KR20140074964A - 피라졸-4-일-헤테로사이클릴-카복사마이드 화합물 및 사용 방법 - Google Patents

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알라스테어 제이 하지스
미지오 마테우치
앤드류 샤프
밍후아 선
빅키 에이치 츠이
시아오징 왕
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에프. 호프만-라 로슈 아게
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Abstract

하기 화학식 I의 피라졸-4-일-헤테로사이클릴-카복사마이드 화합물, 또는 이의 입체 이성질체, 기하 이성질체, 호변 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염은 Pim 키나아제의 억제 및 Pim 키나아제에 의해 매개되는 암과 같은 장애의 치료에 유용하다. 포유 동물 세포에서의 상기 장애 또는 관련된 병리학적 증상의 시험관 내, 동일 반응계 내 및 생체 내 진단, 예방 또는 치료를 위한 화학식 I의 화합물의 사용 방법이 개시된다.
[화학식 I]
Figure pct00388

상기 식에서, X는 티아졸일, 피라진일, 피리딘일 또는 피리미딘일이다.

Description

피라졸-4-일-헤테로사이클릴-카복사마이드 화합물 및 사용 방법{PYRAZOL-4-YL-HETEROCYCLYL-CARBOXAMIDE COMPOUNDS AND METHODS OF USE}
본 발명은, 일반적으로 Pim 키나아제(Pim-1, Pim-2, 및/또는 Pim-3) 억제제에 의해 매개되는 장애의 치료를 위한, 따라서 암 치료제로서 유용한, 피라졸-4-일-헤테로사이클릴-카복사마이드 화합물에 관한 것이다. 또한 본 발명은 조성물, 보다 구체적으로 상기 화합물을 포함하는 약학 조성물, 및 다양한 형태의 암 및 과증식성 장애를 치료하기 위해 이를 단독으로 또는 조합으로 사용하는 방법, 및 포유 동물 세포 또는 연관된 병리학적 증상의 시험관 내, 동일 반응계 내 및 생체 내 진단 또는 치료에 상기 화합물을 사용하는 방법에 관한 것이다.
Pim 키나아제는 유전자 Pim-1, Pim-2 및 Pim-3에 의해 코팅되는 3종의 고도로 연관된 세린 및 트레오닌 단백질 키나아제의 부류이다. 유전자 명칭은 문구 "프로바이럴 인서션 몰로니(Proviral Insertion Moloney)"(쥐과 몰로니 바이러스에 대한 흔한 삽입 부위)에서 유래되었고, 이때 삽입은 Pim 키나아제의 과발현과 유전자 변형 Myc-유도 림프종 모델에서 새로운(de novo) T-세포 림프종 또는 매우 급속적인 종양발생을 초래한다(문헌 [Cuypers et al. (1984) Cell, vol. 37 (1) pp. 141-50; Selten et al. (1985) EMBO J. vol. 4 (7) pp. 1793-8]; [van der Lugt et al. (1995) EMBO J. vol. 14 (11) pp. 2536-44]; [Mikkers et al. (2002) Nature Genetics, vol. 32 (1) pp. 153-9]; 및 [van Lohuizen et al. (1991) Cell, vol. 65 (5) pp. 737-52]). 이런 실험은 종양유전자 c-Myc와의 상승작용을 밝혀 내었고, Pim 키나아제의 억제가 치료 효과를 가질 수 있음을 제안한다.
마우스 유전학은, Pim 키나아제를 길항하는 것이 허용가능한 안전한 프로파일을 가질 수 있음을 제안한다(야생형 새끼(littlermate)보다 약간 더 작지만 Pim 1 -/-; Pim 2 -/-; Pim 3 -/- 마우스 넉아웃(knockout)은 생존가능하다)(문헌[Mikkers et al. (2004) Mol Cell Biol vol. 24 (13) pp. 6104-154]). 상기 3종의 유전자는 단백질 키나아제 도메인을 포함하며 인식가능한 조절 도메인이 명확하게 없는 6종의 단백질 이소형태를 생성한다. 모든 6종의 이소형태는, 활성에 있어서 번역-후 변형을 필요로 하지 않는 구조적 활성 단백질 키나아제이므로, Pim 키나아제는 전사 수준에서 1차적으로 조절된다(문헌[Qian et al. (2005) J Biol Chem, vol. 280 (7) pp. 6130-7]). Pim 키나아제 발현은 사이토카인 및 성장 인자 수용체에 의해 잘 유발가능하고, Pim은 Stat 단백질(Stat3 및 Stat5 포함)의 직접 전사 표적이다. 예컨대, gp130-매개 Pim-1은 Stat3 증식 신호를 필요로 한다(문헌[Aksoy et al. (2007) Stem Cells, vol. 25 (12) pp. 2996-3004; Hirano et al. (2000) Oncogene vol. 19 (21) pp. 2548-56; Shirogane et al. (1999) Immunity vol. 11 (6) pp. 709-19]).
Pim 키아나제는 세포 증식 및 PI3k/Akt./mTor 신호 축에 평행한 생존 경로에서 기능한다(문헌[Hammerman et al. (2005) Blood vol. 105 (11) pp. 4477-83]). 실제로, Bad 및 eIF4E-BP1를 비롯한 PI3K 축의 몇몇 인산화 표적은 세포 성장 및 세포자멸사 조절제이고, 또한 Pim 키아나제의 인산화 표적이다(문헌[Fox et al. (2003) Genes Dev vol. 17 (15) pp. 1841-54]; [Macdonald et al. (2006) Cell Biol vol. 7 pp. 1]; [Aho et al. (2004) FEBS Letters vol. 571 (1-3) pp. 43-9]; 및 [Tamburini et al. (2009) Blood vol. 114 (8) pp. 1618-27]). Pim 키아나제는, Bad의 인산화가 Bcl-2 활성을 증가시켜 세포 생존을 증진시키기 때문에 세포 생존에 영향을 줄 수 있다. 마찬가지로, mTOR 또는 Pim 키아나제에 의한 eIF4E-BP1의 인산화는 eIF4E의 불발현(depreesion)을 초래하고, mRNA 번역 및 세포 성장을 촉진시킨다. 또한, Pim-1은 CDC25A, p21 및 Cdc25C의 인산화를 통해 세포 주기 진행(progression)을 촉진하는 것으로 인식되어 왔다(문헌[Mochizuki et al. (1999) J Biol Chemvol. 274 (26) pp. 18659-66]; [Bachmann et al. (2006) Int J Biochem Cell Biol vol. 38 (3) pp. 430-43]; 및 [Wang et al. (2002) Biochim Biophys Acta vol. 1593 (1) pp. 45-55]).
Pim 키아나제는 c-Myc-유도 및 Akt-유도 종양을 갖는 유전자 변형 마우스 모델에서 상승작용을 보인다(문헌[Verbeek et al. (1991) Mol Cell Biol vol. 11 (2) pp. 1176-9]; [Allen et al. Oncogene (1997) vol. 15 (10) pp. 1133-41]; 및 [Hammerman et al. (2005) Blood vol. 105 (11) pp. 4477-83]). Pim 키아나제는 Flt3-ITD, BCR-abl, 및 Tel-Jak2를 비롯한 급성 골수성 백혈병에서 확인된 종양유전자의 활성 변화에 관여한다. PaF3 세포에서 이런 종양유전자의 발현은 Pim-1 및 Pim-2 발현을 상향조절하고, IL-3 독립적 성장을 가능케 하고, 차후에 Pim 억제는 세포자멸사 및 세포 성장 중단(arrest)를 초래한다(문헌[Adam et al. (2006) Cancer Research 66 (7): 3828-35]). Pim 과발현 및 조절곤란은 백혈병 및 림프종(문헌[Amson et al. (1989) Proc Natl Acad Sci USA 86 (22): 8857-61)]; [Cohen et al. (2004) Leuk Lymphoma 45 (5): 951-5]; 및 [Huttmann et al. (2006) Leukemia 20 (10): 1774-82])뿐만 아니라 다발성 골수종(문헌[Claudio et al. (2002) Blood 100 (6): 2175-86])을 비롯한 많은 조혈성 암을 종종 발생시키는 것으로 알려져 있다. Pim-1은 전립선 암 진행에서 과발현되고 관련되는 것으로 나타났다(문헌[Cibull et al. (2006) J Clin Pathol 59 (3): 285-8]; 및 [Dhanasekaran et al. (2001) Nature vol. 412 (6849): 822-6]). Pim-1 발현은 질병 진행을 겪는 마우스 모델에서 증가한다(문헌[Kim et al. (2002) Proc Natl Acad Sci USA 99 (5): 2884-9]). Pim-1은 c-Myc-유도 유전자 시그네쳐를 갖는 인간 전립선 종양 샘플의 하위세트에서의 가장 높게 과발현된 mRNA인 것으로 보고되었다(문헌[Ellwood-Yen et al. (2003) Cancer Cell 4 (3): 223-38]). Pim-3는 또한 췌장암 및 간세포 암종에서 과발현되고 기능적 역할을 갖는 것으로 알려졌다(문헌[Li et al. (2006) Cancer Research 66 (13): 6741-7; Fujii et al. (2005) Int J Cancer 114 (2): 209-18]).
종양유전자 치료 및 진단 분야 외에, Pim 키아나제는 정상 면역계 기능에 중요한 역할을 할 수 있고, Pim 억제는 암발생(문헌[Nawijn et al (2011) Nature Rev. 11:23-34]), 염증, 자가면역 증상, 알러지 및 기관 이식에서의 면역 억제를 비롯한 많은 상이한 면역학적 병리학에서의 치료능이 있을 수 있다(문헌[Aho et al. (2005) Immunology 116 (1): 82-8]).
본 발명은 Pim 키나아제(Pim-1, Pim-2, 및/또는 Pim-3) 억제제에 의해 매개되는 장애의 치료를 위한 피라졸-4-일-헤테로사이클릴-카복사마이드 화합물, 즉 하기 화학식 I의 구조를 가진 화합물, 또는 이의 입체 이성질체, 기하 이성질체, 호변 이성질체, 및 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:
[화학식 I]
Figure pct00001
상기 식에서,
R2는 하기 구조
Figure pct00002
로부터 선택되며, 여기서 물결 선은 부착 부위를 나타내고, 점선은 임의적인 이중 결합을 나타내고;
X는 하기 구조
Figure pct00003
로부터 선택된다.
R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 및 X를 비롯한 각종 치환기는 본원에 정의된 바와 같다.
본 발명의 하나의 양태는 화학식 I의 화합물, 및 약학적으로 허용가능한 담체, 활택제(glidant), 희석제, 또는 부형제를 포함하는 약학 조성물이다. 상기 약학 조성물은 화학치료제를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명은, 암, 면역 장애, 심혈관계 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경 장애 중에서 선택되고 Pim 키나아제에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 가진 환자에게 치료 효과량의 화학식 I의 화합물을 투여하는 것을 포함하는 질환 또는 장애의 치료 방법을 포함한다. 상기 방법은 화학치료제, 항염증제, 면역 조절제, 신경 영양 인자, 심혈관계 질환 치료제, 간 질환 치료제, 항바이러스제, 혈액 질환 치료제, 당뇨병 치료제 및 면역 결핍 장애 치료제로부터 선택된 추가 치료제를 투여하는 것을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명은, Pim 키나아제를 매개하며 암, 면역 장애, 심혈관계 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경 장애의 치료를 위한 약제의 제조에서의 화학식 I의 화합물의 용도를 포함한다.
본 발명은 Pim 키나아제에 의해 매개되는 증상의 치료를 위한 키트를 포함하며, 상기 키트는 a) 화학식 I의 화합물을 포함하는 제 1 약학 조성물; 및 b) 사용 설명서를 포함한다.
본 발명은, 약제로서 사용하고, 암, 면역 장애, 심혈관계 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경 장애 중에서 선택되고 Pim 키나아제에 의해 매개되는 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 화학식 I의 화합물을 포함한다.
본 발명은 화학식 I의 화합물의 제조 방법을 포함한다.
도 1은 니트로-1H-피라졸 1로부터의 4-아미노피라졸 화합물 5의 예시적 합성을 도시한다.
도 2는 하이드록사마이드 화합물 6로부터의 4-카복시-티아졸 11의 예시적 합성을 도시한다.
도 3은 화합물 12 의 C-2 브롬화 이후 화합물 13의 스즈키 반응에 의한 2-치환된 4-카복시-5-아미노티아졸 11의 예시적 합성을 도시한다.
도 4는 4-아미노,5-아제판일 피라졸 화합물 14 및 2-브로모, 4-카복시-5-아미노티아졸 11의 커플링으로부터 제조되는 5-아제판일-N-(피라졸-4-일)티아졸-카복사마이드 화합물 17의 예시적 합성을 도시한다.
도 5는 4-아미노,5-아제판일 피라졸 화합물 14 및 2-브로모,3-Boc-아미노,6-카복시-피리딜 화합물 18의 커플링으로부터 제조되는 6-아미노-N-(피라졸-4-일)피리딜-카복사마이드 화합물 21의 예시적 합성을 도시한다.
도 6은 4-아미노,5-다이아제판일 피라졸 화합물 22 및 2-브로모,3-치환된 6-카복시-5-아미노피라진일 화합물 23의 커플링으로부터 제조되는 6-아미노-N-(피라졸-4-일)피라진-카복사마이드 화합물 26의 예시적 합성을 도시한다.
도 7은 2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제 핀 27로부터 5-아지도-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제 판 32의 예시적 합성을 도시한다.
도 8은 6,7-다이하이드로-1H-아제핀-3(2H)-온 33으로부터 5-BOC-아미노-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판 39의 예시적 합성을 도시한다.
도 9는 4-니트로-1H-피라졸 2로부터 5-(4-아지도-1-플루오로사이클로헵틸)-4-니트로-1H-피라졸 45의 예시적 합성을 도시한다.
도 10은 5-클로로-4-니트로-1H-피라졸 3으로부터 3-플루오로-1-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민 52의 예시적 합성을 도시한다.
본 발명의 특정 실시양태를 참조하여 상세하게 기술될 것이고, 그 실시예는 구조식 및 화학식과 함께 도시된다. 본 발명은 열거된 실시양태와 함께 기재될 것이고, 그들은 본 발명을 그 실시양태로 한정하려고 의도된 것이 아님이 이해될 것이다. 반대로 본 발명은 본 발명의 범주 내에 포함될 수 있는 모든 대안, 변형 및 등가물을 망라하도록 의도된다. 당업자는 본 명세서에 기재된 것들과 유사하거나 동등한 많은 방법 및 재료를 인식할 것이고, 이는 본 발명의 실시에서 사용될 수 있다. 본 발명은 기재된 방법 및 재료에 한정되지 않는다. 정의된 용어, 용어 사용, 기재된 기술 등을 포함하는 하나 이상의 인용된 문헌, 특허 및 유사한 재료가 본 출원과 상이하거나 모순되는 경우에는 본 출원에 따른다. 다르게 정의되지 않는 한, 본원에 사용되는 모든 기술 용어 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 숙련자에 의해 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본원에 기재된 것과 유사하거나 균등한 방법 및 물질을 본 발명의 실시 및 시험에 사용할 수 있지만, 적합한 방법 및 물질을 이하에서 설명한다.　 모든　공보, 특허 출원, 특허 및 기타 본원에 언급되는 문헌은 그 전체로 본원에 참고로 인용된다.　 달리 언급하지 않는 한, 본원에 사용된 명명법은 IUPAC 체계의 명명법에 기초한다.
정의
치환기의 수를 나타내는 경우, 용어 "하나 이상"은 하나의 치환기로부터 가능한 최대 개수의 치환기 범위, 즉 하나의 수소를 치환기로 대체하는 것으로부터 모든 수소를 치환기로 대체하는 것을 의미한다. 용어 "치환기"는 모 분자 상의 수소 원자를 대체하는 원자 또는 원자단을 나타낸다. 용어 "치환된"은 특정 기가 하나 이상의 치환기를 갖는 것을 나타낸다.　 임의의 기가 다수의 치환기를 갖고 각종 가능한 치환기가 제공되는 경우, 이들 치환기는 독립적으로 선택되며 동일할 필요는 없다.　 용어 "비치환된"은 특정 기가 치환기를 보유하지 않음을 의미한다.　 용어 "임의적으로 치환되는"은, 특정 기가, 가능한 치환기 군으로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 치환되거나 비치환되는 것을 의미한다. 치환기의 수를 나타내는 경우, 용어 "하나 이상"은 하나 이상의 치환기로부터 가능한 최대 개수의 치환기 범위, 즉 하나의 수소를 치환기로 대체하는 것으로부터 모든 수소를 치환기로 대체하는 것을 의미한다.
본원에 사용된 "알킬"이라는 용어는 탄소수 1 내지 12개(C1-C12)의 포화 직쇄 또는 분지쇄 1가 탄화수소 라디칼을 의미하며, 여기서 알킬 라디칼은 독립적으로 하기에 기술된 하나 이상의 치환체로 임의적으로 치환될 수 있다. 또 다른 실시양태에서, 알킬 라디칼은 탄소수 1 내지 8개(C1-C8), 또는 탄소수 1 내지 6개(C1-C6)이다. 알킬 기의 예로는 비제한적으로, 메틸(Me, -CH3), 에틸(Et, -CH2CH3), 1-프로필(n-Pr, n-프로필, -CH2CH2CH3), 2-프로필(i-Pr, i-프로필, -CH(CH3)2), 1-부틸(n-Bu, n-부틸, -CH2CH2CH2CH3), 2-메틸-1-프로필(i-Bu, i-부틸, -CH2CH(CH3)2), 2-부틸(s-Bu, s-부틸, -CH(CH3)CH2CH3), 2-메틸-2-프로필(t-Bu, t-부틸, -C(CH3)3), 1-펜틸(n-펜틸, -CH2CH2CH2CH2CH3), 2-펜틸(-CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-펜틸(-CH(CH2CH3)2), 2-메틸-2-부틸(-C(CH3)2CH2CH3), 3-메틸-2-부틸(-CH(CH3)CH(CH3)2), 3-메틸-1-부틸(-CH2CH2CH(CH3)2), 2-메틸-1-부틸(-CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-헥실(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3), 2-헥실(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3), 3-헥실(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3)), 2-메틸-2-펜틸(-C(CH3)2CH2CH2CH3), 3-메틸-2-펜틸(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3), 4-메틸-2-펜틸(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2), 3-메틸-3-펜틸(-C(CH3)(CH2CH3)2), 2-메틸-3-펜틸(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2), 2,3-다이메틸-2-부틸(-C(CH3)2CH(CH3)2), 3,3-다이메틸-2-부틸(-CH(CH3)C(CH3)3, 1-헵틸, 1-옥틸 등을 포함한다.
본원에 사용된 "알킬렌"이라는 용어는 탄소수 1 내지 12개(C1-C12)인 포화 직쇄 또는 분지쇄 2가 탄화수소 라디칼을 의미하며, 여기서 알킬렌 라디칼은 독립적으로 하기에 기술된 하나 이상의 치환체로 임의적으로 치환될 수 있다. 다른 실시양태에서, 알킬렌 라디칼은 탄소수 1 내지 8개(C1-C8), 또는 탄소수 1 내지 6개(C1-C6)이다. 알킬렌 기의 예로는 비제한적으로, 메틸렌(-CH2-), 에틸렌(-CH2CH2-), 프로필렌(-CH2CH2CH2-) 등을 포함한다.
"알켄일"이라는 용어는 적어도 하나의 불포화 부위, 즉 탄소-탄소 sp2 이중결합을 갖는 탄소수 2 내지 8개(C2-C8)인 직쇄 또는 분지쇄 1가 탄화수소 라디칼을 의미하며, 여기서 알켄일 라디칼은 독립적으로 본 명세서에 기술된 하나 이상의 치환체로 임의적으로 치환될 수 있고, 그 예로는 "시스" 및 "트랜스" 배향인 라디칼, 또는 다르게는 "E" 및 "Z" 배향을 갖는 라디칼을 포함한다. 예컨대, 에틸레닐 또는 비닐(-CH=CH2), 알릴(-CH2CH=CH2) 등을 비제한적으로 포함한다.
"알켄일렌"이라는 용어는 적어도 하나의 불포화 부위, 즉 탄소-탄소 sp2 이중결합을 갖는 탄소수 2 내지 8개의 직쇄 또는 분지쇄 2가 탄화수소 라디칼을 의미하고, 여기서 알켄일렌 라디칼은 임의적으로 본원에 기재된 하나 이상의 치환체로 독립적으로 치환될 수 있고, 그 예로는 "시스" 및 "트랜스" 배향, 또는 다르게는 "E" 및 "Z" 배향을 갖는 라디칼을 포함한다. 예컨대, 비제한적으로 에틸렌일렌 또는 비닐렌(-CH=CH-) 또는 알릴(-CH2CH=CH-) 등을 포함한다.
"알킨일"이라는 용어는 적어도 하나의 불포화 부위, 즉 탄소-탄소 sp 삼중 결합을 갖는 탄소수 2 내지 8개(C2-C8)의 직쇄 또는 분지쇄 1가 탄화수소 라디칼을 의미하고, 여기서 알킨일 라디칼은 독립적으로 본 명세서에 기술된 하나 이상의 치환체로 임의적으로 치환될 수 있다. 예컨대, 비제한적으로 에틴일(-C≡CH), 프로핀일(프로파길, -CH2C≡CH) 등을 포함한다.
"알킨일렌"이라는 용어는 적어도 하나의 불포화 부위, 즉 탄소-탄소 sp 삼중 결합을 갖는 탄소수 2 내지 8개(C2-C8)의 직쇄 또는 분지쇄 2가 탄화수소 라디칼을 의미하고, 여기서 알킨일 라디칼은 임의적으로 본 명세서에 기술된 하나 이상의 치환체로 독립적으로 치환될 수 있다. 그 예로는 비제한적으로 에틴일렌(-C≡C-), 프로핀일렌(프로파길렌, -CH2C≡C-) 등을 포함한다.
"카보사이클", "카보사이클릴", "카보사이클릭 고리" 및 "사이클로알킬"이라는 용어는 모노사이클릭 고리로 탄소수 3 내지 12개(C3-C12) 또는 바이사이클릭 고리로 탄소수 7 내지 12개를 갖는 1가 비방향족, 포화 또는 부분 불포화 고리를 의미한다. 탄소수 7 내지 12개의 바이사이클릭 카보사이클은 예컨대 바이사이클로[4,5], [5,5], [5,6] 또는 [6,6] 시스템으로 배열될 수 있고, 9 내지 10개의 고리원자를 갖는 바이사이클릭 카보사이클은 바이사이클로[5,6] 또는 [6,6] 시스템으로, 또는 바이사이클로[2.2.1]헵탄, 바이사이클로[2.2.2]옥탄 및 바이사이클로[3.2.2]노난과 같은 가교 시스템으로 배열될 수 있다. 스피로 잔기가 또한 이러한 정의의 범주 안에 포함된다. 모노사이클릭 카보사이클의 예로는 비제한적으로 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 1-사이클로펜트-1-에닐, 1-사이클로펜트-2-에닐, 1-사이클로펜트-3-에닐, 사이클로헥실, 1-사이클로헥스-1-에닐, 1-사이클로헥스-2-에닐, 1-사이클로헥스-3-에닐, 사이클로헥사디엔일, 사이클로헵틸, 사이클로옥틸, 사이클로노닐, 사이클로데실, 사이클로운데실, 사이클로도데실 등을 포함한다.
"아릴"은 모 방향족 고리 시스템의 하나의 탄소원자로부터 하나의 수소원자가 제거되어 유도된 탄소수 6 내지 20개(C6-C20)의 1가 방향족 탄화수소 라디칼을 의미한다. 일부 아릴 기는 "Ar"과 같은 예시적 구조로 표시된다. 아릴은 포화, 부분 불포화 고리 또는 방향족 카보사이클릭 고리에 융합된 방향족 고리를 포함하는 바이사이클릭 라디칼을 포함한다. 전형적인 아릴 기는 비제한적으로 벤젠(페닐), 치환된 벤젠, 나프탈렌, 안트라센, 바이페닐, 인데닐, 인다닐, 1,2-다이하이드로나프탈렌, 1,2,3,4-테트라하이드로나프틸 등으로부터 유도된 라디칼을 포함한다. 아릴 기는 독립적으로 본 명세서에 기술된 하나 이상의 치환체로 임의적으로 치환된다.
"아릴렌"은 모 방향족 고리 시스템의 2개의 탄소원자로부터 2개의 수소원자를 제거하여 유도된 탄소수 6 내지 20개(C6-C20)인 2가 방향족 탄화수소 라디칼을 의미한다. 일부 아릴렌 기는 예시적 구조에서 "Ar"로 표현된다. 아릴렌은 포화, 부분 불포화 고리 또는 방향족 카보사이클릭 고리에 융합된 방향족 고리를 포함하는 바이사이클릭 라디칼을 포함한다. 전형적인 아릴렌 기로는 비제한적으로 벤젠(페닐렌), 치환된 벤젠, 나프탈렌, 안트라센, 바이페닐렌, 인데닐렌, 인다닐렌, 1,2-다이하이드로나프탈렌, 1,2,3,4-테트라하이드로나프틸 등으로부터 유도된 라디칼을 포함한다. 아릴렌 기는 임의적으로 본원에 기재된 하나 이상의 치환체로 치환된다.
"헤테로사이클", "헤테로사이클릴" 및 "헤테로사이클릭 고리"라는 용어는 본 명세서에서 상호 호환적으로 사용되며, 고리 원자가 3 내지 20개인 포화 또는 부분 불포화(즉, 고리 내에 하나 이상의 이중 및/또는 삼중 결합을 가짐) 카보사이클릭 라디칼을 의미하며, 여기서 적어도 하나의 고리 원자는 질소, 산소, 인 및 황 중에서 선택되는 헤테로 원자이고, 나머지 고리 원자는 C이며, 이때 하나 이상의 고리 원자는 임의적으로 이하에 기술되는 하나 이상의 치환체에 의해 독립적으로 치환된다. 헤테로사이클은 고리 멤버가 3 내지 7개(탄소원자 2 내지 6개 및 N, O, P 및 S 중에서 선택되는 헤테로원자 1 내지 4개)인 모노사이클, 또는 고리 멤버가 7 내지 10개(탄소 원자 4 내지 9개 및 N, O, P 및 S 중에서 선택되는 헤테로원자 1 내지 6개)인 바이사이클, 예컨대 바이사이클로[4,5],[5,5],[5,6] 또는 [6,6] 시스템일 수 있다. 헤테로사이클은 문헌[Paquette, Leo A.; "Principles of Modern Heterocyclic Chemistry(W.A. Benjamin, New York, 1968), 특히 1, 3, 4, 6, 7 및 9장; "The Chemistry of Heterocyclic Chemicals, A series of Monographs(John Wiley & Sons, New York, 1950 ~ 현재), 특히 Volumes 13, 14, 16, 19, and 28; and J. Am. Chem. Soc. (1960) 82:5566]에 기술되어 있다. 또한, "헤테로사이클릴"은 헤테로사이클 라디칼이 포화, 부분 불포화 고리 또는 방향족 카보사이클릭 또는 헤테로 사이클릭 고리와 융합되어 있는 라디칼을 포함한다. 헤테로사이클릭 고리의 예로는 비제한적으로 모폴린-4-일, 피페리딘-1-일, 피페라진일, 피페라진-4-일-2-온, 피페라진-4-일-3-온, 피롤리딘-1-일, 티오모폴린-4-일, S-다이옥소티오모폴린-4-일, 아조칸-1-일, 아제티딘-1-일, 옥타하이드로피리도[1,2-a]피라진-2-일, [1,4]다이아제판-1-일, 피롤리딘일, 테트라하이드로푸란일, 다이하이드로푸란일, 테트라하이드로티엔일, 테트라하이드로피란일, 다이하이드로피란일, 테트라하이드로티오피란일, 피페리디노, 모폴리노, 티오모폴리노, 티옥산일, 피페라진일, 호모피페라진일, 아제티딘일, 옥세탄일, 티에탄일, 호모피페리딘일, 옥세판일, 티에판일, 옥사제핀일, 다이아제핀일, 티아제핀일, 2-피롤린일, 3-피롤린일, 인돌린일, 2H-피란일, 4H-피란일, 다이옥산일, 1,3-다이옥솔란일, 피라졸린일, 다이티안일, 다이티올란일, 다이하이드로피란일, 다이하이드로티엔일, 다이하이드로푸란일, 피라졸리딘일이미다졸린일, 이미다졸리딘일, 3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산일, 3-아자바이사이클로[4.1.0]헵탄일, 아자바이사이클로[2.2.2]헥산일, 3H-인돌일 퀴놀리진일 및 N-피리딜 우레아이다. 또한, 스피로 잔기도 본 정의의 범주에 포함된다. 2개의 고리 탄소원자가 옥소(=O) 잔기로 치환된 헤테로사이클릭 기의 예는 피리미디노닐 및 1,1-다이옥소-티오모르폴린일이다. 여기서 헤테로사이클 기는 독립적으로 본 명세서에 기술된 하나 이상의 치환체로 임의적으로 치환된다.
"헤테로아릴"이라는 용어는 5-, 6-또는 7-원 고리의 1가 방향족 라디칼을 의미하고, 그 예로는 질소, 산소 및 황 중에서 독립적으로 선택되는 헤테로원자를 하나 이상 함유하는 5 내지 20개 원자의 융합 고리 시스템(이 중 적어도 하나는 방향족임)을 포함한다. 헤테로아릴 기의 예는 피리딜(예컨대, 2-하이드록시피리딘일 포함), 이미다졸릴, 이미다조피리딘일, 피리미딘일(예컨대, 4-하이드록시피리미딘일 포함), 피라졸릴, 트라이아졸릴, 피라진일, 테트라졸릴, 푸릴, 티에닐, 이속사졸릴, 티아졸릴, 옥사다이아졸릴, 옥사졸릴, 이소티아졸릴, 피롤릴, 퀴놀린일, 이소퀴놀린일, 테트라하이드로이소퀴놀린일, 인돌릴, 벤즈이미다졸릴, 벤조푸란일, 신놀린일, 인다졸릴, 인돌리지닐, 프탈라지닐, 피리다지닐, 트라이아지닐, 이소인돌릴, 프테리딘일, 퓨린일, 옥사다이아졸릴, 트라이아졸릴, 티아다이아졸릴, 티아디아졸릴, 푸라잔일, 벤조푸라잔일, 벤조티오페닐, 벤조티아졸릴, 벤족사졸릴, 퀴나졸린일, 퀴녹살린일, 나프티리딘일 및 푸로피리딘일이다. 헤테로아릴 기는 독립적으로 본 명세서에 기술된 하나 이상의 치환체로 임의적으로 치환된다.
헤테로사이클 또는 헤테로아릴 기는 가능한 경우, 탄소(탄소-연결된), 또는 질소(질소-연결된) 결합되어 있을 수 있다. 예시적으로 및 비제한적으로, 탄소 결합된 헤테로사이클 또는 헤테로아릴은 피리딘의 2, 3, 4, 5 또는 6번 위치, 피리다진의 3, 4, 5 또는 6번 위치, 피리미딘의 2, 4, 5 또는 6번 위치, 피라진의 2, 3, 5 또는 6번 위치, 푸란, 테트라하이드로푸란, 티오푸란, 티오펜, 피롤 또는 테트라하이드로피롤의 2, 3, 4 또는 5번 위치, 옥사졸, 이미다졸 또는 티아졸의 2, 4 또는 5번 위치, 이속사졸, 피라졸 또는 이소티아졸의 3, 4 또는 5번 위치, 아지리딘의 2 또는 3번 위치, 아제티딘의 2, 3 또는 4번 위치, 퀴놀린의 2, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8번 위치, 또는 이소퀴놀린의 1, 3, 4, 5, 6, 7 또는 8번의 위치에 결합된다.
예시적 및 비제한적으로, 질소 결합된 헤테로사이클 또는 헤테로아릴은 아지리딘, 아제티딘, 피롤, 피롤리딘, 2-피롤린, 3-피롤린, 이미다졸, 이미다졸리딘, 2-이미다졸린, 3-이미다졸린, 피라졸, 피라졸린, 2-피라졸린, 3-피라졸린, 피페리딘, 피페라진, 인돌, 인돌린, 1H-인다졸, 벤즈이미다졸의 1번 위치에, 이소인돌 또는 이소인돌린의 2번 위치에, 모르폴린의 4번 위치 및 카바졸 또는 β-카볼린의 9번 위치에 결합된다.
"치료하다" 및 "치료"라는 용어는 치료법상의 치료 및 예방 또는 방지 수단 모두를 일컫고, 그 목적은 암의 발달 또는 전이와 같은 원치 않는 생리학적 변화 또는 질환을 예방하거나 늦추는(줄이는) 것이다. 본 발명의 목적을 위해 유리하거나 목적으로 하는 임상 결과는 검출되든 검출되지 않든 증상의 완화, 질병 정도의 감소, 질병의 안정화된(즉, 악화되지 않는) 상태, 질병 진행의 지연 또는 둔화, 질병 상태의 완화 또는 경감 및 (부분적이거나 전체적인) 차도를 포함하나 이에 한정되지는 않는다. 또한, "치료"는 치료를 받지 않았을 때 예상되는 생존에 비해 생존이 연장됨을 의미할 수 있다. 치료를 필요로 하는 개체는 이미 질환 또는 장애를 갖는 개체뿐만 아니라 질환 또는 장애를 갖기 쉬운 개체 또는 질환 또는 장애를 예방해야 하는 개체를 포함한다.
"치료 효과량"이라는 표현은 (i) 본원에 기재된 특정 질환, 증상 또는 장애를 치료 또는 예방하거나, (ii) 하나 이상의 특정 질환, 증상 또는 장애의 징후를 약화, 개선 또는 제거하거나, 또는 (iii) 하나 이상의 특정 질환, 증상 또는 장애의 개시를 예방 또는 지연시키는 본 발명의 화합물 양을 의미한다. 암의 경우, 치료 효과량의 약물은 암 세포의 수를 감소시키고; 종양 크기를 감소시키고; 암 세포의 말초 기관으로의 침투를 억제하고(즉, 일부 정도를 지연시키고, 바람직하게는 정지시킴); 종양 전이를 억제하고(즉, 일부 정도를 지연시키고, 바람직하게는 정지시킴); 종양 성장을 어느 정도 억제하고; 및/또는 암과 연관된 하나 이상의 일부 증상을 어느 정도 완화시킬 수 있다. 상기 약물은 기존의 암 세포의 성장을 억제하고/하거나 기존의 암 세포를 사멸시킬 수 있을 정도로 세포정지성 및/또는 세포독성일 수 있다. 암 치료의 경우, 효율은, 예컨대 질병의 진행 정도에 대한 시간(TTP)을 측정하고/하거나 반응 속도(RR)를 측정함으로써 측정될 수 있다.
"암"이라는 용어는 일반적으로 조절되지 않는 세포 성장을 특징으로 하는 포유 동물의 생리적 증상를 의미하거나 나타낸다. "종양"은 하나 이상의 암성 세포를 포함한다. 암의 비제한적인 예로는 암종, 림프종, 모세포종, 육종 및 백혈병 또는 림프성 악성종양을 포함한다. 이러한 암의 더 구체적인 예로는 편평상피세포암(예컨대, 상피 편평상피 세포암), 폐암, 예컨대 소세포 폐암, 비-소세포 폐암("NSCLC"), 폐의 아데노암종 및 폐의 편평상피세포 암종, 복강암, 간세포암, 위암, 예컨대 위장암, 췌장암, 교아세포종, 자궁경부암, 난소암, 간암, 방광암, 간암, 유방암, 결장암, 직장암, 결장직장암, 자궁내막암 또는 자궁 암종, 타액선 암종, 신장암, 전립선암, 음문암, 갑상선암, 간 암종, 항문 암종, 음경 암종 뿐만 아니라 두경부암을 포함한다.
"화학치료제"는 작용 기전에 관계없이 암 치료에 유용한 화학적 화합물이다. 화학치료제의 부류에는 비제한적으로 알킬화제, 항대사물질, 스핀들 포이즌(spindle poison) 식물 알칼로이드, 세포독성/항종양 항생제, 토포이소머라제 억제제, 항체, 광증감제 및 키나아제 억제제가 포함된다. 화학치료제로는 "표적화된 치료법" 및 통상의 화학치료에 사용된 화합물을 포함한다. 화학치료제의 예로는 에를로티니브(TARCEVA®, 제넨테크(Genentech)/OSI 팜(Pharm)), 도세탁셀(TAXOTERE®, 사노피-아벤티스(Sanofi-Aventis)), 5-FU(플루오로우라실, 5-플루오로우라실, CAS No. 51-21-8), 젬시타빈(GEMZAR®, 릴리(Lilly)), PD-0325901(CAS No. 391210-10-9, 화이자(Pfizer)), 시스플라틴(시스-다이아민,다이클로로백금(II), CAS No. 15663-27-1), 카보플라틴(CAS No. 41575-94-4), 파클리탁셀(TAXOL®, 뉴저지주 프린스턴 소재의 브리스톨-마이어스 스퀴브 온콜로지(Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.)), 트라스투주마브(HERCEPTIN®, 제넨테크), 테모졸로마이드(4-메틸-5-옥소-2,3,4,6,8-펜타자바이사이클로[4.3.0] 노나-2,7,9-트리엔-9-카복사마이드, CAS No. 85622-93-1, TEMODAR, TEMODAL®, 쉐링 폴로(Schering Plough)), 타목시펜((Z)-2-[4-(1,2-디페닐부트-1-에닐)페녹시]-N,N-다이메틸에탄아민, NOLVADEX®, ISTUBAL®, VALODEX®, 및 독소루비신(ADRIAMYCIN), 악티(Akti)-1/2, HPPD 및 라파마이신을 포함한다.
화학치료제의 더 많은 예로는 옥살리플라틴(ELOXATIN®, 사노피), 보르테조미브(VELCADE®, 밀레니엄 팜(Millennium Pharm)), 수텐트(SUNITINIB®, SU11248, 화이자), 레트로졸(FEMARA®, 노바티스(Novartis)), 이마티니브 메실레이트(GLEEVEC®, 노바티스), XL-518(MEK 억제제, 엑셀릭시스(Exelixis), WO 2007/044515), ARRY-886(MEK 억제제, AZD6244, 어레이 바이오파마(Array BioPharma), 아스트라 제네카(Astra Zeneca)), SF-1126(PI3K 억제제, 세마포어 파마슈티컬스(Semafore Pharmaceuticals)), BEZ-235(PI3K 억제제, 노바티스), XL-147(PI3K 억제제, Exelixis), PTK787/ZK 222584(노바티스), 풀베스트란트(FASLODEX®, 아스트라제네카), 류코보린(폴린산), 라파마이신(시롤리무스, RAPAMUNE®, 와이어쓰), 라파마이신 유사체, mTOR 억제제 예컨대 에베로리무스, MEK 억제제(GDC-0973), BCL-2 억제제 예컨대 나비토클락스, (ABT-263) 또는 (ABT-199), 라파티니브(TYKERB®, GSK572016, 글락소 스미스 클라인(Glaxo Smith Kline)), 로나파니브(SARASAR™, SCH 66336, 쉐링 플로), 소라페니브(NEXAVAR®, BAY43-9006, 바이어 랩스(Bayer Labs)), 제피티니브(IRESSA®, 아스트라 제네카), 이리노테칸(CAMPTOSAR®, CPT-11, 화이자), 티피파니브(ZARNESTRA®, 존슨&존슨(Johnson&Johnson)), ABRAXANE™(크레모포-무함유), 파클리탁셀의 알부민-조작된 나노입자 포뮬레이션(일리노이주 샤움버그 소재의 아메리칸 파마슈티칼 파트너스(American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Il)), 반데타니브(rINN, ZD6474, ZACTIMA®, 아스트라 제네카), 클로람부실, AG1478, AG1571(SU 5271; 수겐(Sugen)), 템시롤리무스(TORISEL®, 와이어쓰), 파조파니브(글락소 스미스 클라인), 칸포스파마이드(TELCYTA®, 텔릭(Telik)), 티오테파 및 사이클로스포스파마이드(CYTOXAN®, NEOSAR®; 알킬 설포네이트, 예컨대 부설판, 임프로설판 및 피포설판; 아지리딘, 예컨대 벤조도파, 카보쿠온, 메투레도파 및 우레도파; 에틸렌이민 및 메틸라멜라민류, 예컨대 알트레타민, 트라이에틸렌멜라민, 트라이에틸렌포스포아마이드, 트라이에틸렌티오포스포아마이드 및 트라이메틸로멜라민; 아세토제닌(특히, 불라탁신 및 불라탁시논); 캠토테신(예컨대, 합성 유사체 토포테칸); 브리오스타틴; 칼리스타틴; CC-1065(예컨대, 이의 아도젤레신, 카젤레신 및 비젤레신 합성 유사체); 크립토피신(구체적으로, 크립토피신 1 및 크립토피신 8); 돌라스타틴; 듀오카마이신(예컨대, 합성 유사체, KW-2189 및 CB1-TM1); 엘류테로빈; 판크라티스타틴; 사르코딕틴; 스폰지스타틴; 질소 머스타드, 예컨대 클로람부실, 클로르나파진, 클로로포스파마이드, 에스트라무스틴, 이포스파마이드, 메클로레타민, 메클로레타민 옥사이드 염산염, 멜팔란, 노벰비친, 페네스테린, 프레드니무스틴, 트로포스파마이드, 우라실 머스타드; 니트로소우레아, 예컨대 카무스틴, 클로로조토신, 포테무스틴, 로무스틴, 니무스틴 및 라님누스틴; 항생제, 예컨대 에네디인 항생제(예컨대, 칼리케아미신, 칼리케아미신 감마1I, 칼리케아미신 오메가I1(문헌[Angew Chem. Intl. Ed. Engl. (1994) 33:183-186]); 다인미신(dynemicin), 다인미신 A; 비스포스포네이트, 예컨대 클로드로네이트; 에스페라미신; 뿐만 아니라 네오카르지노스타틴 발색단 및 관련 색소단백질 에네디인 항생제 발색단), 아클라시노미신, 악티노마이신, 오트라마이신, 아자세린, 블레오마이신, 캑티노마이신, 카라비신, 카미노마이신, 카지노필린, 크로모마이시니스, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-다이아조-5-옥소-L-노르류신, 모폴리노-독소루비신, 시아노모폴리노-독소루비신, 2-피롤리노-독소루비신 및 데옥시독소루비신), 에피루비신, 에소루비신, 이다루비신, 네모루비신, 마르셀로마이신, 미토마이신, 예컨대 미토마이신 C, 미코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 피플로마이신, 포르피로마이신, 퓨로마이신, 쿠엘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 투베르시딘, 우베니멕스, 지노스타틴, 조루비신; 항대사물질, 예컨대 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실(5-FU); 엽산 유사체, 예컨대 데노프테린, 메토트렉세이트, 프테로프테린, 트라이메트렉세이트; 퓨린 유사체, 예컨대 플루다라빈, 6-머캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌; 피리미딘 유사체, 예컨대 안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카모푸르, 시타라빈, 디데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 플록스우리딘; 안드로겐, 예컨대 칼러스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토락톤; 항-부신류, 예컨대 아미노글루테티미드, 미토탄, 트릴로스탄; 엽산 보충물, 예컨대 프롤린산; 아세글라톤; 알도포스파마이드 글리코사이드; 아미노레불린산; 에닐우라실; 암사크린; 베스트라부실; 비산트렌; 에다트락세이트; 데포파민; 데메콜친; 다이아지쿠온; 엘프오르니틴; 엘립티늄 아세테이트; 에포틸론; 에토글루시드; 갈륨 니트레이트; 하이드록시우레아; 렌티난; 로니다이닌; 메이탄시노이드, 예컨대 메이탄신 및 안사미토신; 미토구라존; 미토잔트론; 모피단몰; 니트라에린; 펜토스타틴; 페나메트; 피라루비신; 로소잔트론; 포도필린산; 2-에틸하이드라자이드; 프로카바진; PSK® 폴리사카라이드 복합체(오리건주 유진 소재의 JHS 네추럴 프로덕츠(JHS Natural Products, Eugene, OR)); 라족산; 리족신; 시조피란; 스피로게르마늄; 테누아존산; 트라이아지쿠온; 2,2',2"-트라이클로로트라이에틸아민; 트라이초테세네스(특히, T-2 독소, 베라쿠린 A, 로리딘 A 및 안구이딘); 우레탄; 빈데신; 다카바진; 만노무스틴; 미토브로니톨; 미토락톨; 피포브로만; 가사이토신; 아라비노사이드("Ara-C"); 사이클로포스파마이드; 티오테파; 6-티오구아닌; 머캅토퓨린; 메토트렉세이드; 백금 유사체, 예컨대 시스플라틴 및 카보플라틴; 빈블라스틴; 에토포사이드(VP-16); 이포스파마이드; 미토잔트론; 빈크리스틴; 비노렐빈(NAVELBINE®); 노반트론; 테니포사이드; 에다트렉세이트; 다우노마이신; 아미노프테린; 카페시타빈(XELODA®, 로슈(Roche)); 이반드로네이트; CPT-11; 토포이소머라제 억제제 RFS 2000; 다이플루오로메틸 오르니틴(DMFO); 레티노이드, 예컨대 레틴산; 및 전술한 임의의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염, 산 및 유도체를 포함한다.
또한, "화학치료제"의 정의에는 (i) 항에스트로겐 및 선택적 에스트로겐 수용체 조절인자(SERM)와 같이 종양에 대한 호르몬 작용을 조절하거나 저해하는 작용을 하는 항호르몬 제제, 예컨대 타목시펜(예컨대, 놀바덱스(NOLVADEX®), 타목시펜시트레이트), 랄옥시펜, 드롤옥시펜, 4-하이드록시타목시펜, 트라이옥시펜, 케옥시펜, LY117018, 오나프리스톤 및 파레스톤(FARESTON®)(토레미핀 시트레이트); (ii) 부신에서 에스트로겐 생산을 조절하는 효소 아로마타제를 저해하는 아로마타제 억제제, 예컨대 4(5)-이미다졸, 아미노글루테티미드, 메가세(MEGASE®)(메제스트롤 아세테이트), 아로마신(AROMASIN®)(엑세메스탄; 화이자), 포메스타니, 파드로졸, 리비솔(RIVISOR®)(보로졸), 페마레(FEMARA®)(레트로졸; 노바티스), 및 아리미덱스(ARIMIDEX®)(아나스트로졸; 아스트라제네카); (iii) 항-안드로겐, 예컨대 플루타미드, 닐루타미드, 비칼루타미드, 류프롤리드 및 고세렐린; 뿐만 아니라 트록사시타빈(1,3-다이옥솔란 뉴클레오사이드 사이토신 유사체); (iv) 단백질 키나아제 억제제, 예컨대 MEK 억제제(WO 2007/044515); (v) 지질 키나아제 억제제; (vi) 안티센스 올리고뉴클레오타이드, 구체적으로 이상 세포 증식에 관련된 신호 전달 경로에서 유전자의 발현을 저해하는 것, 예컨대 PKC-알파, Raf 및 H-Ras, 예컨대 오블리머센(제나센스(GENASENSE®), 젠타 인코포레이티드(Genta Inc.)); (vii) 리보자임, 예컨대 VEGF 발현 억제제(예컨대, 안지오자임(ANGIOZYME®)) 및 HER2 발현 억제제; (viii) 백신, 예컨대 유전자 요법 백신, 예컨대, 알로벡틴(ALLOVECTIN®), 류벡틴(LEUVECTIN®) 및 바시드(VAXID®), 프로류킨(PROLEUKIN®) rIL-2; (ix)토포이소머라제 1 억제제, 예컨대 루르토테칸(LURTOTECAN®); 아바렐릭스(ABARELIX®) rmRH; (x) 항-혈관형성제, 예컨대 베바시주마드(아바스틴(AVASTIN®), 제넨테크); 및 전술한 임의의 화합물의 약학적으로 허용가능한 염, 산 및 유도체가 포함된다.
또한, "화학치료제"의 정의에는 치료 항체, 예컨대 알렘투주마브(CAMPATH®), 베박시주마브(아바스틴(AVASTIN®), 제넨테크); 세툭시마브(에르비툭스(ERBITUX®), 임클론(Imclone)); 파니투무마브(벡티빅스(VECTIBIX®), 암젠(Amgen)), 리툭시마브(리툭산(RITUXAN®), 제넨테크/바이오겐 아이덱(Biogen Idec)), 퍼투주마브(옴니타그(OMNITARG™), 2C4, 제넨테크), 트라스투주마브(허셉틴(HERCEPTIN®), 제넨테크), 토시투모마브(베사르(BEXXAR®), 코릭시아(Corixia), 글락소스미쓰클라인(GlaxoSmithKline))이 포함된다.
본 발명의 화학식 I의 화합물과 함께 화학치료제로 치료 잠재력이 있는 인간화된 단클론 항체로는, 알렘투주마브, 아폴리주마브, 아셀리주마브, 아틀리주마브, 바피뉴주마브, 베박시주마브, 비바투주마브 머탄신, 칸투주마브 머탄신, 세델리주마브, 세르톨리주마브 페골, 시드푸시투주마브, 시드투주마브, 다클리주마브, 에큘리주마브, 에팔리주마브, 에프라투주마브, 에를리주마브, 펠비주마브, 폰톨리주마브, 젬투주마브 오조가미신, 이노투주마브 오조가미신, 이필리무마브, 라베투주마브, 레브리키주마브, 린투주마브, 마투주마브, 메폴리주마브, 모타비주마브, 모토비주마브, 나탈리주마브, 니모투주마브, 놀로비주마브, 누마비주마브, 오클레리주마브, 오마리주마브, 팔리비주마브, 파스콜리주마브, 펙푸시투주마브, 펙투주마브, 퍼투주마브, 펙셀리주마브, 랄리비주마브, 라니비주마브, 레슬리비주마브, 레슬리주마브, 레시비주마브, 로벨리주마브, 루플리주마브, 시브로투주마브, 시플리주마브, 손투주마브, 타카투주마브 테트락세탄, 타도시주마브, 탈리주마브, 테피바주마브, 토실리주마브, 토랄리주마브, 트라스투주마브, 투코투주마브 셀모류킨, 투쿠시투주마브, 우마비주마브, 우르톡사주마브 및 비실리주마브를 포함한다.
"대사물질"은 특정 화합물 또는 이의 염이 몸에서 대사를 통해 생산된 산물이다. 화합물의 대사물질은 당업계에 알려진 통상적인 기술을 사용하여 동정될 수 있고 그 활성은 본 명세서에 기재된 것들과 같은 시험을 사용하여 측정될 수 있다. 이러한 산물은 투여된 화합물의, 예를 들어 산화, 환원, 가수분해, 아마이드화, 디아마이드화, 에스테르화, 디에스테르화, 효소적 절단 등으로 인해 생길 수 있다. 따라서, 본 발명은 본 발명의 화합물을 이의 대사산물을 산출하기에 충분한 시간 동안 포유 동물과 접촉시키는 단계를 포함하는 방법에 의해 생성되는 화합물을 포함하는 본 발명의 화합물의 대사물질을 포함한다.
"패키지 동봉물(package insert)"이라는 용어는 상업적 치료 제품 패키지에 통상적으로 포함된 설명서를 지칭하기 위해 사용되며 상기 치료 제품의 사용에 관한 지시, 용법, 투약량, 투여, 금기 및/또는 경고에 대한 정보를 포함한다.
"키랄"이라는 용어는 거울상 파트너의 비중첩성을 나타내는 분자를 의미하는 반면, "비키랄(achiral)"이라는 용어는 거울상 파트너에 중첩할 수 있는 분자를 의미한다.
"입체 이성질체"라는 용어는 화학적 구성은 동일하지만 원자 또는 기의 공간 배열에서 상이한 화합물을 의미한다.
"부분입체 이성질체"라는 용어는 2 이상의 키랄성 중심을 보유하고 분자가 서로 거울상이 아닌 입체 이성질체를 의미한다. 부분입체 이성질체는 물성, 예컨대 융점, 비등점, 분광 성질 및 반응성이 다르다. 부분입체 이성질체의 혼합물은 전기영동 및 크로마토그래피와 같은 고해상능 분석 절차로 분리할 수 있다.
"거울상 이성질체"는 서로 비중첩성 거울상인 화합물의 2종의 입체 이성질체를 의미한다.
본원에 사용된 입체화학적 정의와 관례는 일반적으로 문헌[S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; and Eliel, E. and Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Chemicals", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994]을 따른다. 본 발명의 화합물은 비대칭 또는 키랄 중심을 함유할 수 있고, 따라서 상이한 입체 이성질체 형태로 존재한다. 본 발명의 화합물의 모든 입체 이성질체 형태, 예컨대 비제한적으로 부분입체 이성질체, 거울상 이성질체 및 아트로프 이성질체뿐만 아니라 이들의 혼합물, 예컨대 라세미 혼합물도 본 발명의 일부를 구성한다. 많은 유기 화합물은 광학적 활성 형태로 존재하며, 즉 평면-편광의 평면을 회전시키는 능력을 나타낸다. 광학적 활성 화합물을 나타내는데 있어서, 접두사 D 및 L, 또는 R 및 S는 키랄 중심(들)에 대한 분자의 절대 배열을 의미한다. 접두사 d 및 l, 또는 (+) 및 (-)는 화합물에 의한 평면-편광의 회전 기호를 나타내는데 사용되고, (-) 또는 l은 화합물이 좌선성임을 의미한다. (+) 또는 d 접두어가 있는 화합물은 우선성이다. 주어진 화학 구조에서, 이 입체 이성질체는 동일하지만, 단 서로 거울상이다. 특정 입체 이성질체는 거울상 이성질체라 불릴 수 있고, 이러한 이성질체의 혼합물은 종종 거울상 이성질체 혼합물이라 불린다. 거울상 이성질체의 50:50 혼합물은 라세미 혼합물 또는 라세메이트라 불리며, 화학 반응 또는 과정에서 입체선택 또는 입체특이성이 전혀 없는 경우 나타날 수 있다. "라세미 혼합물" 및 "라세메이트"라는 용어는 광학 활성이 없는 2종의 거울상 이성질체의 등몰(equimolar) 혼합물을 의미한다. 거울상 이성질체는 초 임계 유체 크로마토그래피(SFC)와 같은 키랄 분리 방법에 의해 라세미 혼합물로부터 분리될 수 있다.　 분리된 거울상 이성질체의 키랄 중심에서의 구조 배치는 임시적이며 표 1의 구조로 예시될 수 있지만, 입체화학 결정은 예컨대 x-선 결정학적 데이터를 기다린다.
"호변 이성질체" 또는 "호변 이성질체 형태"라는 용어는 낮은 에너지 장벽을 통해 상호변환할 수 있는 에너지가 다른 구조 이성질체를 의미한다. 예를 들어, 광자 호변 이성질체(또한, 양성자성 호변 이성질체로도 알려져 있음)는 광자의 이동을 통한 상호변환, 예컨대 케토-에놀 및 이민-엔아민 이성질체화를 포함한다. 원자가 호변 이성질체로는 결합 전자 중 일부 전자의 재편성에 의한 상호전환을 포함한다.
"약학적으로 허용가능한 염"이라는 용어는 생물학적으로 또는 달리 바람직하지 않은 것이 아닌 염을 의미한다.　 약학적으로 허용 가능한 염은 산 부가 염 및 염기 부가 염을 모두 포함한다. "약학적으로 허용가능한"이라는 표현은 물질 또는 조성물이 제형을 포함하는 다른 성분 및/또는 그것으로 처리되는 포유 동물과 화학적 및/또는 독성학적으로 상용성이어야만 한다는 것을 나타낸다.
"약학적으로 허용가능한 산 부가 염"이라는 용어는 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 탄산, 인산 등과 같은 무기 산, 및 폼산, 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 글루콘산, 락트산, 피루브산, 옥살산, 말산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 아스파르트산, 아스코브산, 글루탐산, 안트라닐산, 벤조산, 신남산, 만델산, 엠본산, 페닐아세트산, 메탄설폰산 "메실레이트", 에탄설폰산, p-톨루엔설폰산 및 살리실산 등과 같은 유기 산의 지방족, 지환족, 방향족, 방향지방족, 헤테로사이클릭, 카복실 및 설폰산 류로부터 선택되는 유기 산으로 형성된 약학적으로 허용가능한 염을 가리킨다.
"약학적으로 허용가능한 염기 부가 염"이라는 용어는 유기 또는 무기 염기로 형성된 약학적으로 허용가능한 염을 가리킨다. 허용가능한 무기 염기의 예로는 나트륨, 칼륨, 암모늄, 마그네슘, 철, 아연, 구리, 망간 및 알루미늄 염을 포함한다. 약학적으로 허용가능한 유기 비독성 염기로부터 유도되는 염으로는 1급, 2급 및 3급 아민, 치환된 아민 예를 들어 천연의 치환된 아민, 환형 아민 및 염기성 이온 교환 수지 예컨대 아이소프로필아민, 트라이메틸아민, 다이에틸아민, 트라이에틸아민, 트라이프로필아민, 에탄올아민, 2-다이에틸아미노에탄올, 트라이메타민, 다이사이클로헥실아민, 리신, 아르기닌, 히스티딘, 카페인, 프로카인, 하이드라바민, 콜린, 베타인, 에틸렌다이아민, 글루코사민, 메틸글루카민, 티오브로민, 푸린, 피페리진, 피페리딘, N-에틸피페리딘 및 폴리아민 수지를 포함한다.
"용매화물"이란 하나 이상의 용매 분자와 본 발명의 화합물의 회합체 또는 착체를 의미한다. 용매화물을 형성하는 용매의 예는 비제한적으로, 물, 이소프로판올, 에탄올, 메탄올, DMSO, 에틸아세테이트, 아세트산 및 에탄올아민을 포함한다.
용어 "EC50"은 50% 최대 유효 농도이고 생체 내에서 특정 효과의 최대의 50%를 얻는 데 필요한 특정 화합물의 혈장 농도를 나타낸다.
용어 "Ki"는 억제 상수이고 수용체에 대한 특정 억제제의 절대 결합 친화도를 나타낸다.　 이는 경쟁 결합 분석을 사용하여 측정하고, 경쟁 리간드(예컨대, 방사성 리간드)가 존재하지 않는 경우, 특정 억제제가 수용체의 50%를 차지하게 되는 농도와 같다.　 Ki 값은 pKi 값(-log Ki)으로 대수적으로 변환시킬 수 있으며, 이 경우 높은 값은 기하급수적으로 더 큰 효능을 나타낸다.
용어 "IC50"은 50% 최대 억제 농도이고 시험관 내 생물학적 과정의 50% 억제율을 얻는 데 필요한 특정 화합물의 농도를 나타낸다.　 IC50　값은 pIC50 값(-log IC50)으로 대수적으로 변환할 수 있으며, 이 경우 높은 값은 기하급수적으로 더 큰 효능을 나타낸다. IC50　값은 절대값은 아니지만 사용되는 농도와 같은 실험 조건에 의존하고 쳉-프루소프(Cheng-Prusoff) 방정식(문헌[Biochem. Pharmacol. (1973) 22:3099])을 이용하여 절대 억제 상수(Ki)로 변환될 수 있다.
"본 발명의 화합물" 및 "화학식 I의 화합물"이라는 용어는 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체, 기하 이성질체, 호변 이성질체, 용매화물, 대사물질 및 약학적으로 허용가능한 염 및 전구 약물을 포함한다.
또한, 본원에 기재된 임의의 화학식은 수화물, 용매화물 및 이들의 화합물의다형체(polymorph), 및 이들 혼합물을 나타내도록 의도된다.
또한, 본원에 주어진 임의의 화학식 또는 구조(화학식 I의 화합물 포함)는 화합물의 동위 원소로 표지된 형태뿐만 아니라 미표지된 형태를 나타내도록 의도된다. 동위 원소로 표지된 화합물은, 하나 이상의 원자가 선택된 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 대체되는 것을 제외하고 본원에 주어진 화학식으로 묘사된 구조를 갖는다. 본 발명의 화합물에 혼입될 수 있는 동위 원소의 예는 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 불소, 및 염소의 동위 원소, 예컨대 2H(중수소), 3H(삼중수소), 11C, 13C, 14C, 15N, 31P, 32P, 35S, 36Cl 및 125I 각각을 포함한다. 본 발명의 다양한 동위 원소로 표지된 화합물은 방사성 동위원소, 예컨대 3H, 13C 및 14C가 혼입된 화합물을 포함한다. 이러한 동위 원소로 표지된 화합물은 대사 연구, 반응 속도 연구, 검출 또는 영상 기술, 예컨대 약물 또는 기질 조직 분배 어세이를 비롯한 양전자 방출 단층 촬영술(PET) 또는 단일광자 단층 촬영(SPECT), 또는 환자의 방사성 치료에 유용하다. 중수소 표지 또는 치환된 본 발명의 치료 화합물은 분포, 대사 및 배설(ADME)과 관련된 개선된 DMPK(약물 대사 및 약동학) 특성을 가질 수 있다. 중수소와 같은 무거운 동위 원소를 갖는 치환체는 예를 들어 증가된 생체 내 반감기 또는 감소된 투여량 요건과 같은 보다 큰 대사 안정성으로 인한 특정 치료 이점을 제공할 수 있다. 특히, 18F 또는 표지된 화합물은 PET 또는 SPECT 연구에 특히 바람직할 수 있다. 본 발명의 동위 원소 표지 화합물 및 이의 전구 약물은 일반적으로 하기에 기재된 비 동위 원소 표지된 시약을 용이하게 수득가능한 동위 원소 표지된 시약으로 대체하여 반응식 또는 실시예 및 제조예에 개시된 절차를 수행함으로써 제조될 수 있다. 또한, 무거운 동위 원소, 특히 중수소(예컨대, 2H 또는 D)를 갖는 치환체는 증가된 생체 내 반감기, 감소된 투여량 요건 또는 치료 지수의 향상과 같은 보다 큰 대사 안정성으로 인한 생성된 특정한 치료 이점을 제공할 수 있다. 여기서 중수소가 화학식 I의 화합물의 치환체로서 고려된다는 것이 이해될 것이다. 무거운 동위 원소, 구체적으로 중수소의 농도는 동위 원소 풍부 인자(isotopic enrichment factor)로 정의될 수 있다. 본 발명의 화합물에서, 특정한 동위 원소로 구체적으로 지칭되지 않은 임의의 원자는 상기 원자의 임의의 안정한 동위 원소를 의미한다. 달리 기재되지 않으면, 위치가 "H" 또는 "수소"로서 구체적으로 지칭될 때, 그 위치는 자연 존재 동위 원소 조성에서 수소를 갖는 것으로 이해된다. 따라서, 본 발명의 화합물에서, 중수소(D)로서 구체적으로 지칭된 임의의 원소는, 예컨대 상기에 주어진 범위에서의 중수소를 나타낸다.
피라졸 -4-일- 헤테로사이클릴 - 카복사마이드 화합물
본 발명은 Pim 키나아제에 의해 조절되는 질환, 증상 및/또는 장애의 치료에 잠재적으로 유용한, 하기 화학식 I의 피라졸-4-일-헤테로사이클릴-카복사마이드 화합물(화학식 Ia 내지 Ii 포함) 및 이의 입체 이성질체, 기하 이성질체, 호변 이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다.
화학식 I의 화합물은 하기 구조를 갖는다:
[화학식 I]
Figure pct00004
상기 식에서,
R1은 H, C1-C12 알킬, C2-C12 알켄일, C2-C12 알킨일, C6-C20 아릴, C3-C12 카보사이클릴, C2-C20 헤테로사이클릴, C1-C20 헤테로아릴 및 -(C1-C12 알킬렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴)이고;
R2는 하기 구조들로부터 선택되고:
Figure pct00005
(이때, 물결 선은 부착 부위를 나타내고, 점선은 임의적인 이중 결합을 나타낸다);
R3은 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH2NH2, -CH2NHCH3, -CH2CH2NH2, -CH2CHCH2NH2, -CH2CH(CH3)NH2, -CH2OH, -CH2CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH(OH)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH2OH, -CH2CH2SO2CH3, -CN, -CF3, -CO2H, -COCH3, -CO2CH3, -CO2C(CH3)3, -COCH(OH)CH3, COCH2NH2, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -S(O)2N(CH3)2, -SCH3, -CH2OCH3, -S(O)2CH3, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸로부터 선택되고;
R4는 F, Cl, Br, I, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH2CH(CH3)2, -CH=CH2, -CH=C(CH3)2, =CH2, -CH2F, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2NH2, -CH2NHCH3, -CH2CH2NH2, -CH2CHCH2NH2, -CH2CH(CH3)NH2, -CH2OH, -CH2CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH(OH)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH2OH, -CH2CH2SO2CH3, -CN, -CO2H, -COCH3, -COCH2NH2, -CO2CH3, -CO2C(CH3)3, -COCH(OH)CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -NO2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CHF2, -NHCH2CF3, -NHCH2CH2OH, -NHCOCH3, -N(CH3)COCH3, -NHC(O)OCH2CH3, -NHC(O)OCH2Cl3, -NHC(O)OC6H5, -NHS(O)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3, =O, -OH, -OCH3, -OCHF2, -OCH2F, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCH2CH(CH3)2, -OC(CH3)3, -S(O)2N(CH3)2, -SCH3, -CH2OCH3, -S(O)2CH3, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 아제티딘일, 아제판일, 옥세탄일, 옥세탄-3-일메틸아미노, (3-메틸옥세탄-3-일)메틸아미노, 피롤리딘일, 피페라진일, 피페리딘일, (피페리딘-4-일에틸), 피란일, (피페리딘-4-일메틸), 모폴리노메틸, 및 모폴리노로부터 독립적으로 선택되거나; 또는
2개의 같은 자리 R4 기는, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 피롤리딘일, 아제티딘일, 아제판일, 옥세탄일, 피롤리딘일, 피페라진일 또는 피페리딘일 고리로부터 선택되는 스피로 고리를 형성하고, 이때 스피로 고리는 -F, -OH, =O, -CH3, -NH2, -CH2F, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2NH2 및 -CF3로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 임의적으로 치환되거나; 또는
2개의 이웃자리 R4 기들 또는 R4 기와 R3 기는 5원 또는 6원 헤테로사이클릴 융합 고리를 형성하고, 이때 헤테로사이클릴 융합 고리는 -F, -OH, =O, -CH3, -NH2, -CH2F, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2NH2 및 -CF3로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 임의적으로 치환되고;
n은 0, 1, 2 또는 3이고;
X는 하기 구조로부터 선택되고:
Figure pct00006
(이때, 물결선은 부착 부위를 나타낸다);
R5는 H, Cl, Br, C1-C12 알킬, -(C1-C12 알킬렌)-(C3-C12 카보사이클릴), -(C1-C12 알킬렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴), -(C2-C8 알케닐렌)-(C3-C12 카보사이클릴), -(C2-C8 알케닐렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴), C6-C20 아릴, -(C6-C20 아릴렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴), -(C6-C20 아릴렌)-(C1-C12 알킬렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴), C3-C12 카보사이클릴, C2-C20 헤테로사이클릴, 및 C1-C20 헤테로아릴로부터 선택되고;
이때, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬렌, 카보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 및 헤테로아릴은 F, Cl, Br, I, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH2NH2, -CH2CH2NH2, -CH2CHCH2NH2, -CH2CH(CH3)NH2, -CH2OH, -CH2CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH(OH)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH2OH, -CH2CH2SO2CH3, -CN, -CF3, -CO2H, -COCH3, -CO2CH3, -CO2C(CH3)3, -COCH(OH)CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -NO2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -N(CH3)COCH3, -NHS(O)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3, =O, -OH, -OCH3, -S(O)2N(CH3)2, -SCH3, -CH2OCH3, -S(O)2CH3, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 아제티딜, 아제파닐, 옥세타닐, 피롤리디닐, 피페라지닐, 피페리디닐, (피페리딘-4-일)에틸), 피라닐, (피페리딘-4-일메틸), 모폴리노메틸, 및 모폴리노로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 기로 임의적으로 치환되고;
R6은 독립적으로 H 또는 -NH2이다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 R1이 H, C1-C12 알킬 예컨대 -CH3, -CH2CH3, -CH2CHF2 및 -CH2CF3, C3-C12 카보사이클릴, 또는 -(C1-C12 알킬렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴) 예컨대 옥세탄-3-일메틸인 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 R1이 H인 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 R1이 C1-C12 알킬 또는 C3-C12 카보사이클릴인 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 R1이 -CH3, -CH2CH3, -CH2CHF2 및 -CH2CF3으로부터 선택되는 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 R1이 -(C1-C12 알킬렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴)인 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 R1이 옥세탄-3-일메틸인 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 R3이 H 또는 -CH3인 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 R4가 F, Cl, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CF3, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CHF2, -NHCH2CF3, -CH2NHCH3, 및 -OCH3으로부터 선택되고, n이 1, 2 또는 3인 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 n이 1 또는 2인 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 R5가 C6-C20 아릴 예컨대 하나 이상의 F, 특히 1개 또는 2개의 F로 치환된 페닐인 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 R6이 -NH2인 화합물을 포함한다.
화학식 I의 화합물의 예시적 실시양태는 하기 화학식 Ia 내지 Ii의 구조를 포함한다:
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생물학적 평가
화학식 I의 화합물의 Pim 키나아제 활성은 많은 직접 및 간접 검출 방법으로 측정가능하다. 본원에 기재된 특정의 예시적 화합물을 이의 Pim 키나아제(이소형태 Pim-1, Pim-2, 및 Pim-3 포함) 결합 활성(실시예 901) 및 종양 세포에 대한 시험관 내 활성(실시예 902)에 대해 분석하였다. 본원에 기재된 특정의 예시적 화합물은 약 1 마이크로몰(μM) 미만의 Pim 결합 활성 IC50 값을 가졌다. 본원에 기재된 특정의 예시적 화합물은 약 1 마이크로몰(μM) 미만의 종양 세포-기반 활성 EC50 값을 가졌다. 실시예 901 및 902에 기재된 분석에서 1 μM 미만의 Ki/IC50/EC50을 갖는 화학식 I의 화합물은 Pim 키나아제(Pim-1, Pim-2 및/또는 Pim-3) 억제제로서 치료적으로 유용할 수 있다.
표 1a 및 표 1b의 예시적인 화학식 I의 화합물은 본 발명의 방법에 따라 제조되고 동정되고 Pim 키나아제의 억제에 대해 시험되었으며, 하기의 구조 및 상응하는 명칭(매사추세츠주 캠브릿지 소재의 캠브릿지소프트 코포레이션(CambridgeSoft Corp.)의 켐바이오드로 울트라(ChemBioDraw Ultra), 버전 11.0)를 가진다. 표 1a 및 1b의 키랄 원자를 갖는 몇몇 화합물은 입체화학으로 완전히 특성화되지 않았다. 　입체화학 또는 다른 기와의 입체화학적 관계는 구조에 임시 배정하여 나타내었다. 입체 이성질체의 분리 수단 및 특성화 데이터는 실시예에 나타내었다.
[표 1a]
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[표 1b]
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본 발명은 화학식 I의 화합물, 및/또는 이의 용매화물, 수화물 및/또는 염, 및 담체(약학적으로 허용가능한 담체)를 포함하는 조성물(예컨대, 약학 조성물)을 포함한다. 본 발명은 또한, 화학식 I의 화합물 및/또는 이의 용매화물, 수화물 및/또는 염, 및 담체(약학적으로 허용가능한 담체)를 포함하고, 제 2 화학치료제(예컨대 본원에 기재된 것들)을 추가로 포함하는 조성물(예컨대, 약학 조성물)을 포함한다. 본 조성물은 포유 동물(예컨대, 인간)에서의 비정상적 세포 성장의 억제 또는 고증식성 장애, 예컨대 암의 치료에 유용하다. 예컨대, 본 화합물 및 조성물은 포유 동물(예컨대, 인간)에서의 다발성 골수종, 림프종, 급성 골수성 백혈병, 전립선암, 유방암, 간세포 암종, 췌장암, 및/또는 결장직장 암의 치료에 유용하다.
본 발명은, 포유 동물(예컨대, 인간)에게 치료 효과량의 화학식 I의 화합물, 및/또는 이의 용매화물, 수화물 및/또는 염, 또는 이의 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 포유 동물(예컨대, 인간)에서의 비정상적 세포 성장의 억제 또는 고증식성 장애, 예컨대 암의 치료 방법을 포함한다. 예컨대, 본 발명은, 포유 동물(예컨대, 인간)에게 치료 효과량의 화학식 I의 화합물, 및/또는 이의 용매화물, 수화물 및/또는 염) 또는 이의 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 포유 동물(예컨대, 인간)에서의 다발성 골수종, 림프종, 급성 골수성 백혈병, 전립선암, 유방암, 간세포 암종, 췌장암, 및/또는 결장직장 암의 치료 방법을 포함한다.
본 발명은, 포유 동물(예컨대, 인간)에게 치료 효과량의 화학식 I의 화합물, 및/또는 이의 용매화물, 수화물 및/또는 염, 또는 이의 조성물을, 제 2 화학치료제, 예컨대 본원에 기재된 것들과 함께 투여하는 것을 포함하는, 포유 동물(예컨대, 인간)에서의 비정상적 세포 성장의 억제 또는 고증식성 장애, 예컨대 암의 치료 방법을 포함한다. 예컨대, 본 발명은, 포유 동물(예컨대, 인간)에게 치료 효과량의 화학식 I의 화합물, 및/또는 이의 용매화물, 수화물 및/또는 염, 또는 이의 조성물을, 제 2 화학치료제, 예컨대 본원에 기재된 것들과 함께 투여하는 것을 포함하는, 포유 동물(예컨대, 인간)에서의 다발성 골수종, 림프종, 급성 골수성 백혈병, 전립선암, 유방암, 간세포 암종, 췌장암, 및/또는 결장직장 암의 치료 방법을 포함한다.
본 발명은, 포유 동물(예컨대, 인간)에게 치료 효과량의 화학식 I의 화합물, 및/또는 이의 용매화물, 수화물 및/또는 염, 또는 이의 조성물을 단독으로, 또는 제 2 화학치료제 예컨대 항-B-세포 항체 치료제(예컨대, 리툭산 및/또는 다세투주맙), 젬시타빈, 코티코스테로이드(예컨대, 프레드니솔론 및/또는 덱사메타손), 화학치료 칵테일(예컨대, CHOP(사이클로포스파마이드, 독소루비신, 빈크리스틴, 프레드니솔론) 및/또는 ICE(이스포스파마이드, 사이톡산, 에토포사이드)), 생물학제 및 화학치료제의 조합(예컨대, 리툭산-ICE, 다세투주맙-리툭산-ICE, R-Gem, 및/또는 D-R-Gem), Akt 억제제, PI3K 억제제(예컨대, GDC-0941(제넨테크) 및/또는 GDC-0980(제넨테크)), 라파마이신, 라파마이신 유사체, mTOR 억제제 예컨대 에베로리무스 또는시롤리무스, MEK 억제제(GDC-0973) 및 Bcl-2 억제제(ABT-263 또는 ABT-199)와 함께 투여하는 것을 포함하는, 포유 동물(예컨대, 인간)에서의 림프종의 치료 방법을 포함한다.
본 발명은, 포유 동물(예컨대, 인간)에게 치료 효과량의 화학식 I의 화합물, 및/또는 이의 용매화물, 수화물 및/또는 염, 또는 이의 조성물을 단독으로, 또는 제 2 화학치료제, 예컨대 멜팔란, "이미즈(Imids)"(면역-조절제, 예컨대 탈리도마이드, 레날리도마이드, 및/또는 포몰리다마이드), 코티코스테로이드(예컨대, 덱사메타손 및/또는 프레드니솔론), 및 보테조미브 또는 기타 프로테아좀(proteasome) 억제제와 함께 투여하는 것을 포함하는, 포유 동물(예컨대, 인간)에서의 다발성 골수종의 치료 방법을 포함한다.
본 발명은, 포유 동물(예컨대, 인간)에게 치료 효과량의 화학식 I의 화합물, 및/또는 이의 용매화물, 수화물 및/또는 염, 또는 이의 조성물을 단독으로, 또는 제 2 화학치료제,예컨대 사이타라빈(araC), 안트라사이클린(예컨대, 다우노루비신 및/또는 이다루비신), 항골수성 항체 치료제(예컨대, SGN-33), 항골수성 항체-약물 접합체(예컨대, 마일로타그(등록상표))와 함께 투여하는 것을 포함하는, 포유 동물(예컨대, 인간)에서의 다발성 골수종, 만성 림프구성 백혈병(CLL), 또는 급성 골수성 백혈병(AML)의 치료 방법을 포함한다.
본 발명은, 포유 동물(예컨대, 인간)에게 치료 효과량의 화학식 I의 화합물, 및/또는 이의 용매화물, 수화물 및/또는 염, 또는 이의 조성물을 단독으로, 또는 제 2 화학치료제, 예컨대 플루다라빈, 사이클로포스파마이드, 항 B 세포 항체 치료제(예컨대, 리툭산 및/또는 다세투주맙)와 함께 투여하는 것을 포함하는, 포유 동물(예컨대, 인간)에서의 만성 림프구성 백혈병(CLL)의 치료 방법을 포함한다.
본 발명은, 포유 동물(예컨대, 인간)에게 치료 효과량의 화학식 I의 화합물, 및/또는 이의 용매화물, 수화물 및/또는 염, 또는 이의 조성물을 단독으로, 또는 제 2 화학치료제, 예컨대 BCR-abl 억제제(예컨대, 이마티니브, 닐로티니브, 및/또는 다사티니브)와 함께 투여하는 것을 포함하는, 포유 동물(예컨대, 인간)에서의 만성 골수성 백혈병(CML)의 치료 방법을 포함한다.
본 발명은, 포유 동물(예컨대, 인간)에게 치료 효과량의 화학식 I의 화합물, 및/또는 이의 용매화물, 수화물 및/또는 염, 또는 이의 조성물을 단독으로 또는 조합으로 투여하는 것을 포함하는, 포유 동물(예컨대, 인간)에서의 골수형성이상 질환(MDS) 및 진성 적혈구증가증(PV), 본태성 혈소판증가증(ET) 또는 골수섬유증(MF)을 비롯한 골수 증식 질환의 치료 방법을 포함한다.
본 발명은 본 화합물을 포유 동물 세포, 유기체 또는 연관된 병리학적 증상의 시험관 내, 동일 반응계 내 및 생체 내 진단 또는 치료에 사용하는 방법을 포함한다.
본 발명의 화합물(이하, "활성 화합물(들)")의 투여는 화합물을 작용 부위로 전달할 수 있는 임의의 방법으로 수행할 수 있다. 이들 방법은 경구 경로, 십이지장내 경로, 비경구 주사(정맥내, 피하, 근육내, 혈관내 또는 주입), 국소, 흡입 및 직장 투여를 포함한다.
투여되는 활성 화합물의 양은 치료되는 대상, 질환 또는 상태의 중증도, 투여 속도, 화합물의 특성 및 처방 전문의의 판단에 따라 좌우될 것이다. 그러나, 유효 투여량은 하루에 체중 1kg 당 약 0.001 내지 약 100mg의 범위, 바람직하게는 약 1 내지 약 35mg/kg/일의 범위이며, 단일 또는 분할 투여된다. 70kg 인간의 경우, 이는 약 0.05 내지 7g/일, 바람직하게는 약 0.05 내지 약 2.5g/일 범위의 양일 것이다. 몇몇 경우에, 상기된 범위의 하한보다 낮은 투여량 수준이 보다 적합할 수 있는 반면, 다른 경우에는 훨씬 더 많은 투여량이 임의의 유해한 부작용을 유발하지 않고 사용될 수 있으되, 이러한 많은 투여량은 우선 하루에 걸쳐 투여하기 위해 여러 작은 투여량으로 분할된다.
활성 화합물은 단독 요법으로 적용되거나, 또는 하나 이상의 화학치료제, 예를 들어 본 명세서에 기재된 것들과 함께 적용될 수 있다. 이러한 공동 치료는 개별 치료 성분을 동시에, 순차적으로 또는 별도로 투여함으로써 달성될 수 있다.
약학적 조성물은 예를 들어 정제, 캡슐제, 환제, 분말제, 지속형 제제, 용액, 현탁액과 같이 경구 투여에 적합한 형태이거나, 멸균 용액, 현탁액 또는 에멀젼과 같이 비경구 주사에 적합한 형태이거나, 연고 또는 크림과 같이 국소 투여에 적합한 형태이거나, 또는 좌제와 같이 직장 투여에 적합한 형태일 수 있다. 약학적 조성물은 정확한 투여량의 단일 투여에 적합한 단위 투여 형태일 수 있다. 약학적 조성물은 통상의 약학적 담체 또는 부형제, 및 활성 성분으로서의 본 발명에 따른 화합물을 포함할 것이다. 덧붙여, 이는 다른 의약 또는 약학적 작용제, 담체, 보조제 등을 포함할 수 있다.
예시적인 비경구 투여 형태는 멸균 수용액, 예를 들어 수성 프로필렌 글리콜 또는 덱스트로스 용액에서 활성 화합물의 용액 또는 현탁액을 포함한다. 원한다면, 이러한 투여 형태는 적합하게 완충될 수 있다.
적합한 약학적 담체는 불활성 희석제 또는 충전제, 물 및 다양한 유기 용매를 포함한다. 필요한 경우, 약학적 조성물은 추가의 성분, 예를 들어 향미제, 결합제, 부형제 등을 함유할 수 있다. 그러므로, 경구 투여의 경우에 다양한 부형제, 예를 들어 시트르산을 함유하는 정제가 다양한 붕해제, 예를 들어 전분, 알긴산 및 특정 착물 실리케이트 및 결합제, 예를 들어 수크로스, 젤라틴 및 아카시아와 함께 사용될 수 있다. 추가로, 윤활제, 예를 들어 스테아르산마그네슘, 나트륨 라우릴 설페이트 및 활석은 흔히 정제화 목적에 유용하다. 유사한 유형의 고체 조성물이 또한 연질 및 경질 충전된 젤라틴 캡슐로 사용될 수 있다. 따라서, 바람직한 물질은 락토스 또는 유당, 및 고분자량 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 수성 현탁액 또는 엘릭시르제가 경구 투여에 바람직한 경우, 그 안의 활성 화합물은 다양한 감미제 또는 향미제, 착색 물질 또는 염료 및 필요에 따라 에멀젼화제 또는 현탁화제 및 희석제, 예를 들어 물, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 글리세린, 또는 이들의 조합물과 합해질 수 있다.
특정 양의 활성 화합물을 갖는 다양한 약학적 조성물을 제조하는 방법은 공지되어 있거나 당업자에게 명백할 것이다. 예를 들어, 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Ester, Pa., 15th Edition(1975)]을 참조한다.
화학식 I의 화합물의 투여
본 발명의 화학식 I의 화합물은 치료해야 하는 증상에 적합한 임의의 경로로 투여될 수 있다. 적당한 경로로는 경구, 비경구(예컨대, 피하, 근육내, 정맥내, 동맥내, 피내, 경막내 및 경막외), 경피, 직장, 비측, 국부(예컨대, 협측 및 설하), 질, 복강내, 폐내 및 비내 투여를 포함한다. 국소 면역억제 치료에서, 화합물은 병변 내 투여로 투여할 수 있으며, 예컨대 관류 또는 이식 전에 억제제와 이식편을 접촉시켜 투여할 수 있다. 바람직한 경로는 수혜자의 증상 등에 따라 달라질 수 있음을 알 수 있을 것이다. 화합물이 경구 투여되는 경우에는 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제와 함께 환제, 캡슐, 정제 등으로 제형화될 수 있다. 화합물이 비경구 투여되는 경우에는 약학적으로 허용가능한 비경구 부형제와 함께 이하에 기술되는 단위 투약 주사성 형태로 제형화할 수 있다.
인간 환자를 치료하는 투여량은 화학식 I의 화합물 약 10mg 내지 약 1000mg의 범위일 수 있다. 일반적인 투여량은 화합물 약 100mg 내지 약 300mg일 수 있다. 투여량은 특정 화합물의 흡수, 분포, 대사 및 배출을 비롯한 약동학 및 약력학적 성질에 따라 1일 1회(QID), 1일 2회(BID), 또는 더 자주 투여할 수 있다. 또한, 독성 인자는 투약량 및 투여 섭생에 영향을 미칠 수 있다. 또한, 경구 투여될 때, 환제, 캡슐 또는 정제는 특정 시간 기간 동안 매일 또는 더 드물게 투여될 수도 있다. 섭생은 다양한 치료 사이클로 반복될 수 있다.
화학식 I의 화합물에 의한 치료 방법
본 발명의 화합물은 Pim 키나아제, 예컨대, Pim-1, Pim-2, 및 Pim-3 키나아제의 과발현의 특징을 갖는 것들을 비제한적으로 포함하는 과증식성 질환, 증상 및/또는 장애의 치료에 유용하다. 따라서, 본 발명의 또 다른 양태는 Pim 키나아제의 억제에 의해 치료 또는 예방될 수 있는 질환 또는 증상의 치료 또는 예방 방법을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 상기 방법은 치료 또는 예방이 필요한 포유 동물에게 치료 효과량의 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체, 기하 이성질체, 호변 이성질체, 또는 약학적으로 허용가능한 염을 투여하는 것을 포함한다. 하나의 실시양태에서, 인간 환자는 화학식 I의 화합물 및 약학적으로 허용가능한 담체, 보조제 또는 비히클로 치료되며, 이때 상기 화학식 I의 화합물은 Pim 키나아제 활성을 검출가능하게 억제하는 양으로 존재한다.
본 발명의 방법에 따라 치료될 수 있는 암은, 유방암, 난소암, 자궁경부암, 전립선암, 고환암, 비뇨생식관 암, 식도암, 후두암, 교모세포종, 신경아세포종, 위암, 피부암, 각질가시세포종, 폐암, 표피 암종, 대세포 암종, 비소세포성 폐암종(NSCLC), 소세포 암종, 폐 선암종, 골암, 결장암, 선종, 췌장암, 선암종, 갑상선 암, 여포 암종, 미분화암종, 유두 암종, 정상피종, 악성 흑색종, 육종, 방광 암종, 간 암종 및 담도암, 신장 암종, 골수 장애, 림프종, 모발세포암, 협강 및 인두(구강)암, 구순암, 설암, 입암, 인두암, 소장암, 결장-직장암, 대장암, 직장암, 뇌암 및 중추신경계 종양, 호지킨병, 백혈병을 포함하지만, 이로 한정되지는 않는다.
본 발명의 또 다른 양태는 전술된 질환 또는 증상을 겪는 포유 동물, 예컨대 인간에서의 전술된 질환 또는 증상의 치료에서 사용하기 위한 본 발명의 화합물을 제공한다. 또한, 전술된 장애를 겪는 온혈 동물, 예컨대 인간에서의 전술된 질환 또는 증상 치료용 약제의 제조에서의 본 발명의 화합물의 용도를 제공한다.
약학 제형
인간을 비롯한 포유 동물의 치료에 화학식 I의 화합물을 사용하기 위해, 이는 일반적으로 약학 조성물로서의 표준 약학적 관례에 따라 제형화된다. 이러한 본 발명의 양태에 따르면, 본 발명의 화합물을 약학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체와 함께 포함하는 약학 조성물이 제공된다.
전형적인 제형은 본 발명의 화합물과 담체, 희석제 또는 부형제를 혼합하여 제조된다. 적당한 담체, 희석제 및 부형제는 당업자에게 공지되어 있고, 탄수화물, 왁스, 수용성 및/또는 팽윤성 중합체, 친수성 또는 소수성 물질, 젤라틴, 오일, 용매, 물 등과 같은 물질을 포함한다. 사용되는 특정 담체, 희석제 또는 부형제는 본 발명의 화합물이 적용되는 수단 및 목적에 따라 달라질 것이다. 용매는 일반적으로 포유 동물에게 투여하기에 안전한 것으로 당업자에게 인식된 용매(GRAS)를 기초로 하여 선택한다. 일반적으로, 안전한 용매는 물과 같은 비독성 수성 용매, 및 물에 용해성 또는 혼화성인 다른 비독성 용매이다. 적당한 수성 용매로는 물, 에탄올, 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜(예컨대, PEG400, PEG300) 등, 및 이의 혼합물을 포함한다. 또한, 제형은 완충액, 안정제, 계면활성제, 습윤제, 윤활제, 유화제, 현탁제, 보존제, 항산화제, 불투명화제, 활택제, 가공보조제, 착색제, 감미제, 향미제, 방향제 및 기타 약물(즉, 본 발명의 화합물 또는 이의 약학 조성물)의 우아한 외양을 제공하거나 약학적 산물(즉, 약제)의 제조를 돕는 기타 공지된 첨가제를 하나 이상 포함할 수 있다.
제형은 통상적인 용해 및 혼합 절차를 이용해 제조될 수 있다. 예컨대, 벌크 약물 물질(즉, 본 발명의 화합물 또는 이 화합물의 안정화된 형태(예컨대, 사이클로덱스트린 유도체 또는 다른 공지된 착제를 갖는 착물)은 전술한 하나 이상의 부형제의 존재 하에 적당한 용매에 용해된다. 본 발명의 화합물은 일반적으로 용이하게 조절가능한 약물 투약량을 제공하고 환자의 처방된 요법에 맞는 약학적 투약 형태로 제형화된다.
적용하기 위한 약학 조성물(또는 제형)은 약물 투여에 사용되는 방법에 따라 다양한 방식으로 포장될 수 있다. 일반적으로, 분배용 물품은 적당한 형태의 약학 조성물이 담겨 있는 용기를 포함한다. 적당한 용기는 당업자에게 공지되어 있고, 병(플라스틱 및 유리), 항낭, 앰플, 플라스틱 백, 금속 실린더 등과 같은 소재를 포함한다. 또한, 용기는 패키지의 내용물에 부주의한 접근을 방지하기 위해 손댐방지 어셈블리를 포함할 수도 있다. 또한, 용기는 용기의 내용물을 기재한 라벨이 부착된다. 또한, 상기 라벨은 적절한 경고를 포함한다.
본 발명의 화합물의 약학 조성물은 다양한 투여 경로 및 종류로 제조할 수 있다. 예컨대, 목적하는 순도를 갖는 화학식 I의 화합물을 경우에 따라 약학적으로 허용가능한 희석제, 담체, 부형제 또는 안정제와 혼합하여(문헌[Reminton's Pharmaceutical Sciences(1980) 16th edition, Osol, A. Ed.]) 동결건조 제형, 밀링된 분말 또는 수용액 형태로 제조할 수 있다. 상온에서 적당한 pH 및 바람직한 정도의 순도에서 생리적으로 허용가능한 담체, 즉 이용되는 투약량 및 농도에서 수혜자에게 비독성인 담체와 혼합하여 제형화 할 수 있다. 상기 제형의 pH는 주로 화합물의 특정 용도 및 농도에 따라 달라지지만, 약 3 내지 약 8 범위일 수 있다. pH 5의 아세테이트 완충액 중의 제형이 적합한 실시양태이다.
본원에서 사용하기 위한 이 발명의 화합물은 바람직하게는 멸균성이다. 특히, 생체 내 투여용으로 사용되는 제형은 멸균성이어야 한다. 이런 멸균화는 멸균 여과막을 통한 여과로 용이하게 성취된다.
상기 화합물은 보통 고체 조성물, 동결건조 제형 또는 수성 용액으로 보관될 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 좋은 의학적 관례와 일치하는 방식, 즉 투여 양, 농도, 스케줄, 과정, 비히클 및 경로로 제형화, 용량화 및 투여될 수 있다. 이러한 상황에서 고찰해야 하는 요인으로는 치료받는 특정 장애, 치료받는 특정 포유 동물, 각 환자의 임상 증상, 장애의 원인, 제제의 전달 부위, 투여 방법, 투여 스케줄, 의료업자에게 공지된 기타 요인을 포함한다. 투여되는 화합물의 "치료 효과량"은 이러한 고찰 내용을 따라야하고 과증식성 장애를 예방, 호전 또는 치료하는데 필요한 최소량이다.
일반적 처방으로, 용량 당 비경구 투여되는 억제제의 초기 약학적 유효량은 약 0.01 내지 100mg/kg 범위, 즉 환자 체중 kg 당 하루에 약 0.1 내지 20 mg이고, 사용되는 화합물의 전형적인 초기 범위는 0.3 내지 15mg/kg/일이다.
허용가능한 희석제, 담체, 부형제 및 안정제는 이용되는 투약량 및 농도에서 수혜자에게 비독성이고, 예컨대 인산염, 구연산염 및 다른 유기산과 같은 완충액; 아스코르브산 및 메티오닌을 비롯한 항산화제; 보존제(예컨대, 옥타데실디메틸벤질 암모늄 클로라이드; 헥사메토늄 클로라이드; 벤즈알코늄 클로라이드, 벤즈에토늄 클로라이드; 페놀, 부틸 또는 벤질 알콜; 알킬 파라벤, 예컨대 메틸 또는 프로필 파라벤; 카테콜; 레조시놀; 사이클로헥산올; 3-펜탄올; 및 m-크레졸); 저분자량(약 10개 잔기 미만) 폴리펩타이드; 단백질, 예컨대 혈청 알부민, 젤라틴 또는 면역글로불린; 친수성 중합체, 예컨대 폴리비닐피롤리돈; 아미노산, 예컨대 글리신, 글루타민, 아스파라긴, 히스티딘, 아르기닌 또는 리신; 단당류, 이당류 및 다른 탄수화물, 예컨대 글루코오스, 만노오스 또는 덱스트린; 킬레이트제, 예컨대 EDTA; 당, 예컨대 수크로오스, 만니톨, 트레할로스 또는 소르비톨; 염형성 반대이온, 예컨대 나트륨; 금속 착물(예컨대, Zn-단백질 착물); 및/또는 비이온 계면활성제, 예컨대 트윈(TWEEN™), 플루로닉스(PLURONICS™) 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 포함한다. 활성 약학적 성분은 또한 코아세르베이션 기술 또는 계면 중합 등에 의해 제조된 마이크로캡슐, 예컨대 각각 하이드록시메틸셀룰로스 또는 젤라틴-마이크로캡슐 및 폴리-(메틸메타크릴레이트) 마이크로캡슐, 콜로이드성 약물 전달 시스템(예컨대, 리포좀, 알부민 미소구, 마이크로에멀젼, 나노입자 및 나노캡슐) 또는 마크로에멀젼에 포획될 수 있다. 이러한 기술은 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed.(1980)]에 개시되어 있다.
화학식 I의 화합물의 지속 방출형 제제가 제조될 수도 있다. 지속 방출 제제의 적당한 예로는 매트릭스가 성형 물품 형태, 예컨대 필름 또는 마이크로캡슐인, 화학식 I의 화합물을 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스를 포함한다. 지속 방출형 매트릭스의 예로는 폴리에스테르, 하이드로겔(예컨대, 폴리(2-하이드록시 에틸-메타크릴레이트) 또는 폴리(비닐 알콜)), 폴리락타이드(미국 특허 3,773,919), L-글루탐산과 감마-에틸-L-글루타메이트의 공중합체, 비-분해성 에틸렌-비닐 아세테이트, 분해성 젖산-글리콜산 공중합체, 예컨대 루프론 디폿(LUPRON DEPOT™)(젖산-글리콜산 공중합체와 류프롤라이드 아세테이트로 구성된 주사성 미소구) 및 폴리-D-(-)-3-하이드록시부티르산을 포함한다.
제형은 본 명세서에서 상술한 투여 경로에 적합한 것을 포함한다. 제형은 단위 투약 형태로 편리하게 제공될 수 있고 약학 분야에 공지된 임의의 방법으로 제조할 수 있다. 기술 및 제형은 일반적으로 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA]에서 찾을 수 있다. 이러한 방법은 하나 이상의 보조 성분을 함유하는 담체와 활성 성분을 회합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로, 제형은 활성 성분과 액체 담체 또는 미분된 고체 담체 또는 이 둘 모두를 균일하게 친밀하게 회합시키고, 그 다음 필요하면 산물을 성형하여 제조한다.
경구 투여에 적합한 화학식 I의 화합물의 제형은 소정량의 화학식 I의 화합물을 각각 함유하는 환제, 캡슐, 사쉐 또는 정제와 같은 개별 단위로 제조할 수 있다.
압축 정제는 경우에 따라 결합체, 윤활제, 불활성 희석제, 보존제, 계면활성제 또는 분산제와 혼합한, 분말 또는 과립과 같은 자유 유동 형태의 활성 성분을 적당한 기계로 압축하여 제조할 수 있다. 성형 정제는 분말화된 활성 성분을 불활성 액체 희석제로 습윤화시킨 혼합물을 적당한 기계에서 성형하여 제조할 수 있다. 정제는 경우에 따라 코팅하거나 스코어링할 수 있고, 경우에 따라 활성 성분의 저속 방출 또는 조절 방출을 제공하도록 제형화한다.
