KR20140030657A - 병개암나무 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 조성물 및 이의 이용 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 병개암나무 추출물, 분획물 또는 화합물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 병개암나무 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과가 있는 조성물에 대한 것이다.
천연물로부터 생리활성 물질에 관한 연구가 활발히 진행되고 있으며, 질병에 대한 치료 및 예방제 또는 건강보조제로서 식물 자원이 널리 이용되고 있다.
피부 노화는, 시간이 경과함에 따라 기관과 동반하여 피부의 구조와 기능이 지속적으로 감퇴되어지는 내인성 노화와 장기간에 걸친 태양 광선의 노출로 인한 피부 조직의 변화인 외인성 노화가 있다. 이러한 노화 과정으로 피부가 건조해지며, 주름이 생기고 피부는 탄력을 잃게 된다.
피부 노화에 관한 연구에서 가장 중요하게 다루어지는 것은 자유 라디칼(free radical)과 활성 산소종(reactive oxygen species)이다. 이들은 자연적으로 생체 내에서 만들어지기도 하지만 공해, 태양 자외선, 화학 산화제 및 미생물 등에 의해 발생된다. 이 때 발생된 자유 전자기나 활성 산소종은 피부 세포에 산화적 스트레스를 가하게 되고, 이러한 과정에서 생긴 물질은 멜라닌과 주름 생성의 원인물질로 여겨진다.
이때 발생되어진 자유 전자나 활성 산소종은 피부세포에 산화적 스트레스를 가하게 되고, 이러한 과정에서 생긴 물질은 멜라닌과 주름 생성의 원인 물질로 여겨진다.
이들 활성 산소종은 효소적, 비효소적 항산화제로 이루어진 피부 항산화 방어막을 붕괴시키고 생체 분자의 산화적 변형, 피부 장벽의 손상과 결합 조직인 콜라겐, 히아루론산 등의 사슬 절단 및 비정상적인 교차결합에 의한 주름생성 등 피부 노화를 가속시킨다.
결과적으로 피부 노화 방지를 위해서는 과잉의 활성 산소종 생성을 억제하고 또한 생성된 활성 산소를 효율적으로 제거할 수 있어야 한다. 또한 피부 주름을 일으키는 효소들의 억제와 색소 침착을 진행하는 효소 활성 억제 등에 관한 연구가 필요하다.
한편, 멜라닌 생성 혹은 멜라노사이트의 증식에 의해 야기되는 색소 침착은 다양한 방법으로 억제가 가능하다. 일반적으로는 멜라닌 합성의 중요한 효소인 티로시나제(Tyrosinase) 활성 억제, 멜라노사이트의 기능 감소, 자동산화 반응의 억제를 통한 멜라닌 생성의 감소, 홍반과 같은 염증반응 억제등 다양한 경로를 이용할 수 있다.
결과적으로 피부노화 방지를 위해서는 과잉의 활성 산소종 생성을 억제하고 또한 생성된 활성산소를 효율적으로 제거할 수 있어야하며, 피부의 주름을 일으키는 효소들의 억제, 색소침착을 진행하는 효소의 활성억제 등에 관한 연구가 필요하다.
이에, 아래와 같이 피부노화 및 미백 관련해서 식물을 이용한 연구가 시행되어 왔다.
한국등록특허공보 제10-0874115호는, 항산화 효과, 피부 노화 방지효과, 피부 주름 개선 효과, 미백 효과를 갖는 백리향 추출물을 함유한 화장료 조성물에 대해 개시하고 있다.
한국등록특허공보 제10-0642526호는, 항염증 효과, 항산화 효과, 피부보호 효과 및 노화 방지 효과를 갖는 겨우살이 추출물을 함유한 화장료 조성물에 대해 개시하고 있다.
상기와 같이 여러 식물에 대한 연구가 시행되고 있으나, 아직까지 병개암나무를 이용한 화장료 조성물에 대한 연구는 시행된 바가 없다. 이에 본 발명자들은 병개암나무를 이용한 연구를 수행하여 본 발명에 이르렀다.
본 발명의 목적은 병개암나무 추출물(Corylus hallaisanensis) 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과가 있는 화장료 조성물을 제공하기 위한 것이다.
