KR20170001567A - 어류의 정액 또는 정소로부터 분리된 dna 단편 혼합물을 포함하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents
어류의 정액 또는 정소로부터 분리된 dna 단편 혼합물을 포함하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 어류의 정액 또는 정소로부터 분리된 DNA 단편 혼합물을 포함하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 조성물이 허혈성 장염의 예방 또는 치료에 우수한 효과가 있음을 확인하였다. 또한, 본 발명의 허혈성 장염 예방 또는 치료용 조성물은 장기간 투여 시에도 안전하고 부작용이 거의 없음을 확인하였다.
이에 따라, 본 발명의 허혈성 장염 예방 또는 치료용 조성물을 이용하여 안전하고 부작용이 없으면서 치료 효과가 뛰어난 허혈성 장염 치료제를 개발함으로써 허혈성 장염 치료에 큰 도움을 줄 수 있을 것으로 기대된다.
이에 따라, 본 발명의 허혈성 장염 예방 또는 치료용 조성물을 이용하여 안전하고 부작용이 없으면서 치료 효과가 뛰어난 허혈성 장염 치료제를 개발함으로써 허혈성 장염 치료에 큰 도움을 줄 수 있을 것으로 기대된다.
Description
본 발명은 어류의 정액 또는 정소로부터 분리된 DNA 단편 혼합물을 포함하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
산업 사회의 발전으로 인해 각종 스트레스와 환경적 요인에 의하여 소화기계통 질환의 환자가 증가하고 있는 추세이다. 소화기계통에서 많이 일어나는 질병으로는 허혈(ischemic)이 있으며, 이는 혈관의 수축 또는 폐색에 의해 유발되는 신체 기관, 조직 또는 부위로의 혈액 공급의 감소 상태를 말한다. 허혈 후에는 혈액의 재관류(reperfusion)가 일어나면서 신경세포가 손상되는 등 다양한 후유증이 야기된다. 허혈은 궁극적으로 비가역적인 손상, 즉 세포 및 조직의 괴사로 이루어지면서, 허혈성 장염과 같은 질환들이 나타날 수 있다.
허혈성 장염(ischemic colitis, IC)은 대장을 침범하는 혈관성 질환 중 가장 흔한 형태이며 전체 허혈성 위장관 질환의 약 50~60%를 차지한다(Suh D.C. et al., 2007). 허혈성 장염은 심하지 않은 경우 복통과 설사와 같은 비특이적인 증상으로 대부분 병원을 찾기 전에 증상이 호전되는 경우가 많고, 병원을 찾는 경우에는 대개 혈성 설사와 복통이 주 증상이나 보존적 치료로 호전되는 경우가 많다.
허혈성 장염의 원인은 대부분 확인하기 어려운 경우가 많으나, 주로 장년층에서 장간막 동맥이 혈전증이나 색전증으로 막히거나 또는 심근 경색이나 심부전으로 내장동맥이 수축되어 발생한다. 장간막 정맥 혈전증, 혈액의 과응고나 저혈압을 유발하는 약물, 혈관염이 원인이 되기도 한다(Reinus J.F. et al., 1981; Hunter G.C. et al., 1988). 허혈성 장염은 병리학적으로 크게 세 가지로 나뉜다. 첫 번째는 점막과 점막하 조직에만 허혈을 일으켜 보존치료만으로도 회복이 가능한 일과성의 가역형, 두 번째는 내측원형근육까지 허혈을 일으킨 만성형, 세 번째는 전벽층에 급격한 허혈을 일으키는 전격형이 있다(Toursarkissian B et al., 1997; Bower T.C., 1993; Deana D.G. et al., 1995). 허혈성 장염의 절반 정도는 자연 치유될 수 있는 일과성의 가역형이므로 보존적 치료만으로도 충분하나 나머지 절반은 장전층괴사나 장천공에 이를 수 있고, 이 경우 사망률이 높아 수술을 염두에 둔 적극적인 치료가 필요하다(Green B.T. et al. 2005; Jung S.H. et al., 2008).
