KR20140108518A

KR20140108518A - Kv1.3 칼륨 통로의 약리학적 표적화에 의한 비만 및 비만 관련 장애의 치료

Info

Publication number: KR20140108518A
Application number: KR1020147012093A
Authority: KR
Inventors: 조지 케이. 챈디; 산지브 쿠마르 우파드하야; 핑 에이치. 왕; 파올로 사손 코르시; 크리스틴 린-에켈 마한; 숀 이아도나토; 조셉 무커지; 레자 엠. 미르볼로키
Original assignee: 더 리전트 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아; 키네타 원, 엘엘씨
Priority date: 2011-10-03
Filing date: 2012-10-02
Publication date: 2014-09-11
Also published as: BR112014008065A2; US20170095530A1; RU2014117558A; WO2013052507A1; IN2014CN03333A; TW201321403A; EP2763702A4; US9878006B2; CA2850357A1; IL231873A0; CN103987408A; MX2014004029A; HK1201048A1; EP2763702A1; AU2012318736A1; SG11201401193XA; US20150072940A1; JP2014531469A

Abstract

인간 또는 비인간 동물 피험체에서 피험체에 칼륨 통로 저해 작용제를 투여함으로써 비만을 치료하고/하거나 비만-관련 장애를 치료하는 갈색 지방 조직의 활성화. 칼륨 통로 저해 작용제는 ShK 독소 또는 변형된 ShK 독소를 포함할 수 있다. 변형된 ShK 독소의 예는 ShK-186을 포함한다.

Description

Kv1.3 칼륨 통로의 약리학적 표적화에 의한 비만 및 비만 관련 장애의 치료{TREATMENT OF OBESITY AND OBESITY-RELATED DISORDERS BY PHARMACOLOGICAL TARGETING OF Kv1.3 POTASSIUM CHANNELS}

관련출원

본 출원은 2011년 10월 3일 출원된 미국 가특허 출원 제61/542,751호에 대한 우선권을 주장하며, 이 기초출원의 전문 개시내용은 본 명세서에 명백하게 참조로서 포함된다.

정부 지원에 관한 언급

본 발명은 미국국립보건원에 의해 부여된 등록번호 NS48252, R43AI08569 및 R01HL096987 하에 미국 정부 지원에 의해 만들어졌다. 미국 정부는 본 발명에서 특정 권리를 가진다.

본 발명의 기술분야

본 발명은 일반적으로 생물학 및 의학 및 더 구체적으로는 비만 및 비만관련 장애를 치료하기 위한 방법에 관한 것이다.

비만은 현재 치명적인 세계적 유행병이다. 2008년 미국의 성인 중에서 과체중 + 비만의 출현율은 68%였다(~2억명의 사람). 보통의 비만도조차, 과량의 지방이 복부에 위치된다면, 2형 진성 당뇨병, 심장혈관계 질병, 뇌졸중 및 일부 암 형태에 대한 위험을 증가시킨다. 비만의 경제적 비용은 매년 2천 7백억 달러가 되는 것으로 추정된다. 식사 제한 및/또는 운동에 의해 체중을 관리하기 위한 방법은 장시간 동안 식사 요법을 고수하는 소수의 사람에게 대체로 비효과적이며, 마찬가지로 정기적 운동에 대한 준수는 부족하다. 결과는 일반적으로 일시적 체중손실 단계(또는 체중 안정) 후 비만에 대한 궤도로 복귀이다. 이런 실패는 안전한 비만방지 치료에 대한 필요를 강조하였다.

인간 및 다수의 다른 포유류에서, 지방은 지방조직에 저장된다. 지방 조직은 두 유형--백색 지방 조직(즉, "백색 지방") 및 갈색 지방 조직(즉, "갈색 지방")으로 분류된다. 백색 지방은 개개의 세포 내에서 거대한 지방 점적으로서 열량을 저장한다.¹ 음식 소비 후, 과량의 열량은 백색 지방에서 지방으로서 저장되는데, 이는 주로 여성에서 궁둥이 및 다리의 피부 하에, 남성에서 장기 주변에 위치된다. 대조적으로, 갈색 지방은 지방을 거의 저장하지 않는데, 대신 그것을 태워서 열을 생성하고, 체온을 조절한다.¹ 열량을 저장하기보다는 태우는 갈색 지방의 능력은 다수의 미토콘드리아를 갖는 각각의 갈색 지방 세포에 의존한다. 갈색 지방 세포의 미토콘드리아는 그것들이 열을 생성하기 위해 ATP 생성으로부터의 물질대사와 분리되는 단백질인 UCP1을 함유한다는 점에서 독특하다.² 소형 포유류 및 신생아는 그것의 견갑골 주변에 엄청난 양의 갈색 지방을 가지는데, 이는 그들이 찬 온도에서 생존할 수 있게 한다. 최근의 연구는 성인 인간에서 주로 하부 경부 및 쇄골의 근육 주변뿐만 아니라 흉부 및 복부의 척추를 따라서 갈색 지방을 확실하게 확인하였다.^3-5 갈색 지방에서 열발생의 자극을 통해 비만을 관리하는 개념은 현재 약제학적, 약효 식품적 및 기능성 식품 산업에 의해 상당한 관심의 초점이다.⁶ 골격근은 열발생과 관련된 다른 조직이며, 이 조직에 의한 열발생을 표적화하는 약물은 또한 비만의 제어에서 가치를 가질 수 있었다.^6,7

갈색 지방은 주로 교감신경계에 의해 약화된다. 호르몬에 의해 활성화될 때, 갈색 지방은 열을 발생하며, 과량의 에너지를 태운다. 실험 동물에서, 갈색 지방에서의 열발생은 교감 신경계로부터 방출된 놀에피네프린에 의해 제어되고; 놀에피네프린은 주로 열발생을 자극하는 β-아드레날린 수용체와 상호작용한다(도 1).^2,8 따라서, 래트에서, β-아드레날린 길항물질 프로프라놀롤(5 ㎎/㎏ 체중)은 갈색 지방 내로 ¹⁸-플루오로-데옥시글루코스 흡수를 제거한다.^8,9. 남성에서, 프로프라놀롤(1 ㎎/㎏)은 동일한 효과를 가지는데¹⁰ ^,11, 이는 또한 남성에서 글루코스 흡수(및 그에 따른 대개 경우의 열발생)가 β-아드레날린 제어 하에 있다는 것을 분명하게 나타낸다.

비만의 관리를 돕거나 또는 관리하기 위해 열발생을 자극한다는 생각은 긴 역사를 가진다.⁶ 19세기 말에 비만 치료에서 이용된 갑상선 추출물은 체중의 현저한 감소를 유발하였지만, 비만 치료에서 그것의 사용은 심장 자극 및 증가된 단백질 이화작용을 포함하는 허용되지 않는 부작용 때문에 평판이 나빠졌다.⁶ 갈색 지방 및 골격근에서 열발생을 유발하는 것에서 교감-부신계의 중심 역할이 이해되었을 때, 1990년대의 인간 시도는 열발생 항-비만 특성을 위한 모든 임상적으로 사용된 교감신경성 약물을 평가하였다.¹² 그러나, 제약회사는 항-비만 약물로서 다수의 특허보호를 벗어난 구형 약물을 연구하는 것에 우려를 표하였다. 이쯤해서, b3-아드레날린수용체는 중요한 수용체가 되는 것으로 보고되었는데, 이것을 통해 갈색 지방 내 열발생을 매개하는 UCP1의 활성화를 포함하여, 주변 조직에서의 지방 산화 및 NA 활성화 열발생을 교감신경에 의해 방출하였다. 설치류 및 개에서, 몇몇 b3-아드레날린수용체 작용물질은 고적적인 아드레날린 수용체 자극과 관련된 심혈관계 부작용을 만들지 않고 강력한 열발생 항-미만 효과를 갖는 것을 나타났다.¹³ b3-아드레날린수용체는 인간 지방 조직 및 골격근에서 설명되었다. 그러나, 이들 약물은 인간 b3-아드레날린수용체에 대해 불량한 선택성 또는 불량한 경구 이용가능성을 가지며, 약물은 II상 임상 시험 이상으로 진행되지 않았다.¹³

비만 및 비만-관련 장애의 치료를 위해 열발생을 촉진하기 위한 유사한 노력은 파이토테라피(phytotherapy)(예를 들어, 마황 및 구아라나), 및 식품 성분(메틸잔틴, 폴리페놀 화합물, 캡사이신 및 캡시노이드, 고단백 식이요법 및 장쇄 불포화 지방산이 풍부한 식이요법)을 포함하였다. 이와 관련하여, 미국특허 제6,451,336호(Sugano, et al.)(발명의 명칭: Agent for Increasing Brown Fat Comprising Conjugated Linoleic Acid as Active Ingredient)는 컨쥬게이트된 리놀레인산을 투여함으로써 갈색 지방조직의 생산을 자극하기 위한 방법을 기재한다. 또한, 미국특허 제5,453,270호(Bills)는 반투성막에서 캡슐화된 배양된 갈색 지방 세포의 양을 피험체에 투여함으로써 피험체에서 갈색 지방조직의 양을 증가시키기 위한 방법을 기재한다.

약제학적 또는 영양학적 접근 이외에, 추운 기후에 노출에 의해 갈색 지방 활성을 자극할 수도 있다. 문헌[The New England Journal of Medicine, 명칭: "Identification and Importance of Brown Adipose Tissue in Adult Humans"]에서 공개된 2009년의 연구에서, 저자는 실외 온도가 증가되었을 때 갈색 지방 활성이 감소된다는 것을 보고하였다. 더 나아가, 마우스에서 최근의 연구는 냉기에 대한 단기간 노출이 갈색 지방으로 증가된 흡수의 결과로서 트라이글라이세라이드의 혈장 클리어런스(plasma clearance)를 가속화하였고, 병리학적 상태에서, 냉기 노출은 고지혈증을 치료하였다는 것을 나타내었다.¹⁴ 이런 발견은 대사적으로 활성인 갈색 지방을 지니는 개체가 냉기에 노출에 의해 체중이 감소될 수 있기 때문에 유용할 수 있었다. 체중 감소는 또한 교감 신경계를 활성화함으로써 감기처럼 보이게 하는 약물을 통해 달성될 수 있었다.

