KR20140084120A - 아미노피리딘을 사용하여 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 치료하는 방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 뇌졸중-관련된 장애를 갖는 환자에서, 특히, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 갖는 환자에서 아미노피리딘의 치료학적 사용과 관련된 방법 및 조성물에 관한 것이다.

Description

아미노피리딘을 사용하여 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 치료하는 방법{METHODS FOR TREATING A STROKE-RELATED SENSORIMOTOR IMPAIRMENT USING AMINOPYRIDINES}

본 발명은 뇌졸중과 연관된 장애, 특히, 감각운동 장애의 치료에 관한 것이다.

중추 신경계(CNS: central nervous system) 손상은 심각한 건강 문제이다. CNS 손상은 일반적으로 불완전하게 치유되어 피험자는 어느 정도 영구적인 기능장애를 갖게 된다. 후유증으로 남는 기능장애는 운동, 감각, 인지, 감정 및 자율신경계 이상을 포함한다.

CNS 손상의 핵심 범주는 뇌졸중의 결과로 일어난 뇌 손상을 포함한다. 뇌졸중은 서방 세계에서 사망의 세번째 원인이고 불능의 주요 원인이다. 따라서 뇌졸중은 큰 사회경제적 부담을 제공한다. 뇌졸중의 병인은 대부분의 뇌졸중에서의 증례인 허혈성이거나, 출혈성이다. 허혈성 뇌졸중은 신체의 어느 곳에선가 형성되어 혈류를 통해 뇌에 이동되는 혈전에 의해 야기되거나(색전증성 뇌졸중), 뇌의 동맥 내부에 형성되는 혈전에 의해 야기된다(혈전증성 뇌졸중). 글루코스 및 산소의 부족에 기인하여 즉각적인 경색 코어에서의 대량의 세포 사멸 이후, 경색 영역은 2차 기작, 예컨대 글루타메이트 흥분세포독성, 세포자살 기작, 및 유리 라디칼의 생성에 의해 수 일 동안 확장된다. 신경 손상(예를 들어 허혈성 사건) 후, 동물 및 사람은 임의의 치료학적 개입 없이 수 일, 수 주 및 수 개월에 걸쳐 기능을 회복할 수 있다. 그러나, 너무나 자주, 이러한 회복은 단지 부분적이고, 동물 및 사람은 운동, 감각 및 인지 결함을 포함하는 장기간 또는 영구적 불능을 겪는다. 뇌졸중에 기인한 운동, 감각 및 인지 장애는 일상 생활의 활동 및 삶의 품질에 상당한 영향을 줄 수 있다. 뇌졸중 생존자들은 종종 영구적인 신경학적 결함을 갖고, 추정적으로 뇌졸중 생존자의 15 내지 30%는 영구적 장애를 갖게 된다[로저(Roger) 등의 문헌 "Circulation 2012; 125:22-e220"].

개인이 뇌졸중을 가질 가능성을 증가시키는 위험 인자는 잘 알려져 있다. 이들은 제한되는 것은 아니지만, 변할 수 없는 위험 인자, 즉 노년, 유전, 인종, 성별, 뇌졸중 또는 다른 심장 마비의 이전 병력; 및 변할수 있거나, 치료될 수 있거나, 제어될 수 있는 위험 인자, 즉 높은 혈압, 담배, 흡연, 진성 당뇨병, 경동맥 또는 다른 동맥 질환, 심방 세동, 다른 심장 질환, 겸상 적혈구 질환, 고 콜레스테롤 혈증, 불량한 식이, 신체 활동부족 및 비만이 포함된다.

이제까지, 허혈성 뇌졸중의 직접적인 약물요법은 뇌졸중 후 급성 상에서 투여되는 약물로 국한되었다. 급성 상은 손상(예를 들어, 뇌졸중)의 개시 시간으로부터 손상후 대략 6 시간까지의 범위이다. 출혈성 뇌졸중을 위한 약물요법은 현재까지 존재하지 않는다.

급성 용도에 적합한 조직 플라스미노겐 활성화인자("tPA": tissue plasminogen activator) 및 특정 기계적 혈전 회수 장치[에사(Eesa) 등의 문헌 "2011, Expert Rev Neurother. 11(8): 1125-1139" 참조] 이외에, 뇌졸중의 치료를 위해 미국에서 승인된 치료법은 아직까지 존재하지 않는다. 이용가능한 치료 이후, 일정 수준의 기능장애가 환자에게 종종 남게되고, 이는 기껏해야 대략 60일 동안 어느 정도, 이어서 종종 1년 이상까지 매우 약하게 내생적으로 개선된다. 이러한 회복은 단지 물리 치료에 의해서만 증진될 수 있다. 불행하게도, 많은 환자들에게 개선될 희망이 거의 없는 영구적 장애가 남는다.

급성 뇌졸중의 치료는 혈전용해제, 구체적으로 tPA의 분초를 다투는 사용을 통해 폐색된 혈관에서 혈류를 복원함으로써 달성된다. tPA는 뇌에 혈액을 공급하는 대동맥에서의 혈전을 분쇄하여, 뇌로의 혈류 및 산소 공급을 복원시킴을 용이하게 한다. 그러나, 뇌졸중 환자중 단지 적은 비율만이 성공적인 tPA 치료법을 받아들이고: tPA는 현재 뇌졸중 증후의 개시 3시간 이내의 사용에 대해서만 FDA 승인되고, 뇌졸중을 앓는 개인의 약 3%에만 제공된다. 많은 환자들은 tPA 치료법에 대한 후보가 아니고, tPA를 위한 시간 이내에 병원에 도착하지 않거나, tPA로 치료될 수 없는 시간 경과된 다수의 작은 경색을 갖는다. 더욱이, tPA로 성공적으로 치료된 환자 조차도 종종 뇌에 일정 정도의 세포 손상을 갖는다.

tPA는 플라스미노겐을 플라스민으로 전환시키는 세린 프로테아제이다. 이어서 플라스민은 뇌에서 혈관을 폐색하는 혈전의 성분이고 뇌졸중을 일으키는 피브린을 분해한다. 이상적으로, tPA는 폐색-후 처음 3시간 이내에 투여되지만, 몇몇 임상가에 의해 폐색-후 늦어도 6시간까지 투여될 수 있다. 불행하게도, 뇌졸중을 겪는 대부분의 환자들은 이러한 치료를 위해 고려되는 시간내에 병원에 도착하지 못한다. 효과적인 제한 시간 이내에 병원에 도착하는 환자들의 경우, tPA는 혈류 폐색을 역전시키고, 뇌의 산소 공급을 복원하고, 손상된 뇌 구조의 정도를 제한하기 위해 투여된다. 그러나, tPA의 사용을 제한하는 몇몇 심각한 모순점이 존재한다. 3 시간 후 tPA를 수여받는 환자들은 심각한 출혈의 위험이 증가되는 한편, tPA의 효과는 감소된다. 이러한 이유로 인하여, tPA는 임의의 치료학적 효능을 달성하기 위해 급성 상 동안의 투여로만 제한된다.

이제까지, 뇌졸중 치료를 위해 FDA에 의해 승인된 다른 약물은 없었다. 현재 실험적인 치료법, 예컨대 대동맥으로 전달되는 프로-유로키나아제(pro-urokinase)는 혈전을 파괴하고 혈류를 복원하기 위한 잠재적 수단으로서 조사되고 있다. 그러나, 과학 문헌에는 뇌졸중의 실험 동물 모델에서 뇌 물질을 보호하고 기능을 복원하는 이점이 입증된 제제들이 기재되어 있다. 이들 제제중 대부분은 급성 세포 사멸, 염증 및 세포자살(apoptosis)에 촛점이 맞춰지고, 이에 따라 허혈성 사건 이후 수 시간내에(24 시간까지) 전달되어야 한다.

아스피린(ASA)은 또한 개인이 뇌졸중 증후를 앓는 경우 몇몇 기관에 의해 추천된다. 몇몇 다른 항혈소판 치료법이 뇌졸중의 가능성을 감소시키는 것을 돕기 위해 사용된다.

지금까지는, 뇌졸중을 위한 치료는 시급하게 필요한 것으로 일반적으로 인정되었다[아베(Abe) 등의 문헌 "2008, J Cereb Blood Flow Metab. Jul 23, Epub ahead of print"; 선(Sun) 등의 문헌 "2008, Stroke Jul 10, Epub ahead of print"; 도하레(Dohare) 등의 문헌 "2008, Behav Brain Res. 193(2):289-97"; 베레이에브(Belayev) 등의 문헌 "2001, Stroke 32(2):553-60"]. 소수의 예외, 예를 들면 신경교 성장 인자(GGF2: glial growth factor 2)의 예외를 갖고[이아시(Iaci) 등의 문헌 "2010, Neuropharmacology 59:640-649" 참조], 제제는, 수 시간의 래그 타임(lag time) 후, 기껏해야 몇몇 실험 동물 모델에서 뇌졸중 후 약 1 일에 투여된 경우에도, 뇌 손상을 제한하고 기능을 복원하거나 뇌졸중 후 회복을 증진시키는 것으로 보이지 않았다.

급성 폐색 후, 순환이 복원되지 않는다면 수 시간 내에 사멸할 것인 반음영(penumbral) 대역에 의해 둘러싸인 파괴된 뇌 물질의 편재화된 영역이 종종 존재한다. 이러한 반음영 대역의 사멸 시간은 실험 동물에서 신경보호물질, 예컨대 NMDA 길항제, 칼슘 채널 차단제, 라디칼 소거제 및 트래핑 제제, 세포자살 방지제, 카스파제(caspase) 저해제, parp 저해제 등에 의해 약간 연장될 수 있다. 그러나, 24 내지 48 시간 후, 괴사 사멸로부터 세포를 보호할 것이라는 희망이 거의 없고, 반면 세포자살적 사멸은 수 일 동안 지속되고, 항-세포자살적 치료법에 대한 치료학적 창은 급성 보호성 치료법에 비해 더 많이 넓은 것으로 입증되지는 않았다[슐츠(Schulz) 등의 문헌 "1998, Cell Death Differ. 5(10):847-57"; 콤자티(Komjati) 등의 문헌 "2004, Int J Mol Med. 13(3):373-82"].

뇌졸중에서 살아남은 개인에서 영구적 감각운동 결함은 대체적으로 물리 치료에 의한 재활에 의해 단지 부분적으로 다루어 진다. 이에 불구하고, 이러한 환자들에서 영구적 기능 결함을 치료하기 위한 약리학적 중재에 대한 가능성에 주의가 거의 기울여지지 않았다. 이는 일반적으로 뇌졸중의 결과로서 손상된 회로 및 신경 세포를 대체하기 위해 할 수 있는 것이 별로 없다는 일반적으로 갖는 믿음에 기인할 수 있다.

칼륨 채널 차단제

특정 아미노피리딘의 예시적인 특성은 이들이 칼륨 채널 차단제라는 것이다. 4-아미노피리딘(4-AP)은 이러한 칼륨 채널 차단 특성을 갖는 아미노피리딘의 일예이다. 전형적으로 1 마이크로M(94 ng/㎖^-1) 미만인, 임상 연구에서 수득된 4-AP 혈장 농도에서, 4-AP의 칼륨 채널 차단 활성은 이들 채널의 특정 유형에 대해 선택적인 것으로 보인다. 흥미롭게도, 높은 농도에서(예컨대 밀리몰 농도에서) 4-AP는 칼륨 채널의 넓은 범위의 차단제이다. 4-AP의 임상적 신경 효과는 칼륨 채널 차단의 분자 기작과 일치한다.

4-아미노피리딘[달팜프리딘(dalfampridine), 팜프리딘(fampridine)]의 연구는 지효성 또는 서방성 제형에 더하여 정맥내(i.v.) 투여 및 속방성(IR: immediate-release) 경구 캡슐 제형을 사용하여 수행되었다. IR 캡슐의 투여는 혈장중 4-아미노피리딘의 신속하고 짧은 지속 피이크를 초래하였다. 초기 약물동력학적 연구는 젤라틴-기재의 캡슐 또는 경구 용액중 4-아미노피리딘 분말로 구성된, 경구 투여용 속방성(IR) 제형을 사용하여 수행되었다. 투여는 4-아미노피리딘 혈장 수준의 신속한 변경을 초래하였고, 이는 잘 용인되지 않았다. 이어서 서방성 매트릭스 정제[팜프리딘-SR 또는 암파이라(AMPYRA: 등록상표)로서 공지됨, 뉴욕주 하우토르네 소재의 아코다 테라퓨틱스(Acorda Therapeutics) 제품]가 개발되었다. 서방성 매트릭스 정제는 1 일 2회 투약의 경우 개선된 안정성 및 적절한 약물동력학적 프로파일을 보여주었다. 4-아미노피리딘의 서방성 조성물 및 이러한 조성물의 관련된 용도가, 예를 들어, 미국 특허 제5,370,879호, 미국 특허 제5,540,938호; 미국 특허 제8,007,826호; 및 미국 특허 공보 제US2005-0228030호에 제시된다. 예를 들면, 적합한 제형, 제조 방법, 서방성 아미노피리딘 조성물의 약물동력학적 특징 및 다양한 신경 질환을 치료하는 방법은 2011년 8월 30일자로 허여된 "서방성 아미노피리딘 조성물(Sustained Realease Aminopyridine Composition)"이라는 명칭의 미국 특허 제8,007,826호; 및 2005년 10월 13일자로 공개된 "서방성 아미노피리딘 조성물의 사용 방법(Methods of Using Sustained Realease Aminopyridine Compositions)"이라는 명칭의 미국 특허 공보 제2005-0228030호에 추가로 기재되어 있고; 이의 각각의 내용은 본원에 참고로 그의 전체가 인용되어 있다.

화합물 4-아미노피리딘은 MS를 갖는 환자를 위한 치료로서 미 식품 의약국(U.S. Food and Drug Administration)에 의해 승인된 칼륨(K+) 채널 차단제이다. 도 1에 제시된 바와 같이, 달팜프리딘은 화학적 4-아미노피리딘(4AP)에 대한 미국 채택 명칭(United States Adopted Name)(USAN)이고, 이는 C₅H₆N₂의 분자식 및 94.1의 분자량을 갖고; 이러한 화합물에 대한 전자의 USAN 명칭은 팜프리딘[이는 국제 일반명(International Nonproprietary Name)을 유지함]이다. 용어 "달팜프리딘", "팜프리딘" 및 "4-아미노피리딘"은 본 명세서 전반에 걸쳐 활성 약물 물질을 지칭하기 위해 사용될 것이다.

국제 특허출원 공개공보 제WO 89/09600호는 "기억 또는 인식에 영향을 주는 독성 증후-후 또는 뇌졸중-후"를 포함하는 특정 질환을 치료하기 위한 칼륨채널 차단제 및 콜린 또는 콜린의 공급원의 조합물의 용도를 개시한다 (p.6 참조).

뇌졸중에 의해 유도된 장애, 예를 들어, 감각운동 장애를 효과적으로 치료하고자 하는 오래 지속된 충족되지 않은 요구가 당분야에 존재한다. 특히, 급성 손상 이후 수 시간, 수 일 또는 수 주 이상된, 지체된 비-급성 상황에서 이러한 치료에 대한 요구가 존재한다. 급성 기간 외의의 치료에 더하여, 감각, 운동, 인지, 감정 또는 자율 기능을 개선시키는 만성 상에서 수행될 수 있는 임의의 치료법에 대해 충족되지 않은 상당한 의학적 요구가 존재한다.

본원에 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여함으로써 뇌졸중을 앓는 환자를 치료하는 방법이 제공된다. 특정 실시태양에서, 뇌졸중을 앓았던 환자에서의 뇌졸중-관련된 장애의 치료가 본원에 개시된다. 특히, 뇌졸중과 관련되거나 이에 의해 유도된 1종 이상의 감각운동 장애를 개선시키는 치료가 본원에 개시된다. 특히, 이러한 치료에서의 아미노피리딘의 용도가 개시된다. 하나의 실시태양에서, 1종 이상의 아미노피리딘이 본원에 개시된 방법에서 사용된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘은 모노- 또는 다이-아미노피리딘이다. 몇몇 실시태양에서, 모노-아미노피리딘은 3-아미노피리딘 또는 4-아미노피리딘이다. 하나의 실시태양에서, 다이-아미노피리딘은 3,4-다이아미노피리딘이다.

특정 실시태양에서, 본원에 개시된 방법에 따라 치료되는 환자는 포유동물이다. 한 바람직한 실시태양에서, 본원에 개시된 방법에 따라 치료되는 환자는 인간이다. 특정 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 뇌졸중은 허혈성 뇌졸중이다. 본 발명에 따라 치료될 수 있는 허혈성 뇌졸중의 하위유형으로는, 제한되지 않지만, 대동맥 아테롬성경화증(색전/혈전), 심장색전증(심장색전증성 뇌졸중), 소혈관 폐색[열공성(lacunar) 뇌졸중], 뿐만 아니라 그 외의 결정되거나 결정되지 않은 병인에 의한 뇌졸중이 포함된다. 특정 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 뇌졸중은 비아테롬성경화증성 혈관병, 응고항진 상태 또는 혈액 질환과 연관된다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 뇌졸중은 출혈성 뇌졸중이다. 본 발명에 따라 치료될 수 있는 출혈성 뇌졸중의 하위유형으로는, 제한되지 않지만, 지주막하 출혈 및 뇌내 출혈이 포함된다.

몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 서방성 조성물로 투여된다. 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 속방성 조성물로 투여된다. 특정 실시태양에서, 본 발명에 따른 방법은 1 일 1회, 1 일 2회 또는 1 일 3회 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여함을 포함한다. 한 구체적인 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-AP) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 서방성 조성물로 존재하고, 1 일 1회 또는 2회, 바람직하게는 경구적으로 투여된다. 또 다른 구체적 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-AP) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 속방성 조성물로 존재하고, 1 일 3회 이상, 바람직하게는 경구적으로 투여된다.

구체적 실시태양에서, 아미노피리딘 그 자체는(이의 약학적으로 허용가능한 염은 아님) 본원에 기재된 임의의 방법으로 사용된다.

특정 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염은, 환자에게 경구적으로, 정맥내로, 근육내로 또는 피하로 투여된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 환자에게 경구적으로 투여된다. 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 경구적으로 투여되는 몇몇 실시태양에서, 이는 정제, 환제 또는 캡슐의 형태로 제형화된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 환자에게 정맥내로 투여된다.

한 구체적인 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염은, 환자에게 경구적으로, 서방성 조성물로 b.i.d(즉, 1 일 2회) 투여된다. 특정 실시태양에서, 1 일 2회 투여는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 매 12 시간 마다 투여함을 포함한다. 한 구체적인 실시태양에서, 서방성 조성물중 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 인간에서 약 2 시간 내지 약 6 시간의 T_max를 제공한다. 또 다른 구체적 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염은, 환자에게 경구적으로, 서방성 조성물로 1 일 1회 투여된다.

특정 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 약 4 mg 내지 약 17.5 mg, 또는 4 mg 내지 17.5 mg(예를 들어, 약 4, 5, 6, 7, 7.5, 8, 9, 10, 11, 12, 12.5, 13, 14, 15, 16, 17, 또는 17.5 mg) 범위의 양으로 투여되고, 이는 구체적 실시태양에서, 1 일 1회 또는 2회, 바람직하게는 서방성 조성물로 투여된다. 특정 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 약 8 mg 내지 약 30 mg, 또는 8 mg 내지 30 mg(예를 들어, 약 8, 9, 10, 11, 12, 12.5, 13, 14, 15, 16, 17, 17.5, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30 mg) 범위의 양으로 투여되고, 이는 구체적 실시태양에서, 1 일 1회 또는 2회, 바람직하게는 서방성 조성물로 투여된다. 몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 4 mg 내지 40 mg 범위의 양으로 투여된다. 몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 약 5 mg 내지 15 mg, 5 mg 내지 10 mg, 5 mg 내지 7.5 mg, 또는 7.5 mg 내지 10 mg의 양으로 1 일 2회, 바람직하게는 서방성 조성물로, 또는 약 5 mg 내지 15 mg, 5 mg 내지 10 mg, 5 mg 내지 7.5 mg, 또는 7.5 mg 내지 10 mg의 양으로 1 일 2회, 바람직하게는 서방성 조성물로 투여된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 5 mg의 투약량으로 1 일 2회, 바람직하게는 서방성 조성물로 투여된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 10 mg의 투약량으로 1 일 2회, 바람직하게는 서방성 조성물로 투여된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 10 mg의 투약량으로 1 일 1회, 바람직하게는 서방성 조성물로 투여된다. 이들중 몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘은 4-아미노피리딘이다. 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 약 8 mg 내지 30 mg, 8 mg 내지 20 mg, 10 mg 내지 15 mg, 또는 10 mg 내지 20 mg 사이에서 1 일 1회(예를 들어, 서방성 조성물로) 투여된다.

본원에 기재된 임의의 투여량 및 투여량 섭생은 본 발명의 방법에서 사용되는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 치료 효과량으로서 작용할 수 있다.

몇몇 실시태양에서, 본 발명의 방법은 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 뇌졸중 이후 초기 만성 상 동안 및/또는 안정적 만성 상 동안 투여함을 포함한다. 다른 실시태양에서, 본 발명의 방법은 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 뇌졸중 이후 급성 상 동안 투여함을 포함한다. 특정 실시태양에서, 치료는 급성 상 동안 개시되고, 뇌졸중-후 초기 만성 상 및/또는 안정적 만성 상 동안 지속된다. 몇몇 실시태양에서, 치료는 초기 만성 상 동안 개시되고, 안정적 만성 상 동안 지속된다. 하나의 실시태양에서, 치료는 안정적 만성 상 동안 개시된다. 구체적 실시태양에서, 치료는, 감각운동 기능의 자발적 회복이 환자에서 예상되거나 관찰될 경우 뇌졸중-후 기간 동안 개시된다. 다른 특정 실시태양에서, 치료는, 감각운동 기능의 거의 또는 전혀 측정할 수 없는 자발적 회복 또는 개선이 환자에서 예상되거나 관찰될 때, 뇌졸중-후 기간 동안 개시된다. 몇몇 실시태양에서, 치료는 감각운동 기능의 자발적 회복이 환자에서 예상되거나 관찰될 때 뇌졸중-후 기간 동안 개시되지만, 이러한 기간을 지나 임의의 기간 동안 지속된다(예를 들어, 이러한 기간을 지나 6 개월, 1 년, 5 년, 10 년, 20 년 동안 지속되거나, 치료된 환자의 일생 동안 지속된다).

특정 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 뇌졸중-후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27 또는 28 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12 주; 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 개월에 또는 그 후에 시작된다. 특정 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 치료의 개시 이래로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12 주; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12 개월; 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10 년 이상 동안 지속된다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 뇌졸중-후 임의의 시점에 시작된다.

하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12 개월에 시작된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12 개월을 지나서 시작된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 8 주에 시작된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 4 주에 시작된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 1 주에 시작된다. 역시 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 2 내지 7 일에 시작된다. 몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 1 주, 2 주, 3 주, 4 주, 5 주, 6 주, 7 주, 또는 8 주에 시작된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 4 개월에 시작된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 6 개월에 시작된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 8 개월에 시작된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 12 개월에 시작된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 4 개월을 지나서 시작된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 6 개월을 지나서 시작된다.

특정 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 3, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 또는 48 시간에 시작된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 6 시간에 시작된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 12 시간에 시작된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 24 시간에 시작된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 적어도 48 시간에 시작된다. 하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 6 시간을 지나서 시작된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 24 시간을 지나서 시작된다.

또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는 뇌졸중 후 즉시, 또는 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 1 시간, 2 시간, 3 시간, 4 시간, 6 시간, 8 시간, 10 시간, 12 시간, 16 시간, 20 시간, 24 시간, 36 시간 또는 48 시간 이내에 시작된다. 구체적 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 바람직하게는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 염의 투여 단계는, 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 1 일 또는 2 일 이내에 시작된다. 특정 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 뇌졸중 후 즉시, 또는 뇌졸중 후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 36 또는 48 시간 이내에 시작되고, 치료가 개시된 이래로 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12 주; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12 개월; 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10 년 동안 지속된다.

특정 실시태양에서, 뇌졸중을 앓는 환자에서 하나 이상의 감각운동 장애를 치료하기 위한 방법이 본원에 제공된다. 특정 실시태양에서, 뇌졸중을 앓는 환자에서 하나 이상의 운동 또는 감각 장애를 치료하기 위한 방법이 본원에 제공된다. 본원에 기재된 방법에 따라 치료된 감각운동 장애로는, 제한없이, 운동실조, 전신 제어 장애, 협응 또는 균형 장애, 신체 감각에서의 장애, 인내력 장애, 손 기능 장애, 미세 손 협응 손실 또는 장애, 반사항진, 그립 강도 감손, 손 강도의 감손, 손 재주 장애, 근육 약화, 근긴장도 감손, 운동 범위 감손, 경직, 강도 감손/약화, 미진(微震), 사지 기능 장애, 상지 기능 장애, 하지 기능 장애, 하지 근육 강도의 감손, 보행 장애(예를 들어, 감소된 보행 속도 또는 비정상적 보행), 언어 장애(예를 들어, 구음 장애), 턱 기능 장애, 저작 기능 장애, 및 턱 관절 장애가 포함된다.

하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 보행 장애, 예컨대 감소된 보행 속도이다. 하나의 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 감각운동 장애는 고유 수용 감각(proprioception)에서의 장애이다. 다른 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 전신 제어 또는 신체 감각에서의 장애이다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 사지 기능 장애(예를 들어, 하지 기능에서의 장애, 하지 근육 강도의 감손, 또는 상지 기능 장애)이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 하지 기능에서의 장애 및/또는 하지 근육 강도의 감손이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 상지 기능 장애이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 상지 경직에서의 장애이다. 역시 또 다른 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 손 기능 장애, 미세 손 협응 장애, 또는 그립 강도 감손이다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 손 강도의 감손이다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 손 재주 장애이다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 구강 운동 기능에서의 장애이다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 언어 장애(예를 들어, 구음 장애, 실행증, 또는 발성 장애)이다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 저작 및/또는 연하 장애(예를 들어, 연하곤란)이다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 안면 마비이다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 사지 마비이다. 하나의 특별한 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 손 마비이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 균형감 장애이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 감각 장애이다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 시각 장애, 예컨대 시각 기능의 감각 및/또는 안구 운동 장애이다.

구체적 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 하나 이상의 뇌졸중-관련된 감각운동 장애의 증후를 치료하기에(예를 들면 이의 위중성을 개선, 경감, 감소시키기에, 또는 이의 기간을 감소시키기에) 효과적이다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 하나 이상의 뇌졸중-관련된 운동 장애의 증후를 치료하기에(예를 들면 이의 위중성을 개선, 경감, 감소시키기에, 또는 이의 기간을 감소시키기에) 효과적이다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 하나 이상의 뇌졸중-관련된 감각 장애의 증후를 치료하기에(예를 들면 이의 위중성을 개선, 경감, 감소시키기에, 또는 이의 기간을 감소시키기에) 효과적이다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 뇌졸중에 의해 손상된 하나 이상의 운동, 감각 또는 감각운동 기능을 복원한다. 특정 실시태양에서, 상기 운동, 감각 또는 감각운동 장애의 수준을 아미노피리딘의 반복된 투여 이후(또는 이전 및 이후) 평가하기 위한 방법이 추가로 제공된다. 이러한 방법은 본원에 기재되거나 당분야에 공지된 운동, 감각 또는 감각운동 기능을 검토하기 위한 임의의 방법일 수 있다.

몇몇 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에서 사용되는 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 적어도 약 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 ng/㎖의 C_minss 또는 평균 C_minss가 인간에서 수득되도록 한다. 하나의 실시태양에서, 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 약 12 ng/㎖ 내지 20 ng/㎖ 범위의 C_minss 또는 평균 C_minss가 인간에서 수득되도록 한다. 이들중 몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘은 4-아미노피리딘이다.

구체적 실시태양에서, 본원에 기재된 임의의 방법, 투여량, 및 투여 섭생은 뇌졸중 후 안정적 운동 결함을 갖는 환자를 치료하기 위해 사용될 수 있다.

용어

명세서 및 특허청구범위를 분명하고 일관성 있게 이해하기 위해, 하기 정의가 제공된다:

본원에 사용될 경우, 용어 "약"은 특정화된 값에 특정화된 값의 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 또는 15%를 더하거나 뺀 값을 포함한다. 하나의 실시태양에서 "약"은 특정화된 값의 98 내지 102%를 의미한다. 하나의 실시태양에서 "약"은 특정화된 값의 95 내지 105%를 의미한다. 그러나, 특히, "약" 특정 값 ng/㎖은 0.6, 0.5. 0.4, 0.3, 0.2 또는 0.1 ng/㎖를 더하거나 뺀 값을 포함한다. 용어 "약"의 의미는 이것이 나타나는 문맥에 따라 분명할 것이다.

본원에 사용될 경우, 달리 유체가 언급되거나 문맥상 지시되지 않는다면, C_minss, C_maxss, C_avss 값은 일반적으로 혈장에 관한 것이다.

장애와 관련하여 용어 "개선"은 치료학적 방향으로의 매개변수의 변경을 표시한다. 본원에 사용될 경우, "개선"은 또한 다르게는 비-치료학적 방향으로 움직이거나 악화되는 매개변수의 안정화를 포함한다.

"약학적으로 허용가능한"이란, 담체, 희석제 또는 부형제가 제형의 다른 구성성분들과 화합성이어야 하고, 규제 기관, 예컨대 미 식품 의약청 또는 유럽 의약청에 의해 인간 또는 수의학적 투여(이러한 증례가 존재할 경우)가 금지되지 않아야 함을 의미한다.

아미노피리딘과 관련하여 용어 "약학적으로 허용가능한 염(들)"은, 본원에 사용될 경우, 약학적으로 허용가능한 무독성 산 또는 염기, 예컨대 무기 산 또는 염기, 또는 유기 산 또는 염기로부터 제조되는 염을 지칭한다. 하나의 실시태양에서, 약학적으로 허용가능한 염은 무기 또는 유기 산일 수 있는 약학적으로 허용가능한 무독성 산으로부터 제조된다. 하나의 실시태양에서, 무독성 산으로는, 제한되지 않지만, 무기 및 유기 산, 예컨대 아세트산, 알긴산, 안트라닐산, 벤젠설폰산, 벤조산, 캄포설폰산, 시트르산, 에텐설폰산, 폼산, 푸마르산, 푸로산, 갈락투론산, 글루콘산, 글루쿠론산, 글루탐산, 글리콜산, 하이드로브롬산, 염산, 이세티온산, 락트산, 말레산, 말산, 만델산, 메탄설폰산, 묵산, 니트르산, 파모산, 판토텐산, 페닐아세트산, 인산, 프로피온산, 살리실산, 스테아르산, 석신산, 설파닐산, 황산, 타르타르산, 및 p-톨루엔설폰산이 포함된다. 하나의 실시태양에서, 무독성 산은 염산이다. 적합한 약학적으로 허용가능한 염은 당분야의 숙련가에게 분명할 것이고, 바르게(S.M. Barge) 등의 문헌["Pharmaceutical Salts," 1977, J. Pharm. Sci. 66: 1-19]에 기재된 것을 포함하며, 이는 본원에 참고로 그의 전체가 인용되어 있다.

본원에 사용될 경우, 용어 "정상 상태"는 시간에 대해 변하지 않는 하나 이상의 특성을 갖는 시스템을 나타내거나, "정상 상태"는 시간에 대해 제한된 범위내에서 변하는 하나 이상의 특성을 갖는 시스템을 나타낸다. 전형적으로, 정상 상태는 동적 평형에 비해 더 일반적인 상태이다. 시스템이 정상 상태로 존재한다면, 시스템의 최근 관찰된 행동은 일반적으로 미래로 지속될 것이다. 많은 시스템에서, 정상 상태는 시스템이 시작되거나 개시된 후 일정 시간이 경과될 때까지 도달되지 않는다. 초기 상태는 종종 일시적 상태, 적정(titration) 기간, 착수 또는 준비 주기로 식별된다.