이에, 본 발명자는 어류의 정액 또는 정소에서 추출한 DNA 단편 혼합물을 이용하여 연구를 진행하던 중 허혈성 장염 마우스 모델에서 DNA 단편 혼합물이 세포의 괴사를 억제한다는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성할 수 있었다.
종래 선행기술로서 한국등록특허 제0818752호에서는 인간 FAF1 단백질을 억제하는 siRNA를 유효성분으로 하는 허혈성 질환 치료용 조성물을 개시하고 있으나 DNA 단편 혼합물이 언급된 바가 없다. 또한 한국공개특허 제2003-0001370호에서는 EGF 활성을 갖는 펩타이드 및 성장호르몬 분비 촉진 헥사펩타이드를 이용하여 내장 허혈을 치료할 수 있음을 개시하고 있으나 본 발명의 DNA 단편 혼합물의 구성과는 차이가 있다.
Bower T.C., Ischemic colitis, Surg. Clin. North Am., 73, 1037-1053, 1993.
Deana D.G. et al., Reversible ischemic colitis in young women, Am. J. Surg. Pathol., 19, 452-462, 1995.
Green B.T. et al., Ischemic colitis: a clinical review, South Med. J., 98, 217-222, 2005.
Hunter G.C. et al., Mesenteric ischemia, Med. Clin. North Am., 72, 1091-1115, 1988.
Jung S.H. et al., Clinical features and prognostic factors in ischemic colitis, Korean J. Gastrointest Endosc., 36, 349-353, 2008.
Reinus J.F. et al., Ischemic disases of the bowel, Gastroenterol. Clin. North Am. 19, 319-343, 1981.
Suh D.C. et al., Patients with irritable bowel syndrome or constipation have an increased risk for ischaemic colitis, Aliment Pharmacol. Ther., 25, 681-692, 2007.
Toursarkissian B et al., Ischemic colitis, Surg. Clin. North Am., 77, 461-470, 1997
본 발명의 목적은 어류의 정액 또는 정소로부터 분리된 DNA 단편 혼합물을 포함하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명은 DNA 단편 혼합물을 포함하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
상기 DNA 단편 혼합물은 어류의 정액 또는 정소로부터 분리한 DNA 단편 혼합물일 수 있다.
상기 어류는 연어과일 수 있다.
상기 DNA 단편 혼합물은 분자량이 30kDa 내지 2,500kDa 일 수 있다.
이하 본 발명을 상세하게 설명한다.
상기 DNA 단편 혼합물이란, 인산, 4종류의 염기, 데옥시리보오스(deoxyribose)로 이루어진 생체고분자에 해당하는 DNA로, 분자량이 저감된 단편 형태로 혼합되어 존재하는 것을 지칭한다.
상기 어류는 연어과의 어류일 수 있고, 바람직하게는 연어 또는 송어일 수 있고, 가장 바람직하게는 연어일 수 있다.
상기 DNA 단편 혼합물은 분자량이 30kDa 내지 2,500kDa 일 수 있고, 40kDa 내지 2,000kDa인 것이 바람직하며, 50kDa 내지 1,500kDa인 것이 가장 바람직하다.
또한, 본 발명은 상기 DNA 단편 혼합물 및 약제학적 부형제를 포함하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다. 상기 DNA 단편 혼합물은 전체 조성물 총 중량에 대하여 바람직하게는 0.001 내지 50중량%, 더 바람직하게는 0.001 내지 40중량%, 가장 바람직하게는 0.001 내지 30중량%로 하여 첨가될 수 있다.
상기 약학 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균주사용액의 형태로 제형화 하여 사용될 수 있다. 상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화 할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다.
본 발명에 따른 DNA 단편 혼합물을 포함하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물은 경구 및 주사제로 투여하는 것이 바람직하다.
경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 본 발명의 추출물 또는 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로스 또는 락토즈, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
주사제는 통상의 방법에 따라 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용할 수 있다. 바람직하게는 주사용수(대한약전 규격)에 녹여 멸균 주사용액으로 이용될 수 있다.
