KR20160060660A - 친화성 크로마토그래피를 위한 및 치료제의 반감기를 연장시키기 위한 화합물 - Google Patents

친화성 크로마토그래피를 위한 및 치료제의 반감기를 연장시키기 위한 화합물 Download PDF

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피터 쿰팔룸
올리버 숀
크리스틴 패트리샤 도나휴
고타스 에빈다
데이빗 아이. 이스라엘
데이빗 파올렐라
레티안 쿠아이
니내드 브이. 프라부
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Abstract

친화성 크로마토그래피에 유용한, 보다 특히 혈청 알부민, 특히 인간 혈청 알부민 (HSA) 및 그의 융합 단백질을 정제하는 친화성 크로마토그래피에 사용하기 위한 화합물이 제시된다. 본원에 기재된 화합물은, 예컨대 투여 시에 HSA에 결합하는 치료 펩티드 또는 소분자에 접합시켜 치료제의 연장된 방출을 제공함으로써, 치료제, 특히 치료 펩티드제 및 소분자의 반감기를 연장시키는 방법이 또한 제시된다.

Description

친화성 크로마토그래피를 위한 및 치료제의 반감기를 연장시키기 위한 화합물 {COMPOUNDS FOR AFFINITY CHROMATOGRAPHY AND FOR EXTENDING THE HALF-LIFE OF A THERAPEUTIC AGENT}
본 발명은 친화성 크로마토그래피에 사용하기 위한 화합물, 보다 특히 혈청 알부민, 특히 인간 혈청 알부민 (HSA)의 친화성 정제에 사용하기 위한 화합물에 관한 것이다. 화합물은, 예컨대 투여 시에 HSA에 결합하는 치료 펩티드 또는 소분자에 접합시켜 치료제의 연장된 방출을 제공함으로써, 치료제, 특히 치료 펩티드제 및 소분자의 반감기를 연장시키기에 또한 유용하다.
인간 혈청 알부민에 결합하는 소분자는 생체분자, 예컨대 인간 혈청 알부민 (HSA)을 비롯한 혈청 알부민, 항체 및 융합 단백질을 정제하는데 사용하기 위한 것으로 기재되어 있다 (문헌 [S. Subramanian, Dye-Ligand Affinity Chromatography: The Interaction of Cibacron Blue F3GA® With Proteins and Enzymes, CRC Critical Reviews in Biochemistry (1984) vol 16 (2), pp. 169 - 205]; 미국 특허 제4,722,896호; 미국 특허 제5,849,874호; 및 PCT 공보 번호 WO 2012/020080 A2 참조). 유사하게, 인간 혈청 알부민에 결합하는 소분자는 주사에 의해 투여되는 치료제, 특히 치료 펩티드제의 반감기를 연장시키기에 유용한 것으로 기재되어 있다 (예를 들어 문헌 [L. Pollaro and C. Heinis, Strategoes to Prolong the Plasma Residence Time of Peptide Drugs, Med. Chem. Commun. (2010) 1, 319-324] 참조).
상기 생체분자를 세포 용해물 또는 기타 액체 혼합물 및 용액 중에 존재하는 기타 생체분자 및 화합물로부터 정제, 분리 및/또는 포획하는데 사용될 수 있는 추가의 개선된 화합물에 대한 수요가 존재한다. 마찬가지로, 대상체에게 투여 시에 대상체의 순환에 투입되는 기존의 치료 분자, 특히 치료 펩티드, 폴리펩티드 및 소분자의 반감기를 안전하게 그리고 효과적으로 증가시키는데 사용될 수 있는 추가의 화합물에 대한 수요가 존재한다.
본 발명의 실시양태는 각종 생체분자, 예컨대 혈청 알부민, 특히 인간 혈청 알부민을 비롯한 혈장 단백질 및 HSA-융합 단백질을 직접 정제하기 위한 친화성제로서 유용한 신규 화합물을 특징으로 한다. 정제될 수 있는 기타 생체분자는 면역글로불린, 피브리노겐, α1-산 당단백질 등; 아밀라제, 셀룰라제, 송아지-장 알칼리성 포스파타제 (CIAP), 락테이트 데히드로게나제 (LDH) 등을 비롯한 효소; 및 친화성 태그부착된 단백질 또는 도메인 (예컨대 6His, FLAG, GST 등을 지님)을 비롯한 인공 단백질 또는 단백질 도메인, Fc-융합 단백질, 도메인 항체 등을 포함한다. 게다가, 상기 화합물은 치료제, 특히 펩티드 치료제에 접합시키는 경우에 투여 시 혈액 중의 치료제의 반감기를 연장시키기에 유용하다. 본 발명의 실시양태는 아가로스 또는 또 다른 기질에 커플링되는 경우와 같이 그의 단편 및 변형체를 비롯한 HSA에 대한 높은 친화성 및 특이성을 갖는 신규 화학형을 제공한다. 또한, 친화성 수지 기술은 HSA 및 HSA-융합 단백질의 정제를 위한 시판 중인 리간드보다 상당히 더 큰 선택성을 갖는다. 더 큰 선택성은 본 발명의 화합물과 알부민 상의 결합 부위의 특이적 상호작용을 통해 달성된다.
본 발명의 실시양태는 하기 화학식 I 또는 화학식 II의 화합물 또는 그의 염이다.
<화학식 I>
Figure pct00001
<화학식 II>
Figure pct00002
상기 식에서,
R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고,
여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고;
아릴은 임의의 치환 또는 비치환된 완전 또는 부분 방향족 탄화수소 치환기 또는 헤테로아릴 치환기이고;
Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y2는 C 또는 N이고;
A 및 D는 독립적으로
Figure pct00003
아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D는 부재하고, 여기서 R'는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
B는 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B는 부재하고;
C는
Figure pct00004
아릴, 헤테로아릴, 아미딘, 티오아미드 중 임의의 것이거나, 또는 C는 부재하고,
여기서 R' 및/또는 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고;
Z는 치환 또는 비치환된 아릴, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로알킬, 또는 N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z는 부재한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 III 또는 화학식 IV의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
<화학식 III>
Figure pct00005
<화학식 IV>
Figure pct00006
상기 식에서,
각각의 Z1, Z2, Z3 및 Z4는 독립적으로 N 및 CR1로부터 선택되고, Z1, Z2, Z3 및 Z4 중 2개 이하는 N이고, 각각의 R1은 독립적으로 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕실, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴로부터 선택되고;
R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고;
아릴은 임의의 치환 또는 비치환된 완전 또는 부분 방향족 탄화수소 치환기 또는 헤테로아릴 치환기이고;
Y1 및 Y3은 독립적으로 C, CR2, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
Y2는 C이고;
A 및 D는 독립적으로
Figure pct00007
아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D는 부재하고;
B는 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B는 부재하고;
C는
Figure pct00008
아릴, 헤테로아릴, 아미딘, 티오아미드 중 임의의 것이고;
E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고;
Z는 치환 또는 비치환된 아릴, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로알킬, 또는 N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z는 부재한다.
본원에 개시된 바와 같이, 화학식 I, 화학식 II, 화학식 III 및 화학식 IV의 화합물은 고체 상에 결합되어 친화성 크로마토그래피 고체 상을 제조할 수 있으며, 이는 단백질 및 하나 이상의 불순물을 포함하는 수용액으로부터 관심 단백질을 분리하기에 유용하다. 예를 들어, 고체 상은 아가로스이다. 관심 단백질은 예를 들어 인간 혈청 알부민을 포함할 수 있다. 수용액은 세포 용해물로부터의 것, 세포 수확물/브로쓰로부터의 것, 체액, 예를 들어 혈액으로부터 단리된 것 또는 기타 혼합물로부터의 것일 수 있다. 예를 들어, 본원에 기재된 바와 같은 친화성 아가로스 물질은 각종 생체분자를 세포 용해물 및 기타 혼합물로부터 정제, 분리 또는 포획시키는데 사용될 수 있다. 액체/수용액 혼합물 중의 기타 생체분자 및 불순물로부터 정제, 분리 또는 포획될 수 있는 생체분자는 생체분자, 예컨대 혈청 알부민 면역글로불린, 피브리노겐, α1-산 당단백질 등을 비롯한 혈장 단백질; 아밀라제, 셀룰라제, 송아지-장 알칼리성 포스파타제 (CIAP), 락테이트 데히드로게나제 (LDH) 등을 비롯한 효소; 및 친화성 태그부착된 단백질 또는 도메인 (예컨대 6His, FLAG, GST 등을 지님)을 비롯한 인공 단백질 또는 단백질 도메인, HSA-융합 단백질, Fc-융합 단백질, 도메인 항체 등이다.
본원에 기재된 바와 같은 화합물은 또한 치료제, 특히 펩티드, 폴리펩티드 및 소분자 치료제의 반감기를 연장시키는데 사용될 수 있다. 통상적으로 펩티드는 정맥내 투여 후 수분 이내에 혈류로부터 제거된다. 신장은 5 kDa 미만의 분자를 완전하게 걸러내는 것으로 보이나, 더 큰 펩티드 (~50-70 kDa 초과)는 효과적으로 보유 및 순환되는 것으로 보인다. 그러나, 일부 펩티드의 신장 제거는 접근 가능한 막 단백질 또는 혈청 단백질로의 결합에 의해 감소될 수 있는 것으로 공지되어 있다. 순환 중인 분자의 수명은 일반적으로 순환 중인 분자의 농도가 계 (신장 등)에 의한 제거를 통해 절반 정도 감소되는데 소요되는 시간으로서 정의되는 혈장 반감기로 나타낸다. 혈액으로부터 정맥내 투여된 분자를 제거하는 것은 거의 항상 2상 과정이 되므로 (제1상은 말초 조직으로의 분배로 인하여 신속하게 감소됨), 제2상 (신장 등에 의한 제거를 통해 감소됨)은 또한 "제거 반감기"로서 통상적으로 지칭되는 용어 "혈장 반감기"와 관련된 감소 부분이 된다.
그래서, 본 발명의 실시양태는 혈류 중의 치료제의 제거 반감기 또는 혈장 반감기를 연장시키는데 사용하기 위한, 치료제, 특히 펩티드 또는 폴리펩티드 치료제에 접합된 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I 또는 화학식 II의 화합물을 제공한다.
본 발명의 하기 특징은 첨부한 도면과 함께 하기 상세한 설명을 참조하면 더 잘 이해될 것이다.
도 1은 친화성-접합된 아가로스 비드를 제조하기 위한 활성화된 아가로스 및 본원에 기재된 바와 같은 화합물 사이의 반응의 개략도를 도시한다.
도 2는 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물과 접합된 친화성 아가로스 비드가 HSA로 스파이크 처리한 세포 용해물로부터 HSA를 분리/정제하는데 사용된 미니 아가로스 겔을 도시한다.
도 3은 미메틱 블루(Mimetic Blue)®와 비교한 HSA-융합된 펩티드에 대한 화학식 I의 화합물에 접합된 친화성 아가로스 물질의 특이성을 도시한다.