다른 가능한 사용은 아연 핑거 단백질 PRDM16이 백색 지방 세포에 비해 갈색 지방 세포에서 고도로 풍부하다는 발견과 갈색 지방 사이의 상관관계를 이용할 수 있었다. 2007년의 연구는 백색 지방 데포(depot) 내 생리학적 수준에서 PRDM16의 유전자이식 발현이 갈색 지방 세포의 형성을 자극하는 한편, 갈색 지방 세포 내 shRNA 발현을 통한 PRDM16의 고갈이 갈색 특징의 거의 전체적인 손실을 야기한다는 것을 발견하였다.

전압개폐 칼륨 통로(IKv)와 칼슘 활성화 칼륨 통로(IKca)는 둘 다 갈색 지방 조직 세포의 세포막에 존재한다. 문헌[Lucero, M.T. et al.; Voltage-Gated Potassium Channels in Brown Fat Cells; J. Gen. Physiol. 93: 451-472 (1989)] 참조. 그러나, 칼륨 통로 차단제 테트라에틸암모늄(tetraethylammonium: TEA)의 차단은 아드레날린 자극에 대해 갈색 지방 조직 세포의 대사 반응을 변경하지 않는 것으로 결론을 내렸다. 문헌[Pappone, P.A., et al., Potassium Channel Block Does Not Affect Metabolic Responses of Brown Fat Cells; Am J Physiol. 262(3 Pt 1):C678-81 (1992)].

따라서, 체중 감소를 촉진하고, 인슐린 감수성을 증가시키는 갈색 지방 조직 및/또는 골격근의 발생 및 활성화를 자극시키는 작용제 및 방법의 개발을 위한 필요가 존재한다.

본 발명은 인간 또는 동물 피험체 또는 환자에서 칼륨 통로 저해제의 투여에 의한 비만 및 비만 관련 장애의 치료를 위한 방법을 제공한다. 본 발명은 또한 비만 및 비만 관련 장애의 치료에서 칼륨 통로 저해 작용제(agent)의 사용을 제공한다.

추가로 본 발명에 따르면, 칼륨 통로를 저해하는 조성물의 치료적 유효량을 피험체에 투여하는 단계를 포함하고, 이에 의해 갈색 지방 및/또는 골격근의 활성을 증가시킴으로써 항비만 효과를 갖는, 포유류 피험체에서 비만 또는 비만 관련 장애의 치료방법이 제공된다. 일부 실시형태에서, 조성물은 미국특허 출원 공개 제2008/0221024호(현재 미국특허 제8,080,523호로서 등록(Chandy et al))에 기재된 칼륨 통로 저해 조성물 중 하나 이상을 포함할 수 있으며, 이것의 전체 개시내용은 본 명세서에 참조로서 명백하게 포함된다. 미국특허 출원 공개 제2008/0221024호에 기재된 칼륨 통로 저해 조성물은 대체로 말미잘 독소 ShK의 유도체를 포함한다. ShK 독소의 공지된 아미노산 서열은 Arg-Ser-Cys-Ile-Asp-Thr-Ile-Pro-Lys-Ser-Arg-Cys-Thr-Ala-Phe-Gln-Cys-Lys-His-Ser-Met-Lys-Tyr-Arg-Leu-Ser-Phe-Cys-Arg-Lys-Thr-Cys-Gly-Thr-Cys(서열번호 1)이다. 미국 특허 출원 공개 제2008/0221024호에 기재된 칼륨 통로 저해 조성물은 다음의 서열을 갖는 것을 포함한다:

p-포스포-Tyr-AEEAc-Arg-Ser-Cys-Ile-Asp-Thr-Ile-Pro-Lys-Ser-Arg-Cys-Thr-Ala-Phe-Gln-Cys-Lys-His-Ser-Met-Lys-Tyr-Arg-Leu-Ser-Phe-Cys-Arg-Lys-Thr-Cys-Gly-Thr-Cys (서열번호 2);

p-포스포-Tyr-AEEAc-Arg-Ser-Cys-Ile-Asp-Thr-Ile-Pro-Lys-Ser-Arg-Cys-Thr-Ala-Phe-Gln-Cys-Lys-His-Ser-Met-Lys-Tyr-Arg-Leu-Ser-Phe-Cys-Arg-Lys-Thr-Cys-Gly-Thr-Cys-아마이드 (서열번호 3);

Tyr-AEEAc-Arg-Ser-Cys-Ile-Asp-Thr-Ile-Pro-Lys-Ser-Arg-Cys-Thr-Ala-Phe-Gln-Cys-Lys-His-Ser-Met-Lys-Tyr-Arg-Leu-Ser-Phe-Cys-Arg-Lys-Thr-Cys-Gly-Thr-Cys-아마이드 (서열번호 4).

NH₂-Arg-Ser-Cys-Ile-Asp-Thr-Ile-Pro-Lys-Ser-Arg-Cys-Thr-Ala-Phe-Gln-Cys-Lys-His-Ser-Met-Lys-Tyr-Arg-Leu-Ser-Phe-Cys-Arg-Lys-Thr-Cys-Gly-Thr-Cys-X, (X는 카복시-말단 카복실 또는 아마이드 기 중 하나를 나타낸다)(서열번호 5).

NH₂-Arg-Ser-Cys-Ile-Asp-Thr-Ile-Pro-Lys-Ser-Arg-Cys-Thr-Ala-Phe-Arg-Cys-Lys-His-Ser-Met-Lys-Tyr-Arg-Leu-Ser-Phe-Cys-Arg-Lys-Thr-Cys-Gly-Thr-Cys-X, (X는 카복시-말단 카복실 또는 아마이드 기 중 하나를 나타낸다)(서열번호 6).

p-포스포-Tyr-AEEAc-Arg-Ser-Cys-Ile-Asp-Thr-Ile-Pro-Lys-Ser-Arg-Cys-Thr-Ala-Phe-Arg-Cys-Lys-His-Ser-Met-Lys-Tyr-Arg-Leu-Ser-Phe-Cys-Arg-Lys-Thr-Cys-Gly-Thr-Cys-X, (X는 카복시-말단 카복실 또는 아마이드 기 중 하나를 나타낸다)(서열번호 7).

본 발명은 또한 비만 및 비만 관련 장애의 치료에서 이들 특정 칼륨 통로 저해 조성물의 사용을 제공한다.

또한 추가로 본 발명에 따르면, 음이온성 전하를 갖는 유기 또는 무기 화학 물질(chemical entity)에 부착된 ShK를 포함하는 물질의 조성물의 치료적 유효량을 피험체에 투여함으로써 포유류 피험체에서 비만 또는 비만관련 장애를 치료하기 위한 방법이 제공된다. 본 발명은 또한 비만 또는 비만 관련 장애를 치료하기 위한 물질의 이러한 조성물의 사용을 포함한다. 물질의 조성물, 즉, 유기 또는 무기 화학 물질은 ShK의 N-말단 잔기에 부착될 수 있다. ShK에 부착될 수 있는 음이온성 전하를 갖는 화학 물질의 예는, AEEAc-L-Tyr(PO₃H₂), AEEAc-L-Pmp(OH₂), AEEAc-D-Pmp(OH₂), AEEAc-D-Pmp(OH, Et), AEEAc-L-Pmp(Et₂), AEEAc-D-Pmp(Et₂), AEEAc-L-Tyr, AEEAc-L-Phe(p-NH₂), AEEAc-L-Phe(p-CO₂H), AEEAc-L-아스파테이트, AEEAc-D-아스파테이트, AEEAc-L-글루타메이트, 또는 AEEAc-D-글루타메이트를 포함하지만, 이들로 필수적으로 제한되지 않는다.

또한 추가로 본 발명에 따르면, 부록 A에서 정의되는 바와 같이 ShK(L5)의 치료적 유효량을 피험체에 투여함으로써 포유류 피험체에서 비만 또는 비만 관련 장애를 치료하기 위한 방법이 제공된다. ShK(L5)는 AEEAc-L-Tyr(PO₃ H₂)-즉, 상기 서열번호 2에 부착된 ShK를 포함한다. 본 발명은 또한 비만 또는 비만 관련 장애를 치료하기 위한 이 조성물(서열번호 2)의 사용을 포함한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 ShK(L5), ShK-186 및 서열번호 2는 동의어이다.

또한 추가로 본 발명에 따르면, 상기 요약한 물질의 조성물은 체중 및/또는 체중 증가량을 약화시키기 위해 사용될 수 있고, 따라서 치료가 필요한 환자에서 비만 및 과체중을 포함하는 에너지 항상성 및 대사 관련(예를 들어, 당뇨병), 식품 섭취 관련 및/또는 에너지 균형 및 체중 관련 질병, 장애 및/또는 질환, 비만 및 과체중과 관련된 장애 및/또는 질환, 예컨대 2형 당뇨병 및 대사 증후군의 치료에 유용하다. 피험체 또는 환자는 인간 또는 비인간 동물일 수 있다.

도 1A는 식이요법-유발 비만 마우스 모델에서 체중 증가 백분율 대 시간의 그래프를 도시한 도면. 모든 마우스는 시험 전체적으로 고 지방/고 프럭토스 식이요법을 받았다.
그것들은 피하 주사에 의해 또 다른 날에 비히클(P6N) 또는 ShK-186(20, 100 또는 500 ㎍/㎏)을 받았다. 체중을 연구의 시작 시 평균 분자량으로 정규화한다. 이 연구에서 모든 마우스는 수컷이었다. 반복 측정 ANOVA를 사용할 때, 모든 ShK-186 용량에 대해 p 값 <0.0001이다.
도 1B는 식이요법-유발 비만 마우스 모델에서 혈액 글루코스 농도 대 시간의 그래프를 도시한 도면. 모든 마우스는 시험 전체적으로 고지방/고 프럭토스 식이요법을 받았다. 그것들은 피하 주사에 의해 또 다른 날에 비히클(P6N) 또는 ShK-186(20, 100 또는 500 ㎍/㎏에서)을 받았다. 혈액 글루코스 농도를 각 동물에서 6일마다 측정하였다.
도 2A 및 2B는 식이요법-유발 비만 모델에서 지질 프로파일을 나타내는 막대 그래프를 도시한 도면.
도 3A는 고지방/고프럭토스 식이요법에 대해 45일 후, 대조군 및 ShK-186-처리(500 ㎍/㎏) 마우스의 CT 스캔을 도시한 도면. 백색 지방 조직을 화살표로 강조한다.
도 3B는 대조군 마우스의 백색 지방 조직 함량을 ShK-186의 500㎎/㎏을 받은 마우스의 백색 지방 조직 함량과 비교하는 막대 그래프를 도시한 도면.
도 4A 내지 4D는 음의 흐름(negative-flow) CLAMS(종합적 실험 동물 모니터링 시스템(Comprehensive Lab Animal Monitoring system)) 대사 우리에서 분석한 마우스의 섭식 및 음용을 도시한 도면. 모든 동물을 대사 우리 연구 전 적어도 7일 동안 고지방/고프럭토스 식이요법으로 길들였다. 모든 동물을 각각의 대사 우리에 개별적으로 넣었고, 보통 12시간 명암 주기 하에 2일 동안 길들였다.
도 6A 및 6B는 18플루오로-데옥시글루코스(¹⁸FDG)에 의한 PET 스캔을 도시한 도면. 갈색 지방 조직에서 ¹⁸FDG 흡수는 화살표로 강조된다.
도 7은 화살표에 의해 강조된 골격근에 의해 ¹⁸FDG 흡수에 의한 PET 영상화를 도시한 도면.

