KR20130070111A - 고농축 락토바실러스균을 함유하는 장용성 캡슐 제제 및 그의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 위산이나 담즙산 등의 체액에 영향을 받지 않고 안정적으로 장까지 전달될 수 있는 고농축의 유산균 분말을 함유하는 장용성 캡슐 제제의 제조방법, 및 상기 방법에 의해 제조된 고농축 유산균 함유 장용성 캡슐 제제에 관한 것으로서, 본 발명에 따라 제조된 고농축 유산균 함유 장용성 캡슐 제제는 한 번에 다량의 생균을 공급할 뿐만 아니라, 장까지 도달하는 데 있어 체액 등의 영향을 최소화할 수 있고, 생산과정 역시 간단하고 저렴하여 대량으로 생산할 수 있다는 장점이 있다.

Description

고농축 락토바실러스균을 함유하는 장용성 캡슐 제제 및 그의 제조방법{ENTERIC CAPSULE FORMULATION　CONTAINING HIGH-CONCENTRATED LACTOBACILLUS STRAIN AND METHOD FOR THE PREPARATION THEREOF}

본 발명은 위산이나 담즙산 등의 체액에 영향을 받지 않고 안정적으로 장까지 전달될 수 있는 고농축의 유산균 분말을 함유하는 장용성 캡슐 제제의 제조방법, 및 상기 방법에 의해 제조된 고농축 유산균 함유 장용성 캡슐 제제에 관한 것이다.

유산균은 인간이나 동물의 장관에 상존하여 병원성 세균이 소화관 상피에 부착하는 것을 방해하여 질병발생을 막아주며, 유산균에 의해 생성된 박테이로신(bacteriocin)과 같은 대사산물은 설사를 일으키는 병원성 미생물과 장내 유해균을 죽이거나 증식을 억제하는 효과를 나타낸다. 유산균은 그 자체가 정장지사 작용을 하는 것이 아니라 유산균이 증식하면서 만들어 내는 활성 대사산물, 예를 들면 유산(lactic acid), 항생물질(락토시딘(lactocidine), 애시도린(acidoline), 애시도필린(acidophiline), 박테로시딘(bacterocidine) 등), 및 비타민 B군 등이 이러한 광범위한 항균 효과를 나타낸다. 뿐만 아니라, 유산균은 콜레스테롤 저하능, 면역 증강능, 항돌연변이원성, 항종양활성 및 항암 효과도 나타낸다.

현재 사용되고 있는 정장용 유산균에는 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 비피더스(Lactobacillus bifidus), 스트렙토코커스 패칼리스(Streptococcus faecalis), 스트렙토코커스 패시움(Streptococcus faecium), 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 바실러스 리케니포미스(Bacillus licheniformis), 바실러스 폴리퍼멘티커스(Bacillus polyfermenticus), 바실러스 메센테리커스(Bacillus mesentericus), 사카로마이세스 세레비제(Saccharomyces cerevisiae), 클로스트리디움 부티리컴(Clostridium butyricum) 등이 있다.

그 중 락토바실러스 애시도필러스는 젖산 등의 유기산을 생성하며, 박테리오신을 생성하여 병원균에 대한 억제능이 뛰어나고 생체면역반응에 대한 효과 및 항암효과도 가져 락토바실러스 속에서도 가장 유용한 균주로 평가받고 있다. 특히, 강력한 장 점막 부착력으로 장 점막에 붙음으로써 장 질환을 유발하는 병원균을 경쟁적으로 떨어뜨려 밖으로 배설시키는 등 생균제(probiotics)로서 사람이나 동물에 유용하게 이용되고 있다(Dunne, C., Murphy, L., et al., 1999, Probiotics, 76:279-292).

락토바실러스 애시도필러스의 중요한 기능으로서는 1) 장내 병원균의 억제, 2) 장내 균총의 정상화, 3) 혈중 콜레스테롤 수준의 저하, 4) 항암성 증진, 5) 면역성 증진, 및 6) 항생제 치료 후 설사의 치료 및 예방 등이 알려져 있다(Elmer, G.W. 2001, Probiotics, 58(12):1101-1109; Scheinbach, 1998). 더욱이, 사람에서 병을 일으키지 않아 안전성이 인정되어 실제로 각종 기능성 유제품 및 발효유제품, 유아용 조제유 등에 널리 이용되고 있다(Salminen, S. and von Wright, A., 1998, Lactic Acid Bacteria, Microbiology and Functional Aspects, Marcel Dekker, Inc., New York.).

일반적인 유산균이 가져야 할 필수적인 특성으로는 내산성이나, 담즙산액에 대한 내성을 들 수 있다. 보통 유산균은 장에 정착하여 장관운동 활성화, 유해균 억제, 비타민 및 면역증강 물질 촉진 등의 다양한 생리활성 효과를 발휘하는데, 유산균은 장에 도달하기까지 위를 거치게 되어있어 위에서 분비되는 위산으로 인해 사멸하여 유산균 본래의 생리활성 기능을 발휘하지 못하게 되는 경우가 많다.

이에 따라, 유산균이 복용 후 효과적으로 살아남아 사람의 장내에서 생존하며 여러 가지 기능을 발휘하기 위해서는, 구강과 위의 효소, 위액의 낮은 pH, 소장내의 담즙 및 점액 등에 대해 저항성이 있어야 한다. 따라서, 유산균 제제에서 중요한 것은 균수 뿐 아니라 위액을 포함한 생체액, 온도 및 습도에 대한 안정성이다. 유산균은 살아서 장에 도달할 경우 약 30분마다 2배수로 증식을 시작한다고 알려져 있다. 그러나 아무리 많은 균을 복용한다 하더라도 위액에서 안정하지 않으면 장까지 도달하는 균수는 미미할 것이며 그 효과도 크게 감소될 것이다. 그러므로 위산, 온도 및 습도에 대한 안정성이 확보된 유산균 제제여야만이 충분한 효과를 발휘할 수 있을 것이다.