도 4a는 HSA를 본원에 기재된 바와 같은 친화성 아가로스 물질로부터 용출시키는 각종 완충액의 효과 비교를 도시한다.
도 4b는 도 4a로부터의 결과의 그래프 표시를 도시한다.
도 5는 화학식 I의 화합물에 접합된 친화성 아가로스 물질에 대한 HSA의 결합 대 미메틱 블루®에 대한 동일한 생체분자의 결합에 대한 열의 효과 비교를 도시한다.
정의
본 명세서 및 첨부하는 청구범위에서 사용된 바와 같이, 하기 용어는 문맥이 달리 요구하지 않는다면 나타낸 의미를 지녀야 한다.
DIPEA는 N,N-디이소프로필에틸아민을 의미하며, 또한 후니그(Hunig) 염기로 지칭된다.
DMF는 디메틸포름아미드를 의미한다.
EDTA는 N,N-에틸렌디아민-N,N,N',N'-테트라아세트산을 의미한다.
HATU는 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트를 의미한다.
h는 시간(들)을 의미한다.
HSA는 인간 혈청 알부민을 의미한다.
미메틱 블루®는 (www.prometicbiosciences.com/assets/files/app_notes/Mimetic%20Blue%20SA%20HL%20P6XL%20Appliation%20Note%20-%20Albumin-fusion%20protein%20protein%20(091110)%20v2[1].pdf), 미메틱 블루® SA HL에 기재된 바와 같은 프로메틱 바이오사이언시즈 리미티드(ProMetic BioSciences Ltd)로부터의 미메틱 블루® SA HL P6XL을 의미한다.
min은 분(들)을 의미한다.
MSA는 마우스 혈청 알부민을 의미한다.
NP40은 세제 터지톨(Tergitol)-타입 NP-40을 의미하며, 또한 노닐 펜옥시폴리에톡실에탄올로서 공지되어 있다.
OD는 분광광도계를 사용하여 측정된 바와 같은 최적 밀도를 의미한다.
OD280은 분광광도계를 사용하여 280 ㎚에서 측정한 바와 같은 최적 밀도를 의미한다.
PBS는 포스페이트 완충 염수를 의미한다.
피어스(Pierce) NHS-활성화된 아가로스는 예컨대 써모 사이언티픽(Thermo Scientific) P6XL (제품 코드(Product Cod) 3125)로부터 N-히드록시숙신이미드-활성화된 아가로스를 의미한다. 적용 노트 - 미메틱 블루® SA HL P6XL을 사용한 재조합 알부민-융합 단백질의 포획 및 정제.
rpm은 분당 회전수를 의미한다.
RT 또는 rt는 실온을 의미한다.
RSA는 래트 혈청 알부민을 의미한다.
SDS는 소듐 도데실 술페이트를 의미한다.
TFA는 트리플루오로아세트산을 의미한다.
본원에 기재된 바와 같이, "알킬"은 완전 포화된 직쇄형 또는 분지쇄형 또는 시클릭 탄화수소 또는 그의 조합인 임의의 지방족 탄화수소 치환기를 의미한다. 본원에 사용된 바와 같이, 알킬은 또한 단일- 또는 다중불포화 또는 그의 조합인 탄화수소를 지칭할 수 있다. 포화 탄화수소 치환기의 예로는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, t-부틸, 이소부틸, sec-부틸, 시클로헥실, 치환된 시클로헥실, 예를 들어 치환 또는 비치환된 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸 치환기 등의 동족체 및 위치 및 입체이성질체로서 공지된 치환기를 들 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 본원에 사용된 바와 같이, 알킬 치환기는 1개 이상의 이중 또는 삼중 결합을 가질 수 있는 알킬 치환기를 포함한다.
본원에 기재된 바와 같이, "아미노 알킬"은 탄화수소에서의 하나 이상의 수소가 아미노 치환기, 예를 들어 -NH2, -NHR, -NR2, -N=R, =NR 등으로 치환된 알킬 치환기를 의미한다.
본원에 기재된 바와 같이, "치환 또는 비치환된 아미노 알킬"은 아미노 알킬 치환기가 -NH2일 수 있거나 (비치환됨) 또는 -NHR, -N=R, =NR 등에 의해 기재된 바와 같이 아미노 기에서 수소 원자 중 하나 이상이 탄소 치환기로 치환될 수 있는 (치환된) 것을 의미한다.
본원에 기재된 바와 같이, "아릴"은 임의의 방향족 탄화수소 치환기, 예컨대 벤젠, 나프탈렌, 페난트렌, 피렌, 벤조[a]안트라센, 벤조[a]피렌 등, 예를 들어 페닐, 나프틸, 페난트릴 등을 의미한다. 본원에 사용된 바와 같이, 아릴은 또한 임의의 완전 또는 부분 방향족 헤테로시클릭 치환기를 비롯한 "헤테로아릴"을 포함한다. 그의 예로는 피롤, 피리딘, 피리미딘, 푸린, 피란, 푸란, 티오펜, 티아졸, 인돌, 이미다졸, 티오이미다졸, 옥사졸, 아제핀, 티오펜, 티아자핀, 퀴놀린, 옥세핀, 옥사디아졸 치환기를 들 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
본원에 기재된 바와 같이, "치환 또는 비치환된 아릴"은 방향족 고리 (페닐, 나프틸, 페난트릴 등)에서 수소를 제외한 치환기를 갖지 않는 임의의 아릴 치환기, 또는 하나 이상의 수소가 탄소 (알킬 등), 아민 (아미노, 아미노알킬, 이미노, 니트로, 니트로알킬 등), 황 (티오, 티오알킬, 술포네이트, 술페이트 등), 옥소 (카르보닐, 알데히드, 산, 에스테르, 에테르 등), 할로겐 (클로로, 플루오로, 브로모, 아이오도) 기 등과 같은 치환기로 치환된 아릴 치환기를 의미한다. 그의 예로는 벤질 치환기 및, 톨루엔, 페놀, 아닐린, 벤조니트릴, 아세토페논, 벤즈알데히드, 벤조산, 크실렌 및 니트로벤젠 치환기를 들 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
본원에 기재된 바와 같이, "치환 또는 비치환된 헤테로아릴"은 고리 탄소에서 하나 이상의 수소가 N, O 또는 S로 치환된 상기 기재된 바와 같은 임의의 헤테로아릴 치환기를 의미한다.
본 발명의 실시양태는 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
<화학식 I>
Figure pct00009
상기 식에서,
R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고; 아릴은 임의의 치환 또는 비치환된 완전 또는 부분 방향족 탄화수소 치환기 또는 헤테로아릴 치환기이고;
Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
Y2는 C 또는 N이고;
A 및 D는 독립적으로
Figure pct00010
아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D는 부재하고;
B는 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B는 부재하고;
C는
Figure pct00011
아릴, 헤테로아릴, 아미딘, 티오아미드 중 임의의 것이고;
E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고;
Z는 치환 또는 비치환된 아릴, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로알킬, 또는 N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z는 부재한다.
관련된 실시양태는 R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I이고; R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"가 각각 독립적으로 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고; 아릴이 치환 또는 비치환된 페닐, 톨릴, 크실릴, 나프틸, 벤질, 티에닐, 인돌릴, 피롤릴, 피리디닐, 피리미디닐, 푸리닐, 피라닐, 푸라닐, 티오페닐, 티아졸릴, 이미다졸릴, 티오이미다졸릴, 옥사졸릴, 아제피닐, 티오페닐, 티아자피닐, 퀴놀리닐, 옥세피닐 또는 옥사디아졸릴 기이고;
Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고;
Y2가 C 또는 N이고;
A 및 D가 독립적으로
Figure pct00012
아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D가 부재하고; B가 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N을 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, S 또는 O를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B가 부재하고; C가
Figure pct00013
아릴, 헤테로아릴, 아미딘, 티오아미드 중 임의의 것이거나, 또는 C가 부재하고; E가 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E가 부재하고; Z가 치환 또는 비치환된 아릴, 또는 N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z가 부재하는 것인 화학식 I의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
본 발명의 특정한 실시양태는 하기 제시된 바와 같은 화학식 Ia의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
<화학식 Ia>
Figure pct00014
상기 식에서,
R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고; R4는 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고; Y2는 C 또는 N이고; A 및 D는 독립적으로
Figure pct00015
아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D는 부재하고; B는 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N을 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, S 또는 O를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B는 부재하고; E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고; Z는 치환 또는 비치환된 아릴, 또는 N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z는 부재한다.
관련된 실시양태는 R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬이고; R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고; R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고; R4가 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬이고; Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y2가 C 또는 N인 상기 기재된 바와 같은 화학식 Ia의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
본 발명의 기타 실시양태는 하기 제시된 바와 같은 화학식 Ib에 의한 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
<화학식 Ib>
Figure pct00016
상기 식에서,
R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고, E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고; R4는 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y2는 C 또는 N이다.
