KR20130027227A - Citrus flower compositions for improving skin conditions - Google Patents

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KR20130027227A
KR20130027227A KR1020110090694A KR20110090694A KR20130027227A KR 20130027227 A KR20130027227 A KR 20130027227A KR 1020110090694 A KR1020110090694 A KR 1020110090694A KR 20110090694 A KR20110090694 A KR 20110090694A KR 20130027227 A KR20130027227 A KR 20130027227A
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citrus
skin
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tangerine
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노경백
이종성
정광선
김명옥
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스킨큐어(주)
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Abstract

PURPOSE: A cosmetic composition for improving skin condition using citrus flowers is provided to ensure sedation, to protect skin from oxidative materials, and to enhance anti-aging. CONSTITUTION: A cosmetic composition for improving skin condition contains a dried citrus flowers or a citrus flower extract as an active ingredient. An antioxidative composition contains the citrus flower extract as an active ingredient. A composition for suppressing oxidative stress contains the citrus flower extract as an active ingredient. The cosmetic composition is manufactured in the form of a skin, lotion, a cream, an essence, a serum, a foundation, a pack, a soap, cleansers, a shampoo, a rinse, a hair tonic, a patch, and a mist.

Description

감귤류 꽃을 이용한 피부 상태 개선용 화장료 {Citrus flower compositions for improving skin conditions}Citrus flower compositions for improving skin conditions

본 발명은 제주도산 감귤류(citrus) 꽃으로부터 얻은 추출물을 함유함을 특징으로 하는 피부상태 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a cosmetic composition for improving skin conditions comprising an extract obtained from citrus flowers of Jeju-do.

감귤류의 명칭에 있어서 귤, 감귤, 밀감 등으로 호칭되고 혼용되어 사용되고 있지만 굳이 나누어 보자면, 감귤이라 함은 금감이나 탱자를 제외한 모든 것을 총칭한 것으로 학술어로는 시트러스(citrus)라 한다. 감귤은 인도를 포함한 동남아시아가 원산지이지만 중국, 유럽, 미국 및 일본 등지에서 품종개량과 재배가 성황을 이루어 오늘에 이르고 있다. 우리나라의 경우, 1512년 충암 김정의에 의하면 제주의 보배로운 것 중의 하나는 귤이며, 그 종류는 아홉(금귤, 유감, 청귤, 동정귤, 당유자, 감자, 산귤, 왜귤, 황귤)이나 된다고 기록되어 있다. 하지만 현재 우리나라 감귤의 재배품종은 원래의 다양하고 좋은 품종은 거의 없어지고, 1911년 일본에서 도입된 추위에 잘 견디는 조생온주밀감이 주종을 이루고 있다. 제주산 감귤은 맛과 향이 좋고 달콤한 향취를 가지고 있으며, 각종 비타민을 비롯해서 생리활성 성분이 많이 함유되어 있어 예로부터 약용으로도 두루 사용되어 오고 있다. 최근 국내에서 감귤생산량이 급속히 증가하고 있으므로, 매년 수확량을 조절하기 위해 감귤꽃을 인공적으로 낙화시켜 버리고 있다. 외국의 경우를 보면 이탈리아, 프랑스 등지에서 오렌지꽃으로부터 추출물을 얻어내어 화장품의 향료 또는 각종 식품의 향신료로서 사용 및 수출되고 있으며, 국내에서도 기존에 화장품이나 식품에 이용 중이기는 하나 대부분 추출물이나 향료 등으로 이용되므로 그 이용범위가 한정되어 있다. 이에 본 발명은 감귤꽃을 바로 사용하거나 특수한 기술을 사용한 추출물의 형태 또는 새로운 방법으로 얻어진 꽃수의 형태로 사용하고자 하였다. 이러한 여러 가지 제조법으로 만들어진 감귤 꽃잎이나 추출물 또는 꽃수는 기존의 방법으로 생산된 추출물이나 꽃수보다 다량의 유효성분이 포함되어 있어 피부진정, 보습, 미백 또는 항산화작용 등의 여러가지 생물학적인 부분에서 뛰어난 효과를 나타내었으며 효능과 더불어 달콤한 향취를 가짐으로써 청량감과 상쾌함을 줄 수 있다. 또한, 폐자원인 감귤꽃을 활용함으로써 자원 재활용효과도 기대할 수 있다.In the name of citrus fruits, citrus fruits, citrus fruits, citrus fruits, etc., are used interchangeably. However, if you divide them, citrus fruits are collectively referred to as citrus. Citrus fruits are native to Southeast Asia, including India, but varieties have been improved and cultivated in China, Europe, the United States, and Japan. In Korea, according to Chungam Kim Jong-ui in 1512, one of the treasures of Jeju is tangerine, and it is recorded that there are nine kinds (kumquat, oil, blueberry, dongjeongguk, sugar-dried, potato, wild mandarin orange, red mandarin orange, tangerine). . However, the current citrus cultivars of Korean citrus varieties are almost disappeared, and the predominantly cold-sealed citrus persimmons, which were introduced in Japan in 1911, are the dominant species. Citrus from Jeju has good taste and aroma, has a sweet scent, and contains various vitamins and other physiologically active ingredients. Recently, citrus fruit production is increasing rapidly in Korea, and artificially fallen citrus flowers to control the yield every year. In foreign countries, extracts are extracted from orange flowers in Italy, France, etc. and used and exported as cosmetic fragrances or spices for various foods. As it is used, its use range is limited. Accordingly, the present invention intends to use citrus flowers directly or in the form of extracts using a special technique or in the form of flower water obtained by a new method. Citrus petals, extracts, or flower water produced by these various recipes contain more active ingredients than extracts or flower water produced by conventional methods, showing excellent effects in various biological areas such as skin soothing, moisturizing, whitening, or antioxidant activities. In addition to its efficacy, it has a sweet scent and can give a refreshing and refreshing feeling. In addition, by utilizing the citrus flowers waste resources can be expected to recycle resources.