다음의 상세한 설명 및 그것이 지칭하는 수반되는 도면은 본 발명의 실시예 또는 실시형태를 일부를 기재하는 것으로 의도되지만, 필수적으로 모두를 기재하지는 않는다. 기재된 실시형태는 단지 예시적이며, 제한적이지 않은 것으로서 모든 측면에서 고려되어야 한다. 본 상세한 설명의 내용 및 수반되는 도면은 어떤 방법으로 본 발명의 범주를 제한하지 않는다.

약제학적 조성물에서와 같은 용어 "조성물"은 담체를 구성하는 활성 성분(들), 및 비활성 성분(들)을 포함하는 생성물뿐만 아니라 성분 중 어느 2 이상의 조합, 복합체화 또는 응집화로부터 또는 성분 중 하나 이상의 해리로부터 또는 성분 중 하나 이상의 다른 유형의 반응 또는 상호작용으로부터 직접적으로 또는 간접적으로 야기되는 임의의 생성물을 포함하는 것으로 의도된다. 따라서, 본 발명에서 이용되는 약제학적 조성물은 활성 성분을 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체와 혼합함으로써 만들어진 임의의 조성물을 포함한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같은, 용어 "약리학적 유효량"("치료적 유효량"을 포함)은 원하는 치료적 또는 생물학적 효과를 유발하기에 충분한 본 발명에 따른 펩타이드의 양을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같은, 용어 "치료적 유효량"은 의사 또는 다른 임상의에 의해 처리되는 포유류에서 생물학적 또는 의학적 반응을 유발하는 본 발명의 펩타이드의 양을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같은, 용어 "예방적으로 효과적인" 또는 "예방적"은 환자가 구체화된 질병 또는 장애로 고통받기 시작하기 전 의사 또는 다른 임상의가 예방하거나, 저해하거나 또는 완화시키기 위한 노력을 하는 의학적 질환을 지니는 포유류의 고통을 예방하거나 또는 저해하거나 또는 고통을 완화시킬 본 발명의 펩타이드의 양을 의미한다.

용어 "당뇨병"은 문헌[Report of the Expert Committee on the Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus { Diabetes Care , Vol. 24, Supp. 1, January 2001)]에서 공개된 기준에 따라 진단된 바와 같은 인슐린 의존성 진성 당뇨병인 1형 당뇨병(이때 공복 혈장 글루코스 수준은 데시리터 당 126 밀리그램 이상이고, 1차적 원인은 췌장 베타 세포 파괴임), 문헌[Report of the Expert Committee on the Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus]에서 공개된 기준에 따라 진단된 비인슐린 의존성 진성 당뇨병인 2형 당뇨병(공복 혈장 글루코스 수준은 데시리터 당 126 밀리그램 이상임), 및 성인의 지연형 자가면역 진성 당뇨병(latent autoimmune diabetes mellitus of adults: LADA)을 포함한다.

용어 "대사 증후군"은 췌장 베타 세포에 의한 인슐린의 결함있는 분비 및 인슐린 저항성을 포함하는 대사 장애, 특히 글루코스 및 지질 조절 장애를 지칭하며, 복부 비만, 이상지질혈증, 고혈압, 글루코스 불내성 또는 전혈전단계와 같은 질환 및 상태를 추가로 포함할 수 있으며, 이는 추가로 고지혈증, 비만, 당뇨병, 인슐린 저항성, 글루코스 불내성, 고혈당증, 및 고혈압과 같은 장애를 야기할 수 있다.

본 명세서에 개시된 조성물 및 방법은 의학적 적용과 동물 축산 또는 수의학적 적용을 위해 사용될 수 있다. 전형적으로, 해당 방법은 인간에서 사용되지만, 또한 다른 포유류에서 사용될 수 있다. 용어 "환자"는 포유류 개체를 나타내는 것으로 의도되며, 본 명세서 및 특허청구범위 전체적으로 사용된다.

본 발명의 주된 적용은 인간 환자와 관련되지만, 본 발명은 실험실, 농장, 동물원, 야생동물, 애완 동물, 스포츠 동물 또는 다른 동물에 적용될 수 있다.

임상적 적응증 및 구체적 이용은 다음을 포함한다: 비만 및 대사 증후군; 에너지 항상성 및 대사와 관련되는 질병, 장애 및/또는 질환(예를 들어, 당뇨병, 특히 2형 당뇨병; 이상지질혈증; 지방간; 고콜레스테롤혈증; 고중성지방혈증; 고뇨산혈증; 내당능장애; 공복혈당장애; 인슐린 저항성 증후군; 및 대사 증후군); 식품 섭취(예를 들어, 과식증; 폭식; 식욕 이상 항진증; 및 강박적 식사); 및/또는 에너지 불균형 및 체중 관련 질병, 장애 및/또는 질환, 더 구체적으로는 과체중 및/또는 과량의 식품 섭취를 특징으로 하는 그러한 질병, 장애 및 질환.

본 발명의 펩타이드는 특히 비만 및 과체중을 포함하는 과도한 체중을 특징으로 하는 체중 관련 질병, 장애 및/또는 질환(체중 손실의 증진, 체중 손실의 유지 및/또는 의약-유발 체중증가 또는 흡연의 중단에 후속되는 체중증가를 포함하는 체중 증가의 예방), 및 비만 및/또는 과체중과 관련된 질병, 장애 및/또는 질환, 예컨대 인슐린 저항성; 내당능장애; 2형 당뇨병; 대사 증후군; 이상지질혈증(고지혈증을 포함); 고혈압; 심장 장애(예를 들어, 관상 동맥성 심장병, 심근경색증); 심혈관계 장애; 비알코올성 지방간 질병(비알코올성 지방간염을 포함); 관절 장애(이차성 골관절염을 포함); 위식도 역류; 수면무호흡; 아테롬성 동맥 경화증; 뇌졸중; 거대 및 미세 혈관 질병; 지방증(예를 들어, 간에서); 담석; 및 담낭 장애의 치료에 유용한 것으로 믿어진다.

본 발명의 펩타이드는 특히 비만 및 2형 당뇨병, 더 구체적으로는 비만의 치료에 유용한 것으로 믿어진다. 비만 및 과체중의 의학적으로 허용가능한 정의가 있는 것으로 이해될 것이다.

본 발명에 의한 치료를 위한 후보인 피험체는, 예를 들어 체중(㎏)을 신장(m)의 제곱으로 나눔으로써 계산되는 체질량 지수(body mass index: BMI)를 측정하고, 의미있는 결과를 비교함으로써 확인될 수 있다. 성인에서 과체중 및 비만의 확인, 평가 및 치료에 대한 전문가 패널에 의해 채택되고, 의료 종사자가 이끄는 조직에 의해 지지되는 인간에서 BMI에 대해 추천되는 분류는 다음과 같다: 저체중 <18.5 ㎏/㎡, 정상 체중 18.5 내지 24.9 ㎏/㎡, 과체중 25 내지 29.9 ㎏/㎡, 비만(클래스 1) 30 내지 34.9 ㎏/㎡, 비만(클래스 2) 35 내지 39.9 ㎏/㎡, 극도 비만(클래스 3)은 40 ㎏/㎡(문헌[Practical Guide to the Identification, Evaluation, and Treatment of Overweight and Obesity in Adults, The North American Association for the Study of Obesity (NAASO) and the National Heart, Lung and Blood Institute (NHLBI) 2000]). 이 분류의 변형은 구체적 인종 그룹 및 임상의에 대해 사용될 수 있다.

과체중 및 비만을 평가하기 위한 다른 대안은 허리 둘레를 측정하는 것에 의한다. 인종 그룹에 기반한 컷오프에서 몇몇 제안된 분류 및 차이가 있다. 예를 들어, 국제 당뇨병 연맹(International Diabetes Federation)으로부터의 분류에 따라, 94㎝ 초과의 허리 둘레를 갖는 남성(유로피드에 대한 컷오프), 및 80㎝ 초과의 허리 둘레를 갖는 여성(유로피드에 대한 컷오프)은 과도한 복부 때문에 당뇨병, 이상지질혈증, 고혈압 및 심장혈관계 질병의 더 높은 위험에 있다. 다른 분류는 성인 치료 패널 III으로부터의 추천에 기반하며, 여기서 추천된 컷오프는 남성에 대해 102㎝이고, 여성에 대해 88㎝이다. 그러나, 본 발명의 펩타이드는 또한 자기 진단 과체중의 감소를 위해 그리고 라이프 스타일, 유전적 고려, 유전 및/또는 다른 인자에 기인하여 비만이 되는 위험의 감소를 위해 사용될 수 있다.

인간을 포함하는 동물에 투여 시 본 발명의 펩타이드는 해당 동물에서 체중 및/또는 체중 증가를 감소시키는 것으로 믿어진다.