관련된 실시양태는 R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬이고; R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고; R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고; R4가 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬이고; Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y2가 C 또는 N인 상기 기재된 바와 같은 화학식 Ib 또는 그의 염을 제공한다.
기타 실시양태는 하기 제시된 바와 같은 화학식 Ic의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
<화학식 Ic>
Figure pct00017
상기 식에서,
R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고, E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고; R4는 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y2는 C 또는 N이다.
관련된 실시양태는 R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I이고; R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고; R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고; Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y2가 C 또는 N인 상기 기재된 바와 같은 화학식 Ic의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
기타 관련된 실시양태는
Figure pct00018
및
Figure pct00019
로부터 선택되는 화학식 I의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
본 발명의 기타 실시양태는 하기 화학식 II의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
<화학식 II>
Figure pct00020
상기 식에서,
R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고;
아릴은 임의의 치환 또는 비치환된 완전 또는 부분 방향족 탄화수소 치환기 또는 헤테로아릴 치환기이고;
Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y2는 C 또는 N이고;
A 및 D는 독립적으로
Figure pct00021
아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D는 부재하고;
B는 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B는 부재하고;
C는
Figure pct00022
아릴, 헤테로아릴, 아미딘, 티오아미드 중 임의의 것이거나, 또는 C는 부재하고;
E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고;
Z는 치환 또는 비치환된 아릴, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로알킬, 또는 N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z는 부재한다.
관련된 실시양태는 R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I이고; R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"가 각각 독립적으로 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고; 아릴이 치환 또는 비치환된 페닐, 톨릴, 크실릴, 나프틸, 벤질, 티에닐, 인돌릴, 피롤릴, 피리디닐, 피리미디닐, 푸리닐, 피라닐, 푸라닐, 티오페닐, 티아졸릴, 이미다졸릴, 티오이미다졸릴, 옥사졸릴, 아제피닐, 티오페닐, 티아자피닐, 퀴놀리닐, 옥세피닐 또는 옥사디아졸릴 기이고; Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고; Y2가 C 또는 N이고; A 및 D가 독립적으로
Figure pct00023
아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D가 부재하고; B가 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N을 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, S 또는 O를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B가 부재하고; C가
Figure pct00024
아릴, 헤테로아릴, 아미딘, 티오아미드 중 임의의 것이거나, 또는 C가 부재하고; E가 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E가 부재하고; Z가 치환 또는 비치환된 아릴, 또는 N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z가 부재하는 것인 화학식 II의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
기타 실시양태는 하기 제시된 바와 같은 화학식 IIa의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
<화학식 IIa>
Figure pct00025
상기 식에서,
R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고; R4는 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y2는 C 또는 N이고; A 및 D는 독립적으로
Figure pct00026
아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D는 부재하고; B는 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N을 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, S 또는 O를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B는 부재하고; E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고; Z는 치환 또는 비치환된 아릴, 또는 N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z는 부재한다.
기타 실시양태는 하기 제시된 바와 같은 화학식 IIb의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
<화학식 IIb>
Figure pct00027
상기 식에서,
R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고; R4는 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y2는 C 또는 N이고; E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재한다.
관련된 실시양태는 R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I이고; R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고; R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고; Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y2가 C 또는 N인 상기 기재된 바와 같은 화학식 IIb의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
기타 관련된 실시양태는 하기 제시된 바와 같은 화학식 IIc의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
<화학식 IIc>
Figure pct00028
상기 식에서,
R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고; R4는 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고; Y2는 C 또는 N이고; E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재한다.
관련된 실시양태는 R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬이고; R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고; R4가 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬이고; Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고; Y2가 C 또는 N S인 화학식 IIc의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
기타 관련된 실시양태는
Figure pct00029
및
Figure pct00030
로부터 선택되는 상기 기재된 바와 같은 화학식 II의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
화학식 I 또는 II의 상기 기재된 화합물의 특정한 실시양태에서, 각각의 D, Z, A 및 B는 존재하지 않는다.
기타 실시양태는
N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르복스아미드;
N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤즈아미드;
1-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)피페리딘-4-일 (3-((2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바모일)페닐)카르바메이트;
1-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)피페리딘-4-일 (3-((2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바모일)페닐)카르바메이트;
N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-2-(1'-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)벤조[d]티아졸-6-카르복스아미드;
N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-4-에틸-2-(1'-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)티아졸-5-카르복스아미드;
2-(1'-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)-N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)벤조[d]티아졸-6-카르복스아미드; 및
2-(1'-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)-N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-4-에틸티아졸-5-카르복스아미드