정제, 트로키, 로젠지, 수성 또는 오일 현탁액, 분산성 분말 또는 과립, 에멀젼, 경질 또는 연질 캡슐, 예컨대 젤라틴 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르는 경구용으로 제조할 수 있다. 경구용으로 의도된 화학식 I의 화합물의 제형은 약학 조성물의 제조에 대해 당업계에 공지된 임의의 방법에 따라 제조할 수 있고, 이러한 조성물은 감미제, 방향제, 착색제 및 보존제를 비롯한 하나 이상의 제제를 함유하여 맛좋은 제제를 제공할 수 있다. 활성 성분을 함유하는 정제는 이 정제의 제조에 적당한 비독성 약학적으로 허용가능한 부형제와 혼합된 것이 적당하다. 이러한 부형제로는, 예컨대 불활성 희석제, 예컨대 칼슘 또는 나트륨 카보네이트, 락토오스, 칼슘 또는 나트륨 포스페이트; 과립화 및 붕해제, 예컨대 옥수수 전분 또는 알긴산; 결합제, 예컨대 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 및 윤활제, 예컨대 마그네슘 스테아레이트, 스테아르산 또는 활석일 수 있다. 정제는 비코팅되거나 또는 마이크로캡슐화를 비롯한 공지의 기술로 코팅하여 위장관에서의 붕해 및 흡수를 지연시키고 장기간 동안 지속적인 작용을 제공할 수 있다. 예컨대, 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 다이스테아레이트와 같은 시간 지연 물질을 단독으로 또는 왁스와 함께 사용할 수 있다.
눈 또는 다른 외부 조직, 예컨대 입 및 피부의 치료를 위해, 제형은 활성 성분(들)을 예컨대 0.075 내지 20%w/w의 양으로 함유하는 국부 연고 또는 크림으로 적용되는 것이 바람직하다. 연고로 제형화될 때, 활성 성분은 파라핀계 또는 수혼화성 연고 베이스와 함께 이용될 수 있다. 다르게는, 활성 성분은 수중유 크림 베이스와 함께 크림으로 제형화되기도 한다.
필요하다면, 크림 베이스의 수성 상은 다가 알콜, 즉 하이드록시 기가 2개 이상인 알콜, 예컨대 프로필렌 글리콜, 부탄 1,3-다이올, 만니톨, 소르비톨, 글리세롤 및 폴리에틸렌 글리콜(예컨대, PEG 400) 및 이의 혼합물을 포함할 수 있다. 국부 제형은 피부 또는 다른 환부를 통해 활성 성분의 흡수 또는 침투를 증강시키는 화합물을 적당하게 포함할 수 있다. 이러한 피부 침투 증강제의 예로는 다이메틸 설폭사이드 및 관련 유사체를 포함한다.
본 발명의 에멀젼의 오일 상은 지방 또는 오일 또는 지방 및 오일과 함께 적어도 하나의 유화제를 함유한 혼합물을 포함하는 공지된 성분으로부터 공지의 방식으로 구성될 수 있다. 친수성 유화제는 안정제로 작용하는 친지성 유화제와 함께 포함되는 것이 바람직하다. 종합하면, 유화제(들)는 안정제(들)와 함께 또는 안정제 없이 소위 유화 왁스를 구성하고, 오일 및 지방과 함께 왁스는 크림 제형의 오일 분산 상을 형성하는 소위 유화 연고 베이스를 구성한다. 본 발명의 제형에 사용하기에 적합한 유화제 및 에멀젼 안정제는 트윈® 60, 스팬(Span®) 80, 세토스테아릴 알콜, 벤질 알콜, 미리스틸 알콜, 글리세릴 모노-스테아레이트 및 나트륨 라우릴 설페이트를 포함한다.
화학식 I의 화합물의 수성 현탁액은 수성 현탁액의 제조에 적합한 부형제와 혼합된 활성 물질을 함유한다. 이러한 부형제로는 현탁제, 예컨대 나트륨 카복시메틸셀룰로스, 크로스카멜로스, 포비돈, 메틸셀룰로스, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스, 나트륨 알기네이트, 폴리비닐피롤리돈, 검 트라가칸트 및 검 아카시아 및 분산제 또는 습윤화제, 예컨대 천연 포스파타이드(예컨대, 레시틴), 지방산과 알킬렌 옥사이드의 축합 산물(예컨대, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트), 장쇄 지방족 알콜과 에틸렌 옥사이드의 축합 산물(예컨대, 헵타데카에틸렌옥시세타놀), 지방산과 헥시톨 무수물 유래의 부분 에스테르와 에틸렌 옥사이드의 축합 산물(예컨대, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트)을 포함한다. 수성 현탁액은 또한 하나 이상의 보존제, 예컨대 에틸 또는 n-프로필 p-하이드록시벤조에이트, 하나 이상의 착색제, 하나 이상의 방향제 및 하나 이상의 감미제, 예컨대 수크로오스 또는 사카린을 함유할 수 있다.
화학식 I의 화합물의 약학 조성물은 멸균 주사성 제제, 예컨대 멸균 주사성 수성 또는 유성 현탁액 형태일 수 있다. 이 현탁액은 앞에서 언급한 적당한 분산제 또는 습윤화제 및 현탁화제를 이용하여 공지된 기술에 따라 제조할 수 있다. 멸균 주사성 제제는 또한 비독성의 비경구 허용가능한 희석제 또는 용매 중의 멸균 주사성 용액 또는 현탁액, 예컨대 1,3-부탄다이올 중의 용액이거나, 또는 동결건조 분말로 제조될 수 있다. 이용될 수 있는 허용가능한 비히클 및 용매 중에는 물, 링거액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 멸균 고정 오일은 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로 이용될 수 있다. 이 목적을 위해, 모든 상표의 고정 오일이 이용될 수 있고, 그 예로는 합성 모노글리세라이드 또는 다이글리세라이드를 포함한다. 또한, 지방산, 예컨대 올레산이 마찬가지로 주사제의 제조에 이용될 수 있다.
단일 투약 형태를 생산하기 위해 담체 물질과 배합될 수 있는 활성 성분의 양은 치료받는 숙주 및 특정 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 예컨대, 인간에게 경구 투여하려는 시간-방출 제형은 약 1 내지 1000 mg의 활성 물질을, 총 조성물의 약 5 내지 약 95%(중량:중량)로 변할 수 있는 적당하고 편리한 양의 담체 물질과 함께 함유할 수 있다. 이 약학 조성물은 투여 시 쉽게 측정가능한 양을 제공하도록 제조할 수 있다. 예컨대, 정맥내 주입용으로 제조된 수용액은 용액 1ml당 활성 성분 약 3 내지 500 ㎍을 함유하여 약 30ml/hr 속도의 적당한 용량이 주입될 수 있다.
비경구 투여에 적합한 제형은 항산화제, 완충액, 세균발육정지제 및 제형을 의도한 수용체의 혈액과 등장성으로 만드는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 주사 용액; 및 현탁제 및 증점제를 함유할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다.
또한, 눈에 국부 투여하기에 적합한 제형은 적당한 담체, 특히 활성 성분의 수성 용매에 활성 성분이 용해 또는 현탁된 점안제를 포함한다. 이러한 제형에서 활성 성분은 약 0.5 내지 20%w/w, 예컨대 약 0.5 내지 10%w/w 농도, 예컨대 약 1.5%w/w의 농도로 존재하는 것이 바람직하다.
입에 국부 투여하기에 적당한 제형은 방향성 베이스, 보통 수크로오스 및 아카시아 또는 트라가칸트에 활성 성분을 함유하는 로젠지; 젤라틴 및 글리세린 또는 수크로오스 및 아카시아와 같은 불활성 베이스 중에 활성 성분을 함유하는 파스틸; 및 적당한 액체 담체에 활성 성분을 함유하는 구강세정제를 포함한다.
직장 투여용 제형은 예컨대 코코아 버터 또는 살리실레이트를 함유하는 적당한 베이스와 함께 좌약으로 제공될 수 있다.
폐내 또는 비측 투여에 적합한 제형은 입자 크기가 예컨대 0.1 내지 500 마이크론 범위(예컨대, 0.5, 1, 30 마이크론, 35 마이크론 등과 같은 마이크론 증분으로 0.1 내지 500 마이크론 범위의 입자 크기를 포함함)이고, 비강을 통한 급속 흡입 또는 폐포낭에 도달하도록 구강을 통한 흡입에 의해 투여된다. 적당한 제형은 활성 성분의 수성 또는 오일 용액을 포함한다. 에어로졸 또는 무수 분말 투여에 적합한 제형은 통상의 방법에 따라 제조할 수 있고, 이하에 기술된 장애를 치료 또는 예방하는데 지금까지 사용된 화합물과 같은 다른 치료제와 함께 전달될 수 있다.
질 투여에 적합한 제형은 활성 성분 외에 당업자에게 적당한 것으로 공지된 담체를 함유하는 페사리, 탐폰, 크림, 젤, 페이스트, 포움 또는 스프레이 제형으로 제공될 수 있다.
이 제형은 단위 용량 또는 다회 용량 용기, 예컨대 밀봉 앰플 및 바이엘에 포장될 수 있고, 사용 직전에 주사를 위해 멸균 액체 담체, 예컨대 물의 첨가만을 필요로 하는 동결건조 상태로 보관될 수 있다. 임시 주사 용액 및 현탁액은 앞서 기술된 종류의 멸균 분말, 과립 및 정제로 제조된다. 바람직한 단위 투약 제형은 위에서 언급한 활성 성분의 1일 용량 또는 단위 1일 분할용량이나 이의 적당한 분획을 함유하는 제형이다.
또한, 본 발명은 위에서 정의한 적어도 하나의 활성 성분을 수의용 담체와 함께 함유하는 수의용 조성물을 제공한다. 수의용 담체는 조성물 투여 목적에 유용한 물질이고, 수의학적으로 불활성이거나 허용가능하고 활성 성분과 융화성인 고체, 액체 또는 기체 물질일 수 있다. 이러한 수의용 조성물은 비경구, 경구 또는 임의의 다른 바람직한 경로를 통해 투여될 수 있다.
병용 요법
화학식 I의 화합물을 단독으로 또는 다른 치료제와 함께 본 명세서에 기술된 질환 또는 장애, 예컨대 염증 또는 과증식 장애(예컨대, 암)를 치료하는데 이용할 수 있다. 특정 실시양태에서, 화학식 I의 화합물은 약학적 복합 제형 또는 병용 요법과 같은 용량투여 섭생으로, 항 염증 성질 또는 항-과증식 성질을 갖거나 염증, 면역 반응 장애 또는 과증식 장애(예컨대, 암)를 치료하는데 유용한 제 2 치료 화합물과 함께 배합된다. 약학적 복합 제형 또는 용량투여 섭생의 제 2 화합물은 서로 악영향을 미치지 않도록 화학식 I의 화합물에 보충 활성을 나타내는 것이다. 이러한 화합물은 의도한 목적에 효과적인 양으로 함께 적당하게 존재한다. 하나의 실시양태에서, 본 발명의 조성물은 화학식 I의 화합물을 본원에 기재된 것들과 같은 화학치료제와 함께 포함한다.
병용 요법은 동시 또는 연속 섭생으로 투여될 수 있다. 연속 투여될 때, 복합물은 2회 이상의 투여로 투여될 수 있다. 병용 투여는 별도의 제형 또는 단일 약학 조성물의 공동투여, 및 임의의 순서로의 연속 투여를 포함하고, 이때 두 활성제(또는 모든 활성제)가 각각의 생물학적 활성을 동시에 발휘하는 시간 기간을 두는 것이 바람직하다.
상기 임의의 공동투여 제제의 적당한 투약량은 현재 사용되는 양이고, 새로 동정된 제제 및 다른 치료제 또는 치료의 복합 작용(상승작용)으로 인해 저하될 수 있다.
병용 요법은 "상승작용" 및 "상승 효과"(즉, 화합물을 별도로 사용하여 수득되는 효과의 합보다 활성 성분을 함께 사용할 때 더 큰 효과)를 달성할 수 있다. 상승 효과는 활성 성분이 (1) 공동조제되고 병용의 단위 투약 제형으로 동시에 투여 또는 전달될 때; (2) 별도의 제형으로 교대로 또는 병행해서 전달될 때; 또는 (3) 일부 다른 섭생으로 달성될 수 있다. 교대 요법으로 전달될 때, 상승 효과는 화합물이, 예컨대 다른 주사기로 다른 주입에 의해, 별개의 환제 또는 캡슐로 또는 분리 주입으로 연속해서 투여 또는 전달될 때 달성될 수 있다. 일반적으로, 교대 요법 동안, 각 활성 성분의 유효 투약량은 연속, 즉 계대로 투여되는 반면, 병용 요법에서는 2종 이상의 활성 성분의 유효 투여량이 함께 투여된다.
항암 요법의 특정한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체, 기하 이성질체, 호변 이성질체, 용매화물, 대사물질 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구 약물은 본 명세서에 기술된 바와 같은 다른 치료제, 호르몬제 또는 항체 제제와 조합되기도 하고, 수술 요법 및 방사선요법과 조합되기도 한다. 따라서, 본 발명에 따른 병용 요법은 적어도 하나의 화학식 I의 화합물, 이의 입체 이성질체, 기하 이성질체, 호변 이성질체, 용매화물, 대사물질 또는 약학적으로 허용가능한 염 또는 전구 약물의 투여, 및 적어도 하나의 다른 암 치료 방법의 이용을 포함한다. 화학식 I의 화합물(들) 및 다른 약학적 활성 화학치료제(들)의 양 및 상대적 투여 타이밍은 바람직한 병용 치료 효과를 달성하도록 선택한다.
화학식 I의 화합물의 대사물
또한, 본 발명의 범위에는 본 명세서에 기술된 화학식 I의 생체내 대사산물이 포함된다. 이 산물은 예컨대, 투여된 화합물의 산화, 환원, 가수분해, 아마이드화, 탈아마이드화, 에스테르화, 탈에스테르화, 효소 절단 등으로부터 산출될 수 있다. 따라서, 본 발명은 화학식 I의 화합물의 대사물질, 예컨대 본 발명의 화합물을 이의 대사산물을 산출하기에 충분한 시간 동안 포유 동물과 접촉시키는 것을 포함하는 방법에 의해 생성되는 화합물을 포함한다.
대사물질은 일반적으로 본 발명의 화합물의 방사능표지된(예컨대, 14C 또는 3H) 동위원소를 제조하는 단계, 이것을 동물, 예컨대 래트, 마우스, 기니아 피그, 원숭이 또는 사람에게 검출가능한 용량(예컨대, 약 0.5mg/kg 이상)으로 투여하는 단계, 충분한 시간 동안(예컨대, 약 30초 내지 30시간) 대사가 일어나도록 하는 단계, 및 이의 변환 산물을 소변, 혈액 또는 다른 생물학적 시료로부터 분리하는 단계에 의해 동정된다. 이 산물은 표지되어 있기 때문에 쉽게 분리된다(다른 것은 대사물질에 생존하는 에피토프에 결합할 수 있는 항체를 이용하여 분리한다). 대사물질의 구조는 통상의 방식, 예컨대 MS, LC/MS 또는 NMR 분석으로 측정한다. 일반적으로, 대사물질의 분석은 당업계에 공지된 통상의 약물 대사 연구와 같은 방식으로 수행한다. 대사물질은 생체내에서 다르게 발견되지 않는 한, 본 발명의 화합물의 치료적 용량에 대한 진단 분석에 유용할 수 있다.
제품
본 발명의 또 다른 실시양태에서, 전술한 질환 및 장애의 치료에 유용한 물질을 함유하는 제조 물품 또는 "키트"가 제공된다. 하나의 실시 양태에서, 이 키트는 화학식 I의 화합물을 함유하는 용기를 포함한다. 키트는 또한 라벨 또는 패키지 동봉물을 용기 위에 또는 용기에 결합시켜 포함한다. "패키지 동봉물"이라는 용어는 치료 제품의 상업적 패키지에 통상적으로 포함되는 설명서로서, 이 치료 제품의 사용에 관한 지시, 용법, 투약량, 투여, 금기 및/또는 경고를 포함하는 설명서를 의미하는 것이다. 적당한 용기로는 예컨대 병, 바이엘, 주사기, 블리스터 팩 등을 포함한다. 용기는 유리 또는 플라스틱과 같은 다양한 소재로 제조될 수 있다. 용기는 증상의 치료에 효과적인 화학식 I 또는 II의 화합물 또는 이의 제형을 담고 있을 수 있고 멸균 접근 입구를 보유할 수 있다(예컨대, 용기는 피하 주사 바늘로 찌를 수 있는 스토퍼를 보유한 바이알 또는 정맥 내 용액 백일 수 있다). 조성물 중의 적어도 하나의 활성제는 화학식 I의 화합물이다. 라벨 또는 패키지 동봉물은 선택한 증상, 예컨대 암을 치료하는데 조성물이 사용된다는 것을 나타낸다. 또한, 라벨 또는 패키지 동봉물은 치료할 환자가 과증식 장애, 신경 변성, 심장 비대, 통증, 편두통 또는 신경외상 질환 또는 사태와 같은 장애를 가진 자임을 나타낼 수 있다. 하나의 실시양태에서, 라벨 또는 패키지 동봉물은 화학식 I의 화합물을 함유하는 조성물이 비정상적 세포 증식으로부터 초래되는 장애를 치료하는데 사용될 수 있다는 것을 나타낸다. 또한, 라벨 또는 패키지 동봉물은 조성물이 다른 장애를 치료하는데 사용될 수 있음을 나타낼 수도 있다. 다르게는, 또는 추가로, 제조 물품은 약학적으로 허용가능한 완충액, 예컨대 세포발육정지성 주사용수(BWFI), 인산염-완충 식염수, 링거액 및 덱스트로스 용액을 함유하는 제 2 용기를 포함할 수 있다. 또한, 상업적 및 사용자 견지에서 바람직한 다른 재료, 예컨대 다른 완충액, 희석제, 필터, 주사바늘 및 주사기를 포함할 수 있다.
키트는 추가로 화학식 I의 화합물의 투여에 대한 안내서, 및 존재한다면 제 2 약학 조성물을 포함할 수 있다. 예컨대, 키트가 화학식 I의 화합물을 함유하는 제 1 조성물, 및 제 2 약학 조성물을 포함한다면, 키트는 추가로 치료가 필요한 환자에게 제 1 및 제 2 약학 조성물을 동시, 연속 또는 분할 투여하는 것에 대한 지침서를 포함할 수 있다.
또 다른 실시양태에서, 키트는 화학식 I의 화합물의 고체 경구 형태, 예컨대 정제 또는 캡슐을 전달하기에 적합하다. 이러한 키트는 다수의 단위 투약량을 포함하는 것이 바람직하다. 이러한 키트는 투약량이 의도한 사용 순서대로 배열되어 있는 카드를 포함할 수 있다. 이러한 카드의 한 예는 "블리스터 팩"이다. 블리스터 팩은 포장 산업에 공지되어 있고 약학적 단위 투약 형태를 포장하는데 널리 사용된다. 원한다면, 기억 보조자가 예컨대 수, 문자 또는 다른 표식 형태로 또는 투약량이 투여될 수 있는 치료 스케줄의 날짜를 표시한 달력 동봉물로 구비될 수 있다.
하나의 실시양태에 따르면, 키트는 (a) 화학식 I의 화합물이 담겨있는 제 1 용기; 및 임의적으로 (b) 항-과증식 활성이 있는 제 2 화합물을 포함하는 제 2 약학 조성물이 담겨있는 제 2 용기를 포함할 수 있다. 다르게는, 또는 추가로 키트는 약학적으로 허용가능한 완충액, 예컨대 세균발육정지성 주사용수(BWFI), 인산염 완충 식염수, 링거액 및 덱스트로스 용액을 함유하는 제 3 용기를 포함할 수 있다. 상업적 및 사용자 견지에서 바람직한, 다른 완충액, 희석제, 필터, 주사바늘 및 주사기를 비롯한 다른 재료를 추가로 포함할 수 있다.
키트가 화학식 I의 조성물 및 제 2 치료제를 함유하는 다른 특정한 실시양태에서, 키트는 각 조성물을 담기 위한 용기, 예컨대 분할된 병 또는 분할된 호일 패킷을 포함할 수 있지만, 각 조성물은 분할되지 않은 단일 용기에 담겨있을 수도 있다. 일반적으로, 키트는 각 성분의 투여에 대한 지시 사항을 포함한다. 키트 형태는 각 성분이 다른 투약 형태(예컨대, 경구 및 비경구)로 투여되는 것이 바람직하거나, 다른 투약 간격으로 투여될 때, 또는 제형의 각 성분의 역가가 주치의 처방이 필요할 때 특히 유리하다.
화학식 I의 화합물의 제조
화학식 I의 화합물은 화학 업계에 공지된 것과 유사한 공정을 포함하는 합성 경로에 의해, 특히 본 명세서에 있는 설명 및 다른 헤테로사이클에 대해 본원에 참고로서 인용된 문헌(문헌[Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, Editors Katritzky and Rees, Elsevier, 1997, e.g. Volume 3]; [Liebigs Annalen der Chemie,(9):1910-16,(1985)]; [Helvetica Chimica Acta, 41:1052-60,(1958)]; [Arzneimittel-Forschung, 40(12):1328-31,(1990)])에 비추어서 합성할 수 있다. 출발 물질은 일반적으로 알드리치 케미컬스(Aldrich Chemicals, 위스콘신 밀워키 소재)와 같은 시판원에서 입수할 수 있거나 당업자에게 공지된 방법을 이용해 용이하게 제조할 수 있다(예컨대, 문헌[Louis F. Fieser and Mary Fieser, Reagents for Organic Synthesis, v. 1-23, Wiley, N.Y.(1967-2006) ed.], 또는 문헌[Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl. ed. Springer-Verlag, Berlin(부록 포함)(또한, 바일슈타인(Beilstein) 온라인 데이터베이스를 통해서도 입수할 수 있음)]에 일반적으로 기술된 방법에 의해 제조될 수 있다.
화학식 I의 화합물, 필요한 시약 및 중간체 합성에 유용한 합성 화학 변형 및 보호기 방법(보호 및 탈보호)은 당 분야에 공지되어 있고, 예를 들면 문헌[R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers(1989); T. W. Greene and P. G .M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley and Sons(1999)] 및 [L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons(1995)] 및 이의 후속 판에 기재된 것을 포함한다.
화학식 I의 화합물을 단독으로 제조하거나 또는 적어도 2개, 예컨대 5 내지 1000개의 화합물 또는 10 내지 100개의 화합물을 포함하는 화합물 라이브러리로 제조할 수 있다. 화학식 I의 화합물의 라이브러리는 조합적 "분리 및 혼합(split and mix)" 접근법으로 제조하거나, 또는 용액상 또는 고상 화학을 이용하는 여러 병행 합성법 또는 당업자에게 공지된 절차에 의해 제조할 수 있다. 본 발명의 추가 양태에 따르면 적어도 2개의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 포함하는 화합물 라이브러리가 제공된다.
일반적 절차 및 실시예는 화학식 I의 화합물의 예시적 제조 방법을 제공한다. 당업자는 다른 합성 경로를 이용해서 본 발명의 화합물을 합성할 수 있다는 것을 잘 알고 있다. 특정 출발 물질과 시약이 도면, 일반적 절차 및 실시예에 묘사하고 논의되고 있지만, 다른 출발 물질과 시약으로 대체하여 다양한 유도체 및/또는 반응 조건을 제공할 수도 있다. 또한, 이하에 기술된 방법으로 제조한 다수의 예시적 화합물은 당업자에게 공지된 통상의 화학을 이용하여 본 개시내용에 비추어 추가 변형시킬 수도 있다.
화학식 I의 화합물을 제조하는데 있어서, 중간체의 원위(remote) 작용기(예컨대, 1급 또는 2급 아민)를 보호할 필요가 있을 수 있다. 이러한 보호의 필요는 원위 작용기의 성질 및 제조방법의 조건에 따라 달라질 것이다. 적당한 아미노-보호기로는 아세틸, 트라이플루오로아세틸, t-부톡시카보닐(BOC), 벤질옥시카보닐(CBz) 및 9-플루오레닐 메틸렌옥시카보닐(Fmoc)을 포함한다. 이러한 보호의 필요는 당업자에 의해 쉽게 결정된다. 보호기 및 이의 사용에 대한 일반적인 설명은 문헌[T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991]을 참조한다.
분리 방법
화학식 I의 화합물을 제조하는 방법에서, 반응 산물을 서로 및/또는 출발 물질과 분리하는 것이 유익할 수 있다. 각 단계 또는 일련의 단계들의 원하는 산물은 당업계에 일상적인 기술을 통해 바람직한 균질도로 분리 및/또는 정제된다. 전형적으로, 이러한 분리는 다중상 추출, 용매 또는 용매 혼합물로부터 결정화, 증류, 승화 또는 크로마토그래피를 수반한다. 크로마토그래피는 예컨대 역상 및 정상상; 크기 배제; 이온 교환; 고압, 중간압 및 저압의 액체 크로마토그래피 방법 및 장치; 소규모 분석; 모의 이동상(SMB) 및 제조용 박층 또는 후막층 크로마토그래피뿐만 아니라 소규모 박층 및 플래쉬 크로마토그래피 기술을 비롯한 임의의 여러 방법을 포함할 수 있다.
다른 부류의 분리 방법은 원하는 산물, 미반응 출발 물질, 반응 부산물 등에 결합하거나 이들을 분리할 수 있도록 선택한 시약으로 혼합물을 처리하는 것을 포함한다. 이러한 시약으로는 활성탄, 분자체, 이온교환 매질 등과 같은 흡착제 또는 흡수제를 포함한다. 다르게는, 시약은 염기성 물질인 경우에는 산, 산성 물질의 경우에는 염기, 항체와 같은 결합 시약, 결합 단백질, 크라운 에터와 같은 선택적 킬레이트제, 액체/액체 이온 추출 시약(LIX) 등일 수 있다. 적당한 분리 방법의 선택은 관계된 물질의 성질, 예컨대, 증류 및 승화 중의 비등점 및 분자량, 크로마토그래피 중의 극성 작용기의 존재 또는 부재, 다중상 추출에서 산성 및 염기성 매질 중의 물질의 안정성 등에 따라 달라진다.
부분입체 이성질체 혼합물은 크로마토그래피 및/또는 분별 결정과 같은 당업자에게 공지된 방법으로 이화학적 차이를 기초로 하여 각 부분입체 이성질체로 분리할 수 있다. 거울상 이성질체는 거울상 이성질체 혼합물을 적당한 광학 활성 화합물(예컨대, 키랄 알콜 또는 모셔(Mosher)의 산 클로라이드와 같은 키랄 보조제)와 반응시켜 부분입체 이성질체 혼합물로 변환시키고, 부분입체 이성질체를 분리한 뒤, 각 부분입체 이성질체를 대응하는 순수 거울상 이성질체로 변환(예컨대, 가수분해)시켜 분리할 수 있다. 또한, 본 발명의 일부 화합물은 아트로프이성질체(예컨대, 치환된 바이아릴)일 수 있고 본 발명의 일부로 간주된다. 또한, 거울상 이성질체는 키랄 HPLC 컬럼을 이용하여 분리할 수도 있다.
단독 입체 이성질체(예컨대, 실질적으로 입체 이성질체가 없는 거울상 이성질체)는 라세미 혼합물을 광학 활성 분할제를 이용한 부분입체 이성질체의 형성과 같은 방법으로 분할하여 수득할 수 있다(문헌[Eliel, E. and Wilen, S. "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994]; [Lochmuller, C. H., (1975) J. Chromatogr., 113(3):283-302]). 본 발명의 키랄 화합물의 라세미 혼합물은 임의의 적당한 방법으로 분리 및 정제할 수 있는데, 그 예로는 (1) 키랄 화합물을 이용한 이온성 부분입체 이성질체 염의 형성 및 분별결정 또는 다른 방법에 의한 분리, (2) 키랄 유도체화 시약을 이용한 부분입체 이성질체 화합물의 형성, 부분입체 이성질체의 분리 및 순수 입체 이성질체로의 변환, (3) 키랄 조건 하에 예컨대 HPLC 또는 SFC(초 임계 유체 크로마토그래피)에 의해 키랄 흡착제 상에서 직접 실질적으로 순수하거나 농축된 입체 이성질체의 분리가 있다(문헌[White and Burnett (2005) Jour. of Chrom. A1074:175-185]; 및 ["Drug Stereochemistry, Analytical Methods and Pharmacology", (1993) Irving W. Wainer, Ed., Marcel Dekker, Inc., New York]).
방법 (1) 하에, 부분입체 이성질체 염은 거울상 이성질적으로 순수한 키랄 염기, 예컨대 브루신, 퀴닌, 에페드린, 스트리크닌, α-메틸-β-페닐에틸아민(암페타민) 등을 카복시산 및 설폰산과 같은 산성 작용기를 보유한 비대칭 화합물과 반응시켜 제조할 수 있다. 부분입체 이성질체 염은 분별결정 또는 이온 크로마토그래피에 의해 분리 유도될 수 있다. 아미노 화합물의 광학 이성질체 분리의 경우, 키랄 카복시산 또는 설폰산, 예컨대 캄포설폰산, 타르타르산, 만델산 또는 젖산의 첨가는 부분입체 이성질체 염을 형성시킬 수 있다.
다르게는, 방법 (2)에서는 분할할 기질을 키랄 화합물의 하나의 거울상 이성질체와 반응시켜 부분입체 이성질체 쌍을 형성한다(문헌[E. and Wilen, S. "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., 1994, p. 322]). 부분입체 이성질체 화합물은, 비대칭 화합물을 거울상 이성질적으로 순수한 키랄 유도체화 시약, 예컨대 멘틸 유도체와 반응시킨 뒤, 이 부분입체 이성질체를 분리하고 가수분해하여 순수한 또는 농축된 거울상 이성질체를 수득함으로써 형성할 수 있다. 광학 순도를 측정하는 방법은 염기의 존재하에 키랄 에스테르, 예컨대 멘틸 에스테르, 예컨대 (-) 멘틸 클로로포르메이트를 제조하거나, 또는 라세미 혼합물의 모셔 에스테르, 즉 α-메톡시-α-(트라이플루오로메틸)페닐 아세테이트를 제조하고(문헌[Jacob III. J. Org. Chem. (1982) 47:4165]), 두 아트로프 이성질체성 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체의 존재에 대해 1H NMR 스펙트럼을 분석하는 것을 포함한다. 아트로프 이성질체 화합물의 안정한 부분입체 이성질체는 아트로프 이성질체성 나프틸-이소퀴놀린을 분리하는 방법에 따라 정상 및 역상 크로마토그래피로 분리 및 정제할 수 있다(WO 96/15111). 방법 (3)에 의하면, 두 거울상 이성질체의 라세미 혼합물은 키랄 정지상을 이용한 크로마토그래피로 분리할 수 있다(문헌["Chiral Liquid Chromatography" (1989) W. J. Lough, Ed., Chapman and Hall, New York; Okamoto, J. Chromatogr., (1990) 513:375-378]). 농축 또는 정제된 거울상 이성질체는 다른 키랄 분자를 비대칭 탄소 원자와 구별하는데 사용되는 방법, 예컨대 광학 회전 및 원편광 이색성 등으로 구별할 수 있다.
일반 제조 절차
도 1은 4-아미노피라졸 화합물 5의 예시적 합성을 도시한다. 4-니트로-1H-피라졸 1을 적합한 용매 또는 순수(neat) 상태에서 염기로 처리한 후 알킬화제, 예컨대 다이메틸 설페이트를 첨가하여 화합물 2로 전환시킨다. 화합물 2를 적절한 온도에서 적합한 용매 중에서, 예컨대 -78℃에서 THF 중에서 염기 예컨대 리튬 헥사메틸다이실라자이드, 또는 nBuLi로 처리하여 5-클로로-4-니트로-1H-피라졸 3으로 전환시킬 수 있다. 공지된 방법 하에 문헌에 기재된 직접 SnAr에 의하거나, 또는 전이 금속 촉매 교차 커플링 반응, 예컨대 스즈키, 소노가시라, 헥크, 부흐발트, 골드버그 조건에 의해 화합물 3을 화합물 4로 전환시킬 수 있다. 적합한 환원 방법, 예컨대 테트라하이드로푸란 중에서 아연 분말 및 암모늄 포르메이트로 처리함에 의해, 또는 H2 및 전이 금속 촉매 예컨대 탄소 상 팔라듐을 사용한 수소화에 의해 화합물 4로부터 4-아미노피라졸 5를 합성할 수 있다.
도 2는 하이드록사마이드 화합물 6로부터의 4-카복시-티아졸 11의 예시적 합성을 도시한다. 적합한 용매 예컨대 물 중 Na2S2O3 중에서 환원제에 의한 화합물 6의 환원에 의해 화합물 7을 수득하고, 이를 적합한 염기를 갖는 적합한 용매 중에서 아실화제에 의해, 예컨대 나트륨 바이카보네이트를 갖는 다이클로로메탄 중에서 벤조일 클로라이드에 의해 화합물 8로 전환시킬 수 있다. 화합물 8을 피리딘 중에서 적합한 시약, 예컨대 라웨슨 시약 중의 황 함유 제제에 의해 화합물 9로 전환시키고, 적합한 Boc-보호기에 의해 보호하여 화합물 10을 수득할 수 있다. 적합한 염기 및 용매, 예컨대 메탄올 및 물 중의 LiOH를 사용하여 화합물 10을 에스터 가수분해하여 화합물 11을 수득할 수 있다.
도 3은 화합물 12의 C-2 브롬화에 이어서 화합물 13의 스즈키 반응에 의한 2-치환된 4-카복시-5-아미노티아졸 11의 예시적 합성을 도시한다.
스즈키-형 커플링 반응은 화학식 I의 화합물의 합성에서 티아졸, 피리딜, 피라진일 또는 피리미딘일 고리의 2번 위치에서 할라이드를 대체시킴에 의해 헤테로사이클 또는 헤테로아릴을 부착시키는 데 유용하다. 예컨대, 2-브로모 (또는 클로로) 티아졸 11은 약 1.5 당량의 아릴, 헤테로사이클릴 또는 헤테로아릴 보론산 또는 에스터 시약 및 과량의 아세토니트릴 중 수성 나트륨 카보네이트와 반응할 수 있다. 촉매량, 또는 그 이상의 저가(low valent) 팔라듐 시약, 예컨대 비스(트라이페닐포스핀)팔라듐(II) 다이클로라이드를 첨가한다. 다양한 보론산 또는 보론산 에스터가 사용될 수 있다. 보론산 에스터는 피나콜 에스터 (4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)를 포함한다. 또한 다르게는, 헤테로사이클 또는 헤테로아릴의 질소가, 예컨대 N-THP로서 보호될 수 있다. 일부 경우, 칼륨 아세테이트가 나트륨 카보네이트 대신에 사용되어 수성층의 pH를 조절한다. 반응물을 마이크로파 반응기, 예컨대 바이오타지 옵티마이저(바이오타지, 인코포레이티드)에서 10 내지 30분 동안 가압 하에 약 140 내지 150℃로 가열한다. 내용물을 에틸 아세테이트, 또는 또 다른 유기 용매로 추출한다. 유기층을 증발시킨 후, 스즈키 커플링 생성물을 실리카 상에서 또는 역상 HPLC로 정제할 수 있다.
스즈키 커플링 단계 동안 다양한 팔라듐 촉매가 사용되어 예시적 화학식 I의 화합물을 형성할 수 있다. PdCl2(PPh3)2, Pd(t-Bu)3, PdCl2 dppf CH2Cl2, Pd(PPh3)4, Pd(OAc)/PPh3, Cl2Pd[(Pet3)]2, Pd(DIPHOS)2, Cl2Pd(Bipy), [PdCl(Ph2PCH2PPh2)]2, Cl2Pd[P(o-tol)3]2, Pd2(dba)3/P(o-tol)3, Pd2(dba)/P(푸릴)3, Cl2Pd[P(푸릴)3]2, Cl2Pd(PmePh2)2, Cl2Pd[P(4-F-Ph)3]2, Cl2Pd[P(C6F6)3]2, Cl2Pd[P(2-COOH-Ph)(Ph)2]2, Cl2Pd[P(4-COOH-Ph)(Ph)2]2, 및 캡슐화된 촉매 Pd 엔캣(EnCat™) 30, Pd 엔캣™ TPP30 및 Pd(II)엔캣™ BINAP30(US 2004/0254066)을 비롯한 저가 Pd(II) 및 Pd(0) 촉매가 스즈키 커플링 반응에서 사용될 수 있다.
도 4는 4-아미노,5-아제판일 피라졸 화합물 14과 2-브로모,4-카복시-5-아미노티아졸 11의 커플링으로부터 제조된 5-아제판일-N-(피라졸-4-일)티아졸-카복사마이드 화합물 17의 예시적 합성을 도시한다. 다이클로로메탄 또는 DMF와 같은 적합한 용매 하에 아마이드 커플링 시약 예컨대 HATU, HBTU 등을 사용하여 화합물 14 및 11을 커플링시켰다. 　그 다음, 용매 중의 적합한 산 또는 염기 예컨대 다이옥산 및 물 중의 HCl, 또는 다이클로로메탄 중의 트라이플우로로아세트산, 또는 아세토니트릴 중의 K2CO3를 사용하여 커플링된 중간체 15를 탈보호시켜 화합물 17로 전환시킬 수 있다. 추가로, R5가 할로겐 기 예컨대 브롬인 경우, 화합물 15를 스즈키 또는 스틸(Stille) 조건으로 처리하여 화합물 16을 수득할 수 있다. 적합한 용매 중의 적합한 산 또는 염기 예컨대 다이옥산 및 물 중의 HCl, 또는 다이클로로메탄 중의 트라이플우로로아세트산, 또는 아세토니트릴 중의 K2CO3를 사용하여 산성 또는 염기성 조건 하에 화학식 16의 화합물의 보호기를 제거하여 화합물 17을 수득할 수 있다.
도 5는 4-아미노,5-아제판일 피라졸 화합물 14와 2-브로모,3-Boc-아미노,6-카복시-피리딜 화합물 18의 커플링으로부터 제조된 6-아미노-N-(피라졸-4-일)피리딜-카복사마이드 화합물 21의 예시적 합성을 도시한다. 다이클로로메탄 또는 DMF와 같은 적합한 용매 하에 아마이드 커플링 시약 예컨대 HATU, HBTU 등을 사용하여 화합물 14 및 18을 커플링시켰다. 　그 다음, 커플링된 중간체 19를 스즈키 또는 스틸 조건으로 처리하여 화합물 20을 수득하였다. 적합한 용매 중의 적합한 산 또는 염기 예컨대 다이옥산 및 물 중의 HCl, 또는 다이클로로메탄 중의 트라이플우로로아세트산, 또는 아세토니트릴 중의 K2CO3를 사용하여 산성 또는 염기성 조건 하에 화합물 20의 보호기를 제거하여 화합물 21을 수득할 수 있다.
도 6은 4-아미노,5-다이아제판일 피라졸 화합물 22과 2-브로모,3-치환된,6-카복시-5-아미노피라진일 화합물 23의 커플링으로부터 제조된 6-아미노-N-(피라졸-4-일)피라진-카복사마이드 화합물 26의 예시적 합성을 도시한다. 다이클로로메탄 또는 DMF와 같은 적합한 용매 하에 아마이드 커플링 시약 예컨대 HATU, HBTU 등을 사용하여 화합물 22 및 23을 커플링시켰다. 　커플링된 중간체 24를 스즈키 또는 스틸 조건으로 처리하여 화합물 25를 수득하였다. 적합한 용매 중의 적합한 산 또는 염기 예컨대 다이옥산 및 물 중의 HCl, 또는 다이클로로메탄 중의 트라이플우로로아세트산, 또는 아세토니트릴 중의 K2CO3를 사용하여 산성 또는 염기성 조건 하에 화합물 25의 보호기를 제거하여 화합물 26을 수득할 수 있다.
도 7은 2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀 27로부터의 5-아지도-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판 32의 예시적 합성을 도시한다. 화합물 27을 m-CPBA로 처리하거나 문헌에 기술된 것과 유사한 방법으로 처리하여 화합물 28로 전환시킬 수 있다. 　화합물 28로부터 문헌 방법에 따라 나트륨 아지드를 사용하여 에폭사이드를 개환시켜 화합물 29를 합성할 수 있다. 화합물 29의 R 보호기의 제거는 적합한 산성 또는 염기성 또는 수소화 조건 또는 다른 공지된 문헌 방법에 의해 이루어질 수 있다. 다이메틸 설폭사이드와 같은 적합한 용매 중의 불화 칼륨과 함께 가열하면서 화합물 30을 화합물 3과 반응시켜 화합물 31을 생성할 수 있다. 수소화 나트륨 및 요오도메탄을 사용하거나 달리 문헌에 기재된 메틸화 방법에 의해 화합물 31을 O-알킬화시켜 5-아지도-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판 화합물 32를 생성할 수 있다. DAST와 같은 친핵성 플루오르화 시약에 의해 화합물 31을 화합물 32로 전환시킬 수 있다. 화합물 31을 케톤으로 산화시킨 다음, 리튬 또는 그리냐드(Grignard) 시약과 같은 유기금속 시약으로 친핵성 첨가한 후, DAST와 같은 친핵성 플루오르화 시약을 첨가하여, 화합물 32로 전환시킬 수 있다.
도 8은 6,7-다이하이드로-1H-아제핀-3(2H)-온 33으로부터의 5-Boc-아미노-(4-니트로-1H-피라졸-5-일) 아제판 39의 예시적 합성을 도시한다. 화합물 33을, 아세토니트릴과 같은 적합한 용매 중의 TMS-아지드 및 앰버라이트(Amberlite) IRA 900F 수지와 함께 가열하여 5-아지도-아제판-3-온 34로 전환시킬 수 있다.　 화합물 35의 R 보호기의 제거는 산성 또는 염기성 또는 수소화 조건에 의하거나 문헌 방법에 의해 이루어질 수 있다. 생성 아민은 다이메틸설폭사이드와 같은 용매 중의 불화 칼륨 하에 5-클로로-4-니트로-1H-피라졸 3과 함께 가열하여 5-아지도-1-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올 36으로 전환시킬 수 있다. 화합물 36은, THF 및 물 중의 트라이페닐포스핀과 함께 가열하면서 스타우딩거(Staudinger) 아지드 환원시킨 다음, 문헌에 기재된 방법을 사용하여 Boc-보호기와 같은 적합한 보호기로 생성 아민을 보호하여 5-(N-Boc)-1-(l-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올 37로 전환시킬 수 있다. 데스-마틴(Dess-Martin) 시약으로 처리하거나 또는 문헌에 기재된 방법에 의해 37을 산화시켜 3급-부틸 1-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6-옥소아제판-4-일카바메이트 38을 제공한다. 화합물 38은 다이클로로메탄과 같은 적합한 용매 중의 데옥소-플루오르(deoxo-Fluor)(등록상표)로 처리하거나 또는 문헌에 기재된 방법에 의해 처리하여 39로 전환될 수 있다.　 화합물 38은 유기금속 시약 예컨대 리튬 또는 그리냐드 시약으로 처리하거나 또는 문헌에 기재된 방법에 의해 처리하여 39로 전환될 수 있다.
도 9는 4-니트로-1H-피라졸 2로부터의 5-(4-아지도-1-플루오로사이클로헵틸)-4-니트로-1H-피라졸 45의 예시적 합성을 도시한다. THF와 같은 적합한 용매 중에서 적절한 온도에서 (Z)-사이클로헵트-4-엔온 40 및 염기 예컨대 리튬 헥사메틸다이실라자이드로 4-니트로-1H-피라졸 2를 처리하거나 문헌에 기재된 방법으로 처리하여 1-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-4-엔올을 생성한다. 41을 DCM과 같은 적합한 용매 중에서 데옥소-플루오르로 처리하거나 문헌에 기재된 방법으로 처리하여 5-(1-플루오로사이클로헵트-4-엔일)-4-니트로-1H-피라졸 42를 생성한다. 42를 m-CPBA에 의하거나 또는 문헌에 보고된 유사한 절차에 의해 에폭시화하여 5-(4-플루오로-8-옥사바이사이클로[5.1.0]옥탄-4-일)-4-니트로-1H-피라졸 43을 생성한다. 43의 에폭사이드를 문헌 방법에 따라 나트륨 아지드로 개환시켜 2-아지도-5-플루오로-5-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵탄올 44를 생성한다. 44를 수소화 나트륨 및 요오도메탄을 사용하거나 또는 문헌에 기재된 다른 메틸화 방법에 의해 O-알킬화하여 45(여기서, R2는 O-알킬이고, R3은 H임)를 생성한다. 화합물 44를 DAST와 같은 친핵성 플루오르화 시약에 의해 45(여기서, R2 및 R3은 F임)로 전환시킬 수 있다. 화합물 44를 케톤으로 산화시킨 다음, 리튬 또는 그리냐드 시약과 같은 유기금속 시약으로 친핵성 첨가하거나, 또는 DAST와 같은 친핵성 플루오르화 시약을 첨가하여, 45(여기서, R2(R5)는 알킬이고, R3은 F임)로 전환시킬 수 있다.
도 10은 5-클로로-4-니트로-1H-피라졸 3으로부터의 3-플루오로-1-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민 52의 예시적인 합성을 도시한다. 문헌에 기재된 방법을 사용하거나 또는 다이메틸설폭사이드와 같은 적합한 용매 중에서 피페리딘-4-온 하이드로클로라이드 수화물 및 칼륨 플루오라이드와 함께 3을 가열하여 1-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-온 46을 생성한다. 문헌에 기재된 방법을 사용하거나 또는 DMF와 같은 적합한 용매 중에서 트라이메틸실릴 클로라이드 및 트라이에틸아민과 함께 46을 가열하여 1-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)-4-(트라이메틸실릴옥시)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘 47을 생성한다. 문헌에 기재된 방법을 사용하거나 또는 적합한 온도에서 아세토니트릴 중의 셀렉트플루오르(등록상표)를 사용하여 47을 플루오르화시켜 3-플루오로-1-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-온 48을 생성한다. 48의 에틸 6-플루오로-1-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-옥소아제판-4-카복실레이트 49로의 고리 팽창은 문헌에 기재된 방법을 사용하거나 또는 적절한 온도에서 다이클로로메탄과 같은 적합한 용매 중의 에틸 다이아조아세테이트 및 보론 트라이플루오라이드 다이에틸 에터레이트를 사용하여 달성될 수 있다. 문헌에 기재된 방법에 의하거나 또는 적절한 온도에서 염산과 함께 49를 가열하여 탈카복실화시킴으로써 3-플루오로-1-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-온 50을 생성한다. 문헌에 기재된 방법에 의해 50을 환원성 아민화시켜 3-플루오로-1-(4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민 51을 생성한다. 다이클로로메탄과 같은 적합한 용매 중의 다이이소프로필에틸아민 하에 트라이플루오로아세트산 무수물을 사용하거나 또는 문헌에 기재된 방법을 사용하여 트라이플루오로아세트아마이드와 같은 적합한 보호기에 의해 51의 아민을 보호하여 아민-보호된 52를 수득할 수 있다.
실시예
실시예 1 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00088
4-니트로-1-H-피라졸(5g, 44.2 mmol)을 함유한 500 mL 환저 플라스크에 나트륨 하이드록사이드(1M, 200 mL) 및 다이메틸 설페이트(31 mL, 330 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 72시간 동안 교반하고, 혼합물을 CH2Cl2(2 x 150 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고, 용매를 증류하여 1-메틸-4-니트로-1H-피라졸을 백색 고체(4.30 g, 76%)로서 수득하였다.
WO 2007/99326에 따라, 500 mL 3구 환저 플라스크에 1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(4.30 g, 33.8 mmol) 및 THF(12 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, THF(1M, 88.4 mL, 90 mmol) 중의 리튬 헥사메틸다이실라자이드를 20분에 걸쳐 첨가 깔때기를 통해 적가하였다. 갈색 혼합물을 30분 동안 교반하고, 30분 동안 -45℃로 가온하였다. 혼합물을 다시 -78℃로 냉각하고, THF(20 mL)에 용해된 헥사클로로에탄(10.5 g, 44.2 mmol)을 15분에 걸쳐 첨가 깔때기를 통해 첨가하였다. 혼합물을 2.5시간 교반하고, -78℃에서 -40℃로 가온하고, 반응을 LCMS로 모니터링하였다. 반응 완료시, 반응을 포화 NH4Cl(150 mL) 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(100 mL)를 첨가하였다. 유기층을 분리하고, 수성 층을 에틸 아세테이트(100 mL)로 추출하였다. 합친 유기층을 물(150 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 유기 용매를 증류시켰다. 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(CH2Cl2/7% MeOH)로 정제하여 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸을 백색 고체(1.40 g, 20%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.13(s, 1H), 3.92(s, 3H); ESIMS m/z = 162.0(M+1)
실시예 2 3급-부틸 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트
Figure pct00089
10 mL 마이크로파 바이알에 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(150 mg, 0.93 mmol) 및 3급-부틸 아제판-4-일카바메이트(220 mg, 1.02 mmol)를 첨가하였다. 에탄올(4 mL) 및 다이이소프로필에틸아민(1.00 mL, 8.00 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 130℃에서 60분 동안 마이크로파로 조사하였다. 혼합물을 냉각시키고, 농축시키고, 플래시 크로마토그래피(헵탄/에틸 아세테이트 20% 내지 80%)로 정제하여 황색 오일(306 mg, 97%)을 수득하였다.
50 mL 환저 플라스크에 니트로 화합물(306 mg, 0.90 mmol), 철(202 mg, 3.61 mmol), 암모늄 클로라이드(241 mg, 4.5 mmol), 에탄올(10 mL) 및 물(1.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반하고, 반응을 LCMS로 모니터링하였다. 반응 완료시, 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트(30 mL) 및 K3PO4 (30 mL)의 10% 수용액으로 세척하였다. 유기층을 물(30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 유기 용매를 증류시켜 3급-부틸 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 98%(264 mg, 95%) 초과의 순도를 갖는 갈색 오일로서 수득하였다. ESIMS m/z = 310.1(M+1).
실시예 3 3급-부틸 1-(1-메틸-4-아미노-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일카바메이트
Figure pct00090
실시예 2에 기재된 절차에 따라, 3급-부틸 피페리딘-4-일카바메이트로 출발하여 3급-부틸 1-(1-메틸-4-아미노-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일카바메이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(173 mg, 70%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 296.1(M+1).
실시예 4 (S)-3급-부틸 1-(1-메틸-4-아미노-1H-피라졸-5-일)피페리딘-3-일카바메이트.
Figure pct00091
실시예 2에 기재된 절차에 따라, (S)-3급-부틸 피페리딘-3-일카바메이트로부터 출발하여 (S)-3급-부틸 1-(1-메틸-4-아미노-1H-피라졸-5-일)피페리딘-3-일카바메이트를 2 단계에 걸쳐 갈색 오일(206 mg, 75%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 296.1(M+1).
실시예 4a 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-(트라이플루오로메틸)피페리딘
Figure pct00092
중간체 22에 대한 절차에 따라, 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸 및 3-(트라이플루오로메틸)피페리딘으로부터 출발하여 107을 황색 오일(499 mg, 97%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 3.77(s, 3H), 3.41-3.32(m, 1H), 3.31-3.18(m, 2H), 3.07-2.97(m, 1H), 2.54-2.40(m, 1H), 2.13-2.06(m, 1H), 1.97-1.90(m, 1H), 1.80-1.60(m, 2H).
실시예 5 (S)-3급-부틸 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피롤리딘-3-일카바메이트
Figure pct00093
실시예 2에 기재된 절차에 따라, (S)-3급-부틸 피롤리딘-3-일카바메이트로부터 출발하여 (S)-3급-부틸 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피롤리딘-3-일카바메이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(162 mg, 62%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 282.1(M+1).
실시예 6 3급-부틸 4-((4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일옥시)메틸)피페리딘-1-카복실레이트
Figure pct00094
50 mL 환저 플라스크에 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(100 mg, 0.60 mmol), 3급-부틸 4-(하이드록시메틸)피페리딘-1-카복실레이트(200 mg, 0.93 mmol) 및 DMF(10 mL)를 첨가하였다. NaH(37 mg, 1.55 mmol)를 서서히 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 플래시 크로마토그래피(헵탄/에틸 아세테이트 20% 내지 80%)로 정제하여 오일(150 mg, 70%)을 수득하였다.
50 mL 환저 플라스크에 니트로 화합물(150 mg, 0.44 mmol), 철(173 mg, 3.10 mmol), 암모늄 클로라이드(199 mg, 3.71 mmol), 에탄올(10 mL) 및 물(1.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반하고, 반응을 LCMS로 모니터링하였따. 반응의 완료시, 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트(30 mL) 및 K3PO4(30 mL)의 10% 수용액으로 세척하였다. 유기층을 물(30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 유기 용매를 증류시켜 3급-부틸 4-((4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일옥시)메틸)피페리딘-1-카복실레이트를 98% 초과의 순도를 갖는 갈색 오일(135 mg, 99%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 311.1(M+1).
실시예 7 (R)-3급-부틸 1-(1-메틸-4-아미노-1H-피라졸-5-일)피페리딘-3-일카바메이트
Figure pct00095
실시예 2에 기재된 절차에 따라, (R)-3급-부틸 피페리딘-3-일카바메이트로 출발하여 (R)-3급-부틸 1-(1-메틸-4-아미노-1H-피라졸-5-일)피페리딘-3-일카바메이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(187 mg, 68%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 296.1(M+1).
실시예 8 3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일옥시)피페리딘-1-카복실레이트
Figure pct00096
실시예 6에 기재된 절차에 따라, 3급-부틸 4-하이드록시피페리딘-1-카복실레이트로 출발하여 3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일옥시)피페리딘-1-카복실레이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(102 mg, 50%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 297.1(M+1)
실시예 9 (R)-3급-부틸 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피롤리딘-3-일카바메이트
Figure pct00097
실시예 2에 기재된 절차에 따라, (R)-3급-부틸 피롤리딘-3-일카바메이트로 출발하여 (R)-3급-부틸 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피롤리딘-3-일카바메이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(159 mg, 61%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 282.1(M+1).
실시예 10 3급-부틸 4-((4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일아미노)메틸)피페리딘-1-카복실레이트
Figure pct00098
실시예 2에 기재된 절차에 따라, 3급-부틸 4-(아미노메틸)피페리딘-1-카복실레이트로 출발하여 3급-부틸 4-((4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일아미노)메틸)피페리딘-1-카복실레이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(124 mg, 43%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 310.1(M+1).
실시예 11 (S)-3급-부틸(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피롤리딘-3-일)메틸카바메이트
Figure pct00099
실시예 에 기재된 절차에 따라 2 및 출발 with(R)-3급-부틸 피롤리딘-3-일메틸카바메이트,(S)-3급-부틸(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피롤리딘-3-일)메틸카바메이트를 수득된 갈색 오일로서(230 mg, 84%) over two 단계. ESIMS m/z = 296.1(M+1).
실시예 12 (R)-3급-부틸(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피롤리딘-3-일)메틸카바메이트
Figure pct00100
실시예 2에 기재된 절차에 따라, (S)-3급-부틸 피롤리딘-3-일메틸카바메이트로 출발하여 (R)-3급-부틸(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피롤리딘-3-일)메틸카바메이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(200 mg, 73%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 296.1(M+1).
실시예 13 3급-부틸(1-(4-아미노-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸카바메이트
Figure pct00101
실시예 2에 기재된 절차에 따라, 3급-부틸 피페리딘-4-일메틸카바메이트로 출발하여 3급-부틸(1-(4-아미노-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸카바메이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(270 mg, 98%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 310.1(M+1).
실시예 14 (S)-3급-부틸(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피페리딘-3-일)메틸카바메이트
Figure pct00102
실시예 2에 기재된 절차에 따라, (R)-3급-부틸 피페리딘-3-일메틸카바메이트로 출발하여 (S)-3급-부틸(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피페리딘-3-일)메틸카바메이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(270 mg, 98%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 310.1(M+1).
실시예 15 (R)-3급-부틸(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피페리딘-3-일)메틸카바메이트
Figure pct00103
실시예 2에 기재된 절차에 따라, (S)-3급-부틸 피페리딘-3-일메틸카바메이트로 출발하여 (R)-3급-부틸(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피페리딘-3-일)메틸카바메이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(268 mg, 98%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 310.1(M+1).
실시예 16 (R)-벤질 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트
Figure pct00104
실시예 2에 기재된 절차에 따라, (R)-벤질 아제판-4-일카바메이트로 출발하여 (R)-벤질 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(191 mg, 60%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 344.1(M+1).
실시예 17 (S)-벤질 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트
Figure pct00105
실시예 2에 기재된 절차에 따라, (S)-벤질 아제판-4-일카바메이트로 출발하여 (S)-벤질 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(220 mg, 63%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 344.1(M+1).
실시예 18 3급-부틸 3-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-6-일카바메이트
Figure pct00106
실시예 2에 기재된 절차에 따라, 3급-부틸 3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-6-일카바메이트로 출발하여 3급-부틸 3-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-아자바이사이클로[3.1.0]헥산-6-일카바메이트를 2단계에 걸쳐 갈색 오일(130 mg, 48%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 294.1(M+1).
실시예 19 에틸 2-아미노-2-시아노아세테이트
Figure pct00107
물(250 mL) 중의 (E)-에틸 2-시아노-2-(하이드록시이미노)아세테이트(20g, 0.14 mol)의 교반된 용액에 물(160 mL) 중의 NaHCO3의 포화 용액을 첨가하고, 그 다음 Na2S2O4(60 g, 0.423 mol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 35℃까지 가온하고 2시간 더 교반하였다. 그 다음, 그것을 NaCl(150 g)로 포화시키고 DCM(3 x 350 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 에틸 2-아미노-2-시아노아세테이트를 적색 오일(7.8 g, 43%)로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 4.45(s, 1H), 4.34(q, J = 7.0 Hz, 2H), 1.36(t, J = 7.0 Hz, 3H); MS(ESI) m/z: 129 [M+H+].
실시예 20 에틸 2-벤즈아미도-2-시아노아세테이트
Figure pct00108
DCM(15 mL) 중의 에틸 2-아미노-2-시아노아세테이트(0.64 g, 5 mmol)의 교반된 용액에 물(15 mL) 중의 NaHCO3의 포화 용액을 첨가하였다. 격렬하게 교반하면서, 벤조일 클로라이드(0.84 g, 6 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가 30분 동안 주위 온도에서 교반하고, 이때 이를 DCM(3 x 15 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 생성 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(5:1 PE/EtOAc)로 정제하여 에틸 2-벤즈아미도-2-시아노아세테이트(0.25 g, 22%)를 백색 고체로서 수득하였다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 7.83-7.85(m, 2H), 7.59(t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.49(t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.02(d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.72(d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.40(q, J = 7.5 Hz, 2H), 1.39(t, J = 7.0 Hz, 3H); MS(ESI) m/z: 233 [M+H+].
실시예 21 에틸 5-아미노-2-페닐티아졸-4-카복실레이트
Figure pct00109
피리딘(20 mL) 중의 에틸 2-벤즈아미도-2-시아노아세테이트(0.46 g, 2 mmol)의 교반된 용액에 라웨슨 시약(0.81 g, 2 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15시간 동안 가열 환류시켰다. 그 다음, 이를 농축하고 EtOAc(40 mL)로 희석시켰다. 희석된 혼합물을 물(3 x 20 mL) 및 염수(10 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(10:1 PE/EtOAc)로 정제하여 에틸 5-아미노-2-페닐티아졸-4-카복실레이트(0.2 g, 40%)를 황색 고체로서 수득하였다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 7.80(d, J = 6.5 Hz, 1H), 7.36-7.41(m, 3H), 4.43(q, J = 7.0 Hz, 2H), 1.44(t, J = 7.0 Hz, 3H); MS(ESI) m/z: 249 [M+H+].
실시예 22 에틸 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-페닐티아졸-4-카복실레이트
Figure pct00110
CH3CN(10 mL) 중의 화합물 에틸 5-아미노-2-페닐티아졸-4-카복실레이트(248 mg, 1 mmol)의 용액에 DMAP(6 mg, 0.05 mmol)를 첨가하고, 그 다음 (Boc)2O(262 mg, 1.2 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가 30분 동안 주위 온도에서 유지하였다. 그 다음, 혼합물을 진공에서 증발시켜 에틸 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-페닐티아졸-4-카복실레이트를 적색 고체(340 mg, 95%)로서 수득하고, 이를 다음 단계에서 추가 정제 없이 사용하였다.
실시예 23 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-페닐티아졸-4-카복실산
Figure pct00111
MeOH/H2O(10 mL, 1:1) 중의 화합물 에틸 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-페닐티아졸-4-카복실레이트(348 mg, 1 mmol)의 용액에 LiOH.H2O(20 mg, 5 mmol)를 첨가하였다. TLC로부터 출발 물질이 사라질 때까지 반응 혼합물을 50 내지 55℃로 가열하였다. 이를 약 0 내지 4℃로 냉각시키고, pH가 약 5로 될 때까지 진한 HCl을 적가하였다. 그 다음, 생성 혼합물을 DCM(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(2 x 20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(50:1 DCM:MeOH)로 정제하여 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-페닐티아졸-4-카복실산(0.22 g, 68%)을 백색 고체로서 수득하였다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.69(s, 1H), 7.89-7.91(m, 2H), 7.46-7.47(m, 3H), 1.57(s, 9H); MS(ESI) m/z: 321 [M+H+]
실시예 24 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복실산
Figure pct00112
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 2-플루오로벤조일 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.70(s, 1H), 8.19-8.23(m, 1H), 7.42-7.45(m, 1H), 7.20-7.30(m, 2H), 1.57(s, 9H); MS(ESI) m/z: 339 [M+H+].
실시예 25 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산
Figure pct00113
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 2, 6-다이플루오로벤조일 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CD3OD, 500 MHz) δ(ppm): 7.42-7.46(m, 1H), 7.06(t, J = 8.5 Hz, 2H), 1.47(s, 9H); MS(ESI) m/z: 355 [M+H+].
실시예 26 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-클로로페닐)티아졸-4-카복실산
Figure pct00114
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 2-클로로벤조일 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-클로로페닐)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(DMSO, 500 MHz) δ(ppm): 13.57(s, 1H), 10.05(s, 1H), 8.14-8.17(m, 1H), 7.63-7.65(m, 1H), 7.49-7.51(m, 2H), 1.53(s, 9H); MS(ESI) m/z: 355 [M+H+].
실시예 27 2-(5-브로모-2-플루오로페닐)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산
Figure pct00115
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 5-브로모-2-플루오로벤조일 클로라이드를 2-(5-브로모-2-플루오로페닐)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.70(s, 1H), 8.32-8.34(m, 1H), 7.49-7.52(m, 1H), 7.09-7.13(m, 1H), 1.57(s, 9H); MS(ESI) m/z: 418 [M+H+].
실시예 28 2-(5-브로모-2-클로로페닐)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산
Figure pct00116
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 5-브로모-2-클로로벤조일 클로라이드를 2-(5-브로모-2-클로로페닐)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.70(s, 1H), 8.31(d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.47(dd, J = 2.5 Hz, J = 8.5 Hz, 1H), 7.35(d, J = 9.0 Hz, 1H), 1.57(s, 9H); MS(ESI) m/z: 433 [M+H+].
실시예 29 2-(3-브로모페닐)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산
Figure pct00117
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 3-브로모벤조일 클로라이드를 2-(3-브로모페닐)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.68(s, 1H), 8.08(s, 1H), 7.78(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.56(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.32(t, J = 8.0 Hz, 1H), 1.57(s, 9H); MS(ESI) m/z: 399 [M+H+].
실시예 30 2-(4-브로모-2-플루오로페닐)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산
Figure pct00118
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 4-브로모-2-플루오로벤조일 클로라이드를 2-(4-브로모-2-플루오로페닐)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.67(s, 1H), 8.07(t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.42(d, J = 9.5 Hz, 1H), 1.57(s, 9H); MS(ESI) m/z: 417 [M+H+].
실시예 31 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(피리딘-2-일)티아졸-4-카복실산
Figure pct00119
주위 온도에서 THF(80 mL) 중의 피콜린산(1.23 g, 10 mmol), EDC.HCl(1.91 g, 10 mmol) 및 HOBT(1.35 g, 10 mmol)의 용액에 DIPEA(3.6 g, 30 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 동일한 온도에서 유지하고, 이때 THF(5 mL) 중의 에틸 2-아미노-2-시아노아세테이트(1.28 g, 10 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 추가 6시간 동안 주위 온도에서 교반하였다. 그 다음, 이를 농축시키고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(5:1 PE/EtOAc)로 정제하여 에틸 2-시아노-2-(피콜린아미도)아세테이트(0.7 g, 30%)를 황색 고체로서 수득하였다.
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 에틸 2-시아노-2-(피콜린아미도)아세테이트를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(피리딘-2-일)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.72(s, 1H), 8.61(d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.09(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.81(t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.34(dd, J = 5.5 Hz, J = 7.0 Hz, 1H), 1.57(s, 9H); MS(ESI) m/z: 322 [M+H+].
실시예 32 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-이소프로필티아졸-4-카복실산
Figure pct00120
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 이소부티릴 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-이소프로필티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.54(s, 1H), 3.16-3.21(m, 1H), 1.54(s, 9H), 1.37(d, J = 7.0 Hz, 6H); MS(ESI) m/z: 287 [M+H+].
실시예 33 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-사이클로헥실티아졸-4-카복실산
Figure pct00121
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 사이클로헥산카복실산 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-사이클로헥실티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.53(s, 1H), 2.84-2.89(m, 1H), 2.08-2.12(m, 2H), 1.84(dd, J = 3.5 Hz, J = 10.0 Hz, 2H), 1.73(d, J = 13.0 Hz, 1H), 1.53(s, 9H), 1.35-1.50(m, 4H), 1.25-1.27(m, 1H); MS(ESI) m/z: 327 [M+H+].
실시예 34 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-o-톨릴티아졸-4-카복실산
Figure pct00122
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 2-메틸벤조일 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-o-톨릴티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CD3OD, 500 MHz) δ(ppm): 7.34(s, 1H), 7.13-7.22(m, 3H), 2.32(s, 3H), 1.43(s, 9H); MS(ESI) m/z: 335 [M+H+].
실시예 35 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-메톡시페닐)티아졸-4-카복실산
Figure pct00123
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 2-메톡시벤조일 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-메톡시페닐)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CD3OD, 500 MHz) δ(ppm): 9.63(s, 1H), 8.27(d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.42(t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.09(t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.04(d, J = 9.0 Hz, 1H), 1.57(s, 9H); MS(ESI) m/z: 351 [M+H+]
실시예 36 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-(트라이플루오로메틸)페닐)티아졸-4-카복실산
Figure pct00124
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 2-(트라이플루오로메틸)벤조일 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-(트라이플루오로메틸)페닐)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CD3OD, 500 MHz) δ(ppm): 7.76(d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.58-7.64(m, 3H), 1.46(s, 9H); MS(ESI) m/z: 389 [M+H+].
실시예 37 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-메틸티아졸-4-카복실산
Figure pct00125
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 아세틸 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-메틸티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.62(s, 1H), 2.62(s, 3H), 1.54(s, 9H); MS(ESI) m/z: 259 [M+H+].
실시예 38 5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산
Figure pct00126
질소 분위기(N2) 하에, 0℃에서 HCOOH(2.44 g, 53 mmol)를 Ac2O(6.48 g, 63.6 mmol)에 첨가하였다. 이를 주위 온도로 가온시킨 후, 반응물을 15시간 동안 50℃로 가열하였다. 이를 주위 온도로 냉각시켰다. 그 다음, 이 혼합된 산 무수물을 0℃에서 무수 THF(5 mL) 중의 에틸 2-아미노-2-시아노아세테이트(128 mg, 1 mmol)의 용액에 적가하였다. 냉각 욕을 제거한 후, 반응을 추가 1시간 동안 주위 온도로 유지하였다. 반응 혼합물을 농축하고 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(5:1 PE/EtOAc)로 정제하여 에틸 2-시아노-2-포름아미도아세테이트(110 mg, 70%)를 백색 고체로서 수득하였다.
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 에틸 2-시아노-2-포름아미도아세테이트를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.70(s, 1H), 8.29(s, 1H), 1.55(s, 9H); MS(ESI) m/z: 245 [M+H+].
실시예 39 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산
Figure pct00127
DCM(50 mL) 중의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산(1.72 g, 10 mmol)의 용액에 NBS(1.95 g, 11 mmol)를 3회 첨가하고, 반응 혼합물을 주위 온도에서 1시간 동안 교반하였다. 반응을 진공에서 농축시키고, 생성 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(6:1 페트-에터-EtOAc)로 정제하여 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산(1.75 g, 70%)을 백색 고체로서 수득하였다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 13.65(s, 1H), 10.03(s, 1H), 1.49(s, 9H). MS(ESI) m/z: 324 [M+H+]
실시예 40 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산
Figure pct00128
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 2,5-다이플루오로벤조일 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.68(s, 1H), 7.87-7.91(m, 1H), 7.15-7.26(m, 1H), 7.08-7.13(m, 1H), 1.57(s, 9H); MS(ESI) m/z: 357 [M+H+]
실시예 41 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,4-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산
Figure pct00129
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 2,4-다이플루오로벤조일 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,4-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.66(s, 1H), 8.16-8.21(m, 1H), 6.95-7.04(m, 2H), 1.62(s, 9H); MS(ESI) m/z: 357 [M+H+]
실시예 42 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,3-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산
Figure pct00130
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 2,3-다이플루오로벤조일 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,3-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CD3OD, 400 MHz) δ(ppm): 7.45(s, 1H), 7.07-7.16(m, 2H), 1.42(s, 9H); MS(ESI) m/z: 357 [M+H+].
실시예 43 2-벤질-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산
Figure pct00131
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 2-페닐아세틸 클로라이드를 2-벤질-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.63(s, 1H), 7.27-7.35(m, 5H), 4.25(s, 2H), 1.50(s, 9H); MS(ESI) m/z: 335 [M+H+].
실시예 44 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(퀴놀린-7-일)티아졸-4-카복실산
Figure pct00132
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 퀴놀린-7-카보닐 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(퀴놀린-7-일)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(DMSO, 500 MHz) δ(ppm): 10.14(s, 1H), 9.11(d, J = 5 Hz, 1h), 8.68(s, 1H), 8.55(s, 1H), 8.21-8.25(m, 2H), 7.75-7.77(m, 1H), 1.54(s, 9H) ; MS(ESI) m/z: 372 [M+H+]
실시예 45 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(이미다조[1,2-a]피리딘-2-일)티아졸-4-카복실산
Figure pct00133
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 이미다조[1,2-a]피리딘-2-카보닐 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(이미다조[1,2-a]피리딘-2-일)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(DMSO, 500 MHz) δ(ppm): 10.12(s, 1H), 8.58(d, 5Hz, 1H), 8.45(s, 1H), 7.61(d, 5Hz, 1H), 7.31-7.34(m, 1H), 6.97-6.99(m, 1H), 1.53(s, 9H); MS(ESI) m/z: 361 [M+H+].
실시예 46 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-3급-부틸티아졸-4-카복실산
Figure pct00134
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 피발로일 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-3급-부틸티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(CDCl3, 500 MHz) δ(ppm): 9.55(s, 1H), 1.55(s, 9H), 1.42(s, 9H); MS(ESI) m/z: 301 [M+H+].
실시예 47 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(3-클로로페닐)티아졸-4-카복실산
Figure pct00135
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 3-클로로벤조일 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(3-클로로페닐)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(DMSO, 500 MHz) δ(ppm): 9.67(s, 1H), 7.91(s, 1H), 7.72(d, J = 7Hz, 1H), 7.38-7.40(m, 2H), 1.56 s, 9H ); MS(ESI) m/z: 355 [M+H+].
실시예 48 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(4-클로로페닐)티아졸-4-카복실산
Figure pct00136
실시예 19 내지 23으로부터 및 도 2에 도시된 절차에 따라, 4-클로로벤조일 클로라이드를 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(4-클로로페닐)티아졸-4-카복실산으로 전환시켰다: 1H-NMR(DMSO, 500 MHz) δ(ppm): 9.66(s, 1H), 7.81(d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.42(d, J = 8.5 Hz, 2H), 1.56(s, 9H); MS(ESI) m/z: 355 [M+H+].
실시예 49 5-아미노-N-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드
Figure pct00137
실시예 113에 기재된 절차에 따라, 1-메틸-1H-피라졸-4-아민 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산을 반응시켜 5-아미노-N-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드를 2단계에 걸쳐 백색 고체(13 mg, 32%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 336.1(M+1)
실시예 50 3급-부틸 3-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)페닐카바메이트
Figure pct00138
10 mL 마이크로파 바이알에 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(150 mg, 0.93 mmol), 3-(3급-부톡시카보닐아미노)페닐붕산(440 mg, 1.86 mmol), 다이클로로[1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]팔라듐(II)(152 mg, 0.019 mmol), 1:1 M 용액의 Na2CO3/KOAc(1 mL) 및 아세토니트릴(4 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 40분 동안 마이크로파에 의해 130℃로 조사하고, 혼합물을 냉각시키고, 농축시키고, 플래시 크로마토그래피(헵탄/에틸 아세테이트 20% 내지 95%)로 정제하여 황색 오일을 수득하였다. 50 mL 환저 플라스크에 니트로 화합물(120 mg, 0.90 mmol), 철(156 mg, 2.8 mmol), 암모늄 클로라이드(200 mg, 3.7 mmol), 에탄올(10 mL) 및 물(1.5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 반응을 LCMS로 모니터링하였다. 반응의 완료시, 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 에틸 아세테이트(30 mL) 및 K3PO4 (30 mL)의 10% 수용액으로 세척하였다. 유기층을 물(30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 유기 용매를 증류시켜 3급-부틸 3-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)페닐카바메이트를 2단계에 걸쳐 순도 98% 초과의 갈색 오일(120 mg, 45%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 289.1(M+1)
실시예 51 1-메틸-5-o-톨릴-1H-피라졸-4-아민
Figure pct00139
실시예 2에 기재된 절차에 따라, o-톨릴붕산으로 출발하여 1-메틸-5-o-톨릴-1H-피라졸-4-아민을 2단계에 걸쳐 갈색 오일(148 mg, 85%)로서 수득하였다. ESIMS m/z = 188.1(M+1)
실시예 52 2-(4-사이클로프로필-2-플루오로페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란
Figure pct00140
단계 1: 3-플루오로-4-니트로페닐 트라이플루오로메탄설포네이트
0℃에서 무수 DCM(100.0 mL) 중의 3-플루오로-4-니트로페놀(10.00 g, 63.65 mmol) 및 트라이플루오로메탄설폰산 무수물(20.0 mL, 119 mmol, 1.87 당량)의 교반된 용액에 트라이에틸아민(33.27 mL, 238.7 mmol, 3.75 당량)을 적가하였다. 생성 갈색 반응 혼합물을 2시간 동안 0℃에서 교반하고, 그 다음 16시간 동안 주위 온도에서 교반하였다. 반응 혼합물을 서서히 물로 켄칭하고, DCM(3 x 100 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수로 세척하고(1x), Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 생성물을 0 내지 65% DCM/헥산으로 용리되는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 15.67 g(85.1%)의 3-플루오로-4-니트로페닐 트라이플루오로메탄설포네이트를 오일로서 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, CDCl3) δ 8.23(t, J = 8.52 Hz, 1H), 7.34-7.27(m, 2H).
단계 2: 4-사이클로프로필-2-플루오로-1-니트로벤젠
물(19.8 mL, 39.56 mmol) 및 톨루엔(39.5 mL) 중의 3-플루오로-4-니트로페닐 트라이플루오로메탄설포네이트(7.15 g, 24.73 mmol), 사이클로프로필붕산(2.55 g, 29.67 mmol), 다이클로로메탄(1:1)(1.62 g, 1.98 mmol)으로 착화된 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)-페로센]다이클로로팔라듐(II), 및 2M 세슘 카보네이트의 혼합물을 20분 동안 탈기하였다. 반응 혼합물을 N2 하에 2.5시간 동안 90℃에서 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 에틸 아세테이트(200 mL)로 희석하고, 셀라이트 패드를 통해 여과시켰다. 여액을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에서 농축시켰다. 조 잔사를 0 내지 75% DCM/헥산으로 용리되는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 4.11 g(91.7%)의 4-사이클로프로필-2-플루오로-1-니트로벤젠을 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, MeOD) δ 7.98(dd, J = 10.2, 6.6 Hz, 1H), 7.12 - 7.02(m, 2H), 2.11 - 1.97(m, 1H), 1.20 - 1.11(m, 2H), 0.89 - 0.82(m, 2H).
단계 3: 4-사이클로프로필-2-플루오로아닐린
물(19.8 mL) 및 3:2:1 v/v EtOH:THF:H2O(86 mL) 중의 4-사이클로프로필-2-플루오로-1-니트로벤젠(3.36 g, 18.55 mmol), 분말 철(4.35 g, 77.9 mmol) 및 2M 암모늄 클로라이드의 혼합물을 17시간 동안 N2 하에 환류 하에 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 셀라이트 패드를 통해 여과시켰다. 셀라이트 패드를 에틸 아세테이트(약 50 mL)로 잘 세정하였다. 여액에 포화 수성 NaHCO3 용액을 서서히 첨가하여 반응 혼합물을 중화시켰다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 200 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 잔사를 0 내지 75% 에틸 아세테이트/헥산으로 용리되는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 2.80 g(99%)의 주황색 오일을 수득하고, 이를 20℃에서 경화시켰다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 6.75 - 6.63(m, 3H), 3.57(s, 2H), 1.87 - 1.72(m, 1H), 0.93 - 0.83(m, 2H), 0.64 - 0.51(m, 2H) ; MS(ESI) m/z: 152.3 [M+H] +.
단계 4: 4-사이클로프로필-2-플루오로-1-아이오도벤젠
0℃에서 물(20 mL) 중의 4-사이클로프로필-2-플루오로아닐린(1.63 g, 10.78 mmol)의 교반된 혼합물에 진한 황산(8.6 mL, 15.0 당량)을 적가하면서 온도를 일정하게 0℃로 유지하였다. 물(2.7 mL) 중의 나트륨 니트라이트(781.0 mg, 11.32 mmol, 1.05 당량)의 용액을 첨가하고 5분 동안 교반하였다. 그 다음, 생성 반응 혼합물을 물(9.7 mL) 중의 칼륨 아이오다이드(3.76 g, 22.64 mmol, 2.1 당량)의 용액에 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 3시간 동안 교반하였다. DCM(400 mL)을 냉각된 반응물에 첨가하였다. 2상 층들을 분리하고, 수성 층을 DCM(2 x 150 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 포화 수성 Na2S2O4, 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 잔사를 100% 헵탄으로 용리되는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 2.01 g(71.28%)의 4-사이클로프로필-2-플루오로-1-아이오도벤젠을 맑은 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.57(dd, J = 8.0, 6.9 Hz, 1H), 6.76(dd, J = 9.4, 1.9 Hz, 1H), 6.64(dd, J = 8.2, 1.9 Hz, 1H), 1.94 - 1.77(m, 1H), 1.09 - 0.95(m, 2H), 0.79 - 0.56(m, 2H).
단계 5: 고압 튜브에 4-사이클로프로필-2-플루오로-1-아이오도-벤젠(1.32 g, 5.04 mmol), 비스피나콜 에스터 보로네이트(1.53 g, 6.04 mmol), 칼륨 아세테이트(1.98 g, 20.15 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II)(368.5 mg, 0.50 mmol), 및 N,N-다이메틸포름아미드(35 mL)를 넣었다. 반응 혼합물을 15분 동안 N2로 탈기하였다. 용기를 밀폐시키고, 반응 혼합물을 90℃에서 16시간 동안 교반하였다. 냉각된 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(75 mL) 및 물(25 mL)로 희석시키고, 그 다음 셀라이트 패드를 통해 여과시켰다. 2상 층들을 분리하고, 유기층을 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 잔사를 0 내지 75% EA/헵탄으로 용리되는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 859.0 mg(65.1%)의 2-(4-사이클로프로필-2-플루오로페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란을 맑은 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.58(s, 1H), 6.83(d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.68(d, J = 10.8 Hz, 1H), 1.91 - 1.81(m, 1H), 1.33(s, 12 H), 0.98(dd, J = 8.3, 2.0 Hz, 2H), 0.74 - 0.66(m, 2H)
실시예 53 ((R)-1-{4-[(2-브로모-5-3급-부톡시카보닐아미노-티아졸-4-카보닐)-아미노]-2-메틸-2H-피라졸-3-일}-퍼하이드로-아제핀-4-일)-카밤산 벤질 에스터
Figure pct00141
무수 N,N-다이메틸포름아미드(22 mL) 중의 2-브로모-5-(이소프로폭시카보닐아미노)-티아졸-4-카복실산(650.0 mg, 2.01 mmol) 및 [(R)-1-(4-아미노-2-메틸-2H-피라졸-3-일)-아제판-4-일]-카밤산 벤질 에스터(828.9 mg, 2.41 mmol, 1.2 당량)의 교반된 용액에 HATU(1.07g, 2.81 mmol, 1.4 당량)를 첨가하고, 그 다음 N,N-다이이소프로필에틸아민(0.88 mL, 5.03 mmol, 2.5 당량)을 첨가하고, 반응 혼합물을 7일 동안 N2 하에 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(150 mL)로 희석시켰다. 유기층을 50% 염수/물, 물 및 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 물질을 45 내지 100% 에틸 아세테이트/헵탄으로 용리되는 플래시 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 1.30 g(79.7%)의 ((R)-1-{4-[(2-브로모-5-3급-부톡시카보닐아미노-티아졸-4-카보닐)-아미노]-2-메틸-2H-피라졸-3-일}-퍼하이드로-아제핀-4-일)-카밤산 벤질 에스터를 점착성 겔로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.28(s, 1H), 8.39(s, 1H), 7.74(s, 1H), 7.33(s, 5H), 5.09(s, 2H), 4.98(s, 1H), 3.89(s, 1H), 3.72(s, 3H), 3.36 - 3.21(m, 2H), 3.16 - 3.03(m, 2H), 2.19 - 2.01(m, 2H), 2.00 - 1.61(m, 4H), 1.51(s, 9 H)
실시예 54 N-(5,5-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00142
데스-마틴(Dess-Martin) 퍼아이오디난(2.3 g, 5.4 mmol)을 DCM(25 mL) 중의 벤질 4-아지도-5-하이드록시아제판-1-카복실레이트(1.3 g, 4.5 mmol)의 용액에 분획 첨가하였다. 18시간 동안 실온에서 교반한 후, 혼합물을 DCM으로 희석하고, 수성 NaHCO3(40 mL)에 이어서 수성 Na2S2O3 (20%, 40 mL)으로 켄칭하였다. 생성 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 벤질 4-아지도-5-옥소아제판-1-카복실레이트(1.10 g, 84%)를 맑은 오일로서 수득하였다. DCM(10 mL) 중의 상기 오일(1.10 g, 3.8 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중의 50%, 3.5 mL, 9.5 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM으로 희석하고, 얼음/물 욕에서 냉각시키고, 포화 수성 NaHCO3(20 mL)을 적가하여 켄칭하였다. 비등이 관찰되었다. 생성 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 유기층을 분리시키고, Na2SO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 벤질 5-아지도-4,4-다이플루오로아제판-1-카복실레이트(0.65 g, 56%)를 맑은 오일로서 수득하였다. 이 오일을 THF(10 mL) 및 물(2 mL)에 용해시키고, 트라이페닐포스핀(0.58 g, 2.2 mmol)을 첨가하였다. After 교반 및 가열 at 60℃ for 18 hr, the 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 DCM에 용해시키고, 유기층을 물로 세척하고, 분리시키고, Na2SO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 물/얼음 욕에서 냉각된 DCM(20 mL) 중의 조 생성물에 DIPEA(1.1 mL, 6.36 mmol)를 첨가하고, 그 다음 트라이플루오로아세트산 무수물(0.75 mL, 5.3 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 실온으로 가온하고, 18시간 동안 교반하고, DCM으로 희석하였다. 물을 첨가하고, 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 60% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 벤질 4,4-다이플루오로5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-카복실레이트(0.59 g, 73%)를 맑은 오일로서 수득하였다. 이러한 트라이플루오로아세트아미드(0.57 g, 1.5 mmol)를 MeOH(50 mL)에 용해시키고, H-큐브(Cube)(등록상표)(충분한 H2 모드, 70℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 조 N-(5,5-다이플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 생성하였다. EtOH(4 mL) 중의 아제판(0.37 g, 1.5 mmol)의 용액에 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(0.73 g, 4.5 mmol) 및 DIPEA(0.65 mL, 3.8 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 6시간 동안 130℃에서 마이크로파로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 N-(5,5-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 오일(0.31 g, 56%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.05(s, 1H), 6.77(d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.72-4.58(m, 1H), 3.80(s, 3H), 3.55-3.39(m, 2H), 3.33-3.18(m, 2H), 2.52-2.17(m, 3H), 2.14-2.04(m, 1H).
실시예 55 3급-부틸 4-(5-(4,4-다이플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00143
MeOH(20 mL) 중의 N-(5,5-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(0.29 g, 0.78 mmol)의 용액을 H-큐브(충분한 H2 모드, 70℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 조 아민을 생성하였다. DCM(15 mL) 중의 상기 아민(0.26 g, 0.78 mmol)의 용액에 DIPEA(0.68 mL, 3.9 mmol), PyBOP(0.61 g, 1.17 mmol) 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(0.30 g, 0.86 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM으로 희석시키고 물로 세척하였다. 유기층을 분리시키고, Na2SO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 80% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-(5-(4,4-다이플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)-아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일카바메이트를 백색 고체(0.37 g, 69%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.28(s, 1H), 8.71(s, 1H), 7.82(s, 1H), 7.42-7.33(m, 1H), 7.11-7.01(m, 2H), 6.72(d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.73-4.57(m, 1H), 3.77(s, 3H), 3.51-3.37(m, 2H), 3.36-3.25(m, 2H), 2.49-2.36(m, 2H), 2.25-2.03(m, 2H), 1.55(s, 9H).
실시예 56 3,3-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘
Figure pct00144
EtOH(3 mL) 중의 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(0.1 g, 4.5 mmol), 3,3-다이플루오로피페리딘 하이드로클로라이드(0.14 g, 0.93 mmol) 및 DIPEA(0.5 mL, 2.8 mmol)의 혼합물을 1시간 동안 130℃에서 마이크로파로 가열하였다. 추가적인 DIPEA(0.5 mL, 2.8 mmol) 및 3,3-다이플루오로피페리딘 하이드로클로라이드(0.29 g, 1.8 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 130℃에서 마이크로파로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 60% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3,3-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘을 황색 오일(127 mg, 83%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 3.80(s, 3H), 3.41-3.29(m, 2H), 3.26-3.04(m, 2H), 2.17-2.03(m, 2H), 1.97-1.88(m, 2H).
실시예 57 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(3,3-다이플루오로피페리딘-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00145
실시예 55의 절차에 따라, 3,3-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로 출발하여 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(3,3-다이플루오로피페리딘-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 크림 고체(57 mg, 20%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.33(s, 1H), 8.67(s, 1H), 7.71(s, 1H), 7.41-7.32(m, 1H), 7.11-7.01(m, 2H), 3.76(s, 3H), 3.32(t, J = 11.0 Hz, 2 H), 3.19-3.13(m, 2H), 2.10-1.97(m, 2H), 1.94-1.85(m, 2H), 1.53(s, 9H).
실시예 58 3급-부틸 3-(메틸(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아미노)프로필카바메이트
Figure pct00146
EtOH(5 mL) 중의 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(0.81 g, 5 mmol), 3급-부틸 3-아미노프로필카바메이트(0.85 g, 4.88 mmol) 및 DIPEA(1.8 mL, 10.5 mmol)의 혼합물을 90분 동안 130℃에서 마이크로파로 가열하였다. 냉각시 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일아미노)프로필카바메이트를 황색 검(1.27 g, 85%)으로서 생성하였다. DMF(5 mL) 중의 상기 검(0.3 g, 1 mmol), K2CO3 (0.41 g, 3 mmol) 및 메틸 아이오다이드(0.1 mL, 1.58 mmol)의 혼합물을 18시간 동안 60℃에서 교반하였다. 더 많은 메틸 아이오다이드(0.1 mL, 1.58 mmol)를 첨가하고, 60℃에서 24시간 동안 교반을 계속하였다. 반응 혼합물을 냉각시키고 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(100 mL) 중에서 분쇄하고, 여과하고, 그 여액을 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 3-(메틸(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아미노)프로필카바메이트를 담황색 검(0.122 g, 38%)으로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 4.60(s, 1H), 3.77(s, 3H), 3.20-3.14(m, 4H), 2.86(s, 3H), 1.72-1.61(m, 2H), 1.42(s, 9H).
실시예 59 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(3급-부틸-(3-메틸아미노)프로필카바모일-3-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00147
MeOH(15 mL) 중의 3급-부틸 3-(메틸(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아미노)프로필카바메이트(122 mg, 0.39 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2 모드, 50℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 적색 오일(0.12 g)을 제공하였다. DCM(10 mL) 중의 상기 오일의 용액에 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(166 mg, 0.47 mmol), PyBOP(0.33 g, 0.64 mmol) 및 DIPEA(0.5 mL, 2.86 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 66시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(20 ml)을 첨가하고, 30분 동안 교반을 계속하였다. 층들을 분리하고, 수성 층을 DCM으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(3급-부틸-(3-메틸아미노)프로필카바모일-3-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 백색 고체(207 mg, 90%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.37(s, 1H), 8.74(s, 1H), 7.87(s, 1H), 7.42-7.32(m, 1H), 7.10-7.02(m, 2H), 4.65(s, 1H), 3.75(s, 3H), 3.20-3.14 (m, 2H), 3.10(t, J = 7 Hz, 2H), 2.85(s, 3H), 1.76-1.66(m, 2H), 1.55(s, 9H), 1.39(s, 9H).
실시예 60 5-클로로-1-에틸-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00148
실시예 1에 따라, 1-에틸-4-니트로피라졸로 출발하여 5-클로로-1-에틸-4-니트로-1H-피라졸을 무색 고체(1.3 g, 74%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.16(s, 1H), 4.26(q, J = 7Hz, 2H), 1.50(t, J = 7Hz, 3H).
실시예 61 5-클로로-1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00149
실시예 1에 따라, 1-사이클로프로필메틸-4-니트로피라졸로 출발하여 5-클로로-1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸을 무색 오일(1.16 g, 56%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.17(s, 1H), 4.07(d, J = 7Hz, 2H), 1.39-1.28(m, 1H), 0.66-0.59(m, 2H), 0.50-0.40(m, 2H).
실시예 62 5-클로로-1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00150
실시예 1에 따라, 1-사이클로프로필-4-니트로피라졸로 출발하여 5-클로로-1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸을 무색 고체(0.23 g, 63%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.09(s, 1H), 3.62-3.54(m, 1H), 1.38-1.28(m, 2H), 1.25-1.13(m, 2H).
실시예 63 (R)-N-(아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00151
MeOH(100 mL) 중의 (R)-3급-부틸 4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-카복실레이트(3.25 g, 0.33 mmol)의 용액을 1.5시간 동안 10% Pd/C(1 g)의 존재 하에 수소 기체 분위기 하에서 실온에서 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 (R)-3급-부틸 4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-카복실레이트를 담회색 오일(2 g, 100%)로서 수득하였다. 실온에서 DCM(100 mL) 중의 상기 오일(1.8 g, 8.4 mmol) 및 DIPEA(3 mL, 17.18 mmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산 무수물(1.31 mL, 9.27 mmol)을 5분에 걸쳐 적가하고, 생성 담황색 용액을 18시간 동안 교반하였다. 포화 수성 나트륨 수소 카보네이트(150 mL)를 첨가하고, 1시간 동안 교반을 계속하였다. 층들을 분리하고, 유기물을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 (R)-3급-부틸 4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-카복실레이트를 담황색 오일(2.61 g, 100%)로서 제공하였다. 실온에서 DCM(50 mL) 중의 상기 오일(2.6 g, 8.38 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(25 mL)을 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM에 용해시키고, DCM 및 MeOH으로 세척되고 MeOH 중의 1 N 암모니아로 용리되는 SCX 칼럼에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 (R)-N-(아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 오일(1.3 g, 74%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.83(s, 1H), 4.44-4.37(m, 1H), 3.13-3.03(m, 2H), 2.88(dt, J = 13.2, 6.6 Hz, 1H), 2.65-2.55(m, 1H), 2.03-1.79(m, 3H), 1.75(s, 1H), 1.69-1.58(m, 3H).
실시예 64 (S)-N-(아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00152
실시예 510의 절차에 따라, (S)-3급-부틸 4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-카복실레이트로 출발하여 (S)-N-(아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 오일(1.35 g, 3단계에 걸쳐 75%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.86(s, 1H), 4.44-4.37(m, 1H), 3.15-3.03(m, 2H), 2.92-2.81(m, 1H), 2.67-2.55(m, 1H), 2.02-1.81(m, 4H), 1.76-1.56(m, 3H).
실시예 64a 3급-부틸 3-플루오로-5-(4-메톡시벤질옥시)아제판-1-카복실레이트
Figure pct00153
아세토니트릴(10 mL) 중의 (Z)-3급-부틸 3-옥소-2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀-1-카복실레이트(2 g, 9.48 mmol), (4-메톡시페닐)메탄올(6.55 g, 47.4 mmol) 및 DBU(0.14 mL, 0.95 mmol)의 용액을 23시간 동안 60℃로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 5-(4-메톡시벤질옥시)-3-옥소아제판-1-카복실레이트를 맑은 오일(1.99 g)로서 제공하였다. 물/THF(20 mL/20 mL) 중의 상기 오일(1.33 g, 3.8 mmol)의 용액에 NaBH4를 첨가하고, 혼합물을 1.5시간 동안 교반하였다. THF를 감압 하에 제거하고, 수성 상을 EtOAc(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 60% EtOAc/이소헥산)으로 정제하여 3급-부틸 3-하이드록시-5-(4-메톡시벤질옥시)아제판-1-카복실레이트(1.30 g)를 맑은 오일로서 제공하였다. 상기 오일(1.15 g, 3.28 mmol)을 DCM(20 mL)에 용해시키고, 데옥소-플루오르(등록상표)를 첨가하였다(THF 중의 50%, 5.93 mL, 16.4 mmol). The 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하고, 희석된 with DCM(30 mL), 냉각된 얼음/물 배쓰에서 및 켄칭된 by dropwise 첨가 of 포화된 수성 NaHCO3 용액(50 mL). 생성 혼합물을 교반된 for 10 분 The 유기층을 분리된, 건조된 over Na2SO4 및 the 용매 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 30% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 3-플루오로-5-(4-메톡시벤질옥시)아제판-1-카복실레이트(746 mg, 3단계에 걸쳐 39%)를 맑은 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.36-7.30(m, 2H), 6.95(d, J = 8.2 Hz, 2H), 5.19-4.64(m, 1H), 4.65-4.43(m, 2H), 4.06-3.20(m, 8H), 2.35-1.67(m, 4H), 1.55-1.50(m, 9H).
실시예 64b 3-플루오로-5-(4-메톡시벤질옥시)-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판
Figure pct00154
MeOH(5 mL) 중의 3급-부틸 3-플루오로-5-(4-메톡시벤질옥시)아제판-1-카복실레이트(740 mg, 0.21 mmol)의 용액에 HCl(1,4-다이옥산 중의 4 M, 5.3 mL, 21 mmol)를 첨가하고, 용액을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 MeOH에 용해시키고, SCX 칼럼에 장전하였다. 칼럼을 MeOH로 세척하고 MeOH 중의 7 N 암모니아로 용리시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 황색 오일을 제공하였다. 무수 DMSO(15 mL) 중의 상기 오일의 용액에 칼륨 플루오라이드(0.32 g, 8.4 mmol) 및 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(372 mg, 2.31 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 65℃로 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 물(300 mL)로 희석시키고, EtOAc(2 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 물(3 x 50 mL)로 세척하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(20 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3-플루오로-5-(4-메톡시벤질옥시)-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판을 황색 오일(300 g, 2단계에 걸쳐 55%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.33-7.23(m, 3H), 6.89-6.86(m, 2H), 4.82-4.66(m, 2H), 4.49-3.93(m, 1H), 3.81(s, 3H), 3.30-2.99(m, 4H), 2.95-2.74(m, 4H), 2.35-2.03(m, 2H), 1.98-1.83(m, 2H).
실시예 65 N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00155
실시예 503의 절차에 따라, 5-클로로-1-에틸-4-니트로-1H-피라졸 및 2,2,2-트라이플루오로-N-(헥사하이드로-1H-아제핀-4-일)-아세트아미드로 출발하여 N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 검(0.136 g, 55%)으로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.07(s, 1H), 6.39-6.37(m, 1H), 4.22-4.19(m, 1H), 4.12(q, J = 7 Hz, 2H), 3.42-3.35(m, 1H), 3.27-3.18(m, 3H), 2.25-2.05(m, 2H), 2.00-1.75(m, 4H), 1.47(t, J = 7 Hz, 3H).
