KR20150107766A - 펩타이드 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 시험관 내에서 MHC 분자와 결합할 수 있고 항원 처리 없이(예를 들면 아피토프) T 세포에 제시될 수 있는 펩타이드를 제공하는 것으로 이는 프로테오리피드 단백질(PLP) 펩타이드의 전부 또는 일부를 포함하는 것이다: PLP 36-61: HEALTGTEKLIETYFSKNYQDYEYLI (서열번호: 1); PLP 179-206: TWTTCQSIAFPSKTSASIGSLCADARMY (서열번호: 2); PLP 207-234: GVLPWNAFPGKVCGSNLLSICKTAEFQM (서열번호: 3). 또한 본 발명은 상기 펩타이드의 의약 조성물로서의 용도와 상기 펩타이드를 사용하여 질환을 치료 및/또는 예방하는 방법을 제공한다.
Description
본 발명은 프로테오리피드 단백질(PLP)로부터 유래된 펩타이드에 관한 것이다. 더욱 상세하게는 본 발명은 MHC 분자와 결합할 수 있고 시험관 내에서 항원 처리 없이 T 세포에 제시될 수 있는 PLP의 친수성 영역의 한 부분으로부터 유래된 펩타이드에 관한 것이다. 본 발명은 질병의 치료 및/또는 예방을 위한 이러한 펩타이드의 용도에 관한 것이다.
다발성 경화증(MS)은 신경 축색의 탈수초(demyelination) 특징을 지니는 중추신경계에 영향을 주는 만성 퇴화성 질환이다. MS는 다양한 신체적 또는 정신적 증상의 원인이 되고 통상 신체적 뿐만 아니라 인지 장애로 진전된다. 질병은 통상 젊은 시기(20-40세)에 발병하고 여성에게 더 흔하게 발병하며 전 세계에 백만 명 이상의 환자를 지니고 있다.
MS의 질병 경과는 유동적이며 일시적으로 정지할 수 있으나 기간 경과에 따라 점차적으로 진전되어진다. MS의 몇 가지 서브타입이 질병의 진전 형태에 따라 구분되어진다.
MS 질환자의 경우 감도 또는 감촉과 같은 감각의 손실, 따끔거림(pricking)또는 지각 감퇴 및 지각 이상과 같은 무감각, 근육 약화, 간헐성 경련, 근육 경련, 또는 움직임의 곤란과 같은 감각의 변화 또는 손실에 기인한 신경학적 증상과 신호로 고통받을 수 있고, 운동 실조증에 따른 조화와 균형의 곤란, 장애로 인한 발성의 곤란 또는 연하 장애로 인한 삼킴의 곤란, 안진 안내섬광 또는 복시를 포함하는 시신경염으로 인한 시각 장애, 피로, 급성 또는 만성 통증, 방광과 장의 곤란에 의한 고통을 겪게 된다.
MS는 면역 관련 장애로 최근 인식되고 있으며 체내의 면역 시스템이 마이엘린을 공격하여 손상시키는 것이다.
MS에 대한 치료법은 아직 알려지지 않았다. 몇 개의 최근 치료법이 공격 후 증상 보존(재발)에 효과적인 것으로 알려지고 있으며 또한 새로운 공격(재발)의 빈도를 예방하거나 감소시키고 장애의 정도를 예방하거나 감소시키는 것으로 알려지고 있다. 그러나 다수의 현재 MS 치료법은 부작용이 발생하고 내성이 있다. 따라서 MS의 증상을 경감시키거나 감소시킬 수 있는 MS의 효과적 치료법에 대한 요구가 존재하고 있다.
본 발명자들은 고정된 항원 제시 세포에 의해 T 세포로 제시될 수 있는 프로테오리피드 단백질(PLP)로부터 유래된 다수의 펩타이드를 확인하였다. 이러한 펩타이드는 다발성 경화증과 같은 탈수초 질환의 예방 및/또는 처리에 유용한 것이다.
따라서 첫 번째 측면에서 본 발명은 시험관 내에서 MHC 분자와 결합할 수 있고 항원 처리 없이(예를 들면 아피토프) T 세포에 제시될 수 있는 펩타이드를 제공하는 것으로 이는 프로테오리피드 단백질(PLP) 펩타이드의 전부 또는 일부를 포함하는 것이다:
PLP 36-61: HEALTGTEKLIETYFSKNYQDYEYLI (서열번호: 1)
PLP 179-206: TWTTCQSIAFPSKTSASIGSLCADARMY (서열번호: 2)
PLP 207-234: GVLPWNAFPGKVCGSNLLSICKTAEFQM (서열번호: 3).
상기 펩타이드는 하기 영역 부분을 포함한다:
PLP 39-57: LTGTEKLIETYFSKNYQDY (서열번호: 4)
PLP 180-198: WTTCQSIAFPSKTSASIGS (서열번호: 5)
PLP 208-222: VLPWNAFPGKVCGSN (서열번호: 6)
상기 펩타이드는 하기 PLP 펩타이드로부터 선택된 것이다:
PLP 39-53: LTGTEKLIETYFSKN (서열번호: 7)
PLP 42-56: TEKLIETYFSKNYQD (서열번호: 8)
PLP 43-57: EKLIETYFSKNYQDY (서열번호: 9)
PLP 180-194: WTTCQSIAFPSKTSA (서열번호: 10)
PLP 181-195: TTCQSIAFPSKTSAS (서열번호: 11)
PLP 182-196: TCQSIAFPSKTSASI (서열번호: 12)
PLP183-197: CQSIAFPSKTSASIG (서열번호: 13)
PLP 184-198: QSIAFPSKTSASIGS (서열번호: 14)
PLP 208-222: VLPWNAFPGKVCGSN (서열번호: 15)
PLP 36-61 : HEALTGTEKLIETYFSKNYQDYEYLI (서열번호: 1)
PLP 179-206: TWTTCQSIAFPSKTSASIGSLCADARMY (서열번호: 2) 및
PLP 207-234: GVLPWNAFPGKVCGSNLLSICKTAEFQM (서열번호: 3).
두 번째 측면에서 본 발명은 발명의 첫 번째 측면에 따른 펩타이드의 탈수초(demyelinating) 질환의 치료 및/또는 예방의 용도를 제공하는 것이다.
세 번째 측면에서 본 발명은 발명의 첫 번째 측면에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드를 포함하는 의약 조성물을 제공하는 것이다.
네 번째 측면에서 본 발명은 발명의 첫 번째 측면에 따른 펩타이드를 개체(subject)에게 투여하는 단계를 포함하는 이를 요구하는 개체 내에서 탈수초 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 방법을 제공하는 것이다.
다섯 번째 측면에서 본 발명은 탈수초 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 용도의 의약품을 제조하는 것에 의한 발명의 첫 번째 측면에 따른 펩타이드의 용도에 관한 것이다.
또한 본 발명의 두 번째, 네 번째 및 다섯 번째 측면에 있어서 상기 질환은 다발성 경화증이다.
도 1 - 도 1은 시험관 내 및 생체 내에서 응답하는 3개의 PLP 펩타이드 영역에 관한 것으로 응답은 DR2 결합 예측과 상호 관련되어 있다. A는 컴퓨터 계산(IEDB 및 NetMHCII 방법)에 의해 HLA-DRB1*1501에 PLP 펩타이드의 결합 예측의 전반적 아웃라인을 나타낸 것으로 이는 마우스 내에 증식 응답을 유도할 수 있는 펩타이드의 능력을 나타낸다. B와 C는 EAE(두 개의 개체 실험)를 유도하는 4개의 긴 펩타이드의 능력을 나타낸 것이다.
도 2는 HEAL-26 내에서 아피토프롤 확인한 것이다.
도 3은 TWTT-28 내에서 아피토프롤 확인한 것이다.
도 4는 GVLP-28 내에서 아피토프롤 확인한 것이다.
도 5는 내성화(Tolerisation) 프로토콜이다.
