KR20130141648A - 렙틴 유도체 - Google Patents

렙틴 유도체 Download PDF

Info

Publication number
KR20130141648A
KR20130141648A KR1020137018975A KR20137018975A KR20130141648A KR 20130141648 A KR20130141648 A KR 20130141648A KR 1020137018975 A KR1020137018975 A KR 1020137018975A KR 20137018975 A KR20137018975 A KR 20137018975A KR 20130141648 A KR20130141648 A KR 20130141648A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
compound
leptin
group
indicates
moiety
Prior art date
Application number
KR1020137018975A
Other languages
English (en)
Inventor
야노스 티보르 코드라
킬리안 발데마르 콘데-프리에뵈스
요한 프레드릭 폴슨
커스틴 라운
Original Assignee
노보 노르디스크 에이/에스
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 노보 노르디스크 에이/에스 filed Critical 노보 노르디스크 에이/에스
Publication of KR20130141648A publication Critical patent/KR20130141648A/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/5759—Products of obesity genes, e.g. leptin, obese (OB), tub, fat
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/2264—Obesity-gene products, e.g. leptin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/542—Carboxylic acids, e.g. a fatty acid or an amino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/545—Heterocyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Abstract

본 발명은 렙틴 유도체, 조성물 및 이들의 치료적 사용과 관련된다.