본원에 사용될 경우 "뇌졸중"은 또한 "뇌 발작(brain attack)"으로도 지칭될 수 있다. 뇌졸중은 뇌 영역으로의 혈류가 막혀서 뇌 세포로의 산소 및 영양소의 공급이 중단되어 세포 부분이 사멸될때 발생된다. 2가지 주요 유형의 뇌졸중이 존재한다: 허혈성 및 출혈성. 허혈성 뇌졸중은 뇌로의 혈류의 봉쇄로부터 야기되고(허혈) 거의 항상 혈관을 차단하는 혈전에 의해 야기되는 반면, 출혈성 뇌졸중은 파열된 혈관의 출혈로부터 야기된다(출혈).

다른 용어 및/또는 약어가 하기에 제공된다:

도 1은 4-아미노피리딘에 관한 정보를 보여준다.
도 2는 투약 및 행동 시험의 시간표를 보여주는 개략도이다.
도 3은 앞다리 위치잡이 시험(forelimb placing test)의 결과를 보여준다: X 축은 뇌졸중 사건 이후의 날짜 수를 나타낸다(즉, MCAO 후 날짜). Y 축은 행동 점수를 나타낸다(0 내지 12, 0은 정상 기능인 경우이고 12는 최대로 손상된 경우임). 그래프는 실시예에 기재된 바와 같이 D-1, D1, D7, D14, D21, D28, D30, D32, D42, D44, D46, D56, D58, D60에서 각각의 시험 군(즉, 군 1 내지 3)의 동물의 평균 행동 점수를 보여준다("D" = 날짜).
도 4a 내지 4d는 뒷다리 위치잡이 시험(hindlimb placing test)의 결과를 보여주고; X 축은 뇌졸중 사건 이후의 날짜 수를 나타낸다(즉, MCAO-후 날짜). Y 축은 행동 점수를 나타낸다(0 내지 6, 0은 정상 기능인 경우이고 6은 최대로 손상된 경우임). 도 4a는 실시예에 기재된 바와 같이 D-1, Dl, D7, D14, D21, D28, D30, D32, D42, D44, D46, D56, D58, D60에서 각각의 시험 군(즉, 군 1 내지 3)의 동물의 평균 행동 점수를 보여준다. 도 4b는 실시예에 기재된 바와 같이 D-1, Dl, D7, D14, D21, D28, D30, D32, D42, D44, D46, D56, D58, D60에서 군 1의 동물의 평균 행동 점수를 보여준다. 도 4c는 실시예에 기재된 바와 같이 D-1, Dl, D7, D14, D21, D28, D30, D32, D42, D44, D46, D56, D58, D60에서 군 2의 동물의 평균 행동 점수를 보여준다. 도 4d는 실시예에 기재된 바와 같이 D-1, Dl, D7, D14, D21, D28, D30, D32, D42, D44, D46, D56, D58, D60에서 군 3의 동물의 평균 행동 점수를 보여준다.
도 5는 신체 스윙(body swing) 시험의 결과를 보여주고: X 축은 뇌졸중 사건 이후의 날짜 수를 나타낸다(즉, MCAO-후 날짜). Y 축은 행동 점수를 나타낸다. 그래프는 실시예에 기재된 바와 같이 D-1, Dl, D7, D14, D21, D28, D30, D32, D42, D44, D46, D56, D58, D60에서 각각의 시험 군(즉, 군 1 내지 3)의 동물의 평균 행동 점수를 보여준다.
도 6은 뇌졸중 사건 이후(즉, MCSO)의 날짜(즉, D-1, D1, D7, D14, D21, D28, D30, D32, D42, D44, D46, D56, D58, D60)에서 각각의 시험 군(즉, 군 1 내지 3)의 동물의 평균 체중(g)을 보여준다.
도 7은 실린더 시험(cylinder test)의 결과를 보여주고: X 축은 뇌졸중 사건 이후의 날짜 수를 나타낸다(즉, MCAO-후 날짜). Y 축은 행동 점수를 나타낸다. 그래프는 실시예에 기재된 바와 같이 -1 일(수술 전), 7 일, 21 일, 30 일, 32 일, 44 일, 46 일, 58 일, 60 일에서 각각의 시험 군(즉, 군 1 내지 3)의 동물의 평균 행동 점수를 보여준다.
도 8은 실린더 시험을 받은 동물의 총 움직임 점수를 보여주고: X 축은 뇌졸중 사건 이후의 날짜 수를 나타낸다(즉, MCAO-후 날짜). Y 축은 행동 점수를 나타낸다. 그래프는 -1 일(수술 전), 7 일, 21 일, 30 일, 32 일, 44 일, 46 일, 58 일, 60 일에서 각각의 시험 군(즉, 군 1 내지 3)의 동물의 평균 행동 점수를 보여준다.
도 9는 MCAO 후 군 1, 2 및 3의 동물의 평균 경색 부피(%)를 보여준다.
도 10은 실시예 16에 기재된 임상적 프로토콜의 연구 고안을 보여준다.
도 11은 앞다리 위치잡이 시험의 결과를 보여주고: X 축은 뇌졸중 사건 이후의 날짜 수를 나타낸다(즉, MCAO-후 날짜). Y 축은 행동 점수를 나타낸다(0 내지 12, 0은 정상 기능인 경우이고 12는 최대로 손상된 경우임). 그래프는 실시예 17에 기재된 바와 같이 각각의 시험 군(즉, 비히클 및 4-AP)의 동물의 평균 행동 점수를 보여준다("D" = 날짜). 데이터는 평균 ± SEM으로 표시된다. * = p < 0.05; † = p < 0.001; ‡ = p < 0.0001.
도 12는 뒷다리 위치잡이 시험의 결과를 보여주고: X 축은 뇌졸중 사건 이후의 날짜 수를 나타낸다(즉, MCAO-후 날짜). Y 축은 행동 점수를 나타낸다(0 내지 6, 0은 정상 기능인 경우이고 6은 최대로 손상된 경우임). 그래프는 실시예 17에 기재된 바와 같이 각각의 시험 군(즉, 비히클 및 4-AP)의 동물의 평균 행동 점수를 보여준다("D" = 날짜). 데이터는 평균 ± SEM으로 표시된다. * = p < 0.05; † = p < 0.001; ‡ = p < 0.0001.
도 13은 신체 스윙 시험의 결과를 보여주고: X 축은 뇌졸중 사건 이후의 날짜 수를 나타낸다(즉, MCAO-후 날짜). Y 축은 행동 점수를 나타낸다. 그래프는 실시예 17에 기재된 바와 같이 각각의 시험 군(즉, 비히클 및 4-AP)의 동물의 평균 행동 점수를 보여준다("D" = 날짜). 데이터는 평균 ± SEM으로 표시된다. * = p < 0.05; † = p < 0.001; ‡ = p < 0.0001.

뇌졸중의 후유증으로서, 개인은 신경 손상을 겪고, 결과로서, 종종 어느 정도의 운동, 감각 또는 감각운동 장애가 남는다. 실험적 치료법은 허혈 동안 및 허혈 직후 뉴런이 사멸되는 것을 보호하는데에 초점이 맞춰져 왔다. 뇌졸중, TIA 또는 다발성 경색 증후군 이후 사람에서 기능을 복원하는 시간-제한된 tPA 투여 이외에 FDA 승인을 받은 약물은 존재하지 않는다.

본 발명은 뇌졸중을 겪은 환자의 치료, 및 몇몇 실시태양에서, 뇌졸중에 기인한 신경 손상을 앓는 환자의 치료를 제공한다. 특히, 본 발명은 뇌졸중 이후 어느 정도의 운동, 감각 또는 감각운동 장애가 남아 있는 환자의 치료를 제공한다. 이러한 장애는 극히 경미한 장애로부터 심각하고 무능화를 일으키는 장애까지의 범위일 수 있다. 이러한 장애는 허혈성 사건으로부터 또는 허혈성 에피소드(episode) 이후의 염증 및 면역 반응으로부터 뉴런 및 수초(myelin)가 손상됨에 기인할 수 있다. 이러한 장애는 뇌졸중의 결과로서 감각운동 기능을 조절하는 뇌의 영역(예를 들어, 피질, 피질하, 또는 비피질성)에서 뉴런 또는 수초에 대한 손실 또는 손상에 기인할 수 있다. 예를 들면, 이러한 장애는 운동 피질, 감각 피질, 또는 체성감각 피질에서의 뉴런 또는 수초에 대한 손실 또는 손상, 또는 감각운동 피질 또는 감각운동 기능에 책임이 있는 피질 영역에서의 뉴런 또는 수초에 대한 손실 또는 손상에 기인할 수 있다. 몇몇 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 환자는 허혈성 뇌졸중을 겪었다. 하나의 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 환자는 중간 뇌 동맥 뇌졸중을 겪었다(예컨대 중간 뇌 동맥 폐색에 기인함). 다른 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 환자는 출혈성 뇌졸중을 겪었다. 몇몇 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 환자는 뇌졸중(예컨대 출혈성 뇌졸중 또는 허혈성 뇌졸중, 예를 들어, 중간 뇌 동맥 뇌졸중)에 기인한 안정적 또는 만성 감각운동 결함을 갖는다. 또 하나의 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 환자는 다발성 경화증을 앓지 않는다.

특히 감각운동 기능을 조절하는 뇌의 영역(예를 들어, 피질, 피질하, 또는 비피질성)에서, 뇌졸중-관련된 뉴런 손실 또는 손상을 치료하기 위한 아미노피리딘(예를 들어, 4-AP 또는 3,4-DAP) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 본원에 개시된다. 특히, 4-AP 및 다른 아미노피리딘, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 뇌졸중 사건 이후 감각운동 기능의 손실을 복원하는데 유용한 것으로 본원에 개시되어 있다. 본원에 제시된 바와 같이, 바람직한 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-AP) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 뇌졸중 사건과 연관되거나 뇌졸중 이후의 감각운동 기능의 손실이 입증된 개인에게 투여된다. 특정 실시태양에서, 신경 기능의 뇌졸중-관련된 장애를 치료하기 위한 아미노피리딘(예를 들어, 4-AP 또는 3,4-DAP) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 용도가 본원에 기재되어 있다. 이들중 몇몇 실시태양에서, 효과량의 아미노피리딘으로 환자를 치료하면 뇌졸중에 기인하여 손상된 신경 기능을 회복하거나 개선시킨다.

구체적 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라서 치료되는 장애는 기억 또는 인지에 영향을 주지 않는다. 다른 구체적인 실시태양에서, 본 발명에 따라 환자에게 투여되는 아미노피리딘을 포함하는 조성물은 콜린, 콜린의 공급원, 아세틸콜린의 전구체, 또는 콜린의 전구체를 포함하지 않는다.

본 발명의 방법에 의해 치료되는 환자 또는 피험자로는, 제한되지 않지만, 인간 및 인간 이외의 척추동물, 예컨대 야생 동물, 가축 및 농장 동물이 포함된다. 특정 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 환자는 포유동물, 예를 들어, 인간, 소, 개, 고양이, 염소, 양, 말, 또는 돼지이다. 한 바람직한 실시태양에서, 환자는 인간이다.

본원에 제시된 바와 같이, 본 발명자들은 아미노피리딘, 구체적으로, 4-아미노피리딘이 인간에서의 허혈성 뇌졸중을 위한 모델인 래트에서 중간 뇌 동맥 폐색 이후 신경 기능을 복원하는데에 효과적임을 입증하였다. 실시예 2 및 실시예 17에 기재된 연구는 뇌졸중의 영구적 중간 뇌 동맥 폐색(MCAO) 래트 모델을 사용하여, 내생성 회복이 안정화된 경우 감각운동 기능에 대한 4-아미노피리딘의 효과를 평가하였다. 본원에 기재된 바와 같이, 본 발명자들은 4-아미노피리딘이 허혈성 사건 후의 감각운동 장애를 치료하기에 효과적이라는 놀라운 발견을 이루었다. 본 발명자들에 의해 수득되고 본원에 기재된 데이터로부터, 투약이 허혈성 사건 후 만성 상 동안, 예를 들어, 허혈성 사건 후 4 주 또는 8 주에 개시된 경우 조차도 효능을 나타냄을 알 수 있다. 따라서, 특정 실시태양에서, 아미노피리딘, 예를 들어, 4-아미노피리딘, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 사용하여 환자에서 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 치료하는 방법이 본원에 기재된다. 특정 실시태양에서, 치료는 뇌졸중-후 초기 만성 상 동안 및/또는 안정적 만성 상 동안이다. 몇몇 실시태양에서, 뇌졸중-후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 주; 1, 2, 3, 4, 5, 6 개월; 또는 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20 년 또는 그 이후, 또는 임의의 시점에서의 본원에 개시된 방법에 따른 환자의 치료가 본원에 기재된다. 다른 실시태양에서, 뇌졸중-후 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 또는 22 시간; 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10 일 이내 또는 이후에서의 본원에 개시된 방법에 따른 환자의 치료가 본원에 기재된다.

아미노피리딘 및 아미노피리딘을 포함하는 조성물

아미노피리딘의 구조는 당분야에 잘 공지되어 있다. 미국 특허 제5,952,357호에 제시된 바와 같이, 모노- 또는 다이아미노피리딘은 하기 구조를 갖는다:

상기 식에서,

x는 1 또는 2이다.

x가 1인 상기 구조식을 갖는 아미노피리딘은, 예를 들어, 2-아미노피리딘, 3-아미노피리딘 및 4-아미노피리딘이다. x가 2인 상기 구조식을 갖는 아미노피리딘 화합물은, 예를 들어, 2,3-다이아미노피리딘; 2,5-다이아미노피리딘; 2,6-다이아미노피리딘; 3,4-다이아미노피리딘; 4,5-다이아미노피리딘 및 4,6-다이아미노피리딘이다.

하나의 실시태양에서, 아미노피리딘은 모노- 또는 다이-아미노피리딘이다. 하나의 실시태양에서, 모노-아미노피리딘은 3-아미노피리딘 또는 4-아미노피리딘이다. 하나의 실시태양에서 다이-아미노피리딘은 3,4-다이아미노피리딘이다.

인식될 수 있듯이, 아미노피리딘의 약학적으로 허용가능한 염은 본원에 논의된 임의의 또는 모든 치료 방법에서 아미노피리딘 대신 또는 이에 추가로 사용될 수 있다. 이와 같이, 구체적 실시태양에서, 아미노피리딘의 약학적으로 허용가능한 염(즉, 상기 열거된 임의의 아미노피리딘 화합물의 임의의 약학적으로 허용가능한 염)이 뇌졸중-관련된 장애, 예를 들어, 본원에 제공된 감각운동 장애의 치료 방법에 사용된다. 이들 염은, 예를 들면, 화합물의 최종 단리 및 정제 동안 제자리에서 제조되거나, 정제된 화합물을 그의 유리 염기 형태로 적합한 유기산 또는 무기산과 별도로 반응시키고, 이렇게 형성된 염을 단리함으로써 제조된다. 몇몇 실시태양에서, 모노- 또는 다이-아미노피리딘의 염은 본 발명의 방법에서 사용된다. 또 다른 실시태양에서, 3-아미노피리딘 또는 4-아미노피리딘의 염이 사용된다. 역시 또 다른 실시태양에서, 3,4-다이아미노피리딘의 염이 사용된다. 몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘의 약학적으로 허용가능한 염은 아세트산, 알긴산, 안트라닐산, 벤젠설폰산, 벤조산, 캄포설폰산, 시트르산, 에텐설폰산, 폼산, 푸마르산, 푸로산, 갈락투론산, 글루콘산, 글루쿠론산, 글루탐산, 글리콜산, 하이드로브롬산, 염산, 이세티온산, 락트산, 말레산, 말산, 만델산, 메탄설폰산, 묵산, 니트르산, 파모산, 판토텐산, 페닐아세트산, 인산, 프로피온산, 살리실산, 스테아르산, 석신산, 설파닐산, 황산, 타르타르산, 및 p-톨루엔설폰산을 사용하여 제조된다. 하나의 실시태양에서, 1 당량의 아미노피리딘은, 본원에 사용될 경우, 1 당량 미만, 또는 1 당량 이상의 산과 함께 산 염을 형성한다. 하나의 실시태양에서 아미노피리딘은, 본원에 사용될 경우, 디하이드로클로라이드 염을 형성할 수 있다. 하나의 실시태양에서 아미노피리딘은, 본원에 사용될 경우, 포스페이트 염을 형성할 수 있다. 본원에 기재된 방법에서 사용될 수 있는 약학적으로 허용가능한 염에 대한 추가의 설명을 위해, 예를 들면, 바르게(S.M. Barge) 등의 문헌["Pharmaceutical Salts", 1977, J. Pharm. Sci. 66: 1-19]을 참고하고, 이는 본원에 참고로 그의 전체가 인용되어 있다.

바람직한 실시태양에서, 아미노피리딘 그 자체(이의 약학적으로 허용가능한 염은 아님)는, 본원에 기재된 뇌졸중-관련된 장애를 치료하는 임의의 방법에서 사용된다.

본 발명에 따라 사용하기에 바람직한 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 특이적으로 칼륨 채널을 저해하는 화합물이다. 이러한 화합물은 바람직하게는, 다른 조직에 비하여, 4-아미노피리딘 또는 3,4-다이아미노피리딘의 저해 프로파일과 유사한 뉴런성 칼륨 채널의 선택적 저해의 프로파일 또는 패턴을 나타내거나, 다른 조직에 비하여, 3,4-다이아미노피리딘 및 4-아미노피리딘에 흔한 저해 프로파일과 유사한 뉴런성 칼륨 채널의 선택적 저해의 프로파일을 나타낸다. 바람직한 아미노피리딘으로는, 제한되지 않지만, 4-아미노피리딘, 및 3,4-다이아미노피리딘이 포함된다.

본 발명에 따른 사용을 위한 아미노피리딘 또는 약학적으로 허용가능한 염은 서방성 또는 속방성 조성물로 존재할 수 있다. 특정 실시태양에서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 경구, 피하, 근육내 또는 정맥내 투여를 위해 제형화된다.

한 구체적인 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 서방성 조성물은, 치료학적으로 유리한 혈관 수준이 적어도 약 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 시간, 또는 18 시간 이상, 또는 24 시간 이상, 또는 30 시간 이상의 기간에 걸쳐 유지되도록, 지속된 속도로 투여 제형으로부터 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 방출하게 한다. 바람직하게는, 본 발명의 실시태양에 따른 경구 투여 제형에서의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 양은 약학 조성물의 t.i.d., b.i.d., 또는 q.d. 투여를 통해 치료학적으로 유용한 혈장 또는 CNS 농도를 달성한다. 용어 "서방성" 및 "복효성(extended release)"은 달리 분명히 지시되지 않는 한 일반적으로 동의어이다.

특정 실시태양에서, 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 4 mg 내지 17.5 mg(예를 들어, 4, 5, 6, 7, 7.5, 8, 9, 10, 11, 12, 12.5, 13, 14, 15, 16, 17 또는 17.5 mg)이거나, 4 내지 40 mg의 범위에 속하고, 한 구체적인 실시태양에서, 바람직하게는 서방성 조성물로 1 일 1회 또는 1 일 2회 투여된다. 구체적 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 서방성 조성물로 투여된다. 다른 특정 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 속방성 조성물로 투여된다. 특정 실시태양에서 치료 효과량의 4-아미노피리딘, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 4 mg 내지 17.5 mg(예를 들어, 4, 5, 6, 7, 7.5, 8, 9, 10, 11, 12, 12.5, 13, 14, 15, 16, 17 또는 17.5 mg)이거나, 4 내지 40 mg의 범위이고, 한 구체적인 실시태양에서, 이는 1 일 1회 또는 1 일 2회, 바람직하게는 서방성 조성물로 투여된다. 하나의 실시태양에서, 1 일 2회 투여는 매 12 시간 마다의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 투여이다.

특정 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 4 mg 내지 17.5 mg(예를 들어, 4, 5, 6, 7, 7.5, 8, 9, 10, 11, 12, 12.5, 13, 14, 15, 16, 17 또는 17.5 mg), 또는 4 mg 내지 17.5 mg, 또는 4 mg 내지 40 mg 범위의 양으로, 1 일 1회 또는 1 일 2회, 바람직하게는 서방성 조성물로 투여된다. 구체적 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 서방성 조성물로 투여된다. 다른 특정 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 속방성 조성물로 투여된다. 특정 실시태양에서 4-아미노피리딘, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 양은 4 mg 내지 17.5 mg(예를 들어, 4, 5, 6, 7, 7.5, 8, 9, 10, 11, 12, 12.5, 13, 14, 15, 16, 17 또는 17.5 mg), 또는 4 mg 내지 17.5 mg, 또는 4 mg 내지 40 mg의 범위로, 1 일 1회 또는 1 일 2회, 바람직하게는 서방성 조성물로 투여된다. 하나의 실시태양에서, 1 일 2회 투여는 매 12 시간 마다의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 투여이다.

본원에 기재된 임의의 치료 방법의 한 구체적인 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘)은 4 내지 17.5 mg(예를 들어, 4, 5, 6, 7, 7.5, 8, 9, 10, 11, 12, 12.5, 13, 14, 15, 16, 17 또는 17.5 mg) 범위의 양으로 1 일 2회 서방성 조성물로 투여되거나, 8 내지 40 mg(예를 들어, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28 ,29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 또는 40 mg) 범위의 양으로 1 일 1회 서방성 조성물로 투여된다.

하나의 실시태양에서, 아미노피리딘(예컨대 3,4-다이아미노피리딘, 4-아미노피리딘 등) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 상기 치료 효과량이 1 일 2회 서방성 조성물중 10 mg인 본 발명에 따른 방법이 제공된다.

또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 상기 치료 효과량이 1 일 2회 서방성 조성물중 5 mg인 본 발명에 따른 방법이 제공된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 상기 치료 효과량이 1 일 2회 서방성 조성물중 7.5 mg인 방법이 제공된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 상기 치료 효과량이 1 일 2회 서방성 조성물중 10 mg인 방법이 제공된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 상기 치료 효과량이 1 일 2회 서방성 조성물중 12.5 mg인 방법이 제공된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 상기 치료 효과량이 1 일 2회 서방성 조성물중 15 mg인 방법이 제공된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 상기 치료 효과량이 1 일 2회 서방성 조성물중 17.5 mg인 방법이 제공된다.

몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 상기 치료 효과량이 1 일 1회 서방성 조성물중 20 mg인 방법이 제공된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 상기 치료 효과량이 1 일 1회 서방성 조성물중 8, 10, 11, 12, 12.5, 13, 14, 15, 16, 17, 17.5, 18, 19, 20, 20.5, 21, 21.5, 22, 22.5, 23, 23.5, 24, 24.5, 25, 25.5, 26, 26.5, 27.5, 30 또는 35 mg인 방법이 제공된다.

또 다른 실시태양에서, 본 발명에 따른 방법은 치료 효과량의 4-아미노피리딘, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을, 8, 10, 11, 12, 12.5, 13, 14, 15, 16, 17, 17.5, 18, 19, 20, 20.5, 21, 21.5, 22, 22.5, 23, 23.5, 24, 24.5, 25, 25.5, 26, 26.5, 27.5, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 또는 40 mg의 총 1 일 양으로 서방성 조성물로 투여함을 포함한다. 예시적인 실시태양은 1 일 2회 투여를 포함하고, 여기서 서방성 조성물중 15 mg이 아침에 투여되고; 서방성 조성물중 10 mg이 저녁에 투여된다. 예시적인 실시태양은 1 일 2회 투여함을 포함하고, 여기서 서방성 조성물중 12.5 mg이 아침에 투여되고; 서방성 조성물중 7.5 mg이 저녁에 투여된다. 또다른 예시적인 실시태양은 1 일 1회 조성물중 총 1 일 양의 투여를 포함한다.

역시 또 다른 실시태양에서, 본 발명에 따른 방법은 치료 효과량의 4-아미노피리딘, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 8, 10, 11, 12, 12.5, 13, 14, 15, 16, 17, 17.5, 18, 19, 20, 20.5, 21, 21.5, 22, 22.5, 23, 23.5, 24, 24.5, 25, 25.5, 26, 26.5, 27.5, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 또는 40 mg의 총 1 일 양으로 속방성 조성물로 투여함을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 속방성 조성물은 1 일 3회 또는 1 일 3회 초과(예를 들어, 1 일 4, 5, 또는 6회)하여 투여된다.

특정 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 서방성(SR) 또는 복효성(ER) 매트릭스 정제로서 다양한 강도, 예를 들면, 4 내지 40 mg으로 제형화되고, 여기서 5-, 7.5-, 10-, 12.5-, 15-, 및 17.5가 현재 바람직하다. 4-아미노피리딘-SR의 한 실시태양은 10 mg이고, 이는 b.i.d. 투약에 바람직하고, 다른 투약 섭생도 본 발명의 범주에 속하고; 따라서 서방성 제형중 활성 구성성분들의 다른 양 또한 본 발명의 범주내에 포함된다.

역시 다른 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 사용되는 서방성 제형은 4-아미노피리딘-SR, 또는 암파이라(등록상표)(뉴욕주 하우토르네 소재의 아코다 테라퓨틱스)이거나, 미국 특허 제5,370,879호, 미국 특허 제5,540,938호; 미국 특허 제8,007,826호; 또는 미국 특허 공보 제US2005-0228030호(이의 각각의 내용은 본원에 참고로 이의 전체가 인용됨)에 제시된 바와 같은 4-아미노피리딘을 위한 서방성 조성물이다.

특정 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 약학 조성물, 예컨대 정제, 씹을 수 있는 정제, 환제, 캡슐, 마이크로캡슐, 용액, 현탁액, 비경구 용액, 로젠지, 분말, 과립, 트로치(troche), 시럽, 좌제, 주사, 또는 블리스터 팩으로 존재할 수 있다. 조성물은 1 일 투약량, 반일 투약량 또는 1 일 투약량의 편리한 비율을 포함하도록 하나의 투여 단위로 제형화될 수 있고, 이는 단일 정제 또는 캡슐 또는 편리한 부피의 액체일 수 있다. 하나의 실시태양에서, 용액은 수용성 염, 예컨대 하이드로클로라이드 염으로부터 제조된다. 일반적으로, 모든 조성물은 약학 화학에 공지된 방법에 따라 제조된다. 캡슐은 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 적합한 담체 또는 희석제와 혼합하고 혼합물의 적절한 양을 캡슐에 충전시킴으로써 제조될 수 있다. 일반적 담체 및 희석제로는, 제한되지 않지만, 불활성 분말 물질, 예컨대 많은 상이한 종류의 전분, 분말화된 셀룰로스, 특히 결정질 및 미정질 셀룰로스, 당, 예컨대 과당, 만니톨 및 자당, 과립 가루 및 유사한 식용 분말이 포함된다.

적합한 제형은 종래의 유기 또는 무기 첨가제, 예컨대 부형제(예를 들어, 자당, 전분, 만니톨, 솔비톨, 락토스, 글루코스, 셀룰로스, 활석, 칼슘 포스페이트 또는 칼슘 카보네이트), 결합제(예를 들어, 셀룰로스, 메틸셀룰로스, 하이드록시메틸셀룰로스, 폴리프로필피롤리돈, 폴리비닐피롤리돈, 젤라틴, 아라비아 고무, 폴리에틸렌글리콜, 자당 또는 전분), 붕해제(예를 들어, 전분, 카복시메틸셀룰로스, 하이드록시프로필전분, 저치환 하이드록시프로필셀룰로스, 중탄산나트륨, 인산 칼슘 또는 시트르산 칼슘), 윤활제(예를 들어, 마그네슘 스테아레이트, 광 무수 실릭산, 활석 또는 소디움 라우릴 설페이트), 착향료(예를 들어, 시트르산, 멘톨, 글리신 또는 오렌지 분말), 보존제(예를 들어, 벤조산 나트륨, 아황산수소 나트륨, 메틸파라벤 또는 프로필파라벤), 안정화제(예를 들어, 시트르산, 시트르산 나트륨 또는 아세트산), 현탁제(예를 들어, 메틸셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈 또는 알루미늄 스테아레이트), 분산제(예를 들어, 하이드록시프로필메틸셀룰로스), 희석제(예를 들어, 물), 및 베이스 왁스(base wax)(예를 들어, 코코아 버터, 백색 와셀린 또는 폴리에틸렌 글리콜)중 하나 이상을 사용하는 흔히 이용되는 방법에 의해 제조될 수 있다. 몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 적합한 제형은 하기 첨가제들중 1개, 2개, 3개 이상, 또는 모두를 사용하여 제조될 수 있다: 콜로이드성 이산화 규소, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스, 마그네슘 스테아레이트, 미정질 셀룰로스, 폴리에틸렌 글리콜, 및 이산화 티탄.

하나의 실시태양에서, 본 발명의 방법에서 사용되는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 정제로서 제형화된다. 정제는 직접적 압착에 의해, 습식 과립화에 의해, 또는 건식 과립화에 의해 제조될 수 있다. 특정 실시태양에서, 이들 제형은 희석제, 결합제, 윤활제, 및 붕해제, 뿐만 아니라 화합물을 혼입한다. 전형적인 희석제로는, 예를 들면, 다양한 유형의 전분, 락토스, 만니톨, 카올린(kaolin), 인산 칼슘 또는 황산 칼슘, 무기 염, 예컨대 염화 나트륨 및 분말화된 당이 포함된다. 분말화된 셀룰로스 유도체가 또한 유용하다. 하나의 실시태양에서, 약학 조성물은 락토스-부재이다. 전형적인 정제 결합제는 전분, 젤라틴 및 당, 예컨대 락토스, 과당, 글루코스 등과 같은 물질이다. 천연 및 합성 고무가 또한 편리하고, 아카시아 고무, 알지네이트, 메틸셀룰로스, 폴리비닐피롤리딘 등이 포함된다. 폴리에틸렌 글리콜, 에틸셀룰로스 및 왁스가 또한 결합제로서 작용할 수 있다. 특정 실시태양에서, 하기 부형제는 정제에 포함될 수 있다: 하이드록시프로필 메틸셀룰로스, USP; 미정질 셀룰로스, USP; 콜로이드성 이산화 규소, NF; 마그네슘 스테아레이트, USP; 및/또는 오파드라이 화이트(Opadry White).

본원에 기재된 방법에서 사용되는 약학 조성물은, 예를 들면, 2005년 12월 15일자로 공개된 미국 특허 출원 공개공보 제2005/0276851호, 및 2005년 10월 13일자로 공개된 미국 특허 출원 공개공보 제2005/0228030호에 기재된 바와 같을 수 있고, 이들 각각의 내용은 참고로 본원에 그의 전체가 인용된다. 본 발명에 따른 아미노피리딘은 용매화되지 않은 형태, 뿐만 아니라 약학적으로 허용가능한 용매, 예컨대 물, 에탄올 등으로 용매화된 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로, 용매화된 형태는 본 발명의 목적을 위해 용매화되지 않은 형태와 동등한 것으로 고려된다.

또 다른 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘, 예를 들어, 4-아미노피리딘, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 적어도 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 ng/㎖ 이상의 C_minss를 달성하는 본 발명에 따른 방법이 기재된다. 또 다른 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 적어도 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 ng/㎖ 이상의 평균 C_minss를 달성하는 방법이 기재된다. 몇몇 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 약 20 ng/㎖의 평균 C_minss(이는 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 ng/㎖의 평균 하한치 및 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 또는 27 ng/㎖의 평균 상한치를 포함함)를 달성하는 방법이 기재된다. 하나의 실시태양에서, 일정량의 약물이 개별 환자에게 제공되고(예를 들어, 투약량) 여기서 투약량은 규범 집단 또는 기준 집단에 투여될 경우 적어도 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 ng/㎖ 이상의 평균 평균 C_minss를 수득하는 양에 상응한다. 기준 집단에서의 유체 또는 조직 수준(예를 들어, C_minss, C_maxss, C_avss)은 규범값으로 지칭될 수 있다. 또 다른 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 약 5 내지 25 ng/㎖, 10 내지 18 ng/㎖, 13 내지 15 ng/㎖, 또는 15 내지 30 ng/㎖ 범위의 C_minss를 달성하는 방법이 기재된다. 또 다른 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 약 20 ng/㎖의 평균 C_minss를 달성하는 방법이 기재된다. 또 다른 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 약 20 ng/㎖의 의 C_minss를 달성하는 방법이 기재되고; 특정 실시태양에서, 약 20 ng/㎖의 C_minss는 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 ng/㎖의 하한치, 및 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 또는 27 ng/㎖의 상한치를 포함한다.

