JP2013538798A - アフィニティクロマトグラフィーによる抗体およびFc融合タンパク質精製のためのリガンド - Google Patents
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Abstract
【化1】
式中、
Spはスペーサー基である;
vは0もしくは1である;
Amはアミド基 -NR1-C(O)- であって、NR1がAr1に結合し-C(O)-がAr2に結合しているか、または-C(O)-がAr1に結合しNR1がAr2に結合しているかのいずれかであり;さらにR1は水素もしくはC1-C4アルキルであるが、好ましくは水素もしくはメチルであって;より好ましくは水素である;
Ar1は、2価の、置換もしくは非置換の5員もしくは6員芳香環である;
Ar2は、5員もしくは6員複素環式芳香環であって、それが
(a) 単結合を介して、もう1つの5員もしくは6員芳香環に結合している;または
(b) 多環式環系の一部として、もう1つの5員もしくは6員芳香環と縮合している;または
(c) C1-C4アルキル;C2-C4アルケニル;C2-C4アルキニル;ハロゲン;C1- C4ハロアルキル;ヒドロキシ置換C1-C4 アルキル;C1-C4アルコキシ;ヒドロキシ置換C1-C4アルコキシ;C1-C4アルキルアミノ;C1-C4アルキルチオ;およびそれらの組み合わせから選択される少なくとも1つの置換基に結合している、
前記5員もしくは6員複素環式芳香環である。
【選択図】 なし
Description
(I)
Lは、リガンドが結合している支持体材料上の連結ポイントである;
Spは、スペーサー基である;
vは、0もしくは1である;
Amは、アミド基-NR1-C(O)-であって、このNR1はAr1に結合し、-C(O)-はAr2に結合しており、または-C(O)-がAr1に結合し、NR1がAr2に結合している;ならびに
R1は水素もしくはC1 - C4アルキル、好ましくは水素もしくはメチルであるが;より好ましくは水素である;
Ar1は、2価の、5員もしくは6員の置換もしくは非置換芳香環である;
Ar2は、5員もしくは6員複素環式芳香環であって、それが、
(a) 単結合でもう1つの5員もしくは6員芳香環に結合している;または
(b) 多環式環系の一部として、もう1つの5員もしくは6員芳香環と縮合している;または
(c) C1 - C4アルキル;C2 - C4アルケニル;C2 - C4 アルキニル;ハロゲン;C1 - C4 ハロアルキル;ヒドロキシ置換C1 - C4 アルキル;C1 - C4 アルコキシ;ヒドロキシ置換C1 - C4 アルコキシ;C1 - C4 アルキルアミノ; C1 - C4 アルキルチオ;およびそれらの組み合わせから選択される、少なくとも1つの置換基に結合している、
前記5員もしくは6員複素環式芳香環である。
-NH-CH2-CH2-CH2-NH (-NH- は連結ポイントLに結合する);
-NH-(CH2)3-NH- (Nは連結ポイントLに結合し、もう一方のNがリガンドのC(=O)に結合する);
-N’H-CH(C(=O)NH-(CH2)3-N’’H-)((CH2)2C(=O)NH-(CH2)3-N’’’H-) (N’ は連結ポイントLに結合し、N’’ およびN’’’ は双方とも、2つの個別のリガンドのC(=O)に結合する);
-NH-(CH2)3-N’(CH3)- (Nは連結ポイントLに結合し、N’ はリガンドのC(=O)に結合する);
-N’H-(CH2)3-NH-C(=O)-CH(-N’’H-)(-(CH2)4-N’’’H-) (N’ は連結ポイントLに結合し、N’’およびN’’’ は双方とも、2つの個別のリガンドのC(=O)に結合する);
-N’H-(CH2)3-NH-C(=O)-CH(-NH-C(=O)-CH2-(O-C2H4)2-N’’H-)(-(CH2)4-NH-C(=O)-CH2-(O-C2H4)2-N’’’H-) (N’ は連結ポイントLに結合し、N’’およびN’’’ は双方とも、2つの個別のリガンドのC(=O)に結合する);
-N’H-(CH2)3-NH-C(=O)-CH(-NH-C(=O)-CH2-O-C2H4-N’’H-)(-(CH2)4-NH-C(=O)-CH2-O-C2H4-N’’’H-) (N’ は連結ポイントLに結合し、N’’およびN’’’ は双方とも、2つの個別のリガンドのC(=O)に結合する);