Description

렙틴 유도체{LEPTIN DERIVATIVES}
본 발명은 새로운 렙틴 유도체 및 이에 관련된 양태, 예를 들어, 이들의 조성물 및 이들의 치료적 사용과 관련된다.
렙틴은 식욕 및 신진대사를 포함하는, 에너지 섭취 및 에너지 소비의 조절에 중요한 역할을 하는 16 kDa 단백질 호르몬이다. 렙틴은 대부분 백색 지방 조직에 의해 분비된다. 마우스 연구는 ob/ob 마우스에서 렙틴 유전자의 동형 접합체 돌연변이가 거대한 비만을 유발하고 과혈당 상태 (hyperglycaemic condition)로 이어진다는 것을 입증하였다. 렙틴 투여는 ob/ob 마우스 모델에서 음식 섭취 및 체중을 감소시키고 비만-관련된 대사 및 내분비 결함을 교정한다. 그러므로 렙틴은 비만의 치료를 위한 후보물질이다. 하지만 비만인 사람은 종종 렙틴 저항성이 있는 것이 특징이고 이것은 지금까지 항-비만제로서 렙틴의 사용을 제한하였다.
따라서, 렙틴 유도체는, 그 자체가 개선된 생체 내 효능을 갖고 및/또는 추가적 항-비만제(들)와 조합 치료시 사람 렙틴보다 더 낮은 빈도로 투여될 수 있으며, 비만을 치료하기 위해 바람직하다.
한 양태에서, 본 발명은 일반식 Z-Y-X-렙틴 화합물의 화합물과 관련되며, Z는 12-22개의 탄소 원자를 함유하고 C-말단 카르복실산 또는 C-말단 테트라졸 기를 포함하는 아실 기이고; Y는 결합,
Figure pct00001
로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서 (spacer)이고,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; X는 렙틴 화합물에 대한 부착 앵커이고,
Figure pct00002
이며,
여기에서 "*"는 렙틴 화합물을 향한 모이어티의 위치를 나타내고 "*""는 Z 또는 이들의 약학적 염, 아미드 또는 에스테르를 향한 모이어티의 위치를 나타낸다. 한 양태에서, Y는 결합,
Figure pct00003
로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고,
Figure pct00004
이며,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23; r은 1, 2 또는 3이다. X는 렙틴 화합물에 대한 부착 앵커이고,
Figure pct00005
이며,
여기에서 "*"는 렙틴 화합물을 향한 모이어티의 위치를 나타내고 "*""는 Z 또는 이들의 약학적 염, 아미드 또는 에스테르를 향한 모이어티의 위치를 나타낸다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 한정된 화합물 및 하나 이상의 약학적 첨가물, 및 임의로 하나 이상의 추가적 항-비만제 및/또는 항-당뇨제, 예를 들어, 프람린티드를 포함하는 조성물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 한정된 바와 같이 의학에서 사용되는 화합물과 관련된다. 한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 비만, 당뇨 또는 지질 영양 이상증 (lipodystrophy)의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 타입 2 진성 당뇨병 (Type 2 Diabetes Mellitus)의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 타입 2 진성 당뇨병과 관련된 합병증 및 증상의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 타입 2 진성 당뇨병과 관련된 합병증 및 증상, 예를 들어, 인슐린 내성 (insulin resistance), 과혈당증 (hyperglycemia), 고중성지방혈증 (hypertriglyceridemia) 및/또는 간 지방증 (hepatic steatosis)의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 타입 1 진성 당뇨병 (Type 1 Diabetes Mellitus)의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 타입 1 진성 당뇨병과 관련된 합병증 및 증상의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 타입 1 진성 당뇨병과 관련된 합병증 및 증상, 예를 들어, 과혈당증의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 선천성 렙틴 결핍의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 선천성 렙틴 결핍과 관련된 합병증 및 증상의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 선천성 전신의 렙틴의 불충분한 수준으로 이어지는 유전자 돌연변이로 인한, 렙틴 결핍과 관련된 합병증 및 증상의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 선천성 지방 위축병 (lipoatrophy) 및/또는 지질 영양 이상증의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 지방 조직의 감소 또는 낮은 수준의 전신 렙틴을 일으키는, 선천성 지방 위축병 및/또는 지질 영양 이상증의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 선천성 지방 위축병 및/또는 지질 영양 이상증, 인슐린 내성, 과혈당증, 고중성지방혈증 및/또는 간 지방증의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 HIV-관련 지질 영양 이상증의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 HIV-관련 지질 영양 이상증과 관련된 합병증 및 증상의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 렙틴 결핍으로 인한 HIV-관련 지질 영양 이상증과 관련된 합병증 및 증상의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 HIV-관련 지질 영양 이상증과 관련된 합병증 및 증상, 예를 들어, 인슐린 내성, 신진대사 장애 (metabolic syndrome), 고지혈증 (hyperlipedemia) 및/또는 복부 비만의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 일반적인 비만의 치료 및/또는 체중 감소 유지 (다이어트와 관련된 요요 효과 (yo-yo effect)의 방지)를 위한 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 렙틴 저항성이 합병증 또는 증상인, 일반적인 비만의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 일반적인 비만과 관련된 합병증 및 증상의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 월경 주기 (menstrual cycle)의 중단 및/또는 불규칙 및 이들의 부작용, 예를 들어, 월경 불순 (amenorrhea) (1차 및 2차)의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 월경 불순 (1차 및 2차)과 관련된, 예를 들어, 월경 주기의 중단 및/또는 불규칙과 관련된 합병증 및 증상의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 불규칙한 월경 주기, 예를 들어, 다낭성 난소 증후군 (Polycystic Ovarian Syndrome; PCOS)의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 다낭성 난소 증후군 (PCOS)의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 다낭성 난소 증후군 (PCOS)과 관련된 합병증 및 증상의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 다낭성 난소 증후군 (PCOS)과 관련된 합병증 및 증상, 예를 들어, 불규칙한 월경 주기의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 골 질량 손실 (bone mass loss), 예를 들어, 골다공증 (Osteoporosis)의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 골다공증의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 골다공증과 관련된 합병증 및 증상의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 설명된 바와 같이 골다공증, 예를 들어, 골 질량 손실 및/또는 뼈 약화 (bone weakness)와 관련된 합병증 및 증상의 치료용 화합물과 관련된다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 한정된 바와 같이 비만, 당뇨 또는 지질 영양 이상증의 치료용 약제의 제조용 화합물의 사용과 관련된다.
도 1은 6일 후 변형되지 않은 사람/래트 렙틴과 비교하여, 실시예 2 및 3의 렙틴 유도체 (화합물 A 및 B)의 단일 주사 후 렙틴 민감성 ob/ob 마우스의 체중 감소에 대한 효과를 나타낸다, MEAN±SEM, n = 6-7.
도 2는 6일 후 변형되지 않은 사람/래트 렙틴과 비교하여, 실시예 5 및 6의 렙틴 유도체 (화합물 C 및 D)의 단일 주사 후 렙틴 민감성 ob/ob 마우스의 체중 감소에 대한 효과를 나타낸다, MEAN±SEM, n = 6-7.
도 3은 변형되지 않은 사람/래트 렙틴과 비교하여 실시예 2 및 3의 렙틴 유도체 (화합물 A 및 B)의 단일 주사 후 렙틴 민감성 ob/ob 마우스의 혈당에 대한 효과를 나타낸다.
도 4는 변형되지 않은 사람/래트 렙틴과 비교하여 실시예 5 및 6의 렙틴 유도체 (화합물 C 및 D)의 단일 주사 후 렙틴 민감성 ob/ob 마우스의 혈당에 대한 효과를 나타낸다.
한 양태에서, 본 발명은 일반식 Z-Y-X-렙틴 화합물의 화합물과 관련된다; Z는 아실 기이고; Y는 여기에 한정된 바와 같이 스페이서이고; X는 여기에 한정된 바와 같이 부착기이다.
한 양태에서, 본 발명은 일반식 Z-Y-X-렙틴 화합물의 화합물과 관련되며, Z는 12-22개의 탄소 원자를 함유하고 C-말단 카르복실산 또는 C-말단 테트라졸 기를 포함하는 아실 기이고; Y는 결합,
Figure pct00006
로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; X는 렙틴 화합물에 대한 부착 앵커이고,
Figure pct00007
이며,
여기에서 "*"는 렙틴 화합물을 향한 모이어티의 위치를 나타내고 "*""는 Z 또는 이들의 약학적 염, 아미드 또는 에스테르를 향한 모이어티의 위치를 나타낸다. 한 양태에서, Y는 결합,
Figure pct00008
로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고,
Figure pct00009
이며,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2 또는 3이고; X는 렙틴 화합물에 대한 부착 앵커이고,
Figure pct00010
이며,
여기에서 "*"는 렙틴 화합물을 향한 모이어티의 위치를 나타내고 "*""는 Z 또는 이들의 약학적 염, 아미드 또는 에스테르를 향한 모이어티의 위치를 나타낸다.
한 양태에서, 본 발명은 일반식 Z-Y-X-렙틴 화합물의 화합물과 관련되며, Z는 16-18개의 탄소 원자를 함유하고 C-말단 카르복실산 또는 C-말단 테트라졸 기를 포함하는 아실 기이고; Y는 결합으로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
Figure pct00011
이며,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; X는 렙틴 화합물에 대한 부착 앵커이고,
Figure pct00012
이며,
여기에서 "*"는 렙틴 화합물을 향한 모이어티의 위치를 나타내고 "*""는 Z 또는 이들의 약학적 염, 아미드 또는 에스테르를 향한 모이어티의 위치를 나타낸다. 한 양태에서, Y는 결합,
Figure pct00013
으로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고
Figure pct00014
이며
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2 또는 3이고; X는 렙틴 화합물에 대한 부착 앵커이고,
Figure pct00015
이며,
여기에서 "*"는 렙틴 화합물을 향한 모이어티의 위치를 나타내고 "*""는 Z 또는 이들의 약학적 염, 아미드 또는 에스테르를 향한 모이어티의 위치를 나타낸다.
한 양태에서, 상기 Z-Y-X-모이어티는 렙틴 화합물에 존재하는 아미노산 잔기에 존재하는 아미노기 또는 렙틴 화합물의 N 말단 알파-아미노기에 결합된다. 한 양태에서, 수소는 상기 아미노기로부터 제거되었다.
한 양태에서, 상기 Z-Y-X 모이어티의 X 모이어티는 알킬화 반응에 의해 렙틴 화합물에 부착된다.
한 구체예에서, 상기 Z-Y-X-렙틴 화합물의 상기 Z-Y-X 모이어티는 알킬화 반응에 의해 렙틴 화합물에 부착된다.
한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 wt 렙틴의 렙틴을 제공한다.
한 양태에서, 본 발명은 wt 렙틴 유사체의 렙틴을 제공한다. 한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 wt 렙틴의 N-말단에 선택적으로 부착되는 Z-Y-X 모이어티를 포함하는 렙틴 유도체를 제공한다.
한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 wt 래트 렙틴의 N-말단에 선택적으로 부착되는 Z-Y-X 모이어티를 포함하는 래트 렙틴 유도체를 제공한다.
한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 wt 사람 렙틴의 N-말단에 선택적으로 부착되는 Z-Y-X 모이어티를 포함하는 사람 렙틴 유도체를 제공한다.
한 양태에서, 상기 Z-Y-X 모이어티의 X 모이어티는 알킬화 반응에 의해 Met-사람 렙틴에 부착된다.
한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 렙틴의 렙틴 유도체를 제공한다.
한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 렙틴의 렙틴 유도체를 제공하고 N-말단에서 선택적으로 알킬화된다.
한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 사람 렙틴 (SEQ ID NO: 1)의 렙틴 유도체를 제공한다.
한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 사람 렙틴 (SEQ ID NO: 1)의 렙틴 유도체를 제공하고 N-말단에서 선택적으로 알킬화된다.
한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 래트 렙틴 (SEQ ID NO: 2)의 렙틴 유도체를 제공한다.
한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 래트 렙틴 (SEQ ID NO: 2)의 렙틴 유도체를 제공하고 N-말단에서 선택적으로 알킬화된다.
한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 Met-렙틴 (SEQ ID NO: 3)의 렙틴 유도체를 제공한다.
한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 Met-렙틴 (SEQ ID NO: 3)의 렙틴 유도체를 제공하고 N-말단에서 선택적으로 알킬화된다.
