KR20130124959A - 히스톤 메틸전달효소의 7-데아자퓨린 조절제 및 그의 사용방법 - Google Patents

Abstract

화합물, 이 화합물을 함유하는 약학 조성물, 히스톤 메틸전달효소의 조절제로서의 상기 화합물 및 조성물의 용도, 및 히스톤 메틸전달효소 활성의 조절로 영향을 받는 질환의 치료방법이 개시된다.

Description

히스톤 메틸전달효소의 7-데아자퓨린 조절제 및 그의 사용방법 {7-DEAZAPURINE MODULATORS OF HISTONE METHYLTRANSFERASE, AND METHODS OF USE THEREOF}

관련출원의 상호참조

본 출원은 그의 전체내용이 본 원에 참고로 포함되는 2010년 12월 3일자로 출원된 미국 가출원 제61/419,504호를 우선권으로 주장하며 그의 이점을 청구한다.

발명의 배경

진핵 세포에서 DNA는 히스톤과 묶여서 크로마틴을 형성한다. 약 150개의 DNA 염기쌍들이 히스톤의 옥타머(히스톤 2A, 2B, 3 및 4 각각 2개) 주변을 2회 감싸 크로마틴의 염기 단위인 뉴클레오좀을 형성한다. 규칙적인 크로마틴 구조가 변하면 관련 유전자의 전사가 변경될 수 있다. 유전자 발현 패턴의 변화는 분화, 증식 및 아포프토시스와 같은 기본적인 세포 과정에 큰 영향을 줄 수 있기 때문에, 상기 과정은 고도로 제어된다. 크로마틴 구조(및 이에 따른 전사) 변화의 제어는 히스톤, 특히 그의 N-말단 후부에 대한 공유결합의 변경으로 매개된다. 이러한 변경은 유전자 발현의 유전 변화로 이어질 수 있기 때문에 종종 후생성으로서 언급되지만, DNA 서열 자체에는 영향을 주지 않는다. 아미노산 측쇄의 공유결합 변경(예를 들어, 메틸화, 아세틸화, 포스포릴화 및 유비퀴틴화)은 효소적으로 매개된다.

히스톤상의 특정 아미노산 부위에 메틸기의 선택적 첨가는 히스톤 메틸전달효소(HMT)로 알려져 있는 특유한 과의 효소 작용으로 제어된다. 특정 유전자의 발현 수준은 관련 히스톤 부위에 메틸기 존재 유무로 영향을 받는다. 특정 히스톤 부위에서 메틸기의 특정 효과는 히스톤 데메틸라제에 의해 메틸기가 제거되거나, 변경된 히스톤이 뉴클레오좀 전환을 통해 대체될 때까지 지속된다. 유사한 방식으로, 다른 효소 부류들이 DNA 및 히스톤을 다른 화학종들과 조합시킬 수 있으며, 다른 효소들은 이들 종을 제거하여 유전자 발현의 일시적 제어를 제공할 수 있다.

전사 조절뒤 생화학 시스템의 조직화된 집단은 세포 증식 및 분화가 최적으로 진행되도록 엄격하게 제어되어야 한다. 이러한 조절이 DNA 및 히스톤 변경에 관여하는 효소의 이상 발현 및/또는 활성으로 붕괴되면 질환 상태가 초래된다. 인간암에서, 예를 들어, 후생적 효소 활성의 실조가 세포 이동 및 침습 증가와 같은 다른 암-관련 표현형뿐만 아니라 제어되지 않는 암과 관련된 세포 증식에 기여한다는 것을 제안하는 증거가 점점 더 확실해지고 있다.

크로모좀 11q23 상에 혼합 계통 백혈병(MLL) 유전자의 재배열은 예후가 좋지 않은 공격성 백혈병과 연관이 된다. MLL이 전위되면 히스톤 H3(H3K79)의 라이신 79를 크로마틴으로 메틸화하여 이소성(ectopic) H3K79 메틸화에 이르는 히스톤 메틸전달효소인 DOT1L이 이상 동원되고, 백혈병유발에 연루되는 유전자 발현이 증가하게 된다. 유아 백혈병의 70%가 넘고 성인 급성 골수성 백혈병(AML)의 약 10% 정도인 것으로 발견된 이러한 재배열은 히스톤 H3(H3K4)의 라이신 4를 메틸화하는 SET-도메인을 비롯한 MLL의 C-말단 서열이 AF4, AF9 및 ENL을 포함하여 각종 융합 파트너 유래의 서열로 대체되는 융합 단백질의 발현으로 이어진다. 이들 융합 파트너의 대부분은 DOT1L을 MLL-융합 단백질에 의해 결합된 게놈좌에 직접 또는 간접적으로 동원하는 전사 연장 복합체 성분이다. 그 결과 H3K79 메틸화가 증대되고, 백혈병 발병기전에 중심이 되는 MLL-융합 표적 유전자, 예컨대 HOXA9 및 MEIS1의 mRNA 발현이 증가한다.

따라서, 잘못 표적화된 DOT1L 효소 활성이 MLL 환자의 질환 추진 요인으로 제안되고 있지만, 특정 DOT1L 메틸전달효소 저해제의 부재하에서 이러한 가설은 모델 시스템에서 직접 다루어지지 않았다.

암 외에도, 대사 질환(예컨대 당뇨), 염증성 질환(예컨대 크론병), 신경변성 질환(예컨대 알츠하이머병) 및 심혈관 질환을 비롯한 다수의 다른 인간 질환에서 후생적 효소의 역할이 점점 더 확실해지고 있다. 따라서 후생적 효소의 이상 작용의 선택적 조절은 광범위 질환의 치료 전망을 밝게 한다.

발명의 개요

본 발명의 일 측면은 히스톤 메틸전달효소 DOT1L의 활성을 선택적으로 조절하는 화합물에 관한 것이다. 예를 들어, 본 발명의 일 측면은 하기 화학식 I의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 수화물, 거울상이성체 또는 입체이성체에 관한 것이다:

상기 식에서, 각각의 경우 독립적으로

X는

또는

이고;

R¹은 수소, 알킬, 사이클로알킬, 알킬사이클로알킬, 알킬아릴, 할로알킬, 포르밀, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴알킬,

이거나; 또는

로 치환된 (C₂-C₄)알킬이나, 단 X가

이면, R¹은

가 아니고;

R¹⁰은 수소 또는 알킬이며;

R^11a는 수소, 알킬, 또는 알킬-사이클로알킬이고;

R^11b는 수소 또는 알킬이거나; 또는 R^11a 및 이것이 결합된 질소와 함께, 0 또는 1개의 추가의 헤테로원자를 포함하는 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴을 형성하며;

R¹³은 수소, 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 헤테로아르알킬 또는 실릴이고;

R¹⁴는 수소, 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬 또는 헤테로아르알킬이며;

R¹⁵는 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고;

R²⁰은 수소, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이며;

A는

또는

이고;

R²는

이며;

Y는 -NH-, -N(알킬)-, -0-, 또는 -CR⁶ ₂-이고;

R^22a는 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 융합된 바이사이클릴, 바이아릴, 아릴옥시아릴, 헤테로아릴옥시아릴, 아릴옥시헤테로아릴 또는 헤테로아릴옥시헤테로아릴이며;

R^22b는 수소 또는 알킬이고;

R²⁴는 수소 또는 알킬이며;

R^25a, R^25b, R^25c 및 R^25d는 독립적으로 -M₂-T₂이고, 여기에서 M₂는 결합, S0₂, SO, S, CO, C0₂, O, 0-C₁-C₄ 알킬 링커(linker), C₁-C₄ 알킬 링커, NH, 또는 N(R_t)이고, R_t는 C₁-C₆ 알킬이며, T₂는 H, 할로, 또는 R_S4이고, R_S4는 C₁-C₆ 알킬, C₂-C₆ 알케닐, C₂-C₆ 알키닐, C₃-C₈ 사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 4 내지 8-원 헤테로사이클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴이며, 여기에서 0-C₁-C₄ 알킬 링커, C₁-C₄ 알킬 링커, R_t 및 R_S4는 각각 할로, 하이드록실, 카르복실, 시아노, C₁-C₆ 알킬, C₂-C₆ 알케닐, C₂-C₆ 알키닐, C₁-C₆ 알콕실, 아미노, 모노-C₁-C₆ 알킬아미노, 디-C₁-C₆ 알킬아미노, C₃-C₈ 사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 4 내지 6-원 헤테로사이클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 임의로 치환되고;

R³은 수소, 할로겐, 하이드록시, 알킬옥시, 아르알킬옥시, 알킬카르보닐옥시 또는 실릴옥시이며;

R⁴는 수소, 할로겐, 하이드록시, 알킬옥시, 아르알킬옥시, 알킬카르보닐옥시 또는 실릴옥시이고;

R⁴¹은 수소, 알킬 또는 알키닐이며;

Z는 수소 또는

이고;

R^5a는 수소, 알킬, 할로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 바이아릴, 알케닐알킬, 알키닐알킬, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐아미노알킬, 아릴카르보닐아미노알킬, 아르알킬카르보닐아미노알킬, 아릴술포닐아미노알킬, 알킬티오알킬, 아르알킬티오알킬 또는 헤테로아르알킬티오알킬; 또는 하이드록시, 할로, 카르복시, 알킬옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 니트로, 아미노, 아미도, 아릴 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 치환된 알킬이며;

R^5b는 수소, 알킬, 할로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 바이아릴, 알케닐알킬, 알키닐알킬, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐아미노알킬, 아릴카르보닐아미노알킬, 아르알킬카르보닐아미노알킬, 아릴술포닐아미노알킬, 알킬티오알킬, 아르알킬티오알킬 또는 헤테로아르알킬티오알킬; 또는 하이드록시, 할로, 카르복시, 알킬옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 니트로, 아미노, 아미도, 아릴 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 치환된 알킬이거나; 또는 R^5a 및 이것이 결합된 질소와 함께, 0 또는 1개의 추가의 헤테로원자를 포함하는 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴을 형성하며;

R⁶은 수소, 알킬 또는 할로이거나; 또는 두 제미널(geminal) R⁶은 함께 취해져 에틸렌, 프로필렌 또는 부틸렌이고;

R^7a는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이며;

R^7b는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이고;

R^7c는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이다.

본 발명의 다른 측면은 본 발명의 화합물(예를 들면, 화학식 I의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 수화물, 거울상이성체 또는 입체이성체), 및 하나 이상의 약학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 약학 조성물은 또한 제2의 치료제를 포함할 수 있다. 이러한 본 발명의 약학 조성물은 본 발명의 방법에 따라 투여될 수 있다(예를 들어, 암 및/또는 신경변성 장애와 관련된 병태 및 장애의 치료 또는 예방용 치료 요법제의 일부로서). 일 실시양태로, 본 발명은 치료적 유효량의 화합물 또는 조성물을 포함하는 포장 약품에 관한 것이다. 일 실시양태로, 본 발명은 예방적 유효량의 화합물 또는 조성물을 포함하는 포장 약품에 관한 것이다.

본 발명의 다른 측면은 치료적 유효량의 본 발명의 화합물을 이를 필요로 하는 대상에 투여하는 것을 포함하는, DOT1-매개 단백질 메틸화가 역할을 하는 장애의 치료 또는 예방 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 DOT1의 활성으로 야기되거나 촉진될 수 있는 임의의 병태를 개선하기 위해 사용될 수 있다.

본 발명의 다른 측면은 세포를 본 발명의 화합물과 접촉시키거나 대상에 본 발명의 화합물을 제공하는 단계를 포함하는, 세포에서 DOT1L 활성 수준을 저해 또는 감소하는 방법에 관한 것이다.

본 발명의 다른 측면은 세포를 본 발명의 화합물과 접촉시키거나 대상에 본 발명의 화합물을 제공하는 단계를 포함하는, 세포에서 히스톤 H3 라이신 잔기 79 (H3K79) 메틸화 수준을 저해 또는 감소하는 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 H3K79 메틸화를 통한 DOT1의 활성으로 야기되거나 촉진될 수 있는 임의의 병태를 개선하기 위해 사용될 수 있다.

본 발명의 다른 측면은 DOT1 메틸화가 역할을 하는 특정 장애, 예를 들어, 암 또는 신경계 장애의 치료 또는 예방 방법에 관한 것이다. 상기 방법은 치료적 유효량의 본 발명의 화합물 또는 약학 조성물을 이를 필요로 하는 대상에 투여하는 것을 포함한다.

도 1은 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 일반적 경로를 나타낸다.
도 2는 본 발명의 화합물을 제조하기 위한 일반적 경로를 나타낸다.
도 3은 화합물 8 및 그의 하이드로클로라이드 염 9를 제공하기 위한 경로를 나타낸다.
도 4는 화합물 16 및 그의 하이드로클로라이드 염 17을 제공하기 위한 경로를 나타낸다.
도 5는 화합물 16에 의한 인간 히스톤 메틸전달효소(HMT)의 저해(IC₅₀ 값)를 표로 나타낸 것이다.
도 6은 다양한 세포 타입에서 화합물 16에 의한 세포 증식의 농도-의존성 저해를 표로 나타낸 것이다.
도 7은 화합물 20을 제공하기 위한 경로를 나타낸다.
도 8은 화합물 21을 제공하기 위한 경로를 나타낸다.

상세한 설명

기본 분자생물학

크로마틴 구조는 유전자 조절 및 후생적 유전에 중요하다. 히스톤의 번역후 변경은 고차 크로마틴 구조의 확립 및 유지에 연루되며; 예를 들어, 특정 코어 히스톤의 후부는 아세틸화, 메틸화, 포스포릴화, 리보실화 및 유비퀴틴화에 의해서 변경된다.

본 발명의 일 측면은 생체내에서 히스톤 H3의 라이신 79("H3K79")를 메틸화하는 것으로 알려진 효소인 히스톤 메틸전달효소 DOT1L의 활성을 선택적으로 조절하는 화합물에 관한 것이다(Feng et al. (2002) Curr. Biol. 12:1052-1058). 다른 HMTase와 유사하게, DOT1L은 S-아데노실메티오닌(SAM) 결합 부위를 함유하고, 메틸 공여체로서 SAM을 이용한다. 그러나, 보고된 다른 HMTase와 달리, DOT1 폴리펩티드는 SET 도메인을 함유하지 않는다.

DOT1L 핵산 및 폴리펩티드는 이미 개시되었다(참조예: 미국 특허출원 공개번호 제2005-0048634 A1호(참고로 원용됨); Feng et al. (2002) Curr. Biol. 12:1052-1058; 및 Okada et al. (2005) Cell 121:167-78). DOT1의 효모 상동체는 텔로머 침묵(Telomeric silencing) 파괴제로서 최초로 동정되었다(효모 DOT1의 단백질 및 핵산 서열은 그의 전체가 본 원에 참고로 원용되는 유전자은행 등록번호 NP010728에서 확인할 수 있다). 인간 DOT1 상동체가 클로닝되고, 분리되어 hDOT1L(인간 DOT1-유사 단백질)로서 지정되었다. 인간 핵산 및 단백질의 서열은 그의 전체가 본 원에 참고로 원용되는 유전자은행 등록번호 AF509504하에 기탁되었다. hDOT1L의 불과 약 360개 N-말단 아미노산만이 효모 DOT1과 상당한 서열 유사성을 공유한다. 또한, C. elegans(유전자은행 등록번호 NP510056 및 CAA90610), 초파리(유전자은행 등록번호 CG10272 및 AAF54122), 마우스(유전자은행 등록번호 XP125730), 아노펠레스 감비애(Anopheles gambiae)(유전자은행 등록번호 EAA03558) 및 뉴로스포라 크라사(Neurospora crassa)(유전자은행 등록번호 EAA33634) 유래 DOT1 상동체는 공용 데이터베이스(그의 개시는 전체가 본 원에 참고로 원용된다)에서 입수가능하다. 이들 상동체중에서 SAM 결합 도메인이 보존된다(약 30-100% 아미노산 서열 동일성 및 50-100% 아미노산 유사성). 본 발명의 다양한 측면은 임의의 DOT1L 폴리펩티드 또는 핵산으로 실시될 수 있다.

촉매적 도메인(아미노산 1-416)을 함유하는 hDOT1L 단백질 단편의 2.5 옹스트롬 분해 구조가 풀렸고; hDOT1L의 아미노산 1-416에 대한 원자 좌표가 결정되어RCSB 데이터베이스에 ID 코드 1NW3 하에 실렸으며, 과학문헌에 게재되었다(참조: Min, et al. (2003) Cell 112:711-723)(이들은 모두 그의 전체내용이 본 원에 참고로 원용된다).

최근에 hDOT1L이 MLL-AF10-매개 백혈병유발에서 중요한 역할을 한다는 것이 입증되었다(Okada et al. (2005) Cell 121:167-78). hDOT1L이 MLL-AF10에 의해 Hoxa9 유전자로 잘못 표적화되면 백혈병 전환에 기여하는 H3K79 메틸화 및 Hoxa9 상향조절에 이른다는 것이 또한 밝혀졌다(Okada et al. (2005) Cell 121 : 167-78). hDOT1L 및 MLL-AF10의 상호작용은 MLL-AF10-매개 백혈병 전환에 필요한 AF10의 OM-LZ(옥타펩티드 모티브-류신 지퍼) 영역을 포함한다는 것이 또한 입증되었다(DiMartino et al. (2002) Blood 99:3780-5). CALM-AF10 융합이 시험관내 및 생체내에서 백혈병유발을 매개하는데 필요하고 이에 충분한 것같이 보이고; hDOT1L 및 그의 H3K79 메틸전달효소 활성이 CALM-AF10-매개 백혈병 전환에 연루되며; Hoxa5 유전자가 CALM-AF10-매개 전환에 관여하는 것으로 추가로 판명되었다(그의 전체가 본 원에 참고로 원용되는 미국 특허 출원 공개번호 제2009-0061443 A1호). 비조절성 유전자 발현으로 이어지는 DOT1L의 이상 동원은 많은 다른 종양발생 MLL-융합 단백질의 공통적인 특징일 수 있다. 예를 들어, MLL 융합 파트너 ENL, AF4 및 AF9가 보통 DOT1L과의 핵 복합체에서 발견되며(Bitoun et al. (2007) Hum. Mol. Genet. 16:92-106, Mueller et al. (2007) Blood 110:4445-54, Zhang et al. (2006) J. Biol. Chem. 281:18059-68), 변경된 H3K79 메틸화 프로파일은 뮤린 및 인간 MLL-AF4 백혈병의 한 특징이다(Krivstov et al. (2008) Cancer Cell 14:355-368).

화합물

본 발명의 일 측면은 하기 화학식 I의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 수화물, 거울상이성체 또는 입체이성체에 관한 것이다:

상기 식에서, 각각의 경우 독립적으로

X는

또는

이고;

R¹은 수소, 알킬, 사이클로알킬, 알킬사이클로알킬, 알킬아릴, 할로알킬, 포르밀, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴알킬,

이거나; 또는

로 치환된 (C₂-C₄)알킬이나, 단 X가

이면, R¹은

가 아니고;

R¹⁰은 수소 또는 알킬이며;

R^11a는 수소, 알킬, 또는 알킬-사이클로알킬이고;

R^11b는 수소 또는 알킬이거나; 또는 R^11a 및 이것이 결합된 질소와 함께, 0 또는 1개의 추가의 헤테로원자를 포함하는 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴을 형성하며;

R¹³은 수소, 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 헤테로아르알킬 또는 실릴이고;

R¹⁴는 수소, 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬 또는 헤테로아르알킬이며;

R¹⁵는 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고;

R²⁰은 수소, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이며;

A는

또는

이고;

R²는

이며;

Y는 -NH-, -N(알킬)-, -0-, 또는 -CR⁶ ₂-이고;

R^22a는 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 융합된 바이사이클릴, 바이아릴, 아릴옥시아릴, 헤테로아릴옥시아릴, 아릴옥시헤테로아릴 또는 헤테로아릴옥시헤테로아릴이며;

R^22b는 수소 또는 알킬이고;

R²⁴는 수소 또는 알킬이며;

R^25a, R^25b, R^25c 및 R^25d는 독립적으로 -M₂-T₂이고, 여기에서 M₂는 결합, S0₂, SO, S, CO, C0₂, O, 0-C₁-C₄ 알킬 링커, C₁-C₄ 알킬 링커, NH, 또는 N(R_t)이고, R_t는 C₁-C₆ 알킬이며, T₂는 H, 할로, 또는 R_S4이고, R_S4는 C₁-C₆ 알킬, C₂-C₆ 알케닐, C₂-C₆ 알키닐, C₃-C₈ 사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 4 내지 8-원 헤테로사이클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴이며, 여기에서 0-C₁-C₄ 알킬 링커, C₁-C₄ 알킬 링커, R_t 및 R_S4는 각각 할로, 하이드록실, 카르복실, 시아노, C₁-C₆ 알킬, C₂-C₆ 알케닐, C₂-C₆ 알키닐, C₁-C₆ 알콕실, 아미노, 모노-C₁-C₆ 알킬아미노, 디-C₁-C₆ 알킬아미노, C₃-C₈ 사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 4 내지 6-원 헤테로사이클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 임의로 치환되고;

R³은 수소, 할로겐, 하이드록시, 알킬옥시, 아르알킬옥시, 알킬카르보닐옥시 또는 실릴옥시이며;

R⁴는 수소, 할로겐, 하이드록시, 알킬옥시, 아르알킬옥시, 알킬카르보닐옥시 또는 실릴옥시이고;

R⁴¹은 수소, 알킬 또는 알키닐이며;

Z는 수소 또는

이고;

R^5a는 수소, 알킬, 할로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 바이아릴, 알케닐알킬, 알키닐알킬, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐아미노알킬, 아릴카르보닐아미노알킬, 아르알킬카르보닐아미노알킬, 아릴술포닐아미노알킬, 알킬티오알킬, 아르알킬티오알킬 또는 헤테로아르알킬티오알킬; 또는 하이드록시, 할로, 카르복시, 알킬옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 니트로, 아미노, 아미도, 아릴 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 치환된 알킬이며;

R^5b는 수소, 알킬, 할로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 바이아릴, 알케닐알킬, 알키닐알킬, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐아미노알킬, 아릴카르보닐아미노알킬, 아르알킬카르보닐아미노알킬, 아릴술포닐아미노알킬, 알킬티오알킬, 아르알킬티오알킬 또는 헤테로아르알킬티오알킬; 또는 하이드록시, 할로, 카르복시, 알킬옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 니트로, 아미노, 아미도, 아릴 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 치환된 알킬이거나; 또는 R^5a 및 이것이 결합된 질소와 함께, 0 또는 1개의 추가의 헤테로원자를 포함하는 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴을 형성하며;

R⁶은 수소, 알킬 또는 할로이거나; 또는 두 제미널 R⁶은 함께 취해져 에틸렌, 프로필렌 또는 부틸렌이고;

R^7a는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이며;

R^7b는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이고;

R^7c는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은

X가

인

상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 X가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 X가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 X가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은

X가

인

상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 X가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 X가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R²가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R²가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R²⁴가 수소 또는 알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R²⁴가 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^25a가 수소, 알킬, -O-알킬, 할로겐, 트리플루오로알킬, -O-트리플루오로메틸, 또는 -S0₂-트리플루오로메틸인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^25b가 수소, 알킬, 할로겐, 또는 트리플루오로알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^25c가 수소, 알킬, 또는 할로겐인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^25c가 수소 또는 할로겐인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R²가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Y가 -NH- 또는 -N(알킬)-인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Y가 -NH-인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Y가 -N(CH₃)-인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Y가 -0-인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Y가 -CH₂-인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^22a가 아릴 또는 아르알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^22a가 치환된 페닐 또는 치환된 벤질인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^22a가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^22a가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^22b가 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^22b가 메틸인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 -CH₃, -CH₂CH₃, -CH₂CH(CH₃)₂ 또는 -CH₂CH₂CH(CH₃)₂인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 C₃-C₇ 사이클로알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 사이클로프로필, 사이클로프로필메틸, 2-사이클로프로필에틸, 사이클로부틸, 사이클로부틸메틸, 2-사이클로부틸에틸, 사이클로펜틸, 사이클로펜틸메틸, 또는 2-사이클로펜틸에틸인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 -CH₂CF₃인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 -CH₂Ph인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 -C(=0)H인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 -C(=0)CH₃인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 헤테로사이클릴 또는 헤테로사이클릴알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹⁵가 알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹⁵가 사이클로알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹⁵가 사이클로알킬알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이

로 치환된 (C₂-C₄) 알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^11a가 수소, 알킬, 또는 알킬-사이클로알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^11a가 수소, 메틸, 또는 i-프로필인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹³이 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

이고, R⁶이 알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

이고, R⁶이 메틸, 에틸 또는 이소프로필인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 하이드록실인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R⁴가 하이드록실인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R⁴가 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R⁴¹이 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R⁴¹이 메틸인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 하이드록실이고; R⁴가 하이드록실인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 하이드록실이고; R⁴가 하이드록실이고; R⁴¹은 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 하이드록실이고; R⁴가 하이드록실이고; R⁴¹은 메틸인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 수소이고; R⁴는 하이드록실인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 수소이고; R⁴가 하이드록실이고; R⁴¹은 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 수소이고; R⁴가 하이드록실이고; R⁴¹은 메틸인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 하이드록실이고; R⁴는 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 하이드록실이고; R⁴가 수소이고; R⁴¹은 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 하이드록실이고; R⁴가 수소이고; R⁴¹은 메틸인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Z가 수소 또는

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Z가 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서 본 발명은 Z가

인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5a가 수소, 알킬, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 또는 헤테로아르알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5a가 수소, 아르알킬옥시알킬, 알킬, 아릴, 아르알킬, 아미노알킬 또는 하이드로알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5a가 -H, -CH₂CH₂OCH₂Ph, -CH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -Ph, -CH₂CH(CH₃), -CH₃, -CH₂Ph, -CH₂CH₂NH₂, -CH₂(사이클로헥실) 또는 -CH₂CH₂OH인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5b가 수소, 알킬, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 또는 헤테로아르알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5b가 수소, 아르알킬옥시알킬, 알킬, 아릴, 아르알킬, 아미노알킬 또는 하이드로알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5b가 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5a가 -H, -CH₂CH₂OCH₂Ph, -CH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -Ph, -CH₂CH(CH₃), -CH₃, -CH₂Ph, -CH₂CH₂NH₂, -CH₂(사이클로헥실) 또는 -CH₂CH₂OH이고; R^5b는 -H인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^7a가 수소 또는 저급 알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^7a가 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^7b가 수소 또는 저급 알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^7b가 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^7c가 수소 또는 저급 알킬인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^7c가 수소인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

본 발명의 일 측면은

로 구성된 군에서 선택되는 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 수화물, 거울상이성체 또는 입체이성체에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 약 10 μM 미만의 IC₅₀으로 DOT1L을 저해하는 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 약 5 μM 미만의 IC₅₀으로 DOT1L을 저해하는 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 약 1 μM 미만의 IC₅₀으로 DOT1L을 저해하는 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 약 750 nM 미만의 IC₅₀으로 DOT1L을 저해하는 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 약 500 nM 미만의 IC₅₀으로 DOT1L을 저해하는 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 약 250 nM 미만의 IC₅₀으로 DOT1L을 저해하는 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 약 100 nM 미만의 IC₅₀으로 DOT1L을 저해하는 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L의 선택적 저해제인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L 및 EZH2를 모두 저해하고; DOT1L IC₅₀이 약 0.001 μM 내지 약 10 μM이고; EZH2 IC₅₀ 대 DOT1L IC₅₀의 비가 약 10 내지 약 50인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L 및 EZH2를 모두 저해하고; DOT1L IC₅₀이 약 0.001 μM 내지 약 10 μM이고; EZH2 IC₅₀ 대 DOT1L IC₅₀의 비가 약 50 내지 약 100인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L 및 EZH2를 모두 저해하고; DOT1L IC₅₀이 약 0.001 μM 내지 약 10 μM이고; EZH2 IC₅₀ 대 DOT1L IC₅₀의 비가 약 100 내지 1,000인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L 및 EHMT2를 모두 저해하고; DOT1L IC₅₀이 약 0.001 μM 내지 약 10 μM이고; EHMT2 IC₅₀ 대 DOT1L IC₅₀의 비가 약 10 내지 약 50인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L 및 EHMT2를 모두 저해하고; DOT1L IC₅₀이 약 0.001 μM 내지 약 10 μM이고; EHMT2 IC₅₀ 대 DOT1L IC₅₀의 비가 약 50 내지 약 100인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L 및 EHMT2를 모두 저해하고; DOT1L IC₅₀이 약 0.001 μM 내지 약 10 μM이고; EHMT2 IC₅₀ 대 DOT1L IC₅₀의 비가 약 100 내지 1,000인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L 및 CARM1을 모두 저해하고; DOT1L IC₅₀이 약 0.001 μM 내지 약 10 μM이고; CARM1 IC₅₀ 대 DOT1L IC₅₀의 비가 약 10 내지 약 50인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L 및 CARM1을 모두 저해하고; DOT1L IC₅₀이 약 0.001 μM 내지 약 10 μM이고; CARM1 IC₅₀ 대 DOT1L IC₅₀의 비가 약 50 내지 약 100인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L 및 CARM1을 모두 저해하고; DOT1L IC₅₀이 약 0.001 μM 내지 약 10 μM이고; CARM1 IC₅₀ 대 DOT1L IC₅₀의 비가 약 100 내지 1,000인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L 및 PRMT5를 모두 저해하고; DOT1L IC₅₀이 약 0.001 μM 내지 약 10 μM이고; PRMT5 IC₅₀ 대 DOT1L IC₅₀의 비가 약 10 내지 약 50인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L 및 PRMT5를 모두 저해하고; DOT1L IC₅₀이 약 0.001 μM 내지 약 10 μM이고; PRMT5 IC₅₀ 대 DOT1L IC₅₀의 비가 약 50 내지 약 100인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 본 발명은 DOT1L 및 PRMT5를 모두 저해하고; DOT1L IC₅₀이 약 0.001 μM 내지 약 10 μM이고; PRMT5 IC₅₀ 대 DOT1L IC₅₀의 비가 약 100 내지 1,000인 상기 언급된 화합물중 어느 한 화합물에 관한 것이다.