특정 적응증에 대한 조합 치료

본 발명의 펩타이드, 조성물 및 방법은 하나 이상의 다른 약제학적으로 활성인 화합물과 조합으로 투여에 의해 앞서 언급한 질병, 적응증, 질환 또는 증후군 중 어떤 것 또는 임의의 질병, 적응증, 질환 또는 증후군에 대해 사용될 수 있다. 이러한 조합 투여는 본 발명의 펩타이드와 하나 이상의 다른 약제학적으로 활성인 화합물을 포함하는 단일 투약 형태에 의할 수 있으며, 이러한 단일 투약 형태는 정제, 캡슐, 스프레이, 흡입 분말, 주사가능한 액체 등을 포함한다. 대안적으로, 조합 투여는 두 상이한 투약 형태의 투여에 의할 수 있으며, 하나의 투약 형태는 본 발명의 펩타이드를 함유하고, 다른 투약 형태는 다른 약제학적으로 활성인 화합물을 포함한다. 이 예에서, 투약 형태는 동일 또는 상이할 수 있다. 조합 치료를 제한하는 것을 의미하는 일 없이, 다음은 사용될 수 있는 특정 조합 치료를 예시한다.

마우스 비만 모델

수반되는 도면은 C57BL/J 마우스(21% 지방 + 60% 프럭토스-물로 구성되는 식이요법)에서 식이요법-유발 비만 모델에서의 ShK-186의 비만-방해 효능을 나타낸다. 8주령 C57BL/6 마우스를 할란 코포레이션(Harlan Co.)(인디애나주 인디아나폴리스에 소재)으로부터 구입하였다. 그것들에 할란 코포레이션(인디애나주 인디아나폴리스에 소재)으로부터 구입한 특별한 고지방 식이요법(#TD88137; 21% 지방)을 섭식시켰고, 그것들은 음용을 위한 60% 프럭토스 용액을 받았다. 마우스에 또 다른 날에 피하 주사에 의해 비히클(P6N) 또는 ShK-186(20, 100 또는 500㎍/㎏)을 투여하였다. 동물을 또 다른 날에 체중을 쟀다. 혈액 글루코스 수준을 로슈(Roche)제의 Accu-Chek 컴팩트 글루코미터를 사용하여 꼬리 정맥 샘플링에 의해 6일마다 모니터링하였다. 어바인에 소재한 캘리포니아 유니버시티의 동물실험 관련 위원회(Institutional Animal Care and Use Committee)에 의해 동물 실험 프로토콜이 승인되었다.

CT 스캔 전 밤새 마우스를 단식시켰다. 모든 CT 획득을 인베온(Inveon)(지멘스 메디컬 솔루션) 전임상 CT 스캐너에 의해 수행하였다. 스캔 동안 2% 아이소플루란이 사용되었고, 마우스를 스캐너 상에서 앙와위(supine position)로 눕혔다. 0.1의 평활인자(smoothing factor)에 의한 공복 MAP 알고리즘을 사용하여 128 x 128 매트릭스로서 영상을 재구성하였다. 물 CT 밀도(CT HU=0) 및 공기 CT 밀도(CT HU=-1000)의 선형 보간법을 사용하여 CT 데이터를 캘리브레이션함으로써 WAT의 CT HU를 얻었다. 스캔 절차 후, 동물을 마취로부터 회복시켰고, 그것의 우리에 넣었으며, 정상 회복에 대해 모니터링하였다. 모든 스캐닝 데이터를 전체 목록 모드에서 획득하였고, 단일 프레임, 3차원 사이노그램(sinogram)으로 정렬시켰는데, 이는 푸리에 레비닝(Fourier rebinning) 알고리즘을 사용하여 레비닝된다. 0.5에서 나이퀴스트(Nyquist) 컷 오프를 지니는 한닝 필터(Hanning Filter)를 사용하는 2차원 필터 백 투사를 사용하여 영상을 재구성하였고, Co-57 감쇠 스캔 데이터를 사용하여 감쇠에 대해 보정하였다. 모든 CT 데이터 분석은 PMOD 3.0 소프트웨어를 사용하여 행해진다.

¹⁸F-FDG를 PETNET로부터 구입하였다. 마우스는 CT 또는 PET 스캔 전 밤새 단식시켰다. PET 스캔을 위해, 동물에 멸균수 중의 ¹⁸F-FDG의 0.1-0.2 mCi로 주사하였다. 대략, 0.02㎖ 내지 0.05㎖을 2% 아이소플루란 하에 정맥내로 투여하였고(꼬리 정맥), ¹⁸F-FDG를 분포 및 흡수시키기 위해 동물을 그것의 우리 내에서 60분 동안 깨운 채로 두었다. 스캔 동안 2% 아이소플루란을 사용하였고, 마우스를 스캐너 상에서 앙와위로 눕혔다. 모든 PET 획득은 인베온(Inveon)(지멘스 메디컬 솔루션) 전임상 PET 스캐너에 의해 수행하였다. PET 데이터는 30분 동안 획득되었다. PET 스캐너와 함께 사용될 때, 동물의 위치를 변화시키는 일 없이 PET 영상화 직후 CT 데이터를 얻었다. PET 영상은 감쇠, 산포, 무작위 및 불감시간(dead time)에 대해 보정된다. 0.1의 평활인자에 의한 공복 MAP 알고리즘을 사용하여 128 x 128 매트릭스로서 영상을 재구성하였다. 물 CT 밀도(CT HU=0) 및 공기 CT 밀도(CT HU=-1000)의 선형 보간법을 사용하여 CT 데이터를 캘리브레이션함으로써 BAT 및 WAT의 CT HU를 얻었다. 스캔 절차 후, 동물을 마취로부터 회복시켰고, 그것의 우리에 넣었으며, 정상 회복에 대해 모니터링하였다.

모든 스캐닝 데이터를 전체 목록 모드에서 획득하였고, 단일 프레임, 3차원 사이노그램으로 정렬시켰는데, 이는 푸리에 레비닝 알고리즘을 사용하여 레비닝된다. 0.5에서 나이퀴스트 컷 오프를 지니는 한닝 필터를 사용하는 2차원 필터 백 투사를 사용하여 영상을 재구성하였고, Co-57 감쇠 스캔 데이터를 사용하여 감쇠에 대해 보정하였다. 모든 MicroPET 및 CT 데이터 분석은 PMOD 3.0 소프트웨어를 사용하여 행하였다.

모든 마우스는 시험 전체적으로 고지방/고프럭토스 식이요법을 받았다. 그들은 피하 주사에 의해 또 다른 날에 비히클(P6N) 또는 ShK-186(20, 100 또는 500 ㎍/㎏)을 받았다. 체중을 연구의 시작 시 평균 체중으로 정규화한다. 이 연구에서 모든 마우스는 수컷이었다. 반복 측정 ANOVA를 사용할 때, 모든 ShK-186 용량에 대해 p 값 <0.0001이었다.

도 1A에 나타내는 바와 같이, 또 다른 날에 피하 투여에 의해 투여된 ShK-186은 비히클 처리 마우스에 비해 용량 의존적 방식에서 체중증가를 유의하게 감소시켰다(모든 ShK-186 용량에 대해 p 값 <0.0001). 또한 체중증가에서 이러한 감소는 도 1B에 의해 나타내는 바와 같이 혈액 글루코스 수준을 변경시키는 일 없이 생겼다.

도 2A는 혈장 내 트라이글라이세라이드 및 비에스터화된 지방산 수준을 나타낸다. 도 2B는 혈장 내 콜레스테롤, HLD 및 LDL을 나타낸다. 혈액은 헤파린 관 내 심장천자에 의해 회수되며, -20℃에서 저장된다. 혈장 내 액체 수준은 제조업자의 추천에 따라 로슈 다이아그노스틱스 코바스 인테그라 400 플러스(Roche Diagnostics COBAS INTEGRA 400)를 사용하여 유니버시티 오브 캘리포니아 데이비스(University of California Davis)에서 비교 병리학 실험실에서 분석하였다. p 값 = 0.01325, NEFA; p<0.05, 트라이글라이세라이드.

도 3A에서 화살표에 의해 강조하고, 도 3B의 막대 그래프에서 나타내는 바와 같이, ShK-186-처리는 비히클-처리 마우스에 비해 식이요법-유발 비만 모델 내 백색 지방 조직의 부피를 유의하게 감소시켰다(p = 0.000708).

도 4A 내지 4D는 측정 단계의 개시에서 비히클(대조군) 또는 ShK-186이 투여된 마우스에 의한 섭식 및 음용을 나타낸다. 모든 그래프에서 처음 24시간 후 p <0.05이다. 측정하기 전 대사 우리에서 2일 동안 마우스를 순응시켰다. 대조군 마우스는 암주기 동안 섭식 및 음용하고, 명주기 동안 "휴식"한 반면, ShK-186-처리 마우스는 암 및 명 주기 동안 섭식 및 음용한다.

도 5A 내지 5D는 비히클 대조군(n-2) 및 ShK-186-처리 마우스(n=2)에서 호흡교환율(Respiratory Exchange Ratio: RER) 및 에너지 소비량을 나타낸다. 0.70의 RER은 피험체가 순수한 지방을 대사할 때인 반면, 1.0의 RER은 피험체가 순수한 탄수화물을 대사할 때이다. ShK-186-처리 마우스는, 특히 명주기 동안 지방보다 더 많은 탄수화물을 대사한다. ShK-186-처리 마우스는 낮 동안 에너지 소비가 더 컸지만, 밤 동안 거의 동일한 에너지 소비를 한다.

도 6A 및 6B는 화살표에 의해 강조되는 갈색 지방 조직 내 18플루오로-데옥시글루코스(¹⁸FDG) 흡수에 의한 PET 스캔을 나타낸다. 도 6A는 ShK-186(100 및 500 ㎍/㎏에서)이 갈색 지방 조직에 의한 ¹⁸FDG-흡수를 유발한다는 것을 나타낸다. 도 6B는 갈색 지방 조직에 의한 ¹⁸FDG 흡수가 프로프라놀롤(5m/kg)에 의해 저해된다는 것을 나타낸다.

도 7은 화살표에 의해 강조되는 골격근에 의해 ¹⁸FDG 흡수에 의한 PET 영상을 나타낸다. ShK-186(20, 100 및 500 ㎍/㎏에서)은 골격근에 의한 ¹⁸FDG 흡수를 증가시켰지만, 프로프라놀롤(5㎎/㎏)은 이 흡수를 저해하지 않았다. 도 6에 대해서와 동일한 방식으로 PET 스캐닝을 수행하였다.

비만 및 관련된 대사 증후군에 대한 조합 치료.

