KR20140032246A - 담배 꽃잎 추출물을 함유하는 금연보조용 조성물 및 금연보조용 식품 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 니코틴 유사 활성을 갖는 천연추출물 및 이를 이용한 금연보조용 조성물에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 니코틴을 코티닌으로 전환하는 천연추출물 및 이를 이용한 금연보조용 조성물에 관한 것이다. 바람직하게는, 담배 꽃잎(Tpbacco petals)의 추출물이 흡연으로 인해 체내에 축적된 니코틴을, 체내에서 독성이 감소된 코티닌으로 전환하는 것이다.
본 발명의 대상은 상기 담배 꽃잎 추출물 및 조성물을 포함하며, 이를 이용한 금연보조용 껌, 패취, 에어로졸, 정제 및 캡슐 조성물을 포함한다. 또한, 본 발명의 대상은 상기 추출물과 조성물을 포함하는 금연보조제 및 의약용 조성물 및 의약용 제품 또는 금연보조 식품을 포함한다.
본 발명의 대상은 상기 담배 꽃잎 추출물 및 조성물을 포함하며, 이를 이용한 금연보조용 껌, 패취, 에어로졸, 정제 및 캡슐 조성물을 포함한다. 또한, 본 발명의 대상은 상기 추출물과 조성물을 포함하는 금연보조제 및 의약용 조성물 및 의약용 제품 또는 금연보조 식품을 포함한다.
Description
본 발명은 금연효과가 우수한 담배 꽃잎 추출물과 이를 이용한 금연보조용 조성물에 관한 것이다. 또한 본 발명은 상기 담배 꽃잎 추출물과 상기 조성물을 포함하는 금연보조용 제품에 관한 것이다.
삶의 발전과 더불어 경제 성장 및 인식의 변화와 함께 건강에 대한 인식도 많이 바뀌고 있다. 건강은 개인의 여가생활 및 삶의 질을 윤택하게 하기 위한 필수적인 요소로 그 중요성이 더욱 커지고 있다. 상기 이유들로 인해, 건강에 대한 관심이 지속적으로 높아지면서 운동을 기본으로 하여, 음식, 기타 여러 분야에서의 건강을 위한 노력이 증가하고 있다. 이러한 사회적 흐름 속에서, 과거 중년 남성의 기호품으로 여겨지던 담배는, 이제 삶이 질을 향상시키기 위해 반드시 끊어야 하는 골칫덩어리로 인식되고 있다.
미국 환경보호국에서는 현재 공기 중의 담배 연기를 A급 발암물질로 발표하였다. 세계보건기구 등이 발표한 수치에 의하면, 전 세계 범위에서 해마다 약 490만 명이 흡연 관련 질병으로 사망하지만, 여러 가지 원인으로 인하여 흡연자들에게 있어서 완전한 금연은 매우 어려운 일로 되고 있다. 흡연은 폐암은 물론, 그외 주요 암과 이와 연관된 종양의 발생은 물론 심혈관계 질환이나 호흡기계 질환, 또는 일부 소화기계 질환도 야기한다. 흡연은 개인의 건강은 물론 국민 보건 차원에서도 큰 사회적 문제로 다루어지고 있기 때문에, 여러 사회적 제도들이 개선되고 있으며, 이로 인해 흡연을 하는 사람들은 점차 많은 제약을 받는 추세에 있다.
매년 사람들은 금연을 다짐하고 계획을 세우지만, 오히려 담배의 강한 중독성으로 인해 큰 좌절감을 얻게 되는 경우가 많다. 이와 같은 담배의 강한 중독성은 담배에 함유된 니코틴에 의해 발생하는데, 이로 인해 흔히 말하는 금단현상이 발생한다. 금단현상은 손떨림이나 환각증상, 성격장애가 오는 경우도 있으며, 사람에 따라 그 증상이 심각한 경우도 있다.
현재까지 밝혀진 바에 의하면, 니코틴은 도파민성 신경세포의 세포체에 분포하고 있는 니코틴성 아세틸콜린 수용기를 자극하여 뇌의 주요 신경전달물질인 도파민의 유리를 증가시키며 행동적 변화(sensitization)를 일으키는 것으로 알려져 있다 (Benwell과 Balfour, 1992). 최근 일부 천연물들이 니코틴 유사성분과 분해성분을 가지며 니코틴 중독의 치료제로서 검토되었으며, 임상적으로 니코틴 금단증상 완화에 효과적인 치료효과를 갖는 것으로 알려졌다. 하지만, 현재까지 이들 약물의 분자생물학적 및 행동적 기작에 대해서는 거의 알려지지 않았다.