로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 III 또는 화학식 IV의 화합물 또는 그의 염을 제공한다.
<화학식 III>
Figure pct00031
<화학식 IV>
Figure pct00032
상기 식에서,
각각의 Z1, Z2, Z3 및 Z4는 독립적으로 N 및 CR1로부터 선택되고, Z1, Z2, Z3 및 Z4 중 2개 이하는 N이고, 각각의 R1은 독립적으로 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕실, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴로부터 선택되고;
R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고;
아릴은 임의의 치환 또는 비치환된 완전 또는 부분 방향족 탄화수소 치환기 또는 헤테로아릴 치환기이고;
Y1 및 Y3은 독립적으로 C, CR2, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
Y2는 C이고;
A 및 D는 독립적으로
Figure pct00033
아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D는 부재하고;
B는 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B는 부재하고;
C는
Figure pct00034
아릴, 헤테로아릴, 아미딘, 티오아미드 중 임의의 것이고;
E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고;
Z는 치환 또는 비치환된 아릴, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로알킬, 또는 N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z는 부재한다. 추가의 실시양태에서, 본 발명은 임의의 Y1, Y2, Y3, 아릴, C, B, A, Z0 (Z), D, R3 및/또는 E는 화학식 I 및/또는 II의 화합물을 기재하는 임의의 선행하는 실시양태에서 정의된 바와 같은 상기 화학식 III 및 화학식 IV에 의한 화합물을 제공한다. 화학식 III 또는 IV의 화합물의 상기 한 실시양태에서, 각각의 D, Z (또는 Z0), A 및 B는 존재하지 않는다.
합성 방법
본원에 기재된 화합물은 원하는 출발 화합물 위에서 카르복실산으로부터 활성 에스테르를 생성하기 위해 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트 (HATU)를 사용한 후, N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA, 또한 후니그 염기로서 공지됨)으로 처리하여 아미드 결합을 형성하여 제조된다. 반응에 유용한 용매로는 디메틸포름아미드 (DMF) 및 기타 극성 유기 용매를 들 수 있다.
친화성 크로마토그래피
친화성 크로마토그래피는 고체 상 (크로마토그래피 컬럼, 수지, 매트릭스, 비드, 겔 등: 번갈아 사용됨)에 공유 결합된 리간드에 대한 단백질의 친화성을 기준으로 하여 하나 이상의 불순물 및 단백질을 포함하는 용액으로부터 관심 단백질을 분리하는데 사용된다. 리간드에 대하여 약한 친화성을 갖거나 또는 친화성이 결여된 용액 중의 단백질은 방해받지 않는 고체 상을 통해 흘러서 고체 상에 결합된 단백질을 배출한다. 그 후, 리간드에 대한 단백질의 친화성을 감소시켜 단백질을 고체 상으로부터 용출시킬 수 있다. 리간드는 본원에 기재된 화합물을 포함한다.
친화성 크로마토그래피 리간드는 고체 상 위에서 부동화될 수 있다. "고체 상"은 본원에 추가로 기재된 바와 같이 리간드가 부착될 수 있는 비-수성 매트릭스 (예를 들어 컬럼, 수지, 매트릭스, 비드, 겔 등)를 의미한다. 리간드 친화성 크로마토그래피를 위한 예시의 물질 및 방법은 예를 들어 WO2011/012715에 기재된 바와 같이 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 상기 공보의 기술내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다. 고체 상은 일반적으로 예를 들어 유리, 실리카, 아가로스 또는 폴리스티렌 표면을 포함하는 것이다. 고체 상은 정제 컬럼 또는 별개의 입자의 불연속 상일 수 있다. 고체 상은 조절된 공극 유리 컬럼 또는 규산 컬럼일 수 있다. 고체 상은 고체 상으로의 불순물의 비특이적 부착을 방지하고자 하는 시약 (예컨대 글리세롤)으로 코팅될 수 있다. 예를 들어, 친화성 고체 상은 아가로스일 수 있다.
통상적으로, 친화성 매트릭스로서 사용되는 물질은 표적 분자가 발견되는 계내에서 불용성이다. 항상은 아니지만 일반적으로, 불용성 매트릭스는 고체이다. 수백종의 물질이 아가로스, 셀룰로스, 덱스트린, 폴리아크릴아미드, 라텍스, 조절된 공극 유리를 비롯한 친화성 매트릭스로서 기재 및 사용되어 왔다. 유용한 친화성 지지체는 높은 표면적 대 부피 비, 리간드의 공유 부착에 대하여 쉽게 변형되는 화학 기, 최소 비특이적 결합 성질, 우수한 흐름 특징 및 기계적 및 화학적 안정성을 갖는 것이다. 다공성 지지체 (또한 수지 또는 겔로 지칭됨)는 일반적으로 단백질의 친화성 정제에 대하여 가장 유용한 성질을 제공한다. 이러한 유형의 지지체는 일반적으로 50-150 ㎛ 직경 비드로서 용액 중에서 생성된 (즉 수화된) 당- 또는 아크릴아미드-계 중합체 수지이다. 비드로 된 포맷은 임의의 크기를 갖는 수지층으로 충전 및 "패킹"된 컬럼에 쉽게 분배될 수 있는 습식 슬러리로서 이들 수지가 제공되도록 한다. 비드는 다공성이며, 생체분자 (단백질 등)가 비드 표면의 사이에서 및 주위에 있을 수 있으므로 비드에 그리고 비드를 통해 자유롭게 흐를 수 있도록 충분히 크다. 친화성 리간드는 다양한 수단에 의해 비드 중합체 (외부 및 내부 표면)에 공유 부착된다. 이러한 결과는 샘플 분자가 부동화된 리간드의 높은 표면적을 지나서 자유롭게 흐를 수 있는 성긴 매트릭스이다. 단백질 친화성 정제 기법에 대하여 가장 널리 사용된 매트릭스 중 하나는 가교된 비드로 된 아가로스 (예, 4% 및 6% 밀도에서 이용 가능함)이다. 1 ㎖ 수지-층은 90 부피% 초과의 물이다. 비드로 된 아가로스는 통상의 적용에는 우수하지만, 쉽게 부서져서 중력식-유동, 저속 원심분리 및 저압 절차에 대하여 적절하게 된다. 비드로 된 아가로스 수지의 추가의 가교 및/또는 화학적 경화는 더 높은 압력을 견딜 수 있는 그의 능력을 증가시킬 수 있으나, 또한 결합 용량을 낮출 수 있다. 폴리아크릴아미드에 기초한 수지는 또한 컬럼 친화성 크로마토그래피에 대한 지지체로서 사용된다. 그러한 폴리아크릴아미드 수지는 연동 펌프 또는 기타 액체 크로마토그래피 시스템을 사용한 중압 적용에 사용될 수 있다. 아가로스 및 폴리아크릴아미드 지지체 둘다는 낮은 비특이성 결합 특징을 갖는다.
자기 입자는 비드로 된 아가로스 및 기타 다공성 수지로부터 완전 상이한 유형의 친화성 지지체이다. 이들은 훨씬 더 작으며 (통상적으로 1-4 ㎛ 직경), 고체 (비-다공성)이다. 그의 작은 크기는 효과적인 리간드 부동화 및 친화성 정제에 요구되는 충분한 표면적-대-부피 비를 제공한다. 자기 비드는 실란 유도체로 공유 코팅된 초상자성 산화철 입자로서 생성된다. 코팅은 비드가 불활성이 되게 하며 (즉, 비특이성 결합을 최소로 하며), 친화성 리간드를 부착시키는데 필요한 특정한 화학적 기를 제공한다. 자기 입자를 사용한 친화성 정제는 바람직하게는 컬럼내에서 수행되지 않는다. 그 대신, 수 마이크로리터의 비드는 성긴 슬러리로서 수백 마이크로리터의 샘플과 혼합된다. 혼합 중에, 비드는 샘플 용액 중에 현탁된 상태를 유지하여 친화성 상호작용이 부동화된 리간드와 함께 발생되도록 한다. 결합을 위한 충분한 시간이 주어진 후, 비드를 수집하고, 강력한 자석을 사용하여 샘플로부터 분리된다. 통상적으로, 단순 벤치-탑(bench-top) 절차는 마이크로원심분리기 시험관내에서 수행하며, 자기 비드는 적절한 자석을 사용하여 시험관의 바닥 또는 측면에서 적소에 유지하면서 피펫팅 또는 기울려따르기를 사용하여 샘플 (또는 세정액 등)을 제거한다. 다공성 수지 위의 자기 입자의 잇점은 자기 비드가 다공성 지지체보다 더 적은 비-특이성 결합을 나타낸다는 사실, 자기 비드가 세포 분리 절차에 대하여 사용될 수 있다는 사실 및 자기 비드가 고-처리량 자동화에 적절하다는 사실을 포함한다. 정교하며 강력한 샘플-취급 기기는 자기 분리를 사용하여 검정 및 정제 절차를 수행하는데 이용 가능하다.
친화성 리간드는 또한 중합체, 자기 입자, 라텍스 비드, 나노입자, 매크로-비드, 멤브레인, 미량평판, 어레이 표면, 계량봉 및, 특정한 생체분자의 포획을 돕는 다수의 기타 디바이스에 연결될 수 있다.
가능한 리간드 부착을 생성하는 화학 반응은 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 잘 특징화되어 있다. 이러한 반응은 그의 통상의 화학 기를 통해 생체분자의 부착을 돕는다. 부착에 일반적으로 사용되는 작용기의 유형은 용이한 반응성 성분, 예컨대 1급 아민, 술프히드릴, 알데히드 및 카르복실산을 포함한다. 일반적으로, 고체 상 매트릭스는 우선 이들 작용기 중 하나 이상에 대하여 반응성인 화합물로 활성화된다. 그 후, 활성화된 착체는 리간드 및 지지체 사이의 공유 결합을 생성하여 리간드 부동화를 초래할 수 있다.
예를 들어, 수개의 효과적인 비드로 된 아가로스, 비드로 된 아크릴아미드 및 자기 비드 친화성 지지체는 다수의 상이한 유형의 리간드의 커플링에 사용할 준비가 된 활성화된 형태로 시판된다. 이들 활성화 화학 및 프로토콜은 우수한 커플링 수율을 보장하고, 부동화된 리간드를 쉽게 침출시키지 않는 안정한 공유 결합을 생성하도록 최적화되었다.
분자를 부동화시키기 위한 통상의 작용 표적의 일례는 아민 기 (-NH2)가 있다. 예를 들어, NHS 에스테르는 카르복실레이트 분자의 EDC 활성화에 의해 형성된 반응성 기이다. NHS 에스테르-활성화된 수지는 약한 알칼리성 조건 (pH 7.2-8.5)에서 1급 아민과 반응하여 안정한 아미드 결합을 생성한다. 부동화 반응은 일반적으로 포스페이트 완충액 중에서 pH 7.2-8.0에서 0.5 내지 4 시간 동안 실온 또는 4℃에서 수행된다. 1급 아민 완충액, 예컨대 트리스 (TBS)는 반응에 대하여 경쟁하므로 적합성을 갖지 않지 않지만, 일부 절차에서는 트리스 또는 글리신 완충액을 접합 절차 종반에 첨가하여 반응을 켄칭 (중지)시키는 것이 유용하다. 아민 함유 화합물을 비드로 된 아가로스 수지에 커플링시키는 또 다른 방법은 환원성 아미노화로 지칭되는 화학을 수반한다. 리간드 화합물에서의 아민은 지지체의 알데히드 기와 접합되며, 이는 아가로스 다당류 매트릭스의 온화한 산화에 의해 제조된다. 환원성 아미노화를 사용한 부동화 반응은 알데히드와 아민 기 사이의 초기 쉬프(Schiff) 염기를 형성한 후, 시아노붕수소화나트륨 (NaCNBH3)의 첨가에 의해 2급 아민으로 환원시키는 것을 수반한다. 존재하는 리간드의 유형 및 양에 의존하여, 환원성 아미노화를 사용한 커플링 반응은 85% 초과의 부동화 수율을 달성할 수 있다. 부동화에 사용될 수 있는 또 다른 아민-반응성 전략은 아즐락톤 고리이다. 이는 아크릴아미드를 아즐락톤으로 공중합화시켜 형성된 독특한, 내구성 폴리아크릴아미드-유사 수지이다. 1급 아민은 5-원자 스페이서의 말단에 아미드 결합을 생성하는 개환 과정에서 아즐락톤 기와 반응할 것이다. 그러한 기는 아민과 자발적으로 반응하며; 커플링 과정을 추진하기는데는 첨가제 또는 촉매가 필요하지 않다. 아민-함유 분자를 함유하는 샘플에 일정량의 지지체를 첨가하는 것은 부동화가 약 1 시간 이내에 발생되도록 한다. 아민-함유 친화성 리간드를 부동화시키기 위한 또 다른 방법은 반응성 이미다졸 카르바메이트를 형성하기 위해 아가로스 지지체 위에서 히드록실을 활성화시키기 위한 카르보닐 디이미다졸 (CDI)의 사용이다. 이러한 반응성 기는 유기 용매 중의 지지체 위에서 형성되며, 아세톤 중의 현탁액으로서 저장되어 가수분해를 방지한다. 수성 커플링 완충액 중의 지지체를 1급 아민-함유 리간드와 반응시키면 이미다졸 기를 잃으며, 카르바메이트 결합을 형성하게 된다. 커플링 과정은 염기성 pH (8.5-10)에서 발생되지만, 환원성 아미노화 또는 아즐락톤 커플링보다는 단백질과 더 느린 반응이 된다. CDI-활성화된 수지는 펩티드 및 작은 유기 분자를 부동화시키는데 특히 유용하다. 반응은 또한 유기 용매 중에서 실시되어 수-불용성 리간드의 커플링을 허용할 수 있다.