-N’H-(CH2)3-NH-C(=O)-CH2-(O-C2H4)2-N’’H- (N’ は連結ポイントLに結合し、N’’ はリガンドのC(=O)に結合する);
-N’H-(CH2)3-NH-C(=O)-CH2-(O-C2H4)2-NH-C(=O)-CH2-(O-C2H4)2-N’’H- (N’ は連結ポイントLに結合し、N’’ はリガンドのC(=O)に結合する);
-N’H-(C2H4-O)2-C2H4-NH-C(=O)-NH-C2H4-(O-C2H4)2-N’H- (N’ は連結ポイントLに結合し、もう一方のN’ はリガンドのC(=O)に結合する);
-N’H-(CH2)5-C(=O)-NH-(CH2)3-N’’H- (N’ は連結ポイントLに結合し、N’’ はリガンドのC(=O)に結合する);
-N’H-C2H4-(O-C2H4)2-NH-C(=O)-(CH2)5-N’’H- (N’ は連結ポイントLに結合し、N’’ はリガンドのC(=O)に結合する);
-N’H-(CH2)6-NH-C(=O)-CH2-(O-C2H4)2-N’’H- (N’ は連結ポイントLに結合し、N’’ はリガンドのC(=O)に結合する)。
(a) 単結合によってもう1つの5員もしくは6員の非置換もしくは置換複素環式芳香環と結合している;または
(b) もう一つの5員もしくは6員芳香環と縮合して、多環式環系の一部となっている;または
(c) C1 - C4 アルキル;C2 - C4 アルケニル;C2 - C4 アルキニル;ハロゲン;C1 - C4 ハロアルキル;ヒドロキシ置換C1 - C4 アルキル; C1 - C4 アルコキシ;ヒドロキシ置換C1 - C4 アルコキシ;C1 - C4 アルキルアミノ;C1 - C4 アルキルチオ;およびそれらの組み合わせから選択される少なくとも1つの置換基と結合している、
前記5員もしくは6員の非置換もしくは置換複素環式芳香環である。
5-[5-(2-フリル)-1-メチルピラゾール-3-イル]カルボキサミド-2-メトキシ安息香酸 N-(3-アミノプロピル)アミド (L1)
1. A.Cecilia, A.Roque, C.R. Lowe, M.A. Taipa: Antibodies and Genetically Engineered Related Molecules: Production and Purification, Biotechnol. Prog. 2004, 20, 639-654
2. K.L.Carson: Flexibility-the guiding principle for antibody manufacturing, Nature Biotechnology, 2005, 23, 1054-1058; S.Hober, K.Nord, M. Linhult: Protein A chromatography for antibody purification, J. Chromatogr. B. 2007, 848, 40-47
3. T.Arakawa, Y.Kita, H.Sato, D. Ejima, Protein Expression and Purification. 2009, 63, 158-163
4. S. Ghose, B. Hubbard, S.M. Cramer, Journal of Chromatography A, 2006, 1122, 144-152。
材料および方法
特に指示のない限り、すべての化学物質および溶媒は、実施例2を除いて、分析グレードとした。実施例2に使用された試薬は、粒子の必要条件および入手しやすさに応じて、調製用から分析用のグレードとした。
Graffinity社は、金チップ上に固定化された数千個の低分子を含有する高密度化合物マイクロアレイを開発した。このアレイは、高密度ピンツールスポッティングと組み合わせてマレイミド-チオールカップリング反応によって構築される。構築のために、アレイあたり最大9,216個のセンサーフィールドの境界を画定するため、フォトリソグラフィー法でガラスプレートを微小構築する。その後に適用される金コーティングは、SPR効果に基礎を与え、2つの異なるチオールの2成分混合の自己組織化単分子層(SAM)の形成を可能にする。一方のチオールは、反応性マレイミド部分を示し、チオール標識アレイ化合物はピンツールスポッティング時に、これに対してカップリングすることができる。得られたマイクロアレイは、9,216個のセンサーフィールドを有し、それぞれが品質管理された規定のアレイ化合物の多重コピーを含有する。