도 6은 HEAL-26 또는 POP-4로 전처리된 마우스로부터 LNC의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 HEAL-26 또는 POP-4 아피토프로 전처리된 마우스로부터 LNC의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 7은 HEAL-26 또는 POP-4로 전처리된 마우스로부터 SPL의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 HEAL-26 또는 POP-4 아피토프로 전처리된 마우스로부터 SPL의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 8은 TWTT-28로 전처리된 마우스로부터 LNC의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 TWTT-28 아피토프로 전처리된 마우스로부터 LNC의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 9는 TWTT-28로 전처리된 마우스로부터 SPL의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 TWTT-28 아피토프로 전처리된 마우스로부터 SPL의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 10은 POP-15로 전처리된 마우스로부터 LNC의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 POP-15 아피토프로 전처리된 마우스로부터 LNC의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 11은 POP-15로 전처리된 마우스로부터 SPL의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 POP-15 아피토프로 전처리된 마우스로부터 SPL의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 12는 POP-22로 전처리된 마우스로부터 LNC의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 POP-22 아피토프로 전처리된 마우스로부터 LNC의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 13은 POP-22로 전처리된 마우스로부터 SPL의 증식을 나타낸 것이다. A는 POP-22 아피토프로 전처리된 마우스로부터 SPL의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 14는 POP-22 또는 GVLP-28로 전처리된 마우스로부터 LNC의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 POP-22(좌측 패널) 또는 GVLP-28(우측 패널) 아피토프로 전처리된 마우스로부터 LNC의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 15는 POP-22 또는 GVLP-28로 전처리된 마우스로부터 SPL의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 POP-22 또는 GVLP-28 아피토프로 전처리된 마우스로부터 SPL의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 6 내지 도 15 각각에서 B는 티미딘 통합 자극 인덱스를 나타낸다. C는 배양 상등액 내에서 분비된 사이토카인의 함량을 나타낸다. B와 C에 있어서 용량의 각각의 점은 개별 마우스를 나타내고 바(bar)는 메디안 평균을 나타내며 p는 Mann- Whitney 테스트를 통하여 계산된 것이다. 오직 낮은 P 수치만을 나타내었고 p 수치가 0.05보다 작은 것은 중요한 것으로 간주된다.
도 2는 HEAL-26 내에서 아피토프롤 확인한 것이다.
도 3은 TWTT-28 내에서 아피토프롤 확인한 것이다.
도 4는 GVLP-28 내에서 아피토프롤 확인한 것이다.
도 5는 내성화(Tolerisation) 프로토콜이다.
도 6은 HEAL-26 또는 POP-4로 전처리된 마우스로부터 LNC의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 HEAL-26 또는 POP-4 아피토프로 전처리된 마우스로부터 LNC의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 7은 HEAL-26 또는 POP-4로 전처리된 마우스로부터 SPL의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 HEAL-26 또는 POP-4 아피토프로 전처리된 마우스로부터 SPL의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 8은 TWTT-28로 전처리된 마우스로부터 LNC의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 TWTT-28 아피토프로 전처리된 마우스로부터 LNC의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 9는 TWTT-28로 전처리된 마우스로부터 SPL의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 TWTT-28 아피토프로 전처리된 마우스로부터 SPL의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 10은 POP-15로 전처리된 마우스로부터 LNC의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 POP-15 아피토프로 전처리된 마우스로부터 LNC의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 11은 POP-15로 전처리된 마우스로부터 SPL의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 POP-15 아피토프로 전처리된 마우스로부터 SPL의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 12는 POP-22로 전처리된 마우스로부터 LNC의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 POP-22 아피토프로 전처리된 마우스로부터 LNC의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 13은 POP-22로 전처리된 마우스로부터 SPL의 증식을 나타낸 것이다. A는 POP-22 아피토프로 전처리된 마우스로부터 SPL의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 14는 POP-22 또는 GVLP-28로 전처리된 마우스로부터 LNC의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 POP-22(좌측 패널) 또는 GVLP-28(우측 패널) 아피토프로 전처리된 마우스로부터 LNC의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 15는 POP-22 또는 GVLP-28로 전처리된 마우스로부터 SPL의 증식 및 사이토카인 생성을 나타낸 것이다. A는 POP-22 또는 GVLP-28 아피토프로 전처리된 마우스로부터 SPL의 티미딘 통합의 평균의 +/-표준오차(SEM)를 나타낸 것이다.
도 6 내지 도 15 각각에서 B는 티미딘 통합 자극 인덱스를 나타낸다. C는 배양 상등액 내에서 분비된 사이토카인의 함량을 나타낸다. B와 C에 있어서 용량의 각각의 점은 개별 마우스를 나타내고 바(bar)는 메디안 평균을 나타내며 p는 Mann- Whitney 테스트를 통하여 계산된 것이다. 오직 낮은 P 수치만을 나타내었고 p 수치가 0.05보다 작은 것은 중요한 것으로 간주된다.
첫 번째 측면에서 본 발명은 펩타이드에 관한 것이다.
펩타이드
'펩타이드'라는 용어는 일반적인 의미에서 인접한 아미노산 사이의 알파-아미노 및 카르복실 그룹이 펩타이드 본드에 의해 각자가 연결되어 있는 일련의 L-아미노산과 같은 잔기를 의미한다. 이 용어는 변형된 펩타이드와 합성 펩타이드 아날로그를 포함한다.
본 발명의 펩타이드는 시험관 내에서 주조직적합성 복합체(MHC) 클래스 Ⅰ 또는 클래스 Ⅱ 분자와 결합할 수 있는 길이를 지닌 것으로 항원 처리 없이 T 세포에 의해 제시될 수 있는 것이다. 다시 말하면 펩타이드란 MHC 분자의 펩타이드 결합 홈에 의해 직접적으로 결합될 수 있는 것으로 하나 또는 모든 말단에 어떠한 트리밍(trimming)도 필요하지 않는 것이다.
MHC 클래스 Ⅰ 분자에 결합하는 펩타이드는 일반적으로 7∼13의 아미노산 길이 바람직하게는 8∼10의 아미노산 길이를 지닌다. 펩타이드의 결합은 펩타이드의 주 사슬 내 원자와 모든 MHC 클래스 Ⅰ 분자의 펩타이드 결합 홈 내에 불변 위치 사이의 두 개의 말단 접촉에 의해 안정화된다. 아미노산이 결합되는 홈의 말단과 펩타이드의 카르복시 말단 모두에 불변 사이트가 존재한다. 펩타이드 길이의 변형은 펩타이드 골격의 꼬임에 의해 수용될 수 있고 프롤린 또는 글리신 잔기는 원하는 유연성을 부여할 수 있다.
MHC 클래스 Ⅱ 분자에 결합하는 펩타이드는 일반적으로 8∼20의 아미노산 길이 바람직하게는 10∼17의 아미노산 길이를 지닌다. 이러한 펩타이드는 MHC 클래스 Ⅰ 펩타이드-결합 홈과는 달리 양 말단이 개방된 MHC 클래스 Ⅱ 펩타이드-결합 홈을 따라 연장되어 변형(conformation)될 수 있다. 주사슬 원자에 의해 주로 유지되는 펩타이드는 펩타이드-결합 홈 선상의 보존된 잔기와 접촉된다.
본 발명의 펩타이드는 화학적 방법을 이용하여 제조된다(Peptide Chemistry, A practical Textbook. Mikos Bodansky, Springer- Verlag, Berlin.). 예를 들어 펩타이드는 고형상 기술(Roberge JY et al (1995) Science 269: 202-204)에 의해 합성되고, 수지로부터 절단되고, 예비 고성능 액체 크로마토그래피에 의해 정제된다(예를 들어 Creighton (1983) Proteins Structures And Molecular Principles, WH Freeman and Co, New York NY). 자동화 합성은 예를 들어 제조사에 의해 제공된 지침에 따라 ABI 43 1 A Peptide Synthesizer(Perkin Elmer)를 이용하여 달성된다.
또한 펩타이드는 재조합 방법 또는 긴 폴리펩타이드로부터의 절단에 의해 제조된다. 예를 들어 펩타이드는 전체 길이 마이엘린 염기성 단백질로부터의 절단에 의해 수득된다. 펩타이드의 조성은 아미노산 분석 또는 서열분석(예를 들어 Edman 분해 절차)에 의해 확인되었다.