이러한 이유로, 유산균 분말을 여러 가지 단백질 또는 탄수화물 등으로 코팅하여 체내에서의 유산균 사멸을 방지하려는 시도가 있어 왔다. 그러나, 종래의 코팅된 유산균 분말은 유산균체가 단백질 또는 탄수화물로 코팅된 형태의 분말로서, 그 자체를 복용하기는 적합하지 않다. 또한 유산균에 직접 코팅을 하는 경우 유산균 자체에 손상(damage)을 주게 되어 균수의 감소를 초래하고 원하지 않은 유산균 변종 등을 나타낼 수가 있다. 이러한 부분을 최소화시키기 위해서는 온도 등의 생산조건을 까다롭게 관리해야 하기 때문에 생산원가 등의 상승을 가져올 수 있고, 제조공정의 조건에 따라 유산균의 안정성은 큰 차이를 보일 수 있어 제품마다 품질의 차이를 가져올 수도 있다.

특히, 생균제의 경우 가장 큰 문제점이 제조과정 중 생존율이 감소하는 것인데, 이와 같이 제조 중 건조와 같은 공정 동안 생존율의 감소는 열과 세포에 존재하는 결합수의 손실에 따른 것으로 보고되어 있다(Daemen, A. L. H. and H. J. van der Stege., 1982, Neth. Milk Dairy J., 36:211-229). 특히 락토바실러스 애시도필러스의 경우 코팅과 같은 전처리 조작에 사용하는 설비의 온도, 시간 등이 균주의 열에 대한 저항성에 영향을 미친다(Teixeira, P., H. Castro and R. Kirby., 1995, J. Appl. Biotechnol., 78:456-462).

이에 따라, 일반적인 유산균을 사용하더라도 보다 간단한 공정으로도 목적하는 장까지 충분한 유산균이 도달할 수 있도록 하는 방법이 요구되었으며, 스트렙토코커스 패시움 및 바실러스 서브틸러스의 복합유산균을 주성분으로 하는 메디락류(한미약품)가 충진된 캡슐에 장용코팅을 한 캡슐 제제가 시판되고 있으나, 식품이나 건강식품의 경우에는 사용할 수 있는 장용성 코팅물질이나 코팅용매가 한정되어 있고, 또 사용하더라도 유산균의 균수를 보존할 수 있는 생산 공정이 복잡하고 까다로워 락토바실러스 균과 같이 열에 약한 유산균에는 실제 적용이 어려운 실정이다.

따라서, 본 발명자는 열에 불안정한 유산균, 특히 락토바실러스 균주를 함유하고 위산이나 담즙산 등의 체액에 대한 영향을 최소화하면서, 장까지 안정적으로 도달할 수 있게 하는 장용성 캡슐을 개발함으로써 본 발명을 완성하였다.

[비특허문헌 1] Dunne, C., Murphy, L., et al. 1999, Probiotics, 76:279-292

[비특허문헌 2] Elmer, G.W. 2001, Probiotics, 58(12):1101-1109

[비특허문헌 3] Salminen, S. and von Wright, A. 1998. Lactic Acid Bacteria, Microbiology and Functional Aspects, Marcel Dekker, Inc., New York

[비특허문헌 4] Hood et al., 1988, J. Food Sci., 53:1514

[비특허문헌 5] Kullisaar et al., 2002, J. Food Microbiol., 72:215-224, 2002

[비특허문헌 6] Zaika et al., 1983, J. Food Sci., 48(5):1455-1459

[비특허문헌 7] Daemen, A. L. H. and H. J. van der Stege., 1982, Neth. Milk Dairy J., 36:211-229

[비특허문헌 8] Teixeira, P., H. Castro and R. Kirby. 1995, J. Appl. Biotechnol., 78:456-462

따라서, 본 발명의 목적은, 고농축의 유산균이 위산이나 담즙산 등의 체액에 대한 영향을 최소화하면서 안전하게 장까지 전달될 수 있는 고농축 유산균 함유 장용성 캡슐 제제의 제조방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 제조방법에 의해 제조된 장용성 캡슐 제제를 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은,

1) 고농축 유산균 분말을 포함하는 혼합분말을 경질 캡슐에 충진하는 단계;

2) 상기 경질 캡슐을 코팅 용액으로 단계적으로 장용 코팅하는 단계; 및

3) 상기 코팅된 캡슐을 건조시키는 단계를 포함하는, 유산균 함유 장용성 캡슐 제제의 제조방법을 제공한다.

상기 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명은, 상기 제조방법에 의해 제조된, 고농축의 유산균을 포함하는 장용성 캡슐 제제를 제공한다.

본 발명에 따라 제조된 고농축 유산균 함유 장용성 캡슐 제제는 한 번에 다량의 생균을 공급할 뿐만 아니라, 장까지 도달하는 데 있어 체액 등의 영향을 최소화할 수 있고, 생산과정 역시 간단하고 저렴하여 대량으로 생산할 수 있다.

도 1은 25℃ 및 65% RH의 조건에서의 보관기간별 유산균 안정성 추이를 나타낸 것이다.

본 발명에 따른 유산균 함유 장용성 캡슐 제제의 제조방법은, 유산균의 사멸이 가장 많이 발생할 수 있는 코팅 단계 및 건조 단계의 조건을 최적화함으로써 제조공정 중에서 발생할 수 있는 유산균의 사멸을 최소화할 수 있으며, 그 공정은 간단하고 신속할 뿐만 아니라 저렴한 비용만으로도 유산균 제제를 대량으로 제조할 수 있다.

구체적으로, 본 발명에 따른 유산균 함유 장용성 캡슐 제제의 제조방법은 1) 고농축 유산균 분말을 포함하는 혼합분말을 경질 캡슐에 충진하는 단계; 2) 상기 경질 캡슐을 코팅 용액으로 단계적으로 장용 코팅하는 단계; 및 3) 상기 코팅된 캡슐을 건조시키는 단계를 포함한다.

본 발명의 방법에 따르면, 열에 약한 유산균, 예를 들면, 락토바실러스(Lactobacillus) 균주, 바람직하게는 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus) 균주를 포함하는 장용성 캡슐 제제를 제조할 수 있다.

이하, 본 발명에 따른 제조방법을 단계별로 구체적으로 설명한다.