プラットフォームは、タンパク質、抗体およびその断片を110,000個の小分子のGraffinity固定化化合物ライブラリーに対して、高速大量にスクリーニングすることを可能にした。それぞれの標的に関して、ライブラリー全体に対して標的をスクリーニングする前に、SPRスクリーニング条件を個別に最適化した。そのように最適化されたスクリーニングパラメーターの中には、a)適当な界面活性剤を含むスクリーニングバッファーの組成、b)抗体もしくはタンパク質標的の溶液中の濃度、ならびにc)チップ表面上に固定化されたリガンドの表面密度、があった。Neumannら(1)は、スクリーニングされた標的、ならびに適用された対応するスクリーニング条件をまとめている。全部で4つの異なる全長抗体をスクリーニングして比較した。それに加えて、2つの抗体のFcおよびFabフラグメントが、タンパク質分解によって得られ、同様にアレイスクリーニングに供された。抗体特異的リガンドを同定するために、一連のスクリーニングには、抗体を含まないCHO細胞株の宿主細胞タンパク質(HCP)も対照として含めた。
基本手順A:5-アリールカルボキサミド-2-メトキシ安息香酸 N-(3-アミノプロピル)アミド(L1, L2, L3, L6, L8, L7, L15, L16, L5, L11, L20, L27, L25, L4, L26, L31, L32, L33, L34, L35, L36, L42, L44, L45, L46, L47, L48, L51, L56, L57, L63)
N-Fmoc-5-アミノ-2-メトキシ安息香酸(0.2-0.5 mmol)およびHOAt(カルボン酸に対して1当量)をDMF、NMP、DMF/DMSOまたはNMP/DMSO混合物(1-3 mL)中に溶解し、DIC(カルボン酸に対して1当量)で処理した。2-5分間撹拌後、その混合物を、トリチルポリスチレン樹脂もしくは2-クロロトリチルポリスチレン樹脂と結合した0.1-0.15 mmolの1,3-ジアミノプロパンに添加した。混合物は数時間または一晩振盪した。次に、樹脂を洗浄し(DMFもしくはDMF、ジクロロメタンもしくはDMF、メタノール、ジクロロメタン、各溶媒数回)、DMF中25%ピペリジン(1-5 mL)で15-30分間処理した。その後、樹脂を完全に洗浄し(DMF、ジクロロメタンもしくはDMF、メタノール、ジクロロメタン、各溶媒数回)、窒素気流下または高真空で風乾した。
5-(イミダゾ[1,2-a]ピリミジン-2-イルカルボキサミド)-2-メトキシ安息香酸 (3-アミノ-1-プロピル)アミド (L63)
0.1 mmolの1,3-ジアミノプロパン-トリチル-ポリスチレン樹脂に、N-Fmoc-5-アミノ-2-メトキシ安息香酸および5-ブロモピリジン-3-カルボン酸を、基本手順Aにしたがってカップリングさせた。その結果得られた、ブロモピリジンカルボン酸アミドの結合した樹脂を完全に乾燥させ、ガラス製バイアルに移した。炭酸セシウムもしくは炭酸カリウム(0.3 mmol)、およびそれぞれのボロン酸(1 mmol)を添加後、無水DMF(1 mL)を添加し、混合物をアルゴンで十分に洗い流した。その後、テトラキス-トリフェニルホスフィンパラジウム(0)(10μmol)を添加し、その混合物を再びアルゴンで洗い流して、バイアルをしっかりと密閉した。混合物を100℃に加熱し、一晩振盪した。その後、樹脂を完全に洗浄し(DMF、ジクロロメタン、各溶媒数回)、小量のサンプルを切断した(条件、下記を参照されたい)。LCMSが不完全な変換を示した場合、カップリングステップを繰り返すか、またはもっと高い温度で実施した。そうでなければ、樹脂をジクロロメタン-TFA-トリエチルシラン85:10:5で処理し(2回切断)、次に樹脂をジクロロメタンですすいだ。蒸発乾固した後、残渣を調製用逆相HPLCで精製した。