실시예 66 (R)-N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00156
실시예 503의 절차에 따라, 5-클로로-1-에틸-4-니트로-1H-피라졸 및(R)-2,2,2-트라이플루오로-N-(헥사하이드로-1H-아제핀-4-일)-아세트아미드(0.1 g, 0.476 mmol)로 출발하여 (R)-N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 검(0.1 g, 60%)으로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.07(s, 1H), 6.39-6.36(m, 1H), 4.23-4.19(m, 1H), 4.12(q, J = 7 Hz, 2H), 3.42-3.35(m, 1H), 3.27-3.18(m, 3H), 2.25-2.05(m, 2H), 2.00-1.75(m, 4H), 1.47(t, J = 7 Hz, 3H).
실시예 67 (S)-N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00157
실시예 503의 절차에 따라, 5-클로로-1-에틸-4-니트로-1H-피라졸 및(S)-2,2,2-트라이플루오로-N-(헥사하이드로-1H-아제핀-4-일)-아세트아미드로 출발하여 (S)-N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 검(0.12 g, 44%)으로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.07(s, 1H), 6.42-6.40(m, 1H), 4.22-4.18(m, 1H), 4.12(q, J = 7Hz, 2H), 3.42-3.35(m, 1H), 3.27-3.18(m, 3H), 2.25-2.05(m, 2H), 2.00-1.75(m, 4H), 1.47(t, J = 7Hz, 3H).
실시예 68 (R)-N-(1-(1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2- 트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00158
실시예 503의 절차에 따라, 5-클로로-1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸 및 (R)-2,2,2-트라이플루오로-N-(헥사하이드로-1H-아제핀-4-일)-아세트아미드로 출발하여 (R)-N-(1-(1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 검(0.98 g, 55%)으로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.08(s, 1H), 6.42-6.39(m, 1H), 4.22-4.14(m, 1H), 4.00-3.85(m, 2H), 3.44-3.32(m, 1H), 3.30-3.15(m, 3H), 2.25-2.05(m, 2H), 2.00-1.75(m, 4H), 1.30-1.20(m, 1H), 0.70-0.62(m, 2H), 0.50-0.35(m, 2H).
실시예 69 (R)-N-(1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00159
실시예 503의 절차에 따라, 5-클로로-1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸 및 (R)-2,2,2-트라이플루오로-N-(헥사하이드로-1H-아제핀-4-일)-아세트아미드로 출발하여 (R)-N-(1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 검(0.105 g, 61%)으로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.96(s, 1H), 6.55-6.38(m, 1H), 4.30-4.15(m, 1H), 3.65-3.53(m, 1H), 3.55-3.25(m, 4H), 2.25-2.05(m, 6H), 1.35-1.05(m, 4H).
실시예 70 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-에틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00160
MeOH(15 mL) 중의 N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(136 mg, 0.39 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(70 bar, 25℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 조 아민을 자주색 검(121 mg)으로서 제공하였다. DCM(10 mL) 중의 상기 아민의 용액에 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(149 mg, 0.42 mmol), HATU(0.43 g, 1.14 mmol) 및 DIPEA(1 mL, 5.72 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(30 ml)을 첨가하고, 교반을 15분 동안 계속하였다. 층들을 분리하고, 수성 물질을 DCM으로 추출하였다. 합친 유기물을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-에틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 무색 고체(170 mg, 68%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.39(s, 1H), 8.75(s, 1H), 7.95(s, 1H), 7.42-7.33(m, 1H), 7.12-7.02(m, 2H), 6.35(d, J = 8 Hz, 1H), 4.25-4.13(m, 1H), 4.05(q, J = 7 Hz, 2H), 3.45-3.25(m, 2H), 3.23-3.10(m, 2H), 2.25-1.65(m, 6H), 1.56(s, 9H), 1.45(t, J = 7 Hz, 3H).
실시예 71 (R)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-에틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00161
실시예 517의 절차에 따라, (R)-N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로 출발하여 (R)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-에틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 크림 고체(0.148 g, 76%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.40(s, 1H), 8.76(s, 1H), 7.95(s, 1H), 7.43-7.34(m, 1H), 7.12-7.02(m, 2H), 6.37(d, J = 8 Hz, 1H), 4.23-4.16(m, 1H), 4.05(q, J = 7 Hz, 2H), 3.43-3.31(m, 2H), 3.25-3.15(m, 2H), 2.22-2.05(m, 2H), 2.03-1.89(m, 2H), 1.89-1.72(m, 2H), 1.57(m, 12H).
실시예 72 (S)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-에틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00162
실시예 517의 절차에 따라, (S)-N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로 출발하여 (S)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-에틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 크림 고체(151 mg, 66%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.40(s, 1H), 8.75(s, 1H), 7.95(s, 1H), 7.45-7.34(m, 1H), 7.12-7.02(m, 2H), 6.37(d, J = 8 Hz, 1H), 4.23-4.16(m, 1H), 4.05(q, J = 7 Hz, 2H), 3.43-3.31(m, 2H), 3.25-3.15(m, 2H), 2.22-2.05(m, 2H), 2.03-1.89(m, 2H), 1.89-1.72(m, 2H), 1.55(s, 9H), 1.46(t, J = 7 Hz, 3H).
실시예 73 (R)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-사이클로프로필메틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00163
(R)-N-(1-(1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산을 반응시켜 (R)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-사이클로프로필메틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 크림 고체(136 mg, 77%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.39(s, 1H), 8.75(s, 1H), 7.95(s, 1H), 7.41-7.36(m, 1H), 7.10-7.02(m, 2H), 6.37(d, J = 8 Hz, 1H), 4.25-4.10(m, 1H), 3.90-3.83(m, 2H), 3.43-3.31(m, 2H), 3.30-3.15(m, 2H), 2.25-2.05(m, 2H), 2.03-1.70(m, 4H), 1.57(s, 9H) 1.35-1.20(m, 1H), 0.64-0.59(m, 2H), 0.43-0.38(m, 2H).
실시예 74 (R)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-사이클로프로필-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00164
(R)-N-(1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산을 반응시켜 (R)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-사이클로프로필-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 크림 고체(142 mg, 73%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.40(s, 1H), 8.76(s, 1H), 7.87(s, 1H), 7.41-7.34(m, 1H), 7.10-7.00(m, 2H), 6.39(d, J = 8 Hz, 1H), 4.25-4.15(m, 1H), 3.45-3.36(m, 3H), 3.35-3.15(m, 2H), 2.25-2.12(m, 1H), 2.10-1.70(m, 5H), 1.55(s, 9H), 1.35-1.15(m, 2H), 1.10-1.00(m, 2H).
실시예 75 (R)-3급-부틸 2-(2-플루오로페닐)-4-(1-에틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00165
실시예 506의 절차에 따라, (R)-N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로 출발하여 (R)-3급-부틸 2-(2-플루오로페닐)-4-(1-에틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 크림 고체(330 mg, 72%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.37(s, 1H), 8.66(s, 1H), 8.15-8.05(m, 1H), 7.45-7.35(m, 1H), 7.30-7.15(m, 3H), 6.31(d, J = 8 Hz, 1H), 4.25-4.15(m, 1H), 4.07(q, J = 7 Hz, 2H), 3.43-3.31(m, 2H), 3.25-3.15(m, 2H), 2.25-2.10(m, 2H), 2.10-1.70(m, 4H), 1.57(s, 9H) 1.47(t, J = 7 Hz, 3H).
실시예 76 (R)-3급-부틸 2-(2-플루오로페닐)-4-(1-사이클로프로필메틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00166
실시예 506의 절차에 따라, (R)-N-(1-(1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로 출발하여 (R)-3급-부틸 2-(2-플루오로페닐)-4-(1-사이클로프로필메틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 크림 고체(350 mg, 70%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.36(s, 1H), 8.66(s, 1H), 8.15-8.05(m, 1H), 7.45-7.35(m, 1H), 7.28-7.15(m, 3H), 6.31(d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.25-4.15(m, 1H), 3.95-3.85(m, 2H), 3.43-3.30(m, 2H), 3.28-3.15(m, 2H), 2.25-2.08(m, 2H), 2.08-1.70(m, 4H), 1.55(s, 9H), 1.35-1.20(m, 1H), 0.70-0.60(m, 2H), 0.50-0.35(m, 2H).
실시예 77 (R)-3급-부틸 2-(2-플루오로페닐)-4-(1-사이클로프로필-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00167
실시예 506의 절차에 따라, (R)-N-(1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로 출발하여 (R)-3급-부틸 2-(2-플루오로페닐)-4-(1-사이클로프로필-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 크림 고체(370 mg, 76%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.36(s, 1H), 8.69(s, 1H), 8.12-8.00(m, 1H), 7.45-7.30(m, 1H), 7.28-7.15(m, 3H), 6.40-6.27(m, 1H), 4.30-4.15(m, 1H), 3.43-3.15(m, 5H), 2.25-1.75(m, 6H), 1.55(s, 9H), 1.35-1.15(m, 2H), 1.10-0.95(m, 2H).
실시예 78 3급-부틸(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸카바메이트
Figure pct00168
EtOH(20 mL) 중의 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(1.9 g, 11.77 mmol), 4-(Boc-아미노메틸)피페리딘(3.78 g, 17.66 mmol) 및 DIPEA(6.15 mL, 35.31 mmol)의 용액을 1시간 동안 130℃에서 마이크로파로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM에 재용해시켰다. 유기층을 물로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸(1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸카바메이트를 황색 고체(3.95 g, 98%)로서 수득하였다. MeOH(125 mL) 중의 상기 고체(3.84 g, 11.30 mmol)의 용액에 10% Pd/C(0.42 g, 3.96 mmol) 및 암모늄 포메이트(2.85 g, 45.2 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 2.5시간 동안 80℃로 가열하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔사를 EtOAc에 재용해시키고, 물로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고 감압 하에 농축시켜 3급-부틸(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸카바메이트를 갈색 오일(3.49 g, 99%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.04(s, 1H), 4.63(s, 1H), 3.64(s, 3H), 3.11-3.07(m, 6H), 2.67(s, 2H), 1.77(d, J = 12.8 Hz, 2H), 1.45(s, 9H), 1.39-1.26(m, 2H). 1H 숨겨진 by 물 피크.
실시예 79 3급-부틸 4-(5-(4-(부틸옥시카보닐아미노메틸)피페리딘-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)-2-브로모티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00169
DCM(10 mL) 중의 PyBOP(2.84 g, 5.46 mmol) 및 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산(1.39 g, 4.29 mmol)의 용액을 30분 동안 실온에서 교반하였다. DCM(20 mL) 중의 3급-부틸(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸카바메이트(1.2 g, 3.90 mmol) 및 DIPEA(1.1 mL, 6.24 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM으로 희석시키고, 물로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-(5-(4-(부틸옥시카보닐아미노메틸)피페리딘-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)-2-브로모티아졸-5-일카바메이트를 핑크색 고체(2.32 g, 96%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6 -DMSO) δ 10.62(s, 1H), 9.64(s, 1H), 7.23(s, 1H), 6.86(t, J = 5.8 Hz, 1H), 3.62(s, 3H), 3.07(d, J = 11.4 Hz, 2H), 2.95(t, J = 11.5 Hz, 2H), 2.87(t, J = 6.3 Hz, 2H), 1.67(d, J = 12.3 Hz, 2H), 1.52(s, 9H), 1.45(s, 1H), 1.40(s, 9H), 1.27-1.16(m, 2H).
실시예 80 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로-3-메톡시페닐)티아졸-4-카복실산
Figure pct00170
실시예 19 내지 23에 따라, 2,6-다이플루오로-3-메톡시벤조일 클로라이드로 출발하여 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로-3-메톡시페닐)티아졸-4-카복실산을 담황색 고체(120 mg, 70%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6 -DMSO) δ 7.32-7.23(m, 1H), 7.22-7.15(m, 1H), 3.88(s, 3H), 1.49(s, 9H).
실시예 81 (R)-벤질 1-(4-(5-3급-부톡시카보닐-아미노-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트
Figure pct00171
DCM(20 mL) 중의 PyBOP(1.31 g, 2.52 mmol) 및 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산(0.61 g, 1.89 mmol)의 용액을 30분 동안 실온에서 교반하였다. DCM(20 mL) 중의 (R)-벤질 아제판-4-일카바메이트(0.62 g, 1.80 mmol) 및 DIPEA(0.5 mL, 2.88 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM으로 희석하고 물로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/헥산)로 정제하여 (R)-벤질 1-(4-(5-3급-부톡시카보닐-아미노-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 핑크색 고체(1.04 g, 89%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.28(s, 1H), 8.40(s, 1H), 7.75(s, 1H), 7.38-7.27(m, 5H), 5.09(s, 2H), 5.00-4.92(m, 1H), 3.91-3.84(m, 1H), 3.73(s, 3H), 3.36-3.24(m, 2H), 3.15-3.04(m, 2H), 2.19-2.03(m, 2H), 1.96-1.79(m, 3H), 1.75-1.63(m, 1H), 1.52(s, 9H).
실시예 82 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-메틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00172
2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산 및 (R)-N-(아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 커플링시켜 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-메틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 연어 살빛 고체(500 mg, 74%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.27(s, 1H), 8.38(s, 1H), 7.74(s, 1H), 6.41(d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.23-4.15(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.38-3.29(m, 2H), 3.22-3.08(m, 2H), 2.22-2.08(m, 2H), 2.03-1.93(m, 2H), 1.88-1.69(m, 2H), 1.52(s, 9H).
실시예 83 (R)-4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판 또는(S) 4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판
Figure pct00173
250 mL 3구 환저 플라스크에 3급-부틸 4-아미노아제판-1-카복실레이트(8.80 g, 41.0 mmol), 트라이에틸아민(29 mL, 0.21 mol) 및 메틸렌 클로라이드(20 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 -20℃로 냉각시키고, 벤질 클로로포메이트(8.4 g, 49 mmol)를 10분에 걸쳐 주사기로 적가하였다. 이종 혼합물을 실온으로 가온하고 2시간 동안 교반하였다. 반응을 LCMS로 모니터링하고, 반응 완료시, 용매를 증류시키고, 조 생성물을 플래시 크로마토그래피(헵탄/에틸 아세테이트 10% 내지 30%)로 정제하여 백색 고체(6.0 g, 42%)로서 수득하였다.
5분 동안 40℃에서 가압 이산화탄소 하에 키랄팩 OJ-H(100x4.6mm, 5 마이크론) 칼럼, 15% 메탄올/CO2, 유속 200 ml/min, 및 압력 100 bar의 키랄 SFC(초임계 유체 크로마토그래피, 문헌[White and Burnett (2005) Jour. of Chrom. A1074:175-185] 참조)를 사용하여 라세미 아제핀을 분해하여 2개의 거울상 이성질체 ((R)-3급-부틸 4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-카복실레이트 및 (S)-3급-부틸 4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-카복실레이트)를 수득하였다.
100 mL 환저 플라스크에 상기 거울상 이성질체들 중 하나, 다이옥산(20 mL) 및 12N HCl(4mL)를 첨가하였다. 혼합물을 2시간 동안 교반하고, 용매를 증류시켜 제거하였다. 이성질체 1의 HCl 염 생성물(2.2 g, 37%) 및 이성질체 2의 HCl 염 생성물(2.4 g, 40%)을 다음 단계에서 직접적으로 사용하였다.
실시예 84 3급-부틸 5-아지도-3-하이드록시-3-메틸아제판-1-카복실레이트
Figure pct00174
아세토니트릴(25 mL) 중의 (Z)-3급-부틸 3-옥소-2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀-1-카복실레이트(15 g, 71.1 mmol)의 교반된 용액에 트라이메틸실릴아자이드(28.2 mL, 213 mmol)를 첨가하고, 그 다음 앰버라이트(Amberlite) IRA 900F 수지(함량: 2 내지 3 mmol/g, 18 g)를 첨가하고, 혼합물을 4시간 동안 60℃로 가열하였다. 16시간 동안 실온에서 방치한 후, 수지를 여과시켜 제거하고, 아세토니트릴로 세척하고, 용매를 감압 하에 제거하여 황색 오일을 제공하였다. 얼음-염 욕에서 냉각된 무수 Et2O(20 ml) 중의 상기 오일(813 mg, 3.2 mmol)의 용액에 메틸 리튬(Et2O 중의 1.6 M, 2.1 mL, 3.36 mmol)의 용액을 10분에 걸쳐 적가하였다. 추가 1.5시간 동안 교반한 후, 포화 NaHCO3(10 mL)를 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(2 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 녹색 오일(0.8 g, 4단계에 걸쳐 81%)을 제공하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 4.00-2.65(m, 6H), 2.30-1.60(m, 4H), 1.55-1.20(m, 12H).
실시예 84a 5-아지도-3-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올
Figure pct00175
DCM(15 mL) 및 트라이플루오로아세트산(5 mL) 중의 3급-부틸 5-아지도-3-하이드록시-3-메틸아제판-1-카복실레이트(0.8 g, 3 mmol)의 용액을 실온에서 1.5시간 동안 교반하고, 그 다음 감압 하에 농축시켰다. 잔사를, DCM 및 MeOH로 세척되고 MeOH 중의 1 N 암모니아로 용리되는 SCX 칼럼 상에 장전된 최소 용적의 DCM에 용해시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 무수 DMSO(10 mL) 중의 잔사의 용액에 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(574 mg, 3.56 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(675 mg, 12.7 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소 하에 16시간 동안 70℃로 가열하고, 그 다음 냉각시키고 물(300 mL)에 부었다. 혼합물을 EtOAc(3 x 150 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 물(100 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하고, 분리시키고, MgSO4로 건조시키고, 농축하여 갈색 검을 제공하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-아지도-3-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올을 4개의 부분입체이성질체들의 혼합물(0.38 g, 2단계에 걸쳐 47%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 4.12-3.90(m, 1H), 3.85 및 3.74(2s, 3H), 3.60-3.40(m, 1H), 3.40-3.30(m, 1H), 3.25-3.10(m, 1H), 3.00-2.60(m, 2H), 2.30-2.10(m, 2H), 2.00-1.70(m, 2H), 1.35-1.15(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 296(M+1).
이 혼합물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)를 통해 하기 2쌍의 부분입체이성질체로 분리였다:
보다 낮은 극성 쌍의 부분입체이성질체(111A) 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 4.12-3.95(m, 1H), 3.83(s, 3H), 3.60-3.50(m, 1H), 3.45-3.30(m, 1H), 3.25-3.10(m, 1H), 2.95-2.85(m, 1H), 2.55(br s, 1H), 2.30-2.10(m, 2H), 2.00-1.70(m, 2H), 1.25(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 296(M+1).
보다 높은 극성 쌍의 부분입체이성질체(111B) 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 4.00-3.92(m, 1H), 3.90(s, 3H), 3.55-3.45(m, 1H), 3.40-3.30(m, 1H), 3.25-3.15(m, 1H), 3.00-2.85(m, 1H), 2.83(s, 1H), 2.30-2.10(m, 3H), 1.95-1.85(m, 1H), 1.20(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 296(M+1).
실시예 84b 3급-부틸 6-플루오로-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트
Figure pct00176
THF(15 mL) 및 물(3 mL) 중의 5-아지도-3-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올(380 mg, 1.29 mmol)의 교반된 용액에 트라이페닐포스핀(338 mg, 1.29 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 60℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(20 mL) 및 DIPEA(0.67 mL, 3.86 mmol)에 용해시키고, 다이-3급-부틸다이카보네이트(565 mg, 3.58 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 20시간 동안 실온에서 교반하고, 감압 하에 농축하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 연한 주황색 고체(0.4 g)를 제공하였다. DCM(10 mL) 중의 상기 고체(0.4 g, 1.29 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(1.2 mL, 3.31 mmol, THF 중의 50%)를 첨가하고, 혼합물을 20시간 동안 실온에서 교반하였다. 포화 NaHCO3(30 mL)를 첨가하고, 15분 동안 교반을 계속하였다. 수성 층을 DCM(30 mL)으로 추출하고, 합친 유기층들을 MgSO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6-플루오로-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 연한 주황색 검(315 mg, 3단계에 걸쳐 64%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 5.30-4.90(m, 1H), 4.75-4.15(m, 1H), 3.90-3.75(m, 3H), 3.65-3.00(m, 4H), 2.55-1.75(m, 4H), 1.48(s, 9H), 1.45-1.25(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 394(M+Na).
실시예 84c 3급-부틸 6-하이드록시-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(보다 낮은 극성 쌍의 부분입체이성질체)
Figure pct00177
THF(5 mL) 및 물(1 mL) 중의 5-아지도-3-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올(보다 낮은 극성 쌍의 부분입체이성질체)(103 mg, 0.35 mmol)의 교반된 용액에 트라이페닐포스핀(113 mg, 0.43 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 60℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 DCM(10 mL) 및 DIPEA(0.19 mL, 1.09 mmol)에 용해시킨 다음, 다이-3급-부틸다이카보네이트(153 mg, 0.70 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 실온에서 교반하고, 그 다음 포화 NaHCO3(15 mL)으로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 연한 주황색 검(110 mg, 2단계에 걸쳐 86%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02(s, 1H), 4.62(br s, 1H), 4.2-4.10(m, 1H), 3.87(s, 3H), 3.60-3.45(m, 1H), 3.35-3.10(m, 2H), 2.90-2.80(m, 1H), 2.73(br s, 1H), 2.25-2.10(m, 1H), 2.05-1.90(m, 1H), 1.80-1.65(m, 2H), 1.45(s, 9H), 1.19(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 370(M+1).
실시예 84d 3급-부틸 6-하이드록시-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트 (보다 높은 극성 쌍의 부분입체이성질체)
Figure pct00178
중간체 113의 절차에 따라, 5-아지도-3-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올(보다 높은 극성 쌍의 부분입체이성질체)로부터 출발하여 3급-부틸 6-하이드록시-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(보다 높은 극성 쌍의 부분입체이성질체)를 연한 주황색 검(100 mg, 97%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 4.70(br s, 1H), 4.05-3.90(m, 1H), 3.88(s, 3H), 3.60-3.50(m, 1H), 3.35-3.25(m, 1H), 3.15-3.05(m, 1H), 2.95-2.85(m, 1H), 2.30-2.10(m, 1H), 2.10-1.80(m, 4H), 1.45(s, 9H), 1.26(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 370(M+1).
실시예 84e 3급-부틸 6-메톡시-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(보다 낮은 극성 쌍의 부분입체이성질체)
Figure pct00179
질소 하에 실온에서 무수 DMF(2 mL) 중의 5-아지도-3-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올(보다 낮은 극성 쌍의 부분입체이성질체)(115 mg, 0.53 mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(25 mg, 0.63 mmol, 오일 중의 60% 분산물)를 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 실온에서 교반하였다. 메틸 아이오다이드(0.05 mL, 0.80 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 빙수(50 mL)를 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(2 x 25 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(20 mL)로 세척하고, 분리시키고, MgSO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 THF(5 mL) 및 물(1 mL)에 용해시키고, 트라이페닐포스핀(102 mg, 0.39 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 60℃로 가열하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(10 mL) 및 DIPEA(0.2 mL, 1.15 mmol)에 용해시키고, 다이-3급-부틸다이카보네이트(170 mg, 0.78 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 실온에서 교반하고, 그 다음 포화 NaHCO3(15 mL)로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6-메톡시-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(보다 낮은 극성 쌍의 부분입체이성질체)를 연한 주황색 검(118 mg, 3단계에 걸쳐 79%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02(s, 1H), 4.55(br s, 1H), 4.20-4.10(m, 1H), 3.88(s, 3H), 3.45-3.25(m, 2H), 3.20(s, 3H), 3.20-2.95(m, 2H), 2.30-2.10(m, 2H), 1.80-1.50(m, 2H), 1.45(s, 9H), 1.08(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 384(M+1).
실시예 84f 3급-부틸 6-메톡시-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(부분입체이성질체 B)
Figure pct00180
중간체 115의 절차에 따라, 5-아지도-3-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올(보다 높은 극성 쌍의 부분입체이성질체)로부터 출발하여 3급-부틸 6-메톡시-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(보다 높은 극성 쌍의 부분입체이성질체)를 연한 주황색 검(110 mg, 3단계에 걸쳐 68%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 5.70(br s, 1H), 4.05-3.90(m, 1H), 3.88(s, 3H), 3.50-3.25(m, 2H), 3.15(s, 3H), 3.10-2.90(m, 2H), 2.25-2.05(m, 2H), 2.00-1.85(m, 1H), 1.75-1.60(m, 1H), 1.45(s, 9H), 1.14(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 384(M+1).
실시예 85 3급-부틸 5-(벤질리덴아미노옥시)-3,3-다이플루오로아제판-1-카복실레이트
Figure pct00181
(Z)-3급-부틸 3-옥소-2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀-1-카복실레이트(330 mg, 1.56 mmol),(E)-벤즈알데하이드 옥심(286 mg, 2.36 mmol) 및 DBU(0.007 mL, 0.05 mmol)를 MeCN(0.5 mL) 중에서 합치고, 혼합물을 48시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 3급-부틸 5-(벤질리덴아미노옥시)-3-옥소아제판-1-카복실레이트를 갈색 오일(127 mg)로서 제공하였다.
DCM(20 mL) 중의 상기 오일(125 mg, 0.37 mmol)의 용액을 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중의 50%, 0.67 mL, 1.86 mmol)로 처리하고, 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(20 mL)으로 희석시키고, 얼음/물 욕 중에서 냉각시키고, 포화 수성 NaHCO3(30 mL)을 첨가하여 켄칭하였다. 생성 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 30% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 5-(벤질리덴아미노옥시)-3,3-다이플루오로아제판-1-카복실레이트(101 mg, 2단계에 걸쳐 18%)를 맑은 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.11-8.03(m, 1H), 7.61-7.55(m, 2H), 7.40-7.36(m, 3H), 4.52-4.42(m, 1H), 4.02-3.56(m, 3H), 3.51-3.27(m, 1H), 2.67-2.51(m, 1H), 2.42-2.21(m, 2H), 2.09-1.91(m, 1H), 1.50-1.45(m, 9H).
실시예 85a 벤즈알데하이드 O-6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일 옥심
Figure pct00182
중간체 109의 절차에 따라, 3급-부틸 5-(벤질리덴아미노옥시)-3,3-다이플루오로아제판-1-카복실레이트로부터 출발하여 벤즈알데하이드 O-6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일 옥심을 황색 오일(52 mg, 33%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.21-7.98(m, 1H), 8.05(s, 1H), 7.63-7.58(m, 2H), 7.41-7.36(m, 3H), 4.71-4.62(m, 1H), 3.85(s, 3H), 3.80-3.65(m, 1H), 3.47-3.39(m, 2H), 3.26-3.23(m, 1H), 2.77(q, J = 13.2 Hz, 1H), 2.58-2.29(m, 2H), 2.23-2.10(m, 1H).
중간체
중간체 1 3급-부틸 메틸((1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸)카바메이트
Figure pct00183
EtOH(3 mL) 중의 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(0.2 g, 1.23 mmol), 3급-부틸 메틸(피페리딘-4-일메틸)카바메이트(0.29 g, 1.36 mmol) 및 DIPEA(1 mL, 5.7 mmol)의 용액을 2시간 동안 130℃에서 마이크로파로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸(1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸카바메이트를 황색 오일(0.34 g, 80%)로서 수득하였다. 0℃로 냉각된 DMF(5 mL) 중의 상기 오일(0.15 mg, 0.44 mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(27 mg, 0.66 mmol, 미네랄 오일 중의 60%)를 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 0℃에서 교반하였다. 아이오도메탄(0.03 mL, 0.53 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. 추가적인 나트륨 하이드라이드(14 mg, 0.33 mmol) 및 아이오도메탄(0.02 mL, 0.78 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 10℃로 가온시키고, 1시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(60 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(7 x 10 mL)로 세척하고, 염수(10 mL)로 세척하고, 분리시키고, MgSO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(30% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 메틸((1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸)카바메이트를 황색 오일(148 mg, 95%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.01(s, 1H), 3.74(s, 3H), 3.38-3.26(m, 2H), 3.25-3.15(m, 2H), 3.12-2.95(m, 2H), 2.89(s, 3H), 1.90-1.71(m, 3H), 1.60-1.32(m, 2H), 1.47(s, 9H).
중간체 2 3급-부틸 6,6-다이플루오로-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00184
EtOH(6 mL) 중의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(1.62 g, 10.0 mmol), 1,4-다이아제판-6-올(4.18 g, 15.0 mmol) 및 DIPEA(6.6 mL)의 용액을 3시간 동안 130℃에서 마이크로파로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM(60 mL) 및 DMF(10 mL)에 용해시켰다. 다이-3급-부틸 다이카보네이트(8.73 g, 40 mmol) 및 DIPEA(3.48 mL)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6-하이드록시-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(2.13 g)를 황색 오일로서 제공하였다. DCM(20 mL) 중의 상기 오일(2.13 g, 6.2 mmol)의 용액에, 데스-마틴(Dess-Martin) 퍼아이오디난(3.18 g, 7.49 mmol)을 적가하였다. 18시간 동안 실온에서 교반한 후, 혼합물을 DCM(20 mL)으로 희석시키고, 포화 수성 NaHCO3(40 mL)로 켄칭하고, 그 다음 20% 수성 나트륨 티오설페이트(40 mL)로 켄칭하였다. 생성 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6-옥소-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(1.6 g)를 점성 황색 오일로서 제공하였다. DCM(10 mL) 중의 상기 오일(0.49 g, 1.43 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중의 50%, 1.3 mL, 3.6 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석시키고, 얼음/물 욕에서 냉각시키고, 포화 수성 NaHCO3(50 mL)을 적가하여 켄칭하였다. 생성 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 60% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6,6-다이플루오로-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(467 mg, 4단계에 걸쳐 42%)를 맑은 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 4.05-3.27(m, 11H), 1.50(s, 9H).
중간체 3 3급-부틸 4-(4-(2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00185
MeOH(30 mL) 중의 3급-부틸 6,6-다이플루오로-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(467 mg, 1.29 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(70 bar, 60℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 적색 오일(428 mg)을 제공하였다. DCM(15 mL) 중의 상기 오일의 용액에 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산(459 mg, 1.42 mmol), PyBOP(1.0 g, 1.94 mmol) 및 DIPEA(0.57 mL, 3.22 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(20 ml)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 희석하였다. 유기층을 물(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 80% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-(4-(2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 베이지 포움(foam)(565 mg, 2단계에 걸쳐 69%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.23(s, 1H), 8.31(s, 1H), 7.62(s, 1H), 4.07-3.95(m, 2H), 3.76(s, 3H), 3.64(s, 2H), 3.56-3.42(m, 2H), 3.38-3.28(m, 2H), 1.53(s, 9H), 1.49(s, 9H).
중간체 4 (R)-N-(아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00186
MeOH(100 mL) 중의 (R)-3급-부틸 4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-카복실레이트(3.25 g, 0.33 mmol)의 용액을 1.5시간 동안 10% 탄소상 팔라듐(1 g)의 존재 하에 수소 기체 분위기 하에서 실온에서 교반하였다. 혼합물을 셀라이트(등록상표)를 통해 여과시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 (R)-3급-부틸 4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-카복실레이트를 담회색 오일(2 g, 100%)로서 제공하였다. 실온에서 DCM(100 mL) 중의 상기 오일(1.8 g, 8.4 mmol) 및 DIPEA(3 mL, 17.2 mmol)의 교반된 용액에 트라이플루오로아세트산 무수물(1.31 mL, 9.3 mmol)을 5분에 걸쳐 적가하고, 생성 담황색 용액을 18시간 동안 교반하였다. 포화 수성 NaHCO3 용액(150 mL)을 첨가하고, 1시간 동안 계속 교반하였다. 층들을 분리하고, 유기물을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 (R)-3급-부틸 4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-카복실레이트를 담황색 오일(2.61 g, 100%)로서 수득하였다. 실온에서 DCM(50 mL) 중의 상기 오일(2.6 g, 8.38 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(25 mL)을 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM에 용해시키고, DCM 및 MeOH으로 세척되고 MeOH 중의 1 N 암모니아로 용리되는 SCX 칼럼에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 (R)-N-(아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 오일(1.3 g, 74%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.83(s, 1H), 4.44-4.37(m, 1H), 3.13-3.03(m, 2H), 2.88(dt, J = 13.2, 6.6 Hz, 1H), 2.65-2.55(m, 1H), 2.03-1.79(m, 3H), 1.75(s, 1H), 1.69-1.58(m, 3H).
중간체 5 5-클로로-1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00187
-70℃로 냉각된 무수 THF(20 mL) 중의 1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸(1.0 g, 5.13 mmol)의 교반된 용액에 리튬 헥사메틸다이실라자이드(THF 중의 1 M, 8.47 mL, 8.47 mmol)의 용액을 적가하였다. 40분 동안 -70℃에서 교반한 후, 반응 혼합물을 20분에 걸쳐 -55℃로 가온하였다. -70℃로 다시 냉각시킨 후, THF(10 mL) 중의 퍼클로로에탄(1.74 g, 7.34 mmol)의 용액을 서서히 첨가하고, 반응 혼합물을 1.5시간 동안 -70℃에서 교반하였다. 포화 수성 암모늄 클로라이드 용액(30 mL)을 첨가하고, 그 다음 물(15 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(3 x 100 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-클로로-1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸을 회백색 고체(438 mg, 37%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.24(s, 1H), 6.18(tt, J = 54.8, 4.2 Hz, 1H), 4.58(td, J = 12.8, 4.2 Hz, 2H).
중간체 6 (R)-N-(1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미드
Figure pct00188
EtOH(4 mL) 중의 5-클로로-1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸(438 mg, 2.07 mmol), (R)-N-(아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(438 mg, 2.07 mmol) 및 DIPEA(1 mL)의 용액을 5시간 동안 155℃에서 마이크로파로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (R)-N-(1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 연한 주황색 검(518 mg)으로서 제공하였다. 무수 THF(2 mL) 중의 상기 검(39 mg, 0.10 mmol) 부분을 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중의 60%, 5 mg, 0.12 mmol)로 처리하였다. 10분 동안 실온에서 교반한 후, 아이오도메탄(0.01 mL, 0.20 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 이러한 반응을 나머지 (R)-N-(1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드에 대해서도 반복하였다. 물(50 mL)을 주의하여 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(2 x 100 mL)로 추출하였다. 유기층들을 합치고, MgSO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 (R)-N-(1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미드를 담황색 검(518 mg)으로서 제공하였다. 상기 검(514 mg, 1.29 mmol)을 MeOH(20 mL)에 용해시키고, 암모늄 포메이트(325 mg, 6.15 mmol) 및 10% 탄소상 팔라듐(50 mg)으로 처리하였다. 혼합물을 2시간 동안 85℃로 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 촉매를 여과 제거하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(50 mL) 및 물(30 mL) 사이에 분배시키고, 수성 층을 DCM(2 x 50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 (R)-N-(1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미드를 담황색 검(348 mg, 3단계에 걸쳐 46%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.13(s, 1H), 6.19(tq, J = 55.4, 4.4 Hz, 1H), 4.65-4.15(m, 3H), 3.40-3.10(m, 4H), 3.10 및 2.97(2 s, 3H), 2.80(br s, 2H), 2.10-1.70(m, 6H).
중간체 7 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00189
DCM(20 mL) 중의 (R)-N-(1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미드(248 mg, 0.67 mmol)의 용액에 DIPEA(1.0 mL, 5.7 mmol), PyBOP(700 mg, 1.34 mmol) 및 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)-티아졸-4-카복실산(282 mg, 0.87 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 20시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(50 mL)을 첨가하고 1시간 동안 계속해서 교반하였다. 혼합물을 DCM(50 mL)으로 추출하고, 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 담황색 검(405 mg, 90%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.27 및 10.26(2s, 1H), 8.32 및 8.27(2s, 1H), 7.88 및 7.85(2s, 1H), 6.36-6.02(m, 1H), 4.67-4.11(m, 2H), 3.41-3.08(m, 5H), 3.08 및 2.95(2s, 3H), 2.22-1.71(m, 4H), 1.31-1.18(m, 2H).
중간체 8 1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올
Figure pct00190
EtOH(3 mL) 중의 5-클로로-1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸(470 mg, 2.22 mmol), 아제판-4-올(281 mg, 2.44 mmol) 및 DIPEA(1 mL)의 용액을 5시간 동안 155℃에서 마이크로파로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올을 연한 주황색 검(400 mg)으로서 제공하였다. 상기 검(390 mg, 1.35 mmol)을 MeOH(25 mL)에 용해시키고, 암모늄 포메이트(340 mg, 5.38 mmol) 및 10% 탄소상 팔라듐(50 mg)으로 처리하였다. 혼합물을 4시간 동안 85℃로 가열하였다. 실온에서 밤새 정치시킨 후, 더 많은 암모늄 포메이트(205 mg, 3.25 mmol) 및 10% 탄소상 팔라듐(50 mg)을 반응 혼합물에 첨가하고, 그 다음 이를 1시간 동안 85℃로 가열하였다. 촉매를 여과 제거하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(30 mL)과 물(20 mL) 사이에 분배하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올을 주황색 오일(265 mg, 2단계에 걸쳐 42%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.17(s, 1H), 6.27-5.91(m, 1H), 4.39-4.23(m, 2H), 4.16-4.04(m, 1H), 3.30-3.11(m, 4H), 2.60(br s, 3H), 2.55(s, 2H), 2.08-1.81(m, 3H), 1.80-1.71(m, 1H).
중간체 9 3급-부틸 2-브로모-4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00191
중간체 7의 절차에 따라, 1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올 및 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)-티아졸-4-카복실산으로 출발하여 3급-부틸 2-브로모-4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 무색 고체(265 mg, 69%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.39(s, 1H), 9.14(s, 1H), 8.02(s, 1H), 6.18(tt, J = 55.9, 4.5 Hz, 1H), 4.38-4.27(m, 2H), 3.33-3.12(m, 5H), 2.20(br s, 1H), 2.35-1.58(m, 4H), 1.70-1.48(m, 2H).
중간체 10 (R)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00192
무수 DMSO(20 mL) 중의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸 from 실시예 1(355 mg, 2.2 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(511 mg, 8.8 mmol)의 용액에 (R)-3급-부틸 3-메틸피페라진-1-카복실레이트(507 mg, 2.53 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 10시간 동안 100℃에서 마이크로파로 가열하였다. 혼합물을 물(40 mL)과 EtOAc(100 mL) 사이에 분배하고, 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (R)-3급-부틸 3-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페라진-1-카복실레이트를 주황색 검(627 mg)으로서 제공하였다. 질소 하에서 MeOH(10 mL) 중의 상기 검(179 mg, 0.55 mmol) 및 암모늄 포메이트(256 mg, 4.4 mmol)의 용액에 10% 탄소상 팔라듐(59 mg, 0.55 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 4시간 동안 70℃로 가열한 후, 냉각시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 물(20 mL)과 DCM(60 mL) 사이에 분배시키고, 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 (R)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트를 갈색 검(150 mg, 2단계에 걸쳐 80%)으로서 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 296(M+1).
중간체 11 (S)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-에틸피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00193
중간체 10의 절차에 따라, 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸 및 (S)-3급-부틸 3-에틸피페라진-1-카복실레이트로 출발하여 (S)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-에틸피페라진-1-카복실레이트를 주황색 검(110 mg, 2단계에 걸쳐 65%)으로서 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 310(M+1).
중간체 12 (R)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-에틸피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00194
중간체 10의 절차에 따라, 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸 및 (R)-3급-부틸 3-에틸피페라진-1-카복실레이트로 출발하여 (R)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-에틸피페라진-1-카복실레이트를 주황색 검(118 mg, 2단계에 걸쳐 67%)으로서 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 310(M+1).
중간체 13 (S)-N-(아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00195
중간체 4의 절차에 따라, (S)-3급-부틸 4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-카복실레이트로 출발하여 (S)-N-(아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 오일(1.35 g, 3단계에 걸쳐 75%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.86(s, 1H), 4.44-4.37(m, 1H), 3.15-3.03(m, 2H), 2.92-2.81(m, 1H), 2.67-2.55(m, 1H), 2.02-1.81(m, 4H), 1.76-1.56(m, 3H).
중간체 14 (S)-N-(1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미드
Figure pct00196
중간체 6의 절차에 따라, (S)-N-(아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-클로로-1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸로부터 출발하여 (S)-N-(1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미드를 담적색 검(100 mg, 3단계에 걸쳐 32%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.13(s, 1H), 6.19(tq, J = 55.4, 4.4 Hz, 1H), 4.65-4.15(m, 3H), 3.40-3.10(m, 4H), 3.10 및 2.97(2s, 3H), 2.80(br s, 2H), 2.10-1.70(m, 6H).
중간체 15 (S)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00197
중간체 7의 절차에 따라, (S)-N-(1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미드 및 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)-티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 (S)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 연한 핑크색 검(80 mg 57%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.27(s, 1H), 8.31 및 8.27(2s, 1H), 7.88 및 7.85(2s, 1H), 6.34-6.05(m, 1H), 4.41-4.31(m, 2H), 3.42-3.29(m, 5H), 3.10 및 2.95(2s, 3H), 2.08-1.75(m, 4H), 1.40-1.15(m, 2H).
중간체 16 3-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-온
Figure pct00198
무수 DMSO(20 mL) 중의 피페리딘-4-온 하이드로클로라이드 하이드레이트(1.84 g, 12.0 mmol), 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(1.3 g, 8.0 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(1.86 g, 32 mmol)의 동일한 용액 3개를 12시간 동안 100℃에서 마이크로파로 가열하였다. 혼합물을 합치고, 물(700 mL)에 붓고, EtOAc(3 x 100 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 5% MeOH/DCM)로 정제하여 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-온을 황색 고체(1.97 g, 36%)로서 수득하였다. DMF(40 mL) 중의 상기 케톤의 용액에 NEt3(3.05 mL, 21.9 mmol) 및 클로로트라이메틸실란(1.55 mL, 12.3 mmol)을 첨가하였다. 반응 용기를 밀폐하고, 혼합물을 16시간 동안 90℃로 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 생성물을 EtOAc(2 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% Et2O/이소헥산)로 정제하여 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-4-(트라이메틸실릴옥시)-1,2,3,6-테트라하이드로피리딘을 황색 검(1.53 g, 59%)으로서 수득하였다. 이 검을 MeCN(130 mL)에 용해시키고 0℃로 냉각시켰다. 2:1 MeCN:DMF(10 mL) 중의 셀렉트플루오르(SelectFluor)(등록상표)(1.99 g, 5.61 mmol)의 용액을 20분에 걸쳐 적가하고, 혼합물을 2시간 동안 -5℃ 내지 0℃에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 EtOAc(50 mL)와 물(40 mL) 사이에 분배시켰다. 생성물을 EtOAc(50 mL) 및 DCM(50 mL)로 추출하고, 합친 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-온을 담황색 고체(1.23 g, 99%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.07(s, 1H), 5.04(ddd, J = 48.3, 8.2, 5.7 Hz, 1H), 3.89(s, 3H), 3.77-3.64(m, 2H), 3.64-3.51(m, 1H), 3.50-3.43(m, 1H), 2.88-2.72(m, 2H).
중간체 17 2,2,2-트라이플루오로-N-(3-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드
Figure pct00199
-5℃에서 DCM(10 mL) 중의 3-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-온(1.07 g, 4.40 mmol)의 용액에 DCM(1 mL) 중의 붕소 트라이플루오라이드 다이에틸 에터레이트(0.71 ml, 5.72 mmol)의 용액을 적가하였다. 혼합물을 30분 동안 교반한 후, DCM(1 mL) 중의 에틸 다이아조아세테이트(0.60 ml, 5.72 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 -5℃에서 교반한 후, 실온으로 가온시켰다. 물(5 mL)을 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 에틸 6-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-옥소아제판-4-카복실레이트를 황색 검(0.85 g, 58%)으로서 수득하였다. 이 검을 3 M 염산(30 mL)에 재용해시키고, 4시간 동안 100℃로 가열하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, DCM(30 mL)에 재용해시키고, 물(20 mL)로 세척하였다. 유기상을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-온을 담황색 고체(0.30 g, 45%)로서 수득하였다. 무수 MeOH(6 mL) 및 DCM(6 mL) 중의 상기 고체(0.30 g, 1.15 mmol)의 용액에 암모늄 아세테이트(0.709 g, 9.20 mmol)를 첨가하고, 활성화된 4Å 분자체로 분쇄하였다. 혼합물을 4시간 동안 55℃로 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 나트륨 시아노보로하이드라이드(80 mg, 1.27 mmol)를 나누어 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(10 mL)에 재용해시키고, 10% 수성 NaOH(10 mL)로 세척하였다. 수성 세척물을 EtOAc(3 x 20 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 아민-작용화된 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민을 황색 검(0.205 g, 69%)으로서 수득하였다. DCM(5 mL) 중의 상기 검(0.20 g, 0.79 mmol) 및 DIPEA(0.37 mL, 2.13 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산 무수물(0.11 mL, 0.78 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반한 후, 물(10 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 3-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 담황색 고체(140 mg, 55%)로서 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 354(M+1).
중간체 18 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올
Figure pct00200
아세토니트릴(3 mL) 중의 (Z)-3급-부틸 3-옥소-2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀-1-카복실레이트(2.0 g, 9.5 mmol)의 용액에 트라이메틸실릴 아자이드(3.76 mL, 28.4 mmol)를 첨가하고, 그 다음 앰버라이트(등록상표) IRA 900F 수지(함량: 2 내지 3 mmolg-1, 2.4 g)를 첨가하고, 생성 혼합물을 16시간 동안 폭발 보호막 뒤에서 60℃로 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 용액을 여과하고, 수지를 아세토니트릴로 세척하고, 여액을 감압 하에 농축하여(욕의 온도 <40℃) 3급-부틸 5-아지도-3-옥소아제판-1-카복실레이트를 황색 액체(2.21 g)로서 수득하였다. THF/물(1/1, 40 mL) 중의 아자이드(2.2 g, 8.70 mmol)의 용액에 NaBH4 (0.82 mg, 21.8 mmol)를 나누어서 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 물(100 mL)로 희석하고, EtOAc(100 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 60% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 5-아지도-3-하이드록시아제판-1-카복실레이트를 오일(2.01 g)로서 수득하였다. MeOH(20 mL) 중의 상기 오일(2.0 g, 7.8 mmol)의 용액에 HCl(1,4-다이옥산 중의 4 M, 43 mL, 173 mmol)을 첨가하고, 용액을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 잔사를 MeOH에 용해시키고, MeOH로 세척되고 MeOH 중의 7 N 암모니아로 용리되는 SCX 칼럼에 통과시켜 5-아지도아제판-3-올을 황색 오일로서 제공하였다. 무수 DMSO(20 mL) 중의 상기 오일에 칼륨 플루오라이드(1.68 g, 28.9 mmol) 및 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(1.17 g, 7.2 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 65℃로 가열하였다. 혼합물을 물(300 mL)로 희석하고, EtOAc(2 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 물(3 x 20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 30% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올을 점성 황색 오일(1.9 g, 4단계에 걸쳐 72%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06 및 8.02(2 s, 1H), 4.15-3.97(m, 2H), 3.95-3.83(m, 4H), 3.58-3.46(m, 1H), 3.39-3.16(m, 3H), 2.29-1.91(m, 4H).
중간체 19 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트
Figure pct00201
THF(40 mL) 및 물(8 mL) 중의 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올, 중간체 18(3.4 g, 16 mmol)의 용액에 트라이페닐포스핀(1.89 g, 7.2 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 폭발 보호막 뒤에서 65℃로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 5-아미노-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올(트라이페닐포스핀 옥사이드로 오염됨)을 점성 오일로서 제공하였다. DCM(40 mL) 중의 상기 아민에 다이-3급-부틸 다이카보네이트(4.49 g, 20.6 mmol) 및 DIPEA(4.78 mL, 27.4 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 60시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6-하이드록시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 황색 오일(1.2 g)로서 수득하였다. DCM(25 mL) 중의 상기 오일(1.2 g)의 용액에 데스-마틴 퍼아이오디난(1.72 g, 1.51 mmol)을 나누어 첨가하였다. 16시간 동안 실온에서 교반한 후, 혼합물을 DCM(25 mL)으로 희석하고, 포화 수성 NaHCO3(40 mL)으로 켄칭하고, 그 다음 20% 수성 나트륨 티오설페이트(40 mL)로 켄칭하였다. 생성 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 60% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6-옥소아제판-4-일카바메이트(0.56 g)를 황색 오일로서 제공하였다. DCM(15 mL) 중의 상기 오일(0.51 g, 1.46 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중의 50%, 1.85 mL, 5.1 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석하고, 얼음/물 욕에서 냉각시키고, 포화 수성 NaHCO3(30 mL)을 적가하여 켄칭하였다. 생성 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(510 mg, 4단계에 걸쳐 64%)를 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 4.18-4.01(m, 1H), 3.84(s, 3H), 3.79-3.19(m, 4H), 2.56-2.42(m, 1H), 2.38-1.99(m, 4H), 1.46(s, 9H).
중간체 20 3급-부틸 6-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트
Figure pct00202
THF(40 mL) 및 물(8 mL) 중의 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올 중간체 18(3.4 g, 16 mmol)의 용액에 트라이페닐포스핀(1.89 g, 7.2 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 65℃로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 5-아미노-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올(트라이페닐포스핀 옥사이드로 오염됨)을 점성 오일로서 제공하였다. DCM(40 mL) 중의 상기 아민에 다이-3급-부틸 다이카보네이트(4.49 g, 20.6 mmol) 및 DIPEA(4.78 mL, 27.4 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 60시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6-하이드록시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 황색 오일(2.6 g)로서 제공하였다. DCM(50 mL) 중의 상기 오일(2.6 g, 10.2 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중의 50%, 6.7 mL, 18.6 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석하고, 얼음/물 욕에서 냉각시키고, 포화 수성 NaHCO3(30 mL)을 적가하여 켄칭하였다. 생성 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(1.07 g, 3단계에 걸쳐 66%)를 담황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.14-7.97(m, 1H), 5.04-4.46(m, 3H), 3.96-2.99(m, 6H), 2.42-1.64(m, 5H), 1.70-1.22(m, 9H).
중간체 21 (S)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00203
중간체 10의 절차에 따라, 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸 및(S)-3급-부틸 3-메틸피페라진-1-카복실레이트로 출발하여 (S)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트를 주황색 검(134 mg, 2단계에 걸쳐 73%)으로서 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 296(M+1).
중간체 22 3급-부틸 8-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-2,8-다이아자스피로[4.5]데칸-2-카복실레이트
Figure pct00204
EtOH(3 mL) 중의 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(150 mg, 0.93 mmol), 3급-부틸 2,8-다이아자스피로[4.5]데칸-2-카복실레이트(244 mg, 1.02 mmol) 및 DIPEA(1 mL)의 혼합물을 2시간 동안 130℃에서 마이크로파로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 8-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-2,8-다이아자스피로[4.5]데칸-2-카복실레이트를 황색 오일(245 mg, 72%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02(s, 1H), 3.76(s, 3H), 3.49-3.39(m, 2H), 3.30-3.00(m, 6H), 1.90-1.60(m, 6H), 1.55(s, 9H).
중간체 23 (S)-5-(2,4-다이메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-아민
Figure pct00205
무수 DMSO(20 mL) 중의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸 from 실시예 1(355 mg, 2.2 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(511 mg, 8.8 mmol)의 용액에 (R)-3급-부틸 3-메틸피페라진-1-카복실레이트(1.15 eq, 2.53 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 10시간 동안 100℃에서 마이크로파로 가열하였다. 혼합물을 물(40 mL)과 EtOAc(100 mL) 사이에 분배시키고, 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (S)-3급-부틸 3-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페라진-1-카복실레이트를 주황색 검(627 mg)으로 제공하였다. DCM(9 mL) 중의 상기 검(212 mg, 0.65 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산(3 mL)을 첨가하고, 혼합물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 물(20 mL)과 DCM(30 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 (S)-2-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페라진을 황색 검(120 mg)으로서 제공하였다. MeOH(10 mL) 중의 상기 검(119 mg, 0.53 mmol) 및 아세트산(0.12 mL, 2.12 mmol)의 용액에 수성 포름알데하이드(물 중의 37 wt%, 0.17 mL, 2.12 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 그 다음, 나트륨 시아노보로하이드라이드(83 mg, 1.33 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 70시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축하고, 잔사를 물(20 mL)과 DCM(30 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 (S)-2,4-다이메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페라진을 황색 검(109 mg)으로서 제공하였다. 질소 하에 MeOH(10 mL) 중의 상기 검(108 mg, 0.45 mmol) 및 암모늄 포메이트(209 mg, 3.6 mmol)의 용액에 10% 탄소상 팔라듐(48 mg, 0.45 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 4시간 동안 70℃로 가열한 후, 냉각시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 물(20 mL)과 DCM(50 mL) 사이에 분배시키고, 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 (S)-5-(2,4-다이메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-아민을 갈색 검(94 mg, 4단계에 걸쳐 62%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.07(s, 1H), 3.66(s, 3H), 3.51-3.41(m, 1H), 3.36(td, J = 5.7, 2.6 Hz, 1H), 2.94-2.84(m, 3H), 2.36(s, 3H), 2.28(td, J = 5.6, 3.0 Hz, 1H), 1.92(dd, J = 11.2, 9.8 Hz, 1H), 0.86(d, J = 6.3 Hz, 3H). 치환가능한 NH2는 관찰되지 않았다.
중간체 24 (R)-5-(2,4-다이메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-아민
Figure pct00206
중간체 23의 절차에 따라, 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸 및 (R)-3급-부틸 3-메틸-피페라진-1-카복실레이트로 출발하여 (R)-5-(2,4-다이메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-아민을 갈색 고체(94 mg, 4단계에 걸쳐 62%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.07(s, 1H), 3.66(s, 3H), 3.59-3.44(m, 2H), 2.99-2.86(m, 3H), 2.46-2.31(m, 4H), 2.03(t, J = 10.7 Hz, 1H), 0.87(d, J = 6.3 Hz, 3H). 치환가능한 NH2는 관찰되지 않았다.
중간체 25 5-클로로-1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00207
중간체 5의 절차에 따라, 1-사이클로프로필-4-니트로피라졸로 출발하여 5-클로로-1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸을 무색 고체(0.23 g, 63%)로서 수득하였다. 1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.09(s, 1H), 3.62-3.54(m, 1H), 1.38-1.28(m, 2H), 1.25-1.13(m, 2H).
중간체 26 3급-부틸 4-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00208
중간체 2의 절차에 따라, 5-클로로-1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸로 출발하여, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산) 후에, 3급-부틸 4-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 황색 오일(520 mg, 4단계에 걸쳐 9%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.96(s, 1H), 4.07-3.34(m, 9H), 1.49(s, 9H), 1.34-1.17(m, 2H), 1.08-1.01(m, 2H).
중간체 27 3급-부틸 4-(4-(2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복사미도)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00209
중간체 3의 절차에 따라, 3급-부틸 4-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트로 출발하여, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산) 후에, 3급-부틸 4-(4-(2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복사미도)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 회백색 포움(573 mg, 4단계에 걸쳐 62%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.23(s, 1H), 8.43(s, 1H), 7.65(s, 1H), 3.71-3.63(m, 4H), 3.45-3.10(m, 5H), 1.49(s, 9H), 1.44(s, 9H), 1.27-1.18(m, 2H), 1.06-0.99(m, 2H).
중간체 28 4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올
Figure pct00210
EtOH(9.5 mL) 중의 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(390 mg, 2.4 mmol) 및 4-하이드록시-4-메틸아제판 하이드로클로라이드(0.48 g, 2.9 mmol)의 용액에 DIPEA(1.9 ml, 10.9 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 130℃에서 마이크로파로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 5% MeOH/DCM)로 정제하여 4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올을 무색 오일(410 mg, 66%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 3.77(s, 3H), 3.56-3.47(m, 1H), 3.28-3.20(m, 2H), 3.08-3.04(m, 1H), 2.17-2.03(m, 1H), 1.95-1.81(m, 4H), 1.78-1.67(m, 1H), 1.56(br s, 1H), 1.25(s, 3H).
중간체 29 3급-부틸 2-브로모-4-(5-(4-하이드록시-4-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00211
MeOH(15 mL) 중의 4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(212 mg, 0.83 mmol)의 용액에 암모늄 포메이트(386 mg, 5.63 mmol) 및 10% 탄소상 팔라듐(88 mg, 0.83 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 18시간 동안 80℃로 가열하였다. 혼합물을 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(20 mL)과 물(20 mL) 사이에 분배시키고, 수성 층을 DCM(3 x 20 mL)으로 재추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-4-메틸아제판-4-올을 적색 오일로서 제공하였다. DCM(25 mL) 중의 상기 오일(140 mg, 0.623 mmol)의 용액에 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산(241 mg, 0.75 mmol), PyBOP(454 mg, 1.94 mmol) 및 DIPEA(0.17 mL, 1.0 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(20 ml)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 희석하였다. 유기층을 물(20 mL)로 세척하고, 분리시키고, MgSO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 2-브로모-4-(5-(4-하이드록시-4-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 회백색 고체(280 mg, 2단계에 걸쳐 63%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.49(s, 1H), 9.41(s, 1H), 7.95(s, 1H), 3.71(s, 3H), 3.41-3.30(m, 1H), 3.24-3.11(m, 3H), 2.39(br s, 1H), 2.07-1.75(m, 5H), 1.84-1.78(m, 1H), 1.52(s, 9H), 1.43(s, 3H).
중간체 30 3급-부틸 4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00212
중간체 2의 절차에 따라, 5-클로로-1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸로 출발하여 3급-부틸 4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 연한 녹색 검(4단계에 걸쳐 11%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.13 및 8.12(2s, 1H), 6.33-6.02(m, 1H), 4.60-4.40(m, 2H), 4.10-3.30(m, 8H), 1.48(s, 9H).
중간체 31 3급-부틸 4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6-하이드록시-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00213
EtOH(6 mL) 중의 5-클로로-1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸(800 mg, 3.78 mmol), 1,4-다이아제판-6-올 다이하이드로브로마이드(1.58 g, 5.67 mmol) 및 DIPEA(2.5 mL, 14.35 mmol)의 혼합물을 3시간 동안 130℃에서 마이크로파로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM 및 1:1 MeOH:DCM 및 MeOH로 세척되고 MeOH 중의 1N 암모니아로 용리되는 SCX 칼럼에 통과시켜 1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-6-올을 담황색 검(1.0 g)으로서 제공하였다. 상기 검(1.0 g, 3.44 mmol)을 DCM(100 mL)에 용해시키고, 다이-3급-부틸 다이카보네이트(2.25 g, 10.31 mmol) 및 DIPEA(2.4 mL, 13.75 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 1.5시간 동안 실온에서 교반하고, 포화 수성 NaHCO3 용액(100 mL)으로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6-하이드록시-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 연녹색 검(2단계에 걸쳐 46%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.11(s, 1H), 6.18(tdd, J = 55.6, 5.6, 3.2 Hz, 1H), 4.49-4.31(m, 2H), 4.19-2.95(m, 10H), 1.60-1.40(m, 9H).
중간체 32 5-클로로-1-(4-메톡시벤질)-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00214
중간체 5의 절차에 따라, 1-(4-메톡시벤질)-4-니트로-1H-피라졸로 출발하여 5-클로로-1-(4-메톡시벤질)-4-니트로-1H-피라졸을 황색 고체(536 mg, 46%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.17(s, 1H), 7.25(d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.89(d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.30(s, 2H), 3.80(s, 3H).
중간체 33 (S)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-5-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00215
무수 DMSO(20 mL) 중의 5-클로로-1-(4-메톡시벤질)-4-니트로-1H-피라졸(268 mg, 1.0 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(232 mg, 4.0 mmol)의 용액에 (S)-3급-부틸 3-메틸피페라진-1-카복실레이트(230 mg, 1.15 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 8시간 동안 100℃에서 마이크로파로 가열하였다. 혼합물을 물(30 mL)과 EtOAc(50 mL) 사이에 분배시키고, 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (S)-3급-부틸 4-(1-(4-메톡시벤질)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트를 황색 검(380 mg)으로서 제공하였다. 에탄올/물(20 mL/2 mL) 중의 상기 검(371 mg, 0.86 mmol)의 용액에 암모늄 클로라이드(230 mg, 4.3 mmol) 및 철 분말(192 mg, 3.44 mmoL)을 첨가하고, 혼합물을 1.5시간 동안 80℃로 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 물(30 mL)과 DCM(40 mL) 사이에 분배시키고, 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 5% MeOH/DCM)로 정제하여 (S)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-5-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트를 적색 검(330 mg, 2단계에 걸쳐 84%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.17-7.11(m, 3H), 6.82(d, J = 8.6 Hz, 2H), 5.34(d, J = 14.4 Hz, 1H), 5.17(d, J = 14.4 Hz, 1H), 3.98-3.80(m, 2H), 3.78(s, 3H), 3.23(ddd, J = 9.9, 6.4, 3.3 Hz, 1H), 3.01(td, J = 11.4, 3.0 Hz, 1H), 2.92-2.83(m, 1H), 2.66(s, 1H), 2.57(s, 1H), 1.47(s, 9H), 0.81(d, J = 6.3 Hz, 3H).
중간체 34 3급-부틸 4-(4-아미노-1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-5-일)피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00216
중간체 33의 절차에 따라, 5-클로로-1-(4-메톡시벤질)-4-니트로-1H-피라졸 및(R)-3급-부틸 3-메틸피페라진-1-카복실레이트로 출발하여 (R)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-5-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트를 적색 검(325 mg, 2단계에 걸쳐 81%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.16-7.11(m, 3H), 6.82(d, J = 8.6 Hz, 2H), 5.16(d, J = 14.8 Hz, 1H), 5.05(d, J = 14.8 Hz, 1H), 4.10-3.80(m, 2H), 3.78(s, 3H), 3.26-3.19(m, 1H), 3.01(td, J = 11.4, 3.0 Hz, 1H), 2.86(t, J = 13.2 Hz, 1H), 2.66(s, 2H), 2.57(s, 2H), 1.47(s, 9H), 0.81(d, J = 6.3 Hz, 3H).
중간체 35 (S)-5-(2-에틸-4-메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-아민
Figure pct00217
중간체 24의 절차에 따라, (S)-3급-부틸 3-에틸-피페라진-1-카복실레이트로 출발하여 (S)-5-(2-에틸-4-메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-아민을 갈색 고체(100 mg, 4단계에 걸쳐 86%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.38(s, 1H), 7.08(s, 1H), 3.75-3.55(m, 5H), 3.29(dt, J = 11.4, 2.4 Hz, 1H), 3.22(ddd, J = 6.0, 5.5, 2.6 Hz, 1H), 2.95(dt, J = 12.5, 2.8 Hz, 1H), 2.64(dd, J = 11.8, 3.6 Hz, 1H), 2.61(s, 3H), 2.29(t, J = 10.9 Hz, 1H), 1.48-1.31(m, 1H), 1.26-1.11(m, 1H), 0.82(t, J = 7.6 Hz, 3H). NH2는 부분적으로 치환되었다.
중간체 36 (R)-5-(2-에틸-4-메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-아민
Figure pct00218
중간체 24의 절차에 따라, (R)-3급-부틸 3-에틸-피페라진-1-카복실레이트로 출발하여 (R)-5-(2-에틸-4-메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-아민을 갈색 고체(100 mg, 4단계에 걸쳐 86%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.40(s, 1H), 7.07(s, 1H), 3.65(s, 3H), 3.66-3.46(m, 2H), 3.24(dt, J = 11.3, 2.4 Hz, 1H), 3.16(ddd, J = 5.8, 5.6, 2.7 Hz, 1H), 2.94(dt, J = 12.3, 2.8 Hz, 1H), 2.77-2.34(m, 4H), 2.21(t, J = 10.8 Hz, 1H), 1.47-1.32(m, 1H), 1.27-1.10(m, 1H), 0.81(t, J = 7.5 Hz, 3H). NH2는 부분적으로 치환되었다.
중간체 37 3급-부틸 4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6-플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00219
DCM(10 mL) 중의 3급-부틸 4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6-하이드록시-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(370 mg, 0.95 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중의 50% 용액, 1.0 mL, 2.37 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 포화 수성 NaHCO3 용액(10 mL)을 서서히 첨가하고, 혼합물을 15분 동안 교반하였다. 수성 층을 DCM(10 mL)으로 추출하고, 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6-플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 연녹색 검(366 mg, 74%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.12(s, 1H), 6.34-6.00(m, 1H), 5.08-2.75(m, 11H), 1.48(s, 9H).
중간체 38 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일(메틸)카바메이트
Figure pct00220
THF(10 mL) 중의 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(190 mg, 0.51 mmol)의 냉각된(빙수 욕) 용액에 리튬 헥사메틸다이실라자이드(THF 중의 1M, 0.8 mL, 0.8 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 아이오도메탄(0.06 mL, 1.02 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(2 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(30 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고, Na2SO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 70% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일(메틸)카바메이트(180 mg, 90%)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.09-7.99(m, 1H), 4.57-4.38(m, 1H), 3.85(s, 3H), 3.84-3.53(m, 1H), 3.45-3.15(m, 3H), 2.81(s, 3H), 2.53-2.29(m, 2H), 2.16-2.01(m, 2H), 1.48(s, 9H).
중간체 39 5-브로모-4-니트로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸
Figure pct00221
아세트산(5 mL) 중의 1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-아민(990 mg, 6.0 mmol)의 교반된 용액에 아세트산 무수물(0.57 mL, 6.0 mmol)을 적가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 더 많은 아세트산 무수물(0.57 mL, 6.0 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하고, 이를 빙욕에서 냉각시키고 발연 질산(0.28 mL, 6 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 7시간 동안 실온에서 교반하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 EtOH(15 mL)에 용해시키고, 진한 염산(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 16시간 동안 가열 환류시켰다. 감압 하에 농축시킨 후, 잔사를 DCM(50 mL)과 5% 수성 NaHCO3 용액(100 mL) 사이에 분배시켰다. 혼합물을 여과하고, 수성 층을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층들을 합치고, MgSO4로 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 연한 주황색 고체(540 mg)로서 제공하였다. 이 고체(540 mg, 2.57 mmol)를 브로모포름(2.9 mL, 33 mmol)에 용해시키고, 상기 용액에 3급-부틸 니트라이트(0.92 mL, 7.71 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 15분 동안 실온에서 교반하고, 그 다음 1.5시간 동안 145℃로 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-브로모-4-니트로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸을 담황색 고체(536 mg, 4단계에 걸쳐 33%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.30(s, 1H), 4.86(q, J = 7.8 Hz, 2H).
중간체 40 (R)-N-(1-(4-아미노-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00222
중간체 8의 절차에 따라, 5-브로모-4-니트로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸(150 mg, 0.55 mmol) 및 (R)-N-(아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(115 mg, 0.55 mmol)로부터 출발하여 (R)-N-(1-(4-아미노-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 무색 검(110 mg, 53%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.25(s, 1H), 7.11(br s, 1H), 4.54(q, J = 8.5 Hz, 2H), 4.35-4.22(m, 1H), 3.40-3.23(m, 2H), 3.21-3.08(m, 2H), 2.62(br s, 2H), 2.17-2.08(m, 1H), 2.06-1.91(m, 1H), 1.92-1.71(m, 4H).
중간체 41 3급-부틸 4-(4-니트로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00223
중간체 22의 절차에 따라, 5-브로모-4-니트로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸 및 3급-부틸 1,4-다이아제판-1-카복실레이트로부터 출발하여 3급-부틸 4-(4-니트로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 담황색 검(197 mg, 91%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.19-8.12(m, 1H), 4.76-4.66(m, 2H), 3.65-3.49(m, 4H), 3.32-3.23(m, 4H), 1.92-1.78(m, 2H), 1.52-1.47(m, 9H).
중간체 42 벤질 4-하이드록시-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-카복실레이트
Figure pct00224
THF/물(30 mL/6 mL) 중의 벤질 4-아지도-5-하이드록시아제판-1-카복실레이트(1.4 g, 4.83 mmol)의 용액에 트라이페닐포스핀(1.26 g, 4.83 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. EtOAc(100 mL)을 첨가하고, 혼합물을 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 생성 오일을 Et2O 중에서 분쇄하고, 생성 고체를 여과 제거하고 여액을 감압 하에 농축시켜 황색 오일을 제공하였다. 0℃에서 무수 DCM(20 mL) 중의 상기 오일의 용액에 DIPEA(2.5 mL, 14.4 mmol)를 첨가하고, 트라이플루오로아세트산 무수물(1.0 mL, 7.22 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 16시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 벤질 4-하이드록시-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-카복실레이트를 금-황색 점성 오일(934 mg, 2 단계에 걸쳐 54%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.40-7.29(m, 5H), 6.49(s, 1H), 5.20-5.11(m, 2H), 3.94-3.25(m, 6H), 2.35-1.65(m, 5H).
중간체 43 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-하이드록시아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00225
MeOH(100 mL) 중의 벤질 4-하이드록시-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-카복실레이트(935 mg, 3.0 mmol)의 용액을 H-큐브(H-Cube(등록상표)(충분한 H2, 50℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 4-하이드록시-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판을 담황색 고체(514 mg)로서 제공하였다. 무수 DMSO(10 mL) 중의 상기 고체(500 mg, 2.21 mmol)의 용액에 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(150 mg, 0.93 mmol), 및 칼륨 플루오라이드(513 mg, 8.85 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 물(200 mL)에 붓고 EtOAc(5 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(70% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-하이드록시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드를 황색 고체(640 mg)로서 제공하였다. 상기 고체의 일부(200 mg, 0.57 mmol)를 MeOH(25 mL) 중에 용해하고, H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 50℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-하이드록시아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 오렌지 포움(foam)(172 mg, 3 단계에 걸쳐 68%)으로 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.22(d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.83(s, 1H), 4.84(d, J = 5.0 Hz, 1H), 3.91-3.73(m, 2H), 3.32(s, 3H), 3.28-2.96(m, 4H), 2.00-1.75(m, 4H). 치환가능한 NH2는 관찰되지 않았다.
중간체 44 3급-부틸 6-하이드록시-6-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00226
THF(10 mL) 중의 다이-3급-부틸 6-옥소-1,4-다이아제판-1,4-다이카복실레이트(570 mg, 1.82 mmol)의 냉각된 용액(빙수욕)에, 메틸마그네슘 브로마이드의 용액(Et2O 중의 3 M, 0.79 mL, 2.36 mmol)을 적가하였다. 혼합물을 실온으로 가온시키고, 16시간 동안 교반하였다. 포화 수성 암모늄 클로라이드 용액(5 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(30 mL) 및 물(30 mL)로 희석시켰다. 층들을 분리하고, 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 70% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 다이-3급-부틸 6-하이드록시-6-메틸-1,4-다이아제판-1,4-다이카복실레이트를 오일(0.45 g)로서 제공하였다. MeOH(2 mL) 중의 상기 오일(0.45 g, 1.36 mmol)의 용액에, 1,4-다이옥산 중의 HCl(4 M, 6.8 mL, 27.3 mmol)을 첨가하고, 용액을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 MeOH 중에 용해하고, MeOH로 세척되고 MeOH 중의 1 N 암모니아로 용리하는 SCX 칼럼에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 6-메틸-1,4-다이아제판-6-올을 오일로서 제공하였다. EtOH(3 mL) 중의 상기 아민에 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(209 mg, 1.29 mmol), 및 DIPEA(0.9 mL, 5.44 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 130℃에서 마이크로파로 3시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. DCM(10 mL) 중의 조 3급-부틸 6-하이드록시-6-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트에 다이-3급-부틸 다이카보네이트(1.18 g, 5.44 mmol) 및 DIPEA(0.9 mL, 5.44 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반시키고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM(30 mL) 중에 용해시켰다. 물(20 mL)을 첨가하고, 유기층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 80% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6-하이드록시-6-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(235 mg, 네 단계에 걸쳐 22%)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 4.16-3.79(m, 7H), 3.52-2.81(m, 4H), 1.70-1.80(br s, 1H), 1.51(s, 9H), 1.16(s, 3H).
중간체 45 3급-부틸 6-플루오로-6-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00227
DCM(5 mL) 중의 3급-부틸 6-하이드록시-6-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(100 mg, 0.28 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중 50%, 0.26 mL, 0.7 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석시키고, 빙수욕 내에서 냉각시키고, 포화 수성 NaHCO3(40 mL)을 적가하여 켄칭하였다. 생성 혼합물을 10분 동안 교반켰다. 유기층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6-플루오로-6-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(70 mg, 70%)를 투명한 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 3.80(s, 3H), 3.73-3.32(m, 6H), 3.26-3.03(m, 2H), 1.50(s, 9H), 1.32(d, J = 20.1 Hz, 3H).
중간체 46 3급-부틸 6,6-다이플루오로-4-(4-니트로-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00228
5-클로로-4-니트로-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸(815 mg, 2.93 mmol), 1,4-다이아제판-6-올(510 mg, 4.39 mmol) 및 DIPEA(2.55 mL, 14.6 mmol)를 EtOH(10 mL) 내에서 합치고, 130℃에서 마이크로파로 1시간 동안 가열하고, 용매를 감압 하에 제거하여 1-(4-니트로-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-6-올을 제공하였다. 상기 아민에 다이-3급-부틸 다이카보네이트(2.56 g, 11.7 mmol) 및 DIPEA(2.55 mL, 14.6 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반시킨 후, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM(30 mL) 중에 용해시켰다. 물(20 mL)을 첨가하고, 유기층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6-하이드록시-4-(4-니트로-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 오일(590 mg)로서 제공하였다. DCM(10 mL) 중의 상기 오일(570 mg, 1.26 mmol)의 용액에 데스-마틴 퍼아이오디난(0.68 g, 1.51 mmol)을 적가하였다. 실온에서 16시간 동안 교반시킨 후, 혼합물을 DCM으로 희석시키고, 포화 수성 NaHCO3(40 mL), 그 다음 20% 수성 나트륨 티오설페이트(30 mL)로 켄칭하였다. 생성 혼합물을 20분 동안 교반시켰다. 유기층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-(4-니트로-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-5-일)-6-옥소-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(0.36 g)를 오일로서 제공하였다. DCM(5 mL) 중의 상기 오일(0.35 g, 0.76 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중 50%, 0.69 mL, 1.91 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석시키고, 냉각된 얼음/물 욕에서 포화 수성 NaHCO3(30 mL)을 적가하여 켄칭하였다. 생성 혼합물을 10분 동안 교반시키고, 유기층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 조 생성물을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6,6-다이플루오로-4-(4-니트로-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(280 mg, 네 단계에 걸쳐 19%)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.12-8.03(m, 1H), 5.61-5.34(m, 2H), 4.01-3.41(m, 6H), 3.59-3.09(m, 4H), 1.67-1.34(m, 9H), 0.94-0.86(m, 2H), SiMe3는 내부 표준 TMS 피크에 의해 가려져 있다.
중간체 47 3급-부틸 6-메톡시-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00229
EtOH(6 mL)중의 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(1.62 g, 10.0 mmol), 1,4-다이아제판-6-올(4.18 g, 15.0 mmol) 및 DIPEA(6.6 mL)의 용액을 130℃에서 마이크로파로 3시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM(60 mL) 및 DMF(10 mL) 중에 용해하였다. 다이-3급-부틸 다이카보네이트(8.73 g, 40 mmol) 및 DIPEA(3.48 mL)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6-하이드록시-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 황색 오일(2.13 g)로서 제공하였다. THF(5 ml) 중의 상기 오일(205 mg, 0.6 mmol)의 용액에 0℃에서 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 24 mg, 0.6 mmol)를 첨가하였다. 30 분 후, 아이오도메탄(0.04 mL, 0.6 mmol)을 첨가하고, 생성 혼합물을 실온으로 1.5 시간에 걸쳐 가온시켰다. 혼합물을 DCM(20 mL)으로 희석시키고, 물(20 mL) 및 포화 수성 NaHCO3(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/ 이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6-메톡시-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 황색 검(gum)으로서 수득하였다(116 mg, 2 단계에 걸쳐 33%). LCMS(ES+) m/z 356(M+1).
중간체 48 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올
Figure pct00230
트라이플루오로아세트산(20 mL)을 DCM(70 mL) 중의 3급-부틸 4-아지도-5-하이드록시아제판-1-카복실레이트(7.43 g, 29.0 mmol)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 바람막이 뒤에서 35℃에서 4시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 MeOH 중에 재-용해시키고, DCM 및 MeOH로 세척하고 MeOH/DCM 중의 3 내지 10% 7 N 암모니아로 용리하는 SCX 칼럼에 통과시켜 5-아지도아제판-4-올을 황색 오일(4.38 g, 28.0 mmol)로서 제공하고, 이를 무수 DMSO(100 mL)에 용해시켰다. 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(5.20 g, 32.2 mmol), 및 칼륨 플루오라이드(6.51 g, 112 mmol)를 첨가했다. 혼합물을 70℃에서 16시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시키고, 물(1000 mL)에 붓고, EtOAc(4 x 250 mL) 중에서 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/ 이소헥산)로 정제하여 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올을 황색 검(7.27 g, 2 단계에 걸쳐 77%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 3.94-3.66(m, 4H), 3.65(td, J = 9.7, 3.8 Hz, 1H), 3.44-3.18(m, 4H), 2.50(d, J = 2.8 Hz, 1H), 2.24-2.12(m, 2H), 2.02-1.89(m, 2H).
중간체 48a 4-아지도-5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판
Figure pct00231
0℃로 냉각된, 무수 DCM(100 mL) 중의 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(4.0 g, 14.2 mmol)의 용액에 서서히 트라이에틸아민(4.0 mL, 28.5 mmol), 그 다음 DMAP(175 mg, 1.42 mmol) 및 4-메틸벤젠-1-설포닐 클로라이드(4.1 g, 21.4 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 18시간 동안 교반하였다. 4-메틸벤젠-1-설포닐 클로라이드(1.4 g, 7.12 mmol)를 반응 혼합물에 좀 더 첨가하고, 이를 실온에서 추가로 24시간 동안 교반하였다. 물(40 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(30 내지 70% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일 4-메틸벤젠설포네이트를 어두운 크림색 고체(2.81g)로서 제공하였다. 상기 고체(2.3 g, 5.29 mmol)를 TBAF의 용액(THF 중의 1.0 M, 21 mL, 21.1 mmol)으로 처리하고, 반응 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 물(30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(2 x 150 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(30 내지 40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 4-아지도-5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판을 황색 점성 오일(804 mg, 2 단계에 걸쳐 20%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 5.06(ddt, J = 46.2, 8.1, 2.5 Hz, 1H), 4.00(dd, J = 20.8, 8.1 Hz, 1H), 3.79(s, 3H), 3.43-3.34(m, 2H), 3.26-3.11(m, 2H), 2.43-2.30(m, 1H), 2.30-2.18(m, 1H), 2.12-1.92(m, 2H).
중간체 49 N-((4S,5S)-1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00232
무수 DCM(100 ml) 중의 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(7.26 g, 25.8 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(12.1 mL, 32.84 mmol, THF 중의 50%)를 적가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 빙욕에서 냉각하고, 포화 수성 NaHCO3 용액(40 mL)을 서서히 첨가하고(기포 관찰됨), 혼합물을 DCM(150 mL)으로 추출하였다. 유기층을 포화 수성 NaHCO3 용액(2 x 30 mL)으로 세척하고, 분리시키고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 4-아지도-5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판을 황색 검(5.55 g)으로서 제공하였다. 반응을 반복하여 추가의 물질을 제공하였다. THF/물(120 mL/24 mL) 중의 상기 검(6.40 g, 22.6 mmol)의 용액을 트라이페닐포스핀(5.93 g, 22.6 mmol)으로 처리하고, 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 EtOAc(150 mL)와 물(20 mL) 사이에 분배시키고, 유기층을 분리하고, 염수(20 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 MeOH 중에 재-용해시키고, MeOH로 세척하고 MeOH/DCM 중의 3 내지 10% 7 N 암모니아로 용리하는 SCX 칼럼에 통과시켜 5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민을 황색 오일(5.70 g)로서 제공하였다. DCM(50 mL) 중의 상기 오일(5.7 g, 22.1 mmol) 및 DIPEA(11.5 mL, 66.3 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산 무수물(3.38 mL, 24.3 mmol)을 적가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(15 mL)을 첨가하고, 유기상을 분리시키고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드를 황색 검(7.8 g)으로서 제공하였다. MeOH(100 mL) 중의 상기 검(7.8 g, 22.0 mmol) 및 암모늄 포메이트(10.23 g, 176.0 mmol)의 용액에 질소 하에 탄소상 10% 팔라듐(585 mg, 5.5 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 4시간 동안 가열한 후 냉각시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 물(20 mL)과 DCM(100 mL) 사이에 분배시키고, 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 N-((4S,5S)-1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 갈색 고체(4.72 g, 네 단계에 걸쳐 49%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 9.03(s, 1H), 7.19(s, 1H), 4.90-4.76(m, 2H), 3.66(s, 3H), 3.52-3.43(m, 2H), 3.12(td, J = 11.9, 5.4 Hz, 1H), 2.96(dt, J = 14.8, 4.2 Hz, 1H), 2.43-2.31(m, 1H), 2.13-1.85(m, 3H). 치환가능한 NH2는 관찰되지 않았다.
중간체 49a N-((4S,5R)-1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00233
THF/물(30 mL/6 mL) 중의 4-아지도-5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판(1.4 g, 4.95 mmol)의 용액을 트라이페닐포스핀(1.3 g, 4.95 mmol)으로 처리하고, 혼합물을 60℃에서 바람막이 뒤에서 4시간 동안 가열하였다. 혼합물을 EtOAc(200 mL)와 포화 수성 NaHCO3 용액(30 mL) 사이에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAc(50 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성 오일을 다이에틸 에터로 분쇄하고, 생성 고체를 여과 제거하고 여액을 감압 하에 농축시켜, 트라이페닐포스핀 옥사이드로 오염된 5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민을 황색 오일로서 제공하였다. 무수 DCM(40 mL) 중의 상기 오일(1.27 g, 4.95 mmol)의 용액에 0℃에서 서서히 DIPEA(2.6 mL, 14.8 mmol)를 첨가하고, 그 다음 트라이플루오로아세트산 무수물(0.83 ml, 5.94 mmol)을 적가했다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 18시간 동안 교반하였다. 물(40 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(150 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드를 황색 점성 오일(1.4 g)로서 제공하였다. MeOH(40 mL) 중의 상기 오일(1.4 g, 3.97 mmol) 및 암모늄 포메이트(2.5 g, 39.7 mmol)의 용액에 질소 하에 탄소상 10% 팔라듐(140 mg)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 30분 동안 가열하고, 냉각시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 물(30 mL)과 DCM(75 mL) 사이에 분배시켰다. 수성 층을 DCM(2 x 75 mL)으로 추출하고, 합친 유기층들을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 N-((4S,5R)-1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 오렌지-황색 유리(1.1 g, 3단계에 걸쳐 69%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.47(s, 1H), 7.12(s, 1H), 5.02-4.85(m, 1H), 4.69-4.55(m, 1H), 3.66(s, 3H), 3.42-3.20(m, 3H), 3.11(ddd, J = 14.4, 6.7, 3.3 Hz, 1H), 2.36-2.22(m, 1H), 2.23-1.94(m, 2H), 1.90-1.82(m, 1H). NH2는 관찰되지 않았다.
중간체 49b 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올
Figure pct00234
DCM(40 mL) 중의 항-5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(1.75 g, 6.23 mmol)의 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 퍼아이오디난(3.2 g, 7.47 mmol)을 적가하였다. 발열이 관찰되어서 혼합물을 냉수 욕에서 냉각시켰다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 포화 수성 NaHCO3 용액(50 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(200 mL)으로 추출하였다. 유기층을 포화 수성 나트륨 티오설페이트 용액(2 x 50 mL) 및 포화 수성 NaHCO3 용액(2 x 50 mL)으로 순차적으로 세척시켰다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(30 내지 60% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-온을 황색 고체(1.55 g)로서 제공하였다. 질소 하에 -78℃로 냉각된, 무수 THF(40 mL) 중의 상기 고체(1.5 g, 5.38 mmol)의 용액에 L-셀렉트라이드(L-SELECTRIDE(등록상표))(THF 중의 1 M, 6.5 mL, 6.45 mmol)의 용액을 적가하고, 반응 혼합물을 -78℃에서 90분 동안 교반시켰다. 혼합물을 실온으로 가온시키고, 물(30 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc(2 x 100 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(50 내지 70% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 신(syn)-5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올을 오렌지-황색 오일(845 mg, 2단계에 걸쳐 50%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.07-8.01(m, 1H), 4.21-4.16(m, 1H), 3.98-3.92(m, 1H), 3.80(s, 2H), 3.44-3.30(m, 2H), 3.28-3.19(m, 1H), 3.14(ddd, J = 13.3, 7.4, 4.0 Hz, 1H), 2.33-2.22(m, 1H), 2.21-2.09(m, 1H), 2.07(d, J = 5.1Hz, 1H), 2.01-1.86(m, 2H). OH는 관찰되지 않았다.
중간체 49c 3급-부틸 5-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트
Figure pct00235
0℃로 냉각된, 무수 DMF(15 mL) 중의 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(420 mg, 1.49 mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 90 mg, 2.24 mmol)를 첨가하였다. 15분 동안 교반시킨 후, 아이오도메탄(0.14 mL, 2.24 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 1시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(150 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(6 x 30 mL) 및 염수(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 4-아지도-5-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판을 황색 오일(350 mg)로서 제공하였다. THF/물(15 mL/3 mL) 중의 상기 오일(350 mg, 1.19 mmol)의 용액을 트라이페닐포스핀(311 mg, 1.19 mmol)으로 처리하고, 반응 혼합물을 60℃에서 바람막이 뒤에서 18시간 동안 가열하였다. 물(2 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc로 (2 x 50 mL) 추출하고, 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성 오일을 Et2O 중에서 분쇄하고, 생성 고체를 여과 제거하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 황색 오일을 제공하였다. 무수 DCM(10 mL) 중의 상기 오일(319 mg, 1.19 mmol)의 용액에 0℃에서 DCM(10 mL) 중의 다이-3급-부틸-다이카보네이트(310 mg, 1.42 mmol)의 용액 및 DIPEA(1.0 mL, 5.93 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 72시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(40 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 5-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 황색 오일(355 mg, 3 단계에 걸쳐 64%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02(s, 1H), 5.14(d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.00-3.90(m, 1H), 3.78(s, 3H), 3.68-3.60(m, 1H), 3.48(t, J = 12.6 Hz, 1H), 3.39(s, 3H), 3.33-3.23(m, 1H), 3.19-3.11(m, 1H), 3.04-2.95(m, 1H), 2.25-2.06(m, 2H), 1.88-1.76(m, 2H), 1.45(s, 9H).
중간체 49d 3급-부틸 5-하이드록시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트
Figure pct00236
THF/물(15 mL/3 mL) 중의 신-5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(420 mg, 1.49 mmol)의 용액을 트라이페닐포스핀(392 mg, 1.49 mmol)으로 처리하고, 반응 혼합물을 60℃에서 9 시간 동안 가열하였다. 염수(5 mL)를 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(2 x 75 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성 오일을 Et2O로 분쇄하고, 생성 고체를 여과 제거하고 여액을 감압 하에 농축시켜 황색 고체를 제공하였다. 무수 DCM(10 mL) 중의 상기 고체의 용액에 DCM(10 mL) 중의 다이-3급-부틸-다이카보네이트(391 mg, 1.79 mmol)의 용액 및 DIPEA(1.3 mL, 7.47 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 18시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(60 내지 75% EtOAc/이소헥산)로 정제하여, 트라이페닐포스핀 옥사이드로 오염된 3급-부틸 5-하이드록시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 황색 오일(172 mg)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 5.20(br s, 1H), 4.19(br s, 1H), 3.98-3.90(m, 1H), 3.79(s, 3H), 3.52-3.42(m, 1H), 3.34-3.05(m, 3H), 2.72(br s, 1H), 2.23-2.10(m, 1H), 2.04-1.95(m, 2H), 1.92-1.80(m, 1H), 1.46(s, 9H).
중간체 50 5-아지도-1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올
Figure pct00237
중간체 48에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-아지도-5-하이드록시아제판-1-카복실레이트 및 5-클로로-1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸로부터 출발하여, 5-아지도-1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올을 황색 검(1.16 g, 2 단계에 걸쳐 50%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.14-8.09(m, 1H), 6.11(tt, J = 27.8, 4.4 Hz, 1H), 4.50-4.39(m, 2H), 3.83(tt, J = 8.8, 3.1 Hz, 1H), 3.67(td, J = 4.7, 3.6 Hz, 1H), 3.45-3.21(m, 4H), 2.37(d, J = 2.9 Hz, 1H), 2.25-2.12(m, 2H), 2.03-1.91(m, 2H).
중간체 51 N-(1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00238
중간체 49에 대한 절차에 따라 5-아지도-1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올로부터 출발하여 N-(1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 적색 검(720 mg, 네 단계에 걸쳐 50%)으로서 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 374(M+1).
중간체 52 6,6-다이플루오로-N,N-다이메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민
Figure pct00239
MeOH(3 mL) 중의 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(0.96 g, 2.56 mmol)의 용액에 1,4-다이옥산(4 M, 12.8 mL, 51.2 mmol) 중의 HCl을 첨가하고, 용액을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM(30 mL) 중에 용해시켰다. 유기층을 포화 수성 NaHCO3 용액(30 mL)으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민을 제공하였다. 상기 아민을 MeOH/THF(1:1, 50 mL) 중에 용해시키고, 포름알데하이드(물 중 38%, 0.45 mL, 6.21 mmol)로 처리하였다. 5분 후, 나트륨 시아노보로하이드라이드(0.39 g, 6.21 mmol)를 적가하고, 생성 혼합물을 5 시간 동안 교반하였다. 추가의 포름알데하이드(물 중 38%, 0.45 mL, 6.21 mmol) 및 나트륨 시아노보로하이드라이드(0.39 g, 6.21 mmol)를 첨가하고, 생성 혼합물을 60 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 물질을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM)로 정제하여 6,6-다이플루오로-N,N-다이메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민을 황색 오일(0.64 g, 2 단계에 걸쳐 82%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.07-8.03(m, 1H), 3.82(s, 3H), 3.70-3.57(m, 2H), 3.42-3.29(m, 1H), 3.24-3.05(m, 1H), 3.04-2.98(m, 1H), 2.51-2.40(m, 1H), 2.35-2.29(m, 6H), 2.20-2.01(m, 2H), 1.97-1.82(m, 1H).
중간체 53 3급-부틸 6-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트
Figure pct00240
질소 하에 0℃로 냉각된, DMF(5 mL) 중의 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올, 중간체 18(0.85 g, 3.0 mmol)의 용액에, 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 133 mg, 3.3 mmol)를 첨가하고, 생성 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 아이오도메탄(0.37 mL, 6.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(200 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(2 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 Na2SO4 상에서 건조하고 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-아지도-3-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판을 오일(0.76 g)로서 제공하였다. THF(15 mL) 및 물(3 mL) 중의 상기 아자이드(0.76 g, 2.6 mmol)를 트라이페닐포스핀(0.71 g, 2.7 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 가열하고, 용매를 감압 하에 제거하여 6-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민을 제공하였다. 상기 아민을 DCM(40 mL) 중에서 현탁하고, 다이-3급-부틸 다이카보네이트(1.13 g, 5.2 mmol) 및 DIPEA(1.36 mL, 7.8 mmol)를 첨가했다. 실온에서 16시간 동안 교반시킨 후 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM(40 mL) 중에 용해시켰다. 물(20 mL)을 첨가하고, 유기층을 분리하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 6-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(0.84 g, 3 단계에 걸쳐 74%)를 오일로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(d, J = 4.3 Hz, 1H), 5.39(d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.21-3.94(m, 1H), 3.84(s, 3H), 3.56-3.42(m, 2H), 3.35-3.03(m, 6H), 2.28-1.89(m, 4H), 1.46(s, 9H).
중간체 53a N-(1-(4-아미노-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-6-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00241
DCM(30 mL) 중의 5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올(0.69 g, 2.25 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중의 50%, 1.06 mL, 2.86 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 62시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석시키고, 얼음/물 욕에서 냉각시키고, 포화 수성 NaHCO3(100 mL)을 적가하여 켄칭하였다. 생성 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3,3-다이플루오로아제판(410 mg)을 점성 황색 오일로서 제공하였다. THF(10 mL) 및 물(2 mL) 중의 상기 오일(400 mg, 1.3 mmol)의 용액에 트라이페닐포스핀(341 mg, 1.3 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 바람막이 뒤에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 EtOAc(30 mL)로 희석하고, 물(3 x 20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 DCM 및 MeOH로 세척하고 3 내지 10% MeOH/DCM 중 1 N 암모니아로 용리하는 SCX 칼럼에 통과시켜 트라이페닐포스핀 옥사이드로 오염된 1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-아민(555 mg)을 점성 황색 오일로서 제공하였다. DCM(20 mL) 중의 상기 오일(360 mg, 1.28 mmol) 및 DIPEA(0.67 mL, 3.84 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산 무수물(0.2 mL, 1.41 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 유기층을 물(2 x 20 mL)로 세척하고, 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 N-(1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(280 mg)를 점성 황색 오일로서 수득하였다.
MeOH(15 mL) 중의 상기 오일(276 mg, 0.73 mmol) 및 암모늄 포메이트(340 mg, 5.84 mmol)의 용액에 질소 하에 탄소상 10% 팔라듐(31 mg, 0.29 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 4시간 동안 가열시키고, 냉각시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 물(10 mL)과 DCM(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 N-(1-(4-아미노-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-6-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(210 mg, 4 단계에 걸쳐 28%)를 점성 적색 오일로서 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 350(M+1).
중간체 54 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00242
0℃로 냉각된, 무수 DMF(15 mL) 중의 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(500 mg, 1.78 mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 107 mg, 2.67 mmol)를 첨가하였다. 15분 동안 교반시킨 후, 아이오도메탄(0.17 mL, 2.67 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 90분 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(200 mL)로 추출하고, 물(6 x 20 mL) 및 염수(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 4-아지도-5-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판을 황색 오일(484 mg)로서 제공하였다. THF/물(15 mL/ 3 mL) 중의 상기 오일(480 mg, 1.63 mmol)의 용액을 트라이페닐포스핀(426 mg, 1.63 mmol)으로 처리하고, 반응 혼합물을 60℃에서 5시간 동안 가열하였다. EtOAc(100 mL)를 첨가하고, 혼합물을 포화 수성 NaHCO3 용액(20 mL)으로 세척하였다. 수성 층을 EtOAc(50 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성 오일을 Et2O 중에서 분쇄하고, 생성 고체를 여과 제거하고 여액을 감압 하에 농축시켜 황색 오일을 제공하였다. 무수 DCM(20 mL) 중의 상기 오일의 용액에 0℃에서 DIPEA(0.85 mL, 4.88 mmol)를 첨가하고, 트라이플루오로아세트산 무수물(0.27 mL, 1.95 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 4시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(40 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드를 황색 오일(530 mg)로서 제공하였다. MeOH(20 mL) 중의 상기 오일(520 mg, 1.42 mmol)의 용액을 암모늄 포메이트(900 mg, 14.2 mmol) 및 탄소상 10% 팔라듐(50 mg)으로 처리하였다. 혼합물을 65℃에서 1시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 촉매를 여과 제거하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 포화 수성 NaHCO3 용액(20 mL)과 DCM(50 mL) 사이에 분배시켰다. 수성 층을 DCM(3 x 50 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 오렌지 포움(486 mg, 4 단계에 걸쳐 82%)으로 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.85(br s, 1H), 7.17(s, 1H), 4.64(dd, J = 14.5, 7.2 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.57-3.36(m, 2H), 3.41(s, 3H), 3.15-3.05(m, 1H), 2.93-2.85(m, 1H), 2.61(br s, 2H), 2.43-2.33(m, 1H), 1.92-1.77(m, 4H).
중간체 55 5-아지도-1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올
Figure pct00243
중간체 18에 대한 절차에 따라 (Z)-3급-부틸 3-옥소-2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀-1-카복실레이트로부터 출발하여 5-아지도-1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올을 연한 갈색 검(네 단계에 걸쳐 88%)으로 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.11(s, 1H), 6.36-5.99(m, 1H), 4.89-4.70(m, 1H), 4.55-4.23(m, 1H), 4.18-4.00(m, 1H), 3.96-3.76(m, 1H), 3.73-3.44(m, 2H), 3.42-3.12(m, 2H), 2.32-1.95(m, 5H).