종래의 여러 문헌 및 특허 등을 통하여, 연잎, 곽향, 소엽, 두충, 토복령, 오수유, 애엽정향 등 약 20 여종의 한약재에서 니코틴 대체 물질이 보고되었다. 또한, 최근 연구정보에 의하면, 인삼의 활성 성분인 사포닌(saponin)이 약물 중독에 의해 야기되는 행동적 변화에서 중요한 역할을 하는 것으로 알려졌다. 예를 들어, 홍삼의 인삼 총 사포닌(ginseng total saponin, GTS)은, 메트암페타민을 투여한 후에 나타나는 행동적 민감화의 발달을 차단하는 역할을 한다. 또한 코카인이나 모르핀을 투여한 후에 나타나는 행동적 변화도 억제되는 것이 밝혀졌다. 반복적으로 니코틴을 처리하는 것은, 또한 행동적 민감화를 야기하는 것으로 알려져 있으며, 이때 보행성 활동의 증가와 측핵의 도파민 농도는 밀접한 상관관계를 보이는 것으로 알려져 있다. 그러나, 니코틴 유사성분만으로는 니코틴 중독 및 금단현상의 근본적인 해결책이 되기에 부족하다. 따라서 본 연구자는 체내의 니코틴을 코티닌으로 전환하고 체외로 배출시켜, 니코틴으로 암을 야기할 수 있는 nitrosamine-4-(methylnitrosamine)-1-(3-pyridyl)-1-butanone(NNK)으로의 전환을 차단함으로서, 니코틴의 축적으로 야기될 수 있는 암과 같은 인체유해성 물질의 형성을 방지하고자 한다.
본 발명은 니코틴 유사활성을 갖거나, 니코틴을 코티닌으로 전환하는 천연추출물인 담배 꽃잎 추출물과 이를 이용한 금연보조용 조성물에 관한 것으로, 이를 이용하여 금연보조용 조성물 및 제품을 제공하는 데 그 목적이 있다.
보다 상세하게는, 담배 꽃잎(Tobacco petals) 추출물을 이용하여, 흡연으로 인해 체내에 축적된 니코틴을 독성이 낮은 코티닌으로 전환시켜 금연효과를 극대화하는 데 그 목적이 있다. 상기 전환작용을 통해 체내 니코틴의 농도를 낮추고, 담배의 꽃잎에 함유된 니코틴 유사 물질을 공급해주어 금연을 원하는 사람들에게 도움을 주는 금연보조용 조성물을 제공하고자한다.
본 발명의 또 다른 목적은 혼합조성물을 이용하여 일상생활에서 쉽고 간편하게 사용하면서 금연성공률을 높일 수 있는 금연보조제품의 제조방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 상기 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금연보조용 조성물을 특징으로 한다.
또한 본 발명의 상기 담배 꽃잎 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.02~70 중량%로 함유됨을 특징으로 하는 금연보조용 조성물을 특징으로 한다.
상기 담배 꽃잎 추출물의 제조방법은 다음의 단계를 거치는 것을 특징으로 한다. 상기 담배 꽃잎 추출물은
1) 담배 꽃잎을 음건하여 마쇄하는 단계; 및
2) 상기 1)의 마쇄물을 용매로 추출하는 단계; 및
3) 상기 2)의 추출액을 여과, 감압 농축 또는 건조하는 단계; 를 거쳐 얻어진다. 본 발명은 상기 제조방법에 의해 얻어진 상기 담배 꽃잎 추출물과 이를 함유하는 조성물을 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명은 상기 제조방법에 있어서, 상기 2)단계에서 용매는 마쇄물인 꽃잎 중량의 1 내지 20배의 용매, 바람직하게는 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 용매 및 이들의 혼합 용매, 보다 바람직하게는 물 및 에탄올 혼합 용매로 추출하는 것을 특징으로 한다.
여기서, 상기 2)단계에서 추출의 공정은 실온에서 10 내지 96시간 동안 추출하는 것을 특징으로 한다. 이때, 상기 2)단계에서 추출의 방법은, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출하는 것을 특징으로 하는 금연 보조용 조성물을 포함한다.