それぞれの(N-Fmoc保護)アミノアリールカルボン酸(0.2-0.5 mmol)およびHOAt(カルボン酸に対して1当量)をDMF、NMP、DMF/DMSO、またはNMP/DMSO混合物(1-3 mL)に溶解し、DIC(カルボン酸に対して1当量)で処理した。2-5分間撹拌した後、混合物を、トリチル-ポリスチレン樹脂または2-クロロトリチルポリスチレン樹脂に結合した0.1-0.15 mmol 1,3-ジアミノプロパンに添加した。混合物を数時間もしくは一晩振盪した。次に、樹脂を洗浄し(DMFもしくはDMF、ジクロロメタンもしくはDMF、メタノール、ジクロロメタン、各溶媒数回)、DMF中25%ピペリジン(1-5 mL)で15-30分間処理した。その後、樹脂を完全に洗浄し(DMF、ジクロロメタンもしくはDMF、メタノール、ジクロロメタン、各溶媒数回)、窒素気流もしくは高真空で風乾した。
1,3-ジアミノプロパンをあらかじめ結合したプレロード型トリチルポリスチレン樹脂を、DCMおよびNMP中であらかじめ膨潤した。Fmoc-8-アミノ-3,6-ジオキサオクタン酸(200μmol)およびHATU(200μmol)をNMP(1.5 mL)に溶解し、DIPEA(400μmol)で2分間処理した後、その溶液を樹脂に添加し、混合物を30分から数時間撹拌した。樹脂をDMF、またはDMF、メタノール、およびジクロロメタンで洗浄した後、ピペリジン(DMF中25%、約2 mL)を添加し、樹脂を少なくとも20分間撹拌した。その後、樹脂をDMF、メタノール、およびジクロロメタンで完全に洗浄し(各3回)、このカップリング/脱保護手順をもう一回繰り返した。上記のHATUカップリングプロトコールを用いて、Fmoc-5-アミノ-2-メトキシ安息香酸(200μmol)を樹脂にカップリングさせた後、上記のようにピペリジンで脱保護した。樹脂を風乾した後、追加の合成ステップを行った。
1,3-ジアミノプロパン(150μmol)をあらかじめ結合したプレロード型の乾燥トリチルポリスチレン樹脂を、ジクロロメタン(1.5 mL)中で、塩化イソフタロイル(1 mmol)およびDIPEA(2 mmol)により3分間処理した。ただちに樹脂をジクロロメタンまたはNMPで洗浄した(2もしくは3回)。その後、それぞれの芳香族アミン(0.3 mmol)およびDIPEA(0.3 mmol)をNMP(1.5 mL)中に溶解して加え、混合物を1時間撹拌した後、DMF、メタノール、およびジクロロメタンで洗浄した(各3回)。ジクロロメタンに溶解したトリフルオロ酢酸(10%)およびトリエチルシラン(5%)で2回処理して、標的化合物を担体から切断した後、樹脂をジクロロメタンで完全に洗浄した。化合物の溶解性がかなり低いため、場合によっては、切断もしくは洗浄溶液にメタノールを加える必要があった。溶媒を蒸発させた後、粗生成物を逆相HPLCで精製した。
実験
乾燥したリガンドを、重量分析に基づいて約100 mMの濃度でDMSO中に再溶解した。保存溶液の正確な濃度は、o-フタルジアルデヒドアッセイで測定した(2)。色素-リガンド分子は、340 nmでの吸光度測定によって定量した。測定値は、1-(3-アミノプロピル)イミダゾールを用いて検量した。
次のクロマトグラフィーおよびバッチ吸着実験のために、実施例2から得られたリガンドをNHS-活性化セファロース 4 FF上に固定化した。リガンド上のアミノプロピルリンカーのアミノ基と、あらかじめ活性化された樹脂のNHS-活性化カルボキシル基との間でアミド結合を形成することによって、カップリングを達成した。
実験
マイクロタイタープレートクロマトグラフィーによって、充填された状態で樹脂を評価した。各カラムに向けて、約30μLの樹脂を384ウェルフィルタープレートに移し、適当なトップフリットでシールした。組換えプロテインA セファロース FFおよびマブゾーベントA2P HFによるカラムを対照として含めた。
いくつかの抗体の結合および溶出を示した。その中には、3つのヒト化された治療用抗体ベバシズマブ、トシリズマブ、およびパリビズマブ、ならびにヒト血清から分離されたヒトpoly-IgG(h-poly-IgG)混合物があった。一部の例では、精製されたベバシズマブFabおよびFcフラグメント、またはウサギIgG(h-poly-IgG、血清から分離)を追加的な供給材料として使用した。リガンドの抗体に対する選択性は、宿主細胞タンパク質の結合作用を調べることによって判定した。比較のために、市販の樹脂、組換えプロテインA セファロース FF (rProtein A)、マブゾーベントA2P (A2P)、およびMEPハイパーセル(Hyper)に関する結果を含めた。