중간체 56 3급-부틸 1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트
Figure pct00244
중간체 19에 대한 절차에 따라 5-아지도-1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올로부터 출발하여 3급-부틸 1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트를 연한 녹색 검(1.34 g, 네 단계에 걸쳐 46%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.17-8.06(m, 1H), 6.34-6.00(m, 1H), 4.72-4.30(m, 3H), 4.12-3.95(m, 1H), 3.66-3.10(m, 4H), 2.59-2.03(m, 4H), 1.45-1.41(m, 9H).
중간체 57 (R)-N-(1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00245
중간체 28에 대한 절차에 따라 5-클로로-1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸 및 (R)-2,2,2-트라이플루오로-N-(헥사하이드로-1H-아제핀-4-일)-아세트아미드로부터 출발하여 (R)-N-(1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 검(105 mg, 61%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.96(s, 1H), 6.55-6.38(m, 1H), 4.30-4.15(m, 1H), 3.65-3.53(m, 1H), 3.55-3.25(m, 4H), 2.25-2.05(m, 6H), 1.35-1.05(m, 4H).
중간체 57a 5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올
Figure pct00246
아세토니트릴(25 mL) 중의 (Z)-3급-부틸 3-옥소-2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀-1-카복실레이트(15.0 g, 71.1 mmol)의 용액에 트라이메틸실릴 아자이드(28.2 mL, 213 mmol) 그 다음 앰버라이트(Amberlite) IRA 900F 수지(부하: 2-3 mmol/g, 18 g)를 첨가하고, 생성 혼합물을 60℃에서 바람막이 뒤에서 16시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 용액을 여과하고, 아세토니트릴로 수지를 세척하고, 여액을 감압 하에 농축시켜(욕의 온도<40℃) 3급-부틸 5-아지도-3-옥소아제판-1-카복실레이트를 연한 오렌지 오일로서 제공하였다. 냉각된 빙욕에서 THF/물(150 mL/150 mL) 중의 상기 오일의 용액에 15 분에 걸쳐 NaBH4(6.73 g, 178 mmol)를 적가하고, 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc(2 x 400 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 물(2 x 250 mL) 및 염수(150 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 3급-부틸 5-아지도-3-하이드록시아제판-1-카복실레이트를 무색 오일(19.2 g)로서 제공하였다. DCM(60 mL) 중의 상기 오일(4.0 g, 15.6 mmol)의 용액에 TFA(30 mL)를 첨가하고, 용액을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 잔사를 DCM 중에 용해시키고, DCM, 1:1 MeOH/DCM 및 MeOH로 세척하고, MeOH 중의 1 N 암모니아로 용리하는 SCX 칼럼에 통과시켜 5-아지도아제판-3-올을 담황색 검(2.36 g)으로서 제공하였다. 무수 DMSO(25 mL) 중의 상기 검(1.17 g, 7.48 mmol)에 칼륨 플루오라이드(1.74 g, 29.9 mmol) 및 5-클로로-1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸(1.61 g, 8.6 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 물(100 mL) 및 추출된 EtOAc(3 x 30 mL)로 세척하였다. 합친 유기층들을 물(3 x 20 mL)로 세척하고, 분리시키고, 상 분리 카트리지에 통과시키고 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올을 점성 황색 오일(2.24 g, 네 단계에 걸쳐 81%)로서 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 308(M+1).
중간체 57b N-(1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00247
DCM(50 mL) 중의 5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-올(1.54 g, 5.0 mmol)의 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 퍼아이오디난(2.54 g, 6.0 mmol)을 적가하였다. 실온에서 3시간 동안 교반시킨 후, 혼합물을 DCM(25 mL)으로 희석시키고, 포화 수성 NaHCO3(50 mL)로 켄칭한 후, 그 다음 포화 수성 나트륨 티오설페이트(50 mL)로 켄칭하였다. 생성 혼합물을 20분 동안 교반시키고, 유기층을 분리하고 수성 물질을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-3-온(1.22 g)을 담황색 고체로서 제공하였다. DCM(60 mL) 중의 상기 고체(1.22 g, 4.0 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중의 50%, 2.68 mL, 7.3 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 62시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석시키고, 냉각된 얼음/물 욕에서 포화 수성 NaHCO3(100 mL)을 적가하여 켄칭하였다. 생성 혼합물을 10분 동안 교반시키고, 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3,3-다이플루오로아제판(860 mg)을 점성 황색 오일로서 제공하였다. THF(20 mL) 및 물(4 mL) 중의 상기 오일(0.85 g, 2.6 mmol)의 용액에 트라이페닐포스핀(682 mg, 2.6 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 바람막이 뒤에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 EtOAc(30 mL)로 희석하고, 물(3 x 20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 DCM 및 1:1 MeOH:DCM 및 MeOH로 세척하고 MeOH 중의 1 N 암모니아로 용리하는 SCX 칼럼에 통과시켜 트라이페닐포스핀 옥사이드로 오염된 1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-아민(783 mg)을 점성 암황색 오일로서 제공하였다. DCM(20 mL) 중의 상기 오일(0.78 g, 2.60 mmol) 및 DIPEA(1.36 mL, 7.80 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산 무수물(0.4 mL, 2.86 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 유기층을 물(2 x 20 mL)로 세척하고, 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 N-(1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 황색 고체(880 mg, 4 단계에 걸쳐 44%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.99-7.95(m, 1H), 6.55(d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.59-4.50(m, 1H), 3.74-3.62(m, 3H), 3.44-3.34(m, 2H), 2.55-2.44(m, 2H), 2.31-2.14(m, 2H), 1.39-1.07(m, 4H).
중간체 58 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-사이클로프로필-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00248
MeOH(20 mL) 중의 (R)-N-(1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(0.725 g, 2.00 mmol)의 용액에 탄소상 10% 팔라듐(0.75 g, 7.07 mmol) 및 암모늄 포메이트(0.507 g, 8.03 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 가열하였다. 혼합물을 셀라이트(등록상표)에 통과시키고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(20 mL) 중에 재-용해시키고, 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복실산(0.74 g, 2.29 mmol), PyBOP(1.57 g, 3.01 mmol) 및 DIPEA(1 mL, 5.6 mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 교반을 10분 동안 지속하였다. 층들을 분리하고 수성 물질을 DCM(2 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-사이클로프로필-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 연한 갈색 고체(0.98 g, 2단계에 걸쳐 77%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.26(s, 1H), 8.43(s, 1H), 7.71(s, 1H), 6.47(d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.25-4.15(m, 1H), 3.47-3.35(m, 3H), 3.29-3.13(m, 2H), 2.46-1.57(m, 6H), 1.52(s, 9H), 1.23-1.17(m, 2H), 1.12-0.96(m, 2H).
중간체 58a 5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올
Figure pct00249
중간체 48에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-아지도-5-하이드록시아제판-1-카복실레이트로부터 출발하여 5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올을 황색 검(1.2 g, 72%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.96(s, 1H), 3.82(tt, J = 8.5, 4.8 Hz, 1H), 3.65(ddd, J = 10.0, 8.5, 3.8 Hz, 1H), 3.62-3.54(m, 1H), 3.52-3.37(m, 2H), 3.31(tdd, J = 14.1, 5.7, 3.8 Hz, 2H), 2.50(d, J = 3.1 Hz, 1H), 2.24-2.13(m, 2H), 2.04-1.92(m, 2H), 1.31-1.20(m, 2H), 1.14-1.05(m, 2H).
중간체 58b N-(1-(4-아미노-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00250
중간체 49에 대한 절차에 따라 5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올로부터 출발하여 N-(1-(4-아미노-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 오렌지 검(900 mg, 4 단계에 걸쳐 67%)으로서 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 350(M+1).
중간체 59 5-클로로-1-에틸-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00251
중간체 5에 대한 절차에 따라 1-에틸-4-니트로피라졸로부터 출발하여 5-클로로-1-에틸-4-니트로-1H-피라졸을 무색 고체(1.3 g, 74%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.16(s, 1H), 4.26(q, J = 7Hz, 2H), 1.50(t, J = 7Hz, 3H).
중간체 60 N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00252
중간체 28에 대한 절차에 따라 5-클로로-1-에틸-4-니트로-1H-피라졸 및 2,2,2-트라이플루오로-N-(헥사하이드로-1H-아제핀-4-일)-아세트아미드로부터 출발하여 N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 검(136 mg, 55%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.07(s, 1H), 6.39-6.37(m, 1H), 4.22-4.19(m, 1H), 4.12(q, J = 7 Hz, 2H), 3.42-3.35(m, 1H), 3.27-3.18(m, 3H), 2.25-2.05(m, 2H), 2.00-1.75(m, 4H), 1.47(t, J = 7 Hz, 3H).
중간체 61 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-에틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00253
중간체 58에 대한 절차에 따라 (R)-N-(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드로부터 출발하여 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-에틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 연한 갈색 고체(186 mg, 2단계에 걸쳐 31%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.30(s, 1H), 8.41(s, 1H), 7.81(s, 1H), 6.44(d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.25-4.17(m, 1H), 4.06(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.40-3.32(m, 2H), 3.23-3.10(m, 2H), 2.23-2.09(m, 2H), 2.06-1.94(m, 2H), 1.91-1.68(m, 2H), 1.54(s, 9H), 1.48(t, J = 7.2 Hz, 3H).
중간체 62 1-((3-메틸옥세탄-3-일)메틸)-1H-피라졸-4-아민
Figure pct00254
MeCN(50 mL) 중의 4-니트로피라졸(1.13 g, 10 mmol) 및 K2CO3(3.4 g, 25 mmol)의 혼합물을 실온에서 15분 동안 교반시킨 후, 3-(브로모메틸)-3-메틸옥세탄(1.8 g, 11 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반시키고, 여과하고, 필터 케이크를 MeCN으로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시키고 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산 구배)로 정제하여 1-((3-메틸옥세탄-3-일)메틸)-4-니트로-1H-피라졸을 무색 고체(1.43 g, 73%)로서 제공하였다. 상기 고체의 일부(206 mg, 1.04 mmol)를 MeOH(20 mL) 중에 용해하고, 암모늄 포메이트(260 mg, 4.13 mmol) 및 탄소상 10% 팔라듐(50 mg)으로 처리하였다. 혼합물을 80℃에서 1.5 시간 동안 가열하고, 냉각하고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 1-((3-메틸옥세탄-3-일)메틸)-1H-피라졸-4-아민을 연한 핑크색 검(160 mg, 92%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.15(s, 1H), 6.97(s, 1H), 4.66(d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.37(d, J = 6.1 Hz, 2H), 4.19(s, 2H), 2.91(s, 2H), 1.23(s, 3H).
중간체 63 3급-부틸 4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)부트-3-이닐카바메이트
Figure pct00255
NEt3(4 mL) 중의 3급-부틸 3-부틴-1-일카바메이트(123 mg, 0.728 mmol)의 용액을 5-브로모-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(100 mg, 0.485 mmol) 및 구리(I) 브로마이드 다이메틸 황화물 착물(10 mg, 0.049 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 방출 및 질소 기체로 재충전 시킴으로써 4회 탈기시킨 후, 테트라키스(트라이페닐포스핀)-팔라듐(0)(28 mg, 0.024 mmol)을 첨가하였다. 탈기를 2회 반복시키고, 반응 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 3급-부틸 3-부틴-1-일카바메이트(123 mg, 0.728 mmol) 및 구리(I) 브로마이드 다이메틸 황화물 착물(10 mg, 0.049 mmol)을 좀 더 첨가하고, 혼합물을 3회 탈기시켰다. 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(28 mg, 0.024 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 48시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc(100 mL)로 희석하고, 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(30 내지 40% EtOAc/이소헥산)로 잔사를 정제하여 3급-부틸 4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)부트-3-이닐카바메이트를 황색 오일(112 mg, 78%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.05(s, 1H), 5.03(s, 1H), 3.94(s, 3H), 3.46(q, J = 6.4 Hz, 2H), 2.79(t, J = 6.4 Hz, 2H), 1.67-1.27(m, 9H).
중간체 64 5-클로로-1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00256
반응식 5에 대한 절차에 따라 1-사이클로프로필메틸-4-니트로피라졸로부터 출발하여 5-클로로-1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸을 무색 오일(1.16 g, 56%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.17(s, 1H), 4.07(d, J = 7Hz, 2H), 1.39-1.28(m, 1H), 0.66-0.59(m, 2H), 0.50-0.40(m, 2H).
중간체 65 (R)-N-(1-(1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00257
반응식 28에 대한 절차에 따라 5-클로로-1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸 및 (R)-2,2,2-트라이플루오로-N-(헥사하이드로-1H-아제핀-4-일)-아세트아미드로부터 출발하여 (R)-N-(1-(1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 담황색 검(0.98 g, 55%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.08(s, 1H), 6.42-6.39(m, 1H), 4.22-4.14(m, 1H), 4.00-3.85(m, 2H), 3.44-3.32(m, 1H), 3.30-3.15(m, 3H), 2.25-2.05(m, 2H), 2.00-1.75(m, 4H), 1.30-1.20(m, 1H), 0.70-0.62(m, 2H), 0.50-0.35(m, 2H).
중간체 66 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-(사이클로프로필메틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00258
반응식 58에 대한 절차에 따라 (R)-N-(1-(1-사이클로프로필메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드로부터 출발하여 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-사이클로프로필메틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 연한 갈색 고체(310 mg, 2단계에 걸쳐 57%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.28(s, 1H), 8.39(s, 1H), 7.83-7.75(m, 1H), 6.40(d, J = 8.2 Hz, 1H), 4.22-4.14(m, 1H), 3.90-3.80(m, 2H), 3.39-3.30(m, 2H), 3.23-3.11(m, 2H), 2.02-1.91(m, 3H), 1.89-1.67(m, 4H), 1.52(s, 9H), 0.65-0.59(m, 2H), 0.47-0.37(m, 2H).
중간체 67 5-아미노-N-(5-클로로-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드
Figure pct00259
실시예 110에 대한 절차에 따라 3-클로로-1-메틸-1H-피라졸-4-아민으로부터 출발하여 5-아미노-N-(5-클로로-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드를 회백색 고체(146 mg, 3단계에 걸쳐 46%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.89(s, 1H), 7.74(s, 1H), 7.60-7.50(m, 3H), 7.28(t, J = 8.6 Hz, 2H), 3.80(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 370(M+1).
중간체 68 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-(3-메톡시프로필)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드
Figure pct00260
실시예 107에 대한 절차에 따라 분취용 HPLC로 정제한 후에, 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-(3-메톡시프로필)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드(0.14 g, 2단계에 걸쳐 28%)를 크림색 고체로서 수득하였다. 1H(400 MHz, d6-DMSO) δ 9.75(s, 1H), 7.97(s, 1H), 7.67(s, 1H), 7.58-7.52(m, 3H), 7.30-7.25(m, 2H), 4.09(t, J = 17.0 Hz, 2H), 3.27(s, 3H), 3.23(t, J = 15.4 Hz, 2H), 1.98 -1.93(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 394(M+1)
중간체 69 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드
Figure pct00261
실시예 107에 대한 절차에 따라 분취용 HPLC로 정제한 후에, 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-(테트라하이드로-2H-피란-4-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드(0.17 g, 2단계에 걸쳐 43%)를 밝은 갈색 고체로서 수득하였다. 1H(400 MHz, d6-DMSO) δ 9.75(s, 1H), 8.03(s, 1H), 7.70(s, 1H), 7.58-7.52(m, 3H), 7.29-7.25(m, 2H), 4.40-4.36(m, 1H), 3.97-3.93(m, 2H), 3.49-3.43(m, 2H), 1.97-1.87(m, 4H) LCMS(ES+) m/z 406(M+1).
중간체 201 3급-부틸 8-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5,8-다이아자스피로[2.6]노난-5-카복실레이트
Figure pct00262
무수 DMSO(20 mL) 중의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(323 mg, 2.0 mmol), 트라이에틸아민(0.7 mL, 5.0 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(581 mg, 10.0 mmol)의 용액에 5,8-다이아자스피로[2.6]노난 다이하이드로브로마이드(686 mg, 2.4 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 마이크로파로 65℃에서 4시간 동안 가열하였다. 혼합물을 EtOAc(30 mL)로 희석시키고, 포화 수성 NaHCO3(3 x 20 mL)로 세척하였다. 수성 층을 DCM(3 x 20 mL)으로 추가로 추출하고, 합친 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 SCX-2 칼럼 상에 부하하고, MeOH로 세척하고, MeOH/DCM 중의 3% 7M 암모니아로 용리하고, 감압 하에 농축시켜 5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5,8-다이아자스피로[2.6]노난을 황색 검(153 mg)으로서 제공하였다. DCM(10 mL) 중의 상기 중간체의 용액에 다이-3급-부틸 다이카보네이트(157 mg, 0.72 mmol) 및 DMAP(4 mg, 0.03 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(3 x 10 mL)로 세척하고, 유기층을 분리시키고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 3급-부틸 8-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5,8-다이아자스피로[2.6]노난-5-카복실레이트를 황색 검(200 mg, 2단계에 걸쳐 28%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02 및 8.00(2s, 1H), 3.85-3.77(m, 3H), 3.75-3.67(m, 2H), 3.47-3.27(m, 4H), 3.29-2.97(m, 2H), 1.49(s, 9H), 0.73-0.55(m, 2H), 0.47-0.38(m, 2H).
중간체 202 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-2-온
Figure pct00263
다이옥산(4 mL) 중의 아제판-2-온(136 mg, 1.2 mmol), 5-브로모-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(206 mg, 1.0 mmol), 잔포스(116 mg, 0.20 mmol) 및 세슘 카보네이트(456 mg, 1.40 mmol)의 혼합물을 15분 동안 질소로 버블링하여 탈기시켰다. 이후 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐(0)(46 mg, 0.05 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 추가 10분 동안 탈기시키고, 마이크로파로 140℃에서 3 시간 동안 가열하였다. 물(10 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(3 x 10 mL) 중에서 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-2-온을 갈색 검(107 mg, 44%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.11(s, 1H), 3.96(dd, J = 15.2, 10.0 Hz, 1H), 3.76(s, 3H), 3.53(dd, J = 15.2, 7.2 Hz, 1H), 2.82-2.74(m, 2H), 2.13-1.96(m, 3H), 1.83-1.67(m, 3H).
중간체 203 3급-부틸 4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-옥소-1,4-다이아제판-1-카복실레이트
Figure pct00264
중간체 202에 대한 절차에 따라 5-브로모-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸 및 3급-부틸 5-옥소-1,4-다이아제판-1-카복실레이트로부터 출발하여 3급-부틸 4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-옥소-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 갈색 검(136 mg, 33%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.18(s, 1H), 4.04-3.72(m, 5H), 3.90-3.62(m, 4H), 3.02-2.86(m, 2H), 1.52(s, 9H).
중간체 204 4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-옥사제판-5-온
Figure pct00265
중간체 202에 대한 절차에 따라 5-브로모-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸 및 1,4-옥사제판-5-온으로부터 출발하여 4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-옥사제판-5-온을 오렌지 고체(40 mg, 13%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.11(s, 1H), 4.18(dd, J = 13.3, 6.4 Hz, 1H), 4.12-3.99(m, 2H), 3.96-3.82(m, 2H), 3.77(s, 3H), 3.64(dd, J = 15.7, 6.4 Hz, 1H), 3.08(ddd, J = 15.6, 8.5, 2.1 Hz, 1H), 2.94(ddd, J = 15.6, 7.5, 1.8 Hz, 1H).
중간체 205 5-아지도-1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올
Figure pct00266
5-아지도아제판-4-올(2.5 g, 16.0 mmol)의 용액을 무수 DMSO(20 mL) 중에 용해하고, 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(2.70 g, 15.4 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(3.71 g, 64 mmol)를 첨가했다. 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시키고, 물(300 mL)에 붓고, EtOAc(2 x 50 mL) 중에서 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-아지도-1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올을 황색 검(2.5 g, 53%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.18-7.95(m, 1H), 4.16-4.07(m, 2H), 3.80(tt, J = 9.1, 3.1 Hz, 1H), 3.67-3.59(m, 1H), 3.42-3.18(m, 4H), 2.51(d, J = 2.9 Hz, 1H), 2.24-2.12(m, 2H), 2.07-1.87(m, 2H), 1.46(t, J = 7.3 Hz, 3H).
중간체 206 3급-부틸 1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일카바메이트
Figure pct00267
무수 DCM(20 ml) 중의 5-아지도-1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(1.25 g, 4.2 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(3.8 mL, 10.6 mmol, THF 중 50%)를 적가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 빙욕에서 냉각시키고, 포화 수성 NaHCO3 용액(40 mL)을 서서히 첨가하고(기포 관찰됨), 혼합물을 DCM(2 x 20 mL)으로 추출하였다. 유기층을 포화 수성 NaHCO3 용액(2 x 10 mL)으로 추출하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 4-아지도-5-플루오로-1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판을 황색 검(0.91 g)으로서 제공하였다. THF/물(20 mL/4 mL) 중의 상기 검(0.9 g, 3.0 mmol)의 용액을 트라이페닐포스핀(0.8 g, 3.0 mmol)으로 처리하고, 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 4 mL로 감압 하에 농축시키고, EtOAc(30 mL)로 희석하고, 1M HCl(4 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 수성 추출물을 EtOAc(20 mL)로 세척하고, 그 다음 6N NaOH로 염기성화시키고, DCM(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민을 황색 오일(0.82 g)로서 제공하였다. DCM(25 mL) 중의 상기 오일(0.8 g, 2.9 mmol) 및 DIPEA(0.77 mL, 4.4 mmol)의 용액에 다이-3급-부틸-다이카보네이트(0.97 g, 4.4 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(15 mL)을 첨가하고, 유기상을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/ 이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일카바메이트를 황색 고체(1.1 g, 3단계에 걸쳐 70%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.07(s, 1H), 4.96(s, 1H), 4.74(td, J = 7.4, 3.6 Hz, 1H), 4.65-4.58(m, 1H), 4.16-4.05(m, 3H), 3.42-3.29(m, 2H), 3.16(d, J = 11.4 Hz, 2H), 2.31-2.18(m, 2H), 2.20-2.06(m, 2H), 1.94-1.82(m, 1H), 1.60-1.45(m, 10H).
중간체 207 3급-부틸 1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일카바메이트
Figure pct00268
중간체 120에 대한 절차에 따라 5-아지도-1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올로부터 출발하여 3급-부틸 1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일카바메이트를 황색 검(0.59 g, 3단계에 걸쳐 70%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.09-8.03(m, 1H), 4.21-3.99(m, 4H), 3.54-3.30(m, 4H), 3.33-3.05(m, 4H), 2.40-2.30(m, 1H), 2.08-1.98(m, 1H), 1.95-1.78(m, 2H), 1.50-1.40(m, 12H).
중간체 208 3급-부틸 1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일카바메이트
Figure pct00269
중간체 120에 대한 절차에 따라 5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올로부터 출발하여 3급-부틸 1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일카바메이트를 황색 검(0.67 g, 3단계에 걸쳐 70%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.96(s, 1H), 5.38(m, 1H), 4.15-4.08(m, 1H), 3.68-3.31(m, 7H), 3.28-3.18(m, 1 H), 3.07(ddd, J = 14.1, 6.2, 3.1 Hz, 1H), 2.42-2.32(m, 1 H), 2.05-1.92(m, 2 H), 1.93-1.80(m, 1 H), 1.48(s, 9H), 1.26-1.13(m, 4 H).
중간체 209 신-5-아지도-1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올
Figure pct00270
중간체 119에 대한 절차에 따라 항-5-아지도-1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올로부터 출발하여 신-5-아지도-1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올을 갈색 검(0.57 g, 2단계에 걸쳐 92%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.15-8.07(m, 1H), 6.35-6.02(m, 1H), 4.55-4.35(m, 2H), 3.83(tt, J = 8.8, 2.9 Hz, 1H), 3.70-3.62(m, 1H), 3.37(t, J = 11.8 Hz, 1H), 3.32-3.18(m, 3H), 2.46(d, J = 2.9 Hz, 1H), 2.25-2.12(m, 2 H), 2.11-1.85(m, 2H).
중간체 210 3급-부틸 1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-하이드록시아제판-4-일카바메이트
Figure pct00271
중간체 122에 대한 절차에 따라 5-아지도-1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올로부터 출발하여 3급-부틸 1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-하이드록시아제판-4-일카바메이트를 황색 검(0.33 g, 2단계에 걸쳐 47%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.12(s, 1H), 6.32-6.05(m, 1H), 5.06(d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.64-4.40(m, 2H), 4.23(m, 1H), 3.89(m, 1H), 3.45-3.29(m, 2H), 3.18-3.09(m, 2H), 2.60(m, 1H), 2.20-1.93(m, 3H), 1.86(dd, J = 14.1, 5.4 Hz, 1H), 1.44(s, 9H).
중간체 211 신-5-아지도-1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올
Figure pct00272
중간체 119에 대한 절차에 따라 항-5-아지도-1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올로부터 출발하여 신-5-아지도-1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올을 갈색 검(0.5 g, 2단계에 걸쳐 81%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.08-8.04(m, 1H), 4.25-4.07(m, 2H), 3.44-3.28(m, 1H), 3.27-3.09(m, 1H), 2.32-2.21(m, 1H), 2.23-2.09(m, 1H), 1.99-1.84(m, 2H), 1.42-1.14(m, 5H), 1.10-0.84(m, 3H).
중간체 212 3급-부틸 1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일카바메이트
Figure pct00273
중간체 120에 대한 절차에 따라 신-5-아지도-1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올로부터 출발하여 3급-부틸 1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일카바메이트를 황색 검(0.46 g, 3단계에 걸쳐 70%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06(s, 1H), 5.11(t, J = 8.8 Hz, 1H), 4.14(q, J = 7.3 Hz, 2H), 3.94(m, 1 H), 3.65-3.61(m, 1H), 3.59-3.18(m, 4H), 3.31-3.20(m, 1H), 3.18-3.10(m, 1H), 2.99(d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.26-2.02(m, 2H), 1.88-1.76(m, 2H), 1.45-1.35(m, 12H).
중간체 213 3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄
Figure pct00274
8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄 하이드로클로라이드(150 mg, 1.0 mmol) 및 DIPEA(0.26 mL, 1.5 mmol)를 DMSO(4 mL) 중에서 15분 동안 실온에서 교반하였다. 이후 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(150 mg, 0.95 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(170 mg, 3 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 및 물(4 mL)에 부었다. 수성을 EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 염수(10 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄(220 mg, 92%)을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 4.43(s, 2H), 3.86(s, 3H), 3.73-3.70(m, 2H), 2.61-2.58(m 2H), 2.09-2.07(m, 4H).
중간체 214 3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄
Figure pct00275
중간체 213에 대한 절차에 따라 (1R, 5S)-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄 하이드로클로라이드로부터 출발하여 3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄을 회백색 고체(290 mg, 99%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 3.81(s, 3H), 3.44(d, J = 10.1 Hz, 2H), 2.66-2.59(m, 2H), 2.29(br s, 2H), 1.78-1.71(m, 4H), 1.64-1.59(m, 2H).
중간체 215 4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-티아제판 1,1-다이옥사이드
Figure pct00276
1,4-티아제판 하이드로클로라이드(153 mg, 1 mmol) 및 DIPEA(0.26 mL, 1.5 mmol)를 DMSO(4 mL) 중에서 15분 동안 실온에서 교반하였다. 이후 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(150 mg, 0.95 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(170 mg, 3 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 70℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(4 mL)에 부었다. 수성을 EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 염수(10 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄 (220 mg, 92%)을 제공하였다. 이 중간체를 DCM(10 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각시키고, m-클로로퍼벤조산(400 mg, 1.9 mmol)으로 처리하고, 생성 혼합물 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 생성 침전물을 차가운 DCM(5 mL)으로 세척하여 여과하여 없앴다. 여액을 2M NaOH(5 mL) 및 염수(5 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-티아제판 1,1-다이옥사이드(280 mg, 2단계에 걸쳐 97%)를 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.14(s, 1H), 3.87(s, 3H), 3.59-3.55(m, 2H), 3.41-3.36(m, 6H), 2.29-2.24(m, 2H).
중간체 218 (Z)-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-4-엔올
Figure pct00277
질소 하에 -78℃로 냉각된, 무수 THF(30 mL) 중의 1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(1.5 g, 11.8 mmol) 및 (Z)-사이클로헵트-4-엔온(1.4 g, 13.0 mmol)의 용액에 리튬 헥사메틸다이실라자이드(THF 중 1.0 M, 30 mL, 29.5 mmol)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 -40℃로 가온하고, 90분 동안 교반시키고, 포화 수성 암모늄 클로라이드 용액(30 mL)을 첨가하고(처음에 적가), 혼합물을 실온으로 가온시키고, EtOAc(150 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(30 mL)로 세척하고, 염수(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(20 내지 25% EtOAc)로 정제하여 (Z)-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-4-엔올을 황갈색 오일(1.37 g, 49%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 5.96-5.86(m, 2H), 4.13(s, 3H), 3.70(s, 1H), 2.63-2.54(m, 2H), 2.41-2.31(m, 2H), 2.16-2.03(m, 2H), 2.00-1.92(m, 2H).
중간체 219 5-((1E,4Z)-사이클로헵타-1,4-다이엔일)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00278
무수 DCM(60 mL) 중의 (Z)-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-4-엔올(1.35 g, 5.70 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중 50%, 6.2 mL, 17.1 mmol)의 용액을 적가하고, 반응 혼합물을 실온에서 90분 동안 교반시키고, 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 포화 수성 NaHCO3 용액(70 mL)을 첨가하고(처음에 적가), DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(15 내지 20% EtOAc/헥산)로 정제하여 5-((1E,4Z)-사이클로헵타-1,4-다이엔일)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸을 담황색 오일(523 mg, 42%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06(s, 1H), 5.90(t, J = 5.6 Hz, 1H), 5.88-5.79(m, 1H), 5.71-5.63(m, 1H), 3.82(s, 3H), 3.14-3.08(m, 2H), 2.62-2.55(m, 2H), 2.44-2.37(m, 2H).
중간체 220 (Z)-5-(1-플루오로사이클로헵트-4-에닐)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00279
중간체 219에 대한 절차에 따라 (Z)-5-(1-플루오로사이클로헵트-4-에닐)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸을 회백색 고체(615 mg, 45%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03 및 8.02(2s, 1H), 5.98-5.94(m, 2H), 4.10 및 4.08(2s, 3H), 2.67-2.54(m, 3H), 2.49(t, J = 13.6 Hz, 1H), 2.10-1.93(m, 4H).
중간체 221 (E)-2-아지도-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-4-엔올
Figure pct00280
0℃로 냉각된, DCM(20 mL) 중의 5-((1E,4Z)-사이클로헵타-1,4-다이엔일)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(520 mg, 2.37 mmol)의 용액에 m-CPBA(70%, 646 mg, 2.61 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 90분 동안 교반하였다. 포화 수성 NaHCO3 용액(30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 2M NaOH 용액(3 x 30 mL)으로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 담황색 고체(595 mg)를 제공하였다. MeOH/물(16mL/4mL) 중의 상기 고체(590 mg, 2.51 mmol)의 서스펜션을 암모늄 클로라이드(333 mg, 6.28 mmol) 및 나트륨 아자이드(816 mg, 12.6 mmol)로 처리하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 18 시간 동안 가열하였다. MeOH를 감압 하에 제거하고, 잔사를 물(20 mL)로 희석하고, EtOAc(100 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(50 내지 60% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (E)-2-아지도-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-4-엔올을 담황색 오일(294 mg, 2단계에 걸쳐 42%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06(s, 1H), 5.96(dd, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H), 3.84-3.70(m, 4H), 3.56-3.47(m, 1H), 2.71(ddd, J = 15.5, 8.3, 2.3 Hz, 1H), 2.61-2.36(m, 4H), 2.23-2.14(m, 1H), 1.89-1.76(m, 1H).
중간체 222 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 1)
Figure pct00281
무수 DCM(20 mL) 중의 (E)-2-아지도-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-4-엔올(450 mg, 1.62 mmol)의 용액에 질소 하에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중 50%, 1.5 mL, 4.05 mmol)의 용액을 적가하고, 혼합물을 교반된 실온에서 2시간 동안 가열하였다. 포화 수성 NaHCO3 용액(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(75 mL)으로 추출하였다. 유기층을 NaHCO3 용액(20 mL)으로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(20 내지 40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 담황색 오일(260 mg)을 제공하였다. THF/물(10 mL/2 mL) 중의 상기 오일(250 mg, 0.89 mmol)의 용액을 트라이페닐포스핀(234 mg, 0.89 mmol)으로 처리하고, 혼합물을 60℃에서 6시간 동안 가열하였다. 트라이페닐포스핀(24 mg, 0.09 mmol)을 반응 혼합물에 좀 더 첨가하고, 이를 60℃에서 1시간 동안 가열하였다. 혼합물을 EtOAc(75 mL) 및 포화 수성 NaHCO3 용액(10 mL)으로 나누고, 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 황색 오일을 제공하였다. DCM(10 mL) 중의 상기 오일(227 mg, 0.89 mmol) 및 DIPEA(0.47 mL, 2.69 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산 무수물(0.15 mL, 1.07 mmol)을 적가하고, 혼합물을 실온에서 72시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 담황색 점성 오일(240 mg)을 제공하였다. MeOH(50 mL) 중의 상기 오일(240 mg, 0.69 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 70℃, 유속: 1 mL/min, 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 담황색 포움(195 mg)을 제공하였다. DCM(20 mL) 중의 상기 포움(190 mg, 0.59 mmol)의 용액에 DIPEA(1.0 mL), PyBOP(767 mg, 1.48 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(231 mg, 0.65 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 물(30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL 및 30 mL)으로 추출하였다. 유기층들을 조합하고, MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(60 내지 70% EtOAc/이소헥산) 그 다음 키랄 분취용 HPLC로 정제하여 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 1)를 회백색 고체(53 mg, 5단계에 걸쳐 5%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.31(s, 1H), 8.70(s, 1H), 7.79(s, 1H), 7.40-7.33(m, 1H), 7.10-7.01(m, 2H), 6.41(d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.81-4.62(m, 1H), 4.17-4.06(m, 1H), 3.86(s, 3H), 2.90-2.79(m, 1H), 2.40-2.28(m, 1H), 2.22-1.89(m, 5H), 1.79-1.67(m, 1 H), 1.60-1.48(m, 10 H).
중간체 223 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 2)
Figure pct00282
중간체 222에 대한 절차에 따라 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 2)를 백색 고체(28 mg, 5단계에 걸쳐 3%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.31(s, 1H), 8.70(s, 1H), 7.79(s, 1H), 7.41-7.32(m, 1H), 7.12-7.02(m, 2H), 6.50(d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.81-4.63(m, 1H), 4.18-4.05(m, 1H), 3.86(s, 3H), 2.87-2.79(m, 1H), 2.38-2.25(m, 1H), 2.21-1.91(m, 5H), 1.68-1.50(m, 2 H), 1.54(s, 9H).
중간체 224 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 3 및 부분입체이성질체 4)
Figure pct00283
중간체 222에 대한 절차에 따라 실리카겔 칼럼 크로마토그래피로 정제한 후, 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 3 및 부분입체이성질체 4)를 거울상 이성질체들의 라세미 혼합물로서 회백색 고체(82 mg, 5단계에 걸쳐 8%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.35(s, 1H), 8.56(s, 1H), 7.78(s, 1H), 7.44-7.35(m, 1H), 7.11-7.01(m, 2H), 6.46(d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.64-4.44(m, 1H), 4.26-4.19(s, 1H), 3.85(s, 3H), 3.05-2.95(s, 1H), 2.36-2.27(m, 1H), 2.09-1.84(m, 7H), 1.54(s, 9H).
중간체 225 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 5)
Figure pct00284
중간체 222에 대한 절차에 따라 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 5)를 백색 고체(28 mg, 5단계에 걸쳐 3%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.31(s, 1H), 8.74(s, 1H), 7.84(s, 1H), 7.40-7.33(m, 1H), 7.14-7.04(m, 2H), 6.63(d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.06-4.88(m, 1H), 4.30-4.16(m, 1H), 3.85(s, 3H), 3.09-2.99(m, 1H), 2.35-1.88(m, 8H), 1.54(s, 9H).
중간체 226 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 6, 부분입체이성질체 7 및 부분입체이성질체 8)
Figure pct00285
중간체 222에 대한 절차에 따라 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 6, 부분입체이성질체 7 및 부분입체이성질체 8)를 백색 고체(76 mg, 5단계에 걸쳐 7%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.35 및 10.31(2s, 1H), 8.74 및 8.61(2s, 1H), 7.84 및 7.75(2s, 1H), 7.41-7.34(m, 1H), 7.12-7.02(m, 2H), 6.73-6.58(m, 1H), 4.31-4.11(m, 1H), 3.86 및 3.85(2s, 3H), 3.08-2.97(m, 1H), 2.44-1.71(m, 9H), 1.55(s, 9H).
중간체 227 (E)-5-(6,6-다이플루오로사이클로헵트-1-에닐)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00286
(E)-3-옥소사이클로헵트-1-에닐 트라이플루오로메탄설포네이트(1.8 g, 6.98 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-옥타메틸-2,2'-바이(1,3,2-다이옥사보롤란)(2.42 g, 9.52 mmol), 칼륨 아세테이트(1.56 g, 15.8 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2 DCM 착물(0.32 g, 0.39 mmol)을 탈기된 다이옥산(20 mL) 중에 현탁시키고, 혼합물을 80℃로 16시간 동안 가열하였다. 냉각 후, 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 다이옥산(3 x 20 mL)으로 세척하였다. 용액을 질소를 버블링함으로써 10분 동안 탈기시키고, 여기에 탈기된 수성 칼륨 아세테이트/나트륨 카보네이트 용액(1 M, 1:1, 20.9 mL, 20.9 mmol), Pd(dppf)Cl2 DCM 착물(0.32 g, 0.39 mmol) 및 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(1.54 g, 9.51 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 110℃로 24시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시키고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과시켰다. 여액을 감압 하에 농축시고, 잔사를 EtOAc(30 mL)에서 용해시키고, 물(3 x 20 mL)로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 오일(460 mg)을 제공하였다. DCM(8 mL) 중의 상기 오일(440 mg, 1.86 mmol)의 용액을 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중 50% 용액, 1.57 mL, 4.34 mmol)로 처리하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(20 mL)으로 희석시키고, 냉-수욕 내에서 냉각시키고, 포화 수성 NaHCO3(50 mL)으로 주의 깊게 켄칭하였다. 유기층을 물(2 x 20 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (E)-5-(6,6-다이플루오로사이클로헵트-1-에닐)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸을 오일(0.16 g, 3단계에 걸쳐 33%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06(s, 1H), 6.24-6.16(m, 1H), 3.84(s, 3H), 2.49-2.31(m, 4H), 1.88-1.75(m, 3H), 1.60(d, J = 6.5 Hz, 1H).
중간체 228 N-(4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드
Figure pct00287
4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(610 mg, 2.40 mmol)을 아세토니트릴(4 mL) 중에 용해시키고, 0℃로 냉각시키고, 농축된 황산(2.1 mL)을 적가했다. 반응을 실온으로 가온시키고, 1시간 동안 교반시킨 후, 얼음(150 g) 위에 붓고, KOH로 염기성화시키고, DCM(2 x 30 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(20 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 N-(4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드를 황색 고체(660 mg, 93%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.05-7.98(m, 1H), 5.31(s, 1H), 3.81-3.73(m, 3H), 3.35(ddd, J = 14.2, 9.3, 2.2 Hz, 1H), 3.22(t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.09(ddd, J = 14.2, 7.6, 2.5 Hz, 1H), 2.43-2.31(m, 2H), 2.05-1.95(m, 3H), 1.89-1.74(m, 4H), 1.53-1.36(m, 3H).
중간체 229 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-에톡시아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00288
중간체 54에 대한 절차에 따라 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올 및 아이오도에탄으로부터 출발하여 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-에톡시아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 핑크색 검(151 mg, 네 단계에 걸쳐 60%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.73(s, 1H), 7.16(s, 1H), 4.60-4.53(m, 1H), 3.69-3.36(m, 8H), 3.16-3.05(m, 1H), 2.90(dt, J = 14.4, 4.4 Hz, 1H), 2.64-2.27(m, 3H), 1.89-1.76(m, 3H), 1.22(t, J = 7.0 Hz, 3H).
중간체 230 신-5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올
Figure pct00289
중간체 119에 대한 절차에 따라 항-5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올로부터 출발하여 신-5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올을 갈색 오일(560 mg, 2단계에 걸쳐 78%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.97-7.92(m, 1H), 3.94(dt, J = 9.0, 2.7 Hz, 1H), 3.73-3.62(m, 1H), 3.53-3.22(m, 5H), 2.24-2.12(m, 2H), 2.02-1.88(m, 2H), 1.28-1.23(m, 2H), 1.15-1.05(m, 2H). OH는 관찰되지 않았다.
중간체 231 3급-부틸 1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일카바메이트
Figure pct00290
중간체 120에 대한 절차에 따라 신-5-아지도-1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올로부터 출발하여 3급-부틸 1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일카바메이트를 황색 오일(440 mg, 3단계에 걸쳐 61%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.95(s, 1H), 5.21(d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.00(d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.73-3.51(m, 3H), 3.56-3.27(m, 4H), 3.26-3.18(m, 1H), 3.10(d, J = 13.5 Hz, 1H), 2.28-2.16(m, 1H), 2.15-2.06(m, 1H), 1.93-1.79(m, 2H), 1.46(s, 9H), 1.37-1.03(m, 4H).
중간체 232 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-4-(트라이플루오로메틸)아제판-4-올
Figure pct00291
트라이플루오로메틸트라이메틸실란(1.42 mL, 9.70 mmol) 중의 벤질 4-옥소아제판-1-카복실레이트(2.0 g, 8.08 mmol)의 용액에 세슘 플루오라이드(70.4 mg, 0.40 mmol)를 첨가하였다. 19F NMR에 의해 트라이플루오로메틸트라이메틸실란이 완전히 소모된 것이 관찰될 때까지 반응 혼합물을 실온에서 교반하고, 1 M HCl 용액(50 mL)으로 켄칭하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 염수(50 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 벤질 4-하이드록시-4-(트라이플루오로메틸)아제판-1-카복실레이트를 황색 오일(1.48 g)로서 제공하였다. 에탄올(20 mL) 중의 상기 오일(1.3 g, 4.1 mmol)의 용액에 메틸사이클로 헥사다이엔(4.6 mL) 및 탄소상 10% 팔라듐(0.13 g)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 환류 가열시키고, 실온으로 냉각시키고, 셀라이트(등록상표)로 여과하고, MeOH로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DMSO(10 mL) 중에 용해시키고, 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(637 mg, 3.94 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(916 mg, 15.76 mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 70℃에서 16시간 동안 가열하고, 물(50 mL)로 켄칭하고, EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 물(100 mL) 및 염수(100 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-4-(트라이플루오로메틸)아제판-4-올을 황색 고체(1.06 g, 3단계에 걸쳐 40%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 3.78(s, 3H), 3.71(ddd, J = 14.7, 10.5, 2.0 Hz, 1H), 3.31(dt, J = 11.8, 4.4 Hz, 1H), 3.14(td, J = 11.3, 4.6 Hz, 1H), 3.06(ddd, J = 14.7, 5.7, 2.9 Hz, 1H), 2.31-2.13(m, 1H), 2.14-1.94(m, 5H), 1.92-1.83(m, 1H).
중간체 233 (E)-7-아지도-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-3-엔올
Figure pct00292
중간체 221에 대한 절차에 따라 (E)-7-아지도-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-3-엔올을 담황색 오일(244 mg, 2단계에 걸쳐 35%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06(s, 1H), 5.95(dd, J = 8.2, 5.1 Hz, 1H), 3.80(s, 3H), 3.69-3.61(m, 2H), 2.74-2.63(m, 1H), 2.61-2.41(m, 3H), 2.28-2.19(m, 1H), 1.97-1.86(m, 1 H). OH는 관찰되지 않았다.
중간체 234 3급-부틸 (E)-2-메톡시-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-4-에닐카바메이트
Figure pct00293
중간체 120에 대한 절차에 따라 (E)-7-아지도-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-3-엔올로부터 출발하여 3급-부틸 (E)-2-메톡시-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-4-에닐카바메이트를 담황색 고체(360 mg, 3단계에 걸쳐 62%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.05(s, 1H), 5.82(t, J = 6.5 Hz, 1H), 4.77(s, 1H), 3.93(s, 1H), 3.82(s, 3H), 3.42(s, 3H), 3.37(t, J = 7.6 Hz, 1H), 2.71-2.44(m, 3H), 2.34(t, J = 11.7 Hz, 1H), 2.22-2.11(m, 1H), 1.86-1.74(m, 1H), 1.47(s, 9H).
중간체 235 3급-부틸 4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트
Figure pct00294
-78℃로 냉각된, 다이에틸 에터(18 mL) 중의 벤질 4-옥소아제판-1-카복실레이트(2.0 g, 8.09 mmol)의 용액에 메틸리튬 리튬 브로마이드 착물(Et2O 중 1.5 M, 10.8 mL, 16.17 mmol)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 암모늄 클로라이드의 포화 용액(50 mL)으로 켄칭하였다. 반응을 실온으로 가온시키고, EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 벤질 4-하이드록시-4-메틸아제판-1-카복실레이트를 밝은 황색 오일(1.94 g)로서 제공하였다. MeOH(10 mL) 중의 상기 오일(884 mg, 3.36 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 50℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 DMSO(10 mL)에 용해시키고, 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(521 mg, 3.23 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(750 mg, 12.91 mmol)를 첨가했다. 반응 혼합물을 75℃에서 16시간 동안 가열한 후, 물(30 mL)로 켄칭했다. 혼합물을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 물(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올을 황색 오일(290 mg)로서 제공하였다. 아세트산(1.0 mL) 중의 상기 오일(260 mg, 1.04 mmol) 및 클로로아세토니트릴(139 mL, 2.09 mmol)의 용액에 0℃에서, 농축된 황산(308 mL, 3.15 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 추가의 2 시간 동안 교반시킨 후, 수성 2 M NaOH(10 mL)으로 켄칭하고, EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 2-클로로-N-(4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드를 황색 오일(264 mg)로서 제공하였다. 에탄올(1.4 mL) 및 아세트산(0.6 mL) 중의 상기 오일(264 mg, 0.80 mmol)의 용액에 티오우레아(73 mg, 0.96 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 환류 가열하고, 1M NaOH 용액(5 mL)으로 켄칭하고, EtOAc(10 mL)로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 MeOH 중의 1M NH3로 용리하는 SCX 칼럼에 통과시켜 4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민을 검(172 mg)으로서 제공하였다. DCM(5 mL) 중의 상기 검(166 mg, 0.65 mmol)의 용액에 DIPEA(0.57 mL, 3.27 mmol), 그 다음 다이-3급-부틸 다이카보네이트(171 mg, 0.78 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반시키고, 물(10 mL)로 켄칭하고, DCM(3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리기에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 황색 오일(188 mg, 6 단계에 걸쳐 14%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 4.53(s, 1H), 3.78(s, 3H), 3.38-3.28(m, 1H), 3.28-3.16(m, 2H), 3.11-3.03(m, 1H), 2.28-2.12(m, 2H), 1.90-1.69(m, 4H), 1.44(d, J = 7.2 Hz, 12H).
중간체 236 5-(4-플루오로-8-옥사바이사이클로[5.1.0]옥탄-4-일)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸
Figure pct00295
DCM(30 mL) 중의 (Z)-5-(1-플루오로사이클로헵트-4-에닐)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(900 mg, 3.77 mmol)의 용액에 0℃에서 메타-클로로퍼옥시벤조산(1.0 g, 4.14 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 90분 동안 교반시킨 후, 나트륨 수소카보네이트의 포화 용액(30 mL)으로 켄칭하였다. 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하고, 수성 2 M NaOH(2 x 50 mL) 및 염수(30 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 5-(4-플루오로-8-옥사바이사이클로[5.1.0]옥탄-4-일)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸을 무색 고체(982 mg, 정량적)로서 2:5 비율의 부분입체이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.07 및 8.01(2 s, 1H), 4.12-4.00(m, 3H), 3.27-3.11(m, 2H), 2.90-2.63(m, 2H), 2.24-1.74(m, 6H).
중간체 237 2-아지도-5-플루오로-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵탄올
Figure pct00296
DMF/물(10 mL/1 mL) 중의 5-(4-플루오로-8-옥사바이사이클로[5.1.0]옥탄-4-일)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸 (260 mg, 1.02 mmol)의 용액을 암모늄 클로라이드(135 mg, 2.55 mmol) 및 나트륨 아자이드(332 mg, 5.1 mmol)로 처리하고, 혼합물을 100℃에서 48 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 EtOAc(100 mL)로 추출하고, 유기층을 물(7 x 20 mL)로 세척하고, 염수(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 2-아지도-5-플루오로-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵탄올을 백색 고체(145 mg, 48%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06 및 8.05(2 s, 1H), 4.08 및 4.06(2 s, 3H), 3.83(dd, J = 10.7, 8.2 Hz, 1H), 3.65-3.58(m, 1H), 2.87-2.55(m, 2H), 2.33-2.21(m, 2H), 2.17-1.98(m, 3H), 1.98-1.84(m, 2H).
중간체 238 3급-부틸 5-플루오로-2-메톡시-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵틸카바메이트
Figure pct00297
중간체 120에 대한 절차에 따라 2-아지도-5-플루오로-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵탄올로부터 출발하여 3급-부틸 5-플루오로-2-메톡시-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵틸카바메이트를 회백색 고체(155 mg, 3단계에 걸쳐 53%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06(s, 1H), 4.08 및 4.06(2 s, 3H), 3.82(d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.39(s, 3H), 2.98-2.62(m, 1H), 2.16-1.84(m, 7H), 1.61-1.49(m, 2H), 1.47(s, 9H).
중간체 239 3급-부틸 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일카바메이트
Figure pct00298
DCM(150 mL) 중의 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(5.4 g, 19.2 mmol)의 용액에 0℃에서 THF 중의 디옥소플루오르(등록상표)의 용액(18.5 mL, 51.1 mmol)을 15 분에 걸쳐 적가하였다. 반응을 18 시간에 걸쳐 실온으로 가온시켰다. 이후 혼합물을 0℃로 냉각시킨 후, 나트륨 수소 카보네이트의 포화 용액(300 mL)을 적가했다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반시킨 후, 층들을 분리하고 수성 층을 DCM(200 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 4-아지도-5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판을 연한 녹색 검(3.66 g)으로서 제공하였다. THF(200 mL) 및 물(20 mL) 중의 상기 검(3.66 g, 12.9 mmol)의 용액에 트라이페닐포스핀(3.38 g, 12.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 18시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 이후 잔사를 EtOAc(500 mL)로 희석시키고, 1 N HCl 수용액(100 mL)으로 켄칭하고, 물(2 x 100 mL)로 세척하였다. 합친 수성 층들을 EtOAc(300 mL)로 세척한 후, 고체 나트륨 하이드록사이드로 pH 14로 염기성화시키고, DCM(3 x 250 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민을 연한 녹색 검(3.1 g)으로서 제공하였다. DCM(150 mL) 중의 상기 검(3.1 g, 12.0 mmol)의 용액에 트라이에틸아민(4 mL, 28.6 mmol), 그 다음 다이-3급-부틸 다이카보네이트(3.95 g, 18.0 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시킨 후, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸-5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 담황색 고체(3.7 g, 86%)로서 제공하였다. MeOH(100 mL) 중의 상기 고체(1.5 g, 4.19 mmol)의 용액에 암모늄 포메이트(1.95 g, 33.58 mmol), 그 다음 탄소상 10% 팔라듐(178 mg, 1.68 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 75℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 용매를 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 물(100 mL)에 용해시키고, DCM(3 x 100 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 3급-부틸 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일카바메이트를 자주색 고체(1.37 g, 네 단계에 걸쳐 54%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.13(s, 1H), 6.28(s, 1H), 4.75(d, J = 46.1 Hz, 1H), 4.26(s, 1H), 3.66(s, 3H), 3.49-3.30(m, 2H), 3.13-2.88(m, 2H), 2.62(s, 2H), 2.29-2.15(m, 1H), 2.10-1.97(m, 1H), 1.89-1.80(m, 1H), 1.75-1.54(m, 1H), 1.45(s, 9H).
중간체 240 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시-카보닐)-아미노-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일카바메이트
Figure pct00299
DCM(50 mL) 중의 PyBOP(3.06 g, 5.03 mmol) 및 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐-아미노)티아졸-4-카복실산(1.63 g, 5.04 mmol)의 용액을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 3급-부틸 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일카바메이트(1.37 g, 4.20 mmol) 및 DIPEA(1.17 mL, 6.71 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(50 mL)으로 희석시키고, 물(3 x 50 mL)로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 잔사를 정제하여 3급-부틸 1-(4-(5-아미노-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일카바메이트를 핑크색 고체(2.50 g, 94%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.27(s, 1H), 8.27(s, 1H), 7.64(s, 1H), 5.01(s, 1H), 4.86-4.60(m, 1H), 3.81-3.64(m, 3H), 3.44-3.27(m, 2H), 3.15-3.07(m, 2H), 2.28-2.10(m, 3H), 1.92-1.70(m, 2H), 1.52(s, 9H), 1.44(s, 9H).
중간체 240a 6-아지도-6-메틸-사이클로헥스-3-엔-1-올
Figure pct00300
나트륨 수소카보네이트(7.5 g, 89 mmol) 및 m-클로로퍼벤조산(20 g, 89 mmol)을 -15℃로 냉각된 DCM(250 mL) 중의 1-메틸사이클로헥사-1,4-다이엔(8.4 g, 89 mmol)의 용액에 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 반응을 나트륨 설파이트의 20% 용액(100 mL)으로 켄칭하고, 실온으로 가온시켰다. 수성 층을 DCM(3 x 100 mL)으로 추출하고, 합친 유기층들을 수성 나트륨 설파이트 용액(100 mL), 수성 NaHCO3(100 mL), 물(100 mL) 및 염수(100 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 에폭사이드를 무색 오일로서 제공하였다. 에폭사이드(2.1 g, 19.1 mmol)를 아세트산(5 mL) 및 물(25 mL) 중의 나트륨 아자이드(6.2 g, 95 mmol)의 혼합물에 서서히 첨가하고, 30℃에서 교반하고, 생성 혼합물을 16시간 동안 교반시켜서, 콘덴서 위에서 원위치에서 생성된 임의의 하이드라조산을 표백 용액에 불어 넣었다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 수성 NaHCO3(20 mL)로 켄칭하였다. 혼합물을 에터(3 x 50 mL)로 추출하고, 합친 유기물을 2 N 수성 NaOH(50 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 6-아지도-6-메틸-사이클로헥스-3-엔-1-올을 황색 오일(1.8 g, 2단계에 걸쳐 82%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 5.58-5.55(m, 2H), 3.77-3.73(m, 1H), 2.46(d, J = 6.5 Hz, 1H), 2.30-2.27(m, 2H), 2.10(s, 3H), 2.06-2.03(m, 2H).
중간체 241 5-아지도-1-벤질-5-메틸아제판-4-올
Figure pct00301
-78℃로 냉각된, MeOH/DCM(100 mL/20 mL) 중의 6-아지도-6-메틸사이클로헥스-3-엔올(3.9 g, 25 mmol)의 용액을 5분 동안 질소를 버블링함으로써 탈기시켰다. 이후 회청색이 남아있을 때까지 오존을 반응 혼합물을 통해 버블링하였다. 연한 색상만이 지속될 때까지 질소를 차가운 반응 혼합물을 통해 버블링하였다. MeOH(5 mL)에 용해된 벤질아민(2.7 g, 25 mmol)의 용액, 그 다음 MeOH(10 mL) 중의 NaCNBH3(6.4 g, 101.5 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온시키고, 16시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 EtOAc(50 mL) 및 물(50 mL)로 나누었다. 수성 층을 EtOAc(3 x 50 mL)로 추가로 추출하고, 합친 유기층들을 염수(40 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(1 내지 10% MeOH/DCM 중의 7 M NH3)로 잔사를 정제하여 5-아지도-1-벤질-5-메틸아제판-4-올을 점성 황색 오일(4.8 g, 73%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.25-7.34(m, 5H), 3.69-3.62(m, 2H), 3.51-3.47(m, 2H), 2.96-2.89(m, 1H), 2.69-2.62(m, 3H), 2.19-2.11(m, 1H), 1.99-1.85(m, 1H), 1.78-1.68(m, 1H), 1.61-1.57(m, 1H), 1.43(s, 3H).
중간체 242 5-아미노-1-벤질-5-메틸아제판-4-올
Figure pct00302
THF(12 mL) 및 물(4 mL) 중의 5-아지도-1-벤질-5-메틸아제판-4-올(1.5 g, 5.76 mmol)의 용액에 트라이메틸포스핀(톨루엔 중 1 M, 28 mL, 28.9 mmol)의 용액을 첨가하고, 반응을 65℃에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 1 M HCl(30 mL) 중에 용해시키고, EtOAc(2 x 25 mL)로 추출하였다. 수성 층을 수성 6 M NaOH로 pH 14로 염기성화시키고, DCM(3 x 30 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(1 내지 10% MeOH/DCM 중의 7 M NH3)로 정제하여 5-아미노-1-벤질-5-메틸아제판-4-올을 점성 황색 오일(1.2 g, 89%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.34-7.20(m, 5H), 3.60-3.52(m, 2H), 3.50-3.46(m, 2H), 2.80-2.79(m, 1H), 2.70-2.45(m, 4H), 2.15-1.95(m, 1H), 1.79-1.72(m, 2H), 1.49-1.40(m, 2H), 1.19(s, 3H).
중간체 243 N-(1-벤질-5-하이드록시-4-메틸아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드
Figure pct00303
0℃에서, THF(20 mL) 중의 5-아미노-1-벤질-5-메틸아제판-4-올(1.2 g, 5.12 mmol) 및 Et3N(0.77 g, 7.68 mmol)의 용액에 트라이플루오로아세트산 무수물(1.18 g, 5.63 mmol, 0.78 mL)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc(10 mL) 및 물(10 mL)로 나누고, 수성 층을 EtOAc(3 x 25 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(30 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(1 내지 5%(MeOH 중의 7 M NH3)/DCM)로 정제하여 N-(1-벤질-5-하이드록시-4-메틸아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(0.8 g, 47 %)를 황색 검으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.34-7.28(m, 5H), 6.65(br s, 1H), 4.22-4.15(m, 1H), 3.60(dd, J = 9.6, 9.7 Hz, 2H), 2.90-2.75(m, 1H), 2.70-2.65(m, 1H), 2.60-2.49(m, 2H), 2.20-2.10(m, 1H), 1.95-1.80(m, 2H), 1.75-1.55(m, 2H), 1.58(s, 3H).
중간체 244 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-하이드록시-4-메틸아제판-4-일)아세트아미드
Figure pct00304
MeOH(30 mL) 중의 N-(1-벤질-5-하이드록시-4-메틸아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(1.7 g, 5.0 mmol)의 용액에 1M HCl(1 mL) 및 탄소 상의 팔라듐 하이드록사이드(0.25 g)를 첨가하였다. 혼합물을 수소 가스(40 psi)의 분위기 하에 72시간 동안 진탕시켰다. 혼합물을 MeOH(30 mL)로 세척하는 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 (1-10%(MeOH 중의 7 M NH3)/DCM)로 용리하는 SCX 칼럼에 통과시켜 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-하이드록시-4-메틸아제판-4-일)아세트아미드를 황색 검(0.8 g, 66%)으로서 수득하였다. 1H(400 MHz, CDCl3) δ 6.90(br s, 1H), 4.22-4.16(m, 1H), 3.70-3.60(m, 1H), 3.40-3.35(m, 1H), 3.15-2.99(m, 1H), 2.90-2.75(m, 2H), 2.20-2.05(m, 1H), 1.99-1.75(m, 4H), 1.53(s, 3H).
중간체 245 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-하이드록시-4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드
Figure pct00305
실시예 213에 대한 절차에 따라 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-하이드록시-4-메틸아제판-4-일)아세트아미드로부터 출발하여 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-하이드록시-4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드를 백색 고체(400 mg, 88%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 3.77(s, 2H), 3.54(dd, J = 10.2, 3.2 Hz, 1H), 3.49(s, 3H), 3.41-3.32(m, 1H), 3.30-3.22(m, 1H), 3.13(dt, J = 13.1, 4.7 Hz, 2H), 2.22-2.00(m, 1H), 1.95-1.72(m, 2H), 1.24-1.15(m, 3H), 1.08(d, J = 7.0 Hz, 1H).
중간체 246 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트
Figure pct00306
에탄올(100 mL) 및 물(10 mL) 중의 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(2.5 g, 6.67 mmol)의 용액에 암모늄 클로라이드(3.5 g, 65.0 mmol) 및 철 분말(3.0 g, 53.7 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2.5시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시키고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, MeOH로 세척하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(200 mL) 중에 용해시키고, 나트륨 수소카보네이트의 포화 용액(300 mL) 및 나트륨 설파이트의 10% 용액(100 mL)으로 켄칭하고, 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 층들을 분리하고, 수성 층을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 30% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트를 오렌지 포움(2.12 g)으로서 제공하였다. DCM(50 mL) 중의 PyBOP(1.92 g, 3.70 mmol) 및 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐-아미노)티아졸-4-카복실산(795 mg, 2.46 mmol)의 용액을 실온에서 15분 동안 교반하였다. 3급-부틸 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트(850 mg, 2.46 mmol) 및 DIPEA(2.0 mL, 11.4 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(50 mL)으로 희석하고, 나트륨 수소카보네이트의 포화 용액(100 mL)으로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트를 담황색 포움(1.35g, 2단계에 걸쳐 77%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.24(s, 1H), 8.37(s, 1H), 7.65(s, 1H), 4.88(s, 1H), 4.04(s, 1H), 3.77(s, 3H), 3.63-3.43(m, 2H), 3.38-3.24(m, 2H), 2.52-2.40(m, 2H), 2.13-2.05(m, 1H), 1.99(s, 1H), 1.53(s, 9H), 1.43(s, 9H).
중간체 247 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시-카보닐-아미노)-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6-메톡시-6-메틸아제판-4-일카바메이트
Figure pct00307
실시예 245에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6-메톡시-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시-카보닐-아미노)-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6-메톡시-6-메틸아제판-4-일카바메이트를 담황색 포움(530 mg, 2단계에 걸쳐 79%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.43(s, 1H), 9.25(s, 1H), 7.92(s, 1H), 4.60(s, 1H), 4.03(d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.71(s, 3H), 3.38(s, 3H), 3.39-3.19(m, 4H), 3.06(d, J = 14.5 Hz, 1H), 2.36(d, J = 14.2 Hz, 1H), 2.16(d, J = 13.4 Hz, 1H), 1.77(d, J = 12.1 Hz, 1H), 1.52(s, 9H), 1.43(s, 9H), 1.12(s, 3H).
중간체 248 (E)-3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-2-엔온
Figure pct00308
DCM(500 mL) 중의 사이클로헵탄-1,3-다이온(10 g, 79.3 mmol)의 용액에 피리딘(12.8 mL, 158.6 mmol)을 첨가하였다. 용액을 -78℃에서 냉각시킨 후, 트라이플릭산 무수물(13.2 mL, 95.1 mmol)을 적가했다. 혼합물을 0℃로 가온하고, 4시간 동안 교반시킨 후, 1 M HCl(150 mL)로 켄칭하였다. 유기층을 나트륨 수소카보네이트의 포화 용액(200 mL)으로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 (E)-3-옥소사이클로헵트-1-에닐 트라이플루오로메탄설포네이트를 갈색 오일로서 제공하였다. 탈기된 다이옥산(200 mL) 중의 상기 오일(1.8 g, 6.97 mmol)의 용액에 칼륨 아세테이트(15.6 g, 158.6 mmol), 비스(피나콜레이트)다이보론(24.2 g, 95.1 mmol) 및 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)-페로센] 다이클로로팔라듐(II) 착물과 다이클로로메탄(3.24 g, 3.97 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 90℃에서 18시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, MeOH(50 mL)로 세척하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 탈기된 다이옥산(200 mL)에 용해시킨 후, 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(15.4 g, 95.1 mmol)을 첨가하고, 그 다음 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센] 다이클로로팔라듐(II), 착물과 다이클로로메탄(3.24 mg, 3.97 mmol) 및 나트륨 카보네이트/칼륨 아세테이트의 1/1 수용액(63 mL, 3.8 M)을 첨가하였다. 혼합물을 105℃에서 3시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, MeOH(50 mL)로 세척했다. 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 EtOAc(50 mL)에서 용해시키고, 물(50 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (E)-3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-2-엔온을 밝은 갈색 고체(7.2 g, 3단계에 걸쳐 39%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.08(s, 1H), 6.09(s, 1H), 3.83(s, 3H), 2.81-2.77(m, 2H), 2.71-2.67(m, 2H), 2.07-1.97(m, 4H).
중간체 249 (2E,6Z)-3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵타-2,6-다이엔온
Figure pct00309
LiHMDS(THF 중의 1 M, 1.28 mL, 1.28 mmol)의 용액에 -78℃에서 (E)-3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-2-엔온(150 mg, 0.64 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반하였다. THF(0.5 mL) 중의 페닐셀레늄 브로마이드(453 mg, 1.92 mmol)의 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃로 가온시키고, 45분 동안 교반시킨 후, 암모늄 클로라이드의 포화 수용액(2 mL)으로 켄칭하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 5 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 (E)-3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-7-(페닐셀라닐)사이클로헵트-2-엔온을 오일로서 제공하였다. 상기 오일을 DCM(3 mL) 중에 용해시키고, 피리딘(0.1 mL, 1.28 mmol), 그 다음 수소 퍼옥사이드(물 중의 30% wt, 0.37 mL, 3.34 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 1 M HCl(10 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(2 x 5 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 1 M HCl(5 mL), 물(5 mL) 및 염수(5 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (2E,6Z)-3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵타-2,6-다이엔온을 황색 오일(26 mg, 3단계에 걸쳐 17%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.11(s, 1H), 6.88-6.82(m, 1H), 6.26-6.23(dd, J = 12.0, 1.6 Hz, 1H), 6.19(d, J = 2.0 Hz, 1H), 3.87(s, 3H), 2.82-2.73(m, 4H).
중간체 250 (E)-3급-부틸 5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-옥소사이클로헵트-4-에닐카바메이트
Figure pct00310
아세토니트릴(10 mL) 중의 (2E,6Z)-3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵타-2,6-다이엔온(690 mg, 2.95 mmol)의 용액에 트라이메틸실릴 아자이드(1 mL, 7.57 mmol) 및 앰버라이트(등록상표) IRA900F 수지(590 mg, 1.47 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 5시간 동안 교반시키고, 실온으로 냉각시키고, 여과시키고, 감압 하에 농축시켜 (E)-6-아지도-3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-2-엔온을 황색 오일로서 제공하였다. THF(20 mL) 및 물(6 mL) 중의 상기 오일(810 mg, 2.93 mmol)의 용액에 나트륨 보로하이드라이드(166 mg, 4.40 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반시킨 후, 물(50 mL)로 희석시켰다. 혼합물을 EtOAc(100 mL)로 추출하고, 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (E)-6-아지도-3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-2-엔올을 황색 오일로서 제공하였다. 상기 오일(810 mg, 2.91 mmol)을 THF(15 mL) 중에 용해시키고, THF(45 mL) 및 물(1.5 mL) 중의 폴리머-지지된 트라이페닐포스핀(3.1 g, 5.76 mmol)의 서스펜션을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 18시간 동안 부드럽게 교반시키고, 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(30 mL) 중에 희석시키고, 다이-3급-부틸 다이카보네이트(754 mg, 3.46 mmol) 및 DIPEA(1.51 mL, 8.64 mmol)를 첨가했다. 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반시키고, DCM(50 mL)으로 희석시키고, 나트륨 수소카보네이트의 포화 용액(50 mL)으로 켄칭하였다. 유기층을 물(50 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (E)-3급-부틸 5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-옥소사이클로헵트-4-에닐카바메이트를 백색 포움(620 mg, 3단계에 걸쳐 59%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.05(s, 1H), 6.03-5.99(m, 1H), 4.82-4.60(m, 2H), 3.86-3.82(m, 4H), 2.82-2.34(m, 1H), 2.29-2.35(m, 1H), 2.34-2.20(m, 2H), 2.15-2.04(m, 1H), 1.85-1.51(m, 2H), 1.45(s, 9H).
중간체 251 (Z)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00311
DMSO(650 mL) 중의 (Z)-2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀 하이드로클로라이드(32.3 g, 0.24 mmol)의 용액에 3-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(37.2 g, 0.23 mmol) 그 다음 DIPEA(64 mL, 0.36 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(56.2 g, 0.96 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75℃에서 25 시간 동안 가열시키고, 실온으로 냉각시키고, 물(1.5 L)에 붓고, EtOAc(4 x 500 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 물(400 mL) 및 염수(300 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 (Z)-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-3-일)-2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀을 밝은 갈색 고체(50.7 g)로 제공하였다. 에탄올(80 mL) 및 물(8 mL) 중의 상기 고체(1.80 g, 8.1 mmol)의 용액에 암모늄 클로라이드(2.15 g, 40.1 mmol) 및 철 분말(1.77 g, 31.8 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 1.5 시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시키고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(200 mL) 중에 용해시키고, 물(200 mL)로 세척하였다. 수성 층을 DCM(100 mL)으로 추출하고, 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 (Z)-1-메틸-3-(2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀-1-일)-1H-피라졸-4-아민을 갈색 오일(1.36 g, 87%)로서 제공하였다. DMF(30 mL) 중의 HATU(3.22 g, 8.47 mmol), 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산(2.52 g, 7.07 mmol), (Z)-1-메틸-3-(2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀-1-일)-1H-피라졸-4-아민(1.36 g, 7.07 mmol) 및 DIPEA(2.48 mL, 14.2 mmol)의 용액을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(50 mL)으로 희석시키고, 물(100 mL)로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(5 내지 80% DCM/DCM 중 10% MeOH)로 정제하여 (Z)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 갈색 고체(2.71 g, 2단계에 걸쳐 72%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.39(s, 1H), 8.82(s, 1H), 7.85(s, 1H), 7.40-7.30(m, 1H), 7.08-6.99(m, 2H), 5.93-5.84(m, 2H), 3.77(s, 3H), 3.19(t, J = 5.1 Hz, 4H), 2.42-2.37(m, 4H), 1.58-1.48(m, 9H).
중간체 252 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-온
Figure pct00312
에탄올(10 mL) 중의 3-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(1.0 g, 6.17 mmol)의 용액에 DIPEA(2 mL, 11.4 mmol) 그 다음 4-하이드록시피리딘(686 mg, 6.79 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 130℃에서 마이크로파로 60분 동안 가열한 후, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(75 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-올을 밝은 황색 오일(1.46 g)로서 제공하였다. DCM(40 mL) 중의 상기 오일(1.40 g, 6.17 mmol)의 용액에 데스-마틴 퍼아이오디난(3.1 g, 7.41 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반시키고, DCM(100 mL)으로 희석시키고, 포화 수성 나트륨 수소카보네이트(30 mL), 그 다음 포화 수성 나트륨 티오설페이트(30 mL), 포화 수성 나트륨 수소카보네이트(30 mL) 및 염수(30 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(50 내지 75% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-온을 황색 고체(1.32 g, 2단계에 걸쳐 95%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06(s, 1H), 3.86(s, 3H), 3.54(t, J = 6.0 Hz, 4H), 2.65(t, J = 6.0 Hz, 4H).
중간체 253 4-(아지도메틸)-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-올
Figure pct00313
나트륨 하이드라이드(255 mg, 6.38 mmol)를 DMSO(15 mL)에 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 15분 동안 교반시킨 후, 트라이메틸 설폭소늄 아이오다이드(1.34 g, 6.09 mmol)를 첨가하였다. 90분 동안 실온에서 교반시킨 후, DMSO(15 mL) 중의 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-온(1.3 g, 5.80 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 55℃에서 2시간 동안 가열한 후, 물(200 mL)에 붓고, EtOAc(3 x 80 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 6-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1-옥사-6-아자스피로[2.5]옥탄을 오렌지 액체로서 제공하였다. MeOH(25 mL) 및 물(5 mL) 중의 상기 액체(1.38 g, 5.80 mmol)의 용액에 암모늄 클로라이드(768 mg, 14.4 mmol) 그 다음 나트륨 아자이드(1.9 g, 29.2 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 18시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시키고, MeOH를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 물(20 mL)로 희석시키고, EtOAc(150 mL)로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL) 및 염수(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(50 내지 75% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 4-(아지도메틸)-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-올을 황색 오일(1.03 g, 2단계에 걸쳐 63%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 3.76(s, 3H), 3.64-3.54(m, 2H), 3.42(s, 2H), 3.05-2.96(m, 2H), 1.92(s, 1H), 1.81-1.77(m, 4H).
중간체 254 3급-부틸(4-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸카바메이트
Figure pct00314
중간체 120에 대한 절차에 따라 4-(아지도메틸)-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-올로부터 출발하여 3급-부틸(4-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸카바메이트를 황색 오일(330 mg, 3단계에 걸쳐 88%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.01(s, 1H), 4.72(s, 1H), 3.74(s, 3H), 3.51(t, J = 11.8 Hz, 2H), 3.28(d, J = 5.9 Hz, 2H), 3.25(s, 3H), 2.92(d, J = 11.8 Hz, 2H), 1.91(d, J = 13.5 Hz, 2H), 1.66(t, J = 13.5 Hz, 2H), 1.45(s, 9H).
중간체 255 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-플루오로-2-하이드록시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵틸)아세트아미드
Figure pct00315
THF/물(20 mL/4 mL) 중의 2-아지도-5-플루오로-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵탄올(280 mg, 094 mmol)의 용액을 트라이페닐포스핀(270 g, 1.03 mmol)으로 처리하고, 혼합물을 60℃에서 바람막이 뒤에서 18시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 MeOH로 세척되고 MeOH 중의 3 N NH3로 용리하는 SCX 카트리지로 정제하고, 2-아미노-5-플루오로-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵탄올을 무색 오일로서 제공하였다. 무수 DCM(20 mL) 중의 상기 오일(256 mg, 0.94 mmol)의 용액에 0℃에서 DIPEA(0.49 mL, 2.82 mmol)를 천천히 적가하고, 그 다음 트라이플루오로아세트산 무수물(0.16 ml, 1.13 mmol)을 적가했다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 18시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(30 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-플루오로-2-하이드록시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵틸)아세트아미드를 담황색 오일(130 mg, 2단계에 걸쳐 38%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.07 및 8.06(2s, 1H), 6.53(s, 1H), 4.08 및 4.06(2s, 3H), 4.05-3.92(m, 2H), 3.06-2.69(m, 3H), 2.32-1.89(m, 6H).
중간체 257 4-(아미노메틸)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)피페리딘-4-올
Figure pct00316
나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 200 mg, 4.9 mmol)를 DMSO(15 mL)에 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 15분 동안 교반시킨 후, 트라이메틸 설폭소늄 아이오다이드(1.0 g, 4.6 mmol)를 첨가하였다. 90분 동안 실온에서 교반시킨 후, DMSO(15 mL) 중의 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-온(1.0 g, 4.45 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 55℃에서 3시간 동안 가열시킨 후, 물(50 mL)에 붓고, EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 6-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1-옥사-6-아자스피로[2.5]옥탄을 오렌지 액체로서 제공하였다. 반응 튜브 내의 상기 액체(0.4 g, 1.67 mmol)의 용액에 MeOH 중의 NH3 7 M 용액(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 밀봉된 튜브 내에서 실온에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔사를 실리카겔 크로마토그래피(1 내지 10% MeOH/DCM 중의 7 M NH3)로 정제하여 4-(아미노메틸)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)피페리딘-4-올을 황색 고체로서 수득하였다(350 mg, 2단계에 걸쳐 60%). 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02(s, 1H), 3.76(s, 3H), 3.64-3.54(m, 2H), 3.09-3.03(m, 2H), 2.72(s, 2H), 1.73-1.62(m, 4H). 치환가능한것은 관찰되지 않았다.
중간체 258 3급-부틸 N-((4-하이드록시-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-4-피페리딜)메틸)카바메이트
Figure pct00317
0℃로 냉각된, DCM(10 mL) 중의 4-(아미노메틸)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)피페리딘-4-올(150 mg, 0.58 mml), 트라이에틸아민(0.12 mL, 0.88 mmol) 및 DMAP(17 mg, 0.15 mmol)에 DCM(2 mL) 중의 다이-3급-부틸 다이카보네이트(140 mg, 0.65 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하고, 수성 층을 DCM(3 x 15 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(15 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(1 내지 10% MeOH/DCM)로 정제하여 3급-부틸 N-((4-하이드록시-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-4-피페리딜)메틸)카바메이트를 황색 고체(140 mg, 68%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02(s, 1H), 5.10-5.03(m, 1H), 3.76(s, 3H), 3.61-3.49(m, 2H), 3.25(d, J = 6.3 Hz, 2H), 3.08-2.96(m, 2H), 1.77-1.72(m, 4H), 1.46(s, 9H). OH는 관찰되지 않았다.
중간체 259 3급-부틸 3-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-11-옥사-3,8-다이아자스피로[5.5]운데칸-8-카복실레이트
Figure pct00318
THF(25 mL) 중의 4-(아미노메틸)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)피페리딘-4-올(0.5 g, 1.95 mmol)의 용액에 물(10 mL) 중에 용해된 K2CO3(0.68 g, 4.98 mmol)를 첨가하였다. 0℃로 냉각시킨 후, 클로로아세틸 클로라이드(0.19 mL, 2.45 mmol)를 서서히 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온시키고, 16시간 동안 교반시키고, 물(15 mL) 및 EtOAc(15 mL)로 나누고, 수성 층을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 황색 고체를 제공하였다. 이를 3급-부탄올(15 mL) 중에 용해시키고, THF(3 mL) 및 칼륨 3급-부톡사이드(0.34 g, 2.9 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 85℃에서 16시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 물(20 mL) 및 EtOAc(20 mL)로 나누고, 수성 층을 EtOAc(3 x 30 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(1 내지 10%, MeOH/DCM)로 정제하여 황색 고체(0.47 g)를 제공하였다. 상기 고체를 THF(15 mL) 중에 용해시키고, 보란 용액(THF 중 1 M, 10 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 66℃에서 72시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시켰다. 반응을 1 M 염화 수소산(5 mL)으로 켄칭하고, EtOAc(3 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. DCM(10 mL) 중의 수득된 중간체(200 mg)의 용액에 트라이에틸아민(0.12 mL, 0.85 mmol) 및 DMAP(20 mg, 0.14 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, DCM(2 mL) 중의 다이-3급-부틸 다이카보네이트(0.18 g, 0.85 mmol)의 용액을 서서히 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온시키고, 16시간 동안 교반하였다. 물(5 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(10 내지 100%, EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 3-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-11-옥사-3,8-다이아자스피로[5.5]운데칸-8-카복실레이트를 회백색 고체(110 mg, 3단계에 걸쳐 44%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02(s, 1H), 3.82-3.59(m, 5H), 3.50-3.32(m, 4H), 2.00-1.85(m, 4H), 1.82-1.69(m, 4H), 1.44(s, 9H).
중간체 265 5-((4-메톡시페닐)메톡시)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-올
Figure pct00319
MeOH(25 mL) 중의 (Z)-2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀 하이드로클로라이드(5.0 g, 25.38 mmol)의 용액에 0℃에서 다이옥산 중의 HCl(4 M, 0.10 mol, 25 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 5분 동안 교반시키고, 실온으로 가온하고, 추가로 3.5 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 조 잔사를 DMSO(90 mL) 중에 용해하였다. DIPEA(8.80 mL, 50.52 mmol)를 첨가하고, 그 다음 5-클로로-1-메틸-4-니트로-피라졸(4.1 g, 25.37 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(5.9 g, 101.54 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 18시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응을 물(500 mL)로 켄칭하고, EtOAc(3 x 200 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 물(200 mL) 및 염수(200 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 담황색 고체(5.22 g)를 제공하였다. DCM(50 mL) 중의 상기 고체의 용액(3.13 g, 14.10 mmol)에 3-클로로퍼벤조산(7.30 g, 21.10 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(250 mL)으로 희석시키고, 포화 수성 NaHCO3(250 mL) 및 1 M 수성 NaOH(150 mL)로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 담황색 고체(3.03 g)를 제공하였다. DCM(30 mL) 중의 상기 고체(1.29 g, 5.42 mmol) 및 파라-메톡시벤질알코올(3.74 g, 27.10 mmol)의 용액에 구리(II) 트라이플루오로메탄설포네이트(0.20 g, 0.54 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 추가의 구리(II) 트라이플루오로메탄설포네이트(0.10 g, 0.26 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 추가로 48 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(250 mL)로 켄칭하고, DCM(2 x 250 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(20 내지 90% EtOAc/이소헥산 이후 0-20% EtOAc/DCM)로 정제하여 5-((4-메톡시페닐)메톡시)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-올을 담황색 검(800 mg, 네 단계에 걸쳐 8%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(t, J = 3.4 Hz, 1H), 7.31-7.25(m, 2H), 6.92-6.87(m, 2H), 4.65(d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.49-4.38(m, 1H), 3.98-3.67(m, 4H), 3.73(s, 3H), 3.57-3.44(m, 1H), 3.34-3.23(m, 2H), 3.22-3.12(m, 2H), 2.95(d, J = 1.3 Hz, 1H), 2.25-2.10(m, 2H), 1.91-1.75(m, 2H).
중간체 266 3급-부틸 N-(2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-((5-(4-하이드록시-5-((4-메톡시페닐)메톡시)아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일)카바모일)티아졸-5-일]카바메이트
Figure pct00320
EtOH(30 mL) 및 물(3 mL) 중의 5-((4-메톡시페닐)메톡시)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-올(0.80 g, 2.18 mmol)의 용액에 철 분말(0.90 g, 16.11 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각하고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(50 mL) 중에 용해시키고, 물(50 mL)로 세척하였다. 수성 층을 DCM(50 mL)으로 재-추출하고, 합친 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 연한 오렌지 검을 제공하였다. DMF(5 mL) 중의 상기 검(0.55 g, 1.60 mmol)의 용액에 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(0.62 g, 1.76 mmol), HATU(0.85 g, 2.40 mmol) 및 DIPEA(0.56 mL, 3.20 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 66 시간 동안 교반시키고, 포화 수성 NaHCO3(200 mL)로 켄칭하고, EtOAc(3 x 150 mL)로 켄칭하였다. 합친 유기층들을 염수(100 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/EtOAc)로 정제하여 3급-부틸 N-(2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-((5-(4-하이드록시-5-((4-메톡시페닐)메톡시)아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일)카바모일)티아졸-5-일]카바메이트를 연한 핑크색 고체(530 mg, 2단계에 걸쳐 35%)로 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.44(s, 1H), 9.02(s, 1H), 7.91(s, 1H), 7.38-7.28(m, 1H), 7.25(d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.00(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.92-6.84(m, 2H), 4.61(d, J = 11.1 Hz, 1H), 4.40(d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.91(t, J = 8.6 Hz, 1H), 3.81(s, 3H), 3.73(s, 3H), 3.55(td, J = 8.4, 3.4 Hz, 1H), 3.34-3.13(m, 4H), 3.10(s, 1H), 2.22-2.14(m, 2H), 1.93-1.77(m, 2H), 1.62-1.50(m, 9H).
중간체 267 5-아지도-4-메톡시-4-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판
Figure pct00321
DCM(100 mL) 중의 3급-부틸 4-아지도-5-하이드록시-아제판-1-카복실레이트(2.4g, 9.38 mmol)의 교반된 용액에 데스 마틴 퍼아이오디난(5.16 g, 12.19 mmol)을 단일 부분으로 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 추가의 DCM(100 mL) 그 다음 포화 NaHCO3(100 mL) 및 10% Na2S2O3(30 mL)을 추가하였다. 30분 동안 교반을 지속하였다. 층들을 분리하고 수성 물질을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 무색 오일(1.99g)을 제공하였다. 무수 Et2O(30 mL) 중의 상기 오일의 얼음-냉각된 용액에 질소 하에 Et2O 중의 메틸리튬 리튬 브로마이드 착물의 용액(1.5 M, 5.8 mL, 8.62 mmol)을 서서히 15 분에 걸쳐서 첨가하였다. 혼합물을 1시간 동안 얼음 냉각시키고, 실온으로 가온시키고, 18시간 동안 교반하였다. 얼음 내에서 냉각시킨 후, 포화 염수(100 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 100 mL)로 추출하고, 합친 추출물을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(20 내지 40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 무색 오일(0.92 g)을 제공하였다. 상기 오일을 무수 DMF(5 mL) 중에 질소 하에 용해시키고, 얼음 중에 냉각시키고, 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60% 분산물, 203 mg, 5.08 mmol)를 15 분에 걸쳐 적가하였다. 얼음으로 15분 동안 교반시킨 후, 아이오도메탄(1.06 mL, 16.94 mmol)을 적가하고 혼합물을 30분 동안 얼음 냉각시켰다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 4시간 동안 교반하였다. 포화 염수(100 mL)를 첨가하고, 혼합물을 Et2O(3 x 100 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 연한 녹색 오일(1.05g)을 제공하였다. 상기 오일을 MeOH(10 mL) 중에 용해시키고, 다이옥산 중 HCl의 용액(4 M, 10 mL)을 첨가하였다. 용액을 40℃로 가온시키고, 2.5시간 동안 교반하였다. 감압 하에 농축시켜 밝은 갈색 검(1.03g)을 수득하고, 이를 DMSO(10 mL) 중에 용해시켰다. 용액에 5-클로로-1-메틸-4-니트로-피라졸(712 mg, 4.41 mmol), 칼륨 플루오라이드(720 mg, 13.56 mmol) 및 DIPEA(1.2 mL, 6.78 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 70℃에서 질소 하에 19 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각시키고, 물(300 mL)에 붓고, EtOAc(3 x 150 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 물(150 mL) 및 염수(150 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-아지도-4-메톡시-4-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판을 담황색 고체(830 mg, 네 단계에 걸쳐 11%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 3.79(s, 3H), 3.47-3.35(m, 2H), 3.32-3.20(m, 5H), 3.06-2.95(m, 1H), 2.60-2.40(m, 1H), 2.18-2.08(m, 1H), 2.06-1.92(m, 1H), 1.80-1.65(m, 1H), 1.39(s, 3H).
중간체 268 3급-부틸 N-(5-메톡시-5-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일)카바메이트
Figure pct00322
중간체 122에 대한 절차에 따라 5-아지도-4-메톡시-4-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판으로부터 3급-부틸 N-(5-메톡시-5-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일)카바메이트를 황색 검(780 mg, 2단계에 걸쳐 75%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02(s, 1H), 5.25-5.15(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.74-3.65(m, 1H), 3.65-3.50(m, 1H), 3.48-3.35(m, 1H), 3.20(s, 3H), 3.19-3.10(m, 1H), 3.00-2.85(m, 1H), 2.45-2.30(m, 1H), 2.20-2.05(m, 1H), 1.90-1.70(m, 2H), 1.46(s, 9H), 1.28(s, 3H).
중간체 269 G02693495 3급-부틸 N-(1-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일)-5-메톡시-5-메틸-아제판-4-일]카바메이트
Figure pct00323
탄소상 10% 팔라듐(0.2 g)을 MeOH(30 mL) 중의 3급-부틸 N-(5-메톡시-5-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일)카바메이트(0.77 g, 2.01 mmol) 및 암모늄 포메이트(1.6 g, 25 mmol)의 교반된 용액에 질소 하에 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 환류 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 DCM(100 mL) 및 포화 수성 NaHCO3(150 mL)로 나누고, 수성 층을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 합친 유기물을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하여 밝은 갈색 검(700 mg)을 제공하였다. 상기 검을 DCM(10 mL) 및 DMF(10 mL) 중에 용해하고, 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(0.84 g, 2.2 mmol), HATU(1.14 g, 3 mmol) 및 DIPEA(0.7 mL, 4 mmol)을 첨가했다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. DCM을 감압 하에 제거하고, 포화 NaHCO3(300 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc(3 x 200 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 N-(1-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일)-5-메톡시-5-메틸-아제판-4-일]카바메이트를 담황색 고체(540 mg, 2단계에 걸쳐 39%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.39(s, 1H), 8.77(s, 1H), 7.89(s, 1H), 7.45-7.30(m, 1H), 7.12-6.95(m, 2H), 5.30-5.20(m, 1H), 3.73(s, 3H), 3.72-3.65(m, 1H), 3.50-3.28(m, 2H), 3.25-3.15(m, 1H), 3.14(s, 3H), 3.05-2.95(m, 1H), 2.40-2.20(m, 1H), 2.18-2.05(m, 1H), 1.95-1.70(m, 2H), 1.55(s, 9H), 1.45(s, 9H), 1.22(s, 3H).
중간체 270 3급-부틸 N-((4R,5S)-5-하이드록시-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일)카바메이트
Figure pct00324
3급-부틸 5-하이드록시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트의 라세미 혼합물(5.13 g, 14.13 mmol)을 거울상 이성질체들의 키랄 SFC 분리로 3급-부틸 N-((4R,5S)-5-하이드록시-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일)카바메이트를 황색 검(2.08 g, 98.3% ee, 40%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 5.12(s, 1H), 4.19(s, 1H), 3.93(t, J = 8.6 Hz, 1H), 3.79(s, 3H), 3.52-3.44(m, 1H), 3.33-3.26(m, 1H), 3.22-3.08(m, 2H), 2.53(s, 1H), 2.19-2.11(m, 1H), 2.02-1.95(m, 2H), 1.92-1.82(m, 1H), 1.46(s, 9H).
중간체 271 3급-부틸 N-((4S,5R)-5-하이드록시-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일)카바메이트
Figure pct00325
3급-부틸 5-하이드록시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트의 라세미 혼합물(5.13 g, 14.13 mmol)을 거울상 이성질체의 키랄 SFC 분리로 3급-부틸 N-((4S,5R)-5-하이드록시-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일)카바메이트를 황색 검(2.02 g, 97.6% ee, 39%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 5.12(s, 1H), 4.19(s, 1H), 3.93(t, J = 8.6 Hz, 1H), 3.79(s, 3H), 3.52-3.44(m, 1H), 3.33-3.26(m, 1H), 3.22-3.08(m, 2H), 2.53(s, 1H), 2.19-2.11(m, 1H), 2.02-1.95(m, 2H), 1.92-1.82(m, 1H), 1.46(s, 9H).
중간체 272 3급-부틸 N-((4R,5S)-1-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일)-5-하이드록시-아제판-4-일]카바메이트
Figure pct00326
메탄올(40 mL) 중의 3급-부틸 N-((4R,5S)-5-하이드록시-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일)카바메이트(1.92 g, 5.40 mmol)의 용액에 탄소상 10% 팔라듐(37 mg, 0.35 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 6 시간 동안 실온에서 600 psi의 수소 분위기 하에 교반하였다. 혼합물을 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 조 아미노-피라졸(1.5 g)을 제공하였다. DCM(50 mL) 중의 PyBOP(3.35 g, 6.44 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(1.8 g, 5.06 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. DCM(50 mL) 중의 조 아미노-피라졸(1.5 g, 4.60 mmol) 및 DIPEA(1.28 mL, 7.36 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 70 시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(50 mL)으로 희석하고, 물(3 x 50 mL)로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 크로마토그래피(0 내지 3% MeOH/DCM)로 정제하고, 뜨거운 Et2O로, 이후 뜨거운 MeCN으로 분쇄하여 3급-부틸 N-((4R,5S)-1-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일)-5-하이드록시-아제판-4-일]카바메이트를 회백색 고체(1.85 g, 2단계에 걸쳐 51%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.67(s, 1H), 9.76(s, 1H), 8.03(s, 1H), 7.41-7.34(m, 1H), 7.09(t, J = 8.8 Hz, 2H), 5.00(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.25(s, 1H), 3.83(s, 1H), 3.72(s, 3H), 3.45-3.25(m, 4H), 3.20-3.12(m, 1H), 2.20-1.84(m, 3H), 1.84-1.78(m, 1H), 1.55(s, 9H), 1.42(s, 9H).
중간체 273 3급-부틸 N-((4S,5R)-1-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일)-5-하이드록시-아제판-4-일]카바메이트
Figure pct00327
중간체 272에 대한 절차에 따라 3급-부틸 N-((4S,5R)-5-하이드록시-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일)카바메이트로부터 출발하여 3급-부틸 N-((4S,5R)-1-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일)-5-하이드록시-아제판-4-일]카바메이트를 백색 고체(1.34 g, 2단계에 걸쳐 37%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.67(s, 1H), 9.76(s, 1H), 8.03(s, 1H), 7.41-7.34(m, 1H), 7.09(t, J = 8.8 Hz, 2H), 5.00(d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.25(s, 1H), 3.83(s, 1H), 3.72(s, 3H), 3.45-3.25(m, 4H), 3.20-3.12(m, 1H), 2.20-1.84(m, 3H), 1.84-1.78(m, 1H), 1.55(s, 9H), 1.42(s, 9H).
중간체 274 항-7-아지도-4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵트-3-엔-1-올
Figure pct00328
중간체 221에 대한 절차에 따라 항-7-아지도-4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵트-3-엔-1-올을 담황색 오일(294 mg, 42 % 수율)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06(s, 1H), 5.96(dd, J = 8.3, 4.9 Hz, 1H), 3.82(s, 3H), 3.80-3.73(m, 1H), 3.56-3.48(m, 1H), 2.71(ddd, J = 15.5, 8.3, 2.3 Hz, 1H), 2.58-2.39(m, 4H), 2.24-2.14(m, 1H), 1.86-1.73(m, 1H).
중간체 275 신-7-아지도-4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵트-3-엔-1-올
Figure pct00329
중간체 119에 대한 절차에 따라 항-7-아지도-4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵트-3-엔-1-올로부터 출발하여 신-7-아지도-4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵트-3-엔-1-올을 황색 오일(346 mg, 2단계에 걸쳐 67%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06(s, 1H), 5.93-5.85(m, 1H), 3.94-3.88(m, 1H), 3.85(s, 3H), 2.98(ddd, J = 15.2, 9.5, 6.4 Hz, 1H), 2.65(dd, J = 15.7, 9.0 Hz, 1H), 2.41(dd, J = 15.2, 6.9 Hz, 1H), 2.30(dd, J = 15.9, 9.4 Hz, 1H), 2.04-1.87(m, 4 H).
중간체 276 3급-부틸 N-(-2-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵트-4-엔-1-일)카바메이트
Figure pct00330
중간체 120에 대한 절차에 따라 신-7-아지도-4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵트-3-엔-1-올로부터 출발하여 3급-부틸 N-(-2-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵트-4-엔-1-일)카바메이트를 무색 오일(189 mg, 3단계에 걸쳐 89%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.05(s, 1H), 5.92(ddd, J = 8.4, 4.7, 1.6 Hz, 1H), 5.23(s, 1H), 3.91-3.81(m, 1H), 3.80(s, 3H), 3.66-3.62(m, 1H), 3.41(s, 3H), 2.93(ddd, J = 15.1, 11.1, 4.7 Hz, 1H), 2.78(t, J = 12.9 Hz, 1H), 2.23(dd, J = 15.1, 8.5 Hz, 1H), 2.15-1.82(m, 3H), 1.46(s, 9H).
중간체 277 G02693497 3급-부틸 N-(5-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일]-2-메톡시-사이클로헵틸]카바메이트
Figure pct00331
MeOH(30 mL) 중의 3급-부틸 N-(-2-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵트-4-엔-1-일)카바메이트(180 mg, 0.49 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 70℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 20% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 무색 오일을 제공하였다. DCM(30 mL) 중의 상기 오일의 용액에 DIPEA(2.00 mL, 11.48 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(171 mg, 0.50 mmol) 그 다음 PyBOP(596 mg, 1.15 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응을 물(20 mL)로 켄칭하고, DCM(80 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 크로마토그래피(70 내지 80% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 N-(5-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일]-2-메톡시-사이클로헵틸]카바메이트를 4개의 부분입체이성질체의 혼합물로서 회백색 고체(175 mg, 2단계에 걸쳐 54%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.39 및 10.36(2s, 1H), 8.69 및 8.62(2s, 1H), 8.32-8.28 및 8.21-8.14(2 m, 1H), 7.85 및 7.75(2s, 1H), 7.43-7.36(m, 1H), 7.32(t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.25-7.17(m, 1H), 5.19 및 5.08(2d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.84(s, 3H), 3.78-3.54(m, 2H), 3.37 및 3.27(2s, 3H), 3.11-2.94(m, 1H), 2.32-1.30(m, 8H), 1.55(s, 9H), 1.43(s, 9H).