한 양태에서, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 생물학적으로 활성인 렙틴 유도체를 제공한다.
한 양태에서, 상기 렙틴 화합물은 렙틴의 유사체, 예를 들어, 래트 또는 사람 렙틴의 유사체이다. 한 양태에서, 상기 렙틴 화합물은 사람 렙틴에 대하여 90%, 예를 들어, 95% 또는 98% 서열 동일성을 갖는다.
한 양태에서, 렙틴 화합물은 포유동물, 예를 들어, 사람, 돼지, 래트 또는 마우스 또는 예를 들어, 사람 또는 래트로부터 유도된다. 한 양태에서, 렙틴 화합물은 VPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHTQSVSSKQKVTGLDFIPGLHPILTL-SKMD-QTLAVYQQILT SMPSRNVIQISNDLENLRDLLHVLAFSKSCHLPWASGLETLDSLG-GVLEAS- GYSTEVVALSRLQGSLQDMLWQLDLSPGC (SEQ ID NO: 1)에 의해 한정된 바와 같이 사람 렙틴이다. 용어 "사람 렙틴" 및 "h렙틴"은 SEQ ID NO: 1을 설명하기 위해 여기에서 교체 가능하게 사용된다. 한 양태에서, 렙틴 화합물은 AVPIHKVQDDTKTLIK TIVTRIN-DISHTQSVSARQRVT-GLDFIPGLHPILSLSKMDQTLAVYQQILTSLPSQNVLQIAHDLENL-RDLLHLLAFSKSCSLPQ-TRGLQKPESLDGVLEASLYSTEWALSRLQGSLQDILQQLDLSPEC (SEQ ID NO: 2)에 의해 한정된 바와 같이 래트 렙틴이다. 용어 "래트 렙틴" 및 "r렙틴"은 SEQ ID NO: 2를 설명하기 위해 여기에서 교체 가능하게 사용된다.
용어 "Met-사람 렙틴" 및 "Met-h렙틴"은 SEQ ID NO: 3을 설명하기 위해 여기에서 교체 가능하게 사용된다. 한 양태에서, 렙틴 화합물은 MVPIQKVQDDTKTLIKTIVTRINDISHTQSVSSKQKVTGLDFIPGLHPILTLSKMD-QTLAVYQQILT SMPSRNVIQISNDLENLRDLLHVLAFSKSCHLPWASGLETLDSLGGVLEAS-GYSTEWALSRLQGSLQDMLWQLDLSPGC (SEQ ID NO: 3)에 의해 한정된 바와 같이 Met-사람 렙틴이다.
용어 "렙틴"은 달리 지시되지 않으면, 여기에 사용된 바와 같이 포유동물 렙틴의 (wt) 변이체를 나타낸다. 용어 "wt" 또는 "네이티브 (native)" 렙틴 또는 "렙틴의 wt"는 여기에 사용된 바와 같이 wt (야생형) 펩티드, 또는 화합물을 나타내며, 이것은 포유동물 렙틴의 변이체이다. SEQ ID NO: 1은 서열 목록에 포함된 바와 같이 "래트 렙틴"으로 지정될 수도 있는 래트 "wt 렙틴"의 예이고 SEQ ID NO: 2는 서열 목록에 포함된 바와 같이 "사람 렙틴"으로 지정될 수도 있는 사람 "wt 렙틴"의 예이다. SEQ ID NO: 1의 서열을 갖는 펩티드는 또한 "네이티브" 래트 렙틴 또는 "네이티브" r렙틴으로 지정될 수도 있다. SEQ ID NO: 2의 서열을 갖는 펩티드는 또한 "네이티브" 또는 "wt" 사람 렙틴 또는 "네이티브" 또는 "wt" h렙틴으로 지정될 수도 있다.
용어 "렙틴 화합물"은 여기에 사용된 바와 같이 포유동물 렙틴 또는 Met-사람 렙틴을 나타내고 그러므로 여기에 한정된 바와 같이 렙틴 또는 렙틴 유사체의 wt 변이체를 포함한다. 여기에 사용된 용어 "여기에 한정된 화합물" 또는 "여기에 설명된 화합물"은 상세한 설명 및/또는 청구항에서 한정된 바와 같이 "렙틴 유도체" 및/또는 변형된 "렙틴 화합물"을 지정하였다.
한 양태에서, 렙틴 화합물은 렙틴의 유사체, 예를 들어, 래트 또는 사람 렙틴의 유사체이다. 한 양태에서, 용어 펩티드의 "유사체"는 하나 이상의 아미노산 잔기가 치환, 삭제 또는 삽입된 상기 펩티드를 의미한다. 한 양태에서, 용어 "아미노산 잔기"는 형식적으로, 히드록시 기가 카르복시 기로부터 제거된 및/또는 형식적으로, 수소 원자가 아미노 기로부터 제거된 상기 아미노산을 의미한다.
용어 "렙틴 유사체"는 여기에 사용된 바와 같이 wt 렙틴의 하나 이상의 아미노산 잔기가 다른 아미노산 잔기에 의해 치환된 및/또는 하나 이상의 아미노산 잔기가 렙틴으로부터 삭제된 및/또는 하나 이상의 아미노산 잔기가 렙틴에 추가 및/또는 삽입된 변형된 사람 렙틴을 의미한다.
여기에서 용어 "알파-ala-r렙틴" 및 "알파-r렙틴"은 N-말단 아미노 기에서 치환된다는 것을 설명하기 위해 교체 가능하게 사용된다.
여기에서 용어 "알파-ala-r렙틴" 및 "알파-r렙틴"은 알라닌의 N-말단 알파-아미노 기에서 치환된다는 것을 설명하기 위해 교체 가능하게 사용된다.
한 양태에서, 렙틴 화합물은 사람 렙틴에 대하여 90%, 예를 들어, 95% 또는 98% 서열 동일성을 갖는다. 한 양태에서, "서열 동일성"은 전체 펩티드를 통해 결정되며, 2개의 펩티드 유사체가 정렬되고 두 번째 유사체에 관하여 첫 번째 유사체의 서열 동일성은 정렬된 동일한 잔기의 수 마이너스 다른 잔기의 수 나누기 첫 번째 유사체의 총 잔기의 수로 제공된다. 따라서, 펩티드 AAAAA에 관하여 펩티드 AAEAA의 서열 동일성은 (5-1)/5이다.
한 양태에서, 렙틴 유사체는 사람 렙틴에 관하여 10개 미만의 아미노산 변형 (치환, 삭제, 추가 (삽입 등) 및 이들의 어떤 조합), 대안으로 사람 렙틴에 대하여 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 또는 1개의 변형을 포함한다.
용어 "렙틴 유도체" 또는 "프로트랙티드 (protracted) 렙틴"은 여기에 사용된 바와 같이 화학적으로 변형된 렙틴 화합물 또는 렙틴 유사체를 의미하며, 변형(들)은 측쇄의 부착의 형태이다. 본 발명의 측쇄는 상세한 설명에서 한정된 바와 같이 Z-Y-X 모이어티를 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
용어 "Z-Y-X 렙틴 화합물"은 여기에 사용된 바와 같이 또한 용어 "렙틴 유도체"로 지정될 수도 있고, 따라서 용어 "렙틴 유도체"의 정의를 포함한다.
용어 "Met-사람 렙틴" 또는 "Met-h렙틴"은 여기에 사용된 바와 같이 N-말단에 메티오닌 아미노산을 포함하는 사람 렙틴 유사체를 나타낸다. 이것은 이. 콜리 (E. Coli)에서 발현에 의해 유도된 Met-사람 렙틴을 포함한다. SEQ ID NO: 3의 서열을 가진 펩티드는 이러한 Met-사람 렙틴의 예이고 또한 "Met-사람 렙틴" 또는 "Met-h렙틴"으로 지정될 수도 있다.
한 양태에서, Z-Y-X-모이어티는 아미노기에 결합되며, 이것은 렙틴 화합물의N-말단 아미노 기이거나 렙틴 화합물에 존재하는 아미노산 잔기에 존재한다.
한 양태에서, Z는 12-22개의 탄소 원자를 함유하고 C-말단 카르복실산 또는 C-말단 테트라졸 기를 포함하는 아실 기이다. 한 양태에서, Z는 아실 기를 포함한다. 한 양태에서, Z는 아실 기이다. 한 양태에서, Z는 12-22개의 탄소 원자를 포함한다. 한 양태에서, Z는 원위 카르복실산 기를 포함한다. 한 양태에서, Z는 원위 테트라졸 기를 포함한다. 한 양태에서, Z는 지방산 또는 지방 2산을 포함한다. 한 양태에서, Z는 지방산 또는 지방 2산이다. 한 양태에서, Z는 알파 및 오메가 카르복시 기를 포함한다. 한 양태에서, Z는 12-22개의 탄소 원자, 예를 들어, 16, 18 또는 20개의 탄소 원자를 갖는 지방산 또는 지방 2산이다. 한 양태에서, Z는
Figure pct00016
이다.
한 양태에서, 스페이서, Y는 결합으로 구성된 그룹으로부터 선택되고,
Figure pct00017
이며,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이다.
한 양태에서, Y는 결합으로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
Figure pct00018
이며,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고,
Figure pct00019
이며,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2 또는 3이다. 한 양태에서, Y는 결합이다. 한 양태에서, Y는
Figure pct00020
이다.
한 양태에서, Y는
Figure pct00021
이다.
한 양태에서, Y는
Figure pct00022
이다.
한 양태에서, Y는
Figure pct00023
이다
한 양태에서, Y는
Figure pct00024
이다
한 양태에서, Y는
Figure pct00025
이다
한 양태에서, Y는
Figure pct00026
이다.
한 양태에서, m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이다. 한 양태에서, n은 1, 2 또는 3이다. 한 양태에서, s는 0, 1, 2 또는 3이다. 한 양태에서, p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이다. 한 양태에서, m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이다. 한 양태에서, n은 1, 2 또는 3이다. 한 양태에서, s는 0, 1, 2 또는 3이다. 한 양태에서, p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 1 1, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 또는 3이다. 한 양태에서, m은 0, 1 또는 2이고, r은 1 또는 2, p는 1이고, n은 1이다.
한 양태에서, m은 0 또는 1이고; r은 1 또는 2이고; p는 1이고; n은 0 또는 1이다. 한 양태에서, m은 0 또는 2이고; r은 1 또는 2이고; p는 1이고; n은 0 또는 1이다. 한 양태에서, m은 0 또는 1이고; r은 1이고; p는 1이고; n은 0 또는 1이다. 한 양태에서, m은 0 또는 2이고; r은 2이고; p는 1이고; n은 1이다. 한 양태에서, m은 1이고; n은 1이고; s는 1 또는 2이다. 한 양태에서, m은 0 또는 1이고; n은 0 또는 1이고; s는 1이다. 한 양태에서, m은 0 또는 1이고; n은 0 또는 1이고; s는 2이다. Y는 결합으로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
Figure pct00027
이며,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고,
Figure pct00028
이며,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2 또는 3이다.
한 양태에서, X는
Figure pct00029
이다.
한 양태에서, 여기의 식에서 "→"는 첫 번째 모이어티에서 두 번째 모이어티로, 예를 들어, Y에서 X로 결합하는 원자를 나타내고, 여기에서 "*"는 렙틴 화합물을 향한 모이어티의 위치를 나타내고 "*""는 Z을 향한 모이어티의 위치를 나타낸다, 즉, X를 나타내는 식에 대하여 "*"는 X의 렙틴 화합물에 부착의 지점을 나타내고 "*""는 X의 Y에 부착의 지점을 나타낸다.
한 양태에서, X는 자유롭거나 아세탈의 탈보호에 의해 형성된 알데히드로부터 발생한, 렙틴 화합물에 대한 부착 앵커이고, 예를 들어,
Figure pct00030
이다.
한 양태에서, Z의 α-카르보닐 말단은 아미드 결합을 통해 Y의 아미노 말단에 결합되고 Y의 카르보닐 말단은 아미드 결합을 통해 X의 아미노 말단에 결합된다. 한 양태에서, Z의 α-카르보닐은 아미드 결합을 통해 X의 아미노 말단에 결합된다.
한 양태에서, Z-Y-X-모이어티는
Figure pct00031
이다.
한 양태에서 Z-Y-X-모이어티의 화합물은
Figure pct00032
이다.
한 양태에서, 본 발명의 화합물은 Z-Y-X-모이어티의 스테레오이소머 (stereoisomer) 모두를 포함한다.
본 발명에 따르는 화합물은
Figure pct00033
(화합물 A) 이다.
본 발명에 따르는 화합물은
Figure pct00034
(화합물 B) 이다.
본 발명에 따르는 화합물은
Figure pct00035
(화합물 C) 이다.
본 발명에 따르는 화합물은
Figure pct00036
(화합물 D) 이다.
제조 방법
본 발명의 렙틴 화합물 (즉, wt 또는 네이티브 렙틴)은 알려져 있는 방법 그 자체로 제조될 수 있다. 래트 및 사람 렙틴은 상업적으로 이용 가능하다 (RayBiotech, Inc., Norcross, GA, USA). Met-사람 렙틴은 하기 설명된 바와 같이 만들어졌다. 또 다른 계획은 먼저 렙틴 화합물을 제조하는 것일 수 있다. 렙틴 화합물은 당업자에게 알려져 있는 방법을 사용하여 발현될 수 있고, 예컨대 US6025324 및 US6025325. Z-Y-X-모이어티는 유럽 특허 W011015649에서 설명된, 당업자에게 알려져 있는 기술을 사용하여 만들어질 수 있다. 이러한 방법의 비-제한 예는 WO2011/015649의 페이지 76에서 발견된다.
약학적 효과
한 양태에서, 본 발명은 여기에 한정된 바와 같이 의학에서 사용되는 화합물의 사용과 관련된다. 한 양태에서, 본 발명은 여기에 한정된 바와 같이 비만, 당뇨 또는 지질 영양 이상증의 치료용 화합물의 사용과 관련된다. 한 양태에서, 본 발명은 여기에 한정된 바와 같이 비만, 당뇨 또는 지질 영양 이상증의 치료용 약제의 제조용 화합물의 사용과 관련된다. 한 양태에서, 본 발명은 여기에 한정된 바와 같이 비만 또는 당뇨의 치료 방법과 관련되며, 화합물은 여기에 한정된 바와 같이 그것이 필요한 환자에게 투여된다.
렙틴은 생식을 정상적으로 조절하는 중요한 호르몬이다. 한 양태에서, 본 발명은 여기에 한정된 바와 같이 사춘기 지연 (delayed puberty), 월경 불순 또는 다낭성 난소 증후군의 치료용 화합물의 사용과 관련된다.
본 발명의 화합물의 약학적 효과는 특히 그것들이 장기간 활성을 갖기 때문에, 비만의 치료에 이롭다. 한 양태에서, 본 발명은 여기에 한정된 바와 같이 화합물의 사용과 관련되며, 상기 화합물은 그것이 필요한 대상체에게 하루에 한 번 또는 더 낮은 빈도로, 예를 들어, 일주일에 한 번 투여된다.
한 양태에서, 본 발명의 화합물은 음식 섭취에 대하여 충분한 효과를 가질 것이다. 음식 섭취에 대한 효과는 여기에서 검정 (I)에 설명된 방법에 의해 결정될 수 있다.
한 양태에서, 본 발명의 화합물은 체중에 대하여 충분한 효과를 가질 것이다. 체중에 대한 효과는 여기에서 검정 (I)에 설명된 방법에 의해 결정될 수 있다.
본 발명의 화합물을 함유하는 약학적 제형은 예를 들어, 음식 섭취의 감소 및 체중의 감소에 사용될 수 있다. 이로 인해, 본 발명의 화합물로 약학적 치료는 비만의 치료 또는 방지에 적합할 수도 있다.
약학적 조성물
한 양태에서, 본 발명은 여기에 한정된 화합물 및 하나 이상의 약학적 첨가물을 포함하는 조성물과 관련된다. 한 양태에서, 상기 조성물은 하나 이상의 추가적 항-비만제 및/또는 항-당뇨제 및 선택적으로 하나 이상의 약학적 첨가물을 추가로 포함한다. 한 양태에서, 상기 항-비만제 및/또는 항-당뇨제 중 하나는 프람린티드이다.
한 양태에서, 본 발명은 여기에 한정된 화합물 및 하나 이상의 약학적 첨가물을 포함하는 조성물과 관련된다.
본 발명에 따르는 한 양태에서, 본 발명의 화합물의 치료적 유효량이 이러한 치료로부터 이익을 얻는 대상체 (예를 들어, 환자 또는 동물)에게 투여된다. 치료되는 것은 예를 들어, 비만일 수 있다. 본 발명의 화합물의 투여를 위한 투약 범위는 원하는 효과를 생산할 만큼 크다.