実験
実験は抗体としてベバシズマブを用いて行った。精製抗体に関するラングミュア(Langmuir)等温式のパラメーターは、96ウェルマイクロタイタープレートでのバッチ吸着実験によって決定された。各ウェル内で、吸着剤スラリー(50% v/v)10μLを100μLのタンパク質溶液と混合した。初濃度はリン酸緩衝食塩水(0.15 M NaCl、20 mMリン酸バッファー、pH 7.3; PBS)中で0.05から5 mg/mLまでさまざまとした。反応は25℃にて少なくとも3時間、激しく撹拌して行った。その後、Bradfordアッセイにより上清中の抗体濃度を測定した。
実施例3の固定化リガンドのサブセットの特徴を、ベバシズマブに対する親和性および最大容量について明らかにした。さらに、L1については結合に必要な時間尺度を決定した。市販の樹脂、組換えプロテインA セファロース FF (組換えプロテインA) およびマブゾーベントA2P (A2P)を比較のために含めた。
実験
精製ベバシズマブを用いたカラムクロマトグラフィーによって動的結合容量を測定した。長さ25 mm、内径3 mmの分析用カラムに樹脂を充填した。リン酸緩衝食塩水(150 mM NaCl、20 mMリン酸バッファー、pH 7.3)中1 mg/mLの抗体を一定の流速でカラムに供給し、溶出液の抗体濃度を280 nmの吸光度によりオンラインでモニターした。溶出液濃度が供給濃度の少なくとも10%に達するまで、抗体をロードした。動的結合容量は、空のカラム滞留時間が3分に相当する、50 cm/hの流速で測定した。50 cm/hの流速で、抗体が完全に通り抜けるまでロードすることによって、平衡容量も測定した。pH 3.0のクエン酸ナトリウム、つづいてpH 2.5のグリシン塩酸塩で洗浄することによって、結合した抗体をカラムから取り除いた。
流速の関数としてのベバシズマブの動的(結合)容量を、L1(実施例3より)および組換えプロテイン A セファロース 4 FF(組換えプロテイン A)について測定した。
実施例2から得られたリガンドL1のアルカリ安定性を8日間にわたって調べた。L1は25℃にて、0.1 Mまたは0.5 M水酸化ナトリウムで処理した。加水分解をLC-MS分析でモニターした。
実験
実施例3と同様のマイクロタイタープレートクロマトグラフィー、または通常のカラムクロマトグラフィーのいずれかによって、細胞培養上清からの抗体精製のための樹脂の適合性を、充填された状態で評価した。いずれの場合も、宿主細胞タンパク質に0.05 mg/mLの濃度で添加したベバシズマブを供給材料として使用した。それに加えて、宿主細胞タンパク質(マイクロタイタープレートおよびカラムクロマトグラフィー)および精製抗体(マイクロタイタープレートクロマトグラフィーのみ)だけを用いたクロマトグラフィー分析を実行した。マイクロタイタープレートクロマトグラフィー用には、分析ごとに25カラム容を注入した。カラムクロマトグラフィー用には、100カラム容を注入した。カラムは注入の前後にPBSで平衡化し、洗浄した。結合したタンパク質は、pH 3.0のクエン酸ナトリウムで溶出した。供給材料およびカラム溶出液中のタンパク質濃度は、Bradfordアッセイまたは280 nmのUV吸収で分析した。
抗体は、実施例3の樹脂L1によるにクロマトグラフィーによって、細胞培養上清から精製した。比較のために、市販の樹脂、組換えプロテイン A セファロース 4 FF(組換えプロテイン A)およびマブゾーベントA2P(A2P)によるクロマトグラフィーも含めた。マイクロタイタープレートクロマトグラフィーについては、同一条件下で3つのクロマトグラフィー分析を、それぞれの樹脂上で、抗体、宿主細胞タンパク質、または後者の混合物を注入して行った。カラムクロマトグラフィーについては、分析は、宿主細胞タンパク質中に抗体を添加したもの、または宿主細胞タンパク質だけを用いて、2回のみ行った。
1. T. Neumann, HD Junker, K. Schmidt, R. Sekul, SPR Based Fragment Screening:
Advantages and Applications, Current Topics in Medicinal Chemistry 2007; 7: 1630-1642