본 발명의 화합물의 다수가 약학적으로 상용성인 반대이온과의 염(즉, 약학적으로 허용가능한 염)으로서 제공될 수 있다. "약학적으로 허용가능한 염"은 수용체에 투여시 본 발명의 화합물 또는 본 발명의 화합물의 프로드럭을 직접 또는 간접적으로 제공할 수 있는 임의의 비독성 염을 의미한다. "약학적으로 허용가능한 반대이온"은 대상에 투여시 염으로부터 방출되는 경우에 독성적이지 않은 염의 이온성 부분이다. 약학적으로 상용성인 염은 염산, 황산, 아세트산, 락트산, 타르타르산, 말산 및 숙신산을 예로 들 수 있으나 이들에만 한정되지 않는 많은 산과 함께 형성될 수 있다. 염은 그의 유리 아민 유리 염기 형태보다 물 또는 다른 프로톤성 용매에 더 잘 용해되는 경향을 보인다. 본 발명은 이러한 염을 포함한다.

약학적으로 허용가능한 산부가염은 염산 및 하이드로브롬산과 같은 광산과 형성된 것, 및 또한 말레산과 같은 유기산과 형성된 것을 포함한다. 예를 들어, 약학적으로 허용가능한 염을 형성하기 위해 보통 사용되는 산은 무기산, 예컨대 이황화수소산, 염산, 하이드로브롬산, 하이드로요오드화산, 황산 및 인산, 및 유기산, 예컨대 파라-톨루엔술폰산, 살리실산, 타르타르산, 바이타르타르산, 아스코르브산, 말레산, 베실산, 푸마르산, 글루콘산, 글루쿠론산, 포름산, 글루탐산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 벤젠술폰산, 락트산, 옥살산, 파라-브로모페닐술폰산, 카르본산, 숙신산, 시트르산, 벤조산 및 아세트산, 및 관련 무기 및 유기산을 포함한다. 따라서, 약학적으로 허용가능한 염은 술페이트, 피로술페이트, 바이술페이트, 술파이트, 바이술파이트, 포스페이트, 모노하이드로젠포스페이트, 다이하이드로젠포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포르메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 숙시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말레에이트, 부티렌-1,4-디오에이트, 헥신-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 술포네이트, 크실렌술포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레에이트, 타르트레이트, 메탄술포네이트, 프로판술포네이트, 나프탈렌-1-술포네이트, 나프탈렌-2-술포네이트, 만델레이트 등을 포함한다.

산성 작용기를 갖는 약학적으로 허용가능한 염을 형성하기에 적합한 염기는 나트륨, 칼륨 및 리튬과 같은 알칼리 금속의 수산화물; 칼슘 및 마그네슘과 같은 알칼리 토금속의 수산화물; 기타 금속, 예컨대 알루미늄 및 아연의 수산화물; 암모니아, 및 유기 아민, 예컨대 비치환 또는 하이드록시-치환된 모노-, 디-, 또는 트리알킬 아민; 디사이클로헥실아민; 트리부틸 아민; 피리딘; N-메틸,N-에틸아민; 디에틸아민; 트리에틸아민; 모노-, 비스-, 또는 트리스-(2-하이드록시-저급 알킬 아민), 예컨대 모노-, 비스-, 또는 트리스-(2-하이드록시에틸)아민, 2-하이드록시-tert-부틸아민, 또는 트리스-(하이드록시메틸)메틸아민, N,N-디알킬-N-(하이드록시 알킬)아민, 예컨대 N,N-디메틸-N-(2-하이드록시에틸)아민, 또는 트리-(2-하이드록시에틸)아민; N-메틸-D-글루카민; 및 아미노산, 예컨대 아르기닌 라이신 등을 포함하나, 이들에만 한정되지는 않는다.

본 발명의 특정 화합물 및 그의 염은 복수 결정형(즉, 다형체)으로 존재할 수 있으며; 본 발명은 각각의 결정형 및 그의 혼합물을 포함한다.

본 발명의 특정 화합물은 하나 이상의 키랄 중심을 가질 수 있고, 상이한 광학적 활성 형태로 존재할 수 있다. 본 발명의 화합물이 하나의 키랄 중심을 가지는 경우, 화합물은 두 거울상이성체 형태로 존재할 수 있으며, 본 발명은 거울상이성체 및 거울상이성체의 혼합물, 예컨대 그의 라세미 혼합물 모두를 포함한다. 거울상이성체는 당업자들에게 공지된 방법으로 분할할 수 있으며; 예컨대, 거울상이성체는 예를 들어, 결정화로 분리될 수 있는 부분입체이성체 염의 형성; 예를 들어, 결정화, 기체-액체 또는 액체 크로마토그래피로 분리될 수 있는 부분입체이성체 유도체 또는 복합체의 형성; 예를 들어, 효소 에스테르화를 통한 하나의 거울상이성체와 거울상이성체-특정 시약의 선택적 반응; 또는 키랄 환경에서, 예를 들어, 키랄 지지체상에서 기체-액체 또는 액체 크로마토그래피로 분할할 수 있으며; 적합한 것으로는 키랄 지지체(예를 들면, 결합된 키랄 리간드를 갖는 실리카) 또는 키랄 용매의 존재하를 들 수 있다. 목적하는 거울상이성체를 상술된 분리 방법중 하나로 다른 화학 물체로 전환하는 경우, 목적하는 정제된 거울상이성체를 방출하기 위한 추가 단계가 이용될 수 있다. 별법으로, 광학적 활성 시약, 기질, 촉매 또는 용매를 사용한 비대칭 합성에 의해, 또는 거울상이성체를 비대칭 변환에 의해 다른 것으로 전환시킴으로서 특정 거울상이성체를 합성할 수도 있다.

본 발명의 화합물이 복수개의 키랄 중심을 갖는 경우, 이는 부분입체이성체 형태로 존재할 수 있다. 부분입체이성체 화합물은 당업자들에게 공지된 방법(예를 들어, 크로마토그래피 또는 결정화로 분리할 수 있고, 개별적인 거울상이성체는 상술된 바와 같이 분리할 수 있다. 본 발명은 본 발명의 화합물의 다양한 부분입체이성체, 및 그의 혼합물을 포함한다. 본 발명의 화합물은 상이한 호변이성체 또는 상이한 기하 이성체로 존재할 수 있으며, 본 발명은 본 발명의 화합물의 각각의 호변이성체 및/또는 기하 이성체, 및 그의 혼합물을 포함한다. 본 발명의 화합물은 즈비터이온 형태로 존재할 수 있다. 본 발명은 본 발명의 화합물의 각 즈비터이온 형태, 및 그의 혼합물을 포함한다.

본 원에 사용된 용어 "프로드럭"은 일부 생리 화학 과정에 의해 생체내에서모 약물로 전환되는 약제를 가리킨다(예를 들어, 프로드럭은 생리 pH에서 목적하는 약물 형태로 전환된다). 프로드럭은 일부 상황에서, 모 약물보다 투여가 용이할 수 있기 때문에, 유용한 경우가 빈번하다. 이들은, 예를 들어 경구 투여로 생체이용가능할 수 있으나, 모 약물은 그렇치 않다. 프로드럭은 또한 모 약물에 비해 약리 조성물에서 향상된 용해도를 가질 수 있다. 프로드럭의 일례는, 제한없이, 세포막을 통한 전달을 용이하게 하기 위해 에스테르("프로드럭")로서 투여되는 본 발명의 화합물일 수 있는데, 여기에서는 수용해도 혜택이 없으나, 일단 세포안으로 유입되면 카르복실로 대사적으로 가수분해되어 수용해도가 유리해진다. 프로드럭은 유용한 성질을 가질 수 있다. 예를 들어, 프로드럭은 최종 약물 보다 물에 더 잘 용해될 수 있어서 약물의 정맥내 투여를 용이하게 할 수 있다. 프로드럭은 또한 최종 약물 보다 경구 생체이용성 수준이 높을 수 있다. 투여 후, 프로드럭은 효소적으로 또는 화학적으로 절단되어 최종 약물을 혈액 또는 조직으로 전달한다.

예시적인 프로드럭은 아민 또는 알코올의 자유 수소가 (C₁-C₆)알카노일옥시메틸, 1-((C₁-C₆)알카노일옥시)에틸, 1-메틸-1-((C₁-C₆)알카노일옥시)에틸, (C₁-C₆)알콕시카르보닐옥시메틸, N-(C₁-C₆)알콕시카르보닐아미노메틸, 숙시노일, (C₁-C₆)알카노일, α-아미노(C₁-C₄)알카노일, 아릴아세틸 및 α-아미노아실, 또는 α-아미노아실-α-아미노아실[여기에서, α-아미노아실 부분은 독립적으로 단백질에서 발견되는 임의의 천연 L-아미노산이다], -P(0)(OH)₂, -P(0)(0(C₁-C₆)알킬)₂ 또는 글리코실(탄수화물의 헤미아세탈의 하이드록실 분리로 발생하는 라디칼)로 대체된 본 발명의 화합물의 아민을 방출한다.

다른 예시적인 프로드럭은 절단시 상응하는 유리 산을 방출하고, 이러한 본 발명의 화합물의 가수분해성 에스테르-형성 잔기는 카르복실산 치환기(예를 들면, -(CH₂)C(0)OH 또는 카르복실산을 함유하는 부분)[여기서, 자유 수소는 (C₁-C₄)알킬, (C₂-C₁₂)알카노일옥시메틸, (C₄-C₉)1-(알카노일옥시)에틸, 5 내지 10개의 탄소 원자를 가지는 1-메틸-1-(알카노일옥시)에틸, 3 내지 6개의 탄소 원자를 가지는 알콕시카르보닐옥시메틸, 4 내지 7개의 탄소 원자를 가지는 1-(알콕시카르보닐옥시)에틸, 5 내지 8개의 탄소 원자를 가지는 1-메틸-1-(알콕시카르보닐옥시)에틸, 3 내지 9개의 탄소 원자를 가지는 N-(알콕시카르보닐)아미노메틸, 4 내지 10개의 탄소 원자를 가지는 1-(N-(알콕시카르보닐)아미노)에틸, 3-프탈리딜, 4-크로토노락토닐, 감마-부티로락톤-4-일, 디-N,N-(C₁-C₂)알킬아미노(C₂-C₃)알킬(예컨대 β-디메틸아미노에틸), 카르바모일-(C₁-C₂)알킬, N,N-디(C₁-C₂)-알킬카르바모일-(C₁-C₂)알킬 및 피페리디노-, 피롤리디노- 또는 모르폴리노(C₂-C₃)알킬로 대체된다]를 포함하나, 이들로만 한정되지는 않는다.

일반적인 합성 방식

이하에 도 1 및 2에 나타낸 일반적인 합성 방법을 설명한다. 달리 언급이 없으면, 하기에 제시된 특정 조건 및 시약의 어떤 것도 본 발명의 범위를 한정하는 것으로 해석되어서는 안되고, 단지 설명만을 목적으로 하는 것이다. 모든 일반적인 방법은 성공적으로 수행되었으며, 각각의 일반적인 방법의 구체예도 또한 제공된다.

도 1은 화학식 viii의 화합물을 제조하기 위한 일반적인 경로를 나타내며, 여기에서 R^11a는 청구범위에 정의된 바와 같다. vi의 vii로의 전환은 용매, 예컨대 디메틸포름아미드중에서 적절한 이소시아네이트로 처리함으로써 수행된다. 생성된 우레아 vii을 프로톤산, 예컨대 트리플루오로아세트산으로 물의 존재하에 처리하면화학식 viii의 화합물이 생성될 것이다.

도 2는 화학식 xiii의 화합물을 제조하기 위한 일반적인 경로를 나타내며, 여기에서 R, R', R^11a 및 R^11b는 청구범위에 정의된 바와 같다. ix의 xviii로의 전환은 적절한 용매, 예컨대 에틸 아세테이트중에서 적절한 산화제, 예컨대 IBX로 처리하여 수행될 수 있다. xviii과 x 간의 환원적 아미노화는 적합한 촉매, 예컨대 아세트산, 및 적절한 환원제, 예컨대 소듐 시아노보로하이드라이드를 사용하여 두 시약을 표준 용매, 예컨대 메탄올중에서 결합하여 수행될 수 있다. 방법 F의 조건하에 화학식 xii의 화합물을 처리하게 되면 화학식 xiii의 화합물이 생성될 것이다.

일반적으로, 도 1 및 2에 있는 임의의 화합물을 화학적으로 보호된 형태로 제조, 정제 및/또는 취급하는 것이 편리하거나 바람직할 수 있다. 본 원에 사용된 용어 "화학적으로 보호된 형태"는 하나 이상의 반응성 작용기가 원치않는 화학 반응으로부터 보호되는 화합물(즉, 이들은 보호기로 변경된다)을 가리킨다.

반응성 작용기를 보호함으로써, 다른 비보호 반응성 작용기를 포함하는 반응이 보호기에 영향없이 수행될 수 있으며; 보호기는 보통 후속 단계에서 나머지 분자에 실질적으로 영향을 미치지 않고 제거될 수 있다. 예를 들어, Protective Groups in Organic Synthesis (T. Green and P. Wuts, Wiley, 1991), 및 Protective Groups in Organic Synthesis (T. Green and P. Wuts; 3rd Edition; John Wiley and Sons, 1999) 참조.

예컨대, 하이드록시기는 에테르(-OR) 또는 에스테르(-OC(=0)R), 예를 들어, t-부틸 에테르; 벤질, 벤즈히드릴(디페닐메틸), 또는 트리틸(트리페닐메틸) 에테르; 트리메틸실릴 또는 t-부틸디메틸실릴 에테르; 또는 아세틸 에스테르(-OC(=0)CH₃,-OAc)로서 보호될 수 있다.

예컨대, 알데히드 또는 케톤기는 각각 아세탈 또는 케탈로서 보호될 수 있으며, 여기서 카르보닐기(C(=0))는 예를 들어, 일차 알코올과의 반응으로 디에테르(C(OR)₂)로 전환된다. 알데히드 또는 케톤기는 산의 존재하에 과량의 물을 사용하여 가수분해로 용이하게 재생된다.

예컨대, 아민기는, 예를 들어, 아미드(-NRC(=0)R) 또는 우레탄(-NRC(=0)OR), 예를 들어 메틸 아미드(-NHC(=0)CH₃); 벤질옥시 아미드(-NHC(=0)OCH₂C₆H₅NHCbz); t-부톡시 아미드(-NHC=(=0)OC(CH₃)₃, -NHBoc); 2-바이페닐-2-프로폭시 아미드(-NHC(=0)OC(CH₃)₂C₆H₄C₆H₅NHBoc), 9-플루오레닐메톡시 아미드(-NHFmoc), 6-니트로베라트릴옥시 아미드(-NHNvoc), 2-트리메틸실릴에틸옥시 아미드(-NHTeoc), 2,2,2-트리클로로에틸옥시 아미드(-NHTroc), 알릴옥시 아미드(-NHAlloc), 2-(페닐술포닐)에틸옥시 아미드(-NHPsec); 또는 적합한 경우(예를 들면, 환식 아민), 니트록시드 라디칼로서 보호될 수 있다.

예컨대, 카르복실산기는 에스테르 또는 아미드, 예를 들어, 벤질 에스테르; t-부틸 에스테르; 메틸 에스테르; 또는 메틸 아미드로서 보호될 수 있다.

예컨대, 티올가는 티오에테르(-SR), 예를 들어, 벤질 티오에테르; 또는 아세트아미도메틸 에테르(-SCH₂NHC(=0)CH₃)로서 보호될 수 있다.

예컨대, 벤즈이미다졸기는 SEM 또는 벤질 보호기로서 보호될 수 있다.

"호변이성체"는 평형으로 존재하고 하나의 이성체 형태에서 다른 이성체 형태로 쉽게 전환되는 2 이상의 구조 이성체중 하나이다. 이러한 전환으로 인접 공액 이중 결합의 변환으로 수반되는 수소 원자의 형식적 이동이 일어난다. 호변이성체는 용액중에서 호변이성체 세트의 혼합물로서 존재한다. 호변이성화가 가능한 용액에서, 호변이성체는 화학 평형에 이르게 될 것이다. 정확한 호변이성체의 비는 온도, 용매 및 pH를 비롯한 다수의 요인에 따라 달라진다. 호변이성화로 상호전환이 가능한 호변이성체의 개념은 호변이성으로 불린다. 가능한 다양한 형태의 호변이성중에서 두가지가 일반적으로 발견된다. 케토-에놀 호변이성에서, 전자 및 수소 원자의 동시 이동이 일어난다. 환-사슬 호변이성은 당 사슬 분자내 알데히드기(-CHO)가 동일 분자내 하나의 하이드록시기(-OH)와 반응하여 글루코스에 의해 나타나는 바와 같은 환식(환형) 형태를 제공함으로써 일어난다. 일반적인 호변이성체쌍은 케톤-에놀, 아미드-니트릴, 락탐-락팀, 복소환식 환내(예를 들면 구아닌, 티민 및 사이토신과 같은 핵염기내) 아미드-이미드산 호변이성, 아민-엔아민 및 엔아민-엔아민을 포함한다.

벤즈이미다졸이 또한 호변이성을 나타낸다: 벤즈이미다졸이 4-, 5-, 6- 또는 7-위치에 하나 이상의 치환기를 함유하는 경우, 상이한 이성체 가능성이 발생한다. 예를 들어, 2,5-디메틸-1H-벤조[d]이미다졸은 그의 이성체 2,6-디메틸-1H-벤조[d]이미다졸과 호변이성체화를 통해 평형으로 존재할 수 있다.

본 발명의 화합물이 상이한 호변이성체로서 도시될 수 있음이 이해될 것이다. 화합물이 호변이성체 형태를 가지는 경우, 모든 호변이성체 형태를 본 발명의 범위에 포함시키고자 하며, 특정 화합물에 대해 사용된 특정 명명 규칙은 어떠한 호변이성체 형태도 제외시키고자 하지 않는다.

약학 조성물

하나 이상의 본 발명의 화합물이 자체로 또는 적합한 담체 또는 부형제(들)와 혼합된 약학 조성물로서 본 원에 기술된 바와 같은 질환 또는 병태를 치료하거나 개선하기 위한 용량으로 인간 환자에 투여될 수 있다. 이들 화합물의 혼합물이 또한 단일 혼합물 또는 적합한 제형화된 약학 조성물로서 환자에 투여될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 일 측면은 치료적 유효량의 하기 화학식 I의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 수화물, 거울상이성체 또는 입체이성체; 및 약학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다:

상기 식에서, 각각의 경우 독립적으로

X는

또는

이고;

R¹은 수소, 알킬, 사이클로알킬, 알킬사이클로알킬, 알킬아릴, 할로알킬, 포르밀, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴알킬,

이거나; 또는

로 치환된 (C₂-C₄)알킬이나, 단 X가

이면, R¹은

가 아니고;

R¹⁰은 수소 또는 알킬이며;

R^11a는 수소, 알킬, 또는 알킬-사이클로알킬이고;

R^11b는 수소 또는 알킬이거나; 또는 R^11a 및 이것이 결합된 질소와 함께, 0 또는 1개의 추가의 헤테로원자를 포함하는 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴을 형성하며;

R¹³은 수소, 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 헤테로아르알킬 또는 실릴이고;

R¹⁴는 수소, 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬 또는 헤테로아르알킬이며;

R¹⁵는 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고;

R²⁰은 수소, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이며;

A는

또는

이고;

R²는

이며;

Y는 -NH-, -N(알킬)-, -0-, 또는 -CR⁶ ₂-이고;

R^22a는 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 융합된 바이사이클릴, 바이아릴, 아릴옥시아릴, 헤테로아릴옥시아릴, 아릴옥시헤테로아릴 또는 헤테로아릴옥시헤테로아릴이며;

R^22b는 수소 또는 알킬이고;

R²⁴는 수소 또는 알킬이며;

R^25a, R^25b, R^25c 및 R^25d는 독립적으로 -M₂-T₂이고, 여기에서 M₂는 결합, S0₂, SO, S, CO, C0₂, O, 0-C₁-C₄ 알킬 링커, C₁-C₄ 알킬 링커, NH, 또는 N(R_t)이고, R_t는 C₁-C₆ 알킬이며, T₂는 H, 할로, 또는 R_S4이고, R_S4는 C₁-C₆ 알킬, C₂-C₆ 알케닐, C₂-C₆ 알키닐, C₃-C₈ 사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 4 내지 8-원 헤테로사이클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴이며, 여기에서 0-C₁-C₄ 알킬 링커, C₁-C₄ 알킬 링커, R_t 및 R_S4는 각각 할로, 하이드록실, 카르복실, 시아노, C₁-C₆ 알킬, C₂-C₆ 알케닐, C₂-C₆ 알키닐, C₁-C₆ 알콕실, 아미노, 모노-C₁-C₆ 알킬아미노, 디-C₁-C₆ 알킬아미노, C₃-C₈ 사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 4 내지 6-원 헤테로사이클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 임의로 치환되고;

R³은 수소, 할로겐, 하이드록시, 알킬옥시, 아르알킬옥시, 알킬카르보닐옥시 또는 실릴옥시이며;

R⁴는 수소, 할로겐, 하이드록시, 알킬옥시, 아르알킬옥시, 알킬카르보닐옥시 또는 실릴옥시이고;

R⁴¹은 수소, 알킬 또는 알키닐이며;

Z는 수소 또는

이고;

R^5a는 수소, 알킬, 할로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 바이아릴, 알케닐알킬, 알키닐알킬, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐아미노알킬, 아릴카르보닐아미노알킬, 아르알킬카르보닐아미노알킬, 아릴술포닐아미노알킬, 알킬티오알킬, 아르알킬티오알킬 또는 헤테로아르알킬티오알킬; 또는 하이드록시, 할로, 카르복시, 알킬옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 니트로, 아미노, 아미도, 아릴 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 치환된 알킬이며;

R^5b는 수소, 알킬, 할로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 바이아릴, 알케닐알킬, 알키닐알킬, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐아미노알킬, 아릴카르보닐아미노알킬, 아르알킬카르보닐아미노알킬, 아릴술포닐아미노알킬, 알킬티오알킬, 아르알킬티오알킬 또는 헤테로아르알킬티오알킬; 또는 하이드록시, 할로, 카르복시, 알킬옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 니트로, 아미노, 아미도, 아릴 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 치환된 알킬이거나; 또는 R^5a 및 이것이 결합된 질소와 함께, 0 또는 1개의 추가의 헤테로원자를 포함하는 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴을 형성하며;

R⁶은 수소, 알킬 또는 할로이거나; 또는 두 제미널 R⁶은 함께 취해져 에틸렌, 프로필렌 또는 부틸렌이고;

R^7a는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이며;

R^7b는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이고;

R^7c는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이다.

본 출원의 화합물의 제형 및 투여 기술은 당업자들에게 주지인 참조문헌, 예컨대 ["Remington's Pharmaceutical Sciences," Mack Publishing Co., Easton, PA, 최신판]에서 확인할 수 있다.

적합한 투여 경로는, 예를 들어 경구, 점안, 직장, 점막 관통, 국소, 또는 장내 투여; 근육내, 피하, 수내 주사뿐 아니라 척수강내, 직접 뇌실내, 정맥내, 복강내, 비강내 또는 안내 주사를 비롯한 비경구적 전달을 포함할 수 있다.

다른 한편으로, 화합물은, 예를 들어, 화합물을 부종 부위에 종종 데포 또는 서방성 제형으로 직접 주사함으로써, 전신적인 방식보다는 국소적인 방식으로 투여될 수 있다.

또한, 화합물은 표적화된 약물 전달 시스템으로, 예를 들어, 내피세포-특이적 항체로 코팅된 리포좀으로 투여될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 예를 들어 통상적인 혼합, 용해, 과립화, 당의정 제조, 가루화, 유화, 캡슐화, 봉입 또는 동결건조 공정으로 제조될 수 있다.

따라서, 본 발명에 따라 사용하기 위한 약학 조성물은 활성 화합물을 약학적으로 사용될 수 있는 제제로 가공하는 것을 용이케 하는 부형제 및 보조제를 포함하는 하나 이상의 생리학적으로 허용가능한 담체를 사용하여 통상적인 방식으로 제형화될 수 있다. 적당한 제형은 선택한 투여 경로에 좌우된다.

주사의 경우, 본 발명의 제제는 수용액, 바람직하게는 생리학적으로 상용성인 완충제, 예컨대 행크액, 링거액, 또는 생리식염수 완충제중에 제형화될 수 있다. 점막 관통 투여의 경우, 관통될 배리어에 적절한 침투제가 제형에 사용된다. 이러한 침투제는 당업계에 주지이다.

경구 투여의 경우, 화합물은 활성 화합물을 당업계에 잘 알려진 약학적으로 허용가능한 담체와 배합하여 용이하게 제형화될 수 있다. 이러한 담체는 치료되는 환자가 경구 섭취할 수 있도록 본 발명의 화합물을 정제, 환제, 당의정, 캡슐, 액제, 겔, 시럽, 슬러리, 현탁물 등으로 제형화할 수 있게 해준다. 경구용 약학 제제는 활성 화합물을 고체 부형제와 배합하고, 임의로 생성된 혼합물을 분쇄한 후, 필요에 따라 적합한 보조제를 첨가한 후 과립 혼합물을 가공하여 정제 또는 당의정 코어를 얻어 수득할 수 있다. 적합한 부형제는 예컨대 락토스, 수크로스, 만니톨 또는 소르비톨을 포함한 당; 셀룰로스 제제, 예를 들어, 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분, 감자 전분, 젤라틴, 트라가칸트검, 메틸 셀룰로스, 하이드록시프로필메틸-셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 및/또는 폴리비닐피롤리돈(PVP)과 같은 충전제를 포함한다. 필요에 따라 붕해제, 예컨대 가교화 폴리비닐 피롤리돈, 아가, 또는 알긴산 또는 알긴산나트륨과 같은 그의 염이 첨가될 수도 있다.