본 발명의 상기 담배 꽃잎 추출물은 니코틴 유사작용을 하는 것을 특징으로 하는 금연 보조용 조성물을 포함한다. 또한, 상기 담배 꽃잎 추출물은 니코틴을 코티닌으로 전환시키는 작용을 하는 것을 특징으로 하는 금연 보조용 조성물도 포함한다.
본 발명은 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 의약용 조성물을 포함할 수 있으며, 상기 의약용 조성물은, 금연보조 및 금단증상완화 효과가 있는 것을 특징으로 하는 의약용 조성물을 포함한다.
더욱이 본 발명은 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금연보조용 식품을 포함한다. 이때, 상기 금연보조용 식품은 밥, 반찬, 국거리, 찌개, 장, 소스, 양념, 조미료, 술, 제과, 제빵, 젤리, 껌(츄잉껌), 떡, 한과, 사탕, 차, 음료, 주스를 포함하는 것으로, 식음을 목적으로 상기 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금연보조용 식품인 것을 특징으로 한다.
본 발명의 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금연보조용 패취제와 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금연보조용 에어로졸제를 포함할 수 있다. 본 발명은 담배 꽃잎 추출물의 독특한 향취를 이용하여 이를 유효성분으로 함유하는 금연보조용 향수, 오일, 방향제, 호르몬제 또는 탈취제를 포함하는 것을 특징으로 한다.
한편, 본 발명은 상기 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금단증상 예방용 및 치료용 조성물을 포함한다.
본 발명의 담배 꽃잎 추출물은 니코틴 유사 활성 및 니코틴을 코티닌으로 전환시키는 활성을 통해 금연보조용 조성물로 이용될 수 있다. 본 발명의 상기 담배 꽃잎 추출물은 금연효과를 극대화시키고, 금단증상을 감소시켜 금연에 더욱 높은 성공률을 줄 수 있다. 또한, 기존의 니코틴 패치, 니코틴 껌, 흡연초 등과 같은 금연보조제 제품에 비하여 안전하다.
본 발명의 담배 꽃잎 추출물은 혼합 조성물로 이용되어, 일상생활에서 쉽고 간편하게 사용하면서 금연 성공률을 높일 수 있는 다양한 형태의 금연 보조용 조성물 및 의약용 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 목적 및 효과는 이하의 상세한 설명으로부터 명확하게 되고, 본 발명의 바람직한 실시예를 나타내는 상세한 설명 및 실시예는 본 발명의 범주를 제한하는 것이 아니다.
본 발명의 용어 "담배 식물(Nicotiana tabacaum L.)"은 남아메리카 열대지방을 원산지로하여 크기는 1.5-2m이다. 줄기는 곧게 서며 몇 개씩 군데에서 나고 전체에 점액을 분비하는 섬모가 있어 끈적끈적하다. 꽃은 7-8월에 연한 홍색으로 피며 가지 끝에 큰 원추꽃차례로 달린다. 식물의 잎을 말려 "담배(cigarette)"로 이용하나, 중독성이 매우 강하며, 암, 심장병, 순환계 질환 등의 병을 유발한다. 한방에서 담배 잎을 연초라는 약재로 쓰는데, 소화 불량과 통증을 완화시키는 데 쓰고, 종기, 악창, 옴, 버짐에는 환부에 붙여 치료하며, 개나 뱀에 물린데도 효과가 있다. 담배 식물에는 "꽃담배"라는 종류도 있으며, 겉모양은 담배와 비슷하나 크기가 훨씬 작은 인공 잡종이며 꽃을 보기 위해 심는다.
본 발명의 대상이 되는 "담배 꽃(Tobacco petals)잎"은 담배 식물의 꽃잎을 총칭하며, 바람직하게, 상기 담배 식물은 N. tabacum , N. tomentosa , N. tomentosiformis, N. otophora , N. setchellii , N. glutinosa , N. glauca , N. paniculota , N. acuminate , N. alata , N. attenuate , N. benthamiana , N. clevelandii , N. digluta , N. excelsior , N. forgetiana , N. langsdorffii , N. longiflora, N. obtusifolia , N. plumbagifolia , N. quadrivalvis , N. repanda , N. rustica, N. suaveolens , N. sylvestris , N. sander 등 60종의 담배 식물 종( Nicotiana species)을 포함한다.