피부는 신체의 가장 외부에 존재하는 기관으로 여러 가지 기능을 가짐과 동시에 외모 및 이미지 등에 큰 영향을 미치는 중요한 기관으로서, 다양한 세포들과 독특한 구조로 이루어져 신체의 외각 표면을 덮고 있어서 수분의 증발 방지, 체온조절, 자외선 등 외부환경에 대한 인체의 1차 방어막 역할을 수행하는 기관이라고 할 수 있다. The skin is an organ that exists at the outermost part of the body. It is an important organ that has various functions and has a great influence on appearance and image.It is composed of various cells and unique structures, covering the outer surface of the body to prevent evaporation of moisture It can be said that it acts as a body's primary defense against external environment such as body temperature control and ultraviolet rays.

사람의 피부색은 피부 내부의 멜라닌(melanin)농도와 분포에 따라 결정 되어진다. 인체 피부의 멜라닌 세포에서 생성되는 멜라닌 색소는 검은 색소와 단백질의 복합형태를 갖는 페놀(phenol)계 고분자 물질로서, 자외선으로 발생하는 피부손상을 차단하는 중요한 역할을 하고 있다. 멜라닌 생합성에는 멜라닌 세포에 존재하는 타이로시네이즈(tyrosinase)의 작용이 가장 중요한 것으로 보고되어 있고, 타이로시네이즈는 아미노산의 일종인 타이로신(tyrosine)을 멜라닌 중합체 생성의 중간산물인 도파(DOPA) 및 도파퀴논(dopaquinone)으로 전환함으로써 피부 흑화과정에 핵심적 역할을 수행한다. Human skin color is determined by the concentration and distribution of melanin in the skin. Melanin pigment produced by melanocytes of human skin is a phenolic polymer material having a complex form of black pigment and protein, and plays an important role in blocking skin damage caused by ultraviolet rays. In melanin biosynthesis, the action of tyrosinase in melanocytes is reported to be the most important. And dopaquinone plays a key role in the skin blackening process.

인체는 약 72% 정도의 수분을 함유하고 있어 피부를 촉촉하게 유지시켜 주며 부드럽게 보호해 주는 역할을 한다. 따라서 피부에서의 수분유지란 건강한 피부를 지니기 위해 매우 중요한 요인이며 피부의 시간 경과에 따른 저항력 약화에 대응할 수 있는 가장 기본적인 요인일 것이다. 수분은 각질층에 적당하게 유지되어 피부의 탄력이나 유연성을 유지하는데 중요하며, 정상적인 피부는 약 30% 정도의 수분이나 수용성 성분을 함유하고 있다. The human body contains about 72% water, which keeps the skin moist and softly protects it. Therefore, the maintenance of water in the skin is a very important factor to have healthy skin and will be the most basic factor to cope with the weakening of the resistance over time. Moisture is properly maintained in the stratum corneum to maintain the elasticity and flexibility of the skin, normal skin contains about 30% water or water-soluble components.