중간체 278 3급-부틸 4-메틸-6-옥소-3,7-다이하이드로-2H-아제핀-1-카복실레이트
Figure pct00332
헥산 중의 n-부틸리튬의 용액(2.5 M, 5.1 mL, 12.75 mmol)을 10 분에 걸쳐 무수 THF(30 mL) 중의 N-(3-메틸-3-부텐-1-일)-1,1-다이메틸에틸 에스테르(2.14 g, 11.57 mmol)의 교반된 용액에 적가하고, 실온에서 질소 하에 교반하였다. 1.25 시간 후, 1-클로로-3-(트라이페닐-λ5-포스판일리덴)프로판-2-온(4.07 g, 11.57 mmol)을 15 분에 걸쳐 적가하고, 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 물(100 mL)을 주의 깊게 첨가하고, 반응 혼합물을 EtOAc(3 x 150 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM)로 정제하여 연한 오렌지 검(5.7g)을 제공하였다. 이를 무수 THF(60 mL)에 용해시키고, 아세트알데하이드(6.4 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 연한 오렌지 오일(2.18g)을 제공하였다. 상기 오일을 DCM(30 mL) 중에 용해시키고, 질소로 탈산소시키고, 그럽스(Grubbs) 2세대 촉매(335 mg, 0.34 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 질소 하에 20시간 동안 환류 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 30% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-메틸-6-옥소-3,7-다이하이드로-2H-아제핀-1-카복실레이트를 암갈색 오일(1.23 g, 3단계에 걸쳐 47%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 5.30(s, 1H), 4.30-4.10(m, 2H), 3.65-3.50(m, 2H), 2.70-2.55(m, 2H), 2.05-1.90(m, 3H), 1.48 및 1.44(2s, 9H).
중간체 279 5-아지도-5-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-3-올
Figure pct00333
중간체 18에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-메틸-6-옥소-3,7-다이하이드로-2H-아제핀-1-카복실레이트로부터 출발하여 5-아지도-5-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-3-올을 연한 녹색 검(720 mg, 3단계에 걸쳐 64%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.04-8.03(m, 1H), 4.25-3.90(m, 1H), 3.88 및 3.84(2s, 3H), 3.75-3.45(m, 1H), 3.45-2.90(m, 3H), 2.30-2.18(m, 1H), 2.15-1.75(m, 4H), 1.55(2s, 3H).
중간체 280 3급-부틸 N-(6,6-다이플루오로-4-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일)카바메이트
Figure pct00334
DCM(100 mL) 중의 5-아지도-5-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-3-올(720 mg, 2.44 mmol)의 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 퍼아이오디난(1.35 g, 3.17 mmol)을 단일 부분으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반시키고, DCM(100 mL)으로 희석시키고, 포화 수성 NaHCO3(200 mL) 그 다음 20% 수성 Na2S2O3(100 mL)로 켄칭하였다. 생성 혼합물을 15분 동안 교반시키고, 유기층을 분리하고 수성 층을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고 용매 감압 하에 제거하여 연한 녹색 검(720 mg)으로서 제공하였다. DCM(50 mL) 중의 상기 검의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중 50%, 3.12 mL, 8.6 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 데옥소-플루오르(등록상표)(3.1 mL)을 좀 더 첨가하고, 혼합물을 40℃에서 28 시간 동안 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 포화 수성 NaHCO3(200 mL)를 적가함으로써 켄칭하고, DCM(100 mL)으로 희석시켰다. 유기층을 분리하고 수성 물질을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 담황색 검(626 mg)을 제공하였다. 상기 검을 THF(20 mL) 및 물(4 mL) 중에 용해시키고, 트라이페닐포스핀(522 mg, 2 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 바람막이 뒤에서 16시간 동안 가열하였다. 트라이페닐포스핀(500 mg)을 좀 더 첨가하고, 추가의 5 시간 동안 가열을 지속하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM(30 mL) 중에 용해시켰다. 상기 용액에 다이-3급-부틸 다이카보네이트(1.08 g, 5 mmol) 및 DIPEA(0.7 mL, 4 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 66 시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 N-(6,6-다이플루오로-4-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일)카바메이트를 무색 고체(540 mg, 네 단계에 걸쳐 57%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 4.92(s, 1H), 3.84(s, 3H), 3.82-3.55(m, 1H), 3.52-3.05(m, 3H), 2.70-2.45(m, 2H), 2.30-2.05(m, 1H), 2.04-1.85(m, 1H), 1.52(s, 3H), 1.45(s, 9H).
중간체 281 3급-부틸 N-(4-((5-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-3,3-다이플루오로-5-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일)카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일]카바메이트
Figure pct00335
중간체 269에 대한 절차에 따라 3급-부틸 N-(6,6-다이플루오로-4-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일)카바메이트로부터 출발하여 3급-부틸 N-(4-((5-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-3,3-다이플루오로-5-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일)카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일)카바메이트를 황색 고체(409 mg, 2단계에 걸쳐 58%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.39(s, 1H), 8.79(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.45-7.30(m, 1H), 7.15-7.00(m, 2H), 5.12(br s, 1H), 3.78(s, 3H), 3.75-3.42(m, 2H), 3.40-3.10(m, 2H), 2.70-2.45(m, 2H), 2.40-2.15(m, 1H), 1.95-1.70(m, 1H), 1.55(s, 9H), 1.46(s, 3H), 1.33(s, 9H).
중간체 285 3-에틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)피페리딘-4-온
Figure pct00336
DCM(15 mL) 중의 3급-부틸 3-에틸-4-옥소-피페리딘-1-카복실레이트(380 mg, 1.67 mmol)의 용액에 실온에서 TFA(3 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 에틸 피페리디논을 이의 트라이플루오로아세테이트 염으로서 제공하였다. 상기 염(410 mg, 1.7 mmol), 5-클로로-1-메틸-4-니트로-피라졸(330 mg, 2.0 mmol) 및 DIPEA(0.75 mL, 4.2 mmol)의 혼합물을 130℃에서 2시간 동안 마이크로파 조건 하에 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(10 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3-에틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)피페리딘-4-온을 밝은 황색 고체(250 mg, 2단계에 걸쳐 58%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.05(s, 1H), 3.87(s, 3H), 3.65-3.54(m, 1H), 3.53-3.41(m, 2H), 3.36-3.21(m, 1H), 2.78-2.64(m, 1H), 2.64-2.49(m, 2H), 2.01-1.87(m, 1H), 1.44-1.29(m, 1H), 0.94(t, J = 7.5 Hz, 3H).
중간체 286 4-(아지도메틸)-3-에틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)피페리딘-4-올
Figure pct00337
중간체 253에 대한 절차에 따라 3-에틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)피페리딘-4-온으로부터 출발하여 4-(아지도메틸)-3-에틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)피페리딘-4-올을 황색 검(170 mg, 2단계에 걸쳐 66%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 3.76(s, 3H), 3.62-3.53(m, 2H), 3.40(d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.34-3.15(m, 1H), 3.06-2.94(m, 2H), 1.97-1.77(m, 3H), 1.37-1.15(m, 2H), 0.92(t, J = 7.4 Hz, 3H). OH는 관찰되지 않았다.
중간체 287 3급-부틸 N-((3-에틸-4-메톡시-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-4-피페리딜)메틸)카바메이트
Figure pct00338
중간체 120에 대한 절차에 따라 4-(아지도메틸)-3-에틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)피페리딘-4-올로부터 3급-부틸 N-((3-에틸-4-메톡시-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-4-피페리딜)메틸)카바메이트를 밝은 황색 고체(110 mg, 3단계에 걸쳐 70%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02(s, 1H), 4.95-4.35(m, 1H), 3.76(s, 3H), 3.53-3.43(m, 2H), 3.36-3.09(m, 7H), 2.07-1.93(m, 1H), 1.44-1.10(m, 4H), 0.96-0.81(m, 12H).
중간체 292 3-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-8-옥사-3-자바이사이클로[3.2.1]옥탄-6-올
Figure pct00339
-78℃로 냉각된, MeOH/DCM(25 mL/5 mL) 중의 7-옥사바이사이클로[2.2.1]헵트-2-엔-5-올(0.7 g, 6.2 mmol)의 용액을 5분 동안 질소를 버블링함으로써 탈기시켰다. 회청색이 남아있을 때까지 반응 혼합물에 오존을 버블링하였다. 연한 칼라가 남아있을 때까지 차가운 반응 혼합물에 질소를 다시 버블링하였다. MeOH(5 mL) 중에 용해된 벤질아민(0.67 g, 6.2 mmol)의 용액, 그 다음 MeOH(10 mL)중의 NaCNBH3(1.6 g, 25 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 가온시키고, 16시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 EtOAc(30 mL) 및 물(30 mL)로 나누었다. 수성 층을 EtOAc(3 x 50 mL)로 추가로 추출하고, 합친 유기층들을 염수(20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 벤질 보호된 아민을 제공하였다. 이를 EtOH(40 mL) 및 2 M 수성 HCl(1 mL)에 용해시킨 후, Pd(OH)2/C(0.2 g)를 첨가하였다. 혼합물을 600 psi의 수소 분위기 하에 70℃에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOH(40 mL)로 세척하는 셀라이트를 통해 여과시켰다. 여액을 감압 하에 농축시켜 탈벤질화된 생성물을, 하이드로클로라이드 염으로서 제공하였다. DMSO(15 mL) 중의 상기 하이드로클로라이드 염(1.1 g, 6.6 mmol)의 서스펜션에 5-클로로-1-메틸-4-니트로-피라졸(1.2 g, 7.3 mmol), DIPEA(1.7 mL, 9.7 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(1.1 g, 20 mmol)를 첨가하고, 반응을 85℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(25 mL) 및 EtOAc(25 mL)로 나누고, 수성 층을 EtOAc(3 x 25 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(25 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(10 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-6-올을 회백색 고체(550 mg, 3단계에 걸쳐 62%)로 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06(s, 1H), 4.66-4.57(m, 1H), 4.38(d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.19(d, J = 6.3 Hz, 1H), 3.94(s, 3H), 3.82-3.73(m, 1H), 3.68(dd, J = 11.1, 2.8 Hz, 1H), 3.12(d, J = 11.1Hz, 1H), 2.71-2.59(m, 2H), 2.38(d, J = 7.0 Hz, 1H), 1.97(dd, J = 12.9, 3.9 Hz, 1H).
중간체 293 6-아지도-3-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄
Figure pct00340
3-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-6-올(500 mg, 1.96 mmoL)을 DCM(15 mL)에 용해시키고, 트라이에틸아민(0.41 mL, 2.95 mmol)을 첨가하였다. 0℃로 냉각시킨 후, 메탄설포닐 클로라이드(0.19 mL, 2.45 mmol)를 서서히 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(10 mL)으로 희석시키고, 물(10 mL)로 켄칭하고, 수성 층을 DCM(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(10 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 밝은 갈색 고체를 제공하였다. 상기 고체(450 mg, 1.35 mmol)를 DMF(20 mL)에 용해시키고, 나트륨 아자이드(450 mg, 6.8 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 150℃에서 18시간 동안 바람막이 뒤에서 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 혼합물을 물(20 mL) 및 EtOAc(20 mL)로 나누고, 수성 층을 EtOAc(3 x 25 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(10 내지 50%, EtOAc/이소헥산)로 정제하여 6-아지도-3-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄을 갈색 검(25 mg, 2단계에 걸쳐 68%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.05(s, 1H), 4.65(d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.34(s, 1H), 4.28(dd, J = 8.0, 3.2 Hz, 1H), 3.82(s, 3H), 3.75-3.70(m, 2H), 2.83-2.73(m, 1H), 2.64-2.49(m, 2H), 2.20(ddd, J = 13.4, 7.3, 3.2 Hz, 1H).
중간체 294 3급-부틸 N-(3-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-6-일)카바메이트
Figure pct00341
THF(10 mL) 및 물(2 mL) 중의 6-아지도-3-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄 (250 g, 0.8 mmol)의 용액에, 트라이메틸포스핀(톨루엔 중의 1 M 용액, 5 mL, 4.47 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 생성 잔사를 (2 M, 15 mL )에 용해시키고, EtOAc(2 x 10 mL)로 세척했다. 수성 층을 5 M 수성 NaOH 용액으로 pH 14로 염기성화시키고, DCM(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 DCM 층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 크림색 고체(220 mg)를 제공하였다. DCM(10 mL) 중의 상기 아민의 용액에 트라이에틸아민(0.18 mL 1.3 mmol) 및 DMAP(26 mg, 0.22 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고, DCM(2 mL) 중의 다이-3급-부틸 다이카보네이트(0.28 g, 1.3 mmol)의 용액을 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(10 mL)으로 희석시키고, 물(10 mL)로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(1 내지 10% MeOH/DCM)로 정제하여 3급-부틸 N-(3-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-6-일)카바메이트를 회백색 고체(110 mg, 2단계에 걸쳐 66%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.03(s, 1H), 4.64-4.52(m, 1H), 4.20(s, 1H), 3.85(s, 3H), 3.50-3.41(m, 4H), 2.69-2.46(m, 3H), 1.84-1.76(m, 1H), 1.45(s, 9H).
중간체 295 3급-부틸 N-(5-플루오로-2-하이드록시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵틸)카바메이트
Figure pct00342
중간체 294에 대한 절차에 따라 2-아지도-5-플루오로-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵탄올로부터 출발하여 3급-부틸 N-(5-플루오로-2-하이드록시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헵틸)카바메이트를 무색 고체(572 mg, 2단계에 걸쳐 61%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06 및 8.05(2s, 1H), 4.70(br s, 1H), 4.07 및 4.06(2s, 3H), 3.86-3.67(m, 3H), 2.96(ddd, J = 40.6, 15.3, 10.4 Hz, 1H), 2.74(dt, J = 44.6, 13.8 Hz, 1H), 2.25-2.04(m, 2H), 2.01-1.79(m, 3H), 1.72-1.63(m, 1H), 1.47(s, 9H).
중간체 302 O1-벤질 O4-에틸 5-하이드록시-4-메틸-아제판-1,4-다이카복실레이트
Et2O(200 mL) 중의 1-(벤질옥시카보닐)-4-피페리디논(20.0 g, 85.80 mmol)의 용액에 0℃에서 붕소 트라이플루오라이드 에테레이트(12.0 mL, 94.40 mmol)를 첨가하고, 그 다음 에틸 다이아조아세테이트(11.7 mL, 94.40 mmol)를 온도를 7℃ 미만으로 유지하면서 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반시키고, 나트륨 카보네이트의 2 M 수용액(150 mL)으로 켄칭하고, EtOAc(3 x 150 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 밝은 황색 오일을 제공하였다. 상기 오일(10 g, 31.30 mmol)을 0℃에서 DMF(75 mL) 중에 용해시키고, 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중의 60% 분산물, 1.38 g, 34.50 mmol)를 적가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반시킨 후, 아이오도메탄(2.15 mL, 34.50 mmol)을 첨가하였다. 반응을 실온으로 가온시키고, 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 Et2O(100 mL)로 희석시키고, 물(100 mL)로 켄칭했다. 수성 층을 Et2O(3 x 75 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 물(2 x 100 mL) 및 염수(2 x 100 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(50% Et2O/이소헥산)로 정제하여 밝은 황색 오일을 제공하였다. 상기 오일의 일부(0.90 g, 2.70 mmol)를 MeOH(4 mL) 중에 용해시키고, MeOH(5 mL) 중의 NaBH4(0.12 g, 3.24 mmol)의 교반된 서스펜션에 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반시킨 후, HCl의 1 M 수용액(5 mL)으로 켄칭하였다. 수성 층을 DCM(3 x 10 mL)으로 추출하고, 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(25 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 O1-벤질 O4-에틸 5-하이드록시-4-메틸-아제판-1,4-다이카복실레이트를 무색 오일(480 mg, 3단계에 걸쳐 1%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.37-7.28(m, 5H), 5.17-5.10(m, 2H), 4.20-4.07(m, 2H), 3.78-3.20(m, 7H), 2.32-2.24(m, 1H), 2.07-1.86(m, 3H), 1.73-1.62(m, 1H), 1.30-1.19(m, 3H). 치환가능한 OH는 관찰되지 않았다.
중간체 303 벤질 3a-메틸-2-옥소-3,4,5,7,8,8a-헥사하이드로옥사졸로[4,5-d]아제핀-6-카복실레이트
Figure pct00344
다이옥산(5 mL) 중의 O1-벤질 O4-에틸 5-하이드록시-4-메틸-아제판-1,4-다이카복실레이트(0.48 g, 1.43 mmol)의 용액에 NaOH의 1 M 수용액(2.9 mL, 2.87 mmol)을 첨가하고, 반응을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 2 M 수성 HCl로 pH 3으로 산성화하고, Et2O(10 mL)과 DCM(10 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 무색 오일(0.42 g)을 제공하였다. 상기 오일의 일부(0.21 g, 0.68 mmol), 다이페닐 포스포릴 아자이드(0.17 mL, 0.82 mmol) 및 트라이에틸아민(0.12 mL, 0.88 mmol)을 톨루엔(7 mL) 중에 용해시키고, 반응 혼합물을 실온에서 40분 동안 교반시키고, 90℃에서 바람막이 뒤에서 40분 동안 가열시키고, 3급-부탄올(0.05 mL, 0.56 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 환류로 16시간 동안 바람막이 뒤에서 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 포화 수성 NaHCO3(10 mL)로 켄칭하였다. 혼합물을 EtOAc(15 mL)로 추출하고, 유기층을 물(10 mL) 및 염수(10 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 벤질 3a-메틸-2-옥소-3,4,5,7,8,8a-헥사하이드로옥사졸로[4,5-d]아제핀-6-카복실레이트를 황색 오일(100 mg, 2단계에 걸쳐 22%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 7.38-7.28(m, 5H), 5.26-4.97(m, 3H), 4.51(s, 1H), 3.98-3.76(m, 1H), 3.43-3.06(m, 2H), 2.17(s, 1H), 1.96-1.77(m, 3H), 1.58(s, 3H). 치환가능한 것은 관찰되지 않았다.
중간체 304 3a-메틸-6-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-3,4,5,7,8,8a-헥사하이드로옥사졸로[4,5-d]아제핀-2-온
Figure pct00345
EtOH(10 mL) 중의 벤질 3a-메틸-2-옥소-3,4,5,7,8,8a-헥사하이드로옥사졸로[4,5-d]아제핀-6-카복실레이트(305 mg, 1.0 mmol) 및 1-메틸-1,4-사이클로헥사다이엔(1.1 mL, 10.00 mmol)의 용액에 탄소상 10% 팔라듐(53 mg, 0.50 mmol)을 질소 하에 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. DMSO(5 mL) 중의 잔사의 용액(170 mg, 1.00 mmol)에 5-클로로-1-메틸-4-니트로-피라졸(178 mg, 1.10 mmol) 및 칼륨 플루오라이드(232 mg, 4.00 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 마이크로파로 110℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응을 물(20 mL)로 켄칭하고, EtOAc(3 x 5 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 크로마토그래피(0 내지 5% MeOH/DCM)로 정제하여 황색 고체(220 mg, 2단계에 걸쳐 74%)를 제공하였다. 물질을 또 하나의 배치로 조합시켜서 350 mg으로 제공하고, 역상 분취용 HPLC에 의하여 부분입체이성질체를 분리하였다. 주요 부분입체이성질체를 단리된 황색 고체(196 mg, 2단계에 걸쳐 67%)로서 수득하였다; 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.11(s, 1H), 7.72(s, 1H), 4.48(dd, J = 6.6, 2.7 Hz, 1H), 3.74(s, 3H), 3.10-3.01(m, 2H), 2.20-1.96(m, 3H), 1.85(dd, J = 15.2, 7.8 Hz, 1H), 1.32(s, 3H). 물 피크 하의 두 양성자. LCMS(ES+) m/z 296(M+1).
중간체 305 8-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이옥사스피로[4.5]데칸-8-올
Figure pct00346
중간체 218에 대한 절차에 따라 1-메틸-4-니트로-1H-피라졸 및 1,4-사이클로헥산다이온 모노에틸렌 아세탈로부터 출발하여 8-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이옥사스피로[4.5]데칸-8-올을 연한 베이지 고체(3.68 g, 83%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.06(s, 1H), 4.45(s, 1H), 4.12(s, 3H), 4.04-3.93(m, 4H), 2.44-2.34(m, 2H), 2.23-1.95(m, 4H), 1.75-1.67(m, 2H).
중간체 306 4-플루오로-4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헥사논
Figure pct00347
무수 DCM(80 mL) 중의 8-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이옥사스피로[4.5]데칸-8-올(3.68 g, 13.0 mmol)의 용액에 질소 하에 데옥소-플루오르(등록상표)(THF 중 50%, 14.1 mL, 39.0 mmol)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 0℃로 냉각시킨 후, 포화 수성 NaHCO3(100 mL)를 첨가하고, 처음에 적가하고, 혼합물을 DCM(2 x 75 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(30 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 담황색 오일을 제공하였다. 상기 오일의 일부(780 mg, 2.74 mmol)를 THF(20 mL) 중에 용해시키고, 2 M 수성 HCl(3 mL)로 처리하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반시키고, 60℃에서 7 시간 동안 및 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(100 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(25 내지 40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 4-플루오로-4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헥사논을 백색 고체(490 mg, 2단계에 걸쳐 30%)로 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.10 및 8.09(2s, 1H), 4.17 및 4.15(2s, 3H), 3.16-2.94(m, 2H), 2.84-2.72(m, 2H), 2.51(dd, J = 15.4, 5.6 Hz, 2H), 2.43-2.33(m, 2H).
중간체 307 3급-부틸 N-[[4-플루오로-1-하이드록시-4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헥실]메틸]카바메이트
Figure pct00348
나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중의 60% 분산물, 183 mg, 4.56 mmol)를 DMSO(15 mL)에 질소 하에 0℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 15분 동안 교반시킨 후, 트라이메틸 설폭소늄 아이오다이드(0.96 g, 4.36 mmol)를 적가하였다. 90분 동안 실온에서 교반시킨 후, DMSO(15 mL) 중의 4-플루오로-4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헥사논(1.0 g, 4.15 mmol)의 용액을 적가했다. 혼합물을 55℃에서 2시간 동안 가열하였고, 실온으로 냉각시키고, 물(200 mL)에 붓고, EtOAc(3 x 60 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 검을 제공하였다. MeOH(30 mL)과 DCM(10 mL) 내 7 M NH3 중의 상기 검(1.1 g, 4.15 mmol)의 용액을 실온에서 4 일 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 생성 황색 오일(1.1 g, 4.15 mmol)을 DCM(30 mL) 및 DIPEA(3.6 mL), 20.7 mmol) 중에 용해시켰다. 용액을 DCM(20 mL) 중의 다이-3급-부틸-다이카보네이트(1.1 g, 4.98 mmol)의 용액으로 처리하고, 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(50% EtOAC/휘발유 40-60)로 정제하여 3급-부틸 N-[[4-플루오로-1-하이드록시-4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)사이클로헥실]메틸]카바메이트를 크림 포움(858 mg, 3단계에 걸쳐 56%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.07 및 8.06(2s, 1H), 5.05-4.95(m, 1H), 4.09 및 4.07(2s, 3H), 3.21(d, J = 6.3 Hz, 2H), 2.95-2.72(m, 2H), 2.54(s, 1H), 1.99-1.87(m, 2H), 1.85-1.65(m, 4H), 1.45(s, 9H).
중간체 308 3급-부틸 N-[(4R)-6,6-다이플루오로-4-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]카바메이트
Figure pct00349
중간체 280을 키랄 SFC로 추가로 정제하여 3급-부틸 N-[(4R)-6,6-다이플루오로-4-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]카바메이트(제1 용리된 이성질체)(440 mg) ee 100%를 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 412(M+23).
중간체 309 3급-부틸 N-[(4S)-6,6-다이플루오로-4-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]카바메이트
Figure pct00350
중간체 308에 대한 절차에 따라 추가의 용리로 3급-부틸 N-[(4S)-6,6-다이플루오로-4-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]카바메이트(제 2 용리된 이성질체)(430 mg) ee 93%를 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 412(M+23).
중간체 310 3급-부틸 N-[4-[[5-[(5R)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)-3,3-다이플루오로-5-메틸-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일]카바메이트
Figure pct00351
중간체 269에 대한 절차에 따라 3급-부틸 N-[(4R)-6,6-다이플루오로-4-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]카바메이트로부터 출발하여 3급-부틸 N-[4-[[5-[(5R)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)-3,3-다이플루오로-5-메틸-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일]카바메이트를 연한 갈색 고체(210 mg, 57%) ee 98.6%로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.39(s, 1H), 8.79(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.45-7.30(m, 1H), 7.15-7.00(m, 2H), 5.12(br s, 1H), 3.78(s, 3H), 3.75-3.40(m, 2H), 3.35-3.10(m, 2H), 2.70-2.45(m, 2H), 2.40-2.15(m, 1H), 1.95-1.70(m, 1H), 1.55(s, 9H), 1.46(s, 3H), 1.33(s, 9H).
중간체 311 3급-부틸 N-[4-[[5-[(5S)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)-3,3-다이플루오로-5-메틸-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일]카바메이트
Figure pct00352
3급-부틸 N-[(4S)-6,6-다이플루오로-4-메틸-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]카바메이트(중간체 309)로부터 출발하여 중간체 269에 대한 절차에 따라 연한 갈색 고체(246 mg)로서 제공하였다. 이를 키랄 SFC를 통해 추가로 정제하여 3급-부틸 N-[4-[[5-[(5S)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)-3,3-다이플루오로-5-메틸-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일]카바메이트를 연한 갈색 고체(190 mg, 51%) ee 98.5%로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.39(s, 1H), 8.79(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.45-7.30(m, 1H), 7.15-7.00(m, 2H), 5.12(br s, 1H), 3.78(s, 3H), 3.75-3.40(m, 2H), 3.35-3.10(m, 2H), 2.70-2.45(m, 2H), 2.40-2.15(m, 1H), 1.95-1.70(m, 1H), 1.55(s, 9H), 1.46(s, 3H), 1.33(s, 9H).
중간체 312 5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]논-8-엔
Figure pct00353
THF(300 mL) 중의 지르코노센 클로라이드(20.8 g, 71 mmol)의 용액에 -78℃에서 서서히 에틸 마그네슘 브로마이드(THF 중의 1 M, 142 mL, 142 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반시킨 후, 0℃로 가온시켰다. 교반을 적색 용액이 수득될 때까지 지속하였다. 혼합물을 추가로 30분 동안 교반시켰다. THF(100 mL) 중의 3급-부틸 6-옥소-3,7-다이하이드로-2H-아제핀-1-카복실레이트(15 g, 71 mmol)를 서서히 첨가하고, 혼합물을 실온으로 가온시키고, 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM(150 mL) 중에 용해시켰다. 티타늄 테트라클로라이드(8 mL, 71 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 포화 암모늄 클로라이드 용액(100 mL)을 반응 혼합물에 서서히 첨가하고, 백색 서스펜션을 제공하였다. 층들을 분리하고 수성 층을 DCM(3 x 200 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 포화 수성 NaHCO3(200 mL) 및 염수(200 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(10 내지 50% Et2O/이소헥산)로 정제하여 원하는 Boc 보호된 물질을 제공하였다. 이를 DCM(50 mL) 중에 용해시키고, TFA(10 mL)를 첨가하고, 혼합물을 40℃에서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 아민을 트라이플루오로아세테이트 염으로서 제공하였다. 이를 DMSO(50 mL)에 용해시키고, DIPEA(6.2 mL, 35 mmol), 칼륨 플루오라이드(3.1 g, 19.1 mmol) 및 5-클로로-1-메틸-4-니트로-피라졸(3.0 g, 19.1 mmol)을 첨가했다. 혼합물을 85℃에서 16시간 동안 가열시킨 후, 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물(50 mL) 및 EtOAc(50 mL) 사이에 분배하고, 수성 층을 EtOAc(3 x 50 mL)로 추출하고, 합친 유기물을 염수(50 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(10 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]비-8-엔을 회백색 고체(2.0 g, 3단계에 걸쳐 56%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.00(s, 1H), 5.69(dt, J = 11.2, 5.4 Hz, 1H), 5.22-5.11(m, 1H), 3.82(s, 3H), 3.47-3.38(m, 2H), 3.18(s, 2H), 2.55-2.48(m, 2H), 0.72-0.61(m, 4H).
중간체 313 8-아지도-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난-9-올
Figure pct00354
DCM(25 mL) 중의 5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]비-8-엔(1.0 g, 4.1 mmol)의 용액에 m-CPBA(1.1 g, 4.8 mmol)를 첨가하고, 생성 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 포화 수성 NaHCO3 (15 mL)를 첨가하고, 수성 층을 DCM(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(10 내지 50%, EtOAc/이소헥산)로 정제하여 중간체 에폭사이드를 황색 고체로서 제공하였다. 이를 DMSO(30 mL) 및 아세트산(3 mL)에 용해시키고, 나트륨 아자이드를 첨가하였다. 혼합물을 110℃에서 16시간 동안 바람막이 뒤에서 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(10 mL)와 EtOAc(10 mL) 사이에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAc(3 x 20 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 염수(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(10 내지 50%, EtOAc/이소헥산)로 정제하여 8-아지도-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난-9-올을 황색 검(160 mg, 2단계에 걸쳐 54%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.01(s, 1H), 3.80(s, 3H), 3.79-3.72(m, 1H), 3.55(dd, J = 7.4, 2.4 Hz, 1H), 3.51-3.34(m, 1H), 3.31-3.18(m, 2H), 2.92(d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.33-2.24(m, 1H), 2.20(d, J = 2.7 Hz, 1H), 2.09-1.98(m, 1H), 1.00-0.94(m, 1H), 0.81-0.71(m, 1H), 0.53-0.44(m, 2 H).
중간체 314 9-아지도-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난-8-올
Figure pct00355
또한, 중간체 313에 대한 절차에 따라 9-아지도-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난-8-올을 황색 검(350 mg, 2단계에 걸쳐 68%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02(s, 1H), 3.99-3.92(m, 1H), 3.79(s, 3H), 3.53-3.20(m, 4H), 2.76(d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.61(d, J = 5.9 Hz, 1H), 2.35-2.15(m, 1H), 2.17-1.82(m, 1H), 0.94-0.73(m, 2H), 0.61-0.51(m, 2H).
중간체 315 8-아지도-9-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난
Figure pct00356
DCM(10 mL) 중의 8-아지도-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난-9-올(200 mg, 0.67 mmol)의 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 퍼아이오디난(340 mg, 0.80 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(50 mL)으로 희석시키고, 포화 수성 NaHCO3(50 mL)를 첨가하고, 혼합물을 DCM(50 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(20 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(10 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 중간체 케톤으로 제공하였다. 질소 하에 -78℃로 냉각된, 무수 THF(7 mL) 중의 상기 케톤(190 mg, 0.62 mmol)의 용액에 L-셀렉트라이드(THF 중의 1 M, 0.8 mL, 0.78 mmol)의 용액을 적가하고, 반응 혼합물을 -78℃에서 2시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 가온시키고, 물(10 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc(2 x 30 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 염수(20 mL)로 세척하고, MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 중간체 알코올을 제공하였다. 0℃로 냉각된, 무수 DMF(5 mL) 중의 상기 알코올(160 mg, 0.52 mmol)의 용액에 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중 60%, 25 mg, 0.62 mmol)를 첨가하였다. 15분 동안 교반시킨 후, 아이오도메탄(0.05 mL, 0.78 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔사를 물(30 mL)과 EtOAc(30 mL) 사이에 분배시켰다. 수성 층을 EtOAc(30 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 염수(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(10 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 8-아지도-9-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난을 회백색 고체(120 mg, 3단계에 걸쳐 55%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02(s, 1H), 3.84(s, 3H), 3.84-3.72(m, 1H), 3.58(s, 3H), 3.57-3.47(m, 2 H), 3.22-3.15(m, 1H), 2.93(s, 1H), 2.40-2.28(m, 1H), 2.24(d, J = 12.5 Hz, 1H), 2.07-1.91(m, 1H), 0.79-0.72(m, 1H), 0.67-0.46(m, 3H).
중간체 316 9-아지도-8-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난
Figure pct00357
중간체 315에 대한 절차에 따라 9-아지도-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난-8-올로부터 출발하여 9-아지도-8-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난을 황색 검(170 mg, 3단계에 걸쳐 62%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.02(s, 1H), 3.90(d, J = 13.4 Hz, 1H), 3.84(s, 2H), 3.73-3.67(m, 1H), 3.45-3.36(m, 1H), 3.41(s, 3H), 3.28(s, 1H), 3.21-3.14(m, 2H), 2.32-2.15(m, 2H), 2.09-1.99(m, 1H), 0.82-0.74(m, 1H), 0.69-0.51(m, 3H).
중간체 317 3급-부틸 N-[9-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난-8-일]카바메이트
Figure pct00358
THF/물(5 mL/1 mL) 중의 8-아지도-9-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난(120 mg, 0.37 mmol)의 용액을 트라이메틸포스핀(톨루엔 중의 1.0 M, 1.8 mL, 1.8 mmol)으로 처리하고, 반응 혼합물을 70℃에서 바람막이 뒤에서 4시간 동안 가열하였다. 반응을 실온으로 냉각시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 1 M 수성 HCl로 산성화하고, EtOAc(2 x 20 mL)로 세척했다. 수성 층을 수성 6 M NaOH로 pH 14로 염기성화하고, DCM(2 x 30 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 밝은 갈색 검을 제공하였다. 무수 DCM(5 mL) 중의 상기 검(80 mg, 0.27 mmol)의 용액에 0℃에서 DIPEA(0.1 mL, 0.54 mmol) 그 다음 DCM(5 mL) 중의 다이-3급-부틸-다이카보네이트(90 mg, 0.41 mmol)의 용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 4시간 동안 교반하였다. 물(5 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(2 x 30 mL)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 염수(10 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(10 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 N-[9-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난-8-일]카바메이트를 황색 검(110 mg, 3단계에 걸쳐 72%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.00(s, 1H), 5.08(d, J = 8.9 Hz, 1H), 3.97-3.86(m, 2H), 3.81(s, 3H), 3.60(ddd, J = 13.6, 10.5, 2.8 Hz, 1H), 3.51(s, 3H), 3.12-3.04(m, 1H), 2.74(s, 1H), 2.16(d, J = 12.6 Hz, 1H), 2.25-1.86(m, 1H), 1.95-1.85(m, 1H), 1.45(s, 9H), 0.77-0.57(m, 4H).
중간체 318 3급-부틸 N-[8-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난-9-일]카바메이트
Figure pct00359
중간체 317에 대한 절차에 따라 9-아지도-8-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난으로부터 출발하여 3급-부틸 N-[8-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난-9-일]카바메이트를 황색 검(160 mg, 2단계에 걸쳐 67%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.01(s, 1H), 5.12(d, J = 8.8 Hz, 1 H), 3.82(s, 3H), 3.68-3.57(m, 2H), 3.52-3.38(m, 1H), 3.36(s, 3H), 3.32(d, J = 12.7 Hz, 1H), 3.21-3.14(m, 1H), 2.74(d, J = 12.8 Hz, 1H), 2.13-1.88(m, 2H), 1.47(s, 9H), 0.91-0.81(m, 1H), 0.68-0.53(m, 2H), 0.43-0.36(m, 1H).
표 1a 및 1b 식 I 화합물 101-531
실시예 101 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(4-((메틸아미노)메틸)피페리딘-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 101
MeOH(40 mL) 중의 중간체 1인, 3급-부틸 메틸((1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸)카바메이트(145 mg, 0.41 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 50℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 조 3급-부틸(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸(메틸)카바메이트를 적-갈색 오일(117 mg)로서 제공하였다. DCM(20 mL) 중의 상기 아민(115 mg, 0.36 mmol)의 용액에 DIPEA(1.0 mL), PyBOP(0.46 g, 0.89 mmol) 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(127 mg, 0.36 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(80 mL)으로 희석시키고, 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(75% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸(1-(4-(5-3급-부톡시카보닐아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸(메틸)카바메이트를 연보라색 포움(200 mg)으로서 제공하였다. 상기 포움(200 mg, 0.30 mmol)을 MeOH(5 mL) 중의 1,4-다이옥산 내 HCl(4 M, 3.8 mL, 15.1 mmol)로 실온에서 3일 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 잔사를 MeOH 중에 재-용해시키고, SCX 칼럼으로 부하하였다. 칼럼을 MeOH로 세척하고 MeOH 중의 7 N 암모니아로 용리하여 101을 베이지색 고체(99 mg, 3단계에 걸쳐 53%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.75(s, 1H), 7.59-7.49(m, 3H), 7.44(s, 1H), 7.32-7.22(m, 2H), 6.90(br s, 1H), 3.63(s, 3H), 3.14-2.96(m, 4H), 2.66(d, J = 6.8 Hz, 2H), 2.45(s, 3H), 1.77(d, J = 12.6 Hz, 2H), 1.78-1.55(m, 1H), 1.36-1.22(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 462(M+1).
실시예 102 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(3-메틸피페라진-1-일)-1H- 피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 102
단계 A. 3급-부틸(±)-2-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페라진-1- 카복실레이트.
Figure pct00360
EtOH(10 mL) 중의 2-메틸피페라진(1 g, 6.2 mmol), 실시예 1로부터의 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(2.48 g, 12.4 mmol), DIPEA(2.4 g,18.6 mmol)의 혼합물을 마이크로파 오븐 내에 140℃에서 5 시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하여 잔사를 제공하였다. 잔사를 MeOH/DCM(10:1)을 용리 용매로 사용하는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸(±)-2-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페라진-1-카복실레이트(1.0 g, 40%)를 황색 고체로서 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, CDCl3) δ(ppm): 8.03(s, 1H), 4.38(s, 1H), 3.99-3.68(m, 1H), 3.83(s, 3H), 3.67-3.65(m, 1H), 3.46-3.41(m, 1H), 3.31-3. 25(m, 1H), 2.90-2.88(d, J = 9.6Hz, 1H), 2.71-2.68(d, J = 9.2 Hz ,1H), 1.49(s, 9H), 1.36-1.34(d, J = 5.2Hz, 3H).
단계 B. 3급-부틸(±)-4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1- 카복실레이트.
MeOH(20 mL) 및 H2O(5 mL) 중의 3급-부틸(±)-2-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페라진-1-카복실레이트(500 mg, 1.54 mmol)의 용액에 아연(845 mg, 13 mmol) 및 NH4Cl(1.4 g, 26 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 2 시간 동안 교반시키고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 PE/EtOAc(10/1~1/10)를 용리 용매로 사용하는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸(±)-4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1- 카복실레이트(650 mg, ~100%)를 적색 고체로서 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, CD3OD) δ(ppm): 7.22(s, 1H), 4.35-4.33(m, 1H), 4.12-4.11(m, 1H), 3.94(s, 3H), 3.43-3.46(m, 1H), 3.25-3.30(m, 2H), 3.01-3.00(m, 1H), 2.89-2.87(d, J = 12 Hz, 1H), 1.49(s, 9H), 1.34-1.36(d, J = 5.6Hz, 3H); MS(ESI) m/z = 296(M+H+).
단계 C. 3급-부틸(±)-4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4- 카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트.
DMF(15 mL) 중의 3급-부틸(±)-4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트(400mg, 2.05 mmol), 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4- 카복실산(630 mg, 2.46 mmol), HATU(0.83g, 8.19 mmol)의 용액에 TEA(1.5mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 20 시간 동안 교반시키고, 물(100 mL)에 부었다. 혼합물을 EtOAc(50 mL × 2)로 추출하였다. 합친 유기층을 물(50 mL × 2) 및 염수(30 mL × 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 DCM/MeOH(1:1)를 용리 용매로서 사용하는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸(±)-4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트(280 mg, 52%)를 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, CDCl3) δ(ppm): 10.32(s, 1H), 8.70(s, 1H), 7.80(s, 1H), 7.38-7.35(m, 1H), 7.06-7.03(m, 2H), 4.34(s, 1H), 3.94-3.97(m, 1H), 3.81(s, 3H), 3.67-3.40(m, 1H), 3.20-3.25(m, 2H), 3.04-3.06(m, 1H), 2.88-2.90(m, 1H), 1.55(s, 9H), 1.47(s, 9H), 1.34-1.36(d, J = 6.4Hz, 3H); MS(ESI) m/z =434(M+H+).
단계 D. 3급-부틸 (R)-4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)- 티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트 및 3급-부틸(S)-4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4- 카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트.
3급-부틸(±)-4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메틸-피페라진-1-카복실레이트(280 mg)를 분취용 HPLC로 키랄 분리하여 3급-부틸(S)-4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트(80 mg) 및 3급-부틸 (R)-4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트(80 mg)를 수득하였다.
단계 E. TFA(1mL)과 DCM(4 mL) 중의 3급-부틸 (R)-4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트(80 mg, 0.126 mmol )의 용액을 주위 온도에서 3 시간 동안 교반하였다. 혼합물이 pH를 암모니아를 첨가시켜서 약 8~9로 조정하고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 수득하였다. 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 102(40 mg, 73%)를 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, CDCl3) δ(ppm): 8.48(s, 1H), 8.33(s, 1H), 7.69(s, 1H), 7.30-7.36(m, 1H), 7.03-7.07(m, 2H), 6.14-6.17(m, 2H), 3.78(s, 3H), 3.53-3.48(m, 1H), 2.90-3.34(m, 6H), 1.32(d, J = 6.5 Hz, 3H); MS(ESI) m/z =434(M+1+).
실시예 103 (S)-5-아미노-N-(5-(3-아미노아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 103
라세미 혼합물의 SFC에 의한 키랄 분리로 103을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 7.77(s, 1H), 7.60-7.43(m, 3H), 7.27(dd, J = 14.5, 5.8 Hz, 2H), 6.39(tt, J = 55.3, 4.2 Hz, 1H), 4.54-4.28(m, 2H), 3.23 - 3.02(m, 4H), 3.00-2.90(m, 2H), 1.85-1.40(m, 6H). MS(ESI) m/z: 498.2 [M+H+].
실시예 104 (R)-5-아미노-N-(5-(3-아미노아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 104
라세미 혼합물의 SFC에 의한 키랄 분리로 104를 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 7.78(s, 1H), 7.60-7.42(m, 3H), 7.34-7.21(m, 2H), 6.39(tt, J = 55.3, 4.1 Hz, 1H), 4.54-4.29(m, 2H), 3.25-3.02(m, 4H), 3.00-2.90(m, 2H), 1.87 - 1.36(m, 8H). MS(ESI) m/z: 498.2 [M+H+].
실시예 105 5-아미노-N-(5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 105
DME(4.9 mL) 및 물(1.6 mL) 중의 중간체 3인, 3급-부틸 4-(4-(2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(283 mg, 0.44 mmol), Na2CO3(93 mg, 0.88 mmol) 및 2-플루오로-5-메틸페닐붕산(95 mg, 0.62 mmol)의 혼합물을 조심스럽게 질소를 혼합물에 10분 동안 버블링함으로써 탈기시켰다. 이후 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로-팔라듐(II)(36 mg, 0.04 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 추가로 10분 동안 탈기시킨 후, 마이크로파로 120℃에서 1시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM(50 mL)에 용해시키고, 물(2 x 20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 80% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-(4-(5-3급-부톡시카보닐아미노-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(179 mg) 및 3급-부틸 4-(4-(5-아미노-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(50 mg)를 제공하였다. 단리된 중간체를 조합하고, MeOH(2 mL) 중에 현탁시키고, 이에 1,4-다이옥산 중의 HCl의 용액(4 M, 1.7 mL, 6.75 mmol)을 첨가하고, 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 EtOAc(50 mL) 중에 용해시키고, 1 M NaOH 용액(20 mL)으로 세척하였다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM)로 정제하여 105를 베이지색 고체(59 mg, 2단계에 걸쳐 30%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.98(s, 1H), 7.90(dd, J = 7.0, 2.5 Hz, 1H), 7.80(s, 1H), 7.16-7.11(m, 1H), 7.09-7.01(m, 1H), 6.09(s, 2H), 3.77(s, 3H), 3.63(t, J = 13.5 Hz, 2H), 3.46-3.29(m, 4H), 3.06(t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.39(s, 3H), 1.95(s, 1H). LCMS(ES+) m/z 466(M+1).
실시예 106 5-아미노-N-(5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 106
실시예 105에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-(4-(2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트 및 2,5-다이플루오로페닐붕산을 반응시켜 106을 베이지색 고체(57 mg, 2단계에 걸쳐 28%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.90(s, 1H), 7.88-7.81(m, 2H), 7.18-7.10(m, 1H), 7.06-6.99(m, 1H), 6.16(s, 2H), 3.78(s, 3H), 3.70-3.56(m, 2H), 3.44(t, J = 14.0 Hz, 2H), 3.35(t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.11-3.05(m, 2H), 1.95(s, 1H). LCMS(ES+) m/z 470(M+1).
실시예 107 (R)-5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(메틸아미노)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 107
DCM(10 mL) 중의 (R)-N-(1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미드(100 mg, 0.28 mmol)를 DIPEA(0.5 mL, 2.87 mmol), PyBOP(293 mg, 0.56 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-사이클로프로필티아졸-4-카복실산(125 mg, 0.35 mmol)에 첨가하고, 혼합물을 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(50 mL)으로 희석시키고, 물(10 mL)로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지를 통해 분리하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (R)-3급-부틸 4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일카바메이트를 담황색 고체(172 mg)로서 제공하였다. 상기 검(170 mg, 0.24 mmol)을 1,4-다이옥산(4 M, 5 mL) 및 MeOH(5 mL) 중의 HCl 내에서 50℃에서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 107을 모노 포메이트 염으로서 백색 고체(62 mg, 2단계에 걸쳐 41%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.56(s, 1H), 7.72(s, 1H), 7.49(tt, J = 8.5, 6.2 Hz, 1H), 7.20-7.12(m, 2H), 6.24(tt, J = 55.5, 4.2 Hz, 1H), 4.48(td, J = 14.0, 4.2 Hz, 2H), 3.40-3.20(m, 5H), 2.68(s, 3H), 2.28-1.74(m, 6H). LCMS(ES+) m/z 512(M+1).
실시예 108 (R)-5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(메틸아미노)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 108
DME(3 mL) 및 물(1 mL) 중의 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(200 mg, 0.29 mmol), Na2CO3(62 mg, 0.59 mmol) 및 2,5-다이플루오로벤젠붕산(66 mg, 0.41 mmol)의 혼합물을 조심스럽게 질소를 혼합물에 5분 동안 버블링함으로써 탈기하였다. 이후 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로-팔라듐(II)(30 mg, 0.037 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 마이크로파로 120℃에서 60분 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 1,4-다이옥산 중의 HCl(4 M, 5 mL) 및 MeOH(5 mL)의 용액에 용해시키고, 70℃에서 48시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 MeOH/DCM에 용해시키고, DCM 및 MeOH로 세척하고, MeOH 중의 1 N 암모니아로 용리하는 SCX 카트리지를 통해 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 108을 모노 포메이트 염으로서 연한 갈색 고체(21 mg, 2단계에 걸쳐 14%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.53(s, 1H), 8.15-7.95(m, 1H), 7.58(s, 1H), 7.35-7.05(m, 2H), 6.25(tt, J = 55.6, 4.1 Hz, 1H), 4.54-4.43(m, 2H), 3.43-3.22(m, 5H), 2.68(s, 3H), 2.28-1.74(m, 6H). LCMS(ES+) m/z 512(M+1).
실시예 109 (R)-5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(메틸아미노)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 109
실시예 108에 대한 절차에 따라 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(200 mg, 0.29 mmol) 및 2-플루오로-5-메틸벤젠붕산(63 mg, 0.41 mmol)을 반응시켜 109를 모노 포메이트 염으로서 연한 갈색 고체(67 mg, 2단계에 걸쳐 45%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.56(s, 1H), 8.07(dd, J = 7.3, 2.2 Hz, 1H), 7.61(s, 1H), 7.26-7.20(m, 1H), 7.12(dd, J = 11.4, 8.4 Hz, 1H), 6.25(tt, J = 55.6, 4.2 Hz, 1H), 4.48(td, J = 13.9, 4.2 Hz, 2H), 3.41-3.33(m, 3H), 3.30-3.13(m, 2H), 2.58(s, 3H), 2.40(s, 3H), 2.23-1.72(m, 6H). LCMS(ES+) m/z 508(M+1).
실시예 110 5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 110
DCM(20 mL) 중의 1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(100 mg, 0.39 mmol)의 용액에 DIPEA(0.5 mL, 2.87 mmol), PyBOP(300 mg, 0.58 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-사이클로프로필티아졸-4-카복실산(164 mg, 0.46 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(100 mL)으로 희석시키고, 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지로 분리하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일카바메이트를 무색 고체(145 mg)로서 제공하였다. 상기 고체(145 mg, 0.24 mmol)를 1,4-다이옥산 중의 HCl(4 M, 5 mL)로 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 110을 크림색 고체(80 mg, 2단계에 걸쳐 44%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 7.81(s, 1H), 7.46(tt, J = 8.5, 6.2 Hz, 1H), 7.19-7.11(m, 2H), 6.22(tt, J = 55.6, 4.2 Hz, 1H), 4.45(td, J = 13.9, 4.2 Hz, 2H), 4.01-3.93(m, 1H), 3.32-3.15(m, 5H), 2.10-1.90(m, 3H), 1.87-1.65(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 499(M+1).
실시예 111 5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 111
3급-부틸 2-브로모-4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(0.13 g, 0.23 mmol) 및 2-플루오로-5-메틸벤젠붕산(53 mg, 0.35 mmol)으로 출발하여 실시예 105에 대한 절차에 따라 111을 검정색 고체(56 mg, 2단계에 걸쳐 50%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.93(s, 1H), 8.08(d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.66(s, 1H), 7.42(s, 2H), 7.24(d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.39(tt, J = 55.3, 4.2 Hz, 1H), 4.55(d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.42(td, J = 14.5, 4.2 Hz, 2H), 3.86-3.80(m, 1H), 3.29-3.03(m, 4H), 2.37(s, 3H), 1.94-1.84(m, 3H), 1.77-1.55(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 495(M+1).
실시예 112 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(2-메틸피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 112
DCM(10 mL) 중의 PyBOP(313 mg, 0.60 mmol) 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(153 mg, 0.43 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. DCM(10 mL) 중의 (R)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트(133 mg, 0.45 mmol) 및 DIPEA(0.12 mL, 0.68 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(50 mL)으로 희석시키고, 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 단리된 중간체를 DCM(6 mL) 중에 재-용해시키고, TFA(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔사를 DCM(50 mL) 중에 재-용해시키고, 포화 수성 NaHCO3(2 x 10 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 분취용 HPLC로 정제하여 112를 백색 고체(41 mg, 2단계에 걸쳐 22%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.66(s, 1H), 7.92(s, 1H), 7.38-7.25(m, 1H), 7.03(t, J = 9.0 Hz, 2H), 6.20(s, 2H), 3.77(s, 3H), 3.27-3.15(m, 2H), 3.10-2.93(m, 4H), 2.59(dd, J = 12.5, 9.5 Hz, 1H), 0.88(d, J = 6.3 Hz, 3H). 알킬 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 434(M+1).
실시예 113 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(2-에틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 113
실시예 112에 대한 절차에 따라 (S)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-에틸피페라진-1-카복실레이트 및 실시예 25부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산을 반응시켜 113을 백색 고체(27 mg, 2단계에 걸쳐 19%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.68(s, 1H), 7.91(s, 1H), 7.31(t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.03(t, J = 9.2 Hz, 2H), 6.20(s, 2H), 3.77(s, 3H), 3.24-3.14(m, 2H), 3.12-2.93(m, 4H), 2.60(t, J = 10.8 Hz, 1H), 1.48-1.28(m, 1H), 1.28-1.16(m, 1H), 0.79(t, J = 7.6 Hz, 3H). 알킬 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 448(M+1).
실시예 114 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(2-에틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 114
실시예 112에 대한 절차에 따라 (R)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-에틸피페라진-1-카복실레이트 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산을 반응시켜 114를 백색 고체(30 mg, 2단계에 걸쳐 21%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.68(s, 1H), 7.91(s, 1H), 7.36-7.27(m, 1H), 7.02(t, J = 8.9 Hz, 2H), 6.24(s, 2H), 3.76(s, 3H), 3.25-3.15(m, 2H), 3.11-2.90(m, 4H), 2.58(t, J = 5.5 Hz, 1H), 1.41-1.31(m, 1H), 1.28-1.14(m, 1H), 0.79(t, J = 7.5 Hz, 3H). 알킬 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 448(M+1).
실시예 115 (R)-5-아미노-N-(5-(4-아미노아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(3-사이클로프로필-2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 115
단계 A. 3급-부틸 2-(5-사이클로프로필-2-플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00361
3급-부틸 2-(5-클로로-2-플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(309 mg, 0.44 mmol), 칼륨 사이클로프로필트라이플루오로보레이트(98 mg, 0.66 mmol), 팔라듐 아세테이트(20.0 mg, 0.088 mmol), 부틸-다이-1-아다만틸포스핀(50.1 mg, 0.133 mmol) 및 세슘 카보네이트(437 mg, 1.33 mmol)를 40 mL 반응 바이알 내에 충전시키고, 질소로 3회 진공 퍼지시켰다. 톨루엔(10.8 mL) 및 물(1.2 mL)을 첨가하고, 혼합물을 105℃에서 4일 동안 가열시키고, LCMS로 모니터링하였다. 반응을 셀라이트를 통해 여과시키고, 메탄올로 철저히 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시키고, 잔사를 헵탄 중의 0 내지 100% 에틸 아세테이트로 용리하는 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 2-(5-사이클로프로필-2-플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(192 mg, 62%)를 수득하였다.
단계 B. Cbz 및 Boc 그룹을 3급-부틸 2-(5-사이클로프로필-2-플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트로부터 탈보호하여 115를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.83(br, 1H), 7.59(s, 1H), 7.48(br, 2H), 7.20-7.05(m, 2H), 3.65(d, J = 4.6 Hz, 3H), 3.18-3.04(m, 4H), 3.3.05-2.95(m, 1H), 2.1.-2.02(m, 1H), 1.85-1.75(m, 3H), 1.68-1.43(m, 3H), 0.98(dt, J = 8.4, 3.1 Hz, 2H), 0.79 - 0.68(m, 2H). MS(ESI) m/z: 488.2 [M+H+].
실시예 116 (R)-5-아미노-N-(5-(4-아미노아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로-3-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 116
화합물 116을 실시예 115에 기재된 절차에 따라 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.81(s, 1H), 7.58(s, 1H), 7.47(s, 2H), 7.40(dd, J = 15.0, 8.5 Hz, 1H), 7.17(t, J = 9.3 Hz, 1H), 3.64(s, 3H), 3.19-2.93(m, 5H), 2.27(s, 3H), 1.93 - 1.72(m, 3H), 1.67 - 1.43(m, 3H). MS(ESI) m/z: 462.2 [M+H+].
실시예 117 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(3-메틸피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 117
실시예 102에 대한 절차에 따라 (S)-4-(4-(5-(3급- 부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트를 반응시켜 117을 백색 고체(40 mg, 73%)로서 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, DMSO-d6) δ(ppm): 8.81(s, 1H), 8.17(s, 1H), 7.51-7.57(m, 3H), 7.36(s, 1H), 7.25-7.29(m, 2H), 3.65(s, 3H), 3.17-3.19(m, 3H), 2.91-3.14(m, 4H), 1.10(d, J = 5.2 Hz, 3H); MS(ESI) m/z =434(M+1+).
실시예 118 5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 118
실시예 105에 대한 절차에 따라 3급-부틸 2-브로모-4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(130 mg, 0.23 mmol) 및 2,5-다이플루오로벤젠붕산(55 mg, 0.35 mmol)을 반응시켜 118을 어두운 녹색 고체(66 mg, 2단계에 걸쳐 57%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.10-8.00(m, 1H), 7.68(s, 1H), 7.30-7.20(m, 1H), 7.19-7.11(m, 1H), 6.24(tt, J = 55.6, 4.2 Hz, 1H), 4.51-4.40(m, 2H), 4.01-3.92(m, 1H), 3.45-3.30(m, 2H), 3.31-3.16(m, 3H), 2.13-1.91(m, 2H), 1.90-1.67(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 499(M+1).
실시예 119 (S)-5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(메틸아미노)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 119
실시예 108에 대한 절차에 따라 (R)-3급-부틸 2-브로모-4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로-N-메틸아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(80 mg, 0.12 mmol) 및 2-플루오로-5-메틸벤젠붕산(30 mg, 0.20 mmol)을 반응시켜 119를 모노 포메이트 염으로서 연한 핑크색 고체(11 mg, 2단계에 걸쳐 19%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.56(s, 1H), 8.08(dd, J = 7.3, 2.2 Hz, 1H), 7.60(s, 1H), 7.26-7.20(m, 1H), 7.12(dd, J = 11.4, 8.4 Hz, 1H), 6.41-6.08(m, 1H), 4.54-4.43(m, 2H), 3.40-3.33(m, 3H), 3.32-3.24(m, 2H), 2.64(s, 3H), 2.41(s, 3H), 2.33-1.94(m, 3H), 1.91-1.76(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 508(M+1).
실시예 120 5-아미노-N-(5-(4-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 120
MeOH(5 mL) 중의 중간체 17인, 2,2,2-트라이플루오로-N-(3-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드(70 mg, 0.20 mmol) 및 암모늄 포메이트(101 mg, 1.60 mmol)의 용액에 질소 하에 탄소상 10% 팔라듐(21 mg, 0.20 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 3시간 동안 가열시키고, 냉각시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 물(10 mL)과 DCM(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 적색 검(64 mg)으로서 제공하였다. DCM(3 mL) 중의 PyBOP(146 mg, 0.28 mmol) 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(78 mg, 0.22 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반시키고, DCM(2 mL) 중의 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(65 mg, 0.20 mmol) 및 DIPEA(56 μL, 0.32 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30 시간 동안 교반하였다. 추가의 DCM(50 mL)을 첨가하고, 혼합물을 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% Et2O/DCM)로 정제하여 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(3-플루오로-4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 4개의 부분입체이성질체의 라세미 혼합물로서 백색 고체(82 mg)의 형태로 제공하였다. 상기 고체를 DCM(12 mL) 및 TFA(2 mL)의 혼합물에 재-용해시키고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 이후 잔사를 .MeOH 내의 7 N 암모니아(20 mL)로 재용해시키고, 55℃에서 24시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 5%, MeOH/DCM 중의 7 N 암모니아)로 정제하여 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(3-플루오로-4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트의 거울상 이성질체들의 2 개의 쌍을 제공하였다. 한 쌍의 거울상 이성질체 120을 백색 고체(41 mg)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 7.60(s, 1H), 7.53-7.43(m, 1H), 7.15(t, J = 8.8 Hz, 2H), 4.48-4.30(m, 1H), 3.83-3.72(m, 3H), 3.57(d, J = 4.4 Hz, 1H), 3.59-3.45(m, 1H), 3.37-3.29(m, 2H), 3.14(td, J = 11.4, 5.2 Hz, 1H), 1.95-1.84(m, 3H), 1.82-1.71(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 466(M+1).
실시예 121 5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 121
실시예 101에 대한 절차에 따라 중간체 19인, 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 5% MeOH/DCM(350 mL)에 용해시키고, 포화 NaHCO3(50 mL) 및 물(4 x 50 mL)로 세척하고, 용매를 감압 하에 제거하여, 121을 베이지색 고체(1.1 g, 3단계에 걸쳐 34%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.83(s, 1H), 7.57-7.47(m, 4H), 7.31-7.22(m, 2H), 3.78-3.45(m, 4H), 3.45-3.02(m, 3H), 2.25-2.06(m, 2H), 1.92-1.55(m, 5H). LCMS(ES+) m/z 484(M+1).
실시예 122 5-아미노-N-(5-((3S,5S)-5-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 122
실시예 101에 대한 절차에 따라 실시예 25로부터 중간체 20인, 3급-부틸 6-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM, 1% MeOH 중의 7 N 암모니아)로 정제하여, 백색 고체(93 mg, 3단계에 걸쳐 7%)를 수득하였다. 화합물 122를 라세미 혼합물의 SFC 키랄 분리로부터 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.51(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.38-7.28(m, 2H), 7.08-6.98(m, 3H), 6.18-6.07(m, 2H), 4.83-4.66(m, 1H), 4.30-4.21(m, 1H), 4.16-4.09(m, 1H), 3.74(s, 3H), 3.40-3.16(m, 3H), 3.11(m, 1H), 2.98-2.89(m, 1H), 1.95-1.76(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 466(M+1).
실시예 123 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(2-메틸피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 123
실시예 112에 대한 절차에 따라 (S)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3- 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 123을 백색 고체(61 mg, 2단계에 걸쳐 32%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.66(s, 1H), 7.92(s, 1H), 7.34-7.27(m, 1H), 7.03(t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.11(s, 2H), 3.77(s, 3H), 3.28-3.16(m, 2H), 3.08-2.93(m, 4H), 2.59(dd, J = 12.4, 9.5 Hz, 1H), 0.88(d, J = 6.3 Hz, 3H). 알킬 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 434(M+1).
실시예 124 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(2,8-다이아자스피로[4.5]데칸-8-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 124
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 8-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-2,8-다이아자스피로[4.5]데칸-2-카복실레이트로부터 출발하여 124를 베이지색 고체(140 mg, 3단계에 걸쳐 47%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) 1H NMR δ 8.85(br s, 1H), 8.81(s, 1H), 7.61-7.45(m, 4H), 7.29(t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.64(s, 3H), 3.22(t, J = 7.5 Hz, 2H), 3.14-2.96(m, 6H), 1.81(t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.73-1.60(m, 4H). LCMS(ES+) m/z 474(M+1).
실시예 125 5-아미노-N-(5-(4-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 125
실시예 121에 대한 절차에 따라 한 쌍의 거울상 이성질체 125를 회백색 고체(37 mg)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 7.73(s, 1H), 7.53-7.41(m, 1H), 7.14(t, J = 8.8 Hz, 2H), 4.78-4.56(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.55(t, J = 15.3 Hz, 1H), 3.51-3.31(m, 2H), 3.20-2.97(m, 2H), 2.14(q, J = 12.2 Hz, 1H), 2.05-1.83(m, 1H), 1.78-1.69(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 466(M+1).
실시예 126 5-아미노-N-(5-((3R,5R)-5-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 126
실시예 101에 대한 절차에 따라 실시예 25로부터 중간체 20인, 3급-부틸 6-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM, 1% MeOH 중의 7 N 암모니아)로 정제하여, 백색 고체(273 mg, 3단계에 걸쳐 19%)로 수득하였다. 화합물 126을 라세미 혼합물의 SFC 키랄 분리로부터 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.52(s, 1H), 7.80(s, 1H), 7.37-7.28(m, 2H), 7.08-6.98(m, 3H), 6.13(s, 2H), 4.83-4.78 및 4.72-4.68(2 m, 1H), 3.79-3.72(m, 3H), 3.54-3.30(m, 3H), 3.24-3.12(m, 2H), 2.31-2.22(m, 1H), 2.18-2.07(m, 1H), 1.93-1.76(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 466(M+1).
실시예 127 5-아미노-N-(5-((3S,5R)-3-아미노-5-플루오로피페리딘-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6- 다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 127
HCl/MeOH(10 mL) 중의 3급-부틸(3S,5R)-1-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로피페리딘-3-일카바메이트(100 mg, 0.15 mmol)의 혼합물을 주위 온도에서 20시간 동안 교반시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 MeOH(10 mL)로 희석시키고, 28% 암모니아 용액으로 중화시키고, 농축하여 조 생성물을 제공하였다. 조 생성물을 분취용 HPLC로 정제하여 127(40 mg, 59%)을 수득하였다. 1H-NMR(500 MHz, CD3OD) δ(ppm): 7.51-7.49(m, 2H), 7.17-7.12(m, 2H), 4.95-4.86(m, 2H), 3.75(s, 3H), 3.31-3.25(m, 3H), 2.97-2.90(m, 1H), 2.31-2.23(m, 1H), 1.64-1.48(m, 1H); MS(ESI) m/z: 452 [M+H+].
실시예 128 N-(5-(1,4-다이아제판-1-일)-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸-4-일)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 128
1:1 메틸렌 클로라이드: TFA 중의 3급-부틸 4-(4-(5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트로부터 Boc 그룹을 제거하여 128을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 11.57(s, 1H), 8.57(s, 1H), 7.65(s, 2H), 7.61-7.43(m, 1H), 7.29(t, J = 8.7 Hz, 2H), 5.21-5.03(m, 1H), 4.58-4.36(m, 2H), 4.26-4.04(m, 2H), 3.59(s, 2H), 3.46-3.36(m, 2H), 2.98(t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.79(t, J = 5.7 Hz, 2H), 1.60 - 1.40(m, 2H). MS(ESI) m/z: 490.2 [M+H+].
실시예 129 N-(5-(1,4-다이아제판-1-일)-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸-4-일)-5-아미노-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 129
1:1 메틸렌 클로라이드: TFA 중의 3급-부틸 4-(4-(5-아미노-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트로부터 Boc 그룹을 제거하여 129를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 10.78(s, 1H), 8.49(s, 1H), 8.41(s, 2H), 7.90(d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.55(s, 2H), 7.26(d, J = 9.0 Hz, 2H), 4.61-4.42(m, 2H), 4.27-4.11(m, 2H), 3.70-3.54(m, 2H), 3.00(t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.84(t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.36(s, 3H), 1.71 - 1.57(m, 2H). MS(ESI) m/z: 486.2 [M+H+].
실시예 130 N-(5-(1,4-다이아제판-1-일)-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸-4-일)-5-아미노-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 130
1:1 메틸렌 클로라이드: TFA 중의 3급-부틸 4-(4-(5-아미노-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트로부터 Boc 그룹을 제거하여 130을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 10.43(s, 1H), 8.42(s, 1H), 8.36(s, 2H), 8.06-7.94(m, 1H), 7.60(s, 2H), 7.51-7.37(m, 1H),7.36-7.24(m, 1H), 4.56(dd, J = 10.5, 8.2 Hz, 1H), 4.47(dd, J = 11.2, 8.1 Hz, 1H), 4.25(dd, J = 10.7, 5.5 Hz, 1H), 4.18(dd, J = 11.2, 5.7 Hz, 1H), 3.60-3.36(m, 7H), 2.94(t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.83-2.74(m, 2H), 1.75 - 1.56(m, 2H). MS(ESI) m/z: 486.2 [M+H+].
실시예 131 (R)-5-아미노-2-(2-플루오로페닐)-N-(5-(4-하이드록시-4-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 131
SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 131을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.85(s, 1H), 8.33-8.20(m, 1H), 7.53(s, 1H), 7.50-7.24(m, 5H), 4.24(s, 1H), 3.65(s, 3H), 3.43-3.32(m, 1H), 3.28-3.17(m, 1H), 3.11-2.98(m, 1H), 2.96-2.83(m, 1H), 2.05-1.88(m, 1H), 1.84 - 1.64(m, 4H), 1.63 -1.45(m, 1H), 1.17(s, 3H). MS(ESI) m/z: 445.2 [M+H+].
실시예 132 (S)-5-아미노-2-(2-플루오로페닐)-N-(5-(4-하이드록시-4-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 132
SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 132를 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.85(s, 1H), 8.33-8.22(m, 1H), 7.53(s, 1H), 7.50-7.23(m, 5H), 4.24(s, 1H), 3.65(s, 3H), 3.42-3.33(m, 1H), 3.27-3.19(m, 1H), 3.11-2.98(m, 1H), 2.96-2.80(m, 1H), 2.06-1.89(m, 1H), 1.80 - 1.63(m, 4H), 1.63 - 1.47(m, 1H), 1.17(s, 3H). MS(ESI) m/z: 445.2 [M+H+].
실시예 133 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(5-(트라이플루오로메틸)-1,4-다이아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 133
SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 133을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 11.98(s, 1H), 7.90(s, 1H), 7.64-7.39(m, 3H), 7.37-7.21(m, 2H), 3.62(s, 3H), 3.22-2.97(m, 6H), 2.89(dd, J = 14.6, 10.5 Hz, 1H), 2.79-2.60(m, 1H), 2.25(dd, J = 12.4, 10.6 Hz, 1H), 1.83-1.59(m, 1H), 0.68(d, J = 6.7 Hz, 3H). MS(ESI) m/z: 448.2 [M+H+].
실시예 134 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(5-(트라이플루오로메틸)-1,4-다이아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 134
SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 134를 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 11.98(s, 1H), 7.90(s, 1H), 7.64-7.39(m, 3H), 7.37-7.21(m, 2H), 3.62(s, 3H), 3.22-2.97(m, 6H), 2.89(dd, J = 14.6, 10.5 Hz, 1H), 2.79-2.60(m, 1H), 2.25(dd, J = 12.4, 10.6 Hz, 1H), 1.83-1.59(m, 1H), 0.68(d, J = 6.7 Hz, 3H). MS(ESI) m/z: 448.2 [M+H+].
실시예 135 (S)-5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 135
SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 135를 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.69(s, 1H), 7.69(s, 1H), 7.59-7.43(m, 3H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.37(tt, J = 55.3, 4.1 Hz, 1H), 4.41(td, J = 14.5, 4.1 Hz, 2H), 3.79(d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.24-2.94(m, 4H), 1.96-1.75(m, 3H), 1.73 - 1.48(m, 3H). MS(ESI) m/z: 499.1 [M+H+].
실시예 136 (R)-5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 136
SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 136을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.69(s, 1H), 7.69(s, 1H), 7.58-7.42(m, 3H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.37(tt, J = 55.3, 4.0 Hz, 1H), 4.47(d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.40(td, J = 14.5, 4.1 Hz, 2H), 3.87-3.72(m, 1H), 3.23-2.94(m, 4H), 1.92 - 1.76(m, 3H), 1.73 - 1.46(m, 3H). MS(ESI) m/z: 499.1 [M+H+].
실시예 137 (S)-5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 137
SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 137을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.91(s, 1H), 8.07(d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.65(s, 1H), 7.41(s, 2H), 7.23(d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.38(tt, J = 55.4, 4.1 Hz, 1H), 4.53(s, 1H), 4.42(td, J = 14.5, 4.1 Hz, 2H), 3.89-3.76(m, 1H), 3.27-2.98(m, 4H), 2.36(s, 3H), 1.95-1.79(m, 3H), 1.79-1.48(m, 3H). MS(ESI) m/z: 495.2 [M+H+].
실시예 138 (R)-5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 138
SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 138을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.91(s, 1H), 8.07(d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.66(s, 1H), 7.41(s, 2H), 7.23(d, J = 9.0 Hz, 2H), 6.38(tt, J = 55.4, 4.1 Hz, 1H), 4.53(d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.42(td, J = 14.5, 4.1 Hz, 2H), 3.93-3.74(m, 1H), 3.27-3.00(m, 4H), 2.37(s, 3H), 1.97-1.78(m, 3H), 1.78-1.49(m, 3H). MS(ESI) m/z: 495.2 [M+H+].
실시예 139 5-아미노-N-(5-((4R,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 139
단계 A: 무수 DCM(10 ml) 중의 벤질 4-아지도-5-하이드록시아제판-1-카복실레이트(1.0 g, 3.45 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(등록상표)(1.6 mL, 8.62 mmol, THF 중의 50%)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 포화 수성 NaHCO3 용액(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 포화 수성 NaHCO3 용액(20 mL)으로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(20% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 벤질 4-아지도-5-플루오로아제판-1-카복실레이트를 신 및 안티 이성질체의 혼합물로서 담황색 오일(0.76 g)로서 수득하였다.
단계 B: THF/물(10 mL/2 mL) 중의 벤질 4-아지도-5-플루오로아제판-1-카복실레이트(0.5 g, 1.71 mmol)의 용액을 트라이페닐포스핀(0.45 g, 1.71 mmol)으로 처리하고, 혼합물을 60℃에서 24시간 동안 가열하였다. 혼합물을 EtOAc(100 mL) 및 물(20 mL) 사이에 분배하고, 염수(20 mL)로 세척했다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 무색 오일을 제공하였다. 상기 오일을 Et2O 중에서 분쇄하고, 생성 고체를 여과 제거하고 Et2O로 세척하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 무색 오일을 제공하였다. 반응을 절반의 규모로 반복하고, 합친 배치를 무수 DCM(20 mL)에 용해시키고, 다이-3급-부틸 다이카보네이트(1.1 g, 5.11 mmol) 및 NEt3(1.1 mL, 7.67 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 벤질 4-(3급-부톡시카보닐아미노)-5-플루오로아제판-1-카복실레이트를 신 및 안티 이성질체의 혼합물로서 무색 오일(0.55 g)로서 수득하였다.
단계 C: MeOH(75 mL) 중의 벤질 4-(3급-부톡시카보닐아미노)-5-플루오로아제판-1-카복실레이트(0.55 g, 1.50 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 50℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 3급-부틸 5-플루오로아제판-4-일카바메이트를 신 및 안티 이성질체로서 무색 오일(317 mg)로서 수득하였다.
단계 D: EtOH(4 mL) 중의 3급-부틸 5-플루오로아제판-4-일카바메이트(310 mg, 1.34 mmol)의 용액에 DIPEA(1 ml, 5.7 mmol) 및 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(216 mg, 1.34 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 130℃에서 마이크로파로 8 시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(30 내지 40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 2개의 트랜스이성질체, 3급-부틸 5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트 및 3급-부틸 5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트를 몇몇 신 이성질체로 오염된 황색 유리(65 mg)로서 수득하였다.
단계 E: MeOH(20 mL) 중의 3급-부틸 5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트 및 3급-부틸 5-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(65 mg, 0.182 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 50℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 유리 아민을 담황색 유리(51 mg)로서 수득하였다.
단계 F: DCM(10 mL) 중의 상기 아민(51 mg, 0.156 mmol)의 용액에 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(56 mg, 0.156 mmol), PyBOP(203 mg, 0.39 mmol) 및 DIPEA(0.5 mL, 2.9 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 물(10 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(40 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(60% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 2개의 트랜스이성질체 3급-부틸 4-(5-(4-Boc-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일카바메이트를 소량의 신(시스) 이성질체로 오염된 연한 연보라색 고체(36 mg)로서 수득하였다.
단계 G: MeOH(2 mL) 중의 3급-부틸 4-(5-(4-Boc-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일카바메이트(35 mg, 0.053 mmol)의 2개의 트랜스 이성질체의 용액/서스펜션을 다이옥산 중의 HCl의 용액(4 M, 0.65 mL, 2.63 mmol)으로 처리하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 5-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드를 회백색 고체(3 mg, 8 단계에 걸쳐 0.16%)로서 수득하였다. 4-아미노 및 5-플루오로 그룹은 트랜스이다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.81(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.38-7.27(m, 1H), 7.08-6.98(m, 2H), 6.14(s, 2H), 4.92-4.77(m, 1H), 3.73(s, 3H), 3.50-3.29(m, 3H), 3.18-3.05(m, 2H), 2.29-2.24(m, 1H), 2.11-1.76(m, 3H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 466(M+1)
5-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드를 SFC로 키랄 분리하여 139를 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.82(s, 1H), 7.59-7.42(m, 4H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.55-4.31(m, 1H), 3.63(s, 3H), 3.23-3.03(m, 5H), 2.20-2.02(m, 1H), 2.02-1.88(m, 1H), 1.88-1.76(m, 1H), 1.67 - 1.52(m, 1H). MS(ESI) m/z: 466.1 [M+H+].
실시예 140 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 140
실시예 139의 절차에 따라 4-아미노 및 5-플루오로 그룹이 시스인 5-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드를 수득하였다. SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 140을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.82(s, 1H), 7.59-7.42(m, 4H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.55-4.31(m, 1H), 3.63(s, 3H), 3.23-3.03(m, 5H), 2.20-2.02(m, 1H), 2.02-1.88(m, 1H), 1.88 - 1.76(m, 1H), 1.67 - 1.52(m, 1H). MS(ESI) m/z: 466.1 [M+H+].
실시예 141 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(2-메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 141
실시예 112에 대한 절차에 따라 (S)-5-(2,4-다이메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-아민 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산을 반응시켜 141을 핑크색 고체(86 mg, 2단계에 걸쳐 46%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.59(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.35-7.28(m, 1H), 7.02(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.13(s, 2H), 3.77(s, 3H), 3.43-3.31(m, 2H), 2.98(d, J = 11.6 Hz, 1H), 2.83(t, J = 11.4 Hz, 2H), 2.35(s, 3H), 2.32-2.25(m, 1H), 1.96(t, J = 10.2 Hz, 1H), 0.90(d, J = 6.3 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 448(M+1).
실시예 142 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(2-메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 142
실시예 110에 대한 절차에 따라 (R)-5-(2,4-다이메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-아민 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산을 반응시켜 142를 백색 고체(54 mg, 2단계에 걸쳐 29%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.59(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.36-7.25(m, 1H), 7.02(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.12(s, 2H), 3.77(s, 3H), 3.43-3.30(m, 2H), 2.98(dt, J = 11.5, 2.8 Hz, 1H), 2.83(t, J = 11.4 Hz, 2H), 2.35(s, 3H), 2.42-2.20(m, 1H), 1.96(t, J = 10.2 Hz, 1H), 0.92(d, J = 8.6 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 448(M+1).
실시예 143 5-아미노-N-(1-사이클로프로필-5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 143
실시예 105에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-(4-(2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복사미도)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트 및 2,5-다이플루오로-페닐붕산을 반응시켜 143을 베이지색 포움(60 mg, 2단계에 걸쳐 42%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.92(s, 1H), 7.92-7.84(m, 2H), 7.17-7.08(m, 1H), 7.07-6.99(m, 1H), 6.15(s, 2H), 3.68(t, J = 13.2 Hz, 2H), 3.52-3.32(m, 5H), 3.11(t, J = 5.4 Hz, 2H), 1.95(s, 1H), 1.26-1.20(m, 2H), 1.08-1.00(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 496(M+1).
실시예 144 5-아미노-N-(1-사이클로프로필-5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 144
실시예 105에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-(4-(2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복사미도)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트 및 2-플루오로-5-메틸페닐붕산을 반응시켜 144를 베이지색 포움(75 mg, 2단계에 걸쳐 53%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.99(s, 1H), 7.92(dd, J = 7.2, 2.2 Hz, 1H), 7.84-7.79(m, 1H), 7.16-7.11(m, 1H), 7.10-7.00(m, 1H), 6.09(s, 2H), 3.69(t, J = 13.3 Hz, 2H), 3.51-3.35(m, 5H), 3.09(t, J = 5.5 Hz, 2H), 2.39(s, 3H), 2.05-1.80(m, 1H), 1.29-1.19(m, 2H), 1.09-0.98(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1).
실시예 145 5-아미노-N-(1-사이클로프로필-5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 145
THF(3 mL) 중의 3급-부틸 4-(4-(2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)티아졸-4-카복사미도)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(191 mg, 0.29 mmol), 칼륨 플루오라이드 다이하이드레이트(90 mg, 0.96 mmol) 및 2,6-다이플루오로-페닐붕산(137 mg, 0.87 mmol)의 혼합물을 조심히 15분 동안 질소를 버블링하여 탈기시켰다. 이후 트리스(다이벤질리덴아세톤)다이팔라듐/트리-3급-부틸 포스포늄 테트라플루오로보레이트 혼합물(몰비: 1/1.2)(35 mg, 0.029 mmol)을 첨가하고, 탈기된 혼합물을 마이크로파로 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 물(5 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(2 x 20 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 60% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-(4-(5-3급-부톡시카보닐아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 오렌지 고체(95 mg, 0.13 mmol)로서 수득하고, 이를 1,4-다이옥산 중의 HCl(4 M, 0.7 mL, 2.73 mmol) 및 MeOH(0.2 mL)의 용액에 용해시키고, 70℃에서 48시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 MeOH/DCM에서 용해시키고, DCM 및 MeOH로 세척하고, MeOH 중의 1 N 암모니아로 용리되는 SCX 카트리지에 통과시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM)로 정제하여 145를 베이지색 고체(35 mg, 2단계에 걸쳐 25%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 9.42(s, 1H), 7.87(s, 1H), 7.38-7.28(m, 1H), 7.08-6.97(m, 2H), 6.20(s, 2H), 3.71-3.56(m, 3H), 3.46-3.35(m, 4H), 3.12-3.06(m, 2H), 1.25-1.19(m, 2H), 1.06-0.97(m, 2H). 알킬 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 496(M+1).
실시예 146 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(4-하이드록시-4-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 146
MeOH(15 mL) 중의 4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(212 mg, 0.83 mmol) 및 암모늄 포메이트(386 mg, 6.6 mmol)의 용액에 질소 하에 탄소상 10% 팔라듐(88 mg, 0.83 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 냉각시키고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 물(20 mL)과 DCM(40 mL) 사이에 분배시키고, 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-4-메틸아제판-4-올을 적색 오일로서 수득하고, 이를 추가 정제없이 사용했다. DCM(10 mL) 중의 DIPEA(0.06 mL, 0.33 mmol), PyBOP(151 mg, 0.29 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산(89 mg, 0.25 mmol)의 용액(30분 동안 예비-교반된)에 1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-4-메틸아제판-4-올(47 mg, 0.21 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(30 mL) 및 물(20 mL)로 희석시켰다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-하이드록시-4-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 회백색 고체(109 mg)로서 제공하였다. 상기 고체를 MeOH(5 mL) 중의 1,4-다이옥산 내 HCl(4 M, 5 mL, 20 mmol)로 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 MeOH 중에 재용해시키고, SCX 칼럼에 통과시키고, DCM 및 MeOH으로 세척하고, MeOH/DCM 중의 3 내지 10% 7 N 암모니아로 용리하는 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 5% MeOH/DCM)로 정제하여 146을 회백색 고체(36 mg, 3단계에 걸쳐 37%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 7.68(s, 1H), 7.52-7.43(m, 1H), 7.17-7.10(m, 2H), 3.74(s, 3H), 3.56-3.44(m, 1H), 3.19-3.10(m, 1H), 3.04-2.96(m, 1H), 2.14-2.02(m, 1H), 1.94-1.80(m, 4H), 1.74-1.64(m, 1H), 1.23(s, 3H)(용매 피크와 일치하는 1개의 양성자). LCMS(ES+) m/z 463(M+1).
실시예 147 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 147
단계 A: DCM(40 mL) 중의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(784 mg, 2.2 mmol)에 PyBOP(1.46 g, 2.8 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반시켰다. 이후 DCM(40 mL) 중의 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(647 mg, 2.0 mmol) 및 DIPEA(0.59 mL, 3.4 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(60 mL)으로 희석시키고, 물(30 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 회백색 고체(1.32 g)로서 수득하였다.
단계 B: 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 압력 용기 내에서 MeOH(20 mL) 중에 현탁시키고, 이에 1,4-다이옥산 중의 HCl의 용액(4 M, 20 mL, 80.0 mmol)을 첨가하였다. 용기를 밀폐하고, 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM 중의 7 N 암모니아)로 정제하여 5-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드를 연한 갈색 고체(653 mg, 2단계에 걸쳐 70%)로 수득하였다. 4-아미노 및 5-플루오로 그룹은 시스이다. 1H NMR(400 M Hz, CDCl3) δ 8.63(s, 1H), 7.84(s, 1H), 7.37-7.29(m, 1H), 7.03(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.13(s, 2H), 4.48(dtd, J = 47.9, 8.6, 3.6 Hz, 1H), 3.72(s, 3H), 3.37-3.15(m, 5H), 2.23-1.92(m, 3H), 1.75-1.67(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 466(M+1). SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 147을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.04(s, 1H), 7.59(s, 1H), 7.56-7.43(m, 3H), 7.26(dd, J = 14.5, 5.9 Hz, 2H), 4.82(dd, J = 47.0, 7.4 Hz, 1H), 3.63(s, 3H), 3.29-3.15(m, 4H), 3.08-2.91(m, 2H), 2.24-2.06(m, 1H), 1.91-1.76(m, 2H), 1.74-1.59(m, 1H). MS(ESI) m/z: 466.1 [M+H+].
실시예 148 (S)-5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 148
SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 148을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.10(s, 1H), 8.15(ddd, J = 9.3, 5.7, 3.3 Hz, 1H), 7.55(s, 1H), 7.51-7.36(m, 3H), 7.27(tt, J = 7.4, 3.6 Hz, 1H), 6.38(tt, J = 55.4, 4.1 Hz, 1H), 4.50(d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.42(td, J = 14.5, 4.1 Hz, 2H), 3.87-3.71(m, 1H), 3.25-2.97(m, 4H), 1.92-1.76(m, 3H), 1.73 - 1.47(m, 3H). MS(ESI) m/z: 499.1 [M+H+].
실시예 149 (R)-5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 149
SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 149를 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.10(s, 1H), 8.15(ddd, J = 9.3, 5.7, 3.3 Hz, 1H), 7.55(s, 1H), 7.51-7.36(m, 3H), 7.27(tt, J = 7.4, 3.6 Hz, 1H), 6.38(tt, J = 55.4, 4.1 Hz, 1H), 4.50(d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.42(td, J = 14.5, 4.1 Hz, 2H), 3.87-3.71(m, 1H), 3.25-2.97(m, 4H), 1.92-1.76(m, 3H), 1.73 - 1.47(m, 3H). MS(ESI) m/z: 499.1 [M+H+].
실시예 150 5-아미노-N-(5-((4R,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 150
실시예 147의 절차에 따라 4-아미노 및 5-플루오로 그룹이 시스인 5-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드를 제공하였다. SFC에 의한 라세미 혼합물의 키랄 분리로 150을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.05(s, 1H), 7.59(s, 1H), 7.57-7.47(m, 3H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.82(dd, J = 47.0, 7.2 Hz, 1H), 3.63(s, 3H), 3.30-3.15(m, 4H), 3.08-2.94(m, 2H), 2.26-2.09(m, 1H), 1.93-1.74(m, 2H), 1.74-1.60(m, 1H). MS(ESI) m/z: 466.1 [M+H+].
실시예 151 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(6-플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 151
화합물 151을 실시예 102에 기재된 절차에 따라 6-플루오로-1,4-다이아제판을 사용하여 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.74(s, 1H), 8.17(s, 1H), 7.59-7.46(m, 3H), 7.43(s, 1H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.47-4.37(m, 1H), 4.30(dd, J = 5.2, 2.3 Hz, 1H), 3.64(s, 3H), 3.08-2.73(m, 8H). MS(ESI) m/z: 452.1 [M+H+].
실시예 152 (R)-5-아미노-N-(5-(4-아미노아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 152
화합물 152를 본원에 기재된 절차에 따라 제조하였다.
실시예 153 5-아미노-N-(5-((3S,5R)-5-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 153
실시예 101에 대한 절차에 따라 중간체 20인, 3급-부틸 6-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산을 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM, 1% MeOH 중의 7 N 암모니아)로 백색 고체(273 mg, 3단계에 걸쳐 19%)로서 제공하였다. 화합물 153 을 라세미 혼합물의 SFC 키랄 분리를 통해 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.77(s, 1H), 7.61-7.41(m, 4H), 7.27(dd, J = 14.5, 5.8 Hz, 2H), 4.84-4.56(m, 1H), 3.67(d, J = 7.4 Hz, 3H), 3.44-3.34(m, 2H), 3.21-2.86(m, 3H), 2.22-2.07(m, 1H), 1.87(ddt, J = 34.3, 21.1, 7.4 Hz, 3H), 1.70 - 1.53(m, 1H). MS(ESI) m/z: 466.1 [M+H+].
실시예 154 5-아미노-N-(5-(5-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 154
실시예 101에 대한 절차에 따라 중간체 20인, 3급-부틸 6-플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산을, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM, 1% MeOH 중의 7 N 암모니아)로, 백색 고체(273 mg, 3단계에 걸쳐 19%)를 제공하였다. 화합물 154를 라세미 혼합물의 SFC 키랄 분리를 통해 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.77(s, 1H), 7.61-7.41(m, 4H), 7.27(dd, J = 14.5, 5.8 Hz, 2H), 4.84-4.56(m, 1H), 3.67(d, J = 7.4 Hz, 3H), 3.44-3.34(m, 2H), 3.21-2.86(m, 3H), 2.22-2.07(m, 1H), 1.87(ddt, J = 34.3, 21.1, 7.4 Hz, 3H), 1.70 - 1.53(m, 1H). MS(ESI) m/z: 466.1 [M+H+].
실시예 155 5-아미노-N-(5-((3R,4S)-4-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 155
실시예 101 또는 112의 절차에 따라 화합물 155를 라세미 혼합물의 SFC 키랄 분리를 통해 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.77(s, 1H), 7.60-7.44(m, 4H), 7.26(dd, J = 14.4, 5.8 Hz, 2H), 4.34-4.10(m, 1H), 3.66(s, 3H), 3.54-3.33(m, 2H), 3.17-2.93(m, 3H), 1.96-1.50(m, 5H). MS(ESI) m/z: 466.1 [M+H+].
실시예 156 5-아미노-N-(5-((3S,4R)-4-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 156
실시예 101 또는 112의 절차에 따라 화합물 156을 라세미 혼합물의 SFC 키랄 분리를 통해 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.77(s, 1H), 7.60-7.44(m, 4H), 7.26(dd, J = 14.4, 5.8 Hz, 2H), 4.34-4.10(m, 1H), 3.66(s, 3H), 3.54-3.33(m, 2H), 3.17-2.93(m, 3H), 1.96-1.50(m, 5H). MS(ESI) m/z: 466.1 [M+H+].
실시예 157 5-아미노-N-(5-((3R,4R)-4-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 157
실시예 101 또는 112의 절차에 따라 화합물 157을 라세미 혼합물의 SFC 키랄 분리를 통해 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.77(s, 1H), 7.61-7.41(m, 4H), 7.26(dd, J = 14.4, 5.8 Hz, 2H), 4.33-4.09(m, 1H), 3.66(s, 3H), 3.51-3.32(m, 2H), 3.06(m, 3H), 1.87-1.49(m, 4H). MS(ESI) m/z: 466.2 [M+H+].
실시예 158 5-아미노-N-(5-((3S,4S)-4-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 158
실시예 101 또는 112의 절차에 따라 화합물 158을 라세미 혼합물의 SFC 키랄 분리를 통해 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.77(s, 1H), 7.61-7.41(m, 4H), 7.26(dd, J = 14.4, 5.8 Hz, 2H), 4.33-4.09(m, 1H), 3.66(s, 3H), 3.51-3.32(m, 2H), 3.06(m, 3H), 1.87-1.49(m, 4H). MS(ESI) m/z: 466.2 [M+H+].
실시예 159 5-아미노-N-(5-((3R,5R)-3-아미노-5-플루오로피페리딘-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 159
HCl/MeOH(10 mL) 중의 3급-부틸(3R,5R)-1-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)- 티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로피페리딘-3-일카바메이트(150 mg, 0.23 mmol)의 혼합물을 주위 온도에서 20시간 동안 교반시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 MeOH(10 mL)로 희석시키고, 28% 암모니아 용액으로 중화시키고, 농축하여 조 생성물을 제공하였다. 조 생성물을 분취용 HPLC로 정제하여 159를 연한 고체(77 mg, 74%)로서 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, CD3OD) δ(ppm): 7.74(s, 1H), 7.48-7.42(m, 1H), 7.14-7.11(m, 2H), 5.36-5.24(m, 1H), 4.00-3.94(m, 1H), 3.83-3.72(m, 4H), 3.42-3.37(m, 1H), 2.74-2.62(m, 2H), 2.50-5.42(m, 1H), 2.02-1.88(m, 1H); MS(ESI) m/z: 452 [M+H+].
실시예 160 5-아미노-N-(5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 160
실시예 162를 따라 화합물 160을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 10.13(s, 1H), 9.14(s, 1H), 8.51(s, 1H), 7.60-7.45(m, 1H), 7.27(t, J = 8.4 Hz, 2H), 5.17(s, 1H), 4.55(t, J = 8.2 Hz, 2H), 4.33-4.10(m, 2H), 3.77(t, J = 12.8 Hz, 2H), 3.69-3.51(m, 2H), 3.47-3.36(m, 2H), 3.19(t, J = 14.3 Hz, 2H), 3.03 - 2.81(m, 3H). MS(ESI) m/z: 526.2 [M+H+].
실시예 161 (R)-5-아미노-N-(5-(4-아미노아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 161
실시예 101을 따라 5-클로로-1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-피라졸 및 (R)-벤질 아제판-4-일카바메이트를 반응시켜 161을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.12(s, 1H), 8.18-8.06(m, 1H), 7.57(s, 1H), 7.52-7.35(m, 3H), 7.34-7.18(m, 1H), 6.39(tt, J = 55.3, 4.2 Hz, 1H), 4.42(td, J = 14.5, 4.2 Hz, 2H), 3.21 -3.03(m, 4H), 3.03-2.91(m, 1H), 1.91-1.71(m, 3H), 1.64-1.36(m, 3H). MS(ESI) m/z: 498.2 [M+H+].
실시예 162 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 162
단계 A. 옥세탄-3-일메틸 메탄설포네이트
Figure pct00362
옥세탄-3-일메탄올(1.85 g, 21.0 mmol)을 메틸렌 클로라이드 중에 용해시키고, 0℃로 냉각시켰다. 트라이에틸아민(5.31 g, 52.2 mmol)을 첨가하고, 그 다음 메탄설포닐 클로라이드(2.89 g, 25.2 mmol)를 천천히 첨가하였다. 혼합물을 주위 온도로 2 시간 동안 가열시키고, 포화 나트륨 바이카보네이트(14 mL)로 켄칭하였다. 수용액을 메틸렌 클로라이드로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 조 옥세탄-3-일메틸 메탄설포네이트(quant.)를 수득하였다.
단계 B. 4-니트로-1-(옥세탄-3-일메틸)피라졸
Figure pct00363
4-니트로피라졸(1000 mg, 8.80 mmol), 옥세탄-3-일메틸 메탄설포네이트(1.90 g, 11.0mmol), 세슘 카보네이트(8.70 g, 27.0 mmol) 및 아세토니트릴(13 mL)의 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 포화 암모늄 클로라이드를 첨가하였다. 혼합물을 메틸렌 클로라이드로 3회 추출하였다. 합친 유기물을 (Na2SO4)에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 조 생성물을 헵탄 중의 0 내지 70% 에틸 아세테이트로 용리하는 플래시 크로마토그래피로 정제하여 4-니트로-1-(옥세탄-3-일메틸)피라졸(1.60g, 99%)을 수득하였다.
단계 C. 5-클로로-4-니트로-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸
Figure pct00364
THF(80 mL) 중의 4-니트로-1-(옥세탄-3-일메틸)피라졸(3200 mg, 17.47 mmol)의 용액에 LHMDS(THF 중의 1M 용액, 22.7 mL, 22.7 mmol)를 -78℃에서 15분 동안 적가하였다. 생성 혼합물을 -78℃에서 30분 동안 교반시키고, THF(20 mL) 중의 헥사클로로에탄(5.38 g, 22.7 mmoL)을 -78℃에서 적가하였다. 생성 혼합물을 -78℃에서 또 다른 40분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 수성 암모늄 클로라이드로 켄칭하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 Na2SO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 조 물질을 헵탄 중 0 내지 75% 에틸 아세테이트를 용리물로 사용하는 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 5-클로로-4-니트로-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸(3.60 g, 95%)을 수득하였다.
단계 D. 실시예 101에 따라 5-클로로-4-니트로-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸 및 아제판-4-올로부터 출발하여, 마지막 탈보호 단계에서 다이옥산 중의 4N HCl 대신에 TFA를 사용하여 162를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.25(s, 1H), 8.27(s, 1H), 7.65-7.48(m, 3H), 7.26(dd, J = 14.3, 5.8 Hx, 2H), 5.18(t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.65 -4.52(m, 2H), 4.41(dd, J = 11.0, 8.2 Hz, 1H), 4.27(dd, J = 10.5, 5.8 hZ, 1H), 4.10(dd, J = 11.1, 6.1 Hz, 1H), 3.80-3.66(m, 1H), 3.63-3.43(m, 5H), 3.43-3.32(m, 1H), 1.95-1.78(m, 2H), 1.77-1.52(m, 4H). MS(ESI) m/z: 505.1 [M+H+].
실시예 163 5-아미노-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)-N-(5-(4-하이드록시아제판-1-일)-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 163
실시예 162의 절차에 따라 163을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.85(s, 1H), 8.05(d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.56(s, 1H), 7.40(s, 2H), 7.23(d, J =9.1 Hz, 2H), 4.72-4.61(m, 2H), 4.53(d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.46(t, J = 6.2 Hz, 2H), 4.25(d, J = 7.4 Hz, 2H), 3.90-3.76(m, 1H), 3.49-3.36(m, 1H), 3.28-2.97(m, 4H), 2.37(s, 3H), 1.99-1.81(m, 3H), 1.78-1.53(m, 3H). MS(ESI) m/z: 501.1 [M+H+].