본 발명의 하나 이상의 펩타이드는 다양한 체중 및 섭식-관련 장애, 예컨대 비만 및/또는 과체중의 치료에서 유용한 하나 이상의 다른 약리학적으로 활성인 작용제(들), 특히 에너지 소비량, 해당과정, 글루코스신생합성, 글루코겐 분해, 지방분해, 지방질생합성, 지방 흡수, 지방 저장, 지방 배설, 배고픔 및/또는 포만감 및/또는 갈증 메커니즘, 식욕/의욕유발, 식품 섭취, 또는 위장 운동성에 영향을 미치는 다른 항비만 약물과 조합될 수 있다. 에너지 섭취를 감소시키는 약물은, 부분적으로 체중 감소 프로그램에서 거동 치료에 부가적으로 사용되는 식욕 저하제로서 지칭되는 다양한 약리학적 작용제를 포함한다.

일반적으로, 본 발명의 하나 이상의 펩타이드와 조합되어 사용될 때 이하에 기재되는 비만 제어제 또는 의약의 전체 투약량은 1회 또는 2 내지 4회로 분할된 용량에서 0.1 내지 3,000㎎/일, 바람직하게는 약 1 내지 1,000 ㎎/일 및 더 바람직하게는 약 1 내지 200 ㎎/일의 범위에 있을 것이다. 그러나, 정확한 용량은 담당의사에 의해 결정되며, 투여되는 화합물의 효능, 환자의 연령, 체중, 상태 및 반응과 같은 이러한 인자에 의존한다.

본 발명의 하나 이상의 펩타이드는 다른 항당뇨병 약물과 같은 당뇨병의 치료에서 유용한 하나 이상의 다른 약리학적으로 활성인 작용제(들)와 조합될 수 있다.

본 발명의 하나 이상의 펩타이드는 추가로 또는 대안적으로 더 비만 및/또는 과체중과 관련된 질병, 장애 및/또는 질환, 예컨대 인슐린 저항성; 내당능장애; 2형 당뇨병; 대사 증후군; 이상지질혈증(고지혈증을 포함); 고혈압; 심장 장애(예를 들어, 관상 동맥성 심장병, 심근경색증); 심혈관계 장애; 비알코올성 지방간 질병(비알코올성 지방간염을 포함); 관절 장애(이차성 골관절염을 포함); 위식도 역류; 수면무호흡; 아테롬성 동맥 경화증; 뇌졸중; 거대 및 미세 혈관 질병; 지방증(예를 들어, 간 내에서); 담석; 및 담낭 장애의 치료에서 유용한 하나 이상의 다른 약리학적으로 활성인 작용제(들)와 조합될 수 있다.

본 발명의 추가 양태에 따르면, 본 발명에 따른 펩타이드 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 약리학적 유효량을 선택적으로 약제학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체와 함께: (1) 인슐린 및 인슐린 유사체; (2) 인슐린 분비 촉진약(secretagogue), 예를 들어 설포닐유레아(예를 들어, 글립자이드) 및 식사 글루코스 조절제(때때로 "단시간 작용성 분비 촉진약"으로 불림), 예컨대 메글루티나이드(예를 들어, 레파글리나이드 및 네이트글리나이드); (3) 인크레틴 작용을 개선시키는 작용제, 예를 들어 다이펩티딜 펩티다제 IV(DPP-4) 저해제(예를 들어, 빌다글립틴, 삭사글립틴, 및 시타글립틴), 및 글루카곤 유사 펩타이드-1(GLP-1) 작용물질(예를 들어, 엑세나타이드); (4) 퍼옥시좀 증식체 활성화 수용체-감마(peroxisome proliferator activated receptor gamma: PPARy) 작용물질을 포함하는 인슐린 민감화제, 예컨대 티아졸리딘다이온(예를 들어, 피오글리타존 및 로지글리타존), 및 PPAR 알파, 감마 및 델타 활성의 임의의 조합에 의한 작용제; (5) 간 글루코스 균형을 조절하는 작용제, 예를 들어 비구아나이드(예를 들어, 메트포민), 프럭토스 1,6-비스포스파타제 저해제, 글라이코겐 포스포릴라제 저해제, 글라이코겐 신타제 키나제 저해제, 및 글루코키나제 활성제; (6) 장으로부터 글루코스의 흡수를 감소/지연시키도록 설계된 작용제, 예컨대 알파-글루코시다제 저해제(예를 들어, 미글리톨 및 아카보스); 및 (7) 글루카곤의 작용을 길항하거나 또는 글루카곤의 분비를 감소시키는 작용제, 예컨대 아밀린 유사체(예를 들어, 프람린타이드); (7) 신장에 의한 글루코스의 재흡수를 방지하는 작용제, 예컨대 나트륨-의존성 글루코스 수송체 2(sodium-dependent glucose transporter 2: SGLT-2) 저해제(예를 들어, 다파글리플로진); (8) 장기적인 과혈당증의 합병증을 치료하도록 설계된 작용제, 예컨대 알도스 환원효소 저해제(예를 들어, 에팔레스타트 및 라니레스타트); 및 미세-맥관장애와 관련된 합병증을 치료하기 위해 사용되는 작용제; (9) 항-이상지질혈증 작용제, 예컨대 HMG-CoA 환원효소 저해제(스타틴, 예를 들어 로수바스타틴) 및 다른 콜레스테롤 저하제; PPARa 작용물질(피브레이트, 예를 들어, 젬피브로질 및 페노피브레이트); 담즙산 교환수지(예를 들어, 콜레스티라민); (10) 콜레스테롤 흡수 저해제(예를 들어, 식물 스테롤(즉, 피토스테롤), 합성 저해제); 콜레스테릴 에스터 전달 단백질(cholesteryl ester transfer protein: CETP) 저해제; 회장 담즙산 수송 시스템의 저해제(IBAT 저해제); 담즙산 결합 수지; 니코틴산(니아신) 및 이의 유사체; 항산화제, 예컨대 프로뷰콜; 및 오메가-3 지방산; (11) 항고혈압제, 예를들어 아드레날린성 수용체 길항물질, 예컨대 베타 차단제(예를 들어, 아테놀롤), 알파 차단제(예를 들어, 독사조신), 및 혼합된 알파/베타 차단제(예를 들어, 라베타롤); 아드레날린성 수용체 작용물질, 예를 들어 알파-2 작용물질(예를 들어, 클로니딘); 앤지오텐신전환효소(angiotensin converting enzyme: ACE) 저해제(예를 들어, 리시노프릴), 칼슘 통로 차단제, 예컨대 다이하이드로피리딘(예를 들어, 니페디핀), 페닐알킬아민(예를 들어, 베라파밀), 및 벤조티아제핀(예를 들어, 딜티아젬); 앤지오텐신 II 수용체 길항물질(예를 들어, 칸데사르탄); 알도스테론 수용체 길항물질 (예를 들어, 에플레레논); 중추작용 아드레날린성 약물, 예컨대 중추 알파 작용물질(예를 들어, 클로니딘); 및 이뇨제(예를 들어, 푸로세마이드); (12) 항혈전제를 포함하는 지혈증 조절제, 예컨대 섬유소용해의 활성제; 트롬빈 길항물질; 인자 Vila 저해제; 항응고제, 예컨대 비타민 K 길항물질(예를 들어, 와파린), 헤파린 및 이의 저분자량 유사체, 인자 Xa 저해제, 및 직접적 트롬빈 저해제(예를 들어, 아르가트로반); 항혈소판제, 예컨대 사이클로옥시게나제 저해제(예를 들어, 아스피린), 아데노신 다이포스페이트(adenosine diphosphate: ADP) 수용체 저해제(예를 들어, 클로피도그렐), 포스포다이에스터라제 저해제(예를 들어, 실로스타졸), 글라이코단백질 IIB/IIA 저해제(예를 들어, 티로피반), 및 아데노신 재흡수 저해제(예를 들어, 다이피리다몰); (14) 항비만 작용제, 예컨대 식욕 억제제(예를 들어, 에페드린), 노르아드레날린 작용제를 포함(예를 들어, 펜터민) 및 세로토닌 작용제(예를 들어, 시뷰트라민), 췌장 리파제 저해제(예를 들어, 올리스타트), 미세소체 운반 단백질(microsomal transfer protein: MTP) 조절제, 다이아실 글라이세롤아실트랜스퍼라제(diacyl glycerolacyltransferase: DGAT) 저해제, 및 카나비노이드(CB1) 수용체 길항물질(예를 들어, 리모나반트); (15) 섭식거동 변형제, 예컨대 오렉신 수용체 조절제 및 멜라민-농축 호르몬(melanin-concentrating hormone: MCH) 조절제; (16) 글루카곤 유사 펩타이드(glucagon like peptide-1: GLP-1) 수용체 조절제; (17) 뉴로펩타이드 Y(NPY)/NPY 수용체 조절제; (18) 파이루베이트 탈수소효소 키나제(pyruvate dehydrogenase kinase: PDK) 조절제; (19) 세로토닌 수용체 조절제; (20) 렙틴/렙틴 수용체 조절제; (21) 그렐린/그렐린 수용체 조절제; 또는 (22) 모노아민 전달-조절제, 예컨대 선택적 세로토닌 재흡수 저해제(selective serotonin reuptake inhibitor: SSRI)(예를 들어, 플루옥세틴), 노르아드레날린 재흡수 저해제(noradrenaline reuptake inhibitor: NARI), 노르아드레날린-세로토닌 재흡수 저해제(noradrenaline-serotonin reuptake inhibitor: SNRI), 트리플 모노아민 재흡수 차단제(예를 들어, 테소펜신), 및 모노아민 옥시다제 저해제(monoamine oxidase inhibitor: MAOI)(예를 들어, 톨록사톤 및 아미플라민), 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염, 용매화물, 이러한 염의 용매화물 또는 프로드러그로부터 선택되는 작용제 중 하나 이상을 동시, 순차적 또는 별개의 투여로, 이러한 치료적 처치가 필요한 포유류에 선택적으로 약제학적으로 허용가능한 담체와 함께 투여하는 것을 포함하는 조합 치료가 제공된다.

본 발명의 추가적인 추가 양태에 따르면, 본 발명에 따른 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염의 약리학적 유효량을 선택적으로 약제학적으로 허용가능한 담체와 함께, 매우 초저열량식(very low calorie diet: VLCD) 또는 저열량식(low-calorie diet: LCD)의 동시, 순차적 또는 별개의 투여에 의해 투여하는 것을 포함하는 조합 치료가 제공된다.