그러나 요즘과 같이 환경의 변화나 생활 패턴의 변화에 따른 자극, 사회생활에서 발생되는 각종 스트레스와 환경오염으로 인한 피부스트레스 등의 원인으로 인하여 각질층의 수분이 감소하여 피부가 건조해지고 표면이 거칠어지고 자극에 쉽게 손상을 받을 수 있다. 이들 손상과정에서는 산화물(Reactive oxygen)이 급격하게 발생하고, 산화물에 의한 피부손상으로 인해 세포단백, 지질, 핵산의 손상을 일으킴으로서 고혈압, 죽상경화증, 고지혈증, 당뇨병, 암, 류마티스성 관절염, 신경손상성 질환 등에서 중요한 발병기전으로 추정되고 있을 뿐만 아니라 노화과정에서도 주요한 인자로 보고 있다. 피부손상은 곧바로 피부의 최외곽층인 각질층의 손상으로 이어지고 이를 통하여 경피수분 손실량이 증가하여 피부건조증이 발생하고, 이를 방지하기 위한 급격한 피지분비에 의하여 피지분비 이상이 동반되어, 피부가 너무 건조하거나 또는 역으로 너무 지성화할 수 있다. 이러한 여러가지 복합적인 피부 문제가 최종적으로는 피부 가려움증, 홍반, 조직손상 등으로 악화될 수 있다. 따라서, 상기 일련의 과정을 단계적으로 적절히 처치함으로써, 피부손상을 최소화할 수 있다. 근래 이러한 현상을 방지하고 보다 건강하고 아름다운 피부를 유지하기 위해서, 기존에 알려진 각종 동물, 식물, 미생물 등으로부터 얻은 생리활성 물질들을 화장품에 부가하여 사용함으로써 피부의 고유기능을 유지시키고 피부세포를 활성화시켜 피부상태를 효과적으로 개선하기 위한 노력이 있어 왔다. However, due to the stimulation caused by changes in the environment and life patterns, skin stress caused by various stresses and environmental pollution caused by social life, the moisture of the stratum corneum decreases, so that the skin dries and the surface becomes rough and irritated. Can easily get damaged. Reactive oxygen occurs rapidly in these processes, and damage to cellular proteins, lipids, and nucleic acids due to skin damage caused by oxide causes hypertension, atherosclerosis, hyperlipidemia, diabetes, cancer, rheumatoid arthritis, and nerve damage. It is not only considered to be an important pathogenesis in sexual diseases, but also as a major factor in the aging process. Skin damage immediately leads to damage of the stratum corneum, which is the outermost layer of the skin, through which the loss of transdermal moisture increases skin dryness, which is accompanied by abnormal sebum secretion by a sudden sebum secretion to prevent this, Or, conversely, too intelligent. These various complex skin problems can finally be exacerbated by skin itching, erythema, tissue damage, and the like. Thus, by appropriately treating the above series of steps, skin damage can be minimized. In order to prevent this phenomenon and maintain a healthier and more beautiful skin, bioactive substances obtained from various known animals, plants, and microorganisms are added to cosmetics to maintain the unique function of the skin and to activate skin cells. Efforts have been made to effectively improve skin conditions.

이러한 이유로 항산화능, 진정효과, 보습, 미백효과를 갖는 인체에 안정한 천연물질로서 의약, 화장품, 식품 등에 쉽게 사용할 수 있는 물질의 개발에 대한 필요성이 요구되고 있다.For this reason, there is a need for the development of a substance that can be easily used in medicine, cosmetics, food, etc. as a natural substance that is stable to the human body having antioxidant capacity, soothing effect, moisturizing effect, and whitening effect.

이러한 배경하에서, 본 발명품은 산화물질에 대한 세포보호효과를 가지며 미백효과를 가지는 동시에 피부에 진정, 보습력을 부여하여 피부상태를 개선 또는 증진시키기 위한 화장료 조성물로 사용가능하다.Under this background, the present invention can be used as a cosmetic composition for improving or improving skin condition by providing a skin protection effect on an oxide and having a whitening effect and imparting soothing and moisturizing properties to the skin.

본 발명의 목적은 감귤류(citrus) 꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물로 피부에 대한 미백효과를 가지며 보습, 진정작용을 부여함으로써 건강한 피부를 유지하고 산화물질로부터 피부를 보호함으로써 피부노화를 방지할 수 있는 피부상태 개선용 조성물을 제공하는데 있다.An object of the present invention is a cosmetic composition comprising citrus flower extract as an active ingredient, which has a whitening effect on the skin and gives moisturizing and soothing effects to maintain healthy skin and protect the skin from oxides, thereby preventing skin aging. The present invention provides a composition for improving skin condition.