본 발명에서 특별히 정의되지 아니한 기타의 용어는 국어사전적 의미나 당업계에서 일반적으로 받아들여지고 있는 의미를 따른다.
본 발명의 용어 "유효성분"은 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.
본 발명의 용어 "니코틴(nicotine)"은 식물의 2차 대사 물질인 알칼로이드의 일종으로 담배와 같은 가지과 식물의 잎에 주로 존재한다. 염기성 유기 화합물이며, 말초신경을 흥분시키거나 마비시킨다. 동물을 각성시키는 효과가 있으나, 의존성 및 독성도 존재한다. 수용액은 약알칼리성을 보이고, 60℃ 이하 및 210℃이상에서는 물에 무제한으로 용해된다. 니코틴은 담배의 뿌리에서 합성되어, 무기염과 마찬가지로 증산류에 의해서 식물체를 상승하여 잎에 축적된다. 잎 속에서는 말산, 시트르산으로 존재하며, 건조중량의 0.5%~0.8% 이상이 잎에 함유되어 있다. 피리딘고리와 피롤고리로 이루어져 있는데, 그 생합성 메커니즘은 아직 밝혀지지 않았으나, 피롤고리의 오르니틴 유래설이 있다.
니코틴은 주로 토마토, 감자와 같은 가지과(Solanaceae) 식물의 잎에서 발견되며, 특히 담배의 잎에 많은 양이 포함되어 있다. 또한, 니코틴은 곤충에 대한 신경독성이 있어서, 과거에는 살충제로 사용되기도 했다. 낮은 농도의 니코틴은 인간을 비롯한 포유류에게 각성 효과를 나타내지만 농도가 높아지면 큰 독성을 나타낼 수 있다.
니코틴 유사물질로서 노르니코틴, 아나바신 등도 담배에 함유되어 있고, 또 니코틴은 엉거시과의 한련초, 속새과의 쇠뜨기, 석송과에 속하는 2, 3종의 식물에도 함유되어 있다. 니코틴은 강한 독성(毒性)을 지녀 중추신경 및 말초신경을 흥분시키거나 마비시키며, 또 장·혈관을 수축시키고, 혈압의 상승을 촉진시킨다. 이로 인한 급성중독, 흡연을 통한 니코틴 흡수로 생기는 만성중독의 발생이 유발된다.
"니코틴의 생합성"은 트립토판에서 시작되어, 몇 단계의 경로를 거쳐 니코틴산(nicotinate)이 만들어진다. 이후 니코틴산에 피롤리딘 고리가 붙으면 니코틴이 완성된다. 일반적으로 니코틴은 담배 잎 속에서는 사과산에 붙거나 구연산에 붙은 형태로 존재한다. 색은 없으며 상온에서는 기름과 비슷한 느낌의 액체 상태이다. 니코틴이 동물의 몸 속에 들어오면 혈관을 통해 빠른 속도로 퍼져서 뇌에도 순식간에 도달한다. 니코틴은 간에서 cytochrome P450(CYP) 계열의 효소에 의해 대사되며 "코티닌(cotinine)"으로 변화한다. 니코틴이 신경계와 접촉하게 되면 "니코틴성 아세틸콜린 수용체(nicotinic acetylcholine receptor: nAChR)"에 결합하여 아드레날린 같은 흥분 계열의 호르몬을 내놓게 된다. 또한 이러한 호르몬의 작용으로 교감신경이 활성화되고, 간에서 포도당(glucose)의 분비량이 늘어난다. 뇌에서는 도파민(dopamine)의 분비량이 늘어서 기분이 좋은 상태를 느낄 수 있다. 이러한 작용을 통해 흡연과 같은 니코틴 노출 시에 집중력, 기억력의 향상 같은 각성 효과를 얻을 수 있다. 또한 니코틴의 양이 과다할 경우에는 앞에서 나온 니코틴성 아세틸콜린 수용체를 차단하기 때문에 살충제로도 사용할 수 있다.
본 발명의 용어 "니코틴성 아세틸콜린수용체(Nicotine acetylcholine receptor)"는 아세틸콜린수용체 중 니코틴에 의한 약리작용을 모방하는 수용체의 일종이다. 본 발명의 용어 "니코틴성 수용기(nicoticnic receptor)"는 아세틸콜린 수용기의 일종으로 니코틴에 의해 자극되는 이온성 수용기이다.
본 발명을 더욱 상세히 설명하면 다음과 같다.