펩타이드의 제조방법

일반적으로, 본 발명의 펩타이드는 고체상 합성에 의해 합성되고, 당업계에 공지된 방법에 따라 정제될 수 있다. 다양한 수지 및 시약을 이용하는 다수의 잘 공지된 절차 중 어떤 것은 본 발명의 펩타이드를 제조하는데 사용될 수 있다. 이러한 방법에서, 본 발명의 펩타이드의 합성은 고체상 방법의 일반적 원칙에 따라 성장되는 펩타이드 쇄 내로 한 번에 하나의 원하는 아미노산 잔기를 순차적으로 포함시킴으로써 수행될 수 있다. 이들 방법은 문헌[Merrifield, R. B., Solid phase synthesis (Nobel lecture). Angew Chem 24:799-810 (1985) 및 Barany et al., The Peptides, Analysis, Synthesis and Biology, Vol. 2, Gross, E. and Meienhofer, J., Eds. Academic Press 1-284 (1980)]을 포함하는 다수의 참고문헌에서 개시된다. 펩타이드의 화학적 합성에서, 다양한 아미노산 잔기의 반응성 측쇄기는 적합한 보호기로 보호되는데, 이는 보호기가 제거될 때까지 해당 부위에서 화학적 반응이 생기는 것을 방지한다. 또한 아미노산 잔기 또는 단편의 알파 아미노기의 보호는 흔한 반면, 해당 완전체는 카복실기에서 반응한 다음 알파 아미노 보호기의 선택적 제거는 해당 부위에서 후속 반응이 일어나게 한다. 구체적 보호기는 개시되었고, 고체상 합성 방법 및 용액상 합성 방법에서 공지되어 있다. 알파 아미노기는 우레탄유형 보호기, 예컨대 벤질옥시카보닐(Z) 및 치환된 벤질옥시카보닐, 예컨대 p-클로로벤질옥시카보닐, p-나이트로벤질옥시카보닐, p-브로모벤질옥시카보닐, p-바이페닐-아이소프로폭시카보닐, 9-플루오레닐메톡시카보닐(Fmoc) 및 p-메톡시벤질옥시카보닐(Moz) 및 지방족 우레탄유형 보호기, 예컨대 t-뷰틸옥시카보닐(Boc), 다이아이소프로필메톡시카보닐, 아이소프로폭시카보닐, 및 알릴옥시카보닐(Alloc)을 포함하는 적합한 보호기에 의해 보호될 수 있다. Fmoc는 알파 아미노에 대해 바람직한 보호기이다. 구아니디노 기는 나이트로, p-톨루엔설포닐(Tos), Z, 펜타메틸크로만설포닐(Pmc), 아다만틸옥시카보닐, 펜타메틸다이하이드로벤조푸란-5-설포닐(Pbf) 및 Boc과 같은 적합한 보호기에 의해 보호될 수 있다. Pbf 및 Pmc는 아르기닌에 대해 바람직한 보호기이다.

고체상 합성은 보호된 알파 아미노산을 적합한 수지에 결합시킴으로써 펩타이드의 C-말단 단부로부터 시작된다. 이러한 출발 물질은 4-(2', 4'-다이메톡실페닐-아미노메틸-페녹시(Rink Amide) 수지, 4-(2',4'-다이메톡실페닐-아미노메틸)-페녹시아세트아미도-놀류실-MBHA 수지, 아미노-잔텐-3-일옥시-메리피엘 수지(Sieber Amide) 수지에 아마이드 결합에 의해, 또는 p-벤질옥시벤질 알코올(Wang) 수지, 2-클로로트라이틸 클로라이드 수지에 에스터 결합에 의해 또는 당업계에 잘 공지된 다른 수단에 의해 알파 아미노-보호된 아미노산을 부착시킴으로써 제조된다. Fmoc-링커-BHA 수지 지지체는 상업적으로 입수가능하며, 일반적으로 실현 가능할 때 사용된다. 수지는 아미노산을 순차적으로 첨가하기 위해 필요하다면 반복 주기를 통해 수행된다.

알파 아미노 Fmoc 보호기는 염기성 조건 하에 제거된다. N,N다이메틸포름아마이드(DMF) 중에서 피페리딘, 피페라진, 다이에틸아민 또는 몰폴린(20-40% v/v)은 이 목적을 위해 사용될 수 있다. 알파 아미노 보호기의 제거 후, 후속적 보호된 아미노산은 보호된 펩타이드 수지인 중간체를 얻기 위한 바람직한 순서로 단계적으로 결합된다.

펩타이드의 고체상 합성에서 아미노산의 결합을 위해 사용되는 활성화 시약은 당업계에 잘 공지되어 있다. 펩타이드가 합성된 후, 원한다면, 오쏘로 보호된 측쇄 보호기는 펩타이드의 추가 유도체화를 위해 당업계에 잘 공지된 방법을 사용하여 제거될 수 있다.

펩타이드 내 반응기는 고체상 합성 동안 또는 수지로부터 제거 후 선택적으로 변형될 수 있다.

최종적으로, 펩타이드는 AEEAc-L-Tyr(PO₃H₂), AEEAc-L-Pmp(OH₂), AEEAc-D-Pmp(OH₂), AEEAc-D-Pmp(OH, Et), AEEAc-L-Pmp(Et₂), AEEAc-D-Pmp(Et₂), AEEAc-L-Tyr, AEEAc-L-Phe(p-NH₂), AEEAc-L-Phe(p-CO₂H), AEEAc-L-아스파테이트, AEEAc-D-아스파테이트, AEEAc-L-글루타메이트, 또는 AEEAc-D-글루타메이트의 첨가를 포함하는 적용의 몇몇 바람직한 실시형태를 얻기 위해 그것의 N-말단에서 변형될 수 있다.

본 발명의 펩타이드는 수지로부터 조질의 펩타이드의 절단 후 공기 산화에 의해 또는 글루타티온 교환 시스템을 사용하여 고리화될 수 있다. 다양한 구체적 고리화 방법은 당업계에 공지되어 있다. 고리화된 펩타이드는 역상 고성능 액체 크로마토그래피(RP-HPLC)에 의해 적합한 컬럼, 예컨대 C18 컬럼을 사용하여 정제될 수 있거나, 또는 다른 분리 또는 정제 방법, 예컨대 펩타이드의 크기 또는 전하에 기반한 방법이 또한 사용될 수 있다. 일단 정제되면, 펩타이드는 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC), 아미노산 분석, 질량 분석법 등과 같은 다수의 방법에 의해 특성규명될 수 있다.

C-말단 치환된 아마이드 유도체 또는 N-알킬 기를 갖는 본 발명의 펩타이드에 대해, 합성은 적합한 수지에 보호된 알파 아미노산을 결합시킴으로써 펩타이드의 C-말단 단부로부터 시작된 고체상 합성에 의해 진행될 수 있다. 고체상에서 치환된 아마이드 유도체를 제조하기 위한 이러한 방법은 당업계에 기재되어 있다. 예를 들어, 문헌[Barn D. R. et al., Synthesis of an array of amides by aluminum chloride assisted cleavage on resin bound esters. Tetrahedron Letters, 37:3213-3216 (1996); DeGrado W. F. and Kaiser E.T., Solidphase synthesis of protected peptides on a polymer bound oxime: Preparation of segments comprising the sequences of a cytotoxic 26-peptide analogue. J. Org . Chem ., 47:32583261 (1982)] 참조.

합성은 고체상 Fmoc 화학을 주로 참조로 하여 기재되었지만, 예시의 방법으로서, 제한 없이 Boc 화학, 용액 화학 및 다른 화학 및 합성 방법을 사용하는 방법과 같은 다른 화학 및 합성 방법이 본 발명의 고리 펩타이드를 만들기 위해 사용될 수 있다는 것이 이해되어야 한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이 구체적 화학식 또는 명칭을 포함하는 본 발명에 따른 펩타이드에 대한 모든 기준은 모든 약제학적으로 허용가능한 염, 이의 용매화물, 수화물, 다형체, 프로드러그, 대사물질, 입체이성질체 및 호변체 이성질체를 포함하는 것으로 의도된다는 것이 이해될 것이다.

본 발명의 펩타이드는 임의의 약제학적으로 허용가능한 염의 형태일 수 있다. 용어 "약제학적으로 허용가능한 염"은 무기 또는 유기 염기 및 무기 또는 유기산을 포함하는 약제학적으로 허용가능한 비독성 염기 또는 산으로부터 제조된 염을 지칭한다(문헌["Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use", P. H. Stahl, P. G. Wermuth, IUPAC, Wiley-VCH, 2002] 참조). 무기 염기로부터 유래된 염은 알루미늄, 암모늄, 칼슘, 구리, 제2철, 제1철, 리튬, 마그네슘, 망간염, 망간, 칼륨, 나트륨, 아연 등을 포함한다. 암모늄, 칼슘, 리튬, 마그네슘, 칼륨 및 나트륨 염이 특히 바람직하다. 약제학적으로 허용가능한 유기 비독성 염기로부터 유래된 염은 1차, 2차 및 3차 아민, 자연적으로 생기는 치환된 아민을 포함하는 치환된 아민, 사이클릭 아민, 및 염기성 이온 교환 수지, 예컨대 아르기닌, 베타인, 카페인, 콜린, N,N'-다이벤질에틸렌다이아민, 다이에틸아민, 2-다이에틸아미노에탄올, 2-다이메틸아미노에탄올, 에탄올아민, 에틸렌다이아민, N-에틸-몰폴린, N-에틸피페리딘, 글루카민, 글루코사민, 히스티딘, 하이드라바민, 아이소프로필아민, 리신, 메틸글루카민, 몰폴린, 피페라진, 피페리딘, 폴리아민 수지, 프로카인, 퓨린, 테오브로민, 트라이에틸아민, 트라이메틸아민, 트라이프로필아민, 트로메타민 등을 포함한다. 본 발명의 펩타이드가 염기성일 때, 산 부가염은 무기 및 유기산을 포함하는 약제학적으로 허용가능한 비독성 산으로부터 제조될 수 있다. 이러한 산은 아세트산, 벤젠설폰산, 벤조산, 캄포설폰산, 카복실산, 시트르산, 에탄설폰산, 포름산, 푸마르산, 글루콘산, 글루탐산, 브롬화수소산, 염산, 이세티온산, 락트산, 말레산, 말산, 만델산, 메탄설폰산, 말론산, 점액산, 질산, 팜산, 판토텐산, 인산, 프로피온산, 숙신산, 황산, 타르타르산, p-톨루엔설폰산, 트라이플루오로아세트산 등을 포함한다. 본 발명의 펩타이드의 산 부가 염은 펩타이드에 대해 적합한 용매 및 과량의 산, 예컨대 염산, 브롬화수소산, 황산, 인산, 아세트산, 트라이플루오로아세트산(TFA), 시트르산, 타르타르산, 말레산, 숙신산 또는 메탄설폰산 중에서 제조된다. 아세테이트, 암모늄 아세테이트 및 TFA 산 염 형태가 특히 유용하다.