본 발명의 다른 목적은 병개암나무 추출물(Corylus hallaisanensis) 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과가 있는 약학적 조성물을 제공하기 위한 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 병개암나무 추출물(Corylus hallaisanensis) 추출물 또는 그 분획물을 유효성분으로 함유하는 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과가 있는 건강 식품을 제공하기 위한 것이다.
본 발명은 병개암나무 추출물(Corylus hallaisanensis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과가 있는 화장료 조성물을 제공한다.
상기 병개암나무 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 것일 수 있다.
상기 저급 알코올은 메탄올 또는 에탄올일 수 있다.
본 발명은 병개암나무 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 항노화 및 피부 미백 효과가 있는 화장료 조성물을 제공한다.
상기 유기용매는 에탄올, 에틸아세테이트 또는 부탄올일 수 있으나 반드시 이에 한정되는 것은 아니다.
병개암나무(Corylus hallaisanensis)는 자작나무과(Betulaceae) 식물로서 꽃은 양성화이며 수꽃이삭은 전년도에 생겨서 가지에 달려 있다. 암꽃이삭은 둥글며 포(苞) 안에 2개의 암꽃이 들어 있다. 열매는 견과(堅果)로 길이 1.3cm 정도이다. 참개암나무와 비슷하지만 포가 관상으로 길게 발달하지 않는 것이 다르다. 한국 특산종으로 한라산에서 자란다.
본 발명의 발명자들은 청정지역인 제주도 자생식물을 이용해서 산화작용을 차단하고, 산화 작용에 의해 유발되는 노화작용을 지연시키며, 피부의 색소 침착을 억제하기 위한 성분을 찾기 위하여 여러 제주 자생식물을 연구한 결과, 상기와 같은 효능을 가진 병개암나무에서 우수한 항산화 활성 효과, 주름 개선 및 탄력 증진 효과뿐만 아니라 미백 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
이러한 우수한 활성을 갖는 병개암나무 추출물은 기능성 화장품 원료로의 응용이 가능하며, 천연식물을 사용함으로써 합성원료들로 야기되는 알러지 및 부작용, 안전성 및 안정성 면을 해결할 수 있음을 확인함으로서 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 병개암나무 추출 방법은 이 기술분야에 널리 알려진 것이라면 어느 것이나 사용할 수 있다. 예를 들면, 병개암나무 중량의 약 20 ~ 30 배 부피의 용매를 사용하여 에탄올추출 등의 방법에 의해 2 ~ 3회 반복 추출하고, 여과한 후 이 여액을 감압 건조하여 분말 형태로 제조한다.
본 발명에 따른 상기 유효성분은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.00001 내지 10 중량%로 포함될 수 있는데, 바람직하게는 0.00001 내지 7 중량%, 더욱 바람직하게는 0.001 내지 5 중량%일 수 있다. 상기 추출물, 분획물 또는 화합물의 함량이 0.0001 중량 % 미만인 경우에는 항노화 활성 및 함염 활성이 나타나지 않을 수 있으며, 10 중량 % 이상인 경우에는 함유량 증가에 대한 효과 증대 정도가 미미할 수 있고 경제적이지도 못하다.
상기 화장료 조성물은 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 파운데이션, 젤, 연고 또는 스프레이로 구성된 군으로부터 선택될 수 있으나. 반드시 이로 한정되는 것은 아니다.
또한, 상기 화장료 조성물은 본 발명의 병개암나무 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성 화합물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항노화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.
발명은 병개암나무 추출물 또는 병개암나무 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 항노화 효과 및 항염증 효과가 있는 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 약학적 조성물은 통상적으로 사용되는 부형제, 붕해제, 감미제, 활택제, 향미제 등을 추가로 포함할 수 있으며, 통상적인 방법에 의해 정제, 캅셀제, 산제, 과립제, 현탁제, 유제, 시럽제, 기타 액제로 제형화될 수 있다. 구체적으로 본 발명의 약학적 조성물은 경구 투여용 제형, 예를 들면 정체, 트로치제(troches), 로젠지(lozenge), 수용성 또는 우성현탁액, 조제분말 또는 과립, 에멀젼, 하드 또는 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제(elixirs)로 제제화된다. 정제 및 캡슐 등의 제형으로 제제하기 위해 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴, 셀롤로오스 또는 젤라틴과 같은 결합제, 디칼슘 포스페이트와 같은 부형제, 옥수수 전분 또는 고구마 전분과 같은 붕해제, 스테아르산 마그네슘, 스테아르산 칼슘, 스테아릴푸마르산 나트륨 또는 폴리에틸렌글리콜 왁스와 같은 윤활유가 함유된다. 캡슐제형의 경우는 상기에서 언급한 물질 이외에도 지방유와 같은 액체 담체를 함유한다.
또한, 본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여시 피하주사, 정맥주사, 근육내 주사 또는 흉부내 주사 주입방식을 선택하는 것이 바람직하다. 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위해서는 본 발명의 센티페드그라스 추출물, 이의 분획물 또는 분획물로부터 분리한 활성분획을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 현탁액으로 제조하고 이를 앰플 또는 바이알의 단위 투여형으로 제제한다.
본 발명에 따른 유효성분의 투여량은 체내에서 활성성분의 흡수도, 불활성화율 및 배설속도, 환자의 연령, 성별 및 상태, 치료할 질병의 중증 정도에 따라 적절히 선택되나, 경구 투여제의 경우 일반적으로 성인에게 1일에 체중 1 ㎏당 본 발명의 추출물을 0.0001 ~ 500 ㎎의 양으로 1회 내지 수회 나누어 투여할 수 있으며, 0.001 ~ 100 ㎎의 양으로 투여하는 것이 바람직하다.
또한 본 발명은 병개암나무 추출물 또는 병개암나무 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 항노화 및 피부 미백가 있는 건강 식품을 제공한다.
본 발명의 병개암나무 추출물 또는 이의 분획물은 항노화 및 피부 미백 효과가 우수하므로 건강 식품으로서 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 건강식품은 병개암나무 추출물 또는 이의 분획물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 병개암나무 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성 화합물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 건강 음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ㎖당 일반적으로 약 0.01 ~0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g 이다.
상기 외에 본 발명의 병개암나무 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성 화합물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
그 밖에 본 발명의 병개암나무 추출물, 이의 분획물 또는 상기 분획물로부터 분리한 활성 화합물은 천연 과일주스, 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부당 0.01~0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명에 따른 병개암나무 추출물 또는 이의 분획물은 항노화 및 피부 미백 효과가 있어서 화장료 조성물, 약학적 조성물 및 건강 식품으로 이용할 수 있다.
도 1은 병개암나무 추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성을 나타낸 그래프이다.
도 1은 병개암나무 추출물의 멜라닌 합성 저해효과를 나타낸 그래프이다.
도 1은 병개암나무 추출물의 멜라닌 합성 저해효과를 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명에 대하여 실시예 및 실험예를 통하여 보다 상세히 설명하나, 이들이 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.
실시예 1: 병개암나무 추출물 제조
1-1: 병개암나무 에탄올 추출물 제조
병개암나무(Corylus hallaisanensis) 가지는 한라수목원에서 제공받아 준비하였다. 준비한 병개암나무 가지 1 kg을 잘게 자른 후, 이를 70 % 에탄올 20 ℓ에 넣고 일주일 동안 침적시킨 후 여과하였다. 여과하여 걸러진 이 여액을 감압 건조하여 분말형태인 병개암나무 에탄올 추출물을 준비하였다.
1-2: 병개암나무 추출물의 헥산 분획물 제조
상기 실시예 1에서 제조한 병개암나무 추출물을 물 1 L에 현탁시키고 극성 순서에 따라 헥산(n-hexane), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 부탄올(n-butanol), 물(water)을 넣고 순차적으로 분획하여 생성된 분획 추출물 중 헥산 분획물을 감압 건조하여 분말 형태인 병개암나무 헥산 분획물을 준비하였다.
1-3:
병개암나무
추출물의 에틸아세테이트
분획물
제조
분획 추출물 중 에틸아세테이트 분획물을 감압 건조하여 분말 형태인 병개암나무 에틸아세테이트 분획물을 준비한 것을 제외하고는 실시예 1-2와 동일하게 수행하였다.
1-4: 병개암나무 추출물의 부탄올 분획물 제조
분획 추출물 중 부탄올 분획물을 감압 건조하여 분말 형태인 병개암나무 부탄올 분획물을 준비한 것을 제외하고는 실시예 1-2와 동일하게 수행하였다.
1-5: 병개암나무 추출물의 물 추출물 제조
분획 추출물 중 물 분획물을 감압 건조하여 분말 형태인 병개암나무 물 분획물을 준비하였다.
실시예 2: DPPH법을 이용한 자유 라디칼 소거 활성 측정
자유라디칼은 노화, 특히 피부 노화의 원인 물질로 알려진 것이다. 자유 라디칼 소거 활성 측정을 위해 0.2 mM DPPH를 에탄올에 용해시키고, 각 시료를 농도별로 준비하였다. 96웰 플레이트에 0.2 mM DPPH 용액 0.18 mL와 시료 용액 0.02 mL를 넣고 상온에서 10분간 반응시킨 후, 스펙트로포토메터(spectrophotometer)로 515 nm에서 흡광도를 측정하였다.
소거 능력은 다음과 같은 식에 의해 %로 계산되었고, 각 시료의 SC50(DPPH의 농도가 50% 감소되는데 필요한 시료의 농도, scavenging concentration) 값을 구하였다. 대조군은 Vitamic C(SC50 = 7.7 μg/mL)를 사용하였다.
DPPH 라디칼 소거능(radical scavenging activity, %)
= [ 1 - (Abssample - Absblank) / Abscontrol ] × 100
여기서 Abssample은 시료 반응액의 흡광도이고, Absblank는 시료만의 흡광도, Abscontrol은 DPPH 용액의 흡광도이다. 자유 라디칼 소거 활성 측정 결과는 도 1 에 나타내었다.
도 1에 나타나 있듯이, 실시예 1-1의 추출물(에탄올 추출)의 SC50는 31.7 μg/mL, 실시예 1-33의 추출물(에틸아세테이트 분획)은 31.9 μg/mL, 실시예 1-4의 추출물(부탄올 분획)은 23.3 μg/mL, 실시예 5의 추출물(물 분획)은 39.0 μg/mL로 나타남을 확인하였다. 본 발명의 추출물 모두에서 자유 라디칼(free radical) 소거활성이 나타났으며, 특히 실시예 1-3 및 1- 4의 추출물에서 높은 활성을 나타냄을 알 수 있었다.
실시예 3:
멜라닌 합성 저해효과 측정
병개암나무 추출물에 대한 세포 내에서의 미백 효과를 측정하기 위하여 B16 멜라노마 세포를 이용하여 멜라노제네시스(melanogenesis) 저해효과를 측정하였다. 6 웰 plate에 5 ×104 cells/mL이 되도록 세포를 분주하고, 37℃의 5% CO2 조건하에서 24 시간 배양 후 배지를 제거하였다. D-PBS(D-phosphate buffered saline)으로 세척한 후 1μM α-MSH를 포함하는 배지로 교환 후 시료 추출물(실시예 1-1,1-2,1-3,1-4, 및 1-5)을 농도별로 각각 첨가하여 3일간 배양하였다. 3일 동안 배양 후 배지를 제거한 후 D-PBS 버퍼로 세척한 후 트립신으로 처리하여 세포를 회수하였다.
회수된 세포는 1M NaOH 500 ㎕를 첨가하고 55℃에서 2시간 방치하여 세포 내의 멜라닌을 얻었다. 마이크로플레이트 리더로 475 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 상기 시료 추출물을 용매(DMSO:EtOH=1:1)에 녹인 것을 사용하였고, 알부틴을 사용하였다. 그 결과를 도 2 및 하기 표 1, 2에 나타내었다.
처리농도 (㎍/ml) |
멜라닌 생합성 억제율(%) |
|
대조군 | 100 | 0 |
알부틴 | 1000 | 58.1 |
실시예 1-1(EtOH) | 100 | 68.8 |
실시예 1-2(Hex) | 100 | 72.9 |
실시예 1-3(EtOAc) | 100 | 77.7 |
실시예 1-4(BuOH) | 100 | 31.4 |
실시예 1-5(water) | 100 | -14.1 |
처리농도 (㎍/ml) |
멜라닌 생합성 억제율(%) |
|
대조군 | 100 | 0 |
알부틴 | 1000 | 45.4 |
실시예 1-3(EtOAc) | 25 50 100 |
76.7 70.6 22.6 |
상기 표 1, 2와 도 2에 나타나 있듯이,실시예 1-1의 추출물(에탄올 추출)의 경우 100 μg/ml에서 68.8%의 저해율을 보였고, 100 μg/ml의 실시예 1-2의 추출물(헥산 분획)과 실시예 1-3의 추출물(에틸아세테이트 분획), 실시예 1-4의 추출물(부탄올 분획)에서 각각 72.9%, 77.7%, 31.4%의 melanin 합성 저해율을 나타냈다. 이는 대조군으로 사용한 1000 μg/ml의 알부틴의 저해율보다 좋은 활성을 보여 멜라노마 세포 내에서의 미백 활성은 알부틴보다 우수함을 알 수 있었다.
실시예
4: 세포 독성 평가
세포독성을 확인하기 위해 MTT 방법을 수행하였다. B16F10 멜라노마 세포와 인간 섬유아세포(normal human fibroblaste, NHF), 인간 각질세포(human keratinocyte cell, HKC)를 24시간 배양 후 시료 추출물(실시예 1-1,1-2,1-3,1-4, 및 1-5)들을 여러 농도별로 처리한 후 2일간 배양한 후 500 μg/ml MTT (3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide)를 웰당 20 μL 첨가하였다. 37℃에서 4 시간 동안 반응시킨 후 MTT 용액을 제거하고 웰당 DMSO 200 μL 첨가하였다. 살아있는 세포와 반응하여 생긴 포르마잔(formazan) 침전물을 용해시킨 다음 마이크로플레이트 리더로 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 상기 시료 추출물을 용매(DMSO:EtOH=1:1)에 녹인 것을 사용하였다. 그 결과를 아래 표 3에 나타내었다.
처리 농도 (㎍/ml) |
NHF 세포 생존율 (%) | HKC 생존율 (%) |
|
대조군 | 100 | 100 | 100 |
실시예 1-1(EtOH) | 100 | 110.8 | 110.3 |
실시예 1-2(Hex) | 100 | 57.9 | 79.1 |
실시예 1-3(EtOAc) | 100 | 109.1 | 104.8 |
실시예 1-4(BuOH) | 100 | 102.5 | 142.1 |
실시예 1-5(water) | 100 | 100.3 | 191.4 |
처리 농도 (㎍/ml) |
NHF 세포 생존율 (%) |
|
대조군 | 100 | 100 |
실시예 1-1(EtOH) | 25 50 100 |
106.8 117.5 123.1 |
실시예 1-3(EtOAc) | 6.25 12.5 25 50 100 |
103.9 107.9 120.5 137.5 149.5 |
상기 표 3 및 4에 나타나 있듯이, 인간 섬유아세포(Normal human fibroblast, NHF)와 인간 각질세포(human keratinocyte cell, HKC)에서의 세포독성을 확인한 결과, 세포 독성이 없음을 확인할 수 있다.
실시예 5: NO(Nitric oxide)저해 효과 측정
염증 유발 인자인 NO(Nitric oxide)저해 효과를 RAW 264.7 세포배양 시스템을 이용하여 측정하였다. 24 웰 플레이트에 3 × 105 cells/mL이 되도록 세포를 분주하고, 37℃의 5% CO2 조건 하에서 18 시간 배양한 후 배지를 제거하고, D-PBS(D-phosphate buffered saline)으로 세척한 후 1μM LPS를 포함하는 배지로 교환 후 시료 추출물(실시예 1-1,1-2,1-3,1-4, 및 1-5)을 농도별로 각각 첨가하여 1일간 배양하였다. 1일 동안 배양 후 배지 100 μL에 그리스 시약(Griess reagent) 100 μL를 넣어 NO(Nitric oxide)를 측정하였다. 대조군으로는 상기 시료 추출물을 용매(DMSO:EtOH=1:1)에 녹인 것을 사용하였다. 그 결과를 하기 표 5 및 6에 나타내었다.
처리농도 (㎍/ml) |
NO 저해율 (%) |
|
대조군 | 100 | 0 |
실시예 1- 1(EtOH) | 100 | 52.8 |
실시예 1-2(Hex) | 100 | 44.9 |
실시예 1-3(EtOAc) | 100 | 99.5 |
실시예 1-4(BuOH) | 100 | 21.4 |
실시예 1-5(water) | 100 | 13.1 |
처리농도 (㎍/ml) |
NO 저해율 (%) |
|
대조군 | 100 | 0 |
실시예 1-3(EtOAc) | 6.25 12.5 25 50 100 |
14.3 38.6 61.8 87.5 99.3 |
상기 표 2 및 3에 나타나 있듯이, RAW 264.7 세포에서의 NO(Nitric oxide)저해 효과를 확인한 결과, 특히 실시예 1-3의 추출물(에틸 아세테이트 분획)에서 NO저해 효과가 우수함을 알 수 있다.
실시예 6: 병개암나무 추출물이 함유된 화장료 조성물의 제조
상기 실시예 1-3의 에틸아세테이트 분획물을 함유한 크림의 제조예는 하기 표 7에 나타낸 바와 같다. 수상인 정제수, 트리에탄올아민, 글리콜(1,3-Propanediol)을 70℃로 가열하고 용해시키고, 여기에 유상인 지방산, 유성성분, 유화제 및 방부제를 70℃로 가열하여 용해한 액을 첨가하여 유화시킨다. 유화가 완료된 후 상기 용액을 45℃로 냉각시키고 병개암나무 가지 추출물의 에틸아세테이트 분획물과 향을 첨가하고 분산시킨 다음 30℃로 냉각한다.
성분 | 함량 (중량%) |
병개암나무 추출물의 에틸아세테이트 분획물 | 5.10 |
호호바 오일 | 5.00 |
유동파라핀 | 7.00 |
세틸아릴 알코올 | 2.00 |
폴리글리세릴-3 메칠 글루코스 디스테아레이 | 2.00 |
글리세릴스테아레이트 | 0.50 |
스쿠알란 | 3.00 |
프로필렌글리콜 | 4.00 |
글리세린 | 5.00 |
트리에탄올 아민 | 0.30 |
카르복시 비닐폴리머 | 0.30 |
토코페릴 아세테이트 | 0.20 |
프로필파라벤 및 인공향료 및 황색 4호 | 0.10 |
정제수 | 65.5 |
합계 | 100 |
실시예
7:
병개암나무
추출물이 함유된 약제 제조
상기 실시예 1-3의 에틸아세테이트 분획물을 유효 성분으로 함유하는 시럽제의 제조예는 하기 표 8에 나타낸 바와 같다.
구성 성분 | 함량(중량%) |
병개암나무 추출물의 에틸아세테이트 분획물 | 2 |
사카린 | 0.8 |
당 | 25.4 |
글리세린 | 8 |
향미료 | 0.04 |
에탄올 | 4 |
소르브산 | 0.4 |
증류수 | 59.36 |
실시예
9:
병개암나무
추출물이 함유된 건강 식품 제조
상기 실시예 1-3의 에틸아세테이트 분획물을 0.5~5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하였다.
본 발명의 단순한 변형 내지 변경은 이 분야의 통상의 지식을 가진 자에 의하여 용이하게 실시될 수 있으며, 이러한 변형이나 변경은 모두 본 발명의 영역에 포함되는 것으로 볼 수 있다.
Claims (9)
- 병개암나무 (Corylus hallaisanensis) 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과가 있는 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 병개암나무 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 것인 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과가 있는 화장료 조성물.
- 제2항에 있어서,
상기 저급 알코올은 메탄올 또는 에탄올인 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과 효과가 있는 화장료 조성물.
- 병개암나무 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과 효과가 있는 화장료 조성물.
- 제4항에 있어서,
상기 유기용매는 에탄올, 에틸아세테이트 또는 부탄올인 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과가 있는 화장료 조성물.
- 제1항 또는 제4항에 있어서,
상기 유효성분은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 0.00001 내지 10 중량%로 포함되는 것인 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과가 있는 화장료 조성물.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 화장수, 에센스, 로션, 크림, 팩, 파운데이션, 젤, 연고 또는 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것인 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과가 있는 화장료 조성물.
- 병개암나무 추출물 또는 병개암나무 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과가 있는 약학적 조성물.
- 병개암나무 추출물 또는 병개암나무 추출물을 추가적으로 유기용매로 추출하여 제조된 유기용매 분획물을 유효성분으로 함유하는 항노화, 항염증 및 피부 미백 효과가 있는 건강 식품.
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