본 발명의 담배 꽃잎 추출물은 하기와 같이 제조될 수 있다.
본 발명의 담배 꽃잎를 음건하여 마쇄한 후, 꽃잎 중량의 1 내지 20배의 용매로, 실온에서 10 내지 96시간, 바람직하게는 60 내지 80시간 동안 하기 추출방법에 의하여 추출과정을 거친다.
상기 용매는 상기 꽃잎 중량의 5 내지 20배 분량의 물, C1 내지 C4의 저급 알콜 용매 및 이들의 혼합 용매를 이용하는 것이 바람직하다. 바람직하게는 물 및 에탄올 혼합 용매를 이용하고, 보다 바람직하게는, 50 내지 100% 에탄올 혼합용매를 이용하는 것으로 한다.
상기 추출방법은 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 방법을 사용한다. 바람직하게는 냉침 추출하며, 추출 후 수득한 추출물을 여과, 감압 농축 또는 건조하여 본 발명의 담배 꽃잎 추출물을 수득할 수 있다.
본 발명의 금연보조용 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.02 내지 70% 중량으로 포함한다. 그러나 상기와 같은 조성은 반드시 이에 한정되는 것은 아니고, 환자의 상태 및 질환의 종류 및 진행 정도에 따라 변할 수 있다.
본 발명의 담배 꽃잎 추출물을 포함하는 조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 추출물을 포함하는 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
실시예는 하기와 같이, 본 발명의 담배 꽃잎 추출물을 포함하는 조성물이 니코틴과 유사한 활성을 가짐으로써 금연보조용 조성물로 사용 가능함을 예측할 수 있다. 또한, 본 발명에서는 상기 조성물을 이용하여, 다양한 식품 및 의약품의 형태로 제조함으로써 그 활용도를 높이고자 하였다. 이하 본 발명을 실시예 및 제조예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예 및 제조예에 한정되는 것은 아니다.
실시예
실시예
1. 추출물 제조
본 발명의 실시예 1은 국내 재배되는 담배 식물인 황색종과 버어리종을 대상으로 하여 본 발명의 담배 꽃잎 추출물을 제조하는 방법에 관한 것이다. 담배 식물의 꽃잎 추출물을 정량하기 위하여, 담배 꽃잎을 분리 및 건조하였다. 건조된 상기 담배 꽃잎은 잘게 마쇄한 후, 시료 중량의 10 배량의 물과 에탄올을 각각 가하여 25 ℃에서 12시간 동안 1회 추출하고, 여과지를 이용하여 여과한 후, 4 ℃에서 냉장보관하면서 실험에 사용하였다.
실시예
2. 니코틴 및 니코틴 유사체 함량 분석
본 발명의 실시예 2는 상기 담배 꽃잎 추출물을 이용하여 니코틴 및 니코틴 유사체 함량을 분석하기 위해 하기와 같이 진행되었다.
시료를 HPLC column (Waters 510 HPLC system, Millipore Corporation, USA)으로 주입하였다. 분석조건은 다음과 같이 하였다.
유속 2.0 mL/분, 온도 25℃, 압력 20.7 MPa (3000 psi), UV detector 민감도: 0.001 absorption units full scale (aufs), 분석파장 254 nm, analytical column은 Waters μ-Bondapak C18 reverse column (3.9 mm×30 cm)(Waters Inc., USA), 이동상(mobile phase)은 water: methanol: acetate buffer (0.1 mol/L, pH 4.0): acetonirile (65:29:4:2)로 pH는 트리에틸아민(triethylamine)으로 6.4로 조정하였다. 만든 이동상은 0.45 μM Millipore HA type filter (Millipore Corporation, USA)를 통해 진공펌프를 이용하여 탈기한 다음 사용하였다. pH 4.0 0.1 mol/L acetate-acetic acid buffer는 0.1 mol/L sodium acetate와 0.1 mol/L acetic acid를 1+4.556 비율로 섞어 제조하였다. Acetonitrile (methyl cyanide, CH3CN, FW 41.05, AX0145-1)), triethanolamine (FW 101.19, 23,962-3), acetic acid glacial (C3H4O2, FW 60.05, ACS reagent, A-0808)은 Sigma-Aldrich 사로부터 구입하였다.