수초 프로테오리피드 단백질(PLP)
수초는 유전체 (전기적으로 절연된) 물질로서 층, 수초(myelin sheath)를 형성하고 통상 뉴런의 축삭돌기를 둘러싸고 있다. 이는 신경 체계의 적합한 기능을 위해 매우 필수적인 것이다. 수초를 형성하는 단백질은 수초 염기성 단백질(MBP), 마이엘린 희소돌기아교세포 당단백질(MOG) 및 프로테오리피드 단백질(PLP)이다.
수초 프로테오리피드 단백질(PLP)은 중추신경계(CNS) 수초에 가장 풍부한 단백질이며 소수성 통합 막 단백질이다.
인간 PLP 서열은 서열번호: 16에 나타내었다.
서열번호: 16
1 glleccarc lvgapfaslv atglcffgva lfcgcgheal tgtekliety fsknyqdyey
60 linvihafqy viygtasfff lygalllaeg fyttgavrqi fgdyktticg kglsatvtgg
120 qkgrgsrgqh qahslervch clgk lghpd kfvgityalt vwllvfacs avpvyiyfnt
180 wttcqsiafp sktsasigsl cadarmygvl pwnafpgkvc gsnllsickt aefqmtfhlf
240 iaafvgaaat Ivslltfmia atynfavlkl mgrgtkf
본 발명의 펩타이드는 PLP 서열의 소수성 영역으로부터 유래된 것이다. 펩타이드는 항원의 단편으로부터 유래된 것이며 상기 항원은 항원 제시 세포에 의해 자연 항원 처리를 야기하는 것이다.
PLP의 소수성 영역은 다음과 같다:
PLP 36-61 : HEALTGTEKLIETYFSKNYQDYEYLI (서열번호: 17)
PLP 88-119: EGFYTTGAVRQIFGDYKTTICGKGLSATVTGG (서열번호: 18)
PLP 104-135: KTTICGKGLSATVTGGQKGRGSRGQHQAHSLE (서열번호: 19)
PLP 119-150: GQKGRGSRGQHQAHSLERVCHCLGKWLGHPDK (서열번호: 20)
PLP 179-206: TWTTCQSIAFPSKTSASIGSLCADARMY (서열번호: 21)
PLP 192-219: TSASIGSLCADARMYGVLPWNAFPGKVC (서열번호: 22)
PLP 207-234: GVLPWNAFPGKVCGSNLLSICKTAEFQM (서열번호: 23)
PLP 260-276: ATYNFAVLKLMGRGTKF (서열번호: 24)
펩타이드는 하기 프로테오리피드 단백질(PLP) 영역의 전부 또는 일부를 포함한다:
PLP 36-61 : HEALTGTEKLIETYFSKNYQDYEYLI (서열번호: 1)
PLP 179-206: TWTTCQSIAFPSKTSASIGSLCADARMY (서열번호: 2)
PLP 207-234: GVLPWNAFPGKVCGSNLLSICKTAEFQM (서열번호: 3).
펩타이드는 상기 영역의 하나로부터 최소한의 에피토프를 포함한다.
펩타이드는 하기 영역의 부분을 포함한다:
PLP 39-57: LTGTEKLIETYFSKNYQDY (서열번호: 4)
PLP 180-198: WTTCQSIAFPSKTSASIGS (서열번호: 5)
PLP 208-222: VLPWNAFPGKVCGSN (서열번호: 6)
펩타이드는 하기 PLP 펩타이드로부터 선택된 것이다:
The peptide may be selected from the following PLP peptides:
PLP 39-53: LTGTEKLIETYFSKN (서열번호: 7)
PLP 42-56: TEKLIETYFSKNYQD (서열번호: 8)
PLP 43-57: EKLIETYFSKNYQDY (서열번호: 9)
PLP 180-194: WTTCQSIAFPSKTSA (서열번호: 10)
PLP 181-195: TTCQSIAFPSKTSAS (서열번호: 11)
PLP 182-196: TCQSIAFPSKTSASI (서열번호: 12)
PLP183-197: CQSIAFPSKTSASIG (서열번호: 13)
PLP 184-198: QSIAFPSKTSASIGS (서열번호: 14)
PLP 208-222: VLPWNAFPGKVCGSN (서열번호: 15)
PLP 36-61 : HEALTGTEKLIETYFSKNYQDYEYLI (서열번호: 1)
PLP 179-206: TWTTCQSIAFPSKTSASIGSLCADARMY (서열번호: 2) 및
PLP 207-234: GVLPWNAFPGKVCGSNLLSICKTAEFQM (서열번호: 3).
펩타이드는 상기 펩타이드의 하나로부터 최소한의 에피토프를 포함한다.
특히 펩타이드는 하기 펩타이드 중 하나로부터의 최소한의 에피토프를 포함하거나 에피토프로 구성되어 있다.
PLP 39-53 : LTGTEKLIETYFSKN (서열번호: 7)
PLP 181-195: TTCQSIAFPSKTSAS (서열번호: 11)
PLP 179-206: TWTTCQSIAFPSKTSASIGSLCADARMY (서열번호: 2)
아피토프(Apitopes)
적응성 면역 반응에 있어서 T 림프구는 단백질 항원 내부 에피토프를 인식할 수 있다. 항원 제시 세포(APC)는 단백질 항원을 포획하고 짧은 펩타이드 단편으로 분해시킨다. 펩타이드는 세포 내부에서 주조직적합성 복합체(MHC) 클래스 Ⅰ 또는 클래스 Ⅱ 분자에 결합되고 세포 표면으로 운반된다. MHC 분자와 함께 세포 표면에서 제시될 때 펩타이드가 T 세포 에티토프인 경우 T 세포(T 세포 수용체)를 통해 인식되는 것이다.
T 세포 에티토프는 자가 또는 외래에 항원에 대해 적응성 면역 반응의 중심 역할을 한다. 알러지 자가면역질환 이식거부를 포함하는 과민감 질환에서의 T 세포 에티토프의 중심 역할은 실험 모델의 사용을 통해 표시되어 왔다. 애쥬번트와 결합된 T 세포 에티토프의 구조에 기반을 둔 합성 펩타이드의 주입에 의해 염증 또는 알러지 질환을 유발할 수 있다.
이와는 대조적으로 용해된 형태의 펩타이드 에피토프의 투여에 의해 특정 펩타이드 에피토프에 대한 면역학적 내성을 유발시키는 것이 가능하다고 여겨진다. 용해성 펩타이드 항원의 투여는 실험적 자가면역성 뇌척수염증(EAE - 다발성 경화증(MS)의 모델) 질환을 저해하는 효과적인 수단으로 알려져 있다(Metzler and Wraith (1993) Int. Immunol. 5:1159-1165; Liu and Wraith (1995) Int. Immunol. 7:1255-1263; Anderton and Wraith (1998) Eur. J. Immunol. 28:1251-1261). 또한 관절염, 당뇨병 및 포도막망막염의 실험적 모델(상기 Anderton and Wraith (1998)의 고찰)이다. 이는 또한 EAE 내에서 진행되는 질환의 치료 수단으로 알려져 있다(상기 Anderton and Wraith (1998)).
질병을 치료하거나 예방하기 위한 내성(tolerogenic) 펩타이드의 용도는 상당히 주목되어 왔다. 하나의 이유는 어떤 면역내성 에피토프가 같은 조직 내에서 다른 항원을 위해 T 세포 반응을 하향 조절한다는 것이다. 이러한 현상은 '방관자(bystander) 억제'로 알려져 있으며 이는 주어진 항원 내에서 적어도 하나 이상의 에피토프(바람직하게는 모든 에피토프)에 대한 내성을 유도할 수 있다는 것이다. 이는 특정 면역내성 펩타이드를 이용한다면 하나의 주어진 질환에 대한 하나 이상의 항원에 대해 내성을 유도할 수 있다는 것이다(상기 Anderton and Wraith (1998)). 이는 특정 질환 내에서 모든 병리적 항원을 확인할 필요를 없애주는 것이다.