친화성 리간드는 또한 단지 아민을 제외한 작용기를 통해 부동화될 수 있다. 특히, 티올 기 (-SH)는 특정한 단백질 분자 위에서 활성 중심 또는 결합 부위로부터 떨어져서 커플링 반응을 지시하는데 사용될 수 있다. 티올 기 (술프히드릴)는 친화성 리간드 분자내에서 고유할 수 있거나 또는 이들은 관련 기술분야에 공지된 합성 화학 방법에 의해 첨가될 수 있다.
티올 기 함유 리간드의 커플링 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 말레이미드-활성화된 시약은 거의 중성 조건 (pH 6.5-7.5)에서 술프히드릴 기 (-SH)와 특이적으로 반응하여 안정한 티오에테르 결합을 형성한다. 말레이미드 화학은 술프히드릴 기의 접합을 위해 설계된 대부분의 가교제 및 표지 시약에 대한 기본이 된다. 이러한 방법은 특히 티올 함유 리간드를 말레이미드-활성화된 폴리스티렌 미량평판에 커플링시키는데, 예를 들어 평판 표면을 리간드로 효과적으로 코팅시키기에 유용하다. 아이오도아세틸-활성화된 지지체 (예, 긴 스페이서 아암의 말단에서 아이오도아세틸 기를 갖는 비드로 된 아가로스 또는 아크릴아미드)는 생리적 내지 알칼리성 조건 (pH 7.2 내지 9)에서 친화성 리간드의 술프히드릴 기와 반응하여 안정한 티오에테르 결합을 생성하는데 사용될 수 있다. 술프히드릴의 부동화는 아이오드 원자의 대체를 통해 발생된다. 게다가, 피리딜 디술피드 함유 지지체는 넓은 pH 범위에 걸쳐 친화성 리간드 술프히드릴 기와 반응하여 디술피드 결합을 형성하는데 사용될 수 있다. 그리하여, 이러한 화학을 사용하여 제조된 접합체는 통상의 디술피드 환원제, 예컨대 디티오트레이톨 (DTT)을 사용하여 분해 가능하다. 이러한 적용의 경우, 아민-활성화된 수지는 가교제를 사용하여 변형되어 가역적 술프히드릴 부동화를 위한 활성화된 수지를 생성할 수 있다.
친화성 리간드 화합물은 또한 카르보닐 케톤 또는 알데히드를 그의 본래의 상태로 함유하거나 또는 함유하도록 변형될 수 있다. 예를 들어, 당단백질 또는 당지질의 경우에서와 같이, 이웃하는 탄소 원자에서 히드록실을 갖는 당 잔기를 함유하는 당접합체가 생성될 수 있으며; 이러한 시스-디올은 과아이오드산나트륨으로 산화되어 공유 부동화를 위한 부위로서 알데히드를 생성할 수 있다. 히드라지드-활성화된 수지 및 화합물은 pH 5 내지 7에서 산화된 탄수화물 (당)의 카르보닐과 접합되어 히드라존 결합을 형성할 것이다. 히드라지드 화학은 글리코실화 부위를 통해 당접합체를 표지, 부동화 또는 접합시키기에 유용하다.
친화성 리간드 화합물은 또한 카르보디이미드-매개된 반응의 사용에 의해 카르복실 기를 함유할 수 있거나 또는 이를 통한 커플링을 허용하도록 변형될 수 있다. 활성화된 지지체가 카르복실레이트와 자발적으로 반응하는 반응성 기를 함유하지 않더라도, 아민 (또는 히드라지드)을 함유하는 크로마토그래피 지지체는 수용성 카르보디이미드 가교제로 활성화되는 카르복실레이트와의 아미드 결합을 형성하는데 사용될 수 있다. 카르복실-대-아민 가교 EDC 및 기타 카르보디이미드를 위한 EDC 카르보디이미드 가교제는 제로(zero)-길이 가교제이며; 이들은 표적 분자 사이의 최종 가교 (아미드 결합)의 일부가 되지 않으면서 카르복실레이트 (-COOH)를 1급 아민 (-NH2)과 직접 접합된다. 리간드 부동화는 이러한 반응을 위한 1급 아민으로서 디아미노디프로필아민 (DADPA) 아가로스 수지를 사용하여 달성될 수 있다.
커플링은 또한 반응성 수소 화학을 통해 달성될 수 있다. 작은 유기 리간드 친화성 분자는 부동화를 위한 이용 가능한 화학적 취급을 함유하지 않는 구조를 가질 수 있다. 기타 분자는 낮은 반응성을 갖는 작용기를 갖거나 또는 입체 힌더드될 수 있다. 그러나, 이들 화합물 중 일부는 마니히(Mannich) 반응을 사용하여 포름알데히드 및 아민으로 축합될 수 있는 활성 (또는 대체 가능한) 수소를 갖는다. 공식적으로, 마니히 반응은 포름알데히드 (또는 또 다른 알데히드)를 암모니아 및, 활성 수소를 함유하는 또 다른 화합물로 축합시키는 것으로 이루어진다. 암모니아를 사용하는 대신에, 이러한 반응은 1급 또는 2급 아민 또는 심지어 아미드를 사용하여 실시될 수 있다. 디아미노디프로필아민 (DADPA) 아가로스 수지가 이러한 반응에 대하여 1급 아민으로서 사용될 경우 리간드 부동화가 발생된다. 친화성 크로마토그래피 리간드 고체 상은 관심 단백질 및 리간드 고체 상 사이의 고 특이성 결합 상호작용에 기초하여 단백질 샘플의 분리를 허용한다. 그래서, 고체 상은 완충 조건에 의존하여 관심 단백질이 가역적 부착 가능한 리간드를 포함한다.
친화성 리간드는 또한 기타 공지된 공유 결합, 예컨대 에테르 (티오에테르 포함) 및 아미드 결합을 통해 부동화될 수 있다.
관심 단백질을 리간드 고체 상에 결합시키는 것은 컬럼 크로마토그래피에 의해 이루어질 수 있다. 예를 들어, 리간드 고체 상이 컬럼에 형성되며, 관심 단백질을 함유하는 샘플이 컬럼을 통해 흐르며, 컬럼을 1종 이상의 세정액으로 세정한 후, 용출 완충액을 사용하여 관심 단백질을 컬럼으로부터 용출시킨다.
관심 단백질은 혈청 알부민 (특히 사람 HSA), 면역글로불린, 피브리노겐, α1-산 당단백질 등을 비롯한 혈장 단백질; 아밀라제, 셀룰라제, 송아지-장 알칼리성 포스파타제 (CIAP), 락테이트 데히드로게나제 (LDH) 등을 비롯한 효소; 또한 친화성 태그부착된 단백질 또는 도메인 (6His, FLAG, GST 등을 지님)을 비롯한 인공 단백질 또는 단백질 도메인, 특히 혈청 알부민 융합 단백질, 특히 HSA 융합 단백질 (예, HSA-GLP1 융합, 예컨대 알비글루티드), 알부민을 포함하는 Fc-융합 단백질, 도메인 항체 등을 포함할 수 있다. 예를 들어, 관심 단백질은 인간 혈청 알부민을 포함할 수 있다. 본원에 기재된 화합물은 인간 혈청 알부민으로의 특이성 결합 및, 래트 또는 마우스 혈청 알부민으로의 비-특이성 결합을 나타낼 수 있다.
"불순물"은 샘플 용출액 중의 친화성 크로마토그래피 이전에 또는 친화성 크로마토그래피 이후에 샘플 중에 존재하는 임의의 이물질 또는 바람직하지 않은 분자를 지칭한다. "공정 불순물"이 존재할 수 있다. 이들은 관심 단백질이 생성되는 공정의 결과로서 존재하는 불순물이다. 예를 들어, 이는 숙주 세포 단백질 (HCP), RNA 및 DNA (예를 들어 바이러스)를 포함한다. "HCP"는 관심 단백질에 관한 것이 아니며, 세포 배양 또는 발효 중의 숙주 세포에 의해 생성된, 세포내 및/또는 분비된 단백질을 비롯한 단백질을 지칭한다. 숙주 세포 단백질의 일례로는 정제 도중에 그리고 정제 후 여전히 존재할 경우 관심 단백질에 손상을 야기할 수 있는 프로테아제이다. 예를 들어, 프로테아제가 관심 단백질을 포함하는 샘플 중에 잔존할 경우, 초기에 존재하지 않았던 생성물-관련된 물질 또는 불순물을 생성할 수 있다. 프로테아제의 존재는 정제 과정 도중에 및/또는 최종 제제 중에서 시간 경과에 따라 관심 단백질의 붕괴를 야기할 수 있다. HCP의 제거 또는 HCP의 감소된 레벨은 정의에 의하면 프로테아제의 제거 또는 감소에 필적한다.
공정 불순물은 또한 세포를 성장시키거나 또는 관심 단백질의 발현을 보장하는데 사용되는 성분, 예를 들어 용매 (예, 효모 세포를 배양하는데 사용된 메탄올), 항생제, 메토트렉세이트 (MTX), 배지 성분, 응집제 등을 포함한다. 이전의 단계 중에 샘플에 침출될 수 있는 친화성 크로마토그래피 리간드 고체 상의 일부인 분자도 또한 포함된다.
불순물은 또한 그의 활성은 유지하지만, 그의 구조가 상이한 단백질을 포함하는 "생성물-관련 물질"; 및 구조에서의 그의 차이로 인하여 그의 활성을 손실한 단백질을 포함하는 "생성물-관련 불순물"을 포함한다. 이러한 생성물-관련 변형체는 예를 들어 고 분자량 종 (HMW), 저 분자량 종 (LMW), 응집된 단백질, 전구체, 분해된 단백질, 미스폴딩된 단백질, 언더디술피드(underdisulfide)-결합된 단백질, 분절 및 탈아미드화된 종을 포함한다.
치료제에 대한 반감기 연장제로서 화학식 I II, III 및 IV의 화합물
본원에 기재된 바와 같은 화학식 I, II, III 또는 IV의 화합물을 펩티드 및 폴리펩티드 치료제를 비롯한 치료제에 공유 또는 비-공유 상호작용에 의해 접합시킬 수 있다.
본원에 사용된 바와 같이, "치료제"는 개체에게 투여하여 개체에서 생물학적 표적 분자에 결합되거나 및/또는 그의 작용을 변경시켜 이로운 치료 또는 진단 효과를 생성할 수 있는 임의의 약물 (예를 들어, 작은 유기 분자, 핵산, 폴리펩티드)을 지칭한다. 잠재적 치료제로는 엑센딘, 인슐린, 프로테아제 억제제, 호르몬, 바소프레신, 면역글로불린, 부세렐린, 9-데스글리신아미드, 8-아르기닌 바소프레신 (DGAVP), AL-108, 필로머, 오스테오칼신, 펩티도미메틱 화합물, 예컨대 D-4F를 비롯한 아포A1 모사체, 항체- 및 항체 분절계 치료제 및 임의의 기타 펩티드, 본원의 화합물에 접합시킬 수 있는 폴리펩티드 또는 소분자 화합물을 들 수 있다. 적절한 접합 물질 및 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있으며, WO2003/084469, WO2012/140647 및 WO2014/106583에 추가로 기재되어 있으며, 상기 공보의 내용은 본원에 전문이 포함된다. 적절한 치료제는 경구, 정맥내, 비강, 복강내, 피하 및 경구를 비롯한 임의의 적절한 투여 경로에 의해 화학식 I, II, III 또는 IV의 화합물과 함께 투여될 수 있다. 그 후, 치료제 및 화학식 I, II, III 또는 IV의 화합물은 혈중 혈장 단백질과 결합되어 생성된 착체가 치료제의 혈장 반감기를 연장시키도록 작용된다. 혈중 혈장 단백질은 알부민일 수 있다. 예를 들어, 혈장 단백질은 인간 혈청 알부민일 수 있다. 본원에 기재된 화합물은 인간 혈청 알부민으로의 특이성 결합 및, 래트 또는 마우스 혈청 알부민으로의 비-특이성 결합을 나타낼 수 있다.
어구 "반감기" ("t1/2") 및 "혈청 반감기"는 본 개시내용에 따른 접합된 치료제의 혈청 (또는 혈장) 농도가 생체내에서, 예를 들어 치료제의 분해 및/또는 자연 기전에 의해 항원 결합된 단백질의 제거 또는 분리로 인하여 50% 정도로 감소되는데 소요된 시간을 지칭한다.
반감기 측정
반감기 (t1/2): 접합된 치료제의 농도가 그의 초기 값의 절반에 도달하는데 필요한 시간으로 지칭한다. 단백질의 혈청 반감기는 약물동력학적 실험에 의해 측정될 수 있다.
제거율 (CL): 단위 시간당 단백질이 비가역적으로 제거된 혈장의 부피를 지칭한다. 제거율은 투여량/AUC로서 계산된다 (AUC: 곡선 아래의 면적 또는 혈장 약물 농도 시간 곡선 아래의 면적). 제거율은 또한 약물 제거율을 접합된 치료제의 혈장 농도로 나누어 계산할 수 있다 (제거율 = CL*농도).
평균 체류 시간 (MRT): 접합된 치료제가 비가역적으로 제거되기 이전에 체내에 체류되는 평균 시간. MRT= AUMC/AUC로서 계산됨.