본 발명의 단계 1)은 고농축 유산균 분말을 포함하는 혼합분말을 통상적인 방식에 따라 경질 캡슐에 충진하는 단계로서, 이때, 상기 유산균은 캡슐 당 700억 CFU(colony forming unit) 이하, 예를 들어 300억 내지 700억 CFU의 양으로 충진될 수 있다. 상기 경질 캡슐은 0호 이하의 크기의 캡슐을 사용하는 것이 바람직하다.

상기 혼합 분말은 고농축 유산균 분말을 약학적으로 허용가능한 부형제, 첨가제, 활택제 또는 이들의 혼합물과 혼합하여 제조할 수 있다.

이때 약학적으로 허용가능한 부형제로는 말토덱스트린, 유당, 전분, 미결정셀룰로오스 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 성분을 사용할 수 있다. 상기 첨가제로는 스테아린산, 포비돈, 카르복시메틸셀룰로오스 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 성분을 사용할 수 있다. 상기 활택제로는 스테아린산 마그네슘, 스테아린산, 탈크 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 성분을 사용할 수 있다. 상기 부형제, 첨가제 및 활택제는 고농축 유산균 100 중량부를 기준으로 각각 50 내지 100 중량부, 20 내지 50 중량부, 및 1 내지 10 중량부의 양으로 포함될 수 있다.

본 발명의 일 실시양태에 따르면, 고농축 유산균 분말, 말토덱스트린 및 약학적으로 허용가능한 첨가제를 혼합기(V-Mixer, 세종)를 이용하여 20 내지 30 rpm(예를 들어 21 rpm)으로 20 내지 40분간(예를 들어 30분간) 혼합하고, 혼합이 완료되면 활택제를 투입하고 3 내지 10분간(예를 들어 5분간) 추가로 혼합함으로써 고농축 유산균 분말 및 약학적으로 허용가능한 부형제등의 혼합물을 제조할 수 있다.

본 발명의 단계 2)는, 상기 제조된 경질 캡슐 위에 유산균이 체액의 영향을 최소화하여 장내에 안전하게 장착되기 위한 장용성 물질을 포함하는 코팅 용액으로 단계적으로 장용 코팅하는 단계이다. 경질 캡슐에 일반적인 필름코팅을 하는 경우는 코팅공정이 어렵지 않아 용이하게 공정을 진행할 수 있다. 그러나 내산성을 가져야하는 장용성 코팅의 경우, 일반적인 건강기능식품의 내산성 조건인 pH 1.2에서 2시간동안 캡슐의 붕괴(인습) 없이 유지되는 것이 어렵기 때문에 코팅의 조건 및 코팅량 등의 조건을 까다롭게 설정해야 한다. 또한, 붕해에 대한 품질을 유지하면서도 내용물인 유산균수의 감소 및 잔류 용매의 잔존이 없도록 짧은 시간 안에 코팅을 해야 하는 어려운 점이 있다.

한편, 일반적인 정제 등의 코팅에서는 단일 분사조건으로 코팅이 실시되지만, 젤라틴 캡슐은 표면이 매끄러워 코팅액의 부착성이 떨어지므로 코팅 공정의 각 분사 단계마다 분사량의 변화를 주어야만 양호한 코팅이 가능하다. 또한 코팅액 분사 시 과량의 분사액이 나오는 경우 코팅기 내부의 온도 저하로 장용성 코팅 물질의 백탁 현상이 일어나거나 제품끼리 달라붙는 현상(twinning)도 발생할 수 있으므로 코팅 시 분사량이나 코팅기의 온도에 특히 주의를 해야 한다. 추가적으로 공정 중의 유산균 사멸정도도 동시에 고려해야 하므로 공정 조건 설정은 중요하다.

본 발명에 따른 장용 코팅은, 3단계의 장용 코팅 단계를 포함할 수 있는데, 구체적으로, 1 내지 25 ml/분의 유속으로 5 내지 30분 동안 코팅하는 1차 코팅; 30 내지 60 ml/분의 유속으로 30 내지 50분 동안 코팅하는 2차 코팅(본 코팅); 및 1 내지 25 ml/분의 유속으로 5 내지 20분 동안 코팅하는 3차 코팅을 포함한다. 바람직하게는, 5 내지 20 ml/분의 유속으로 10 내지 20분 동안 코팅하는 1차 코팅; 40 내지 50 ml/분의 유속으로 35 내지 45분 동안 코팅하는 2차 코팅(본 코팅); 및 5 내지 10 ml/분의 유속으로 10 내지 15분 동안 코팅하는 3차 코팅을 포함한다. 상기와 같은 단계적 코팅방법은 코팅 및 건조 공정에서의 온도와 시간을 줄여 유산균의 사멸을 최소화할 수 있다.

본 발명에 따른 장용 코팅 단계 중 1차 코팅은 경질캡슐의 매끄러운 표면에 코팅이 잘 장착되도록 하여 본 코팅이 가능하도록 하는데 목적이 있다. 이때 1차 코팅을 25 ml/분 초과의 유속 또는 30분 이상의 코팅 시간으로 수행하는 경우, 한 번에 많은 양의 코팅이 경질캡슐의 표면에 뿌려지게 됨에 따라 추후 코팅이 건조되는 과정에서 경질캡슐의 표면과 코팅면 사이에 간극이 생길 수 있고, 캡슐 표면이 두꺼워지고 백탁현상이 나타날 수 있다.

본 발명에 따른 장용 코팅 단계 중 2차 코팅(본 코팅)은 30 내지 60 ml/분의 속도로 코팅하는 것이 바람직하다. 만일 30 ml/분 미만의 유속으로 코팅하면 정상적인 장용피막이 아닌 1차 코팅과 같은 거친 표면의 코팅이 이루어질 수 있고, 60 ml/분 초과의 유속으로 코팅하게 되면 캡슐끼리 붙어버리는 트위닝(twining) 현상이 발생된다. 또한, 본 코팅의 코팅시간은 30분 내지 50분 동안 코팅해야 장용 피막이 형성되어 캡슐의 내산성을 확보할 수 있다. 만일 50분을 초과하여 코팅할 경우 캡슐 표면이 두꺼워져 품질상의 문제가 생기거나 유산균의 감소가 일어날 수 있다.