펩타이드는 상대적으로 낮은 가격으로 인해 치료에 유용한 선택일 수 있다. 또한 펩타이드 동족체는 면역 특성의 변형을 통해 생산될 수 있다. 펩타이드는 MHC 또는 TCR에 대한 그들의 상호반응의 변화를 통해 조절할 수 있다.
이러한 접근법의 하나의 가능한 문제는 T 세포 에피토프로 작용하는 모든 펩타이드가 내성을 유도하지는 않는다는 것이다. 수초 염기성 단백질(MBP) 펩타이드 89-101은 면역 후에 면역우세 항원이며 T 세포 작용성을 위한 프라이밍 및 EAE 유도를 위한 모두의 목적으로 매우 효과적인 면역원이다. 그러나 이 펩타이드는 용해성 형태로 투여시 내성을 유도하는 것은 효과적이지 않다(상기 Anderton and Wraith (1998)).
T 세포 에피토프의 능력에 대한 관찰된 서열을 위한 다수의 설명이 제안되어 왔다(상기 Anderton and Wraith (1998)의 고찰). 특히 HMC에 대한 펩타이드의 친화성과 면역 내성간에 상호관계에 대해 제안되어 왔다(상기 Liu and Wraith (1995)). 그러나 이들은 모두 관찰을 통한 일부만을 나타낼 뿐이다. 예를 들면 MBP[89-101]는 상대적으로 높은 친화성으로 I-AS와 결합하나 관용적이지 않다. 따라서 관용을 유도하는 펩타이드를 쉽게 예측하는 것은 어려운 것이다.
본 발명자들은 만약 적당한 크기를 지닌 펩타이드 에피토프가 항원 처리 없이 미성숙된 APC에 의해 제시된다면 이는 면역학적 내성을 유도할 수 있을 것이라고 설명하고 있다(국제특허 출원번호 PCT/GBOl/03702). 어떤 T 세포 에피토프는 관용적이고 또 다른 에피토프는 내성을 유발하지 않는다는 관찰을 통해 어떤 에피토프는 MHC 분자에 의해 그들이 제시되기 전에 항원 처리를 요한다는 사실에 의해 또한 설명될 수 있는 것이다. 추가적 처리를 요하는 이러한 에피토프는 애쥬번트와 결합하여 주입할 때 질병을 유도하는 능력에 관계없이 용해성 형태로 투여할 때 내성을 유도하지 않는 것이다.
추가적 처리를 요구하지 않는 에피토프는 내성을 유도할 수 있다. 또한 이러한 에피토프를 본 발명자들은 '아피토프(apitope)'(Antigen Processing Independent epiTOPES)라고 칭한다.
항원 처리 독립적 제시 시스템(APIPS)
본 발명의 펩타이드는 시험관 내에서 MHC 분자와 결합할 수 있고 항원 처리 없이 T 세포에 제시될 수 있다.
펩타이드가 '무처리(processing free)' 시스템을 사용하여 항원 처리 없이 MHC 분자에 결합할 수 있는지 여부를 측정하는 것이 가능하다. 이러한 시스템은 T 세포에 MHC 분자를 통해 항원을 제시할 수 있다. 그러나 항원을 처리하는 것은 불가능하다. 따라서 펩타이드는 시험관 내에서 MHC 분자에 결합할 수 있는 능력을 측정할 수 있다. 또한 항원 처리 독립적 제시 시스템(APIPS)을 통해 항원 처리 없이 T 세포에 제시될 수 있다.
APIPS의 실시예로는 다음을 포함한다:
a) 고정된 APC(CD28에 대한 항체 존재 또는 부재);
b) MHC 분자 클래스 I 또는 Ⅱ를 포함한 지질막(CD28에 대한 항체 존재 또는 부재); 및
c) 플레이트-결합 형태의 정제된 천연 또는 재조합 MHC(CD28에 대한 항체 존재 또는 부재).
트렁크화된 펩타이드에 대한 반응을 측정함으로서 T 세포 반응을 조사하기 위한 고정된 APC의 이용은 예를 들면 폴리펩타이드 내 최소 에피토프를 조사하는 연구와 같은 분야에서 잘 알려져 있다(Fairchild et al (1996) Int. Immunol. 8:1035-1043). APC는 예를 들어 포름알데하이드(일반적으로 파라포름알데하이드) 또는 글루타르알데하이드를 이용하여 고정된다.
지질막(평면 막 또는 리포솜임)은 인공 지질을 이용하여 제조하거나 APC 유래의 형질막/미세소체 분획일 수 있다.
이용시 APIPS는 조직 배양 플레이트의 웰에 적용한다. 이후 펩타이드 항원이 첨가되고 APIPS의 MHC 부분에 펩타이드와의 결합은 선별된 T 세포주 또는 클론의 첨가에 의해 검출된다. T 세포주 또는 클론의 활성화는 예를 들어 3H-티미딘 통합 또는 사이토카인 분비를 통해 당분야에 알려진 어떠한 방법으로도 측정할 수 있다.
만약 펩타이드가 APIPS에 의해 T 세포에 제시될 능력을 지닌다면 항원 처리 없이 MHC 분자에 결합될 수 있는 것이며 이는 아피토프이다.
내성(Tolerance)
본 발명의 펩타이드는 프로테오리피드 단백질에 내성을 유도할 수 있는 것이다.
본 명세서 내에 사용되는 '내성(tolerogenic)'이라는 용어는 내성을 유도할 수 있다는 의미이다.
내성은 항원에 반응하지 않는 것이다. 자가 항원에 대한 내성은 면역 체계의 필수적인 특징이고 이것이 소실되면 자가면역 질환이 유발될 수 있다. 적응성 면역 체계는 다양한 막대한 감염성 작용제에 반응할 수 있는 능력을 유지하면서 그 자신의 조직 내에 포함된 자가 항원의 자가면역 공격을 회피해야 한다. 이는 대부분 흉선의 아폽토시스성 세포사멸로 미성숙 T 림프구의 민감성(중추 내성)에 의해 상당한 정도로 제어된다. 그러나 모든 자가 항원이 흉선 내에서 탐지되지 않고, 또한 자가-반응성 흉선세포의 사멸도 불완전하게 유지된다. 따라서 말초 조직 내 숙성 자가-반응성 T 림프구에 의해 수득되는 내성(말초 내성) 메커니즘이 존재한다. 중추 및 말초 내성의 메커니즘 고찰은 Anderton et al (1999)(Immunological Reviews 169:123-137)에 기재되어 있다.
내성은 CD4+ T 세포의 일부 이상에서 아네르기의 유도에 의해 유발되고 이를 특징으로 한다. T 세포를 활성화시키기 위해 펩타이드는 T 세포에 2개의 신호를 전달하는 것이 가능한 "전문성(professional)" APC와 연관되어야 한다. 첫 번째 신호(신호 1)는 MHC-펩타이드 복합체에 의해 APC의 세포 표면 상에 전달되고 TCR을 통해 T 세포에 의해 수신된다. 두 번째 신호(신호 2)는 CD80 및 CD86과 같은 동시자극 분자에 의해 APC의 표면 상에 전달되고 CD28에 의해 T 세포의 표면 상에서 수신된다. T 세포가 신호 2의 부재 하에 신호 1을 수신하는 경우 활성화되지 않는 것으로 판단되고, 실제로 아네르기가 된다. 아네르기성 T 세포는 후속 항원 유발에 불응성이고, 다른 면역 반응을 억제하는 것이 가능하다. 아네르기성 T 세포는 T 세포 내성을 매개하는데 관련된 것으로 판단된다.
펩타이드가 성숙된 항원 제시 세포에 의해 처리되어야 하기 때문에 MHC 분자에 의해 제시되기 전에 처리된 펩타이드는 내성을 유도하지 않는다. 성숙된 항원 제시 세포(대식세포, B 세포 및 수지상 세포와 같은)는 항원을 처리할 뿐만 아니라 신호 1 및 2 모두를 T 세포로 전달하여 T 세포 활성화를 유발하는 것이 가능하다. 한편 아피토프는 미성숙 APC 상에서 클래스 Ⅱ MHC에 결합할 수 있을 것이다. 따라서 이들은 동시자극 없이 T 세포에 제시되어 T 세포 아네르기 및 내성을 유발할 수 있을 것이다.