| 그룹 | 총 함량 (μg/g 건조중량) |
Nicotine | Nornicotine | Anabasine | Anatabine |
| 황색종 | 121 | 94.2 | 3.0 | 0.4 | 2.4 |
| 버리어종 | 107 | 92.4 | 5.1 | 1.5 | 1.0 |
(단위: 총 함량중의 % 비율)
조사한 결과 [표 1]과 같이, 상기 담배 꽃잎 추출물에 대한 니코틴 및 니코틴 유사체 함량을 보여준다. 대부분의 금연보조제의 경우, 니코틴 및 유사체를 이용하여 금단현상을 억제한다. 본 발명의 실시예 2는 담배 꽃잎 추출물에 대한 상기 억제 효과를 확인하기 위해 분석된 것이며, 일반적으로는 분석되지않는다.
실시예
3. 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량
본 발명의 실시예 3은 상기 담배 꽃잎 추출물이 함유하고 있는 폴리페놀 및 플라보노이드 함량을 분석하기 위해 하기와 같이 진행되었다.
Minussi 등(Food Chem 82: 409416)의 방법에 따라 70% 에탄올 추출액 100 μL에 2% (탄산나트륨)sodium carbonate 2 mL와 50% Folin-Ciacalteu 시약 100 μL를 가한 후 720 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 갈릭산(gallic acid)(Sigma-Aldrich Co., USA)의 검량선에 의하여 함량을 산출하였다.
| 그룹 | 총 폴리페놀 (Total polyphenol) |
총 플라보노이드 (Total flavonoid) |
| 황색종 | 31.94 | 34.22 |
| 버리어종 | 32.11 | 33.18 |
(단위: mg)
조사한 결과 [표 2]와 같이, 상기 담배 꽃잎 추출물에서 측정된 폴리페놀 및 플라보노이드의 총 함량 분석 결과이다. 실시예 3은 향후 니코틴을 분해할 수 있는 성분을 추적하기 위한 데이터로 이용될 수 있으며, 담배 꽃잎 내의 유효성분에 대한 분류를 위해 활용된다.
실시예
4. 직접혼합법에 의한 니코틴 분해능 측정
본 발명의 실시예 4은 상기 담배 꽃잎 추출물이 함유하고 있는 니코틴 분해능을 측정하기 위해서 직접혼합법을 이용하여 분석되었다.
니코틴의 90% 정도는 (세포적 산화)c-oxidation에 의해 코니틴으로 전환되며, 코티닌은 24시간 정도의 긴 반감기를 가진다. 제조된 니코틴 분해용 추출물을 이용하여 니코틴이 코티닌으로 전환되는 양을 측정하여 니코틴의 분해능을 측정하였다.
실험은 하기와 같이 진행되었다.
실험방법은 1.5mL 마이크로튜브에 1mM의 니코틴 200μL와 담배 꽃잎 추출물 200 μL를 잘 혼합한 후, 0, 10, 30, 60, 90분 경과 후 생성된 코티닌의 양을 측정하였다. 반응온도는 25℃, 반응 조건은 4M sodium acetate trihydrate 완충액 (pH 4.7) 100 μL, 1.5M KCN 40 μL, 0.4M chloramine-T 40 μL, 50 볼륨%의 아세톤에 용해한 78mM barbituric acid 200 μL를 순서대로 넣고 10초 동안 잘 혼합하였고, 혼합물을 상온에서 15분간 반응시킨 다음 1M sodium metabisulphite 40 μL를 넣어 반응을 중지시켰다. 흡광도는 490nm에서 측정하여 변화량 분석을 수행하였다.
| 황색종 | 버리어종 | 녹차추출물 | 시호추출물 | |
| 0분 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
| 10분 | 2.1 | 2.3 | 1.2 | 1.0 |
| 30분 | 2.3 | 2.1 | 1.5 | 1.2 |
| 60분 | 2.2 | 2.1 | 1.4 | 1.2 |
| 90분 | 2.1 | 2.0 | 1.1 | 1.0 |
(단위: O.D.)
조사한 결과 [표 3]과 같이, 상기 담배 꽃잎 추출물과 비교 추출물과의 니코틴 분해능을 직접혼합법을 이용하여 측정하였다. 상기 담배 꽃잎 추출물인 황색종 담배 꽃잎 추출물과 버리어종 담배 꽃잎 추출물은 10분 이후 2.0 O.D.을 넘어 큰 활력을 보였으나, 비교 추출물인 녹차 추출물과 시호 추출물은 10분 후, 1.0 O.D.을 넘고 90분이 된 후에도 큰 활력의 차이를 보이지않고 오히려 감소하였다. 대부분의 추출물에서 60~90분 후, 활력이 감소하였다.