약제학적 조성물.

본 발명은 본 발명의 하나 이상의 펩타이드 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 약제학적으로 허용가능한 담체와 함께제형화될 때, 본 발명의 화합물은 전체 조성의 0.0001중량% 내지 99.5중량%, 예컨대 0.001중량% 내지 95중량%의 농도에서 약제학적 조성물에서 존재할 수 있다. 담체의 선택은 당업자의 지식 내이며, 예를 들어 투여 방식, 투약 형태 및 활성 화합물의 생리적 특성, 예컨대 용해도 및 안정성에 의존한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "담체"는 치료적으로 불활성인 성분에 관한 것이다. 투약 형태는 고체, 반고체, 액체 또는 자기 겔화 시스템일 수 있다. 제형은 속방형 및/또는 지연-, 지속-, 펄스-, 제어-, 표적화 및 프로그램된 방출 제형을 포함하는 변형 방출형일 수 있다. 담체는 액체 제형일 수 있으며, 바람직하게는 완충, 등장성, 수용액이다. 본 명세서에서 이후에 기재되는 바와 같이 약제학적으로 허용가능한 담체는 또한 희석제, 담체 등과 같은 부형제 및 안정제, 보존제, 가용화제, 완충제 등과 같은 첨가제를 포함한다.

제형 부형제는 폴리비닐피롤리돈, 젤라틴, 하이드록시 프로필 셀룰로스(HPC), 아카시아, 폴리에틸렌 글라이콜, 만니톨, 염화나트륨 및 시트르산나트륨을 포함할 수 있다. 주사 또는 다른 액체 투여 제형에 대해, 적어도 하나의 완충 구성요소를 함유하는 물이 바람직하며, 안정제, 보존제 및 가용화제가 또한 사용될 수 있다. 바람직한 실시형태는 주사용수(pH 6) 중의 10mM 인산 나트륨, 0.8%(w/v) NaCl, 0.05% (w/v) 폴리솔베이트 20으로 구성된 용액 중에서 1, 10 또는 25 ㎎/㎖ 펩타이드를 함유하는 액체 제형을 포함한다.

고체 투여 제형에 대해, 전분, 당, 셀룰로스 유도체, 지방산 등과 같은 임의의 다양한 증점제, 충전제, 증량제 및 담체 첨가제가 사용될 수 있다. 국소 투여 제형에 대해, 임의의 다양한 크림, 연고, 겔, 로션 등이 사용될 수 있다.

대부분의 약제학적 제형에 대해, 비활성 성분은 제제의 중량부 또는 부피부를 초과하여 구성될 것이다. 약제학적 제형에 대해, 또한 어떤 다양한 측정 방출, 서방출 또는 지속방출 제형 및 첨가제가 사용될 수 있고, 따라서 투약량이 제형화되어 시간 기간에 걸쳐 본 발명의 펩타이드의 전달을 제공하는 것으로 생각된다. 일반적으로, 환자에게 투여되는 본 발명의 펩타이드의 실제 양은 투여 방식, 사용되는 제형 및 원하는 반응에 따라서 상당히 넓은 범위 사이에서 다를 것이다. 실제 사용에서, 본 발명의 펩타이드는 통상적인 약제학적 조제 기법에 따라 약제학적 담체와 혼합되는 활성 성분으로서 조합될 수 있다. 담체는, 예를 들어, 경구, 비경구(정맥내 포함), 요도, 질, 비강, 구강, 혀밑 등에 투여를 위해 원하는 제제 형태에 따라서 매우 다양한 형태를 취할 수 있다.

경구 투약 형태를 위한 조성물을 제조하는데, 예를 들어 현탁액, 엘릭시르 및 용액과 같은 경구 액체 제제의 경우에 보통의 약제학적 매질 중 어떤 것, 예를 들어 물, 글라이콜, 오일, 알코올, 향미제, 보존제, 착색제 등; 또는, 예를 들어 분말, 경질 및 연질 캡슐 및 정제와 같은 경구 고체 제제의 경우에 담체, 예컨대 전분, 당, 미정질 셀룰로스, 희석제, 과립화제, 윤활제, 결합제, 붕괴제 등이 사용될 수 있다.

투여의 용이함 때문에, 정제 및 캡슐은 유리한 경구 투약 단위 형태를 나타낸다. 원한다면, 정제는 표준 수성 또는 비수성 기법에 의해 코팅될 수 있다. 이러한 치료적으로 유용한 조성물에서 활성 펩타이드의 양은 효과적인 투약량이 얻어지는 것이다. 다른 투약 단위 형태에서, 혀밑 구성물, 예컨대 시트, 웨이퍼, 정제 등이 사용될 수 있다.

정제, 알약, 캡슐 등은 또한 결합제, 예컨대 포비돈, 검 트래거캔스, 아카시아, 옥수수 전분 또는 젤라틴; 희석제; 충전제, 예컨대 미정질셀룰로스; 부형제, 예컨대 인산2칼슘; 붕괴제, 예컨대 옥수수 전분, 감자 전분 또는 알긴산; 보존제; 착색제; 윤활제, 예컨대 스테아르산마그네슘; 및 감미제, 예컨대 수크로스, 락토스 또는 사카린을 함유할 수 있다. 투약 단위 형태가 캡슐일 때, 상기 유형의 물질에 추가적으로 지방 오일과 같은 액체 담체를 함유할 수 있다. 다양한 다른 물질이 코팅으로서 또는 투약 단위의 물리적 형태를 변형시키기 위해 이용될 수 있다. 예를 들어, 정제는 셸락, 당 또는 둘 다로 코팅될 수 있다. 시럽 또는 엘릭시르는 활성 성분에 추가적으로 감미제로서 수크로스, 보존제로서 메틸 및 프로필파라벤, 염료 및 체리 또는 오렌지향과 같은 향미제를 함유할 수 있다.

경구 전달을 위해 제형화된다면, 펩타이드는 바람직하게 제형화되며 만들어져서 장용 보호제 내에서 감싸지고, 더 바람직하게는 정제 또는 캡슐이 위에 수송될 때까지 방출되지 않으며, 선택적으로 소장 부분에 추가로 수송되었다. 본 출원의 내용에서, 용어 장용 코팅 또는 재료는 본질적으로 온전하게 위를 통과할 것이지만 활성 약물 물질을 방출하기 위해 위를 통과한 후 붕괴되는 코팅 또는 재료를 지칭한다. 사용될 수 있는 재료는 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트, 하이드록시프로필메틸에틸셀룰로스 숙시네이트, 하이드록시프로필메틸셀룰로스 프탈레이트, 폴리비닐 아세테이트 프탈레이트, 및 메타크릴 산메틸 메타크릴레이트 공중합체를 포함한다. 사용되는 장용 코팅은 주로 위의 바깥 부위에서 투약 형태의 해리를 촉진하며, 대략 적어도 5.5의 pH, 더 바람직하게는 약 6.0 내지 약 8.0의 pH를 용해하도록 선택될 수 있다.

어떤 다양한 침투 향상제가 사용되어 장용 코팅의 해리 시 장 내 흡수를 증가시킬 수 있다. 일 양태에서, 침투 향상제는 부세포적(paracellular) 또는 세포투과적 수송 시스템을 증가시킨다.

대표적인, 이러한 침투 향상제의 비제한적 예는 칼슘 킬레이트, 담즙염(예컨대 콜산나트륨) 및 지방산을 포함한다. 일부 실시형태에서, 장 프로테아제에 대한 물질로서 작용하는 펩타이드 또는 폴리펩타이드가 추가로 첨가된다. 펩타이드는 또한 비경구로 투여될 수 있다. 이들 활성 펩타이드의 용액 또는 현탁액은, 예를 들어 하이드록시-프로필셀룰로스와 혼합되는 수 중에서 제조될 수 있다. 또한 분산물은 글라이세롤, 액체, 폴리에틸렌글라이콜 및 오일 중의 이들의 혼합물 중에서 제조될 수 있다. 이들 제제는 미생물유기체의 성장을 방지하기 위해 선택적으로 보존제를 함유할 수 있다.

주사용에 적합한 약제학적 형태는 멸균 수성 용액 또는 분산물 및 멸균 주사 용액 또는 분산물의 즉석 제조를 위한 분말을 포함한다. 모든 경우에, 형태는 멸균이어야 하며, 주사기에 의해 투여될 수 있는 정도로 유체이어야 한다. 형태는 제조 및 저장 조건 하에서 안정하여야 하고, 박테리아 및 진균과 같은 미생물유기체의 오염 작용에 대해 보존되어야 한다. 담체는, 예를 들어 물, 에탄올, 폴리올, 예를 들어 글라이세롤, 프로필렌 글라이콜 또는 액체 폴리에틸렌 글라이콜, 이들의 적합한 혼합물 및 식물성 오일을 함유하는 용매 또는 분산 매질일 수 있다.

본 발명의 펩타이드는 비강 투여에 의해 치료적으로 적용될 수 있다. "비강 투여"는 본 발명의 사이클릭 펩타이드 중 어떤 것의 비강 투여의 어떤 형태를 의미한다. 펩타이드는 수용액, 예컨대 식염수, 시트레이트 또는 다른 흔한 부형제 또는 보존제를 포함하는 용액일 수 있다. 펩타이트는 건조 또는 분말 제형일 수 있다.

수용액이라면, 펩타이드는 식염수, 아세테이트, 포스페이트, 시트레이트, 아세테이트 또는 다른 완충제에 의해 적절하게 완충될 수 있으며, 이는 임의의 생리적으로 허용가능한 pH, 예컨대 약 pH 4 내지 약 pH 7일 수 있다. 포스페이트 완충 식염수, 식염수 및 아세테이트 완충제 등과 같은 완충제의 조합이 또한 사용될 수 있다. 식염수의 경우에, 0.9% 식염수 용액이 사용될 수 있다. 아세테이트, 포스페이트, 시트레이트 등의 경우에, 50mM 용액이 사용될 수 있다. 완충제에 추가로, 적합한 보존제가 사용되어 박테리아 및 다른 미생물 성장을 방지하거나 또는 제한할 수 있다. 사용될 수 있는 하나의 이러한 보존제는 0.05% 염화벤즈알코늄이다.