본 발명의 치료용 조성물의 투여량은 치료 받을 대상의 연령, 성별, 체중, 질환의 병리 상태, 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다.
상기 DNA 단편 혼합물은 2㎎/㎏ 내지 25㎎/㎏을 투여할 수 있다. 바람직하게는 2㎎/㎏ 내지 16㎎/㎏의 농도로 투여할 수 있다. 투여 농도가 2㎎/㎏ 미만일 경우에는 치료 효과를 얻기 어렵고, 25㎎/㎏를 초과할 경우에는 투여량 대비 치료 효과의 상승 정도가 크지 않다.
상기 DNA 단편 혼합물은 1일 1회 또는 수회로 나누어 투여될 수 있다.
본 발명의 치료용 조성물은 허혈성 장염의 예방 또는 치료를 위하여 쥐, 가축 및 인간과 같은 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁 내 경막 또는 뇌혈관 내 주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명은 어류의 정액 또는 정소로부터 분리된 DNA 단편 혼합물을 포함하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 조성물이 허혈성 장염의 예방 또는 치료에 우수한 효과가 있음을 확인하였다. 또한, 본 발명의 허혈성 장염 예방 또는 치료용 조성물은 장기간 투여 시에도 안전하고 부작용이 거의 없음을 확인하였다.
이에 따라, 본 발명의 허혈성 장염 예방 또는 치료용 조성물을 이용하여 안전하고 부작용이 없으면서 치료효과가 뛰어난 허혈성 장염 치료제를 개발함으로써 허혈성 장염 치료에 큰 도움을 줄 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 허혈성 장염의 발병에 따른 환부의 온도 변화를 보여주고 있다.
도 2는 허혈성 장염이 유발된 쥐에서 DNA 단편 혼합물의 투여에 따른 장 조직의 변화를 육안으로 관찰한 결과를 보여주고 있다.
도 3은 허혈성 장염이 유발된 쥐에서 DNA 단편 혼합물의 투여에 따른 장의 조직학적 변화를 H&E 염색을 통해 보여주고 있다.
도 4는 허혈성 장염이 유발된 쥐에서 DNA 단편 혼합물의 투여에 따른 대장 점막의 분열을 메이슨 트리크롬 염색을 통해 보여주고 있다.
도 5는 허혈성 장염이 유발된 쥐에서 DNA 단편 혼합물의 투여에 따른 세포사멸관련 인자의 단백질 발현을 보여주고 있다.
각각의 도면에서 (A)는 허혈성 장염이 유발되지 않은 정상군을, (B)는 허혈성 장염이 유발된 군을, (C)는 DNA 단편 혼합물을 2㎎/㎏ 투여한 군을, (D)는 DNA 단편 혼합물을 4㎎/㎏ 투여한 군을, (E)는 DNA 단편 혼합물을 8㎎/㎏ 투여한 군을, (F)는 DNA 단편 혼합물을 16㎎/㎏ 투여한 군을 나타낸다.
도 2는 허혈성 장염이 유발된 쥐에서 DNA 단편 혼합물의 투여에 따른 장 조직의 변화를 육안으로 관찰한 결과를 보여주고 있다.
도 3은 허혈성 장염이 유발된 쥐에서 DNA 단편 혼합물의 투여에 따른 장의 조직학적 변화를 H&E 염색을 통해 보여주고 있다.
도 4는 허혈성 장염이 유발된 쥐에서 DNA 단편 혼합물의 투여에 따른 대장 점막의 분열을 메이슨 트리크롬 염색을 통해 보여주고 있다.
도 5는 허혈성 장염이 유발된 쥐에서 DNA 단편 혼합물의 투여에 따른 세포사멸관련 인자의 단백질 발현을 보여주고 있다.
각각의 도면에서 (A)는 허혈성 장염이 유발되지 않은 정상군을, (B)는 허혈성 장염이 유발된 군을, (C)는 DNA 단편 혼합물을 2㎎/㎏ 투여한 군을, (D)는 DNA 단편 혼합물을 4㎎/㎏ 투여한 군을, (E)는 DNA 단편 혼합물을 8㎎/㎏ 투여한 군을, (F)는 DNA 단편 혼합물을 16㎎/㎏ 투여한 군을 나타낸다.