당의정 코어에 적합한 코팅이 제공될 수 있다. 이를 위해, 임의로 아라비아고무, 활석, 폴리비닐 피롤리돈, 카르보폴 겔, 폴리에틸렌 글리콜, 및/또는 이산화티탄, 래커 용액, 및 적합한 유기 용매 또는 용매 혼합물을 함유할 수 있는 농축된 당 용액이 사용될 수 있다. 활성 화합물 용량의 상이한 조합을 식별하거나 특정하기 위해 색소 또는 안료가 정제 또는 당의 코팅에 첨가될 수 있다.

경구적으로 사용될 수 있는 약학 제제는 젤라틴 및 가소제, 예컨대 글리세롤 또는 소르비톨로 만들어진 연질 밀봉 캅셀뿐만 아니라 젤라틴으로 만들어진 압입형(push-fit) 캅셀을 포함한다. 압입형 캅셀은 락토스와 같은 충전제, 전분과 같은 결합제, 및/또는 활석 또는 스테아르산마그네슘과 같은 윤활제, 및 임의로, 안정제와 함께 활성 성분을 함유할 수 있다. 연질 캅셀의 경우에는, 활성 화합물을 적합한 액체, 예컨대 지방 오일, 액체 파라핀, 또는 액체 폴리에틸렌 글리콜에 용해시키거나 현탁시킬 수 있다. 또한, 안정제가 첨가될 수 있다.

구강 투여의 경우, 조성물은 통상적인 방식으로 제형화된 정제 또는 로젠지 형태를 취할 수 있다.

흡입에 의한 투여의 경우, 본 발명에 따라 사용하기 위한 화합물은 편리하게는 적합한 추진제, 예를 들어 디클로로디플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 또는 그밖의 다른 적합한 기체를 사용하여 압축 팩 또는 분무기로부터 에어졸 스프레이 모양의 형태로 전달된다. 압축 에어졸의 경우, 용량 단위는 계량된 양을 전달하기 위한 밸브를 제공함으로써 결정될 수 있다. 예를 들어 흡입기 또는 취입기에 사용하기 위한 젤라틴의 캅셀 및 캐트리지는 화합물과 적합한 분말 베이스, 예컨대 락토스 또는 전분의 분말 믹스를 함유하도록 제형화될 수 있다.

화합물은 주사, 예를 들어 일시 주사 또는 연속 주입에 의한 비경구 투여용으로 제형화될 수 있다. 주사용 제형은, 예를 들어 보존제가 첨가된 앰풀 또는 다회 투여 용기내에 단위 투여 형태로 제공될 수 있다. 조성물은 유성 또는 수성 비히클중에 현탁물, 용액 또는 에멀젼과 같은 형태를 취할 수 있고, 현탁화제, 안정제 및/또는 분산제와 같은 제형화제를 함유할 수 있다.

비경구 투여용 약학 제형은 수용성 형태로 활성 화합물의 수용액을 포함한다. 또한, 활성 화합물의 현탁물은 적절한 유성 주사 현탁물로서 제조될 수 있다. 적합한 친유성 용매 또는 비히클은 참기름과 같은 지방 오일, 또는 합성 지방산 에스테르, 예컨대 에틸 올레에이트 또는 트리글리세리드, 또는 리포좀을 포함한다. 수성 주사 현탁물은 현탁물의 점도를 증가시키는 물질, 예컨대 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스, 소르비톨, 또는 덱스트란을 함유할 수 있다. 임의로, 현탁물은 또한 적합한 안정제 또는 고농축 용액의 제조가 가능하도록 화합물의 용해도를 증가시키는 제제를 함유할 수 있다.

다른 한편으로, 활성 성분은 사용전에 적합한 비히클, 예를 들어 발열물질을 함유하지 않는 무균수로 재구성하기 위한 분말 형태일 수 있다.

화합물은 또한, 예를 들어 코코아버터 또는 다른 글리세리드와 같은 통상적인 좌약 베이스를 함유하는 좌제 또는 정체 관장과 같은 직장용 조성물로 제형화될 수 있다.

전술된 제형 외에도, 화합물은 또한 데포 제제로 제형화될 수 있다. 이러한 장기 작용성 제형은 이식에 의해(예를 들어, 피하적 또는 근육내로 또는 근육내 주사에 의해) 투여될 수 있다. 따라서, 예를 들어, 화합물은 적합한 중합성 또는 소수성 물질(예를 들어 허용가능한 오일중에 에멀젼으로) 또는 이온 교환 수지, 또는 난용성 유도체(예를 들어, 난용성 염)와 함께 제형화될 수 있다.

또한, 소수성 약학 화합물을 위한 다른 전달 시스템이 사용될 수도 있다. 소수성 약물용 전달 비히클 또는 담체의 예로서 리포좀 및 에멀젼이 있다. 디메틸술폭시드와 같은 특정 유기 용매가 또한 사용될 수 있다. 또한, 화합물은 서방성 시스템, 예컨대 치료제를 함유하는 고체 소수성 중합체의 반투과성 매트릭스를 사용하여 전달될 수 있다. 다양한 서방성 물질이 제시되었으며, 당업자들에게 잘 알려져 있다. 서방성 캅셀은 그의 화학적 성질에 따라, 화합물을 수 주에서 100 일 넘어서 까지 방출할 수 있다. 치료제의 화학적 성질 및 생물학적 안정성에 따라, 단백질 안정화를 위한 추가적인 전략이 이용될 수 있다.

약학 조성물은 또한 적합한 고체 또는 겔상 담체 또는 부형제를 포함할 수 있다. 이러한 담체 또는 부형제의 예로는 탄산칼슘, 인산칼슘, 각종 당, 전분, 셀룰로스 유도체, 젤라틴 및 중합체, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜을 들 수 있으나, 이들로만 한정되지는 않는다.

치료 방법

본 원에 그의 과정이 히스톤 또는 다른 단백질의 메틸화 상태 조절로 영향을 받을 수 있고, 상기 메틸화 상태는 적어도 부분적으로 DOT1의 활성으로 매개되는 병태 및 질환의 치료 또는 예방 방법이 제공된다. 이어서 히스톤의 메틸화 상태 조절은 메틸화에 의해 활성화된 표적 유전자 및/또는 메틸화에 의해 억제된 표적 유전자의 발현 수준에 영향을 줄 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 일 측면은 치료적 유효량의 하기 화학식 I의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 수화물, 거울상이성체 또는 입체이성체를 이를 필요로 하는 대상에 투여하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다:

상기 식에서, 각각의 경우 독립적으로

X는

또는

이고;

R¹은 수소, 알킬, 사이클로알킬, 알킬사이클로알킬, 알킬아릴, 할로알킬, 포르밀, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴알킬,

이거나; 또는

로 치환된 (C₂-C₄)알킬이나, 단 X가

이면, R¹은

가 아니고;

R¹⁰은 수소 또는 알킬이며;

R^11a는 수소, 알킬, 또는 알킬-사이클로알킬이고;

R^11b는 수소 또는 알킬이거나; 또는 R^11a 및 이것이 결합된 질소와 함께, 0 또는 1개의 추가의 헤테로원자를 포함하는 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴을 형성하며;

R¹³은 수소, 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 헤테로아르알킬 또는 실릴이고;

R¹⁴는 수소, 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬 또는 헤테로아르알킬이며;

R¹⁵는 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고;

R²⁰은 수소, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이며;

A는

또는

이고;

R²는

이며;

Y는 -NH-, -N(알킬)-, -0-, 또는 -CR⁶ ₂-이고;

R^22a는 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 융합된 바이사이클릴, 바이아릴, 아릴옥시아릴, 헤테로아릴옥시아릴, 아릴옥시헤테로아릴 또는 헤테로아릴옥시헤테로아릴이며;

R^22b는 수소 또는 알킬이고;

R²⁴는 수소 또는 알킬이며;

R^25a, R^25b, R^25c 및 R^25d는 독립적으로 -M₂-T₂이고, 여기에서 M₂는 결합, S0₂, SO, S, CO, C0₂, O, 0-C₁-C₄ 알킬 링커, C₁-C₄ 알킬 링커, NH, 또는 N(R_t)이고, R_t는 C₁-C₆ 알킬이며, T₂는 H, 할로, 또는 R_S4이고, R_S4는 C₁-C₆ 알킬, C₂-C₆ 알케닐, C₂-C₆ 알키닐, C₃-C₈ 사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 4 내지 8-원 헤테로사이클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴이며, 여기에서 0-C₁-C₄ 알킬 링커, C₁-C₄ 알킬 링커, R_t 및 R_S4는 각각 할로, 하이드록실, 카르복실, 시아노, C₁-C₆ 알킬, C₂-C₆ 알케닐, C₂-C₆ 알키닐, C₁-C₆ 알콕실, 아미노, 모노-C₁-C₆ 알킬아미노, 디-C₁-C₆ 알킬아미노, C₃-C₈ 사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 4 내지 6-원 헤테로사이클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 임의로 치환되고;

R³은 수소, 할로겐, 하이드록시, 알킬옥시, 아르알킬옥시, 알킬카르보닐옥시 또는 실릴옥시이며;

R⁴는 수소, 할로겐, 하이드록시, 알킬옥시, 아르알킬옥시, 알킬카르보닐옥시 또는 실릴옥시이고;

R⁴¹은 수소, 알킬 또는 알키닐이며;

R^5a는 수소, 알킬, 할로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 바이아릴, 알케닐알킬, 알키닐알킬, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐아미노알킬, 아릴카르보닐아미노알킬, 아르알킬카르보닐아미노알킬, 아릴술포닐아미노알킬, 알킬티오알킬, 아르알킬티오알킬 또는 헤테로아르알킬티오알킬; 또는 하이드록시, 할로, 카르복시, 알킬옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 니트로, 아미노, 아미도, 아릴 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 치환된 알킬이며;

R^5b는 수소, 알킬, 할로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 바이아릴, 알케닐알킬, 알키닐알킬, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐아미노알킬, 아릴카르보닐아미노알킬, 아르알킬카르보닐아미노알킬, 아릴술포닐아미노알킬, 알킬티오알킬, 아르알킬티오알킬 또는 헤테로아르알킬티오알킬; 또는 하이드록시, 할로, 카르복시, 알킬옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 니트로, 아미노, 아미도, 아릴 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 치환된 알킬이거나; 또는 R^5a 및 이것이 결합된 질소와 함께, 0 또는 1개의 추가의 헤테로원자를 포함하는 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴을 형성하며;

R⁶은 수소, 알킬 또는 할로이거나; 또는 두 제미널 R⁶은 함께 취해져 에틸렌, 프로필렌 또는 부틸렌이고;

R^7a는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이며;

R^7b는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이고;

R^7c는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Z가 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Z가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은

X가

인

상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 X가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 X가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 X가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은

X가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 X가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 X가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R²가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R²가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R²⁴가 수소 또는 알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R²⁴가 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^25a가 수소, 알킬, -O-알킬, 할로겐, 트리플루오로알킬, -O-트리플루오로메틸, 또는 -S0₂-트리플루오로메틸인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^25b가 수소, 알킬, 할로겐, 또는 트리플루오로알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^25c가 수소, 알킬, 또는 할로겐인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^25c가 수소 또는 할로겐인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R²가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Y가 -NH- 또는 -N(알킬)-인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Y가 -NH-인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Y가 -N(CH₃)-인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Y가 -0-인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Y가 -CH₂-인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^22a가 아릴 또는 아르알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^22a가 치환된 페닐 또는 치환된 벤질인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^22a가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^22a가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^22b가 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^22b가 메틸인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 -CH₃, -CH₂CH₃, -CH₂CH(CH₃)₂ 또는 -CH₂CH₂CH(CH₃)₂인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 C₃-C₇ 사이클로알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 사이클로프로필, 사이클로프로필메틸, 2-사이클로프로필에틸, 사이클로부틸, 사이클로부틸메틸, 2-사이클로부틸에틸, 사이클로펜틸, 사이클로펜틸메틸, 또는 2-사이클로펜틸에틸인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 -CH₂CF₃인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 -CH₂Ph인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 -C(=0)H인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 -C(=0)CH₃인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이 헤테로사이클릴 또는 헤테로사이클릴알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹⁵가 알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹⁵가 사이클로알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹⁵가 사이클로알킬알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이

로 치환된 (C₂-C₄) 알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^11a가 수소, 알킬, 또는 알킬-사이클로알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^11a가 수소, 메틸, 또는 i-프로필인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹³이 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R¹이

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

이고, R⁶이 알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 A가

이고, R⁶이 메틸, 에틸 또는 이소프로필인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 하이드록실인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R⁴가 하이드록실인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R⁴가 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R⁴¹이 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R⁴¹이 메틸인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 하이드록실이고; R⁴가 하이드록실인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 하이드록실이고; R⁴가 하이드록실이고; R⁴¹은 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 하이드록실이고; R⁴가 하이드록실이고; R⁴¹은 메틸인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 수소이고; R⁴는 하이드록실인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 수소이고; R⁴가 하이드록실이고; R⁴¹은 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 수소이고; R⁴가 하이드록실이고; R⁴¹은 메틸인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R³이 하이드록실이고; R⁴는 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Z가 수소 또는

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 Z가 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서 본 발명은 Z가

인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5a가 수소, 알킬, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 또는 헤테로아르알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5a가 수소, 아르알킬옥시알킬, 알킬, 아릴, 아르알킬, 아미노알킬 또는 하이드로알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5a가 -H, -CH₂CH₂OCH₂Ph, -CH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -Ph, -CH₂CH(CH₃), -CH₃, -CH₂Ph, -CH₂CH₂NH₂, -CH₂(사이클로헥실) 또는 -CH₂CH₂OH인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5b가 수소, 알킬, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 또는 헤테로아르알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5b가 수소, 아르알킬옥시알킬, 알킬, 아릴, 아르알킬, 아미노알킬 또는 하이드로알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5b가 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^5a가 -H, -CH₂CH₂OCH₂Ph, -CH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -Ph, -CH₂CH(CH₃), -CH₃, -CH₂Ph, -CH₂CH₂NH₂, -CH₂(사이클로헥실) 또는 -CH₂CH₂OH이고; R^5b는 -H인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^7a가 수소 또는 저급 알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^7a가 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^7b가 수소 또는 저급 알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^7b가 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^7c가 수소 또는 저급 알킬인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 R^7c가 수소인 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

특정 실시양태에서, 본 발명은 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 수화물, 거울상이성체 또는 입체이성체가

로 구성된 군에서 선택되는 상기 언급된 방법중 어느 한 방법에 관한 것이다.

암 및 신경계 질환과 같은 질병은 단백질(예를 들면, 히스톤) 메틸화 조절제, 예를 들어 히스톤 메틸전달효소, 또는 히스톤 데메틸라제 효소의 활성 조절제를 투여함으로써 치료될 수 있다. 히스톤 메틸화는 암에서 특정 유전자의 이상 발현, 및 비-뉴런 세포에서 뉴런 유전자의 침묵에 관여하는 것으로 보고되었다. 본 원에 기술된 조절제는 이들 질환을 치료하기 위해서, 즉 영향을 받은 세포에 대해 히스톤 또는 다른 단백질의 정상적인 메틸화 상태를 회복시키기 위해 사용될 수 있다.

적어도 히스톤 메틸화 증가가 특정 암과 관련된다고 밝혀진 사실에 기초하여, 대상에서 암의 치료 방법은 메틸화를 감소시키거나, 메틸화를 거의 대응하는 정상 세포내의 수준으로 회복시키는 치료적 유효량의 화합물을 이를 필요로 하는 대상에 투여하는 것을 포함한다. 질환에 특이적인 메틸화 증가가 히스톤 또는 단백질 메틸화의 전반적인 세포 수준의 증가없이 주요 게놈좌내 크로마틴에서 일어날 수 있다는 것은 특히 주목할만하다. 예를 들어, 주요 질환-관련 유전자에서 이상 고메틸화가 전반적인 히스톤 또는 단백질 저메틸화를 배경으로 일어날 가능성이 있다.

메틸화 조절제는 세포 증식을 일반적으로 조절하기 위해 사용될 수 있다. 예를 들어, 일부 경우에는 메틸화를 감소시키는 제제로 과다 증식이 감소될 수 있는 반면에, 메틸화를 증가시키는 제제로 불충분한 증식이 촉진될 수 있다. 따라서, 치료될 수 있는 질환에는 과다증식 질환, 예컨대 양성 세포 증식 및 악성 세포 증식이 포함된다.

치료될 수 있는 예시적인 암으로는 백혈병, 예를 들어 급성 림프성 백혈병 및 골수성 백혈병, 혼합 계통 백혈병 및 암종, 예컨대 결장직장암종 및 간암종이 포함된다. 그밖의 암으로는 급성 림프모구 백혈병; 급성 림프모구 백혈병; 급성 골수성 백혈병; 급성 골수성 백혈병; 부신피질 암종; 부신피질 암종; AIDS-관련 암; AIDS-관련 림프종; 항문암; 소아 소뇌 별아교세포종; 소아뇌 별아교세포종; 기저 세포 암종, 예로서 피부암(비흑색종); 간외 담관암; 방광암; 방광암; 골암, 골육종/악성 섬유조직구종; 뇌간신경교종; 뇌종양; 뇌종양, 뇌간신경교종; 뇌종양, 소뇌 별아교세포종; 뇌종양, 뇌 별아교세포종/악성 뇌교종; 뇌종양, 뇌실막세포종; 뇌종양, 수모세포종; 뇌종양, 천막상 원시신경외배엽 종양; 뇌종양, 시각 경로 및 시상하부 뇌교종; 뇌종양; 유방암; 유방암 및 임신; 유방암; 남성 유방암; 기관지 선종/카르시노이드; 버킷 림프종; 카르시노이드 종양; 위장 카르시노이드 종양; 미지 원발성 암종; 원발성 중추신경계 림프종; 소뇌 별아교세포종; 뇌 별아교세포종/악성 뇌교종; 자궁경부암; 소아암; 만성 림프성 백혈병; 만성 골수성 백혈병; 만성 골수증식성 장애; 결장암; 결장직장암; 피부 T-세포 림프종, 예로서 균상식육종 및 세자리 증후군; 자궁내막암; 뇌실막세포종; 식도암; 식도암; 유잉 종양(Ewing's Family of Cancer); 두개외 생식 세포 종양; 고환외 생식 세포 종양; 간외 담관암; 눈암, 안내 흑색종; 눈암, 망막아종; 담낭암; 위(위내) 암; 위(위내)암; 위장 카르시노이드 종양; 두개외 생식 세포 종양; 고환외 생식 세포 종양; 난소 생식 세포 종양; 융모상피성 종양; 뇌교종; 소아뇌간 뇌교종; 뇌교종, 소아뇌 별아교세포종; 소아 시각 경로 및 시상하부 뇌교종; 모양세포성 백혈병; 두경부암; 성인 (원발성) 간세포(간) 암; 소아 (원발성) 간세포(간) 암; 호지킨 림프종; 호지킨 림프종; 임신중 호지킨 림프종; 하인두암; 시상하부 및 시각 경로 뇌교종; 안내 흑색종; 섬세포 암종(내분비 췌장); 카포시육종; 신장(신세포) 암; 신장암; 후두암; 후두암; 급성 림프모구 백혈병; 백혈병, 급성 림프모구; 급성 골수성 백혈병; 백혈병, 급성 골수성; 만성 림프성 백혈병; 만성 골수성 백혈병; 모양세포성 백혈병; 입술구강암; 성인 (원발성) 간암; 소아 (원발성) 간암; 비소세포 폐암; 소세포 폐암; AIDS-관련 림프종; 버킷 림프종; 피부 T-세포 림프종, 예로서 균상식육종 및 세자리 증후군; 호지킨 림프종; 호지킨 림프종; 임신중 호지킨 림프종; 비-호지킨 림프종; 비-호지킨 림프종; 임신중 비-호지킨 림프종; 원발성 중추신경계 림프종; 발데스트롬 마크로글로불린혈증; 골/골육종의 악성 섬유조직구종; 수모세포종; 흑색종; 안내(눈) 흑색종; 메르켈 세포 암종; 성인 악성 중피종; 중피종; 잠복 원발성 전이성 목편평세포암; 다발성 내분비 신생물 증후군; 다발 골수종/형질 세포 신생물 균상식육종; 골수이형성 증후군; 골수이형성/골수증식성 질환; 만성 골수성 백혈병; 성인 급성 골수성 백혈병; 소아 급성 골수성 백혈병; 다발성 골수종; 만성 골수증식성 장애; 비강 및 부비강암; 비인두암; 비인두암; 신경모세포종; 비-호지킨 림프종; 비-호지킨 림프종; 임신중 비-호지킨 림프종; 비소세포 폐암; 구강암; 순구강암; 구강인두암; 골육종/악성 골섬유조직구종; 난소암; 난소 상피암; 난소 생식 세포 종양; 난소 저악성 잠재성 종양; 췌장암; 췌장암; 섬세포 췌장암; 부비강 및 비강암; 부갑상선암; 음경암; 크롬친화세포종; 송과체모세포종 및 천막상 원시신경외배엽 종양; 뇌하수체 종양; 형질 세포 신생물/다발 골수종; 흉막과폐 모세포종; 임신 및 유방암; 임신 및 호지킨 림프종; 임신 및 비-호지킨 림프종; 원발성 중추신경계 림프종; 전립선암; 직장암; 신세포(신장) 암; 신세포(신장) 암; 신우 및 수뇨관 이행세포 암; 망막아종; 횡문근육종; 침샘암; 침샘암; 유잉 육종; 카포시육종; 연조직육종; 연조직육종; 자궁육종; 세자리 증후군; 피부암(비흑색종); 피부암; 피부암(흑색종); 메르켈 세포 피부암종; 소세포 폐암; 소장암; 연조직 육종; 연조직 육종; 편평상피세포 암종, 예로서 피부암(비흑색종); 잠복 원발성 전이성 목편평세포암; 위내(위) 암; 위내(위) 암; 천막상 원시신경외배엽 종양; 피부 T-세포 림프종, 예로서 균상식육종 및 세자리 증후군; 고환암; 흉선종; 흉선종 및 흉선암종; 갑상선암; 갑상선암; 신우 및 수뇨관의 이행세포암; 임신 융모성 종양; 미지 원발성 부위 암종; 미지 원발성 부위 암; 소아 특이암; 수뇨관 및 신우의 이행세포 암; 요도암; 자궁내막 자궁암; 자궁 육종; 질암; 시각 경로 및 시상하부 뇌교종; 외음부암; 발데스트롬 마크로글로불린혈증; 윌름 종양; 및 부인과 암을 들 수 있다.

치료될 수 있는 신경계 질환은 간질, 정신분열병, 양극성 장애 또는 기타 심리 및/또는 정신 장애, 신경병증, 골격근 위축, 및 신경변성 질환, 예를 들어 신경변성 질병을 포함한다. 예시적인 신경변성 질환은 알츠하이머 근위축성 측색 경화(ALS), 및 파킨슨 질환을 포함한다. 다른 류의 신경변성 질환으로서 적어도 부분적으로 폴리글루타민의 응집으로 초래되는 질환이 포함된다. 이러한 류의 질환에는 헌팅턴 질환, 척수연수 근위축(SBMA 또는 케네디 질환), 치아적핵담창구루이체 위축증(DRPLA), 척수소뇌성 실조증 제1 타입(SCA1), 척수소뇌성 실조증 제2 타입(SCA2), 마차도-요셉 질환(MJD; SCA3), 척수소뇌성 실조증 제6 타입(SCA6),척수소뇌성 실조증 제7 타입(SCA7) 및 척수소뇌성 실조증 제12 타입(SCA12)이 포함된다.

DOT1으로 매개되는 후생적 메틸화가 관여할 수 있는 임의의 다른 질환이 본 원에 기술된 화합물 및 방법을 사용하여 치료 또는 예방될 수 있다.

병용 요법

본 발명의 일 측면으로, 본 발명의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염은 암 및/또는 신경계 장애와 같은 질환을 치료하기 위해 다른 치료제와 조합하여 사용될 수 있다. 예를 들어, 추가의 약제는 본 발명의 화합물로 치료되는 질환 또는 병태를 치료하기에 유용한 것으로 업계에서 인식되고 있는 치료제일 수 있다. 추가의 약제는 또한 치료 조성물에 혜택을 줄 수 있는 약제일 수 있다(예를 들면, 조성물의 점도에 영향을 주는 제제).

본 발명에 의해 구상되는 병용 요법은, 예를 들어 단일 약학 제형으로 본 발명의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 추가의 약제(들)의 투여뿐 아니라 상이한 약학 제형으로 본 발명의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 및 추가의 약제(들)의 투여를 포함한다. 다시 말해서, 공동-투여는 두 약제의 조합이 유익한 효과를 제공하도록 적어도 두가지 약제를 대상에 투여하는 것을 의미한다. 예를 들어, 약제는 동시에 또는 일정 시간에 걸쳐 순차적으로 투여될 수 있다.

이하 제시되는 약제는 설명을 목적으로 하는 것이며, 제한할 의도는 아니다. 본 발명의 일부인 배합물은 본 발명의 화합물 및 후술하는 목록으로부터 선택되는 적어도 하나의 추가 약제일 수 있다. 배합물은 또한 형성된 조성물이 그의 의도하는 기능을 수행할 수 있다면 복수의 약제, 예를 들어 2 이상의 추가의 약제를 포함할 수 있다.

예를 들어, 본 발명의 일 측면은 다른 항암제, 예를 들어 히스톤을 변경하는 화합물, 예컨대 HDAC 저해제와 조합된 본 발명의 화합물(예를 들면, 화학식 I의 화합물)의 암 및/또는 신경계 장애의 치료를 위한 용도에 관한 것이다. 특정 실시양태에서, 다른 항암제는 화학요법제(예컨대 2CdA, 5-FU, 6-머캅토퓨린, 6-TG, 아브락산^TM, 액큐탄^®, 액티노마이신-D, 아드리아마이신^®, 알림타^®, all-트랜스 레티노산, 아메토프테린, Ara-C, 아자시타딘, BCNU, 블레녹산^®, 캄프토사르^®, CeeNU^®, 클로파라빈, 클로라르^TM, 시톡산^®, 다우노루비신 하이드로클로라이드, 다우녹솜^®, 다코겐^®, DIC, 독실^®, 엘렌스^®, 엘록사틴^®, 엠시트^®, 에토포시드 포스페이트, 플루다라^®, FUDR^®, 겜자르^®, 글리벡^®, 헥사메틸멜라민, 하이캄틴^®, 히드레아^®, 이다마이신^®, 이펙스^®, 익사베필론, 익셈프라^®, L-아스파라기나제, 류케란^®, 리포좀 Ara-C, L-PAM, 리소드렌, 마툴란^®, 미트라신, 미토마이신-C, 밀레란^®, 나벨빈^®, 뉴트렉신^®, 닐로티닙, 니펜트^®, 질소 머스타드, 노반트론^®, 온카스파르^®, 판레틴^®, 파라플라틴^®, 플라티놀^®, 프로리페프로스판 20 + 카르무스틴 이식정, 산도스타틴^®, 타르그레틴^®, 타시그나^®, 탁소테레^®, 테모다르^®, TESPA, 트리세녹스^®, 발스타르^®, 벨반^®, 비다자^TM, 빈크리스틴 술페이트, VM 26, 젤로다^® 및 자노사르^®), 생물제제(예컨대 알파 인터페론, 칼메트 게랭균(Bacillus Calmette-Guerin), 벡사르^®, 캄파트^®, 에르가미솔^®, 에를로티닙, 헤르셉틴^®, 인터류킨-2, 이레사^®, 레날리도미드, 미로타르그^®, 온탁^®, 페가시스^®, 레불리미드^®, 리툭산^®, 타르세바^TM, 탈로미드^®, 티케르브^®, 벨카드 및 제발린^®), 코르티코스테로이드(예컨대 덱사메타손 인산나트륨, 델타손^® 및 델타-코르테프^®, 호르몬 치료제(예컨대 아리미덱스^®, 아로마신^®, 카소덱스^®, 사이타드렌^®, 엘리가드^®, 율렉신^®, 에비스타^®, 파슬로덱스^®, 페마라^®, 할로테스틴^®, 메가스^®, 닐란드론^®, 놀바덱스^®, 플레낙시스^TM 및 졸라덱스^®) 및 방사성약물(예컨대 이오도토프^®, 메타스트론^®, 포스포콜^® 및 사마리움 SM-153)로 구성된 군에서 선택된다.