물론 아피토프도 성숙된 APC의 세포 표면에서 MHC 분자에 결합 가능하다. 그러나 면역 체계는 성숙된 APC 보다는 더 많은 미성숙 APC를 포함한다(10% 이하의 수지상 세포가 활성화됨이 제안되었음, Summers et al. (2001) Am. J. Pathol. 159: 285-295). 따라서 아피토프에 대한 디폴트 위치에서 활성화보다는 아네르기/내성이 될 것이다.
펩타이드 투여에 의해 내성이 유도되는 경우 항원-특이적 CD4+ T 세포의 증식 능력이 감소되는 것으로 나타났다. 또한 이들 세포에 의한 IL-2, IFN-γ 및 IL-4 생성은 하향-조절되나 IL-10의 생성은 증가된다. 펩타이드-유도 내성 상태의 마우스 내 IL-10의 중화는 질환에 대한 감수성을 완전하게 회복시키는 것으로 나타났다. 조절된 세포의 대부분은 IL-10을 생성하여 내성 상태를 유지하고 면역 조절을 매개하는 것으로 제시되고 있다(Burkhart et al (1999) Int. Immunol. 11:1625-1634).
따라서 내성 유도는 다음과 같은 다양한 기법에 의해 모니터링 될 수 있다.
(a) 생체 내에서 펩타이드가 목적 에피토프인 질병에 따른 감소된 감수성;
(b) CD4+ T 세포 내 아네르기의 유도(시험관 내 항원에 대한 후속 유발에 의해 검출될 수 있음);
(c) CD4+ T 세포군의 변화
(ⅰ) 증식 감소;
(ⅱ) IL-2, IFN-γ 및 IL-4 생성의 하향-조절; 및
(ⅲ) IL-10 생성의 증가를 포함;
목적 질환
본 발명의 펩타이드는 질병의 치료 및/또는 예방을 위해 사용할 수 있다.
이러한 질병은 탈수초 질환, 예를 들면 부신 백질 이영양증(adrenoleukodystrophy), 백질 질환(white matter disease)의 소멸 또는 다발성 경화증(MS)이다.
본 발명의 펩타이드는 특히 다발성 경화증(MS)의 치료 및/또는 예방에 유용하다. 다발성 경화증(MS)은 중추신경계 백질을 통해 다양한 탈수초 병변 증가에 의해 특징지어지는 만성 염증 질환이다. 이는 또한 다양한 부위에서 수차례 지속 발병한다(McFarlin and McFarland, 1982 New England J. Medicine 307:1183-1188 and 1246-1251). MS는 자가작동 T 세포에 의해 매개되는 것으로 여겨진다.
의약 조성물
두 번째 측면에서 본 발명은 발명의 첫 번째 측면의 하나 또는 그 이상의 펩타이드를 포함하는 의약 조성물에 관한 것이다.
본 발명자들은 '방관자(bystander) 억제'에도 불구하고 내성을 효과적으로 유도하기 위해 상당한 수의 서로 다른 T 세포 클론의 목표가 필요함을 예측하였다. 따라서 다수의 펩타이드를 질병의 예방 또는 치료를 위해 개체에게 투여하는 것이 필요하다.
의약 조성물은 예를 들면 1 내지 20개의 아피토프를 포함하며 바람직하게는 1 내지 15, 2 내지 8 또는 4 내지 6개의 아피토프를 포함한다.
둘 이상의 아피토프를 위해 의약 조성물은 키트의 형태로 제조될 수 있고 아피토프의 일부 또는 각각은 별개로 또는 동시에 제공될 수 있으며 별도로 또는 연속적으로 투여할 수 있다.
선택적으로 만약 의약 조성물 또는 그의 일부가 다중 용량으로 투여된다면 각각의 용량을 서로 별개로 하여 포장할 수 있다.
의약 조성물은 치료 용량 또는 예방 용량에 적합한 각각의 아피토프를 포함할 수 있으며 선택적으로 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함할 수 있다.
또한 본 발명의 의약 조성물 내에는 각각의 아피토프를 혼합시키기 위해 적절한 결합제, 윤활제, 현탁화제, 코팅제 또는 용해제를 포함할 수 있다.
투여
펩타이드는 애쥬번트 부재하에서 용해성 형태로 투여할 수 있다.
펩타이드는 비강 경로, 점막 경로, 피하 또는 피내로 투여할 수 있다.
펩타이드에 대한 연구는 용액 형태인 경우 복강 내 투여(i.p.), 정맥 내 투여(i.v.) 또는 비강 내 투여(i.n.) 또는 경구 투여 방식으로 투여하여 T 세포 내성을 유도할 수 있다 (상기 Anderton and Wraith (1998); 상기 Liu and Wraith (1995); Metzler and Wraith (1999) Immunology 97:257-263).
마우스에 대한 연구는 내성을 유도하기 위한 펩타이드 투여 기간은 투여자 내의 T 세포 전구체 빈도에 의존하는 것으로 나타났다(상기 Burkhart et al (1999)). 다수의 실험 연구에서 반복된 펩타이드의 용량이 내성을 유도하기 위해 요구된다 (상기 Burkhart et al (1999)). 펩타이드의 정확한 용량은 각각의 개체에 의존적이고 바람직한 실시형태에서 다수의 용량을 투여하는 것이다.
만약 다수의 펩타이드를 동시에 투여한다면 이들은 단일 또는 다중 용량의 투여에 적합한 '칵테일' 형태일 수 있다. 선택적으로 다중 용량을 투여하는 것이 바람직하나 용량간의 펩타이드의 상대 농도가 변동될 수 있다.
바람직한 실시형태에서 상승된 농도의 다수의 용량을 환자에게 투여하기 위해서는 '용량의 단계적 상승'을 위한 프로토콜이 필요하다. 이러한 접근법은 예를 들면 봉독 알러지에 대한 면역 치료 적용시 포스포리파아제 A2 펩타이드의 적용과 같은 것이다(Mtiller et al (1998) J. Allergy Clin Immunol. 101 :747-754 and Akdis et al (1998) J. Clin. Invest. 102:98-106).
실시예
다음 실시예들로 본 발명을 더욱 상세히 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명을 제한하는 것으로 해석되지 않는다. 본 발명은 이 실시예에 기재된 특정 실시형태에 특히 관련되어 있다.
(실시예 1) 프로테오리피드 단백질(PLP) 서열의 친수성 부분 조사
재료 및 방법
항원
PLP는 거대한 소수성 단백질이기 때문에 서열 내의 친수성 부분을 사용하는 것이 필요하다. 이러한 목적으로 친수성 소수성 관계 연구를 수행하고 하기 8개의 펩타이드를 PLP 분자의 친수성 도메인으로부터 다음과 같이 합성하였다:
36-61 (26머): HEALTGTEKLIETYFSKNYQDYEYLI-NH2
88-119 (32머): EGFYTTGAVRQIFGDYKTTICGKGLSATVTGG-NH2
104-135 (32머): KTTICGKGLSATVTGGQKGRGSRGQHQAHSLE-NH2
119-150 (32머): GQKGRGSRGQHQAHSLERVCHCLG WLGHPDK-NH2
179-206 (28머): TWTTCQS1AFPSKTSASIGSLCADARMY-NH2
192-219 (28머) : TSASIGSLCADARMYGVLPWNAFPGKVC-NH2
207-234 (28머): GVLPWNAFPGKVCGSNLLSICKTAEFQM-NH2
260-276 (17머): ATYNFAVLKLMGRGTKF-NH2
각각의 펩타이드에 대해 컴퓨터 기반 연구를 DR2(HLA-DRB1*1501) 결합 능력을 예측하기 위해 수행하였다. 시험관 내(증식 에세이) 및 생체 내(EAE 유도) 연구를 반응을 조사하기 위해 수행하였다. 그 결과를 도 1에 나타낸다.