다른 실시태양에서, 5 내지 25 ng/㎖, 10 내지 20 ng/㎖, 15 내지 30 ng/㎖, 또는 12 내지 20 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득되도록 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 투여함을 포함하는, 환자에서 뇌졸중-관련된 운동, 감각, 또는 감각운동 장애를 치료하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시태양에서, 환자에서 뇌졸중-관련된 운동, 감각 또는 감각운동 장애를 치료하는 방법은 적어도 12 ng/㎖ 내지 15 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득되도록 하는 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 상기 환자에게 투여함을 포함한다. 또 다른 실시태양에서, 환자에서 뇌졸중-관련된 운동, 감각 또는 감각운동 장애를 치료하기 위한 방법은 적어도 13 ng/㎖ 내지 15 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득되도록 하는 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 상기 환자에게 투여함을 포함한다. 하나의 실시태양에서, 일정량의 약물이 개별 환자에게 제공되고(예를 들어, 투약량), 여기서 투약량은 규범 또는 기준 집단에 투여될 경우 적어도 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 ng/㎖ 이상의 평균 C_minss를 수득하는 양에 상응하고; 기준 집단에서의 혈장 수준(예를 들어, C_minss, C_maxss, C_avss)은 규범 값으로서 지칭될 수 있다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따른 방법은 적어도 11 또는 12 ng/㎖의 C_minss가 수득되도록 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 투여함을 포함한다.

특정 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 환자에서 약 2 시간 내지 약 6 시간의 T_max를 달성하는 본 발명에 따른 방법이 제공된다. 이들중 몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 서방성 조성물로 투여된다(예를 들어, 1 일 1회, 1 일 2회 또는 1 일 3회). 이들 실시태양중 하나에서, 아미노피리딘은 4-아미노피리딘이다. 4-아미노피리딘의 치료 효과량은 본원에 개시된 임의의 양일 수 있다. 하나의 실시태양에서, 환자는 인간이다. 몇몇 실시태양에서, 1 일 1회, 1 일 2회 또는 1 일 3회 서방성 조성물로 투여되는 치료 효과량의 4-아미노피리딘은 인간에서 약 2 시간 내지 약 6 시간의 T_max를 달성한다.

또 다른 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘, 예를 들어, 4-아미노피리딘, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 60, 59, 58, 57, 56, 55, 54, 53, 52, 51, 50, 49, 48, 47, 46, 45, 44, 43, 42, 41, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 또는 20 ng/㎖ 이하의 C_maxss를 달성하는 본 발명에 따른 방법이 제공된다. 또 다른 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 50, 49, 48, 47, 46, 45, 44, 43, 42, 41, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 또는 20 ng/㎖ 이하의 C_maxss를 달성하는 본 발명에 따른 방법이 제공된다. 하나의 실시태양에서, 일정량의 약물이 개별 환자에게 제공되고(예를 들어, 투약량), 여기서 투약량은 규범 또는 기준 집단에 투여될 경우 50, 49, 48, 47, 46, 45, 44, 43, 42, 41, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 또는 20 ng/㎖ 이하의 평균 C_maxss를 수득하는 양에 상응한다. 기준 집단에서의 유체 또는 조직 수준(예를 들어, C_minss, C_maxss, C_avss)은 규범 값으로 지칭될 수 있다. 또 다른 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 약 15 내지 30 ng/㎖, 25 내지 35 ng/㎖, 25 내지 40 ng/㎖, 또는 35 내지 55 ng/㎖ 범위의 C_maxss를 달성하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 약 30 ng/㎖의 C_maxss를 달성하는 방법이 제공된다. 또 다른 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 또는 30 ng/㎖의 하한치, 및 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 또는 60 ng/㎖의 상한치를 포함하는 범위의 C_maxss를 달성하는 방법이 제공된다.

또 다른 실시태양에서, 상기 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 50, 49, 48, 47, 46, 45, 44, 43, 42, 41, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 또는 20 ng/㎖ 미만의 평균 C_maxss를 달성하는 방법이 제공된다. 하나의 실시태양에서, 일정량의 약물이 개별 환자에게 제공되고(예를 들어, 투약량), 여기서 투약량은 규범 또는 기준 집단에 투여될 경우 50, 49, 48, 47, 46, 45, 44, 43, 42, 41, 40, 39, 38, 37, 36, 35, 34, 33, 32, 31, 30, 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 또는 20 ng/㎖ 이하의 평균 C_maxss를 수득하는 양에 상응하고; 기준 집단에서의 혈장 수준(예를 들어, C_minss, C_maxss, C_avss)은 규범 값으로서 지칭될 수 있다.

또 다른 실시태양에서, 본원에 실질적으로 기재된 바와 같은 조성물의 단위 투약량이 사용된다.

피험자에게 투여되는 아미노피리딘, 이의 약학적으로 허용가능한 염, 또는 아미노피리딘을 포함하는 조성물의 실제 투여량은 신체적 및 생리학적 인자, 예컨대 연령, 성별, 체중, 증상의 위중성, 치료되는 질환의 유형, 이전의 또는 동시적인 치료 개입, 피험자의 특발성 질환 및 투여 경로에 의해 결정될 수 있다. 이들 인자는 당분야의 숙련가에 의해 쉽게 결정된다. 투여를 담당하는 의사는 전형적으로 조성물중 활성 구성성분(들)의 농도 및 개별 피험자를 위한 적절한 투약량(들)을 결정할 것이다. 투여량은 환자 상태가 임의로 복합적이거나 변경된 경우 개인의 담당 의사에 의해 조사될 수 있다.

투여의 용이성 및 투여량의 균일성을 위해 단위 투여형으로 비경구적 조성물을 제형화하는 것이 특히 유리하다. 단위 투여형은 본원에 사용될 경우 치료되는 피험자를 위해 통일된 투여량으로서 적합한 물리적인 별개의 단위를 지칭하고; 각각의 단위는 필요한 약학 담체와 함께 원하는 치료 효과를 생성하도록 계산된 치료학적 화합물의 예정된 양을 포함한다. 본 발명의 단위 투여형을 위한 세부사항은 (a) 치료 화합물의 고유의 특징 및 달성되는 특정 치료 효과, 및 (b) 환자에서 선택된 증상의 치료를 위한 이러한 치료 화합물을 배합하는 당분야에 내재하는 제한점에 의해 결정되거나 직접적으로 이에 의존된다. 단위 투여형은 정제 또는 블리스터 팩일 수 있다. 특정 투여 프로토콜에서, 환자는 하나 보다 많은 단일 단위 투약량을 한번에 이용할 수 있고, 예를 들어, 블리스터 팩의 별도의 블리스터에 포함된 2개의 정제를 소비한다.

광학이성질체 - 부분입체이성질체 - 기하이성질체 - 호변이성질체: 본원에 기재된 화합물은 비대칭 중심을 갖고 거울상 이성질체로서 존재할 수 있다. 본 발명에 따른 화합물이 둘 이상의 비대칭 중심을 갖는 경우, 이들은 부분입체이성질체로서 추가로 존재할 수 있다. 본 발명은 실질적으로 순수한 분해된 거울상이성질체, 이의 라세미 혼합물, 뿐만 아니라 부분입체이성질체의 혼합물과 같은 모든 가능한 입체이성질체를 포함한다. 특정 위치에서의 한정적 입체화학없이 화학식이 제시된다. 본 발명은 이러한 화학식 및 이의 약학적으로 허용가능한 염의 모든 입체이성질체를 포함한다. 거울상이성질체의 부분입체이성질체 쌍은, 예를 들면, 적합한 용매로부터의 분별 결정에 의해 분리될 수 있고, 이렇게 수득된 거울상이성질체의 쌍은 종래의 수단에 의해, 예를 들면 광학 활성 산 또는 염기를 분해제로서 사용하여 또는 키랄성 HPLC 칼럼 상에서 개별 입체이성질체로서 분리될 수 있다. 추가로, 일반식의 화합물의 거울상 이성질체 또는 부분입체이성질체는 공지된 배좌의 광학적으로 순수한 출발 물질 또는 시약을 사용하여 입체특이적 합성에 의해 수득될 수 있다.

본 발명의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 환자에서 뇌졸중과 연관된 장애를 치료하기에 위해 치료학적으로 효과적인 투여량으로 투여된다. 특정 실시태양에서, 치료는 환자에서 장애의 증후의 정도를 치료되지 않은 피험자에 비하여 적어도 약 10%, 더 바람직하게는 20%, 더 바람직하게는 적어도 약 40%, 더욱 더 바람직하게는 적어도 약 60%, 여전히 더 바람직하게는 적어도 약 80% 감소시킨다. 이러한 백분율 변화 정량화는 바람직하게는 결과의 측정값을 연속적 선형 등급로 제공하는 감각운동 기능에 대한 검정, 예컨대 T25FW 등에 적용된다. 감각운동 기능에 대한 다른 시험은 백분율 변화로서 표시되지 않을 것이지만, 적절한 통계적 비교에 의해 유의적인 변화를 초래할 것으로 예측된다. 이러한 시험은 특정 기술을 수행하는 능력에 값을 할당하는 반정량적 측정을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 대조 군에 비교하여 뇌졸중-관련된 감각운동 장애(예를 들어, 특정 작업 또는 기술을 수행하는 환자의 능력에 의해 평가될 경우)에 있어서 통계적으로 유의적인 개선을 초래한다. 이러한 대조 군은 치료의 개시 이전에 평가되는 과제 또는 기술을 수행하는 환자의 능력일 수 있다.

감각운동 장애 및 본 발명에 따른 아미노피리딘 투여의 결과

본 발명은 포유동물에서 뇌졸중-유도된 신경 손상을 치료하는 방법, 특히, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 몇몇 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 환자는 하나 이상의 감각운동 장애(예를 들어, 감각운동 장애의 하나 이상의 증후로 진단되거나 이를 나타냄)를 갖는다. 특정 실시태양에서, 본원에 개시된 방법에 따라 치료되는 환자는 감각운동 기능에 책임이 있거나 이에 관여된 피질 영역 또는 다른 영역에서의 뉴런 손상(예를 들어, 뉴런 손실 또는 탈수초)에 기인한 장애를 갖는다. 본 발명의 바람직한 실시태양은 뇌졸중으로부터 야기된 감각운동 기능의 장애를 치료하기 위해 4-아미노피리딘을 사용하는 방법에 관한 것이다. 이러한 치료는 본원에 기재된 임의의 투약량 및 투여량 섭생을 투여함으로써 이루어질 수 있다.

본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애, 또는 감각운동 기능의 장애로는, 제한없이: 운동실조, 전신 제어 장애, 협응 또는 균형 장애, 신체 감각에서의 장애, 고유 수용 감각 장애, 보행 장애, 반사작용 장애, 재주(dexterity) 장애, 인내력 장애, 손 기능 장애, 미세 손 협응 손상 또는 장애, 반사항진, 손 강도 감손, 손 재주 장애, 그립 강도 감손, 근육 약화, 근긴장도 장애, 운동 범위 감손, 경직, 강도 감손/약화, 미진, 사지 기능 장애, 상지 기능 장애, 하지 기능 장애, 하지 근육 강도의 감손, 보행 장애(예를 들어, 감소된 보행 속도), 언어 장애(예를 들어, 구음 장애), 턱 기능 장애, 저작 기능 장애, 또는 턱 관절 장애가 포함된다. 하나의 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 감각운동 장애는 고유 수용 감각 장애이다. 하나의 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 감각운동 장애는 구강 운동 기능 장애이다. 특정 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 감각운동 장애는 언어 장애(예를 들어, 구음 장애, 실행증, 또는 발성 장애), 또는 저작 기능 장애 및/또는 연하(예를 들어, 연하곤란)이다. 하나의 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 감각운동 장애는 시각 장애, 예컨대 감각 및/또는 시각 기능의 안구 운동 장애이다. 다른 특정 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 감각운동 장애는 보행 속도 장애, 손 재주 장애, 손 강도에서의 장애, 또는 상지 경직이다. 몇몇 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 감각운동 장애는 푸글-메이어 평가(Fugl-Meyer Assessment)를 사용하여 측정될 경우의 운동 및/또는 감각 기능 장애이다. 특정 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 감각운동 장애는 운동 기능 장애, 균형감 장애, 감각 장애, 또는 관절 기능 장애이다. 구체적 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 감각운동 장애는 안면 마비, 사지 마비 또는 손 마비이다.

특정 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애로는, 제한되지 않지만 보행 장애, 사지 기능 장애, 하지 기능 장애, 하지 근육 강도의 감손, 근긴장도 감손, 경직, 상지 기능 장애, 손 기능 장애, 미세 손 협응 장애, 그립 강도 감손, 균형 또는 협응 장애, 전신 제어 장애, 턱 기능 장애, 저작 기능 장애, 또는 턱 관절 장애가 포함된다.

하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 하지 기능 장애 및/또는 하지 근육 강도 감손이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 하지 운동 기능 장애이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 보행 장애(예컨대 감소된 보행 속도)이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 상지 기능(예를 들어, 상지 운동 기능) 장애이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 사지 마비이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 근긴장도 감손 또는 경직(예를 들어, 사지 경직)이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 균형 또는 협응 장애이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 감각 장애이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 구강 운동 기능 장애이다. 하나의 특별한 실시태양에서, 구강 운동 기능 장애는 입술 및/또는 혀의 근육 강도의 감손이다(예컨대 구음 장애에서). 또 다른 특정 실시태양에서, 구강 운동 기능 장애는 입술 및/또는 혀의 근육의 협응에 있어서의 장애이다(예컨대 실행증에서). 역시 또 다른 특정 실시태양에서, 구강 운동 기능 장애는 호흡에 관여된 근육 강도의 감손이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료된 감각운동 장애는 언어 장애(예를 들어, 구음 장애, 실행증, 발성 장애)이다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 안면, 혀 및/또는 설인(glossopharyngeal) 근육의 감각운동 교란이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 저작 및/또는 연하 장애(예를 들어, 연하곤란)이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 턱 기능 또는 턱 관절 장애이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 안면 마비이다. 하나의 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 손 기능 장애, 손 협응 장애(예를 들어, 미세 손 협응 장애), 그립 강도 감손, 손 재주 장애, 또는 손 마비이다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따라 치료되는 감각운동 장애는 시각 장애 또는 교란이다. 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 시각 장애는 시각적 기능의 감각 및/또는 안구 운동 장애이다. 하나의 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 시각 장애는 시각 기능의 감각 장애이다. 하나의 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 시각 장애는 시각 기능의 안구 운동 장애이다.

하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 투여는 하나 이상의 감각운동 기능을 복원시킨다. 이는 자명하거나, 예를 들어, 보행 능력, 균형감, 직립 능력, 손 강도, 재주, 반사 신경, 삶의 질에 대한 당분야에 승인된 측정법에 대한 대답에 있어서의 개선, 또는 본원에 기재되거나 당분야에 공지된 임의의 다른 감각운동 기능의 개선으로서 측정된다.

특정 실시태양에서, 일정량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여함으로써 환자를 치료하는 것은 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 경감시키거나 방지하는데 효과적이다. 하나의 실시태양에서, 일정량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여함으로써 환자를 치료하는 것은 감각운동 장애의 증후들의 개시를 예방하는데 효과적이다. 다른 실시태양에서, 일정량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여함으로써 환자를 치료하는 것은 뇌졸중 -관련된 감각운동 장애의 증후를 경감시키는데(예를 들어, 위중성을 감소시키는데) 효과적이다. 역시 다른 실시태양에서, 일정량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여함으로써 환자를 치료하는 것은 뇌졸중-관련된 감각운동 장애의 기간을 감소시키는데 효과적이다. 한 구체적인 실시태양에서, 일정량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여함으로써 환자를 치료하는 것은 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 제거하고/하거나 뇌졸중에 의해 손상된 감각운동 기능을 되찾는데 효과적이다. 특정 실시태양에서, 일정량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여함으로써 환자를 치료하는 것은 뇌졸중에 의해 손상된 감각운동 기능을 복원하는데 효과적이다. 이들중 몇몇 실시태양에서, 뇌졸중은 허혈성 뇌졸중이다. 하나의 실시태양에서, 뇌졸중은 중간 뇌 동맥 뇌졸중(예컨대 중간 뇌 동맥 폐색에 기인함)이다. 다른 실시태양에서, 뇌졸중은 출혈성 뇌졸중이다.

또 다른 실시태양에서, 환자에서 감각운동 기능의 개선을 유지하는 방법이 제공되고, 여기서 감각운동 기능은 뇌졸중의 결과로서 손상되며, 이러한 방법은 4-아미노피리딘의 투여 동안 환자에서 손상된 감각운동 기능의 개선을 미리 달성한 후에 치료 효과량의 아미노피리딘(예컨대 3,4-다이아미노피리딘, 4-아미노피리딘 등) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 투여함을 포함한다.

하나의 실시태양에서, 감각운동 기능의 뇌졸중-관련된 손상을 갖는 환자에서 이러한 기능의 개선(들)을 유지하기 위한 방법은 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 상기 환자에게 연장된 기간에 걸쳐 투여함을 포함한다. 또 다른 실시태양에서, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 갖는 환자에서 지속된 개선을 달성하는 방법은 치료 효과량의 아미노피리딘(예컨대 3,4-다이아미노피리딘, 4-아미노피리딘 등) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 상기 환자에게 연장된 기간 동안 연속적으로 투여함을 포함한다.

구체적 실시태양에서, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 겪는 환자들 사이에서의 개선(들)은 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 또는 22 주; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 또는 18 개월 이상; 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6 년 이상, 또는 5 년 초과의 기간에 걸쳐 일어난다.

감각운동 기능의 장애 및 감각운동 기능의 개선을 비롯한 감각운동 기능은, 당분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 평가될 수 있다. 예를 들면, 평가 시험으로는, 제한없이, 25 걸음 보행 시간(T25FW), 2 분 보행, 6 분 보행(6MW), 상자 및 블럭(Box & Block) 시험, 식스 스팟 스텝 시험(Six Spot Step Test), 하지 기능을 위한 도수 근력 검사, LEMMT, 애쉬워쓰(Ashworth) 등급, 변형된 애쉬워쓰 등급, 그립 강도 시험, 9-홀 페그보드 시험(9-hole peg test), 미세한 손가락 운동, 상지 기능을 위한 신속한 손가락 교차 시험, 감각 기능을 점수화하는 기능적 시스템, 및 운동실조를 위한 손가락-코 맞대기 시험(finger-to-nose) 및 발꿈치-정강이 시험(heel-to-shin)이 포함된다. 특히, T25W는 보행을 측정하기 위해 사용될 수 있고, LEMMT는 하지 근육 강도를 측정하기 위해 사용될 수 있으며, 변형된 애쉬워쓰 등급은 경직을 측정하기 위해 사용될 수 있다. 당분야에 승인된 상지 기능 평가로는, 제한없이, 수행력 등급-자가-보고(performance scale-self-report) 측정, 핸드-헬드(hand-held) 동력측정법, 및 상지 인덱스(UEI)가 포함된다. 감각운동 기능을 측정하기 위해 사용될 수 있는 다른 평가 시험으로는, 제한되지 않지만: 베르그 균형 등급(BBS: Berg Balance Scale), 켈라(Kela) 협응 시험, 자세 조절 시험(Postural Stability Test), 10-미터 보행 시간 시험, 어깨 잡아당김 시험(Shoulder Tug Test), 그립 강도, 무릎 신근의 최대 정적수축력(isometric force), 근지구력 시험, 수동적 하지직거상 시험(passive straight leg raise), TEMPA(노인들을 위한 상지 수행력 시험), 젭센-테일러(Jebsen-Taylor) 손 기능 시험, 팔, 어깨 및 손의 불능(DASH: Disabilities of the Arm, Shoulder and Hand) 설문조사, 및 손 기능 측정-36(MAM-36: Manual Ability Measure-36)이 포함된다. 감각운동 기능을 측정하기 위해 사용될 수 있는 또 다른 평가는 푸글-메이어 평가이다. 몇몇 실시태양에서, 푸글-메이어 평가는 운동 기능(예를 들어, 하지 운동 기능 및/또는 상지 운동 기능), 균형, 감각 및/또는 관절 기능을 측정하기 위해 사용될 수 있다. 구체적 실시태양에서, 푸글-메이어 평가는 하지 운동 기능, 상지 운동 기능, 및/또는 감각을 측정하기 위해 사용된다. 이러한 평가는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 본원에 개시된 방법에 따라 환자에게 투여하기 전 및 후에 수행될 수 있다. 예를 들면, 이러한 기능의 뇌졸중-관련된 장애를 앓는 환자의 감각운동 기능은 아미노피리딘을 투여하기 전 및/또는 아미노피리딘을 투여한 후, 예를 들어, 본원에 기재된 방법에 따른 치료를 개시한지 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 주; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 개월; 또는 1, 2, 3, 4, 5 년째 또는 그 이후에 평가될 수 있다.

한 구체적인 실시태양에서, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애에서 치료학적 결과는 하기 시점중 임의의 하나, 둘, 셋, 넷, 다섯 이상의 시점에서, 또는 이들 각각에서, 및/또는 하기 시점들중 임의의 한 시점 이후에 평가되거나 검출된다: 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 의한 치료 개시 후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 및 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 및 6.5 년.

아미노피리딘의 투여 방식

몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따른 방법은 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 1 일 1회, 1 일 2회 또는 1 일 3회 투여함을 포함한다. 특정 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 경구적으로 투여된다. 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 정맥내로 투여된다. 역시 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은, 예를 들어, 근육내로 또는 피하로 투여된다.

특정 실시태양에서, 본 발명의 방법은 뇌졸중-후 급성 상 동안 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 투여함을 포함한다. 뇌졸중 이후의 급성 상은 뇌졸중-후 뇌 조직에 대한 진행중인 손상(예를 들어, 허혈성 병변의 팽창)을 특징으로 한다. 예를 들면, 급성 상 동안, 뇌 조직에 대한 진행중인 손상은 뇌졸중에 기인한 초기 손상이 초래되는 코어 대역을 둘러싼 반음영 대역에서 일어난다. 이러한 손상은, 예를 들어, 산소 박탈에 기인한 세포 사멸을 포함할 수 있다. 전형적으로, 급성 상은 뇌졸중의 개시 시점으로부터 뇌졸중-후 대략 6시간 까지 지속된다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 뇌 조직에 대한 손상이 진행되는 뇌졸중-후 기간 동안 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 투여함을 포함한다. 하나의 실시태양에서, 이러한 치료는, 허혈성 병변이 여전히 팽창되는 때인 뇌졸중-후 기간 동안이다. 예를 들면, 환자는 뇌졸중-후 1, 2, 3, 4, 5 또는 6 시간이내의 급성 상 동안 본 발명에 따라 치료될 수 있다.

몇몇 실시태양에서, 본 발명의 방법은 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 뇌졸중-후 초기 만성 상 동안 투여함을 포함한다. 뇌졸중-후 급성 상에 이어, 설치류 종에서 수 주(예를 들어, 4, 5, 또는 6 주 이하) 동안, 인간에서 수 개월(예를 들어, 4, 5, 6, 7, 8, 10, 11 또는 12 개월 이하) 동안 지속될 수 있는, 신경 기능의 자발적인 회복 기간-초기 만성 상-이 존재한다. 초기 만성 상은 뇌졸중에 의해 손상된 신경 기능, 특히, 감각운동 기능의 진행되고 지속되는 내생성 회복을 특징으로 한다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 뇌졸중-후 기간 동안(이 동안 신경 기능, 예를 들어, 감각운동 기능의 자발적 또는 내생성 회복이 관찰됨) 투여함을 포함한다. 예를 들면, 인간 환자는 초기 만성 상 동안, 뇌졸중-후 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 24 시간; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6 주, 또는 1, 2, 3, 또는 4 개월째 또는 그 이후, 및 뇌졸중-후 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 개월, 또는 1 년 이전에 본 발명에 따라 치료될 수 있다.

다른 실시태양에서, 본 발명의 방법은 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 뇌졸중-후 안정적 만성 상 동안 투여함을 포함한다. 뇌졸중-후 안정적 만성 상은 뇌졸중에 의해 손상된 기능, 특히 감각운동 기능의 자발적 또는 내생성 개선이 거의 또는 전혀 없음을 특징으로 한다. 전형적으로, 설치류 종에서 안정적 만성 상은 뇌졸중-후 4 내지 6 주 이후에 도달되고; 인간 종에서는 이는 뇌졸중-후 4 내지 8 개월 이후(때때로 1년 이후)에 도달된다. 안정적 만성 상은 종종 안정적 일생의 불능, 특히 안정적 일생의 감각운동 장애를 나타내고, 이는 치료의 부재시 측정될만큼 개선되지 않는다. 특정 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 뇌졸중-후 안정적 만성 상 동안 투여될 경우 환자에서 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 개선시키는데 효과적이다. 몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 뇌졸중-후 기간 동안 투여함을 포함하고, 이 동안 신경 기능, 예를 들어, 감각운동 기능의 자발적 또는 내생성 개선이 거의 또는 전혀 관찰되지 않는다. 예를 들면, 인간 환자는 본 발명에 따라서 안정적 만성 상 동안 뇌졸중-후 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 개월; 1, 2, 3, 4, 5, 7, 10, 12, 15, 20 년에, 또는 이후에, 또는 임의의 시점에 치료될 수 있다.

본 발명의 하나의 실시태양에서, 치료는 뇌졸중-후 급성 상 이후에 개시된다. 본 발명의 하나의 실시태양에서, 치료는 뇌졸중-후 급성 상 동안 개시되고 이후 여전히 지속된다. 하나의 실시태양에서, 치료는 뇌졸중-후 초기 만성 상 이후에 개시된다. 또 다른 실시태양에서, 치료는 뇌졸중-후 초기 만성 상 동안 개시되고 이후 여전히 지속된다. 역시 또 다른 실시태양에서, 치료는 뇌졸중-후 안정적 만성 상 동안 개시된다.

아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 치료 이점은 포유동물에게 치료 효과량을 투여함으로써 달성될 수 있다. 특정 실시태양에서, 치료는 뇌졸중 후 1 시간, 2 시간, 6 시간, 8 시간, 12 시간, 24 시간, 30 시간, 36 시간, 42 시간, 2 일, 3 일, 4 일, 5 일, 1 주, 2 주, 3 주, 4 주째, 또는 그 이전 또는 이후에 수행된다. 특정 실시태양에서, 치료는 뇌졸중 후 3 시간, 6 시간, 8 시간, 12 시간, 24 시간, 30 시간, 36 시간, 42 시간, 2 일, 3 일, 4 일, 5 일, 1 주, 2 주, 3 주, 4 주, 8 주째, 또는 그 이후에 수행된다. 하나의 실시태양에서, 치료는 뇌졸중 이후 6 시간째 또는 이후에 수행된다. 하나의 실시태양에서, 치료는 뇌졸중 후 24 시간째 또는 이후에 수행된다. 하나의 실시태양에서, 치료는 뇌졸중 후 7 일(1 주)째 또는 이후에 수행된다. 하나의 실시태양에서, 치료는 뇌졸중 후 14 일(2 주)째 또는 이후에 수행된다. 하나의 실시태양에서, 치료는 뇌졸중 후 1 개월째 또는 이후에 수행된다. 하나의 실시태양에서, 치료는 뇌졸중 후 4 개월째 또는 이후에 수행된다. 하나의 실시태양에서, 치료는 뇌졸중 후 6 개월째 또는 이후에 수행된다. 하나의 실시태양에서, 치료는 뇌졸중 후 8 개월째 또는 이후에 수행된다. 하나의 실시태양에서, 치료는 뇌졸중 후 12 개월째 또는 이후에 수행된다. 한 구체적인 실시태양에서, 본 발명의 방법은 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포유동물에게 투여함을 포함하고, 여기서 투여는 허혈성 사건 이후 적어도 2 일, 3 일, 4 일, 7 일 또는 10 일에, 포유동물에서 허혈성 사건 이후 초기 만성 상 동안 및/또는 안정적 만성 상 동안 감각운동 기능의 개선을 촉진하기에 충분한 치료 효과량으로 수행된다. 특정 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 뇌졸중-후 임의의 시점에 수행된다. 구체적 실시태양에서, 본 발명의 방법은 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포유동물에게 투여함을 포함하고, 여기서 투여는 뇌졸중-후 임의의 시점에서, 감각운동 기능의 개선을 촉진하기에 충분한 양으로 수행된다.

특정 실시태양에서, 본 발명은 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을, 뇌졸중-후 1, 2 또는 3 일에 시작하고, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 일; 뇌졸중-후 1 주 또는 1 주 초과; 뇌졸중-후 2 주 또는 2 주 초과; 뇌졸중-후 3 주 또는 3 주 초과; 뇌졸중-후 4 주 또는 4 주 초과; 뇌졸중-후 1 개월 또는 1 개월 초과; 뇌졸중-후 2 개월 또는 2 개월 초과; 뇌졸중-후 3 개월 또는 3 개월 초과; 뇌졸중-후 4 개월 또는 4 개월 초과; 뇌졸중-후 5 개월 또는 5 개월 초과; 뇌졸중-후 6 개월 또는 6 개월 초과까지를 포함하여 포유동물에게 투여함을 포함한다. 특정 실시태양에서, 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 뇌졸중-후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8 주째 또는 이후에 환자에게 투여함을 포함한다.

본 발명의 또 다른 양태에 따라서, 신경 기능, 예를 들어, 감각운동 기능을, 포유동물에서 허혈성 사건 이후 급성 상을 지난 기간 동안 개선시킴을 촉진하기 위한 방법이 제공된다. 한 구체적인 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료는 급성 상이내에 시작할 수 있지만, 급성 상을 지나 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6 주, 또는 6 주 이후를 포함한다.

특정 실시태양에서, 투여 단계는 뇌졸중 후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 시간; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 15, 20, 25, 또는 30 년 이내 또는 이후에 시작된다. 다른 실시태양에서, 투여 단계는 뇌졸중 후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 시간; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 15, 20, 25, 또는 30 년 이내 또는 이후에 시작된다.

본 발명의 몇몇 실시태양에서, 환자에서 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 치료하는 방법은: 치료 효과량의 아미노피리딘(예컨대 3,4-다이아미노피리딘, 4-아미노피리딘 등) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 상기 환자에게 일정 기간 동안 투여함을 포함한다. 특정 실시태양에서, 투여 단계는: 뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 시간; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 15, 20, 25, 또는 30 년 이내 또는 이후에 시작된다. 상기의 추가의 실시태양에서, 투여 단계는 적어도 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 및 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 15, 20, 25, 30, 또는 35 년 또는 그 이상의 기간 동안 지속된다.

몇몇 실시태양에서, 치료 섭생(본원에 기재된 임의의 투약량 및 투여 빈도로부터 선택될 수 있는 특정 투약량 및 투여 빈도)은 일정 기간에 걸쳐, 예를 들어, 적어도 4 일, 적어도 1 주, 적어도 2 주, 적어도 3 주, 적어도 1 개월, 적어도 2 개월, 적어도 3 개월, 적어도 4 개월, 또는 적어도 6 개월 동안 안정하다.

한 구체적인 실시태양에서, 본 발명은 치료 효과량의 아미노피리딘(예컨대 3,4-다이아미노피리딘, 4-아미노피리딘 등) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 투여함을 포함하는, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 상기 환자에서 단기간의 초기, 또는 비-만성 성에 걸쳐 효과적으로 치료하는 방법을 포함한다. 본원에 제공된 특정 실시태양에서, 환자는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염으로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 주; 1, 2, 3, 또는 4 개월의 기간 동안 치료된다. 치료는 이러한 기간을 지나 지속될 수 있고 이는 본 발명의 범주에 속함을 알아야 한다.

또 다른 실시태양에서, 본 발명은 치료 효과량의 아미노피리딘(예컨대 3,4-다이아미노피리딘, 4-아미노피리딘 등) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 연장된 기간 동안 투여함을 포함하는, 초기 만성 및/또는 안정한 만성 상에 걸쳐 환자에서 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 효과적으로 치료하는 방법을 포함한다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명은 치료 효과량의 아미노피리딘(예컨대 3,4-다이아미노피리딘, 4-아미노피리딘 등) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 연장된 기간 동안 투여함을 포함하는, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 오랫 동안 치료하는 방법을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 연장된 기간은 적어도 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 또는 22 주; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 또는 18 개월; 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 년 이상, 또는 10 년 초과이다.