이하 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명은 여기서 설명되는 실시예에 한정되지 않고 다른 형태로 구체화될 수도 있다. 오히려, 여기서 소개되는 내용이 철저하고 완전해지고, 당업자에게 본 발명의 사상을 충분히 전달하기 위해 제공하는 것이다.
<실시예 1. 실험 동물의 준비>
실험동물은 180±5g 무게의 7주령이 된 S/D(Sprague Dawley) 계열 수컷 흰 쥐를 이용하였다.
모든 쥐는 고형사료와 물을 자유롭게 섭취하였으며, 22~24℃에서 습도가 60%가 되도록 유지하며, 밤낮 주기가 12시간 간격으로 조절되는 실험실 환경에서 사육하였다. 사육한 쥐는 하기 표 1의 실험군으로 나누어, 실험군 당 10마리씩 사용하였다.
| 구분 | 허혈성 장염 유발 | DNA 단편 혼합물 투여 (㎎/㎏) |
| A | × | 0 |
| B | ○ | 0 |
| C | ○ | 2 |
| D | ○ | 4 |
| E | ○ | 8 |
| F | ○ | 16 |
<
실시예
2. 허혈성 장염 동물모델의 제조>
실시예 1에서 사육한 쥐를 Zoletil 50®을 복강 주사하여 마취시켰다. 마취 한 쥐의 복부 중앙을 절개하여 개복한 후 하행결장 4㎝ 범위의 주변부 혈관을 결찰시켰다. 수술이 끝난 쥐는 절개부분을 봉합 한 뒤 1% 요오드액으로 소독한 후 항온항습장치 내에서 회복시켰다.
<실시예 3. 약물 투여>
실시예 2의 허혈성 장염 동물 모델에 본 발명의 DNA 단편 혼합물을 투여하여 허혈성 장염의 치료 효과를 확인하였다.
DNA 단편 혼합물(분자량 50kDa~1500kDa)의 투여는 허혈성 장염 유발 수술이 끝난 후 48시간 이후부터 실시하였다. DNA 단편 혼합물은 2, 4, 8, 16㎎/㎏의 농도로 500㎕씩 복강에 1일 1회로 총 21일 동안 주사하여 투여하였다. 이때 대조군으로는 허혈성 장염을 유발하지 않은 정상군과 DNA 단편 혼합물을 투여하지 않은 허혈성 장염 모델군을 이용하였다.
<실시예 4. 환부의 온도 측정>
허혈성 장염 유발의 확인은 염증이 일어난 환부에서 열이 증가되는 것에 기인하여 레이저 온도계(MT6, Raytek Co., CA. US)를 이용하여 허혈성 장염 유발 전과 유발 후 1주 단위로 3번 총 4회 실시하였고, 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1을 살펴보면, 허혈성 장염을 유발 후의 환부 온도가 정상군(A)을 제외한 모든 실험군에서 증가하는 것으로 나타났으며, 2차 검사에서는 DNA 단편 혼합물 농도 의존적으로 환부 온도가 낮아지는 것으로 나타났다. 특히나 16㎎/㎏의 DNA 단편 혼합물을 투여한 군(F)에서 가장 높은 감소 효과를 보였다. DNA 단편 혼합물 투여 3주 후의 측정 검사에서도 DNA 단편 혼합물을 투여한 집단의 환부 온도가 통계적으로 의미 있게 감소하는 것을 확인하였다.
<실시예 5. 장 관찰>
DNA 단편 혼합물 투여 21일 후에 쥐를 10㎎/㎏의 Zoletil 50®을 복강 내 주사하여 마취시킨 후 복강을 열고 허혈성 장염을 유발시킨 장 조직을 노출 시킨 후 동일한 각도와 거리에서 장 조직을 촬영하였고 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2에서 보여주듯이, 허혈성 장염을 유발시킨 군(B)의 경우에는 허혈 시킨 대장 부위에 괴사가 증가되는 것으로 나타났으며, 장 외부의 혈관 출혈도 관찰되었다. 반면 DNA 단편 혼합물을 투여한 경우(C, D, E, F)에는 허혈로 인한 괴사가 호전되어 정상군(A)의 상태와 비슷한 대장 형태를 유지하고 있음을 알 수 있었다.