3개의 펩타이드가 시험관 내 및 생체 내 모든 연구에서 응답하였다. 이는 DR32 결합 예측에 상호 관련된 것이다. 이 펩타이드는 HEAL-26, TWTT-28 및 GVLP-28이었다(이들 펩타이드를 확인하기 위해 굵은 글씨로 표시한 첫 번째 4개의 아미노산 서열을 사용하였다).
(실시예 2) HEAL-26 내의 아피토프의 확인
HEAL-26 기반으로 15-머의 중복 펩타이드 패널을 표준 F-moc 화학방법을 이용하여 합성하였다. 각각의 펩타이드를 다음과 같이 하나의 아미노산에 의해 배치하였다:
상기 펩타이드를 DR2로 마우스로부터 HEAL-26 특이 하이브리도마를 사용하여 분석하였다. 이들 중 POP-4, POP-7 및 POP-8이 아피토프로부터 확인되었다.
(실시예 3) TWTT-28 내의 아피토프의 확인
TWTT-28 기반으로 15-머의 중복 펩타이드 패널을 표준 F-moc 화학방법을 이용하여 합성하였다. 각각의 펩타이드를 다음과 같이 하나의 아미노산에 의해 배치하였다. 상기 펩타이드를 DR2로 마우스로부터 TWTT-28 특이 하이브리도마를 사용하여 분석하였다.
이들 중 POP-14 내지 POP-18의 펩타이드가 아피토프로 확인되었으며 다음과 같은 서열을 지닌다:
(실시예 4) GVLP-28 내의 아피토프의 확인
GVLP-28 기반으로 15-머의 중복 펩타이드 패널을 표준 F-moc 화학방법을 이용하여 합성하였다. 각각의 펩타이드를 다음과 같이 하나의 아미노산에 의해 배치하였다. 상기 펩타이드를 DR2로 마우스로부터 GVLP-28 특이 하이브리도마를 사용하여 분석하였다.
이들 중 POP-22의 펩타이드가 아피토프로 확인되었으며 다음과 같은 서열을 지닌다:
VLPWNAFPGKVCGSN
(실시예 5) 생체 외 내성 시험
내성을 유도하는 아피토프의 능력을 측정하기 위해 본 발명자들은 생체 외에서 면역 응답을 저해하는 이들 아피토프의 능력을 우선 결정하였다. 이러한 목적으로 HLA-DRB1*1501 마우스를 개별 아피토프에 용량 상승 방법으로 전처리시키고 상응하는 긴 사슬 펩타이드로 프라임시켰다. 프라임 10일 후에 비장 세포(SPL) 및 림프절 세포(LNC)를 3H-티미딘 통합에 의한 이들의 증식을 측정하기 위해 3일 동안 상응하는 긴 사슬 펩타이드와 함께 배양 및 자극시켰다. 멀티플렉스 사이토카인 프로파일링 시스템에 의해 사이토카인 생성을 나타낸다(도 5).
내성 연구는 POP-4 전처리가 T-세포 증식 저해와 림프절(도 6) 및 비장(도 7) 내에서 Thl/Thl7 사이토카인 생성 억제(IFN-γ, TNF-α 및 IL-17의 중요한 저하)를 유도하는 것을 나타낸다. HEAL-26(도 6 및 도 7)은 증식을 저하시키고 SPL 및 LNC 모두에서 IL-17의 생성을 저해시킨다. 그러나 마우스를 HEAL-26으로 전처리시켰을 때 Thl/Thl7 사이토카인으로부터 Th2 사이토카인으로의 이동을 나타내는 IL-5의 증가가 관찰되었다.
POP-15와 TWTT-28은 증식과 SPL 및 LNC에서 사이토카인 생성을 효과적으로 저해한다. POP-15의 경우 비장 세포 증식에는 차이가 없으나 사이토카인생성에는 경미한 차이를 나타내었다. 이는 POP-15로 처리된 마우스가 더 적은 IFN-γ(통계적으로 유의한), 더 적은 GM-CSF 및 더 적은 IL-17을 생성하는 것이다. 또한 POP-15로 마우스를 처리 하였을 때 증식 및 사이토카인(IFN-γ, GM-CSF 및 IL-17)의 유의적 저해가 관찰되었다.
POP-22의 경우 그 결과는 불분명하고 그 이유는 PBS 마우스의 매우 낮은 응답 때문이다. 그러나 POP-22와 GVLP-28을 전처리한 효과를 관찰하는 것이 가능하다. 실지로 자극 지수는 PLP-22(도 12 및 도 14) 및 GVLP-28(도 14)의 경우 LNC 증식의 감소를 나타낸다. 이러한 세포에 의해 IL-17 생성의 유의적 저해가 마우스를 POP-22 또는 GVLP-28로 전처리 하였을 때 또한 관찰되었다.
재료 및 방법
마우스
HLA-DRB1*1501 마우스(DR2 마우스)는 Lars Fugger로부터 획득하였으며 (LS Madsen ei al. A humanized model for multiple sclerosis using HLA-DR2 and a human T-cell receptor. Nature genet 1999. 23, 343-347) Ab0 마우스와 백크로스 시켰다. 그 결과물인 DR2 마우스는 HLA-DRB1*1501 분자를 발현하였으나 마우스 MHC 분자는 발현하지 않았다.
펩타이드
긴 사슬 펩타이드와 15-머 펩타이드를 GL Biochem Ltd(Shangai, China)로부터 합성한 후 디메틸 술폭사이드(DMSO, Sigma- Aldrich, Saint Louis, MA) 내에 -80℃로 보관하였다.
HLA-DRB1*1501과 결합하는 펩타이드의 조사
NetMHCII 2.2 서버
NetMHCII 2.2 서버는 인공적 뉴런 네트워크를 사용하여 HLA-DRB1*1501의 펩타이드 결합을 예측한다. 예측치는 nM IC50 수치로 주어진다. 강하고 약한 결합 펩타이드를 아웃풋에서 지시한다. 높은 친화성 결합 펩타이드는 50nM 이하의 IC50 수치를 나타내고 낮은 결합 펩타이드는 500nM 이하의 IC50 수치를 나타낸다. 이러한 결과는 다음과 같이 계산된 예측 스코어에 의해 제시된다. l-log50000(aff). 웹사이트 주소: http://www.cbs.dtu.dk/services/NetMHCII.
면역 에피토프 데이터베이스(IEDB): 콘센서스 방법
각각의 펩타이드를 위해 4개 방법(ARB, combinatorial library, SMM_align 및 Sturniolo)의 각각을 위한 백분위를 SWISSPROT 데이터베이스로부터 선택된 500만개의 랜덤 15 머의 스코어를 통해 펩타이드 스코어를 비교함으로써 생성시킨다. 작은 수의 백분위는 높은 친화성을 나타낸다. 4개 방법의 메디안 백분위를 사용하여 컨센서스 방법의 등급을 생성시킨다. 웹사이트 주소: http://tools.iirrmuneepitope.org/analyze/html/mhc_II_binding.html.
긴 사슬 펩타이드의 면역원성 결정
프라이밍 및 EAE(실험적 자가면역 뇌척수염)
HLA-DRB1*1501 형질전환 마우스에 Complete Freund 애쥬번트(CFA; BD Difco, Oxford, UK)와 함께 PBS(Lonza, Verviers, Belgium) 내에 100㎍의 긴 사슬 펩타이드를 포함하는 용액 100㎕를 주입하였다. 대조군으로 PBS 만을 주입하였다. 4mg/ml 결핵균(MTb, BD Difco, Oxford, UK)을 꼬리 기반으로 피하 투여하였다. EAE 연구를 위해 마우스를 프라이밍과 동시에 및 2일 후에 200ng의 백일해 독소를 주입한다. 마우스는 매일 체중과 질병 스코어를 측정하였다.
세포 배양
10일 째에 림프절과 비장을 제거시키고 비장 세포와 림프절 세포를 분리시킨 후 96-웰 편평한 플레이트 기반 내에서 X-vivo 15 배지(글루타민, 페니실린 및 스트렙토마이신이 보충된, Lonza, Verviers, Belgium)에서 배양시킨다. 200㎕/웰 내에 0.5×100 세포/웰이 되도록 다양한 농도의 펩타이드를 배양하여 증식 에세이에 사용한다.