대안의 실시형태에서, 본 발명의 펩타이드는 폐에 직접 투여될 수 있다. 폐내 투여는 정량 흡입기에 의해 수행될 수 있으며, 장치는 흡입동안 환자에 의해 작동될 때 본 발명의 펩타이드의 정량 볼루스를 자가 투여하게 한다. 마이크로-밀링, 분무 건조 및 급속 냉동 에어로졸 다음에 동결건조를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는 다양한 상이한 기법 중 어떤 것이 건조 분말 마이크로입자를 만들기 위해 사용될 수 있다.

본 발명의 펩타이드는 지속 방출 제형의 주사에 의해 치료적으로 투여될 수 있다. 일반적으로, 임의의 다수의 주사가능하고, 생체흡수성인 중합체는 지속 방출 주사 제형 중에서 사용될 수 있다. 대안적으로, 피하 주사를 허용하는 제형을 포함하는 다른 지속 방출 제형이 사용될 수 있는데, 다른 제형은 하나 이상의 나노/마이크로구체, 리포좀, 에멀전(예컨대, 수중유 에멀전), 겔, 불용성 염 또는 유중 현탁액을 포함할 수 있다. 제형은 펩타이드의 농도 및 양, 사용되는 재료의 지속방출 속도 및 당업자에게 공지된 다른 인자에 따라서 주사가 매일, 매주, 매달 또는 다른 주기적 기준으로 요구되는 것일 수 있다.

투여 경로

본 발명의 하나 이상의 펩타이드를 포함하는 조성물이 주사에 의해 투여된다면, 주사는 정맥내, 피하, 근육내, 복강내 또는 당업계에 공지된 다른 수단일 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 펩타이드가 세포의 상피층을 가로질러 도입되는 어떤 투여 경로가 사용될 수 있다. 따라서 투여 수단은 점막, 구강 투여, 경구 투여, 피부 투여, 흡입 투여, 비강 투여, 요도 투여, 질 투여 등을 포함할 수 있다.

치료적 유효량.

일반적으로, 환자에게 투여되는 본 발명의 펩타이드의 실제 양은 투여 방식, 환자(체중, 성별, 건강상태 및 식이요법을 포함), 사용되는 제형 및 원하는 반응에 따라서 상당히 넓은 범위 사이에서 다를 것이다. 치료를 위한 투약량은 앞서 언급한 어떤 수단 또는 당업계에 공지된 어떤 다른 수단에 의한 원하는 치료적 효과를 초래하기에 충분한 양의 투여이다. 본 발명의 펩타이드는 고도로 활성이다. 예를 들어, 펩타이드는 선택된 구체적 펩타이드, 원하는 치료적 반응, 투여 경로, 당업계에 공지된 제형 및 다른 인자에 따라서 약 0.001, 0.01, 0.5, 1, 5, 50, 100, 500, 1000, 5000, 10000 또는 25000 ug/㎏ 체중에서(1회 용량으로서 또는 분할된 매일의 용량으로) 투여될 수 있다.

본 발명은 투여시 활성 약리학적 펩타이드가 되기 전 대사 과정에 의해 화학적 변환을 겪는 본 발명의 펩타이드의 프로드러그를 포함하는 것으로 추가로 의도된다. 일반적으로, 이러한 프러드러그는 생체내에서 용이하게 전환되는 본 펩타이드의 기능적 유도체일 것이다. 프로드러그는 생체내에서 활성 모 펩타이드 약물을 방출하는 임의의 공유적으로 결합된 화합물이다. 적합한 프로드러그 유도체의 선택 및 제조를 위한 통상적인 절차는, 예를 들어 문헌["Design of Prodrugs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985]에 기재되어 있다.

본 발명의 펩타이드의 특정 변형은 펩타이드의 반감기를 향상시키기 위해 만들어질 수 있다(문헌[G. Pasuta and F. M. Veronese (2007) "Polymer-drug conjugation, recent achievements and general strategies" Progress in Polymer Science 32 (8-9): 933-961] 참조).

본 발명은 본 발명의 특정 실시예 또는 실시형태를 참조로 하여 본 명세서에서 상기 기재되었지만, 다양한 첨가, 삭제, 변경 및 변형이 본 발명의 의도된 정신과 범주로부터 벗어나는 일 없이 실시예 및 실시형태에 기재된 것으로 만들어질 수 있다는 것이 인식되어야 한다. 달리 구체화되거나 또는 달리 그것의 의도된 사용에 적합하지 않은 실시형태 또는 실시예를 제공하지 않는다면, 예를 들어, 하나의 실시형태 또는 실시예의 어떤 구성요소, 단계, 구성원, 성분, 조성물, 반응물, 부분 또는 일부는 다른 실시형태 또는 실시예에 도입되거나 또는 함께 사용될 수 있다. 또한, 방법 또는 공정 단계가 특정 순서로 기재되거나 또는 열거된 경우, 달리 구체화되거나 또는 달리 그것의 의도된 목적에 적합하지 않은 방법 또는 공정을 제공하지 않는다면, 이러한 단계의 순서는 변화될 수 있다. 추가적으로, 본 명세서에 기재된 어떤 발명 또는 실시예의 구성요소, 단계, 구성원, 성분, 조성물, 반응물, 부분 또는 일부는 달리 주목되지 않는다면, 구성요소, 단계, 구성원, 성분, 조성물, 반응물, 부분 또는 일부의 실질적인 부재 시 선택적으로 존재하거나 또는 이용될 수 있다. 모든 합리적인 부가, 삭제, 변경 및 변형은 기재된 실시예 및 실시형태와 동일한 것으로 고려되며, 다음의 특허청구범위의 범주 내에 포함된다.

Claims

인간 또는 동물 피험체에서 비만을 치료하거나 또는 비만-관련 장애를 치료하는, 갈색 지방 조직의 활성화를 위한 칼륨 통로 저해 작용제(potassium channel inhibiting agent)의 용도.
제1항에 있어서, 상기 작용제는 ShK 독소(서열번호 1)를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제1항에 있어서, 상기 작용제는 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6 또는 서열번호 7로부터 선택된 변형된 ShK 독소를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제1항에 있어서, 상기 작용제는 화학 물질(chemical entity)에 부착된 ShK 독소를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 상기 화학 물질은 AEEAc-L-Tyr(PO₃H₂), AEEAc-L-Pmp(OH₂), AEEAc-D-Pmp(OH₂), AEEAc-D-Pmp(OH, Et), AEEAc-L-Pmp(Et₂), AEEAc-D-Pmp(Et₂), AEEAc-L-Tyr, AEEAc-L-Phe(p-NH₂), AEEAc-L-Phe(p-CO₂H), AEEAc-L-아스파테이트, AEEAc-D-아스파테이트, AEEAc-L-글루타메이트 및 AEEAc-D-글루타메이트로부터 선택된 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항 또는 제5항에 있어서, 상기 화학 물질은 상기 ShK의 N-말단 잔기에 부착된 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ShK 독소는 천연 공급원으로부터 얻어진 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ShK 독소는 합성인 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 형광 태그를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-Pmp(OH₂)를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-D-Pmp(OH₂)를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-D-Pmp(OH, Et)를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-Pmp(Et₂)를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-D-Pmp(Et₂)를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-Tyr을 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-Phe(p-NH₂)를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-Phe(p-CO₂H)를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-아스파테이트를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-D-아스파테이트를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-글루타메이트를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제4항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-D-글루타메이트를 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 작용제는 프레임 내 단백질, 또는 상이한 크기의 폴리에틸렌 글라이콜을 더 포함하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제1항 내지 제22항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 작용제는 Kv1.3 칼륨 통로를 저해하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 작용제는 Kv1.1 칼륨 통로 보다 더 많이 Kv1.3을 선택적으로 저해하는 것인, 칼륨 통로 저해 작용제의 용도.
인간 또는 동물 피험체에서 비만을 치료하거나 또는 비만-관련 장애를 치료하는, 갈색 지방 조직을 활성화시키는 방법으로서, 상기 방법은 칼륨 통로를 저해하는 작용제를 상기 피험체에 투여하는 단계를 포함하는, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제25항에 있어서, 상기 작용제는 ShK 독소(서열번호 1)를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제25항에 있어서, 상기 작용제는 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4, 서열번호 5, 서열번호 6 또는 서열번호 7로부터 선택된 변형된 ShK 독소를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제25항에 있어서, 상기 작용제는 화학 물질에 부착된 ShK 독소를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-Tyr(PO₃H₂), AEEAc-L-Pmp(OH₂), AEEAc-D-Pmp(OH₂), AEEAc-D-Pmp(OH, Et), AEEAc-L-Pmp(Et₂), AEEAc-D-Pmp(Et₂), AEEAc-L-Tyr, AEEAc-L-Phe(p-NH₂), AEEAc-L-Phe(p-CO₂H), AEEAc-L-아스파테이트, AEEAc-D-아스파테이트, AEEAc-L-글루타메이트 또는 AEEAc-D-글루타메이트로부터 선택된 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제25항 내지 제29항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화학 물질은 ShK의 상기 N-말단 잔기에 부착되는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제25항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ShK 독소는 천연 공급원으로부터 얻어진 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제25항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ShK 독소는 합성인 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 화학 물질은 형광 태그를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-Pmp(OH₂)를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-D-Pmp(OH₂)를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-D-Pmp(OH, Et)를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-Pmp(Et₂)를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-D-Pmp(Et₂)를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-Tyr을 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-Phe(p-NH₂)를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-Phe(p-CO₂H)를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-아스파테이트를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-D-아스파테이트를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-L-글루타메이트를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제28항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 AEEAc-D-글루타메이트를 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제25항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 작용제는 Kv1.3 칼륨 통로를 저해하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제25항 내지 제45항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 작용제는 Kv1.1 칼륨 통로보다 더 많이 Kv1.3을 선택적으로 저해하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.
제25항 내지 제47항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ShK 독소에 부착된 화학 물질은 프레임 내 단백질, 또는 상이한 크기의 폴리에틸렌 글라이콜을 더 포함하는 것인, 갈색 지방 조직의 활성화 방법.