투여량

본 원에 사용된 "치료적 유효량" 또는 "치료적 유효 용량"은 병태의 진행을 완전히 또는 부분적으로 억제하거나, 또는 병태의 하나 이상의 증상을 적어도 부분적으로 개선하는 본 발명의 화합물 또는 2 이상의 이러한 화합물의 배합물의 양이다. 치료적 유효량은 또한 예방적으로 효과적인 양일 수 있다. 치료적으로 유효한 양은 환자의 크기 및 성별, 치료할 병태, 병태의 경중도 및 소기 결과에 따라 달라질 것이다. 주어진 환자에 대한 치료적 유효량은 당업자들에게 공지된 방법으로 결정될 수 있다.

치료적 유효 용량이란 환자의 증상을 개선하는 화합물의 양을 가리킨다. 이러한 화합물의 독성 및 치료 효능은, 예를 들어 최대 내성 용량(MTD) 및 ED₅₀(50% 최대 반응을 위한 효과적인 용량)을 결정하기 위한 세포 배양물 또는 실험 동물에서 표준 제약 절차로 결정될 수 있다. 독성 및 치료 효능간 용량비는 치료 지수이며, MTD와 ED₅₀의 비로 표현될 수 있다. 이들 세포 배양 시험 및 동물 연구로부터 얻은 데이터를 인간에 사용하기 위한 투여량 범위를 작성하는데 사용할 수 있다. 투여량은 또한 병에 걸린 조직 또는 대용 조직에서 효소 저해(예를 들면, 히스톤 메틸화 또는 표적 유전자 발현)의 약력학적 마커에 대한 화합물 효과를 추적하여 유도될 수도 있다. 세포 배양 또는 동물 실험은 약력학적 마커의 변화에 필요한 용량과 치료 효과에 필요한 용량간 관계를 결정하는데 이용될 수 있으며, 세포 배양 또는 동물 실험 또는 초기 단계의 임상실험에서 결정될 수 있다. 이러한 화합물의 투여량은 바람직하게는 독성이 거의 없거나 전혀 없는 ED₅₀을 포함하는 혈중 농도 범위내이다. 투여량은 사용되는 투여 형태 및 이용된 투여 경로에 따라서 상기 범위내에서 다양할 수 있다. 정확한 제형, 투여 경로 및 투여량은 환자의 상태를 보고 의사 개개인이 선택할 수 있다. 위기 치료의 경우에는, MTD에 근접한 급성 대량 주사 또는 주입의 투여가 신속한 반응을 얻기 위해 필요할 수 있다.

투여량 및 간격은 치료 효능을 달성하는데 필요한 기간 동안 메틸전달효소의 조절 효과, 또는 최소 유효 농도(MEC)를 유지하기에 충분한 혈장 수준의 활성 부분을 제공하도록 개별적으로 조정될 수 있다. MEC는 각 화합물에 대해 다양할 것이나, 시험관내 데이터 및 동물 실험으로부터 추정할 수 있다. MEC를 달성하는데 필요한 투여량은 개인의 특성 및 투여 경로에 따라 다를 것이다. 그러나, HPLC 분석 또는 생물학적 분석을 이용하여 혈장 농도를 결정할 수 있다.

투여 간격은 또한 MEC 값을 사용하여 결정될 수 있다. 특정 실시양태에서, 화합물은 소기하는 증상의 개선이 이루어질 때까지 시간의 10-90%, 바람직하게는 30-90% 및 가장 바람직하게는 50-90% 동안 혈장 수준을 MEC 이상으로 유지하는 요법을 이용하여 투여되어야 한다. 다른 실시양태에서는, 상이한 MEC 혈장 수준이 상이한 시간 동안 유지될 것이다. 국소 투여 또는 선택적 섭취의 경우, 약물의 유효한 국소 농도는 혈장 농도와 연관되지 않을 수 있다.

당업자들이라면 각종 투여 요법에서 투여량을 선택할 수 있으며, 투여되는 조성물의 양은 치료 대상, 대상의 체중, 병의 경중도, 투여 방식 및 처방의의 판단에 따라 달라질 것이다.

키트

본 발명의 화합물 및 조성물(예를 들면, 화학식 I의 화합물 및 조성물)은 필요에 따라, 활성 성분을 함유하고 있는 하나 이상의 단위 투여 형태를 포함할 수 있는 키트(예를 들면, 팩 또는 디스펜서 장치) 내에 존재할 수 있다. 팩은, 예를 들어 금속 또는 플라스틱 포일, 예컨대 블리스터 팩을 포함할 수 있다. 팩 또는 디스펜서 장치에 투여 설명서가 첨부될 수 있다. 약학적 상용성 담체중에 제형화된 본 발명의 화합물을 포함하는 조성물이 또한 제조되어 적절한 용기에 도입되고, 표시된 병태의 치료용이라는 라벨이 붙여질 수 있다. 사용 설명서가 또한 제공될 수 있다.

화합물의 활성 평가

DOT1L 폴리펩티드 및 핵산을 사용하여 H3K79 HMTase 활성, SAM 결합 활성, 히스톤 및/또는 뉴클레오좀 결합 활성, AF10 결합 활성, AF10-MLL 또는 다른 MLL 융합 단백질 결합 활성, 및/또는 대상으로 하는 임의의 다른 생물학적 활성을 예로 들 수 있으나 이들에 한정되지 않는 DOT1L의 하나 이상의 생물학적 활성을 조절(예를 들면, 증가 또는 감소) 및/또는, 이에 결합하는 화합물을 스크리닝할 수 있다. DOT1L 폴리펩티드는 전장 DOT1L 폴리펩티드의 기능성 단편 또는 그의 기능성 등가체일 수 있고, 대상으로 하는 임의의 DOT1 도메인을 포함할 수 있으며, 이들로는 촉매적 도메인, SAM 결합 도메인 및/또는 양전하 도메인, AF10 상호작용 도메인 및/또는 핵외 반출 신호가 포함되나 이들에 한정되지 않는다.

히스톤, 뉴클레오좀, 핵산 또는 폴리펩티드에 대한 DOT1L 결합의 평가 방법은 당업자들에게 자명한 표준 기술로 수행될 수 있다(예시적인 방법에 대한 구체예 참조). 이 방법은 효모 및 포유동물의 이종 교잡 검정(two-hybrid assay) 및 공면역침전 기술을 포함한다

예를 들어, DOT1L H3K79 HMTase 활성을 조절하는 화합물은 DOT1L 폴리펩티드를 H3을 포함하는 히스톤 또는 펩티드 기질과 시험 화합물의 존재하에 접촉시키고; H3K79 메틸화를 제공하기에 충분한 조건하에서 히스톤 또는 펩티드 기질의 H3K79 메틸화 수준을 검출하여 확인할 수 있는데, 여기에서 시험 화합물의 부재하에 히스톤 H3K79 메틸화 수준에 비해 시험 화합물의 존재하에 H3K79 메틸화의 상승 또는 감소는 시험 화합물이 DOT1L H3K79 HMTase 활성을 조절한다는 표시이다.

본 발명의 스크리닝 방법은 세포-기반 또는 무세포 시스템에서 수행될 수 있다. 다른 대안으로서, 동물 전체(유전자이식 비-인간 동물 포함)에서 분석이 수행될 수 있다. 또한, 세포-기반 시스템에서는, DOT1L 폴리펩티드(또는 분석에 사용된 임의의 다른 폴리펩티드)가 세포에 직접 첨가될 수 있거나, 또는 세포내 핵산으로부터 생성될 수 있다. 핵산은 세포 내생이거나, 외래의 것(예를 들면, 유전자 변형 세포)일 수 있다.

임의의 관심 화합물이 본 발명에 따라 스크리닝될 수 있다. 적합한 시험 화합물은 소형 유기 화합물을 포함한다. 소형 유기 화합물은 스테로이드, 항생제, 효소 저해제, 리간드, 호르몬, 약물, 알칼로이드, 오피오이드, 테르펜, 포르피린, 독소, 촉매뿐 아니라 이들의 조합을 포함하는 각종 유기 분자, 예컨대 복소환식, 방향족, 지환식, 지방족 및 이들의 조합을 포함한다.

정의

편의상, 본 원 명세서, 실시예 및 청구범위에 사용된 특정 용어들을 이곳에 모아 놓았다. 본 원에 사용되고 정의된 바와 같은 모든 정의가 사전적 정의, 참고로 원용된 문헌내의 정의 및/또는 정의된 용어의 일상적인 의미에 우선한다.

본 원에 사용된 단수는 1 이상(즉, 적어도 하나)의 문법적 대상을 언급한다. 예로서, "요소"는 하나의 요소 또는 복수의 요소를 의미한다.

본 원 명세서 및 청구범위에 사용된 "및/또는"이라는 표현은 결합된 요소의 "어느 하나 또는 둘 모두", 즉 일부의 경우 공동으로 존재하고 다른 경우에는 분리되어 존재하는 요소를 의미하는 것으로 이해하여야 한다. "및/또는"과 함께 서술된 다중 요소도 동일한 방식, 즉, 결합된 "하나 이상의" 요소로 해석되어야 한다. 구체적으로 표시된 요소와 관련되건 관련되지 않건 상관없이, "및/또는" 표현으로 구체적으로 표시된 요소 외에 다른 요소도 임의로 존재할 수 있다. 따라서, 비한정적인 예로서, "포함하는"과 같이 한도가 없는 말과 관련하여 사용되는 경우, "A 및/또는 B"는 일 실시양태에서는, A 만(임의로 B 이외의 요소 포함); 다른 실시양태에서는 B 만(임의로 A 이외의 요소 포함); 또다른 실시양태에서는 A 및 B 모두(임의로 다른 요소 포함); 등을 의미할 수 있다.

본 원 명세서 및 청구범위에 사용된 "또는"은 상기 정의된 "및/또는"과 동일한 의미로 이해하여야 한다. 예를 들어, 어떤 목록에서 항목이 분리된 경우, "또는" 또는 "및/또는"은 일체를 포함하는 것으로 해석되며, 즉 요소의 수 또는 목록의 적어도 하나뿐만 아니라 복수개, 및, 임의로, 나열되지 않은 추가 항목도 포함한다. 예컨대 "~의 단 하나" 또는 "그중 정확히 하나"와 같이 명확히 별도로 지정된 유일한 용어, 또는, 청구범위에 사용되는 경우, "로 구성되는"은 요소의 수 또는 목록중 정확히 하나를 포함함을 나타낼 것이다. 일반적으로, 본 원에 사용된 "또는" 이라는 용어는, 예컨대 "어느 하나", "의 하나", "의 단 하나", 또는 "의 정확히 하나"라는 용어가 있으면, 독점적인 선택(즉, "하나 또는 다른 것이지만 둘 다는 아닌") 으로만 해석되어야 할 것이다. "~로 실질적으로 구성된"이 청구범위에 사용되는 경우, 이는 특허법 분야에서 일상적으로 사용되는 의미를 가질 것이다.

하나 이상의 요소 목록과 관련하여 본 원 명세서 및 청구범위에 사용된 "적어도 하나"의 어구는 요소 목록중 임의의 하나 이상의 요소로부터 선택된 적어도 하나의 요소를 의미하나, 반드시 요소 목록내에 특정적으로 기술된 각각 및 모든 요소의 적어도 하나를 포함해야 하는 것은 아니며, 요소 목록중 임의의 요소 조합을 제외하지 않는 것으로 이해하여야 한다. 이 정의는 또한 구체적으로 표시된 요소와 관련되건 관련되지 않건 상관없이, "적어도 하나"의 어구가 가리키는 요소 목록내에 특정적으로 기술된 것 외에 다른 요소가 임의로 존재할 수 있음도 내포한다. 따라서, 비한정적인 예로서, "A 및 B의 적어도 하나"(또는 동등하게 A 또는 B의 적어도 하나" 또는 동등하게 A 및/또는 B"의 적어도 하나)는, 일 실시양태에서, 임의로 복수개의 A를 포함하나 B는 존재하지 않는(및 임의로 B 외의 요소 포함) 적어도 하나를 가리킬 수 있고; 다른 실시양태에서는 임의로 복수개의 B를 포함하나 A는 존재하지 않는(및 임의로 A 외의 요소 포함) 적어도 하나를 가리킬 수 있으며; 또다른 실시양태에서는 임의로 복수개의 A를 포함하는 적어도 하나, 및 임의로 복수개의 B를 포함하는 적어도 하나(임의로 다른 요소 포함)를 가리킬 수 있는 것을 예로 들 수 있다.

명확히 달리 지정되지 않으면, 복수개의 단계 또는 작용을 포함하는 본 원에 청구한 임의의 방법에서, 방법의 단계 또는 작용 순서는 반드시 방법의 단계 또는 작용이 인용된 순서로만 제한되지 않는 것으로 또한 이해하여야 한다.

청구범위 및 상기 명세서에서, "포함하는", "포함한", "수반하는", "가지는", "함유하는", "관여하는", "갖는" "~로 구성되는" 등과 같은 모든 이행 어구는 제한이 없는 것으로 이해하여야 하며, 즉 제한없이 포함하는 의미이다. 이행 어구 "~로 구성된다" 및 "~로 실질적으로 구성되는" 만이 각각 미국 특허청의 특허 심사 절차 설명서 2111.03절에 나타낸 바와 같은 제한 또는 반제한 이행 어구이다.

용어 "공동-투여" 및 "공동-투여하는"은 치료제가 환자에 어느 정도 동시에 존재하기만 하면, 동시 투여(동시에 2 이상의 치료제 투여) 및 시간차 투여(추가의 치료제 또는 치료제들의 투여와 상이한 시기에 하나 이상의 치료제 투여) 모두를 가리킨다.

용어 "수화물"은 화합물의 생물학적 효과를 보유하며, 하나 이상의 물 분자를 가지는 명시된 화합물의 약학적으로 허용가능한 형태를 의미한다.

각 표현, 예를 들면 알킬, m, n 등의 정의는 임의의 구조에서 복수개 존재하는 경우 동일 구조 어디에서도 독립적인 정의이다.

"치환" 또는 "~로 치환된"은 치환이 치환된 원자 및 치환기의 허용되는 원자가에 따라 일어나고, 치환으로 안정한 화합물, 예를 들어 재배열, 폐환, 제거, 또는 다른 반응에 의한 바와 같은 변환이 자발적으로 일어나지 않는 화합물이 생성된다는 단서를 내포함을 포함한다.

용어 "치환된"은 또한 유기 화합물의 모든 허용되는 치환기를 포함하는 것으로 고려된다. 넓은 측면에서, 허용되는 치환기는 유기 화합물의 비환식 및 환식, 분지형 및 비분지형, 탄소환식 및 복소환식, 방향족 및 비방향족 치환기를 포함한다. 예시적인 치환기는, 예를 들어, 후술하는 것을 포함한다. 허용되는 치환기는 적절한 유기 화합물에 대해 하나 이상일 수 있으며, 동일하거나 상이할 수 있다. 본 발명의 목적상, 질소와 같은 헤테로원자는 수소 치환기 및/또는 헤테로원자의 원자가를 만족하는 본 원에 기술된 유기 화합물의 임의의 허용되는 치환기를 가질 수 있다. 본 발명을 어떤 식으로든 유기 화합물의 허용되는 치환기로 제한할 의도는 없다.

후술하는 임의의 기에 첨부된 용어 "저급"은 기가 7개 미만의 탄소(즉, 6개 또는 그 미만의 탄소)를 함유함을 의미한다. 예를 들어 "저급 알킬"이란 1-6개의 탄소를 가지는 알킬기를 가리키며, "저급 알케닐"은 2-6개의 탄소를 가지는 알케닐기를 가리킨다.

본 원에 사용된 용어 "불포화"는 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합 또는 탄소-탄소 삼중 결합을 가지는 화합물 및/또는 기를 가리킨다.

본 원에 사용된 용어 "지방족"은 선형 또는 분지형이나 환식이 아닌(또한 "비환식" 또는 "개방쇄" 기로도 알려짐) 화합물 및/또는 기를 가리킨다.

본 원에 사용된 용어 "환식"은 하나의 환, 또는 2 이상의 환(예를 들면, 스피로, 융합, 브리지)을 가지는 화합물 및/또는 기를 가리킨다.

용어 "방향족"은 4n+2개의 전자를 함유하고, 여기서 n은 정수의 절대값을 가지는 사이클적으로 접합된 분자 부분을 특징으로 하는 평면 또는 다환식 구조를 가리킨다. 융합 또는 결합된 환을 함유하는 방향족 분자는 또한 이환식 방향족 환으로서 칭해진다. 예를 들어, 탄화수소 환 구조중에 헤테로원자를 함유하는 이환식 방향족 환은 이환식 헤테로아릴 환으로 칭해진다.

본 원에 사용된 용어 "탄화수소"는 수소 및 탄소만으로 이루어진 유기 화합물을 가리킨다.

본 발명의 목적상, 화학 요소는 원소 주기율표, CAS version, Handbook of Chemistry and Physics, 67th Ed., 1986-87, 표지 뒷면에 따라 분류된다.

본 원에 사용된 용어 "헤테로원자"는 당업계에서 인정된 것으로서, 탄소 또는 수소 외 임의 원소의 원자를 가리킨다. 예시적인 헤테로원자는 붕소, 질소, 산소, 인, 황 및 셀레늄을 포함한다.

용어 "알킬"은 1 내지 20개의 탄소 원자를 함유하는 지방족 탄화수소 라디칼을 의미한다. 일 실시양태에서, 용어 "알킬"은 1 내지 15개의 탄소 원자를 함유하는 지방족 탄화수소 라디칼을 가리킨다. 일 실시양태에서, 용어 "알킬"은 1 내지 10개의 탄소 원자를 함유하는 지방족 탄화수소 라디칼을 가리킨다. 일 실시양태에서, 용어 "알킬"은 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 지방족 탄화수소 라디칼을 가리킨다. 알킬의 대표적인 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, sec-부틸, 이소-부틸, tert-부틸, n-펜틸, 이소펜틸, 네오펜틸, n-헥실, 2-메틸사이클로펜틸, 1-(1-에틸사이클로프로필)에틸 및 1-사이클로헥실에틸을 포함하나, 이들에만 한정되지는 않는다.

용어 "사이클로알킬"은 3 내지 15개의 탄소 원자를 함유하는 환식 탄화수소 라디칼을 가리킨다. 일 실시양태에서, 용어 "사이클로알킬"은 3 내지 10개의 탄소 원자를 함유하는 환식 탄화수소 라디칼을 가리킨다. 일 실시양태에서, 용어 "사이클로알킬"은 3 내지 7개의 탄소 원자를 함유하는 환식 탄화수소 라디칼을 가리킨다. 사이클로알킬의 대표적인 예는 사이클로프로필 및 사이클로부틸을 포함하나, 이들에만 한정되지는 않는다.

본 원에 사용된 용어 "알케닐"은 2 내지 10개의 탄소 원자 및 두개의 수소가 제거되어 형성된 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 라디칼을 의미한다. 알케닐의 대표적인 예는 에테닐, 2-프로페닐, 2-메틸-2-프로페닐, 3-부테닐, 4-펜테닐, 5-헥세닐, 2-헵테닐, 2-메틸-1-헵테닐 및 3-데세닐을 포함하나, 이들에만 한정되지는 않는다.

본 원에 사용된 용어 "알키닐"은 2 내지 10개의 탄소 원자 및 적어도 하나의 탄소-탄소 삼중 결합을 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 라디칼을 의미한다. 알키닐의 대표적인 예는 아세틸레닐, 1-프로피닐, 2-프로피닐, 3-부티닐, 2-펜티닐 및 1-부티닐을 포함하나, 이들에만 한정되지는 않는다.

용어 "알킬렌"은 당업계에서 인정된 것으로서, 상기 정의된 바와 같이 알킬기의 두 수소 원자가 제거되어 형성된 디라디칼을 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "카르보사이클릴"은 완전 포화되거나 하나 이상의 불포화 결합을 갖고 오해할 여지를 없애기 위해 불포화도로 방향족 환 시스템(예를 들면, 페닐)으로 되지 않는 탄소 원자수 3 내지 12의 단환식 또는 다환식(예를 들면, 이환식, 삼환식 등) 탄화수소 라디칼을 의미한다. 카르보사이클릴기의 예로는 1-사이클로프로필, 1-사이클로부틸, 2-사이클로펜틸, 1-사이클로펜테닐, 3-사이클로헥실, 1-사이클로헥세닐 및 2-사이클로펜테닐메틸을 들 수 있다.

본 원에 사용된 용어 "헤테로사이클릴"은 비-방향족 환 시스템의 라디칼을 가리키며, 완전 포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 갖고 오해할 여지를 없애기 위해 불포화도로 방향족 환 시스템으로 되지 않으며 적어도 하나의 헤테로원자, 예컨대 질소, 산소, 또는 황을 포함하여 3 내지 12개의 원자를 가지는 단환식, 이환식 및 삼환식 환을 포함하나, 이들에만 한정되지는 않는다. 예시적인 것으로 복소환식 환의 예로 다음을 들 수 있으나, 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석하여서는 안된다: 아지리디닐, 아지리닐, 옥시라닐, 티이라닐, 티이레닐, 디옥시라닐, 디아지리닐, 아제틸, 옥세타닐, 옥세틸, 티에타닐, 티에틸, 디아제티디닐, 디옥세타닐, 디옥세테닐, 디티에타닐, 디티에틸, 푸릴, 디옥살라닐, 피롤릴, 옥사졸릴, 티아졸릴, 이미다졸릴, 옥사디아졸릴, 티아디아졸릴, 트리아졸릴, 트리아지닐, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 티오페닐, 피라졸릴, 테트라졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 트리아지닐, 테트라지닐, 퀴놀리닐, 이소퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 퀴나졸리닐, 피리도피라지닐, 벤족사졸릴, 벤조티오페닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조티아졸릴, 벤족사디아졸릴, 벤즈티아디아졸릴, 인돌릴, 벤즈트리아졸릴, 나프티리디닐, 아제핀, 아제티디닐, 모르폴리닐, 옥소피페리디닐, 옥소피롤리디닐, 피페라지닐, 피페리디닐, 피롤리디닐, 퀴니클루디닐, 티오모르폴리닐, 테트라하이드로피라닐 및 테트라하이드로푸라닐. 본 발명의 헤테로사이클릴기는 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로, 할로알킬, 플루오로알킬, 하이드록시, 알콕시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 카르보사이클릴옥시, 헤테로사이클릴옥시, 할로알콕시, 플루오로알킬옥시, 술프히드릴, 알킬티오, 할로알킬티오, 플루오로알킬티오, 알케닐티오, 알키닐티오, 술폰산, 알킬술포닐, 할로알킬술포닐, 플루오로알킬술포닐, 알케닐술포닐, 알키닐술포닐, 알콕시술포닐, 할로알콕시술포닐, 플루오로알콕시술포닐, 알케닐옥시술포닐, 알키닐옥시술포닐, 아미노술포닐, 술핀산, 알킬술피닐, 할로알킬술피닐, 플루오로알킬술피닐, 알케닐술피닐, 알키닐술피닐, 알콕시술피닐, 할로알콕시술피닐, 플루오로알콕시술피닐, 알케닐옥시술피닐, 알키닐옥시술피닐, 아미노술피닐, 포르밀, 알킬카르보닐, 할로알킬카르보닐, 플루오로알킬카르보닐, 알케닐카르보닐, 알키닐카르보닐, 카르복시, 알콕시카르보닐, 할로알콕시카르보닐, 플루오로알콕시카르보닐, 알케닐옥시카르보닐, 알키닐옥시카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 할로알킬카르보닐옥시, 플루오로알킬카르보닐옥시, 알케닐카르보닐옥시, 알키닐카르보닐옥시, 알킬술포닐옥시, 할로알킬술포닐옥시, 플루오로알킬술포닐옥시, 알케닐술포닐옥시, 알키닐술포닐옥시, 할로알콕시술포닐옥시, 플루오로알콕시술포닐옥시, 알케닐옥시술포닐옥시, 알키닐옥시술포닐옥시, 알킬술피닐옥시, 할로알킬술피닐옥시, 플루오로알킬술피닐옥시, 알케닐술피닐옥시, 알키닐술피닐옥시, 알콕시술피닐옥시, 할로알콕시술피닐옥시, 플루오로알콕시술피닐옥시, 알케닐옥시술피닐옥시, 알키닐옥시술피닐옥시, 아미노술피닐옥시, 아미노, 아미도, 아미노술포닐, 아미노술피닐, 시아노, 니트로, 아지도, 포스피닐, 포스포릴, 실릴, 실릴옥시, 및 알킬렌 부분(예를 들면, 메틸렌)을 통해 헤테로사이클릴기에 결합된 상기 임의의 치환기로 구성된 군에서 독립적으로 선택되는 0, 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 치환된다.

본 원에 사용된 용어 "아릴"은 페닐, 나프틸, 페난트레닐 또는 안트라세닐기를 의미한다. 본 발명의 아릴기는 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로, 할로알킬, 플루오로알킬, 하이드록시, 알콕시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 카르보사이클릴옥시, 헤테로사이클릴옥시, 할로알콕시, 플루오로알킬옥시, 술프히드릴, 알킬티오, 할로알킬티오, 플루오로알킬티오, 알케닐티오, 알키닐티오, 술폰산, 알킬술포닐, 할로알킬술포닐, 플루오로알킬술포닐, 알케닐술포닐, 알키닐술포닐, 알콕시술포닐, 할로알콕시술포닐, 플루오로알콕시술포닐, 알케닐옥시술포닐, 알키닐옥시술포닐, 아미노술포닐, 술핀산, 알킬술피닐, 할로알킬술피닐, 플루오로알킬술피닐, 알케닐술피닐, 알키닐술피닐, 알콕시술피닐, 할로알콕시술피닐, 플루오로알콕시술피닐, 알케닐옥시술피닐, 알키닐옥시술피닐, 아미노술피닐, 포르밀, 알킬카르보닐, 할로알킬카르보닐, 플루오로알킬카르보닐, 알케닐카르보닐, 알키닐카르보닐, 카르복시, 알콕시카르보닐, 할로알콕시카르보닐, 플루오로알콕시카르보닐, 알케닐옥시카르보닐, 알키닐옥시카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 할로알킬카르보닐옥시, 플루오로알킬카르보닐옥시, 알케닐카르보닐옥시, 알키닐카르보닐옥시, 알킬술포닐옥시, 할로알킬술포닐옥시, 플루오로알킬술포닐옥시, 알케닐술포닐옥시, 알키닐술포닐옥시, 할로알콕시술포닐옥시, 플루오로알콕시술포닐옥시, 알케닐옥시술포닐옥시, 알키닐옥시술포닐옥시, 알킬술피닐옥시, 할로알킬술피닐옥시, 플루오로알킬술피닐옥시, 알케닐술피닐옥시, 알키닐술피닐옥시, 알콕시술피닐옥시, 할로알콕시술피닐옥시, 플루오로알콕시술피닐옥시, 알케닐옥시술피닐옥시, 알키닐옥시술피닐옥시, 아미노술피닐옥시, 아미노, 아미도, 아미노술포닐, 아미노술피닐, 시아노, 니트로, 아지도, 포스피닐, 포스포릴, 실릴, 실릴옥시, 및 알킬렌 부분(예를 들면, 메틸렌)을 통해 헤테로사이클릴기에 결합된 상기 임의의 치환기로 구성된 군에서 독립적으로 선택되는 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 임의로 치환될 수 있다.