한 양태에서, 본 발명은 환자에게 투여되는 단위 투약 형태로 본 발명의 화합물을 제공한다. 여기에 사용된 바와 같이, "단위 투약 형태"는 질환 또는 의학적인 상태로 고통받는 대상체를 치료하기 위해 단일 투여되는 조성물을 나타낸다. 각각의 단위 투약 형태는 전형적으로 본 발명의 각각의 화합물 플러스 약학적으로 허용 가능한 첨가물을 포함한다. 단위 투약 형태의 예는 개개의 타블렛, 개개의 캡슐, 벌크 분말, 액체 용액, 좌약, 에멀젼 또는 현탁액이다. 질환 또는 질병의 치료는 단위 투약 형태의 주기적인 투여, 예를 들어, 하루에 2번 이상, 매 식사 당 1번, 4시간 또는 다른 간격마다 1번, 또는 하루에 단 1번 하나의 단위 투약 형태가 필요할 수도 있다. 주사용 제형은 단위 투약 형태, 예를 들어, 앰플 또는 다회수 투여 용기로 제공될 수도 있다.
본 발명의 단위 투약 형태는 본 발명의 화합물의 치료적 유효량을 함유한다. 한 양태에서, 단위 투약 형태의 투여는 포유동물에서 본 발명의 화합물의 적절한 수준을 야기한다.
특정 투여량이 본 발명의 특정 화합물의 분자 구조 및 화학적 성질에 의존할 것이지만, 약학 당업자들은 여기에서 개시로부터 적절한 투여량이 통상적인 기술을 사용하여 결정될 수 있다는 것으로 생각할 것이다. 예를 들어, 포유동물에서 원하지 않는 부작용을 유도하지 않거나 최소한으로만 유도하는 본 발명의 화합물의 투여 또는 제형은 다양한 방법으로 결정될 수 있다. 이 맥락에서 사용되는 바와 같이, "증가된 수준"은 미리 결정된 수준 (예를 들어, 부작용의 지정된 역치 수준)으로 증가를 나타낼 수 있다. 이러한 결정을 하는 한 방법은 (i) (a) 포유동물을 테스트하기 위해 본 발명의 화합물의 복수의 다른 투여량 (또는 제형)을 투여하고; (b) 각각의 투여량의 부작용에 대한 효과를 측정함으로써, 원하는 효과 및 부작용에 대한 투여량-반응 데이터를 생성함으로써 투여량-반응 검정을 실행하는 단계; 및 (ii) 투여량-반응 데이터로부터 원하는 효과를 제공하지만 부작용을 유도하지 않는 본 발명의 제형의 화합물의 투여량을 결정하는 단계를 수반한다.
본 발명의 화합물의 원하는 수준 또는 농도를 달성하기 위해 동물에게 투여된, 본 발명의 화합물의 양은 당업자에게 잘 알려져 있는 많은 인자, 예를 들어, 화합물 반감기 (예를 들어, 혈청 반감기), 및 투여의 빈도 및 방식에 의존할 것이다. 다른 범위의 본 발명의 화합물은 초기 투여량-반응 곡선의 데이터 및 통상적인 방법으로 얻어질 수 있는 다른 데이터에 기초하여 당업자에게 명백할 것이다.
본 발명은 또한 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 첨가물과 결합된 본 발명의 화합물을 함유하는 조성물을 제공한다.
한 양태에서, 조성물은 버퍼, 예를 들어, 포스페이트 버퍼 또는 Na2HP04를 포함한다.
한 양태에서, 조성물은 글리세롤을 포함한다.
한 양태에서, 조성물은 등장화제, 예를 들어, NaCl을 포함한다.
한 양태에서, 조성물의 pH는 pH 3-10의 범위, 예를 들어, pH 7.5이다.
한 양태에서, 조성물은 Na2HP04, 글리세롤 및 NaCl을 포함한다. 한 양태에서, 조성물은 15mM Na2HP04, 7.5 부피% 글리세롤, 125 mM NaCl, pH 7.5를 포함한다.
본 발명의 화합물은 치료되는 대상체에게 직접적으로 투여될 수 있다. 투여는 선택적으로 멸균 상태 하에 있다. 하지만, 본 발명의 화합물에 대해 단독으로 투여되는 것이 가능한 한편, 그것을 약학적 제형으로서 제공하는 것이 종종 바람직하다. 제형은 전형적으로 하나 이상의 허용 가능한 이들의 담체와 함께 적어도 하나의 활성 구배를 포함한다. 각각의 담체는 다른 성분과 호환되고 대상체에게 해롭지 않은 의미에서 약학적으로 및 생리학적으로 둘 다 허용 가능할 것이다. 치료적 제형은 약학 당업계에 잘 알려져 있는 어떤 방법에 의해서도 제조될 수 있다.
본 발명의 화합물은 비경구 (예를 들어, 근육 내, 복강 내, 정맥 내, ICV, 낭 내 (intracisternal) 주사 또는 주입, 피하 주사, 또는 임플란트)에 의해, 흡입 스프레이, 비강, 질, 직장, 혀 밑, 또는 국부적 경로의 투여에 의해 투여될 수도 있고 각각의 투여 경로에 적절한, 통상적인 비-독성 약학적으로 허용 가능한 담체, 보조제 및 비히클 (vehicle)을 함유하는 적합한 투약 단위 제형으로, 단독으로 또는 함께 조제될 수도 있다. 종종, 투여는 비경구 (예를 들어, 정맥 내)로 투여될 것이다.
원하는 경우 (예를 들어, 특정 혈장 농도를 유지하기 위해) 본 발명의 화합물은 전달 제어 제형의 형태로 환자에게 투여될 수 있다. 비경구 투여, 및 다른 경로의 투여에 적합한 형태를 포함하는, 다양한 적합한 전달 제어 시스템이 알려져 있다. 약물 전달 시스템의 제작에 이용된 첨가물은 당업자에게 알려져 있는 다양한 공보에 설명된다. 이 공보는 또한 일반적인 챕터 및 장시간-방출 및 지연된-방출 타블렛 및 캡슐의 약물 방출 능력을 결정하는데 특이적인 테스트를 제공한다. 본 발명의 한 양태에서, 본 발명의 화합물은 대상체에서 트리글리세리드의 운동-매개 붕괴를 향상시키기 위해, 운동의 프로그램과 함께 투여된다.
약학적 조성물은 멸균 주사 가능한 수성 또는 유성 현탁액의 형태일 수도 있다. 이 현탁액은 업계에 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁화제를 사용하는, 선행 기술에 따라 조제될 수도 있다. 멸균 주사 가능한 조제물은 또한 비-독성 비경구-허용 가능한 희석액 또는 용매의 멸균 주사 가능한 용액 또는 현탁액일 수도 있다. 허용 가능한 비히클 및 이용될 수도 있는 용매 중에, 물, 링거 용액 (Ringer's solution) 및 등장성 염화 나트륨 용액이 있다. 하지만, 어떤 특정 환자에 대한 특이적 투여 수준 및 투약의 빈도는 다를 수도 있고 이용된 특정 화합물의 활성, 대사의 안정성 및 그 화합물의 작용의 길이, 나이, 체중, 일반적인 건강, 성별, 식단, 투여의 방식 및 시간, 배설의 속도, 약물 조합, 및 특정 질병의 심각도를 포함하는 다양한 인자에 의존할 것이다. 일부 구체예에서, 본 발명의 화합물의 매일 또는 매주 투여가 고려된다.
여기에서, 본 발명에 따르는 아실화된 유도체가 "장기간 작용"을 갖는다는 표현은 이들의 T½이 해당하는 비-유도된 렙틴의 T½보다 적어도 50%, 바람직하게 적어도 100%, 및 더 바람직하게 적어도 500% 더 길다는 것을 의미한다.
여기에서, 본 발명에 따르는 알킬화된 유도체가 "장기간 작용"을 갖는다는 표현은 이들의 T½이 해당하는 비-유도된 렙틴의 T½보다 적어도 50%, 바람직하게 적어도 100%, 및 더 바람직하게 적어도 500% 더 길다는 것을 의미한다.
여기에서, 본 발명에 따르는 알킬화된 유도체가 "장기간 작용"을 갖는다는 표현은 이들의 약력학적 효과가 해당하는 비-유도된 렙틴에 관하여 증가된다는 것을 의미한다. 한 양태에서, 증가는 해당하는 비-유도된 렙틴보다 적어도 50%, 바람직하게 적어도 100%, 및 더 바람직하게 적어도 500% 더 긴 약력학적 효과이다.
여기에서, 표현 "약력학적 효과"는 신체에 대한 생화학적 생리학적 효과이다. 한 구체예에서, "약력학적 효과"는 체중, 음식 섭취 또는 혈당에 대한 렙틴의 억제 효과를 나타낸다.
여기에서, "치료적 유효량"은 연구원, 수의사, 의사 또는 다른 임상의에 의해 요구되는, 조직, 계통, 동물 또는 사람의 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하도록 계산된 약제의 미리 결정된 양, 예를 들어, 원하는 치료적 효과를 달성하기 위해 질환 또는 어느 다른 원하지 않는 증상의 진행을 자극, 방지, 저해, 지연 또는 전환하는데 충분한 양을 나타낸다.
여기에서, "약학적으로 허용 가능한 담체" 또는 "약학적으로 허용 가능한 첨가물"은 투여시 부정적인 물리적 반응을 일으키지 않는 담체 및 치료제가 치료적 유효량을 전달하기 위해 충분히 가용성인 것을 나타낸다. 첨가물의 예는 완충된 물, 생리식염수, 포스페이트 완충된 식염수 (PBS), 덱스트로스 용액, 행크 용액 (Hank's solution) 및 비활성 희석액, 예를 들어, 칼슘 카르보네이트, 나트륨 카르보네이트, 락토스, 칼슘 포스페이트 또는 나트륨 포스페이트를 포함한다.
여기에서, "포유동물"은 그것의 보통의 의미를 갖고 영장류 (예를 들어, 사람 및 비-사람 영장류), 실험 동물 (예를 들어, 마우스 및 래트와 같은 설치류), 농장 동물 (예를 들어, 소, 돼지, 양 및 말), 및 가축 (예를 들어, 개 및 고양이)를 포함한다.
여기에서, 용어 포유동물의 상태 및/또는 질환의 "치료" 또는 "처치"는 (i) 상태 및 질환의 방지, 즉, 질환의 어떤 증상의 방지; (ii) 상태 또는 질환의 억제, 즉, 임상적 증상의 발달 또는 진행의 회피; 및/또는 (iii) 상태 또는 질환의 완화, 즉, 임상적 증상의 퇴화의 유발을 의미한다.
본 발명의 구체예
1. 일반식 Z-Y-X-렙틴 화합물의 화합물로서,
Z는 12-22개의 탄소 원자를 함유하고 C-말단 카르복실산 또는 C-말단 테트라졸 기를 포함하는 아실 기이다; Y는 결합으로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
Figure pct00037
이며,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; X는 렙틴 화합물에 대한 부착 앵커이고,
Figure pct00038
이며,
여기에서 "*"는 렙틴 화합물을 향한 모이어티의 위치를 나타내고 "*""는 Z 또는 이들의 약학적 염, 아미드 또는 에스테르를 향한 모이어티의 위치를 나타낸다.
2. 구체예 1에 있어서, Y는 결합으로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
Figure pct00039
이며,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고,
Figure pct00040
이며,
여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2 또는 3인 화합물.
3. 구체예 1에 있어서, Y는 결합으로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
Figure pct00041
이며,
여기에서, m은 0, 1, 2이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3 또는 4; r은 1, 2 또는 3이고,
Figure pct00042
이며,
여기에서, m은 0, 1, 2 또는 3; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3 또는 4; r은 1, 2 또는 3이다.
4. 구체예 1 내지 구체예 3 중 어느 하나에 있어서, Z-Y-X-모이어티는 렙틴 화합물에 존재하는 아미노산 잔기에 존재하는 아미노 기 또는 렙틴 화합물의 N 말단 알파-아미노기에 결합되는 화합물.
5. 구체예 1에 있어서, 수소가 상기 아미노기로부터 제거되는 화합물.
6. 구체예 1 내지 구체예 5 중 어느 하나에 있어서, 상기 렙틴 화합물은 렙틴의 유사체, 예를 들어, 래트 또는 사람 렙틴의 유사체인 화합물.
7. 구체예 1 내지 구체예 6 중 어느 하나에 있어서, 상기 렙틴 화합물은 사람 렙틴에 대하여 90%, 예를 들어, 95% 또는 98% 서열 동일성을 갖는 화합물.
8. 구체예 1 내지 구체예 7 중 어느 하나에 있어서, Z는 아실 기를 포함하는 화합물.
9. 구체예 1 내지 구체예 8 중 어느 하나에 있어서, Z는 지방산 또는 지방 2산을 포함하는 화합물.
10. 구체예 1 내지 구체예 9 중 어느 하나에 있어서, Z는 알파 및 오메가 카르복시 기를 포함하는 화합물.
11. 구체예 1 내지 구체예 10 중 어느 하나에 있어서, Z는 원위 카르복실산 기를 포함하는 화합물.
12. 구체예 1 내지 구체예 11 중 어느 하나에 있어서, Z는 원위 테트라졸 기를 포함하는 화합물.
13. 구체예 1 내지 구체예 12 중 어느 하나에 있어서, Z는 12-22개의 탄소 원자를 갖는 지방산 또는 지방 2산을 포함하는 화합물.
14. 구체예 1 내지 구체예 13 중 어느 하나에 있어서, Z는 16-18개의 탄소 원자를 갖는 지방산 또는 지방 2산을 포함하는 화합물.
15. 구체예 1 내지 구체예 14 중 어느 하나에 있어서, Z는 16개의 탄소 원자를 갖는 지방산 또는 지방 2산을 포함하는 화합물.
16. 구체예 1 내지 구체예 15 중 어느 하나에 있어서, Z는 18개의 탄소 원자를 갖는 지방산 또는 지방 2산을 포함하는 화합물.
17. 구체예 1 내지 구체예 16 중 어느 하나에 있어서, Z는 20개의 탄소 원자를 갖는 지방산 또는 지방 2산을 포함하는 화합물.
18. 구체예 1 내지 구체예 17 중 어느 하나에 있어서, Z는
Figure pct00043
인 화합물.
19. 구체예 1 내지 구체예 18 중 어느 하나에 있어서, Y는 결합인 화합물
20. 구체예 1 내지 구체예 19 중 어느 하나에 있어서, Y는
Figure pct00044
인 화합물.
21. 구체예 1 내지 구체예 20 중 어느 하나에 있어서, Y는
Figure pct00045
인 화합물.
22. 구체예 1 내지 구체예 21 중 어느 하나에 있어서, Y는
Figure pct00046
인 화합물.
23. 구체예 1 내지 구체예 22 중 어느 하나에 있어서, Y는
Figure pct00047
인 화합물.
24. 구체예 1 내지 구체예 23 중 어느 하나에 있어서, Y는
Figure pct00048
인 화합물.
25. 구체예 1 내지 구체예 24 중 어느 하나에 있어서, Y는
Figure pct00049
인 화합물.
26. 구체예 1 내지 구체예 25 중 어느 하나에 있어서, Y는
Figure pct00050
인 화합물
27. 구체예 1 내지 구체예 26 중 어느 하나에 있어서, Y는
Figure pct00051
인 화합물.
한 양태에서, m은 1 또는 2이고, r은 1 또는 2이고, p는 1, n은 1이다.
28. 구체예 1 내지 구체예 27 중 어느 하나에 있어서, Y는
Figure pct00052
인 화합물.
29. 구체예 1 내지 구체예 28 중 어느 하나에 있어서, Y는
Figure pct00053
이며, r은 1이고, s는 1이고 n은 1인 화합물.
30. 구체예 1 내지 구체예 29 중 어느 하나에 있어서, m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6인 화합물.
31. 구체예 1 내지 구체예 30 중 어느 하나에 있어서, n은 1, 2 또는 3인 화합물.
32. 구체예 1 내지 구체예 31 중 어느 하나에 있어서, s는 0, 1, 2 또는 3인 화합물.
33. 구체예 1 내지 구체예 32 중 어느 하나에 있어서, r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23인 화합물.
34. 구체예 1 내지 구체예 33 중 어느 하나에 있어서, r은 0, 1, 2 또는 3인 화합물.
35. 구체예 1 내지 구체예 34 중 어느 하나에 있어서, p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 1 1, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23인 화합물.
36. 구체예 1 내지 구체예 35 중 어느 하나에 있어서, X는
Figure pct00054
인 화합물.
37. 구체예 1 내지 구체예 36 중 어느 하나에 있어서, X는
Figure pct00055
인 화합물.
38. 구체예 1 내지 구체예 37 중 어느 하나에 있어서, X는
Figure pct00056
인 화합물.
39. 구체예 1 내지 구체예 38 중 어느 하나에 있어서, 상기 화합물은
Figure pct00057
인 화합물 A.
40. 구체예 1 내지 구체예 39 중 어느 하나에 있어서, 상기 화합물은
Figure pct00058
인 화합물 B.
41. 구체예 1 내지 구체예 40 중 어느 하나에 있어서, 상기 화합물은
Figure pct00059
인 화합물 C.
42. 구체예 1 내지 구체예 41 중 어느 하나에 있어서, 상기 화합물은
Figure pct00060
인 화합물 D.