본 발명에 따른 장용 코팅 단계 중 3차 코팅은 본 코팅이 진행되면서 남은 코팅용매를 최대한 제거하면서도 코팅면이 깨끗하게 될 수 있도록 마무리하는 단계로서, 1차 코팅과 같이 25 ml/분 이하의 속도로 코팅한다. 코팅조건이 맞지 않다면 캡슐의 균질한 건조가 힘들어 성상의 품질이 나빠지는 경향이 있다.

또한, 본 발명에 따른 장용 코팅은, 캡슐 온도를 15 내지 45℃, 바람직하게는 30 내지 34℃를 유지하면서 코팅하는 것이 바람직하다. 이는 캡슐 온도 10℃ 이하에서는 제품의 백탁 현상이 발생하고, 15℃ 미만에서는 제품이 서로 달라붙는 트위닝 현상이 발생할 수 있기 때문이다. 또한, 캡슐온도 45℃를 초과하면 코팅액이 비산되는 현상이 발생하여 충분한 코팅이 되지 않을 뿐 아니라 유산균의 안정성에도 영향을 미치기 때문에 15℃ 내지 45℃의 범위에서 장용코팅을 수행하는 것이 좋다. 안정적인 코팅이 가능하고 유기용매의 휘발 및 건조 효율을 고려하여 가장 바람직한 코팅 온도는 캡슐 온도 30℃ 내지 34℃이다.

일반적으로 의약품의 제조에서 수행되는 장용 코팅에서는 코팅기제의 용해성 및 코팅성을 고려하여 에탄올 및 아세톤, 또는 에탄올 및 메틸렌클로라이드의 혼합용매를 사용한다. 그러나, 본 발명에서 코팅에 사용되는 용매로는 식품용으로 사용하기 적합한 물과 에탄올의 혼합 용매로, 바람직하게는 물과 에탄올이 4:6 내지 1:9의 부피비로 혼합된 혼합용매를 사용할 수 있다.

상기 혼합용매는 에탄올 비율이 60%(v/v) 미만일 경우에는 건조시간이 길어지며, 90%(v/v) 초과일 경우에는 코팅액이 빨리 건조되어 비산 코팅이 어렵기 때문에, 4:6 내지 1:9의 부피비를 갖는 물과 에탄올의 혼합용매(예를 들어 15:85(v/v)의 비율로 혼합된 85% 에탄올 용매)인 것이 좋다.

본 발명에서는, 상기 혼합용매에 장용 코팅 기제로서 히드록시프로필메틸셀룰로오즈 프탈레이트(hydroxypropylmethyl cellulose phthalate), 제인(zein), 쉘락(shellac), 유드라짓(Eudragit) 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 장용성 물질, 바람직하게는 히드록시프로필메틸셀룰로오즈 프탈레이트를 혼합함으로써 장용 코팅 용액을 제조할 수 있다. 상기 장용 코팅 기제는 혼합용매 총 중량을 기준으로 18 내지 25중량%로 포함되는 것이 바람직하다.

또한, 상기 장용 코팅 용액은 글리세린초산지방산 에스테르, 폴리소르베이트, D-소르비톨 또는 트리아세틴과 같은 가소제 등이 추가될 수 있다.

또한, 본 발명의 일 실시양태에 따르면, 장용 코팅은 코팅기를 사용하여 설비 용량 10 L를 고려하여 6,000 캡슐(약 2,580g)을 코팅할 수 있다. 이때, 팬 rpm은 캡슐의 유동성이 유지되는 값인 13 rpm으로 설정하고, 스프레이건과 캡슐층 사이의 거리는 6 내지 10 cm, 분무공기 압력은 0.2 내지 0.4 MPa(예를 들어 0.3 MPa), 배기차압은 50 내지 100 mmaq를 유지하는 것이 바람직하다.

본 발명의 단계 3)은 상기 단계 2)에서 제조된 장용 코팅된 캡슐을 건조하여 최종적으로 고농축 유산균 함유 장용성 캡슐 제제를 제조한다. 본 발명의 일 실시양태에 따르면 장용 코팅된 캡슐은 제품 온도를 30 내지 35℃, 팬의 속도를 0.5 내지 1 rpm으로 30분간 건조시킴으로써 사용된 용매를 제거할 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 방법에 따라 제조된 고농축 유산균 함유 장용성 캡슐 제제를 제공한다. 상기 방법에 따라 제조된 캡슐 제제는, 캡슐 당 300억 내지 700억 CFU의 유산균을 함유하며, 몸무게가 70 ㎏인 성인 환자를 기준으로 할 때, 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회에 분할 투여할 수도 있으며, 이때, 1회 복용량을 2캡슐 이하로 하는 것을 특징으로 한다.

종래에도 유산균을 포함하는 경질캡슐 위에 장용성 코팅을 시행하여 시판되는 의약품 등이 있으나 이는 비교적 온도에 강한 스트렙토코쿠스 패시움 및 바실러스 서브틸러스를 포함하여 사멸이 비교적 적었다. 그러나 건조 후에도 잔류 용매량이 많아 용매를 제거하는데 건조시간이 상당히 오래 걸리는 단점이 있었다. 그러나, 본 발명의 제조방법에 따르면, 온도에 약한 락토바실러스 애시도필러스를 사용하더라도 균의 사멸을 최소화할 수 있고, 특별한 단계적인 코팅 방법에 의해 코팅 및 건조의 온도와 시간을 줄여 유산균의 사멸을 최소화할 수 있다.

[실시예]

이하, 본 발명을 하기 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들만으로 한정되는 것은 아니다.

제조예: 고농축 유산균 분말이 충진된 경질 캡슐의 제조

하기 표 1에 기재된 조성 및 함량을 이용하여 고농축 유산균 분말 및 약학적으로 허용가능한 부형제를 포함하는 혼합물을 제조하였다. 구체적으로, 상기 표 1에 기재된 바와 같은 고농축 유산균 분말(락토바실러스 애시도필러스(다니스코, USA)(생균수 3,000억 CFU/g)), 말토덱스트린 및 스테아린산을 혼합기(V-Mixer, 세종)를 이용하여 21 rpm으로 30분간 혼합하였다. 혼합이 완료되면 스테아린산 마그네슘을 투입하고 5분간 추가로 혼합하였다. 이어, 상기 혼합물을 1호 경질 캡슐에 통상적인 방식에 따라 충진함으로써, 500억 CFU 이상의 유산균 분말이 충진된 경질 캡슐을 제조하였다.