용어 "아릴렌"은 당업계에서 인정된 것으로서, 본 원에서는 상기 정의된 바와 같은 아릴 환의 두 수소 원자를 제거하여 얻은 디라디칼을 가리키기 위해 사용된다.

본 원에 사용된 용어 "아릴알킬" 또는 "아르알킬"은 본 원에 정의된 바와 같은 알킬기를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 아릴기를 의미한다. 아르알킬의 대표적인 예는 벤질, 2-페닐에틸, 3-페닐프로필, 및 2-나프트-2-일에틸을 포함하나, 이들에만 한정되지는 않는다.

본 원에 사용된 용어 "바이아릴"은 아릴-치환된 아릴, 아릴-치환된 헤테로아릴, 헤테로아릴-치환된 아릴 또는 헤테로아릴-치환된 헤테로아릴을 의미하며, 여기에서 아릴 및 헤테로아릴은 본 원에 정의된 바와 같다. 대표적인 예는 4-(페닐)페닐 및 4-(4-메톡시페닐)피리디닐을 포함한다.

본 원에 사용된 용어 "융합된 바이사이클릴"은 두 환이 오르토-융합되고, 각 환이 두 융합 원자를 포함하여 총 4, 5, 6 또는 7개의 원자(즉, 탄소 및 헤테로원자)를 포함하며, 각 환이 완전히 포화될 수 있고, 하나 이상의 불포화 단위를 함유할 수 있거나, 또는 완전히 불포화(예를 들면, 일부의 경우, 방향족)될 수 있는 이환식 환 시스템의 라디칼을 의미한다. 오해할 여지를 없애기 위해, 융합된 바이사이클릴내 불포화도는 아릴 또는 헤테로아릴 부분으로 이어지지 않는다.

본 원에 사용된 용어 "헤테로아릴"은 적어도 하나의 헤테로원자, 예컨대 질소, 산소, 또는 황을 포함하여 3 내지 12개의 원자를 갖는 단환식, 이환식 및 삼환식 환을 포함하나 이들로 한정되지는 않는 방향족 환 시스템의 라디칼을 포함한다. 이들로는 아미노벤즈이미다졸, 벤즈이미다졸, 아자인돌릴, 벤조(b)티에닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조푸라닐, 벤족사졸릴, 벤조티아졸릴, 벤조티아디아졸릴, 벤조트리아졸릴, 벤족사디아졸릴, 푸라닐, 이미다졸릴, 이미다조피리디닐, 인돌릴, 인돌리닐, 인다졸릴, 이소인돌리닐, 이속사졸릴, 이소티아졸릴, 이소퀴놀리닐, 옥사디아졸릴, 옥사졸릴, 퓨리닐, 피라닐, 피라지닐, 피라졸릴, 피리디닐, 피리미디닐, 피롤릴, 피롤로[2,3-d]피리미디닐, 피라졸로[3,4-d]피리미디닐, 퀴놀리닐, 퀴나졸리닐, 트리아졸릴, 티아졸릴, 티오페닐, 테트라하이드로인돌릴, 테트라졸릴, 티아디아졸릴, 티에닐, 티오모르폴리닐, 트리아졸릴 또는 트로파닐이 예시될 수 있으나, 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석하여서는 안된다. 본 발명의 헤테로아릴기는 알킬, 알케닐, 알키닐, 할로, 할로알킬, 플루오로알킬, 하이드록시, 알콕시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 카르보사이클릴옥시, 헤테로사이클릴옥시, 할로알콕시, 플루오로알킬옥시, 술프히드릴, 알킬티오, 할로알킬티오, 플루오로알킬티오, 알케닐티오, 알키닐티오, 술폰산, 알킬술포닐, 할로알킬술포닐, 플루오로알킬술포닐, 알케닐술포닐, 알키닐술포닐, 알콕시술포닐, 할로알콕시술포닐, 플루오로알콕시술포닐, 알케닐옥시술포닐, 알키닐옥시술포닐, 아미노술포닐, 술핀산, 알킬술피닐, 할로알킬술피닐, 플루오로알킬술피닐, 알케닐술피닐, 알키닐술피닐, 알콕시술피닐, 할로알콕시술피닐, 플루오로알콕시술피닐, 알케닐옥시술피닐, 알키닐옥시술피닐, 아미노술피닐, 포르밀, 알킬카르보닐, 할로알킬카르보닐, 플루오로알킬카르보닐, 알케닐카르보닐, 알키닐카르보닐, 카르복시, 알콕시카르보닐, 할로알콕시카르보닐, 플루오로알콕시카르보닐, 알케닐옥시카르보닐, 알키닐옥시카르보닐, 알킬카르보닐옥시, 할로알킬카르보닐옥시, 플루오로알킬카르보닐옥시, 알케닐카르보닐옥시, 알키닐카르보닐옥시, 알킬술포닐옥시, 할로알킬술포닐옥시, 플루오로알킬술포닐옥시, 알케닐술포닐옥시, 알키닐술포닐옥시, 할로알콕시술포닐옥시, 플루오로알콕시술포닐옥시, 알케닐옥시술포닐옥시, 알키닐옥시술포닐옥시, 알킬술피닐옥시, 할로알킬술피닐옥시, 플루오로알킬술피닐옥시, 알케닐술피닐옥시, 알키닐술피닐옥시, 알콕시술피닐옥시, 할로알콕시술피닐옥시, 플루오로알콕시술피닐옥시, 알케닐옥시술피닐옥시, 알키닐옥시술피닐옥시, 아미노술피닐옥시, 아미노, 아미도, 아미노술포닐, 아미노술피닐, 시아노, 니트로, 아지도, 포스피닐, 포스포릴, 실릴, 실릴옥시, 및 알킬렌 부분(예를 들면, 메틸렌)을 통해 헤테로아릴기에 결합된 상기 임의의 치환기로 구성된 군에서 독립적으로 선택되는 0, 1, 2, 3, 4 또는 5개의 치환기로 치환된다.

용어 "헤테로아릴렌"은 당업계에서 인정된 것으로서, 본 원에 사용되는 경우 상기 정의된 바와 같은 헤테로아릴 환의 두 수소 원자를 제거하여 얻은 디라디칼을 가리킨다.

본 원에 사용된 용어 "헤테로아릴알킬" 또는 "헤테로아르알킬"은 본 원에 정의된 바와 같은 알킬기를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 헤테로아릴을 의미한다. 헤테로아릴알킬의 대표적인 예로 피리딘-3-일메틸 및 2-(티엔-2-일)에틸이 포함되나, 이들에만 한정되지는 않는다.

용어 "할로" 또는 "할로겐"은 -Cl, -Br, -I 또는 -F를 의미한다.

용어 "할로알킬"은 적어도 하나의 수소가 본 원에 정의된 바와 같은 할로겐으로 대체된 본 원에 정의된 바와 같은 알킬기를 의미한다. 할로알킬의 대표적인 예로 클로로메틸, 2-플루오로에틸, 트리플루오로메틸, 펜타플루오로에틸, 및 2-클로로-3-플루오로펜틸이 포함되나, 이들에만 한정되지는 않는다.

용어 "플루오로알킬"은 일부 또는 모든 수소가 불소로 대체된 본 원에 정의된 바와 같은 알킬기를 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "할로알킬렌"은 상기 정의된 바와 같은 할로알킬기에서 두개의 수소 원자를 제거하여 얻은 디라디칼을 가리킨다.

본 원에 사용된 용어 "하이드록시"는 -OH기를 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "알콕시"는 산소 원자를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 알킬기를 의미한다. 알콕시의 대표적인 예로 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 2-프로폭시, 부톡시, tert-부톡시, 펜틸옥시, 및 헥실옥시가 포함되나, 이들에만 한정되지는 않는다. 용어 "알케닐옥시", "알키닐옥시", "카르보사이클릴옥시", 및 "헤테로사이클릴옥시"도 마찬가지로 정의된다.

본 원에 사용된 용어 "할로알콕시"는 적어도 하나의 수소가 본 원에 정의된 바와 같은 할로겐으로 대체된 본 원에 정의된 바와 같은 알콕시기를 의미한다. 할로알콕시의 대표적인 예로 클로로메톡시, 2-플루오로에톡시, 트리플루오로메톡시, 및 펜타플루오로에톡시가 포함되나, 이들에만 한정되지는 않는다. 용어 "플루오로알킬옥시"도 마찬가지로 정의된다.

본 원에 사용된 용어 "아릴옥시"는 산소를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 아릴기를 의미한다. 본 원에 사용된 용어 "헤테로아릴옥시"는 산소를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 헤테로아릴기를 의미한다. 용어 "헤테로아릴옥시"도 마찬가지로 정의된다.

본 원에 사용된 용어 "아릴알콕시" 또는 "아릴알킬옥시"는 산소를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 아릴알킬기를 의미한다. 용어 "헤테로아릴알콕시"도 마찬가지로 정의된다. 아릴옥시 및 헤테로아릴알콕시의 대표적인 예로 2-클로로페닐메톡시, 3-트리플루오로메틸페닐에톡시, 및 2,3-디메틸피리디닐메톡시가 포함되나, 이들에만 한정되지는 않는다.

본 원에 사용된 용어 "술프히드릴" 또는 "티오"는 -SH기를 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "알킬티오"는 황을 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 알킬기를 의미한다. 알킬티오의 대표적인 예로 메틸티오, 에틸티오, tert-부틸티오, 및 헥실티오가 포함되나, 이들에만 한정되지는 않는다. 용어 "할로알킬티오", "플루오로알킬티오", "알케닐티오", "알키닐티오", "카르보사이클릴티오", 및 "헤테로사이클릴티오"도 마찬가지로 정의된다.

본 원에 사용된 용어 "아릴티오"는 황을 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 아릴기를 의미한다. 용어 "헤테로아릴티오"도 마찬가지로 정의된다.

본 원에 사용된 용어 "아릴알킬티오" 또는 "아르알킬티오"는 황을 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 아릴알킬기를 의미한다. 용어 "헤테로아릴알킬티오"도 마찬가지로 정의된다.

본 원에 사용된 용어 "술포닐"은 -S(=0)₂-기를 가리킨다.

본 원에 사용된 용어 "술폰산"은 -S(=0)₂OH를 가리킨다.

본 원에 사용된 용어 "알킬술포닐"은 본 원에 정의된 바와 같은 술포닐기를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 알킬기를 의미한다. 알킬술포닐의 대표적인 예로 메틸술포닐 및 에틸술포닐이 포함되나, 이들에만 한정되지는 않는다. 용어 "할로알킬술포닐", "플루오로알킬술포닐", "알케닐술포닐", "알키닐술포닐", "카르보사이클릴술포닐", "헤테로사이클릴술포닐", "아릴술포닐", "아르알킬술포닐", "헤테로아릴술포닐" 및 "헤테로아르알킬술포닐"도 마찬가지로 정의된다.

본 원에 사용된 용어 "알콕시술포닐"은 본 원에 정의된 바와 같은 술포닐기를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 알콕시기를 의미한다. 알콕시술포닐의 대표적인 예로 메톡시술포닐, 에톡시술포닐 및 프로폭시술포닐이 포함되나, 이들에만 한정되지는 않는다. 용어 "할로알콕시술포닐", "플루오로알콕시술포닐", "알케닐옥시술포닐", "알키닐옥시술포닐", "카르보사이클릴옥시술포닐", "헤테로사이클릴옥시술포닐", "아릴옥시술포닐", "아르알킬옥시술포닐", "헤테로아릴옥시술포닐" 및 "헤테로아르알킬옥시술포닐"도 마찬가지로 정의된다.

용어 트리플릴, 토실, 메실, 및 노나플릴은 당업계에서 인정된 것으로서, 각각 트리플루오로메탄술포닐, p-톨루엔술포닐, 메탄술포닐, 및 노나플루오로부탄술포닐기를 가리킨다. 용어 트리플레이트, 토실레이트, 메실레이트, 및 노나플레이트는 당업계에서 인정된 것으로서 각각 상기 기를 함유하는 트리플루오로메탄술포네이트 에스테르, p-톨루엔술포네이트 에스테르, 메탄술포네이트 에스테르, 및 노나플루오로부탄술포네이트 에스테르 작용기 및 분자를 가리킨다.

본 원에 사용된 용어 "아미노술포닐"은 술포닐기를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 아미노기를 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "술피닐"은 -S(=0)-기를 가리킨다. 술피닐기는 술포닐기에 대해 상기 정의된 바와 같다. 본 원에 사용된 용어 "술핀산"은 -S(=0)OH를 가리킨다.

용어 "옥시"는 -O-기를 가리킨다.

본 원에 사용된 용어 "카르보닐"은 -C(=0)-기를 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "티오카르보닐"은 -C(=S)-기를 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "포르밀"은 -C(=0)H기를 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "알킬카르보닐"은 본 원에 정의된 바와 같은 카르보닐기를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 알킬기를 의미한다. 알킬카르보닐의 대표적인 예로 아세틸, 1-옥소프로필, 2,2-디메틸-1-옥소프로필, 1-옥소부틸, 및 1-옥소펜틸이 포함되나, 이들에만 한정되지는 않는다. 용어 "할로알킬카르보닐", "플루오로알킬카르보닐", "알케닐카르보닐", "알키닐카르보닐", "카르보사이클릴카르보닐", "헤테로사이클릴카르보닐", "아릴카르보닐", "아르알킬카르보닐", "헤테로아릴카르보닐", 및 "헤테로아르알킬카르보닐"도 마찬가지로 정의된다.

본 원에 사용된 용어 "카르복시"는 -C0₂H기를 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "알콕시카르보닐"은 본 원에 정의된 바와 같은 카르보닐기를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 알콕시기를 의미한다. 알콕시카르보닐의 대표적인 예로 메톡시카르보닐, 에톡시카르보닐, 및 tert-부톡시카르보닐이 포함되나, 이들에만 한정되지는 않는다. 용어 "할로알콕시카르보닐", "플루오로알콕시카르보닐", "알케닐옥시카르보닐", "알키닐옥시카르보닐", "카르보사이클릴옥시카르보닐", "헤테로사이클릴옥시카르보닐", "아릴옥시카르보닐", "아르알킬옥시카르보닐", "헤테로아릴옥시카르보닐", 및 "헤테로아르알킬옥시카르보닐"도 마찬가지로 정의된다.

본 원에 사용된 용어 "알킬카르보닐옥시"는 산소 원자를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 알킬카르보닐기를 의미한다. 알킬카르보닐옥시의 대표적인 예로 아세틸옥시, 에틸카르보닐옥시, 및 tert-부틸카르보닐옥시가 포함되나, 이들에만 한정되지는 않는다. 용어 "할로알킬카르보닐옥시", "플루오로알킬카르보닐옥시", "알케닐카르보닐옥시", "알키닐카르보닐옥시", "카르보사이클릴카르보닐옥시", "헤테로사이클릴카르보닐옥시", "아릴카르보닐옥시", "아르알킬카르보닐옥시", "헤테로아릴카르보닐옥시", 및 "헤테로아르알킬카르보닐옥시"도 마찬가지로 정의된다.

본 원에 사용된 용어 "알킬술포닐옥시"는 산소 원자를 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 알킬술포닐기를 의미한다. 용어 "할로알킬술포닐옥시", "플루오로알킬술포닐옥시", "알케닐술포닐옥시", "알키닐술포닐옥시", "카르보사이클릴술포닐옥시", "헤테로사이클릴술포닐옥시", "아릴술포닐옥시", "아르알킬술포닐옥시", "헤테로아릴술포닐옥시", "헤테로아르알킬술포닐옥시", "할로알콕시술포닐옥시", "플루오로알콕시술포닐옥시", "알케닐옥시술포닐옥시", "알키닐옥시술포닐옥시", "카르보사이클릴옥시술포닐옥시", "헤테로사이클릴옥시술포닐옥시", "아릴옥시술포닐옥시", "아르알킬옥시술포닐옥시", "헤테로아릴옥시술포닐옥시" 및 "헤테로아르알킬옥시술포닐옥시"도 마찬가지로 정의된다.

본 원에 사용된 용어 "아미노"는 -NH₂, 및 하나의 수소 또는 수소 둘 다가 독립적으로 상기 정의된 바와 같은 알킬, 할로알킬, 플루오로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 아르알킬, 헤테로아릴, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐, 할로알킬카르보닐, 플루오로알킬카르보닐, 알케닐카르보닐, 알키닐카르보닐, 카르보사이클릴카르보닐, 헤테로사이클릴카르보닐, 아릴카르보닐, 아르알킬카르보닐, 헤테로아릴카르보닐, 헤테로아르알킬카르보닐, 술포닐 및 술피닐기로 구성된 군에서 선택되는 치환기로 대체되었거나; 또는 두 수소가 함께 알킬렌기로 대체된(질소를 함유하는 환을 형성) 그의 치환된 유도체를 가리킨다. 대표적인 예는 메틸아미노, 아세틸아미노, 및 디메틸아미노를 포함하나, 이들에만 한정되지는 않는다.

본 원에 사용된 용어 "아미도"는 카보닐을 통해 모 분자 부분에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 아미노기를 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "시아노"는 -C≡N기를 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "니트로"는 -N0₂기를 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "아지도"는 -N₃기를 의미한다.

본 원에 사용된 용어 "포스피닐" 또는 "포스피노"는 -PH₃, 및 1, 2 또는 3개의 수소가 독립적으로 알킬, 할로알킬, 플루오로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 아르알킬, 헤테로아릴, 헤테로아르알킬, 알콕시, 할로알콕시, 플루오로알킬옥시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 카르보사이클릴옥시, 헤테로사이클릴옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로아르알킬옥시, 및 아미노로 구성된 군에서 선택되는 치환기로 대체된 그의 치환된 유도체를 포함한다.

본 원에 사용된 용어 "포스포릴"은 -P(=0)OH₂, 및 하나의 하이드록실 또는 하이드록실 둘 다가 알킬, 할로알킬, 플루오로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 아르알킬, 헤테로아릴, 헤테로아르알킬, 알콕시, 할로알콕시, 플루오로알킬옥시, 알케닐옥시, 알키닐옥시, 카르보사이클릴옥시, 헤테로사이클릴옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 헤테로아릴옥시, 헤테로아르알킬옥시, 및 아미노로 구성된 군에서 선택되는 치환기로 대체된 그의 치환된 유도체를 포함한다.

본 원에 사용된 용어 "실릴"은 H₃Si-, 및 1, 2 또는 3개의 수소가 독립적으로 알킬, 할로알킬, 플루오로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 아르알킬, 헤테로아릴, 및 헤테로아르알킬로 구성된 군에서 선택되는 치환기로 대체된 그의 치환된 유도체를 포함한다. 대표적인 예는 트리메틸실릴(TMS), tert-부틸디페닐실릴(TBDPS), tert-부틸디메틸실릴(TBS/TBDMS), 트리이소프로필실릴(TIPS), 및 [2-(트리메틸실릴)에톡시]메틸(SEM)을 포함한다.

본 원에 사용된 용어 "실릴옥시"는 산소 원자를 통해 모 분자에 부착된 본 원에 정의된 바와 같은 실릴기를 의미한다.

약어 Me, Et, Ph, Tf, Nf, Ts, 및 Ms는 각각 메틸, 에틸, 페닐, 트리플루오로메탄술포닐, 노나플루오로부탄술포닐, p-톨루엔술포닐 및 메탄술포닐을 나타낸다. 당업계의 숙련자들이 유기 화학에서 사용하는 약어에 대한 더 많은 포괄적인 목록은 [Journal of Organic Chemistry]의 각 권 첫 호에 나타나 있으며; 이 목록은 전형적으로 표준 약어 목록의 제목이 달린 표로 제시되었다.

본 원에 사용된 용어 "치료"는 병태를 예방 또는 관리, 및/또는 개선하기 위해 본 원에 기재된 하나 이상의 화합물을 대상에 투여 및/또는 적용하는 것을 포함한다. 이러한 목적의 "치료"는 치유를 제공할 수 있으나, 반드시 그럴 필요는 없으며; 그보다 "치료"는 병태의 관리 형태일 수 있다. 본 원에 기재된 화합물이 암을 비롯하여 원치 않는 세포 증식을 치료하기 위해 사용되는 경우, "치료"는 정상 세포는 최소한으로 파괴하면서 바람직하지 않은 세포 증식을 부분적으로 또는 완전히 파괴하는 것을 포함한다. 세포 수준에서 암 세포를 비롯하여 원치 않는 급속한 세포 증식을 치료하기 위한 바람직한 기전은 아포프토시스이다.

본 원에 사용된 용어 "예방"은 임상적으로 분명한 질환 진행의 발현을 완전히 예방 또는 저속화시키거나, 또는 위험이 있는 개체에서 전임상적으로 분명한 질환 단계의 발현을 예방 또는 저속화시키는 것을 포함한다. 이는 질환 발생의 위험이 있는 개체의 예방적 치료를 포함한다.

치료 목적의 용어 "대상"은 장애로 진단되었거나, 그의 증상을 가지거나, 또는 그의 발생 위험이 있는 모든 인간 또는 동물 대상을 포함한다. 예방 방법을 위한 대상은 모든 인간 또는 동물 대상이다. 예방 목적으로 설명하자면, 대상은 원치 않는 신속한 세포 증식, 예컨대 암으로 특정되는 장애의 위험이 있거나, 유전적으로 그러한 장애에 취약한 인간 대상일 수 있다. 대상은 발암물질에 노출됨으로써 위험에 처할 수 있고, 유전적으로 원치 않는 신속한 세포 증식으로 특정되는 장애에 취약할 수 있으며, 그밖에 다른 것일 수 있다. 인간 치료에 유용한 것 외에, 본 원에 기재된 화합물은 또한 개, 고양아, 말, 소, 양 및 돼지를 예로 들 수 있으나, 이들로만 한정되지는 않는 반려 동물 및 가축을 비롯한 포유동물의 수의과적 치료에 유용하다.

별도로 언급이 없으면, 재조합 및 합성 폴리펩티드, 융합 단백질, 항체 또는 그의 항원-결합 단편 생성, 핵산 서열 조작, 형질전환 세포의 생성 등에 표준 방법이 사용될 수 있다. 이러한 기술은 당업자들에게 알려져 있다. 참조예: Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual 2nd Ed. (Cold Spring Harbor, N.Y., 1989); F. M. Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology (Green Publishing Associates, Inc. and John Wiley & Sons, Inc., New York).

용어 "DOT1L 폴리펩티드"는 전장 폴리펩티드의 기능성 단편 및 실질적으로 유사하거나 실질적으로 동일한 아미노산 서열을 갖는(적어도 약 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 그 이상의 아미노산 서열 유사성 또는 동일성) 이들의 기능성 균등물을 포함하며, 여기에서, 기능성 단편 또는 기능성 균등물은 천연 폴리펩티드의 기능성을 하나 이상 보유한다.

"기능성"이란 폴리펩티드(또는 핵산)가 천연 폴리펩티드(또는 핵산)의 하나 이상의 생물학적 성질에 대해 동일하거나 실질적으로 유사한 활성, 예를 들어 천연 폴리펩티드(또는 핵산)의 활성의 적어도 약 50%, 75%, 85%, 90%, 95% 또는 98% 또는 그 이상을 가짐을 의미한다.

용어 "조절하다(modulate)" (및 문법적 동의어)는 활성의 증가 또는 감소를 의미한다. 특정 실시양태에서, 용어 "증가하다" 또는 "향상되다" (및 문법적 동의어)는 적어도 약 25%, 50%, 75%, 2-배, 3-배, 5-배, 10-배, 15-배, 20-배 또는 그 이상의 상승을 의미한다. 특정 실시양태에서, 용어 "저하된다" 또는 "감소하다" (및 문법적 동의어)는 적어도 약 25%, 40%, 50%, 60%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% 또는 그 이상의 하락을 의미한다. 일부 실시양태에서는, 제시된 활성, 물질 또는 다른 파라미터가 검출되지 않는다. 구체적으로, DOT1L의 저해제가 제공된다.

용어 "약력학적 마커"는 약물을 수용하는 환자에서 측정될 수 있는 약물 반응의 분자 마커를 가리킨다. 마커는 약물 표적 조절의 직접적 척도이며, 용량 반응에 정량적인 변화를 나타낼 수 있다. DOT1L 저해제에 대한 잠재적 약력학적 마커는 질환 또는 대용 조직에서 히스톤 H3K79 메틸화의 수준일 수 있다.

구체예

이하, 본 발명이 일반적으로 설명될 것이며, 본 발명의 특정 측면 및 실시양태를 설명할 목적으로만 포함되고 본 발명을 한정할 의도로 제공되지 않는 하기 실시예를 참조함으로써 보다 쉽게 이해될 것이다.

약어

약어 정의

AA 아세트산암모늄

Ac 아세틸

ACN 아세토니트릴

AcOH 아세트산

atm 대기

Bn 벤질

BOC tert-부톡시 카르보닐

BOP (벤조트리아졸-1-일옥시)트리스(디메틸아미노)포스포늄

헥사플루오로포스페이트

Cbz 벤질옥시 카르보닐

COMU (1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노옥시)디메틸아 미노모르폴리노-카르베늄 헥사플루오로포스페이트

d 일

DBU 1,8-디아자바이사이클로[5.4.0]운덱-7-엔

DCE 1,2-디클로로에탄

DCM 디클로로메탄

DEAD 디에틸 아조디카르복실레이트

DIAD 디이소프로필 아조디카르복실레이트

DiBAL-H 디-이소부틸 알루미늄 하이드라이드

DIPEA 디이소프로필에틸아민 (휘닉(Hunig's) 염기)

DMAP N,N-디메틸-4-아미노피리딘

DMB 2,4-디메톡시 벤질

DMF 디메틸포름아미드

DMSO 디메틸 술폭시드

DPPA 디페닐포스폰산 아지드

EA 또는 EtOAc 에틸 아세테이트

EDC 또는 EDCI N-(3-디메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보디이미드

ELS 증발 광산란

ESI- 전기분무 음성 모드

ESI+ 전기분무 양성 모드

Et₂0 디에틸 에테르

Et₃N 또는 TEA 트리에틸아민

EtOH 에탄올

FA 포름산

FC 플래쉬 크로마토그래피

h 시간

H₂0 물

HATU 0-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로 늄 헥사플루오로포스페이트

HCl 염산

HOAT 1-하이드록시-7-아자벤조트리아졸

HOBt 1-하이드록시벤조트리아졸

HO-Su N-하이드록시숙신이미드

HPLC 고성능 액체 크로마토그래피

KHMDs 포타슘 헥사메틸디실라지드

LC/MS 또는 LC-MS 액체 크로마토그래피 질량 스펙트럼

LDA 리튬 디이소프로필아미드

LG 이탈기

LiHMDs 리튬 헥사메틸디실라지드

M 몰농도

m/z 질량/전하비

m-CPBA 메타-클로로퍼벤조산

MeCN 아세토니트릴

MeOD d₄-메탄올

MeOH 메탄올

MgS0₄ 황산마그네슘

min 분

MS 질량 분석법

Ms 메실

MS 질량 스펙트럼

MsCl 메실 클로라이드

MsO 메실레이트

MWI 마이크로파 조사

Na₂C0₃ 탄산나트륨

NaHC0₃ 중탄산나트륨

NaHMDs 소듐 헥사메틸디실라지드

NaOH 수산화나트륨

NIS N-요오도숙신이미드

NMR 핵자기공명

o/n 또는 O/N 하룻밤

PE 석유 에테르

PG 보호기

PMB 파라 메톡시벤질

PPAA 1-프로판포스폰산 사이클릭 무수물

ppm 백만당부

prep HPLC 정제용 고성능 액체 크로마토그래피

prep TLC 정제용 박층 크로마토그래피

p-TsOH 파라-톨루엔술폰산

rt 또는 RT 실온

SEM 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸

SEMC (트리메틸실릴)에톡시메틸 클로라이드

SFC 초임계 크로마토그래피

SGC 실리카겔 크로마토그래피

STAB 소듐 트리아세톡시 보로하이드라이드

TBAF 테트라-n-부틸암모늄 플로오라이드

TFA 트리플루오로아세트산

TfO 트리플레이트

THF 테트라하이드로푸란

THP 테트라하이드로피란

TLC 박층 크로마토그래피

Ts 토실

TsOH 토식산

UV 자외선

일반적인 방법

세포 배양

인간 백혈병 세포주 THP-1, RS4;11, 및 MV4-11은 ATCC로부터 입수하고, MOLM-13 세포는 DSMZ로부터 입수하였다. 모든 세포주는 10% FBS를 함유하는 RPMI 1640에서 증식시켰으며, 판매자가 권고하는 세포 밀도 및 환경 조건을 이용하여 유지하였다. 배지에 비필수 아미노산 및 L-글루타민을 보충하였다. THP-1 세포에는 또한 0.05 mM β-머캅토에탄올이 보충되었다.