43. 구체예 1 내지 구체예 42 중 어느 하나에 있어서, 의학에 사용되는 화합물.
44. 구체예 1 내지 구체예 43 중 어느 하나에 있어서, 비만, 당뇨 또는 지질 영양 이상증의 치료용 화합물.
45. 구체예 36에 있어서, 상기 항-비만제 및/또는 항-당뇨제 중 하나는 프람린티드인 화합물.
44. 구체예 1 내지 구체예 43 중 어느 하나에 있어서, 사춘기 지연, 월경 불순 또는 다낭성 난소 증후군의 치료용 화합물.
46. 구체예 41 내지 구체예 44 중 어느 하나에 있어서, 상기 화합물은 그것이 필요한 대상체에게 하루에 1번 또는 더 낮은 빈도로, 예를 들어, 일주일에 1번 투여되는 화합물.
47. 구체예 1 내지 구체예 46 중 어느 하나에서 한정된 화합물 및 하나 이상의 약학적 첨가물을 포함하는 조성물.
48. 비만, 당뇨 또는 지질 영양 이상증의 치료용 약제의 제조를 위해 구체예 1 내지 구체예 47 중 어느 하나에서 한정된 화합물의 사용.
49. 사춘기 지연, 월경 불순 또는 다낭성 난소 증후군의 치료용 약제의 제조를 위해 구체예 1 내지 구체예 48 중 어느 하나에서 한정된 화합물의 사용
50. 비만, 당뇨 또는 지질 영양 이상증의 치료 방법으로서, 구체예 1 내지 구체예 49 중 어느 하나에서 한정된 화합물은 그것이 필요한 환자에게 투여되는 방법.
51. 사춘기 지연, 월경 불순 또는 다낭성 난소 증후군의 치료 방법으로서, 구체예 1 내지 구체예 50 중 어느 하나에서 한정된 화합물은 그것이 필요한 환자에게 투여되는 방법.
실시예
약어
Boc = 삼차 부틸옥시카르보닐
CHCl3 = 클로로포름
CaCl2 = 칼슘 클로라이드
CH3CN = 아세토니트릴
DCM = 디클로로메탄, CH2Cl2, 메틸렌클로라이드
DIC = 디이소프로필카르브디이미드
DIPEA = N,N-디이소프로필에틸아민
DMF = N,N-디메틸포름아미드
DMSO = 디메틸술폭시드
E.Coli = 에스체리키아 콜리
EDAC = 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드 히드로클로라이드
Et20 = 디에틸 에테르
EtOAc = 에틸 아세테이트
Fmoc = 9H-플루오렌-9-일메톡시카르보닐
Fmoc-Glu-O-t-Bu = N-Fmoc-글루탐산-1-t-부틸 에스테르
Fmoc-OEG-OH = (2[2-(Fmoc-아미노)에톡시]에톡시)아세트산
H20 = 물
HCl = 히드로겐클로라이드
HEK293= 사람 배아 신장 293
HPCD = (2-히드록시프로필)-β-시클로덱스트린
HOAt = 1-히드록시-7-아자벤조트리아졸
MeOH = 메탄올
MgCl2 = 마그네슘 클로라이드
NaCl = 나트륨 클로라이드
NMP = N-메틸피롤리딘-2-원
OEG = (2[2-(아미노)에톡시]에톡시)아세트산
OtBu = 삼차 부틸 에스테르
tBu = 삼차 부틸
NaCl = 나트륨 클로라이드
NMP = N-메틸피롤리딘-2-원
OEG = (2[2-(아미노)에톡시]에톡시)아세트산
OtBu = 삼차 부틸 에스테르
tBu = 삼차 부틸
PBS 버퍼 = 포스페이트 완충된 식염수
p-STAT-3 = 전사 3의 인산화된 신호 변환기 및 액티베이터 (activator)
TFA = 트리풀로로아세트산
TIPS = 트리이소프로필실란
THF = 테트라히드로푸란
Met -h 렙틴
Met-h렙틴 (SEQ ID: 3)은 상업적으로 이용 가능하지만, 당업자에게 알려져 있는 방법에 의해 이. 콜리에서 발현될 수도 있다.
단백질 분석 방법
UPLC: Waters Acquity UPLC BEH C18, 1.7 μm, 2.1 mm x 50 mm 컬럼이 장착된 Waters Acquity UPLC 시스템을 사용하여 UPLC-분석을 수행하였다. UV 검출 물질을 214 nm에서 수거하였다. 오븐 온도는 40 ℃였다. 다음 용출액을 사용하였다;
용매 A: 99.95% 물, 0.05% 트리플루오로아세트산
용매 B: 99.95% 아세토니트릴, 0.05% 트리플루오로아세트산.
단계 구배: 0.5분에 5 내지 35% B 이후 3.5분에 35 내지 55%
구배 실행-시간: 4.0 분
총 실행-시간: 6.0 분
유속: 고정된 0.45 ml/분 또는 다음 2개의 방법 중 하나에 의해
Figure pct00061
표 1: UPLC 분석 (I)을 위한 모델
Figure pct00062
표 2: UPLC 분석 ( II )을 위한 모델
실시예 1: 프로트랙터 ( protractor ) 그룹 4-(1- 카르복시 -3-{2-[2-({[(2, 2-디메톡시- 에틸카르바모일 )- 메틸 ]- 카르바모일 }- 메톡시 )- 에톡시 ]- 에틸카르바모일 }-프 로필카르바모일 )-2-[4-(16-2H- 테트라졸 -5-일- 헥사데카노일술파모일 )- 부티릴아미노 ]-부 티르 산 (화합물 1)의 합성
Figure pct00063
프로트랙터 그룹 화합물 1의 합성을 계획 1에 도시하고 하기 설명된 바와 같이 수행하였다.
계획 1.
Figure pct00064
t-BOC-Gly Pam 수지 (3 g, 로딩 1 mmol/g)를 NMP로 1시간 동안 세척하였고 여과하였다. 20 mL TFA를 추가하였고 현탁액을 10분 동안 흔들었고, 여과하였고 NMP로 두 번 세척한 후, 이어서 NMP 중의 5% DIPEA (25 mL)로 및 NMP로 추가 3번 세척하였다.
Fmoc-OEG-OH (3.1 g, 8 mmol)를 NMP 중의 HOAt의 용액 (0.25 M, 32 mL)에 용해하였고, DIC (1250 μL, 8 mmol)을 추가하였고 혼합물이 수지에 추가되기 전에 15분 동안 미리 활성화하는 것을 허용하였다. 현탁액을 하룻밤 동안 흔들었고, 여과하였고 NMP로 3번 세척하였다. 수지를 NMP 중의 피페리딘의 용액 (25 %, 20 mL)에 추가하였고 10분 동안 흔들었고, 여과하였고 NMP로 6번 세척하였다.
Fmoc-Glu-(OtBu)-OH (1.7 g, 4 mmol)를 NMP 중의 HOAt의 용액 (0.25 M, 16 mL)에 용해하였고, DIC (626 μL, 4 mmol)를 추가하였고 혼합물이 수지에 추가되기 전에 15분 동안 미리 활성화하는 것을 허용하였다. 현탁액을 2시간 동안 흔들었고, 여과하였고 NMP로 3번 세척하였다 (3번). 수지를 NMP 중의 피페리딘의 용액 (25 %, 20 mL)에 추가하였고 10분 동안 흔들었고, 여과하였고 NMP로 6번 세척하였다.
Fmoc-Glu-(OtBu)-OH (1.7 g, 4 mmol)를 NMP 중의 HOAt의 용액 (0.25 M, 16 mL)에 용해하였고, DIC (626 μL, 4 mmol)를 추가하였고 혼합물이 수지에 추가되기 전에 15분 동안 미리 활성화하는 것을 허용하였다. 현탁액을 2시간 동안 흔들었고, 여과하였고 NMP로 3번 세척하였다 (3번). 수지를 NMP 중의 피페리딘의 용액 (25 %, 20 mL)에 추가하였고 10분 동안 흔들었고, 여과하였고 NMP로 6번 세척하였다.
4-(16-1H-테트라졸-5-일-헥사데카노일술파모일)-부티르 산 (WO2007/009894, 페이지 79-82에 설명된 합성) (1.9 g, 4 mmol)을 NMP 중의 HOAt의 용액 (0.25 M, 16 mL)에 용해하였고 혼합물이 수지에 추가되기 전에 15분 동안 미리 활성화하는 것을 허용하였다. 현탁액을 5시간 동안 흔들었고, 여과하였고 NMP로 3번 세척하였다. 수지를 TFA (20 mL), TIPS (500 μL) 및 물 (500 μL)과 함께 1시간 동안 처리하였다. 수지 결합 비보호 펩티드를 CHCl3/아미노아세트알데히드디메틸아세탈 (3:2) (25 mL)의 혼합물과 함께 처리하였다. 수지를 여과하였고 화합물 1을 수득하기 위해 증발 건조하였다.
실시예 2: 지속적인 래트 렙틴 (화합물 A)의 합성
Figure pct00065
화합물 1 (22 mg, 0.0094 mmol)을 20% (2-히드록시프로필)-p-시클로덱스트린 (HPCD)을 함유하는 물 (4 mL)에 용해하였다. 알데히드를 수성 HCl을 추가한 후 이어서 1시간 동안 흔들어서 해방하였다. 래트 렙틴 (100 mg, 0.0031 mmol)을 5 mL Hepes 버퍼 (milliQ 물 중의 25 mM Hepes, pH 7)에 용해하였다. 이 용액에 해방된 알데히드를 추가하였고 혼합물을 상온에서 1시간 동안 흔들었다. NaCNBH3 (50 mg)를 추가하였고 혼합물을 하룻밤 동안 흔들었다. 혼합물을 용출 상태를 위해 0.5 M NaCl을 추가하였고, 정제된 화합물 A, 즉, N-말단 아미노기에서 화합물 1로 알킬화된 래트 렙틴 (SEQ ID NO: 2)을 발생시키는, 10 mM Na2HP04, 15 부피% 글리세롤, pH 7.6으로 구성된 버퍼를 사용하여 8 mL Poros50HQ 음이온 교환 컬럼에서 정제하였다. Mw = 17190 g/mol.
UPLC 및 LC-MS 분석을 상기 설명된 바와 같이 수행하였고 결과는 UPLC: RT = 3.66 분; LC-MS: 평균 질량 = 17190.2 Da이다 (계산된 것 = 17189.8 Da; MS 해상도 = 100000).
실시예 3: 지속적인 사람 렙틴 (화합물 B)의 합성
Figure pct00066
화합물 1 (10 mg)을 20% (2-히드록시프로필)-β-시클로덱스트린 (HPCD)을 함유하는 물 (2 mL)에 용해하였다. 알데히드를 수성 HCl을 추가한 후 이어서 1시간 동안 흔들어서 해방하였다. Met-h렙틴 (50 mg)을 2.5 mL Hepes 버퍼의 혼합물 (milliQ 물 중의 25 mM Hepes, pH 7 + 5% HPCD를 함유하는 1.5 mL Hepes 버퍼 (25 mM, pH 7.0))에 용해하였다. 이 용액에 해방된 알데히드를 추가하였고 혼합물을 상온에서 24시간 동안 흔들었다. NaCNBH3 (24 mg)를 추가하였고 혼합물을 하룻밤 동안 흔들었다. 혼합물을 용출 상태를 위해 0.5 M NaCl을 추가하였고, 정제된 화합물 B, 즉, N-말단 아미노기에서 화합물 1로 알킬화된 사람 렙틴 (SEQ ID NO: 3)을 발생시키는, 10 mM Na2HP04, 15 부피% 글리세롤, pH 7.6으로 구성된 버퍼를 사용하여 8 mL Poros50HQ 음이온 교환 컬럼에서 정제하였다. Mw = 17115 g/mol.
UPLC 및 LC-MS 분석을 상기 설명된 바와 같이 수행하였고 결과는 UPLC: RT = 3.72 분; LC-MS: 평균 질량 = 17115 Da이다 (계산된 것 = 17189.8 Da; MS 해상도 = 100000).
실시예 4: 프로트랙터 그룹 17-[(S)-1- 카르복시 -3-(2-{2-[(2-{2-[(4- 포르밀 -벤질카르바모일)- 메톡시 ]- 에톡시 }- 에틸카르바모일 )- 메톡시 ]- 에톡시 } 에틸카르바모 일)- 프로필카르바모일 ]- 헵타데칸 산 (화합물 2)의 합성
Figure pct00067
프로트랙터 그룹 화합물 2의 합성을 계획 2에 도시하고 하기 설명된 바와 같이 수행하였다.
계획 2.
Figure pct00068
t-Bu-N-(4-포르밀-벤질) 카르바메이트 (100 mg)를 TFA/DCM (1:1)과 함께 1시간 동안 처리하였다. 혼합물을 진공에서 농축하였고 톨루엔과 동시 농축하였다 (2번).
잔기를 THF (2.5 mL)에 용해하였고 THF (5 ml) 중의 17-((S)-1-카르복시-3-{2-[2-({2-[2-(2,5-디옥소-피롤리딘-1-일옥시카르보닐메톡시)-에톡시]-에틸카르바모일}-메톡시)-에톡시]-에틸카르바모일}-프로필카르바모일)-헵타데칸 산 (320 mg)의 용액을 추가하였다. DIPEA (0.5 ml)를 천천히 추가하였다. 130분 후, 혼합물을 진공에서 농축하였다.
잔기를 EtOAc 및 1 N HCl에 용해하였다. 유기층을 1 N HCl 및 브라인으로 추출하였다. 유기층을 건조하였고 (Na2SO4) 진공에서 농축하여 흰 고체를 제공한다.
17-((S)-1-카르복시-3-{2-[2-({2-[2-(2,5-디옥소-피롤리딘-1-일옥시카르보닐메톡시)-에톡시]-에틸카르바모일}-메톡시)-에톡시]-에틸카르바모일}-프로필카르바모일)-헵타데칸 산의 합성을 WO2009083549 실시예 7, 페이지 79에 설명된 방법에 따라 수행하였다.
실시예 5: 지속적인 래트 렙틴 (화합물 C)의 합성
Figure pct00069
일반적인 과정:
렙틴을 포스페이트 버퍼, pH-7.4, 농도 5-10 mg/mL에 옮겼다.
프로트랙터 (즉, 화합물 2)를 10 mg/mL의 농도로 40% HPβCD 용액에 용해하였다. 프로트랙터의 4개의 등가물을 단백질에 추가하였다. 총 부피 ~ 5 mL.
메탄올 중의 NaCNBH3의 신선한 용액을 제조하였다 (5-10%). 메탄올 중의 환원제의 50 μL의 여러 앨리쿼트를 그 다음 2일 중에 단백질 용액에 추가하였다 (24시간 당 ~200 μL). 반응을 LC-MS를 사용하여 관찰하였다. 제 3일에, 생성물을 HIC 컬럼 및 10xPBS 대 MilliQ 물의 구배를 사용하여 정제하였다. 정제된 생성물은 화합물 C, 즉, N-말단 아미노 기에서 화합물 2로 알킬화된 래트 렙틴 (SEQ ID NO: 2)이었다.
지속적인 r렙틴
LC-MS: 계산 질량 17065.72, 발견 17068.33
실시예 6: 지속적인 래트 렙틴 (화합물 D의 합성
Figure pct00070
Met-h렙틴 (SEQ ID NO: 3)을 포스페이트 버퍼, pH-7.4, 농도 5-10 mg/mL에 옮겼다.
프로트랙터 (즉, 화합물 2)를 10 mg/mL의 농도로 40% HPβCD 용액에 용해하였다. 프로트랙터의 4개의 등가물을 단백질에 추가하였다. 총 부피 ~ 5 mL.
메탄올 중의 NaCNBH3의 신선한 용액을 제조하였다 (5-10%). 메탄올 중의 환원제의 50 μL의 여러 앨리쿼트를 그 다음 2일 중에 단백질 용액에 추가하였다 (24시간 당 ~200 μL). 반응을 LC-MS를 사용하여 관찰하였다. 제 3일에, 생성물을 HIC 컬럼 및 10xPBS 대 MilliQ 물의 구배를 사용하여 정제하였다.
정제된 생성물은 화합물 D, 즉, N-말단 아미노 기에서 화합물 2로 알킬화된 Met-h렙틴 (SEQ ID NO: 3)이었다.
지속적인 Met-h렙틴
LC-MS: 계산 질량 16990.60, 발견 16992.44
실시예 7: 실시예 5 및 6의 화합물 (화합물 C 및 D)과 결합하는 전체 세포
안정적으로 사람 렙틴 수용체를 발현하는 HEK293 세포를 폴리-D-리신 코팅된 24 웰 플레이트에 웰 당 200,000개의 세포로 분주하였고 5% C02의 배양기에서 37 ℃에서 2일 동안 알파-최소 필수 배지 (MEM), 10% 열 불활성화된 태아 소 혈청 (FCS), 1 % 페니실린-스트렙토마이신 (P/S), 1 mg/ml 제오신 및 1 mg/ml G418 항생제를 함유하는 세포 배양 배지에서 배양하였다. 실험 전에, 세포를 순수한 MEM 배지로 헹군 후 이어서, 45분 동안 0.005% 폴리소르베이트 20 및 0.1 % 오발부민 및 [125I]-h렙틴 100000 cpm을 함유하는 MEM에서 10, 3, 1, 0.3, 0.1, 0.03 및 0.01 nM 농도의 렙틴 유사체에서 배양하였다. 세포를 매우 찬 MEM으로 3번 세척하였고 1.0% 노니데트 P-40, 0.5% triton X-100 (C14H22O(C2H40)n) 및 1 M 나트륨 히드록시드를 함유하는 용해 버퍼에서 용해하였다. 샘플을 플라스틱으로 옮긴다.
Figure pct00071
표 3: 본 발명의 화합물과 결합하는 전체 세포.
실시예 8: 실시예 2, 3, 5 및 6의 화합물 (화합물 A, B, C 및 D)의 신틸레이 션 근접 검정 ( Scintillation Proximity Assay ; SPA )