이를 통해, DNA 단편 혼합물의 투여가 허혈성 장염으로 유발된 대장 부위의 괴사를 억제 또는 치료할 수 있음을 알 수 있었다.
<실시예 6. 조직 염색>
실시예 6-1. 조직 처리
실시예 5에서 장 조직을 촬영한 쥐를 이용하여 조직을 적출하였다. 이중 일부 조직을 100mM 인산 완충액에 녹인 4% 파라포름알데히드(paraformaldehyde) 고정액에 24시간 동안 넣어 조직 고정을 실시하였다. 이후 70%, 80%, 90% 및 100% 에탄올에 순서대로 넣어 탈수분 시켰으며 자일렌(xylene)으로 침착시킨 후 경질 파라핀(Leica, USA) 용액을 이용하여 3단계의 과정을 거쳐 조직에 파라핀을 침습시켰다. 침습이 끝난 조직은 절편을 제작하기 위해 블록을 만들고 고정된 파라핀 조직을 파라핀 절편기(Shandon Finesse 325, Thermo Electron Co., England)를 이용하여 5㎛ 두께로 절편을 조직하였다. 조직 절편을 코팅 슬라이드에 붙인 후 37℃ 슬라이드 오븐에서 16~18시간 방치하였다.
실시예 6-2. H&E(Hematoxylin and eosin) 염색
실시예 6-1에서 제작한 조직 절편을 Mayer's hematoxyline(Sigma, USA) 용액에 30초간 반응 시킨 후, 흐르는 물에서 10분간 세척하였다. 이후 eosin(Sigma, USA) 용액에 3초간 반응시켰다. 염색이 완료된 조직은 탈수과정을 거쳐 Permount®(Fischer scientific, USA)로 봉입하였다. H&E 염색한 조직 절편을 현미경을 이용하여 관찰하여, 조직의 변화를 확인하였고, 이를 도 3에 나타내었다.
도 3에서 보여주듯이, 허혈성 장염 유발군(B)은 정상군(A)에 비해 대장 내 점막 부위에서 응축과 분열을 비롯한 조직의 손상이 관찰되었다. 그러나 DNA 단편 혼합물을 투여한 군(C, D, E, F)에서는 허혈로 인해 야기된 대장 내 점막의 응축 및 분열이 감소되는 것으로 나타났으며, 이는 투여한 DNA 단편 혼합물 농도 의존적인 것을 알 수 있었다.
실시예 6-3. 메이슨 트리크롬(Masson's trichrome) 염색
허혈성 장염 유발 후 DNA 단편 혼합물 투여에 따른 대장 점막의 분열 정도를 확인하기 위한 방법으로 총 콜라겐 섬유(total collagen fiber)의 발현을 확인하고자 하였다. 이에 따라, 메이슨 트리크롬 염색을 실시하였다.
실시예 6-1에서 파라핀에 포매된 조직을 자일렌(xylene)에 침착시켜 파라핀을 제거하고, 수화시킨 후 Bouin's 용액(Sigma, USA)에서 1시간 동안 처리하였다. 그 후 Weigner's iron hematoxylin 용액(Sigma, USA)에 10분간 처리한 후 세척하고, Biebrich scarlet-acid fuchsin 용액(Sigma, USA)에 2분간 처리하여 세척하였다. 세척한 조직을 phosphomolybdic-phosphotungstic acid 용액(Sigma, USA)에 10~15분간 처리한 후 aniline blue 용액(Sigma, USA)에 5분간, light green 용액에 1분간 처리하고 세척한 후 acetic 용액에 5분간 처리 후 95% 에탄올과 자일렌으로 처리한 후 Permount®(Fischer scientific, USA)로 봉입하였다. 메이슨 트리크롬으로 염색한 조직을 현미경을 이용하여 관찰하였고, 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 4에서 보여주듯이, 정상군(A)에 비해 허혈성 장염 유발군(B)은 허혈로 인해 대장 점막의 분열이 증가된 반면에, DNA 단편 혼합물을 투여한 군(C, D, E, F)에서는 허혈로 인해 야기된 대장 점막의 분열이 DNA 단편 혼합물 농도 의존적으로 감소하는 것을 관찰할 수 있었다.