실시예
5. 세포에서의 니코틴 분해능 측정
본 발명의 실시예 5은 상기 담배 꽃잎 추출물이 함유하고 있는 니코틴 분해능을 측정하기 위해 세포를 이용하여 분석하였다. 실험은 하기와 같이 진행되었다.
사용된 세포주는 간세포주로 HepG2를 사용하였다. 잘 배양된 세포에 니코틴 1mM의 농도로 처리한 후, 담배 꽃잎 추출물을 120 μL를 같이 처리하였다. 6시간 예비 배양 후, PBS로 세포를 세척하여, 니코틴이 함유된 신선한 배지로 교체하여 배양하면서 시간별로 니코틴의 양을 측정하였다. 측정 시간은 0, 30, 60 및 120분으로 하였다. 시간대별로 각 세포와 배지를 회수하였고, 회수한 세포는 초음파분쇄기를 이용하여 세포내 있는 코티닌이 회수되도록 처리하였다. 측정은 DBA법을 이용하여 490nm에서 흡광도를 측정하였다.
| 황색종 | 버리어종 | 녹차추출물 | 시호추출물 | |
| 0분 | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
| 30분 | 2.4 | 2.5 | 1.6 | 1.3 |
| 60분 | 2.3 | 2.6 | 1.2 | 1.1 |
| 120분 | 2.5 | 2.5 | 1.1 | 0.8 |
(단위: O.D.)
조사한 결과 [표 4]과 같이,상기 담배 식물군과 비교 식물군의 니코틴 분해능을 세포를 이용하여 측정하였다. 상기 담배 식물군인 황색종 담배 꽃잎 추출물과 버리어종 담배 꽃잎 추출물은 30분 이후 약 2.5 O.D.의 큰 활력을 보였으나, 상기 비교 식물군인 상기 녹차 추출물과 상기 시호 추출물은 30분 후, 각각 1.6 O.D 과 1.3 O.D.으로 비교적 낮은 활력을 보였으며, 120분 후, 두 종의 상기 담배 꽃잎 추출물은 2.5 O.D.의 활력을 유지하는 데 비해, 상기 비교 식물군인 상기 녹차 추출물과 상기 시호 추출물은 각각 1.1 O.D.과 0.8 O.D.로 크게 차이를 보이는 것을 확인하였다.
본 발명은 다른 여러 가지 형태로 실시할 수 있다. 그 때문에, 전술한 실시예는 모든 점에서 단순한 예시에 지나지 않으며, 한정적으로 해석해서는 안 된다. 본 발명의 범위는 특허청구의 범위에 의해서 나타내는 것으로써, 명세서 본문에 의해서는 아무런 구속도 되지 않는다. 특허청구범위의 균등 범위에 속하는 변형이나 변경은, 모두 본 발명의 범위 내의 것이다.
본 발명의 상기 담배 꽃잎 추출물을 이용하여, 다양한 금연보조용 조성물을 제조하고, 의약용 또는 식품 등으로 적용시키는 것으로 그 활용도를 높이고자 하였다. 다음의 제조예로 본 발명의 담배 꽃잎 추출물에 대한 활용 가능성을 설명한다.
제조예
제조예
1.
패취
제조
아크릴레이트 점착제 DT87-502A 80%에 리바스티그민(rivastigmine) 18% 을 혼합하고, 여기에 PGML(프로필렌글리콜모노라우레이트) 2%을 가한 후 잘 혼합하였다. 상기 조성물을 동일한 양으로 나누어 배면층((3M Scotchpak 1109 Polyester film)) 및 라이너(3M Scotchpak 9744, 1022, 3M paper release liner 1361, 9743)에 랩코터 드라이어(Lab coater and Dryer, 스위스 Mathis사)로 각각 코팅하고 섭씨 75℃에서 열풍으로 건조시켜서 제1점착제층과 제3점착제층을 제조하였다. 크기는 다양하게 조제가 가능하였다. 패취제 제조시 담배 꽃잎 추출물은 500 mg으로 하였다.