특정 실시태양에서, 치료 효과량의 아미노피리딘, 예를 들어, 4-아미노피리딘, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 정맥내로 뇌졸중 이후 급성 상 동안 투여된다. 몇몇 실시태양에서, 치료 효과량의 아미노피리딘, 예를 들어, 4-아미노피리딘, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 뇌졸중-후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 일, 또는 1, 2, 3, 4, 8 주 이내에 정맥내로 투여된다. 정맥내 투여는 1 일 1회, 1 일 2회, 1 일 3회, 2 일 1회, 3 일 1회, 또는 주 1회 일어날 수 있다. 하나의 실시태양에서, 환자는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 단일 정맥내 투여로 치료된다.

또 다른 실시태양에서, 치료 효과량의 아미노피리딘, 예를 들어, 4-아미노피리딘, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 뇌졸중 이후 경구적으로 급성 상, 초기 만성 상 및/또는 안정적 만성 상 동안 투여된다. 한 구체적인 실시태양에서, 치료 효과량의 아미노피리딘, 예를 들어, 4-아미노피리딘, 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 뇌졸중-후 경구적으로 단지 초기 만성 상 동안 및/또는 안정적 만성 상 동안 투여된다. 경구 투여는 1 일 1회, 1 일 2회, 1 일 3회, 또는 1 일 3회 이상, 속방성 또는 서방성 조성물로 수행될 수 있다.

아미노피리딘 화합물의 투여는 본원에 기재된 바와 같이 다양한 기법에 의해 달성될 수 있다. 본 발명에 따른 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 투여는, 예를 들어, 화합물을 표적 조직 내로 또는 조직 상으로 투여하거나; 화합물을 환자에게 전신으로 제공함으로써, 예를 들어, 정맥내 주사(예를 들어, 비경구적) 또는 경구 투여(예를 들어, 장 투여) 또는 국소 투여(예를 들어, 경피, 피하, 패치, 좌제) 또는 흡인(예를 들어, 경점막)에 의해(이로써 화합물은 표적 조직에 도달함) 수행될 수 있다. 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 투여함은 환자 자신에 의해 또는 간병인, 예컨대 의료 전문인에 의해 이루어질 수 있고; 예컨대 환자 등에 의한 섭취 또는 적용을 포함하고, 여기서 화합물은 그의 효과를 나타낼 수 있다.

하나의 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 국소적으로, 즉 고통, 질환, 또는 인지된 통증 부위에 또는 그 근처에 비전신 경로에 의한 직접적인 투여에 의해 투여된다.

특정 실시태양에서, 환자는 뇌졸중 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 14, 16, 18, 20, 22 시간 이내에, 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7 일에 시작하여 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 의해, 투약량 당 0.01 내지 1.0 mg/kg의 투약량으로, 1 일 1회, 2 일 1회, 격일, 또는 주 1회, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10 일 이상, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8 주 이상, 또는 1, 2, 3, 4, 5 개월 이상(또는 1 일 내지 5 일, 2 일 내지 10 일, 10 일 내지 1 개월, 10 일 내지 6 개월, 또는 10 일 내지 1 년) 동안 정맥내로 치료된다.

다르게는, 환자는 뇌졸중-후 1 일, 2 일, 3 일, 4 일, 5 일, 6 또는 7 일째(또는 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7 일 이후) 시작하거나, 1 주, 2 주, 3 주, 4 주, 5 주, 6 주, 7 주, 또는 8 주째 또는 이후에 시작하거나, 1 개월, 2 개월, 3 개월, 4 개월, 6 개월, 8 개월, 10 개월, 또는 12 개월째 또는 이후에 시작하여, 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘) 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 의해, 4 mg 내지 17.5 mg(예를 들어, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 또는 17 mg)의 양으로, 1 일 1회 또는 1 일 2회, 5, 10, 15, 20 일 이상, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 주 이상, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 9 개월 이상, 또는 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20 년 이상(또는 10 일 내지 3 개월, 10 일 내지 6 개월, 10 일 내지 1 년, 3 개월 내지 1 년, 6 개월 내지 1 년, 6 개월 내지 5 년, 또는 1 년 내지 50 년) 동안 경구적으로 치료된다. 몇몇 실시태양에서, 환자는 뇌졸중-후 4 주째(또는 뇌졸중-후 4 주 이후) 시작하여 5 mg, 7.5 mg, 10 mg 또는 12.5 mg의 4-아미노피리딘으로 1 일 2회 치료된다. 다른 실시태양에서, 환자는 뇌졸중-후 4 개월째(또는 뇌졸중-후 4 개월 이후) 시작하여 5 mg, 7.5 mg, 10 mg 또는 12.5 mg의 4-아미노피리딘으로 1 일 2회 치료된다. 역시 다른 실시태양에서, 환자는 뇌졸중-후 4, 5, 6, 7, 8 주, 또는 3, 4, 5, 6, 7, 또는 8 개월째 또는 그 이후 시작하여 8 mg, 10 mg, 12 mg, 12.5 mg, 15 mg, 20 mg 또는 25 mg의 4-아미노피리딘으로 1 일 1회 치료된다.

조합 치료

본 발명의 조성물 및 방법은 다수의 치료학적 또는 예방학적 적용과 관련하여 사용될 수 있다. 아미노피리딘에 의한 치료 효과를 증가시키거나, 또 다른 치료법(제2 치료법의 보호를 증대시키기 위해, 이들 조성물 및 방법을 뇌졸중과 연관된 질병 및 병리학적 증상, 예를 들면, 감각운동 장애 등에 효과적인 다른 제제 및 방법과 함께 조합하는 것이 요망될 수 있다.

이와 같이, 한 구체적인 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 뇌졸중-관련된 장애, 예를 들면, 감각운동 장애의 치료를 위한 하나 이상의 다른 제제 및/또는 물리 치료 또는 작업 치료(occupational therapy)와 조합될 수 있다. 몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 하나 이상의 추가의 약물 또는 치료법과 동시에 또는 순차적으로 투여된다. 예를 들면, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 뇌졸중-관련된 장애에 효과적인 또 다른 약물의 투여와 동시에, 이전에, 또는 이후에 환자에게 투여될 수 있다. 이러한 다른 약물은, 예를 들면, 콜린에스테라제 저해제, 예컨대 도네페질(donepezil), 리바스티그민(rivastigmine), 또는 갈란타민(galantamine), 또는 면역조절자, 예컨대 인터페론(interferon)일 수 있다. 특정 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 1종, 2종 또는 그 이상의 추가의 약물(들)의 조합물은 고정된 투약량 조합물이다. 예를 들면, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염 및 하나 이상의 추가의 약물(들)(예컨대 상기 기재된 임의의 다른 약물)은 하나의 조성물, 예컨대 환제, 정제, 또는 캡슐로 제형화된다. 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 뇌졸중을 앓는 환자에게 물리 치료, 작업 치료, 또는 언어 치료 등과 함께 부수적으로(예를 들어, 동시에, 이전에 또는 이후에) 투여된다. 몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 버팀대, 기립대 또는 다른 정형용 지지대, 예컨대 롤링 워커(rolling walker), 또는 소통 보조기, 예컨대 음성 합성 장치가 부착된 컴류터를 사용하는 환자에게 투여된다. 한 구체적인 실시태양에서, 아미노피리딘(또는 이의 염), 및 다른 약물 또는 치료법은 동일한 의사의 방문시, 또는 서로에 대해 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 12 시간 이내에, 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7 일 이내에 투여된다.

다양한 조합물이 사용될 수 있고; 예를 들면, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 "A"이고, 부차적 치료법(예를 들어, 콜린에스테라제 저해제, 예컨대 도네페질, 리바스티그민, 및 갈란타민 및 면역조절제, 예컨대 인터페론 등)은 "B"이며, 비제한적 조합 사이클은 다음을 포함한다:

A/B/A B/A/B B/B/A A/A/B A/B/B B/A/A A/B/B/B B/A/B/B

B/B/B/A B/B/A/B A/A/B/B A/B/A/B A/B/B/A B/B/A/A

B/A/B/A B/A/A/B A/A/A/B B/A/A/A A/B/A/A A/A/B/A

본 발명의 조성물을 피험자에게 투여함은 본원에 기재된 투여를 위한 일반적 프로토콜을 따를 것이고, 특정 부차적 치료법의 투여를 위한 일반적 프로토콜은 또한, 존재한다면, 치료의 독성을 고려하여 수행될 것이다. 필요한 경우 치료 사이클이 반복될 것임이 예상된다. 또한, 다양한 표준 치료법이 기재된 치료법과 함께 적용될 수 있음도 고려된다.

몇몇 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 환자에게 부수적으로 작업 또는 물리 치료과 함께 투여된다. 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 뇌졸중-후 환자가 작업 또는 물리 치료를 받은 이후에 환자에게 투여된다. 또 다른 실시태양에서, 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 작업 또는 물리 치료 없이 환자에게 투여된다. 하나의 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 환자는 작업 또는 물리 치료를 부수적으로 수여받지 않는다. 역시 또 다른 실시태양에서, 본원에 기재된 방법에 따라 치료되는 환자는 뇌졸중-후 작업 또는 물리 치료를 받지 않았다. 특정 실시태양에서, 본 발명에 따른 치료(작업 또는 물리 치료를 사용하거나 사용하지 않음)는 작업 또는 물리 치료를 단독으로 사용하는 경우에 비해 더 효과적이다.

키트

키트는 본 발명의 예시적인 실시태양을 포함한다. 키트는 하나 이상의 내부 수용기/용기, 용구 및/또는 지시서를 수용하도록 배열된 외부 수용기 또는 용기를 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 용구는 약물을 투여하는 물품(들), 예컨대 패치, 흡인 장치, 유체 용기 컵, 주사기 또는 바늘을 포함할 수 있다. 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 조성물은 본 발명의 수용기내에 포함될 수 있다. 본 발명의 수용기는 다중 투약량에 유용한 충분량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 함유할 수 있거나, 단위 또는 단일 투여형일 수 있다. 특정 실시태양에서, 키트는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 정제, 환제, 블리스터 팩, 또는 캡슐의 형태로 함유하는 조성물을 포함한다.

본 발명의 키트는 일반적으로 본 발명에 따른 투여를 위한 지시서를 포함한다. 지시서는 운동실조, 전신 제어 장애, 협응 또는 균형 장애, 신체 감각의 장애, 인내력 장애, 손 기능 장애, 미세 손 협응 손실 또는 장애, 반사항진, 그립 강도 감손, 근육 약화, 근긴장도 감손, 운동 범위 감손, 경직, 강도 감손/약화, 미진, 사지 기능 장애, 상지 기능 장애, 하지 기능 장애, 하지 근육 강도의 감손, 보행 장애 (예를 들어, 감소된 보행 속도), 구음 장애, 턱 기능 장애, 저작 기능 장애, 또는 턱 관절 장애중 하나 이상을 치료함을 포함할 수 있다. 본원에 제시되거나 지지된 임의의 투여 방식은 지시서의 일부를 구성할 수 있다.

하나의 실시태양에서, 지시서는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 1 일 2회 섭취되어야 함을 지시한다. 하나의 실시태양에서, 지시서는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 1 일 1회 섭취되어야 함을 지시한다. 하나의 실시태양에서, 지시서는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 함유하는 조성물이 뇌졸중-후 급성 상 동안 1회 이상 섭취되어야 함을 지시한다. 하나의 실시태양에서, 지시서는 조성물이 뇌졸중-후 초기 만성 상 동안 및/또는 안정적 만성 상 동안 1회 이상 섭취되어야 함을 지시한다.

지시서는 본 발명의 임의의 용기/수용기에 고정될 수 있다. 하나의 실시태양에서, 지시서는 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 본 발명에 따른 치료학적 범위를 달성도록 또는 이를 위해 섭취됨을 지시한다. 지시서는 본 발명의 임의의 용기/수용기에 고정되거나, 본 발명의 용기 또는 수용기내의 별도의 시이트일 수 있다. 다르게는, 지시서는 본 발명의 수용기 상에 인쇄되거나, 이에 엠보싱되거나, 이의 성분으로서 형성될 수 있다. 다르게는, 지시서는 본 발명의 수용기 또는 용기내에 동봉된 물질 위에 인쇄될 수 있다. 하나의 실시태양에서, 키트는 외부 수용기, 예컨대 상자를 갖고, 이 안에는 용기, 예컨대 병이 존재하고, 지시서는 외부 수용기; 및/또는 병 위에 및/또는 내에 제공된다. 키트는 또한 키트 성분의 사용, 뿐만 아니라 키트에 포함되지 않은 임의의 다른 시약의 용도를 위한 지시서를 포함하고; 이러한 시약은 본 발명의 키트의 실시태양인 것으로 고려된다. 본 발명에 따라서, 키트는 상기 확인된 특정 물품으로 제한되지 않고, 추구되는 치료에서 직접적으로 또는 간접적으로 사용되는 임의의 시약을 포함할 수 있다.

추가의 실시태양

본 발명의 실시태양은 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 환자에서 오래되거나, 연장되거나, 장기적이거나, 지연되거나, 지속적인 시간에 걸쳐 효과적으로 치료하는 방법을 포함하고; 이는 또한 "장기간의" 치료 또는 치료의 "장기간의" 방법으로 지칭되고; 이는 또한 "지속적인" 치료 또는 치료의 "지속적인" 방법으로 지칭된다. 본 발명의 또 다른 실시태양은 아미노피리딘의 투여와 인접한 동안 또는 이의 연속적인 투여 동안 또는 투여 이전에 환자에서 뇌졸중-관련된 감각운동 장애의 개선을 미리 달성한 후 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘)을 상기 환자에게 투여함을 포함하는, 환자에서 뇌졸중-관련된 감각운동 장애의 개선을 유지하기 위한 방법에 관한 것이다. 임의의 이러한 방법은 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘)을 상기 환자에게 연장되거나, 장기적이거나, 지연되거나, 지속적이거나, 오랜 기간 동안 투여함을 포함한다(본원에 사용될 경우, 연장되고, 장기적이고, 지연되고, 지속적이고, 오래됨은 달리 명백히 지시하지 않는 한 동의어이다). 특정 실시태양에서, 연장되거나, 장기적이거나, 지연되거나, 오래되거나, 지속적인 기간은 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 또는 22 주; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 또는 18 개월; 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6 년 이상, 또는 5 년 초과이다. 특정 실시태양에서, 연장되거나, 장기적이거나, 지연되거나, 오래되거나, 지속적인 기간은 환자의 일생 동안이다. 이들 방법은 또한 본 발명에 따라 아미노피리딘을 치료학적 수준(예컨대 C_minss 또는 평균 C_minss) 또는 범위(예컨대 C_minss 범위, 또는 평균 C_minss 값의 기준 범위)로 투여함을 포함할 수 있다.

하나의 실시태양에서, 일정 량의 약물이 개별 환자에게 제공되고(예를 들어, 투약량), 여기서 투약량은 규범 집단 또는 기준 집단에게 투여될 경우 적어도 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 ng/㎖ 이상의 평균 C_minss를 수득하는 투약량에 상응한다.

특정 실시태양에서, 치료 효과량의 4-아미노피리딘은 1 일 2회 투여되는 서방성 조성물중 10 mg이다. 투여 방법은 또한 본 발명에 따라 4-아미노피리딘을 치료학적 수준(예컨대 C_minss) 또는 범위(예컨대 C_minss 범위)로 투여함을 포함할 수 있다.

본 발명의 또 다른 실시태양은 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘)을 하기 환자에게 연장된 기간에 걸쳐 투여함을 포함하는, 개선된 감각운동 기능, 예를 들어, 전신 제어, 협응, 균형감, 신체 감각, 인내력, 손 기능, 미세 손 협응, 그립 강도, 근긴장도, 운동 범위, 강도, 사지 기능, 상지 기능, 하지 기능, 하지 근육 강도, 보행(예를 들어, 보행 속도), 구음 장애, 턱 기능, 저작 기능, 또는 턱관절을, 이들 감각운동 기능중 하나의 뇌졸중-관련된 장애를 갖는 환자에서 유지시키는 방법에 관한 것이다. 특정 실시태양에서, 연장되거나, 장기적이거나, 지연되거나, 지속되거나, 오래된 기간은 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 또는 22 주; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 또는 18 개월; 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6 년 이상, 또는 5 년 초과이다. 특정 실시태양에서, 연장되거나, 장기적이거나, 지연되거나, 지속되거나, 오래된 기간은 환자의 일생 동안이다. 이러한 유지는 기준 또는 규범 집단에 비해 본질적으로 균일한 백분율의 개선이 존재하는 경우 비교적 일관될 수 있거나, 이러한 유지는 기준 또는 규범 집단에 비해 변동되는 백분율의 개선이 존재하는 경우 비교적 변화될 수 있고; 유지가 비교적 변화되는 경우, 이는 대상 환자가 기준 또는 규범 집단에 비해 더 악화된 경우의 기간을 포함할 수 있다.

본 발명의 추가의 실시태양은 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘)을 환자에게 연장된 기간 동안 투여함을 포함하는, 뇌졸중의 임의의 하나 이상의 징후 또는 증후, 예컨대 뇌졸중에 의해 유도되거나 이와 관련된 임의의 하나 이상의 감각운동 장애에 있어서의 지속된 개선 또는 비교적 지속된 개선을 달성하는 방법에 관한 것이다. 대조 또는 표준 양 또는 값에 관하여, 때때로 뇌졸중 이후의 환자에서 감각운동 기능의 점진적인 감퇴가 존재하고, 뇌졸중-관련된 감각운동 병리학의 고유의 진행에 수반되는 기능 감퇴와 관련하여 증가 또는 상대적 증가가 적절히 고려될 수 있음을 알아야 한다. 특정 실시태양에서, 지속된 개선은 연장된 기간 동안, 예컨대 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 또는 22 주; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 또는 18 개월; 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6 년 이상 동안, 또는 5 년을 초과하여 일어난다. 특정 실시태양에서, 연장된 기간은 환자의 일생 동안이다. 특정 실시태양에서, 치료 효과량의 4-아미노피리딘은 서방성 조성물중 10 mg이다. 특정 실시태양에서, 서방성 조성물은 1 일 2회 투여될 수 있다. 특정 실시태양에서, 서방성 조성물은 1 일 1회 투여될 수 있다. 이들 방법은 또한 본 발명에 따라 아미노피리딘을 치료학적 수준(예컨대 C_minss) 또는 범위(예컨대 C_minss 범위)로 투여함을 포함할 수 있다. 지속된 개선은 기준 또는 규범 집단에 비해 개선 백분율이 계속 성장하는 경우 비교적 증가할 수 있거나, 이러한 개선은 기준 군에 비해 더 나아지는 경향이 있도록 기준 또는 규범 집단에 비해 개선 백분율이 변동되는 경우 비교적 달라질 수 있고; 개선이 비교적 달라지는 경우, 이는 대상 환자가 기준 또는 규범 집단에 비해 더 악화된 경우의 기간을 포함할 수 있다.

특정 실시태양에서, 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘)은 균일한 패턴(예를 들어, 특정 날짜에서의 mg 양 또는 특정 mg 양, 예를 들어 오전에 더 높은 투약량 및 저녁에 더 낮은 투약량이 사용되거나 이의 반대일 수 있음) 및 균일한 계획(예를 들어, 1 일 2회)으로 투여되는 치료 효과량의 아미노피리딘을 포함하는 안정하거나 일정하거나 일관되거나 변치않거나 변함없거나 바뀌지 않는 투약 섭생이고, 여기서 안정하거나 일정하거나 일관되거나 변치않거나 변함없거나 바뀌지 않는 투약 섭생 동안 투약량 또는 계획은 변하지 않는다. 본원에 사용될 경우, 용어 "안정한" 또는 "일정한" 또는 "일관된" 또는 "변치않는" 또는 "변함없는" 또는 "바뀌지 않는"은, 달리 분명히 지시되지 않는 한, 동의어이다. 예를 들어, 치료의 안정하거나 일정하거나 일관되거나 변치않거나 변함없거나 바뀌지 않는 과정으로부터의 가끔씩의 환자 불응 또는 일탈은 이러한 치료의 정의에 속함을 알아야 한다. 특정 실시태양에서, 아미노피리딘의 투약량(예를 들어 mg 양)의 적정(증가하거나 감소하거나)은 안정한 투약 섭생 전 기간 동안 일어나지 않는다.

본 발명의 실시태양은 또한 적어도 5 ng/㎖ 내지 20 ng/㎖, 10 ng/㎖ 내지 20 ng/㎖, 또는 12 ng/㎖ 내지 20 ng/㎖의 정상 상태에서의 최소 농도(C_minss)가 수득되거나, 20 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득되도록 일정량 또는 범위의 4-아미노피리딘을 환자에게 투여함을 포함하는, 환자에서 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 치료하거나 경감시키는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 실시태양은 또한 적어도 7 ng/㎖ 내지 20 ng/㎖, 또는 12 ng/㎖ 내지 20 ng/㎖ 범위의 정상 상태에서의 평균 최소 농도(평균 C_minss)가 수득되거나, 20 ng/㎖ 범위의 평균 C_minss가 수득되도록 일정량 또는 범위의 4-아미노피리딘을 환자에게 투여함을 포함하는, 환자에서 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 치료하거나 경감시키는 방법에 관한 것이다. 특정 실시태양에서, 20 ng/㎖ 범위의 C_minss는 약 20 ng/㎖의 C_minss를 달성한다. 다른 실시태양에서, 약 20 ng/㎖의 C_minss가 수득되고; 특정 실시태양에서, 20 ng/㎖ 범위의 C_minss는 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 ng/㎖의 하한치, 및 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 또는 27 ng/㎖의 상한치를 포함한다. 특정 실시태양에서, 적어도 12 ng/㎖ 내지 15 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득된다. 특정 실시태양에서, 적어도 13 ng/㎖ 내지 15 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득된다. 특정 실시태양에서, 적어도 15 ng/㎖ 내지 25 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득된다. 특정 실시태양에서, 적어도 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 또는 25 ng/㎖ 이상의 C_minss가 수득된다. 다른 실시태양에서, 약 20 ng/㎖의 평균 C_minss가 수득되고; 특정 실시태양에서, 20 ng/㎖ 범위의 평균 C_minss는 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20 ng/㎖의 평균 하한치, 및 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 또는 27 ng/㎖의 평균 상한치를 포함한다. 특정 실시태양에서, 적어도 12 ng/㎖ 내지 15 ng/㎖ 범위의 평균 C_minss가 수득된다. 특정 실시태양에서, 적어도 13 ng/㎖ 내지 15 ng/㎖ 범위의 평균 C_minss가 수득된다. 특정 실시태양에서, 적어도 15 ng/㎖ 내지 25 ng/㎖ 범위의 평균 C_minss가 수득된다. 특정 실시태양에서, 적어도 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 또는 25 ng/㎖ 이상의 평균 C_minss가 수득된다.

다르게는 본 발명에 따른 방법(예를 들어, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 치료하기 위한 방법, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애의 증후를 환자에서 개선하는 방법, 또는 치료학적으로 효과적인 수준의 아미노피리딘을 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 갖는 환자에서 수득하는 방법)은, 5 내지 12 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득되거나; 10 내지 20 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득되거나; 15 내지 25 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득되거나; 15 내지 30 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득되거나; 17 내지 23 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득되거나; 18 내지 22 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득되거나; 19 내지 21 ng/㎖ 범위의 C_minss가 수득되도록 아미노피리딘(예를 들어, 4-아미노피리딘)을 상기 환자에 투여함을 포함한다. 구체적 실시태양에서, C_minss는 하한치가 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 ng/㎖로 구성된 군에서 선택되고 상한치가 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 또는 27 ng/㎖으로 구성된 군에서 선택되는 범위에 있고, 이는 임의의 특정 조합, 예를 들어, 제한없이 16 내지 23 ng/㎖, 12 내지 24 ng/㎖, 13 내지 27 ng/㎖ 등의 범위가 고려될 수 있음을 나타내는 것임을 알아야 한다.

특정 실시태양에서, 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-AP)은 연장된 기간 동안 C_minss 또는 평균 C_minss(또는 이의 개별 범위)를 수득하기 위해 투여되고, 이 기간은 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 또는 22 주; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 또는 18 개월; 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6 년 이상, 또는 5 년을 초과한다. 특정 실시태양에서, 연장된 기간은 환자의 일생 동안이다.

본 발명의 추가의 실시태양은 약 13 ng/㎖ 내지 약 15 ng/㎖의 평균 혈장 농도가 수득되고 평균 최대 혈장 농도가 약 15 ng/㎖ 이하이도록 치료 효과량의 4-아미노피리딘을 환자에게 투여함을 포함하는, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애 또는 이의 증후를 치료하는 방법이다.

특정 실시태양에서, 약 15 ng/㎖ 내지 약 27 ng/㎖ 의 정상 상태에서의 혈장 농도(C_avss)가 수득되도록 치료 효과량의 4-아미노피리딘을 환자에게 투여함을 포함하는, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애 또는 이의 증후를 치료하는 방법이 본원에 기재된다. 몇몇 실시태양에서, 약 20 ng/㎖ 내지 약 40 ng/㎖의 정상 상태에서의 혈장 농도(C_avss)가 수득되도록 치료 효과량의 4-아미노피리딘을 환자에게 투여함을 포함하는, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애 또는 이의 증후를 치료하는 방법이 본원에 기재된다. 하나의 실시태양에서, 약 10 ng/㎖ 내지 약 20 ng/㎖의 정상 상태에서의 혈장 농도(C_avss)가 수득되도록 치료 효과량의 4-아미노피리딘을 환자에게 투여함을 포함하는, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애 또는 이의 증후를 치료하는 방법이 본원에 기재된다. 또 다른 실시태양에서, 약 5 ng/㎖ 내지 약 15 ng/㎖의 정상 상태에서의 혈장 농도(C_avss)가 수득되도록 치료 효과량의 4-아미노피리딘을 환자에게 투여함을 포함하는, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애 또는 이의 증후를 치료하는 방법이 본원에 기재된다.

본 발명의 방법의 특정 실시태양에서, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 갖거나 갖는 것으로 의심되고, 다발성 경화증을 앓지 않거나 앓는 것으로 의심되지 않는 환자가 식별되고 본원에 기재된 방법에 따라 치료된다.

특정 실시태양에서, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애의 개선은 적어도 약 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 또는 20%(또는 그 이상)일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29 또는 30%(또는 그 이상)일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 20%일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 25%일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 또는 40%(또는 그 이상)일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 40%일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 45%일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 또는 50%(또는 그 이상)일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 50%일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 55% 또는 그 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 60%일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 65% 또는 그 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 70% 또는 그 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 75% 또는 그 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 80% 또는 그 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 85% 또는 그 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 90% 또는 그 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 95% 또는 그 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 적어도 약 100%일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 약 100% 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 약 150% 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 약 200% 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 약 250% 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 약 300% 이상일 수 있다. 특정 실시태양에서, 개선은 4 내지 100%, 4 내지 20%, 5 내지 20%, 6 내지 20%, 7 내지 20%, 8 내지 20%, 9 내지 20%, 10 내지 20%, 10 내지 30%, 10 내지 60%, 20 내지 30%, 20 내지 40%, 20 내지 50%, 20 내지 60%, 20 내지 100%, 30 내지 100%, 50 내지 100%, 30 내지 150%, 50 내지 150%, 100 내지 150%, 100 내지 200%, 50 내지 250%, 100 내지 250% 또는 100 내지 300%일 수 있다. 이러한 변화 정량(%)은 바람직하게는 연속 선형 등급으로 결과 측정을 제공하는 감각운동 기능에 대한 검정, 예컨대 T25FW 등에 적용된다.

본 발명의 실시태양은 또한 치료 효과량의 아미노피리딘(예를 들어, 4-AP)을 환자에게 연장된 기간 동안 투여함을 포함하는, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 환자에서 일관되게 개선시키는 방법에 관한 것이다. 특정 실시태양에서, 연장된 기간은 적어도 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21 또는 22 주; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 또는 18 개월; 또는 1, 2, 3, 4, 5, 6 년, 또는 5 년 초과이다. 특정 실시태양에서, 연장된 기간은 환자의 일생 동안이다. 본원에 사용될 경우, 일관된 증가는 기선(즉, 아미노피리딘으로 치료되기 이전)으로부터의 임의의 감소가 없는 일정한 증가이다.

삶의 질 또는 일상 생활의 활동으로 공지된 다양한 매개변수가 당분야에 공지되어 있다. 이들 매개변수는 본 발명에 따른 치료 기간 이후 뇌졸중을 앓았던 환자에서 증상(예를 들어, 감각운동 기능)의 개선을 평가하기 위해 측정될 수 있다. 이들로는, 예를 들어, 다음과 같은 일상 생활에 미치는 장애(Impact of Impairment on Daily Life)의 영향이 포함된다:

⊙ 자신의 집에서 방들 간의 방향찾기

⊙ 화장실 가기

⊙ 샤워

⊙ 자신의 아이 돌보기

⊙ 안전하게 길 건너기

⊙ 고용된 상태

⊙ 식료품 장보기

⊙ 요리

⊙ 계단 오르기

⊙ 운동

⊙ 사회 활동 참여

몇몇 실시태양에서, 본 발명에 따른 방법은 피험자가 이전에 이러한 활동(들)을 달성할 수 없었던 경우, 피험자가 이들중 임의의 활동을 달성할 수 있도록 허용한다. 구체적 실시태양에서, 본 발명에 따른 방법은 피험자가 이전에 이러한 활동(들)을 달성하는 능력이 제한되었던 경우, 피험자가 이들중 임의의 활동을 더 잘 달성할 수 있도록 허용한다.

특정 실시태양에서, 본 발명에 따른 방법은, 뇌졸중-관련된 감각운동 장애의 증후, 매개변수, 특징, 값, 결과 또는 증거가 아미노피리딘에 의해 이전에 효과적으로 나타난 경우, 치료 효과량의 아미노피리딘을 환자에게 투여함으로써(이전에 이러한 증후, 매개변수, 특징, 값, 결과 또는 증거의 개선이 달성된 후), 이러한 증후, 매개변수, 특징, 값, 결과 또는 증거의 개선을 유지시킬 수 있도록 한다. 효능의 기간은 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 또는 18 주; 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 또는 13 개월; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 년, 또는 10 년 이상일 수 있다.

실시예

실시예 1: 설치류 뇌졸중 모델

뇌 허혈성 손상을 유도하도록 수컷 래트[약 300 내지 400 g, 스프라그-돌리(Sprague-Dawley)]를 수술한다. 혀혈성 손상 후 1 일, 10 일 및 4 주에 개시하여, 동물에게 4-AP(0.1, 0.3 및 1 mg/kg)를 2 주 동안 단일 투약 또는 1 일 투약으로 경구적으로 투약한다. 투약(단일 치료의 경우) 또는 마지막 투약(다중 치료의 경우) 이후 4시간[C_max(약 3 시간) 후 1시간과 동일함]째 앞다리 위치잡이 시험, 뒷다리 위치잡이 시험, 신체 스윙 시험, 실린더 시험 및 활동 상자 시험을 수행함으로써 신경 행동을 평가한다. 약물 금단의 기간 이후 신경 기능을 또한 평가한다. 추가로, 비히클 또는 4-AP 투약 이후 다수의 시점에서 측방향 꼬리 정맥으로부터 소량의 혈액 샘플(100 ㎕)을 채취하여 HPLC-MS/MS 방법에 의해 4-AP의 혈장 농도를 확보한다. 이러한 혈액 샘플링은 동물이 신경 개선에 대해 평가되는 시점 부근에서의 혈장 노출을 결정할 수 있도록 허용한다.

실험의 종료시, 뇌 경색 부피 측정을 위해 동물을 펜토바비탈(pentobarbital)로 깊이 마취시키고 PBS 및 파라포름알데히드로 심장을 통해 관류시키고, 뉴런 손상의 정도는 각각 H & E 염색 믹 룩솔 패스트 블루(Luxol fast blue) 염색에 의해 평가된다.