본 발명에서는 감귤꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부상태 개선용 피부외용제로서, 상기 목적 및 이점은 하기의 실시예 및 청구범위에 의해 명확하게 된다.In the present invention, the skin external preparation for improving the skin condition comprising the citrus flower extract as an active ingredient, the above objects and advantages will be apparent by the following examples and claims.

본 발명에 따른 감귤꽃잎수 추출물을 포함하는 조성물은 피부진정, 보습효과를 가지는 동시에 항산화 효과를 나타냄으로써 건강한 피부유지와 더불어 피부개선용 조성물로 사용가능하다.The composition comprising the citrus petal water extract according to the present invention can be used as a composition for improving skin as well as maintaining a healthy skin by exhibiting a soothing, moisturizing effect and an antioxidant effect.

상기한 바와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 의한 피부 미백, 진정, 보습, 항산화력 증진용 화장료 조성물은 감귤류 꽃 또는 천연 추출물을 함유하는 것을 특징으로 한다. In order to achieve the object as described above, the cosmetic composition for skin whitening, soothing, moisturizing, antioxidant power enhancement according to the present invention is characterized by containing a citrus flower or a natural extract.

본 발명자들은 본 발명에 제품 안정성이 우수하고 피부에 대한 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있으며 피부 미백, 보습, 진정, 항산화효과가 우수한 천연식물 또는 식물추출물을 개발하고자 노력하였다. 그 결과, 감귤류 꽃으로부터 추출한 감귤꽃수가 우수한 미백효과, 보습효과, 진정효과 및 항산화효과를 나타냄으로 인해 피부상태개선효과를 부여할 수 있음을 확인하였다.The present inventors have tried to develop a natural plant or plant extract excellent in product stability and safe to use without side effects on the skin and excellent in skin whitening, moisturizing, soothing and antioxidant effects. As a result, it was confirmed that citrus flower water extracted from citrus flowers can give skin condition improvement effect by showing excellent whitening effect, moisturizing effect, soothing effect and antioxidant effect.

본 발명의 감귤 꽃 제조방법은 다음과 같다.Citrus flower production method of the present invention is as follows.

감귤 꽃 수확 - 선별 - 수세척 - 건조Citrus Flower Harvest-Screening-Washing-Drying

감귤꽃 제조에 있어 건조는 자연건조, 진공오븐 건조 또는 열풍건조 등 방법에 한정되지는 않는다.Drying in citrus flowers is not limited to natural drying, vacuum oven drying or hot air drying.

본 발명의 감귤꽃수 제조방법은 다음과 같다.Citrus blossom water production method of the present invention is as follows.

1) 건조된 감귤꽃을 중량에 대하여 3배에서 5배 정도의 초저온 액체질소를 넣어 일반적으로 사용되는 브랜더나 믹서 등으로 1분에서 10분 정도 3000rpm에서 10000rpm으로 고속회전하는 프로펠러로 완전히 분쇄한다. 분쇄시 완전한 분쇄를 위하여 2분 간격으로 액체질소를 1배수 정도씩 더 주입한다. 분쇄가 끝난 후 상온에서 10분 정도 방치하면 꽃잎이 물리적으로 완전히 파쇄된 상태로 꽃잎 식물세포를 구성하는 액포의 물이 흘러나와 완전히 빨간색의 걸쭉한 상태의 꽃잎파쇄물이 얻어진다.1) Put dried citrus flower into cryogenic liquid nitrogen about 3 to 5 times by weight, and grind completely with propeller rotating at high speed from 3000rpm to 10000rpm for 1-10 minutes with a commonly used brander or mixer. In order to completely grind during the grinding process, liquid nitrogen is injected in multiples of 2 times at intervals of 2 minutes. After grinding, it is left at room temperature for about 10 minutes, and the water of the vesicles constituting the petal plant cells flows out in a state where the petals are physically completely broken to obtain a completely red thick flake petal.

2) 이 꽃잎파쇄물을 1um 여과지로 여과하여 여과액을 얻는다. 이 여과액을 감귤꽃잎수 원액이라 명하였다.2) This petal crushed product is filtered through 1 um filter paper to obtain a filtrate. This filtrate was named Citrus Petal Stock Solution.

3) 꽃잎수 원액이 여과된 여과지위의 세포파쇄물을 다시 물을 용매로 사용하여 냉침법으로 추출한다. 선행등록특허(제10-0782599호)에서 제공된 천연방부성분을 2% 첨가한 물을 용재로 사용하여 상온에서 3일 간 담가서 추출한 후 여과하여 감귤꽃잎 추출물을 얻었으며 이 추출물은 감귤꽃잎수 추출물로 명명하였다.3) Extract the cell lysate on the filter paper from which the petal water stock solution was filtered by cold immersion method using water as a solvent. After extracting by soaking for 3 days at room temperature using water containing 2% of the natural preservative ingredient provided in the prior registration patent (No. 10-0782599) as a solvent and filtered to obtain a citrus petal extract. Named it.