정상 상태 농도: 정상 상태 농도 (Css)는 약물 제거율이 지속된 약물 투여의 결과로서 약물 투여 속도에 필적할 때 도달되는 농도이다. Css는 피크 및 트로프 레벨 사이에서 변동되며, ㎍/㎖ 단위로 측정한다. "평균 정상 상태 트로프 농도"는 주어진 시간에서 환자 모집단에 대한 트로프 레벨의 평균치를 지칭한다.
실시예
실시예 1: N-(2-(2-(2- 아미노에톡시 ) 에톡시 )에틸)-4-(1H- 벤조[d]이미다졸 -2-일)벤즈아미드 (화합물 4) 및 N-(2-(2-(2- 아미노에톡시 ) 에톡시 )에틸)-2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르복스아미드 (화합물 5)의 제조
N,N-디메틸포름아미드 (DMF) (3 ㎖) 중의 원하는 카르복실산 (1.0 equiv, 0.201 mmol) 및 HATU (92 ㎎, 0.242 mmol)의 용액에 실온에서 DIPEA (0.106 ㎖, 0.604 mmol)를 첨가하고, 10 분 동안 교반하였다. 그 후, 용액에 tert-부틸 (2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바메이트 (0.048 ㎖, 0.201 mmol)를 첨가하고, 반응을 실온에서 밤새 교반되도록 하였다. 반응을 에틸 아세테이트 (EtOAc) (100 ㎖)로 희석하고, NH4Cl (2×100 ㎖) 및 포화 NaCl (1×50 ㎖)로 세정하였다. 유기층을 MgSO4 위에서 건조시킨 후, 무수 상태로 증발시켰다.
디클로로메탄 (DCM) (3 ㎖) 중의 BOC 보호된 물질 (1.0 equiv, 0.201 mmol)의 용액에 실온에서 TFA (0.465 ㎖, 6.03 mmol)를 첨가하였다. 반응을 실온에서 1 시간 동안 교반되도록 하였다. 용매 및 과잉의 TFA를 감압 조건 하에서 제거하고, 얻은 잔류물을 DCM과 함께 2회 공비시켰다. 생성된 물질을 DMF 중에 용해시킨 후, 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.
하기 반응식 1은 tert-부틸 (2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바메이트 (1) 및 4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조산 (2) 및 2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르복실산 (3)으로부터 N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤즈아미드 (화합물 4) 및 N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르복스아미드 (화합물 5)의 생성을 제시한다.
<반응식 1>
Figure pct00035
실시예 2: 1 -(4-(1H- 벤조[d]이미다졸 -2-일) 벤조일 )피페리딘-4-일 (3-((2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바모일)페닐)카르바메이트 (화합물 10) 및 1-(2-페닐-1H- 벤조[d]이미다졸 -6-카르보닐)피페리딘-4-일 (3-((2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바모일)페닐)카르바메이트 (화합물 11)의 제조
N,N-디메틸포름아미드 (DMF) (3 ㎖) 중의 원하는 카르복실산 (1.0 equiv, 0.420 mmol) 및 HATU (160 ㎎, 0.420 mmol)의 용액에 실온에서 DIPEA (0.220 ㎖, 1.259 mmol)를 첨가하고, 10 분 동안 교반하였다. 그 후, 용액에 메틸 3-(((피페리딘-4-일옥시)카르보닐)아미노)벤조에이트 (화합물 7), 0.112 ㎖, 0.420 mmol)를 첨가하고, 반응을 실온에서 밤새 교반되도록 하였다. 반응을 EtOAc (100 ㎖)로 희석하고, NH4Cl (2×100 ㎖) 및 포화 NaCl (1×50 ㎖)로 세정하였다. 유기층을 MgSO4 위에서 건조시킨 후, 무수 상태로 증발시켰다.
생성된 생성물을 그 상태대로 사용하였으며, 테트라히드로푸란 (THF) (4 ㎖) 및 메탄올 (1 ㎖) 중에 용해시켰다. 이 용액에 물 (1 ㎖) 중의 LiOH (0.030 g, 1.260 mmol)를 첨가하였다. 반응을 실온에서 밤새 교반되도록 하였다. LCMS 분석은 완료된 전환을 나타냈다. 각각의 반응에 1N HCl (5 ㎖)을 첨가한 후, 용매를 무수 상태로 증발시켰다. 이 물질을 그 상태대로 그 다음 단계로 보냈다.
그 다음, N,N-디메틸포름아미드 (DMF) (3 ㎖) 중의 생성된 카르복실산 (1.0 equiv, 0.420 mmol) 및 HATU (192 ㎎, 0.504 mmol)에 실온에서 DIPEA (0.220 ㎖, 1.260 mmol)를 첨가하고, 10 분 동안 교반하였다. 그 후, 이 용액에 tert-부틸 (2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바메이트 (화합물 1) (0.100 ㎖, 0.420 mmol)를 첨가하고, 반응을 실온에서 밤새 교반되도록 하였다. 반응을 EtOAc (100 ㎖)로 희석하고, NH4Cl (2×100 ㎖) 및 포화 NaCl (1×50 ㎖)로 세정하였다. 유기층을 MgSO4 위에서 건조시킨 후, 무수 상태로 증발시켰다.
디클로로메탄 (DCM) (3 ㎖) 중의 생성된 BOC 보호된 물질 (1.0 equiv, 0.360 mmol)에 실온에서 TFA (0.969 ㎖, 12.58 mmol)를 첨가하였다. 반응을 실온에서 1 시간 동안 교반되도록 하였다. 용매 및 과잉의 TFA를 감압 조건 하에서 제거하고, 얻은 잔류물을 DCM과 함께 2회 공비시켰다. 생성된 물질을 DMF 중에 용해시킨 후, 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.
하기 반응식 2는 (2) 4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조산 (3) 2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르복실산 및 (7) 메틸 3-(((피페리딘-4-일옥시)카르보닐)아미노)벤조에이트로부터 1-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)피페리딘-4-일 (3-((2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바모일)페닐)카르바메이트 (화합물 8) 및 1-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)피페리딘-4-일 (3-((2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바모일)페닐)카르바메이트 (화합물 9)의 생성을 제시한다. 그 후, 화합물 (8) 및 (9)의 반응 혼합물을 기재된 바와 같이 LiOH로 처리하여 3-((((1-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)피페리딘-4-일)옥시)카르보닐)아미노)벤조산 (10) 및 3-((((1-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)피페리딘-4-일)옥시)카르보닐)아미노)벤조산 (11)의 혼합물을 생성하였다. 그 다음, 생성물의 혼합물을 기재된 바와 같은 tert-부틸 (2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바메이트 (1) 1-[비스(디메틸아미노)메틸렌]-1H-1,2,3-트리아졸로[4,5-b]피리디늄 3-옥시드 헥사플루오로포스페이트 (HATU) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (DIPEA)으로 처리한 후, 트리플루오로아세트산 (TFA)으로 처리하여 생성물인 1-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)피페리딘-4-일 (3-((2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바모일)페닐)카르바메이트 (10) 및 1-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)피페리딘-4-일 (3-((2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바모일)페닐)카르바메이트 (11)를 생성하였다.
하기 반응식 2는 산 2 및 3 각각으로부터 2개의 단계에 걸쳐 카르복실레이트 8 및 9의 제조를 제시한다. 그 후, 화합물 8 및 9를 2 단계에 걸쳐 원하는 최종 생성물인 1-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)피페리딘-4-일 (3-((2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바모일)페닐)카르바메이트 (10) 및 1-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)피페리딘-4-일 (3-((2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바모일)페닐)카르바메이트 (11)로 전환시켰다.
<반응식 2>
Figure pct00036
실시예 3: N-(2-(2-(2- 아미노에톡시 ) 에톡시 )에틸)-2- (1'-(2-페닐-1H-벤조[d] 이미다졸-6-카르보닐)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)벤조[d]티아졸-6-카르복스아미드 (화합물 19); N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-4-에틸-2-(1'-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)티아졸-5-카르복스아미드 (화합물 20); 2-(1'-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)-N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)벤조[d]티아졸-6-카르복스아미드 (화합물 21); 및 2-(1'-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)-N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-4-에틸티아졸-5-카르복스아미드 (화합물 22)의 제조
N,N-디메틸포름아미드 (DMF) (3 ㎖) 중의 원하는 카르복실산 (예, 화합물 2 및 3) (1.0 equiv, 0.420 mmol) 및 HATU (160 ㎎, 0.420 mmol)의 용액에 실온에서 DIPEA (0.220 ㎖, 1.259 mmol)를 첨가하고, 10 분 동안 교반하였다. 그 후, 이 용액에 tert-부틸 [4,4'-비피페리딘]-1-카르복실레이트 (12) (0.108 ㎖, 0.420 mmol)를 첨가하고, 반응을 실온에서 밤새 교반되도록 하였다. 반응 혼합물을 EtOAc (100 ㎖)로 희석하고, NH4Cl (2×100 ㎖) 및 포화 NaCl (1×50 ㎖)로 세정하였다. 유기층을 MgSO4 위에서 건조시킨 후, 무수 상태로 증발시켰다. Boc 보호된 미정제 물질을 물질 디클로로메탄 (DCM) (3 ㎖) 중에 용해시켰다. 이 용액에 TFA (0.971 ㎖, 12.60 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2 시간 동안 교반되도록 하였다. 용매 및 과잉의 TFA를 감압 조건 하에서 제거하고, 얻은 잔류물을 DCM과 함께 2회 공비시켜 화합물 13 및 14를 정량적 수율로 얻었다.