표 1은 치료 군 및 종점에 대한 요약을 보여준다.

[표 1]

치료 군 및 종점에 대한 요약

연구 완료시, 뇌 경색 이후의 신경 기능을 신경 기능 개선, 상대적 경색 감소, 상대적 수초화 및/또는 축색돌기 생존에 대해 평가한다(표 1에 기재된 바와 같음).

실시예 2: 4- AP 의 경구 투여 효과: 래트에서 MCA 폐색( MCAO ) 후의 기능적 회복. 비히클 -제어된 2중 교차 맹검 연구

4-AP는 허혈성 사건으로부터 떨어진 시점에 안정적 운동 결함을 갖는 래트에서 허혈성 뇌졸중 이후 기능적 감각운동 개선을 촉진하는 이의 능력에 대해 평가되었다. 동물 모델은 인간 허혈성 뇌졸중의 증상을 모방하고, 중간 뇌 동맥 폐색(MCAO)이 생성되며, 이는 피질성 척추로(백색 물질)를 비롯하여, 뇌 피질 및 선조체에서 광범위한 경색을 일으킨다.

특히, 하기 제시된 실험에 이용되는 스프라그 돌리에서 MCAO 모델은 인간 혀혈성 뇌졸중의 증상을 모방한다. 이러한 모델에서, 초점 뇌 경색은 타무라 등의 방법(No To Shinkei 1986; 38:747-51)을 변형하여 근위 우측 중간 뇌 동맥(MCA)의 영구적 폐색에 의해 중심 뇌 경색을 일으켰다. 간단히, 측두근을 이등분 하고 눈 및 귀 관 사이의 중간에 만들어진 절개부를 통해 반영하였다. 협골궁을 제거하거나 안면 신경을 가로 절개하지 않고 관자놀이 아래 두개골절제를 통해 근위 MCA를노출시켰다. 이어서 동맥을 근위로부터 내부 뇌 정맥으로의 후삭(olfactory tract)까지 마이크로바이폴라(microbipolar) 응고에 의해 폐색시키고 가로 절개하였다.

본 실시예에 기재된 MCAO 모델은 뇌졸중 이후 신경 회복의 전형적인 인간 패턴과 많은 방식으로 평행한 회복 패턴을 나타낸다. MCAO 이후, 특정 촉각, 고유 수용 및 감각 시험(앞다리 및 뒷다리 위치잡이, 및 신체 스윙 대칭)으로 측정되는 바와 같이, 수술 후 1 일째 감각운동 기능이 즉각적이고 완전히 손실된다. 이는 처음 수 주에 걸쳐 비교적 신속한 부분적 회복 기간이 수반된다. 기재된 MCAO 모델에서, 회복이 시작되어 MCAO 이후 4주째 정체기에 도달되고, 이 시점에서 감각운동 기능에 있어서 여전히 측정가능한 결함이 존재한다. 유사하지만 더 느린 회복 패턴이 뇌졸중 이후 처음 수 개월에 걸쳐 인간에서 발생된다[크라머(Cramer)의 문헌 "Ann Neurol 2008; 63:272-87" 참조].

실험 고안

이 실험에서, 스프라그 돌리 래트를 마취하고, 수술하여 중간 뇌 동맥 폐색(MCAO)을 일으키고, 4-아미노피리딘으로 치료하거나 치료하지 않고, 이후 기재되는 바와 같이 행동 평가를 수행하였다. 뇌졸중 이후 4 주째 치료를 시작하였다.

동물: 45 마리의 수컷 스프라그 돌리 래트(300 내지 400 g)[찰스 리버 래버레이토리스(Charles River Laboratories)로부터 수득됨, 이는 수술하기 7 내지 10 일 전에 250 내지 275 g의 체중으로 도착됨]를 사용하였다. 동물을 무작위로 치료 군에 할당하였다.

명명법: 연구의 날짜에 대한 명명법은 다음과 같다: 0 일은 MCAO를 수행한 날이고, 이후의 날짜는 연속적으로 번호매겨진다(1 일, 2 일, 3 일 등); -1 일은 MCAO 전날을 나타낸다.

군 형성에 대한 세부사항: 본 연구에서 몇몇 절차를 위해 필요한 양의 시간으로 인해 3개의 치료 군(이후 열거되는 바와 같음)을 8개의 작업 군(계획에 기재된 바와 같음, 이하 참고)으로 분할해야 했다. 하루에 6 마리의 동물이 뇌졸중 수술을 받았다. 동물이 연구의 8-일 수술 기간 동안 사망하였다면, 이를 여분의 동물로 대체하였다. 사망하지 않았다면, 동물을 대체하지 않았다. 대부분의 동물 사망(전체의 5% 미만)은 수술 직후 내지 7 일 기간에 발생하였다.

마취: N₂0 : 0₂(2 : 1)중 1 내지 3% 이소플루란. N₂0 : 0₂(2 : 1)중 2 내지 3% 이소플루란에 의해 유도 챔버에서 마취를 유도하였고, 안면 마스크를 통해 1 내지 1.5%의 이소플루란으로 유지시켰다. 마취의 적당한 깊이를 뒷다리 핀치시 움츠림이 없고 눈깜빡임 반응이 없는 것으로 평가하였다. 일단 마취되면, 동물에게 세파졸린 나트륨(40 mg/kg, 복강내) 및 부프레노르핀(0.1 mg/kg, 피하)을 공급한다. 이러한 절차를 위하여 예방적 항생제로서 세파졸린을 사용하였다(이는 무시할만한 감염률을 보장하기 때문임). 수의학적 안과용 연고인 라크릴루브(Lacrilube)를 눈에 적용하였다.

수술 절차: 작은 초점 뇌졸중(경색)을 중간 뇌 동맥 폐색(MCAO)에 의한 뇌(대뇌 피질)의 표면의 오른쪽 측면 상에 만들었다. 두부의 오른쪽 측면을 전기 클리퍼(clipper)로 쉐이빙하였다(눈 및 귀 사이의 대략 3 × 5 cm의 패치). 이 영역은 주의깊게 셉티솔(septisol)로 세정된다. 무균성 기법을 사용하여, 눈 및 고막 관 사이의 중간에 절개부를 만들었다. 측두근을 단리하고, 이등분하고, 반영하였다. 뼈의 작은 창을 드릴 및 론저(rongeur)를 통해 제거하여(관자놀이 아래 두개골절제) 중간 뇌 동맥(MCA)을 노출시켰다. 수술 이후 동물의 저작 능력을 손상할 수 있게 하는 협골궁을 제거하거나 안면 신경을 가로 절개하지 않도록 주의를 기울였다. 실체 현미경(dissecting microscope)을 사용하여, 경막을 절제하고, 마이크로바이폴라 전기소작술을 사용하여 MCA를 후삭 근위부로부터 내부 뇌 정맥(이 정맥을 파열하지 않도록 주의함)까지 전기응고시켰다. 이어서 MCA를 가로 절개하였다. 이어서 측두근을 재위치시키고, 절개부를 피하에서 봉합하여 닫았다. 피부 절개부를 수술 스테이플(staple)로 닫았다(2 내지 3개 요구됨). 절차 전체를 통하여, 직장 온도계에 연결된 자가-조절 가열 패드를 사용하여 체온을 37.0 ± 1℃로 유지시켰다.

수술-후 모니터링: 수술 후, 동물이 마취로부터 깨어날 때까지 동물을 가열 패드 위에 유지시켰다. 이어서 이들을 깨끗한 우리로 돌려보냈다. 이들을 MCAO 수술일(0 일) 및 이후 적어도 1 일 1회 자주 관찰하였다.

취급, 수술, 및 주사 시간표: 동물은, 심각한 공격이 관찰되거나 우리의 동료(들)이 사망하지 않는 한, 수술 전 및 후에 우리당 2 내지 3 마리씩 사육되었다. 동물을 수술 이전 7 일 동안 취급하였다. 세파졸린 나트륨을 수술 바로 전에 복강내로(40 mg/kg) 투여하였다. 부프레노르핀을 수술 바로 전에 피하로(O.1 mg/kg) 투여하였다.

투약 및 치료: 래트를 표 2A, 2B, 3 및 도 2에 제시된 투약 계획에 따라서 치료하였고, 각각의 상은 2 주의 시간 기간이었다. 4-AP의 용액을 이 실험에 사용하였다. 투약을 허혈성 사건 이후 4 주째에 개시하였다. 4-아미노피리딘을 주사용수[WFI: water for injection, 셀그로(Cellgro)]에 용해시키고 멸균 여과하였다. 0.315 mg/㎖ 또는 1.0 mg/㎖의 4-아미노피리딘의 최종 농도를 위관 영양에 의해 제공하여, 각각 0.63 mg/kg 및 2 mg/kg의 최종 농도를 생성하였다. 비히클 대조 군 치료는 위관 영양에 의해 2 ㎖/kg로 전달된 WFI였다. 이 연구는 3개의 치료 상으로 나뉘었고, 동물의 각각의 무작위화된 코호트(cohort)는 각각의 치료 상 동안 상이한 투약 수준을 수여받았다. MCAO 후 30 일째 개시하여(30 일, 제1 상의 개시), 동물은 대략 12 시간 간격으로 총 5회의 투약량을 위해 용액(2 ㎖/kg)을 위관 영양으로 수여받았다. 동일한 계획을 연구의 제2 상 및 제3 상의 경우 각각 44 일 및 58 일에 상이한 치료로 반복하였다. 동물은 상들 사이의 10 일 동안 치료받지 않았다[휴약(washout) 기간].

[표 2A]

[표 2B]

치료 군: 투약을 MCAO 수술 이후 4 주째 개시하였다.

이러한 4 주 동안, 이하 정의된 바와 같이 매주 행동 평가를 수행하였다. 4-AP + 비히클 대조 군의 2가지 투약 수준을 평가하였고, 치료는 허혈성 사건 이후 4 주째에 개시하였다. 모든 투약을 위관 영양을 통해 공급하고, 부피는 2 ㎖/kg를 초과하지 않는다. 동물에게 1차 투약을 제공하고, 투약 후 60 분에 행동 평가를 시작하였다. 이어서 동물에게 적절한 시간의 날짜에 b.i.d(바람직하게는 매 12 시간 마다)로 2차 투약을 공급하였고, 그후 2 일 이상 동안 투약하였다(총 3 일 투약, 총 5회 투약). 5차 투약 이후 1 시간째, 동물에게 이후 정의된 바와 같은 행동 평가를 수행하였다. 최종 행동 평가를 수행한 후, 약물을 10 또는 11 일 동안 중단하고, 행동을 재평가하였고, 이어서 동물을 표 2A, 2B 및 3에 기재된 바와 같이 교차 치료(표 2B의 제2 상)에 의해 다시 치료한 후, 동일한 행동 시험 및 투약 섭생을 수행하였다. 이러한 교차를 1회 이상 또 반복하였다(표 2B의 제3 상)(도 2 참조).

행동 시험 세부사항: 어떤 치료를 받는지 모르는 평가자들에 의해 행동 평가를 수행하였다. MCAO 수술 직전, MCAO 수술 후 24 시간, 및 이후 1 주마다, 투약의 제1 상이 도달될 때까지 사지 위치잡이 및 신체 스윙 행동 시험을 사용하여 감각운동 기능의 맹검 평가를 수행하였다. 상기 기재된 바와 같이, 행동 평가를 투약 시간에 정확히 맞춰 시간 측정하였다. 동물을 각각의 상의 1차 및 5차 투약 이후 1 시간에 시험하였고(즉, 제1 상의 30 및 32 일, 제2 상의 44 및 46일; 및 제3 상의 58 및 60 일); 동물을 또한 휴약 기간 동안 42 및 56 일에 시험하였다. 동물에게 1차 투약을 제공하고, 60 분 이후 행동 평가를 수행하고, 혈액을 투약 후 90 분째 수집하였다. 이어서 동물에게 적절한 시간에 b.i.d(바람직하게는 매 12 시간 마다)로 2차 투약량을 공급하였고, 그후 2 일 이상 동안 투약하였다(총 3 일 투약, 총 5회 투약). 5차 투약 이후 1 시간째, 동물에게 행동 평가를 수행하였다. 최종 행동 평가를 수행한 후, 약물을 10 또는 11 일 동안 중단하고, 행동을 재평가하였고, 이어서 동물을 표 2A, 2B 및 3 및 도2에 기재된 바와 같이 교차 치료에 의해 다시 치료한 후, 동일한 행동 시험 및 투약 섭생을 수행하였다.

사지 위치잡이: -1 일(수술-전), 1 일, 7 일, 14 일, 21 일, 28 일, 30 일, 32 일, 42 일, 44 일, 46 일, 56 일, 58 일, 60 일에 평가하였다. 사지 위치잡이 시험을 앞다리 및 뒷다리 시험으로 나누었다. 앞다리 위치잡이 시험의 경우, 검사자는 테이블탑 가까이에 래트를 유지시키고 수염, 시각, 촉각, 또는 고유 수용 감각 자극에 반응하여 앞다리를 테이블탑에 위치시키는 래트의 능력을 점수화하였다. 유사하게, 뒷다리 위치잡이 시험의 경우, 검사자는 촉각, 및 고유 수용 감각 자극에 반응하여 뒷다리를 테이블탑에 위치시키는 래트의 능력을 평가하였다. 함께, 이들 시험은 감각운동계에서의 기능 및 회복을 반영한다[데 릭(De Ryck) 등의 문헌 "Brain Res 1992; 573:44-60"]. 별도의 하위점수(subscore)를 각각의 방식의 감각 입력정보에 대해 수득하고 더하여 총 점수를 제공하였다(앞다리 위치잡이 시험의 경우: 0 = 정상, 12 = 최대로 손상됨; 뒷다리 위치잡이 시험의 경우: 0 = 정상; 6 = 최대로 손상됨). 점수는 0.5 증분으로 제공된다(이후 참조). 전형적으로, 뇌졸중 이후 처음 1 개월 동안 사지 위치잡이 행동의 느리고 꾸준한 회복이 존재한다.

앞다리 위치잡이 시험(0 내지 12):

수염 위치잡이(0 내지 2);

시각적 위치잡이(전방(0 내지 2), 옆면(0 내지 2))

촉각적 위치잡이(배면(0 내지 2), 측면(0 내지 2))

고유 수용 감각 위치잡이(0 내지 2).

뒷다리 위치잡이 시험(0 내지 6):

촉각 위치잡이(배면(0 내지 2), 측면(0 내지 2))

고유 수용 감각 위치잡이(0 내지 2).

각각의 하위 시험의 경우, 동물은 다음과 같이 점수가 매겨진다:

0.0 = 즉각적 반응

0.5 = 2 초 이내의 반응

1.0 = 2 내지 3 초의 반응

1.5 = 3 초 초과의 반응

2.0 = 무반응

신체 스윙: -1 일(수술-전), 1 일, 7 일, 14 일, 21 일, 28 일, 30 일, 32 일, 42 일, 44 일, 46 일, 56 일, 58 일, 60 일에 평가하였다. 꼬리로 매달린 경우 머리를 한쪽으로 또는 다른 쪽으로 움직이는 운동을 계수함으로써 신체 스윙을 평가하였다. 이 시험을 위해, 래트는 그의 꼬리의 기부로부터 대략 1 인치 지점으로 매달린다. 이어서, 이는 테이블의 표면 위로 1 인치 올려진다. 래트를 수직 축에 유지시키고, 이는 왼쪽 또는 오른쪽으로 10°이하로 정의된다. 래트가 그의 머리를 수직 축 밖으로 측부로 움직일 때마다 스윙을 기록하였다. 또 다른 스윙을 시도하기 이전에, 래트를 계수될 다음 스윙을 위해 수직 위치로 돌려놓아야 한다. 30회의 총 스윙을 계수하였다. 이 시험은 선조(striatal) 기능의 대칭성을 반영하고[보르론간(Borlongan) 등의 문헌 "J. Neurosci 1995; 15:5372-8"], 정상 래트는 전형적으로 양쪽 측부로의 동일한 스윙 수를 갖는다. 초점 허혈 이후, 래트는 대측성(contralateral) 쪽으로 스윙하는 경향이 있다(본 경우에는 왼쪽). 신체 스윙 점수는 총 스윙에 대한 오른쪽으로의 백분율로서 표시되었다. 뇌졸중 이후 처음 1 개월 동안 신체 스윙 점수의 자발적인 부분 회복이 존재한다(거의 50%). 신체 스윙 시험을 사지 위치잡이 시험과 동일한 시간에 수행하였다.

실린더 시험: -1 일(수술-전), 1 일, 7 일, 21 일, 30 일, 32 일, 44 일, 46 일, 58 일, 60 일에 평가하였다. 이 시험은 사지 사용 비대칭성을 평가하였다. 래트를 투명한 실린더(직경: 20 cm, 높이: 30 cm)에 3 내지 6 분 동안 넣어 두었다. 동물이 카메라로부터 뒤돌때 앞다리의 움직임을 결정하도록 거울을 실린더 뒤에 두었다. 동물에 의해 나타난 앞다리-사용 비대칭성의 정도를, 완전히 뒤돌아 있는 동안 왼쪽 또는 오른쪽 앞다리가 벽에 접촉하는 횟수를 계수함으로써 결정하였다. 완전히 뒤돌아 있는 동안 벽에 접촉하면서 왼쪽 및 오른쪽 앞다리 둘 다의 자발적 사용을 또한 점수화하였다. 20회의 앞다리 위치잡이의 총 수를 시험 동안 계수하였다. 데이터를 벽 운동에 대한 사지 사용 관찰 총 수에 대하여 손상되지 않거나 손상된 앞다리의 사용 퍼센트로 표시하였다.

혈액 샘플링: 약물 투여시 행동 평가가 완료된 후(30, 32, 44, 46, 58 및 60일), 대략 300 마이크로리터의 혈액 샘플을 투약 후 정확히 90 분째 채취하여 이 시점에서의 4-AP 혈장 수준을 평가하였다. 혈액을 각각의 동물의 복재(saphenous) 정맥으로부터 수집하였다. 혈액을 K3 EDTA 관에 수집하고 10,000 rpm에서 10 분 동안 4℃에서 원심분리하였다. 혈장을 수득하고, 동결시키고 대략 -80℃에서 저장하였다. 샘플을 4-AP 수준에 대해 분석하였다. 양성적 전기분무 방식으로 2중 질량 분광분석 검출 방법에 의해 유효한 액체 크로마토그래피를 사용하여 4-AP 농도를 측정하였다.

안락사 및 사후 처리: 경색 부피 분석. 마지막 행동 평가 이후, 래트를 케타민(ketamine)/자일라진(xylazine)(100 mg/kg 케타민, 10 mg/kg 자일라진, 복강내)으로 깊이 마취하고 일반 염수로 심장을 통해 관류시키고(헤파린 2 유닛/㎖ 포함), 이후 4% 파라포름알데히드 또는 포르말린을 관류시켰다(63 일째). 뇌를 수거하고, 조직학적 평가를 위해 처리하였다. 군 당 10개의 뇌의 하위집합을 경색 부피 측정을 위해 처리하였다(H & E 염색).

경색 측정: 뇌를 파라핀에 함침시키고 5 미크론 두께의 관상 단면을 마이크로톰(microtome)을 사용하여 절단하였다. 단면을 표준 방법을 사용하여 헤마톡실린 및 에오신(H & E)으로 염색하였다. 각각의 뇌로부터의 7개의 관상 단면(각각 브레그마(bregma)와 비교하여 +4.7, +2.7, +0.7, -1.3, -3.3, -5.3 및 -7.3)을 디지털 카메라로 사진찍고, 각각의 슬라이스 상의 경색 면적을 "간접적 방법"에 의해 NIH 영상(영상 J)으로 결정하여(고유의 대측성 [좌측] 반구의 면적 - 동측성(ipsilateral) [우측] 반구의 고유의 영역의 면적) 뇌 부종을 교정하였다. 이어서 경색 면적을 슬라이스 끼리 합하고, 슬라이스 두께(단면 간의 거리)를 곱하여 총 경색 부피를 제공하였고, 이는 경색 대측성 반구 부피의 백분율로서 표시되었다.

규제 순응성: 이 연구는 비-GLP 환경하에, AAALAC 공인된 설비에서, 표준의 우수한 과학적 원리와 실제에 따라 실행되었다.

품질 보증(QA): 연구의 진행 동안, 수집된 데이터는 데이터 집합의 수집에 관여하지 않은 제2의 과학자에 의해 검증되었다. 이러한 검증을 원시 데이터로 기록하고, 이러한 연구에 대한 데이터 패키지로 유지시켰다. 연구의 완료시, 전체 데이터 패키지(모든 원시 데이터, 측정값, 기록지 및 계산값)를 검증하고 최종 보고서에 대해 검토하였다.

통계적 방법

통계적 방법: 기선 행동 값으로부터의 변화를 각각의 상에서 각각의 치료 군에 대해 계산하였다. 기선은, 동물이 투약 상의 개시(제1 상, 제2 상 및 제3 상의 경우 각각 28, 42 및 56 일) 이전에 치료받지 않는 동안 측정된 행동 값으로 규정된다. 각각의 전체 투약 상에 대한 평균 행동 매개변수 데이터를 분산 분석(ANOVA: Analysis of Variance) 하였다. 또한 평균 방법으로부터의 최소 자승법에서의 차이를 이용하는 각각의 치료 쌍 사이의 SAS 페어-와이스(pair-wise) 비교를 사용하여, 실험의 투약량, 순서, 이월 효과(carry-over effect) 및 상을 공변인(covariate)으로서 검사하는 혼합 모델 분석으로 데이터를 처리하였다. p < 0.005의 값을 통계적으로 유의적인 것으로 고려하였다.

각각의 상에서, 기선을 상의 첫 날짜(이는 28 일, 42 일 및 56 일임)에서의 측정값으로 규정하였다. 기선으로부터의 변화를, 다른 날짜에서의 측정값과 기선 측정값의 차이로서 채택하였다. 각각의 피험자에 대한 기선으로부터의 평균 변화는 각각의 상에서의 기선 값으로부터 2개의 변화를 합하고(예를 들어, 제1 상에서 30 일 및 32 일) 2로 나누어 계산된다.

기술 통계(평균 및 표준 편차)를 상이한 행동 종점을 위해 엑셀 시이트에 제공하였다. 기선으로부터의 변화를 치료 군(N = 15)당 상이한 상에서, 상 측정이 수행되는 날짜를 무시하고 계산하였다. 상 내에서, 유일한 공변인으로서 치료를 갖는 일원(one-way) ANOVA를 사용하여 상이한 치료하에서의 평균을 비교하였다. 귀무 가설은 평균이 상이한 치료하에서 모두 동일하다는 것이었다. p-값 < 0.01(신체 스윙의 경우) 및 < 0.0001(뒷다리 및 앞다리의 경우)에 의해, 통계적 유의성은 강하게 증명되었다. 귀무 가설은 99%의 신뢰 수준에서 거부되었고, 따라서 연구된 근육 기능에 대해 3개의 투약량 수준이 상당히 상이한 치료 효과를 보여준 것으로 결론지어 졌다.

혼합된 모델의 2개 세트를 사용하여 결과에 미치는 다른 영향을 추가로 조사하였다. 혼합된 모델의 제1 세트에서, 결과 변수는 상 내에서의 2개의 기선-후 측정값으로부터의 평균 변화였다. 고정된 효과는 다음의 공변인을 포함하였다: "투약량", "순서", "이월" 및 "상". "투약량"은 3가지 치료를 지칭하고, "순서"는 각각의 군에 할당된 치료 순서를 지칭하고(즉, "높은 치료-낮은 치료-비히클 치료"), "이월"은 이전 상으로부터의 투약량으로서 정의되는 이월 효과이고, 여기서 제1 상의 이월 효과는 0으로 설정되었다. 유일한 하나의 무작위 효과인 id가 존재하였고, 이는 순서에 내포된 피험자 식별이었다. 혼합된 모델의 제2 세트에서, 결과 변수는 상 내의 기선으로부터의 원시 변화(raw change)였다(2개의 기선-후 측정값의 평균을 취하지 않음). 고정된 효과로서의 날짜는 모델에 부가되어 고정된 효과는 다음의 공변인을 포함하였다: "투약량", "순서", "이월", "상" 및 "날짜"; "날짜"는 측정값이 취해진 날짜이고, 이는 상에 내포되었다. 나머지 고정된 효과는 이전의 혼합된 모델에서와 동일하였다. 유일한 하나의 무작위 효과인 id가 존재하였고, 이는 순서에 내포된 피험자 식별이었다. 혼합된 모델에서, 제시된 SAS로부터의 출력물의 2개 부분이 존재하였다. 제1 부분은 "고정된 효과의 제3 유형 시험"이다. 통계적으로 유의적인 p-값(< = 0.05)에 의해, 이 효과가 결과를 유의적으로 예측한다는 결론이 내려질 수 있었다. 제2 부분은 "최소 자승 평균의 차이"였고, 여기서 페어-와이즈 비교를 각각의 치료 쌍, 즉 높은 투약량 대 낮은 투약량 사이에서 수행하였다. 0.05 이하의 p-값은 상이한 치료하에서의 결과의 차이에 있어서 통계적인 유의성을 주장한다.

앞다리 기능에 있어서, 제1 모델은, 상, 투약량 및 이월 효과가 유의적 효과이지만 순서는 그렇지 않음을 입증하였다. 높은 투약량은 낮은 투약량(p=0.0334) 및 비히클(p = 0.001)에 비교하여 앞다리 기능을 유의적으로 개선시킨 반면; 낮은 용량은 비히클에 비하여 0.05의 수준에서 통계적으로 유의적인 개선을 나타내지 않았다. 제2의 혼합된 모델에서, 날짜는 또 다른 상당한 효과로서 나타났고, 모든 3가지 치료는 p < 0.0001에 의해 서로 유의적인 차이를 보여주었다(즉, 높은 투약량 대 낮은 투약량, 높은 투약량 대 비히클, 및 낮은 투약량 대 비히클). 전체적으로, 앞다리 기능의 경우, 두 모델은 상, 투약량 및 이월 효과가 유의적 효과이지만 순서는 그렇지 않음을 입증하였다. 두 모델은 높은 투약량이 낮은 투약량 및 비히클에 비해 앞다리 기능을 유의적으로 개선시킬 것임을 입증하였다. 제2의 혼합된 모델은 더 작은 p-값에 기초하여 치료 효과를 검출하는데에 더 민감한 것으로 나타났다.

동일한 분석 절차를 앞다리, 뒷다리, 및 신체 스윙을 비롯한 각각의 결과 측정값에 대해 적용하였다.

앞다리 기능의 경우, 제1 모델은 상 및 투약량이 유의적 효과이지만 순서 또는 이월 효과는 유의적이지 않음을 입증하였다. 높은 투약량은 비히클에 비해 앞다리 기능을 유의적으로 개선시켰고(p < 0.0001), 낮은 투약량 또한 비히클에 비해 앞다리 기능을 유의적으로 개선시켰지만(p = 0.0027), 높은 투약량은 낮은 투약량에 비하여 0.05 수준에서 통계적 유의성을 나타내지 않았다. 제2의 혼합된 모델에서, 순서를 제외한 모든 효과는 유의적인 효과를 나타내었고, 모든 3가지 치료는 p < 0.0001에 의해 서로 유의적인 차이를 보여주었다(즉, 높은 투약량 대 낮은 투약량, 높은 투약량 대 비히클, 및 낮은 투약량 대 비히클). 전체적으로, 뒷다리 기능의 경우, 두 모델은 상 및 투약량이 유의적인 효과임을 입증하였다. 두 모델은 또한 높은 투약량 및 낮은 투약량이 비히클에 비해 뒷다리 기능을 유의적으로 개선시킬 것임을 입증하였다. 제2의 혼합된 모델은 더 작은 p-값에 기초하여 치료 효과를 검출하는데에 더 민감한 것으로 나타났다.

신체 스윙 기능의 경우, 제1 모델은 투약량만이 유의적 효과임을 입증하였다. 높은 투약량은 비히클에 비해 신체 스윙 기능을 유의적으로 개선시켰고(p = 0.0131), 낮은 투약량 또한 비히클에 비해 신체 스윙 기능을 유의적으로 개선시켰지만(p = 0.033), 높은 투약량은 낮은 투약량에 비하여 0.05 수준에서 통계적 유의성을 나타내지 않았다. 제2의 혼합된 모델에서, 상은 또 다른 유의적인 효과로서 나타났다. 높은 투약량은 낮은 투약량(p = 0.006) 및 비히클(p < 0.0001)에 비해 신체 스윙 기능을 유의적으로 개선시켰지만; 낮은 투약량은 0.05 수준에서 비히클에 비해 통계적으로 유의적인 개선을 나타내지 않았다. 전체적으로, 신체 스윙 기능의 경우, 두 모델은 투약량이 유의적인 효과임을 보여주었다.

혼합된 모델에서 기선으로부터의 변화 = 투약량, 순서, 이월, 상, 날짜이고, id는 무작위 효과로서 순서에 내포된다. 기선은 각각의 상의 경우 각각 28 일, 46 일, 및 56 일이다. 투약량은 3개의 고정된 수준인 높은 투약량, 낮은 투약량 및 비히클이고; 순서는 3개의 상이한 투약 순서로서의 3개의 고정된 값, 즉 "hlv", "lvh" 및 "vhl"을 갖고; 이월(이월 효과)은 이전 상으로부터의 투약량으로 정의되고, 여기서 제1 상에 대한 이월 효과는 0으로 설정된다. id는 데이터로부터의 래트의 식별이다. ^*는 α = 0.05에서 양쪽 검정(two sided test)에 기초하여 통계적으로 유의적임을 나타낸다.

결과

표 3은 치료 군 사이의 동물의 분포를 보여준다. 표 4 내지 6은 각각의 군 1 내지 3에 대한 앞다리 위치잡이 시험 총 점수를 보여준다. 표 7 내지 9는 각각의 군 1 내지 3에 대한 뒷다리 위치잡이 시험 총 점수를 보여준다. 표 10 내지 12는 각각의 군 1 내지 3에 대한 신체 스윙 시험 총 점수를 보여준다. 표 13 내지 15는 각각의 군 1 내지 3에서 시험된 시점에서의 동물의 체중을 보여준다. 표 16 내지 18은 각각의 군 1 내지 3에 대한 실린더 시험 총 점수(전체 비대칭성의 %)를 보여준다. 표 19 내지 21은 각각의 군 1 내지 3에 대한 실린더 시험 총 움직임 점수를 보여준다.

[표 3]

치료 군 사이의 동물의 분포

[표 4]

앞다리 위치잡이 총 점수 군 1

[표 5]

앞다리 위치잡이 총 점수 군 2

[표 6]

앞다리 위치잡이 총 점수 군 3

[표 7]

뒷다리 위치잡이 총 점수 군 1

[표 8]

뒷다리 위치잡이 총 점수 군 2

[표 9]

뒷다리 위치잡이 총 점수 군 3

[표 10]

신체 스윙 시험(오른쪽 스윙%) 군 1

[표 11]

신체 스윙 시험(오른쪽 스윙%) 군 2

[표 12]

신체 스윙 시험(오른쪽 스윙%) 군 3

[표 13]

체중(g) 군 1

[표 14]

체중(g) 군 2

[표 15]

체중(g) 군 3

[표 16]

실린더 시험 점수(전체 비대칭성(%)) 군 1

[표 17]

실린더 시험 점수(전체 비대칭성(%)) 군 2

[표 18]

실린더 시험 점수(전체 비대칭성(%)) 군 3

[표 19]

실린더 시험(총 움직임) 군 1

[표 20]

실린더 시험(총 움직임) 군 2

[표 21]

실린더 시험(총 움직임) 군 3

MCAO는 감각운동 기능의 실질적인 급성 손상을 초래하였고, 이는 부분적으로 회복되어, 치료 전 4-주 기간의 종료시 모든 동물에서 안정적 결함의 정체기에 도달했다.