안정적으로 사람 렙틴 수용체를 발현하는 HEK293 세포를 5% C02의 배양기에서 37 ℃에서 10% 열 불활성화된 태아 소 혈청, 1 % 페니실린-스트렙토마이신 (P/S), 1 mg/ml 제오신 및 1 mg/ml G418 항생제를 함유하는 RPMI 1640 세포 배양 배지의 500 cm2 세포 수확 디쉬에서 배양하였고 긁어서 기계적으로 떼어냈다. 플레이트를 매우 찬 PBS (137mM NaCl, 2.7mM KCl, 4.3mM Na2HP04, 1.47mM KH2P04 pH 7.4로 조정됨)로 세척하였고 세포를 튜브로 옮겼고 +4 ℃에서 5분 동안 1000 g로 원심분리하였다. 펠렛을 매우 찬 균질화 버퍼 (20mM Hepes, 5mM MgCl2, 1 mg/ml 바시트라신, pH 7.1)에 재현탁하였고 조직 균질기를 사용하여 중간 속도로 30초 동안 균질화하였다. 균질액을 초원심분리기를 사용하여 +4 ℃에서 10분 동안 35000 g로 원심분리하였고 상층액을 제거하였고 신선한 균질화 버퍼를 추가하였다. 펠렛의 균질화를 총 3번 반복하였다. 최종 펠렛을 몇 밀리리터의 균질화 버퍼에 재현탁하였고 단백질 농도를 Bradford 방법을 사용하여 결정하였고 미크로플레이트 리더 상에서 595 nm로 측정하였다. 단백질 농도를 1 mg/ml로 조정하였고 동결 튜브로 옮겼고 -80 ℃에서 저장하였다.
사람 렙틴 수용체 SPA 결합 검정을 웰 당 200 μL의 총량으로 흰색 96-웰 플레이트에서 수행하였다. 신틸레이션 액체를 함유하는, 소맥 배아 응집소 (wheat germ agglutinin) 코팅된 비드를 결합 버퍼 (50mM Hepes, 1 mM CaCl2, 5mM MgCl2, 0.02% Tween 20, 0.25% 오발부민 pH 7.4)에서 재구성하였고 막 조제물과 혼합하여 1 mg 비드의 최종 농도 및 웰 당 10 μg의 총 단백질을 제공한다. 약 100 pM의 농도에 맞게 방사성 리간드 사람 [125I]-렙틴의 웰 당 50,000 cpm을 추가하였다. 알부민의 존재시 결합이 조사될 때 사람 혈청 알부민을 2%의 최종 농도로 추가하였다. 동결 건조된 렙틴 유사체를 PBS에 100 μM로 용해하였고 결합 버퍼에서 단계 희석하여 100 nM 내지 0.01 pM의 범위의 최종 검정 농도를 제공하였다. 플레이트를 밀봉하였고 400 rpm으로 설정된 플레이트 셰이커에서 +25 ℃에서 2시간 동안 배양하였고 그 이후 미크로플레이트 신틸레이션 및 발광 계수기에서 발광을 해독하기 전에 10분 동안 1500 rpm으로 원심분리하였다. 발광의 감소로서 방사성 리간드의 배출량을 측정하였고 IC50을 에스자형 투여량-반응 곡선의 비선형 회귀 분석에 의해 계산하였다.
Figure pct00072
표 4: 본 발명의 화합물의 SPA 결합
실시예 9: 실시예 2, 3, 5 및 6의 화합물 (화합물 A, B, C 및 D)의 기능성 루시퍼라제 검정
h렙틴 수용체 및 루시퍼라제 리포터 유전자를 갖는 p-STAT-3 반응 요소를 안정하게 발현하는 HEK293 세포를 5% C02의 배양기에서 +37 ℃에서 10% 열 불활성화된 태아 소 혈청 (FCS), 1 % 페니실린-스트렙토마이신 (P/S), 1 mg/ml 제오신 및 1 mg/ml G418 항생제를 함유하는 RPMI 1640 세포 배양 배지에서 배양하였다. 세포를 96 웰 플레이트에 분주하였고 (웰 당 20,000 세포) 24시간 동안 부착되도록 한 후 이어서 24시간 동안만 1 % 페니실린-스트렙토마이신 (P/S)이 들어있는 RPMI 배지를 고갈시켰다. 세포를 1 % 페니실린-스트렙토마이신 (P/S)이 들어있는 RPMI 배지에서 4.5시간 동안 100 nM 내지 0.01 pM의 범위의 최종 농도로 0.7% 사람 혈청 알부민이 있거나 없는 렙틴 유사체에서 배양한 후 이어서 모든 배지를 제거하였다. 루시퍼라제는 반딧불이-특이적 기질, 빛을 생산하는 D-루시페린의 산화를 촉진하고 D-루시페린을 함유하는 용해 버퍼를 PBS를 가지고 1:1로 희석하였고 200 μL를 각 웰에 추가한 후 이어서 상온에서 30분 배양하였다. 발광을 미크로플레이트 신틸레이션 및 발광 계수기 상에서 측정하였고 EC50 값을 에스자형 투여량-반응 곡선의 비선형 회귀 분석에 의해 계산하였다.
Figure pct00073
표 5: 본 발명의 화합물의 루시퍼라제 검정
실시예 10: HSA 농도 0.7% 및 2.0%에서 실시예 2, 3, 5 및 6의 화합물 (화합물 A, B, C 및 D)과 결합하는 사람 혈청 알부민 ( HSA )
Figure pct00074
표 6: 본 발명의 화합물의 HAS 결합
약학적 방법
검정 (I): ob / ob 마우스의 음식 섭취 및 체중을 관찰하는 실험 과정
렙틴의 일 회 투여 후 개별적으로 사육된 ob/ob 마우스에서 음식 섭취를 관찰하였다. 계속되는 음식 섭취를 온라인 음식 섭취 관찰 시스템 (BioDAQ)을 통해 자동으로 관찰하였다. 시스템은 민감한 저울 위에 개개의 음식 호퍼 (hopper)가 있는 32개의 위치를 함유하였다. 음식이 음식 호퍼로부터 제거될 때 이것은 32개의 개개의 저울 각각으로부터 계속해서 데이터를 수거하는 컴퓨터에 의해 기록된다.
피하 (s.c)에 렙틴을 투여할 때 마우스는 8-9개월 ob/ob 마우스 (Taconic)이었다. 그것들은 실험의 개시 전에 2주 이상 동안 시스템에 적응될 것이다. 그것들을 반대의 낮-밤 빛 주기 (오전 10시 내지 오후 10시 어둠) 그대로 사육하였다. 케이지 당 2마리의 마우스가 있었고, 이것들은 다. 2마리의 마우스 사이에서 일부 상호 작용을 허용하는 분리 벽 (dividing wall)으로 분리하는 한편, 동시에 개개의 음식 섭취의 기록을 가능하게 한다.
마우스에게 음식 (Research Diets의 D12450B)을 공급했다. 펠렛을 저울을 위해 만들어진 및 마우스가 과도한 음식을 낭비하지 않고 임의로 먹는 것을 허용하는 음식 호퍼에 두었다. 마우스는 물에 자유롭게 접근하였다.
마우스를 4시간 동안 굶겼고 어둠의 시작 30분 전에 렙틴을 포함하는 조성물을 피하에 한 번 투여하였다.
음식 섭취를 투여 후 기간 동안 관찰하였다. 체중을 투여 전 및 그 후의 시점에서, 예를 들어, 제 6일에 얻었다. 음식 섭취 및 체중의 차이를 일원 분산 분석 (one-way ANOVA analysis)에 의해 통계적으로 평가한 후, 이어서 Dunnetts 사후 테스트를 하여 비히클 처치와 비교하였다.
검정 ( II ):
비히클, wt 래트/사람 렙틴 또는 화합물 A/B/C/D의 투여 후 검정 (I)에 따라 ob/ob 마우스의 음식 섭취 및 체중을 6일 동안 측정하였다. 투여량은 마우스 당 0.2 또는 0.6 ml이었다. 결과는 표 2 (음식 섭취) 및 표 3 (체중)에 나타난다. 본 발명에 따르는 렙틴 유도체는 ob/ob 마우스에서 음식 섭취에 대하여 크고 오래 지속되는 효과를 갖는다는 것이 관찰되었다. 본 발명에 따르는 렙틴 유도체는 ob/ob 마우스에서 체중의 감소에 대하여 크고 투여량 의존적인 효과를 갖는다는 것이 관찰되었다. 게다가, 정상적인 일주기가 온전하다는 것이 관찰되었다.
검정 ( III ):
다양한 시점에 꼬리 정맥에서 혈액 샘플 (10 μl)을 모세혈관 튜브에 채취하였다 (표 참조). 모세혈관 튜브를 500 μl EBIO (EBIO Eppendorf, Germany) 버퍼를 함유하는 튜브에 배치하였고 혈당 농도를 BioSen (EKF Diagnostics)에서 분석하였다. 혈당 농도를 글루코스 분석기 (Biosen 5030, EKF Diagnostic, Germany)에 의해 분석하였다.
실시예 11: 실시예 2에 따라 60 또는 180 μg/마우스 파운드 (화합물 A)의 투여 후 ob / ob 마우스의 음식 섭취
Figure pct00075
표 7: 음식 섭취에 대한 효과의 일원 분산 분석을 Dunnetts 다중 비교 테스트로 수행하였고, 비히클에 관하여 *는 p<0.05를 나타내고, **는 p<0.01을 나타내고 ***는 p<0.001을 나타낸다.
실시예 12: 실시예 2에 따라 60 또는 180 μg/마우스 파운드 (화합물 A)의 투여 후 ob / ob 마우스의 체중 변화
Figure pct00076
표 8: 체중에 대한 효과의 일원 분산 분석을 Dunnetts 다중 비교 테스트로 수행하였고, 비히클에 관하여 *는 p<0.05를 나타내고, **는 p<0.01을 나타내고 ***는 p<0.001을 나타낸다.
실시예 13: 실시예 2 및 3에 따르는 150 μg/마우스 화합물 (화합물 A 및 B)의 투여 후 ob / ob 마우스의 음식 섭취
Figure pct00077
표 9: 일원 분산 분석을 Bonferoni 다중 비교 테스트로 수행하였고, 비히클에 관하여 */†는 p<0.05를 나타내고, **/††는 p<0.01을 나타내고 ***/†††는 p<0.001을 나타낸다. *는 비히클 대 약물의 유의성을 나타내고, †는 지속적인 래트 /사람 렙틴 대 래트 /사람 네이티브 렙틴의 유의성을 나타낸다.
실시예 14: 실시예 2 및 3에 따르는 150 μg/마우스 화합물 (화합물 A 및 B)의 투여 후 ob / ob 마우스의 체중 변화
Figure pct00078
표 10: 일원 분산 분석을 Bonferoni 다중 비교 테스트로 수행하였고, 비히클에 관하여 */†는 p<0.05를 나타내고, **/††는 p<0.01을 나타내고 ***/†††는 p<0.001을 나타낸다. *는 비히클 대 약물의 유의성을 나타내고, †는 지속적인 래트 /사람 렙틴 대 래트 /사람 네이티브 렙틴의 유의성을 나타낸다.
실시예 15: 실시예 4 및 5에 따르는 150 μg/마우스 화합물 (화합물 C 및 D)의 투여 후 ob / ob 마우스의 음식 섭취
Figure pct00079
표 11: 일원 분산 분석을 Bonferoni 다중 비교 테스트로 수행하였고, 비히클에 관하여 */†는 p<0.05를 나타내고, **/††는 p<0.01을 나타내고 ***/†††는 p<0.001을 나타낸다. *는 비히클 대 약물의 유의성을 나타내고, †는 지속적인 래트 /사람 렙틴 대 래트 /사람 네이티브 렙틴의 유의성을 나타낸다.
실시예 16: 실시예 4 및 5에 따르는 150 μg/마우스 화합물 (화합물 C 및 D)의 투여 후 ob / ob 마우스의 체중 변화
Figure pct00080
표 12: 일원 분산 분석을 Bonferoni 다중 비교 테스트로 수행하였고, 비히클에 관하여 */†는 p<0.05를 나타내고, **/††는 p<0.01을 나타내고 ***/†††는 p<0.001을 나타낸다. *는 비히클 대 약물의 유의성을 나타내고, †는 지속적인 래트 /사람 렙틴 대 래트 /사람 네이티브 렙틴의 유의성을 나타낸다.
각각의 참고문헌이 개별적으로 및 특이적으로 참고로 포함되는 것으로 지시되지 않고 여기에서 그것의 전문이 설명되는 경우 (법으로 허용된 최대 범위), 공보, 특허 출원, 및 특허를 포함하는, 여기에 인용된 모든 참고문헌은 전문이 및 같은 범위로 본원에 참고로 포함된다.
모든 주제 및 부제는 본원에 편의상으로만 사용되고 어떤 법으로도 본 발명을 제한하는 것으로 생각되어서는 안 된다.
여기에 제공된 어떤 및 모든 실시예, 또는 예시적 언어 (예를 들어, "와 같은")의 사용은 단지 본 발명을 더 명확하게 하기 위한 것이고 달리 주장되지 않으면 본 발명의 범위에 대한 제한으로 생각되지 않는다. 명세서의 어떤 언어도 본 발명의 실시에 필수적인 어떤 비-주장 요소를 나타내는 것으로 생각되어서는 안 된다.
여기에서 특허 서류의 인용 및 통합은 단지 편의상으로만 수행되고 이러한 특허 서류의 유효기간, 특허 가능성, 및/또는 시행 가능성의 어떤 전망도 반영하지 않는다.
본 발명은 적용 가능한 법에 의해 허용된 바와 같이 여기에 첨부된 청구항에 인용된, 대상 물질의 변형 및 동등한 물질 모두를 포함한다.
SEQUENCE LISTING <110> Novo Nordisk A/S <120> LEPTIN DERIVATIVES <130> 8316.204-WO <150> EP11152160.5 <151> 2011-01-26 <160> 3 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 146 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 1 Val Pro Ile Gln Lys Val Gln Asp Asp Thr Lys Thr Leu Ile Lys Thr 1 5 10 15 Ile Val Thr Arg Ile Asn Asp Ile Ser His Thr Gln Ser Val Ser Ser 20 25 30 Lys Gln Lys Val Thr Gly Leu Asp Phe Ile Pro Gly Leu His Pro Ile 35 40 45 Leu Thr Leu Ser Lys Met Asp Gln Thr Leu Ala Val Tyr Gln Gln Ile 50 55 60 Leu Thr Ser Met Pro Ser Arg Asn Val Ile Gln Ile Ser Asn Asp Leu 65 70 75 80 Glu Asn Leu Arg Asp Leu Leu His Val Leu Ala Phe Ser Lys Ser Cys 85 90 95 His Leu Pro Trp Ala Ser Gly Leu Glu Thr Leu Asp Ser Leu Gly Gly 100 105 110 Val Leu Glu Ala Ser Gly Tyr Ser Thr Glu Val Val Ala Leu Ser Arg 115 120 125 Leu Gln Gly Ser Leu Gln Asp Met Leu Trp Gln Leu Asp Leu Ser Pro 130 135 140 Gly Cys 145 <210> 2 <211> 147 <212> PRT <213> rattus norvegicus <400> 2 Ala Val Pro Ile His Lys Val Gln Asp Asp Thr Lys Thr Leu Ile Lys 1 5 10 15 Thr Ile Val Thr Arg Ile Asn Asp Ile Ser His Thr Gln Ser Val Ser 20 25 30 Ala Arg Gln Arg Val Thr Gly Leu Asp Phe Ile Pro Gly Leu His Pro 35 40 45 Ile Leu Ser Leu Ser Lys Met Asp Gln Thr Leu Ala Val Tyr Gln Gln 50 55 60 Ile Leu Thr Ser Leu Pro Ser Gln Asn Val Leu Gln Ile Ala His Asp 65 70 75 80 Leu Glu Asn Leu Arg Asp Leu Leu His Leu Leu Ala Phe Ser Lys Ser 85 90 95 Cys Ser Leu Pro Gln Thr Arg Gly Leu Gln Lys Pro Glu Ser Leu Asp 100 105 110 Gly Val Leu Glu Ala Ser Leu Tyr Ser Thr Glu Val Val Ala Leu Ser 115 120 125 Arg Leu Gln Gly Ser Leu Gln Asp Ile Leu Gln Gln Leu Asp Leu Ser 130 135 140 Pro Glu Cys 145 <210> 3 <211> 147 <212> PRT <213> artificial <220> <223> Artificial Sequence based on SEQ ID 1 (homo sapiens, Leptin) <400> 3 Met Val Pro Ile Gln Lys Val Gln Asp Asp Thr Lys Thr Leu Ile Lys 1 5 10 15 Thr Ile Val Thr Arg Ile Asn Asp Ile Ser His Thr Gln Ser Val Ser 20 25 30 Ser Lys Gln Lys Val Thr Gly Leu Asp Phe Ile Pro Gly Leu His Pro 35 40 45 Ile Leu Thr Leu Ser Lys Met Asp Gln Thr Leu Ala Val Tyr Gln Gln 50 55 60 Ile Leu Thr Ser Met Pro Ser Arg Asn Val Ile Gln Ile Ser Asn Asp 65 70 75 80 Leu Glu Asn Leu Arg Asp Leu Leu His Val Leu Ala Phe Ser Lys Ser 85 90 95 Cys His Leu Pro Trp Ala Ser Gly Leu Glu Thr Leu Asp Ser Leu Gly 100 105 110 Gly Val Leu Glu Ala Ser Gly Tyr Ser Thr Glu Val Val Ala Leu Ser 115 120 125 Arg Leu Gln Gly Ser Leu Gln Asp Met Leu Trp Gln Leu Asp Leu Ser 130 135 140 Pro Gly Cys 145