<실시예 7. 세포사멸관련 인자의 단백질 발현 확인>
허혈성 장염에 따른 세포 괴사와 관련하여 세포사멸관련 인자의 발현 정도를 확인하고자 하였다.
실시예 5에서 장 조직을 촬영한 쥐로부터 적출한 대장 조직을 용해버퍼(lysis buffer)로 단백질을 추출한 후 원심 분리하여 상층액을 얻은 뒤 Bio-Rad의 단백질 정량 시약을 사용해 단백질 농도를 정량하여 50㎍의 단백질을 얻었다.
상기에서 확보한 단백질 50㎍을 10% SDS-PAGE로 전기영동 시킨 후 니트로셀룰로스 멤브레인(nitrocellulose membrane)으로 단백질을 트랜스퍼(tranfer) 시켰다. 단백질이 트랜스퍼 된 멤브레인을 5% 탈지분유(skim milk)로 블로킹(blocking)시킨 다음 Bax 또는 Bcl-2에 대항하는 일차 항체를 4℃에서 16~18시간 동안 처리하였다. 이때 정량 대조군으로 GAPDH 항체를 이용하였다. 1차 항체를 처리한 멤브레인을 TBST 용액(Tris-buffered saline with 0.05% tween 20)으로 10분씩 3회 세척하였다. 세척한 멤브레인에 각각의 일차 항체에 대항하는 2차 항체를 넣고 상온에서 1시간 동안 반응시킨 후 다시 TBST 용액으로 15분씩 3회 세척하였다. 세척한 멤브레인에 ECL 용액(enhanced chemiluminescence solution)을 처리하여 단백질 밴드를 확인하였다. 그 결과를 도 5에 나타내었다.
도 5에서 보여주듯이, 세포사멸인자(apoptotic factor)인 Bax의 경우 정상군(A)에 비해 허혈성 장염이 유발된 군(B)에서 그 발현이 증가하는 것을 관찰하였다. 2㎎/㎏ 및 4㎎/㎏ 의 DNA 단편 혼합물을 투여한 경우에는 Bax의 발현이 증가하였으나, 8㎎/㎏ 및 16㎎/㎏의 DNA 단편 혼합물을 투여한 경우에는 농도 의존적으로 Bax의 발현이 감소하는 것을 알 수 있었다. 반면, 항세포사멸인자(anti-apoptotic factor)인 Bcl-2의 경우에는 허혈성 장염 유발군(B)와 비교하였을 때, DNA 단편 혼합물을 투여한 군(C, D, E, F)에서 발현이 증가하는 것을 알 수 있었다.
이를 통해, DNA 단편 혼합물이 허혈성 장염이 발생한 부위의 세포 괴사를 억제함으로써 허혈성 장염을 치료할 수 있음을 예측할 수 있었다.
Claims (6)
- DNA 단편 혼합물을 유효성분으로 포함하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 DNA 단편 혼합물은 어류의 정액 또는 정소로부터 분리한 것을 특징으로 하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물. - 제2항에 있어서,
상기 어류는 연어과인 것을 특징으로 하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물. - 제1항 내지 제2항의 어느 한 항에 있어서,
상기 DNA 단편 혼합물은 분자량이 30kDa 내지 2,500kDa 인 것을 특징으로 하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물. - 제4항에 있어서,
상기 DNA 단편 혼합물은 분자량이 40kDa 내지 2,000kDa 인 것을 특징으로 하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물. - 제5항에 있어서,
상기 DNA 단편 혼합물은 분자량이 50kDa 내지 1,500kDa 인 것을 특징으로 하는 허혈성 장염의 예방 또는 치료용 조성물.
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal |