KR20140008303A

KR20140008303A - 안구 혈관 질환의 치료를 위한 투여 요법

Info

Publication number: KR20140008303A
Application number: KR1020137010744A
Authority: KR
Inventors: 미첼 브리겔; 페터 엔드; 비나야크 호사그라하라; 브루스 자페; 에릭 메레디스; 로날드 뉴톤; 스테판 푸어; 위빈 추
Original assignee: 노파르티스 아게
Priority date: 2010-10-27
Filing date: 2011-10-25
Publication date: 2014-01-21
Also published as: ES2547145T3; EP2632458A1; WO2012055884A1; US20130197016A1; BR112013009701A2; CA2814439A1; EA022873B1; EA201390618A1; EP2632458B1; AU2011322597A1; CN103167873A; MX2013004782A; AU2011322597B2; JP5934229B2; JP2013540791A

Abstract

안구 혈관 질환의 치료를 위한 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도를 제공한다. 안구 혈관 질환의 치료를 위해 1주 이상 동안 안구 조직에 치료 유효 농도의 VEGF-R2 화합물을 전달하는, 특정 VEGF-R2 억제제의 주 1회 투여를 포함하는 투여 요법을 제공한다.

Description

안구 혈관 질환의 치료를 위한 투여 요법{DOSING REGIMES FOR THE TREATMENT OF OCULAR VASCULAR DISEASE}

도입

본 발명은 안구 질환의 치료에서 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제의 용도에 관한 것이다. 더욱 특히, 본 발명은 안구 혈관 질환의 치료에서 특정 VEGF-R2 억제제의 간헐적 투여의 용도에 관한 것이다. 본원에 제공하는 특정 투여 요법에서, VEGF-R2 억제제는 매 5일마다 1회 또는 그보다 더 적은 빈도로, 매 5일 내지 21일마다 1회, 또는 매 6일, 7일, 또는 8일마다 1회 투여된다.

본 분야에 관한 간략한 설명

VEGF-R2는 특정의 종양학적 및 안과학적 적응증을 비롯한, 다양한 증식성 및 신생혈관 질환의 치료를 위한 표적으로서 인식되어져 왔다. 특히, 소라페닙 (바이엘(Bayer), 4-[4-[[4-클로로-3-(트리플루오로메틸)페닐]카르바모일아미노]페녹시]-N-메틸-피리딘-2-카르복스아미드), 파조파닙 (글락소 스미스 클라인(Glaxo Smith-Kline), 5-[[4-[(2,3-디메틸-2H-인다졸-6-일)메틸아미노]-2-피리미디닐]아미노]-2-메틸벤졸술폰아미드), 및 티보자닙 (아베오 파마슈티칼즈(Aveo Pharmaceuticals), 1-(2-클로로-4-((6,7-디메톡시퀴놀린-4-일)옥시)페닐)-3-(5-메틸이속사졸-3-일)우레아)은 다양한 종양학적 적응증 치료용으로 등록되어 있거나, 또는 그러한 용도로 고급 임상 개발 중에 있다.

경구용 소라페닙은, 치료받는 환자수가 적고 간헐성 환자에서는 요법 없이도 질환이 약화될 수 있다는 사실로 인한 모호한 이점하에 단독으로 또는 유리체내용 베바시주맙과 함께 병용하여 매일 또는 주 3회로 신생혈관성 성인 황반 변성 (AMD)을 앓는 3명의 환자에게 투여되었다 (문헌 [T. Diago, et. al. Mayo Clin. Proc. 2008;83*2):231-234] 및 [M. Kernt, et. al., Acta Ophthamologica, 2008(86) 456-458] 참조).

전신 독성에 관한 우려와 눈 혈관 질환의 치료에 필요한 장기간의 투여 기간에 의해 눈 질환 치료용으로서의 VEGF-R2 억제제의 용도에 대한 이의가 제기되었다.

본 발명의 간단한 요약

본 발명은 본 요법을 필요로 하는 환자에게 VEGF-R2 억제제를 매 5일마다 1회 또는 그보다 더 적은 빈도로 투여하는 간헐적 투여 요법 및 상기 투여 요법을 사용하여 안구 혈관 질환을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 바람직한 투여 요법은 VEGF-R2 억제제를 매 5일 내지 21일마다 1회, 매 5일 내지 14일마다 1회, 매 6일 내지 10일마다 1회, 매 6일, 7일, 또는 8일마다 1회, 또는 매 7일마다 1회 투여하는 것을 포함한다. 본 발명의 간헐적 투여 요법은 동일 용량의 VEGF-R2 억제제를 1일 1회 투여하는 것에 필적하는 효능을 제공할 뿐만 아니라, 또한 1일 1회 투여와 비교하였을 때 전신 안전성에 관한 책임을 감소시켜준다. 더욱 특히, 본 발명에 의해 제공되는 투여 요법을 통해 VEGF-R2 억제제의 순차적인 투여 사이의 기간 동안 안구 조직에서 VEGF-R2 억제제의 농도는 유지되고, 환자의 혈장으로부터 VEGF-R2 억제제는 신속하게 제거된다. 저빈도 투여, 혈장으로부터의 신속한 제거 및 안구내 노출 유지의 조합은 투여되는 약물의 안전성을 증진시킴과 동시에 효능을 유지시킨다.

특정 측면에서, 본 발명은 치료 유효량의 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제를 투여하여 안구 혈관 질환을 치료하는 방법으로서, 여기서 투여 빈도는 매 5일마다 1회 또는 그보다 더 적은 빈도이거나, 또는 더욱 바람직하게는 매 5일 내지 21일마다 1회로 투여되는 것인 치료 방법을 제공한다. 투여 빈도가 감소되면, 혈장 농도로 측정되는 바, 화합물의 전신 노출은 감소됨과 동시에 상승된 안구 농도는 유지된다.

본원에서 제공된 치료 방법에서 사용하기에 적합한 특정의 바람직한 VEGF-R2 억제제로는 매주 1회 투여되었을 때 효능을 발휘하는 VEGF-R2 억제제를 포함한다. 상승된 안구 노출 및 신속한 혈장 제거를 제공하는 화합물이 본 발명의 방법에서 사용하기에 적합하다. 특정 측면에서, 본 발명에서 사용하기에 적합한 화합물은 래트 레이저 유도 맥락막 혈관신생 (CNV) 모델에서 VEGF-R2 억제제를 스크리닝하고, 위약에 비하여 CNV의 크기를 약 40% 이상만큼 감소시킨 화합물을 선별함으로써 확인할 수 있다. 특히 적합한 화합물은 또한 래트 레이저 유도 CNV 검정법에서 혈장으로부터 신속하게 제거되는데, 여기서 신속한 제거란 (1) 투여 후 48시간 경과하였을 때 혈장 농도가 C_최대의 10% 이하인 것, 또는 (2) 투여 후 72시간 경과하였을 때 혈장 농도가 10 nM 이하인 것으로 정의된다.

한 측면에서, 본 발명은 환자에게 매 5일 내지 21일마다 1회, 매 5일 내지 14일마다 1회, 매 6일 내지 10일마다 1회, 매 6일, 7일, 또는 8일마다 1회, 또는 매 7일마다 1회로 투여하기에 적합한 경구용 약제의 제조에서 사용하기 위한 VEGF-R2 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도를 제공한다. 상기 약제는 예컨대, 연령 관련 황반 변성, 당뇨병성 망막병증, 망막 정맥 폐쇄, 및 하기 개시되는 다른 눈 적응증과 같은, 안구 혈관 질환의 치료에서 사용하기에 적합하다.

본 발명의 약제는 또한 흑색종의 치료에서 사용하기에 적합할 수 있다. 더욱 특히, 본 발명의 약제는 피부, 안구 또는 전이성 흑색종의 치료에서 사용하기에 적합할 수 있다.

도 1은 래트 CNV 모델에서 화합물 2의 경구 1일 투여량에 대한 억제율(%)을 나타내는 플롯이다;
도 2는 실시예 1, 2, 및 3의 CNV 모델에서 래트에게 상이한 투여 간격으로 투여된 두 용량의 화합물 2의 억제를 나타내는 막대 차트이다;
도 3은 0시간째인 시점에 30 mg/kg의 단일 경구 용량을 투여받은 브라운 노르웨이(Brown Norway) 래트의 혈장, 망막 및 후안부 안배에서의 화합물 1의 농도를 나타내는 시간 플롯이다;
도 4는 0시간째인 시점에 10 mg/kg의 단일 경구 용량을 투여받은 브라운 노르웨이 래트의 혈장, 망막 및 후안부 안배에서의 화합물 2의 농도를 나타내는 시간 플롯이다;
도 5는 0시간째인 시점에 0.3 mg/kg의 단일 경구 용량을 투여받은 브라운 노르웨이 래트의 혈장, 망막 및 후안부 안배에서의 화합물 6의 농도를 나타내는 시간 플롯이다; 그리고,
도 6은 0시간째인 시점에 10 mg/kg의 단일 경구 용량을 투여받은 브라운 노르웨이 래트의 혈장, 망막 및 후안부 안배에서의 화합물 9의 농도를 나타내는 시간 플롯이다.

본 발명의 상세한 설명

본 발명은 환자에게 VEGF-R2 억제제를 1일 1회 투여 요법보다 더 적은 빈도로 투여함으로써 안구 혈관 질환을 안전하고 효과적으로 치료하기 위한 특정의 투여 요법에 관한 것이다. 더욱 특히, 본 발명은 VEGF-R2 억제제를 매 5일마다 1회 또는 그보다 더 적은 빈도로, 매 5일 내지 21일마다 1회, 매 5일 내지 14일마다 1회, 매 6일 내지 10일마다 1회, 매 6일, 7일, 또는 8일마다 1회로 투여하는 투여 요법에 관한 것이다. 본 출원인은 놀랍게도, 상승된 안구 노출이 유지되고 신속하게 전신 제거되는 특정 VEGF-R2 억제제가, 본원에 제공되는 주 1회 투여 요법을 포함하는 본 발명의 저빈도 투여 요법에서 사용하기에 특히 적합하다는 것을 발견하게 되었다. 안구 노출이 선택적으로 유지되는 VEGF-R2 억제제를 통해 요법 및 약제는 그를 필요로 하는 환자에게 저빈도로 투여될 수 있다.

한 측면에서, 본 발명은 눈 혈관 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 다회 용량의 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서

(a) 순차적인 용량은 5일 이상의 간격을 두고 투여되고;

(b) VEGF-R2 억제제는, 레이저 유도 혈관신생 모델에서 항목 (a)에 제공된 투여 빈도에 따라 등가 용량으로 래트에게 투여되었을 때, 위약 대조군에 비하여 약 40% 이상만큼 혈관신생 면적을 감소시키고, 용량 투여 72시간 후, 래트에서 약 10 nM 이하의 혈장 농도를 제공하는 것인,

눈 혈관 질환을 앓고 있거나 또는 상기 질환에 걸리기 쉬운 환자를 치료하는 방법을 제공한다.

제2 측면에서, 본 발명은 눈 혈관 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 다회 용량의 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서

(a) 순차적인 용량은 5일 이상의 간격을 두고 투여되고;

(b) VEGF-R2 억제제는, 레이저 유도 혈관신생 모델에서 항목 (a)에 제공된 투여 빈도에 따라 등가 용량으로 래트에게 투여되었을 때, 위약 대조군에 비하여 약 40% 이상만큼 혈관신생 면적을 감소시키고, 용량 투여 1일 내지 5일 후 측정하였을 때, 래트에서 혈장 노출보다 5배 이상 더 큰 후안부 안배 노출을 제공하는 것인,

제3 측면에서, 본 발명은 눈 혈관 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 다회 용량의 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 순차적인 용량은 5일 이상의 간격을 두고 투여되고, VEGF-R2 억제제는

5-[[4-[(2,3-디메틸-2H-인다졸-6-일)메틸아미노]-2-피리미디닐]아미노]-2-메틸벤졸술폰아미드 (파조파닙),

5-((S)-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드;

6-(6-아미노-피리미딘-4-일옥시)-나프탈렌-1-카르복실산 (3-트리플루오로메틸-페닐)-아미드;

(-)-5-((S)-7-아세틸-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 (5-시클로프로필-이속사졸-3-일)-아미드;

5-(5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드;

1-(2-클로로-4-((6,7-디메톡시퀴놀린-4-일)옥시)페닐)-3-(5-메틸이속사졸-3-일)우레아 (티보자닙); 및

6-(6-히드록시메틸-피리미딘-4-일옥시)-나프탈렌-1-카르복실산 (3-트리플루오로메틸-페닐)-아미드, 또는 그의 제약상 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,

제4 측면에서, 본 발명은 눈 혈관 질환의 치료에 사용하기 위한 경구용 제약 약제가,

(a) 순차적인 용량이 5일 이상의 간격을 두고 투여되고;

(b) 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제가, 레이저 유도 혈관신생 모델에서 항목 (a)에 제공된 투여 빈도에 따라 등가 용량으로 래트에게 투여되었을 때, 위약 대조군에 비하여 약 40% 이상만큼 혈관신생 면적을 감소시키고, 용량 투여 72시간 후, 래트에서 약 10 nM 이하의 혈장 농도를 제공하는 것인 투여 요법에서 사용하기에 적합한 것인,

상기 약제의 제조를 위한 VEGF-R2 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도를 제공한다.

제5 측면에서, 본 발명은 눈 혈관 질환의 치료에 사용하기 위한 경구용 제약 약제가,

(a) 순차적인 용량이 5일 이상의 간격을 두고 투여되고;

(b) 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제가, 레이저 유도 혈관신생 모델에서 항목 (a)에 제공된 투여 빈도에 따라 등가 용량으로 래트에게 투여되었을 때, 위약 대조군에 비하여 약 40% 이상만큼 혈관신생 면적을 감소시키고, 용량 투여 1일 내지 5일 후 측정하였을 때, 래트에서 혈장 노출보다 5배 이상 더 큰 후안부 안배 노출을 제공하는 것인 투여 요법에서 사용하기에 적합한 것인,

제6 측면에서, 본 발명은 눈 혈관 질환의 치료에 사용하기 위한 경구용 제약 약제가,

순차적인 용량이 5일 이상의 간격을 두고 투여되고, 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제가

6-(6-히드록시메틸-피리미딘-4-일옥시)-나프탈렌-1-카르복실산 (3-트리플루오로메틸-페닐)-아미드, 또는 그의 제약상 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 투여 요법에서 사용하기에 적합한 것인,

본 발명의 제1, 제2, 제3, 제4, 제5, 또는 제6 측면 중 임의의 방법 또는 용도에서, 안구 혈관 질환은 연령 관련 황반 변성, 망막 정맥 폐쇄, 당뇨병성 망막병증, 황반 부종, 또는 당뇨병성 황반 부종이다.

본 발명의 제1, 제2, 제3, 제4, 제5, 또는 제6 측면 중 임의의 방법 또는 용도에서, 순차적인 용량은 6일, 7일, 8일, 또는 9일의 간격을 두고 투여된다. 특정 실시양태에서, 순차적인 용량은 7일의 간격을 두고 투여된다.

본 발명의 제1, 제2, 제3, 제4, 제5, 또는 제6 측면 중 임의의 방법 또는 용도에서, 환자는 인간이다.

본 발명의 방법에서 사용하기에 적합할 수 있는 특정 화합물로는 WO2010/066684 및 WO2006/059234 (이들 각각은 본원에서 참고로 포함된다)에 개시된 화합물을 포함한다. 주 1회 요법에서 효과적인, '684 및 '234 출원의 특정 바람직한 화합물로는 WO2010/066684의 실시예 54-B, 54-Q, 57-S, 135-A, 137-N, 및 137-O의 화합물, 및 WO2006/059234의 실시예 26 및 52의 화합물을 포함한다. 본 발명의 주 1회 투여 방법에서 사용하기에 적합한 특정의 다른 화합물로는 파조파닙 (WO2007/064753), 티보자닙 (WO2002/088110)을 포함한다. 특정 실시양태에서, VEGF-R2 억제제는 5-((S)-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드 (즉, WO2010/066684의 실시예 54-B), 파조파닙, 및 티보자닙, 또는 그의 제약상 허용되는 염으로부터 선택된다.

특정 실시양태에서, VEGF-R2 억제제는 5-((S)-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염이거나, 또는 VEGF-R2 억제제는 1-(2-클로로-4-((6,7-디메톡시퀴놀린-4-일)옥시)페닐)-3-(5-메틸이속사졸-3-일)우레아 또는 그의 제약상 허용되는 염이거나, 또는 VEGF-R2 억제제는 5-[[4-[(2,3-디메틸-2H-인다졸-6-일)메틸아미노]-2-피리미디닐]아미노]-2-메틸벤졸술폰아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염이다.

5-((S)-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드 및 1-(2-클로로-4-((6,7-디메톡시퀴놀린-4-일)옥시)페닐)-3-(5-메틸이속사졸-3-일)우레아, 또는 제약상 허용되는 염은 본 발명의 방법 및 용도에서 사용하기에 특히 적합하다.

투여의 주기성이 1일 1회 미만인, 예컨대 매 4일마다 1회, 매 5일마다 1회, 매 6일마다 1회 투여, 주 1회 투여, 또는 매 2주마다 1회 투여인, VEGF-R2 억제제의 주기적인 경구 투여는 연령 관련 황반 변성을 비롯한 안구 혈관 질환에 대하여 효능이 있지만, 1일 1회 투여와 비교하였을 때 화합물의 전신, 예컨대 혈장 노출을 감소시킨다. 이론으로 제한하고자 하는 것은 아니지만, 전신 노출 감소는 VEGF-R2 억제제의 경구 투여와 관련된 전신 부작용을 감소시킬 것으로 예측된다. 예를 들어, 매 6일 또는 7일마다 경구적으로 투여된 화합물 2는 1일 1회 투여, 매 2일마다 투여 또는 매 4일마다 투여에 의해 투여된 화합물 2와 비교하였을 때 개선된 안전성 프로파일을 가진다. 하기 실시예 6 내지 9를 참조할 수 있다.

본 발명은 또한 주 1회 용량이 약 0.1 mg 내지 약 800 mg이거나, 더욱 바람직하게는 0.5 내지 500 mg인, VEGF-R2 억제제를 주 1회 용량으로 투여하는 단계를 포함하는, 환자에서 안구 혈관 질환을 치료 또는 예방하는 방법을 포함한다. 바람직한 주 1회 투여량은 투여되는 특이적인 VEGF-R2 억제제 및 환자 크기에 따라 달라질 것이다. 특정 실시양태에서, 파조파닙의 주 1회 인간 유효 용량은 약 5 mg 내지 약 800 mg이거나, 또는 바람직하게는 약 30 mg 내지 약 400 mg이고, 티보자닙의 경우는 약 0.1 mg 내지 약 5 mg이거나, 또는 바람직하게는 약 0.5 mg 내지 약 2 mg이다. 다른 실시양태에서, 5-((S)-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드 또는 5-(5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드의 주 1회 인간 유효 용량은 약 30 mg 내지 약 300 mg이거나, 또는 바람직하게는 약 50 mg 내지 약 200 mg이다. 다른 실시양태에서, 6-(6-아미노-피리미딘-4-일옥시)-나프탈렌-1-카르복실산 (3-트리플루오로메틸-페닐)-아미드, 5-(6-메틸아미노메틸-피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 (1-메틸-5-트리플루오로메틸-1H-피라졸-3-일)-아미드 또는 5-(6-메틸아미노메틸-피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 (5-시클로프로필-1-메틸-1H-피라졸-3-일)-아미드의 주 1회 인간 유효 용량은 약 5 mg 내지 약 100 mg이다. 다른 실시양태에서, 6-(6-히드록시메틸-피리미딘-4-일옥시)-나프탈렌-1-카르복실산 (3-트리플루오로메틸-페닐)-아미드 또는 5-(6,7-디히드로-5H-피롤로[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 (5-시클로프로필-이속사졸-3-일)-아미드의 주 1회 인간 유효 용량은 약 1 mg 내지 약 50 mg이다. 다른 실시양태에서, (-)-5-((S)-7-아세틸-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 (5-시클로프로필-이속사졸-3-일)-아미드의 주 1회 인간 유효 용량은 0.1 mg 내지 약 5 mg이다.

본원에서 사용되는 용어 "안구 혈관 질환"이란 비정상적인 또는 과도한 혈관 또는 림프관을 포함하는 맥락막, 공막, 망막 또는 관련 조직의 안구 질환을 의미하는 것으로 한다. 본 발명의 방법에 의해 치료 또는 예방될 수 있는 특정 안구 혈관 질환으로는 신생혈관 및 건성 연령 관련 황반 변성, 지도상 위축, 중심성 장액 망막병증, 낭포 황반 부종, 당뇨병성 망막병증, 증식성 당뇨병성 망막병증, 당뇨병성 황반 부종, 홍채 혈관신생, 미숙아 망막병증, 망막 중심 정맥 폐쇄 또는 망막 분지 정맥 폐쇄, 염증성/감염성 망막 혈관신생/부종 (예컨대, 후부 포도막염, 사르코이드증, 톡소플라즈마증, 히스토플라스마증, 보그트-고야나기-하라다(Vogt-Koyanagi-Harada) 질환, 다초점성 맥락막염, 만성 포도막염, 결핵, 매독, 점상 및 다초점성 내층 맥락막병증), 망막아세포종, 흑색종, 안구 종양, 망막 박리, 근시 혈관신생, 혈관무늬 망막병증, 일스병(Eales disease), 코우츠병(Coats disease), 소르스비 안저 이영양증(Sorsby's fundus dystrophy), 허혈성 망막병증 (망막 동맥 폐쇄, 다카야스병(Takayasu's), 경동맥 폐쇄), 및 맥락막 파열을 포함한다. 특정 실시양태에서, 본 치료 방법은 습성 및 건성 연령 관련 황반 변성, 당뇨병성 망막병증, 당뇨병성 황반 부종, 망막 중심 정맥 폐쇄 및 망막 분지 정맥 폐쇄의 치료에 적합하다.

특정 측면에서, 본 치료 방법은 또한 흑색종의 치료 또는 예방에 사용하는 데에도 적합하다.

본원에서 사용되는 바, "후안부 안배"라는 용어는 망막 색소 상피, 맥락막 및 공막 복합체를 의미한다.

본원에서 사용되는 바, "등가 용량"이라는 용어는 환자 또는 대상체에서의 유사 유효 용량과, 예컨대 인간에서의 유사 유효 용량과 상관관계에 있는 래트에서의 용량을 의미한다. 예를 들어, 인간 등가 용량은 체표면적 추정치 또는 다른 크기 조정 인자에 기초하여 래트와 인간 사이에 상관관계가 있을 수 있다. 비제한적인 일례에서, 래트에서의 10 mg/kg의 경구 투여 용량은 70 kg인 인간에 대해서는 100 mg 용량과 상관관계가 있는 것으로 추정된다. 래트와 대상체 종 (즉, 인간) 간의 최종 용량 상관관계는 당업계에 주지된 약동학적 특성, 대사 및 생체이용성 등을 비롯한 다수의 생물학적 특성에 따라 달라질 수 있다.

본원에서 사용되는 바, "염" 또는 "염들"이라는 용어는 본 발명의 화합물의 산 부가 또는 염기 부가 염을 의미한다. "염"은 특히 "제약상 허용되는 염"을 포함한다. "제약상 허용되는 염"이라는 용어는 본 발명의 화합물의 생물학적 유효성 및 특성을 보유하는 것으로서, 전형적으로는 생물학적으로 또는 달리 비바람직하지 않은 염을 의미한다. 다수의 경우에서, 본 발명의 화합물은 아미노기 및/또는 카르복실기 또는 그와 유사한 기의 존재에 의해 산 염 및/또는 염기 염을 형성할 수 있다.

무기산 및 유기산을 사용하여 제약상 허용되는 산 부가염을 형성할 수 있고, 그 예로, 아세테이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 베실레이트, 브로마이드/히드로브로마이드, 비카르보네이트/카르보네이트, 비술페이트/술페이트, 캄포르술포네이트, 클로라이드/히드로클로라이드, 클로르테오필로네이트, 시트레이트, 에탄디술포네이트, 푸마레이트, 글루셉테이트, 글루코네이트, 글루쿠로네이트, 히퓨레이트, 히드로아이오다이드/아이오다이드, 이세티오네이트, 락테이트, 락토비오네이트, 라우릴술페이트, 말레이트, 말레에이트, 말로네이트, 만델레이트, 메실레이트, 메틸술페이트, 나프토에이트, 납실레이트, 니코티네이트, 니트레이트, 옥타데카노에이트, 올레이트, 옥살레이트, 팔미테이트, 파모에이트, 포스페이트/히드로겐 포스페이트/디히드로겐 포스페이트, 폴리갈락투로네이트, 프로피오네이트, 스테아레이트, 숙시네이트, 술포살리실레이트, 타르트레이트, 토실레이트 및 트리플루오로아세테이트 염이 있다.

염이 유도될 수 있는 무기산으로는 예를 들어 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등을 포함한다.

염이 유도될 수 있는 유기산으로는 예를 들어 아세트산, 프로피온산, 글리콜산, 옥살산, 말레산, 말론산, 숙신산, 푸마르산, 타르타르산, 시트르산, 벤조산, 만델산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 톨루엔술폰산, 술포살리실산 등을 포함한다.

본원에서 사용되는 바, "제약상 허용되는 담체"라는 용어는 당업자에게 공지된 바와 같이, 임의의 모든 용매, 분산 매질, 코팅제, 계면활성제, 항산화제, 보존제 (예를 들어, 항박테리아제, 항진균제), 등장화제, 흡수 지연제, 염, 보존제, 약물 안정화제, 결합제, 부형제, 붕해제, 윤활제, 감미제, 향미제, 염료 등 및 이들의 조합을 포함한다 (예를 들어, 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Ed. Mack Printing Company, 1990, pp. 1289-1329] 참조). 임의의 통상의 담체가 활성 성분과 비상용성인 경우를 제외하고, 치료 또는 제약 조성물에서의 그의 사용은 고려된다.

본 발명의 화합물의 "치료 유효량"이라는 용어는 대상체의 생물학적 또는 의학적 반응, 예를 들어 효소 또는 단백질 활성의 감소 또는 억제, 또는 증상의 호전, 상태의 완화, 질환 진행의 저속화 또는 지연, 또는 질환의 예방 등을 유도하는 본 발명의 화합물의 양을 의미한다. 비제한적인 한 실시양태에서, "치료 유효량"이라는 용어는 대상체에게 투여되는 경우에, (1) (i) VEGF-R2에 의해 매개되거나, 또는 (ii) VEGF-R2의 활성과 관련이 있거나, 또는 (iii) VEGF-R2의 (정상적인 또는 비정상적인) 활성을 특징으로 하는 상태, 또는 장애 또는 질환을 적어도 부분적으로 완화, 억제, 예방 및/또는 호전시키는 데 효과적이거나; (2) VEGF-R2의 활성을 감소 또는 억제하는 데 효과적이거나; (3) VEGF-R2의 발현을 감소 또는 억제하는 데 효과적인 본 발명의 화합물의 양을 의미한다. 비제한적인 또 다른 실시양태에서, "치료 유효량"이라는 용어는 세포, 또는 조직, 또는 비-세포성 생물학적 물질, 또는 배지에 투여되는 경우에 VEGF-R2의 활성을 적어도 부분적으로 감소 또는 억제하는 데 효과적이거나; 또는 VEGF-R2의 발현을 적어도 부분적으로 감소 또는 억제하는 데 효과적인 본 발명의 화합물의 양을 의미한다. VEGF-R2에 대한 상기 실시양태에서 예시된 바와 같은 "치료 유효량"이라는 용어의 의미는 또한 임의의 다른 관련 단백질/펩티드/효소, 예컨대 VEGF-R2, 또는 다른 VEGF-R2 등에도 동일한 의미로 적용된다.

본원에서 사용되는 바, "대상체"라는 용어는 동물을 의미한다. 전형적으로, 상기 동물은 포유동물이다. 대상체는 또한 예를 들어, 영장류 (예를 들어, 인간, 여성 또는 남성), 소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 래트, 마우스, 어류, 조류 등을 의미한다. 특정 실시양태에서, 대상체는 영장류이다. 또 다른 실시양태에서, 대상체는 인간이다.

본원에서 사용되는 바, "억제하다," "억제" 또는 "억제하는"이라는 용어는 주어진 상태, 증상 또는 장애 또는 질환의 감소 또는 저해를 의미하거나, 또는 생물학적 활성 또는 과정의 기초 활성에서의 유의적인 감소를 의미한다.

본원에서 사용되는 바, 임의의 질환 또는 장애의 "치료하다," "치료하는" 또는 "치료"라는 용어는 한 실시양태에서, 질환 또는 장애의 호전 (즉, 질환 또는 그의 하나 이상의 임상적 증상의 발생의 저속화 또는 정지 또는 감소)을 의미한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다," "치료하는" 또는 "치료"란 환자가 인식할 수 없는 것을 비롯한, 하나 이상의 신체적 파라미터의 완화 또는 호전을 의미한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다," "치료하는" 또는 "치료"란 신체적으로 (예를 들어, 인식가능한 증상의 안정화) 또는 생리학적으로 (예를 들어, 신체적 파라미터의 안정화), 또는 이들 둘 모두인 방식으로 질환 또는 장애를 조절하는 것을 의미한다. 또 다른 실시양태에서, "치료하다," "치료하는" 또는 "치료"란 질환 또는 장애의 발병, 발달 또는 진행을 예방하거나 지연시키는 것을 의미한다.

본원에서 사용되는 바, 치료가 대상체에게 생물학적으로, 의학적으로, 또는 삶의 질에 있어서 도움이 된다면, 대상체는 치료를 "필요로 하는" 것이다.

본원에서 사용되는 바, 본 발명과 관련하여 (특히, 특허청구범위와 관련하여) 사용되는 "하나"("a," "an"), "그"("the")라는 용어 및 유사한 용어는 본원에서 달리 언급되지 않는 한, 또는 문맥상 명확하게 모순되지 않는 한, 단수 및 복수의 의미, 둘 모두를 포함하는 것으로 해석되어야 한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 본 발명의 화합물 및 제약상 허용되는 담체를 포함하는, 경구 투여용 제약 조성물을 제공한다. 추가로, 본 발명의 제약 조성물은 고체 형태 (제한없이, 캡슐제, 정제, 환제, 과립제, 분제 또는 좌제 포함), 또는 액체 형태 (제한없이, 액제, 현탁제 또는 에멀젼 포함)로 제조될 수 있다. 제약 조성물은 멸균과 같은 통상적인 제약학적 작업에 의해 처리될 수 있고/거나, 통상적인 불활성 희석제, 윤활제, 완충화제 뿐만 아니라 아주반트, 예컨대 보존제, 안정제, 습윤제, 유화제 및 완충제 등을 함유할 수 있다.

전형적으로, 제약 조성물은

a) 희석제, 예컨대 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 만니톨, 소르비톨, 셀룰로스 및/또는 글리신;

b) 윤활제, 예컨대 실리카, 활석, 스테아르산, 그의 마그네슘 또는 칼슘 염 및/또는 폴리에틸렌글리콜; 정제의 경우에는 또한

c) 결합제, 예컨대 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스 및/또는 폴리비닐피롤리돈; 원하는 경우,

d) 붕해제, 예컨대 전분, 아가, 알긴산 또는 그의 나트륨 염 또는 발포성 혼합물; 및/또는

e) 흡착제, 착색제, 향미제 및 감미제와 함께 활성 성분을 포함하는 정제 및 젤라틴 캡슐제이다.

정제는 당업계에 공지된 방법에 따라 필름 코팅되거나 장용성 코팅될 수 있다.

경구 투여에 적합한 조성물은 유효량의 본 발명의 화합물을 정제, 로젠지, 수성 또는 오일성 현탁제, 분산가능한 분제 또는 과립제, 에멀젼, 경질 또는 연질 캡슐제, 또는 시럽제 또는 엘릭시르의 형태로 포함한다. 경구용으로 사용하기 위한 조성물은 제약 조성물의 제조에 대해 당업계에 공지된 임의의 방법에 따라 제조되고, 이러한 조성물은 제약상 우아하고 맛좋은 제제를 제공하기 위해 감미제, 향미제, 착색제 및 보존제로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 작용제를 함유할 수 있다. 정제는 활성 성분을, 정제의 제조에 적합한 비독성의 제약상 허용되는 부형제와 혼합하여 함유할 수 있다. 이러한 부형제는, 예를 들어, 불활성 희석제, 예컨대 탄산칼슘, 탄산나트륨, 락토스, 인산칼슘 또는 인산나트륨; 과립화제 및 붕해제, 예를 들어 옥수수 전분 또는 알긴산; 결합제, 예를 들어 전분, 젤라틴 또는 아카시아; 및 윤활제, 예를 들어 스테아르산마그네슘, 스테아르산 또는 활석이다. 정제는 코팅되지 않거나, 또는 공지된 기법에 의해 코팅되어 위장관에서의 붕해 및 흡수를 지연시킴으로써 보다 장기간에 걸쳐 지속적인 작용을 제공한다. 예를 들어, 글리세릴 모노스테아레이트 또는 글리세릴 디스테아레이트와 같은 시간 지연 물질이 사용될 수 있다. 경구용 제제는, 활성 성분이 불활성 고체 희석제, 예를 들어, 탄산칼슘, 인산칼슘 또는 카올린과 혼합된 경질 젤라틴 캡슐제, 또는 활성 성분이 물 또는 오일 매질, 예를 들어, 땅콩유, 액상 파라핀 또는 올리브유와 혼합된 연질 젤라틴 캡슐제로서 제시될 수 있다.

본 발명에 따른 화합물의 활성은 하기 시험관내 & 생체내 방법에 의해 평가될 수 있다.

하기는 단지 일례로서의 설명이다.

실시예 1: 래트 레이저 유도 맥락막 혈관신생 (CNV) 모델; 1일 1회 투여

레이저를 가하기 약 1시간 전, 3개월된 브라운 노르웨이 래트에 위약 또는 표 1의 활성제를 하기 표 2에 명시되어 있는 투여 농도 및 제제로 투여하였다. 페닐에프린 및 시클로펜톨레이트 (앨테어 파마슈티칼즈 인코퍼레이티드( Altaire Pharmaceuticals inc .: 미국 뉴욕주 아케보그 ) 및 아코른 인코퍼레이티 드( Akorn Inc .: 미국 일리노이주 레이크 포레스트 )) 한 방울을 이용하여 래트의 눈을 확장시킨 후, 고정시켰다. 각각의 눈에 오큘라이트 GLx 532 nm (Oculight GLx 532 nm) 레이저 (이리덱스(Iridex))를 이용하여 시신경으로부터의 디스크 직경이 2-3인 4개의 레이저 화상을 입혔다. 각 연구군은 10마리의 래트, 20개의 눈 및 80개의 데이터 점을 가졌다. 레이저 광응고술을 통해 기화 기포가 성공적으로 유도되었다.

레이저 손상 후, 래트에 위약 또는 표 1의 화합물을 표 2에 명시되어 있는 투여 농도 및 제제로 1일째부터 11일째 또는 12일째까지 1일 1회로 투여하였다. 눈을 수거하기 직전, 설치류에 2,000 kd 플루오레세인 이소티오시아네이트 (FITC) 덱스트란 혈관 표지를 i.v.로 주사하였다. 최종 용량을 투여한 후 약 24시간째에 조직을 수거하였다.

눈을 4% 파라포름알데히드로 고정시키고, 망막 색소 상피 (RPE)/맥락막/공막 복합체를 절개하여 현미경용 슬라이드 위에 놓았다. 각 CNV 병변의 형광 영상을 포착하고, 악시오비전(Axiovision) 소프트웨어 (버전 4.5 자이스(Version 4.5 Zeiss))를 사용하여 마스크된 데이터 상에서 병변의 면적을 정량화하였다. 뉴먼-쿨스(Newman-Keuls) 사후 분석법 (그래프패드 소프트웨어, 인코퍼레이티드(GraphPad Software, Inc.: 미국 캘리포니아주 라 졸라)로부터 입수된 프리즘 v. 4.02(Prism v. 4.02))을 이용하여 일원분산분석(ANOVA)에 의해 군간의 차이를 분석하였다. 본원에서 효능은 위약과의 비교로 나타낸, 처리 후 CNV 면적의 감소율(%)을 의미하는 것으로 정의된다.

도 1은 실시예 1의 래트 모델에서 화합물 2의 1일 1회 투여에 대한 ED₅₀/ED₉₀ 플롯을 나타낸 플롯이다. 화합물 2는 1일 1회 투여시 용량에 의존하는 방식으로 억제하는 것으로 나타났다. 1일 1회 투여 요법에서, 화합물 2에 대한 ED₅₀은 3.3 mg/kg이고, ED₉₀은 13.0 mg/kg이었다. ED₅₀은 CNV 면적이 비히클 처리군에서의 CNV 면적보다 50% 더 작다는 것을 의미하고, 유사하게, ED₉₀은 90% 더 작다는 것을 의미한다. N은 특정 용량의 화합물 2에 대해 완료된 개별 래트 CNV 연구의 개수를 의미한다. 각 군은 10마리의 래트, 한쪽 눈당 4개의 레이저 화상, 및 80개의 데이터점/군으로 구성되었다. 검정 기간은 레이저를 가한 후 11일 또는 12일이었다 (1 mg/kg n=2, 3 mg/kg n=5, 10 mg/kg n=7, 30 mg/kg n =1).

실시예 2: 래트 레이저 유도 맥락막 혈관신생 (CNV) 모델;

매 2일, 4일 또는 6일마다 투여

레이저를 가하기 약 1시간 전, 3개월된 브라운 노르웨이 래트에 위약 또는 물 중 0.5% 메틸 셀룰로스 및 0.1% 트윈 80 중 3 또는 10 mg/kg의 화합물 2의 현탁액을 투여하였다. 페닐에프린 및 시클로펜톨레이트 (앨테어 파마슈티칼즈 인코퍼레이티드(미국 뉴욕주 아케보그 ) 및 아코른 인코퍼레이티드(미국 일리노이주 레이크 포레스트 )) 한 방울을 이용하여 래트의 눈을 확장시킨 후, 고정시켰다. 각각의 눈에 오큘라이트 GLx 532 nm 레이저 (이리덱스)를 이용하여 시신경으로부터의 디스크 직경이 2-3인 4개의 레이저 화상을 입혔다. 레이저 광응고술을 통해 기화 기포가 성공적으로 유도되었다. 각 연구군은 10마리의 래트, 20개의 눈 및 80개의 데이터 점을 가졌다.

레이저 손상 후, 래트에 위약 또는 3 또는 10 mg/kg의 화합물 2를 매 2일마다, 매 4일마다, 또는 매 6일마다 1회 투여하였다. 눈을 수거하기 직전, 설치류에 2,000 kd 플루오레세인 이소티오시아네이트 (FITC) 덱스트란 혈관 표지를 i.v.로 주사하였다. 최종 용량을 투여한 후 약 24시간째에 조직을 수거하였다. 매 2일마다 투여한 경우, 연구는 레이저를 가한 후 11일째에 완료되었다. 매 4일마다, 또는 매 6일마다 투여한 경우, 연구는 레이저를 가한 후 13일째에 완료되었다.

눈을 4% 파라포름알데히드로 고정시키고, RPE/맥락막/공막 복합체를 절개하여 현미경용 슬라이드 위에 놓았다. 각 CNV 병변의 형광 영상을 포착하고, 악시오비전 소프트웨어 (버전 4.5 자이스)를 사용하여 마스크된 데이터 상에서 병변의 면적을 정량화하였다. 뉴먼-쿨스 사후 분석법 (그래프패드 소프트웨어, 인코퍼레이티드(미국 캘리포니아주 라 졸라)로부터 입수된 프리즘 v. 4.02)을 이용하여 일원분산분석(ANOVA)에 의해 군간의 차이를 분석하였다.

본원에서 효능은 위약과의 비교로 나타낸, 처리 후 CNV 면적의 감소율(%)을 의미하는 것으로 정의된다.

실시예 3: 래트 레이저 유도 맥락막 혈관신생 (CNV) 모델; 주 1회 투여

레이저를 가하기 약 1시간 전, 3개월된 브라운 노르웨이 래트에 위약 또는 표 1의 활성제를 상기 표 2에 명시되어 있는 투여 농도 및 제제로 투여하였다. 페닐에프린 및 시클로펜톨레이트 (앨테어 파마슈티칼즈 인코퍼레이티드(미국 뉴욕주 아케보그 ) 및 아코른 인코퍼레이티드(미국 일리노이주 레이크 포레스트 )) 한 방울을 이용하여 래트의 눈을 확장시킨 후, 고정시켰다. 각각의 눈에 오큘라이트 GLx 532 nm 레이저 (이리덱스)를 이용하여 시신경으로부터의 디스크 직경이 2-3인 4개의 레이저 화상을 입혔다. 각 연구군은 10마리의 래트, 20개의 눈 및 80개의 데이터 점을 가졌다. 레이저 광응고술을 통해 기화 기포가 성공적으로 유도되었다.

레이저 손상 후, 래트에 위약, 또는 표 2에 명시되어 있는 바와 같이 제제화된 표 1의 화합물을 6일 및 13일째에 투여하였다. 눈을 수거하기 직전, 설치류에 2,000 kd 플루오레세인 이소티오시아네이트 (FITC) 덱스트란 혈관 표지를 i.v.로 주사하였다. 최종 용량을 투여한 후 약 24시간째에 조직을 수거하였다.

눈을 4% 파라포름알데히드로 고정시키고, RPE/맥락막/공막 복합체를 절개하여 현미경용 슬라이드 위에 놓았다. 각 CNV 병변의 형광 영상을 포착하고, 악시오비전 소프트웨어 (버전 4.5 자이스)를 사용하여 마스크된 데이터 상에서 병변의 면적을 정량화하였다. 뉴먼-쿨스 사후 분석법 (그래프패드 소프트웨어, 인코퍼레이티드(미국 캘리포니아주 라 졸라)로부터 입수된 프리즘 v. 4.02)을 이용하여 일원분산분석(ANOVA)에 의해 군간의 차이를 분석하였다. 본원에서 효능은 위약과의 비교로 나타낸, 처리 후 CNV 면적의 감소율(%)을 의미하는 것으로 정의된다.

도 2는 실시예 1, 2, 및 3의 CNV 모델에서 래트에게 상이한 투여 간격으로 투여된 두 용량의 화합물 2의 억제를 나타내는 막대 차트이다. 10 mg/kg의 투여 요법 모두, 및 3 mg/kg으로 1일 1회 및 매 2일마다 투여된 때에 비히클에 대한 통계적 신뢰도는 p<0.001인 것으로 관찰되었다. 비히클과 비교하였을 때, 매 4일마다, 매 6일마다, 또는 매 7일마다 투여된 3 mg/kg 용량의 경우, 통계학적으로는 어떤 유의적인 차이도 관찰되지 않았다.

화합물 2를 매 2일마다, 매 4일마다, 매 6일마다 10 mg/kg으로 투여한 경우, 실시예 1 및 2의 래트 CNV 모델에서의 1일 1회 투여와 등가인 효능을 얻었다. 화합물 2를 주 1회 투여한 경우, 10 mg/kg의 용량으로 1일 1회 투여한 경우와 비교하였을 때 효능은 약간 더 낮았다.

화합물 2를 이용하여 1일 1회 미만으로 투여하는 것이 효능이 있는지 여부를 알아보기 위해 연구를 수행하였다. 도 2는 실시예 1, 2, 및 3의 래트 레이저 CNV 모델에서 3 mg/kg 또는 10 mg/kg의 화합물 2를 투여하였을 때, 그에 대한 효능 결과를 요약한 막대 차트이다. 화합물 2를 래트 레이저 CNV 모델에서 3 및 10 mg/kg으로 1일 1회, 또는 매 2일마다, 매 4일마다, 매 6일마다 및 7일마다 투여하였다. 각 연구에서, 최종 투여는 조직 수집 24시간 전에 수행하였다. 연구 기간은 11일 내지 14일이었고, 이는 실시예 1-3에 명시되어 있다. 10 mg/kg의 투여 요법 모두, 및 3 mg/kg으로 1일 1회 및 매 2일마다 투여된 때에 비히클에 대한 통계적 신뢰도는 p<0.001인 것으로 관찰되었다. 매 4일마다, 매 6일마다, 및 매 7일마다 투여된 3 mg/kg의 경우, 비히클에 대한 통계적 신뢰도는 p>0.05인 것으로 관찰되었다.

실시예 1 및 3에서 시험된 화합물 모두, 1일 1회 투여된 때와 비교하여 주 1회 투여된 때에 약간의 효능을 나타내었다. 화합물 1, 2, 3, 및 6은 화합물의 순차적인 투여 사이인 장시간의 기간에 가장 큰 수준의 효능을 나타내었다. 화합물 8, 9 및 10은 주 1회 투여 요법으로 투여된 때에 가장 작은 효능을 나타내었다.

실시예 4: 래트 레이저 유도 맥락막 혈관신생 (CNV) 모델;

단일 용량 투여

3개월된 브라운 노르웨이 래트에 레이저를 가하고, 처음부터 위약 또는 활성제로 처리하지는 않았다. 페닐에프린 및 시클로펜톨레이트 (앨테어 파마슈티칼즈 인코퍼레이티드(미국 뉴욕주 아케보그 ) 및 아코른 인코퍼레이티드(미국 일리노이주 레이크 포레스트 )) 한 방울을 이용하여 래트의 눈을 확장시킨 후, 고정시켰다. 각각의 눈에 오큘라이트 GLx 532 nm 레이저 (이리덱스)를 이용하여 시신경으로부터의 디스크 직경이 2-3인 4개의 레이저 화상을 입혔다. 각 연구군은 10마리의 래트, 20개의 눈 및 80개의 데이터 점을 가졌다. 레이저 광응고술을 통해 기화 기포가 성공적으로 유도되었다.

레이저 손상 후 13일째 또는 21일째, 래트에 위약 또는 물 중 0.5% 메틸 셀룰로스 및 0.5% 및 0.1% 트윈 80 중 10 mg/kg의 화합물 2의 현탁액을 투여하였다. 눈을 수거하기 직전, 설치류에 2,000 kd 플루오레세인 이소티오시아네이트 (FITC) 덱스트란 혈관 표지를 i.v.로 주사하였다. 단일 용량을 투여한 후 약 24시간째에 조직을 수거하였다. 즉, 연구는 레이저를 가한 후 14일째 또는 22일째에 완료되었다.

레이저를 가한 후 13일째 또는 21일째에 화합물 2 또는 위약을 단일 경구 용량으로서 투여하였다. 두 실험에서 14일째 및 22일째 CNV 면적을 측정하였다. 위약을 투여받은 래트와 비교하였을 때, 각각 CNV는 49% (13일째 단일 용량)만큼 및 43% (21일째 단일 용량)만큼 억제되었다 (p<0.001 대 비히클).

실시예 5: 단일 경구 용량 투여 후, 브라운 노르웨이 래트에서의 안구 PK

3개월된 브라운 노르웨이 래트에 표 1의 활성제를 하기 표 3에 명시되어 있는 투여 농도 및 제제로 경구적으로 투여하였다. 투여 후 6, 24, 48, 72, 96, 120 및 144시간째에 활성제당 래트 2마리씩으로부터 안구 조직 및 혈장을 수집하였다. 수집된 안구 조직은 망막 및 후안부 안배였다. 각 시점에 4개의 개별 망막, 4개의 개별 후안부 안배 및 2개의 개별 혈장 샘플 중의 약물 수준을 측정하였다.

안구 조직을 균질화시키고, 혈장 단백질을 침전시키고, LC-MS/MS에 의해 약물 농도를 분석하였다. 화합물 1, 2, 6 및 9에 대한 망막, 후안부 안배 (PEC) 및 혈장에서의 노출은 곡선하 면적 측정치 (AUC)로서 하기 표 4에 열거되어 있다.

도 4는 후안부 안배, 망막 및 혈장 중 화합물 2의 농도를 나타내는 플롯이다 . 화합물 2는 7일 동안 안구 조직 (예컨대, 망막 및 PEC)에서 실질적으로 일정한 농도로 유지되었지만, 혈장으로부터 상대적으로 빠르게 제거되었다. 상기 4개의 화합물 중 화합물 2의 망막 대 혈장 노출의 비가 가장 높았다. 화합물 2의 약동학적 프로파일은 안구 조직 중 유리 약물을 제공하여 약리학적 효능을 7일 이상 동안 지속시킨다. 혈장으로부터 화합물 2의 신속한 제거는 VEGF-R2 억제와 관련된 비바람직한 전신 부작용을 최소화시키는 것으로 예상된다. 이론으로 제한하고자 하는 것은 아니지만, 국소 안구 노출로부터 전신 (예컨대, 혈장) 노출로의 분기는 화합물 2의 전신 농도의 감소에 기인하여 표적에 대해 미치는 전신 부작용의 위험을 최소화시키면서, 안구 혈관 질환의 치료에서 국소 효능을 지속시켜 주는 것으로 여겨진다.

도 3은 후안부 안배, 망막 및 혈장 중 화합물 1의 농도를 나타내는 플롯이다. 화합물 1은 1주 이상 동안 후안부 안배 조직에서 안구 노출을 지속시켰다. 그러나, 화합물 1은 또한 투여 후 1주 전 기간에 걸쳐 증가된 혈장 노출을 나타내었다.

도 5는 후안부 안배, 망막 및 혈장 중 화합물 6의 농도를 나타내는 플롯이다. 화합물 6은 화합물 2와 가장 유사한 안구 프로파일을 가졌다. 그러나, 화합물 6의 망막 대 혈장 노출의 비는 화합물 2보다 낮게 나타났다. 0.3 mg/kg의 화합물 6은 주 1회 투여되었을 때, 1일 1회 투여와 비교하여 효능을 39% 상실하였다. 대조적으로, 10 mg/kg의 화합물 2는 주 1회 투여되었을 때, 1일 1회 투여와 비교하여 효능을 16% 상실하였다. 표 2를 참조할 수 있다.

도 6은 후안부 안배, 망막 및 혈장 중 화합물 9의 농도를 나타내는 플롯이다. 화합물 9의 후안부 안배, 망막 및 혈장 농도는 각 샘플링 시점에서의 것과 실질적으로 유사하였다. 이론으로 제한하고자 하는 것은 아니지만, 화합물 9를 주 1회 투여 요법으로 투여하였을 때 효능이 없었던 것은, 혈장 노출과 안구 노출이 유사하고, 1주 동안에 걸쳐 안구 노출이 꾸준하게 감소되었기 때문인 것으로 여겨진다.

실시예 6-8 화합물 2를 경구적으로 투여받은 브라운 노르웨이 래트에서의 조직병리학적 연구

브라운 노르웨이 래트에게 비히클 또는 화합물 2를 3 내지 30 mg/kg 범위의 용량으로 0.5% 메틸 셀룰로스 및 0.1% 트윈 80 중의 현탁액으로서 경구적으로 투여하였다. 한 투여 요법에서, 14일 동안 매일 3, 10, 및 30 mg/kg의 용량으로 투여하였다. 상기 군에 있는 동물은 플루오레세인 이소티오시아네이트 (FITC) 덱스트란 혈관 표지의 최종 i.v. 주사를 맞지 않았다.

다른 투여 요법에서, 즉, 매 2일마다, 매 4일마다, 또는 매 6일마다 투여하는 요법에서, 래트는 실시예 2에 기술되는 바와 같이 레이저 유도 CNV를 가졌다. 같은 래트 개체에서 CNV 분석 뿐만 아니라 제한 부검을 실시하였다. 0일째 (상기 기술된 바와 같이 레이저를 가한 날)를 출발로 하여, 10 mg/kg의 화합물 2를 11일 동안 매 2일마다, 13일 동안 매 4일마다, 또는 13일 동안 매 6일마다 투여하였다 (하기 표 5에 요약되어 있다). 화합물 2를 투여하지 않는 날에 비히클을 투여하였다. 연구 종결시, 안락사시키기 약 10분 전에 PBS 중에 용해된 FITC-덱스트란 2,000 KD (12.5 mg/mL) 500 ㎕를 동물에게 i.v. 주사하였다. 래트에게 주사함으로써, 기술된 바와 같이 CNV의 혈관구조 면적을 평가할 수 있었다.

각각의 상기 연구로부터 군당 5 내지 6마리의 래트에서 제한 부검을 실시하였다. 모든 동물로부터 신장, 심장, 뇌, 위장관 (위, 십이지장, 공장, 회장, 맹장, 결장 및 직장), 췌장, 및 장간막 림프절을 수집하였다. 조직을 10% 완충처리된 포르말린 중에 고정시키고, 통상적으로 프로세싱하여 현미경용 슬라이드에 놓았다. 모든 조직을 현미경으로 검사하였다.

실시예 6 14일 동안 매일 화합물 2를 투여받은 브라운 노르웨이 래트에서의 조직병리학적 소견

브라운 노르웨이 래트에게 표 5의 스케줄 (^a)에 따라 14일 동안 매일 3, 10 또는 30 mg/kg의 용량으로 투여하였다. 췌장의 경우, ≥3 mg/kg/일인 용량에서, 신장 및 뇌의 맥락얼기의 경우, ≥10 mg/kg/일인 용량에서, 시험 항목과 관련된 변화가 일어났다. 신장에서는 시험 항목과 관련된 사구체병증이 ≥10 mg/kg/일인 용량에서 나타난 반면, 30 mg/kg/일에서는 세뇨관 호염기구증가증 및 염증성 침윤이 증가된 중증도로 나타났다. ≥3 mg/kg/일인 용량에서, 외분비 췌장의 단일 세포 괴사 (세엽 세포 및 간헐적 도관 세포의 괴사)가 발생하였다. 뇌에서는, ≥10 mg/kg/일인 용량에서, 맥락얼기 간질의 유리질화/부종 및 소동맥/세동맥에 영향을 미치는 세포 잔해가 나타났다. ≥10 mg/kg/일인 용량에서 췌장에서의 추가의 변화로는 세엽 세포 위축 및 효소원 과립 감소를 포함하였다.

실시예 7 11일 동안 매 2일마다 화합물 2를 투여받은 브라운 노르웨이 래트에서의 조직병리학적 소견

브라운 노르웨이 래트에게 표 5의 스케줄 (^b)에 따라 11일 동안 매일 10 mg/kg의 용량으로 투여하였다. 매 2일마다 투여받은 투여군에서의 시험 항목과 관련된 변화로는 맥락얼기 세동맥과 관련된 최소의 염증성 침윤을 포함하였다. 신장에는 최소 내지 중간 정도의 사구체병증이 나타났다. 추가로, 대조군과 비교하여 증가된 중증도의 세뇨관 호염기구증가증이 발생하였고, 염증성 세포 침윤의 발생 또한 증가하였다. 췌장에서, 췌장의 세엽 세포 및 간헐적 도관 세포의 단일 세포 괴사가 분명하게 나타났다.

실시예 8 13일 동안 매 4일마다 또는 매 6일마다 화합물 2를 투여받은 브라운 노르웨이 래트에서의 조직병리학적 소견

브라운 노르웨이 래트에게 표 5의 스케줄 (^c)에 따라 13일 동안 매일 10 mg/kg의 용량으로 투여하였다. 매 4일마다 투여받은 투여군 연구에서 시험 항목과 관련된 변화로는 최소 내지 중간 정도의 사구체병증, 최소의 맥락얼기 변화 (세포 잔해 및/또는 유리화/부종), 및/또는 외분비 췌장의 최소의 아폽토시스를 포함하였다. 추가로, 매 4일마다 10 mg/kg을 투여받은 군 중 1마리의 동물은 원주형으로 분포되어 확산되는 고유판 확장을 특징으로 하는 대장 부종을 가졌다. 매 4일마다 10 mg/kg을 투여받은 군 중 또 다른 1마리의 동물은 시험 항목에 기인하는 것으로 간주되는, 직장 근육내 출혈 및 염증 병소 부위를 가졌다.

본 연구 조건하에서, 매 6일마다 10 mg/kg을 투여받은 동물에서는 시험 항목과 관련된 어떤 변화도 없었다.

실시예 9 4주 동안 매주 화합물 2를 투여받은 브라운 노르웨이 래트에서의 조직병리학적 소견

나이브 브라운 노르웨이 래트에게 비히클 또는 화합물 2를 3 내지 30 mg/kg/주 범위의 용량으로 0.5% 메틸 셀룰로스 및 0.1% 트윈 80 중의 현탁액으로서 경구적으로 투여하였다 (1일째, 8일째, 15일째, 22일째 및 29일째 투여된 용량, n = 5마리의 래트/군, 상세한 내용은 하기 표 6에 개략적으로 기재되어 있다).

연구 종결시, 완전한 부검을 실시하고, 대조군 및 30 mg/kg 용량군으로부터 엄선된 목록의 조직 및 기관을 검사하였다. 모든 동물로부터 중대한 병변 및 잠재적인 표적 조직 (신장, 뇌, 심장, 및 췌장)을 검사하였다. 시험 항목과 관련된 어떤 미세한 변화도 없었다.

Claims

눈 혈관 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 다회 용량의 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서
(a) 순차적인 용량은 5일 이상의 간격을 두고 투여되고;
(b) VEGF-R2 억제제는, 레이저 유도 혈관신생 모델에서 항목 (a)에 제공된 투여 빈도에 따라 등가 용량으로 래트에게 투여되었을 때, 위약 대조군에 비하여 약 40% 이상만큼 혈관신생 면적을 감소시키고, 용량 투여 72시간 후, 래트에서 약 10 nM 이하의 혈장 농도를 제공하는 것인,
눈 혈관 질환을 앓고 있거나 또는 상기 질환에 걸리기 쉬운 환자를 치료하는 방법.
눈 혈관 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 다회 용량의 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서
(a) 순차적인 용량은 5일 이상의 간격을 두고 투여되고;
(b) VEGF-R2 억제제는, 레이저 유도 혈관신생 모델에서 항목 (a)에 제공된 투여 빈도에 따라 등가 용량으로 래트에게 투여되었을 때, 위약 대조군에 비하여 약 40% 이상만큼 혈관신생 면적을 감소시키고, 용량 투여 1일 내지 5일 후 측정하였을 때, 래트에서 혈장 노출보다 5배 이상 더 큰 후안부 안배 노출을 제공하는 것인,
눈 혈관 질환을 앓고 있거나 또는 상기 질환에 걸리기 쉬운 환자를 치료하는 방법.
눈 혈관 질환의 치료를 필요로 하는 환자에게 다회 용량의 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 단계를 포함하며, 여기서 순차적인 용량은 5일 이상의 간격을 두고 투여되고, VEGF-R2 억제제는
5-[[4-[(2,3-디메틸-2H-인다졸-6-일)메틸아미노]-2-피리미디닐]아미노]-2-메틸벤졸술폰아미드,
5-((S)-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드;
6-(6-아미노-피리미딘-4-일옥시)-나프탈렌-1-카르복실산 (3-트리플루오로메틸-페닐)-아미드;
(-)-5-((S)-7-아세틸-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 (5-시클로프로필-이속사졸-3-일)-아미드;
5-(5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드;
1-(2-클로로-4-((6,7-디메톡시퀴놀린-4-일)옥시)페닐)-3-(5-메틸이속사졸-3-일)우레아; 및
6-(6-히드록시메틸-피리미딘-4-일옥시)-나프탈렌-1-카르복실산 (3-트리플루오로메틸-페닐)-아미드, 또는 그의 제약상 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인,
눈 혈관 질환을 앓고 있거나 또는 상기 질환에 걸리기 쉬운 환자를 치료하는 방법.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 질환이 연령 관련 황반 변성, 망막 정맥 폐쇄, 당뇨병성 망막병증, 황반 부종 또는 당뇨병성 황반 부종인 방법.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 순차적인 용량이 6일, 7일, 8일 또는 9일의 간격을 두고 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 순차적인 용량이 7일의 간격을 두고 투여되는 것인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, VEGF-R2 억제제가 5-((S)-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, VEGF-R2 억제제가 1-(2-클로로-4-((6,7-디메톡시퀴놀린-4-일)옥시)페닐)-3-(5-메틸이속사졸-3-일)우레아 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, VEGF-R2 억제제가 5-[[4-[(2,3-디메틸-2H-인다졸-6-일)메틸아미노]-2-피리미디닐]아미노]-2-메틸벤졸술폰아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염인 방법.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 환자가 인간인 방법.
눈 혈관 질환의 치료에 사용하기 위한 경구용 제약 약제가,
(a) 순차적인 용량이 5일 이상의 간격을 두고 투여되고;
(b) 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제가, 레이저 유도 혈관신생 모델에서 항목 (a)에 제공된 투여 빈도에 따라 등가 용량으로 래트에게 투여되었을 때, 위약 대조군에 비하여 약 40% 이상만큼 혈관신생 면적을 감소시키고, 용량 투여 72시간 후, 래트에서 약 10 nM 이하의 혈장 농도를 제공하는 것인 투여 요법에서 사용하기에 적합한 것인,
상기 약제의 제조에 있어서 VEGF-R2 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
눈 혈관 질환의 치료에 사용하기 위한 경구용 제약 약제가,
(a) 순차적인 용량이 5일 이상의 간격을 두고 투여되고;
(b) 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제가, 레이저 유도 혈관신생 모델에서 항목 (a)에 제공된 투여 빈도에 따라 등가 용량으로 래트에게 투여되었을 때, 위약 대조군에 비하여 약 40% 이상만큼 혈관신생 면적을 감소시키고, 용량 투여 1일 내지 5일 후 측정하였을 때, 래트에서 혈장 노출보다 5배 이상 더 큰 후안부 안배 노출을 제공하는 것인 투여 요법에서 사용하기에 적합한 것인,
상기 약제의 제조에 있어서 VEGF-R2 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
순차적인 용량이 5일 이상의 간격을 두고 투여되는 투여 요법에서 사용하기에 적합한, 눈 혈관 질환의 치료에 사용하기 위한 경구용 제약 약제의 제조에 있어서,
5-[[4-[(2,3-디메틸-2H-인다졸-6-일)메틸아미노]-2-피리미디닐]아미노]-2-메틸벤졸술폰아미드,
5-((S)-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드;
6-(6-아미노-피리미딘-4-일옥시)-나프탈렌-1-카르복실산 (3-트리플루오로메틸-페닐)-아미드;
(-)-5-((S)-7-아세틸-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 (5-시클로프로필-이속사졸-3-일)-아미드;
5-(5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드;
1-(2-클로로-4-((6,7-디메톡시퀴놀린-4-일)옥시)페닐)-3-(5-메틸이속사졸-3-일)우레아; 및
6-(6-히드록시메틸-피리미딘-4-일옥시)-나프탈렌-1-카르복실산 (3-트리플루오로메틸-페닐)-아미드, 또는 그의 제약상 허용되는 염으로 이루어진 군으로부터 선택되는 혈관 내피 성장 인자 수용체 2 (VEGF-R2) 억제제 또는 그의 제약상 허용되는 염의 용도.
제11항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 눈 혈관 질환이 연령 관련 황반 변성, 당뇨병성 망막병증, 망막 정맥 폐쇄, 황반 부종 또는 당뇨병성 황반 부종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 용도.
제11항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 순차적인 용량이 6일, 7일, 8일 또는 9일의 간격을 두고 투여되는 것인 용도.
제11항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 순차적인 용량이 7일의 간격을 두고 투여되는 것인 용도.
제11항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, VEGF-R2 억제제가 5-((S)-6-메틸-5,6,7,8-테트라히드로-피리도[3,4-d]피리미딘-4-일옥시)-인돌-1-카르복실산 [5-(1-메틸-시클로프로필)-2H-피라졸-3-일]-아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염인 용도.
제11항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, VEGF-R2 억제제가 1-(2-클로로-4-((6,7-디메톡시퀴놀린-4-일)옥시)페닐)-3-(5-메틸이속사졸-3-일)우레아 또는 그의 제약상 허용되는 염인 용도.
제11항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, VEGF-R2 억제제가 5-[[4-[(2,3-디메틸-2H-인다졸-6-일)메틸아미노]-2-피리미디닐]아미노]-2-메틸벤졸술폰아미드 또는 그의 제약상 허용되는 염인 용도.
제11항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 환자가 인간인 용도.