2. Roth M. Fluorescence reaction for amino acids. Anal Chem 197; 43(7):880-2.
3. Rousseaux J, Rousseaux-Prevost R, Bazin H. Optimal conditions for the preparation of Fab and F(ab')2 fragments from monoclonal IgG of different rat IgG subclasses. J. Immunol. Methods 1983; 64(1-2):141-146.
4. Chase HA. Prediction of the performance of preparative affinity chromatography. J Chromatogr 1984; 297:179-202.
5. Coffman JL, Kramarczyk JF, Kelley BD. High-throughput screening of chromatographic separations: I. Method development and column modeling. Biotechnology and Bioengineering 2008; 100(4):605-618.
Claims (15)
- 抗体もしくは抗体フラグメントをアフィニティ精製するための、支持体材料および支持体材料に共有結合した少なくとも1つのリガンドを含んでなるリガンド置換されたマトリックスの使用、
ここで該リガンドは式(I)、
Lはリガンドが結合される支持体材料上の連結ポイントである;
Spはスペーサー基である;
vは0もしくは1である;
Amはアミド基-NR1-C(O)-であり、NR1がAr1に結合し-C(O)-がAr2に結合しているか、または-C(O)-がAr1に結合していてNR1がAr2に結合しているかのいずれかであり;かつ、
R1は水素もしくはC1-C4アルキルであり、好ましくは水素もしくはメチルであり;より好ましくは水素である;
Ar1は、2価の、5員もしくは6員の置換もしくは非置換芳香環である;
Ar2は、5員もしくは6員複素環式芳香環であって、それが、
(a) 単結合を介して、さらなる5員もしくは6員芳香環に結合している;または
(b) 多環式環系の一部として、さらなる5員もしくは6員芳香環と縮合している;または
(c) C1-C4アルキル;C2-C4アルケニル;C2-C4アルキニル;ハロゲン;C1- C4ハロアルキル;ヒドロキシ置換C1-C4 アルキル;C1-C4アルコキシ;ヒドロキシ置換C1-C4アルコキシ;C1-C4アルキルアミノ;C1-C4アルキルチオ;およびそれらの組み合わせから選択される少なくとも1つの置換基に結合している、
前記5員もしくは6員複素環式芳香環である]
で表される前記使用。 - Ar1がフェニレン、好ましくはメトキシ置換フェニレンである、請求項1に記載の使用。
- C=OおよびNH基が互いにメタ位でAr1に結合している、請求項1または2に記載の使用。
- Ar2の5員もしくは6員複素環式芳香環が、環員ヘテロ原子、好ましくは窒素もしくは酸素原子に隣接する環員炭素原子を介してC=O基と結合している、請求項1〜3のいずれか1つに記載の使用。
- Ar2の5員もしくは6員複素環式芳香環が、2個以上の窒素原子、または1個以上の窒素原子および1つの酸素原子を含有する、請求項1〜4のいずれか1つに記載の使用。
- Ar2の5員もしくは6員複素環式芳香環が、N-メチル置換ピラゾール、ピリジン、イソオキサゾール、またはオキサジアゾ-ルである、請求項1〜5のいずれか1つに記載の使用。
- 支持体材料が、炭水化物または架橋炭水化物、好ましくはアガロース、セルロース、デキストラン、デンプン、アルギン酸塩およびカラギーナン、セファロース(Sepharose)、セファデックス(Sephadex);合成ポリマー、好ましくはポリスチレン、スチレン-ジビニルベンゼンコポリマー、ポリアクリレート、PEGポリアクリレートコポリマー、ポリメタクリレート、ポリビニルアルコール、ポリアミド、およびパーフルオロカーボン;無機材料、好ましくはガラス、シリカ、および金属酸化物;ならびに複合材料から選択される材料を含む、請求項1〜6のいずれか1つに記載の使用。
- タンパク質が抗体、好ましくはIgG型抗体、またはFc融合タンパク質である、請求項1〜7のいずれか1つに記載の使用。
- リガンド置換されたマトリックスのリガンドと、抗体もしくは融合タンパク質の、Fcフラグメントまたはドメインとの結合によって精製が達成される、請求項8に記載の使用。
- Fcフラグメントもしくはドメイン、または抗体が、IgG抗体クラスに属し、より好ましくはヒトIgGに属し、またはヒト起源のポリクローナルもしくはモノクローナルIgG、特にIgG1、IgG2およびIgG4に属する、請求項8または9に記載の使用。
- 請求項1〜7のいずれか1つに記載のリガンド置換されたマトリックス。
- 請求項1〜7のいずれか1つに記載の式(I)のリガンドを支持体材料に結合させる、請求項11に記載のリガンド置換マトリックスを合成する方法。
- タンパク質のアフィニティ精製、好ましくはアフィニティクロマトグラフィーのための方法であって、精製されるべきタンパク質を、請求項1〜7のいずれか1つに記載のリガンド置換マトリックスと接触させる、前記方法。