실시예 164 (R)-5-아미노-N-(5-(4-아미노아제판-1-일)-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 164
실시예 162의 절차에 따라 164를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.09(s, 1H), 8.31(s, 1H), 8.29(s, 1H), 7.66-7.45(m, 2H), 7.27(td, J = 8.4, 5.9 Hz, 2H), 5.17(s, 1H), 4.59(dd, J = 18.0, 7.8 Hz, 1H), 4.48-4.35(m, 1H), 4.32-4.18(m, 1H), 4.16-4.02(m, 1H), 3.67-3.38(m, 6H), 2.97-2.84(m, 1H), 1.91-1.30(m, 6H). MS(ESI) m/z: 504.1 [M+H+].
실시예 165 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(6-플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1-(옥세탄-3-일메틸)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드
실시예 162의 절차에 따라 165를 수득하였다. MS(ESI) m/z: 508.2 [M+H+].
실시예 166 (S)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 166
실시예 101 및 112의 절차에 따라 화합물 166을 라세미 혼합물의 SFC 키랄 분리를 통해 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.83(s, 1H), 7.59-7.43(m, 4H), 7.28(t, J = 8.6 Hz, 2H), 3.75-3.54(m, 4H), 3.25-3.01(m, 4H), 2.29-2.09(m, 2H), 1.90-1.77(m, 1H), 1.77-1.62(m, 1H). MS(ESI) m/z: 484.1 [M+H+].
실시예 167 (R)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 167
실시예 101 및 112의 절차에 따라 화합물 167을 라세미 혼합물의 SFC 키랄 분리를 통해 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.84(s, 1H), 7.59-7.44(m, 4H), 7.28(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.73-3.57(m, 4H), 3.26-2.96(m, 4H), 2.30-2.09(m, 2H), 1.91-1.79(m, 1H), 1.79-1.60(m, 1H). MS(ESI) m/z: 484.1 [M+H+].
실시예 168 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 168
실시예 169 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 169
단계 A. (±)-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-(트라이플루오로메틸)피페라진
Figure pct00365
EtOH(10 mL) 중의 (±)-2-(트라이플루오로메틸)피페라진(1 g, 6.2 mmol), 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H- 피라졸(2.1 g, 13 mmol), DIPEA(2.4 g, 18.6 mmol)의 혼합물을 마이크로파 오븐 내에서 140℃에서 5 시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 DCM/MeOH(10:1)를 용리 용매로서 사용하는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 (±)-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-(트라이플루오로메틸)피페라진을 황색 오일(1.8 g, 99%)로서 수득하였다. MS(ESI) m/z: 280 [M+H+].
단계 B. (±)-1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-아민
Figure pct00366
MeOH(20 mL) 및 H2O(5 mL) 중의 (±)-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-(트라이플루오로메틸)피페라진(420 mg, 1.5 mmol)의 용액에 아연(590 mg, 4 mmol) 및 NH4Cl(805mg, 10 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 2 시간 동안 교반시키고, 셀라이트를 통해 여과시켰다. 여액을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 PE/EtOAc(10/1~1/10)를 용리 용매로서 사용하는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 (±)-1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-아민(340 mg, 90%)을 적색 고체로서 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, DMSO-d6) δ(ppm): 6.84(s, 1H), 3.38-3.52(m, 5H), 3.13-3.17(m, 2H), 2.94-3.00(m, 2H), 2.50-2.78(s, 3H), 1.98(m, 1H); MS(ESI) m/z: 250(M+1+).
단계 C. 3급-부틸(±)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페라진-1- 일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트
Figure pct00367
DMF(15 mL) 중의 (±)-1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-아민(300 mg, 2.05 mmol), 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(516 mg, 1.73 mmol), HATU(0.54 g, 1.73 mmol)의 용액에 TEA(1.1 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 20시간 동안 교반시키고, 물(100 mL)에 붓고, EtOAc(50 mL × 2)로 추출하였다. 합친 유기층을 물(50 mL × 2) 및 염수(30 mL × 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 DCM/MeOH(1:1)를 용리 용매로서 사용하는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸(±)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(380 mg, 52%)를 백색 고체로서 수득하였다. MS(ESI) m/z: 588(M+1+).
단계 D. 분취용 HPLC를 이용하여 3급-부틸(±)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(380 mg)를 키랄 분리하여 3급-부틸(S)- 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(123 mg) 및 3급-부틸 (R)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1- 메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(120 mg)를 수득하였다.
단계 E. TFA(1mL)과 DCM(4 mL) 중의 3급-부틸(S)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(80 mg, 0.126 mmol)의 혼합물을 주위 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 암모니아를 첨가하여 혼합물의 pH를 약 8~9로 조정하고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 168을 포름산 염(40 mg, 73%)으로서 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, DMSO-d6) δ(ppm): 8.85(s, 1H), 7.50-7.56(m, 3H), 7.37(s, 1H), 7.25-7.28(m, 2H), 3.65(s, 3H), 3.46-3.48(m, 1H), 3.02-3.14(m, 3H), 2.92-2.97(m, 2H), 2.78(m, 1H), 1.23(s, 1H); MS(ESI) m/z = 488.1(M+1+).
단계 F. TFA(1mL)과 DCM(4 mL) 중의 3급-부틸 (R)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페라진-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(80 mg, 0.126 mmol)의 혼합물을 주위 온도에서 3시간 동안 교반하였다. 암모니아를 첨가하여 혼합물의 pH를 약 8~9로 조정하고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 169 포름산 염(40 mg, 73%)을 백색 고체로서 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, DMSO-d6) δ(ppm): 8.84(s, 1H), 7.50-7.55(m, 3H), 7.37(s, 1H), 7.25-7.28(m, 2H), 3.47(s, 3H), 3.36-3.48(m, 1H), 3.07-3.16(m, 3H), 2.94-2.96(m, 2H), 2.78-2.80(m, 1H), 1.24(s, 1H); MS(ESI) m/z = 488.1(M+1+).
실시예 170 (S)-5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(3-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 170
실시예 101 또는 112의 절차에 따라 화합물 170을 라세미 혼합물의 SFC 키랄 분리를 통해 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.84(s, 1H), 7.71(s, 1H), 7.56-7.52(m, 1H), 7.51(s, 2H), 7.27(m, 2H), 6.39(tt, J = 55.4, 4.1 Hz, 1H), 4.63(d, J = 3.9 Hz, 1H), 4.60-4.50(m, 1H), 4.42-4.31(m, 1H), 3.70(d, J = 3.8 Hz, 1H), 3.18(ddd, J = 17.8, 12.9, 4.7 Hz, 2H), 3.11-3.02(m, 2H), 1.91-1.82(m, 1H), 1.77(dd, J = 17.4, 10.6 Hz, 1H), 1.67(m, 2H), 1.60-1.47(m, 2H). ESIMS m/z = 499.1(M+1).
실시예 171 (R)-5-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(3-하이드록시아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 171
실시예 101 또는 112의 절차에 따라 화합물 171을 라세미 혼합물의 SFC 키랄 분리를 통해 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.84(s, 1H), 7.72(s, 1H), 7.56-7.52(m, 1H), 7.51(s, 2H), 7.27(m, 2H), 6.39(tt, J = 55.4, 4.1 Hz, 1H), 4.63(d, J = 3.9 Hz, 1H), 4.52(m, 1H), 4.43-4.32(m, 1H), 3.75-3.66(m, 1H), 3.18(ddd, J = 17.8, 12.9, 4.7 Hz, 2H), 3.11-3.02(m, 2H), 1.91-1.82(m, 1H), 1.77(dd, J = 17.4, 10.6 Hz, 1H), 1.67(m, 2H), 1.45(m, 2H). ESIMS m/z = 499.1(M+1).
실시예 172 5-아미노-N-(5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 172
실시예 149에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-(4-니트로-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(64 mg, 0.16 mmol)로부터 출발하여, 화합물 172를 연한 오렌지 고체(13 mg, 3단계에 걸쳐 16%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 9.45(s, 1H), 7.72(s, 1H), 7.60-7.47(m, 3H), 7.29(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.53-6.21(m, 1H), 4.45(td, J = 14.5, 4.0 Hz, 2H), 3.56(t, J = 13.6 Hz, 2H), 3.31-3.14(m, 3H), 2.89(s, 3H). 알킬 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 520(M+1).
실시예 173 5-아미노-N-(5-(6-하이드록시-1,4-다이아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 173
실시예 149에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-(4-니트로-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-6-하이드록시-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(18 mg, 0.46 mmol)로부터 출발하여 173을 무색 고체(78 mg, 3단계에 걸쳐 34%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 11.42(s, 1H), 8.01(s, 1H), 7.60(s, 2H), 7.59-7.48(m, 1H), 7.30(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.37(tt, J = 55.4, 4.2 Hz, 1H), 4.72(s, 1H), 4.55-4.30(m, 2H), 3.65-3.50(m, 1H), 3.10-2.93(m, 4H), 2.73-2.63(m, 2H), 2.45(dd, J = 12.7, 8.8 Hz, 1H). 알킬 NH 및 OH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 500(M+1).
실시예 174 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(2-메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 174
DCM(5 mL) 중의 PyBOP(328 mg, 0.63 mmol) 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(176 mg, 0.50 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. DCM(5 mL) 중의 중간체 33인, (S)-3급-부틸 4-(4-아미노-1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-5-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트(181 mg, 0.45 mmol) 및 DIPEA(0.13 mL, 0.72 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 65 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(40 mL)으로 희석시키고, 물(15 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 (S)-3급-부틸 4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-5-일)-3-메틸피페라진-1-카복실레이트를 황색 고체(150 mg)로서 제공하였다. 상기 고체를 DCM(10 mL)에 재용해시키고, TFA(2 mL)를 첨가한 후 65℃에서 2.5시간 동안 가열하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시킨 후, MeOH 중의 7 N 암모니아(20 mL) 내에서 재-용해시키고, 밀봉된 압력 용기 내에서 바람막이 뒤에서 55℃에서 16시간 동안 가열하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, MeOH에 재용해시키고, DCM 및 MeOH로 세척하고 MeOH/DCM 중의 3 내지 10% 7 N 암모니아로 용리하는 SCX 칼럼에 통과시켜 174를 회백색 고체(60 mg, 2단계에 걸쳐 32%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.03(s, 1H), 7.51-7.41(m, 1H), 7.16(t, J = 8.9 Hz, 2H), 3.20-3.14(m, 1H), 3.08-2.98(m, 5H), 2.64(dd, J = 12.7, 9.4 Hz, 1H), 0.93(d, J = 6.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 420(M+1).
실시예 175 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(2-메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 175
실시예 174에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-(4-아미노-1-(4-메톡시벤질)-1H-피라졸-5-일)피페라진-1-카복실레이트 및 5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 175를 백색 고체(29 mg, 2단계에 걸쳐 15%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.03(s, 1H), 7.50-7.44(m, 1H), 7.16(t, J = 8.9 Hz, 2H), 3.20-3.14(m, 1H), 3.09-2.99(m, 5H), 2.64(dd, J = 12.6, 9.3 Hz, 1H), 0.93(d, J = 6.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 420(M+1).
실시예 176 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(2-에틸-4-메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 176
실시예 110에 대한 절차에 따라 실시예 25로부터의 (S)-5-(2-에틸-4-메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-아민 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 176을 연보라색 고체(53 mg, 31%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.58(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.37-7.27(m, 1H), 7.01(t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.16(s, 2H), 3.76(s, 3H), 3.32(t, J = 11.3 Hz, 1H), 3.22(t, J = 9.3 Hz, 1H), 2.96(t, J = 12.9 Hz, 2H), 2.79(d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.42-2.22(m, 4H), 1.96(t, J = 10.2 Hz, 1H), 1.41-1.33(m, 1H), 1.29-1.15(m, 1H), 0.80(t, J = 7.5 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 462(M+1).
실시예 176 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(2-에틸-4-메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 176
실시예 110에 대한 절차에 따라 실시예 25로부터의 (R)-5-(2-에틸-4-메틸피페라진-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-아민 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 176을 백색 고체(47 mg, 2단계에 걸쳐 28%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.58(s, 1H), 7.87(s, 1H), 7.37-7.25(m, 1H), 7.01(t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.17(s, 2H), 3.76(s, 3H), 3.33(t, J = 11.3 Hz, 1H), 3.22(t, J = 9.2 Hz, 1H), 2.97(t, J = 12.7 Hz, 2H), 2.79(d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.41-2.22(m, 4H), 1.96(t, J = 10.2 Hz, 1H), 1.41-1.33(m, 1H), 1.28-1.13(m, 1H), 0.80(t, J = 7.5 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 462(M+1).
실시예 178 5-아미노-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)-N-(5-(4-하이드록시-4-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 178
실시예 105에 대한 절차에 따라 3급-부틸 2-브로모-4-(5-(4-하이드록시-4-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트로부터 출발하여 178을 회백색 고체(60 mg, 2단계에 걸쳐 25%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.06(d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.59(s, 1H), 7.24-7.19(m, 1H), 7.11(dd, J = 11.4, 8.4 Hz, 1H), 3.75(s, 3H), 3.51-3.48(m, 1H), 3.26-3.17(m, 1H), 3.09-3.01(m, 1H), 2.41(s, 3H), 2.16-2.04(m, 1H), 1.96-1.83(m, 4H), 1.78-1.68(m, 1H), 1.26(s, 3H)(용매 피크와 일치하는 1 양성자). LCMS(ES+) m/z 459(M+1).
실시예 179 5-아미노-N-(5-(6-플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 179
실시예 149에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-6-플루오로-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(366 mg, 0.93 mmol)로부터 출발하여 179를 담황색 고체(40 mg, 3단계에 걸쳐 10%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 10.26(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.66-7.52(m, 3H), 7.34(t, J = 8.9 Hz, 2H), 6.42(t, J = 55.3 Hz, 1H), 4.71(d, J = 47.8 Hz, 1H), 3.61-3.41(m, 2H), 3.42-3.04(m, 4H), 3.05(t, J = 16.5 Hz, 1H), 2.83-2.57(m, 3H). 알킬 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 502(M+1).
실시예 180 (R)-3-아미노-N-(5-(4-아미노아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피콜린아미드 180
실시예 101 또는 112의 절차에 따라 (R)-3-아미노-6-브로모-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)피콜린아미드를 제조하였다. 마이크로파 반응 튜브 내에서, (R)-3-아미노-6-브로모-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)피콜린아미드(284 mg, 0.51 mmol), (2-플루오로페닐)붕산(215 mg, 1.54 mmol), 및 Pd(dppf)2Cl2(37 mg, 0.051 mmol)를 아세토니트릴(4 mL) 중에 용해하였다. 1.0M 칼륨 아세테이트(0.77 mL, 0.77 mmol) 및 1.0 M 나트륨 카보네이트(0.77 mL, 0.77 mmol)를 첨가했다. 혼합물을 마이크로파 하에 120℃에서 30분 동안 조사하였다. 이를 냉각하고 셀라이트를 통해 여과시키고, 메탄올로 세척하였다. 여액을 농축하고, 메틸렌 클로라이드 중의 0 내지 10% 메탄올로 용리하는 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-3-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피콜린아미드(98 mg, 33%)를 수득하였다.
(R)-3-아미노-N-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피콜린아미드(98 mg, 0.17 mmol)를 메탄올(5 mL) 중의 칼륨 카보네이트(144 mg, 1.03 mmol)로 50℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여액을 역상 HPLC로 정제하여 180을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.81(s, 1H), 8.00(td, J = 8.3, 1.8 Hz, 1H), 7.86(s, 1H), 7.74(dd, J = 8.7, 2.2 Hz, 1H), 7.43(dt, J = 7.2, 3.8 Hz, 1H), 7.38-7.20(m, 4H), 7.08(s, 2H), 6.38(tt, J = 55.3, 4.1 Hz, 1H), 4.43(td, J = 14.5, 4.1 Hz, 2H), 3.55(s, 1H), 3.21-3.07(m, 4H), 2.92(dd, J = 19.4, 10.4 Hz, 1H), 1.89-1.69(m, 3H), 1.69-1.37(m, 3H). MS(ESI) m/z: 474.2 [M+H+].
실시예 181 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(3-하이드록시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 181
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 181을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.78(s, 1H), 7.59(s, 1H), 7.51(d, J = 12.3 Hz, 3H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.55(d, J = 4.1 Hz, 1H), 3.68(m, 1H), 3.66(s, 3H), 3.20-3.10(m, 2H), 3.05(dd, J = 13.6, 7.4 Hz, 2H), , 2.07-1.55(m, 6H). ESIMS m/z = 449.1(M+1).
실시예 182 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(3-하이드록시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 182
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 182를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.78(s, 1H), 7.59(s, 1H), 7.49(m, 3H), 7.28(d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.55(d, J = 4.0 Hz, 1H), 3.68(m, 1H) 3.66(s, 3H), 3.23-3.11(m, 2H), 3.05(dd, J = 13.6, 7.4 Hz, 2H), 1.95-1.82(m, 1H), 1.81-1.61(m, 3H), 1.61-1.47(m, 2H). ESIMS m/z = 449.1(M+1).
실시예 183 5-아미노-N-(5-(3,3-다이플루오로-5-(메틸아미노)아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 183
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일(메틸)카바메이트로부터 출발하여, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM, 1% MeOH 중의 7 N 암모니아)한 후, 183을 백색 고체(122 mg, 3단계에 걸쳐 48%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.85(s, 1H), 7.59-7.49(m, 4H), 7.33-7.23(m, 2H), 3.80-3.57(m, 4H), 3.48-3.24(m, 2H), 3.14-3.03(m, 1H), 2.90-2.80(m, 1H), 2.50-2.04(m, 5H), 1.95(d, J = 13.9 Hz, 1H), 1.77-1.65(m, 1H). 알킬 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 498(M+1).
실시예 184 5-아미노-N-(5-((3R,5S)-3-아미노-5-플루오로피페리딘-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 184
HCl/MeOH(10 mL) 중의 3급-부틸(3R,5S)-1-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로피페리딘-3-일카바메이트(200 mg, 0.31 mmol)의 혼합물을 주위 온도에서 20시간 동안 교반시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 수득하였다. 잔사를 MeOH(10 mL)로 희석시키고, 28% 암모니아 용액으로 중화시키고, 농축하여 조 생성물을 제공하였다. 조 생성물을 분취용 HPLC로 정제하여 184를 연한 고체(138 mg, 99%)로서 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, CD3OD) δ(ppm): 7.60(s, 1H), 7.50-7.45(m, 1H), 7.14-7.11(m, 2H), 5.36-5.23(m, 1H), 3.84-3.74(m, 4H), 3.63-3.49(m, 2H), 2.72-2.62(m, 2H), 2.54-5.41(m, 1H), 2.16-2.05(m, 1H); MS(ESI) m/z: 452 [M+H+]。
실시예 185 (R)-5-아미노-N-(5-(4-아미노아제판-1-일)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 185
실시예 107에 대한 절차에 따라 (R)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(148 mg, 0.21 mmol)로부터 출발하여 185를 오렌지 고체(69 mg, 2단계에 걸쳐 65%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 9.0(br s, 1H), 7.79(s, 1H), 7.60-7.48(m, 3H), 7.33-7.25(m, 2H), 4.84(q, J = 9.1 Hz, 2H), 3.15-3.10(m, 4H), 3.04-2.97(m, 1H), 1.88-1.73(m, 3H), 1.65-1.45(m, 3H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 516(M+1).
실시예 186 N-(5-(1,4-다이아제판-1-일)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 186
실시예 145에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-(4-니트로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(197 mg, 0.5 mmol)로부터 출발하여, Et2O 중의 5% MeOH 내에 분쇄하여, 186을 비스-하이드로클로라이드 염 및 오렌지 고체(48 mg, 3단계에 걸쳐 19%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 9.22(br s, 2H), 8.91(s, 1H), 7.60(s, 1H), 7.60-7.52(m, 3H), 7.34-7.24(m, 2H), 5.02(q, J = 9.1 Hz, 2H), 3.43-3.12(m, 8H), 2.02-1.95(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 502(M+1). 알킬 NH는 관찰되지 않았다.
실시예 187 5-아미노-N-(5-(4-아미노-5-하이드록시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 187
실시예 107에 대한 절차에 따라 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-하이드록시아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드로부터 출발하여 187을 베이지색 고체(119 mg, 2단계에 걸쳐 49%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.83(s, 1H), 7.60-7.47(m, 4H), 7.28(t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.64(s, 3H), 3.50-3.05(m, 8H), 2.81(t, J = 8.7 Hz, 1H), 2.00-1.84(m, 2H), 1.78-1.67(m, 1H), 1.65-1.56(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 464(M+1).
실시예 188 5-아미노-N-(5-(3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 188
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 188을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.74(s, 1H), 7.56(s, 1H), 7.52-7.46(m, 2H), 7.31-7.23(m, 2H), 3.67(s, 3H), 3.52(t, J = 13.2 Hz, 2H), 3.16(t, J = 6.0 Hz, 2H), 2.23-2.09(m, 2H), 1.82-1.68(m, 4H). ESIMS m/z = 469.1(M+1)
실시예 189 5-아미노-N-(5-((3S,5S)-3-아미노-5-플루오로피페리딘-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6- 다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 189
HCl/MeOH(10 mL) 중의 3급-부틸(3S,5S)-1-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로피페리딘-3-일카바메이트(208 mg, 0.32 mmol)의 혼합물을 주위 온도에서 20시간 동안 교반시키고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 MeOH(10 mL)로 희석시키고, 28% 암모니아 용액으로 중화시키고, 농축하여 조 생성물을 제공하였다. 조 생성물을 분취용 HPLC로 정제하여 189(130 mg, 90%)를 고체로서 수득하였다. 1H NMR(500 MHz, DMSO) δ(ppm): 8.82(s, 1H), 7.56-7.51(m, 3H), 7.41(s, 1H), 7.30-7.26(m, 2H), 4.80-4.65(m, 1H), 3.64(s, 3H), 3.06-2.98(m, 2H), 2.89-2.84(m, 1H), 2.70-2.66(m, 1H), 2.23-2.18(m, 1H), 1.72(br s, 3H), 1.41-1.32(m, 1H); MS(ESI) m/z: 452 [M+H+].
실시예 190 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(6-하이드록시-6-메틸-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 190
MeOH(5 mL) 중의 중간체 44인, 3급-부틸 6-하이드록시-6-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(70 mg, 0.20 mmol)의 용액에, 탄소상 10% 팔라듐(10 mg)을 첨가하고, 혼합물을 H2(60 psi) 분위기 하에 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6-하이드록시-6-메틸-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 오일로서 제공하였다. DCM(5 mL) 중의 상기 아민의 용액에, DIPEA(0.1 mL, 9.6 mmol), PyBOP(0.16 g, 0.3 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산(78 mg, 0.22 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석시키고, 물(10 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 60% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6-하이드록시-6-메틸-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 고체(122 mg)로서 제공하였다. MeOH(1 mL) 중의 상기 고체(122 mg, 0.18 mmol)에, HCl의 용액(1,4-다이옥산 중의 4 M, 3.2 mL, 12.9 mmol)을 첨가하고, 생성 용액을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 잔사를 MeOH에 용해시키고, SCX 칼럼에 부하하였다. 칼럼을 MeOH로 세척하고 MeOH 중의 7 N 암모니아로 용리하였다. 분취용 HPLC로 정제하여 190을 회백색 고체(40 mg, 3단계에 걸쳐 44%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 9.19(s, 1H), 8.24(s, 1H), 7.59-7.48(m, 3H), 7.33-7.23(m, 2H), 3.69(s, 3H), 3.26-3.02(m, 4H), 2.98-2.73(m, 4H), 1.01(s, 3H). 알킬 NH 및 OH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 464(M+1).
실시예 191 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(6-플루오로-6-메틸-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 191
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6-플루오로-6-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트로부터 출발하여, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM, 1% MeOH 중의 7 N 암모니아)로 정제하여, 191을 베이지색 고체(51 mg, 3단계에 걸쳐 39%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 9.37(s, 1H), 7.62-7.48(m, 4H), 7.34-7.24(m, 2H), 3.68(s, 3H), 3.16(t, J = 6.4 Hz, 4H), 3.03-2.79(m, 4H), 1.21(d, J = 21.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 466(M+1).
실시예 192 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(6-메톡시-6-메틸-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 192
DMF(1 mL) 중의 중간체 44인, 3급-부틸 6-하이드록시-6-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(70 mg, 0.20 mmol)의 냉각된(냉-수욕) 용액에 질소 하에 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중의 60%, 9.5 mg, 0.24 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반시키고, 아이오도메탄(0.04 mL, 0.6 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 추가의 나트륨 하이드라이드(미네랄 오일 중의 60%, 9.5 mg, 0.24 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 30분 동안 교반시킨 후, 아이오도메탄(0.04 mL, 0.6 mmol)을 더 첨가하였다. 5 시간 후, 물(30 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(2 x 5 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 Na2SO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하여 3급-부틸 6-메톡시-6-메틸-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 오일로서 제공하였다. MeOH(4 mL) 중의 상기 오일의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 60℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6-메톡시-6-메틸-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 오일로서 제공하였다. DCM(10 mL) 중의 상기 아민의 용액에 DIPEA(0.1 mL, 9.6 mmol), PyBOP(160 mg, 0.30 mmol) 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(78 mg, 0.22 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(30 mL)으로 희석시키고, 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(75% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6-메톡시-6-메틸-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 베이지색 고체(123 mg)로서 제공하였다. 상기 고체(120 mg, 0.30 mmol)를 MeOH(1 mL) 중의 1,4-다이옥산 내 HCl(4 M, 2.3 mL, 9.1 mmol)로 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 잔사를 MeOH 중에 재-용해시키고, SCX 칼럼에 부하하였다. 칼럼을 MeOH로 세척하고 MeOH 중의 7 N 암모니아로 용리하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM, 1% MeOH 중의 7 N 암모니아)로 정제하였다. 분취용 HPLC로 추가로 정제하여 192를 모노포메이트 염으로서 회백색 고체(19 mg, 네 단계에 걸쳐 20%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 9.38(s, 1H), 8.21(s, 1H), 7.66(s, 1H), 7.60-7.48(m, 3H), 7.33-7.23(m, 2H), 3.67(t, J = 4.9 Hz, 3H), 3.29-2.69(m, 11H), 0.97(s, 3H). 알킬 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 477(M+1).
실시예 193 5-아미노-N-(5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 193
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6,6-다이플루오로-4-(4-니트로-1-((2-(트라이메틸실릴)에톡시)메틸)-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트로부터 출발하여, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM, 1% MeOH 중의 7 N 암모니아) 및 분취용 HPLC로 193을 회백색 고체(86 mg, 3단계에 걸쳐 25%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 11.99(s, 1H), 8.53(s, 1H), 7.85(s, 1H), 7.59-7.47(m, 3H), 7.32-7.24(m, 2H), 3.70(t, J = 13.9 Hz, 2H), 3.22-3.10(m, 4H), 2.96-2.91(m, 2H), 2.80-2.73(s, 1H). LCMS(ES+) m/z 456(M+1).
실시예 194 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(6-메톡시-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 194
MeOH(15 mL) 중의 중간체 47인, 3급-부틸 6-메톡시-4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(114 mg, 0.32 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 70℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 3급-부틸 4-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6-메톡시-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 핑크색 고체(100 mg)로서 제공하였다. DCM(5 mL) 중의 상기 고체의 용액에 DIPEA(0.84 mL, 48 mmol), PyBOP(219 mg, 0.42 mmol) 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(118 mg, 0.33 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 65 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(50 mL)으로 희석시키고, 물(10 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 5% MeOH/DCM)로 정제하여 3급-부틸 4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6-메톡시-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 핑크색 고체(160 mg)로서 제공하였다. 상기 고체(159 mg, 0.24 mmol)를 1,4-다이옥산 중의 HCl(4 M, 3 mL, 12.0 mmol) 및 MeOH(3 mL)에 용해시키고, 밀봉된 압력 용기 내에서 바람막이 뒤에서 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 잔사를 MeOH에 재-용해시키고, SCX 칼럼에 부하하였다. 칼럼을 MeOH로 세척하고 MeOH/DCM 중의 0-10% 7 N 암모니아로 용리하여 194를 연한 갈색 고체(53 mg, 3단계에 걸쳐 36%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 11.35(s, 1H), 8.13(s, 1H), 7.39-7.29(m, 1H), 7.04(t, J = 8.6 Hz, 2H), 6.33(s, 2H), 3.74(s, 3H), 3.41-3.28(m, 4H), 3.36-3.00(m, 6H), 2.88-2.77(m, 1H), 2.69(dd, J = 12.7, 7.6 Hz, 1H). 알킬 NH 는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 464(M+1).
실시예 195 5-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 195
본원에 기재된 절차에 따라 중간체 49인, N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로 195를 갈색 고체(368 mg, 2단계에 걸쳐 69%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.49(s, 1H), 8.13(td, J = 7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.79(s, 1H), 7.39-7.31(m, 1H), 7.33-7.17(m, 1H), 7.17(dd, J = 11.4, 8.3 Hz, 1H), 6.09(s, 2H), 4.50(dtd, J = 48.0, 8.7, 3.8 Hz, 1H), 3.73(s, 3H), 3.36-3.19(m, 5H), 2.34-2.23(m, 1H), 2.14-2.05(m, 1H), 2.01-1.93(m, 1H), 1.78-1.67(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 448(M+1).
실시예 196 5-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 196
DCM(40 mL) 중의 PyBOP(1.82 g, 3.5 mmol) 및 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐-아미노)티아졸-4-카복실산(889 mg, 2.75 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반시키고, DCM(40 mL) 중의 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(808 mg, 2.50 mmol) 및 DIPEA(0.74 mL, 4.25 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(50 mL)으로 희석시키고, 물(10 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 5% MeOH/DCM)로 정제하여 3급-부틸 2-브로모-4-(5-(4-플루오로-5-(3급-부톡시카보닐아미노)아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 연한 갈색 고체(1.57 g)로서 제공하였다. DME(12 mL) 및 물(4 mL) 중의 상기 고체(786 mg, 1.25 mmol), Na2CO3(265 mg, 2.50 mmol) 및 2-플루오로-5-메틸벤젠붕산(250 mg, 1.63 mmol)의 혼합물을 30분 동안 질소를 조심스럽게 버블링하여 탈기하였다. 이후 [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로-팔라듐(II)(102 mg, 0.125 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 추가로 10분 동안 탈기한 후, 마이크로파로 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 물(10 mL)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc(2 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 5% MeOH/DCM)로 정제하여 3급-부틸 4-(5-(4-플루오로-5-(3급-부톡시카보닐아미노)아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-5-일카바메이트를 갈색 고체(600 mg)로서 제공하였다. 상기 고체(591 mg, 0.9 mmol)를 1,4-다이옥산 중의 HCl(4 M, 10 mL, 40.0 mmol) 및 MeOH(10 mL)에 용해시키고, 밀봉된 압력 용기 내에서 바람막이 뒤에서 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 MeOH 중에 재-용해시키고, SCX 칼럼 상에 부하하였다. 칼럼을 MeOH로 세척하고 MeOH/DCM 중의 0-10% 7 N 암모니아로 용리하여 196을 연한 갈색 고체(235 mg, 3단계에 걸쳐 41%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.44(s, 1H), 7.87(dd, J = 7.2, 2.2 Hz, 1H), 7.74(s, 1H), 7.18-7.12(m, 1H), 7.05(dd, J = 11.0, 8.4 Hz, 1H), 6.08(s, 2H), 4.49(dtd, J = 48.0, 8.5, 3.7 Hz, 1H), 3.74(s, 3H), 3.38-3.19(m, 5H), 2.40(s, 3H), 2.31-2.20(m, 1H), 2.15-2.09(m, 1H), 2.01-1.94(m, 1H), 1.74-1.68(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 462(M+1).
실시예 197 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로에틸아미노)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 197
(R)-3급-부틸 4-(5-(4-아미노아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일카바메이트(112 mg, 0.204 mmol) 및 2,2,2-트라이플루오로에틸 트라이플루오로메탄설포네이트(95 mg, 0.409 mmol)를 메틸렌 클로라이드 / DMF(1.5 mL / 1.5 mL) 중에 용해하였다. N,N-다이이소프로필에틸아민(132 mg, 1.02 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하여 DMF를 제거하고, 에틸 아세테이트 중에 재용해시키고, 염수로 세척했다. 수성 층을 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 농축하고, 헵탄 중의 0 내지 100% 에틸 아세테이트로 용리하는 플래시 크로마토그래피로 정제하여 (R)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(4-(2,2,2-트라이플루오로에틸아미노)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(96 mg, 75%)를 수득하고, 이를 다이옥산 중의 4N HCl로 탈보호하고, 역상 HPLC 상에서 정제하여 197을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.65(s, 1H), 7.59-7.43(m, 4H), 7.25(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.64(s, 3H), 3.24-3.01(m, 6H), 2.81(s, 1H), 2.14(d, J = 6.1 Hz, 1H), 1.96-1.74(m, 3H), 1.65-1.48(m, 3H). MS(ESI) m/z: 530.2 [M+H+].
실시예 198 3-아미노-N-(5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피콜린아미드 198
실시예 180의 절차에 따라 화합물 198을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.81(s, 1H), 8.03(dd, J = 11.2, 4.9 Hz, 1H), 7.72(dd, J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 7.64(s, 1H), 7.42(ddd, J = 7.4, 6.1, 1.8 Hz, 1H), 7.36-7.24(m, 3H), 7.07(s, 2H), 3.70(s, 3H), 3.59(t, J = 13.8 Hz, 2H), 3.17(dt, J = 18.1, 9.7 Hz, 4H), 2.89(s, 2H), 2.78(s, 1H). MS(ESI) m/z: 446.2 [M+H+].
실시예 199 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(3-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 199
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 199를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.72(s, 1H), 7.55(s, 1H), 7.55-7.50(m, 1H), 7.48(s, 2H), 7.28(d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.85-4.64(m, 1H), 3.66(s, 3H), 3.50-3.33(m, 2H), 3.18-3.05(m, 2H), 1.96(ddd, J = 23.4, 9.2, 4.8 Hz, 2H), 1.74(ddt, J = 20.0, 14.0, 7.3 Hz, 3H), 1.60 - 1.46(m, 1H). ESIMS m/z = 451.1(M+1)
실시예 200 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(3-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 200
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 200을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.72(s, 1H), 7.55(s, 1H), 7.55-7.50(m, 1H), 7.48(s, 2H), 7.30-7.23(m, 2H), 4.91-4.60(m, 1H), 3.66(s, 3H), 3.50-3.33(m, 2H), 3.17-3.08(m, 2H), 2.01-1.89(m, 2H), 1.89-1.72(m, 2H), 1.67(dd, J = 15.2, 9.1 Hz, 1H), 1.60-1.47(m, 1H). ESIMS m/z = 451.1(M+1)
실시예 201 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(3-하이드록시-3-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 201
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 201을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.85(s, 1H), 7.60(s, 1H), 7.56-7.50(m, 1H), 7.48(s, 2H), 7.26(m, 2H), 4.19(s, 1H), 3.66(s, 3H), 3.09(t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.03(s, 2H), 1.85-1.57(m, 5H), 1.50(dd, J = 14.0, 8.1 Hz, 1H), 1.05(s, 3H). ESIMS m/z = 463.2(M+1)
실시예 202 5-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 202
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 202를 회백색 고체(212 mg, 3단계에 걸쳐 36%)로서 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.41(s, 1H), 7.84(ddd, J = 9.1, 5.8, 3.2 Hz, 1H), 7.78(s, 1H), 7.13(td, J = 9.7, 4.4 Hz, 1H), 7.07-7.00(m, 1H), 6.15(s, 2H), 4.50(dtd, J = 47.9, 8.7, 3.8 Hz, 1H), 3.74(s, 3H), 3.37-3.21(m, 5H), 2.32-2.21(m, 1H), 2.15-1.96(m, 2H), 1.76-1.70(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 466(M+1).
실시예 203 5-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 203
DCM(40 mL) 중의 PyBOP(692 mg, 1.33 mmol) 및 실시예 25로부터의 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(372 mg, 1.05 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반시키고, DCM(40 mL) 중의 중간체 51인, N-(1-(4-아미노-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(354 mg, 0.95 mmol) 및 DIPEA(0.28 mL, 1.62 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 DCM(50 mL)으로 희석시키고, 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 5% MeOH/DCM)로 정제하여 3급-부틸 4-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일카바메이트를 회백색 고체(600 mg, 0.84 mmol)로서 수득하고, 이를 1,4-다이옥산 중의 HCl(4 M, 10 mL, 40.0 mmol) 및 MeOH(10 mL)에 용해시키고, 밀봉된 압력 용기 내에서 바람막이 뒤에서 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 MeOH 중에 재-용해시키고, SCX 칼럼 상에 부하하였다. 칼럼을 MeOH로 세척하고 MeOH/DCM 중의 0-10% 7 N 암모니아로 용리하여 203을 회백색 고체(197 mg, 2단계에 걸쳐 40%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.75(s, 1H), 8.00(s, 1H), 7.37-7.29(m, 1H), 7.09-6.99(m, 2H), 6.31-6.01(m, 3H), 4.56-4.28(m, 3H), 3.39-3.13(m, 5H), 2.32-2.17(m, 1H), 2.14-1.94(m, 2H), 1.77-1.64(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 516(M+1).
실시예 204 (R)-5-아미노-N-(5-(4-(2,2-다이플루오로에틸아미노)아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 204
실시예 197의 절차에 따라 화합물 204를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.66(s, 1H), 7.61-7.40(m, 4H), 7.25(dd, J = 14.5, 5.8 Hz, 2H), 5.89(tt, J = 56.6, 4.3 Hz, 1H), 3.64(s, 3H), 3.22-3.01(m, 4H), 2.91-2.73(m, 3H), 1.97 - 1.75(m, 3H), 1.64 - 1.46(m, 3H). MS(ESI) m/z: 512.2 [M+H+].
실시예 205 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(5-메틸-1,4-다이아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 205
본원에 기재된 절차에 따라 라세미 화합물 205를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 12.03(s, 1H), 7.91(s, 1H), 7.63-7.46(m, 3H), 7.35-7.21(m, 2H), 3.60(s, 3H), 3.22-2.99(m, 5H), 2.85-2.64(m, 3H), 1.52-1.35(m, 1H), 1.31 - 1.11(m, 1H), 0.89(d, J = 6.3 Hz, 3H). MS(ESI) m/z: 448.2 [M+H+].
실시예 206 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(6-플루오로-6-메틸-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 206
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 206을 이의 라세미 혼합물을 SFC 상에서 키랄 분리하여 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.37(s, 1H), 7.62(s, 1H), 7.56-7.52(m, 1H), 7.51(s, 2H), 7.26(dd, J = 14.5, 5.8 Hz, 2H), 3.66(s, 3H), 3.34(s, 1H), 3.12(dd, J = 13.6, 3.1 Hz, 3H), 2.99-2.87(m, 2H), 2.87-2.73(m, 2H), 1.19(d, J = 21.2 Hz, 4H). ESIMS m/z = 466.1(M+1)
실시예 207 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(6-하이드록시-6-메틸-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 207
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 207을 이의 라세미 혼합물을 SFC 상에서 키랄 분리하여 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.20(s, 1H), 7.60(s, 1H), 7.54(dd, J = 8.3, 6.3 Hz, 1H), 7.49(s, 2H), 7.27(m, 2H), 4.30(s, 1H), 3.67(s, 3H), 3.08(m, 5H), 2.89(dt, J = 11.7, 5.7 Hz, 1H), 2.84-2.76(m, 1H), 2.74(s, 2H), 0.99(s, 3H). ESIMS m/z = 464.2(M+1)
실시예 208 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(6-하이드록시-6-메틸-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 208
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 208을 이의 라세미 혼합물을 SFC 상에서 키랄 분리하여 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.20(s, 1H), 7.60(s, 1H), 7.53(m, 1H) 7.50(s, 2H), 7.27(m, 2H), 4.30(s, 1H), 3.67(s, 3H), 3.16-3.00(m, 5H), 2.89(dt, J = 11.8, 5.8 Hz, 1H), 2.83-2.77(m, 1H), 2.74(s, 2H), 0.99(s, 3H). ESIMS m/z = 464.2(M+1)
실시예 209 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(6-플루오로-6-메틸-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 209
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 209를 이의 라세미 혼합물을 SFC 상에서 키랄 분리하여 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.37(s, 1H), 7.62(s, 1H), 7.56-7.52(m, 1H), 7.52(s, 2H), 7.26(dd, J = 14.5, 5.8 Hz, 2H), 3.66(s, 3H), 3.34(s, 1H), 3.11(dd, J = 13.6, 3.1 Hz, 3H), 2.98-2.87(m, 2H), 2.87-2.73(m, 2H), 1.18(d, J = 21.2 Hz, 4H). ESIMS m/z = 466.1(M+1)
실시예 210 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 210
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 210을 이의 라세미 혼합물을 SFC 상에서 키랄 분리하여 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.91(s, 1H), 8.22(s, 1H), 7.68(s, 1H), 7.53(m, 1H), 7.50(s, 2H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.36(m, 1H), 4.42(dd, J = 14.3, 4.0 Hz, 2H), 3.25-3.07(m, 6H), 2.21-2.04(m, 1H), 1.94(ddd, J = 41.1, 22.7, 8.9 Hz, 2H), 1.75-1.53(m, 1H). ESIMS m/z = 516.1(M+1)
실시예 211 5-아미노-N-(5-((4R,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 211
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 211을 이의 라세미 혼합물을 SFC 상에서 키랄 분리하여 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.90(s, 1H), 8.22(s, 1H), 7.68(s, 1H), 7.53(m, 1H), 7.51(s, 2H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.36(m, 1H), 4.42(dd, J = 14.3, 4.0 Hz, 2H), 3.25-3.09(m, 6H), 2.21-2.04(m, 1H), 1.94(ddd, J = 41.1, 22.7, 8.9 Hz, 2H), 1.75-1.55(m, 1H). ESIMS m/z = 516.1(M+1)
실시예 212 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 212
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 212를 이의 라세미 혼합물을 SFC 상에서 키랄 분리하여 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.95(s, 1H), 8.07(d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.46(s, 1H), 7.39(s, 2H), 7.23(d, J = 9.3 Hz, 2H), 4.48(dtd, J = 48.1, 8.3, 3.6 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.15(ddd, J = 13.5, 8.5, 3.3 Hz, 5H), 2.36(s, 3H), 2.22-2.06(m, 1H), 2.06-1.92(m, 1H), 1.91-1.78(m, 1H), 1.64(m, 1H). ESIMS m/z = 462.2(M+1)
실시예 213 5-아미노-N-(5-((4R,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 213
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 213을 이의 라세미 혼합물을 SFC 상에서 키랄 분리하여 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.95(s, 1H), 8.07(d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.45(s, 1H), 7.39(s, 2H), 7.23(d, J = 9.3 Hz, 2H), 4.51(dtd, J = 48.1, 8.3, 3.6 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.15(ddd, J = 13.5, 8.5, 3.3 Hz, 5H), 2.36(s, 3H), 2.22-2.06(m, 1H), 2.06-1.92(m, 1H), 1.91-1.78(m, 1H), 1.64(m, 1H). ESIMS m/z = 462.2(M+1)
실시예 214 3-아미노-N-(5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피라진-2-카복사마이드 214
실시예 180의 절차에 따라 화합물 214를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.93(s, 1H), 8.67(s, 1H), 8.12(t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.73(s, 2H), 7.58(s, 1H), 7.52-7.40(m, 1H), 7.35(dd, J = 13.3, 5.6 Hz, 2H), 3.70(s, 3H), 3.58(t, J = 13.8 Hz, 3H), 2.89(s, 2H), 2.78(s, 1H). MS(ESI) m/z: 447.2 [M+H+].
실시예 215 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(5-(다이메틸아미노)-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 215
실시예 101에 대한 절차에 따라 6,6-다이플루오로-N,N-다이메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-아민으로부터 출발하여, 분취용 HPLC로 정제하여, 215를 백색 고체(119 mg, 12%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.72(s, 1H), 7.58-7.48(m, 4H), 7.31-7.21(m, 2H), 3.75-3.50(m, 3H), 3.53-3.22(m, 2H), 3.16-3.06(m, 1H), 2.89-2.81(m, 1H), 2.37-2.19(m, 2H), 2.10-2.05(m, 6H), 1.89-1.74(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 512(M+1).
실시예 216 5-아미노-N-(5-(5-아미노-3-메톡시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 216
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여, 분취용 HPLC로 정제하여 216의 모노포메이트 염을 백색 고체(480 mg, 3단계에 걸쳐 39%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.92 및 8.79(2 br s, 1H), 8.43(s, 1H), 7.61-7.46(m, 4H), 7.36-7.25(m, 2H), 3.67 및 3.66(2 s, 3H), 3.54-2.99(m, 9H), 2.26-2.18(m, 1H), 2.05-1.91(m, 1H), 1.86-1.69(m, 2H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 478(M+1).
실시예 217 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-메톡시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 217
DCM(20 mL) 중의 중간체 54인, N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(150 mg, 0.45 mmol)의 용액에 DIPEA(1.0 mL), PyBOP(580 mg, 1.12 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산(159 mg, 0.45 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(100 mL)으로 희석시키고, 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(70 내지 80% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-메톡시-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 회백색 고체(260 mg, 0.39 mmol)로서 수득하고, 이를 MeOH(5 mL) 중의 1,4-다이옥산 중의 HCl(4 M, 4.8 mL, 19.3 mmol)로 실온에서 3일 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 생성 고체를 MeOH/물(10 mL/10 mL) 중에 용해시키고, 이에 K2CO3(267 mg, 19.3 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 65℃에서 3시간 동안 가열하였다. MeOH를 감압 하에 제거하고, 수성 잔사를 물(5 mL)로 희석시키고, DCM 중의 5% MeOH(2 x 75 mL)로 추출하였다. 유기층들을 조합하고, MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 217을 베이지색 고체(144 mg, 3단계에 걸쳐 67%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.62(s, 1H), 7.84(s, 1H), 7.38-7.28(m, 1H), 7.02(t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.15(s, 2H), 3.72(s, 3H), 3.37(s, 3H), 3.36-3.25(m, 2H), 3.22-3.08(m, 3H), 3.07-2.99(m, 1H), 2.17-2.10(m, 1H), 2.02-1.93(m, 1H), 1.88-1.65(m, 2H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 478(M+1).
실시예 218 5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 218
실시예 145에 대한 절차에 따라 중간체 19인, 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 218을 황색 고체(560 mg, 2단계에 걸쳐 60%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.54(s, 1H), 8.18(td, J = 3.9, 1.8 Hz, 1H), 7.74(s, 1H), 7.39-7.33(m, 1H), 7.33-7.17(m, 1H), 7.17(ddd, J = 11.4, 8.2, 1.2 Hz, 1H), 6.09(s, 2H), 3.76(s, 3H), 3.73-3.61(m, 1H), 3.53-3.36(m, 3H), 3.26(td, J = 11.6, 4.9 Hz, 1H), 2.41-2.25(m, 2H), 2.02-1.91(m, 1H), 1.88-1.78(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 466(M+1).
실시예 219 5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 219
실시예 145에 대한 절차에 따라 중간체 19인, 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 219를 황색 고체(665 mg, 2단계에 걸쳐 70%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.52(s, 1H), 7.95(d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.72(s, 1H), 7.14(s, 1H), 7.04(dd, J = 11.1, 8.5 Hz, 1H), 6.09(s, 2H), 3.86-3.51(m, 4H), 3.57-3.37(m, 3H), 3.33-3.23(m, 1H), 2.53-2.15(m, 5H), 2.02-1.90(m, 1H), 1.87-1.74(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 480(M+1).
실시예 220 5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 220
실시예 145에 대한 절차에 따라 중간체 19인, 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 220을 황색 고체(570 mg, 2단계에 걸쳐 59%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.62(s, 1H), 7.95-7.88(m, 1H), 7.85(s, 1H), 7.13(td, J = 9.7, 4.4 Hz, 1H), 7.07-6.98(m, 1H), 6.15(s, 2H), 3.81-3.58(m, 4H), 3.56-3.36(m, 3H), 3.30-3.20(m, 1H), 2.51-2.39(m, 1H), 2.38-2.21(m, 1H), 2.05-1.94(m, 1H), 1.91-1.79(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 484(M+1).
실시예 221 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 221
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 221을 이의 라세미 혼합물을 SFC 상에서 키랄 분리하여 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.08(s, 1H), 8.15(s, 1H), 7.45(d, J = 11.0 Hz, 2H), 7.43(s, 2H), 7.27(t, J = 8.3 Hz, 1H), 4.45(dtd, J = 48.2, 8.4, 3.6 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.15(ddd, J = 25.1, 17.1, 8.5 Hz, 5H), 2.20-2.03(m, 1H), 2.02-1.90(m, 1H), 1.88-1.77(m, 1H), 1.71-1.53(m, 1H). ESIMS m/z = 466.1(M+1)
실시예 222 5-아미노-N-(5-((4R,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 222
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 222를 이의 라세미 혼합물을 SFC 상에서 키랄 분리하여 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.08(s, 1H), 8.15(s, 1H), 7.46(d, J = 11.0 Hz, 2H), 7.43(s, 2H), 7.28(t, J = 8.3 Hz, 1H), 4.45(dtd, J = 48.2, 8.4, 3.6 Hz, 1H), 3.66(s, 3H), 3.15(ddd, J = 25.1, 17.1, 8.5 Hz, 5H), 2.20-2.03(m, 1H), 2.02-1.90(m, 1H), 1.89-1.78(m, 1H), 1.71-1.53(m, 1H). ESIMS m/z = 466.1(M+1)
실시예 223 5-아미노-N-(5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 223
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 223을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.12(s, 1H), 8.54(d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.08(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.92(td, J = 7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.56(s, 2H), 7.47(s, 1H), 7.38(dd, J = 7.0, 5.3 Hz, 1H), 3.68(s, 3H), 3.59(t, J = 13.9 Hz, 2H), 3.24-3.16(m, 2H), 2.97-2.86(m, 2H). MS(ESI) m/z: 435.1 [M+H+].
실시예 224 5-아미노-N-(5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(3-플루오로피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 224
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 224를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.37(s, 1H), 8.44(d, J = 4.6 Hz, 1H), 7.86(dd, J = 11.1, 8.5 Hz, 1H), 7.68(d, J = 2.8 Hz, 3H), 7.48(dt, J = 8.4, 4.2 Hz, 1H), 3.68(s, 3H), 3.57(t, J = 13.4 Hz, 2H), 3.27-3.18(m, 3H), 3.07-2.89(m, 3H), 2.07(s, 2H). MS(ESI) m/z: 453.1 [M+H+].
실시예 225 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(5-메틸-1,4-다이아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 225
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 225를 이의 라세미 혼합물 205를 SFC 상에서 키랄 분리하여 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 11.81(s, 1H), 8.20(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.62-7.46(m, 3H), 7.35-7.21(m, 2H), 3.60(s, 3H), 3.21-3.01(m, 5H), 2.90-2.69(m, 3H), 1.48(d, J = 11.6 Hz, 1H), 1.35-1.17(m, 1H), 0.92(d, J = 6.3 Hz, 3H). MS(ESI) m/z: 448.1 [M+H+].
실시예 226 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(5-메틸-1,4-다이아제판-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 226
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 226을 이의 라세미 혼합물 205를 SFC 상에서 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체로서 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 11.83(s, 1H), 8.23(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.61-7.47(m, 3H), 7.33-7.23(m, 2H), 3.60(s, 3H), 3.26-2.98(m, 6H), 2.84-2.67(m, 3H), 1.48(d, J = 11.9 Hz, 1H), 1.32-1.12(m, 1H), 0.92(d, J = 6.3 Hz, 3H). MS(ESI) m/z: 448.1 [M+H+].
실시예 227 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(3-하이드록시-3-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 227
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 227을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.85(s, 1H), 7.61(s, 1H), 7.56-7.50(m, 1H), 7.48(s, 2H), 7.26(m, 2H), 4.19(s, 1H), 3.67(s, 3H), 3.09(t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.03(s, 2H), 1.85-1.58(m, 5H), 1.50(dd, J = 14.0, 8.1 Hz, 1H), 1.05(s, 3H). ESIMS m/z = 463.2(M+1)
실시예 228 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(3-하이드록시-3-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 228
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 228을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.85(s, 1H), 7.61(s, 1H), 7.56-7.50(m, 1H), 7.48(s, 2H), 7.26(m, 2H), 4.19(s, 1H), 3.67(s, 3H), 3.09(t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.03(s, 2H), 1.85-1.57(m, 5H), 1.50(dd, J = 14.0, 8.1 Hz, 1H), 1.05(s, 3H). ESIMS m/z = 463.2(M+1)
실시예 229 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 229
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 229를 이의 라세미 혼합물을 SFC 상에서 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체로서 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.93(s, 1H), 8.29(m, 1H), 7.48(s, 1H), 7.43(m, 1H), 7.41(s, 2H), 7.33(d, J = 7.9 Hz, 2H), 4.48(dtd, J = 47.9, 8.5, 3.5 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.23-3.10(m, 5H), 2.14(ddd, J = 19.7, 8.6, 3.1 Hz, 1H), 1.98(ddd, J = 18.3, 9.4, 4.9 Hz, 1H), 1.86(dd, J = 18.4, 13.0 Hz, 1H), 1.63(dtd, J = 14.3, 9.5, 4.6 Hz, 1H). ESIMS m/z = 448.2(M+1)
실시예 230 5-아미노-N-(5-((4R,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 230
본원에 기재된 절차에 따라 화합물 230을 이의 라세미 혼합물을 SFC 상에서 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체로서 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.94(s, 1H), 8.29(m, 1H), 7.47(s, 1H), 7.43(m, 1H), 7.41(s, 2H), 7.34(d, J = 7.9 Hz, 2H), 4.48(dtd, J = 47.9, 8.5, 3.5 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.23-3.10(m, 5H), 2.14(ddd, J = 19.7, 8.6, 3.1 Hz, 1H), 1.98(ddd, J = 18.3, 9.4, 4.9 Hz, 1H), 1.86(dd, J = 18.4, 13.0 Hz, 1H), 1.65(dtd, J = 14.3, 9.5, 4.6 Hz, 1H). ESIMS m/z = 448.2(M+1)
실시예 231 3-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피콜린아미드 231
본원에 기재된 절차에 따라 라세미 화합물 231을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.73(s, 1H), 8.01(dd, J = 11.3, 4.8 Hz, 1H), 7.73(dd, J = 8.7, 2.1 Hz, 1H), 7.67(s, 1H), 7.43(ddd, J = 7.2, 6.2, 1.7 Hz, 1H), 7.37-7.24(m, 3H), 7.06(s, 2H), 4.40(dtd, J = 48.0, 8.2, 3.6 Hz, 1H), 3.67(s, 3H), 3.28-3.00(m, 5H), 2.21-2.04(m, 1H), 2.04-1.89(m, 1H), 1.83(dd, J = 9.3, 5.6 Hz, 1H), 1.76-1.54(m, 3H). MS(ESI) m/z: 442.2 [M+H+].
실시예 232 3-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피라진-2-카복사마이드 232
본원에 기재된 절차에 따라 라세미 화합물 232를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.76(s, 1H), 8.68(d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.12(td, J = 8.2, 1.8 Hz, 1H), 7.73(s, 2H), 7.57(s, 1H), 7.46(dt, J = 7.2, 3.7 Hz, 1H), 7.41-7.27(m, 2H), 4.39(dtd, J = 48.0, 8.2, 3.6 Hz, 1H), 3.66(s, 3H), 3.26-2.97(m, 5H), 2.19-1.87(m, 2H), 1.87-1.74(m, 1H), 1.69-1.51(m, 3H). MS(ESI) m/z: 443.2 [M+H+].
실시예 233 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(3-메틸피페라진-1-일)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 233
단계 A. 3급-부틸(±)-2-메틸-4-(4-니트로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5- 일)피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00368
EtOH(6 mL) 중의 중간체 39인, 5-브로모-4-니트로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸(550 mg, 2.01 mmol), (±)3급-부틸 2-메틸피페라진-1-카복실레이트(403 mg, 2.01 mmol), DIPEA(2 mL)의 용액을 130℃에서 2 시간 동안 마이크로파 오븐 내에서 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 PE:EtOAc(1:1)를ㅋ 용리 용매로서 사용하는 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸(±)-2-메틸-4-(4-니트로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)피페라진-1-카복실레이트를 황색 고체(377 mg, 48%)로서 수득하였다. MS(ESI) m/z: 394 [M+H+].
단계 B. 3급-부틸(±)-4-(4-아미노-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-2-메틸- 피페라진-1-카복실레이트
Figure pct00369
MeOH(15 mL) 및 H2O(3 mL) 중의 (±)3급-부틸 2-메틸-4-(4-니트로-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)피페라진-1-카복실레이트(370 mg, 0.94 mmol)의 용액에 아연(362 mg, 5.6 mmol) 및 NH4Cl(400 mg, 7.5 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 4 시간 동안 교반시키고, 셀라이트를 통해 여과시키고, 감압 하에 증발시켜서 3급-부틸(±)-4-(4-아미노-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트를 황색 고체(300 mg, 88%)로서 수득하였다. MS(ESI) m/z: 364 [M+H+].
단계 C. 3급-부틸(±)-4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸- 4-카복사미도)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트
DMF(15 mL) 중의 3급-부틸(±)-4-(4-아미노-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)- 2-메틸피페라진-1-카복실레이트(300 mg, 0.83 mmol), 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(294 mg, 0.83 mmol), HATU(410 mg, 1.08 mmol)의 용액에 TEA(2 mL)를 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 20시간 동안 교반시키고, 물(100 mL)에 붓고, EtOAc(40 mL × 3)로 추출하였다. 합친 유기층을 물(50 mL × 2) 및 염수(30 mL × 2)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 3급-부틸(±)-4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트를 백색 고체(190 mg, 33%)로서 수득하였다. MS(ESI) m/z: 702 [M+H+].
단계 D. 3급-부틸(±)-4-(4-(5-(3급-부톡시- 카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H- 피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트(190 mg)의 분취용 HPLC에 의한 키랄 분리로 각각 약 80 mg의 (R) 거울상 이성질체 및 (S) 거울상 이성질체를 수득하였다.
단계 E. HCl/MeOH(10 mL) 중의 3급-부틸 (R)-4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트(82 mg, 0.12 mmol)의 혼합물을 주위 온도에서 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔사를 제공하였다. 잔사를 MeOH(30 mL)로 희석시키고, 28% 암모니아 용액으로 중화시키고, 농축하고, 분취용 HPLC로 정제하여 233을 백색 고체(32 mg, 56%)로서 수득하였다. 1H-NMR(500 MHz, CD3OD) δ(ppm): 7.69(s, 1H), 7.51-7.45(m, 1H), 7.17-7.12(m, 2H), 4.84-4.78(m, 2H), 3.22.-3.17(m, 1H), 3.05-2.86(m, 6H), 1.08(d, J=6 Hz, 3H); MS(ESI) m/z: 502 [M+H+].
실시예 234 5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 234
실시예 145에 대한 절차에 따라 중간체 56인, 3급-부틸 1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트(1.33 g, 3.13 mmol)로부터 출발하여 234을 담황색 고체(300 mg, 3단계에 걸쳐 36%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.95(s, 1H), 7.67(s, 1H), 7.59-7.48(m, 3H), 7.29(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.38(tt, J = 55.2, 4.2 Hz, 1H), 4.44(td, J = 14.4, 4.2 Hz, 2H), 3.75-3.58(m, 1H), 3.50-3.05(m, 6H), 2.29-2.06(m, 2H), 1.92-1.80(m, 1H), 1.77-1.63(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 534(M+1).
실시예 235 5-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)피리미딘-4-카복사마이드 235
실시예 237의 절차에 따라 화합물 235를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.78(s, 1H), 8.61(s, 1H), 8.13-8.00(m, 1H), 7.67(s, 1H), 7.53-7.39(m, 1H), 7.35-7.23(m, 2H), 7.00(s, 2H), 4.51-4.29(m, 1H), 3.29-2.98(m, 5H), 2.23-2.04(m, 1H), 2.04-1.87(m, 1H), 1.87-1.72(m, 1H), 1.72-1.51(m, 1H). MS(ESI) m/z: 447.1 [M+H+].
실시예 236 5-아미노-N-(5-(6,6-다이플루오로-1,4-다이아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)피리미딘-4-카복사마이드 236
실시예 237에 제공된 절차에 따라 화합물 236을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.95(s, 1H), 8.61(s, 1H), 8.08-7.94(m, 2H), 7.66(s, 1H), 7.55-7.40(m, 1H), 7.35-7.21(m, 2H), 7.00(s, 2H), 3.58-3.44(m, 2H), 3.23-3.10(m, 4H), 2.96 - 2.81(m, 2H). MS(ESI) m/z: 447.1 [M+H+].
실시예 237 5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)피리미딘-4-카복사마이드 237
나트륨 에톡사이드(에탄올 중 21 질량%; 8.69 mL, 23.268 mmol)를 냉욕에 에탄올(100 mL) 중의 2-플루오로벤즈아미딘(2.71 g, 15.512 mmol)의 냉각된 혼합물을 첨가하였다. 생성 혼합물을 실온으로 가온시키고, rt(실온)에서 질소 하에 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 에탄올(20ml) 중의 (E)-2,3-다이브로모-4-옥소-부트-2-에노산(2.00 g, 7.7561 mmol)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 50℃에서 3시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응을 진공에서 농축시켰다. 물 및 1M NaOH(~50ml)를 첨가하고, 수성 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 수성 상을 1N HCl(약 30 ml)로 pH4로 산성화한 후, EtOAc로 3회 추출하였다. 합친 유기 추출물을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축시켜 5-브로모-2-(2-플루오로페닐)피리미딘-4-카복실산을 770mg 수득하였다.
CuSO4(5H2O와 함께, 65mg)를 5-브로모-2-(2-플루오로페닐)피리미딘-4-카복실산(770mg, 2.59 mmol) 및 28% 수성 암모늄 하이드록사이드(12 ml)의 혼합물에 첨가하였다. 반응을 마이크로파 반응기 내에서 110℃에서 30분 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시키고, 진공에서 농축시켰다. 잔사를 1N HCl(20 mL)로 희석시키고, EtOAc로 3회 추출하였다. 합친 유기 추출물을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축하여 5-아미노-2-(2-플루오로페닐)피리미딘-4-카복실산(320 mg, 53%)을 수득하였다.
1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-아민(99 mg, 0.29 mmol), 5-아미노-2-(2-플루오로페닐)피리미딘-4-카복실산(87 mg, 0.37 mmol), PyBop(304 mg, 0.57 mmol), 및 다이이소프로필에틸아민(222 mg, 1.72 mmol)을 메틸렌 클로라이드(10 mL)에 용해시키고, 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, 헵탄 중의 0 내지 100% 에틸 아세테이트로 용리하는 플래시 크로마토그래피로 정제하여 3급-부틸 1-(4-(5-아미노-2-(2-플루오로페닐)피리미딘-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트(157 mg, 97%)를 수득하였다.
3급-부틸 1-(4-(5-아미노-2-(2-플루오로페닐)피리미딘-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트(157 mg)를 다이옥산 중의 4N HCl(6 mL)로 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축 건조시키고, 포화 수성 나트륨 바이카보네이트로 염기성화하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기상을 나트륨 설페이트 상에서 건조하고, 여과하고, 농축했다. 조 생성물을 역상 HPLC 상에서 정제하여 237을 수득하였다. MS(ESI) m/z: 461.1 [M+H+].
실시예 241 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페리딘-1-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 241
실시예 101의 절차에 따라 실시예 25로부터의 거울상 이성질체로서 순수한 1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페리딘-1-일)-1H-피라졸-4-아민 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 화합물 241을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.80(s, 1H), 7.62-7.47(m, 1H), 7.45(s, 1H), 7.32-7.14(m, 2H), 3.65(s, 3H), 3.23(dd, J = 11.5, 3.8 Hz, 1H), 3.15-2.91(m, 3H), 2.71-2.55(m, 1H), 1.95(dd, J = 12.8, 3.3 Hz, 1H), 1.79(d, J = 13.2 Hz, 1H), 1.70-1.51(m, 1H), 1.39(ddd, J = 24.5, 12.2, 4.1 Hz, 1H). MS(ESI) m/z: 487.3 [M+H+].
실시예 242 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로-펜일)-티아졸-4-카복실산 [1-메틸-5-(3-트라이플루오로메틸-피페리딘-1-일)-1H-피라졸-4-일]-아미드 242
실시예 101의 절차에 따라 실시예 25로부터의 거울상 이성질체로서 순수한 1-메틸-5-(3-(트라이플루오로메틸)피페리딘-1-일)-1H-피라졸-4-아민 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 화합물 242를 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.80(s, 1H), 7.62-7.47(m, 1H), 7.45(s, 1H), 7.32-7.14(m, 2H), 3.65(s, 3H), 3.23(dd, J = 11.5, 3.8 Hz, 1H), 3.15-2.91(m, 3H), 2.71-2.55(m, 1H), 1.95(dd, J = 12.8, 3.3 Hz, 1H), 1.79(d, J = 13.2 Hz, 1H), 1.70-1.51(m, 1H), 1.39(ddd, J = 24.5, 12.2, 4.1 Hz, 1H). MS(ESI) m/z: 487.3 [M+H+].
실시예 243 3-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피라진-2-카복사마이드 243
모 라세미 화합물 232를 SFC 키랄 분리하여 키랄 부분입체이성질체 243을 피크 2로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.76(s, 1H), 8.68(d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.22(s, 1H), 8.13(td, J = 8.2, 1.9 Hz, 1H), 7.71(s, 2H), 7.55(s, 1H), 7.50-7.40(m, 1H), 7.40-7.24(m, 2H), 4.58-4.35(m, 1H), 3.67(s, 3H), 3.28-3.02(m, 5H), 2.23-2.05(m, 1H), 2.05-1.92(m, 1H), 1.92-1.77(m, 1H), 1.71-1.57(m, 1H). MS(ESI) m/z: 443.1 [M+H+].
실시예 244 3-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피라진-2-카복사마이드 244
모 라세미 화합물 232를 SFC 키랄 분리하여 키랄 부분입체이성질체 244를 피크 1로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.75(s, 1H), 8.68(d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.12(td, J = 8.1, 1.9 Hz, 1H), 7.72(s, 2H), 7.56(s, 1H), 7.52-7.40(m, 1H), 7.40-7.27(m, 2H), 4.53-4.28(m, 2H), 3.67(s, 3H), 3.23-2.97(m, 5H), 2.19v2.03(m, 1H), 2.03-1.90(m, 1H), 1.90-1.74(m, 1H), 1.67-1.52(m, 1H). MS(ESI) m/z: 443.1 [M+H+].
실시예 245 3-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피콜린아미드 245
모 라세미 화합물 231을 SFC 키랄 분리하여 키랄 부분입체이성질체 245를 피크 2로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.72(s, 1H), 8.01(td, J = 8.0, 1.8 Hz, 1H), 7.73(dd, J = 8.7, 2.2 Hz, 1H), 7.67(s, 1H), 7.48-7.37(m, 1H), 7.37-7.21(m, 3H), 7.05(s, 2H), 4.39(dtd, J = 48.0, 8.2, 3.7 Hz, 1H), 3.67(s, 3H), 3.24-2.98(m, 5H), 2.19-2.04(m, 1H), 1.97(dtd, J = 19.7, 9.8, 4.8 Hz, 1H), 1.89-1.77(m, 1H), 1.73-1.53(m, 2H). MS(ESI) m/z: 442.1 [M+H+].
실시예 246 3-아미노-N-(5-(4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피콜린아미드 246
모 라세미 화합물 231을 SFC 키랄 분리하여 키랄 부분입체이성질체 246을 피크 1로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.72(s, 1H), 8.01(td, J = 8.0, 1.8 Hz, 1H), 7.73(dd, J = 8.7, 2.2 Hz, 1H), 7.67(s, 1H), 7.47-7.37(m, 1H), 7.38-7.22(m, 3H), 7.05(s, 2H), 4.39(dtd, J = 48.0, 8.2, 3.7 Hz, 1H), 3.67(s, 3H), 3.25-2.97(m, 5H), 2.21-2.03(m, 1H), 2.03-1.88(m, 1H), 1.88-1.75(m, 1H), 1.75-1.52(m, 2H). MS(ESI) m/z: 442.1 [M+H+].
실시예 247 (S)-3-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피라진-2-카복사마이드 247
모 라세미 화합물 293을 SFC 키랄 분리하여 키랄 부분입체이성질체 247을 피크 2로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.78(s, 1H), 8.68(d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.15(dd, J = 11.3, 4.9 Hz, 1H), 7.73(s, 2H), 7.54(s, 1H), 7.51-7.41(m, 1H), 7.35(dd, J = 16.1, 7.7 Hz, 2H), 3.79-3.59(m, 4H), 3.53-3.37(m, 2H), 3.19 -3.10(m, 1H), 2.37-2.15(m, 2H), 1.98-1.67(m, 2H). MS(ESI) m/z: 461.1 [M+H+].
실시예 248 (R)-3-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피라진-2-카복사마이드 248
모 라세미 화합물 293을 SFC 키랄 분리하여 키랄 부분입체이성질체 248을 피크 1로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.76(s, 1H), 8.68(d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.17-8.04(m, 1H), 7.73(s, 2H), 7.59(s, 1H), 7.54-7.41(m, 1H), 7.41-7.25(m, 2H), 3.77-3.55(m, 4H), 3.50-3.34(m, 1H), 3.21-3.04(m, 2H), 2.27- 2.03(m, 2H), 1.92-1.64(m, 3H). MS(ESI) m/z: 461.1 [M+H+].
실시예 249 3-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피콜린아미드 249
모 라세미 화합물 292를 SFC 키랄 분리하여 키랄 부분입체이성질체 249를 피크 2로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.71(s, 1H), 8.07-7.96(m, 1H), 7.71(dd, J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 7.66(s, 1H), 7.48-7.38(m, 1H), 7.38-7.23(m, 3H), 7.06(s, 2H), 3.78-3.58(m, 4H), 3.50-3.33(m, 1H), 3.19-3.02(m, 2H), 2.24-1.97(m, 2H), 1.88-1.78(m, 1H), 1.78-1.63(m, 1H), 1.63-1.42(m, 1H). MS(ESI) m/z: 460.1 [M+H+].
실시예 250 (R)-3-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피콜린아미드 250
모 라세미 화합물 292를 SFC 키랄 분리하여 키랄 부분입체이성질체 250을 피크 1로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.71(s, 1H), 8.06-7.96(m, 1H), 7.71(dd, J = 8.7, 2.3 Hz, 1H), 7.66(s, 1H), 7.48-7.37(m, 1H), 7.37-7.25(m, 3H), 7.06(s, 2H), 3.76-3.59(m, 4H), 3.51-3.33(m, 1H), 3.18-3.04(m, 2H), 2.25-2.01(m, 2H), 1.91-1.77(m, 1H), 1.77-1.64(m, 1H), 1.64-1.43(m, 2H). MS(ESI) m/z: 460.1 [M+H+].
실시예 252 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로-펜일)-티아졸-4-카복실산 [5-(5-아미노-3-메톡시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일]-아미드 252
실시예 145에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6-메톡시-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(더 극성 쌍의 부분입체이성질체)로부터 출발하여, 분취용 HPLC로 정제한 후에, 252를 모노포메이트 염으로서 담황색 고체(116 mg, 3단계에 걸쳐 53%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.83(br s, 1H), 8.43(s, 1H), 7.60-7.45(m, 4H), 7.35-7.20(m, 2H), 3.68(s, 3H), 3.30-3.15(m, 5H), 3.10-2.85(m, 5H), 2.15-1.65(m, 4H), 1.02(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 253 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로-펜일)-티아졸-4-카복실산 [5-(5-아미노-3-하이드록시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일]-아미드 253
실시예 145에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6-하이드록시-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(더 극성 쌍의 부분입체이성질체)로부터 출발하여, 분취용 HPLC로 정제한 후에, 253을 모노포메이트 염으로서 담황색 고체(37 mg, 3단계에 걸쳐 19%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.70(br s, 1H), 8.44(s, 1H), 7.58-7.45(m, 4H), 7.35-7.20(m, 2H), 3.70(s, 3H), 3.60-2.80(m, 8H), 2.05-1.60(m, 4H), 1.14(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 478(M+1)
실시예 254 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로-펜일)-티아졸-4-카복실산 [5-(5-아미노-3-메톡시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일]-아미드 254
실시예 145에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6-메톡시-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(덜 극성 쌍의 부분입체이성질체)로부터 출발하여, 분취용 HPLC로 정제한 후에, 254를 모노포메이트 염 담황색 고체(78 mg, 34%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.84(s, 1H), 8.44(s, 1H), 7.63(s, 1H), 7.60-7.45(m, 3H), 7.35-7.20(m, 2H), 3.67(s, 3H), 3.60-3.15(m, 5H), 3.15-2.90(m, 5H), 2.15-1.55(m, 4H), 1.01(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 255 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로-펜일)-티아졸-4-카복실산 [5-(5-아미노-3-하이드록시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일]-아미드 255
실시예 145에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6-하이드록시-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트(덜 극성 쌍의 부분입체이성질체)로부터 출발하여, 분취용 HPLC로 정제한 후에, 255를 모노포메이트 염으로서 담황색 고체(39 mg, 3단계에 걸쳐 18%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.88(s, 1H), 8.42(s, 1H), 7.60-7.45(m, 4H), 7.35-7.20(m, 2H), 3.68(s, 3H), 3.67-3.55(m, 2H), 3.30-2.80(m, 6H), 2.05-1.60(m, 4H), 1.06(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 478(M+1)
실시예 256 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로-펜일)-티아졸-4-카복실산 [5-(5-아미노-3-플루오로-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일]-아미드 256
실시예 145에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6-플루오로-6-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 256을 연한 갈색 고체(110 mg, 3단계에 걸쳐 27%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.64-8.56(m, 1H), 7.89 및 7.80(2s, 1H), 7.40-7.26(m, 1H), 7.06-6.99(m, 2H), 6.22(br s, 2H), 3.77 및 3.64(2s, 3H), 3.67-2.99(m, 5H), 2.45-2.05(m, 1H), 2.05-1.60(m, 5H), 1.45-1.25(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 480(M+1)
실시예 257 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로-펜일)-티아졸-4-카복실산 [5-(3-플루오로-5-하이드록시-아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일]-아미드 257
실시예 145에 대한 절차에 따라 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-(트라이플루오로메틸)피페리딘으로부터 출발하여, 분취용 HPLC로 정제한 후에, 257을 베이지색 고체(222 mg, 3단계에 걸쳐 41%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 9.08 및 8.66(2s, 1H), 7.93 및 7.83(s, 1H), 7.33(ddd, J = 8.6, 5.9, 2.7 Hz, 1H), 7.07-6.99(m, 2H), 6.22 및 6.16(2s, 2H), 4.96-4.73(m, 1H), 4.45 및 4.12(2s, 1H), 3.76 및 3.74(2s, 3H), 3.60-3.17(m, 4H), 2.44-1.90(m, 4H). OH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 467(M+1)
실시예 258 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로-펜일)-티아졸-4-카복실산 [1-메틸-5-(3-트라이플루오로메틸-피페리딘-1-일)-1H-피라졸-4-일]-아미드 258
실시예 101에 대한 절차에 따라 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-(트라이플루오로메틸)피페리딘으로부터 출발하여, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(20 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여, 258을 회백색 포움(415 mg, 3단계에 걸쳐 48%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.52(s, 1H), 7.77(s, 1H), 7.37-7.26(m, 1H), 7.07-6.97(m, 2H), 6.13(s, 2H), 3.73(s, 3H), 3.32(dd, J = 11.5, 3.8 Hz, 1H), 3.17-3.04(m, 3H), 2.54-2.40(m, 1H), 2.10-2.04(m, 1H), 1.94-1.84(m, 1H), 1.84-1.43(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 487(M+1)
실시예 261 (S)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 261
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 261을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.92(s, 1H), 8.54(d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.12(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.93(t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.53(d, J = 14.5 Hz, 3H), 7.42-7.35(m, 1H), 3.68(s, 3H), 3.50-3.37(m, 2H), 3.20-3.09(m, 2H), 2.36-2.16(m, 3H), 1.90(d, J = 18.9 Hz, 1H), 1.83-1.68(m, 1H). ESIMS m/z = 449.1(M+1)
실시예 262 (R)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 262
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 262를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.92(s, 1H), 8.54(d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.12(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.93(t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.53(d, J = 14.5 Hz, 3H), 7.42-7.35(m, 1H), 3.68(s, 3H), 3.50-3.37(m, 2H), 3.20-3.09(m, 2H), 2.36-2.16(m, 3H), 1.90(d, J = 18.9 Hz, 1H), 1.83-1.68(m, 1H). ESIMS m/z = 449.1(M+1)
실시예 263 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 263
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 263을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.88(s, 1H), 8.53(d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.14(d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.89(d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.54(s, 2H), 7.49(s, 1H), 7.40-7.35(m, 1H), 4.49(dtd, J = 48.0, 8.5, 3.6 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.22-3.11(m, 5H), 2.22-2.08(m, 1H), 2.08-1.95(m, 1H), 1.93-1.79(m, 1H), 1.63(dtd, J = 14.3, 9.5, 4.5 Hz, 1H). ESIMS m/z = 431.1(M+1)
실시예 264 (S)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(3-플루오로피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 264
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 264를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.69(s, 1H), 8.43(d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.27(s, 2H), 7.88(dd, J = 10.9, 8.6 Hz, 1H), 7.67(s, 2H), 7.61(s, 1H), 7.48(dt, J = 8.3, 4.1 Hz, 1H), 3.68(s, 3H), 3.20-2.99(m, 3H), 2.32(t, J = 19.9 Hz, 3H), 1.93(d, J = 13.3 Hz, 1H), 1.82(dd, J = 14.8, 9.4 Hz, 2H). ESIMS m/z = 467.1(M+1)
실시예 265 5-아미노-N-(5-((4R,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 265
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 265를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.16(s, 1H), 8.05(s, 1H), 7.51(s, 1H), 7.40(s, 2H), 7.23(d, J = 9.0 Hz, 2H), 4.88(dd, J = 47.4, 7.4 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.09(m, 3H), 2.36(s, 3H), 2.20(ddd, J = 10.8, 7.3, 3.4 Hz, 1H), 2.00-1.80(m, 3H), 1.78-1.67(m, 1H). ESIMS m/z = 462.1(M+1)
실시예 266 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 266
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 266을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.21(s, 1H), 8.28(s, 2H), 8.12(ddd, J = 9.3, 5.7, 3.3 Hz, 1H), 7.47(s, 2H), 7.40(m, 2H), 7.27(tt, J = 7.4, 3.5 Hz, 1H), 4.88(d, J = 40.8 Hz, 2H), 3.67(s, 3H), 3.09(d, J = 4.0 Hz, 1H), 2.25-2.09(m, 2H), 2.06-1.82(m, 3H), 1.82-1.66(m, 2H). ESIMS m/z = 466.1(M+1)
실시예 267 5-아미노-N-(5-((4R,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 267
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 267을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.11(s, 1H), 8.26(dd, J = 14.8, 6.9 Hz, 1H), 7.51(s, 1H), 7.41(s, 3H), 7.39-7.29(m, 2H), 4.88(dd, J = 47.4, 7.1 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.12-3.03(m, 5H), 2.26-2.12(m, 1H), 2.00-1.80(m, 2H), 1.79-1.67(m, 1H). ESIMS m/z = 448.1(M+1)
실시예 268 5-아미노-N-(5-((4R,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(3-플루오로피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 268
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 268을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.79(s, 1H), 8.43(d, J = 4.6 Hz, 1H), 7.85(dd, J = 11.0, 8.6 Hz, 1H), 7.63(d, J = 13.0 Hz, 3H), 7.47(dt, J = 8.3, 4.1 Hz, 1H), 4.49(dtd, J = 47.9, 8.1, 3.6 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.18-3.07(m, 4H), 2.21-2.04(m, 1H), 1.98(dt, J = 9.5, 7.4 Hz, 1H), 1.94-1.83(m, 1H), 1.76-1.50(m, 1H), 1.72-1.57(m, 1H). ESIMS m/z = 449.1(M+1)
실시예 269 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(3-플루오로피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 269
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 269를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.79(s, 1H), 8.43(d, J = 4.6 Hz, 1H), 7.85(dd, J = 11.0, 8.6 Hz, 1H), 7.63(d, J = 13.0 Hz, 3H), 7.47(dt, J = 8.3, 4.1 Hz, 1H), 4.49(dtd, J = 47.9, 8.1, 3.6 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.18-3.07(m, 4H), 2.21-2.04(m, 1H), 1.98(dt, J = 9.5, 7.4 Hz, 1H), 1.94-1.83(m, 1H), 1.76-1.50(m, 1H), 1.72-1.57(m, 1H). ESIMS m/z = 449.1(M+1)
실시예 270 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 270
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 270을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.11(s, 1H), 8.26(dd, J = 14.8, 6.9 Hz, 1H), 7.51(s, 1H), 7.41(s, 3H), 7.39-7.29(m, 2H), 4.88(dd, J = 47.4, 7.1 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.12-3.03(m, 5H), 2.26-2.12(m, 1H), 2.00-1.80(m, 2H), 1.79-1.67(m, 1H). ESIMS m/z = 448.1(M+1)
실시예 271 5-아미노-N-(5-((4R,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 271
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 271을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.21(s, 1H), 8.28(s, 2H), 8.12(ddd, J = 9.3, 5.7, 3.3 Hz, 1H), 7.47(s, 2H), 7.40(m, 2H), 7.27(tt, J = 7.4, 3.5 Hz, 1H), 4.88(d, J = 40.8 Hz, 2H), 3.67(s, 3H), 3.09(d, J = 4.0 Hz, 1H), 2.25-2.09(m, 2H), 2.06-1.82(m, 3H), 1.82-1.66(m, 2H). ESIMS m/z = 466.1(M+1)
실시예 272 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 272
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 272를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.16(s, 1H), 8.05(s, 1H), 7.51(s, 1H), 7.40(s, 2H), 7.23(d, J = 9.0 Hz, 2H), 4.88(dd, J = 47.4, 7.4 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.09(m, 3H), 2.36(s, 3H), 2.20(ddd, J = 10.8, 7.3, 3.4 Hz, 1H), 2.00-1.80(m, 3H), 1.78-1.67(m, 1H). ESIMS m/z = 462.1(M+1)
실시예 273 (R)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(3-플루오로피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 273
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 273을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.69(s, 1H), 8.43(d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.27(s, 2H), 7.88(dd, J = 10.9, 8.6 Hz, 1H), 7.67(s, 2H), 7.61(s, 1H), 7.48(dt, J = 8.3, 4.1 Hz, 1H), 3.68(s, 3H), 3.20-2.99(m, 3H), 2.32(t, J = 19.9 Hz, 3H), 1.93(d, J = 13.3 Hz, 1H), 1.82(dd, J = 14.8, 9.4 Hz, 2H). ESIMS m/z = 467.1(M+1)
실시예 274 5-아미노-N-(5-((4R,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 274
모 라세미 화합물을 SFC 키랄 분리하여 거울상 이성질체 274를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.88(s, 1H), 8.53(d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.14(d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.89(d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.54(s, 2H), 7.49(s, 1H), 7.40-7.35(m, 1H), 4.49(dtd, J = 48.0, 8.5, 3.6 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.22-3.11(m, 5H), 2.22-2.08(m, 1H), 2.08-1.95(m, 1H), 1.93-1.79(m, 1H), 1.63(dtd, J = 14.3, 9.5, 4.5 Hz, 1H). ESIMS m/z = 431.1(M+1)
실시예 275 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로-3-아이오도-펜일)-티아졸-4-카복실산 [5-(5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일]-아미드 275
실시예 145에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 275를 회백색 고체(220 mg, 3단계에 걸쳐 34%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 7.93-7.85(m, 1H), 7.64(s, 1H), 7.04(ddd, J = 10.3, 8.8, 1.4 Hz, 1H), 3.77(s, 3H), 3.74-3.62(m, 1H), 3.55-3.36(m, 3H), 3.30-3.23(m, 1H), 2.41-2.22(m, 2H), 2.06-1.95(m, 1H), 1.91-1.80(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 610(M+1)
실시예 276 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 276
실시예 107에 대한 절차에 따라 N-(1-(4-아미노-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 276을 모노포메이트 염으로서 회백색 고체(170 mg, 2단계에 걸쳐 40%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.54(s, 1H), 8.06(ddd, J = 9.4, 5.8, 3.2 Hz, 1H), 7.39(s, 1H), 7.28(td, J = 9.9, 4.4 Hz, 1H), 7.19-7.11(m, 1H), 4.86(dtd, J = 49.0, 9.3, 3.6 Hz, 1H), 3.62-3.49(m, 2H), 3.50-3.38(m, 4H), 2.45-2.31(m, 1H), 2.26-2.06(m, 2H), 1.99-1.86(m, 1H), 1.21-1.12(m, 2H), 1.15-1.05(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 277 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 277
실시예 107에 대한 절차에 따라 N-(1-(4-아미노-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 277을 황색 고체(228 mg, 2단계에 걸쳐 55%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.07(dd, J = 7.3, 2.3 Hz, 1H), 7.48(s, 1H), 7.24-7.19(m, 1H), 7.11(dd, J = 11.4, 8.4 Hz, 1H), 4.49(dtd, J = 48.3, 8.8, 3.8 Hz, 1H), 3.56-3.48(m, 1H), 3.47-3.34(m, 4H), 3.23-3.13(m, 1H), 2.41(s, 3H), 2.35-2.21(m, 1H), 2.19-2.06(m, 1H), 2.01-1.91(m, 1H), 1.84-1.72(m, 1H), 1.19-1.10(m, 2H), 1.11-1.04(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 488(M+1)
실시예 278 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 278
실시예 107에 대한 절차에 따라 N-(1-(4-아미노-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여, 분취용 HPLC로 정제한 후에, 278을 모노포메이트 염으로서 회백색 고체(209 mg, 2단계에 걸쳐 50%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.54(s, 1H), 7.52(s, 1H), 7.51-7.44(m, 1H), 7.19-7.12(m, 2H), 4.86(dtd, J = 48.0, 9.3, 3.0 Hz, 1H), 3.61-3.47(m, 2H), 3.48-3.36(m, 4H), 2.46-2.32(m, 1H), 2.26-2.05(m, 2H), 1.99-1.86(m, 1H), 1.23-1.11(m, 2H), 1.13-1.05(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 279 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로-펜일)-티아졸-4-카복실산 [5-(5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-4-일]-아미드 279
실시예 145에 대한 절차에 따라 N-(1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드로부터 출발하여 279를 모노포메이트 염으로서 회백색 고체(166 mg, 3단계에 걸쳐 16%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.55(s, 1H), 7.55-7.43(m, 2H), 7.19-7.12(m, 2H), 3.87-3.71(m, 1H), 3.69-3.45(m, 4H), 3.44-3.39(m, 1H), 2.70-2.45(m, 2H), 2.24-2.13(m, 1H), 2.08-1.95(m, 1H), 1.24-1.11(m, 2H), 1.14-1.05(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 510(M+1)
실시예 280 (R)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 280
모 라세미 화합물의 SFC 키랄 분리로 거울상 이성질체 280을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.92(s, 1H), 7.66(s, 1H), 7.52(d, J = 8.0 Hz, 3H), 7.28(t, J = 8.6 Hz, 2H), 6.37(m, 2H), 4.43(d, J = 4.1 Hz, 3H), 3.64(dt, J = 27.0, 13.5 Hz, 2H), 2.26(s, 3H), 1.92-1.80(m, 1H), 1.71(tt, J = 19.7, 10.0 Hz, 1H), 1.49(dd, J = 8.3, 6.7 Hz, 1H), 0.98(d, J = 2.4 Hz, 1H). ESIMS m/z = 534.1(M+1)
실시예 281 (S)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 281
모 라세미 화합물의 SFC 키랄 분리로 거울상 이성질체 281을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.92(s, 1H), 7.66(s, 1H), 7.52(d, J = 8.0 Hz, 3H), 7.28(t, J = 8.6 Hz, 2H), 6.37(m, 2H), 4.43(d, J = 4.1 Hz, 3H), 3.64(dt, J = 27.0, 13.5 Hz, 2H), 2.26(s, 3H), 1.92-1.80(m, 1H), 1.71(tt, J = 19.7, 10.0 Hz, 1H), 1.49(dd, J = 8.3, 6.7 Hz, 1H), 0.98(d, J = 2.4 Hz, 1H). ESIMS m/z = 534.1(M+1)
실시예 282 (S)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 282
모 라세미 화합물의 SFC 키랄 분리로 거울상 이성질체 282를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.11(s, 1H), 8.13(s, 1H), 7.48(s, 2H), 7.44(s, 1H), 7.43(m, 1H), 7.28(tt, J = 7.5, 3.6 Hz, 1H), 3.68(s, 3H), 3.67-3.62(m, 1H), 3.48-3.35(m, 2H), 3.19-3.06(m, 2H), 2.23(ddd, J = 35.9, 24.1, 14.0 Hz, 3H), 1.92-1.82(m, 1H), 1.73(ddd, J = 20.0, 12.7, 8.0 Hz, 1H). ESIMS m/z = 484.1(M+1)
실시예 283 (R)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 283
모 라세미 화합물의 SFC 키랄 분리로 거울상 이성질체 283을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.11(s, 1H), 8.13(s, 1H), 7.48(s, 2H), 7.44(s, 1H), 7.43(m, 1H), 7.28(tt, J = 7.5, 3.6 Hz, 1H), 3.68(s, 3H), 3.67-3.62(m, 1H), 3.48-3.35(m, 2H), 3.19-3.06(m, 2H), 2.23(ddd, J = 35.9, 24.1, 14.0 Hz, 3H), 1.92-1.82(m, 1H), 1.73(ddd, J = 20.0, 12.7, 8.0 Hz, 1H). ESIMS m/z = 484.1(M+1)
실시예 284 (S)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 284
모 라세미 화합물의 SFC 키랄 분리로 거울상 이성질체 284를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.98(s, 1H), 8.31 8.08(d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.49(s, 1H), 7.41(s, 2H), 7.23(d, J = 9.0 Hz, 2H), 3.68(s, 3H), 3.64(d, J = 14.5 Hz, 1H), 3.45(ddd, J = 19.7, 15.1, 9.3 Hz, 2H), 3.21-3.11(m, 2H), 2.37(s, 3H), 2.28(dd, J = 31.2, 15.2 Hz, 2H), 1.88(d, J = 15.3 Hz, 1H), 1.81-1.66(m, 1H). ESIMS m/z = 480.1(M+1)
실시예 285 ((R)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 285
모 라세미 화합물의 SFC 키랄 분리로 거울상 이성질체 285를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.98(s, 1H), 8.31 8.08(d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.49(s, 1H), 7.41(s, 2H), 7.23(d, J = 9.0 Hz, 2H), 3.68(s, 3H), 3.64(d, J = 14.5 Hz, 1H), 3.45(ddd, J = 19.7, 15.1, 9.3 Hz, 2H), 3.21-3.11(m, 2H), 2.37(s, 3H), 2.28(dd, J = 31.2, 15.2 Hz, 2H), 1.88(d, J = 15.3 Hz, 1H), 1.81-1.66(m, 1H). ESIMS m/z = 480.1(M+1)
실시예 286 (S)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 286
모 라세미 화합물의 SFC 키랄 분리로 거울상 이성질체 286을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.99(s, 1H), 8.30(dd, J = 14.7, 6.9 Hz, 1H), 7.51(s, 1H), 7.48-7.40(m, 3H), 7.40-7.32(m, 2H), 3.68(s, 3H), 3.50-3.37(m, 3H), 3.16(m, 2H), 2.35-2.17(m, 2H), 1.87(m, 1H), 1.76(m, 1H). ESIMS m/z = 466.1(M+1)
실시예 287 (R)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 287
모 라세미 화합물의 SFC 키랄 분리로 거울상 이성질체 287을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.99(s, 1H), 8.30(dd, J = 14.7, 6.9 Hz, 1H), 7.51(s, 1H), 7.48-7.40(m, 3H), 7.40-7.32(m, 2H), 3.68(s, 3H), 3.50-3.37(m, 3H), 3.16(m, 2H), 2.35-2.17(m, 2H), 1.87(m, 1H), 1.76(m, 1H). ESIMS m/z = 466.1(M+1)
실시예 288 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-메톡시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 288
모 라세미 화합물의 SFC 키랄 분리로 거울상 이성질체 288을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.79(s, 1H), 8.31(s, 1H), 7.53-7.49(m, 4H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.63(s, 3H), 3.25(s, 3H), 3.24-3.13(m, 4H), 3.06(m, 2H), 1.69(m, 2H). ESIMS m/z = 478.2(M+1)
실시예 289 5-아미노-N-(5-((4R,5R)-4-아미노-5-메톡시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 289
모 라세미 화합물의 SFC 키랄 분리로 거울상 이성질체 289를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.79(s, 1H), 8.31(s, 1H), 7.53-7.49(m, 4H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.63(s, 3H), 3.25(s, 3H), 3.24-3.13(m, 4H), 3.06(m, 2H), 1.69(m, 2H). ESIMS m/z = 478.2(M+1)
실시예 290 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(5-(다이메틸아미노)-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 290
모 라세미 화합물의 SFC 키랄 분리로 거울상 이성질체 290을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.70(s, 1H), 8.18(s, 1H), 7.54(s, 1H), 7.50(m, 2H), 7.25(t, J = 8.6 Hz, 2H), 3.68(s, 3H), 3.65-3.51(m, 2H), 2.84(s, 1H), 2.24(m, 4H), 2.07(s, 6H), 1.96 - 1.76(m, 2H). ESIMS m/z = 512.1(M+1)
실시예 292 3-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피콜린아미드 292
실시예 180의 절차에 따라 화합물 292를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.72(s, 1H), 8.02(t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.72(dd, J = 8.7, 2.1 Hz, 1H), 7.66(s, 1H), 7.49-7.38(m, 1H), 7.38-7.25(m, 3H), 7.07(s, 2H), 3.80-3.58(m, 4H), 3.51-3.33(m, 2H), 3.20-3.03(m, 2H), 2.25-2.09(m, 1H), 1.90-1.76(m, 1H), 1.76-1.61(m, 1H), 1.54-1.37(m, 1H). MS(ESI) m/z: 460.2 [M+H+].
실시예 293 3-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-6-(2-플루오로페닐)피라진-2-카복사마이드 293
실시예 180의 절차에 따라 화합물 293을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.79(s, 1H), 8.68(d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.25(s, 1H), 8.12(t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.74(s, 2H), 7.60-7.52(m, 1H), 7.52-7.41(m, 1H), 7.41-7.28(m, 2H), 3.77-3.57(m, 5H), 3.18-2.96(m, 3H), 2.31-2.15(m, 2H), 1.94-1.81(m, 1H), 1.8-1.62(m, 1H). MS(ESI) m/z: 461.2 [M+H+].