화합물 17 및 18은 하기 기재된 바와 같이 제조하였다. N,N-디메틸포름아미드 (DMF) (3 ㎖) 중의 원하는 카르복실산 (예, 화합물 15 및 16) (1.0 equiv, 0.420 mmol) 및 HATU (0.192 g, 0.504 mmol)의 용액에 실온에서 DIPEA (0.220 ㎖, 1.260 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 10 분 동안 교반하였다. 그 후, 반응 혼합물에 tert-부틸 (2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바메이트 (1) (0.100 ㎖, 0.420 mmol)를 첨가하고, 반응을 실온에서 밤새 교반되도록 하였다. 반응을 EtOAc (100 ㎖)로 희석하고, NH4Cl (2×100 ㎖) 및 포화 NaCl (1×50 ㎖)로 세정하였다. 유기층 (화합물 17 및 18 함유)을 MgSO4 위에서 건조시킨 후, 무수 상태로 증발시켰다.
N,N-디메틸포름아미드 (DMF) (3 ㎖) 중의 생성된 BOC-보호된 카르복실산 (화합물 17 및 18) (1.0 equiv, 0.210 mmol)에 실온에서 DIPEA (1.5 ㎖, 0.315 mmol)를 첨가하였다. 그 후, 이 용액에 원하는 아민 (예, 화합물 13 및 14) (1.0 equiv, 0.210 mmol)을 첨가하고, 반응을 80℃에서 밤새 가열하였다. 반응을 EtOAc (50 ㎖)로 희석하고, NH4Cl (2×50 ㎖) 및 포화 NaCl (1×50 ㎖)로 세정하였다. 유기층 (BOC-보호된 생성물 19, 20, 21, 22 함유)을 MgSO4 위에서 건조시킨 후, 무수 상태로 증발시켰다. 생성물을 정제할 필요 없이 그 다음 단계로 보냈다. 디클로로메탄 (DCM) (3 ㎖) 중의 원하는 BOC-보호된 물질 (예, BOC-보호된 화합물 19, 20, 21 및 22) (1.0 equiv)의 용액에 실온에서 TFA (0.809 ㎖, 10.50 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1 시간 동안 교반되도록 하였다. 용매 및 과잉의 TFA를 감압 조건 하에서 제거하고, 얻은 잔류물을 DCM과 함께 2회 공비시켰다. 최종 생성물 (예, 화합물 19, 20, 21 및 22)을 분취용 HPLC에 의해 정제하였다.
반응식 3 (하기)은 화합물 19, 20, 21 및 22의 생성을 3-부분 합성으로 기재한다. 우선, 화합물 13 및 14는 화합물 12를 산 2 및 3으로 커플링시킨 후 TFA를 사용한 BOC 탈보호에 의해 화합물 (4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)페닐)([4,4'-비피페리딘]-1-일)메타논 (13) 및 [4,4'-비피페리딘]-1-일(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-일)메타논 (14)을 정량적 수율로 얻어서 제조하였다.
화합물 17 및 18은 모노-보호된 디아민 1을 화합물 15 (2-클로로벤조[d]티아졸-6-카르복실산) 및 화합물 16 (2-클로로-4-에틸티아졸-5-카르복실산)으로 각각 커플링시켜 제조하였다.
그 후, 화합물 13 및 14를 염기의 존재하에서 화합물 17 및 18과 반응시키고, 가열하여 BOC 보호된 최종 생성물을 제공하고, TFA로 처리시 원하는 화합물 N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-2-(1'-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)벤조[d]티아졸-6-카르복스아미드 (19); N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-4-에틸-2-(1'-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)티아졸-5-카르복스아미드 (20); 2-(1'-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)-N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)벤조[d]티아졸-6-카르복스아미드 (21); 및 2-(1'-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)-N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-4-에틸티아졸-5-카르복스아미드 (22)를 우수한 수율로 얻었다.
<반응식 3>
Figure pct00037
친화성 실시예
실시예 4: 친화성 아가로스 물질의 제조
피어스 NHS 활성화된 아가로스 (N-히드록시숙신이미드-활성화된 아가로스) (26 ㎎)를 포스페이트-완충 염수 (PBS) 중의 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I 또는 화학식 II의 화합물의 100 μM 용액 400 ㎕와 pH 7.5에서 실온에서 1 시간 동안 합한 후, 1M 트리스-HCl을 pH 8.0에서 30 분 동안 실온에서 첨가하였다. 생성된 혼합물은 약 200 ㎕의 화합물-접합된 아가로스를 산출하였다. 도 1은 반응의 개략도 및 접합된 아가로스 비드를 도시한다.
실시예 5: 생체분자의 친화성 정제/포획
A. 인간 혈청 알부민으로 스파이크 처리한 세포 용해물
PBS 완충액 중의 MCF7 세포를 음파 처리하여 세포 용해물을 제조하고, 107 세포를 500 ㎕ PBS 중에 현탁시키고, 얼음 위에서 마이크로-음파처리 팁으로 브랜슨 소니피어(Branson Sonifier) 450 (출력=4에서 1 분; 듀티 사이클=30%)에서 음파 처리하였다. 용액이 맑아지면, 13,000 rpm에서 20 분 동안 원심분리하여 부스러기를 제거한 후, 700 ㎍의 생성된 용해물 단백질 (OD280)을 100 ㎕의 PBS 완충액 중의 10 ㎍의 HSA로 스파이크 처리하고, 이 혼합물을 실시예 4에서 제조된 바와 같은 5 ㎕의 친화성 아가로스 비드에 로딩하였다. 도 2에 도시한 바와 같이, 세포 용해물+HSA로 로딩한 친화성 아가로스 비드는 세포 용해물로부터 HSA를 효과적으로 분리/포획시켰다 (좌측으로부터 우측으로 나타내어, 레인 6 및 7 (윤곽선)과 바로 우측의 레인 8 및 9 각각을 비교한다: 본원에 기재된 바와 같은 화합물에 접합되지 않은 아가로스에 로딩된 HSA 및, 접합된 친화성 아가로스 비드에 로딩된 세포 용해물의 부재하에서의 HSA).
B. 미메틱 블루 ®와 비교한 친화성 아가로스 물질을 사용한 HSA의 친화성 정제/포획
도 3은 HSA에 대한 미메틱 블루®와 비교한, HSA에 대한 본원에 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물에 접합된 친화성 아가로스 물질의 우수한 특이성을 도시한다 (A-비드 표지된 레인 4 및 7을 미메틱 표지된 레인 5 및 8과 비교한 것에 유의한다).
C. 정제/포획된 HSA -융합된 펩티드의 용출
또 다른 실험은 실시예 4에 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물에 접합된 친화성 아가로스 물질로부터 포획된 HSA를 용출시키는 다양한 완충액 및 용액의 능력을 비교하였다. 이러한 실험에서, 6개의 파이넥서스(phynexus) 팁을 본원에 기재된 바와 같은 5 ㎕의 친화성 아가로스 물질로 패킹시켰다. 각각의 팁은 투입으로서 20 ㎍의 HSA를 수용하였다. HSA가 실온에서 30 분 동안 친화성 아가로스 물질에 결합되도록 하고, 그 후 대표적인 통과액을 수집하였다.
각각의 팁을 50 ㎕ 세정 완충액 (100/0; 80/20; 60/40; 40/60; 20/80; 및 0/100의 PBS/H2O)으로 각 세정당 10 분 동안 2회 세정하였다. 그 후, 세정 용액을 수집하고, SDS-PAGE에 의해 분석하였다. (2% 투입을 로딩하고, 각각 레인 2 및 3의 경우 겔에 대한 분획을 수집하고; 겔에 13% 로딩함, 레인 4-15).
각각의 겔 밴드에서의 HSA의 양을 플루오에켐(FluoeChem) 소프트웨어로 정량화하였다. 도 4a의 레인 14 및 15에서 알 수 있는 바와 같이, 용출 완충액으로서 H2O만을 사용하여 2개의 세정액으로 60% 용출을 달성하였다 (팁 6). 일반적으로, 본원에 기재된 친화성 아가로스 물질로부터 HSA의 용출율은 증가되었으며, 용출 완충액의 이온 강도는 감소되었다 (도 4a의 팁 1, 레인 4-5; 팁 2, 레인 6-7; 팁 3, 레인 8-9; 팁 4, 레인 10-11; 팁 5, 레인 12-13; 및 팁 6, 레인 14-15를 비교하며; 또한 도 4b에서 그래프로 나타낸 바와 같이 세정액 1 및 2를 합하고, H2O를 통한 각각의 레인 PBS에서 각각 암 및 명 색도에 의해 나타낸 결과를 참조한다).
D. 미메틱 블루 ®와 비교한 HSA -융합된 펩티드를 포획시키는 친화성 아가로스 물질의 능력에 대한 열의 효과
친화성 아가로스 물질+생체분자 또는 미메틱 블루®+생체분자 혼합물을 95℃에서 PBS 중에서 (세제 없음) 10 분 동안 가열한 후 최대 결합 용량을 달성하도록 실시예 4에 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물에 접합된 친화성 아가로스 물질과, 상기 기재된 바와 같은 HSA-융합된 펩티드에 노출시킨 미메틱 블루®와 비교하는 또 다른 실험을 실시하였다. 열 처리 후, HSA-융합된 펩티드를 친화성 아가로스/생체분자 혼합물 또는 미메틱 블루®/생체분자 혼합물로부터 용출시키고, "용출된" 분획을 분석하고, "결합됨"으로 표지하였다.
도 5에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 4에 기재된 바와 같은 화학식 I의 화합물에 접합된 친화성 아가로스 물질은 미메틱 블루®와는 상이한 작용/결합 기전을 갖는 것으로 보이는데 (친화성 결합됨 레인 7을 미메틱 블루® 결합됨 레인 10과 비교함), 여기서 친화성 아가로스 물질로의 생체분자의 결합은 열에 의해 분해 가능한 반면, 미메틱 블루®로의 생체분자의 결합은 그렇지 않다.
실시예 5A 내지 5D에서 사용된 바와 같이 완충 용액 중의 생체분자-스파이크 처리한 세포 용해물 또는 생체분자 혼합물은 PBS (pH 7.4에서 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2PO4, 10 mM KH2PO4) 또는 RIPA 완충액 (pH 8.0에서 50 mM 트리스, 150 mM NaCl, 2 mM EDTA, 1% NP40, 0.5% Na데옥시콜레이트, 1% SDS) 또는 기타 저 이온 강도 완충액으로 용출시킬 수 있다는 점에 유의하여야 한다. 생체분자는 상기와 같은 낮은 이온 강도/낮은 염 완충액을 사용하여 친화성 아가로스 물질로부터 유사하게 용출될 수 있으며, 심지어 도 4a 및 4b에 예시된 바와 같이 물로 용출시킬 수 있다.
반감기 연장
실시예 6: 치료제 분자에 대한 반감기 연장제로서 화학식 I, II, III 및 IV의 화합물
본원에 기재된 바와 같은 화학식 I, II, III 또는 IV의 화합물은 공유 또는 비-공유 상호작용에 의해 치료제, 특히 펩티드를 포함한, 화학식 I, II, III 또는 IV의 화합물과 접합시킬 수 있는 작용 모이어티를 갖는 소분자 치료제 및 폴리펩티드 치료제 및 올리고뉴클레오티드 치료제에 접합시킬 수 있다.
특정 실시양태에서, 화학식 I 내지 IV의 화합물은 혈중 혈장 단백질, 예컨대 인간 혈청 알부민 (HSA)과 결합되어 2성분 친화성 화합물/혈청 단백질 접합시키며, 그 후 이러한 2성분 친화성 화합물/혈청 단백질 접합은 예를 들어 경구 또는 정맥내 투여된 치료제와 상호작용하며, 치료제가 순환에 들어가면 3성분 착체를 형성하며, 그리하여 생성된 3성분 착체는 치료제의 혈장 반감기를 효과적으로 연장시키는 작용을 한다.
상기 기재된 본 발명의 실시양태는 단지 예시를 위한 것이며, 다수의 변형예 및 수정예는 관련 기술분야의 기술자에게 명백할 것이다. 상기 모든 변형예 및 수정예는 임의의 첨부된 청구범위에서 정의된 바와 같은 본 발명의 범주내에 포함시키고자 한다.