원료구분	조성비 (무게비 %)
고농축 유산균	48.6
말토덱스트린	33.4
첨가제(스테아린산)	15.0
활택제(스테아린산 마그네슘)	3.0
계	100

실시예 1: 고농축 유산균 분말이 충진된 경질캡슐의 장용 코팅-(1)

상기 제조예에서 제조한 경질 캡슐에 장용 코팅을 실시하였다.

먼저 물과 에탄올을 혼합하여 85% 에탄올 용액을 제조한 후, 상기 용매를 교반하면서 하기 표 2에 기재된 성분을 서서히 가하여 완전히 분산시킨 후 공기압력 0.3 MPa으로 교반하여 코팅용액을 제조하였다. 코팅팬에 제조예에서 제조한 경질 캡슐을 투입한 후 코팅용액으로 코팅을 실시하였다. 이 때 급기온도를 40±5℃로 하고 캡슐 온도가 18±2℃가 되도록 조건을 설정한 후 코팅을 실시하였다. 이는 유산균의 소실을 최소화할 목적으로 캡슐의 온도를 코팅 가능한 온도까지 확인하기 위함이었다. 코팅액의 분사조건은 공정 초기에는 스프레이양을 8.0 ml/분으로 하여 약 25분간 시행하였고 이후 40.0 ml/분의 속도로 약 45분간 진행하였다. 이 후 캡슐의 실링 상태를 확인한 후 5.0 ml/분의 속도로 약 15분간 최종 코팅을 진행한 후 분사를 마무리하였다. 코팅액의 분사가 끝난 후 캡슐 온도는 그대로 유지하면서 30분간 더 코팅팬을 회전시켜 건조를 실시하고 코팅공정을 종료하였다.

장용성 코팅 용매의 구성

성분	캡슐 당 조성비 (무게 %)
히드록시프로필 메틸셀룰로오스 프탈레이트	83
글리세린초산지방산 에스테르	17
(에탄올)	적량
(정제수)	적량
코팅기제 총 질량	100

실시예 2 : 고농축 유산균 분말이 충진된 경질캡슐의 장용코팅-(2)

상기 제조예에서 제조한 경질 캡슐에 장용 코팅을 실시하였다.

먼저 상기 실시예 1에 기재된 것과 동일한 방식으로 코팅용액을 제조하였다. 이어, 코팅팬에 제조예에서 제조한 경질 캡슐을 투입한 후 코팅용액으로 코팅을 실시하였다. 이 때 급기온도를 50±5℃로 하고, 캡슐 온도가 32±2℃가 되도록 조건을 설정한 후 코팅을 실시하였다. 코팅액의 분사조건은 공정 초기에는 스프레이양을 약 10.0 ml/분으로 하여 20분간 시행하였고 이후 약 45.0 ml/분의 속도로 40분간 진행하였다. 이 후 캡슐의 실링 상태를 확인한 후 5.0 ml/분의 속도로 약 15분간 최종 코팅을 진행한 후 분사를 마무리 하였다. 코팅액의 분사가 끝난 후 캡슐 온도는 그대로 유지하면서 30분간 더 코팅팬을 회전시켜 건조를 실시하고 코팅공정을 종료하였다.

실시예 3 : 고농축 유산균 분말이 충진된 경질캡슐의 장용코팅-(3)

상기 제조예에서 제조한 경질 캡슐에 장용 코팅을 실시하였다.

먼저 상기 실시예 1에 기재된 것과 동일한 방식으로 코팅용액을 제조하였다. 이어, 코팅팬에 제조예에서 제조한 경질 캡슐을 투입한 후 코팅용액으로 코팅을 실시하였다. 이 때 급기온도를 60±5℃로 하고 캡슐 온도가 42±2℃가 되도록 조건을 설정한 후 코팅을 실시하였다. 코팅액의 분사조건은 공정 초기에는 스프레이양을 20.0 ml/분으로 하여 약 10분간 시행하였고 이후 50.0 ml/분의 속도로 약 35분간 진행하였다. 이 후 캡슐의 실링 상태를 확인한 후 8.0 ml/분의 속도로 약 10분간 최종 코팅을 진행한 후 분사를 마무리 하였다. 코팅액의 분사가 끝난 후 캡슐 온도는 그대로 유지하면서 30분간 더 코팅팬을 회전시켜 건조를 실시하고 코팅공정을 종료하였다.

실시예 1 내지 3에서 수행된 코팅 조건을 표 3에 정리해서 요약하였다.

단계적 장용 코팅의 조건

코팅조건	실시예 1	실시예 2	실시예 3
급기온도(℃)	40± 5	50± 5	60± 5
캡슐온도(℃)	18± 2	32± 2	42± 2
팬 속도 (rpm)	13	13	13
공기압 (MPa)	0.3	0.3	0.3
배기차압 (mmaq)	50~100	50~100	50~100
스프레이건과 캡슐층사이 거리(cm)	약 10	약 8	약 6
초반 코팅공정의 분사량(ml/분)	약 8	약 10	약 20
분사시간 (분)	약 25	약 20	약 10
중반 코팅공정의 분사량(ml/분)	약 40	약 45	약 50
분사시간 (분)	약 45	약 40	약 35
후반 코팅공정의 분사량(ml/분)	약 5	약 5	약 8
분사시간 (분)	약 15	약 15	약 10

비교예 1 : 고농축 유산균 분말이 충진된 경질캡슐의 장용코팅-(4)

상기 제조예에서 제조한 경질 캡슐에 장용 코팅을 실시하였다.

먼저 물과 에탄올을 혼합하여 85% 에탄올 용액을 제조한 후, 하기 표 4에 기재된 성분을 서서히 가하여 완전히 분산시킨 후 공기압력 0.3 MPa으로 교반하여 코팅용액을 제조하였다. 코팅팬에 제조예에서 제조한 경질 캡슐을 투입한 후 코팅용액으로 코팅을 실시하였다. 이 때 급기온도를 50± 5℃로 하고 캡슐 온도가 30± 2℃가 되도록 조건을 설정한 후 코팅을 실시하였다. 코팅액의 분사조건은 공정에 관계없이 40.0 ml/분의 속도로 약 60분간 진행하였다. 이 후 캡슐의 실링 상태를 확인한 후 분사를 마무리하였다. 코팅액의 분사가 끝난 후, 캡슐 온도는 그대로 유지하면서 30분간 더 코팅팬을 회전시켜 건조를 실시하고 코팅공정을 종료하였다.