실시예 291 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(5-(다이메틸아미노)-3,3-다이플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 291
모 라세미 화합물의 SFC 키랄 분리로 거울상 이성질체 291을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.70(s, 1H), 8.18(s, 1H), 7.54(s, 1H), 7.50(m, 2H), 7.25(t, J = 8.6 Hz, 2H), 3.68(s, 3H), 3.65-3.51(m, 2H), 2.84(s, 1H), 2.24(m, 4H), 2.07(s, 6H), 1.96-1.76(m, 2H). ESIMS m/z = 512.1(M+1)
실시예 294 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복사마이드 294
실시예 221에 대한 절차에 따라 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(5% MeOH/DCM 및 1% MeOH 중의 7 N 암모니아)로 정제하여, 294를 크림색 고체(107 mg, 48%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.73(s, 1H), 7.90-7.84(m, 1H), 7.82(s, 1H), 7.17-7.11(m, 1H), 7.04(dd, J = 11.1, 8.4 Hz, 1H), 6.10(s, 2H), 4.95-4.78(m, 1H), 3.74(s, 3H), 3.49-3.33(m, 3H), 3.24-3.11(m, 2H), 2.40(s, 3H), 2.40-2.26(m, 1H), 2.09-1.91(m, 2H), 1.87-1.77(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 462(M+1)
실시예 295 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 295
실시예 221에 대한 절차에 따라 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 295를 어두운 크림색 고체(166 mg, % 3단계에 걸쳐 73%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.65(s, 1H), 7.87-7.81(m, 2H), 7.17-7.09(m, 1H), 7.07-7.01(m, 1H), 6.16(s, 2H), 4.90(dd, J = 47.1, 6.7 Hz, 1H), 3.74(s, 3H), 3.49-3.32(m, 3H), 3.23-3.09(m, 2H), 2.36-2.28(m, 1H), 2.18-1.81(m, 3H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 466(M+1)
실시예 296 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 296
실시예 221에 대한 절차에 따라 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여, 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(5-7% MeOH/DCM 및 1% MeOH 중의 7 N 암모니아)로 정제하여, 296을 크림색 고체(128 mg, 3단계에 걸쳐 59%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.72(s, 1H), 8.13-8.08(m, 1H), 7.84(s, 1H), 7.40-7.32(m, 1H), 7.29-7.20(m, 1H), 7.17(dd, J = 11.4, 8.3 Hz, 1H), 6.10(s, 2H), 4.89(dd, J = 47.0, 7.0 Hz, 1H), 3.74(s, 3H), 3.50-3.31(m, 3H), 3.22-3.09(m, 2H), 2.37-2.27(m, 1H), 2.12-1.89(m, 2H), 1.86-1.78(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 448(M+1)
실시예 297 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(3-플루오로피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 297
실시예 107에 대한 절차에 따라 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(3-플루오로피리딘-2-일)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 297을 연한 갈색 고체(424 mg, 2 단계에 걸쳐서 72%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.70(s, 1H), 8.39(dt, J = 4.6, 1.4 Hz, 1H), 7.86(s, 1H), 7.52(ddd, J = 10.8, 8.3, 1.4 Hz, 1H), 7.32-7.26(m, 1H), 6.32(s, 2H), 4.51(dtd, J = 47.9, 8.5, 3.6 Hz, 1H), 3.73(s, 3H), 3.40-3.17(m, 5H), 2.34-2.19(m, 1H), 2.16-1.96(m, 2H), 1.79-1.66(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 449(M+1)
실시예 298 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 298
실시예 107에 대한 절차에 따라 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(피리딘-2-일)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 298을 담황색 고체(418 mg, 2 단계에 걸쳐서 74%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.54(d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.40(s, 1H), 8.06(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.78-7.73(m, 2H), 7.28-7.23(m, 1H), 6.26(s, 2H), 4.51(dtd, J = 48.0, 8.8, 3.8Hz, 1H), 3.73(s, 3H), 3.37-3.20(m, 5H), 2.35-2.21(m, 1H), 2.18-2.04(m, 1H), 2.02-1.92(m, 1H), 1.79-1.66(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 431(M+1)
실시예 299 5-아미노-2-(3-플루오로-피리딘-2-일)-티아졸-4-카복실산 [5-(5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일]-아미드 299
실시예 145에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 299를 담황색 고체(350 mg, 3단계에 걸쳐 43%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.56(s, 1H), 8.39(dt, J = 4.6, 1.4 Hz, 1H), 7.81(s, 1H), 7.52(ddd, J = 10.8, 8.3, 1.4 Hz, 1H), 7.32-7.26(m, 1H), 6.32(s, 2H), 3.76(s, 3H), 3.71-3.57(m, 1H), 3.54-3.35(m, 3H), 3.33-3.24(m, 1H), 2.41-2.26(m, 2H), 2.03-1.92(m, 1H), 1.90-1.78(m, 1H), 1.34(br s, 2H). LCMS(ES+) m/z 467(M+1)
실시예 300 5-아미노-2-피리딘-2-일-티아졸-4-카복실산 [5-(5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일]-아미드 300
실시예 145에 대한 절차에 따라 3급-부틸 6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 300을 담황색 고체(519 mg, 3단계에 걸쳐 66%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.55(d, J = 4.9 Hz, 1H), 8.41(s, 1H), 8.07(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.76(t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.69(s, 1H), 7.33-7.20(m, 1H), 6.25(s, 2H), 3.77(s, 3H), 3.74-3.59(m, 1H), 3.55-3.36(m, 3H), 3.33-3.23(m, 1H), 2.43-2.28(m, 2H), 2.03-1.92(m, 1H), 1.88-1.77(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 449(M+1).
실시예 301 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-(3-메틸피페라진-1-일)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 301
실시예 233에 대한 절차에 따라 3급-부틸(S)-4-(4-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-(2,2,2-트라이플루오로에틸)-1H-피라졸-5-일)-2-메틸피페라진-1-카복실레이트로부터 출발하여 301을 백색 고체(25 mg, 50%)로서 수득하였다. 1H-NMR(500 MHz, CD3OD) δ(ppm): 7.69(s, 1H), 7.51-7.45(m, 1H), 7.16-7.12(m, 2H), 4.90-4.78(m, 2H), 3.22.-3.17(m, 1H), 3.05-2.86(m, 6H), 1.08(d, J=6 Hz, 3H); MS(ESI) m/z: 502 [M+H+]
실시예 304 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로-펜일)-티아졸-4-카복실산 [5-(3,3-다이플루오로-5-하이드록시-아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일]-아미드 304
실시예 101에 대한 절차에 따라 실시예 85a로부터의 벤즈알데하이드 O-6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일 옥심으로부터 출발하여, 분취용 HPLC로 정제한 후에 304를 백색 고체(37 mg, 3단계에 걸쳐 27%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.77(s, 1H), 7.84(s, 1H), 7.39-7.29(m, 1H), 7.09-6.99(m, 2H), 6.19(s, 2H), 4.30(s, 1H), 3.75(s, 3H), 3.66-3.36(m, 3H), 3.34-3.24(m, 1H), 2.57-2.40(m, 2H), 2.10-2.02(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 485(M+1)
실시예 305 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-메톡시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 305
실시예 101에 대한 절차에 따라 실시예 49c로부터의 3급-부틸 5-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 305를 살구 포움(286 mg, 3단계에 걸쳐 66%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.94(s, 1H), 7.90(s, 1H), 7.38-7.28(m, 1H), 7.02(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.16(s, 2H), 3.72(s, 3H), 3.49-3.44(m, 1H), 3.45-3.18(m, 6H), 3.20-3.06(m, 2H), 2.17-2.06(m, 1H), 2.06-1.96(m, 1H), 1.85-1.65(m, 2H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 478(M+1)
실시예 306 5-아미노-N-(5-((3R,5R)-5-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 306
실시예 107에 대한 절차에 따라 실시예 53a로부터의 N-(1-(4-아미노-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-6-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드로부터 출발하여, 키랄 분취용 HPLC로 정제한 후에, 306을 회백색 고체(7.6 mg, 2 단계에 걸쳐서 2%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 7.63(s, 1H), 7.51-7.42(m, 1H), 7.20-7.11(m, 2H), 4.89-4.85(m, 1H), 3.63-3.46(m, 4H), 3.45-3.27(m, 2H), 2.34-2.18(m, 1H), 2.10-1.90(m, 2H), 1.80-1.66(m, 1H), 1.25-1.15(m, 1H), 1.17-1.00(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 307 5-아미노-N-(5-((3S,5S)-5-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 307
실시예 107에 대한 절차에 따라 실시예 53a로부터의 N-(1-(4-아미노-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-6-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드로부터 출발하여, 키랄 분취용 HPLC로 정제한 후에, 307을 회백색 고체(7.8 mg, 2 단계에 걸쳐서 2%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 7.63(s, 1H), 7.51-7.42(m, 1H), 7.20-7.11(m, 2H), 4.89-4.85(m, 1H), 3.63-3.46(m, 4H), 3.45-3.27(m, 2H), 2.34-2.18(m, 1H), 2.10-1.90(m, 2H), 1.80-1.66(m, 1H), 1.25-1.15(m, 1H), 1.17-1.00(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 308 5-아미노-N-(5-((3S,5R)-5-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 308
실시예 107에 대한 절차에 따라 실시예 53a로부터의 N-(1-(4-아미노-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-6-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드로부터 출발하여, 키랄 분취용 HPLC로 정제한 후에, 308을 회백색 고체(2.6 mg, 2 단계에 걸쳐서 1%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 7.58(s, 1H), 7.52-7.44(m, 1H), 7.21-7.11(m, 2H), 4.87-4.86(m, 1H), 3.61-3.49(m, 4H), 3.38-3.30(m, 1H), 3.12(t, J = 5.8 Hz, 1H), 2.32-2.23(m, 1H), 2.21-2.07(m, 1H), 2.03-1.93(m, 1H), 1.93-1.83(m, 1H), 1.22-1.04(m, 4H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 309 5-아미노-N-(5-((3R,5S)-5-아미노-3-플루오로아제판-1-일)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 309
실시예 107에 대한 절차에 따라 실시예 53a로부터의 N-(1-(4-아미노-1-사이클로프로필-1H-피라졸-5-일)-6-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드로부터 출발하여, 키랄 분취용 HPLC로 정제한 후에, 309를 회백색 고체(2.5 mg, 2 단계에 걸쳐서 1%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 7.58(s, 1H), 7.52-7.44(m, 1H), 7.21-7.11(m, 2H), 4.87-4.86(m, 1H), 3.61-3.49(m, 4H), 3.38-3.30(m, 1H), 3.12(t, J = 5.8 Hz, 1H), 2.32-2.23(m, 1H), 2.21-2.07(m, 1H), 2.03-1.93(m, 1H), 1.93-1.83(m, 1H), 1.22-1.04(m, 4H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 310 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-하이드록시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 310
실시예 101에 대한 절차에 따라 실시예 49d로부터의 3급-부틸 5-하이드록시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 310을 연한 베이지색 고체(106 mg, 3단계에 걸쳐 68%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 9.05(br s, 1H), 7.60-7.47(m, 4H), 7.28(t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.90-3.82(s, 1H), 3.70-3.58(m, 3H), 3.40-3.20(m, 3H), 3.08-2.92(m, 2H), 1.99-1.83(m, 2H), 1.70-1.55(m, 2H). 알킬 NH2 및 OH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 464(M+1)
실시예 313 5-아미노-N-[5-(5,8-다이아자스피로[2.6]노난-8-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 313
실시예 101의 절차에 따라 3급-부틸 8-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5,8-다이아자스피로[2.6]노난-5-카복실레이트로부터 출발하여 313을 담황색 고체(90 mg, 3단계에 걸쳐 35%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 12.25(s, 1H), 8.15(s, 1H), 7.41-7.22(m, 1H), 7.02(t, J = 8.6 Hz, 2H), 6.34(s, 2H), 3.66(s, 3H), 3.38(t, J = 6.3 Hz, 2H), 3.11(t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.97(s, 2H), 2.74(s, 2H), 0.33(t, J = 5.3 Hz, 2H), 0.13(t, J = 5.3 Hz, 2H). 치환가능한 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 460(M+1)
실시예 314 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 314
라세미 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드를 SFC로 키랄 분리하여 314를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.28(s, 1H), 7.64(s, 1H), 7.61-7.40(m, 4H), 7.32-7.17(m, 2H), 3.62(s, 3H), 3.40(d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.20(s, 3H), 3.18-3.07(m, 2H), 3.07-2.92(m, 3H), 2.13-1.93(m, 1H), 1.83-1.74(m, 1H), 1.74-1.56(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 478(M+1)
실시예 315 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-하이드록시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 315
라세미 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드를 SFC로 키랄 분리하여 315를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.28(s, 1H), 7.64(s, 1H), 7.60-7.42(m, 4H), 7.31-7.20(m, 2H), 3.62(s, 3H), 3.44-3.36(m, 1H), 3.19(s, 3H), 3.18-3.07(m, 2H), 3.02(dt, J = 13.0, 3.8 Hz, 3H), 2.12-1.95(m, 1H), 1.86-1.73(m, 1H), 1.73 - 1.57(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 478(M+1)
실시예 318 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(2-옥소아제판-1-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 318
실시예 101의 절차에 따라 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-2-온으로부터 출발하여 318을 백색 고체(51 mg, 3단계에 걸쳐 26%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.40(s, 1H), 7.95(s, 1H), 7.35-7.28(m, 1H), 7.01(t, J = 8.9 Hz, 2H), 6.14(s, 2H), 3.78-3.58(m, 5H), 2.76(d, J = 7.4 Hz, 2H), 1.92-1.75(m, 6H). LCMS(ES+) m/z 447(M+1)
실시예 319 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(7-옥소-1,4-다이아제판-1-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 319
실시예 101의 절차에 따라 3급-부틸 4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-옥소-1,4-다이아제판-1-카복실레이트로부터 출발하여 319를 백색 고체(35 mg, 3단계에 걸쳐 20%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.70(s, 1H), 7.96(s, 1H), 7.36-7.28(m, 1H), 7.02(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.16(s, 2H), 3.83(ddd, J = 15.2, 8.3, 2.4 Hz, 1H), 3.72(s, 3H), 3.64(ddd, J = 15.2, 6.1, 2.5 Hz, 1H), 3.22-3.02(m, 4H), 2.96-2.84(m, 2H). 치환가능한 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 448(M+1)
실시예 322 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 322
실시예 101의 절차에 따라 3급-부틸((4R,5R)-1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일)카바메이트 및 5-((3급-부톡시카보닐)아미노)-2-(피리딘-2-일)티아졸-4-카복실산을 반응시켜 라세미 322(58.4 mg, 2단계에 걸쳐 41%)를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.89(s, 1H), 8.54(d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.17(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.89(t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.62-7.47(m, 3H), 7.43-7.31(m, 1H), 3.64(s, 3H), 3.27(s, 3H), 3.23-2.91(m, 6H), 2.15-2.00(m, 1H), 1.92-1.80(m, 1H), 1.79-1.55(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 443(M+1)
실시예 323 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3-플루오로-2-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 323
실시예 101의 절차에 따라 3급-부틸((4R,5R)-1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일)카바메이트 및 5-((3급-부톡시카보닐)아미노)-2-(3-플루오로-피리딘-2-일)티아졸-4-카복실산을 반응시켜 라세미 323(35.8 mg, 2단계에 걸쳐 24%)을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.84(s, 1H), 8.43(d, J = 4.6 Hz, 1H), 7.89-7.78(m, 1H), 7.66(s, 2H), 7.62(s, 1H), 7.48(dt, J = 8.3, 4.1 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.28(d, J = 7.5 Hz, 5H), 3.26-2.95(m, 8H), 2.07(dd, J = 10.6, 4.4 Hz, 1H), 1.92(dd, J = 10.6, 7.4 Hz, 1H), 1.79-1.55(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 461(M+1)
실시예 324 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 324
실시예 101의 절차에 따라 3급-부틸((4R,5R)-1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일)카바메이트 및 5-((3급-부톡시카보닐)아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복실산을 반응시켜 324(118 mg, 2단계에 걸쳐 63%)를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.94(s, 1H), 8.30(t, J = 8.2 Hz, 1H), 7.51(s, 1H), 7.48-7.39(m, 3H), 7.39-7.27(m, 2H), 3.64(s, 3H), 3.27(s, 4H), 3.24-2.90(m, 7H), 2.14-2.01(m, 1H), 1.91-1.81(m, 1H), 1.77-1.54(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 460(M+1)
실시예 325 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-플루오로-5-메틸-펜일)티아졸-4-카복사마이드 325
실시예 101의 절차에 따라 3급-부틸((4R,5R)-1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일)카바메이트 및 5-((3급-부톡시카보닐)아미노)-2-(2-플루오로-5-메틸페닐)티아졸-4-카복실산을 반응시켜 325(70.8 mg, 2단계에 걸쳐 40%)를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.98(s, 1H), 8.07(d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.48(s, 1H), 7.40(s, 2H), 7.23(d, J = 9.0 Hz, 2H), 3.64(s, 3H), 3.24(s, 4H), 3.23-2.86(m, 8H), 2.37(s, 3H), 2.11-1.95(m, 1H), 1.91-1.79(m, 1H), 1.79- 1.53(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 474(M+1).
실시예 326 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 326
실시예 101의 절차에 따라 3급-부틸((4R,5R)-1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일)카바메이트 및 5-((3급-부톡시카보닐)아미노)-2-(2,5-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산을 반응시켜 326(64.2 mg, 2단계에 걸쳐 33.6%)을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.08(s, 1H), 8.22-8.10(m, 1H), 7.46(d, J = 9.7 Hz, 2H), 7.45-7.35(m, 2H), 7.34-7.18(m, 1H), 3.64(s, 3H), 3.23(d, J = 12.0 Hz, 4H), 3.21-2.89(m, 6H), 2.10-1.97(m, 1H), 1.89-1.79(m, 1H), 1.78-1.53(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 478(M+1)
실시예 327 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-하이드록시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 327
라세미 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-하이드록시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드를 SFC로 키랄 분리시켜 단일 거울상 이성질체 327을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.14(s, 1H), 7.60(s, 1H), 7.57-7.41(m, 3H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.77(d, J = 7.1 Hz, 1H), 3.62(s, 3H), 3.25-2.91(m, 5H), 1.96-1.78(m, 2H), 1.72-1.55(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 464(M+1)
실시예 328 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-하이드록시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 328
실시예 333의 절차에 따라 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올로부터 출발하여 키랄 분리상의 제 2 용리 피크로, 328(18%)을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.85(s, 1H), 7.60-7.39(m, 4H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.63(s, 3H), 3.22-3.01(m, 5H), 2.81-2.68(m, 1H), 1.97-1.78(m, 2H), 1.76-1.62(m, 1H), 1.62-1.45(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 464(M+1)
실시예 331 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일)-1-사이클로프로필-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 331
라세미 트랜스- 3급-부틸 N-[1-(2-사이클로프로필-4-니트로-피라졸-3-일)-5-플루오로-아제판-4-일]카바메이트를 20% 메탄올 w/ 0.1% NH4OH로 AD 칼럼 상에서 키랄 분리하였다. 실시예 369의 절차에 따라 제 2 용리 피크를 331로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.83(s, 1H), 7.59-7.40(m, 4H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.44(dtd, J = 47.9, 8.3, 3.7 Hz, 1H), 3.54(tt, J = 7.5, 3.9 Hz, 1H), 3.27-3.05(m, 5H), 2.23-2.09(m, 1H), 2.01-1.77(m, 4H), 1.70-1.53(m, 1H), 1.03(dd, J = 7.4, 3.8 Hz, 2H), 0.94(dd, J = 6.8, 4.6 Hz, 2H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 332 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일)-1-사이클로프로필-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 332
331의 제조에 따라 제 1 용리 피크를 단일 거울상 이성질체 332로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.81(s, 1H), 8.25(s, 1H), 7.95(s, 1H), 7.60-7.42(m, 3H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.64-4.42(m, 1H), 3.59-3.49(m, 1H), 3.32-3.10(m, 5H), 2.24-2.07(m, 1H), 2.03-1.85(m, 2H), 1.74-1.59(m, 1H), 1.04(dd, J = 8.3, 4.1 Hz, 2H), 0.96(dd, J = 10.3, 5.8 Hz, 2H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 333 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-하이드록시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 333
단계 A: THF/물(15 mL/ 3 mL) 중의 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(502 mg, 1.78 mmol)의 용액(키랄 분리 상의 제1 용리 피크)을 트라이페닐포스핀(476 mg, 1.78 mmol)으로 처리하고, 반응 혼합물을 60℃에서 5시간 동안 가열하였다. EtOAc(100 mL)를 첨가하고, 혼합물을 포화 수성 NaHCO3 용액(20 mL)으로 세척하였다. 수성 층을 EtOAc(50 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 오일을 제공하였다. 무수 DCM(20 mL) 중의 상기 오일의 용액에 0℃에서 DIPEA(0.85 mL, 4.88 mmol) 및 트라이플루오로아세트산 무수물(0.29 mL, 2.05 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 4시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/헵탄)로 정제하여 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-하이드록시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드 황색 오일(626 mg, 88%)로서 제공하였다. MeOH(20 mL) 중의 상기 오일(554 mg, 1.57 mmol)의 용액을 암모늄 포메이트(1002 mg, 15.7 mmol) 및 탄소상 10% 팔라듐(50 mg)으로 처리하였다. 혼합물을 65℃에서 1시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후 촉매를 여과 제거하고, 여액을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 포화 수성 NaHCO3 용액(20 mL)과 DCM(50 mL) 사이에 분배시켰다. 수성 층을 DCM(3 x 50 mL)으로 추출하고, 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-하이드록시아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 오렌지 형태로서 수득하였다.
단계 B: DCM(20 mL) 중의 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-하이드록시아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(504 mg, 1.57 mmol)의 용액에 DIPEA(1.65 mL, 9.42 mmol), PyBOP(1.17 mg, 2.20 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산(559 mg, 1.57 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(100 mL)으로 희석시키고, 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/헵탄)로 정제하여 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-하이드록시-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 회백색 고체(240 mg, 23%)로서 제공하였다. 상기 고체(240 mg, 0.36 mmol)를 MeOH(5 mL) 중의 1,4-다이옥산 중의 HCl(4 M, 6 mL, 24 mmol)로 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 포화 NaHCO3로 염기성화하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 333을 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 464(M+1)
실시예 334 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-[(4S)-4-[(3-메틸옥세탄-3-일)메틸아미노]아제판-1-일]피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 334
아세토니트릴(2 mL) 및 THF(2 mL) 중의 (S)-3급-부틸(4-((5-(4-아미노아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일)카바메이트(103 mg, 0.19mmol)의 용액에 3-(아이오도메틸)-3-메틸-옥세탄(78 mg, 0.38 mmol) 및 칼륨 카보네이트(130 mg, 0.94 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 3일 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(50 mLx3)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 15% 메탄올/DCM)로 정제하여 3급-부틸 N-[2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-[[1-메틸-5-[(4R)-4-[(3-메틸옥세탄-3-일)메틸아미노]아제판-1-일]피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트(130mg, 정량적)를 제공하였다. 상기 고체(130 mg, 0.21 mmol)를 TFA(3 mL) 및 DCM(3 mL)로 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 포화 NaHCO3로 염기성화하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 334(55.7mg, 51%)를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.66(s, 1H), 8.18(s, 1H), 7.56(s, 1H), 7.55-7.41(m, 3H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.28(d, J = 5.6 Hz, 2H), 4.12(d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.65(s, 3H), 3.23-3.00(m, 4H), 2.83-2.70(m, 1H), 2.70-2.58(m, 2H), 1.99-1.77(m, 3H), 1.68-1.51(m, 3H), 1.17(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 532(M+1)
실시예 335 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[5-[(4S)-4-(2-하이드록시에틸아미노)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 335
실시예 334의 절차에 따라 3-(아이오도메틸)-3-메틸-옥세탄을 2-아이오도에탄올로 대체하는 것을 제외하여 3급-부틸 N-[2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-[[5-[(4R)-4-(2-하이드록시에틸아미노)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트(37mg, 38%) 및 3급-부틸 N-[4-[[5-[(4R)-4-[비스(2-하이드록시에틸)아미노]아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일]카바메이트(10mg, 9.6%)를 수득하였다. 실시예 334에서 탈보호 절차에 따라 3급-부틸 N-[2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-[[5-[(4R)-4-(2-하이드록시에틸아미노)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트를 335(16.7 mg, 31%)로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.69(s, 1H), 8.27(s, 1H), 7.59-7.41(m, 4H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.65(s, 3H), 3.50-3.42(m, 2H), 3.24-3.03(m, 5H), 2.98-2.83(m, 1H), 2.73-2.57(m, 2H), 1.89(m, 3H), 1.68 - 1.49(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 336 5-아미노-N-[5-[(4S)-4-[비스(2-하이드록시에틸)아미노]아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 336
335의 제조에 따라 3급-부틸 N-[4-[[5-[(4R)-4-[비스(2-하이드록시에틸)아미노]아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일]카바메이트를 실시예 334의 절차에 따라 탈보호시켜 336(6mg, 71%)을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.63(s, 1H), 8.24(s, 1H), 7.56(s, 1H), 7.55-7.41(m, 3H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.65(s, 3H), 3.19-3.02(m, 7H), 2.85-2.71(m, 2H), 2.46(t, J = 6.2 Hz, 4H), 1.92-1.75(m, 3H), 1.67-1.50(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 536(M+1)
실시예 337 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-하이드록시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 337
5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-하이드록시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드의 SFC에 의한 키랄 분리로 단일 거울상 이성질체 337을 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 464(M+1)
실시예 340 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(5-옥소-1,4-옥사제판-4-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 340
실시예 101의 절차에 따라 4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-옥사제판-5-온으로부터 출발하여 340을 백색 고체(45 mg, 3단계에 걸쳐 70%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.38(s, 1H), 7.86(s, 1H), 7.36-7.27(m, 1H), 7.06-6.98(m, 2H), 6.12(s, 2H), 4.01-3.86(m, 5H), 3.80-3.62(m, 4H), 3.03-2.94(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 449(M+1)
실시예 341 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 341
실시예 101의 절차에 따라 3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄으로부터 출발하여 341을 백색 고체(49 mg, 3단계에 걸쳐 40%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.71(s, 1H), 7.56-7.52(m, 3H), 7.47(s, 1H), 7.30-7.24(m, 2H), 4.27(br s, 2H), 3.68(s, 3H), 3.35-3.32(m, 2H), 2.68(d, J = 10.9 Hz, 2H), 2.09-1.97(m, 2H), 1.82-1.79(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 447(M+1)
실시예 342 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-[(4S)-4-(옥세탄-3-일메틸아미노)아제판-1-일]피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 342
실시예 334의 절차에 따라 3-(아이오도메틸)-3-메틸-옥세탄을 3-(아이오도메틸)옥세탄으로 대체하는 것을 제외하고, 3급-부틸 N-[2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-[[1-메틸-5-[(4R)-4-(옥세탄-3-일메틸아미노)아제판-1-일]피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트(17mg, 25.5%) 및 3급-부틸 N-[4-[[5-[(4R)-4-[비스(옥세탄-3-일메틸)아미노]아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일]카바메이트(19mg, 25.6%)를 수득하였다. 실시예 334에서 탈보호 절차에 따라 3급-부틸 N-[2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-[[1-메틸-5-[(4R)-4-(옥세탄-3-일메틸아미노)아제판-1-일]피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트를 342(4.1 mg, 29%)로 전환시켰다. LCMS(ES+) m/z 518(M+1)
실시예 343 5-아미노-N-[5-[(4S)-4-[비스(옥세탄-3-일메틸)아미노]아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 343
342의 제조에 따라 3급-부틸 N-[4-[[5-[(4R)-4-[비스(옥세탄-3-일메틸)아미노]아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일]카바메이트를 실시예 334의 절차에 따라 탈보호시켜 343을 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 588(M+1)
실시예 348 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-에틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 348
실시예 101의 절차에 따라 3급-부틸 1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 348을 백색 고체(37 mg, 3단계에 걸쳐 23%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.64(s, 1H), 7.88(s, 1H), 7.39-7.26(m, 1H), 7.03(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.17(s, 2H), 4.48(dtd, J = 48.0, 8.7, 3.6 Hz, 1H), 4.02(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.38-3.13(m, 6H), 2.32-2.18(m, 1H), 2.14-1.93(m, 2H), 1.85-1.79(m, 1H), 1.83-1.57(m, 1H), 1.43(t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 480(M+1)
실시예 349 5-아미노-N-[5-(3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 349
실시예 101에 대한 절차에 따라 3-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄으로부터 출발하여 349를 회백색 고체(80 mg, 3단계에 걸쳐 30%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.57(s, 1H), 7.86(s, 1H,) 7.39-7.22(m, 1H), 7.04-6.99(m, 2H), 6.12(br s, 2H), 3.76(s, 3H), 3.25(d J = 10.4 Hz, 2H), 2.81-2.78(dd J = 10.4, 3.4 Hz, 2H) 2.24(br s, 2H), 1.86(d, J = 7.7 Hz, 2H), 1.72-1.69(m, 2H), 1.60(br s, 2H). LCMS(ES+) m/z 445(M+1)
실시예 350 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[5-(1,1-다이옥소-1,4-티아제판-4-일)-1-메틸-피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 350
실시예 101에 대한 절차에 따라 4-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1,4-티아제판 1,1-다이옥사이드로부터 출발하여 350을 회백색 고체(52 mg, 3단계에 걸쳐 20%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.45(s, 1H), 7.74(s, 1H), 7.36-7.32(m, 1H), 7.07-7.01(m, 2H), 6.12(br s, 2H), 3.79(s, 3H), 3.59-3.56(m, 2H), 3.47-3.43(m, 2H), 3.38-3.35(m, 2H), 3.30-3.27(m, 2H), 2.24-2.18(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 483(M+1)
실시예 352 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-메톡시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 352
5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-메톡시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드의 SFC에 의한 키랄 분리로 단일 거울상 이성질체 352를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.85(s, 1H), 8.46(s, 1H), 7.64(s, 1H), 7.60-7.44(m, 3H), 7.29(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.65(s, 3H), 3.27-3.14(m, 3H), 3.07(dd, J = 10.9, 5.5 Hz, 1H), 3.02(s, 3H), 2.97(d, J = 14.4 Hz, 1H), 2.00(d, J = 14.3 Hz, 1H), 1.92-1.82(m, 1H), 1.71-1.57(m, 1H), 1.48(dd, J = 14.3, 10.8 Hz, 1H), 0.99(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 353 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-메톡시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 353
5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-메톡시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드의 SFC에 의한 키랄 분리로 단일 거울상 이성질체 353을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.85(s, 1H), 8.47(s, 1H), 7.64(s, 1H), 7.59-7.45(m, 3H), 7.29(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.65(s, 3H), 3.28-3.12(m, 3H), 3.11-3.03(m, 1H), 3.02(s, 3H), 2.97(d, J = 14.3 Hz, 1H), 2.00(d, J = 14.2 Hz, 1H), 1.93-1.80(m, 1H), 1.71-1.57(m, 1H), 1.48(dd, J = 14.3, 10.8 Hz, 1H), 0.99(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 354 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(9-옥사-3,7-다이아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 354
단계 A. 마이크로파 반응 바이알에 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(141 mg, 0.88 mmol), 3급-부틸 9-옥사-3,7-다이아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트(200 mg, 0.88 mmol)를 첨가하였다. 에탄올(8 mL) 및 다이이소프로필에틸아민(0.92 mL, 5.25 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 마이크로파로 60분 동안 130℃에서 조사하였다. 혼합물을 냉각시키고, 농축하고, 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트 / 헵탄 0% 내지 100%)로 정제하여 황색 오일 3급-부틸 7-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-9-옥사-3,7-다이아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트(202 mg, 65%)를 수득하였다.
단계B: MeOH(30 mL) 중의 상기 황색 오일의 용액을 H-큐브(등록상표)(60 bar, 60℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 3급-부틸 7-(4-아미노-2-메틸-피라졸-3-일)-9-옥사-3,7-다이아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트를 갈색 오일로서 제공하였다. DCM(10 mL) 중의 상기 오일의 용액에 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(260 mg, 0.74 mmol), PyBOP(480 g, 0.91mmol) 및 DIPEA(0.60 mL, 3.40 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 희석시켰다. 유기층을 물(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/헵탄)로 정제하여 3급-부틸 7-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-9-옥사-3,7-다이아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트(380mg, 정량적)를 수득하였다.
단계 C: 상기 고체(380 mg, 0.57 mmol)를 TFA(7 mL) 및 DCM(10 mL)으로 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 포화 NaHCO3으로 염기성화하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 354(82mg, 29%)를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.58(s, 1H), 7.63-7.40(m, 4H), 7.27(t, J = 8.6 Hz, 2H), 3.66(s, 3H), 3.62(d, J = 19.8 Hz, 3H), 3.20-2.86(m, 7H). LCMS(ES+) m/z 462(M+1)
실시예 357 5-아미노-N-(5-((4R,5R)-4-아미노-5-플루오로사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 357
MeOH(2 mL) 중의 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 1)(49 mg, 0.074 mmol)의 용액/서스펜션에 다이옥산 중의 HCl의 용액(4 M, 1.9 mL, 7.42 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 72시간 동안 가열하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 MeOH /물(5 mL/5 mL) 중에 용해하고 K2CO3(51 mg, 0.37 mmol)로 처리하였다. 혼합물을 가열된 65℃ 18시간 동안 가열하였다. MeOH를 감압 하에 제거하고, 수성 잔사를 5% MeOH/DCM(2 x 30 mL)으로 추출하였다. 유기층들을 조합하고, MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 MeOH 중에 용해하고, SCX 칼럼 상으로 부하하였다. 칼럼을 MeOH로 세척하고, MeOH 중의 3 N 암모니아로 용리하고, 용매를 감압 하에 제거하여 357(부분입체이성질체 1)을 베이지색 고체(10 mg, 2단계에 걸쳐 29%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.44(s, 1H), 7.76(s, 1H), 7.35-7.28(m, 1H), 7.07-6.99(m, 2H), 6.11(s, 2H), 4.46-4.29(m, 1H), 3.83(s, 3H), 3.23-3.13(m, 1H), 2.84-2.76(m, 1H), 2.26-1.81(m, 6H), 1.60-1.40(m, 2H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 465(M+1)
실시예 358 5-아미노-N-(5-((4R,5R)-4-아미노-5-플루오로사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 358
MeOH(2 mL) 중의 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 2)(28 mg, 0.042 mmol)의 서스펜션에 다이옥산 중의 HCl의 용액(4 M, 1.1 mL, 4.24 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 MeOH /물(3 mL/3 mL) 중에 용해하고, K2CO3(29 mg, 0.21 mmol)로 처리하고, 60℃에서 18시간 동안 가열하였다. MeOH를 감압 하에 제거하고, 수성 잔사를 5% MeOH/DCM(2 x 40 mL)으로 추출하였다. 유기층들을 조합하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 358(부분입체이성질체 2)을 회백색 고체(17 mg, 2단계에 걸쳐 86%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.44(s, 1H), 7.76(s, 1H), 7.34-7.29(m, 1H), 7.03(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.11(s, 2H), 4.47-4.29(m, 1H), 3.83(s, 3H), 3.23-3.12(m, 1H), 2.86-2.75(m, 1H), 2.25-1.84(m, 6H), 1.60-1.40(m, 2H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 465(M+1)
실시예 359 5-아미노-N-[5-(2,6-다이아자스피로[3.4]옥탄-6-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 359
실시예 354의 절차에 따라 3급-부틸 9-옥사-3,7-다이아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트를 3급-부틸 2,7-다이아자스피로[3.4]옥탄-2-카복실레이트로 대체하여 359을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.70(s, 1H), 8.44(s, 1H), 7.58-7.44(m, 3H), 7.39(s, 1H), 7.26(t, J = 8.6 Hz, 2H), 3.61(s, 5H), 3.56(d, J = 8.2 Hz, 4H), 3.21(t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.10(t, J = 6.9 Hz, 2H). LCMS(ES+) m/z 446(M+1)
실시예 360 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(1-옥소-2,8-다이아자스피로[4.5]데칸-8-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 360
실시예 354의 절차에 따라 3급-부틸 9-옥사-3,7-다이아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트를 3,8-다이아자스피로[4.5]데칸-4-온으로 대체하여 360을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.78(s, 1H), 7.58-7.43(m, 4H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.64(s, 3H), 3.21-3.07(m, 4H), 3.07-2.92(m, 2H), 1.97(t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.86-1.74(m, 3H), 1.41(d, J = 12.9 Hz, 2H). LCMS(ES+) m/z 488(M+1)
실시예 361 5-아미노-N-[5-(2,7-다이아자스피로[3.4]옥탄-2-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 361
실시예 354의 절차에 따라 3급-부틸 9-옥사-3,7-다이아자바이사이클로[3.3.1]노난-3-카복실레이트를 3급-부틸 2,7-다이아자스피로[3.4]옥탄-7-카복실레이트; 옥살산으로 대체하여 361을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.73(s, 1H), 7.60-7.43(m, 3H), 7.27(t, J = 8.6 Hz, 2H), 7.15(s, 1H), 4.04(d, J = 7.0 Hz, 2H), 3.97(d, J = 7.0 Hz, 2H), 3.57(s, 3H), 3.11(t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.89(s, 1H), 2.73(s, 1H), 2.14(t, J = 7.3 Hz, 2H), 2.07(s, 2H). LCMS(ES+) m/z 446(M+1)
실시예 362 5-아미노-N-[5-[4-(아제티딘-3-일)-1,4-다이아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 362
단계 A: 마이크로파 반응 바이알에 5-클로로-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(500 mg, 3.10 mmol), 3급-부틸 1,4-다이아제판-1-카복실레이트(744 mg, 3.72 mmol)를 첨가하였다. 에탄올(15 mL) 및 다이이소프로필에틸아민(3.23 mL, 18.57 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 마이크로파로 60분 동안 130℃에서 조사하였다. 혼합물을 냉각시키고, 농축하고 플래시 크로마토그래피(에틸 아세테이트 / 헵탄 0% 내지 100%)로 정제하여 황색 오일 3급-부틸 4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(690 mg, 69%)를 수득하였다.
단계 B: DCM(4 mL) 및 TFA(4 mL) 중의 3급-부틸 4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이아제판-1-카복실레이트(200 mg, 0.61 mmol)의 용액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 포화 NaHCO3로 염기성화하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% 메탄올/DCM)로 정제하여 1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이아제판(88 mg, 64%)을 제공하였다. 이를 아세토니트릴(3 mL)에 용해시켰다. 3급-부틸 3-아이오도아제티딘-1-카복실레이트(221 mg, 0.78 mmol) 및 DIPEA(5 당량)를 첨가하고, 추가의 아이오다이드 및 DIPEA를 2일 및 3일 마다 첨가하여 혼합물을 75℃에서 7 일 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(50 mL)으로 추출하였다. 유기층을 물(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% 메탄올/DCM)로 정제하여 3급-부틸 3-[4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이아제판-1-일]아제티딘-1-카복실레이트(144 mg, 97%)를 수득하였다.
단계 C: 실시예 354의 절차에 따라 3급-부틸 3-[4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이아제판-1-일]아제티딘-1-카복실레이트를 362로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.71(s, 1H), 8.36(s, 1H), 7.62-7.41(m, 4H), 7.29(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.12-3.96(m, 1H), 3.89-3.75(m, 1H), 3.66(s, 3H), 3.59(dd, J = 17.1, 10.1 Hz, 4H), 3.41(dd, J = 14.3, 7.1 Hz, 2H), 3.21(t, J = 5.4 Hz, 4H), 2.68 - 2.54(m, 2H), 1.91 - 1.73(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 489(M+1)
실시예 363 5-아미노-N-[5-(3,3-다이플루오로사이클로헵틸)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 363
MeOH(10 mL) 중의 (E)-5-(6,6-다이플루오로사이클로헵트-1-에닐)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(0.14 g, 0.54 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 65℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 오일을 제공하였다. 이를 DCM(20 mL) 및 DIPEA(0.28 mL)에 용해시키고, PyBOP(0.42 g, 0.81 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(211 mg, 0.59 mmol)을 첨가했다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반시키고, DCM(30 mL)으로 희석시키고, 물(10 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 50% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 포움(210 mg)을 제공하였다. MeOH(2 mL) 중의 상기 포움(200 mg)의 용액을 다이옥산 중의 HCl의 용액(4 M, 2.7 mL, 10.8 mmol)으로 처리하고, 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 EtOAc(25 mL)에서 용해시키고, 포화 수성 NaHCO3 (2 x 20 mL) 및 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 키랄 제조용 HPLC로 정제하여 363(거울상 이성질체 1)을 백색 고체(6.3 mg, 3단계에 걸쳐 5%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.49(s, 1H), 7.79(s, 1H), 7.40-7.30(m, 1H), 7.10-7.00(m, 2H), 6.13(s, 2H), 3.88(s, 3H), 3.19-3.07(m, 1H), 2.68-2.37(m, 2H), 2.30-1.94(m, 6H), 1.89-1.57(m, 2H)
실시예 364 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-메톡시아제판-1-일)-1-에틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 364
실시예 101의 절차에 따라 3급-부틸 1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일카바메이트로부터 364를 모노포메이트 염으로서 백색 고체(70 mg, 3단계에 걸쳐 64%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.41(s, 1H), 7.59-7.45(m, 2H), 7.27(t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.96(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.33-3.27(m, 4H), 3.23-3.04(m, 5H), 2.13(d, J = 14.4 Hz, 1H), 1.96(d, J = 14.4 Hz, 1H), 1.75-1.67(m, 2H), 1.32(t, J = 7.2 Hz, 3H). 치환가능한 것은 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 365 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-메톡시아제판-1-일)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 365
실시예 101의 절차에 따라 3급-부틸 1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일카바메이트로부터 365를 모노포메이트 염으로서 백색 고체(68 mg, 3단계에 걸쳐 64%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.40(s, 1H), 7.58-7.47(m, 1H), 7.43(s, 1H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.55-3.47(m, 1H), 3.36-3.08(m, 9H), 2.15(d, J = 14.4 Hz, 1H), 2.02-1.94(m, 1H), 1.83-1.66(m, 2H), 1.07-0.94(m, 4H). 치환가능한 것은 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 504(M+1)
실시예 366 5-아미노-N-[5-(3,3-다이플루오로사이클로헵틸)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 366
실시예 363의 절차에 따라 366(거울상 이성질체 2)을 백색 고체(6.6 mg, 5%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.49(s, 1H), 7.80(s, 1H), 7.39-7.30(m, 1H), 7.10-7.00(m, 2H), 6.13(s, 2H), 3.88(s, 3H), 3.17-3.06(m, 1H), 2.64-2.33(m, 2H), 2.30-1.94(m, 6H), 1.85-1.57(m, 2H)
실시예 367 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(2-옥소-1,9-다이아자스피로[4.6]운데칸-9-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 367
실시예 508의 절차에 따라 367을 단일 거울상 이성질체로서 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 8.64(s, 1H), 7.99(s, 1H), 7.59-7.50(m, 2H), 7.48(s, 2H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.65(s, 2H), 3.30(s, 3H), 3.31-3.15(m, 2H), 3.11-2.96(m, 2H), 2.15-2.05(m, 2H), 1.80(m, 6H). MS(ESI) m/z: 502.1 [M+H+]
실시예 368 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(2-옥소-1,9-다이아자스피로[4.6]운데칸-9-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 368
실시예 508의 절차에 따라 368을 단일 거울상 이성질체로서 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 8.64(s, 1H), 7.99(s, 1H), 7.59-7.50(m, 2H), 7.48(s, 2H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.65(s, 2H), 3.30(s, 3H), 3.31-3.15(m, 2H), 3.11-2.96(m, 2H), 2.15-2.05(m, 2H), 1.80(m, 6H). MS(ESI) m/z: 502.1 [M+H+]
실시예 369 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일)-1-에틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 369
라세미 트랜스-3급-부틸(1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)카바메이트를 20% 메탄올 w/ 0.1% NH4OH로 AD 칼럼 상에서 키랄 분리하였다. 실시예 354의 절차에 따라 제 1 용리 피크를 369로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.82(s, 1H), 7.60(s, 1H), 7.57-7.43(m, 3H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.42(dtd, J = 47.8, 8.2, 3.6 Hz, 1H), 3.95(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.24-3.04(m, 5H), 2.18-1.76(m, 3H), 1.66-1.51(m, 1H), 1.32(t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 480(M+1)
실시예 370 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일)-1-에틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 370
369의 제조에 따라 제 2 용리 피크를 370으로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.82(s, 1H), 7.60(s, 1H), 7.57-7.44(m, 3H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.42(dd, J = 47.9, 3.6 Hz, 1H), 3.95(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.24-3.02(m, 5H), 2.19-2.03(m, 1H), 2.00-1.77(m, 2H), 1.67-1.52(m, 1H), 1.32(t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 480(M+1)
실시예 371 5-아미노-N-[5-(3,3-다이플루오로-5-하이드록시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 371
라세미 N-[6,6-다이플루오로-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]옥시-1-페닐-메탄이민을 35% 메탄올 w/ 0.1% NH4OH로 AD 칼럼 상에서 키랄 분리시켰다. 실시예 369의 절차에 따라 제 1 용리 피크를 371로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.76(s, 1H), 7.61-7.40(m, 4H), 7.26(t, J = 8.6 Hz, 2H), 4.90(d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.06-3.90(m, 1H), 3.74-3.57(m, 4H), 3.47-3.34(m, 1H), 3.34-3.20(m, 1H), 3.17-3.01(m, 1H), 2.43-2.23(m, 2H), 2.00-1.73(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 485(M+1)
실시예 372 5-아미노-N-[5-(3,3-다이플루오로-5-하이드록시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 372
371의 제조에 따라 제 2 용리 피크를 단일 거울상 이성질체 372로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.76(s, 1H), 7.60-7.42(m, 4H), 7.26(t, J = 8.6 Hz, 2H), 4.90(d, J = 3.9 Hz, 1H), 4.00(s, 1H), 3.75-3.54(m, 4H), 3.46-3.34(m, 1H), 3.34-3.23(m, 1H), 3.16-3.03(m, 1H), 2.45-2.23(m, 2H), 2.01-1.70(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 485(M+1)
실시예 373 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일)-1-에틸-피라졸-4-일]-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 373
실시예 369의 절차에 따라 제 1 용리 피크를 단일 거울상 이성질체 373으로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.92(s, 1H), 8.28(t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.56(s, 1H), 7.51-7.27(m, 5H), 4.56-4.32(m, 1H), 3.96(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.24-3.06(m, 5H), 2.20-2.04(m, 1H), 2.04-1.90(m, 1H), 1.90-1.77(m, 1H), 1.77-1.54(m, 3H), 1.33(t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 462(M+1)
실시예 374 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일)-1-에틸-피라졸-4-일]-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 374
373의 제조에 따라 제 2 용리 피크를 단일 거울상 이성질체 374로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.92(s, 1H), 8.28(t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.56(s, 1H), 7.50-7.23(m, 5H), 4.56-4.33(m, 1H), 3.96(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.25-3.04(m, 5H), 2.21-2.05(m, 1H), 2.05-1.90(m, 1H), 1.90-1.79(m, 1H), 1.79-1.50(m, 3H), 1.33(t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 462(M+1)
실시예 375 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-하이드록시아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 375
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 1-(1-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-하이드록시아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 375를 모노포메이트 염으로서 연한 갈색 고체(58 mg, 3단계에 걸쳐 47%)로 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.42(s, 1H), 7.65(s, 1H), 7.58-7.48(m, 1H), 7.28(t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.36(tt, J = 55.3, 4.1 Hz, 1H), 4.43(td, J = 14.5, 4.2 Hz, 2H), 4.04(s, 1H), 3.40-3.29(m, 2H), 3.26-3.18(m, 1H), 3.12-3.02(m, 1H), 2.95(dt, J = 13.7, 4.7 Hz, 1H), 2.14-2.02(m, 1H), 1.93-1.66(m, 2H), 1.77-1.67(m, 1H). 치환가능한 것은 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 514(M+1)
실시예 376 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-메톡시아제판-1-일)-1-에틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 376
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 1-(1-에틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 376을 모노포메이트 염으로서 연한 갈색 고체(60 mg, 3단계에 걸쳐 51%)로 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.41(s, 1H), 7.59(s, 1H), 7.58-7.45(m, 1H), 7.27(t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.96(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.42(dt, J = 9.8, 3.0 Hz, 1H), 3.70-3.60(m, 1H), 3.50-2.94(m, 5H), 3.09-3.00(m, 1H), 3.00-2.91(m, 1H), 2.13-2.04(m, 1H), 2.03-1.91(m, 1H), 1.79-1.65(m, 2H), 1.31(t, J = 7.2 Hz, 3H). 치환가능한 것은 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 377 5-아미노-N-(5-((4R,5S)-4-아미노-5-플루오로사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 377
실시예 358의 절차에 따라 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 5)를 377(부분입체이성질체 5)로 회백색 고체(16 mg, 2단계에 걸쳐 79%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.46(s, 1H), 7.79(s, 1H), 7.38-7.28(m, 1H), 7.03(t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.14(s, 2H), 4.88-4.71(m, 1H), 3.82(s, 3H), 3.25-3.14(m, 1H), 3.06-2.96(m, 1H), 2.20-1.83(m, 7H), 1.78-1.63(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 465(M+1)
실시예 378 N-[5-(4-아세트아미도-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 378
EtOH(25 mL) 및 물(2.5 mL)의 혼합물 중의 N-(4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드(330 mg, 1.11 mmol)의 교반된 용액에 암모늄 클로라이드(300 mg, 5.55 mmol) 및 철 분말(250 mg, 4.44 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 가열하고, 냉각시키고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 물(20 mL)과 DCM(40 mL) 사이에 분배시키고, 유기층을 분리하고, 염수(20 mL)로 세척하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-4-메틸아제판-4-일)아세트아미드를 갈색 고체로서 수득하고, 이를 추가 정제없이 사용했다. 실시예 149에 대한 절차에 따라 상기 중간체 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산을 사용하여 378을 회백색 포움(54 mg, 3단계에 걸쳐 19%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.52(s, 1H), 7.86(s, 1H), 7.39-7.29(m, 1H), 7.07-6.99(m, 2H), 6.15(s, 2H), 5.38(s, 1H), 3.74(s, 3H), 3.30-3.18(m, 4H), 3.12(ddd, J = 13.6, 6.6, 3.1 Hz, 1H), 2.30-2.19(m, 2H), 2.00-1.72(m, 6H), 1.45(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 504(M+1)
실시예 379 5-아미노-N-(5-((4R,5R)-4-아미노-5-플루오로사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 379
실시예 358의 절차에 따라 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 3 및 부분입체이성질체 4)로부터 출발하여 분취용 HPLC로 정제한 후에, 379(부분입체이성질체 3 및 부분입체이성질체 4)를 라세미 쌍의 거울상 이성질체들 및 회백색 고체(4 mg, 2단계에 걸쳐 7%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.41(s, 1H), 7.76(s, 1H), 7.38-7.28(m, 1H), 7.03(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.12(s, 2H), 4.33-4.18(m, 1H), 3.83(s, 3H), 3.14-3.05(m, 1H), 2.96-2.88(m, 1H), 2.32-2.20(m, 1H), 2.00-1.69(m, 7H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 465(M+1)
실시예 380 5-아미노-N-(5-((4R,5S)-4-아미노-5-플루오로사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 380
실시예 358의 절차에 따라 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 6, 부분입체이성질체 7 및 부분입체이성질체 8)로부터 출발하여 분취용 HPLC로 정제한 후에, 380(부분입체이성질체 6 및 부분입체이성질체 7)을 백색 포움(8 mg, 2단계에 걸쳐 15%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.47(s, 1H), 7.75(s, 1H), 7.38-7.29(m, 1H), 7.02(t, J = 8.9 Hz, 2H), 6.13(s, 2H), 4.77(dd, J = 47.1, 6.6 Hz, 1H), 3.83(s, 3H), 3.18(dd, J = 23.9, 8.0 Hz, 1H), 2.93-2.85(m, 1H), 2.42-2.32(m, 1H), 2.18-1.55(m, 7H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 465(M+1)
실시예 381 5-아미노-N-(5-((4R,5S)-4-아미노-5-플루오로사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 381
실시예 358의 절차에 따라 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4-플루오로-5-(2,2,2-트라이플루오로아세트아미도)사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(부분입체이성질체 6, 부분입체이성질체 7 및 부분입체이성질체 8)로부터 출발하여 분취용 HPLC로 정제한 후에, 381(부분입체이성질체 8)을 회백색 고체(9 mg, 2단계에 걸쳐 17%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) 8.46(s, 1H), 7.80(s, 1H), 7.36-7.29(m, 1H), 7.03(t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.11(s, 2H), 4.88-4.72(m, 1H), 3.82(s, 3H), 3.24-3.15(m, 1H), 3.05-2.97(m, 1H), 2.13-1.82(m, 7H), 1.74-1.67(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 465(M+1)
실시예 383 5-아미노-N-(5-사이클로헵틸-1-메틸-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 383
MeOH(30 mL) 중의 (Z)-5-(1-플루오로사이클로헵트-4-에닐)-1-메틸-4-니트로-1H-피라졸(100 mg, 0.42 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 70℃, 유속: 1 mL/min, 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 적색 검(81 mg)을 제공하였다. DCM(20 mL) 중의 상기 아민(80 mg, 0.41 mmol)의 용액에 DIPEA(1 mL), PyBOP(606 mg, 1.17 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(183 mg, 0.51 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(100 mL)으로 희석시키고, 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(30 내지 40% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸 4-(5-사이클로헵틸-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일카바메이트를 크림색 고체(140 mg)로서 제공하였다. 상기 고체(130 mg, 0.25 mmol)를 MeOH(3 mL) 중의 다이옥산 중의 HCl(4 M, 3.1 mL, 12.2 mmol)에서 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 MeOH 중에 용해하고, SCX 칼럼 상에 부하하였다. 칼럼을 MeOH로 세척하고, MeOH 중의 2 N 암모니아로 용리하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 분취용 HPLC로 정제하여 383을 크림색 고체(45 mg, 3단계에 걸쳐 25%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.59(s, 1H), 7.85(s, 1H), 7.35-7.29(m, 1H), 7.02(t, J = 8.9 Hz, 2H), 6.10(s, 2H), 3.83(s, 3H), 2.92-2.81(m, 1H), 1.97-1.83(m, 6H), 1.72-1.50(m, 6H). LCMS(ES+) m/z 432(M+1)
실시예 384 N-[5-(4-아세트아미도-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-5-아미노-2-(3-플루오로-2-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 384
실시예 378의 절차에 따라 N-(4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(3-플루오로피리딘-2-일)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 384를 회백색 포움(80 mg, 3단계에 걸쳐 29%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.57(s, 1H), 8.41(d, J = 4.3 Hz, 1H), 7.90(s, 1H), 7.52(t, J = 9.7 Hz, 1H), 7.31(dt, J = 8.4, 4.3 Hz, 1H), 6.32(s, 2H), 5.75(s, 1H), 3.74(s, 3H), 3.33-3.15(m, 4H), 2.38-2.21(m, 2H), 2.02-1.84(m, 4H), 1.82-1.74(m, 3H), 1.51(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 487(M+1)
실시예 385 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-에톡시-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 385
실시예 107에 대한 절차에 따라 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-에톡시아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 385를 갈색 고체(127 mg, 2단계에 걸쳐 60%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.61(s, 1H), 7.85(s, 1H), 7.42-7.28(m, 1H), 7.04(t, J = 8.9 Hz, 2H), 6.19(s, 2H), 3.78-3.58(m, 4H), 3.47-3.35(m, 1H), 3.38-3.25(m, 2H), 3.25-3.16(m, 3H), 3.09-3.01(m, 1H), 2.13(d, J = 14.7 Hz, 1H), 2.00(d, J = 14.7 Hz, 1H), 1.92-1.82(m, 1H), 1.84-1.58(m, 3H), 1.22(t, J = 7.0 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 386 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-메톡시아제판-1-일)-1-사이클로프로필-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 386
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 1-(1-사이클로프로필-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-메톡시아제판-4-일카바메이트 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산으로부터 386을 회백색 고체(29 mg, 3단계에 걸쳐 23%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.96(s, 1H), 7.86(s, 1H), 7.36-7.28(m, 1H), 7.02(t, J = 8.9 Hz, 2H), 6.19-6.10(m, 2H), 3.50-3.35(m, 4H), 3.33(s, 3H), 3.25-3.11(m, 2H), 2.19-2.05(m, 1H), 2.03-1.96(m, 1H), 2.01-1.60(m, 2H), 1.57(s, 3H), 1.27-1.12(m, 2H), 0.97(d, J = 7.1 Hz, 2H). LCMS(ES+) m/z 504(M+1)
실시예 387 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 387
실시예 107에 대한 절차에 따라 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(피리딘-2-일)티아졸-4-카복실산으로부터 387을 회백색 고체(106 mg, 2단계에 걸쳐 68%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.65(s, 1H), 8.54(d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.04(d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.81(s, 1H), 7.76(t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.29-7.20(m, 1H), 6.27(s, 2H), 4.90(d, J = 47.2 Hz, 1H), 3.73(s, 3H), 3.58-3.33(m, 3H), 3.23-3.11(m, 2H), 2.44-2.22(m, 1H), 2.11-1.92(m, 2H), 1.87-1.76(m, 1H). 치환가능한 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 431(M+1)
실시예 388 5-아미노-N-(5-((4S,5R)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(3-플루오로피리딘-2-일)티아졸-4-카복사마이드 388
실시예 107에 대한 절차에 따라 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(3-플루오로피리딘-2-일)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 388을 회백색 고체(120 mg, 2단계에 걸쳐 74%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.42(s, 1H), 7.85(t, J = 9.8 Hz, 1H), 7.64(s, 1H), 7.50-7.44(m, 1H), 4.85(d, J = 47.3 Hz, 1H), 3.64(s, 3H), 3.40-3.22(m, 3H), 3.23-2.83(m, 2H), 2.31-2.01(m, 1H), 2.04-1.66(m, 2H), 1.92-1.48(m, 1H). 치환가능한 NH2(x 2) 및 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 449(M+1)
실시예 389 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-에틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 389
라세미 트랜스-3급-부틸 N-[1-(2-에틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트를 15% 메탄올로 AD 칼럼 상에서 키랄 분리하였다. 실시예 369의 절차에 따라 트랜스-3급-부틸 N-[1-(2-에틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트의 제 1 용리 피크를 389로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.88(s, 1H), 7.63(s, 1H), 7.58-7.40(m, 3H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.95(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.24(s, 3H), 3.22-2.97(m, 5H), 2.94-2.82(m, 1H), 2.07-1.95(m, 1H), 1.90-1.49(m, 3H), 1.32(t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 390 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-에틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 390
389의 제조에 따라 SFC 키랄 분리된 트랜스-3급-부틸 N-[1-(2-에틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트의 제 2 용리 피크를 390으로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.88(s, 1H), 7.63(s, 1H), 7.59-7.43(m, 3H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.95(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.24(s, 3H), 3.22-2.98(m, 5H), 2.94-2.83(m, 1H), 2.08-1.95(m, 1H), 1.90-1.47(m, 3H), 1.32(t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 391 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-에틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 391
389의 제조에 따라 SFC 키랄 분리된 트랜스-3급-부틸 N-[1-(2-에틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트의 제 1 용리 피크를 391로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.92(s, 1H), 8.30(t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.60(s, 1H), 7.49-7.39(m, 3H), 7.39-7.27(m, 2H), 3.96(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.26(s, 3H), 3.24-3.02(m, 5H), 2.99-2.88(m, 1H), 2.13-2.01(m, 1H), 1.91-1.78(m, 1H), 1.78-1.51(m, 2H), 1.33(t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 474(M+1)
실시예 392 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-에틸-피라졸-4-일]-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 392
390의 제조에 따라 SFC 키랄 분리된 트랜스-3급-부틸 N-[1-(2-에틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트의 제 2 용리 피크를 392로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.92(s, 1H), 8.30(t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.60(s, 1H), 7.50-7.38(m, 3H), 7.33(t, J = 7.7 Hz, 2H), 3.96(q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.26(s, 3H), 3.23-3.03(m, 5H), 2.98-2.89(m, 1H), 2.13-2.01(m, 1H), 1.91-1.50(m, 3H), 1.33(t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 474(M+1)
실시예 393 5-아미노-N-[5-[(4S)-4-아미노아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(6-하이드록시-2-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 393
단계 A: 마이크로파 반응 바이알 내에, 3급-부틸 N-[4-[[5-[(4S)-4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]-2-브로모-티아졸-5-일]카바메이트(200 mg, 0.31 mmol), 6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2-올(205mg, 0.93mmol) 및 PDCL2(DPPF)(23mg, 0.031mmol)를 아세토니트릴(8mL) 중에 용해시켰다. 칼륨 아세테이트(1.0M, 0.46mL, 0.46 mmol) 및 나트륨 카보네이트(1.0M, 0.46 mL, 0.46mmol)를 첨가하고, 혼합물을 마이크로파로 30분 동안 120℃에서 조사하였다. 혼합물을 냉각시키고, Na2SO4 및 셀라이트를 통해 여과시키고, 농축하고 플래시 크로마토그래피(메탄올 / DCM 0% 내지 10%)로 정제하여 3급-부틸 N-[4-[[5-[(4S)-4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]-2-(6-하이드록시-2-피리딜)티아졸-5-일]카바메이트를 수득하였다.
단계 B: 환저 플라스크 내에, 상기 3급-부틸 N-[4-[[5-[(4S)-4-(벤질옥시카보닐아미노)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]-2-(6-하이드록시-2-피리딜)티아졸-5-일]을 DCM(10 mL) 내에 용해시켰다. 붕소 트리브로마이드(DCM 중의 1.0m, 2.2 mL, 2.21 mmol)를 서서히 첨가하고, 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응을 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 포화 NaHCO3로 염기성화시키고, EA로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 393(10.3mg, 2단계에 걸쳐 7.6%)을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.98(s, 1H), 7.60(t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.50(s, 2H), 7.47(s, 1H), 7.16(d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.49(d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.21-2.98(m, 5H), 1.96-1.71(m, 3H), 1.71-1.45(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 429(M+1)
실시예 394 5-아미노-N-[5-[4-(2-아미노아세틸)-1,4-다이아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 394
단계 A: 362의 제조에 따라 1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이아제판(105 mg, 0.47 mmol), 2-(3급-부톡시카보닐아미노)아세트산(106mg, 0.61mmol) 및 PyBOP(396mg, 0.75mmol)를 DCM(6mL) 중에 용해시켰다. DIPEA(0.49ml, 2.80mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 조 반응 혼합물을 농축하고 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EA/헵탄)로 정제하여 3급-부틸 N-[2-[4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이아제판-1-일]-2-옥소-에틸]카바메이트(정성적 수율)를 수득하였다.
단계 B: 354에 대한 절차에 따라 3급-부틸 N-[2-[4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이아제판-1-일]-2-옥소-에틸]카바메이트를 394(85mg, 3단계에 걸쳐 24%)로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.72(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.59-7.39(m, 4H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.70-3.58(m, 5H), 3.58-3.45(m, 2H), 3.35(d, J = 18.5 Hz, 2H), 3.28-3.22(m, 1H), 3.22-3.08(m, 3H), 1.89-1.70(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 491(M+1)
실시예 395 5-아미노-N-[5-[4-(2-아미노에틸)-1,4-다이아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 395
단계 A: 362의 제조에 따라 1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이아제판(105 mg, 0.47 mmol) 및 3급-부틸 N-(2-브로모에틸)카바메이트(209mg, 0.93mmol)를 아세토니트릴(3mL)에 용해시켰다. DIPEA(0.41mL, 2.33 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 18시간 동안 가열하였다. 조 반응 혼합물을 농축하고 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EA/헵탄)로 정제하여 3급-부틸 N-[2-[4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이아제판-1-일]에틸]카바메이트(정성적 수율)를 수득하였다.
단계 B: 354에 대한 절차에 따라 3급-부틸 N-[2-[4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-1,4-다이아제판-1-일]에틸]카바메이트를 395(17mg)로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.74(s, 1H), 8.33(s, 2H), 7.58-7.43(m, 4H), 7.28(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.66(s, 3H), 3.21(t, J = 5.4 Hz, 4H), 2.82-2.68(m, 6H), 2.62(t, J = 6.1 Hz, 2H), 1.91-1.76(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 477(M+1)
실시예 396 N-[5-(3,4,4a,5,6,8,9,9a-옥타하이드로-2H-[1,4]옥사지노[2,3-d]아제핀-7-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 396
마이크로파 반응 바이알 내에, (4aR,9aR)-2,3,4,4a,5,6,7,8,9,9a-데카하이드로-[1,4]옥사지노[2,3-d]아제핀 다이하이드로클로라이드(509 mg; 2.22mmol) 및 5-클로로-1-메틸-4-니트로-피라졸(322mg, 2.00 mmol)을 아세토니트릴(16 mL) 중에 용해시켰다. DIPEA(3.11mL, 17.77mmol)를 첨가하고, 혼합물을 마이크로파로 130℃에서 60분 동안 조사하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, EA로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 Na2SO4 상에서 건조하고, 농축하여 트랜스-7-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-3,4,4a,5,6,8,9,9a-옥타하이드로-2H-[1,4]옥사지노[2,3-d]아제핀을 제공하였다. DCM(15mL) 중의 상기 화합물의 용액에 다이-3급-부틸-다이카보네이트(727mg, 3.33mmol) 및 DIPEA(1.16mL, 6.66mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 조 반응 혼합물을 농축하고 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EA/헵탄)로 정제하여 라세미 트랜스-3급-부틸-7-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-2,3,4a,5,6,8,9,9a-옥타하이드로-[1,4]옥사지노[2,3-d]아제핀-4-카복실레이트를 수득하고, 이를 20% 메탄올 w/ 0.1% NH4OH로 AD 칼럼 상에서 키랄 분리하였다. SFC 키랄 분리로 트랜스-3급-부틸-7-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-2,3,4a,5,6,8,9,9a-옥타하이드로-[1,4]옥사지노[2,3-d]아제핀-4-카복실레이트의 제 1 용리 피크를 실시예 354의 절차에 따라 396으로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.63(s, 1H), 7.55(s, 1H), 7.54-7.43(m, 3H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.64(s, 3H), 3.24-3.13(m, 4H), 3.13-2.95(m, 3H), 2.65(d, J = 5.6 Hz, 2H), 2.60-2.52(m, 1H), 1.82-1.68(m, 3H), 1.64-1.53(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 490(M+1)
실시예 397 N-[5-(3,4,4a,5,6,8,9,9a-옥타하이드로-2H-[1,4]옥사지노[2,3-d]아제핀-7-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 397
396의 제조에 따라 SFC 키랄 분리된 트랜스-3급-부틸-7-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-2,3,4a,5,6,8,9,9a-옥타하이드로-[1,4]옥사지노[2,3-d]아제핀-4-카복실레이트의 제 2 용리 피크를 397로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.63(s, 1H), 7.55(s, 1H), 7.53-7.40(m, 3H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.64(s, 3H), 3.23-3.13(m, 4H), 3.13-2.94(m, 3H), 2.65(d, J = 6.8 Hz, 2H), 2.60-2.52(m, 1H), 1.86-1.65(m, 3H), 1.65-1.54(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 490(M+1)
실시예 398 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-하이드록시-아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 398
라세미 시스- 3급-부틸 N-[1-[2-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-피라졸-3-일]-5-하이드록시-아제판-4-일]카바메이트를 30% 메탄올로 AD 칼럼 상에서 키랄 분리시켰다. 실시예 369의 절차에 따라 SFC 키랄 분리된 시스- 3급-부틸 N-[1-[2-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-피라졸-3-일]-5-하이드록시-아제판-4-일]카바메이트의 제 1 용리 피크를 398로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.30(s, 1H), 7.76(s, 1H), 7.59-7.41(m, 3H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.55-6.17(m, 1H), 4.56(s, 1H), 4.45-4.28(m, 2H), 3.76(d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.26-3.13(m, 2H), 3.13-2.93(m, 3H), 1.95-1.77(m, 2H), 1.73-1.55(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 514(M+1)
실시예 399 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-하이드록시-아제판-1-일)-1-(2,2-다이플루오로에틸)피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 399
398의 절차에 따라 SFC 키랄 분리하여 시스- 3급-부틸 N-[1-[2-(2,2-다이플루오로에틸)-4-니트로-피라졸-3-일]-5-하이드록시-아제판-4-일]카바메이트의 제 2 용리 피크를 399로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.29(s, 1H), 7.76(s, 1H), 7.62-7.41(m, 3H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.55-6.19(m, 1H), 4.58(s, 1H), 4.45-4.31(m, 2H), 3.76(d, J = 7.9 Hz, 1H), 3.25-3.13(m, 2H), 3.13-2.93(m, 3H), 1.94-1.77(m, 2H), 1.71-1.55(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 514(M+1)
실시예 401 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-사이클로프로필-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 401
라세미 시스- 3급-부틸 N-[1-(2-사이클로프로필-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트를 30% 메탄올로 AD 칼럼 상에서 키랄 분리하였다. 실시예 369의 절차에 따라 SFC 키랄 분리하여 시스- 3급-부틸 N-[1-(2-사이클로프로필-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트의 제 1 용리 피크를 401로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.38(s, 1H), 7.64(s, 1H), 7.58-7.44(m, 3H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.58-3.45(m, 1H), 3.39(d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.27-3.20(m, 1H), 3.27-3.21(m, 1H), 3.19(s, 3H), 3.07(dd, J = 11.4, 6.5 Hz, 2H), 2.13-1.96(m, 1H), 1.85-1.58(m, 4H), 1.08-0.86(m, 4H). LCMS(ES+) m/z 504(M+1)
실시예 402 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-사이클로프로필-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 402
401의 제조에 따라 SFC 키랄 분리하여 시스- 3급-부틸 N-[1-(2-사이클로프로필-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트의 제 2 용리 피크를 402로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.38(s, 1H), 7.64(s, 1H), 7.58-7.41(m, 3H), 7.27(t, J = 8.6 Hz, 2H), 3.60-3.46(m, 1H), 3.40(d, J = 8.6 Hz, 1H), 3.33-3.27(m, 1H), 3.27-3.21(m, 1H), 3.19(s, 3H), 3.15-2.99(m, 2H), 2.11-1.97(m, 1H), 1.85-1.61(m, 4H), 1.09-0.87(m, 4H). LCMS(ES+) m/z 504(M+1)
실시예 403 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-사이클로프로필-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 403
라세미 트랜스- 3급-부틸 N-[1-(2-사이클로프로필-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트를 15% 메탄올로 AD 칼럼 상에서 키랄 분리하였다. 실시예 369의 절차에 따라 SFC 키랄 분리하여 트랜스- 3급-부틸 N-[1-(2-사이클로프로필-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트의 제 1 용리 피크를 403으로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.92(s, 1H), 7.60-7.39(m, 4H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.59-3.45(m, 1H), 3.29-3.02(m, 8H), 2.96-2.85(m, 1H), 2.10-1.96(m, 1H), 1.93-1.83(m, 1H), 1.78-1.65(m, 1H), 1.65-1.49(m, 1H), 1.10-0.85(m, 4H). LCMS(ES+) m/z 504(M+1)
실시예 404 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-사이클로프로필-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 404
403의 제조에 따라 SFC 키랄 분리하여 트랜스- 3급-부틸 N-[1-(2-사이클로프로필-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트의 제 2 용리 피크를 404로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.92(s, 1H), 7.62-7.41(m, 4H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.53(t, J = 5.4 Hz, 1H), 3.28-2.99(m, 8H), 2.96-2.83(m, 1H), 2.10-1.97(m, 1H), 1.92-1.80(m, 1H), 1.79-1.64(m, 1H), 1.64- 1.46(m, 1H), 1.10-0.82(m, 4H). LCMS(ES+) m/z 504(M+1)
실시예 405 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[5-[4-하이드록시-4-(트라이플루오로메틸)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 405
실시예 101에 대한 절차에 따라 1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-4-(트라이플루오로메틸)아제판-4-올 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 405를 연한 갈색 고체(53 mg, 3단계에 걸쳐 29%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.95(s, 1H), 7.94(s, 1H), 7.39-7.28(m, 1H), 7.02(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.21(s, 2H), 3.73(s, 3H), 3.46(ddd, J = 13.7, 8.5, 5.0 Hz, 1H), 3.29-3.18(m, 3H), 2.95(s, 1H), 2.15-1.97(m, 5H), 1.87-1.77(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 517(M+1)
실시예 406 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-에틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 406
라세미 시스- 3급-부틸 N-[1-(2-에틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트를 30% 메탄올로 AD 칼럼 상에서 키랄 분리하였다. 실시예 369에 대한 절차에 따라 SFC 키랄 분리하여 시스- 3급-부틸 N-[1-(2-에틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트의 제 1 용리 피크를 406으로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.20-9.01(s, 1H), 8.39-8.28(s, 1H), 7.69-7.60(s, 1H), 7.60-7.45(m, 3H), 7.35-7.19(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.01-3.89(q, J = 8.1, 7.7 Hz, 2H), 3.56-3.47(d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.26-3.20(s, 3H), 3.21-2.88(m, 1H), 2.15-1.98(s, 0H), 1.96-1.80(s, 0H), 1.76-1.60(m, 2H), 1.37-1.27(t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 407 5-아미노-N-[5-(4-아미노-5-메톡시-아제판-1-일)-1-에틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 407
406의 제조에 따라 SFC 키랄 분리하여 시스- 3급-부틸 N-[1-(2-에틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-메톡시-아제판-4-일]카바메이트의 제 2 용리 피크를 407로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.23-9.02(s, 1H), 8.40-8.32(s, 1H), 7.70-7.61(s, 1H), 7.59-7.45(m, 3H), 7.35-7.20(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.01-3.90(m, 2H), 3.56-3.44(d, J = 7.1 Hz, 1H), 3.27-3.20(s, 3H), 3.21-2.91(m, 1H), 2.13-1.99(m, 1H), 1.94-1.79(m, 1H), 1.77-1.60(m, 2H), 1.36-1.27(t, J = 7.2 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 410 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-5-아미노-4-메톡시사이클로헵트-1-에닐)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 410
실시예 378의 절차에 따라 3급-부틸 (E)-2-메톡시-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-4-에닐카바메이트 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-사이클로프로필티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 410을 모노포메이트 염으로서 회백색 포움(13 mg, 3단계에 걸쳐 4%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.63(s, 1H), 8.35(s, 1H), 7.80(s, 1H), 7.59-7.43(m, 3H), 7.26(t, J = 8.8 Hz, 2H), 5.93(t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.70(s, 3H), 3.26(s, 3H), 3.02-2.96(m, 1H), 2.91(t, J = 9.3 Hz, 1H), 2.68-2.60(m, 1H), 2.42-2.24(m, 4H), 1.98-1.89(m, 2H), 1.48-1.37(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 475(M+1)
실시예 411 5-아미노-N-[5-(4-아미노-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 411
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 411을 연한 갈색 고체(68 mg, 3단계에 걸쳐 55%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.98(s, 1H), 7.91(s, 1H), 7.38-7.25(m, 1H), 7.02(t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.20(s, 2H), 3.73(s, 3H), 3.34-3.26(m, 1H), 3.33-3.08(m, 2H), 3.17-3.09(m, 1H), 1.95-1.78(m, 2H), 1.77-1.66(m, 4H), 1.19(s, 3H). 치환가능한 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 462(M+1)
실시예 412 5-아미노-N-[5-(4-아미노-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 412
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일카바메이트 및 5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 412를 연한 갈색 고체(87 mg, 3단계에 걸쳐 74%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.73(s, 1H), 8.13(t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.85(s, 1H), 7.39-7.30(m, 1H), 7.26-7.11(m, 2H), 6.11(s, 2H), 3.75(s, 3H), 3.40-3.18(m, 3H), 3.17-3.09(m, 1H), 1.98-1.89(m, 1H), 1.90-1.71(m, 5H), 1.23(s, 3H). 치환가능한 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 444(M+1)
실시예 413 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-메톡시사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 413
MeOH(50 mL) 중의 3급-부틸 5-플루오로-2-메톡시-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵틸카바메이트(430 mg, 1.27 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 70℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 오렌지 포움을 제공하였다. 이후 상기 포움을 MeOH(70 mL) 중에 용해시키고, 탄소상 10% 팔라듐(45 mg)을 첨가하였다. 이후 혼합물을 H2(400 psi) 분위기 하에 실온에서 3시간 동안 교반시키고, 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 용매를 감압 하에 제거하여 3급-부틸 5-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2-메톡시사이클로헵틸카바메이트를 함유하는 복합 혼합물을 오렌지 포움(378 mg)으로서 제공하였다. DCM(30 mL) 중의 상기 혼합물(378 mg, 1.13 mmol)의 용액에 DIPEA(1.0 mL, 5.74 mmol), PyBOP(1.5 g, 2.81 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(418 mg, 1.24 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(150 mL)으로 희석시키고, 물(30 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(70 내지 80% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 4개의 부분입체이성질체의 혼합물을 복숭아 고체(240 mg)로서 수득하고, 이를 분취용 HPLC로 분리하였다. 이후 각각의 부분입체이성질체(25 mg, 0.03 mmol)를 MeOH(1 mL) 중의 다이옥산 중의 HCl(4 M, 0.95 mL, 3.80 mmol)로 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 잔사를 MeOH 중에 재-용해시키고, SCX 칼럼 상에 부하하였다. 칼럼을 MeOH로 세척하고, MeOH 중의 7 N 암모니아로 용리하여 413(부분입체이성질체 1)을 회백색 고체(13 mg, 3단계에 걸쳐 2%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.43(s, 1H), 8.21(td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.79(s, 1H), 7.38-7.32(m, 1H), 7.26-7.21(m, 1H), 7.16(dd, J = 11.4, 8.3 Hz, 1H), 6.09(s, 2H), 3.84(s, 3H), 3.36(s, 3H), 3.11-2.99(m, 2H), 2.91-2.84(m, 1H), 2.13-2.02(m, 2H), 1.98-1.91(m, 2H), 1.85(t, J = 12.3 Hz, 4H), 1.58-1.46(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 459(M+1)
실시예 414 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-메톡시사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 414
실시예 413의 절차에 따라 414(부분입체이성질체 2)를 베이지색 고체(16 mg, 3단계에 걸쳐 2%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.39(s, 1H), 8.22-8.15(m, 1H), 7.76(s, 1H), 7.38-7.31(m, 1H), 7.27-7.20(m, 1H), 7.15(dd, J = 11.4, 8.3 Hz, 1H), 6.10(s, 2H), 3.83(s, 3H), 3.35(s, 3H), 3.16-3.12(m, 1H), 3.05(t, J = 9.2 Hz, 1H), 2.95-2.82(m, 1H), 2.15-2.00(m, 2H), 1.98-1.80(m, 5H), 1.64-1.50(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 459(M+1)
실시예 415 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-메톡시사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 415
실시예 413의 절차에 따라 415(부분입체이성질체 3)를 베이지색 고체(15 mg, 3단계에 걸쳐 2%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.37(s, 1H), 8.17(t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.72(s, 1H), 7.38-7.31(m, 1H), 7.26-7.12(m, 2H), 6.11(s, 2H), 3.84(s, 3H), 3.36(s, 3H), 2.99(d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.92(t, J = 7.6 Hz, 1H), 2.17(dd, J = 14.1, 7.0 Hz, 1H), 2.13-1.79(m, 7H), 1.47(d, J = 13.7 Hz, 2 H). LCMS(ES+) m/z 459(M+1).
실시예 416 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-메톡시사이클로헵틸)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 416
실시예 413의 절차에 따라 416(부분입체이성질체 4)을 베이지색 고체(14 mg, 3단계에 걸쳐 2%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.37(s, 1H), 8.17(td, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 7.72(s, 1H), 7.39-7.31(m, 1H), 7.26-7.12(m, 2H), 6.10(s, 2H), 3.84(s, 3H), 3.36(s, 3H), 3.02-2.96(m, 2H), 2.96-2.87(m, 1H), 2.22-2.11(m, 1H), 2.13-1.78(m, 7H), 1.54-1.41(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 459(M+1)
실시예 417 5-아미노-N-[5-[(4S)-4-아미노아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 417
단계 A: 환저 플라스크 내에서, N-[(4S)-1-(4-아미노-2-메틸-피라졸-3-일)아제판-4-일]-2,2,2-트라이플루오로-아세트아미드(733mg, 2.40 mmol), 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)-1H-이미다졸-4-카복실산(955mg, 3.12 mmol), 및 PyBOP(2020mg, 3.84 mmol)를 DCM(40 mL) 중에 용해시켰다. DIPEA(2.51 mL, 14.4 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 농축하고 플래시 크로마토그래피(EA / 헵탄 0% 내지 100%)로 정제하여 3급-부틸 N-[2-브로모-4-[[1-메틸-5-[(4S)-4-[(2,2,2-트라이플루오로아세틸)아미노]아제판-1-일]피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트(1.39g, 95%)를 수득하였다.
단계 B: 마이크로파 반응 바이알 내에서, 3급-부틸 N-[2-브로모-4-[[1-메틸-5-[(4S)-4-[(2,2,2-트라이플루오로아세틸)아미노]아제판-1-일]피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트(100 mg, 0.16 mmol), 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘(110 mg, 0.49 mmol) 및 PD(DPPF)CL2(12 mg, 0.016 mmol)를 아세토니트릴(3 mL)에 용해시켰다. 1.0M KOAc (0.25 mL, 0.25 mmol) 및 1.0M Na2CO3(0.25 mL, 0.25 mmol)를 첨가하고, 반응을 마이크로파로 120℃에서 30분 동안 조사하고, 혼합물을 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과시키고, 농축하고 플래시 크로마토그래피(EA / 헵탄 0% 내지 100%)로 정제하여 3급-부틸 N-[2-(2-플루오로-4-피리딜)-4-[[1-메틸-5-[(4S)-4-[(2,2,2-트라이플루오로아세틸)아미노]아제판-1-일]피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트(60 mg, 58%)를 제공하였다. 이 화합물을 다이옥산 중의 4N HCl(3 mL, 12 mmol) 및 메탄올(2 mL)로 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 메탄올(3 mL) 및 물(1 mL) 중에 용해시키고, 칼륨 카보네이트(67 mg, 0.48 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 1.5시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 물로 희석시키고, EA로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 417을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.04(s, 1H), 8.29(d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.74(d, J = 5.3 Hz, 3H), 7.59(s, 1H), 7.42(s, 1H), 3.66(s, 3H), 3.24-3.01(m, 5H), 1.94- 1.73(m, 3H), 1.67-1.48(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 431(M+1)
실시예 418 5-아미노-N-[5-[(4S)-4-아미노아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-메톡시-3-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 418
417에 대한 절차에 따라 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘을 (2-메톡시-3-피리딜)붕산으로 대체하여 418을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.97(s, 1H), 8.64(d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.22(d, J = 4.6 Hz, 1H), 7.40(s, 1H), 7.32(s, 2H), 7.22-7.13(m, 1H), 4.05(s, 3H), 3.66(s, 3H), 3.25-2.98(m, 5H), 2.04-1.79(m, 3H), 1.77-1.54(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 443(M+1)
실시예 419 5-아미노-N-[5-[(4S)-4-아미노아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(1-메틸피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 419
417에 대한 절차에 따라 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘을 1-메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피라졸로 대체하여 419를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.73(s, 1H), 8.18(d, J = 47.7 Hz, 1H), 7.81(d, J = 11.8 Hz, 1H), 7.53(d, J = 24.5 Hz, 1H), 7.24(s, 2H), 3.87(s, 3H), 3.64(s, 3H), 3.21-3.01(m, 5H), 1.96-1.77(m, 3H), 1.72-1.48(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 416(M+1)
실시예 420 5-아미노-N-[5-[(4S)-4-아미노아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(5-플루오로-3-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 420
417에 대한 절차에 따라 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘을 3-플루오로-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘으로 대체하여 420을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.01(s, 1H), 8.90(s, 1H), 8.58(d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.20(d, J = 10.0 Hz, 1H), 7.61(s, 2H), 7.39(s, 1H), 3.66(s, 3H), 3.22-3.03(m, 5H), 1.99-1.75(m, 3H), 1.69-1.51(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 431(M+1)
실시예 421 5-아미노-N-[5-[(4S)-4-아미노아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3,5-다이메틸이속사졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 421
417에 대한 절차에 따라 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘을 (3,5-다이메틸이속사졸-4-일)붕산으로 대체하여 421을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.60(s, 1H), 8.41(s, 1H), 7.50(s, 1H), 7.39(s, 2H), 3.66(s, 3H), 3.26-2.98(m, 5H), 2.65(s, 3H), 2.47(s, 3H), 2.04-1.75(m, 3H), 1.72-1.50(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 431(M+1)
실시예 422 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(3-플루오로피리딘-4-일)티아졸-4-카복사마이드 422
다이옥산(1.6 mL) 중의 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시-카보닐)-아미노-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일카바메이트(100 mg, 0.16 mmol)의 용액에 3-플루오로-4-(트리부틸스탄닐)피리딘(90 mg, 0.23 mmol), 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0)(9 mg, 0.008 mmol), 구리(I) 아이오다이드(9 mg, 0.05 mmol) 및 리튬 클로라이드(20 mg, 0.48 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 탈기시킨 후, 마이크로파로 120℃에서 1시간 동안 가열하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM)로 정제하여 갈색 오일(100 mg, 96%)을 제공하였다. 다이옥산(3 mL) 중의 상기 오일(100 mg, 0.15 mmol)의 용액에 다이옥산(4 M, 3 mL, 12.0 mmol) 중의 HCl을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 36 시간 동안 교반하였다. 분취용 HPLC로 정제하여 422를 모노포메이트 염으로서 황색 고체(24 mg, 35%)로서 수득하였다. 1H NMR(d6-DMSO) δ 9.11(s, 1H), 8.70(d, J = 2.76 Hz, 1H), 8.51(d, J = 5.10 Hz, 1H), 8.33-8.20(m, 2H), 7.69(s, 2H), 7.49-7.38(m, 1H), 4.78-4.44(m, 1H), 3.66(s, 3H), 3.30-3.10(m, 5H), 2.22-2.05(m, 1H), 2.05-1.96(m, 1H), 1.95-1.90(m, 1H), 1.75-1.62(m, 1H). 치환가능한 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 449(M+1)
실시예 423 5-아미노-2-(2-플루오로페닐)-N-[5-(2-메톡시-8-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-5-일)-1-메틸-피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 423
실시예 413의 절차에 따라 423을 베이지색 고체(109 mg, 3단계에 걸쳐 18%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 10.96(s, 1H), 8.27(t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.37-7.29(m, 1H), 7.22-7.11(m, 2H), 6.06(s, 2H), 3.91(s, 3H), 3.62-3.56(m, 1H), 3.44(s, 3H), 2.37-2.28(m, 1H), 2.19-2.00(m, 5H), 1.89-1.73(m, 3H), 1.52-1.39(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 457(M+1)
실시예 424 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-하이드록시-4-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 424
MeOH(10 mL) 중의 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-하이드록시-4-메틸-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드(200 mg, 0.55 mmol) 및 암모늄 포메이트(700 mg, 2.74 mmol)의 용액에 질소 하에 탄소상 10% 팔라듐(50 mg, 0.13 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 2시간 동안 가열한 후, 실온으로 냉각시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 물(10 mL)과 DCM(50 mL) 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리하고, 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켜 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-하이드록시-4-메틸아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드를 적색 검(140 mg)으로서 제공하였다. DCM(3 mL) 중의 PyBOP(330 mg, 0.62 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(160 mg, 0.45 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반시켰다. DCM(2 mL) 중의 N-(1-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-하이드록시-4-메틸아제판-4-일)-2,2,2-트라이플루오로아세트아미드(140 mg, 0.41 mmol) 및 DIPEA(140 μL, 0.83 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 추가의 DCM(50 mL)을 첨가하고, 혼합물을 물(20 mL)로 세척하였다. 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 THF(2 mL), MeOH(2 mL) 및 물(1 mL)의 혼합물에 용해시키고, 칼륨 카보네이트(200 mg, 1.44 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 18시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 이후 잔사를 DCM(3 mL) 중에 용해시키고, 트라이플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반시키고, 감압 하에 농축시키고, 분취용 HPLC로 정제하여 424를 모노포메이트 염으로서 백색 고체(5 mg, 3단계에 걸쳐 2%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.56(s, 1H), 7.57(s, 1H), 7.53-7.44(m, 1H), 7.15(t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.86-3.72(m, 5H), 3.45-3.35(m, 2H), 3.26-3.14(m, 1H), 2.15-1.90(m, 4H), 1.46(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 478(M+1)
실시예 425 5-아미노-N-[5-[(4S)-4-아미노아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-플루오로-5-메틸-3-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 425
417에 대한 절차에 따라 2-플루오로-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘을 2-플루오로-5-메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘으로 대체하여 425를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.00(s, 1H), 8.55(d, J = 9.7 Hz, 1H), 8.06(s, 1H), 7.51(s, 2H), 7.44(s, 1H), 3.66(s, 3H), 3.22-2.95(m, 5H), 2.38(s, 3H), 1.92-1.77(m, 3H), 1.67-1.42(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 445(M+1)
실시예 426 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3-플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 426
실시예 422의 절차에 따라 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 426을 모노포메이트 염으로서 백색 고체(76 mg, 2단계에 걸쳐 51%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 9.16(s, 1H), 8.71(d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.54(d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.32-8.19(m, 2H), 7.70(s, 2H), 7.45(s, 1H), 3.69(s, 3H, 물 피크 하에), 3.56-3.34(m, 3H, 물 피크 하에), 3.37-3.24(m, 1H), 3.22-3.11(m, 1H), 2.44-2.31(m, 2H), 2.03-1.91(m, 1H), 1.90-1.80(m, 1H). 치환가능한 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 467(M+1)
실시예 428 5-아미노-N-[5-[(4R,5R)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(4-메틸-3-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 428
단계 A: 환저 플라스크 내에서, 3급-부틸 N-[(4R,5R)-1-(4-아미노-2-메틸-피라졸-3-일)-5-플루오로-아제판-4-일]카바메이트(1240mg, 3.80 mmol), 2-브로모-5-(3급-부톡시카보닐아미노)-1H-이미다졸-4-카복실산(1510mg, 4.94 mmol), 및 PyBOP(3.20 g, 6.08 mmol)를 DCM(50 mL) 중에 용해시켰다. DIPEA(3.97 mL, 22.8 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하였다. 혼합물을 농축하고, 플래시 크로마토그래피(EA / 헵탄 0% 내지 100%)로 정제하여 3급-부틸 N-[2-브로모-4-[[5-[(4R,5R)-4-(3급-부톡시카보닐아미노)-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트(2.23 g, 93%)를 수득하였다.
단계 B: 마이크로파 반응 바이알 내에서, 3급-부틸 N-[2-브로모-4-[[5-[(4R,5R)-4-(3급-부톡시카보닐아미노)-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트(161 mg, 0.25 mmol), (4-메틸-3-피리딜)붕산(105 mg, 0.76) 및 PD(DPPF)CL2(19 mg, 0.025 mmol)를 아세토니트릴(3 mL) 중에 용해시켰다. 1.0M KOAc (0.38 mL, 0.38 mmol) 및 1.0M Na2CO3(0.38 mL, 0.38 mmol)를 첨가하고, 반응물을 마이크로파로 125℃에서 30분 동안 조사시키고, 혼합물을 냉각시키고, 셀라이트를 통해 여과시키고, 농축하고 플래시 크로마토그래피(EA / 헵탄 0% 내지 100%)로 정제하여 3급-부틸 N-[4-[[5-[(4R,5R)-4-(3급-부톡시카보닐아미노)-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]-2-(4-메틸-3-피리딜)티아졸-5-일]카바메이트(95 mg, 58%)로서 제공하였다. 이 화합물을 다이옥산 중 4N HCl(3 mL, 12 mmol) 및 메탄올(2 mL)로 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 잔사를 포화 NaHCO3로 염기성화하고, EA로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 428(38mg, 58%)을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.83(s, 1H), 8.79(s, 1H), 8.43(d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.49(s, 2H), 7.47(s, 1H), 7.37(d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.42(dt, J = 8.4, 5.0 Hz, 1H), 3.64(s, 3H), 3.26-3.02(m, 5H), 2.63(s, 3H), 2.18-2.02(m, 1H), 2.02-1.88(m, 1H), 1.87-1.75(m, 1H), 1.66-1.53(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 445(M+1)
실시예 429 5-아미노-N-[5-[(4R,5R)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(1,5-다이메틸피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 429
428에 대한 절차에 따라 (4-메틸-3-피리딜)붕산을 1,5-다이메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피라졸로 대체하여 429를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.61(s, 1H), 7.69(s, 1H), 7.54(s, 1H), 7.23(s, 2H), 4.46(dt, J = 48.2, 6.6 Hz, 1H), 3.78(s, 3H), 3.64(s, 3H), 3.25-3.04(m, 5H), 2.56(s, 3H), 2.21-2.03(m, 1H), 2.03-1.91(m, 1H), 1.91-1.76(m, 1H), 1.71- 1.55(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 448(M+1)
실시예 430 5-아미노-N-[5-[(4R,5R)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-메틸-3-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 430
428에 대한 절차에 따라 (4-메틸-3-피리딜)붕산을 (2-메틸-3-피리딜)붕산으로 대체하여 430을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.76(s, 1H), 8.47(d, J = 4.7 Hz, 1H), 8.04(d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.49(s, 2H), 7.40-7.28(m, 1H), 4.56-4.34(m, 1H), 3.64(s, 3H), 3.26-3.02(m, 5H), 2.82(s, 3H), 2.22-2.03(m, 1H), 2.03-1.89(m, 1H), 1.89-1.76(m, 1H), 1.70-1.51(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 445(M+1)
실시예 431 5-아미노-N-[5-[(4R,5R)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-메틸-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 431
428에 대한 절차에 따라 (4-메틸-3-피리딜)붕산을 (2-메틸-4-피리딜)붕산으로 대체하여 431을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.97(s, 1H), 8.48(d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.64(d, J = 6.5 Hz, 3H), 7.58(d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.45(s, 1H), 4.61-4.37(m, 1H), 3.65(s, 3H), 3.26-3.06(m, 5H), 2.22-2.06(m, 1H), 2.06-1.93(m, 1H), 1.93-1.76(m, 1H), 1.70-1.54(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 445(M+1)
실시예 432 5-아미노-N-[5-[(4R,5R)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(6-시아노-2-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 432
428에 대한 절차에 따라 (4-메틸-3-피리딜)붕산을 6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2-카보니트릴로 대체하여 432를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.03(s, 1H), 8.44(d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.14(t, J = 7.9 Hz, 1H), 8.00(d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.74(s, 2H), 7.44(s, 1H), 4.67-4.41(m, 1H), 3.65(s, 3H), 3.28-3.05(m, 5H), 2.23-2.06(m, 1H), 2.06-1.94(m, 1H), 1.94-1.77(m, 1H), 1.75-1.57(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 456(M+1)
실시예 433 5-아미노-N-[5-(4-아미노-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 433
라세미 412를 SFC로 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체 433을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.02(s, 1H), 8.42(s, 1H), 8.29(t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.45(d, J = 7.2 Hz, 3H), 7.42-7.26(m, 2H), 3.66(s, 3H), 3.24-2.95(m, 4H), 1.95-1.53(m, 6H), 1.23(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 444(M+1)
실시예 434 5-아미노-N-[5-(4-아미노-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 434
라세미 412를 SFC로 키랄 분리하여 434를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.03(s, 1H), 8.42(s, 1H), 8.28(t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.45(d, J = 11.1 Hz, 3H), 7.41-7.25(m, 2H), 3.66(s, 3H), 3.24-2.98(m, 4H), 1.96-1.52(m, 6H), 1.21(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 444(M+1)
실시예 435 5-아미노-N-[5-(4-아미노-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 435
라세미 411을 SFC로 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체 435를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.96(s, 1H), 7.58(s, 1H), 7.56-7.43(m, 2H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.65(s, 3H), 3.23-2.94(m, 5H), 1.97-1.48(m, 6H), 1.15(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 462(M+1)
실시예 436 5-아미노-N-[5-(4-아미노-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 436
라세미 411을 SFC로 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체 436을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.96(s, 1H), 7.57(s, 1H), 7.56-7.44(m, 2H), 7.27(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.65(s, 3H), 3.25-2.90(m, 5H), 1.93-1.51(m, 6H), 1.15(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 462(M+1)
실시예 437 5-아미노-N-[5-[(4R,5R)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(1,3-다이메틸피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 437
실시예 428에 대한 절차에 따라 (4-메틸-3-피리딜)붕산을 1,3-다이메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피라졸로 대체하여 437을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.55(s, 1H), 8.08(s, 1H), 7.57(s, 1H), 7.22(s, 2H), 4.46(dt, J = 48.3, 6.7 Hz, 1H), 3.78(s, 3H), 3.65(s, 3H), 3.26-3.03(m, 5H), 2.42(s, 3H), 2.23-2.05(m, 1H), 2.05-1.92(m, 1H), 1.92-1.77(m, 1H), 1.70-1.53(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 448(M+1)
실시예 438 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3,5-다이플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 438
실시예 422에 대한 절차에 따라 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트 및 3,5-다이플루오로-4-(트리부틸스탄닐)피리딘으로부터 출발하여 438을 백색 고체(68 mg, 2단계에 걸쳐 43%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.83(s, 1H), 8.67(s, 2H), 7.78(s, 2H), 7.61-7.56(m, 1H), 3.79-3.56(m, 4H), 3.46-3.33(m, 1H), 3.37-3.16(m, 2H), 3.16-3.06(m, 1H), 2.35-2.08(m, 2H), 1.91-1.78(m, 1H), 1.81-1.60(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 485(M+1)
실시예 439 5-아미노-N-(5-((4S,5S)-4-아미노-5-플루오로아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(3,5-다이플루오로피리딘-4-일)티아졸-4-카복사마이드 439
실시예 422에 대한 절차에 따라 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시-카보닐)-아미노-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-5-플루오로아제판-4-일카바메이트 및 3,5-다이플루오로-4-(트리부틸스탄닐)피리딘으로부터 출발하여 439를 백색 고체(42 mg, 2단계에 걸쳐 28%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.84(s, 1H), 8.65(s, 2H), 7.75(s, 2H), 7.58(s, 1H), 4.44(dtd, J = 47.9, 8.0, 3.6 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.26-3.08(m, 5H), 2.19-2.05(m, 1H), 2.04-1.79(m, 2H), 1.73-1.50(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 467(M+1)
실시예 440 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-메톡시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3,5-다이플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 440
실시예 422에 대한 절차에 따라 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시-카보닐-아미노)-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6-메톡시-6-메틸아제판-4-일카바메이트 및 3,5-다이플루오로-4-(트리부틸스탄닐)피리딘으로부터 출발하여 440을 모노포메이트 염으로서 백색 고체(67 mg, 2단계에 걸쳐 43%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.84(s, 1H), 8.70(s, 2H), 8.45(s, 1H), 7.82(s, 2H), 7.70(s, 1H), 3.68(s, 3H), 3.52(t, J = 11.2 Hz, 2H), 3.36-3.19(m, 3H), 3.13-3.04(m, 1H), 3.04(s, 3H), 2.98(d, J = 14.4 Hz, 1H), 2.18(d, J = 14.2 Hz, 1H), 2.12-1.98(m, 1H), 1.85-1.75(m, 1H), 1.68-1.57(m, 1H), 1.03(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 493(M+1)
실시예 441 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-메톡시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3-플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 441
실시예 422에 대한 절차에 따라 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시-카보닐-아미노)-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6-메톡시-6-메틸아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 441을 모노포메이트 염으로서 백색 고체(72 mg, 2단계에 걸쳐 48%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 9.15(s, 1H), 8.71(d, J = 2.7 Hz, 1H), 8.58(d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.41(s, 1H), 8.23(dd, J = 5.2, 6.4 Hz, 1H), 7.72(s, 2H), 7.59(s, 1H), 3.69(s, 3H), 3.54(t, J = 10.6 Hz, 1H), 3.33-3.21(m, 2H), 3.25-2.91(m, 5H), 2.22-1.95(m, 2H), 1.82-1.72(m, 1H), 1.74-1.61(m, 1H), 1.05(s, 3H). 치환가능한 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 475(M+1)
실시예 442 5-아미노-N-[5-[(4R,5R)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(5-시아노-2-플루오로-펜일)티아졸-4-카복사마이드 442
실시예 428에 대한 절차에 따라 (4-메틸-3-피리딜)붕산을 (5-시아노-2-플루오로-펜일)붕산으로 대체하여 442를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.22(s, 1H), 8.86(d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.91(s, 1H), 7.67-7.57(m, 1H), 7.53(s, 2H), 7.35(s, 1H), 4.56-4.34(m, 1H), 3.65(s, 3H), 3.24-3.00(m, 5H), 2.20-2.03(m, 1H), 2.03-1.89(m, 1H), 1.79(s, 1H), 1.67-1.50(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 473(M+1)
실시예 443 5-아미노-N-[5-[(4R,5R)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이메틸-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 443
실시예 428에 대한 절차에 따라 (4-메틸-3-피리딜)붕산을 2,6-다이메틸-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘으로 대체하여 443을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.95(s, 1H), 7.63(s, 2H), 7.45(s, 1H), 7.44(s, 2H), 4.60-4.35(m, 1H), 3.65(s, 3H), 3.27-3.00(m, 5H), 2.47(s, 6H), 2.23-2.06(m, 1H), 2.06-1.90(m, 1H), 1.90-1.76(m, 1H), 1.71-1.54(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 459(M+1).