Claims (15)

  1. 일반식 Z-Y-X-렙틴 화합물의 화합물 또는 이들의 약학적 염, 아미드 또는 에스테르로서, Z는 12-22개의 탄소 원자를 함유하고 C-말단 카르복실산 또는 C-말단 테트라졸 기를 포함하는 아실 기이고; Y는 결합,
    Figure pct00081
    로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
    여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; X는 렙틴 화합물에 대한 부착 앵커이고,
    Figure pct00082
    이며,
    여기에서 "*"는 렙틴 화합물을 향한 모이어티의 위치를 나타내고 "*""는 Z를 향한 모이어티의 위치를 나타내는 화합물.
  2. 제 1항에 있어서, Z-Y-X-모이어티는 렙틴 화합물의 N 말단 알파-아미노 기에 존재하는 아미노 기에 연결되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  3. 일반식 Z-Y-X-렙틴 화합물의 화합물로서, Z는 12-22개의 탄소 원자를 함유하고 C-말단 카르복실산 또는 C-말단 테트라졸 기를 포함하는 아실 기이고; Y는 결합,
    Figure pct00083
    로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
    여기에서 m은 0, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23이고; r은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22 또는 23인 것을 특징으로 하는 화합물.
  4. 제 1항, 제 2항 또는 제 3항 중 어느 한 항에 있어서, Z는 16-18개의 탄소 원자를 포함하고 Y는 결합,
    Figure pct00084
    로 구성된 그룹으로부터 선택된 스페이서이고,
    여기에서 m은 0, 1, 2이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3 또는 4; r은 1, 2 또는 3이고 또는,
    Figure pct00085
    이고,
    여기에서 m은 0, 1, 2 또는 3이고; n은 1, 2 또는 3이고; s는 0, 1, 2 또는 3이고; p는 1, 2, 3 또는 4이고; r은 1, 2 또는 3이고; X는 렙틴 화합물에 대한 부착 앵커이고,
    Figure pct00086
    이며,
    여기에서 "*"는 렙틴 화합물을 향한 모이어티의 위치를 나타내고 "*""는 Z를 향한 모이어티의 위치를 나타내는 것을 특징으로 하는 화합물.
  5. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Z-Y-X-모이어티는 알킬화 반응에 의해 렙틴에 부착되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  6. 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 렙틴 화합물은 래트 또는 사람 렙틴의 유사체와 같은 렙틴의 유사체인 것을 특징으로 하는 화합물.
  7. 제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 있어서, Z는 지방산 또는 지방 2산을 포함하는 것을 특징으로 하는 화합물.
  8. 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 있어서, Z는 알파 및 오메가 카르복시 기를 포함하는 것을 특징으로 하는 화합물.
  9. 제 1항 내지 제 8항 중 어느 한 항에 있어서, Z는 12-22개의 탄소 원자를 갖는 지방산 또는 지방 2산을 포함하는 것을 특징으로 하는 화합물.
  10. 제 1항 내지 제 9항 중 어느 한 항에 있어서, Z는 16-20개의 탄소 원자를 갖는 지방산 또는 지방 2산을 포함하는 것을 특징으로 하는 화합물.
  11. 제 1항 내지 제 10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물은 하기 화합물 B인 것을 특징으로 하는 화합물
    Figure pct00087
    .
  12. 제 1항 내지 제 11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화합물은 하기 화합물 D인 것을 특징으로 하는 화합물
    Figure pct00088
    .
  13. 제 1항 내지 제 12항 중 어느 한 항에 있어서, 의학에 사용되는 것을 특징으로 하는 화합물.
  14. 제 1항 내지 제 13항 중 어느 한 항에 있어서, 비만, 당뇨, 지질 영양 이상증, 사춘기 지연, 월경 불순 또는 다낭성 난소 증후군의 치료를 위한 것을 특징으로 하는 화합물.
  15. 제 1항 내지 제 14항 중 어느 한 항에서 정의된 화합물 및 하나 이상의 약학적 첨가물, 및 선택적으로 하나 이상의 추가적인 프림란티드와 같은 항-비만제 및/또는 항-당뇨제를 포함하는 조성물.
KR1020137018975A 2011-01-26 2012-01-24 렙틴 유도체 KR20130141648A (ko)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP11152160 2011-01-26
EP11152160.5 2011-01-26
US201161437895P 2011-01-31 2011-01-31
US61/437,895 2011-01-31
PCT/EP2012/051055 WO2012101124A1 (en) 2011-01-26 2012-01-24 Leptin derivatives