장용성 코팅 용매의 구성

성분	캡슐당 조성비 (무게 %)
히드록시프로필 메틸셀룰로오스 프탈레이트	83
히드록시프로필 메틸셀룰로오스	10
글리세린초산지방산 에스테르	7
(에탄올)	적량
(정제수)	적량
코팅기제 총 질량	100

시험예 1: 유산균수의 측정

(1) 유산균수의 측정 방법

유산균수의 측정 방법은 식품공정 발효미생물류 중 유산간균 및 구균에 따른 방법으로 시험하였다. 즉, 고농축 유산균 분말로 락토바실러스 애시도필러스를 인산염 완충액에 1×10¹¹ CFU/mL 의 농도가 되게 첨가하였다. 전처리한 시험용액 1 mL 및 10배씩 단계적으로 희석한 각 희석액 1 mL씩을 멸균 페트리 디쉬에 무균적으로 취하고, 43℃ 내지 45℃로 유지한 MRS 배지 약 15 mL를 무균적으로 분주한 후, 시료와 배지를 잘 섞고 냉각 응고시켰다. 이를 35℃ 내지 37℃에서 72시간 배양한 후 발생한 황색의 집락을 유산균의 집락으로 계측하였으며, 시료 1g 중의 유산균수에 희석배수로 곱하여 최종 유산균 수를 측정하였다.

(2) 혼합 공정에 의한 유산균 수의 변화

피복되지 않은 락토바실러스 애시도필러스 1(제조처: 미국, 다니스코), 피복되지 않은 락토바실러스 애시도필러스 2(제조처: 캐나다, 로젤), 및 단백 및 당으로 피복된 락토바실러스 애시도필러스(제조처: 한국, 셀바이오텍)들을 이용하여 상기 제조예에 기재된 것과 동일한 방식으로 경질 캡슐을 제조하였으며, 캡슐 내에 포함된 유산균의 생균수를 측정하여 제조처간의 유산균의 사멸영향을 확인하였다.

그 결과, 표 5에 나타난 바와 같이, 유산균의 생균수는 제조처, 또는 피복유무에 따른 특이적인 변화 없이 이론상 수치와 측정된 수치가 유사한 결과를 나타내었다. 이를 통해 단순 혼합공정에서는 유산균의 사멸정도 및 제조처간의 차이는 없음을 알 수 있었다.

	피복되지 않은 락토바실러스 애시도필러스 1	피복되지 않은 락토바실러스 애시도필러스 2	단백 및 당으로 피복된 락토바실러스 애시도필러스
투입된 유산균 분말 내 균수	약 3000억 CFU/g	약 3000억 CFU/g	약 1500억 CFU/g
캡슐 당 이론 유산균 수	510억	510억	255억
시험 결과치	525억	520억	300억

(3) 장용 코팅에 의한 유산균 수의 변화

유산균 분말을 충진한 경질 캡슐에 장용 코팅을 한 실시예 1 내지 3, 및 비교예 1의 장용성 캡슐을 대상으로 경질 캡슐의 장용 코팅 및 건조 후의 유산균의 생균수를 각각 측정하였다. 또한, 건강기능식품공전에 제시된 시험방법으로 상기 장용성 캡슐의 붕해 시간을 측정하였다. 그 결과는 표 6에 기재된 바와 같다.

표 6에 나타낸 바와 같이, 유산균의 생균수는 코팅 조건에 따라 달라지는데, 일반적인 장용 코팅방법으로 제조된 비교예 1의 경우 이론균수 대비 약 50% 이상의 유산균수가 감소한 반면, 실시예 1 및 2는 유산균수의 감소가 거의 없었고, 실시예 3은 약 40% 이하의 유산균수가 감소되어, 제품의 온도가 상승할수록 유산균의 생존율이 낮아지는 것을 알 수 있었다.

코팅 조건에 따른 유산균수의 변화

	실시예 1	실시예 2	실시예 3	비교예 1
투입균으로 산정한 예상균수	510억	510억	510억	510억
코팅 후 측정한 유산균수(캡슐당)	515억	505억	380억	260억
건조 후 측정한 유산균수(캡슐당)	505억 (99%)	495억 (97%)	310억 (61%)	200억 (39%)
붕해 시간 (분)	58분	51분	50분	45분 (내산성 일부부적합)

시험예 2: 내산성 시험

(1) 시험 방법

(1-1) 유산균 분말 자체 또는 장용 코팅하지 않은 캡슐의 내산성 시험

위액에 대한 유산균의 생존율을 시험하기 위하여, pH 1.2의 인공위액에 대한 유산균 노출시험을 시행하였다.

인공위액은 염화나트륨 2g, 펩신 3.2g 및 농염산 5.8 mL를 정제수에 녹여 1000 mL로 만들고 pH는 1.2로 조절하였다. 이어, 락토바실러스 애시도필러스 1(제조처: 미국, 다니스코), 및 단백 및 당으로 피복된 락토바실러스 애시도필러스(제조처: 한국, 셀바이오텍)를 제조예에 기재된 방법에 따라 첨가물과 혼합하여 혼합분말로 각각 제조한 후 준비된 pH 1.2의 인공위액 90 mL에 락토바실러스 애시도필러스로서 1× 10¹¹ CFU/mL 농도로 녹인 후 실온에서 마그네틱바를 이용하여 서서히 저어주면서 0분, 30분, 60분, 90분 및 120분 동안 방치하였다. 이 후 각 방치시간이 경과하는 시점에서 시험액을 1 mL씩 취해 멸균된 pH 7.2 펩톤식염완충액 9 mL에 옮겨 10진 희석법으로 희석하였다. 희석 시 최소 30초 이상 혼합(vortex)하여 최대 희석배수의 10^-1, 10^-2 및 최대 희석배수까지 희석한 후 각 희석액에서 1 mL을 무균적으로 취하여 2매 이상의 페트리 디쉬에 분주하였다. 유산균 측정용 MRS 한천배지 15 mL을 분주하여 시료와 배지를 잘 섞고 응고시킨 후 35℃ 내지 37℃에서 48 내지 72시간 동안 호기 배양하였다. 배양 후 생성된 황색의 집락을 유산균의 집락으로 계측하였다. 시료 1g 중의 유산균수에 희석 배수를 곱하여 유산균 수를 측정하였으며, 평판 당 30 내지 300개의 집락을 생성한 평판을 택하여 집락수를 계산하였다. 유산균의 생존율은 다음식에 따라 계산하였다.