제조예
2. 에어로졸
에어로졸 용액은 용매인 물 무게를 기준으로 15% 구연산, 5% 주석산, 5% 비타민 C, 5% 아디픽 산이 되도록 조성되었다. 조성물은 미세한 안개(fine mist)입자로 분사가 되로록 분사용기에 담았다. 분사기는 길이 5 -15 cm와 직경 1 - 2 cm 크기의 용기와 용기의 내용물을 압력에 의해 분사할 수 있도록 조절캡으로 구성되어 있는 것을 사용하였다. 담배 꽃잎 추출물은 250 mg으로 하였다.
제조예
3. 정제 및 캅셀제의 제조
담배 꽃잎 추출물 130 mg, 결정성 셀룰로오스 30 mg, 옥수수전분 30 mg 및 스테아린산 마그네슘 3 mg를 함께 혼합한 후 타정기를 이용하여 정제화하고, 캅셀충진기를 사용하여 No.2 젤라틴 캅셀에 채워 캅셀제를 제조하였다.
제조예
4. 건강보조용 식품(
액제
)의 제조
당귀추출분말 100 mg, 비타민 C 500 mg, 자일리톨 1000 mg, 구연산 500 mg, 과일향 90 mg 및 정제수 90 g을 혼합하여 액제 형태의 건강 보조 식품을 제조하였다.
제조예
5. 식품(
츄잉껌
)의 제조
담배 꽃잎 추출물 130 mg, 자일리톨 1000 mg, 천연분말향 10 mg 및 츄잉껌 베이스 400 mg를 혼합하여 츄잉껌을 제조하였다.
Claims (16)
- 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금연보조용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 담배 꽃잎 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.02~70 중량%로 함유됨을 특징으로 하는 금연보조용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 담배 꽃잎 추출물은
1) 담배 꽃잎을 음건하여 마쇄하는 단계; 및
2) 상기 1)의 마쇄물을 용매로 추출하는 단계; 및
3) 상기 2)의 추출액을 여과, 감압 농축 또는 건조하는 단계;를 거쳐 얻어진 것임을 특징으로 하는 금연보조용 조성물.
- 제3항에 있어서, 상기 2)단계에서 용매는 마쇄물인 꽃잎 중량의 1 내지 20배의 용매 또는 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 용매 및 이들의 혼합 용매 또는 물 및 에탄올 혼합 용매 중 선택된 것으로 추출하는 것을 특징으로 하는 금연보조용 조성물.
- 제3항에 있어서, 상기 2)단계에서 추출의 공정은 실온에서 10 내지 96시간 동안 추출하는 것임을 특징으로 하는 금연보조용 조성물.
- 제3항에 있어서, 상기 2)단계에서 추출의 방법은, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 및 초음파 추출 방법 중에서 선택된 방법으로 추출하는 것임을 특징으로 하는 금연보조용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 담배 꽃잎 추출물은 니코틴 유사작용을 하는 것을 특징으로 하는 금연보조용 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 담배 꽃잎 추출물은 니코틴을 코티닌으로 전환시키는 작용을 하는 것을 특징으로 하는 금연보조용 조성물.
- 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 의약용 조성물.
- 제 9항에 있어서 상기 의약용 조성물은, 금연보조 및 금단증상완화 효과가 있는 것을 특징으로 하는 의약용 조성물.
- 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금연보조용 식품.
- 제11항에 있어서, 상기 금연보조용 식품은 밥, 반찬, 국거리, 찌개, 장, 소스, 양념, 조미료, 술, 제과, 제빵, 젤리, 껌(츄잉껌), 떡, 한과, 사탕, 차, 음료, 주스를 포함하는 것으로, 식음을 목적으로 상기 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금연보조용 식품.
- 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금연보조용 패취제.
- 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금연보조용 에어로졸제.
- 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금연 보조용 향수, 오일, 방향제, 호르몬제 또는 탈취제.
- 담배 꽃잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 금단증상 예방용 및 치료용 조성물.
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|---|---|---|---|---|
| CN112089087A (zh) * | 2020-10-28 | 2020-12-18 | 云南中宝龙天然香料有限公司 | 一种精油类烟草提取物的多级提取方法 |
-
2012
- 2012-09-06 KR KR1020120098915A patent/KR20140032246A/ko not_active Application Discontinuation
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| CN112089087B (zh) * | 2020-10-28 | 2022-02-01 | 云南中宝龙天然香料有限公司 | 一种精油类烟草提取物的多级提取方法 |
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