모든 군(1 내지 3)은 MCAO-유도된 허혈에 대해 전형적인 회복 반응을 나타내었고, 수술 직전(-1 일)에 정상 점수는 0이고, 폐색 후 24 시간 이내(1 일)에 기능이 완전히 손실되었다(점수 12, 앞다리; 6, 뒷다리). 그 다음 4 주의, 치료되지 않은 상 동안, 앞다리 및 뒷다리 점수는 각각 대략 5.5 및 3으로 각각 개선되었고, 회복의 정체기 수준에 도달하였다(도 3 및 4). 신체 스윙 시험에서, 동물들은 수술 후 5% 미만의 오른쪽으로의 스윙을 나타냈고, 4주의 미처리 기간의 종료시 오른쪽 스윙을 대략 25% 회복하였다(도 5). 유의적이지 않지만, 기선 행동 측정값은 제1 상 및 제2 상 사이에, 제2 상 및 제3 상 사이에 약물 부재 기간 동안 치료전 수준에 비해 약하게 개선되었다. 이는 느리고 지속적인 내생성 회복, 반복된 행동 평가의 훈련 효과 및 가능하게는 치료의 이월 효과에 기인할 수 있다.

모든 동물들은 연구 종료까지 각각의 치료를 받았다. 4-AP를 래트에 1 일 2회 투여하였다(본 연구 및 실시예 17에 제시된 연구에서). 1 내지 1.5 시간의 반감기를 갖고[하예스(Hayes) 등의 문헌 "J. Clin. Pharmacol. 2003; 43:379-85"], 이러한 섭생은 화합물의 장기간의 혈장 수준을 지속하지 않았지만, 이는 동물에서 반복된 1 일 노출을 허용하였다. 행동 평가를 투약 후 1 시간에 수행하여 평가 동안의 적절한 노출을 보장하였고, 각각의 투약 상에 대한 3일 간격은 행동 평가를 실행하기 이전에 경구 위관 영양의 스트레스에 동물을 적응시키는 것을 도왔다. 30 분 후 혈액을 채취하여 행동 평가의 완료시 동물에서의 달팜프리딘의 투약-연관된 수준을 확인하였다(표 22). 여기서 사용된 투약량 또는 수득된 혈장 농도를 약물의 서방성 제형으로 치료된 환자에서 기대되는 바와 동일시하는 것은 가능하지 않음을 주지해야 한다(여기서 약물동력학은 매우 상이함). 또한, 혈액에서의 농도와 비교하여 뇌척수액에서 측정된 피이크 농도에서는 지연이 존재하고, 이는 인간 피험자에서 대략 1 시간이다[도노반(Donovan) 등의 문헌 "Spinal Cord 2000; 38:7-15"]. 따라서, 주어진 혈장 수준을 위해 중추 신경계에서 달성된 4-AP의 농도는 더 긴 시간 동안 유지된 유사한 농도와 비교하여 위관 영양 이후 일시적 혈장 피이크를 위해 훨씬 적을 것이다.

앞다리 위치잡이 시험은 앞다리 기능에 대한 치료 효과를 보여준다. 도 3으로부터, 허혈성 뇌 손상 후 4 주째 낮은 투약량 또는 높은 투약량의 4-아미노피리딘에 의한 치료가 래트에서 앞다리 기능을 개선시키는데 효과적임을 알 수 있다. 또한 도 3으로부터, 효과는 투약량-반응성임을 알 수 있다. 이러한 효과는 또한 약물의 중단시 감소하므로 가역성이다.

뒷다리 위치잡이 시험은 뒷다리 기능에 대한 효과를 보여준다. 도 4a 내지 4d로부터, 허혈성 뇌 손상 후 4 주째 낮은 투약량 또는 높은 투약량의 4-아미노피리딘에 의한 치료가 래트에서 뒷다리 기능을 개선시키는데 효과적임을 알 수 있다. 또한 도 4a 내지 4d로부터 효과가 가역성임을 알 수 있다. 분명히, 더 높은 투약량에 의한 치료가 더 낮은 투약량 또는 비히클 대조 군에 의한 치료에 비해 개선된 행동 점수를 일으키므로, 효과는 투약량 반응성이다.

신체 스윙 시험은 전신 제어에 대한 치료 효과를 보여준다. 도 5로부터, 낮은 투약량 또는 높은 투약량의 4-아미노피리딘에 의한 치료가 래트에서 총 스윙에 대한 오른쪽으로의 백분율을 개선시키는데 효과적이고, 이에 따라 허혈성 뇌졸중의 증후중 하나를 개선시키는데 효과적임을 알 수 있다. 이와 같이, 도 5로부터, 4-아미노피리딘이 래트에서 전신 제어를 개선시키는데 효과적임을 알 수 있다. 도 5는 또한 효과가 가역적이고 투약량-의존적임을 입증하였다.

제1 투약 상 동안 2 mg/kg으로 4-아미노피리딘을 수여받은 군 1 동물(도 3 내지 5)은 치료전 기선 점수에 비해 앞다리, 뒷다리 및 신체 스윙 점수에서 유의적인 개선을 나타내었다(28 일 대 32 일; p 값 < 0.05). 투약 제1 상 및 제2 상 사이에서(휴약 기간, 33 내지 42 일), 사지 위치잡이에 대한 효과는 거의 기선 수준으로 복귀되었다. 제2 투약 상 동안, 군 1의 동물은 4-아미노피리딘을 0.63 mg/kg으로 수여받았다. 모든 행동 점수는 투약 직전의 휴약 기간 동안의 점수에 비해 유의적으로 개선되었지만(42 일 대 46 일; p < 0.05), 이들은 제1의 더 높은 투약량 상 동안과 동일한 정도의 개선을 나타내지는 않았다. 제2 및 제3 상 사이의 휴약 기간 동안(47 일 내지 56 일), 행동 점수는 기선 점수와 유사한 수준으로 감소하였다(56 일). 이 군의 동물은 제3 상 동안 비히클을 수여받았고, 투약 직전의 날짜와 비교하여 행동 점수에 변화가 없었다(56 일째).

제1 투약 상 동안 0.63 mg/kg으로 4-아미노피리딘을 수여받은 군 2 동물(도 3 내지 5)은 치료전 기선 점수에 비해 모든 측정값에서 유의적으로 개선된 행동 점수를 나타내었다(28 일 대 32 일; p 값 < 0.05). 투약 제1 상 및 제2 상 사이에서, 동물이 약물을 투약받지 않는 동안, 행동에 대한 효과는 투약 이전 상과 유사한 수준으로 감소하였다(42 일). 투약 제2 상 동안, 이러한 군의 동물은 비히클을 수여받았고, 행동 시험 점수에 변화가 없는 것으로 입증되었다. 이들은 제2 상 및 제3 상 사이의 휴약 기간 동안 기능이 기선 수준으로 유지되었다(47 내지 56일). 이러한 군의 동물은 투약의 제3 상 동안 4-아미노피리딘을 2 mg/kg으로 수여받았고, 모든 행동 시험 점수는 이전 상의 기선 점수에 비해 유의적으로 개선되었다(56 일 대 60 일; p 값 < 0.05).

군 3의 동물(도 3 내지 5)은 상이한 치료 상 동안 군 1 및 2에서 보여지는 것과 유사한 결과를 갖는다. 이들 동물은 제1 상 동안 비히클을 수여받았다. 행동 점수에는 전혀 변화가 없었고, 동물은 제1 상 및 제2 상 사이의 휴약 기간을 통해 기능을 이러한 수준으로 유지하였다. 제2 상 동안 2 mg/kg으로의 4-아미노피리딘 치료 및 제3 상 동안 0.63 mg/kg으로의 4-아미노피리딘 치료는 각각의 상 직전의 약물이 없는 경우의 평가에 비하여 사지 위치잡이에서 유의적인 개선을 나타내었다(각각 42 일 대 46 일, 및 56 일 대 60 일; p 값 < 0.05). 신체 스윙 점수는 제2 상에서 높은 투약량 치료 동안 개선되었지만(42 일 대 46 일; p < 0.05), 제3 치료 상 동안 낮은 투약량 치료로는 변화되지 않았다. 제2 상 및 제3 상 사이의 휴약 기간 동안 기선 행동으로 복귀되었다(56 일).

함께 고려하여, 모든 동물은 이들이 치료되는 순서와 무관하게 각각의 치료에 유사하게 반응하였다. 모든 경우에 있어서, 임의의 투약 상 동안 가장 높은 투약량은 비히클 및 낮은 투약량에 비해 유의적인 개선을 초래하였고(p 값 < 0.05), 더 낮은 투약량은 사용된 통계 모델에 따라서 비히클에 비해 통계적으로 더 우수하거나 유의적인 경향을 나타내었다(ANOVA 또는 혼합된 모델 분석, 상기 통계 방법을 참조한다).

치료 전 매주 평가함에 더하여, 평가를 임의의 소정의 투약 상 동안 2회 수행하였다(1차 투약 및 5차 투약 후). 이들 점수 사이에 약간의 개선이 주지되었다(예를 들면, 군 3, 30 일 및 32 일 사이, 동물이 비히클 치료를 수여한 경우). 이는 경구 위관 영양의 스트레스에 대한 순응에 기인할 수 있거나, 아마도 동물이 시험에 익숙해 지고 이를 기대함에 따라 학습 반응을 나타낸 것일 수 있다. 이러한 효과는 동물이 각각 3일의 투약 기간 동안 단지 1회 시험되는 실시예 17에 제시된 연구에서는 관찰되지 않았다(56 일, 비히클 군 참조). 기선이 여전히 약하게 개선되고 모든 가능한 투약 순서가 시험되지 않았으므로, 이후의 상에 4-AP로 투약된 경우, 4-AP로의 이전 노출이 더 크거나 더 작은 반응으로 동물에게 미리 제공되었는지의 여부를 결정하는 것은 불가능하였다. 투약 순서의 다양성으로부터의 이러한 잠재적인 이월 효과를 제거하기 위해, 실시예 17에 제시된 연구는 휴약 기간 없이 투약량의 단계적 확대 연구로서 고안되었다.

실린더 시험은 전신 제어, 예컨대 신체 대칭 및 협응의 양태에 대한 치료 효과를 보여준다. 도 7로부터, 4-아미노피리딘에 의한 치료는, 래트에서의 총 사지 사용에 대한 손상된 앞다리의 사용의 백분율의 증가에 의해 보여지듯이, 뇌졸중으로부터 생성된 사지 사용에서의 비대칭성을 개선시키는데 효과적임을 알 수 있다. 이와 같이, 도 7로부터, 4-아미노피리딘은 래트에서 신체 대칭성 및 협응을 개선시키기에 효과적임을 알 수 있다. 도 7로부터, 이 효과는 가역성이고 투약량-의존성임이 입증되었다.

도 9는 경색 부피의 차이가 군 1 내지 3 사이에서 관찰되지 않았음을 보여준다. 특히, 평균 경색 부피(대측성 반구의 %)는 임의의 군 사이에서 차이가 없었다. 군 1에서 평균 경색 부피(%)는 45.0(±1.8)이고, 군 2에서는 41.4(±2.3)이며, 군 3에서 39.0(±3.3)이었다.

4-아미노피리딘 혈장 수준: 동물이 비히클 치료를 수여받았을 때 채취된 혈액 샘플은 이 방법을 위한 정량화의 하한치 미만의 4-아미노피리딘의 수준을 갖는다. 동물이 4-아미노피리딘을 수여받았을때 채취된 혈액은 투약 수준에 적절히 관련된 행동 시험의 시간에서의 노출을 확인하였다. 4-아미노피리딘 혈장 수준은 표 22에 제시된다.

[표 22]

4-아미노피리딘 혈장 수준

데이터로부터, 각각의 별도의 치료 상 및 전체 동안, 4-아미노피리딘 치료가 앞다리, 뒷다리 및 신체 스윙 기능에 있어서 유의적인 개선을 초래하였음을 알 수 있다. 추가로, 본 발명자들에 의해 이용되는 몇몇의 교차 통계 모델은 높은 투약량이 일관된 기초하에 비히클 대조 군 및 낮은 투약량에 비해 유의적으로 우수함을 입증하였다(사지 위치잡이 시험의 경우 p < 0.0001, 신체 스윙의 경우 p < 0.001). 낮은 투약량은 비히클 대조 군에 비하여 개선에 대한 강한 경향을 나타내거나 이에 대한 유의성에 도달하였다. 추가적으로, 투약 상에서의 2차 평가 동안의 점수는 1차 약물 평가에 비해 유의적으로 우수하였다. 이와 같이, 본 실시예는 4-AP가 동물에서 검출가능한 혈장 수준으로 존재하는 시간 동안 앞다리 및 뒷다리 감각운동 기능에서 가역성이며 투약량 의존성인 유의적 개선을 입증하였다. 신체 스윙 시험 데이터는 또한 자세 기능의 회복에 대한 투약량 의존성 효과를 나타낸다. 이는 선조체중의 관에 대한 영향, 또는 아마도 피질하 백색 물질 영역에 대한 효과의 증거이다. 추가로, 본 실시예는 각각의 군내에서 및 각각의 상에서의 군 사이에서 4-AP에 의한 치료에 대한 분명한 투약량-의존성 반응을 입증한다.

또한, 도 3 내지 8에서의 결과로부터, 4-아미노피리딘에 의한 연속된 치료가 감각운동 행동 결과에 추가의 개선을 산출할 수 있음을 알 수 있다. 특히, 4-아미노피리딘의 다중 투약량의 투여 이후 행동 점수는, 평균적으로, 4-아미노피리딘의 단일 투약 이후 행동 점수에 비해 개선된다.

이들 결과로부터 4-아미노피리딘에 의한 치료가 감각운동 기능의 뇌졸중-관련된 장애를 앓는 포유동물에서 감각운동 기능을 개선시키는데 효과적임을 알 수 있다. 이들 결과는, 치료가 만성 기간 동안 개시될 경우, 뇌졸중 사건 이후 안정적 운동 결함에 의한 뇌졸중-관련된 감각운동 장애가 개선됨을 또한 입증한다. 이러한 데이터에 기초하여, 4-아미노피리딘은 유의적으로 뇌졸중-후 만성 감각운동 결함을 개선시키는 것으로 결론내릴 수 있다.

실시예 3: 허혈성 뇌졸중의 치료

허혈성 뇌졸중의 징후 및 증후를 갖는 환자를 의료 시설로 보냈다. 환자는 tPA로 또는 다른 치료법으로 혈관이식되어 혈류를 복원하였다. 비록 혈류가 복원되었지만, 일정 수준의 뇌 손상이 야기되었다. 뇌졸중 후 3일째, 환자를 신경학적으로 평가하였고, 측정가능한 감각운동 결함을 갖는 것으로 보여졌다. 4 일째 시작하여, 2 일 후 및 3 일 후, 이 환자를 4-아미노피리딘으로 투약당 0.01 내지 1.0 mg/kg의 투약량으로, 정맥내로 10 일 내지 3 개월 동안 치료하였다. 치료 동안 및 치료 후, 감각운동 기능을 평가하였다.

실시예 4: 뇌졸중 및 생성된 오른쪽 손의 마비의 치료

오른쪽 손이 마비된 환자를 응급 부서로 보냈다. 평가 및 영상촬영 이후, 환자가 허혈성 뇌졸중을 앓는 것으로 결정하였다. 환자는 승인된 방법에 따라 tPA를 수여받았고, 혈류는 혈전 제거를 통해 복원되었다. 그러나, tPA 치료 후 1 주일째, 환자는 손 운동 활성에 대한 표준 신경 측정법에 의해 측정될 경우 오른쪽 손의 마비가 남아있었다. 이 환자를 4-아미노피리딘으로 뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 또는 6.5 년, 또는 그 이상의 날짜에 1 주당 1회 4 주 동안 치료하였다(0.01 내지 1.0 mg/kg, IV). 동력계 및 다른 강도 시험을 비롯한 표준 신경 시험에 의해 신경학자 또는 다른 의사에 의해 주기적으로 손 기능에서의 개선을 측정하였다. 치료 동안 및 치료 이후, 오른쪽 손에서의 감각운동 기능을 평가하였다.

실시예 5: 허혈성 뇌졸중의 치료

허혈성 뇌졸중의 징후 및 증후를 갖는 환자를 의료 시설로 보냈다. 이들은 왼쪽 측부가 마비된 것으로 밝혀졌다. 환자는 혈관 이식 치료를 위해 재시간에 도착하지 못하였다. 임상적 평가시, 일부 뇌 손상이 초래된 것으로 밝혀졌다. 뇌졸중 후 3 일째, 환자를 신경학적으로 평가하였고, 측정가능한 감각운동 손상을 갖는 것으로 보여졌다. 이 환자를 4-아미노피리딘으로 뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 또는 6.5 년, 또는 그 이상의 날짜에 투약 당 0.01 내지 1.0 mg/kg의 투약량으로, 정맥내로 각각의 날짜에 4 주 동안 치료하였고; 이후 이들은 6 개월 동안 매주 투약받았다. 이들은 또한 물리 치료를 받았다. 치료 동안(예를 들어, 2 주 후) 및 치료 이후, 왼쪽 측부의 감각운동 기능을 평가하였다.

실시예 6: 허혈성 뇌졸중의 치료

왼쪽 손이 마비된 환자를 응급 부서로 보냈다. 환자는 이들 손의 문제가 "1 주 전을 지나" 시작된 것으로 보고하였다. 평가 및 영상촬영 이후, 환자가 허혈성 뇌졸중을 앓는 것으로 결정하였다. 환자는 tPA를 수여받지 않았다. 신경 검사시, 환자는 손 운동 활성에 대한 표준 신경 측정법에 의해 측정될 경우 왼쪽 손의 마비가 남아있는 것으로 밝혀졌고; 환자는 또한 감각 결함을 가졌다. 환자는 물리 치료 또는 작업 치료에 참여하는 것을 거부하였다. 환자는 4-아미노피리딘으로 뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 또는 6.5 년, 또는 그 이상의 날짜에 1 주당 1회 12 주 동안 치료받았다(0.01 내지 1.0 mg/kg, IV). 동력계 및 다른 강도 시험을 비롯한 표준 신경 시험에 의해 신경학자 또는 다른 의사에 의해 주기적으로 손 기능에서의 개선을 측정하였다. 치료 동안(예를 들어, 치료 2 주 후) 및 치료 이후, 오른쪽 손에서의 감각운동 기능을 평가하였다.

실시예 7: 출혈성 뇌졸중의 치료

허혈성 뇌졸중 또는 뇌 출혈과 일치하는 징후 및 증후를 갖는 환자를 의료 시설로 보냈다. 환자를 안정화시켰다. 신경 평가시, 일정 수준의 뇌 손상이 초래된 것으로 밝혀졌다. 뇌졸중 후 1 주째 환자는 신경학적으로 다시 평가받았고 측정가능한 감각운동 결함을 갖는 것으로 보였다. 이 환자는 4-아미노피리딘으로 뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 또는 6.5 년, 또는 그 이상의 날짜에 0.01 내지 1.0 mg/kg의 투약량으로 매일 정맥내로 10 일 동안 치료받기 시작했고, 이후, 2 개월 동안 매주 상기 투약량을 투여 받고, 이 시점에 모든 치료를 중단하였다. 감각운동 기능을 평가하였다(예를 들어, 뇌졸중-후 1, 2, 3, 4, 5, 6 주, 및/또는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 또는 12 개월 후, 및/또는 치료 개시로부터).

실시예 8: 만성 기간에서의 치료를 포함하는, 뇌졸중-관련된 손상의 4- 아미노피리딘의 치료

포괄적 시험을 위해, 포함 기준은 다음을 포함한다: 신경 손상이 임상적으로 입증된 성인 남녀.

탐색되는 지표:

혈전용해제가 사용되는 허혈성 뇌졸중,

혈전용해제가 사용되지 않는 허혈성 뇌졸중,

출혈성 뇌졸중.

탐색되는 투약량 범위:

투약당 0.001 mg/kg 내지 10.0 mg/kg.

탐색되는 투약 빈도:

매일

격일

4일에 한번

매주

격주

매달

혼합된 주기성 섭생:

- 1 주 또는 2 주 동안 매일, 이어서 남은 연구 기간 동안 매주, 격주, 매달

- 1 주 또는 2 주 동안 격일, 이어서 매주, 격주 또는 매달

탐색되는 치료의 개시:

뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 또는 6.5 년, 또는 그 이상의 날짜.

탐색되는 치료 기간

1, 2, 4, 10, 30 주 동안 치료,

1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 개월 동안 치료

1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 년 동안 치료.

탐색되는 기능:

손 운동 기능,

안면 운동 기능,

생존,

작업에 복귀하는 시간.

회복은 표준 신경 측정법에 의해 측정된다.

결과: 상기 기재된 바와 같은 치료시, 당분야에 공지된 방법을 사용하여 4-아미노피리딘으로 치료된 환자 및 위약으로 치료된 환자에서 감각운동 기능을 평가하고, 시험 결과를 비교한다.

다른 실시태양에서, 모든 상기 매개변수에 비해 더 적은 조합이 탐색된다.

실시예 9: 한쪽 손의 약화 및/또는 마비를 갖는 허혈성 뇌졸중의 4- 아미노피리딘 치료(혈전용해제 사용 안함 )

포함 기준은 다음을 포함한다: 의식 없음, 방향상실, 말 장애(speech difficulty), 안면 또는 사지 마비에 기초하여 뇌졸중이 입증된 성인 남녀. 허혈성 뇌졸중은 방사선 사진으로 확인됨.

환자는, tPA(또는 다른 혈전용해제)에 대한 후보가 아니거나 어떠한 이유로도 이전에 tPA를 수여받지 않은, 한쪽 손이 약화 및/또는 마비된 환자에 대해 선택된다. 환자 및/또는 환자의 법정 대리인으로부터 동의서를 받는다.

환자는 등록되고 무작위로 4-아미노피리딘 또는 위약을 뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 또는 6.5 년, 또는 그 이상의 날짜에 수여받고, 이들이 대형 병원이나 개인 병원을 비롯한 의료 설비에 보내지자 마자 시작하여, 진단하고 영상촬영한다.

이 시험을 위해, 치료를 손상 후 1 시간 내지 7 일 사이에 개시한다. 3개월 동안을 격일로 1 주일 동안, 이어서 나머지 치료 기간 동안 매주 투약하여 치료를 지속한다. 환자에게 0.0001 내지 1.0 mg/kg을 정맥내로, 근육내로, 또는 피하로 투약한다.

연구 동안 격주로 손 감각운동 활성에 대한 표준 신경 측정법에 의해 회복을 측정한다.

결과: 상기 기재된 치료시, 4-아미노피리딘으로 치료된 환자 및 위약으로 치료된 환자에서 당분야에 공지된 방법을 사용하여 손 기능을 평가하고, 시험 결과를 비교한다.

실시예 10: 한쪽 안면의 마비를 갖는 허혈성 뇌졸중의 4- 아미노피리딘 치료(혈전용해제 사용 안함 )

환자는, 혈전용해제를 수여받지 않거나 받을 수 없는, 한쪽 안면이 마비된 환자에 대해 선택된다. 3 개월의 투약 기간 동안 격주로 당분야에 공지된 방법에 의해 기능을 평가한다. 환자 및/또는 환자의 법정 대리인으로부터 동의서를 받는다.

환자는 등록되고 무작위로 4-아미노피리딘 또는 위약을 수여받는다. 치료를 뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 또는 6.5 년, 또는 그 이상의 날짜에 개시한다. 3개월 동안을 격일로 1 주일 동안, 이어서 나머지 치료 기간 동안 매주 투약하여 치료를 지속한다. 환자에게 0.0001 내지 1.0 mg/kg을 정맥내로, 근육내로, 또는 피하로 투약한다.

결과: 상기 기재된 치료시, 4-아미노피리딘으로 치료된 환자 및 위약으로 치료된 환자에서 안면 운동을 평가하고, 시험 결과를 비교한다.

실시예 11: 허혈성 뇌졸중의 4- 아미노피리딘 치료(혈전용해제 사용)

포함 기준은 다음을 포함한다: 의식 없음, 방향상실, 말 장애, 안면 또는 사지 마비에 기초하여 뇌졸중이 입증된 성인 남녀. 허혈성 뇌졸중은 방사선 사진으로 확인된다.

환자는, tPA 또는 다른 혈전용해제로 치료되지 않은, 한쪽 손이 약화 및/또는 마비된 환자에 대해 선택된다. 환자 및/또는 환자의 법정 대리인으로부터 동의서를 받는다.

환자는 등록되고 의료 설비로 보내지자 마자 무작위로 4-아미노피리딘 또는 위약을 수여받기 시작하고, 진단 및 영상촬영을 완료한다.

치료를 뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 또는 6.5 년, 또는 그 이상의 날짜에 개시한다. 3개월 동안을 격일로 1 주일 동안, 이어서 나머지 치료 기간 동안 매주 투약하여 치료를 지속한다. 환자에게 0.0001 내지 1.0 mg/kg을 정맥내로, 근육내로, 또는 피하로 투약한다.

연구 동안 격주로 손 감각운동 활성에 대한 표준 신경 측정법에 의해 회복을 측정한다.

결과: 상기 기재된 치료시, 4-아미노피리딘으로 치료된 환자에서의 손 기능을 당분야에 공지된 방법을 사용하여 측정하고, 위약으로 치료된 환자에서의 기능과 비교한다.

실시예 12: 구음 장애를 갖는 뇌졸중의 4- 아미노피리딘 치료(혈전용해제 사용 안함 )

환자는, 혈전용해제를 수여받지 않거나 받을 수 없는 구음 장애를 갖는 환자에 대해 선택된다. 3 개월의 투약 기간 동안 격주로 당분야에 공지된 방법에 의해 기능을 평가한다. 환자 및/또는 환자의 법정 대리인으로부터 동의서를 받는다.

환자는 등록되고 무작위로 4-아미노피리딘 또는 위약을 수여받는다. 치료를 뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 또는 6.5 년, 또는 그 이상의 날짜에 개시한다. 3개월 동안을 격일로 1 주일 동안, 이어서 나머지 치료 기간 동안 매주 투약하여 치료를 지속한다. 환자에게 0.0001 내지 1.0 mg/kg을 정맥내로, 근육내로, 또는 피하로 투약한다.

결과: 상기 기재된 치료시, 4-아미노피리딘으로 치료된 환자에서 구음 장애에 기인한 언어 장애를 당분야에 공지된 방법을 사용하여 평가하고, 위약으로 치료된 환자에서의 장애와 비교한다.

실시예 13: 구음 장애를 갖는 환자의 4- 아미노피리딘 치료(혈전용해제 사용)

포함 기준은 다음을 포함한다: 의식 없음, 방향상실, 말 장애, 안면 또는 사지 마비에 기초하여 뇌졸중이 입증된 성인 남녀. 허혈성 뇌졸중은 방사선 사진으로 확인된다. 환자는, 구음 장애를 갖고 혈전용해제로 치료되지 않은 환자에 대해 선택된다.

치료를 뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 또는 6.5 년, 또는 그 이상의 날짜에 개시한다. 3개월 동안을 격일로 1 주일 동안, 이어서 나머지 치료 기간 동안 매주 투약하여 치료를 지속한다. 환자에게 0.0001 내지 1.0 mg/kg을 정맥내로, 근육내로, 또는 피하로 투약한다.

3 개월의 투약 기간 동안 격주로 당분야에 공지된 방법에 의해 기능을 평가한다.

결과: 상기 기재된 바와 같은 치료시, 4-아미노피리딘으로 치료된 환자에서 및 위약으로 치료된 환자에서의 구음 장애에 기인한 언어 장애를 평가하고 비교한다.

실시예 14: 출혈성 뇌졸중을 갖는 환자의 4- 아미노피리딘 치료

포함 기준은 다음을 포함한다: 의식 없음, 방향상실, 말 장애, 안면 또는 사지 마비에 기초하여 뇌졸중이 입증된 성인 남녀. 출혈성 뇌졸중은 방사선 사진으로 확인된다. 환자 및/또는 환자의 법정 대리인으로부터 동의서를 받는다.

환자는 한쪽 손이 약화된 환자에 대해 선택된다.

환자는 등록되고 대형 병원이나 개인 병원을 비롯한 의료 설비로 보내지자 마자 무작위로 4-아미노피리딘 또는 위약을 수여받기 시작하고, 진단, 영상촬영, 및 동의를 완료한다.

치료를 뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 또는 6.5 년, 또는 그 이상의 날짜에 개시한다. 3개월 동안을 격일로 1 주일 동안, 이어서 나머지 치료 기간 동안 매주 투약하여 치료를 지속한다. 환자에게 0.0001 내지 1.0 mg/kg을 정맥내로, 근육내로, 또는 피하로 투약한다.

연구 기간 동안 격주로 손 감각운동 활성의 표준 신경 측정법에 의해 회복을 측정한다.

결과: 상기 기재된 바와 같은 치료시, 4-아미노피리딘으로 치료된 환자에서의 손 기능을 당분야에 공지된 방법을 사용하여 측정하고, 위약으로 치료된 환자에서의 기능과 비교한다.

실시예 15: 출혈성 뇌졸중을 갖는 환자의 4- 아미노피리딘 치료

인간에서, 0.05 내지 0.1 투약 수준으로의 4AP의 단일 투약량 또는 다중 1 일 투약량을 투여하는 것이 혈전증성 뇌졸중 이후의 기능적 결과에 미치는 영향을 하기 프로토콜을 사용하여 평가한다.

목적: 만성 허혈성 뇌졸중에서 경구적으로 또는 정맥내로 투여된 4AP의 효능 및 안정성을 평가하기 위함.

고안: 다중심적이고 무작위성인, 이중맹검되고 위약 제어된 안정성 및 효능 연구.

포함 기준: 허혈성 뇌졸중 및 사지 약화를 갖고, 뇌졸중 이전에 전체 기능적 독립성을 갖는 환자.

배제 기준: 6 개월 미만의 예상 수명의 심각한 질병, 공지된 심각한 신장 질환, 현재 공지된 알코올 또는 불법 약물 남용 또는 의존성을 갖는 환자. 출혈성 뇌졸중을 앓는 환자도 배제된다.

환자 관여: 환자는 무작위로 단일 투약량의 4AP 또는 위약을, 또는 2 주간의 1 일 투약량의 4AP 또는 위약을, 뇌졸중 사건 이후 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 또는 21 일; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23 또는 24 주; 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 42, 48, 54, 60, 또는 66 개월; 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 3.5, 4, 4.5, 5, 5.5, 6 또는 6.5 년, 또는 그 이상의 날짜에 시작하여 수여받는다. 혈액 샘플을 4AP 치료 이후 여러 시점에서 수집하여 감각운동 기능 결과가 평가되는 시점 부근에서의 혈장 약물 농도를 결정한다.

주요 결과: 치료 후 2 일(단일 투약) 또는 2 주(다중 투약)째의 전체적인 회복 및 감각운동 기능의 회복을 변형된 랜킨 등급(Rankin Scale) 및 NIH 등급에 의해 측정한다.

4-AP에 의한 치료시, 단일 또는 다중 투여 후 뇌졸중 환자에서의 감각운동 기능을 측정하고, 기선 기능 및 위약 치료와 비교한다.

실시예 16: 허혈성 뇌졸중 이후 만성 결함을 갖는 피험자에서의 달팜프리딘 10 mg 복효성 정제에 대한 연구

약어 목록

하기 약어 및 전문 용어는 본 연구 프로토콜에서 사용된다:

연구 대상

하기 임상적 기능에 대한 달팜프리딘-ER 10 mg(즉, 10 mg의 4-아미노피리딘의 서방성 제형)의 효과를 검사하기 위해 1 일 2회 대략 12 시간 간격으로 투여한다:

⊙ 25 걸음 보행 시간(T25FW)에 의해 측정된 보행 속도

⊙ 상자 및 블럭 시험에 의해 측정된 손 재주

⊙ 그립 시험 및 핀치 시험에 의해 측정된 손 강도

⊙ 푸글-메이어(FMA) 평가에 의해 측정된 운동 및 감각 기능

⊙ 선택적으로, 불능 평가 등급(DAS: Disability Assessment scale)에 의해 측정된 상지 경직

⊙ 기능적 독립성 측정(FIM: Functional Independence Measure) 등급에 의한 일상 생활의 활동(ADL)을 수행하는데 필요한 보조

⊙ 전반적 피험자 인상(SGI) 등급

⊙ 전반적 임상가 인상(CGI) 등급

⊙ 선택적으로 벡 우울증 척도(BDI)에 의해 측정된 우울증(심각한 우울증을 제외시키기 위함)

조사 계획

이는 허혈성 뇌졸중 이후 만성 안정적 감각운동 결함을 갖는 환자에서 1 일 2회, 대략 12 시간 간격으로 섭취된 달팜프리딘-ER 10 mg에 대한 연구이다. 이 연구는 이중 맹검의, 위약-제어된 2-기간 교차 연구로서 고안된다. 이는 계획된 66명의 피험자에 의해 다수 위치에서 수행될 것이다. 8 주 동안의 연구는 2-주의 스크리닝 기간, 제1 기간에서의 2 주간의 치료, 1-주 휴약 기간, 제2 기간에서의 2 주간의 치료, 및 1-주간의 치료-후 후속 전화를 포함한다. 부작용은 연구 기간을 통해 모니터링될 것이다. 추가적으로, 간단한 신체 검사 및 활력 징후(vital sign) 측정을 각각의 연구 기간 동안 수행하여, 기선으로부터의 잠재적 변화를 평가한다. 이후 기재된 한 세트의 기능적 및 주관적 임상 평가가 또한 시행될 것이다.