생존율 (%)=(위액에 각 시간별로 방치한 후 생존한 유산균수/초기 유산균수)× 100

그 결과, 표 7에서 나타난 바와 같이, 제조처별 유산균의 내산성 생존율에서는 큰 차이가 없음을 확인할 수 있었다. 특히, 단백 및 당으로 피복된 락토바실러스 애시도필러스의 경우에도 그렇지 않은 것과 큰 차이를 보이지 않았음을 알 수 있었다. 또한, 비교예로 사용된 락토바실러스 애시도필러스 1 혼합분말을 충진한 나캡슐의 경우에도 유산균 분말 자체의 결과와 크게 다르지 않았다. 이는 유산균 분말 자체라도 캡슐 충진 후 장용 코팅을 시행한다면 약학적으로 허용가능한 부형제 또는 첨가제와의 혼합에 의한 전처리와는 무관하게 실제 위산에 대한 영향을 최소화할 수 있음을 의미하며, 결국 단계적 장용 코팅을 하는 것이 기능식품으로의 유산균의 역할을 극대화시킬 수 있는 방법임을 확인할 수 있었다.

유산균에 대한 내산성 시험결과

위액 처리시간	락토바실러스 애시도필러스 1 혼합분말		단백 또는 당으로 피복된 락토바실러스 애시도필러스 혼합분말		락토바실러스 애시도필러스 1을 충진한 나캡슐
0분	510억	100%	500억	100%	505억	100%
30분	306억	60%	325억	65%	353억	70%
60분	260억	51%	300억	60%	313억	62%
90분	244억	44%	265억	53%	270억	53%
120분	165억	32%	215억	43%	227억	45%

(1-2) 장용 코팅을 수행한 캡슐의 내산성 시험 방법

위액에 대한 장용 코팅을 수행한 유산균의 생존율을 시험하기 위하여, pH 1.2의 인공위액에 대한 유산균을 함유한 장용 코팅 캡슐의 노출시험을 시행하였다.

상기 1-1에 기재된 것과 동일한 방식으로 pH 1.2의 인공위액을 조제한 후, 인공위액 900 mL에 실시예 1 내지 3, 및 비교예 1의 장용성 캡슐(락토바실러스 애시도필러스로서 약 1× 10¹¹ CFU/g 농도로 유산균을 함유함)을 각각 넣은 후 실온에서 마그네틱바를 이용하여 서서히 저어주면서 0분, 30분, 60분, 90분 및 120분 동안 방치하였다. 이 후 각 방치시간이 경과하는 시점에 캡슐을 꺼내어 정제수로 수회 세척한 후 건조하고, 장용성 캡슐을 개봉하였다. 유산균의 생존율은 상기 실험예 1에 기재된 생균수 측정법에 따라 측정하였다.

그 결과, 표 8에 나타난 바와 같이, 유산균 분말을 충진한 캡슐에 장용 코팅을 한 실시예 1 내지 3, 및 비교예 1의 경우 시험된 조건에서 거의 대부분의 유산균이 생존하는 것을 확인할 수 있었다. 다만, 비교예 1의 경우, 1시간 이후에는 유산균의 감소 속도가 더 빨라지는 현상이 나타났다. 즉, 한가지 조건으로 코팅한 비교예 1의 경우 코팅 시 캡슐끼리 붙은 현상이나 캡슐을 완전히 실링하지 못하는 현상이 발생하였고 이는 내산성 시험결과에서 유산균의 더 빠른 감소속도를 나타내는 것으로 판단된다.

유산균에 대한 내산성 시험결과

위액 처리시간	실시예 1		실시예 2		실시예 3		비교예 1
0분	515억	100%	532억	100%	485억	100%	460억	100%
30분	517억	100%	543억	102%	480억	99%	445억	97%
60분	501억	97%	520억	98%	470억	97%	430억	94%
90분	485억	94%	516억	97%	446억	92%	390억	85%
120분	467억	91%	505억	95%	437억	90%	368억	78%

시험예 3: 내담즙성 시험

(1) 시험방법

담즙산으로부터의 유산균의 생존율을 확인하기 위하여 담즙이 처리된 조건에서 담즙산의 농도별로 생존율을 확인하였다.

인공 담즙인 옥스갈(oxgall)을 인산염완충액에 녹여 농도가 0%, 0.25%, 0.50%, 0.75% 및 1%가 되게 인공담즙용액을 제조하였다. 실시예 1 내지 3 및 비교예 1의 캡슐, 및 락토바실러스 애시도필러스 1 혼합분말을 충진한 나캡슐을 락토바실러스 애시도필러스로서 1× 10¹¹/ml의 농도가 되도록 각각의 준비된 농도의 인공담즙용액에 접종하여 6시간 동안 방치하였다. 이 후, 상기 용액 1 mL씩을 취해 멸균된 pH 7.2 펩톤식염완충액 9 mL으로 옮겨 10진 희석법으로 희석하였다. 희석 시 최소 30초 이상 혼합(vortex)하여 최대 희석배수의 10^-1, 10^-2 및 최대 희석배수까지 희석하였다. 각 희석액에서 1mL을 무균적으로 취하여 2매 이상의 페트리 디쉬에 분주하였다. 유산균 측정용 MRS 한천배지 15 mL를 분주하여 상기 시료와 배지를 잘 섞고 응고시킨 후 35℃ 내지 37℃에서 48 내지 72시간 호기 배양하였다. 배양 후 생성된 황색의 집락을 유산균의 집락으로 계측하였다. 시료 1g 중의 유산균수에 희석배수로 곱하여 유산균 수를 측정하며, 평판 당 30 내지 300개의 집락을 생성한 평판을 택하여 집락수를 계산하였다.