메틸화 분석

세포를 12 웰 플레이트에서 2 mL의 최종 농도로 5×10⁵ 세포/mL로 시딩하였다. 세포에 화합물을 50 mM DMSO 원액으로부터 적절한 농도로 투여하였다. 트립판 블루 배제(Vicell)를 이용하여 세포수를 세고, 5분간 200 g으로 펠렛화한 후, 5×10⁵ 세포/mL의 최종 세포 농도로 화합물을 함유하는 신선한 배지에 재현탁시켜 화합물 및 배지를 7일 배양 과정 동안 이틀마다 새것으로 교환하였다. 화합물 배양 후, 상업적 히스톤 추출 키트(Active Motif)를 사용하여 1×10⁶ 세포로부터 히스톤을 추출하였다. BSA 표준 곡선과 함께 BCA 단백질 분석(Pierce)을 이용하여 정제된 히스톤을 정량하였다. 분리된 히스톤 400 ng을 4-20% 겔상의 SDS-PAGE로 분획화하고, 니트로셀룰로스막으로 옮겼다. 막을 다양한 일차 및 이차 항체와 배양하고, Licor 영상 시스템(Odyssey)에서 영상화하였다. H3K79-Me2 토끼 다클론성 항체는 아베암(Abeam) 사에서 구입하였다. H3K4-Me3, H3K9-Me3, H3K27-Me2, 및 H3K27-Me3을 포함한 다른 토끼 다클론성 항체는 셀 시그널링 테크놀로지(Cell Signaling Technologies, CST)사에서 구입하였다. 마우스 단클론성 전체 H3 항체를 로딩 콘트롤(CST)로 사용하였다. 형광 표지된 이차 항체는 오딧세이(Odyssey) 사에서 구입하였다.

세포 증식 및 생존성 분석

기하급수적으로 증식한 세포 배양물로부터 세포를 수확하고, 웰당 3×10⁴ 세포로 시딩하였다. 샘플을 96 웰 흑벽 투명 바닥 플레이트(Corning)에서 유지하였다. 0일에 0.2% DMSO 중 50 uM 최종 농도의 화합물을 적절한 웰에 첨가하였다. MV4-11 및 MOLM-13 처리를 14일 동안 지속하고, THP-1 세포는 18일 동안 처리하였다. 배양중에, 샘플을 V-바닥 플레이트(Corning)로 옮기고, 실온 회전자에서 200 g으로 5분 동안 회전시킨 후, 화합물을 함유하는 신선한 배지에 재현탁시킨 다음, 분석 플레이트로 다시 옮겨 화합물 및 배지를 이틀마다 교환하였다. 세포를 Guava Viacount 분석을 이용하여 주기적으로 계수하고, EasyCyte Plus 기기(Millipore)를 사용하여 판독하였다. 필요에 따라 분석 플레이트를 권고된 세포 밀도 이내까지 분열시켰다. 세포 분열을 고려하여 최종 세포수를 조정하고, 총 생존 세포/웰로 나타내었다.

HOXA9 (qPCR)

세포를 메틸화 분석과 유사하게 화합물로 7일간 처리하였다. 세포를 실온 회전자에서 200 g으로 펠렛화하고, Qiagen RNeasy 키트를 사용하여 전체 RNA를 분리하였다. Nanovue(GE Healthcare)를 사용하여 RNA의 농도 및 질을 결정하였다. 고용량 cDNA 역전사 키트(Applied Biosystems)를 사용하여 전체 RNA를 역전사시켰다. HOXA9에 대해 예비설계된 표지된 프라이머 세트를 어플라이드 바이오시스템(Applied Biosystems) 사에서 구입하였다. qPCR 반응물은 50 ng cDNA, 1X 표지된 프라이머 및 1X Taqman 범용 PCR 마스터 믹스(Applied Biosystems)를 함유하였다. 샘플을 7900 HT 고속 실시간 PCR 장치(Applied Biosystems)에서 2분 50℃, 10분 95℃, 15초 95℃ 및 1분 60℃에서 40 사이클의 PCR 조건으로 실행시켰다. HOXA9 사이클수를 항존 유전자(house keeping gene) B2 마이크로글로불린(Applied Biosystems 제품인 B2M 예비설계된 대조군)에 대해 정규화하였다. 다음 방정식을 사용하여 DMSO 대조군에 대한 퍼센트를 계산하였다: 대조군 퍼센트 = (2^{^-△△CT})*100 (여기에서, △△CT는 정규화된 HOXA9 샘플과 대조군 차(△CT 샘플 - ACT 대조군 = △△CT)이다).

IC ₅₀ 결정

화합물을 10 포인트에 대해 DMSO에서 연속 3배 희석하고, 1 ㎕를 384 웰 마이크로타이터 플레이트에 플레이팅하였다. 양성 대조군(100% 저해 표준)은 2.5 uM 최종 농도의 S-아데노실-1-호모시스테인이었고, 음성 대조군(0% 저해 표준)은 1 ㎕의 DMSO를 함유하였다. 이어, 화합물을 웰당 40 ㎕의 D0T1L(1-416)과 함께 30분 동안 배양하였다(분석 완충제중 25 nM 최종 농도: 20 mM 트리스, pH 8.0, 10 mM NaCl, 0.002% Tween20, 0.005% 소피부 젤라틴, 100 mM KCl, 및 0.5 mM DTT). 웰당 10 ㎕의 기질 믹스(200 nM S-[메틸-³H]-아데노실-L 메티오닌, 600 nM의 비표지된 S-[메틸-³H]-아데노실-L 메티오닌, 및 20 nM 올리고뉴클레오좀을 함유한 동일한 분석 완충제)를 가하여 반응을 개시시켰다. 반응을 실온에서 120분 동안 인큐베이션하고, 웰당 10 ㎕의 100 μM S-메틸-아데노실-L 메티오닌으로 퀀칭하였다. 검출을 위해, 50 ㎕ 반응물로부터의 기질을 384 웰 스트렙타비딘 코팅된 플래쉬플레이트(Flashplate)(Perkin Elmer)(또한 0.2% 폴리에틸렌이민으로 코팅됨)에 고정화시키고, Top Count 섬광계수기(Perkin Elmer)에서 판독하였다.

일반적인 합성 방식

본 발명의 화합물은 유기 화학업자들에게 알려진 다수의 방법으로 제조될 수 있다. 본 발명의 화합물은 유기 화학 합성 분야에 공지된 합성 방법과 함께, 후술하는 방법을 이용하거나, 당업자들이 이를 적절히 변형하여 합성될 수 있다. 바람직한 방법은 후술하는 방법을 포함하나, 이들에만 한정되지는 않는다. 반응은 사용된 시약 및 물질에 적절하고 변환에 적합한 용매중에서 수행된다. 유기 합성 분야의 숙련자라면 분자상에 존재하는 작용기가 제안된 변형에 따라야 함을 이해할 것이다. 이는 간혹 목적하는 본 발명의 화합물을 수득하기 위하여 합성 단계의 순서를 변경하거나, 다른 것에서 특정의 공정 구상을 선택하는데 따른 판단을 필요로 할 것이다. 본 발명에서 기술되는 화합물에 존재하는 반응성 작용기를 보호하기 위해 사용되는 보호기의 신중한 선택이 또한 본 분야에서 임의의 합성 경로를 설계하는데 다른 주요 고려사항임이 인식될 것이다. 숙련가들이 대처해야 할 많은 사항을 기술하고 있는 권위있는 설명서는 그린(Greene) 및 웃츠(Wuts)에 의한 (Protective Groups In Organic Synthesis, Wiley and Sons, 1991)이다.

본 원에 기재된 합성 방식에서, 화합물은 간단하게 하기 위해 하나의 특정 배열로 도시될 수 있다. 이러한 특정 배열을 본 발명이 어떤 하나의 이성체, 호변이성체, 위치이성체 또는 입체이성체로 한정되고 이성체, 호변이성체, 위치이성체 또는 입체이성체의 혼합물이 제외된다는 것으로 해석하여서는 안된다.

반응식 1

반응식 1은 확립된 화학을 이용하는 일반적인 경로에 따라 변형된 데아자퓨린 유사체를 합성하는 것에 대해 나타낸다. 테트라하이드로피란-2-온과 적절히 치환된 디아미노벤젠 유도체를 축합하여 벤즈이미다졸을 제공할 수 있다(단계 a). 에틸 아세테이트중에 IBX 등의 적합한 시약으로 산화하여 변형된 벤즈이미다졸을 제공한다(단계 b). 디클로로에탄중의 소듐 아세톡시보로하이드라이드를 사용하여 아민으로 환원적 아미노화하여 커플링 생성물을 제공할 수 있다(단계 c). MeOH 중의 HCl을 사용하여 산성 조건하에서 아세토나이드 보호기를 제거함으로써 목적하는 디올을 제공할 수 있다(단계 d).

반응식 2

반응식 2는 아미노벤즈아미다졸 부분을 함유하는 관련 데아자퓨린 유사체의 합성을 설명한다. 디클로로에탄중의 소듐 아세톡시보로하이드라이드를 사용하여 아민과 4-(1,3-디옥소이소인돌린-2-일)부탄알을 축합하여 보호된 아민을 제공할 수 있다(단계 a). 이 중간체를 환류 에탄올중에 히드라진으로 처리하여 아민 보호기를 제거하여 유리 아민을 제공할 수 있다(단계 b). tert-부탄올중에 승온에서 아민과 적절히 치환된 2-클로로벤즈아미다졸을 축합하여 목적하는 아미노벤즈이미다졸을 제공할 수 있다(단계 c). MeOH 중의 HCl을 사용하여 산성 조건하에서 아세토나이드 보호기를 제거함으로써 목적하는 디올을 제공할 수 있다(단계 d).

반응식 3

반응식 3은 황 함유 링커와 아미노벤즈이미다졸 부분을 함유하는 관련 데아자퓨린 유사체의 합성을 설명한다. 출발 티올을 아세톤 등의 극성 용매중에 K₂CO₃ 등의 약염기를 사용하여 적절한 할로 에스테르로 변형하여 티오에스테르를 제공하고, MeOH 등의 극성 용매중에 LiOH 등의 강염기로 비누화하여 목적하는 산을 제공할 수 있다(단계 a). 산을 표준 아미드 커플링 조건을 사용하여 적절한 디아민과 커플링하여 목적하는 아미노 아미드를 제공할 수 있다(단계 b). 시약 및 용매로서 아세트산 등의 약산을 사용하여 아미노 아미드를 벤즈이미다졸로 폐환하여 벤즈이미다졸을 제공할 수 있다(단계 c). 각종 선택적 산화 시약, 예를 들어 m-CPBA를 사용하여 황 원자의 산화 상태를 조절하고(n= 0-2), MeOH 등의 극성 용매중에 HCl 등의 강산으로 처리하여 아세토나이드 보호기를 제거함으로써 최종 생성물을 제공할 수 있다(단계 d).

반응식 4

반응식 4는 치환된 아민 함유 링커와 아미노벤즈이미다졸 부분을 함유하는 관련 데아자퓨린 유사체의 합성을 설명한다. 벤질 보호된 아민을 아세톤 등의 극성 용매중에 K₂CO₃ 등의 약염기의 존재하에서 적절한 할로 에스테르로 알킬화하여 목적하는 에스테르를 얻고 EtOH 등의 극성 용매중에 탄소상 팔라듐 등의 적절한 촉매 및 수소 가스를 사용하는 촉매적 수소화에 적용하여 유리 아민을 제공할 수 있다(단계 a). 환원적 아미노화 조건 또는 알킬화 조건을 사용하여 각종 치환기(R₁)를 도입하여 R₁ 치환된 아민을 제공할 수 있다. 이어, 에스테르를 MeOH 등의 극성 용매중의 LiOH 등의 강염기로 가수분해하여 산을 제공할 수 있다(단계 b). 산을 표준 아미드 커플링 조건을 사용하여 적절한 디아민과 커플링하여 목적하는 아미노 아미드를 제공할 수 있다(단계 c). 아미노 아미드를 시약 및 용매로서 아세트산 등의 약산을 사용하여 벤즈이미다졸로 폐환하여 벤즈이미다졸을 제공하고, MeOH 등의 극성 용매중에 HCl 등의 강산을 사용하여 아세토나이드 보호기를 제거하여 최종 생성물을 제공할 수 있다(단계 d).

반응식 5

반응식 5는 치환된 아미드 함유 링커와 아미노벤즈이미다졸 부분을 함유하는 관련 데아자퓨린 유사체의 합성을 설명한다. 반응식 2에서 전술된 아민으로 출발하고 표준 아미드 커플링 조건하에 적절히 치환된 산 에스테르로 처리하여 아미드 에스테르를 얻고, MeOH 등의 극성 용매중의 LiOH 등의 강염기로 가수분해하여 산을 제공할 수 있다(단계 a). 산을 표준 아미드 커플링 조건을 사용하여 적절한 디아민과 커플링하여 목적하는 아미노 아미드를 제공할 수 있다(단계 b). 아미노 아미드를 시약 및 용매로서 아세트산 등의 약산을 사용하여 벤즈이미다졸로 폐환하여 벤즈이미다졸을 제공하고, MeOH 등의 극성 용매중에 HCl 등의 강산을 사용하여 아세토나이드 보호기를제거하여 최종 생성물을 제공할 수 있다(단계 c).

화합물 8 및 9의 제조

하기 단계가 도 3에 상세히 도식화되었다.

단계 1: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(하이드록시메틸)테트라하이드로푸란-3,4-디올

1-부탄올 (16.0 mL) 중 7-클로로 튜베르시딘 (1.67 g, 5.84 mmol)의 현탁액을 N,N-디이소프로필에틸아민 (1.22 mL, 7.01 mmol) 및 1-(2,4-디메톡시페닐)메탄아민 (1.05 mL, 7.01 mmol)으로 처리하고, 100-110℃에서 하룻밤 가열하였다. 20시간 후, LCMS로 새로운 생성물이 형성되고 출발 물질이 소비된 것을 확인하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 용매를 고진공하에 제거하였다. 이 물질을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(200 g 실리카겔; 5-10% MeOH/CH₂Cl₂) 표제 화합물 (2.19 g, 90%)을 폼(foam)으로 수득하였다: C₂₀H₂₄N₄O₆에 대한 MS (ESI+) m/z 417.1 (M+H)⁺; C₂₀H₂₄N₄O₆에 대한 (ESI-) m/z 415.2 (M-H)^-; HPLC 순도 97% (체류 시간, 2.41 min).

단계 2: ((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메탄올

아세톤 (76.5 mL) 및 2,2-디메톡시프로판 (16.5 mL, 134 mmol) 중 (2R,3R,4S,5R)-2-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(하이드록시메틸)테트라하이드로푸란-3,4-디올 (3.30 g, 7.45 mmol)의 용액을 10-캄포르술폰산 (1.73 g, 7.44 mmol)으로서 한 부분으로(in one portion) 처리하고, 반응물을 실온에서 교반하였다. 1시간 후, 모든 SM이 HPLC로 소비되었다. 중탄산나트륨 (1.88 g, 22.3 mmol)을 가하여 반응을 퀀칭하고, 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였더니 침전이 형성되었다. 반응 혼합물을 200 mL CHCl₃ 및 75 mL H₂O에 분배하였다. 혼합물을 15 mL 염수로 희석하고, 추출한 후, 상을 분리하였다. 수성상을 50 mL 분량의 CHCl₃으로 2회 세척하고, 유기상을 모아 Na₂SO₄에서 건조시켰다. 용액을 여과하고, 농축하여 폼을 얻었다. 미정제 생성물을 메탄올 (130 mL, 3200 mmol)에 취하고, p-톨루엔술폰산 일수화물 (1.27 g, 6.70 mmol)로서 한 부분으로 처리하였다. 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 중탄산나트륨 (1.88 g, 22.3 mmol)으로 퀀칭하고, 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 용매를 진공중에 제거하고, 잔사를 50 mL H₂O 및 150 mL CH₂Cl₂에 분배한 후, 추출하였다. 유기상을 50 mL 포화 NaHCO₃으로 세척하고, Na₂SO₄에서 건조시킨 다음, 여과하고, 농축하여 폼을 얻었다. 생성물을 플래쉬 크로마토그래피로 분리하여(120 g 실리카겔, 60-80% EA/hept) 표제 화합물 (2.83 g, 83%)을 연황색 폼으로 수득하였다: C₂₃H₂₈N₄O₆에 대한 MS (ESI+) m/z 457.4 (M+H)⁺; C₂₃H₂₈N₄O₆에 대한 (ESI-) m/z 455.2 (M-H)^-; HPLC 순도 99% (체류 시간, 3.08 min).

단계 3: N-(((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드

테트라하이드로푸란 (25 mL) 중 ((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메탄올 (1.52 g, 3.33 mmol) 및 트리페닐포스핀 (1.92 g, 7.32 mmol)의 용액을 0℃로 냉각하고, 디에틸 아조디카르복실레이트 (1.26 mL, 7.99 mmol)로 적가 처리하였다. 얻은 황색 용액을 테트라하이드로푸란 (9.9 mL, 120 mmol) 중 N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 (1.01 g, 4.66 mmol)의 용액으로 약 5분간 적가 처리하고, 용액을 교반한 후, 실온으로 서서히 가온하였다. 실온에서 24시간 후, HPLC에 의해 출발 물질이 소비된 것으로 나타났다. 반응 혼합물을 부분적으로 농축하고, 용액을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(175 g 실리카겔, 60-90% EA/hept) 표제 화합물 (0.82 g, 38%)을 연황색 유리질로 수득하였다: C₃₀H₃₄N₆O₉S에 대한 MS (ESI+) m/z 655.3 (M+H)⁺; C₃₀H₃₄N₆O₉S에 대한 (ESI-) m/z 653.3 (M-H)^-; HPLC 순도 68% (체류 시간, 3.94 min).

단계 4: N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸아미노)메틸)테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

아세토니트릴 (23 mL, 440 mmol) 중 N-(((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)-N-메틸-2-니트로벤젠술폰아미드 (0.82 g, 1.2 mmol) 및 탄산세슘 (0.82 g, 2.5 mmol)의 현탁액을 질소 가스를 10분간 살포하여 탈기하였다. 용액을 벤젠티올 (0.26 mL, 2.5 mmol)로 적가 처리하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 22시간 후, LCMS에 의해 반응이 완료된 것으로 나타났다. 반응 혼합물을 60 mL 1N NaOH 및 120 mL CH₂Cl₂에 분배하고, 층을 분리한 후, 수성상을 3 분량의 25 mL CH₂Cl₂로 세척하였다. 유기상을 모아 MgSO₄에서 건조시키고, 여과한 후, 오일로 농축하였다. 물질을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(80 g 실리카겔, CH₃OH/CH₂Cl₂ 중 0-5% 7N NH₃) 표제 화합물 (320 mg, 54%)을 폼으로 수득하였다: C₂₄H₃₁N₅O₆에 대한 MS (ESI+) m/z 470.1 (M+H)⁺; C₂₄H₃₁N₅O₆에 대한 (ESI-) m/z 468.0 (M-H)^-; HPLC 순도 99% (체류 시간, 2.67 min).

단계 5: 1-(4-tert-부틸페닐)-3-(3-하이드록시프로필)우레아

디에틸에테르 (15 mL) 중 3-아미노-1-프로판올 (0.180 mL, 2.36 mmol)의 용액을 0℃로 냉각하고, 1-tert-부틸-4-이소시아네이토벤젠 (0.400 mL, 2.25 mmol)으로 적가 처리하였다. 반응 혼합물을 실온으로 서서히 가온하였다. 16시간 후, TLC (100% 에틸 아세테이트)에 의해 반응이 완료된 것으로 나타났다. 반응 혼합물을 10 mL 분량의 CH₂Cl₂ 및 Et₂O로 희석하고, 15 mL 분량의 H₂O, 0.5N HCl 및 염수로 세척한 후, Na₂SO₄에서 건조시켰다. 유기상을 여과하고, 농축하여 무색 점성 오일을 얻고, PhCH₃에 용해시킨 다음, 농축하고, 고진공하에 하룻밤 두어 표제 화합물 (600 mg, 110%)을 무색 점성 오일로 수득하였다: C₁₄H₂₂N₂O₂에 대한 MS (ESI+) m/z 251.0 (M+H)⁺; C₁₄H₂₂N₂O₂에 대한 (ESI-) m/z 249.3 (M-H)^-; HPLC 순도 98% (체류 시간, 3.43 min).

단계 6: 3-(3-(4-(tert-부틸)페닐)우레이도)프로필 메탄술포네이트

메틸렌 클로라이드 (14 mL) 중 1-(4-tert-부틸페닐)-3-(3-하이드록시프로필)우레아 (563 mg, 2.25 mmol)의 용액을 0℃로 냉각하고, 트리에틸아민 (0.376 mL, 2.70 mmol)에 이어 메탄술포닐 클로라이드 (0.191 mL, 2.47 mmol)로 적가 처리한 후, 혼합물을 0℃에서 TLC로 완료될 때까지 교반하였다. 30분 후, 반응이 TLC (100% EA)로 완료되었다. 반응 혼합물을 15 mL CH₂Cl₂로 희석하고, 유기상을 15 mL 분량의 1N HCl, 포화 NaHCO₃ 및 H₂O로 세척한 후, MgSO₄에서 건조시켰다. 용액을 여과하고, 농축하여 점성 오일을 얻은 뒤, 고진공하에 두어 표제 화합물 (800 mg)을 무색 점성 오일로 수득한 다음, 냉동고에 보관하였다: C₁₅H₂₄N₂O₄S에 대한 MS (ESI+) m/z 329.1 (M+H)⁺; HPLC 순도 93% (체류 시간, 3.95 min).

단계 7: 1-(4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)프로필)우레아

3-(3-(4-(tert-부틸)페닐)우레이도)프로필 메탄술포네이트 (224 mg, 0.682 mmol), 테트라-n-부틸암모늄 요오다이드 (252 mg, 0.682 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민 (120 mL, 0.67 mmol)의 혼합물을 아세토니트릴 (7.8 mL, 150 mmol) 중의 N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aR,4R,6R,6aR)-2,2-디메틸-6-((메틸아미노)메틸)테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (320 mg, 0.68 mmol)으로 처리하고, 용액을 65℃에서 가열하였다. 65℃에서 16.5시간 후, HPLC에 의해 반응이 약 78-85% 완료된 것으로 나타났다. 추가적인 60 mg의 메실레이트 (0.4 mL CH₃CN 중) 및 67 mg의 TBAI를 첨가하고, 7시간 동안 가열을 계속하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 농축하였다. 미정제 잔사를 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(60g 실리카겔, CH₃OH/CH₂Cl₂ 중 3-7% 7N NH₃) TBAI로 오염된 생성물을 얻었다. 물질을 20 mL 1/1 에틸 아세테이트/에틸 에테르에 용해시키고, 3 분량의 10 mL H₂O로 세척하였다. 유기상을 Na₂SO₄에서 건조시키고, 여과한 후, 농축하여 표제 화합물 (295 mg, 62%)을 폼으로 수득하였다: C₃₈H₅₁N₇O₆에 대한 MS (ESI+) m/z 702.2 (M+H)⁺: C₃₈H₅₁N₇O₆에 대한 (ESI-) m/z 700.3 (M-H)^-; HPLC 순도 96% (체류 시간, 3.69 min).

단계 8: 1-(4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-3,4-디하이드록시테트라하이드로푸란-2-일)메틸)(메틸)아미노)프로필)우레아

1-(4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(메틸)아미노)프로필)우레아 (295 mg, 0.420 mmol)를 0℃로 냉각시킨 트리플루오로아세트산 (11 mL) 및 물 (1 mL)에 용해시키고, 생성된 용액을 0℃에서 30분 동안 교반한 후, 실온으로 가온하였다. 5시간 후, HPLC에 의해 반응이 완료된 것으로 나타났다. 반응물을 진공중에 농축하고, 잔사를 25 mL MeOH에 취한 후 (슬러리), 농축하였다. 이 과정을 2회 반복하고, 잔사를 고진공에 잠시 두었다. 물질을 15 mL MeOH에 취하고, 현탁액을 중프릿(medium frit)을 통해 여과하였다. 여액을 진공중에 농축하고, 잔사를 40 mL 20% MeOH/EA에 취한 뒤, 용액을 25 mL 포화 NaHCO₃으로 세척하였다. 수성층을 10 mL EA로 한 번 역추출하고, 유기물을 모아 Na₂SO₄에서 건조시켰다. 용액을 여과하고, 농축하여 유리질/폼을 얻었다. 생성물을 정제용 TLC로 분리하여 (두개의 20 cm x 20 cm x 1.0 mm prep TLC 플레이트, CH₃OH/CH₂Cl₂ 중 15% 7N NH₃) 표제 화합물 (90 mg, 43%)을 폼으로 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, d₄-MeOH) ppm 8.08 (s, 1 H), 7.26 (m, 3 H), 7.21 (m, 2 H), 6.63 (d, J=3.52 Hz, 1 H), 6.12 (d, J=4.56 Hz, 1 H), 4.49 (t, J=4.87 Hz, 1 H), 4.21 (m, 1 H), 4.17 (t, J=5.60 Hz, 1 H), 3.22 (t, J=6.43 Hz, 2 H), 2.96 (m, 2 H), 2.72 (t, J=6.95 Hz, 2 H), 2.46 (s, 3 H), 1.76 (m, 2 H), 1.28 (s, 9 H); C₂₆H₃₇N₇O₄에 대한 MS (ESI+) m/z 512.2 (M+H)⁺; C₂₆H₃₇N₇O₄에 대한 (ESI-) m/z 510.2 (M-H)^-; HPLC 순도 97% (체류 시간, 2.81 min).

단계 9: 1-(4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-3,4-디하이드록시테트라하이드로푸란-2-일)메틸)(메틸)아미노)프로필)우레아 하이드로클로라이드

메탄올 (0.7 mL) 중 1-(4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-3,4-디하이드록시테트라하이드로푸란-2-일)메틸)(메틸)아미노)프로필)우레아 (20 mg, 0.039 mmol)의 용액을 0.1N HCl (0.39 mL, 0.039 mmol) 및 물 (2.0 mL)의 혼합물에 첨가하였다. 무색 용액을 진공중에 농축하여 메탄올을 제거하였다. 용액을 동결건조하여 표제 화합물 (20 mg, 93%)을 백색 고체로 수득하였다: ¹H NMR (400 MHz, D₂O) ppm 8.02 (s, 1 H), 7.33 (d, J=3.73 Hz, 1 H), 7.21 (d, J=8.09 Hz, 2 H), 6.90 (d, J=8.09 Hz, 2 H), 6.69 (d, J=3.73 Hz, 1 H), 6.13 (d, J=4.56 Hz, 1 H), 4.47 (m, 2 H), 4.24 (t, J=5.39 Hz, 1 H), 3.67 (m, 1 H), 3.54 (d, J=12.02 Hz, 1 H), 3.33 (m, 1 H), 3.22 (m, 1 H), 3.11 (m, 1 H), 2.94 (s, 3 H), 1.90 (m, 2 H), 1.20 (s, 9 H); C₂₆H₃₇N₇O₄에 대한 MS (ESI+) m/z 512.3 (M+H)⁺; C₂₆H₃₇N₇O₄에 대한 (ESI-) m/z 510.2 (M-H)^-; HPLC 순도 97% (체류 시간, 2.82 min). IC₅₀ < 10 nM.