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20130141648A true KR20130141648A (ko) 2013-12-26

Family

ID=44148807

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020137018975A KR20130141648A (ko) 2011-01-26 2012-01-24 렙틴 유도체

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20140018290A1 (ko)
EP (1) EP2667899A1 (ko)
JP (1) JP2014505060A (ko)
KR (1) KR20130141648A (ko)
CN (1) CN103379919A (ko)
AU (1) AU2012210624A1 (ko)
BR (1) BR112013018628A2 (ko)
CA (1) CA2825683A1 (ko)
MX (1) MX2013008559A (ko)
RU (1) RU2013137412A (ko)
WO (1) WO2012101124A1 (ko)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107254142A (zh) * 2016-07-21 2017-10-17 广东广山新材料股份有限公司 一种阻燃树脂组合物、热固性树脂组合物、复合金属基板及阻燃电子材料
CN111848774B (zh) * 2020-08-05 2022-05-10 武汉海特生物制药股份有限公司 一种美曲普汀的制备方法

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE741187T1 (de) 1995-05-05 1997-04-30 Hoffmann La Roche Rekombinante Obesitäts-(OB)-Proteine
US6025324A (en) 1996-05-15 2000-02-15 Hoffmann-La Roche Inc. Pegylated obese (ob) protein compositions
US6420339B1 (en) * 1998-10-14 2002-07-16 Amgen Inc. Site-directed dual pegylation of proteins for improved bioactivity and biocompatibility
KR101241862B1 (ko) * 2003-09-19 2013-03-13 노보 노르디스크 에이/에스 신규 ｇｌｐ-1 유도체
TW200522976A (en) * 2003-09-19 2005-07-16 Novo Nordisk As Novel plasma protein affinity tags
WO2007009894A2 (en) 2005-07-18 2007-01-25 Novo Nordisk A/S Peptides for use in the treatment of obesity
RU2009103198A (ru) * 2006-07-07 2010-08-20 Ново Нордиск Хелс Кеа Аг (Ch) Новые белковые конъюгаты и способы их получения
JP5606314B2 (ja) * 2007-09-05 2014-10-15 ノボ・ノルデイスク・エー／エス Ａ−ｂ−ｃ−ｄ−で誘導体化されたペプチドとその治療用途
US20100317057A1 (en) 2007-12-28 2010-12-16 Novo Nordisk A/S Semi-recombinant preparation of glp-1 analogues
CN105963710A (zh) 2009-08-06 2016-09-28 诺沃—诺迪斯克保健股份有限公司 具有延长的体内功效的生长激素
WO2011153642A1 (en) * 2010-06-10 2011-12-15 Angiochem Inc. Leptin and leptin analog conjugates and fusion proteins and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
JP2014505060A (ja) 2014-02-27
MX2013008559A (es) 2013-08-21
EP2667899A1 (en) 2013-12-04
AU2012210624A1 (en) 2013-07-11
RU2013137412A (ru) 2015-03-10
CN103379919A (zh) 2013-10-30
BR112013018628A2 (pt) 2017-07-18
WO2012101124A1 (en) 2012-08-02
US20140018290A1 (en) 2014-01-16
CA2825683A1 (en) 2012-08-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2683039C2 (ru) Стабильные совместные агонисты рецептора глюкагоноподобного пептида-1/глюкагона пролонгированного действия для медицинского применения
KR102066987B1 (ko) 폴리펩티드
JP4980554B2 (ja) 過剰体重を防止または治療するためのオキシントモジュリン
AU2014350197B2 (en) Selective PYY compounds and uses thereof
JP5703226B2 (ja) アミリン誘導体
JP2019187419A (ja) グルカゴン類似体
US8022035B2 (en) Y4 selective receptor agonists for therapeutic interventions
CN101855240A (zh) 改进的胰岛淀粉样多肽衍生物
US20150011466A1 (en) APJ Receptor Compounds
JP6227629B2 (ja) ヒトアミリン類似体
EA027853B1 (ru) Синтетические миметики апелина для лечения сердечной недостаточности
EP3068795B1 (en) Hpyy(1-36) having a beta-homoarginine substitution at position 35
US8575091B1 (en) Amylin analogues and pharmaceutical compositions thereof
JP2017536343A (ja) 安定したｇｌｐ−１ベースのｇｌｐ−１／グルカゴン受容体コアゴニスト
Ericson et al. A review of single-nucleotide polymorphisms in orexigenic neuropeptides targeting G protein-coupled receptors
KR20130141648A (ko) 렙틴 유도체
WO2016124687A1 (en) Selective pyy compounds and uses thereof
CN102076353A (zh) 胰岛淀粉样多肽和鲑鱼降钙素的衍生杂合肽
RU2678312C1 (ru) Селективные соединения пептида yy и их применения
US20160159861A1 (en) APJ Receptor Compounds
TW201315477A (zh) 多胜肽

Legal Events

Date Code Title Description
WITB Written withdrawal of application