(2) 시험결과

표 9에서 나타난 바와 같이, 실시예 1 및 비교예 1의 장용성 캡슐의 경우 시험된 조건에서 거의 대부분의 유산균이 생존하는 것을 확인할 수 있었다. 실시예 2 및 3의 경우도 실시예 1과 유사한 결과를 나타내었다. 이는 내산성 결과와도 유사하며, 유산균 분말의 종류에 상관없이 장용 코팅을 한 캡슐이 우수한 내담즙성을 보이는 것을 알 수 있었다. 한편, 유산균 분말의 혼합물은 담즙의 농도가 높아질수록 유산균의 감소 속도가 빨라짐을 확인할 수 있었다. 이는 내산성 시험과 마찬가지로 유산균 자체 또는 유산균 분말을 포함하는 나캡슐을 복용한다면 실제 유산균이 담즙산에 영향을 받을 수 있는 것을 의미한다.

유산균에 대한 내담즙성 시험결과

담즙의 농도	실시예 1		비교예 1		유산균 혼합분말을 포함하는 나캡슐
0%	510억	100%	460억	100%	510억	100%
0.25%	513억	101%	450억	98%	380억	75%
0.50%	502억	98%	473억	103%	313억	61%
0.75%	517억	101%	445억	97%	256억	50%
1.00%	503억	99%	462억	100%	176억	35%

시험예 3 및 4의 내산성 및 내담즙성에 대한 시험결과에서 나타난 바와 같이, 유산균 자체의 복용보다는 유산균을 안전한 코팅막으로 보호한 장용 캡슐이 유산균의 효과를 월등히 나타낼 수 있음을 알 수 있다.

시험예 4: 보관에 따른 안정성 시험

상온에서의 안정성을 시험하기 위하여, 실시예 2 및 비교예 1의 캡슐을 검체로 하여 2g의 실리카겔을 포함한 고밀도 폴리에틸렌(HDPE)병으로 각각 포장한 후 25± 2℃ 및 60± 5% RH 조건에서 보관하였다. 안정성 시험방법은 시험개시 후 0, 1, 2, 3 및 4개월 시간 간격으로 샘플을 취한 뒤, 시험예 1에 기재된 것과 동일한 방식으로 유산균의 생균수를 확인하였으며, 그 결과를 도 1에 나타내었다.

도 1에서 나타난 바와 같이, 실시예 2의 장용성 캡슐은 보관된 기간 동안 약 5% 미만의 역가 소실을 보이는 반면, 비교예 1의 캡슐은 시험된 기간 동안 실시예 2의 캡슐보다 낮은 유산균 안정성을 나타내었다. 이는 본원 발명의 방법에 따른 단계적 장용 코팅법이 일반 장용 코팅법에 비해 온도와 용매 등의 영향에 따른 유산균 자체의 손상(damage)을 억제할 수 있음을 알 수 있다. 따라서, 유산균을 포함하는 캡슐에 있어서, 단계적 장용 코팅이 유산균의 생존율에 중요한 인자임을 확인할 수 있다.

Claims (16)

1) 고농축 유산균 분말을 포함한 혼합분말을 경질 캡슐에 충진하는 단계;
2) 상기 경질 캡슐을 코팅 용액으로 단계적으로 장용 코팅하는 단계; 및
3) 상기 코팅된 캡슐을 건조시키는 단계를 포함하는, 유산균 함유 장용성 캡슐 제제의 제조방법.

제 1항에 있어서,
상기 단계 2)의 장용 코팅이 1 내지 25 ml/분의 유속으로 5 내지 30분 동안 코팅하는 1차 코팅; 30 내지 60 ml/분의 유속으로 30 내지 50분 동안 코팅하는 2차 코팅(본 코팅); 및 1 내지 25 ml/분의 유속으로 5 내지 20분 동안 코팅하는 3차 코팅을 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법.

제 1항에 있어서,
상기 단계 2)의 장용 코팅이 캡슐의 온도를 15 내지 45℃로 유지하면서 이루어지는 것을 특징으로 하는, 제조방법.

제 1항에 있어서,
상기 유산균이 락토바실러스(Lactobacillus) 균주인 것을 특징으로 하는, 제조방법.

제 4항에 있어서,
상기 락토바실러스 균주가 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophilus)인 것을 특징으로 하는, 제조방법.

제 1항에 있어서,
상기 고농축 유산균이 700억 CFU(colony forming unit) 이하의 양으로 캡슐에 충진되는 것을 특징으로 하는, 제조방법.

제 1항에 있어서,
상기 경질 캡슐이 0호 캡슐 이하의 크기인 것을 특징으로 하는, 제조방법.

제 1항에 있어서,
상기 혼합 분말이 고농축 유산균 분말을 약학적으로 허용가능한 부형제, 첨가제, 활택제 또는 이들의 혼합물과 혼합하여 제조한 것임을 특징으로 하는, 제조방법.

제 8항에 있어서,
상기 부형제가 말토덱스트린, 유당, 전분, 미결정셀룰로오스 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 제조방법.

제 8항에 있어서,
상기 첨가제가 스테아린산, 포비돈, 카르복시메틸셀룰로오스 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 제조방법.

제 8항에 있어서,
상기 활택제가 스테아린산 마그네슘, 스테아린산, 탈크 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는, 제조방법.

제 1항에 있어서,
상기 코팅 용액의 용매가 물과 에탄올의 혼합용매인 것을 특징으로 하는, 제조방법.

제 12항에 있어서,
상기 혼합용매가 물과 에탄올을 부피비로 4:6 내지 1:9의 비율로 혼합된 것임을 특징으로 하는, 제조방법.

제 1항에 있어서,
상기 코팅 용액이 히드록시프로필메틸셀룰로오즈 프탈레이트(hydroxypropyl- methyl cellulose phthalate), 제인(zein), 쉘락(shellac), 유드라짓(Eudragit) 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택되는 장용성 물질을 코팅 기제로 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법.

제 14항에 있어서,
상기 장용성 물질이 히드록시프로필메틸셀룰로오즈 프탈레이트인 것을 특징으로 하는, 제조방법.

제 1항의 제조방법에 따라 제조된, 유산균 함유 장용성 캡슐 제제.

Images