증식 에세이 및 사이토카인 분석
배양 3일 후에 60㎕의 상등액을 채취하고(세포를 교란시키지 않고) 동결시킨다. 20 μCi/ml 희석액(stock 5 mCi; PerkinElmer,Waltham, MA)에 적정된 티미딘 25㎕/웰을 가하고 세포의 최종 농도가 0.5 μCi/웰이 되도록 한다. 세포를 7℃에서 인큐베이션시킨다. 18시간 후에 플레이트를 동결시킨다. 그리고 해동시킨 플레이트를 채취하고 β-카운터(Wallac 1450 MicroBeta TriLux Liquid Scintillation Counter)를 사용하여 판독한다. 상등액은 마우스로 분석한다 Thl/Th2 lOplex FlowCytomix Multiplex(Bender).
T 세포 클론의 생성
프라이밍 및 T 세포주의 수립:
0일 째 5 마리의 HLA-DRB1*1501 형질전환 마우스에 꼬리 기반으로 4mg/ml 결핵균과 함께 CFA 내의 100㎍의 긴 사슬 펩타이드를 주입한다. PBS 프라임된 대조군을 프라이밍을 위한 대조로 사용한다. 10일 째에 림프절과 비장을 제거하고 비장 세포와 림프절 세포를 분리한다.
비장 세포와 림프절 세포를 혼합시키고 음성 정제 키트를 사용하여 정제시킨 CD4 T 세포(untouched CD4 T 세포; Miltneyi, Bergisch Gladbach, Germany)를 혼합시킨다. CD4 T 세포를 HLA-DRB1*1501 마우스로부터 APC(항원 제시 세포)로서 방사능 조사된 비장 세포(3000 rad)로 재자극시킨다. 이때 CD4 T 세포와 비장 세포의 비율은 1:1이고 그 함량은 약 5×l06 세포/ml이며 이때 6-웰 플레이트 내에는 10㎍/ml의 긴 사슬 펩타이드를 포함한다. 자극은 우태아 혈청(FCS)에 특이적 세포의 활성화를 피하기 위해 X-vivo 15 배지에서 행한다. 4일 째, 20 U/ml의 재조합 인간 IL-2(R&D, Mineapolis, MN)를 세포에 가한다. 7일 째, 모든 세포를 채취하고 Ficoll 밀도 구배 분리법(Histopaque 1083, Sigma- Aldrich, St Louis, MA)을 사용하여 사멸된 세포를 제거시킨다.
세포를 방사능 조사된 DR2 마우스의 비장 세포로 재자극시키며 이때 APC:CD4 T 세포의 비율은 2:1이었다. 다시 긴 사슬 펩타이드를 배양액에 10㎍/ml 되도록 첨가시킨다. 이때 RPMI-5% FCS(Biosera, Ringmer, UK; hepes, 페니실린, 스트렙토마이신, 글루타민이 보충된: Lonza; and β-mercaptoethanol: gibco)를 사용하였다. 7일 째, 세포를 채취하고 피콜시킨 후 융합시킨다.
융합(Fusion):
l×l07 BW5147 세포(Health Protection Agency Culture Collections, Salisbury, UK)와 l×l06 CD4 T 세포주를 서로 혼합시키고 세척시킨다. 37℃에서 무혈청 배지를 50ml 튜브 내에 넣고 배지를 세팅시킨 후 펠렛 제조를 위해 원심분리시킨다. 상등액을 따르고 여분을 피펫으로 제거한다. 세포를 5분간 수욕 하에 놓고 남아있는 배지를 밑으로 내려가게 한 후 피펫으로 제거시킨다. 세포 펠렛을 잔잔하게 그러나 전체적으로 재현탁시킨다. 37℃ PEG(폴리에틸렌 글리콜, 40-50% 용액, Sigma- Aldrich, St Louis, MA) 1 ml를 45초 이상 가하고 세포를 후드 내에 소규모 수욕 하에 보관시킨다. 이 세포를 37℃에서 45초간 인큐베이션 시킨다. 37℃ 무혈청 배지 1 ml를 30초간 가하면서 튜브를 스월링시킨다. 그 후 2 ml를 같은 방법으로 가하고 다시 3, 4, 10 및 30 ml를 상기한 바와 같이 가한다.
튜브를 매우 천천히 반대로 하고 37℃에서 5분간 인큐베이션 시킨다. 세포는 브레이크 없이 실온(RT)에서 1300 rpm으로 5분간 원심분리 시킨다. 상등액을 피펫으로 주의 깊게 제거한다(약 1 ml를 피펫에 남게 한다). 50 ml의 RT 무혈청 배지를 가하고 세포 펠렛을 제거시키지 않는다. 세포를 상기한 바와 같이 원심분리 시키고 안전한 배지와 함께 재 세척을 반복한다. 세포를 50 ml RT 완전 배지 10%-FCS로 재현탁시키고 4개의 96-웰 편평한 바닥 플레이트(100㎕/웰)로 플레이팅 시킨다. 38ml의 완전한 RPMI-10% FCS를 튜브에 가하고 이전 단계를 두 번 반복한 후 최종적으로 37℃에서 인큐베이션 시킨 3단계 희석(총 12 플레이트로 종료시킨다. 48시간 후에 100㎕의 2x HAT(하이포크산틴-아미노프테린-티미딘, Sigma- Aldrich, Saint Louis, MA) 배지를 각각의 웰에 가한다. 6일에 하이브리도마가 나타나기 시작한다. 클론을 이들이 안정화 될 때까지 HAT 1X 배지에 유지시킨다. 그 후 HT(하이포크산틴-티미딘 Sigma-Aldrich, Saint Louis, MA) 배지에 2 내지 3주간 이전시킨 후 완전한 RPMI로 이전시킨다. 클론이 불안정해지면 일정하게 냉동시킨다(90% FCS+10%DMSO).
항원-특이 클론의 축적
100㎕ 의 하이브리도마 세포를 편평한 바닥 96-웰 플레이트 웰 내에 5×104 MGAR 세포(HLA-DRB1*1501을 발현하는 인간 세포주, Health Protection Agency Culture Collections, Salisbury, UK)와 함께 배양한다. 긴 사슬 펩타이드 10㎍/ml 또는 같은 양의 DMSO(펩타이드의 희석액)을 포함하는 50㎕의 완전한 RPMI-10%FCS를 웰에 가한다. 48시간 후에 120㎕의 상등액을 제거하고 마우스 IL-2 ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay)를 수행한다. IL-2를 생성하는 클론을 사용된 항원으로 인지한다. 남아있는 상등액을 -20℃로 동결시킨다.
IL-2 ELISA
96 웰 플레이트(Immunosorb 96 웰, Nunc, Roskilde , Denmark)를 50㎕/웰 정제된 래트 항-마우스 Il-2 캡쳐 Ab(BD Biosciences, Oxford, UK)로 코팅시킨 후 탄산 완충액(3.56g Na2C03(Sigma- Aldrich, Saint Louis, MA), 8.4g NaHC03(Fisher Scientific, Loughborough, UK) 및 1L elgastat water; pH 9.5) 내에서 1:250으로 희석시킨다. 그 후 4℃에서 하룻밤 인큐베이션시킨다. PBS-Tween(1L lOx PBS, 9L 증류수, 0.5 ml Tween(Sigma- Aldrich, Saint Louis, MA))으로 2차례 세척 후에 200㎕/웰의 PBS-10% FCS를 가하고 실온에서 한시간 인큐베이션 시킨다. PBS-Tween으로 3차례 세척 후에 50㎕의 상등액 또는 IL-2 표준품(BD Biosciences, Oxford, UK) 희석액(PBS-10% FCS 내)을 웰에 가하고 실온에서 두시간 인큐베이션 시킨다. PBS-Tween(Sigma-Aldrich, Saint Louis, MA)으로 4차례 세척 후에 10% FCS/PBS 내에서 1:1000으로 희석시킨 50㎕/웰의 비오틴 래트 항-마우스 IL2(BD Biosciences, Oxford, UK)를 가하고 실온에서 한시간 인큐베이션 시킨다. 4차례 세척 후에 PBS 내에서 1:1000으로 희석시킨 50㎕/웰의 엑스트라비딘 퍼옥시다제(Sigma-Aldrich, Saint Louis, MA)를 가하고 실온에서 30분 인큐베이션 시킨다.