- タンパク質が抗体もしくはFc融合タンパク質であって、リガンドが抗体もしくはFc融合タンパク質のFc領域に結合する、請求項13に記載の方法。
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CN113549038B (zh) * | 2021-07-07 | 2023-05-23 | 常州大学 | 多取代异苯并呋喃化合物及其用途 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1997041856A1 (en) * | 1996-05-08 | 1997-11-13 | Massachusetts Institute Of Technology | ORGANOMETALLIC LIGANDS FOR THE LOCALIZATION AND QUANTIFICATION OF AMYLOID IN VIVO AND $i(IN VITRO) |
US6479531B1 (en) * | 1998-11-09 | 2002-11-12 | James Black Foundation Limited | Gastrin and cholecystokinin receptor ligands |
US20050065066A1 (en) * | 2002-12-20 | 2005-03-24 | Kaarsholm Niels Christian | Stabilised insulin compositions |
WO2009138714A1 (en) * | 2008-05-16 | 2009-11-19 | Avecia Biologics Limited | Purification process for antibody fragments using derivatized triazines as affinity ligands |
WO2009141384A2 (en) * | 2008-05-21 | 2009-11-26 | Novo Nordisk A/S | Process for the purification of factor vii polypeptides using affinity resins comprising specific ligands |
WO2010084425A1 (en) * | 2009-01-26 | 2010-07-29 | Domain Therapeutics | New adenosine receptor ligands and uses thereof |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1997041856A1 (en) * | 1996-05-08 | 1997-11-13 | Massachusetts Institute Of Technology | ORGANOMETALLIC LIGANDS FOR THE LOCALIZATION AND QUANTIFICATION OF AMYLOID IN VIVO AND $i(IN VITRO) |
US6479531B1 (en) * | 1998-11-09 | 2002-11-12 | James Black Foundation Limited | Gastrin and cholecystokinin receptor ligands |
US20050065066A1 (en) * | 2002-12-20 | 2005-03-24 | Kaarsholm Niels Christian | Stabilised insulin compositions |
WO2009138714A1 (en) * | 2008-05-16 | 2009-11-19 | Avecia Biologics Limited | Purification process for antibody fragments using derivatized triazines as affinity ligands |
WO2009141384A2 (en) * | 2008-05-21 | 2009-11-26 | Novo Nordisk A/S | Process for the purification of factor vii polypeptides using affinity resins comprising specific ligands |
WO2010084425A1 (en) * | 2009-01-26 | 2010-07-29 | Domain Therapeutics | New adenosine receptor ligands and uses thereof |
Non-Patent Citations (1)
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JPN6015040786; DUFRESNE M. et al.: Physiol Rev Vol.86, 2006, P.805-847 * |
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