사전 동의된 피험자를 모집한 후, 의료 병력 검사, 이전 뇌 영상촬영으로부터의 결과, SMA-12 화학 시험, 예컨대 크레아틴 소거율의 추정, 소변 검사, 출산 가능성이 있는 여성에 대한 소변 임신 검사(UTP)를 통해, 스크리닝 방문(1차 방문)시 적격여부를 결정한다. 벡 우울증 척도(BDI)를 시행하여 심각한 우울증을 제외시킨다. 또한 스크리닝시, 보행 속도 시간(T25FW), 손 재주(상자 및 블럭), 손 강도(그립 및 핀치 시험), 상지 및 하지에서의 운동 기능(FMA), 상지 운동 경직(DAS), 및 일상 생활의 활동을 수행하는데 필요한 보조에 대한 측정(FIM)이 시행될 것이다. 스크리닝 기간(-14 내지 -1 일)을 2차 방문시 완료하고, 이때 자격요건을 얻은 피험자에 대해 1차 기간의 시작을 표시한다.

2차 방문시(1 일), 피험자를 다음의 2가지 맹검 치료 순서중 하나로 2:1의 비율로 무작위로 나눈다: 위약 이후 달팜프리딘-ER 투여(순서 A) 또는 달팜프리딘-ER 후 위약 투여(순서 B). 이전 방문시 시행된 동일한 임상적 평가를 수행할 것이다. 피험자는 이들에게 할당된 조사 치료를 1 주간 공급받고 퇴원한다. 이들은 그날 저녁 첫번째 투약량을 섭취하고 다음 방문일 아침까지 대략 매 12 시간 마다 1회 투약량을 섭취하도록 지시될 것이다. 이들은 이 기간 동안 1 주 간격으로 2회의 추가의 방문을 받는다: 3차 방문(8 일) 및 4차 방문(15 일). 이들 각각의 방문시, 유사한 다수의 임상적 평가가 수행되고, 전반적 피험자 인상(SGI) 및 전반적 임상가 인상(CGI)이 더해진다. 각각의 방문시 평가에 대한 상세한 계획을 위해 표 23을 참조한다. 3차 방문시 연구 절차의 완료를 위해 조사 제품의 새로운 공급물이 분배될 것이다.

1차 기간의 종료인 4차 방문에서의 연구 절차가 완료될 때, 1 주의 휴약 기간이 시작될 것이고, 이 동안 모든 피험자는 위약을 섭취한다. 피험자는 단일 맹검 위약 공급 후 퇴원하고, 그날 저녁 첫번째 투약량을 섭취하고 다음 방문일 아침까지 대략 매 12 시간 마다 1회 투약량을 섭취하도록 지시될 것이다.

5차 방문(22 일)은 두 군에 대한 연구의 2차 기간의 시작을 표시한다. 이러한 방문 동안, 피험자는 새로운 세트의 임상적 평가를 받고, 이후 이들은 각 군 당 달성된 순서에 따라 교차 치료를 시작한다. 유사한 세트의 평가를 이 기간 동안 매주 2회의 추가의 방문시 수행한다: 6차 방문(29 일) 및 7차 방문(36 일). 2차 기간의 종료일인 7차 방문을 제외하고, 각각의 방문시 연구 절차를 완료할 때 조사 제품을 분배한다. 투약 지침서는 이전 방문때와 동일하다.

후속 전화 방문인 8차 방문(43 일)은, 부작용을 평가하기 위해 한 주 후에 수행된다. 이 연구에 대한 참여는 후속 전화 후 완료된다.

달팜프리딘-ER의 추정적인 피이크 혈장 농도에 상응하도록, 치료 평가 방문 동안(3차, 4차, 6차 및 7차 방문) 계획된 연구 평가의 개시 2 시간 전에 조사 제품의 아침 투약량을 섭취하도록 하는 투약 계획을 갖도록 피험자에게 지시한다.

치료 순응성을 모니터링하기 위해, 스크리닝 방문 후 모든 임상 방문시 혈장 연구 약물 농도를 결정하도록 혈액 샘플을 수득한다.

연구 고안은 도 10에 도표로 나타나 있다. 연구 절차의 방문 계획은 표 23에 제시되고, 절차는 아래에서 찾아볼 수 있다.

[표 23a]

평가 계획

[표 23b]

평가 계획

피험자의 선택 및 거절

(a) 포함 기준

피험자는 하기 기준 모두를 충족시키면 연구에 포함될 수 있다:

1. 지지되는 이전 영상촬영 결과(MRI/CT 스캔)에 따라 평가자에 의해 확인된 경우, 허혈성 뇌졸중에 기인한 안정적 감각운동 결함의 병력

2. 뇌졸중-후 6 개월 이상

3. 18세 내지 85세 사이의 연령의 남성 또는 여성

4. 18.0 내지 35 kg/㎡ 범위의 신체 질량 지수(BMI)를 가짐

5. 암파이라, 달팜프리딘, 팜프리딘 또는 4-아미노피리딘(4AP)을 이전에 사용하지 않음

6. 스크리닝 방문 및 필요할 경우 두 번 방문당 1회 T25FW를 완료하는 충분한 보행 능력

7. 27 이하의 하지 운동 푸글-메이어 점수

8. 필요한 모든 연구 절차를 수행하는 능력

9. 평가자에 의해 결정될 경우, 사전 동의를 제공할 수 있는 적절한 인지 능력

10. 스크리닝 방문으로부터 4주 이내의 안정한 부수적 약제 치료.

(b) 배제 기준

하기 배제 기준중 하나라도 충족한 피험자는 연구에 참여하기에 적절하지 않다.

1. 불임 수술을 받지 않고, 폐경 후 2년 미만이거나, 효과적인 피임 방법을 사용하지 않는, 출산 가능성이 있는 성적으로 활동적인 여성.

2. 임신 또는 모유 수유

3. 단순 열성 발작 이외의 발작 병력

4. 크록크로프트-가울트(Cockcroft-Gault) 식을 사용하여 계산된 크레아틴 소거율이 50 ㎖/분 이하인 것으로 규정된, 보통 내지 심각한 신장 손상

5. 스크리닝 방문시 또는 스크리닝 방문 전 4 주 이내의 활성 요로 감염(UTI)의 증거

6. 스크리닝 방문 전 4 주 이내의 처방 약제 섭생 또는 치료의 개시, 및/또는 부수적 약제 섭생 또는 부수적 치료법이 연구 과정 동안 변화될 것으로 예상됨

7. 스크리닝 방문 전 4 주 이내의 바클로펜(baclofen) 또는 티자니딘(tizanidine)의 개시, 또는 스크리닝 방문 전 4 주 이내의 투약 섭생의 임의의 변화

8. 스크리닝 방문 전 3 개월 이내의 세로토닌 재섭취 저해제(SSRI)의 개시, 또는 스크리닝 방문 전 3 개월 이내의 투약 섭생에서의 임의의 변화

9. 스크리닝 방문 전 2 개월 이내의 보툴리넘(Botulinum) 독소의 사용

10. 지난 일년 이내의 약물 또는 알코올 남용 병력

11. 지난 6 개월 이내의 사지중 어느 하나의 정형외과적 수술 절차

12. 피험자가, 평가자의 판단에서, 임상적으로 유의적이면서 연구를 안전하게 완료하는 피험자의 능력에 영향을 줄 가능성이 있는 비이상적 실험 값을 갖는다.

13. 평가자에 의해 고려되는 불안정한 협심증, 조절되지 않은 고혈압, 또는 임의의 다른 상당한 심혈관계 비이상성

14. 벡 우울증 척도(BDI)에 기초하여 30 이상의 점수에 의해 지시되는 심각한 우울증

15. 평가자의 판단에 따라, 연구의 수행 또는 연구 결과의 해석을 간섭하는 임의의 다른 의학적 증상

16. 스크리닝 방문 전 4 주 이내에 조사 중재 시험의 참여

17. 다발성 경화증의 진단

(c) 피험자 거절 기준

선택적인 거절 기준은 하나 이상의 하기 이유를 포함한다:

⊙ 피험자가 부작용을 경험함(예컨대 발작)

⊙ 임신

⊙ 피험자가 프로토콜에 비순응성임

⊙ 피험자가 후속 절차를 잊어버림

⊙ 피험자가 알코올 또는 약물을 남용하거나, 또다른 적격 기준을 더 이상 충족시키지 않음

피험자의 치료

(a) 투여되는 치료

각각의 피험자는 (A) 달팜프리딘-ER 10 mg을 28회, (B) 위약을 42 회 투약받는다(휴약 기간 동안의 위약 14회 포함). 정제는 집에서 물과 함께 섭취된다. 치료 순서는 하기 섹션 (b)에 기재된 바와 같이 결정된다.

평가가 완료된 후, 2차, 3차, 4차, 5차 및 6차 방문시 피험자에게 조사 제품을 분배한다. 피험자에게 방문일 저녁에 1차 투약량을 섭취하고 다음날 아침에, 대략 12 시간 이후 다음 투약량을 섭취하도록 지시한다. 피험자에게 가능한 일정하게 매 12 시간 마다 투약을 지속하도록 지시한다. 피험자에게 빠트린 투약을 보충하지 않아야 한다고 말해둔다.

각각 분배된 공급물로부터의 마지막 투약량을 다음 계획된 방문일의 아침에 섭취한다. 피험자에게 치료 평가 방문, 즉 3차, 4차, 6차 및 7차 방문 동안 계획된 연구 평가의 개시 2 시간 전에 조사 제품의 아침 투약량을 섭취하는 투약 계획을 갖도록 지시한다.

(b) 치료 군으로 피험자를 할당하는 방법

피험자를, 연구 개시 이전에 이루어진 무작위 분류에 따라서, 1차 방문때 각각 2가지 맹검 치료 순서(A 또는 B)중 하나로 2:1의 비율로 무작위로 나누었다.

A: 위약 이후 달팜프리딘-ER 투여

B: 달팜프리딘-ER 이후 위약 투여

(c) 맹검

약물 투여는 이중 맹검이고, 이는 치료 순서가 피험자 또는 연구 부원에게 공지되지 않음을 의미한다.

휴약 기간은 단일 맹검이고, 이는 연구 부원은 이 기간 동안 위약이 투여됨을 알지만, 피험자는 그렇지 않음을 의미한다.

(d) 치료 순응성

피험자에게 처방된 모든 투약량을 섭취하도록 격려한다. 치료 순응성은 회수된 병에 남은 정제를 계수하고, 각각의 치료 기간 동안 혈장 달팜프리딘 농도를 결정하기 위해 혈액 샘플을 수득함으로써 모니터링된다. 비순응성에 대한 어떠한 이유라도 기록된다.

(e) 이전 및 부수적 약제

다음의 약제는 안정적 증후를 유지할 목적으로 연구 기간 동안, 및 연구 이전의 일정 기간 동안 배제된다:

⊙ 스크리닝 방문 전 4 주 이내에 개시되거나 투약 변경된 바클로펜 또는 티자니딘

⊙ 스크리닝 방문 전 3 개월 이내에 개시되거나 투약 변경된 SSRI

⊙ 스크리닝 방문 전 2 개월 이내에 투여된 보툴리넘 독소

⊙ 스크리닝 방문 전 4 주 이내에 개시되거나 변경된 다른 처방 약제(또는 치료법)

피험자의 안전성을 위해 필요한 경우를 제외하고, 연구 동안 부수적 치료에 대해 어떠한 변화도 없다.

조사 제품에 대한 설명

활성: 상업용 약물이 사용된다. 암파이라(달팜프리딘). 복효성 정제는 백색 내지 회백색의, 양면이 볼록한 계란형의 필름-코팅되고 점수화되지 않은 정제로서, 편평한 가장자리를 갖고, 한쪽 면에 "A10"으로 데보싱(debossing)되며, 10 mg의 달팜프리딘을 함유한다. 비활성 구성성분은 콜로이드성 이산화 규소, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스, 마그네슘 스테아레이트, 미정질 셀룰로스, 폴리에틸렌 글리콜, 및 이산화 티탄으로 구성된다.

위약: 위약 정제는 암파이라 정제와 외관이 동일하고, 동일한 비활성 구성성분을 함유한다.

연구 절차

하기 섹션은 본 연구에서 수득되는 기선 및 임상적 기능적 측정법을 설명한다. 방문 연구에 의한 절차의 상세한 계획은 하기 제공되고 표 23에 요약되어 있다.

임의의 연구 절차에 들어가기 전에, 피험자는 사전 서면 동의서를 제공해야 한다.

(a) 혈장 달팜프리딘 농도

혈장 달팜프리딘 농도를 결정하기 위한 혈액 샘플을 모든 기능적 임상적 평가를 완료한 후 수득한다. 이들 측정 목적은 치료 순응성을 평가하기 위함이다. 최소 7 ㎖의 전혈을 적절히 표지된 헤파린 관에 수집하고, 원심분리할 때까지 차갑게 유지시킨다(즉, 젖은 얼음 위에서). 수집 직후, 관을 낮은 속도로 원심분리하고, 대략 3 ㎖의 혈장을 각각의 샘플로부터 표지된 관으로 옮긴다. 중앙 실험실로의 이송이 요청될 때까지 혈장을 -20℃에서 저장한다. 이송시, 동결된 혈장 샘플을 함께 수집하여 드라이 아이스 상의 절연된 용기에 넣고 하룻밤 지정된 중앙 실험실로 밤새 고속 이송한다.

(b) 임상 평가

25 걸음 보행 시간(T25FW)

T25FW 시험은 보행 기능의 정량적 측정이다. 피험자에게 그 또는 그녀가 분명히 표지되고 막힘이 없는 25-걸음 코스의 한쪽 끝에서 다른쪽 끝으로 빨리 걸어가도록 지시한다. 국제 다발성 경화증 협회(National Multiple Scloerosis Society)에서 발행한 시행 및 득점 매뉴얼(Administration and Scoring Manual)에 제공된 상세한 지시에 따라서 T25FW를 수행한다[피셔(Fischer J) 등의 문헌 "National Multiple Scloerosis Society. 2001; 1-410"]. 피험자는 표시된 출발선상에 발끝으로 서고, 피험자의 발의 임의의 일부가 선을 지날때 시간측정을 시작한다. 피험자 발의 임의의 일부가 표시된 결승선을 지나면 시간측정을 종료한다. 시간을 초 단위로 기록하고, 이 연구를 위해 제공된 스톱워치를 사용하여, 초의 거의 10분의 1로 반올림한다. 피험자는 동일한 거리를 다시 돌아감으로써 이 과제를 다시 시행하는데, 두 시험 사이에 최대 5분의 휴식 기간을 준다. 필요할 경우, 피험자는 적절한 보조 장치를 사용한다. 방문 사이에 이들의 수행력 점수를 불공평하게 개선시키는 예행연습이나 실행 측정없이 피험자의 정상 활동을 유지하도록, 그 또는 그녀에게 지시하여야 한다. 각각의 평가에서 T25FW를 위한 동일한 시험 공간 및 동일하게 지정된 영역을 사용하도록 매번 노력을 기울인다. 외부적으로 주의를 산만하게 하는 가능성을 가능한 최소한으로 유지시킨다.

보행 속도에 대한 규범 데이터가 이용가능하다[보하논(Bohannon R.)의 문헌 "Age and Ageing. 1997; 26: 15-19"]. 18세 이상 내지 20세 미만의 피험자의 경우, 20세 연령 군에 대한 규범 데이터를 사용한다.

상자 및 블럭 시험

상자 및 블럭 시험[매티오웨츠(Mathiowetz V) 등의 문헌 "Am J Occup Ther. 1985; 36(6): 386-391"]을 손 재주에 대한 유효하고 신뢰가능한 측정법으로 사용한다. 피험자에게 상자의 한쪽에서 한번에 블럭 하나를 빨리 집고, 칸막이 너머로 상자의 다른 쪽으로 각각의 블럭을 옮겨서 이를 떨어뜨리도록 지시한다. 이 시험은 본래 뇌성마비를 앓는 성인의 전체 손 재주를 평가하기 위해 개발되었다. 정상 성인에 대한 데이터는 입수가능하다[보하논(Bohannon R.)의 문헌 "Age and Ageing. 1997; 26: 15-19"]. 18세 이상 내지 20세 미만의 피험자의 경우, 20 내지 24세 연령의 군에 대한 규범 데이터를 사용한다.

피로 효과를 최소화하기 위하여 핀치 및 그립 시험 이전에 상자 및 블럭 시험을 일정하게 수행하였다. 우세한 손 및 우세하지 않은 손 둘 다를 시험하고, 우세한 손으로 시작한다.

그립 및 핀치 시험에 의한 손 강도

그립 시험[매티오웨츠(Mathiowetz V) 등의 문헌 "Arch Phys Med Rehabil. 1985; 66:69-72"]을, 손 강도 문제를 식별하거나, 작업 치료 프로그램, 질환 또는 손상의 과정으로부터 생성될 수 있는 변화를 검출하거나, 일반적 집단에 대한 환자의 강도의 관련성을 나타내기 위한 단순하고 유효하고 신뢰가능한 측정법으로서 사용한다. 동력계를 사용하여 손 강도를 측정한다.

핀치 시험(매티오웨츠 등의 문헌 "Arch Phys Med Rehabil. 1985; 66:69-72")을, 핀치 강도 문제를 식별하거나, 작업 치료 프로그램 으로부터 생성될 수 있는 변화, 질환 또는 손상의 과정을 검출하거나, 일반적 집단에 대한 환자의 강도의 관련성을 나타내기 위한 단순하고 유효하고 신뢰가능한 측정법으로서 사용한다. 이는 3가지 성분들, 팁, 키 및 손바닥 핀치를 갖는다. 핀치 게이지를 사용하여 핀치 강도를 측정한다.

그립 시험, 팁 핀치, 키 핀치 및 손바닥 시험의 각각의 손에 대한 3회 시험이 존재하고, 각각의 시간에 이들을 측정한다.

성인에서 그립 및 핀치 시험에 대한 규범 데이터가 이용가능하다(매티오웨츠 등의 문헌 "Arch Phys Med Rehabil. 1985; 66:69-72"). 18세 이상 내지 20세 미만의 피험자의 경우, 20 내지 24세 연령의 군에 대한 규범 데이터를 사용한다.

푸글-메이어 평가(FMA)

FMA는 뇌졸중-후 편측 마비를 앓는 환자에서 운동 기능, 균형감, 감각 및 관절 기능을 평가하기 위하여 고안된 수행력-기초된 장애 평가이다[푸글-메이어(Fugl-Meyer AR) 등의 문헌 "Scand J Rehabil Med. 1975; 7(1): 13-31"]. 이러한 연구를 위해, 상지(UE) 운동 기능, 하지(LE) 운동 기능 및 감각 분야를 평가한다(표 24 참조).

[표 24a]

푸글-메이어 평가 점수 시이트

[표 24b]

항목들은 위중성의 3-포인트 등급에 대해 등급화된다. 총 점수는 각각의 분야에 대해 별도로 결정될 수 있고, 총 UE 및 LE 점수는 총 운동 점수에 대해 조합될 수 있다.

불능 평가 등급(DAS)

선택적으로, DAS를 수행한다.

DAS는 뇌졸중-후 상지 경직을 앓는 환자에서 흔히 영향을 받는 다음의 4가지 기능적 영역에서 장애를 평가하기 위해 개발되었다: 개인 위생, 옷입기, 통증, 및 사지 위치. 임상가는 "불능 없음" 내지 "심각한 불능" 범위의 4-포인트 등급을 사용하여 이들 각각의 분야에서 피험자의 장애 수준을 등급화한다. 4가지 기능적 분야의 평가는 하기 지침에 따라 수행한다[브라쉬어(Brashera A) 등의 문헌 "Arch Phys Med Rehabil. 2002; 83(10): 1349-54"].

위생: 등급평가자는 해리(maceration), 궤양, 및/또는 손바닥 감염의 정도; 손바닥 및 손 청결성; 청결의 용이성; 손톱 정리의 용이성; 및 환자의 일상 생활에서의 위생-관련된 불능에 의해 초래된 간섭 정도를 평가한다.

옷입기: 등급평가자는 환자가 의류(예를 들어, 셔츠, 자켓, 장갑)를 착용할 수 있는 어려움 또는 용이성, 및 환자의 일상 생활에서의 불능과 관련된 옷입기에 의한 초래되는 방해 정도를 평가한다.

사지 위치: 등급평가자는 상지의 비이상적 위치의 정도를 평가한다.

통증: 등급평가자는 상지 경직에 관련된 통증 또는 불편함의 강도를 평가한다.

각각의 4가지 기능적 분야를 하기 등급로 등급화한다: 0 = 불능 없음; 1 = 온화한 불능(뚜렷하지만, 정상 활동을 그다지 방해하지 않음); 2 = 중간 불능(정상 활동은 증가된 노력 및/또는 보조를 필요로 함); 3 = 심각한 불능(제한된 정상 활동).

기능적 독립성 측정(FIM)

FIM 등급은 일상 생활의 활동(ADL)을 수행하기 위해 개인이 얼마나 많은 보조를 필요로 하는지를 측정하는 널리 사용되는 불능에 대한 평가이다. 이는 18개 항목으로 구성되고: 13개 항목은 신체 분야에서이고, 5개 항목은 인지 분야에서이다. 등급화는 임상가의 직접적 관찰에 기초하고, 각각의 항목은 "전체 보조" 내지 "완전한 독립성" 범위의 7-포인트 등급에 대해 점수화하였다. 평가된 관점은 다음과 같다: 섭식, 몸단장, 목욕, 상체 옷입기, 하체 옷입기, 화장실 사용, 방광 관리, 장 관리, 침대에서 의자로의 이동, 화장실 이동, 샤워장 이동, 이동 운동(보행 또는 휠체어 수준), 계단, 인지 이해, 표현, 사회적 상호작용, 문제 해결, 기억.

점수 기준은 다음과 같다(재활 측정 데이터베이스 웹페이지 참조):

전반적 피험자 인상(SGI)

SGI는 "끔찍함" 내지 "기쁨" 범위의 7-포인트 등급을 사용하여, 이전 주 동안 그 또는 그녀의 신체적 행복감(well-being)에 대한 조사 약물의 효과를 등급화하도록 피험자에게 요청하는 치료 응답을 위해 통상적으로 사용되는 측정법이다.

피험자에게 다음에 대한 진술을 작성하는 서식이 제공된다: "우리는 당신이 당신의 신체적 행복감에 대한 연구 약제의 효과에 대해 어떻게 느끼는지을 알고 싶습니다. 지난 7 일 동안 연구 약제의 효과에 대해 어떻게 느끼싶니까?". 피험자에게 응답에 대한 하기 선택사항을 제공한다: "끔찍함", "불행함", "주로 불만족함", "중간/혼합됨", "주로 만족함", "만족함" 및 "기쁨". 피험자에게 이들 자신의 언어로 제공된 응답을 설명하도록 요청한다.

전반적 임상가 인상(CGI)

CGI는, 기선에서의 피험자의 증상에 비교하여, 조사 제품에 의한 치료 이후 피험자의 신경 상태 및 일반적 건강 상태에서의 변화에 대한 전체적 인상을 제공하도록 임상가에게 요청하는 치료 응답에 대해 통상적으로 사용되는 측정법이다. CGI는 "매우 많이 개선됨" 내지 "매우 많이 악화됨"의 범위의 7-포인트 등급에 따라 등급화된다.

임상가에게 다음에 대해 진술을 작성하는 서식이 제공된다: "피험자의 증후 및 다른 신경 기능을 전체적으로 고려하여, 오늘 피험자의 신경 상태는 이들의 스크리닝 방문에 비하여 어떻게 등급을 매길 것입니까? 다른 인자를 고려하지 않고 단지 신경 변화만을 고려하세요." 임상가에게 응답에 대한 하기 선택사항을 제공한다: "매우 많이 개선됨", "많이 개선됨", "어느 정도 개선됨", "변화 없음", "어느 정도 악화됨", "많이 악화됨" 및 "매우 많이 악화됨". 임상가에게, 가능하다면, 임의의 변화 지표를 설명하도록 요청한다.

벡 우울증 척도(BDI)

BDI(표 25 참조)는 우울증 증후의 위중성을 측정하는 널리 사용되는 자가-보고 우울증 설문지이다. 21개 항목 각각은 최소 내지 위중함 범위의 4-포인트 등급으로 등급화된다. 스크리닝시 30 이상의 점수로 지시되는 바와 같이 심각한 우울증을 갖는 피험자는 연구 참여로부터 배제된다. BDI는 또한 임상 평가중 하나로서 다른 방문시에 시행된다.

[표 25a]

벡 우울증 척도(BDI)

[표 25b]

(c) 연구 순서

하기 섹션은 연구 동안 각각의 임상 방문시 수행되는 평가를 설명한다.

1차 방문, -14 일 내지 -1 일(스크리닝 방문)

평가자는 하기 절차가 수행된 후 연구에 대한 적격성을 평가한다. 이들 절차는 무작위 방문 전 14일 이내에 완료된다. 이들은 다음의 개략화된 순서로 수행된다.

⊙ 서면 사전 동의서를 얻는다.

⊙ 인구통계학 정보를 비롯하여, 의료 병력을 완료한다.

⊙ 이전 및 부수적 약제 치료를 검토한다.

⊙ 피험자는 BDI를 완료한다.

⊙ 완전한 신체 검사를 완료한다.

⊙ 신장 및 체중을 비롯하여, 일상적인 착석시 활력 징후 측정을 수행한다.

⊙ BMI를 계산한다.

⊙ T25FW를 시행한다.

⊙ 상자 및 블럭 시험을 시행한다(우세한 손 및 우세하지 않은 손, 우세한 손 먼저).

⊙ 그립 시험, 팁 핀치, 키 핀치 및 손바닥 핀치 시험을 시행한다. 이들 시험을 각각의 손으로 3회 시행한다.

⊙ FMA, DAS, 및 FIM을 시행한다.

⊙ 실험실 평가를 위해 혈액 및 소변 샘플을 채취한다(SMA-12, 계산된 크레아틴 소거율, 소변 검사, 및 출산 가능성이 있는 여성의 경우 소변 임신 검사).

⊙ 부작용을 검토한다.

⊙ 피험자가 자격을 갖춘다면, 14 일 이내에 조사 기관으로 오도록 피험자에게 계획을 알린다.

2차 방문, 1 일(무작위 방문, 1차 기간의 개시)

하기 평가 및 절차는 다음의 개략화된 순서로 수행된다:

⊙ 간단한 신체 검사를 완료한다.

⊙ 착석시 활력 징후 측정을 수행한다.

⊙ T25FW를 시행한다.

⊙ 상자 및 블럭 시험을 시행한다(우세한 손 및 우세하지 않은 손, 우세한 손 먼저).

⊙ 그립 시험, 팁 핀치, 키 핀치 및 손바닥 핀치 시험을 시행한다. 이들 시험을 각각의 손으로 3회 시행한다.

⊙ FMA, DAS, 및 FIM을 시행한다.

⊙ 피험자는 BDI를 완료한다.

⊙ 혈장 달팜프리딘 농도를 위해 혈액 샘플을 수득한다.

⊙ 출산의 가능성이 있는 여성의 경우 소변 임신 시험을 한다.

⊙ 부작용 및 부수적 약제 치료를 검토한다.

⊙ 두 치료 순서중 하나로 무작위 분류한다.

⊙ 할당된 이중 맹검 조사 제품의 1주 공급물을 분배하면서, 그날 저녁 1회 투약량을 섭취하라고 지시한다. 투약 섭생에 대해 피험자에게 추가로 지시하기 위해 섹션 "피험자의 치료"를 참조한다.

⊙ 환자를 퇴원시키고 1 주(± 1 일) 내에 있을 다음 방문에 대한 날짜 및 시간 계획을 잡는다.

3차 방문, 8 일

하기 평가 및 절차는 다음의 개략화된 순서로 수행된다:

⊙ 간단한 신체 검사를 완료한다.

⊙ 착석시 활력 징후 측정을 수행한다.

⊙ 피험자는 SGI를 완료한다.

⊙ T25FW를 시행한다.

⊙ 상자 및 블럭 시험을 시행한다(우세한 손 및 우세하지 않은 손, 우세한 손 먼저).

⊙ 그립 시험, 팁 핀치, 키 핀치 및 손바닥 핀치 시험을 시행한다. 이들 시험을 각각의 손으로 3회 시행한다.

⊙ FMA, DAS, 및 FIM을 시행한다.

⊙ CGI를 완료한다.

⊙ 혈장 달팜프리딘 농도를 위해 혈액 샘플을 수득한다.

⊙ 부작용 및 부수적 약제 치료를 검토한다.

⊙ 마지막 방문으로부터의 조사 제품을 수집하고, 약물 책임성을 수행한다.

⊙ 할당된 이중 맹검 조사 제품의 새로운 1주 공급물을 분배하면서, 그날 저녁, 대략 마지막 투약 후 12 시간째 투약량을 섭취하라고 지시한다. 투약 섭생에 대해 피험자에게 추가로 지시하기 위해 섹션 "피험자의 치료"의 (a)를 참조한다.

⊙ 환자를 퇴원시키고 1 주(± 1 일) 내에 있을 다음 방문에 대한 날짜 및 시간 계획을 잡는다

4차 방문, 15 일(1차 기간의 종료, 휴약의 개시)

하기 평가 및 절차는 다음의 개략화된 순서로 수행된다:

⊙ 간단한 신체 검사를 완료한다.

⊙ 착석시 활력 징후 측정을 수행한다.

⊙ 피험자는 SGI를 완료한다.

⊙ T25FW를 시행한다.

⊙ 상자 및 블럭 시험을 시행한다(우세한 손 및 우세하지 않은 손, 우세한 손 먼저).

⊙ 그립 시험, 팁 핀치, 키 핀치 및 손바닥 핀치 시험을 시행한다. 이들 시험을 각각의 손으로 3회 시행한다.

⊙ FMA, DAS, 및 FIM을 시행한다.

⊙ CGI를 완료한다.

⊙ 피험자는 BDI를 완료한다.

⊙ 혈장 달팜프리딘 농도 및 SMA-12를 위해 혈액 샘플을 수득한다.

⊙ 부작용 및 부수적 약제 치료를 검토한다.

⊙ 마지막 방문으로부터의 조사 제품을 수집하고, 약물 책임성을 수행한다.

⊙ 단일 맹검 위약의 1-주 공급물을 분배하면서, 그날 저녁에 1차 투약량을 섭취하라고 지시한다. 투약 섭생에 대해 피험자에게 추가로 지시하기 위해 섹션 "피험자의 치료"의 (a)를 참조한다.

⊙ 환자를 퇴원시키고 1 주(± 1 일) 내에 있을 다음 방문에 대한 날짜 및 시간 계획을 잡는다.

5차 방문, 22 일(휴약의 종료, 2차 기간의 개시)

하기 평가 및 절차는 다음의 개략화된 순서로 수행된다:

⊙ 간단한 신체 검사를 완료한다.

⊙ 착석시 활력 징후 측정을 수행한다.

⊙ 피험자는 SGI를 완료한다.

⊙ T25FW를 시행한다.