Claims (27)

  1. 하기 화학식 I의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 I>
    Figure pct00038

    상기 식에서,
    R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고,
    여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고;
    아릴은 임의의 치환 또는 비치환된 완전 또는 부분 방향족 탄화수소 치환기 또는 헤테로아릴 치환기이고;
    Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y2는 C 또는 N이고;
    A 및 D는 독립적으로
    Figure pct00039

    아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D는 부재하고;
    B는 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B는 부재하고;
    C는
    Figure pct00040

    아릴, 헤테로아릴, 아미딘 또는 티오아미드 중 임의의 것이고;
    E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고;
    Z는 치환 또는 비치환된 아릴, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로알킬, 또는 N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z는 부재한다.
  2. 제1항에 있어서,
    R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I이고;
    R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"가 각각 독립적으로 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고;
    아릴이 치환 또는 비치환된 페닐, 톨릴, 크실릴, 나프틸, 벤질, 티에닐, 인돌릴, 피롤릴, 피리디닐, 피리미디닐, 푸리닐, 피라닐, 푸라닐, 티오페닐, 티아졸릴, 이미다졸릴, 티오이미다졸릴, 옥사졸릴, 아제피닐, 티오페닐, 티아자피닐, 퀴놀리닐, 옥세피닐 또는 옥사디아졸릴 기이고;
    Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고;
    Y2가 C 또는 N이고;
    A 및 D가 독립적으로
    Figure pct00041

    아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D가 부재하고;
    B가 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N을 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, S 또는 O를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B가 부재하고;
    C가
    Figure pct00042

    아릴, 헤테로아릴, 아미딘, 티오아미드 중 임의의 것이거나, 또는 C가 부재하고;
    E가 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E가 부재하고;
    Z가 치환 또는 비치환된 아릴, 또는 N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z가 부재하는 것인 화합물 또는 그의 염.
  3. 제1항에 있어서, 하기 제시된 바와 같은 화학식 Ia의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 Ia>
    Figure pct00043

    상기 식에서,
    R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고,
    여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고;
    R4는 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y2는 C 또는 N이고;
    A 및 D는 독립적으로
    Figure pct00044

    아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D는 부재하고;
    B는 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N을 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, S 또는 O를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B는 부재하고;
    E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고;
    Z는 치환 또는 비치환된 아릴, 또는 N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z는 부재한다.
  4. 제3항에 있어서,
    R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I이고;
    R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고;
    Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고;
    Y2가 C이고;
    E가 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E가 부재하는 것인 화합물 또는 그의 염.
  5. 제1항에 있어서, 하기 제시된 바와 같은 화학식 Ib의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 Ib>
    Figure pct00045

    상기 식에서,
    R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고,
    여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고, E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고;
    R4는 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y2는 C 또는 N이다.
  6. 제5항에 있어서,
    R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬이고;
    R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고;
    R4가 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬이고;
    Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고;
    Y3이 C인 화합물 또는 그의 염.
  7. 제1항에 있어서, 하기 제시된 바와 같은 화학식 Ic의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 Ic>
    Figure pct00046

    상기 식에서,
    R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고,
    여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고, E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고;
    R4는 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y2는 C 또는 N이다.
  8. 제7항에 있어서,
    R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I이고;
    R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고;
    Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고;
    Y2가 C 또는 N인 화합물 또는 그의 염.
  9. 제1항에 있어서,
    Figure pct00047

    및
    Figure pct00048

    로부터 선택되는 화합물 또는 그의 염.
  10. 하기 화학식 II의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 II>
    Figure pct00049

    상기 식에서,
    R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고,
    여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고;
    아릴은 임의의 치환 또는 비치환된 완전 또는 부분 방향족 탄화수소 치환기 또는 헤테로아릴 치환기이고;
    Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y2는 C 또는 N이고;
    A 및 D는 독립적으로
    Figure pct00050

    아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D는 부재하고;
    B는 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B는 부재하고;
    C는
    Figure pct00051

    아릴, 헤테로아릴, 아미딘, 티오아미드 중 임의의 것이거나, 또는 C는 부재하고;
    E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고;
    Z는 치환 또는 비치환된 아릴, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로알킬, 또는 N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z는 부재한다.
  11. 제10항에 있어서,
    R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I이고;
    R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고, 여기서 R' 및 R"가 각각 독립적으로 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고, E가 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E가 부재하고; 아릴이 치환 또는 비치환된 페닐, 톨릴, 크실릴, 나프틸, 벤질, 티에닐, 인돌릴, 피롤릴, 피리디닐, 피리미디닐, 푸리닐, 피라닐, 푸라닐, 티오페닐, 티아졸릴, 이미다졸릴, 티오이미다졸릴, 옥사졸릴, 아제피닐, 티오페닐, 티아자피닐, 퀴놀리닐, 옥세피닐 또는 옥사디아졸릴 기이고;
    Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고;
    Y2가 C 또는 N이고;
    A 및 D가 독립적으로
    Figure pct00052

    아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D가 부재하고;
    B가 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N을 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, S 또는 O를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B가 부재하고;
    C가
    Figure pct00053

    아릴, 헤테로아릴, 아미딘, 티오아미드 중 임의의 것이거나, 또는 C가 부재하고;
    E가 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E가 부재하고;
    Z가 치환 또는 비치환된 아릴, 또는 N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z가 부재하는 것인 화합물 또는 그의 염.
  12. 제10항에 있어서, 하기 제시된 바와 같은 화학식 IIa의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 IIa>
    Figure pct00054

    상기 식에서,
    R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고,
    여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고;
    R4는 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y2는 C 또는 N이고;
    A 및 D는 독립적으로
    Figure pct00055

    아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D는 부재하고;
    B는 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N을 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, S 또는 O를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B는 부재하고;
    E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고;
    Z는 치환 또는 비치환된 아릴, 또는 N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z는 부재한다.
  13. 제12항에 있어서,
    R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I이고;
    R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고;
    Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고;
    Y2가 C인 화합물 또는 그의 염.
  14. 제10항에 있어서, 하기 제시된 바와 같은 화학식 IIb의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 IIb>
    Figure pct00056

    상기 식에서,
    R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고,
    여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고;
    R4는 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y2는 C 또는 N이고;
    E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재한다.
  15. 제14항에 있어서,
    R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬이고;
    R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고;
    R4가 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬이고;
    Y1 및 Y3이 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고;
    Y2가 C인 화합물 또는 그의 염.
  16. 제10항에 있어서, 하기 제시된 바와 같은 화학식 IIc의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 IIc>
    Figure pct00057

    상기 식에서,
    R1은 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고,
    여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고;
    R4는 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y1 및 Y3은 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y2는 C 또는 N이고;
    E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재한다.
  17. 제16항에 있어서,
    R1이 H, -Cl, -F, -Br 또는 -I이고;
    R3이 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n이 0 내지 12의 임의의 정수이고;
    Y1 및 Y2가 독립적으로 C, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2가 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH)nCH3 (여기서, n은 1, 2, 3, 4 또는 5임) 또는 -C(CH3)3이고;
    Y2가 C인 화합물 또는 그의 염.
  18. 제10항에 있어서,
    Figure pct00058

    및
    Figure pct00059

    로부터 선택되는 화합물.
  19. N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르복스아미드;
    N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤즈아미드;
    1-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)피페리딘-4-일 (3-((2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바모일)페닐)카르바메이트;
    1-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)피페리딘-4-일 (3-((2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)카르바모일)페닐)카르바메이트;
    N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-2-(1'-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)벤조[d]티아졸-6-카르복스아미드;
    N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-4-에틸-2-(1'-(2-페닐-1H-벤조[d]이미다졸-6-카르보닐)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)티아졸-5-카르복스아미드;
    2-(1'-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)-N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)벤조[d]티아졸-6-카르복스아미드; 및
    2-(1'-(4-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)벤조일)-[4,4'-비피페리딘]-1-일)-N-(2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)에틸)-4-에틸티아졸-5-카르복스아미드
    로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 그의 염.
  20. 하기 화학식 III 또는 IV의 화합물 또는 그의 염.
    <화학식 III>
    Figure pct00060

    <화학식 IV>
    Figure pct00061

    상기 식에서,
    각각의 Z1, Z2, Z3 및 Z4는 독립적으로 N 및 CR1로부터 선택되고, Z1, Z2, Z3 및 Z4 중 2개 이하는 N이고, 각각의 R1은 독립적으로 H, -Cl, -F, -Br, -I, -OH, -CN, -NO2, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알콕실, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴로부터 선택되고;
    R3은 -[(CH2)2E]n(CH2)2NR'R"이고, n은 0 내지 30의 임의의 정수이고,
    여기서 R' 및 R"는 각각 독립적으로 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐 또는 치환 또는 비치환된 시클로알킬이고;
    아릴은 임의의 치환 또는 비치환된 완전 또는 부분 방향족 탄화수소 치환기 또는 헤테로아릴 치환기이고;
    Y1 및 Y3은 독립적으로 C, CR2, O, N, NR2 또는 S이고, 여기서 R2는 H, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알킬, 치환 또는 비치환된 C1-C6 알케닐, 치환 또는 비치환된 시클로알킬, 아릴 또는 헤테로아릴이고;
    Y2는 C이고;
    A 및 D는 독립적으로
    Figure pct00062

    아미딘, 티오아미드이거나, 또는 A 및/또는 D는 부재하고;
    B는 치환 또는 비치환된 C4-C9-시클로알킬, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 C4-C9-헤테로시클로알킬, N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 B는 부재하고;
    C는
    Figure pct00063

    아릴, 헤테로아릴, 아미딘 또는 티오아미드 중 임의의 것이고;
    E는 CH2, O, NH 또는 S이거나, 또는 E는 부재하고;
    Z는 치환 또는 비치환된 아릴, N, O 또는 S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로알킬, 또는 N, O, S를 포함하는 치환 또는 비치환된 헤테로아릴이거나, 또는 Z는 부재한다.
  21. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 D, Z (또는 Z0), A 및 B가 부재하는 것인 화합물.
  22. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 치료에 사용하기 위한 화합물.
  23. 치료제 및 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는 제약 조성물.
  24. 제23항에 따른 제약 조성물로 환자를 치료하는 방법.
  25. 치료제를 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 따른 화합물에 접합시키고, 이를 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 치료제의 반감기를 연장시키는 방법.
  26. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는 친화성 크로마토그래피 고체 상.
  27. 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 사용하여 관심 단백질을 정제하는 방법.
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