화합물 16 및 17의 제조

하기 단계가 도 4에 상세히 도식화되었다.

단계 1: 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

무수 테트라하이드로푸란 (32 mL) 중 ((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메탄올 (2.83 g, 6.20 mmol) 및 트리페닐포스핀 (2.28 g, 8.68 mmol)의 용액을 빙/수조에서 0℃로 냉각하였다. 디이소프로필 아조디카르복실레이트 (1.71 mL, 8.68 mmol)를 적가한 후, 테트라하이드로푸란 (5.3 mL, 66 mmol) 중 디페닐포스폰산 아지드 (1.87 mL, 8.68 mmol)의 용액을 적가하였다. DPPA 용액을 첨가하였더니 유백색 침전이 형성되었다. 약 30분 후, 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 하룻밤 교반하였다. 24시간 후, HPLC에 의해 모든 출발 물질이 소비된 것으로 나타났다. 반응 혼합물을 원래 부피의 약 1/2로 농축하고, 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(175 g 실리카겔, 10-55% EA/hept) 표제 화합물 (2.49 g, 83%)을 누르스름한 뻣뻣한 폼으로 수득하였다: C₂₃H₂₇N₇O₅에 대한 MS (ESI+) m/z 482.2 (M+H)⁺; C₂₃H₂₇N₇O₅에 대한 (ESI-) m/z 480.1 (M+H)^-, m/z 526.1 (M+CO₂H)^-; HPLC 순도 97% (체류 시간, 3.64 min).

단계 2: 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

테트라하이드로푸란 (50 mL, 600 mmol) 중 ((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아지도메틸)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (2.49 g, 5.17 mmol)의 용액을 테트라하이드로푸란 (7.24 mL, 7.24 mmol) 중 1.0 M의 트리메틸포스핀 용액으로 적가 처리하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 20시간 후, HPLC에 의해 모든 출발 물질이 소비되었다. 반응 혼합물을 물 (1.80 mL, 99.9 mmol)로 처리하고, rt에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축한 후, 미정제 생성물을 90 mL CH₂Cl₂에 취하고, 4 분량의 30 mL H₂O 및 15 mL 염수로 세척하였다. 용액을 Na₂SO₄에서 건조시키고, 여과한 후, 농축하여 오일을 얻고 고진공하에 적용하였더니 폼으로 되었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(120 g 실리카겔, CH₃OH/CH₂Cl₂ 중 3-10% 7N NH₃) 표제 화합물 (1.76 g, 75%)을 폼으로 수득하였다: C₂₃H₂₉N₅O₅에 대한 MS (ESI+) m/z 456.2 (M+H)⁺; C₂₆H₃₅N₅O₅에 대한 (ESI-) m/z 454.1 (M-H)^-; HPLC 순도 92% (체류 시간, 2.65 min).

단계 3: N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((이소프로필아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

1,2-디클로로에탄 (34 mL) 중 ((3aR,4R,6R,6aR)-6-(아미노메틸)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (1.76 g, 3.86 mmol)의 용액을 아세톤 (0.31 mL, 4.2 mmol) 및 아세트산 (0.22 mL, 3.9 mmol)으로 적가 처리한 다음, 소듐 트리아세톡시보로하이드라이드 (0.98 g, 4.6 mmol)로 처리하고, 혼합물을 실온에서 완료될 때까지 교반하였다. 1시간 후, HPLC에 의해 출발 물질이 소비되었고, 반응이 완료된 것으로 나타났다. 반응 혼합물을 60 mL CH₂Cl₂로 희석하고, 50 mL 포화 NaHCO₃으로 세척하였다. 수성상을 30 mL CH₂Cl₂로 세척하고, 유기상을 모아 40 mL 염수로 세척한 후, Na₂SO₄에서 건조시켰다. 용액을 여과하고, 농축하여 표제 화합물 (1.76 g, 92%)을 유리질로 얻은 뒤, 다음 단계에 직접 사용하였다: C₂₆H₃₅N₅O₅에 대한 MS (ESI+) m/z 498.3 (M+H)⁺; HPLC 순도 90% (체류 시간, 2.74 min).

단계 4: 2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)프로필)이소인돌린-1,3-디온

γ-브로모프로필프탈이미드 (2.37 g, 8.85 mmol), 테트라-n-부틸암모늄 요오다이드 (0.234 g, 0.632 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (1.40 mL, 8.04 mmol) 및 N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((이소프로필아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (3.42 g, 6.32 mmol)의 혼합물을 프로판니트릴 (25 mL)에 취하고, 95℃에서 가열하였다. 95℃에서 48시간 후, HPLC에 의해 반응이 거의 완료된 것으로 나타났다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 혼합물을 200 mL 에틸 아세테이트로 희석한 후, 2 분량의 100 mL H₂O 및 100 mL 염수로 세척하였다. 유기상을 Na₂SO₄에서 건조시키고, 여과한 후, 농축하여 유리질을 얻었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(250 g 실리카겔, CH₃OH/CH₂Cl₂ 중 2-4% 7N NH₃) 표제 화합물 (3.12 g, 72%)을 폼으로 수득하였다: C₃₇H₄₄N₆O₇에 대한 MS (ESI+) m/z 685.2 (M+H)⁺, C₃₇H₄₄N₆O₇에 대한 (ESI-) m/z 729 (M+HCO₂)^-; HPLC 순도 99% (체류 시간, 3.17 min).

단계 5: N ¹ -(((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)-N ¹ -이소프로필프로판-1,3-디아민

2-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)프로필)이소인돌린-1,3-디온 (1.37 g, 2.00 mmol)을 메탄올중 2M 메틸아민 (30 mL, 60 mmol)에 용해시켰다. 용액을 실온에서 5분 동안 교반한 후, 55-60℃에서 가열하였다. 1시간 후, SM이 HPLC에 의해 소비되었다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 진공중에 농축하였다. 생성된 황갈색 오일을 20 mL MeOH에 취하고, 농축하였다. 이 과정을 오일로 될 때까지 반복하였다. 물질을 고진공하에 두어 N-메틸프탈이미드와 함께 표제 화합물을 함유하는 고체를 얻고, 다음 단계에 그대로 사용하였다: C₂₉H₄₂N₆O₅에 대한 MS (ESI+) m/z 555.4 (M+H)⁺; HPLC 시간 2.57 min.

단계 6: 1-(4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)프로필)우레아

메틸렌 클로라이드 (40 mL) 중 N¹-(((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)-N¹-이소프로필프로판-1,3-디아민 (1.11 g, 2.00 mmol, 단계 6으로부터의 미정제물)의 현탁액을 메틸렌 클로라이드 (3.5 mL) 중 1-tert-부틸-4-이소시아네이토벤젠 (0.36 mL, 2.0 mmol)의 용액으로 적가 처리하고, 실온에서 교반하였다. 1시간 후, 반응이 HPLC로 완료되었다. 반응 혼합물을 농축하여 유리질을 얻었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(100 g 실리카겔, CH₃OH/CH₂Cl₂ 중 2-4% 7N NH₃) 표제 화합물 (1.07 g, 73%)을 폼으로 수득하였다: C₄₀H₅₅N₇O₆에 대한 MS (ESI+) m/z 730.4 (M+H)⁺; C₄₀H₅₅N₇O₆에 대한 (ESI-) m/z 728.5 (M-H)^-; HPLC 순도, 89% (체류 시간, 3.78 min).

단계 7: 1-(3-((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-3,4-디하이드록시테트라하이드로푸란-2-일)메틸)(이소프로필)아미노)프로필)-3-(4-(tert-부틸)페닐)우레아

1-(4-(tert-부틸)페닐)-3-(3-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)프로필)우레아 (1.07 g, 1.39 mmol)를 0℃로 냉각시킨 트리플루오로아세트산 (25 mL) 및 물 (2.5 mL)의 혼합물에 용해시키고, 생성된 용액을 0℃에서 30분 동안 교반한 후, 실온으로 가온하였다. 4시간 후, 반응이 HPLC로 완료된 것으로 나타났다. 반응 혼합물을 진공중에 농축하고, 잔사를 25 mL MeOH에 취한 뒤 (백색 슬러리), 농축하였다. 이 과정을 3회 반복하고, 생성된 잔사를 고진공하에 두었다. 이 물질을 100 mL 10% MeOH/CH₂Cl₂에 취하고, 2 분량의 75 mL 포화 NaHCO₃ 및 50 mL 1% aq Na₂CO₃으로 세척하였다. 유기상을 Na₂SO₄에서 건조시키고, 여과한 후, 농축하여 유리질/고체를 얻었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(100 g 실리카겔, CH₃OH/CH₂Cl₂ 중 5-10% 7N NH₃) 표제 화합물 (0.35g, 46%)을 무색 유리질로 수득하였다: C₂₈H₄₁N₇O₄에 대한 MS (ESI+) m/z 540.3 (M+H)⁺; C₂₈H₄₁N₇O₄에 대한 (ESI-) m/z 538.3 (M-H)^-, m/z 584.4 (M+HCO₂)^-; HPLC 순도 98% (체류 시간 2.86 min); ¹NMR (400 MHz, d₄-MeOH) ppm 8.05 (s, 1 H), 7.27 (d, J=3.73 Hz, 1 H), 7.24 (m, 2 H), 7.18 (m, 2 H), 6.63 (d, J=3.73 Hz, 1 H), 6.15 (d, J=4.77 Hz, 1 H), 4.46 (t, J=5.08 Hz, 1 H), 4.18 (t, J=5.39 Hz, 1 H), 4.11 (m, 1 H), 3.22 (m, 2 H), 3.07 (m, 1 H), 2.85 (m, 1 H), 2.72 (m, 1 H), 2.60 (t, J=6.43 Hz, 2 H), 1.68 (m, 2 H), 1.28 (s, 9 H), 1.05 (d, J=6.63 Hz, 3 H), 1.01 (d, J=6.43 Hz, 3 H).

단계 8: 1-(3-((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-3,4-디하이드록시테트라하이드로푸란-2-일)메틸)(이소프로필)아미노)프로필)-3-(4-(tert-부틸)페닐)우레아 하이드로클로라이드

50 mL 50% aq 메탄올중 1-(3-((((2R,3S,4R,5R)-5-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-3,4-디하이드록시테트라하이드로푸란-2-일)메틸)(이소프로필)아미노)프로필)-3-(4-(tert-부틸)페닐)우레아 (1.64 g, 3.04 mmol)의 용액을 수중 1.0N 염화수소 (3.87 mL, 3.04 mmol)로 처리하였다. 용액을 농축하여 메탄올을 거의 제거하고, 하룻밤 동결건조시켰다. 혼탁한 혼합물을 파인 프릿(fine frit)을 통해 여과하고, 여액을 진공중에 농축하여 MeOH를 제거하였다. 생성된 용액을 하룻밤 동결건조시켜 표제 화합물 (1.70 g, 97%)을 고체로 수득하였다: C₂₈H₄₁N₇O₄에 대한 MS (ESI+) m/z 540.4 (M+H)⁺; C₂₈H₄₁N₇O₄에 대한 MS (ESI+) m/z 538.4 (M+H)⁺, m/z 574.4 (M+Cl)^-; HPLC 순도 97% (체류 시간, 2.88 min); ¹H NMR (400 MHz, d₄- MeOH) ppm 8.12 (s, 1 H), 7.29 (m, 2 H), 7.23 (m, 3 H), 6.68 (m, 1 H), 6.09 (br. s., 1 H), 4.57 (m, 1 H), 4.35 (m, 2 H), 3.79 (br. s., 1 H), 3.55 (m, 2 H), 3.26 (br. s., 4 H), 1.94 (m, 2 H), 1.35 (m, 6 H), 1.29 (s, 9 H). IC₅₀ < 10 nM.

화합물 18의 제조

(2R,3R,4S,5R)-2-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((4-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)부틸)(이소프로필)아미노)메틸)테트라하이드로푸란-3,4-디올

통례

HPLC 조건: Agilent 1100 HPLC. Zorbax Eclipse XDB-C18 50 x 4.6 mm 컬럼. 용매 A - 물 (0.1% TFA); 용매 B - 아세토니트릴 (0.07% TFA). 유량 - 1.50 mL/min. 구배 - 5 min 95% A → 90% B, 1 min 유지, 이어 재순환 (1분간 95% A로). 214 및 254 nm에서 UV 검출.

단계 1: 벤질 5-브로모펜타노에이트

메틸렌 클로라이드 (14 mL) 중 5-브로모펜탄산 (1.00 g, 5.52 mmol) 및 벤질 알코올 (0.286 mL, 2.76 mmol)의 용액을 N,N'-디이소프로필카르보디이미드 (0.523 g, 4.14 mmol) 및 4-디메틸아미노피리딘 (43.9 mg, 0.359 mmol)으로 연속 처리하였다. 용액을 실온에서 교반하였다. 4-디메틸아미노피리딘 첨가 1분내에 침전이 형성되었다. 약 65시간 후, 반응 혼합물을 여과한 후, 고체를 CH₂Cl₂로 세척하고, 여액을 20 mL 분량의 1N HCl, 포화 NaHCO₃ 및 염수로 세척한 후, Na₂SO₄에서 건조시켰다. 용액을 여과하고, 농축하여 거의 무색에 가까운 액체를 고체 (DIC 우레아)와 함께 얻었다. 이 물질을 1/1 MTBE/헵탄에 취해 백색 침전이 있는 용액을 얻었다. 혼합물을 여과하고, 농축한 후, 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(75 g 실리카겔; 5-10% MTBE/hept) 표제 화합물 (0.69 g, 92%)을 무색 액체로 수득하였다. HPLC 순도 >95% (체류 시간, 4.73 min).

단계 2: 벤질 5-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)펜타노에이트

벤질 5-브로모펜타노에이트 (116 mg, 0.427 mmol), 테트라-n-부틸암모늄 요오다이드 (11.3 mg, 0.0305 mmol), N,N-디이소프로필에틸아민 (69.08 uL, 0.3966 mmol) 및 N-(2,4-디메톡시벤질)-7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-((이소프로필아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (165 mg, 0.305 mmol)의 혼합물을 프로판니트릴 (1.0 mL)에 취해 연황갈색 용액을 얻고, 95℃에서 가열하였다. 95℃에서 68시간 후, HPLC에 의해 출발 물질이 소비된 것으로 나타났다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각한 후, 30 mL 에틸 아세테이트로 희석하고, 2 분량의 25 mL H₂O 및 25 mL 염수로 세척하였다. 유기상을 Na₂SO₄에서 건조시키고, 여과한 후, 농축하여 황갈색 점성 유리질을 얻었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(40 g 실리카겔; CH₃OH/CHCl₃ 중 1.5% 7N NH₃) 표제 화합물 (151 mg, 72%)을 무색 유리질로 수득하였다: C₃₈H₄₉N₅O₇에 대한 MS (ESI+) m/z 688.3 (M+H)⁺; C₃₈H₄₉N₅O₇에 대한 MS (ESI-) m/z 686.7 (M-H)^-; HPLC 순도 95% (체류 시간, 3.48 min).

단계 3: 5-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)펜탄산

에탄올 (4.1 mL) 중 벤질 5-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)펜타노에이트 (151 mg, 0.220 mmol)의 용액을 10% 탄소상 팔라듐 (51 mg, 0.048 mmol) 및 1,4-사이클로헥사디엔 (0.23 mL, 2.4 mmol)으로 처리하였다. 혼합물을 85℃에서 HPLC에 의해 출발 물질이 소비된 것으로 나타날 때까지 가열하였다. 약 1시간 후, HPLC에 의해 출발 물질이 소비된 것을 확인하고, 반응 혼합물을 실온으로 냉각하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 패드를 40 mL EtOH로 세척하였다. 용액을 농축하여 표제 화합물 (136 mg, 104%)을 거의 무색에 가까운 유리질로 얻은 뒤, 이를 톨루엔에 취하고, 농축한 다음, 고진공하에 두었다. 물질은 정제없이 다음 단계에 사용할 수 있을 정도로 충분한 순도를 가지는 것으로 판단되었다: C₃₁H₄₃N₅O₇에 대한 MS (ESI+) m/z 598.7 (M+H)⁺; HPLC 순도 >95% (체류 시간, 2.84 min).

단계 4: N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-5-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)펜탄아미드

N,N-디메틸포름아미드 (2.2 mL) 중 5-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)펜탄산 (131 mg, 0.219 mmol) 및 4-tert-부틸벤젠-1,2-디아민 (40 mg, 0.24 mmol)의 용액을 N,N-디이소프로필에틸아민 (84 uL, 0.48 mmol)으로 적가 처리한 후, PyBop 시약 (120 mg, 0.24 mmol)으로 처리하였다. 용액을 실온에서 19시간 동안 교반하고 HPLC로 반응이 완결된 것을 확인하였다. 반응 혼합물을 고진공하에 농축하였다. 잔사를 40 mL CH₂Cl₂에 취하고, 20 mL 분량의 H₂O, 5% 시트르산, 및 염수로 세척하였다. 유기상을 Na₂SO₄에서 건조시키고, 여과한 후, 농축하여 황갈색 점성 유리질을 얻었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(40 g 실리카겔; CH₃OH/CH₂Cl₂ 중 2% 7N NH₃) 표제 화합물 (140 mg, 86%)을 황갈색을 띠는 유리질로 수득하였다: C₄₁H₅₇N₇O₆에 대한 MS (ESI+) m/z 744.9 (M+H)⁺; HPLC 순도 (두 위치이성체의 것을 합한 것) 91% (체류 시간, 3.25 및 3.28 min).

단계 5: 7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((4-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

N-(2-아미노-4-(tert-부틸)페닐)-5-((((3aR,4R,6R,6aR)-6-(4-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)메틸)(이소프로필)아미노)펜탄아미드 (140 mg, mmol)를 아세트산 (3.5 mL)에 취한 뒤, 용액을 65℃에서 2시간 동안 가열하고 HPLC에 의해 출발 물질이 소비된 것을 확인하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 용매를 고진공하에 제거하였다. 잔사를 30 mL CH₂Cl₂에 취하고, 20 mL 분량의 포화 NaHCO₃ 및 2% Na₂CO₃ 용액으로 세척하였다. 유기상을 Na₂SO₄에서 건조시키고, 여과한 후, 농축하여 연황갈색 유리질/뻣뻣한 폼을 얻었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(25 g 실리카겔; CH₃OH/CH₂Cl₂ 중 3% 7N NH₃) 표제 화합물 (120 mg, 88%)을 황갈색을 띠는 유리질로 수득하였다: C₄₁H₅₅N₇O₅에 대한 MS (ESI+) m/z 726.5 (M+H)⁺; C₄₁H₅₅N₇O₅에 대한 MS (ESI-) m/z 724.6 (M-H)^-; HPLC 순도 90% (체류 시간, 3.14 min).

단계 6: (2R,3R,4S,5R)-2-(4-아미노-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)-5-(((4-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)부틸)(이소프로필)아미노)메틸)테트라하이드로푸란-3,4-디올

7-((3aR,4R,6R,6aR)-6-(((4-(5-(tert-부틸)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)부틸)(이소프로필)아미노)메틸)-2,2-디메틸테트라하이드로푸로[3,4-d][1,3]디옥솔-4-일)-N-(2,4-디메톡시벤질)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (120 mg, 0.16 mmol)을 빙조에서 0℃로 예냉시킨 트리플루오로아세트산 (5.0 mL) 및 물 (0.5 mL)의 혼합물에 용해시켰다. 용액을 0℃에서 30분 동안 교반한 후, 실온으로 가온하였다. 실온에서 4.5시간 후, HPLC에 의해 반응이 완결된 것을 확인하고, 핑크색 반응 혼합물을 농축하였다. 잔사를 10 mL MeOH에 취하고, 농축하였다. 이 과정을 2회 반복하고, 잔사를 1시간 고진공하에 두었다. 물질을 6 mL MeOH에 취하고, 100 mg K₂CO₃ 및 물 5 방울로 처리하였다. 혼합물을 30분 동안 교반하고, 혼합물이 염기성임을 확인하였다. 혼합물을 파인 프릿을 통해 여과하고, 고체를 10 mL MeOH로 세척한 후, 여액을 농축하여 거의 무색에 가까운 고체를 얻었다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여(20 g 실리카겔; CH₃OH/CH₂Cl₂ 중 8% 7N NH₃) 표제 화합물 (60 mg, 68%)을 무색 유리질로 수득하였다: C₂₉H₄₁N₇O₃에 대한 MS (ESI+) m/z 536.5 (M+H)⁺; C₂₇H₄₁N₇O₃에 대한 MS (ESI-) m/z 534.5 (M-H)^-; HPLC 순도 >95% (체류 시간, 2.53 min); ¹H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δ 8.07 (s, 1 H), 7.48 (br. s., 1 H), 7.38 (d, J=8.50 Hz, 1 H), 7.27 (dd, J=8.50, 1.87 Hz, 1 H), 7.22 (d, J=3.73 Hz, 1 H), 6.61 (d, J=3.73 Hz, 1 H), 6.11 (d, J=4.77 Hz, 1 H), 4.43 (t, J=5.08 Hz, 1 H), 4.14 (t, J=5.49 Hz, 1 H), 4.04 (m, 1 H), 3.00 (m, 1 H), 2.83 (m, 3 H), 2.67 (dd, J=14.10, 6.84 Hz, 1 H), 2.53 (m, 2 H), 1.80 (m, 2 H), 1.52 (m, 2 H), 1.36 (s, 9 H), 1.01 (d, J=6.63 Hz, 3 H), 0.97 (d, J=6.63 Hz, 3 H).

화합물 20 및 21을 각각 유사한 과정으로 합성하였다. 이는 도 7 및 8에 각각 예시되었다.

DOT1L 저해

화합물 9 및 17은 생화학 분석에서 DOT1L의 강력한 저해제이다(이하 표 1 참조). 세포에서 상기 화합물의 DOT1L 저해능을 평가하기 위하여, 세포의 히스톤 H3 라이신 79 (H3K79) 메틸화에 대한 그의 효과를 조사하였다. DOT1L은 H3K79를 메틸화할 수 있는 것으로 알려진 유일한 히스톤 메틸전달효소이고, 따라서 세포의 DOT1L을 저해하면 세포의 H3K79 메틸화를 감소시킬 수 있다.

표 1

표 1의 데이터는 9 및 17이 세포로 유입되어 세포 상황에서 DOT1L을 저해할 수 있음을 제시한다. 화합물 9 및 17는 또한 세포에서의 증식을 저해하였다.

요약하면, 9 및 17로 DOT1L 활성을 저해하면 H3K79 메틸화가 감소되어 MLL-재배열된 백혈병 세포주의 증식 및 생존이 급격히 줄어든다.

강력한 소분자 DOT1L 저해제인 화합물 16에 의한 혼합 계통 백혈병 세포의 선택적 살해

SAM 기질 및 S-아데노실호모시스테인(SAH) 산물의 화학 구조, DOT1L 촉매작용의 반응 메카니즘 및 DOT1L 활성 부위의 공개된 결정 구조에 기초해, 메카니즘으로 유도되는 저해제 발견을 용이하게 하는 의약품 화학 설계 원리가 수립되었으며; 이에 따라 설계된 화학 유사체를 합성하고, DOT1L 효소 활성의 저해제로서 시험하였다. 그 결과, 화합물 16이 밝혀졌다. 이 화합물은 400±100 pM의 IC50으로 DOT1L 효소 활성을 농도-의존적으로 강력하게 저해하는 것으로 입증되었다. 이 화합물의 화학 구조는 SAM 기질, 및 SAH 산물의 뉴클레오시드 코어를 갖고 있다. 그에 따라, SAM 결합 포켓내 효소에 결합되도록 설계되었다. 정상 상태의 동태 분석으로 화합물이 SAM과 경쟁적으로 효소와 결합하는 것으로 확인되었다. 예를 들어, 경쟁적 저해의 현저한 특성은 기질 농도의 함수로서 화합물의 겉보기 IC50의 선형증가이며; 화합물 16은 SAM의 KM에 대해 SAM 농도의 함수로서 시험된 경우 이러한 패턴을 나타낸다. SAM은 모든 히스톤 메틸전달효소(HMT)에 의해 이용되는 일반적인 메틸기 공여체이다. HMT에 의한 SAM 이용의 보편성에도 불구하고, 도 5에 요약한 바와 같이, 화합물 16은 다른 HMT에 비해 현저한 DOT1L 저해 선택성을 나타낸다. 요컨대, 이 화합물은 시험된 모든 HMT에 대해서 DOT1L에 대해 1000배 초과의 최소 선택성을 나타낸다.

화합물 16 은 세포의 H3K79 메틸화를 선택적으로 저해한다

생화학 분석에서 화합물 16이 강력한 고선택성 DOT1L 저해제인 것을 확인하고, 디메틸화된 H3K79 (H3K79me2)에 특이적인 항체를 사용하여 추출된 히스톤의 면역블롯 분석으로 화합물 16이 세포에서 DOT1L을 저해할 수 있는지에 대해 검사하였다. MLL-재배열된 급성 골수성 백혈병(AML)(MOLM-13, MLL-AF9), MLL-재배열된 이중표현형 백혈병(MV4-11, MLL-AF4), 또는 비-MLL-재배열된 T-세포 급성 백혈병(주르카트) 유래 인간 세포주를 화합물 16으로 처리하면 전체적인 H3K79me2 수준이 농도 의존적으로 감소하게 된다. 화합물 16으로 매개되는 세포의 H3K79me2 결핍 동력학을 이해하기 위해서, 최대 세포 DOT1L 저해에 충분한 농도인 3 μM의 화합물 16과 배양된 MV4-11 세포에서 경시적 분석을 수행하였다. 처리 하루내에 H3K79me2 수준의 중등 감소가 확실하게 나타났으나, 완전한 감소에는 5일이 걸렸다. H3K79에 특이적인 히스톤 데메틸라제 효소는 알려지지 않았으며, DOT1L 저해에 이은 이 잔기에서의 메틸화 저하는 아마도 히스톤 전환 및 치환을 통한 비메틸화된 H3의 크로마틴 도입 때문으로 보인다.

세포에서 화합물 16 저해 활성의 특이성을 평가하기 위하여, 화합물 16으로 처리된 MV4-11 세포로부터 추출한 히스톤을 메틸-라이신 및 메틸-아르기닌 잔기 특이 항체의 패널로 면역블롯팅하였다. 화합물 16의 처리로 영향을 받은 메틸 마크는 H3K79me1 및 H3K79me2이 유일하였으며, 이는 화합물 16이 세포 상황에서 고특이적 DOT1L 저해제인 것과 일치한다.