실시예 444 5-아미노-N-[5-[(4R,5R)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(5-시아노-3-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 444
실시예 428에 대한 절차에 따라 (4-메틸-3-피리딜)붕산을 5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-3-카보니트릴로 대체하여 444를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.29(s, 1H), 9.03(s, 1H), 8.97(s, 1H), 8.74(s, 1H), 7.64(s, 2H), 7.41(s, 1H), 4.44(dtd, J = 11.5, 8.2, 3.2 Hz, 1H), 3.64(s, 3H), 3.27-3.00(m, 5H), 2.20-2.04(m, 1H), 2.04-1.89(m, 1H), 1.89-1.78(m, 1H), 1.66 - 1.52(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 456(M+1)
실시예 445 5-아미노-N-[5-[(4R,5R)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,5-다이메틸-3-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 445
실시예 428에 대한 절차에 따라 (4-메틸-3-피리딜)붕산을 2,5-다이메틸-3-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘으로 대체하여 445를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.70(s, 1H), 7.92(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.51(s, 1H), 7.42(s, 2H), 7.19(d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.43(dt, J = 47.9, 6.1 Hz, 1H), 3.64(s, 3H), 3.27-2.99(m, 5H), 2.77(s, 3H), 2.47(s, 3H), 2.16-2.05(m, 1H), 2.04-1.89(m, 1H), 1.87-1.69(m, 3H), 1.68-1.52(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 459(M+1)
실시예 446 5-아미노-N-[5-[(5S)-5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3-플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 446
라세미 426의 SFC에 의한 키랄 분리로 단일 거울상 이성질체 446을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.09(s, 1H), 8.70(d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.54(d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.22(t, J = 5.9 Hz, 1H), 7.68(s, 2H), 7.49(s, 1H), 3.78-3.57(m, 4H), 3.53-3.35(m, 1H), 3.29-3.04(m, 3H), 2.37-2.11(m, 2H), 1.95-1.67(m, 4H). LCMS(ES+) m/z 467(M+1)
실시예 447 5-아미노-N-[5-[(5R)-5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3-플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 447
라세미 426의 SFC에 의한 키랄 분리로 단일 거울상 이성질체 447을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.11(s, 1H), 8.70(d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.53(d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.27(s, 1H), 8.26-8.16(m, 1H), 7.68(s, 2H), 7.47(s, 1H), 3.79-3.62(m, 4H), 3.51-3.08(m, 3H), 2.40-2.19(m, 2H), 2.02-1.86(m, 1H), 1.86 -1.70(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 467(M+1)
실시예 448 5-아미노-N-[5-(6-아미노-1-옥사-9-아자스피로[3.6]데칸-9-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 448
단계 A: 메틸 트라이페닐포스포늄 브로마이드(3.09g, 8.49 mmol)를 톨루엔(25 mL) 중에 현탁시켰다. THF 중의 칼륨 3급-부톡사이드(1.0 mol/L)(7.07 mL, 7.074 mmol)를 첨가하고, 혼합물이 밝은 황색으로 변하였다. 실온에서 4시간 동안 교반시킨 후, 5mL 톨루엔 중의 3급-부틸 N-[(4S)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-6-옥소-아제판-4-일]카바메이트(1000 mg, 2.83 mmol)(키랄 분리에서의 제 2 용리 피크)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반시킨 후, 포화 암모늄 클로라이드로 켄칭하고, EA로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 농축하고 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EA/헵탄)로 정제하여 3급-부틸 N-[(4R)-6-메틸렌-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]카바메이트(699 mg, 70%)를 수득하였다.
단계 B: MCPBA(335 mg, 1.49 mmol, 77 질량%)를 DCM(12 mL) 중의 3급-부틸 N-[(4R)-6-메틸렌-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]카바메이트(350 mg, 1.00 mmol)의 교반된 용액에 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응을 포화 NaHCO3으로 켄칭하고, DCM으로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 농축하고 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EA/헵탄)로 정제하여 3급-부틸 N-[(5S)-8-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-2-옥사-8-아자스피로[2.6]노난-5-일]카바메이트(316 mg, 86%)를 수득하였다.
단계 C: DMSO(5mL) 중의 나트륨 하이드라이드(115 mg, 2.87 mmol, 60 질량%)의 교반된 서스펜션에 트라이메틸설폭소늄 아이오다이드(644 mg, 2.87 mmol)를 첨가하고, 서스펜션을 60℃에서 2시간 동안 교반시키고, 맑은 용액을 얻었다. 에폭사이드 3급-부틸 N-[(5S)-8-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-2-옥사-8-아자스피로[2.6]노난-5-일]카바메이트(320 mg, 0.87 mmol)를 DMSO(2 mL) 중에 용해시키고, 반응 혼합물에 첨가했다. 생성된 맑은 용액을 65℃에서 2일 동안 교반하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응을 물로 켄칭하고, EA로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 농축하고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EA/헵탄)로 정제하여 3급-부틸((9S)-6-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-1-옥사-6-아자스피로[3.6]데칸-9-일)카바메이트(114 mg, 34%)를 수득하였다.
단계 D: MeOH(30 mL) 중의 상기 화합물의 용액을 H-큐브(등록상표)(50 bar, 50℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 3급-부틸((9S)-6-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-1-옥사-6-아자스피로[3.6]데칸-9-일)카바메이트를 갈색 오일로서 제공하였다. DCM(10 mL) 중의 상기 오일의 용액에 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(131 mg, 0.39 mmol), PyBOP(251 g, 0.48mmol) 및 DIPEA(0.31 mL, 1.79 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 희석시켰다. 유기층을 물(20 mL)로 세척하고, 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/헵탄)로 정제하여 3급-부틸 N-[(6S)-9-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-3-옥사-9-아자스피로[3.6]데칸-6-일]카바메이트(185mg, 90%)를 수득하였다.
단계 E: 상기 화합물을 TFA(5 mL) 및 DCM(5 mL)로 실온에서 30분 동안 교반시키고, 용매를 감압 하에 제거하고, 포화 NaHCO3로 염기성화하고, 에틸 아세테이트로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 448(11 mg, 8.4%)을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 7.60(s, 1H), 7.58-7.43(m, 3H), 7.30(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.39-4.19(m, 2H), 3.66(s, 3H), 3.44(d, J = 13.9 Hz, 1H), 3.24-3.13(m, 1H), 3.09-2.89(m, 3H), 2.48-2.38(m, 1H), 2.34-2.20(m, 2H), 1.90-1.74(m, 2H), 1.69-1.51(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 490(M+1)
실시예 449 5-아미노-N-[5-[(5R)-5-아미노-3-메틸렌-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 449
448의 제조에 따라 3급-부틸 N-[(4R)-6-메틸렌-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]카바메이트를 449로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.73(s, 1H), 7.56(s, 1H), 7.55-7.41(m, 3H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.89(d, J = 9.7 Hz, 2H), 3.86-3.71(m, 2H), 3.67(s, 3H), 3.16-3.05(m, 1H), 3.05-2.92(m, 1H), 2.85(s, 1H), 2.44-2.28(m, 1H), 1.82-1.69(m, 2H), 1.53-1.35(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 460(M+1)
실시예 450 5-아미노-N-[5-[(4S,5S)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-(트리듀테리오메틸)피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 450
실시예 147의 절차에 따라 5-클로로-1-트리듀테리오메틸-4-니트로-1H-피라졸을 450으로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.83(s, 1H), 7.62-7.41(m, 4H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.41(dtd, J = 47.9, 8.2, 3.6 Hz, 1H), 3.24-3.02(m, 5H), 2.18-2.02(m, 1H), 2.02-1.89(m, 1H), 1.89-1.78(m, 1H), 1.69(br, 2H), 1.64 -1.49(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 469(M+1)
실시예 451 5-아미노-N-[5-[(4R,5R)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-(트리듀테리오메틸)피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 451
실시예 150의 절차에 따라 5-클로로-1-트리듀테리오메틸-4-니트로-1H-피라졸을 451로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.83(s, 1H), 7.60-7.40(m, 4H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.41(dtd, J = 48.0, 8.2, 3.6 Hz, 1H), 3.24-3.02(m, 5H), 2.19-2.03(m, 1H), 2.03-1.88(m, 1H), 1.88-1.77(m, 1H), 1.69(br, 2H), 1.66- 1.52(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 469(M+1)
실시예 452 5-아미노-N-[5-(6-아미노-1-옥사-9-아자스피로[3.6]데칸-9-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 452
실시예 448의 절차에 따라 제 1 용리 피크 3급-부틸 N-[(4R)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-6-옥소-아제판-4-일]카바메이트를 452로 전환시켰다. LCMS(ES+) m/z 490(M+1)
실시예 453 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 453
448의 제조에 따라 3급-부틸 N-[(4R)-6-메틸렌-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]카바메이트를 453으로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.65(s, 1H), 8.41(s, 1H), 7.61-7.43(m, 4H), 7.28(td, J = 8.8, 2.0 Hz, 2H), 3.66(d, J = 3.0 Hz, 4H), 3.33-3.01(m, 3H), 2.96-2.77(m, 2H), 2.19-1.58(m, 4H), 1.49(dd, J = 24.1, 11.2 Hz, 1H), 0.86(dd, J = 15.5, 6.8 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 462(M+1)
실시예 454 5-아미노-N-[5-[(5S)-5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3,5-다이플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 454
라세미 438을 SFC로 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체 454를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.81(s, 1H), 8.66(d, J = 1.1 Hz, 2H), 7.76(s, 2H), 7.60(s, 1H), 3.76-3.59(m, 4H), 3.49-3.34(m, 1H), 3.28-3.02(m, 3H), 2.37-2.09(m, 2H), 1.92-1.61(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 485(M+1)
실시예 455 5-아미노-N-[5-[(5R)-5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3,5-다이플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 455
라세미 438을 SFC로 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체 455를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.79(s, 1H), 8.66(s, 2H), 8.28(s, 1H), 7.76(s, 2H), 7.58(s, 1H), 3.78-3.60(m, 4H), 3.51-3.23(m, 3H), 3.18-3.05(m, 1H), 2.42-2.15(m, 2H), 1.99-1.73(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 485(M+1)
실시예 456 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 456
MeOH(40 mL) 중의 (E)-3급-부틸 3-하이드록시-5-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)사이클로헵트-4-에닐카바메이트(620 mg, 1.76 mmol)의 용액을 H-큐브(등록상표)(충분한 H2, 70℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C 카트리지)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 3급-부틸 5-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-하이드록시사이클로헵틸카바메이트를 황색 오일로서 제공하였다. DCM(50 mL) 중의 상기 아민의 용액에 DIPEA(0.92 mL, 5.28 mmol), PyBOP(1.37 g, 2.64 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(690 mg, 1.94 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(100 mL)으로 희석시키고, 물(50 mL)로 세척하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(75% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 3급-부틸(5-(4-(5-3급-부톡시카보닐아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)- 1-메틸-1H-피라졸-5-일)-3-하이드록시사이클로헵틸카바메이트를 황색 포움(890 mg)으로서 제공하였다. 상기 포움(890 mg, 1.34 mmol)을 DCM(50 mL) 중에 용해시키고, 데스-마틴(Dess-Martin) 퍼아이오디난(684 mg, 1.61 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반하였다. 혼합물을 20% 나트륨 티오설페이트/포화 수성 NaHCO3의 1/1 수용액(100 mL)으로 켄칭하고, 층들을 추출하고, MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 밝은 황색 고체(500 mg)를 제공하였다. 상기 고체의 일부(356 mg, 0.54 mmol)를 건조한 THF(5 mL) 중에 용해하고, 0℃에서 냉각시킨 후, 메틸마그네슘 브로마이드의 용액(Et2O 중의 3 M, 0.72 mL, 2.15 mmol)을 적가했다. 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반시킨 후, 메틸마그네슘 브로마이드의 추가의 양(Et2O 중 3 M, 0.3 mL, 0.9 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 추가로 6 시간 동안 교반시키고, 암모늄 클로라이드의 포화 용액(30 mL)으로 켄칭하고, EtOAc(50 mL)로 추출하고, 물로 세척하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 밝은 황색 오일을 제공하였다. 수득된 4개의 부분입체이성질체를 분취용 HPLC에 의해 분리하여 부분입체이성질체 1을 백색 고체(22 mg, 5단계에 걸쳐 2%)로서 제공하였다. 상기 고체(22 mg, 0.03 mmol)를 다이옥산 중의 HCl(4 M, 1 mL, 4.0 mmol) 및 MeOH(1 mL)에 용해시키고, 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 456을 오렌지 고체(15 mg, 96%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.79(s, 1H), 8.45(s, 2H), 7.59-7.50(m, 2H), 7.33-7.25(m, 2H), 3.78(s, 3H), 3.58-3.05(m, 1H), 3.17(s, 1H), 2.85-2.77(m, 1H), 2.08-1.92(m, 4H), 1.88-1.78(m, 5H), 1.55-1.44(m, 1H), 1.17(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 477(M+1)
실시예 457 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-((4R,5S)-4,5-다이하이드록시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 457
3급-부탄올(35 mL) 중의 (Z)-3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(1-메틸-5-(2,3,6,7-테트라하이드로-1H-아제핀-1-일)-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트(1.28 g, 2.41 mmol)의 용액에 물(35 mL) 중의 N-메틸모폴린-N-옥사이드(0.80 g, 6.80 mmol)의 용액, 그 다음 오스뮴 테트록사이드의 용액(3급-부탄올 중 2.5% 중량, 2.5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 72시간 동안 교반시킨 후, DCM(100 mL)으로 희석시키고, 나트륨 다이티오나이트의 포화 용액(50 mL)으로 켄칭하고, 유기층을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM)로 정제하여 3급-부틸 2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-(5-(4,5-신-다이하이드록시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일카바모일)티아졸-5-일카바메이트를 갈색 검(0.12 g)으로서 제공하였다. 상기 검(0.12 g, 0.21 mmol)을 다이옥산 중 HCl(4 M, 10 mL, 40.0 mmol) 및 MeOH(2 mL)에 용해시키고, 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 457을 백색 고체(36 mg, 2단계에 걸쳐 3%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.74(s, 1H), 7.60-7.50(m, 4H), 7.34-7.26(m, 2H), 4.41(d, J = 4.1 Hz, 2H), 3.91(t, J = 4.7 Hz, 2H), 3.67(s, 3H), 2.96(ddd, J = 12.8, 7.7, 4.4 Hz, 2H), 2.55-2.52(m, 2H), 2.02-1.92(m, 2H), 1.72-1.64(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 465(M+1)
실시예 458 5-아미노-N-[5-[4-(아미노메틸)-4-메톡시-1-피페리딜]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 458
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸(4-메톡시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)피페리딘-4-일)메틸카바메이트 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산으로부터 출발하여 458을 회백색 고체(30 mg, 3단계에 걸쳐 7%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.56(s, 1H), 7.56-7.42(m, 2H), 7.15(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.74(s, 3H), 3.42-3.33(m, 4H), 3.23(s, 2H), 3.12-2.95(m, 3H), 1.97(d, J = 13.6 Hz, 2H), 1.76-1.66(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 478(M+1)
실시예 459 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로-4-메톡시-펜일)티아졸-4-카복사마이드 459
다이메틸 에터(3 mL) 중의 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트(200 mg, 0.31 mmol)의 용액에 2,6-다이플루오로-4-메톡시페닐붕산(101 mg, 0.54 mmol), [1,1'-비스(다이페닐포스피노)페로센]다이클로로팔라듐(II), 다이클로로메탄과의 착물(50 mg, 0.06 mmol), 나트륨 카보네이트(67 mg, 0.63 mmol) 및 물(1 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 5분 동안 탈기시킨 후, 마이크로파로 120℃에서 2.5 시간 동안 조사하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/이소헥산)로 정제하여 갈색 오일을 제공하였다. MeOH(10 mL) 중의 상기 오일의 용액에 다이옥산 중의 HCl(4 M, 10 mL, 40.0 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 40℃에서 3시간 동안 가열하였다. 분취용 HPLC로 정제하여 459를 백색 고체(10 mg, 2단계에 걸쳐 6%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.82(s, 1H), 7.54(s, 1H), 7.43(s, 2H), 6.99-6.88(m, 2H), 3.85(s, 3H), 3.79-3.50(m, 4H), 3.47-3.33(m, 1H), 3.29-3.16(m, 2H), 3.15-3.05(m, 1H), 2.29-2.09(m, 2H), 1.90-1.78(m, 1H), 1.77-1.65(m, 1H), 1.62(s, 2H). LCMS(ES+) m/z 514(M+1)
실시예 460 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(1,5-다이메틸피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 460
실시예 459의 절차에 따라 3급-부틸 1-(4-(5-(3급-부톡시카보닐-아미노)-2-브로모티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-6,6-다이플루오로아제판-4-일카바메이트로부터 출발하여 460을 적색 고체(13 mg, 2단계에 걸쳐 8%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.63(s, 1H), 7.74-7.65(m, 1H), 7.59-7.52(m, 1H), 7.25(s, 2H), 3.79(s, 3H), 3.82-3.55(m, 4H), 3.48-3.34(m, 1H), 3.29-3.05(m, 3H), 2.57(s, 3H), 2.28-2.05(m, 2H), 1.92-1.80(m, 1H), 1.84-1.56(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 466(M+1)
실시예 461 5-아미노-N-[5-[(5R)-5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(6-시아노-2-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 461
단계 A: 실시예 166의 절차에 따라 (R)-3급-부틸(6,6-다이플루오로-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)카바메이트를 3급-부틸 N-[2-브로모-4-[[5-[(5R)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)-3,3-다이플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트로 전환시켰다.
단계 B: 실시예 428의 절차에 따라 3급-부틸 N-[2-브로모-4-[[5-[(5R)-5-(3급-부톡시카보닐아미노)-3,3-다이플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트를 6-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-다이옥사보롤란-2-일)피리딘-2-카보니트릴과 반응시켜 461을 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 474(M+1)
실시예 462 5-아미노-N-[5-[(5R)-5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(1,3-다이메틸피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 462
실시예 461의 절차에 따라 462를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.57(s, 1H), 8.07(s, 1H), 7.57(s, 1H), 7.22(s, 2H), 3.79(s, 3H), 3.74-3.57(m, 4H), 3.49-3.34(m, 1H), 3.26-3.04(m, 3H), 2.43(d, J = 9.1 Hz, 3H), 2.31-2.04(m, 2H), 1.86(d, J = 14.1 Hz, 1H), 1.82-1.59(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 466(M+1)
실시예 463 5-아미노-N-[5-[(5R)-5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(1,5-다이메틸피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 463
실시예 461의 절차에 따라 463을 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.62(s, 1H), 8.28(s, 1H), 7.68(s, 1H), 7.53(s, 1H), 7.23(s, 2H), 3.78(s, 3H), 3.75-3.58(m, 4H), 3.52-3.35(m, 1H), 3.35-3.23(m, 2H), 3.21-3.06(m, 1H), 2.56(s, 3H), 2.37-2.18(m, 2H), 1.92(d, J = 13.3 Hz, 1H), 1.80(dd, J = 14.9, 9.7 Hz, 1H). LCMS(ES+) m/z 466(M+1)
실시예 464 5-아미노-N-[5-[(5R)-5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-메틸-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 464
실시예 461의 절차에 따라 464를 제조하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.99(s, 1H), 8.50(d, J = 5.2 Hz, 1H), 8.27(s, 1H), 7.64(d, J = 5.6 Hz, 3H), 7.57(d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.47(s, 1H), 3.75-3.60(m, 4H), 3.54-3.37(m, 1H), 3.37-3.22(m, 2H), 3.22-3.05(m, 1H), 2.53(s, 3H), 2.41-2.22(m, 2H), 1.99-1.87(m, 1H), 1.87-1.70(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 463(M+1)
실시예 465 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 465
라세미 혼합물 3급-부틸 N-[5-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸]카바메이트를 SFC로 키랄 분리하고, 그 다음 다이옥산 중의 4N HCl로 탈보호하여 465를 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.66(s, 1H), 8.44(s, 1H), 7.56(s, 1H), 7.53(t, J = 8.4 Hz, 1H), 7.47(s, 2H), 7.27(t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.77(s, 3H), 3.53-3.10(m, 2H), 2.11-1.99(m, 1H), 1.99-1.78(m, 4H), 1.72-1.53(m, 3H), 1.15(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 477(M+1)
실시예 466 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 466
라세미 혼합물 3급-부틸 N-[5-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸]카바메이트를 SFC로 키랄 분리하고, 그 다음 다이옥산 중의 4N HCl 로 탈보호하여 466을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 477(M+1)
실시예 467 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 467
라세미 혼합물 3급-부틸 N-[5-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸]카바메이트를 SFC로 키랄 분리하고, 그 다음 다이옥산 중의 4N HCl 로 탈보호하여 467을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 477(M+1)
실시예 468 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 468
라세미 혼합물 3급-부틸 N-[5-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸]카바메이트를 SFC로 키랄 분리하고, 그 다음 다이옥산 중의 4N HCl 로 탈보호하여 468을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.70(s, 1H), 7.85(s, 2H), 7.60-7.49(m, 1H), 7.46(s, 1H), 7.28(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.78(s, 3H), 3.72-3.42(m, 1H), 2.99-2.84(m, 1H), 2.10-1.94(m, 3H), 1.94-1.74(m, 4H), 1.65(d, J = 13.6 Hz, 1H), 1.26(s, 3H).LCMS(ES+) m/z 477(M+1)
실시예 469 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 469
라세미 혼합물 3급-부틸 N-[5-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸]카바메이트를 SFC로 키랄 분리하고, 그 다음 다이옥산 중의 4N HCl로탈보호하여 469를 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.70(s, 1H), 7.85(s, 2H), 7.60-7.50(m, 1H), 7.46(s, 1H), 7.28(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.79(s, 3H), 3.74-3.43(m, 1H), 2.99-2.84(m, 1H), 2.12-1.95(m, 3H), 1.95-1.71(m, 4H), 1.65(d, J = 13.5 Hz, 1H), 1.26(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 477(M+1)
실시예 470 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 470
라세미 혼합물 3급-부틸 N-[5-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-3-하이드록시-3-메틸-사이클로헵틸]카바메이트를 SFC로 키랄 분리하고, 그 다음 다이옥산 중의 4N HCl 로 탈보호하여 470을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.66(s, 1H), 8.43(s, 1H), 7.56(s, 1H), 7.53(dd, J = 11.6, 5.2 Hz, 1H), 7.48(s, 2H), 7.27(t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.76(s, 3H), 3.51-3.29(m, 2H), 2.13-2.00(m, 1H), 2.00-1.79(m, 4H), 1.72-1.54(m, 3H), 1.16(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 477(M+1)
실시예 471 5-아미노-N-[5-[(4S,5S)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3,5-다이플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 471
라세미 439를 SFC로 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체 471을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.81(s, 1H), 8.64(d, J = 0.9 Hz, 2H), 7.73(s, 2H), 7.58(s, 1H), 4.57-4.34(m, 1H), 3.65(s, 3H), 3.26-3.04(m, 5H), 2.20-1.78(m, 5H), 1.71-1.51(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 467(M+1)
실시예 472 5-아미노-N-[5-[(4S,5S)-4-아미노-5-플루오로-아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3,5-다이플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 472
라세미 439를 SFC로 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체 472를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.82(s, 1H), 8.64(d, J = 1.1 Hz, 2H), 7.73(s, 2H), 7.58(s, 1H), 4.44(dtd, J = 47.9, 8.2, 3.6 Hz, 1H), 3.65(s, 3H), 3.24-3.04(m, 5H), 2.23-1.71(m, 5H), 1.68-1.51(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 467(M+1)
실시예 473 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-메톡시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3,5-다이플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 473
라세미 440을 SFC로 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체 473을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.85(s, 1H), 8.67(s, 2H), 7.76(s, 2H), 7.70(s, 1H), 3.66(s, 3H), 3.31-3.23(m, 2H), 3.24-3.13(m, 1H), 3.12 - 2.92(m, 5H), 2.00(d, J = 14.1 Hz, 1H), 1.88-1.75(m, 1H), 1.70-1.55(m, 1H), 1.42(dd, J = 14.3, 10.6 Hz, 1H), 0.99(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 493(M+1)
실시예 474 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-메톡시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3,5-다이플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 474
라세미 440을 SFC로 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체 474를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.85(s, 1H), 8.67(s, 2H), 7.76(s, 2H), 7.70(s, 1H), 3.66(s, 3H), 3.29-3.11(m, 3H), 3.12 - 2.89(m, 5H), 2.00(d, J = 14.1 Hz, 1H), 1.89-1.76(m, 1H), 1.67-1.55(m, 1H), 1.41(dd, J = 14.4, 10.5 Hz, 1H), 0.99(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 493(M+1)
실시예 475 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-메톡시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3-플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 475
라세미 441을 SFC로 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체 475를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.20(s, 1H), 8.69(d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.57(d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.31-8.16(m, 1H), 7.69(s, 2H), 7.68(s, 1H), 3.67(s, 3H), 3.46(t, J = 10.2 Hz, 1H), 3.36-3.18(m, 2H), 3.09-2.91(m, 5H), 2.09(d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.94-1.81(m, 1H), 1.77-1.59(m, 1H), 1.50(dd, J = 14.2, 10.7 Hz, 1H), 1.02(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 475(M+1)
실시예 476 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3-메톡시-3-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(3-플루오로-4-피리딜)티아졸-4-카복사마이드 476
라세미 441을 SFC로 키랄 분리하여 단일 거울상 이성질체 476을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.20(s, 1H), 8.69(d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.57(d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.29-8.21(m, 1H), 7.69(s, 2H), 7.68(s, 1H), 3.67(s, 3H), 3.46(t, J = 10.3 Hz, 1H), 3.38-3.21(m, 2H), 3.09-2.94(m, 5H), 2.09(d, J = 14.2 Hz, 1H), 1.95-1.82(m, 1H), 1.75-1.63(m, 1H), 1.50(dd, J = 14.2, 10.7 Hz, 1H), 1.02(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 475(M+1)
실시예 477 5-아미노-2-(2-플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(1-옥사-6,9-다이아자스피로[3.6]데칸-6-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 477
실시예 448의 절차에 따라 3급-부틸 4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-6-옥소-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 라세미 477로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.46(s, 1H), 8.35(t, J = 6.9 Hz, 1H), 7.63(s, 1H), 7.51-7.27(m, 5H), 4.28(dt, J = 15.1, 6.3 Hz, 2H), 3.67(s, 3H), 3.45(q, J = 14.5 Hz, 2H), 3.23-3.02(m, 4H), 2.88-2.74(m, 2H), 2.42-2.29(m, 1H), 2.29-2.14(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 458(M+1).
실시예 478 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(1-옥사-6,9-다이아자스피로[3.6]데칸-6-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 478
실시예 448의 절차에 따라 3급-부틸 4-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-6-옥소-1,4-다이아제판-1-카복실레이트를 라세미 478로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.73(s, 1H), 7.67(s, 1H), 7.61-7.41(m, 3H), 7.29(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.30-4.15(m, 2H), 3.66(s, 3H), 3.48-3.33(m, 2H), 3.21-2.98(m, 4H), 2.81(t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.38-2.25(m, 1H), 2.25-2.09(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 458(M+1).
실시예 479 5-아미노-N-[5-[4-(아미노메틸)-4-하이드록시-1-피페리딜]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 479
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 N-[[4-하이드록시-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-4-피페리딜]메틸]카바메이트로부터 출발하여 479를 크림색 고체(37 mg, 33단계에 걸쳐 5%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 8.55(s, 1H), 7.52-7.43(m, 2H), 7.20-7.10(m, 2H), 3.74(s, 3H), 3.49-3.38(m, 2H), 3.09-3.03(m, 2H), 2.92(s, 2H), 1.85-1.73(m, 4H). LCMS(ES+) m/z 464(M+1)
실시예 480 (R)-5-아미노-2-(2-플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(1-옥사-6,9-다이아자스피로[3.6]데칸-6-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 480
라세미 5-아미노-2-(2-플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(1-옥사-6,9-다이아자스피로[3.6]데칸-6-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 477을 SFC로 키랄 분리하여 480(제1 용리 피크)을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.46(s, 1H), 8.41-8.32(m, 1H), 7.63(s, 1H), 7.51-7.30(m, 5H), 4.36-4.19(m, 2H), 3.67(s, 3H), 3.45(q, J = 14.5 Hz, 2H), 3.26-3.04(m, 4H), 2.88-2.71(m, 2H), 2.42-2.29(m, 1H), 2.29-2.16(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 458(M+1).
실시예 481 (S)-5-아미노-2-(2-플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(1-옥사-6,9-다이아자스피로[3.6]데칸-6-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 481
5-아미노-2-(2-플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(1-옥사-6,9-다이아자스피로[3.6]데칸-6-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 477의 라세미 혼합물을 SFC로 키랄 분리하여 481(제 2 용리 피크)을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.46(s, 1H), 8.36(dd, J = 11.1, 4.8 Hz, 1H), 7.63(s, 1H), 7.52-7.31(m, 5H), 4.36-4.21(m, 2H), 3.67(s, 3H), 3.45(q, J = 14.5 Hz, 2H), 3.21-3.05(m, 4H), 2.91-2.72(m, 2H), 2.41-2.31(m, 1H), 2.26-2.14(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 458(M+1)
실시예 482 (R)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(1-옥사-6,9-다이아자스피로[3.6]데칸-6-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 482
478의 라세미 혼합물을 SFC로 키랄 분리하여 482(제1 용리 피크)를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.71(s, 1H), 7.67(s, 1H), 7.60-7.44(m, 3H), 7.28(dd, J = 14.5, 5.9 Hz, 2H), 4.30-4.16(m, 2H), 3.66(s, 3H), 3.40(q, J = 14.7 Hz, 2H), 3.19-3.00(m, 4H), 2.82(t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.38-2.26(m, 1H), 2.23-2.13(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 458(M+1).
실시예 483 (S)-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-(1-옥사-6,9-다이아자스피로[3.6]데칸-6-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 483
478의 라세미 혼합물을 SFC로 키랄 분리하여 483(제 2 용리 피크)을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.71(s, 1H), 8.22(s, 1H), 7.66(s, 1H), 7.62-7.44(m, 3H), 7.29(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.30-4.17(m, 2H), 3.66(s, 3H), 3.48-3.31(m, 2H), 3.20-2.99(m, 4H), 2.82(t, J = 5.7 Hz, 2H), 2.38-2.25(m, 1H), 2.25-2.12(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 458(M+1).
실시예 484 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-[1-메틸-5-(1-옥사-4,9-다이아자스피로[5.5]운데칸-9-일)피라졸-4-일]티아졸-4-카복사마이드 484
실시예 121에 대한 절차에 따라 3급-부틸 3-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-11-옥사-3,8-다이아자스피로[5.5]운데칸-8-카복실레이트로부터 출발하여 484를 회백색 고체(15 mg, 3단계에 걸쳐 30%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.56(s, 1H), 7.80(s, 1H), 7.39-7.16(m, 1H), 7.06-6.96(m, 2H), 6.12(s, 2H), 3.75(s, 3H), 3.69(t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.40-3.30(m, 2H), 2.99-2.92(m, 2H), 2.88-2.83(m, 2H), 2.79(s, 2H), 2.11-2.00(m, 2H), 1.74-1.63(m, 2H). 알킬 NH는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 490(M+1)
실시예 485 5-아미노-N-[5-(5-아미노-4-메톡시-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 485
MeOH(10 mL) 중의 3급-부틸 N-(1-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일)-5-메톡시-5-메틸-아제판-4-일]카바메이트(0.12 g, 0.17 mmol)의 용액에 다이옥산 중의 HCl(4 M, 10 mL, 0.04 mol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반시키고, 감압 하에 농축시켰다. 분취용 HPLC로 정제하여 485를 담황색 고체(64 mg, 74%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 9.63(s, 1H), 7.69(s, 1H), 7.59-7.48(m, 3H), 7.31-7.22(m, 2H), 3.61(s, 3H), 3.31-3.25(m, 1H), 3.14-3.03(m, 2H), 3.03(s, 3H), 2.99-2.89(m, 1H), 2.11-2.02(m, 1H), 1.92-1.82(m, 1H), 1.79-1.59(m, 4H), 1.47(dd, J = 14.5, 6.2 Hz, 1H), 1.19(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 486 N-[5-[(3aR,8aS)-2-옥소-3a,4,5,7,8,8a-헥사하이드로-3H-옥사졸로[4,5-d]아제핀-6-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 486
DMF(2 mL) 중의 3급-부틸 N-((4R,5S)-1-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일)-5-하이드록시-아제판-4-일)카바메이트(199 mg, 0.30 mmol)의 교반된 용액에 0℃에서 나트륨 하이드라이드(오일 중 60% 분산물, 26 mg, 0.66 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온으로 2시간 동안 가온시키고, 물(3 mL)로 켄칭하고, 생성 침전물을 여과 제거하고 감압 하에 건조하였다. 수성 층을 EtOAc(3 x 3 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시키고, 잔사를 조기에 수집된 침전물과 조합시켰다. 다이옥산 중 HCl(4 M, 10 mL) 중의 상기 물질(159 mg, 0.27 mmol) 및 MeOH(5 mL)의 용액을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하였다. 분취용 HPLC로 정제하여 486을 백색 고체(55 mg, 2단계에 걸쳐 41%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.50(s, 1H), 7.79(s, 1H), 7.37-7.28(m, 1H), 7.05(t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.14(s, 2H), 5.08-5.00(m, 1H), 4.87(s, 1H), 4.26(td, J = 9.3, 3.5 Hz, 1H), 3.75(s, 3H), 3.45-3.33(m, 2H), 3.16-3.07(m, 2H), 2.34-2.27(m, 2H), 2.20-2.09(m, 1H), 2.06-1.97(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 490(M+1)
실시예 487 [(4S,5R)-5-아미노-1-[4-[[5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]아제판-4-일] 아세테이트 487
DCM(2 mL) 중의 3급-부틸 N-((4R,5S)-1-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일)-5-하이드록시-아제판-4-일]카바메이트(200 mg, 0.3 mmol) 및 DMAP(55 mg, 0.45 mmol)의 용액에 아세트산 무수물(0.43 mL, 0.45 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(3 mL)로 켄칭하고, EtOAc(3 x 3 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔사를 실리카겔 크로마토그래피(0 내지 5% MeOH/DCM)로 정제하여 회백색 고체를 수득하였다. 다이옥산 중의 HCl(4 M, 10 mL) 및 MeOH(5 mL) 중 상기 고체(176 mg, 0.25 mmol)의 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC, 그 다음 실리카겔 크로마토그래피(0 내지 10% MeOH/DCM 중의 7 M NH3)로 정제하여 487을 백색 고체(52 mg, 2단계에 걸쳐 41%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 7.64(s, 1H), 7.51-7.42(m, 1H), 7.15(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.19(dt, J = 10.1, 2.6 Hz, 1H), 4.13-4.09(m, 1H), 3.76(s, 3H), 3.53(ddd, J = 13.5, 9.7, 3.3 Hz, 1H), 3.35-3.20(m, 2H), 3.17-3.09(m, 1H), 2.29-2.18(m, 1H), 2.09-1.86(m, 5H), 1.78-1.69(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 506(M+1)
실시예 488 N-[5-[(3aS,8aR)-2-옥소-3a,4,5,7,8,8a-헥사하이드로-3H-옥사졸로[4,5-d]아제핀-6-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 488
실시예 486의 절차에 따라 3급-부틸 N-((4S,5R)-1-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일)-5-하이드록시-아제판-4-일)카바메이트로부터 출발하여 488을 백색 고체(69 mg, 2단계에 걸쳐 52%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.50(s, 1H), 7.79(s, 1H), 7.37-7.28(m, 1H), 7.05(t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.14(s, 2H), 5.08-5.00(m, 1H), 4.87(s, 1H), 4.26(td, J = 9.3, 3.5 Hz, 1H), 3.75(s, 3H), 3.45-3.33(m, 2H), 3.16-3.07(m, 2H), 2.34-2.27(m, 2H), 2.20-2.09(m, 1H), 2.06-1.97(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 490(M+1)
실시예 489 [(4R,5S)-5-아미노-1-[4-[[5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]아제판-4-일] 아세테이트 489
실시예 487의 절차에 따라 3급-부틸 N-((4S,5R)-1-(4-((5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐)아미노)-2-메틸-피라졸-3-일)-5-하이드록시-아제판-4-일]카바메이트로부터 출발하여 489를 백색 고체(40 mg, 2단계에 걸쳐 31%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d4-MeOD) δ 7.64(s, 1H), 7.51-7.42(m, 1H), 7.15(t, J = 8.7 Hz, 2H), 4.19(dt, J = 10.1, 2.6 Hz, 1H), 4.13-4.09(m, 1H), 3.76(s, 3H), 3.53(ddd, J = 13.5, 9.7, 3.3 Hz, 1H), 3.35-3.20(m, 2H), 3.17-3.09(m, 1H), 2.29-2.18(m, 1H), 2.09-1.86(m, 5H), 1.78-1.69(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 506(M+1)
실시예 490 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(5-((4R,5R)-4,5-다이하이드록시아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 490
MeOH(25 mL) 중의 3급-부틸 N-(2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-((5-(4-하이드록시-5-((4-메톡시페닐)메톡시)아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일)카바모일)티아졸-5-일)카바메이트(0.50 g, 0.73 mmol)의 용액에 10% Pd/C(0.20 g)를 첨가하였다. 혼합물을 수소의 50 psi 분위기 하에 실온에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트(등록상표)를 통해 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 무색 고체를 제공하였다. 조 고체를 DCM(10 mL) 중에 용해시키고, TFA(10 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 18시간 동안 실온에서 교반하고, 감압 하에 농축시키고, 조 잔사를 MeOH/2 M 수성 NaOH의 1/1 혼합물(40 mL)에 용해시키고, 50℃에서 18시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 물(30 mL)로 희석시키고, DCM(50 mL) 및 EtOAc(2 x 50 mL)로 추출하였다. 합친 유기층들을 상 분리 카트리지에 통과시키고, 감압 하에 농축시켰다. 분취용 HPLC로 정제하여 490을 담황색 고체(86 mg, 2단계에 걸쳐 25%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.72-8.63(m, 1H), 7.61-7.45(m, 4H), 7.31-7.23(m, 2H), 4.57(s, 2H), 3.63(s, 3H), 3.52(d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.20-3.05(m, 4H), 1.94-1.86(m, 2H), 1.74-1.64(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 465(M+1)
실시예 491 5-아미노-N-[5-[4-아미노-5-(트리듀테리오메톡시)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 491
실시예 101 및 333의 절차에 따라 트리듀테리오메틸 아이오다이드로부터 출발하여, 491을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.93(s, 1H), 8.30(t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.52(s, 1H), 7.50-7.27(m, 5H), 3.64(s, 3H), 3.24-3.03(m, 5H), 3.02-2.87(m, 1H), 2.13-2.01(m, 1H), 1.92-1.79(m, 1H), 1.78-1.53(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 463(M+1)
실시예 492 5-아미노-N-[5-[4-아미노-5-(트리듀테리오메톡시)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 492
실시예 101 및 333의 절차에 따라 트리듀테리오메틸로부터 출발하여, 492를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.87(s, 1H), 7.63-7.41(m, 4H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.63(s, 3H), 3.25-2.98(m, 5H), 2.98-2.84(m, 1H), 2.07-1.93(m, 1H), 1.95-1.80(m, 1H), 1.79-1.63(m, 1H), 1.63-1.49(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 481(M+1)
실시예 493 5-아미노-N-[5-[(5S)-5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일]-1-(트리듀테리오메틸)피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 493
실시예 101 및 112의 절차에 따라 5-클로로-1-트리듀테리오메틸-4-니트로-1H-피라졸을 493으로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.82(s, 1H), 7.61-7.40(m, 4H), 7.28(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.72-3.56(m, 1H), 3.50-3.33(m, 1H), 3.27-3.03(m, 3H), 2.29-2.08(m, 2H), 1.91-1.78(m, 1H), 1.78-1.46(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 487(M+1)
실시예 494 5-아미노-N-[5-[(5R)-5-아미노-3,3-다이플루오로-아제판-1-일]-1-(트리듀테리오메틸)피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 494
실시예 101 및 112의 절차에 따라 5-클로로-1-트리듀테리오메틸-4-니트로-1H-피라졸을 494로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.82(s, 1H), 7.60-7.40(m, 4H), 7.28(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.72-3.55(m, 1H), 3.48-3.33(m, 1H), 3.27-3.02(m, 3H), 2.29-2.05(m, 2H), 1.90-1.78(m, 1H), 1.78-1.49(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 487(M+1)
실시예 495 5-아미노-N-[5-(5-아미노-3,3-다이플루오로-5-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 495
MeOH(5 mL) 중의 3급-부틸 N-(4-((5-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-3,3-다이플루오로-5-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일)카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일)카바메이트(0.36 g, 0.51 mmol)의 용액에 다이옥산 중의 HCl(4 M, 0.02 mol, 5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반시키고, 감압 하에 농축시켰다. 1/1 MeOH/DCM(250 mL), 그 다음 MeOH(250 mL)로 세척하고, MeOH(200 mL) 중 1 N NH3로 용리하는 SCX 카트리지로 정제하여 495를 담황색 포움(250 mg, 87%)으로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.92(s, 1H), 7.85(s, 1H), 7.33(tt, J = 8.4, 6.1 Hz, 1H), 7.07-6.99(m, 2H), 6.28-6.06(m, 2H), 3.78-3.74(m, 3H), 3.65-3.40(m, 3H), 3.29-3.20(m, 1H), 2.41-2.16(m, 2H), 1.96-1.85(m, 1H), 1.77(dt, J = 14.7, 4.6 Hz, 1H), 1.26(s, 3H). 치환가능한 것은 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 498(M+1)
실시예 496 5-아미노-N-(5-((3S,4R)-4-(아미노메틸)-3-에틸-4-메톡시피페리딘-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 496
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 N-((3-에틸-4-메톡시-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-4-피페리딜)메틸)카바메이트로부터 출발하여 496을 백색 고체(21 mg, 3단계에 걸쳐 33%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.52(s, 1H), 7.80(s, 1H), 7.36-7.27(m, 1H), 7.07-6.97(m, 2H), 6.15(s, 2H), 3.75(s, 3H), 3.18(s, 3H), 3.20-3.03(m, 4H), 3.03(d, J = 13.8 Hz, 1H), 2.91(d, J = 13.8 Hz, 1H), 1.89-1.74(m, 2H), 1.72-1.45(m, 5H), 0.89(t, J = 7.5 Hz, 3H). LCMS(ES+) m/z 506(M+1)
실시예 497 5-아미노-N-[5-(5-아미노-1-옥사-8-아자스피로[3.6]데칸-8-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 497
단계 A: THF/물(15 mL/ 3 mL) 중의 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(502 mg, 1.78 mmol)의 용액(키랄 분리 상의 제 2 용리 피크)을 트라이페닐포스핀(476 mg, 1.78 mmol)으로 처리하고, 반응 혼합물을 60℃에서 5시간 동안 가열하였다. EtOAc(100 mL)를 첨가하고, 혼합물을 포화 수성 NaHCO3 용액(20 mL)으로 세척하였다. 수성 층을 EtOAc(50 mL)로 추출하고, 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 감압 하에 농축시켜 오일을 제공하였다. 무수 DCM(20 mL) 중의 상기 오일의 용액에 0℃에서 DIPEA(0.85 mL, 4.88 mmol) 및 트라이플루오로아세트산 무수물(0.29 mL, 2.05 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 4시간 동안 교반하였다. 물(20 mL)을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/헵탄)로 정제하여 2,2,2-트라이플루오로-N-(5-하이드록시-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-일)아세트아미드를 황색 오일(626 mg, 88%)로서 수득하였다.
단계 B: DCM 중의 상기 오일의 용액에 데스-마틴(Dess-Martin) 퍼아이오디난(1.0 당량) 및 나트륨 바이카보네이트(4.0 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반시킨 후, 물을 첨가하고, 혼합물을 DCM(100 mL)으로 추출하였다. 유기층을 분리하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EtOAc/헵탄)로 정제하여 (S)-2,2,2-트라이플루오로-N-(1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-옥소아제판-4-일)아세트아미드를 수득하였다.
단계 C: 실시예 448의 절차에 따라 (S)-2,2,2-트라이플루오로-N-(1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-옥소아제판-4-일)아세트아미드를 2,2,2-트라이플루오로-N-[(10S)-7-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-3-옥사-7-아자스피로[3.6]데칸-10-일]아세트아미드로 전환시켰다. SFC로 키랄 분리하여 두 개의 피크를 단일 거울상 이성질체들로서 제공하였다. 제 2 용리 피크를 실시예 417에 기재된 절차에 따라 탈보호하여 497을 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.72-8.61(m, 1H), 7.56(s, 1H), 7.54-7.40(m, 2H), 7.25(t, J = 8.6 Hz, 2H), 3.65(s, 3H), 3.44-3.33(m, 2H), 3.08-2.86(m, 4H), 2.73-2.57(m, 1H), 1.93-1.66(m, 5H), 1.66-1.53(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 490(M+1)
실시예 498 5-아미노-N-[5-(5-아미노-1-옥사-8-아자스피로[3.6]데칸-8-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 498
497의 제조에 따라 SFC 키랄 분리하여 2,2,2-트라이플루오로-N-[(10S)-7-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-3-옥사-7-아자스피로[3.6]데칸-10-일]아세트아미드의 제 1 용리 피크를 498로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.67(s, 1H), 7.60-7.41(m, 3H), 7.25(t, J = 8.6 Hz, 2H), 3.65(s, 3H), 3.44-3.33(m, 2H), 3.08-2.86(m, 4H), 2.65-2.54(m, 1H), 1.91-1.69(m, 5H), 1.65-1.50(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 490(M+1)
실시예 499 5-아미노-N-(5-((1R,5R,6S)-6-아미노-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-3-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 499
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 N-[3-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-8-옥사-3-아자바이사이클로[3.2.1]옥탄-6-일]카바메이트로부터 출발하여 499 를 포메이트 염으로서 회백색 고체(12 mg, 3단계에 걸쳐 28%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.41(s, 1H), 8.10(s, 1H), 7.75(s, 1H), 7.38-7.29(m, 1H), 7.08-6.97(m, 2H), 6.14(s, 2H), 4.53(d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.00(s, 1H), 3.87(d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.77(s, 3H), 3.51-3.40(m, 2H), 2.86(d, J = 11.2 Hz, 1H), 2.68-2.53(m, 3H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 462(M+1)
실시예 500 5-아미노-N-[5-[5-아미노-4-하이드록시-4-(2-하이드록시에틸)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 500
단계 A: 실시예 498의 절차에 따라 5-아지도-1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)아제판-4-올(502 mg, 1.78 mmol)(키랄 분리 상의 제1 용리 피크)을 (R)-2,2,2-트라이플루오로-N-(1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-옥소아제판-4-일)아세트아미드로 전환시켰다.
단계 B: 실시예 448에 기재된 절차에 따라 (R)-2,2,2-트라이플루오로-N-(1-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-5-옥소아제판-4-일)아세트아미드를 2,2,2-트라이플루오로-N-[(10R)-7-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-3-옥사-7-아자스피로[3.6]데칸-10-일]아세트아미드로 전환시켰다. SFC로 키랄 분리하여 2개의 피크를 단일 거울상 이성질체들로서 제공하였다. 제 1 용리 피크를 실시예 448에 기재된 절차 및 실시예 417에 기재된 탈보호 절차에 따라 500(옥세탄 고리-개방된 생성물)으로서 트라이플루오로아세트아미드를 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.14(s, 1H), 8.21(s, 1H), 7.61-7.41(m, 4H), 7.25(t, J = 8.6 Hz, 2H), 3.64(s, 3H), 3.47-3.37(m, 2H), 3.22-2.83(m, 5H), 2.72(s, 1H), 2.34-2.17(m, 2H), 1.94-1.82(m, 1H), 1.82-1.59(m, 2H), 1.59 - 1.37(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 508(M+1)
실시예 501 5-아미노-N-[5-(5-아미노-1-옥사-8-아자스피로[3.6]데칸-8-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 501
실시예 498의 절차에 따라 SFC 키랄 분리하여 2,2,2-트라이플루오로-N-[(10S)-7-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-3-옥사-7-아자스피로[3.6]데칸-10-일]아세트아미드의 제 2 용리 피크를 501로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.67(s, 1H), 8.39(s, 1H), 7.61-7.38(m, 4H), 7.26(t, J = 8.7 Hz, 2H), 3.66(s, 3H), 3.52-3.17(m, 2H), 3.12-2.93(m, 4H), 2.92-2.78(m, 1H), 2.00-1.77(m, 5H), 1.72-1.57(m, 1H). LCMS(ES+) m/z 490(M+1)
실시예 502 5-아미노-N-[5-(5-아미노-4-메톡시-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 502
라세미 혼합물 3급-부틸 N-[1-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-5-메톡시-5-메틸-아제판-4-일]카바메이트를 SFC로 키랄 분리시키고, 그 다음 다이옥산 중의 4N HCl로 탈보호시켜 502를 단일 거울상 이성질체로 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.56(s, 1H), 7.68(s, 1H), 7.61-7.43(m, 3H), 7.26(t, J = 8.6 Hz, 2H), 3.61(s, 3H), 3.18-3.05(m, 3H), 3.02(s, 3H), 2.91(t, J = 8.2 Hz, 1H), 2.15-2.02(m, 1H), 1.96-1.82(m, 1H), 1.78-1.63(m, 1H), 1.55-1.40(m, 1H), 1.18(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 503 5-아미노-N-[5-(5-아미노-4-메톡시-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 503
라세미 혼합물 3급-부틸 N-[1-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-5-메톡시-5-메틸-아제판-4-일]카바메이트를 SFC로 키랄 분리하고, 그 다음 다이옥산 중의 4N HCl로 탈보호하여 503을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 9.54(s, 1H), 7.68(s, 1H), 7.60-7.41(m, 3H), 7.26(t, J = 8.6 Hz, 2H), 3.61(s, 3H), 3.18-3.05(m, 3H), 3.01(s, 3H), 2.92(d, J = 7.1 Hz, 1H), 2.13-2.00(m, 1H), 1.96-1.81(m, 1H), 1.76-1.62(m, 1H), 1.56-1.40(m, 1H), 1.19(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 492(M+1)
실시예 504 5-아미노-N-[5-(5-아미노-4-메톡시-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 504
라세미 혼합물 3급-부틸 N-[5-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-2-메톡시-사이클로헵틸]카바메이트를 SFC로 키랄 분리하고, 그 다음 다이옥산 중의 4N HCl로 키랄 분리하여 504를 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.88(s, 1H), 8.32(s, 1H), 7.52(s, 1H), 7.49-7.26(m, 4H), 7.03-6.91(m, 1H), 6.70 6.58(m, 1H), 3.76(s, 3H), 3.24(s, 3H), 3.17-3.10(m, 1H), 3.02-2.91(m, 1H), 2.27-2.12(m, 1H), 2.07-1.84(m, 3H), 1.76-1.62(m, 2H), 1.57-1.42(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 459(M+1)
실시예 505 5-아미노-N-[5-(5-아미노-4-메톡시-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 505
라세미 혼합물 3급-부틸 N-[5-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-2-메톡시-사이클로헵틸]카바메이트를 SFC로 키랄 분리하고, 그 다음 다이옥산 중의 4N HCl로 키랄 분리하여 505를 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.89(s, 1H), 8.27(s, 1H), 7.53-7.24(m, 5H), 7.03-6.91(m, 1H), 6.67-6.51(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.24(s, 3H), 3.12-2.93(m, 2H), 2.00-1.61(m, 7H), 1.58-1.39(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 459(M+1)
실시예 506 5-아미노-N-[5-(5-아미노-4-메톡시-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 506
라세미 혼합물 3급-부틸 N-[5-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-2-메톡시-사이클로헵틸]카바메이트를 SFC로 키랄 분리하고, 그 다음 다이옥산 중의 4N HCl로 키랄 분리하여 506을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.89(s, 1H), 8.27(s, 1H), 7.55-7.24(m, 5H), 7.05-6.91(m, 1H), 6.67-6.54(m, 1H), 3.75(s, 3H), 3.24(s, 3H), 3.12-2.96(m, 2H), 1.97-1.62(m, 7H), 1.60-1.36(m, 2H). LCMS(ES+) m/z 459(M+1)
실시예 507 5-아미노-N-[5-(5-아미노-4-메톡시-4-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 507
라세미 혼합물 3급-부틸 N-[5-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2-플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-2-메톡시-사이클로헵틸]카바메이트를 SFC로 키랄 분리하고, 그 다음 다이옥산 중의 4N HCl로 탈보호하여 507을 단일 거울상 이성질체로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.87(s, 1H), 8.33(s, 1H), 7.52(s, 1H), 7.48-7.26(m, 4H), 7.02-6.89(m, 1H), 6.66-6.55(m, 1H), 3.76(s, 3H), 3.24(s, 3H), 3.17-3.07(m, 1H), 3.02-2.89(m, 1H), 2.26-2.09(m, 1H), 2.12-1.86(m, 3H), 1.77-1.60(m, 2H), 1.61-1.40(m, 3H). LCMS(ES+) m/z 459(M+1)
실시예 508 5-아미노-N-[5-(2,6-다이아자스피로[3.5]노난-6-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 508
단계 A: 5-클로로-1-메틸-4-니트로-피라졸(0.16 g; 0.99 mmol) 및 3급-부틸 2,8-다이아자스피로[3.5]노난-2-카복실레이트(0.2 g, 0.88 mmol)를 부탄-1-올(2 mL) 중에 현탁하고, 그 다음 DIPEA(0.7 mL; 3.9616 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 120℃에서 2일 동안 가열하였다. 모든 용매를 증발시키고, 조 혼합물을 다이클로로메탄 중의 0-30% 에틸 아세테이트의 구배로 용리하는 실리카겔로 정제하였다. 3급-부틸 6-(1-메틸-4-니트로-1H-피라졸-5-일)-2,6-다이아자스피로[3.5]노난-2-카복실레이트(200mg)를 황색 오일로 57% 수율로 수득하였다. MS(ESI) m/z: 352.2 [M+H+].
단계 B: 3급-부틸 8-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-2,8-다이아자스피로[3.5]노난-2-카복실레이트(200 mg, 0.57 mmol)를 메탄올(20 mL) 중에 용해시켰다. 용액을 50 bar의 수소 압력 및 1 mL/분의 유속에서, H-큐브를 이용하여 Pd/C의 카트리지를 통해 50℃에서 수소화시켰다. 반응을 시스템(1 mL/min의 유속, 80min)을 통해 4 사이클로 완료하였다. 증발시킨 후, 원하는 생성물 3급-부틸 6-(4-아미노-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2,6-다이아자스피로[3.5]노난-2-카복실레이트(184 mg, 100%)를 밝은 갈색 고체로서 수득하였다. MS(ESI) m/z: 322.3 [M+H+].
단계 C: 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복실산(224.4 mg, 0.63 mmol)을 다이클로로메탄(2 mL) 중에 현탁시키고, 그 다음 다이클로로메탄(2 mL) 중의 HATU(269.3 mg, 0.69 mmol), DIPEA(299.0 mg, 2.3 mmol) 및 3급-부틸 8-(4-아미노-2-메틸-피라졸-3-일)-2,8-다이아자스피로[3.5]노난-2-카복실레이트(184 mg, 0.57 mmol)를 첨가하였다. 서스펜션을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 포화 NaHCO3(5 mL)를 반응 혼합물에 첨가했다. 분리시킨 후, 수성 층을 다이클로로메탄(5 mL x 2)으로 추출하였다. 합친 유기층들을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 증발시켰다. 생성 조 혼합물을 다이클로로메탄 중의 0-6% 메탄올의 구배로 용리하는 실리카겔 칼럼 상에서 정제하였다. 백색 고체(336 mg, 89%)를 원하는 생성물, 3급-부틸 6-(4-(5-((3급-부톡시카보닐)아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사미도)-1-메틸-1H-피라졸-5-일)-2,6-다이아자스피로[3.5]노난-2-카복실레이트로서 수득하였다. MS(ESI) m/z: 674.5 [M+Na+].
단계 D: 3급-부틸 8-[4-[[5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카보닐]아미노]-2-메틸-피라졸-3-일]-2,8-다이아자스피로[3.5]노난-2-카복실레이트(336 mg, 0.51 mmol)를 메탄올(2 mL) 및 다이클로로메탄(2 mL) 중에 용해시킨 후, 1,4-다이옥산(2 mL) 중의 4 M의 염화수소를 첨가하였다. 용액을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 증발시킨 후, 조 혼합물을 회백색 고체(345 mg)로서 수득하였다. 조 혼합물을 역상 HPLC로 정제하여 508을 백색 고체(66 mg, 28%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 8.70(s, 1H), 7.55-7.45(m, 4H), 7.26(t, J = 8.8 Hz, 2H), 3.66(s, 3H), 3.54(s, 1H), 3.22(s, 4H), 3.12(s, 2H), 2.94(t, J = 5.3 Hz, 2H), 1.68-1.60(m, 2H), 1.58-1.50(m, 2H). MS(ESI) m/z: 460.2 [M+H+].
실시예 509 5-아미노-2-(2,6-다이플루오로페닐)-N-(1-메틸-5-((3aR,8aS)-3a-메틸-2-옥소테트라하이드로-2H-옥사졸로[5,4-d]아제핀-6(7H,8H,8aH)-일)-1H-피라졸-4-일)티아졸-4-카복사마이드 509
MeOH(10 mL) 중의 3a-메틸-6-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-3,4,5,7,8,8a-헥사하이드로옥사졸로[4,5-d]아제핀-2-온(195 mg, 0.66 mmol) 및 1-메틸-1,4-사이클로헥사다이엔(0.52 mL, 4.60 mmol)의 용액에 탄소상 10% 팔라듐(35 mg, 0.33 mmol)을 질소 하에 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. TLC가 주로 출발 물질을 표시하기 때문에 촉매를 여과 제거하고, 신선한 탄소상 10% 팔라듐(35 mg, 0.33 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 16시간 동안 가열하였다. TLC가 주로 출발 물질을 표시하기 때문에 촉매를 여과 제거하고, 용적이 최대 14 mL인 MeOH로 만들고, 혼합물을 H-큐브(등록상표)(충분한 수소 모드, 75℃, 유속: 1 mL/min, 30 mm 10% Pd/C)에 통과시켰다. 용매를 감압 하에 제거하여 조 아미노-피라졸(175 mg)을 제공하였다. DMF(5 mL) 중의 HATU(351 mg, 0.92 mmol) 및 5-(3급-부톡시카보닐아미노)-2-(2,6-다이플루오로페닐)-티아졸-4-카복실산(259 mg, 0.73 mmol)의 용액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. DMF(5 mL) 중의 조 아미노-피라졸(175 mg, 0.66 mmol) 및 DIPEA(0.18 mL, 1.06 mmol)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 DCM 이후 MeOH로 분쇄하였다. 잔여 고체를 DMSO(3 mL) 및 메탄올(5 mL) 중에 현탁시키고, 다이옥산 중의 HCl의 용액(4 M, 15 mL)을 첨가하고, 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 휘발성 용매를 감압 하에 제거하고, 잔여 DMSO 용액을 분취용 HPLC로 정제하여 509를 황색 고체(13 mg, 3단계에 걸쳐 4%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) 8.78(s, 1H), 7.66(s, 1H), 7.57-7.47(m, 4H), 7.27(t, J = 8.8 Hz, 2H), 4.45(dd, J = 6.8, 3.8 Hz, 1H), 4.02(s, 1H), 3.66(s, 3H), 3.31-3.29(m, 1H), 3.23-3.15(m, 1H), 3.07-2.95(m, 2H), 2.09-2.02(m, 2H), 1.90(t, J = 5.1 Hz, 2H), 1.30(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 504(M+1)
실시예 510 5-아미노-N-[5-(5-아미노-1-옥사-8-아자스피로[3.6]데칸-8-일)-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 510
메탄올(2 mL) 및 물(2 mL) 중의 3급-부틸 N-[2-(2,6-다이플루오로페닐)-4-[[1-메틸-5-[(10R)-10-[(2,2,2-트라이플루오로아세틸)아미노]-3-옥사-7-아자스피로[3.6]데칸-7-일]피라졸-4-일]카바모일]티아졸-5-일]카바메이트(30 mg, 0.044 mmol)의 용액에 칼륨 카보네이트(67 mg, 0.48mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 65℃에서 8시간 동안 가열하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응 혼합물을 물로 희석시키고, EA로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 Na2SO4 상에서 건조하고, 여과하고, 농축했다. 잔사를 DCM(4 mL) 및 TFA(2 mL)로 20분 동안 교반시키고, 감압 하에 농축시켜, 포화 NaHCO3로 염기성화하고, 에틸 아세테이트(3x)로 추출하였다. 합친 유기층들을 MgSO4 상에서 건조하고, 용매를 감압 하에 제거하고, 잔사를 분취용 HPLC로 정제하여 510을 수득하였다. LCMS(ES+) m/z 490(M+1).
실시예 511 5-아미노-N-[5-[4-아미노-5-(다이플루오로메틸)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 511
단계 A:(메톡시메틸)트라이페닐포스포늄 클로라이드(5.59 g, 15.8 mmol)(사용 전 진공 상에서 밤새 건조함)를 에틸 에터(65 mL) 내에 현탁시켰다. 서스펜션을 -15℃로 냉각시켰다. THF 중의 칼륨 3급-부톡사이드(1.0 mol/L)(12.6 mL, 12.6 mmol)를 서서히 첨가하고, 밝은 오렌지 서스펜션을 색상이 유지될 때까지 -25℃ 내지 -10℃로 1시간 동안 교반하였다. 2,2,2-트라이플루오로-N-[(4R)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-옥소-아제판-4-일]아세트아미드(1.38 g, 3.95 mmol)를 THF(12 mL) 중에 용해시키고, -15℃에서 일리드로 첨가하였다. 혼합물을 서서히 실온으로 가온시키고, 밤새 교반한 후, 포화 암모늄 클로라이드로 켄칭하고, EA로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 농축하고 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EA/헵탄)로 정제하여 2,2,2-트라이플루오로-N-[(4R)-5-(메톡시메틸렌)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]아세트아미드를 수득하였다.
단계 B: 클로로포름(90 mL) 중의 2,2,2-트라이플루오로-N-[(4R)-5-(메톡시메틸렌)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]아세트아미드(1060 mg, 2.81 mmol)의 용액에 트리클로로아세트산(1.84 g, 11.24 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 밤새 가열시키고, 또 하나의 트리클로로아세트산(1.84 g, 11.24 mmol)을 첨가하고, 6시간 동안 가열을 지속하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 반응을 포화 나트륨 바이카보네이트로 켄칭하고, DCM으로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 농축하고 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EA/헵탄)로 정제하여 2,2,2-트라이플루오로-N-[(4R)-5-포르밀-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]아세트아미드(896 mg, 88%)를 수득하였다.
단계 C: DCM(5 mL) 중의 2,2,2-트라이플루오로-N-[(4R)-5-포르밀-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]아세트아미드(190 mg, 0.52 mmol)의 용액에 데옥소-플루오르(R)(1.16g , 2.62 mmol, 톨루엔 중 50 질량%)를 서서히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1.5 시간 동안 교반시키고, 포화 NaHCO3로 켄칭하고, DCM으로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 농축하고 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EA/헵탄)로 정제하여 N-[(4R)-5-(다이플루오로메틸)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]-2,2,2-트라이플루오로-아세트아미드(121 mg, 60%)를 제공하였다. SFC에 의한 상기 화합물의 키랄 분리로 두 개의 단일 거울상 이성질체들을 수득하였다. 실시예 497에 기재된 절차에 따라 SFC 키랄 분리하여 N-[(4R)-5-(다이플루오로메틸)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]-2,2,2-트라이플루오로-아세트아미드의 제 1 용리 피크를 511로 전환시켰다. LCMS(ES+) m/z 498(M+1)
실시예 512 5-아미노-N-[5-[4-아미노-5-(다이플루오로메틸)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 512
511의 제조에 따라 SFC 키랄 분리하여 N-[(4R)-5-(다이플루오로메틸)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]-2,2,2-트라이플루오로-아세트아미드의 제 2 용리 피크를 512로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.72(s, 1H), 7.60-7.36(m, 4H), 7.30-7.17(m, 2H), 6.30(t, J = 58.2 Hz, 1H), 3.64(s, 3H), 3.29-3.21(m, 2H), 3.21-3.05(m, 3H), 2.92-2.79(m, 1H), 2.05-1.87(m, 2H), 1.79-1.55(m, 4H). LCMS(ES+) m/z 498(M+1)
실시예 513 5-아미노-N-[5-[4-아미노-5-(하이드록시메틸)아제판-1-일]-1-메틸-피라졸-4-일]-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 513
단계 A: 511의 제조에 따라 2,2,2-트라이플루오로-N-[(4R)-5-포르밀-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]아세트아미드(192 mg, 0.53 mmol)를 메탄올(5 mL) 중에 용해시키고, 빙욕에서 냉각시켰다. 나트륨 보로하이드라이드(41 mg, 1.06 mmol)를 첨가하고, 실온으로 가온시키고, 40분 동안 교반하였다. 반응을 포화 NaHCO3로 켄칭하고, EA로 3회 추출하였다. 합친 유기층들을 농축하고 잔사를 실리카겔 칼럼 크로마토그래피(0 내지 100% EA/헵탄)로 정제하여 2,2,2-트라이플루오로-N-[(4R)-5-(하이드록시메틸)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]아세트아미드(120 mg, 62%)를 수득하였다.
단계 B: 실시예 497의 절차에 따라 2,2,2-트라이플루오로-N-[(4R)-5-(하이드록시메틸)-1-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)아제판-4-일]아세트아미드를 513으로 전환시켰다. 1H NMR(400 MHz, DMSO) δ 8.72(s, 1H), 7.60-7.36(m, 4H), 7.30-7.17(m, 2H), 6.30(t, J = 58.2 Hz, 1H), 3.64(s, 3H), 3.29-3.21(m, 2H), 3.21-3.05(m, 3H), 2.92-2.79(m, 1H), 2.05-1.87(m, 2H), 1.79-1.55(m, 4H). LCMS(ES+) m/z 478(M+1)
실시예 516 5-아미노-N-(5-((8R,9S)-8-아미노-9-메톡시-5-아자스피로[2.6]노난-5-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 516
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 N-[9-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난-8-일]카바메이트로부터 출발하여 516을 백색 고체(10 mg, 3단계에 걸쳐 58%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 8.77(s, 1H), 7.94(s, 1H), 7.38-7.28(m, 1H), 7.08-6.98(m, 2H), 6.17(s, 2H), 3.77(dd, J = 12.7, 1.7 Hz, 1H), 3.71(s, 3H), 3.45(s, 3H), 3.43-3.37(m, 1H), 3.19-3.12(m, 2H), 2.65(d, J = 2.3 Hz, 1H), 2.26(d, J = 12.7 Hz, 1H), 2.12-2.00(m, 1H), 1.79-1.70(m, 1H), 0.68-0.62(m, 1H), 0.60-0.43(m, 3H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 504(M+1)
실시예 517 5-아미노-N-(5-((8R,9S)-9-아미노-8-메톡시-5-아자스피로[2.6]노난-5-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 517
실시예 101에 대한 절차에 따라 3급-부틸 N-[8-메톡시-5-(2-메틸-4-니트로-피라졸-3-일)-5-아자스피로[2.6]노난-9-일]카바메이트로부터 출발하여, 517을 백색 고체(5 mg, 3단계에 걸쳐 51%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, CDCl3) δ 9.77(s, 1H), 8.02(s, 1H), 7.38-7.28(m, 1H), 7.07-6.97(m, 2H), 6.24(s, 2H), 3.97(d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.69(s, 3H), 3.58-3.50(m, 1H), 3.34-3.25(m, 1H), 3.22(s, 3H), 3.23-3.15(m, 1H), 2.57(d, J = 2.8 Hz, 1H), 2.31-2.16(m, 2H), 1.85-1.78(m, 1H), 0.64-0.53(m, 2H), 0.49-0.41(m, 1H), 0.39-0.32(m, 1H). 알킬 NH2는 관찰되지 않았다. LCMS(ES+) m/z 504(M+1)
실시예 518 (R)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로-5-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 518
MeOH(10 mL) 중의 3급-부틸 N-(4-((5R-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-3,3-다이플루오로-5-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일)카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일]카바메이트(205 mg, 0.294 mmol)의 용액에 다이옥산 중의 HCl(4 M, 0.04 mol, 10 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반시키고, 감압 하에 농축시켜 518을 하이드로클로라이드 염으로서 연한 갈색 고체(145 mg, 92%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.81(s, 1H), 8.39(br s, 3H), 7.65-7.53(m, 1H), 7.51(s, 1H), 7.35-7.20(m, 2H), 3.90-3.75(m, 1H), 3.74-3.60(m, 4H), 3.55-3.42(m, 2H), 3.40-3.30(m, 1H), 3.25-3.10(m, 1H), 2.70-2.45(m, 2H), 2.35-2.15(m, 1H), 2.00-1.85(m, 1H), 1.48(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 498(M+1)
실시예 526 (S)-5-아미노-N-(5-(5-아미노-3,3-다이플루오로-5-메틸아제판-1-일)-1-메틸-1H-피라졸-4-일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-4-카복사마이드 526
실시예 520에 대한 절차에 따라 3급-부틸 N-(4-((5S-(5-(3급-부톡시카보닐아미노)-3,3-다이플루오로-5-메틸-아제판-1-일)-1-메틸-피라졸-4-일)카바모일)-2-(2,6-다이플루오로페닐)티아졸-5-일]카바메이트로부터 출발하여 526을 하이드로클로라이드 염으로서 연한 갈색 고체(147 mg, 98%)로서 수득하였다. 1H NMR(400 MHz, d6-DMSO) δ 8.81(s, 1H), 8.37(br s, 3H), 7.65-7.53(m, 1H), 7.52(s, 1H), 7.35-7.20(m, 2H), 3.90-3.75(m, 1H), 3.74-3.65(m, 4H), 3.60-3.42(m, 2H), 3.40-3.30(m, 1H), 3.25-3.10(m, 1H), 2.70-2.45(m, 2H), 2.35-2.15(m, 1H), 2.00-1.85(m, 1H), 1.46(s, 3H). LCMS(ES+) m/z 498(M+1)
실시예 901 Pim 키나아제 결합 활성
박테리아에서 발현되고 IMAC 컬럼 크로마토그래피로 정제된 융합 단백질로서 PIM-1, -2, 및 -3 효소를 생성하였다(문헌[Sun, X., Chiu, J.F., and He, Q.Y. (2005) Expert Rev. Proteomics, 2:649-657]). 형광-표지된 Pim-특이성 펩타이드 기질을 아메리칸 펩타이드 캄파니(캘리포니아주 서니베일 소재)에서 주문 합성하였다. 반응 완충액은 10 mM HEPES, pH 7.2, 10 mM MgCl2, 0.01% Tween 20, 2 mM DTT를 함유하였다. 종결 완충액은 190 mM HEPES, pH 7.2, 0.015% Brij-35, 0.2% 코팅 리에이전트 3(매사추세츠주 홉킨턴 소재의 캘리퍼 라이프 사이언스), 20 mM EDTA를 함유하였다. 분리 완충액은 100 mM HEPES, pH 7.2, 0.015% Brij-35, 0.1% 코팅 리에이전트 3, 1:200 코팅 리에이전트 8(매사추세츠주 홉킨턴 소재의 캘리퍼 라이프 사이언스), 10 mM EDTA 및 5% DMSO를 함유하였다.
PIM 반응을 384-웰 플레이트에서 웰 당 10 μL의 최종 부피로 수행하였다. 표준 효소 반응은 5 μL 2X ATP 및 시험 화합물을 반응 완충액 중의 5 μL의 2X 효소 및 FAM-펩타이드(20 pM PIM1, 50 pM PIM2, 또는 55 pM PIM3, 1 μM FAM-펩타이드, 및 10 μM ATP 함유)에 첨가하여 개시되었다. 실온에서 90분의 항온 처리 후, 인산화 반응을 10 μL 종결 완충액을 첨가하여 중단시켰다. 각 독립 반응에서의 생성물 및 기질을, 캘리퍼 LC3000(등록상표)(매사추세츠주 홉킨턴 소재의 캘리퍼 라이프 사이언스) 상에서 수행되는 12-시퍼(sipper) 미세유체 칩(매사추세츠주 홉킨턴 소재의 캘리퍼 라이프 사이언스) 상에서 분리하였다. 생성물 및 기질의 분리를 캘리퍼사의 옵티마이저 소프트웨어(매사추세츠주 홉킨턴 소재)를 사용하여 전압 및 압력을 선택하여 최적화하였다. 분리 조건으로는 -500V의 하류 전압,-2150V의 상류 전압, 및 -1.2 psi의 스크리닝 압력을 사용하였다. 생성물 및 기질 형광단을 488 nm에서 여기시키고, 530 nm에서 검출하였다. 기질 전환율을 HTS 웰 분석기 소프트웨어(매사추세츠주 홉킨턴 소재의 캘리퍼 라이프 사이언스)를 이용하여 전기영동도로부터 계산하였다. 시험 화합물에 대한 Ki 값을 계산하였다. 예시적인 화합물의 대표적인 PIM1 LC3K Ki(마이크로몰 값)에 대해 표 1 참조.
실시예 902 시험관내 세포 증식능 분석
BaF3 모 라인(parental line)을 DSMZ 기탁소로부터 입수하였다. PIM1 또는 PIM2로 형질주입된 BaF3 라인을 생성하였다. 마우스 IL-3를 R&D 시스템즈로부터 구입하였다. G418을 클론테크(Clontech)로부터 구입하였다. BaF3 모 라인에 대한 배지는 RPMI, 10% FBS, 2 mM L-글루타민, 2 ng/mL mIL-3을 함유하였다. BaF3 PIM1 및 2 라인에 대한 배지는 RPMI, 10% FBS, 2 mM L-글루타민, 250 μg/mL을 함유하였다. MM1.S(다발성 골수종 세포) 라인에 대한 배지는 RPMI, 10% FBS, 2 mM L-글루타민을 함유하였다.
BaF3, 쥐 인터루킨-3 의존성 프로-B 세포 라인, 모 세포, BaF3 PIM1 세포, BaF3 PIM2 세포, 및 MM1.S(다발성 골수종) 세포를 45 μL/웰의 384-웰 플레이트에 각각 2k/웰, 5k/웰, 5k/웰, 및 10k/웰로 씨딩하였다. 시험 화합물을 5 μL/웰로 첨가하였다. (모 라인 및 형질도입된) BaF3 세포를 밤새 항온처리하고, MM1.S 세포를 72시간 동안 37℃에서 5% CO2에서 항온처리하였다. 세포 적정기 글로 시약(CELL TITER GKI® Reagent)(프로메가(Promega))을 50 μL/웰로 첨가하고, 그 플레이트를 30분 동안 항온처리하고, 발광을 HT 어낼리스트(Analyst) 상에서 판독하였다. 시험 화합물에 대한 IC50/EC50 값을 계산하였다.
본 발명의 대표적 화합물을 전술된 바와 같이 시험하였고, 하기 표 2a 및 2b에서와 같은 Ki/IC50/EC50 을 보임을 확인하였다.
[표 2a]
Figure pct00370
[표 2b]
Figure pct00371
Figure pct00372
Figure pct00373
Figure pct00374
Figure pct00375
본원 명세서 및 특허청구범위에 사용된 "포함" 및 "포함하는"이라는 용어는 언급된 특징, 정수, 성분 또는 단계의 존재를 명시하는 것으로 의도된 것이지만, 하나 이상의 다른 특징, 정수, 성분, 단계 또는 그룹의 존재 또는 추가를 배제하지 않는다.
본 발명은 기재내용의 명확한 이해를 목적으로 예시 및 실시예에 의해 일부 상세히 기술되었지만, 이러한 기재내용 및 실시예가 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본원에 인용된 모든 특허 및 과학 문헌의 개시내용은 그 전체가 본원에 참고로 인용된다.

Claims (32)

  1. 하기 화학식 I의 화합물, 또는 이의 입체 이성질체, 기하 이성질체, 호변 이성질체 또는 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 I]
    Figure pct00376

    상기 식에서,
    R1은 H, C1-C12 알킬, C2-C12 알켄일, C2-C12 알킨일, C6-C20 아릴, C3-C12 카보사이클릴, C2-C20 헤테로사이클릴, C1-C20 헤테로아릴 및 -(C1-C12 알킬렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴)이고;
    R2는 하기 구조들로부터 선택되고:
    Figure pct00377

    (이때, 물결 선은 부착 부위를 나타내고, 점선은 임의적인 이중 결합을 나타낸다);
    R3은 H, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH2NH2, -CH2NHCH3, -CH2CH2NH2, -CH2CHCH2NH2, -CH2CH(CH3)NH2, -CH2OH, -CH2CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH(OH)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH2OH, -CH2CH2SO2CH3, -CN, -CF3, -CO2H, -COCH3, -CO2CH3, -CO2C(CH3)3, -COCH(OH)CH3, COCH2NH2, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -S(O)2N(CH3)2, -SCH3, -CH2OCH3, -S(O)2CH3, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실 및 사이클로헵틸로부터 선택되고;
    R4는 F, Cl, Br, I, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH2CH(CH3)2, -CH=CH2, -CH=C(CH3)2, =CH2, -CH2F, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2NH2, -CH2NHCH3, -CH2CH2NH2, -CH2CHCH2NH2, -CH2CH(CH3)NH2, -CH2OH, -CH2CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH(OH)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH2OH, -CH2CH2SO2CH3, -CN, -CO2H, -COCH3, -COCH2NH2, -CO2CH3, -CO2C(CH3)3, -COCH(OH)CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -NO2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CHF2, -NHCH2CF3, -NHCH2CH2OH, -NHCOCH3, -N(CH3)COCH3, -NHC(O)OCH2CH3, -NHC(O)OCH2Cl3, -NHC(O)OC6H5, -NHS(O)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3, =O, -OH, -OCH3, -OCHF2, -OCH2F, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCH2CH(CH3)2, -OC(CH3)3, -S(O)2N(CH3)2, -SCH3, -CH2OCH3, -S(O)2CH3, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 아제티딘일, 아제판일, 옥세탄일, 옥세탄-3-일메틸아미노, (3-메틸옥세탄-3-일)메틸아미노, 피롤리딘일, 피페라진일, 피페리딘일, (피페리딘-4-일)에틸), 피란일, (피페리딘-4-일메틸), 모폴리노메틸, 및 모폴리노로부터 독립적으로 선택되거나; 또는
    2개의 같은 자리 R4 기가, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 피롤리딘일, 아제티딘일, 아제판일, 옥세탄일, 피롤리딘일, 피페라진일 또는 피페리딘일 고리로부터 선택되는 스피로 고리를 형성하고, 이때 스피로 고리는 -F, -OH, =O, -CH3, -NH2, -CH2F, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2NH2 및 -CF3로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 임의적으로 치환되거나; 또는
    2개의 이웃자리 R4 기들 또는 R4 기와 R3 기가 5원 또는 6원 헤테로사이클릴 융합 고리를 형성하고, 이때 헤테로사이클릴 융합 고리는 -F, -OH, =O, -CH3, -NH2, -CH2F, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2NH2 및 -CF3로부터 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기로 임의적으로 치환되고;
    n은 0, 1, 2 또는 3이고;
    X는 하기 구조로부터 선택되고:
    Figure pct00378

    (이때, 물결선은 부착 부위를 나타낸다);
    R5는 H, Cl, Br, C1-C12 알킬, -(C1-C12 알킬렌)-(C3-C12 카보사이클릴), -(C1-C12 알킬렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴), -(C2-C8 알케닐렌)-(C3-C12 카보사이클릴), -(C2-C8 알케닐렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴), C6-C20 아릴, -(C6-C20 아릴렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴), -(C6-C20 아릴렌)-(C1-C12 알킬렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴), C3-C12 카보사이클릴, C2-C20 헤테로사이클릴, 및 C1-C20 헤테로아릴로부터 선택되고;
    이때, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알킬렌, 카보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 및 헤테로아릴은 F, Cl, Br, I, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH2NH2, -CH2CH2NH2, -CH2CHCH2NH2, -CH2CH(CH3)NH2, -CH2OH, -CH2CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH(OH)CH(CH3)2, -C(CH3)2CH2OH, -CH2CH2SO2CH3, -CN, -CF3, -CO2H, -COCH3, -CO2CH3, -CO2C(CH3)3, -COCH(OH)CH3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -C(CH3)2CONH2, -NO2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -N(CH3)COCH3, -NHS(O)2CH3, -N(CH3)C(CH3)2CONH2, -N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3, =O, -OH, -OCH3, -S(O)2N(CH3)2, -SCH3, -CH2OCH3, -S(O)2CH3, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 아제티딜, 아제파닐, 옥세타닐, 피롤리디닐, 피페라지닐, 피페리디닐, (피페리딘-4-일)에틸), 피라닐, (피페리딘-4-일메틸), 모폴리노메틸, 및 모폴리노로부터 독립적으로 선택된 하나 이상의 기로 임의적으로 치환되고;
    R6은 독립적으로 H 또는 -NH2이다.
  2. 제 1 항에 있어서,
    R1이 H인, 화합물.
  3. 제 1 항에 있어서,
    R1이 C1-C12 알킬 또는 C3-C12 카보사이클릴인, 화합물.
  4. 제 3 항에 있어서,
    R1이 -CH3, -CH2CH3, -CH2CHF2 및 -CH2CF3으로부터 선택된, 화합물.
  5. 제 1 항에 있어서,
    R1이 -(C1-C12 알킬렌)-(C2-C20 헤테로사이클릴)인, 화합물.
  6. 제 5 항에 있어서,
    R1이 옥세탄-3-일메틸인, 화합물.
  7. 제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R3이 H 또는 -CH3인, 화합물.
  8. 제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4가 독립적으로 F, Cl, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CF3, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCH2CHF2, -NHCH2CF3, -CH2NHCH3, 및 -OCH3으로부터 선택되고, n이 1, 2 또는 3인, 화합물.
  9. 제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5가 C6-C20 아릴인, 화합물.
  10. 제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R5가, 하나 이상의 F로 치환된 페닐인, 화합물.
  11. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    R6이 -NH2인, 화합물.
  12. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기 화학식 Ia의 구조를 갖는 화합물:
    [화학식 Ia]
    Figure pct00379
    .
  13. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기 화학식 Ib의 구조를 갖는 화합물:
    [화학식 Ib]
    Figure pct00380
    .
  14. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기 화학식 Ic의 구조를 갖는 화합물:
    [화학식 Ic]
    Figure pct00381
    .
  15. 제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기 화학식 Id의 구조를 갖는 화합물:
    [화학식 Id]
    Figure pct00382
    .
  16. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기 화학식 Ie의 구조를 갖는 화합물:
    [화학식 Ie]
    Figure pct00383
    .
  17. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기 화학식 If의 구조를 갖는 화합물:
    [화학식 If]
    Figure pct00384
    .
  18. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기 화학식 Ig의 구조를 갖는 화합물:
    [화학식 Ig]
    Figure pct00385
    .
  19. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기 화학식 Ih의 구조를 갖는 화합물:
    [화학식 Ih]
    Figure pct00386
    .
  20. 제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,
    하기 화학식 Ii의 구조를 갖는 화합물:
    [화학식 Ii]
    Figure pct00387
    .
  21. 제 1 항에 있어서,
    표 1a로부터 선택되는 화합물.
  22. 제 1 항에 있어서,
    표 1b로부터 선택되는 화합물.
  23. 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항의 화합물, 및 약학적으로 허용가능한 담체, 활택제(glidant), 희석제 또는 부형제를 포함하는 약학 조성물.
  24. 제 23 항에 있어서,
    화학치료제를 추가로 포함하는 약학 조성물.
  25. 제 23 항에 있어서,
    암, 면역 장애, 심혈관계 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경 장애로부터 선택되고 Pim 키나아제에 의해 매개되는 질환 또는 장애의 치료에 사용하기 위한 약학 조성물.
  26. 암, 면역 장애, 심혈관계 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경 장애로부터 선택되고 Pim 키나아제에 의해 매개되는 질환 또는 장애를 가진 환자에게 치료 효과량의 제 23 항의 약학 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 질환 또는 장애의 치료 방법.
  27. 제 26 항에 있어서,
    상기 질환 또는 장애가 다발성 골수종, 유방암, 난소암, 자궁경부암, 전립선암, 고환암, 비뇨생식관 암, 식도암, 후두암, 교모세포종, 신경아세포종, 위암, 피부암, 각질가시세포종, 폐암, 표피 암종, 대세포 암종, 비소세포성 폐암종(NSCLC), 소세포 암종, 폐 선암종, 골암, 결장암, 선종, 췌장암, 선암종, 갑상선암, 여포 암종, 미분화암종, 유두 암종, 정상피종, 악성 흑색종, 육종, 방광 암종, 간 암종 및 담도암, 신장 암종, 췌장암, 골수 장애, 림프종, 모발세포암, 협강암, 비인두암, 인두암, 구순암, 설암, 입암, 소장암, 결장-직장암, 대장암, 직장암, 뇌암 및 중추신경계 종양, 호지킨병, 백혈병, 기관지암, 갑상선암, 간암 및 담관암, 간세포암, 위암, 신경교종/교모세포종, 자궁내막암, 악성 흑색종, 신장암 및 신우암, 방광암, 자궁 근종, 자궁경부암, 급성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 림프구성 백혈병, 골수성 백혈병, 구강암 및 인두암, 비호지킨 림프종, 악성 흑색종, 및 융모 결장 샘종으로부터 선택된 암인, 방법.
  28. 제 26 항에 있어서,
    화학치료제, 항염증제, 면역 조절제, 신경 영양 인자, 심혈관계 질환 치료제, 간 질환 치료제, 항바이러스제, 혈액 질환 치료제, 당뇨병 치료제 및 면역 결핍 장애 치료제로부터 선택되는 추가적인 치료제를 투여하는 것을 추가로 포함하는 방법.
  29. 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항의 화합물의, Pim 키나아제를 매개하며 암, 면역 장애, 심혈관계 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경 장애의 치료를 위한 약제의 제조에서의 용도.
  30. 제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
    Pim 키나아제를 매개하며 암, 면역 장애, 심혈관계 질환, 바이러스 감염, 염증, 대사/내분비 기능 장애 및 신경 장애의 치료를 위한 화합물.
  31. a) 제 23 항의 약학 조성물; 및
    b) 사용 설명서
    를 포함하는, Pim 키나아제에 의해 매개되는 증상을 치료하기 위한 키트(kit).
  32. 본원에 전술된 발명.
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Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014033630A1 (en) * 2012-08-31 2014-03-06 Novartis Ag Novel aminothiazole carboxamides as kinase inhibitors
LT2900657T (lt) 2012-09-26 2020-05-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Cikliniai eterio pirazol-4-il-heterociklil-karboksamido junginiai ir jų naudojimo būdai
JP6437452B2 (ja) 2013-01-14 2018-12-12 インサイト・ホールディングス・コーポレイションＩｎｃｙｔｅ Ｈｏｌｄｉｎｇｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ Ｐｉｍキナーゼ阻害剤として有用な二環式芳香族カルボキサミド化合物
JP6554037B2 (ja) 2013-01-15 2019-07-31 インサイト・ホールディングス・コーポレイションＩｎｃｙｔｅ Ｈｏｌｄｉｎｇｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ Ｐｉｍキナーゼ阻害剤として有用なチアゾールカルボキサミドおよびピリジンカルボキサミド化合物
AU2014308703A1 (en) 2013-08-23 2016-03-24 Incyte Corporation Furo- and thieno-pyridine carboxamide compounds useful as Pim kinase inhibitors
CA2939848A1 (en) 2014-03-18 2015-09-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Oxepan-2-yl-pyrazol-4-yl-heterocyclyl-carboxamide compounds and methods of use
TWI675836B (zh) 2014-03-25 2019-11-01 美商伊格尼塔公司 非典型蛋白質激酶ｃ之氮雜喹唑啉抑制劑
US9580418B2 (en) 2014-07-14 2017-02-28 Incyte Corporation Bicyclic aromatic carboxamide compounds useful as Pim kinase inhibitors
US9822124B2 (en) 2014-07-14 2017-11-21 Incyte Corporation Bicyclic heteroaromatic carboxamide compounds useful as Pim kinase inhibitors
US10155777B2 (en) * 2015-04-08 2018-12-18 University Of Delaware Trans-cycloheptenes and hetero-trans-cycloheptenes for bioorthogonal coupling
SG11201707752SA (en) 2015-04-22 2017-11-29 Rigel Pharmaceuticals Inc Pyrazole compounds and method for making and using the compounds
WO2016196244A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Incyte Corporation Pyridineamine compounds useful as pim kinase inhibitors
TWI734699B (zh) 2015-09-09 2021-08-01 美商英塞特公司 Ｐｉｍ激酶抑制劑之鹽
TW201718546A (zh) 2015-10-02 2017-06-01 英塞特公司 適用作pim激酶抑制劑之雜環化合物
JOP20190257A1 (ar) 2017-04-28 2019-10-28 Novartis Ag مركبات أريل غير متجانسة ثنائية الحلقة مندمجة 6-6 واستخدامها كمثبطات lats
WO2019113487A1 (en) 2017-12-08 2019-06-13 Incyte Corporation Low dose combination therapy for treatment of myeloproliferative neoplasms
AR119857A1 (es) 2019-08-30 2022-01-19 Rigel Pharmaceuticals Inc Compuestos de pirazol, formulaciones de los mismos y su uso para la inhibición de una proteína irak
WO2023202563A1 (en) * 2022-04-18 2023-10-26 Newbay Technology Development Co., Ltd. Akt inhibitor in combination with pim kinase inhibitor
WO2024009191A1 (en) 2022-07-05 2024-01-11 Pfizer Inc. Pyrido[4,3-d]pyrimidine compounds

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US5543523A (en) 1994-11-15 1996-08-06 Regents Of The University Of Minnesota Method and intermediates for the synthesis of korupensamines
DE102004044835B4 (de) * 2004-09-14 2008-12-11 Atmel Germany Gmbh Integrierte Halbleiter-Kaskodenschaltung für Hochfrequenzanwendungen
WO2006070198A1 (en) * 2004-12-30 2006-07-06 Astex Therapeutics Limited Pyrazole derivatives as that modulate the activity of cdk, gsk and aurora kinases
NZ567140A (en) 2005-10-07 2011-09-30 Exelixis Inc Azetidines as MEK inhibitors for the treatment of proliferative diseases
EP1968579A1 (en) 2005-12-30 2008-09-17 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical compounds
UY30183A1 (es) 2006-03-02 2007-10-31 Astrazeneca Ab Derivados de quinolina
FR2903406B1 (fr) 2006-07-04 2012-08-10 Aventis Pharma Sa Derives de pyrazolylbenzimidazole,compositions les contenant et utilisation
EP2049106A2 (en) 2006-07-14 2009-04-22 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical combinations
EP2046330A2 (en) 2006-07-14 2009-04-15 Astex Therapeutics Limited Pharmaceutical combinations
US20090318430A1 (en) 2006-07-21 2009-12-24 Astex Therapeutics Limited Medical use of cyclin dependent kinases inhibitors
WO2008054702A1 (en) 2006-10-31 2008-05-08 Schering Corporation Anilinopiperazine derivatives and methods of use thereof
MX2009004791A (es) * 2006-10-31 2009-08-19 Schering Corp Derivados de anilinopiperazina t metodos de uso de los mismos.
GB0701426D0 (en) 2007-01-25 2007-03-07 Univ Sheffield Compounds and their use
US8822497B2 (en) 2007-03-01 2014-09-02 Novartis Ag PIM kinase inhibitors and methods of their use
EP2178861B1 (en) * 2007-07-19 2014-08-20 Merck Sharp & Dohme Corp. Heterocyclic amide compounds as protein kinase inhibitors
SI2206707T1 (sl) 2007-10-24 2014-11-28 Astellas Pharma Inc. Azolkarboksamidna spojina ali njena sol
EP2070924A1 (de) 2007-12-10 2009-06-17 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Neue 2-Hetarylthiazol-4-carbonsäureamid-Derivative, deren Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
EP2070916A1 (de) 2007-12-10 2009-06-17 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft 2-Aryl-thiazol-4-carbonsäureamid-Derivate, deren Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
AR069650A1 (es) 2007-12-14 2010-02-10 Actelion Pharmaceuticals Ltd Derivados de aminopirazol como agonistas no peptidicos del receptor alx humano
CA2712959C (en) 2008-01-22 2015-06-23 Vernalis (R & D) Ltd Indolyl-pyridone derivatives having checkpoint kinase 1 inhibitory activity
AR070531A1 (es) 2008-03-03 2010-04-14 Novartis Ag Inhibidores de cinasa pim y metodos para su uso
UA110324C2 (en) 2009-07-02 2015-12-25 Genentech Inc Jak inhibitory compounds based on pyrazolo pyrimidine
EP2470440A4 (en) * 2009-08-28 2017-05-24 Graphic Packaging International, Inc. Carton with handle
US8435976B2 (en) 2009-09-08 2013-05-07 F. Hoffmann-La Roche 4-substituted pyridin-3-yl-carboxamide compounds and methods of use
SG178986A1 (en) * 2009-09-08 2012-04-27 Hoffmann La Roche 4-substituted pyridin-3-yl-carboxamide compounds and methods of use
JP2013508412A (ja) 2009-10-22 2013-03-07 ヴァンダービルト ユニバーシティー ｍＧｌｕＲ４アロステリック増強剤、組成物、および神経機能不全を治療する方法
US8470820B2 (en) 2010-01-22 2013-06-25 Hoffman-La Roche Inc. Nitrogen-containing heteroaryl derivatives
AU2011237936A1 (en) * 2010-04-07 2012-10-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Pyrazol-4-yl-heterocyclyl-carboxamide compounds and methods of use
US8703768B2 (en) 2010-06-09 2014-04-22 Hoffmann-La Roche Inc. Nitrogen containing heteroaryl compounds

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