⊙ 상자 및 블럭 시험을 시행한다(우세한 손 및 우세하지 않은 손, 우세한 손 먼저).

⊙ 그립 시험, 팁 핀치, 키 핀치 및 손바닥 핀치 시험을 시행한다. 이들 시험을 각각의 손으로 3회 시행한다.

⊙ FMA, DAS, 및 FIM을 시행한다.

⊙ CGI를 완료한다.

⊙ 피험자는 BDI를 완료한다.

⊙ 혈장 달팜프리딘 농도를 위해 혈액 샘플을 수득한다.

⊙ 부작용 및 부수적 약제 치료를 검토한다.

⊙ 마지막 방문으로부터의 조사 제품을 수집하고, 약물 책임성을 수행한다.

⊙ 교차 치료의 새로운 1-주 공급물을 분배하면서, 그날 저녁 1차 투약량을 섭취하라고 지시한다. 투약 섭생에 대해 피험자에게 추가로 지시하기 위해 섹션 "피험자의 치료"의 (a)를 참조한다.

⊙ 환자를 퇴원시키고 1 주(± 1 일) 내에 있을 다음 방문에 대한 날짜 및 시간 계획을 잡는다.

6차 방문, 29 일

하기 평가 및 절차는 다음의 개략화된 순서로 수행된다:

⊙ 간단한 신체 검사를 완료한다.

⊙ 착석시 활력 징후 측정을 수행한다.

⊙ 피험자는 SGI를 완료한다.

⊙ T25FW를 시행한다.

⊙ 상자 및 블럭 시험을 시행한다(우세한 손 및 우세하지 않은 손, 우세한 손 먼저).

⊙ 그립 시험, 팁 핀치, 키 핀치 및 손바닥 핀치 시험을 시행한다. 이들 시험을 각각의 손으로 3회 시행한다.

⊙ FMA, DAS, 및 FIM을 시행한다.

⊙ CGI를 완료한다.

⊙ 혈장 달팜프리딘 농도를 위해 혈액 샘플을 수득한다.

⊙ 부작용 및 부수적 약제 치료를 검토한다.

⊙ 마지막 방문으로부터의 조사 제품을 수집하고, 약물 책임성을 수행한다.

⊙ 교차 치료의 새로운 1-주 공급물을 분배하면서, 그날 저녁, 대략 마지막 투약 후 12 시간 째 투약량을 섭취하라고 지시한다. 투약 섭생에 대해 피험자에게 추가로 지시하기 위해 섹션 "피험자의 치료"의 (a)를 참조한다.

⊙ 환자를 퇴원시키고 1 주(± 1 일) 내에 있을 다음 방문에 대한 날짜 및 시간 계획을 잡는다.

7차 방문, 36 일(2차 기간의 종료)

하기 평가 및 절차는 다음의 개략화된 순서로 수행된다:

⊙ 간단한 신체 검사를 완료한다.

⊙ 착석시 활력 징후 측정을 수행한다.

⊙ 피험자는 SGI를 완료한다.

⊙ T25FW를 시행한다.

⊙ 상자 및 블럭 시험을 시행한다(우세한 손 및 우세하지 않은 손, 우세한 손 먼저).

⊙ 그립 시험, 팁 핀치, 키 핀치 및 손바닥 핀치 시험을 시행한다. 이들 시험을 각각의 손으로 3회 시행한다.

⊙ FMA, DAS, 및 FIM을 시행한다.

⊙ CGI를 완료한다.

⊙ 피험자는 BDI를 완료한다.

⊙ 혈장 달팜프리딘 농도 및 SMA-12를 위해 혈액 샘플을 수득한다.

⊙ 부작용 및 부수적 약제 치료를 검토한다.

⊙ 마지막 방문으로부터의 조사 제품을 수집하고, 약물 책임성을 수행한다. 조사 제품을 분배하지 않는다.

⊙ 환자를 퇴원시키고 1 주(± 1 일) 내에 있을 다음 방문인 전화 방문에 대한 날짜 및 시간 계획을 잡는다.

후속 전화, 43 ± 1 일

임의의 부작용 또는 약제 치료의 변화를 검토하기 위해 후속 전화를 건다. 후속 전화는 주말/휴일을 고려하여 43 일 이전 또는 이후 2일에 수행될 수 있다.

⊙ 최종 상태 평가

통계

(a) 통계적 검증력

66명의 피험자를 다음의 2가지 치료 순서중 하나로 2:1의 비율로 무작위로 나누었다: 위약 이후 달팜프리딘-ER 투여(순서 A) 또는 달팜프리딘-ER 이후 위약 투여(순서 B). 이러한 샘플 크기는 적절한 계획 추정을 제공하여 추가의 연구의 고안에 도움을 준다.

(b) 유도된 종점 및 데이터 취급

분석을 위한 기선은 이중 맹검 약제의 1차 투약 이전의 최종의 필수적 평가로서 정의된다.

허혈성 뇌졸중 이후로의 연령 및 시간을 사전 동의서 날짜에 기초하여 컴퓨터처리한다.

연령은 다음과 같이 계산된다: 연령 = [동의한 날짜 - 생년월일] / 365.25, 앞의 정수로 버림한다.

허혈성 뇌졸중 이후로의 날짜는 다음과 같이 계산된다: 날짜 = 사전 동의한 날짜 - 뇌졸중에 걸린 날짜.

기선 측정값의 유도는 "유도된 변수 및 데이터 취급"이라는 표제의 섹션에서 하기 개략화된 유도를 따른다.

(c) 기능적 평가의 분석

본 섹션에서 모든 적용가능한 변수의 유도에 대한 컴퓨터관련 세부사항은 이후 "유도된 변수 및 데이터 취급"이라는 표제의 섹션에서 찾아볼 수 있다.

기능적 평가

본 연구에서 탐색되는 기능적 평가는 다음과 같다:

⊙ 25 걸음 보행 시간 시험(T25FW)에 의해 측정된 보행 속도

⊙ 상자 및 블럭 시험에 의해 측정된 손 재주

⊙ 그립 시험 및 핀치 시험에 의해 측정된 손 강도

⊙ 푸글-메이어 평가(FMA) 상의 전반적 운동 기능 점수 및 개별적 운동 점수:

- 상지 기능

- 하지 기능

⊙ 불능 평가 등급(DAS)에 의해 측정된 상지 경직

⊙ 기능적 독립성 측정(FIM) 등급에 의한 일상 생활 활동(ADL)을 수행하는데 필요한 보조

⊙ 전반적 피험자 인상(SGI) 등급

⊙ 전반적 임상가 인상(CGI) 등급

⊙ 벡 우울증 척도(BDI)에 의해 측정된 우울증

유도된 변수 및 데이터 취급

분석을 위한 기선은 이중 맹검 약제의 1차 투약 이전의 최종의 필수적 평가로서 정의된다.

보행 속도

각각의 방문시, T25FW 시험을 2회 실시한다. 각각의 시험을 위한 보행 속도는 걸음을 완료하는 시간(초)의 왕복 값에 25(피이트)를 곱하여 유도된다(1 초당 피이트 수). 특정 연구를 위한 보행 속도는 연구 방문으로부터의 시험 1 및 시험 2에 대한 보행 속도의 평균을 계산하여 유도된다. 하나의 시험이 빠진 경우, 그 방문에 대한 보행 속도는 빠지지 않은 시험으로부터의 보행 속도이다.

그립 및 핀치 시험

각각의 방문시, 그립 및 핀치 시험을 각각 3회 실시한다. 특정 연구 방문에 대한 응답은 특정 시험에 대한 3회 시험이 평균이다. 그립 시험 및 핀치 시험은 우세한 손 및 우세하지 않은 손에 의해 분리하여 요약된다.

상자 및 블럭 시험

상자 및 블럭 시험은 60초 이내에 칸막이의 다른 편으로 이동시키는 블럭의 수이다. 응답 변수를 위해 어떠한 유도도 필요치 않다. 상자 및 블럭 시험은 우세한 손 및 우세하지 않은 손에 의해 분리하여 요약된다.

푸글-메이어 평가(FMA)

FMA는 5가지 분야에서의 155개 항목으로 구성된 상지 및 하지 운동, 및 감각 장애에 대한 측정법이다. 하위점수는 연관된 개별 항목에 대한 점수를 합함으로써 각각의 분야에 대해 결정될 수 있다. 전반적 FMA 점수는 개별 분야 하위점수를 합함으로써 생성될 수 있다. FMA 전반적 점수 및 개별 분야의 하위점수는 분리하여 요약된다.

불능 평가 등급(DAS)

DAS는 뇌졸중-후 상지 경직을 갖는 환자에서 흔히 영향을 받는 4가지 기능적 영역에서의 장애를 평가하기 위해 사용된다. 4가지 기능적 영역은 분리하여 분석된다. 응답 변수를 위해 어떠한 유도도 필요치 않다.

기능적 독립성 측정(FIM) 등급

FIM 등급은 18개 항목으로 구성된 신체적 및 인지적 불능에 대한 평가이다. 각각의 방문시, FIM 등급에 대한 응답은 18개 항목에 대한 개인의 응답의 합이다. 총 점수는 18(기능의 가장 낮은 수준) 내지 126(기능의 가장 높은 수준)의 범위일 수 있다.

전반적 피험자 인상(SGI) 등급

각각의 방문시, SGI에 대한 응답은 지난 주 동안의 그 또는 그녀의 신체적 행복감에 대한 조사 제품의 피험자 등급이다. 응답 변수를 위해 어떠한 유도도 필요치 않다.

전반적 임상가 인상(CGI) 등급

각각의 방문시, CGI에 대한 응답은, 기선에 비교하여, 조사 제품에 의한 치료 후 피험자의 신경 상태 및 일반적 건강 상태에 있어서의 변화에 대한 임상가의 전체적 인상이다. 응답 변수를 위해 어떠한 유도도 필요치 않다.

벡 우울증 척도(EDI)

BDI는 우울증 증후의 위중성을 측정하는 자가-보고된 21개 항목의 우울증 설문지이다. 각각의 방문시, BDI에 대한 응답은 21개 항목으로부터의 개별적 응답의 합이다. 총 점수는 0 내지 63의 범위일 수 있다.

통계 방법

기능적 평가에 대한 달팜프리딘-ER의 효과를 결정하기 위해 분석을 수행한다. 각각의 기능적 평가의 경우, SGI 및 CGI를 제외하고, 기선으로부터의 피험자내 변화는 각각의 치료 기간내에 계산된다:

1차 기간 : 4차 방문 평가 - 2차 방문 평가

2차 기간: 7차 방문 평가 - 5차 방문 평가

SGI 및 CGI의 경우, 4차 방문 평가 및 7차 방문 평가가 분석에 사용된다.

임의의 기능적 평가를 위해, 4차 방문 평가가 빠진 다면, 3차 방문 평가를 사용하여 전가된다. 7차 방문 평가가 빠진다면, 6차 방문 평가를 사용하여 전가된다.

SGI 및 CGI를 제외한 모든 임상적 평가를 위해, 하기 2가지 유형의 분석을 수행한다. 제1 유형은 순서 A로 무작위 분류된 44명의 피험자를 사용하여 1차 기간(위약) 대 2차 기간(달팜프리딘-ER)의 경우의 기선으로부터의 피험자 내에서의 차이에 기초한다. 두 치료 사이의 기선으로부터의 변화는 양방성 t-테스트(paired t-test)를 사용하여 비교된다. 분석의 제2 유형은 단기 1차 기간내에 기선으로부터의 변화에 대한 치료 군 간의 비교에 기초한다. 두 치료 간의 기선으로부터의 변화는 2-샘플 t-테스트를 사용하여 비교된다.

SGI 및 CGI의 경우, 2가지 유형의 분석이 또한 수행된다. 그러나, 분석은 기선으로부터의 변화에 기초하지 않고 4차 방문 및 7차 방문시의 SGI 및 CGI의 결과를 사용하여 수행된다. 상기 기재된 통계 방법은 또한 SGI 및 CGI의 분석에 사용된다.

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실시예 17: 4- AP 의 경구 투여 효과: 래트에서 MCA 폐색( MCAO ) 이후 기능적 회복. 비히클 -제어된 투약량 단계적 확대 맹검 연구.

4-AP를, 허혈성 사건으로부터 경과된 시간에 안정적 운동 결함을 갖는 래트에서 허혈성 뇌졸중 후 기능적 감각운동 개선을 촉진시키는 그의 능력에 대해 평가하였다. 본 실시예에 사용되는 허혈성 뇌졸중의 동물 모델, 즉, MCAO 모델은, 실시예 2에 기재된 동물 모델과 동일하다.

MCAO 모델에서, 회복은 MCAO 이후 4 주에 정체기에 도달하기 시작했고, 이 시점에서 감각운동 기능에서의 측정가능한 결함이 여전히 존재하였다. 그러나, MCAO 이후 4 주째, 느리게 지속되는 내생성 회복이 여전히 존재할 수 있다. 이러한 이유로, 본 실시예에서의 치료는 MCAO 후 56 일째 개시하였고, 이 시점은 초기 허혈성 사건으로부터 더욱 멀어져 동물이 내생성 회복 이후 더 안정적인 감각운동 결함 수준에 도달할 수 있도록 한다.

실험 고안

본 실험에서, 스프라그 돌리 래트를 수술하여 중간 뇌 동맥 폐색(MCAO)을 일으키고, 이를 이후 기재되는 바와 같이 비히클(물) 또는 4-아미노피리딘으로 치료하고, 이후 기재되는 바와 같이 행동 평가를 수행하였다.

동물: 30 마리의 수컷 스프라그 돌리 래트, 300 내지 400 g(찰스 리버 래버레이토리스로부터 수득됨, 이는 수술하기 7 내지 10 일 전에 250 내지 275 g의 체중으로 도착됨)를 사용하였다. 동물을 무작위로 치료 군에 할당하였다.

명명법: 연구의 날짜에 대한 명명법은 다음과 같다: 0 일은 MCAO를 수행한 날이고, 이후의 날짜는 연속적으로 번호매겨진다(1 일, 2 일, 3 일 등); -1 일은 MCAO 전날을 나타낸다.

군 형성에 대한 세부사항: 본 연구에서 몇몇 절차를 위해 필요한 양의 시간으로 인해 2개의 치료 군(이하 표 26 참조)을 4개의 작업 군으로 분할해야 했다. 하루에 6 마리의 동물이 뇌졸중 수술을 받았다. 동물이 연구의 8-일 수술 기간 동안 사망하였다면, 이를 여분의 동물로 대체하였다. 사망하지 않았다면, 동물을 대체하지 않았다. 대부분의 동물 사망(전체의 5% 미만)은 수술 직후 내지 7 일 기간에 발생하였다.

마취: 마취는 상기 실시예 2에 기재된 바와 같이 수행하였다.

온도: 37.0 ± 1℃.

수술 절차: 수술 절차는 상기 실시예 2에 기재된 바와 같이 수행하였다.

수술-후 모니터링: 수술-후 모니터링은 상기 실시예 2에 기재된 바와 같이 수행하였다.

취급, 수술, 및 주사 시간표: 취급, 수술, 및 주사 시간표는 상기 실시예 2에 기재된 바와 동일하였다.

치료 및 투약: 래트를 표 26에 제시된 치료 계획에 따라 치료하였다. 투약은 표 27에 제시되어 있다. 4-아미노피리딘을 주사용수(WFI, 셀그로)에 용해시키고 멸균 여과하였다. 4-아미노피리딘의 0.25 mg/㎖, 0.5 mg/㎖ 및 1.0 mg/㎖ 용액을 2 ㎖/kg으로 위관 영양에 의해 각각 0.5 mg/kg, 1 mg/kg 또는 2.0 mg/kg의 최종 투약량을 위해 전달하였다. 비히클 제어 치료는 위관 영약에 의해 2 ㎖/kg로 전달된 WFI였다. MCAO 이후 56 일째 개시하여, 대략 12 시간 지나서 동물에게 용액(2 ㎖/kg)의 위관 영양을 제공하였다. 비히클 대조 군을 56 내지 65 일째 모든 투약의 경우 물로 치료하였다. 치료 군의 경우, 0.5 mg/kg으로 4-아미노피리딘의 6회 투약량을 56 내지 59 일에 걸쳐 전달하고, 이후 59 내지 62 일에 걸쳐 1.0 mg/kg으로 6회 투약하고, 62 내지 65 일에 걸쳐 2.0 mg/kg으로 6회 투약하였다. 모든 군의 동물을 66 내지 70 일 동안 치료하지 않았다. p.o.=경구.

[표 26]

[표 27]

치료 군: 동물은 MCAO 수술을 받고 56 일 동안 회복하도록 허용되었다. 이어서 동물을 이들의 기선 행동에 기초하여 2개 군으로 무작위로 분류하였다. 경구 투약(b.i.d.)을 MCAO 이후 56 일째 저녁에 개시하였다. 투약 기간 동안의 행동 시험을 투약 후 1 시간째 개시하였다. 행동 시험 직전 및 직후의 치료 상 동안(투약 후 90 분) 복재 정맥을 통해 혈액을 수집하였다. 모든 투약을 위관 영양을 통해 수행하였고, 부피는 2 ㎖/kg를 초과하지 않았다.

혈액 샘플링: 1차 투약 직전인 56 일째, 및 이어서 6차 투약 후 정확히 90 분에 각각의 투약 수준에서 각각의 동물의 복재 정맥으로부터 300 마이크로리터의 혈액 샘플을 수집하였다. 상기 실시예 2에 기재된 바와 같이, 혈액을 수집하고, 원심분리하고, 분석하였다.

행동 시험 세부사항: 행동 평가를 치료 할당에 대해 모르는 평가자가 수행하였다. 감각운동 기능의 맹검 평가를 MCAO 수술 직전, MCAO 수술 후 24 시간째, 및 이후 투약의 제1 상까지 매주 사지 위치잡이 및 신체 스윙 행동 시험을 사용하여 수행하였다. 상기 기재된 바와 같이, 행동 평가를 정확히 투약 시간에 맞춰 시간 측정하였다. 동물에게 1차 투약량을 제공하고, 행동 평가를 60 분 후 개시하였다. 동물을 각각의 투약 수준의 6차 투약(59, 62 및 65 일) 이후 1 시간째, 및 70 일에 5일간의 휴약 종료시 시험하였다.

사지 위치잡이: -1 일(수술-전), 1 일, 7 일, 14 일, 21 일, 28 일, 35 일, 42 일, 49 일, 56 일, 59 일, 62 일, 65 일, 70 일에 평가하였다. 사지 위치잡이 시험을 앞다리 및 뒷다리 시험으로 나누었다. 앞다리 및 뒷다리 위치잡이 시험, 및 이들 시험에 대한 점수는 상기 실시예 2에 기재되어 있다.

신체 스윙: -1 일(수술 전), 1 일, 7 일, 14 일, 21 일, 28 일, 35 일, 42 일, 49 일, 56 일, 59 일, 62 일, 65 일, 70 일에 평가하였다. 신체 스윙 시험 및 이들 시험에 대한 점수는 상기 실시예 2에 기재되어 있다.

안락사 및 사후 처리: MCAO 후 70 일째, 상기 실시예 2에 기재된 바와 같이 래트를 마취하였다.

경색 측정: 경색 측정을 상기 실시예 2에 기재된 바와 같이 수행하였다.

통계 방법: 치료 전 기선 값(56 일)으로부터의 변화를 투약 이후 평가된 각각의 시점에서의 각각의 행동 점수에 대해 계산하였다. 평균 행동 매개변수 데이터를 분산 분석(ANOVA)하였다. 경색 부피 데이터를 ANOVA에 의해 분석하였다. 모든 데이터를 평균 ± SEM으로 표시하였다.

규제 순응성: 연구를 위한 규제 순응성은 상기 실시예 2에 기재된 바와 동일하였다.

품질 보증(QA): 연구를 위한 QA는 상기 실시예 2에 기재된 바와 동일하였다.

결과

동물의 두 군(비히클 및 4-아미노피리딘-치료)은 수술 직전(-1 일) 0의 정상 점수를 갖고, 폐색 후 24 시간 이내(1 일)에 기능이 완전히 손실된(점수 12, 앞다리; 점수 6, 뒷다리), MCAO-유도된 허혈에 대한 전형적인 회복 반응을 나타내었다. 그 다음 8 주간의 치료되지 않은 상 동안, 앞다리 및 뒷다리 점수는 대략 4.5 및 2.5(각각)로 개선되었고, 회복의 정체기 수준에 도달하였다(도 11 및 12 참조). 특히, 기능의 완전한 손실 이후, 동물은 부분적으로 회복하고 30 일 부근에 정체기에 도달하였다. 동물은 치료가 개시되는 때인 56 일까지 기능의 이러한 수준으로 유지되었다.

앞다리 및 뒷다리 위치잡이, 및 신체 스윙 시험에 의해 감각운동 기능을 평가하였다. 앞다리 위치잡이 시험은 앞다리 기능에 대한 치료 효과를 보여준다(도 11). 뒷다리 위치잡이 시험은 뒷다리 기능에 대한 치료 효과를 보여준다(도 12 참조). 신체 스윙 시험은 전신 제어에 대한 치료 효과를 보여준다(도 13 참조).

비히클 군은 투약 개시 이전의 최종 평가와 비교하여 행동에 있어서 작고 통계적으로 유의적이지 않은 변화를 나타내었다. 대조적으로, 0.5 mg/kg의 4-아미노피리딘(낮은 투약량)을 수여받은 동물은 비히클에 비해 앞다리 위치잡이에 있어서 유의적으로 개선되었다(p < 0.001)(도 11 참조, 59 일). 뒷다리 위치잡이 점수는 낮은 투약량으로 개선되었지만 유의성에 도달되지 않았다(도 12 참조, 59 일). 4-아미노피리딘의 투약량을 1 mg/kg으로 증가시킨 결과, 앞다리 및 뒷다리 시험 둘다에서 비히클에 비해 측정가능한 개선을 초래하였다(각각 p < 0.001 및 p < 0.05, 도 11 및 12, 62 일). 2 mg/kg의 4-아미노피리딘으로의 최종 투약량의 단계적 확대는, 앞다리 및 뒷다리 기능에 있어서 비히클로 치료된 동물과 비교하여 유의적인 개선과 연관되었다(각각 p < 0.0001 및 p < 0.001, 도 11 및 12, 65 일). 치료를 5 일 동안 중단할 경우, 개선은 원시 점수에서 부분적으로 감소하였지만, 뒷다리 점수는 비히클 치료된 군에 비해 더 높게 유지되었다(p < 0.05, 도 12, 70 일). 연장되고 일정한 투약 기간은 비히클 치료된 군에 비하여 완전히 휴약될 추가의 시간이 필요할 수 있다. 그러나, 4-아미노피리딘의 혈청 반감기가 짧기 때문에, 비교적 짧은 기간에 초래되는 반복된 시험으로부터의 훈련 효과가 존재하기 쉬운 것으로 보인다. 비히클 치료된 동물은 그들의 결함이 안정적으로 유지되었고, 단지 약간의 개선이 치료 상의 전체 과정 동안 비히클 치료된 동물에서 보여졌다.

이와 같이, 도 11로부터, 허혈성 뇌 손상 후 8 주째 낮은 투약량, 중간 투약량 또는 높은 투약량의 4-아미노피리딘에 의한 치료가 래트에서 앞다리 기능을 개선시키는데 효과적임을 알 수 있다. 또한 도 11로부터 이러한 효과가 투약량-반응성임을 알 수 있다. 이러한 효과는 또한 약물의 중단시 감소하므로 가역성이다. 도 12로부터, 허혈성 뇌 손상 후 8 주째 낮은 투약량의 4-아미노피리딘에 의한 치료가 래트에서 뒷다리 기능을 개선시키는데 효과적일 수있음을 알 수 있고, 허혈성 뇌 손상 후 8 주째 중간 투약량 또는 높은 투약량의 4-아미노피리딘에 의한 치료가 래트에서 뒷다리 기능을 개선시키는데 효과적임을 알 수 있다. 추가로, 도 12로부터, 더 높은 투약량이 더 낮은 투약량 또는 비히클 대조 군에 비해 개선된 행동 점수를 나타내므로 이러한 효과는 투약량 반응성임을 알 수 있다. 도 12로부터 효과가 적어도 부분적으로 가역성임을 또한 알 수 있다.

신체 스윙 수행력은 평가된 시점에서 광범위하게 특징화되지 않는다. 56 일의 치료전 점수에 비해 약물 평가 첫날(59 일)에서의 신체 스윙 수행력에 대하여 치료 효과가 있는 것으로 보이지만, 치료 개시 이전의 비히클 및 4-아미노피리딘 군 사이에서 관찰된 신체 스윙 비대칭의 발산(divergene)의 견지에서 전체적으로 데이터로부터 결론을 도출할 수 없다(도 13). 본 실시예에 사용된 동물의 연령 및 크기는 실시예 2에 제시된 연구에서보다 상당히 더 크고, 이는 이러한 특정 시험에서 동물의 수행 능력 및 일반적 동기에 있어서 일정 역할을 할 수 있음을 주지해야 한다.

4-아미노피리딘 혈장 수준: 동물이 비히클 치료를 수여받을 때 채취된 혈액 샘플은 이 방법의 정량화의 하한치 미만의 4-아미노피리딘 수준을 가졌다. 동물이 4-아미노피리딘을 수여받을 때 채취된 샘플은 투약량 수준에 적절히 관련된 행동 시험의 시점에서의 노출을 확인하였다. 4-아미노피리딘 혈장 수준은 표 28에 제시되어 있다.

[표 28]

4-아미노피리딘 혈장 수준

따라서, 데이터는 4-AP가 동물에서 검출가능한 혈장 수준으로 존재하는 경우 앞다리 및 뒷다리 감각운동 기능에서 유의적이고 가역성이며 투약량 의존성인 개선을 보여준다.

표 29로부터 비히클(물) 및 4-아미노피리딘 사이에서 경생 부피의 차이는 관찰되지 않았음을 알 수 있다. SE = 표준 오차

[표 29]

뇌 조직의 경색 부피 분석은 임상전 뇌졸중 연구를 위한 전형적 결과 측정법으로서 본 연구에 포함되었다. 본 연구에서 임의의 군 사이에 경색 부피 차이는 관찰되지 않았고, 경색 부피는 또한 본 실시예 및 실시예 2에 제시된 연구 사이에서 유사하였다.

실시예 2 및 17에 대한 참고문헌

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41. 디지크후이젠(Dijkhuizen RM), 렌(Ren) J, 만데빌(Mandeville JB) 등의 문헌 "뇌졸중 후 래트 뇌에서 재조직화의 기능적 자기 공명 영상촬영(Functional magnetic resonance imaging of reorganization in rat brain after stroke). Proc Natl Acad Sci US 2001;98: 12766-71".

다양한 참고문헌, 예컨대 특허, 특허 출원 및 특허 공보가 본원에 인용되고, 이의 개시내용은 참고로 본원에 그의 전체가 포함되어 있다.

Claims (35)

1. 치료 효과량의 아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 뇌졸중을 앓는 환자에게 투여하는 단계를 포함하는, 뇌졸중을 앓는 환자를 치료하는 방법.
2. 제1항에 있어서,
   치료 효과량의 아미노피리딘을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
3. 제1항에 있어서,
   치료 효과량의 아미노피리딘의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
4. 제1항 내지 제3항중 어느 한 항에 있어서,
   환자에서 뇌졸중-관련된 감각운동 장애를 치료하는 방법.
5. 제1항 내지 제4항중 어느 한 항에 있어서,
   환자가 인간인 방법.
6. 제1항 내지 제5항중 어느 한 항에 있어서,
   아미노피리딘이 모노아미노피리딘 또는 다이아미노피리딘인 방법.
7. 제1항 내지 제6항중 어느 한 항에 있어서,
   아미노피리딘이 4-아미노피리딘인 방법.
8. 제1항 내지 제7항중 어느 한 항에 있어서,
   아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 서방성(sustained release) 조성물로 존재하는 방법.
9. 제1항 내지 제7항중 어느 한 항에 있어서,
   아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 속방성(immediate release) 조성물로 존재하는 방법.
10. 제1항 내지 제9항중 어느 한 항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 1 일 1회 투여하는 방법.
11. 제1항 내지 제9항중 어느 한 항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 1 일 2회 투여하는 방법.
12. 제1항 내지 제9항중 어느 한 항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 환자에게 1 일 3회 이상 투여하는 방법.
13. 제11항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 치료 효과량이 1 일 2회 4 내지 17.5 mg, 5 내지 15 mg, 5 내지 10 mg 또는 7.5 내지 10 mg의 범위인 방법.
14. 제11항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 치료 효과량이 1 일 2회 5 mg인 방법.
15. 제11항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 치료 효과량이 1 일 2회 10 mg인 방법.
16. 제1항 내지 제15항중 어느 한 항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 경구적으로 투여되는 방법.
17. 제16항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염이 정제의 형태로 제형화되는 방법.
18. 제1항 내지 제17항중 어느 한 항에 있어서,
    투여 단계를 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 4 주 이상째에 시작하는 방법.
19. 제1항 내지 제17항중 어느 한 항에 있어서,
    투여 단계를 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 1 주 이상째에 시작하는 방법.
20. 제1항 내지 제17항중 어느 한 항에 있어서,
    투여 단계를 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 2 내지 7 일 사이에 시작하는 방법.
21. 제1항 내지 제17항중 어느 한 항에 있어서,
    투여 단계를 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 1 주 이상, 2 주 이상, 3 주 이상, 4 주 이상, 5 주 이상, 6 주 이상, 7 주 이상 또는 8 주 이상째에 시작하는 방법.
22. 제1항 내지 제17항중 어느 한 항에 있어서,
    투여 단계를 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 1 개월 이상, 2 개월 이상, 3 개월 이상, 4 개월 이상, 5 개월 이상, 6 개월 이상, 7 개월 이상, 8 개월 이상, 9 개월 이상, 10 개월 이상, 11 개월 이상 또는 12 개월 이상째에 시작하는 방법.
23. 제22항에 있어서,
    투여 단계를 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 4 개월 이상째에 시작하는 방법.
24. 제22항에 있어서,
    투여 단계를 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 6 개월 이상째에 시작하는 방법.
25. 제1항 내지 제17항중 어느 한 항에 있어서,
    투여 단계를 환자가 뇌졸중을 겪은 시점으로부터 6 시간 이내 또는 2 일 이내에 시작하는 방법.
26. 제1항 내지 제25항중 어느 한 항에 있어서,
    뇌졸중이 허혈성 뇌졸중인 방법.
27. 제4항 내지 제26항중 어느 한 항에 있어서,
    뇌졸중-관련된 감각운동 장애가 보행 장애, 사지 기능 장애, 하지 기능 장애, 하지 근육 강도 감손, 근긴장도 감손, 상지 기능 장애, 손 기능 장애, 미세 손 협응 장애, 그립(grip) 강도 감손, 균형감 또는 협응 장애, 전신 제어 장애, 구음 장애, 턱 기능 장애, 저작 기능 장애 및 턱 관절 장애로 구성된 군에서 선택되는 방법.
28. 제27항에 있어서,
    뇌졸중-관련된 감각운동 장애가 보행 장애인 방법.
29. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 치료 효과량이, 약 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20 ng/㎖ 이상의 C_minss(정상 상태에서의 최소 측정 혈장 농도) 또는 평균 C_minss가 인간에서 수득되도록 하는 방법.
30. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 치료 효과량이, 약 12 내지 20 ng/㎖ 범위의 C_minss 또는 평균 C_minss가 인간에서 수득되도록 하는 방법.
31. 제1항 내지 제30항중 어느 한 항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 반복된 투여 이후 상기 장애의 수준을 평가하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
32. 제8항에 있어서,
    서방성 조성물이 인간에서 약 2 내지 약 6 시간의 T_max(투약 후 최대 측정 혈장 농도의 시간)를 제공하는 방법.
33. 제10항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 치료 효과량이 1 일 1회 8 내지 30 mg, 10 내지 30 mg, 10 내지 20 mg 또는 15 내지 20 mg의 범위인 방법.
34. 제10항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 치료 효과량이 1 일 1회 10 mg인 방법.
35. 제10항에 있어서,
    아미노피리딘 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 치료 효과량이 1 일 1회 15 mg인 방법.
    

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