화합물 16 은 MLL 융합 표적 유전자 발현을 봉쇄한다

화합물 16이 주요 MLL 융합 표적 유전자의 발현을 저해할 수 있는지를 검사하였다. HOXA9 및 MEIS1 과발현은 MLL 재배열된 백혈병의 특징이다(Armstrong et al., 2002; Ferrando et al., 2003; Ross et al., 2004; Ross et al., 2003; Rozovskaia et al., 2001; Yeoh et al., 2002). 또한, 두 유전자 모두 MLL 융합 단백질로 결합되고, H3K79에서 고메틸화되며, MV4-11을 비롯한 MLL-재배열된 세포주에서 DOT1L RNAi 녹다운으로 하향조절된다(Guenther et al., 2008; Krivtsov et al., 2008; Lin et al., 2010; Milne et al., 2005; Monroe et al., 2010; Mueller et al., 2009; Okada et al., 2005; Thiel et al.; Yokoyama et al., 2010). 정량적 실시간 PCR(RT-PCR)을 이용하여 MOLM-13 및 MV4-11 세포에서 HOXA9 및 MEIS1 전사 수준에 대한 화합물 16의 효과를 조사하였다. 화합물 16으로의 처리에 따라 약 700 nM의 IC50으로 각 세포주에서 양 전사에 농도-의존성 감소가 있었다. 3 μM 화합물 16으로 처리된 세포에서 HOXA9 및 MEIS1 mRNA 수준을 경시적으로 측정하여 감소 동력학을 평가하였다. 양 전사 수준은 화합물 첨가 48시간내에 상당히 감소하였고, 화합물 16으로 처리하고 6 내지 8일 후에 최대로 감소되었다(이들 데이터를 피팅하여 HOXA9 및 MEIS1 저해에 대한 추정 반감기는 각각 2.3 및 3.3일로 산출되었다). 항존 유전자 TBP의 전사 수준은 영향을 받지 않았기 때문에, 이러한 감소는 유전자 발현에 대한 일반적인 저해 효과 때문이 아니다.

화합물 16 은 MLL-재배열된 세포의 증식을 선택적으로 저해한다

화합물 16이 H3K79 메틸화를 저해하고 MLL 융합 표적 유전자 발현을 봉쇄할 수 있음을 확인하고, MLL-재배열된 백혈병 세포에서 항-증식 활성으로 번역되는지를 조사하였다. 3 μM 화합물 16의 존재 또는 부재하에 MV4-11 및 MOLM-13 세포에 대해 증식 분석을 수 일에 걸쳐 수행하였다. 주르카트 세포를 비-MLL 재배열된 세포주 대조군으로서 포함시켰다. 연장된 화합물 16의 처리 효과는 MLL-재배열된 세포주에 대해 대단히 특이적이었다. 화합물 16에 의해 생존 MV4-11 및 MOLM-13 세포수가 현저히 감소된 반면, 주르카트 세포의 증식은 영향을 받지 않았다. 주르카트 세포가 영향을 받지 않은 것은 세포 H3K79me2 수준에 대해 면역블롯으로 측정된 것과 같이, 이들 세포에서 DOT1L을 저해할 수 있는 화합물 16의 능력 차이 때문이 아니었다. 이 분석은 또한 화합물 16의 항증식 효과가 명백해지기 전에 상당한 지연을 나타내었으며; MLL-재배열된 양 세포주는 저해제에 노출 후 수 일동안 통상의 속도로 계속 증식되었다. 이는 아마도 메틸화된 H3K79의 소모후 mRNA 발현 저하 및 류케모겐 증식에 매우 중요한 유전자 산물의 수준 감소를 포함하는 과정으로, DOT1L 저해 후 MLL 융합 표적 유전자의 이상 발현을 완전히 역전시키는데 필요한 시간을 반영하는 것일 수 있다. 화합물 16에 대한 MLL-재배열된 세포주의 감수성차 분석을 확대하기 위해, 6개의 MLL-재배열된 인간 백혈병 세포주 및 6개의 비-재배열된 인간 백혈병 세포주의 패널에서 증식 저해를 위한 IC50 값을 결정하였다. MLL-재배열된 패널(도 6)은 MLL-AF4, MLL-AF9 또는 MLL-ENL 융합을 함유한 ALL, AML 및 이중표현형 백혈병 유래 인간 세포주를 포함하였다. 도 6에 나타낸 바와 같이, MLL-재배열된 세포주에 대한 IC50 값은 나노몰 내지 마이크로몰 범위인 반면, 비-MLL 재배열된 세포주에 대한 IC50 값은 항상 10 μM 초과이거나, 시험한 최고 농도에서 저해 부족으로 확인할 수 없었다(도 6에서 IC50 > 50 μM로 보고). 이어서, 이들 결과가 MLL-AF9 융합 단백질의 레트로바이러스 발현으로 형질전환된 일차 뮤린 조혈 선구세포로 확대될 수 있는지를 결정하였다.

이들 결과는 DOT1L 메틸전달효소 활성이 MLL-재배열된 세포 증식 및 MLL 융합 매개 전환에 필요하지만, 배양물중 비-MLL-재배열된 세포의 증식 및 생존에 필수적이지는 않음을 입증한다.

화합물 16 은 MLL-재배열된 세포에서 분화 및 아포프토시스를 야기한다

세포 사멸 메카니즘을 좀 더 자세히 살펴보기 위해, DNA 함량을 위한 유세포 측정 및 아넥신 V 염색으로 MV4-11 및 MOLM-13 세포에서 세포 주기 및 아포프토시스에 대한 화합물 16의 효과를 평가하였다. 3 μM 화합물 16과 배양 4일 후에 MV4-11 세포에서 G0/G1 기의 소폭 증가, 및 S-기 세포 감소가 분명하게 나타났다. 이후 다음 6일에 걸쳐 sub-G1 및 아넥신-양성 세포 증가가 이어졌고, 이는 아포프토시스 세포사와 합치한다. 아넥신-양성 세포 퍼센트가 상당히 낮긴 하지만, MOLM-13 세포에서도 유사한 결과를 얻었다. 다음으로, 화합물 16이 세포사 전에 분화를 유도하는지를 분석하였다. MOLM-13 세포를 3 μM 화합물 16으로 처리하고, 골수 분화 마커 CD14의 세포 표면 발현을 유세포 측정으로 관찰하였다. 화합물 16으로 처리하고 12일 후 CD14 발현이 유도되었다. MOLM-13 세포의 화합물 16 처리로 상향조절된 유전자의 유전자 세트 농축 분석(GSEA)(Subramanian et al., 2005)(하기 참조)이 또한 CD14를 비롯한 조혈 세포 계통 마커의 상당한 농축을 입증하였다[(정규화된 농축 점수(NES) = 1.78, 오발견율(FDR) = 0.054)]. 이는 DOT1L의 소분자 저해가 세포 사멸 전 분화도를 어느 정도 촉진함을 추가로 제시한다.

화합물 16 은 MLL-재배열된 유전자 특징을 역전시킨다

MLL-재배열된 백혈병 세포주에서 유전자 발현에 대한 화합물 16의 처리 효과를 평가하기 위하여, 3 μM 화합물 16으로 처리된 MV4-11 세포 및 MOLM-13 세포로부터 RNA를 최대 6일 동안 분리하고, 증폭시킨 후, 아피메트릭스 마이크로어레이에 하이브리드화하였다. 저해제 처리 후 4일 까지, 통계적으로 유의적인 유전자 발현 변화(통계적으로 유의적인 변화(q<0.15)를 갖고 적어도 2배 상향 또는 하향조절된 프로브)는 관찰되지 않았으며, 이는 H3K79 메틸화 및 증식에 대한 화합물 16의 상대적 지연 효과에 부합한다. 화합물 16으로 처리하고 6일 후 MV4-11 및 MOLM-13 세포중에는 다수의 HOXA 유전자, MEIS1 및 MEF2C를 비롯하여, MLL 융합 매개 백혈병유발에 이미 연루되었던 하향 조절된 유전자가 몇 개 있었다. 화합물 16으로 처리하고 6일 후, MOLM-13 세포의 하향 조절된 유전자의 GSEA에 의해 MLL-생식계 급성 백혈병에 비해 MLL-재배열된 인간 급성 백혈병에서 과발현된 유전자에 대한 강력한 농축(NES = -1.74, FDR = 0.014)이 입증되었다(Ross et al., 2004). 이는 MLL-재배열된 세포주에서 DOT1L의 소분자 저해가 MLL-재배열된 유전자 발현 특성을 역전시킬 수 있음을 제시하는 것이다. 이어, 화합물 16으로 처리하고 6일 후, GSEA를 사용하여, MOLM-13(MLL-AF9) 또는 MV4-11(MLL-AF4) 세포의 하향조절된 유전자와 대규모 시퀀싱을 병용한 게놈 규모의 크로마틴 면역침전(ChIP-seq)을 통해 MLL-AF9 또는 MLLAF4의 직접 표적으로 확인된 유전자(Guenther et al., 2008)를 비교하였다. MOLM-13 세포에서 화합물 16으로 하향조절된 유전자는 직접 MLL-AF9 표적이 상당히 풍부한(NES = -1.86, FDR: 0.007) 반면, MV4-11 세포에서 화합물 16으로 하향조절된 유전자는 직접 MLL-AF4 표적이 풍부하였다(NES = -1.51, FDR: 0.081, 도 5D). 두 결과 모두 DOT1L의 소분자 저해가 직접 MLL 융합 표적의 발현을 감소시킴을 제시한다. 마지막으로, 화합물 16 처리로 야기된 MOLM-13(MLL-AF9) 세포의 유전자 발현 변화를 MLL-AF9 백혈병의 마우스 모델에서 Dot1L의 유전자 녹아웃으로 야기된 변화와 비교하였다. 이들 유전자 발현 변화(NES = -1.58, FDR: 0.024, 도 5E) 간에 상당한 중복이 있음을 발견하였으며, 이는 화합물 16 처리 및 Dot1L의 유전자 소거가 유사한 경로를 통해 MLL-재배열된 세포의 세포 사멸을 유도함을 보여주는 것이다.

참조에 의한 원용

본 원에 인용된 모든 미국 특허 및 미국 공개 특허 출원은 참조로 본 원에 원용된다.

균등물

본 발명의 다수의 실시양태가 본 원에 기술되고 예시되었지만, 당업자들이라면 본 원에 기술된 기능을 수행하고/하거나, 본 원에 기술된 결과 및/또는 하나 이상의 이점을 얻기 위해 다양한 다른 수단 및/또는 구조를 용이하게 구상할 수 있을 것이며, 이러한 변형 및/또는 변경은 본 발명의 범위내인 것으로 간주된다. 더 일반적으로, 당업자들은 본 원에 기술된 모든 파라미터, 치수, 물질, 및 구성이 예시적인 것이며, 실제의 파라미터, 치수, 물질 및/또는 구성이 특정 적용 또는 본 발명의 교시가 이용되는 적용에 따라 달라질 것임을 쉽사리 받아들일 것이다. 당업자들은 일상적인 실험만으로도 본 원에 기술된 특정 실시양태에 대한 많은 균등물을 인식하거나, 알아낼 수 있을 것이다. 따라서, 상기 실시양태들은 단지 예시로만 제시된 것이며, 이하 특허청구범위 및 그의 균등물의 범위내에서 본 발명이 구체적으로 기술되고 청구된 것과 다른 방식으로 실시될 수 있는 것으로 이해하여야 한다. 본 발명은 본 원에 기술된 각각의 개별적인 특징, 시스템, 물품, 물질, 키트 및/또는 방법에 관한 것이다. 또한, 2 이상의 이러한 특징, 시스템, 물품, 물질, 키트 및/또는 방법은 이들이 서로 상충되지만 않으면, 본 발명의 범위내에 포함된다.

Claims (102)

1. 화학식 I의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 수화물, 거울상이성체 또는 입체이성체:
   

   

   
   상기 식에서, 각각의 경우 독립적으로
   X는

   

   
   또는

   

   이고;
   R¹은 수소, 알킬, 사이클로알킬, 알킬사이클로알킬, 알킬아릴, 할로알킬, 포르밀, 헤테로사이클릴, 헤테로사이클릴알킬,

   

   

   

   이거나; 또는

   

   

   로 치환된 (C₂-C₄)알킬이나, 단 X가

   

   이면, R¹은

   

   가 아니고;
   R¹⁰은 수소 또는 알킬이며;
   R^11a는 수소, 알킬, 또는 알킬-사이클로알킬이고;
   R^11b는 수소 또는 알킬이거나; 또는 R^11a 및 이것이 결합된 질소와 함께, 0 또는 1개의 추가의 헤테로원자를 포함하는 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴을 형성하며;
   R¹³은 수소, 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 헤테로아르알킬 또는 실릴이고;
   R¹⁴는 수소, 알킬, 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬 또는 헤테로아르알킬이며;
   R¹⁵는 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이고;
   R²⁰은 수소, 알킬, 사이클로알킬 또는 사이클로알킬알킬이며;
   A는

   

   
   또는

   

   이고;
   R²는

   

   이며;
   Y는 -NH-, -N(알킬)-, -O-, 또는 -CR⁶ ₂-이고;
   R^22a는 아릴, 헤테로아릴, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 융합된 바이사이클릴, 바이아릴, 아릴옥시아릴, 헤테로아릴옥시아릴, 아릴옥시헤테로아릴 또는 헤테로아릴옥시헤테로아릴이며;
   R^22b는 수소 또는 알킬이고;
   R²⁴는 수소 또는 알킬이며;
   R^25a, R^25b, R^25c, 및 R^25d는 독립적으로 -M₂-T₂이고, 여기에서 M₂는 결합, SO₂, SO, S, CO, CO₂, O, O-C₁-C₄ 알킬 링커(linker), C₁-C₄ 알킬 링커, NH, 또는 N(R_t)이고, R_t는 C₁-C₆ 알킬이며, T₂는 H, 할로, 또는 R_S4이고, R_S4는 C₁-C₆ 알킬, C₂-C₆ 알케닐, C₂-C₆ 알키닐, C₃-C₈ 사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 4 내지 8-원 헤테로사이클로알킬, 또는 5 내지 10-원 헤테로아릴이며, 여기에서 O-C₁-C₄ 알킬 링커, C₁-C₄ 알킬 링커, R_t, 및 R_S4는 각각 할로, 하이드록실, 카르복실, 시아노, C₁-C₆ 알킬, C₂-C₆ 알케닐, C₂-C₆ 알키닐, C₁-C₆ 알콕실, 아미노, 모노-C₁-C₆ 알킬아미노, 디-C₁-C₆ 알킬아미노, C₃-C₈ 사이클로알킬, C₆-C₁₀ 아릴, 4 내지 6-원 헤테로사이클로알킬, 및 5 내지 6-원 헤테로아릴로 구성된 군에서 선택된 하나 이상의 치환기에 의해 임의로 치환되고;
   R³은 수소, 할로겐, 하이드록시, 알킬옥시, 아르알킬옥시, 알킬카르보닐옥시 또는 실릴옥시이며;
   R⁴는 수소, 할로겐, 하이드록시, 알킬옥시, 아르알킬옥시, 알킬카르보닐옥시 또는 실릴옥시이고;
   R⁴¹은 수소, 알킬 또는 알키닐이고;
   Z는 수소 또는

   

   이고;
   R^5a는 수소, 알킬, 할로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 바이아릴, 알케닐알킬, 알키닐알킬, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐아미노알킬, 아릴카르보닐아미노알킬, 아르알킬카르보닐아미노알킬, 아릴술포닐아미노알킬, 알킬티오알킬, 아르알킬티오알킬 또는 헤테로아르알킬티오알킬; 또는 하이드록시, 할로, 카르복시, 알킬옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 니트로, 아미노, 아미도, 아릴 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 치환된 알킬이며;
   R^5b는 수소, 알킬, 할로알킬, 알케닐, 알키닐, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 바이아릴, 알케닐알킬, 알키닐알킬, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 헤테로아르알킬, 알킬카르보닐아미노알킬, 아릴카르보닐아미노알킬, 아르알킬카르보닐아미노알킬, 아릴술포닐아미노알킬, 알킬티오알킬, 아르알킬티오알킬 또는 헤테로아르알킬티오알킬; 또는 하이드록시, 할로, 카르복시, 알킬옥시, 아릴옥시, 아르알킬옥시, 니트로, 아미노, 아미도, 아릴 및 헤테로아릴로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 치환된 알킬이거나; 또는 R^5a 및 이것이 결합된 질소와 함께, 0 또는 1개의 추가의 헤테로원자를 포함하는 4- 내지 8-원 헤테로사이클릴을 형성하며;
   R⁶은 수소, 알킬 또는 할로이거나; 또는 두 제미널(geminal) R⁶은 함께 취해져 에틸렌, 프로필렌 또는 부틸렌이고;
   R^7a는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이며;
   R^7b는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이고;
   R^7c는 수소, 저급 알킬, 저급 할로알킬, 시아노, 할로, 저급 알콕시, 또는 시아노, 저급 알콕시 및 할로로 구성된 군에서 독립적으로 선택된 1, 2 또는 3개의 치환기에 의해 임의로 치환된 C₃-C₅ 사이클로알킬이다.
2. 제1항에 있어서, X가

   

   인 화합물.
3. 제1항에 있어서, X가

   

   인 화합물.
4. 제1항에 있어서, X가

   

   인 화합물.
5. 제1항에 있어서, X가

   

   인 화합물.
6. 제1항에 있어서, X가

   

   인 화합물.
7. 제1항에 있어서, X가

   

   인 화합물.
8. 제1항에 있어서, X가

   

   인 화합물.
9. 제1항 내지 제8항중 어느 한 항에 있어서, R²가

   

   인 화합물.
10. 제1항 내지 제8항중 어느 한 항에 있어서, R²가

    

    인 화합물.
11. 제10항에 있어서, R²⁴가 수소 또는 알킬인 화합물.
12. 제11항에 있어서, R²⁴가 수소인 화합물.
13. 제9항 내지 제12항중 어느 한 항에 있어서, R^25a가 수소, 알킬, -O-알킬, 할로겐, 트리플루오로알킬, -O-트리플루오로메틸, 또는 -SO₂-트리플루오로메틸인 화합물.
14. 제13항에 있어서, R^25b가 수소, 알킬, 할로겐, 또는 트리플루오로알킬인 화합물.
15. 제14항에 있어서, R^25c가 수소, 알킬, 또는 할로겐이고; R^25d는 수소인 화합물.
16. 제15항에 있어서, R^25c가 수소 또는 할로겐이고; R^25d는 수소인 화합물.
17. 제1항 내지 제8항중 어느 한 항에 있어서, R²가

    

    인 화합물.
18. 제17항에 있어서, Y가 -NH- 또는 -N(알킬)-인 화합물.
19. 제17항에 있어서, Y가 -NH-인 화합물.
20. 제17항에 있어서, Y가 -N(CH₃)-인 화합물.
21. 제17항에 있어서, Y가 -O-인 화합물.
22. 제17항에 있어서, Y가 -CH₂-인 화합물.
23. 제17항 내지 제22항중 어느 한 항에 있어서, R^22a가 아릴 또는 아르알킬인 화합물.
24. 제17항 내지 제22항중 어느 한 항에 있어서, R^22a가 치환된 페닐 또는 치환된 벤질인 화합물.
25. 제17항 내지 제22항중 어느 한 항에 있어서, R^22a가

    

    
    

    

    
    

    

    
    인 화합물.
26. 제17항 내지 제22항중 어느 한 항에 있어서, R^22a가

    

    
    

    

    
    인 화합물.
27. 제17항 내지 제26항중 어느 한 항에 있어서, R^22b가 수소인 화합물.
28. 제17항 내지 제26항중 어느 한 항에 있어서, R^22b가 메틸인 화합물.
29. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이 수소인 화합물.
30. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이 알킬인 화합물.
31. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이 -CH₃, -CH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -CH₂CH(CH₃)₂ 또는 -CH₂CH₂CH(CH₃)_2인 화합물.
32. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이 C₃-C₇ 사이클로알킬인 화합물.
33. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이 사이클로프로필, 사이클로프로필메틸, 2-사이클로프로필에틸, 사이클로부틸, 사이클로부틸메틸, 2-사이클로부틸에틸, 사이클로펜틸, 사이클로펜틸메틸, 또는 2-사이클로펜틸에틸인 화합물.
34. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이

    

    또는

    

    인 화합물.
35. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이 -CH₂CF_3인 화합물.
36. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이 -CH₂Ph인 화합물.
37. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이 -C(=O)H인 화합물.
38. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이 -C(=O)CH₃인 화합물.
39. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이 헤테로사이클릴 또는 헤테로사이클릴알킬인 화합물.
40. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이

    

    ,
    

    

    인 화합물.
41. 제40항에 있어서, R¹이

    

    인 화합물.
42. 제40항에 있어서, R¹이

    

    인 화합물.
43. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이

    

    인 화합물.
44. 제43항에 있어서, R¹⁵가 알킬인 화합물.
45. 제43항에 있어서, R¹⁵가 사이클로알킬인 화합물.
46. 제43항에 있어서, R¹⁵가 사이클로알킬알킬인 화합물.
47. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이
    

    

    로 치환된 (C₂-C₄) 알킬인 화합물.
48. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이

    

    
    

    

    
    인 화합물.
49. 제47항 또는 제48항에 있어서, R^11a가 수소, 알킬, 또는 알킬사이클로알킬인 화합물.
50. 제47항 또는 제48항에 있어서, R^11a가 수소, 메틸, 또는 i-프로필인 화합물.
51. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이

    

    인 화합물.
52. 제51항에 있어서, R¹³이 수소인 화합물.
53. 제1항 내지 제28항중 어느 한 항에 있어서, R¹이

    

    
    

    

    
    

    

    인 화합물.
54. 제1항 내지 제53항중 어느 한 항에 있어서, A가

    

    
    

    

    
    

    

    인 화합물.
55. 제54항에 있어서, A가

    

    인 화합물.
56. 제1항 내지 제53항중 어느 한 항에 있어서, A가

    

    
    

    

    
    인 화합물.
57. 제56항에 있어서, A가

    

    인 화합물.
58. 제56항에 있어서, A가

    

    
    

    

    
    인 화합물.
59. 제56항에 있어서, A가

    

    인 화합물.
60. 제56항에 있어서, A가

    

    인 화합물.
61. 제1항 내지 제53항중 어느 한 항에 있어서, A가

    

    인 화합물.
62. 제1항 내지 제53항중 어느 한 항에 있어서, A가

    

    인 화합물.
63. 제1항 내지 제53항중 어느 한 항에 있어서, A가

    

    이고; R⁶은 알킬인 화합물.
64. 제1항 내지 제53항중 어느 한 항에 있어서, A가

    

    이고; R⁶은 메틸, 에틸 또는 이소프로필인 화합물.
65. 제1항 내지 제64항중 어느 한 항에 있어서, R³이 하이드록실인 화합물.
66. 제1항 내지 제64항중 어느 한 항에 있어서, R³이 수소인 화합물.
67. 제1항 내지 제66항중 어느 한 항에 있어서, R⁴가 하이드록실인 화합물.
68. 제1항 내지 제66항중 어느 한 항에 있어서, R⁴가 수소인 화합물.
69. 제1항 내지 제68항중 어느 한 항에 있어서, R⁴¹이 수소인 화합물.
70. 제1항 내지 제68항중 어느 한 항에 있어서, R⁴¹이 메틸인 화합물.
71. 제1항 내지 제64항중 어느 한 항에 있어서, R³이 하이드록실이고; R⁴는 하이드록실인 화합물.
72. 제1항 내지 제64항중 어느 한 항에 있어서, R³이 하이드록실이고; R⁴는 하이드록실이며; R⁴¹은 수소인 화합물.
73. 제1항 내지 제64항중 어느 한 항에 있어서, R³이 하이드록실이고; R⁴는 하이드록실이며; R⁴¹은 메틸인 화합물.
74. 제1항 내지 제64항중 어느 한 항에 있어서, R³이 수소이고; R⁴는 하이드록실인 화합물.
75. 제1항 내지 제64항중 어느 한 항에 있어서, R³이 수소이고; R⁴는 하이드록실이며; R⁴¹은 수소인 화합물.
76. 제1항 내지 제64항중 어느 한 항에 있어서, R³이 수소이고; R⁴는 하이드록실이며; R⁴¹은 메틸인 화합물.
77. 제1항 내지 제64항중 어느 한 항에 있어서, R³이 하이드록실이고; R⁴는 수소인 화합물.
78. 제1항 내지 제64항중 어느 한 항에 있어서, R³이 하이드록실이고; R⁴는 수소이며; R⁴¹은 수소인 화합물.
79. 제1항 내지 제64항중 어느 한 항에 있어서, R³이 하이드록실이고; R⁴는 수소이며; R⁴¹은 메틸인 화합물.
80. 제1항 내지 제79항중 어느 한 항에 있어서, Z가 수소 또는

    

    인 화합물.
81. 제80항에 있어서, Z가 수소인 화합물.
82. 제80항에 있어서, Z가

    

    인 화합물.
83. 제1항 내지 제82항중 어느 한 항에 있어서, R^5a가 수소, 알킬, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 또는 헤테로아르알킬인 화합물.
84. 제1항 내지 제82항중 어느 한 항에 있어서, R^5a가 수소, 아르알킬옥시알킬, 알킬, 아릴, 아르알킬, 아미노알킬 또는 하이드로알킬인 화합물.
85. 제1항 내지 제82항중 어느 한 항에 있어서, R^5a가 -H, -CH₂CH₂OCH₂Ph, -CH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -Ph, -CH₂CH(CH₃), -CH₃, -CH₂Ph, -CH₂CH₂NH₂, -CH₂(사이클로헥실) 또는 -CH₂CH₂OH인 화합물.
86. 제1항 내지 제86항중 어느 한 항에 있어서, R^5b가 수소, 알킬, 카르보사이클릴, 헤테로사이클릴, 아릴, 헤테로아릴, 카르보사이클릴알킬, 헤테로사이클릴알킬, 아르알킬, 또는 헤테로아르알킬인 화합물.
87. 제1항 내지 제86항중 어느 한 항에 있어서, R^5b가 수소, 아르알킬옥시알킬, 알킬, 아릴, 아르알킬, 아미노알킬 또는 하이드로알킬인 화합물.
88. 제1항 내지 제86항중 어느 한 항에 있어서, R^5b가 수소인 화합물.
89. 제1항 내지 제82항중 어느 한 항에 있어서, R^5a가 -H, -CH₂CH₂OCH₂Ph, -CH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, -Ph, -CH₂CH(CH₃), -CH₃, -CH₂Ph, -CH₂CH₂NH₂, -CH₂(사이클로헥실) 또는 -CH₂CH₂OH이고; R^5b는 -H인 화합물.
90. 제1항 내지 제89항중 어느 한 항에 있어서, R^7a가 수소 또는 저급 알킬인 화합물.
91. 제91항에 있어서, R^7a가 수소인 화합물.
92. 제1항 내지 제91항중 어느 한 항에 있어서, R^7b가 수소 또는 저급 알킬인 화합물.
93. 제94항에 있어서, R^7b가 수소인 화합물.
94. 제1항 내지 제93항중 어느 한 항에 있어서, R^7c가 수소 또는 저급 알킬인 화합물.
95. 제94항에 있어서, R^7c가 수소인 화합물.
96. 제1항 내지 제95항중 어느 한 항에 있어서, R^5a 및 R^5b가 수소인 화합물.
97. 

    
    

    

    
    

    

    
    로 구성된 군에서 선택되는 것인 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 수화물, 거울상이성체 또는 입체이성체.
98. 제1항 내지 제97항중 어느 한 항의 화합물, 또는 그의 약학적으로 허용가능한 염, 수화물, 거울상이성체 또는 입체이성체; 및 약학적으로 허용가능한 희석제 또는 담체를 포함하는 약학 조성물.
99. 제1항 내지 제97항중 어느 한 항의 화합물, 또는 제98항의 약학 조성물; 및 이들의 사용 설명서를 포함하는 키트 또는 포장 약품.
100. 제1항 내지 제97항중 어느 한 항의 화합물, 또는 제98항의 약학 조성물의 치료적 유효량을 이를 필요로 하는 대상에 투여하는 단계를 포함하는, DOT1-매개 단백질 메틸화가 역할을 하는 장애의 치료 또는 예방 방법.
101. 제100항에 있어서, 장애가 암인 방법.
102. 제100항에 있어서, 장애가 신경계 장애인 방법.

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