4차례 세척 후에 50㎕/웰의 기질 용액을 가하고 실온에서 맑은 색 변화가 나타날 때까지 인큐베이션 시킨다. 반응을 50㎕/웰 2M H2S04(BDH, Poole, UK)를 사용하여 종료시키고 플레이트를 450 nm(550nm ref)에서 ELISA 판독기(SpectraMax Pro, Molecular Device, Sunnyvale, CA)로 판독한다. 기질 용액은 10 ml 인산염-구연산염 완충액 0.1M(5.14 ml 0.2M Na2HP04(BDH, Poole, UK), 4.86 ml 0.1 M 구연산염 (Sigma), 10 ml elgastat water), 0.1 ml of TMB (디프로스트시킨 3,3',5,5'-테트라메틸벤지딘, DMSO 내의 lOmg/ml, Sigma-Aldrich, Saint Louis, MA), 6㎕ 과산화수소(Sigma-Aldrich, Saint Louis, MA)로 구성되어 있다.
항원 처리 독립 제시 시스템
고정된 또는 고정되지 않은 MGAR 세포와 함께 15-머 펩타이드(POP-1 내지 POP-12)의 응답을 테스트하여 특이 클론을 시험하였다. 이를 위해 각각의 클론으로부터 1×105 세포를 96-웰 편평한 바닥 플레이트 내의 5×104 고정 또는 신선한 MGAR 세포와 함께 배양시킨다. MGAR 세포의 고정을 위해 20×106 MGAR세포를 실온에서 6ml의 파라포름알데히드(PFA, BDH, Poole, UK) 0.5%(pH7)와 함께 5분간 인큐베이션 시킨다. 그 후 0.4M에서 6 ml의 글리신(Wisher Scientific, Loughborough, UK)을 첨가하여 반응을 종료시킨다. 세포를 세척시키고 RPMI-10%FCS에 재현탁시킨다. RPMI-10%FCS 내에서 희석된 10㎍/ml의 15-머 펩타이드를 각각의 웰에 가한다. 펩타이드 대신 DMSO가 포함된 웰을 음성 대조군으로 각각의 클론에 사용한다. 긴 사슬 펩타이드를 포함한 웰을 양성 대조군으로 사용한다. 48시간 배양 후에 120㎕의 상등액을 채취하고 Il-2 생성을 측정하기 위해 ELISA로 분석한다.
아피토프 처리를 통한 내성 유도
HLA-DRB1*1501 형질전환 마우스를 아피토프의 용량 상승(0.1, 1, 10 및 3 차례 100 ㎍) 방법으로 전처리 시키거나 100㎕의 PBS로 -15, -13, -11, -8, -6, -4일에 전처리시켰다. 0일에는 4mg/ml의 결핵균과 함께 CFA 내의 긴 사슬 펩타이드 100㎍을 꼬리 기반으로 주입하여 프라임시켰다. 10일 후에 서혜부 림프절과 비장을 채취하였다. 증식과 LNC 및 비장 세포에 의한 사이토카인 생성을 상기한 방법으로 분석하였다.
본 발명의 상기 기재된 방법 및 시스템의 다양한 변형 및 변경은 본 발명의 범위 및 정신에 위배됨 없이 당업자에게 명백할 것이다. 본 발명은 특정한 바람직한 실시태양과 관련하여 기재되었으나 청구된 본 발명은 이러한 특정한 한정되지 않음이 이해되어야 한다. 실제로 화학 또는 생물학 또는 관련분야의 당업자에게 명백한 본 발명을 수행하기 위한 상기 기재된 방법의 다양한 변형은 본 발명에 의해 포함된다. 상기 명세서에 논의된 모든 간행물은 참고문헌으로 본원에 포함된다.
<110> APITOPE INTERNATIONAL NV
MERCK SERONO S.A.
<120> PEPTIDE
<130> P044820PCT1
<150> GB1300683.8
<151> 2013-01-15
<160> 33
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 26
<212> PRT
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Ser Leu Val Ala Thr Gly Leu Cys Phe Phe Gly Val Ala Leu Phe Cys
20 25 30
Gly Cys Gly His Glu Ala Leu Thr Gly Thr Glu Lys Leu Ile Glu Thr
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Arg Gln Ile Phe Gly Asp Tyr Lys Thr Thr Ile Cys Gly Lys Gly Leu
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Ser Ala Thr Val Thr Gly Gly Gln Lys Gly Arg Gly Ser Arg Gly Gln
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130 135 140
Leu Gly His Pro Asp Lys Phe Val Gly Ile Thr Tyr Ala Leu Thr Val
145 150 155 160
Val Trp Leu Leu Val Phe Ala Cys Ser Ala Val Pro Val Tyr Ile Tyr
165 170 175
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Ser Ala Ser Ile Gly Ser Leu Cys Ala Asp Ala Arg Met Tyr Gly Val
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245 250 255
Met Ile Ala Ala Thr Tyr Asn Phe Ala Val Leu Lys Leu Met Gly Arg
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Gln Lys Gly Arg Gly Ser Arg Gly Gln His Gln Ala His Ser Leu Glu
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Gly Gln Lys Gly Arg Gly Ser Arg Gly Gln His Gln Ala His Ser Leu
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Glu Thr Tyr Phe Ser Lys Asn Tyr Gln Asp Tyr Glu Tyr Leu Ile
1 5 10 15
Claims (10)
- 시험관 내에서 MHC 분자와 결합할 수 있고 항원 처리 없이 T 세포에 제시될 수 있는 펩타이드에 있어서,
상기 펩타이드는 하기 프로테오리피드 단백질(PLP) 펩타이드의 전부 또는 일부를 포함함을 특징으로 하는 펩타이드:
PLP 36-61: HEALTGTEKLIETYFSKNYQDYEYLI (서열번호: 1)
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PLP 207-234: GVLPWNAFPGKVCGSNLLSICKTAEFQM (서열번호: 3).
- 제 1항에 있어서, 상기 펩타이드는 하기 펩타이드의 부분을 포함함을 특징으로 하는 펩타이드:
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- 제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 펩타이드는 하기 PLP 펩타이드로부터 선택된 것임을 특징으로 하는 펩타이드:
PLP 39-53: LTGTEKLIETYFSKN (서열번호: 7)
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- 선행 항에 있어서, 상기 펩타이드는 탈수초(demyelinating) 질환의 치료 및/또는 예방의 용도임을 특징으로 하는 펩타이드.
- 제 4항에 있어서, 상기 질환은 다발성 경화증임을 특징으로 하는 펩타이드.
- 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 따른 하나 또는 그 이상의 펩타이드를 포함하는 의약 조성물.
- 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 따른 펩타이드를 개체(subject)에게 투여하는 단계를 포함하는 이를 요구하는 개체 내에서 탈수초 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 방법.
- 제 7항에 있어서, 상기 질환은 다발성 경화증임을 특징으로 하는 방법.
- 탈수초 질환의 치료 및/또는 예방을 위한 용도의 의약품을 제조하기 위한 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항의 따른 펩타이드의 용도.
- 제 9항에 있어서, 상기 질환은 다발성 경화증임을 특징으로 하는 용도.
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Citations (2)
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|---|---|---|---|---|
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| AU5671196A (en) * | 1996-03-28 | 1997-10-17 | Immulogic Pharmaceutical Corporation | Myelin oligodendrocyte glycoprotein peptides and uses thereof |
| ATE536187T1 (de) * | 2000-10-19 | 2011-12-15 | Epimmune Inc | Hla-klasse-i- und -klasse-ii-bindende peptide und ihre verwendungen |
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| WO1996032957A1 (en) * | 1995-04-20 | 1996-10-24 | Brigham & Women's Hospital | Modulation of cytokine patterns of human autoreactive t-cell clones |
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