2)항에서 얻어진 감귤꽃잎수는 고형분으로 전체 꽃잎 건조중량에 대하여 17% 정도인 것으로 최종 확인되었다. 또한 3)항에서 얻어진 감귤꽃잎수 추출물은 꽃잎 건조중량에 대하여 7% 정도인 것으로 확인되었다. 물론 침지시간 조절에 따라 1에서 5% 정도 함량이 증가함을 확인하였다. The citrus petals obtained in paragraph 2 were found to be 17% by weight of the total dry weight of the petals. In addition, the citrus petal extract obtained in 3) was found to be about 7% of the dry weight of the petals. Of course, it was confirmed that the content increased by about 1 to 5% by adjusting the immersion time.

이렇게 얻어진 감귤꽃 또는 감귤꽃수를 통상적인 화장료 조성물로 만들어 피부 미백, 보습, 진정, 항산화효과를 등의 피부개선효과를 평가하였다. The citrus flower or citrus flower water thus obtained was made into a conventional cosmetic composition to evaluate skin improvement effects such as skin whitening, moisturizing, soothing, and antioxidant effects.

이러한 효능평가에서 미백 및 보습효과가 뛰어났으며, 감귤꽃수의 경우 피부의 보습과 밀접하게 관련된 히알루로니데이즈(Hyaluronidase) 효소의 활성을 일정 수준 억제할 수 있으며, 또한 히알루론산(hyaluronic acid)의 합성을 증진시킬 수 있음이 밝혀졌다. 또한 인체를 대상으로 한 보습력 측정에서도 높은 보습정도를 나타내었다. 건조된 감귤꽃잎의 경우 팩이나 입욕제 및 다양한 용도로 활용이 가능하며 이를 이용해서 감귤꽃잎팩으로 사용한 경우 미백효과 및 보습효과가 뛰어났다. Was born whitening and moisturizing jump out of this efficacy, can be suppressed in the case of citrus kkotsu constant moisturizing and closely related hyaluronic Ronnie Days (Hyaluronidase) activity of the enzyme in the skin level, and the synthesis of hyaluronic acid (hyaluronic acid) It has been found to be able to enhance. In addition, the moisturizing power of the human body showed a high degree of moisturizing. Dried citrus petals can be used in packs, baths and various applications. When used as citrus petals packs, the whitening and moisturizing effects were excellent.

본 발명의 조성물은 산화물질로부터의 세포보호효과를 가짐으로서 우수한 항산화 효과를 발휘한다. 본 발명의 항산화용 조성물은 산화물질로부터의 피부손상을 예방하여 산화물질로부터 기인할 수 있는 다양한 질환 또는 질병을 억제 또는 예방할 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 항산화용 조성물은 피부 노화의 예방 또는 억제에 적용할 수 있다. The composition of the present invention exhibits an excellent antioxidant effect by having a cytoprotective effect from oxide. Antioxidant compositions of the present invention can prevent or damage the skin damage from the oxide material can inhibit or prevent a variety of diseases or diseases that can be attributed to the oxide material. Preferably, the antioxidant composition of the present invention can be applied to the prevention or suppression of skin aging.

또한, 본 발명의 조성물은 피부 미백용도를 갖는다. 본 명세서에서 용어 미백은 멜라닌 색소의 침착으로 야기되는 피부의 흑화를 방지하는 피부트러블을 개선하는 작용을 의미한다.In addition, the composition of the present invention has a skin whitening purpose. As used herein, the term whitening refers to the action of improving skin trouble that prevents blackening of the skin caused by the deposition of melanin pigment.

본 발명의 피부미백 조성물은 타이로시네이즈의 활성을 억제함으로서 멜라닌 생성을 억제하는 우수한 미백효과를 나타내며, 안정성이 높고, 피부 자극 유발 등의 부작용이 거의 없다.The skin whitening composition of the present invention exhibits an excellent whitening effect of inhibiting melanin production by inhibiting the activity of tyrosinase, and has high stability and almost no side effects such as skin irritation.

따라서 본 발명에서 얻어진 동백꽃잎 또는 동백꽃잎수는 사용용도와 방법에 따라 적절한 첨가제를 함유하는 여러 가지 종류의 화장료 조성물로 제조될 수 있다. Therefore, the camellia petals or camellia petals obtained in the present invention can be prepared with various kinds of cosmetic compositions containing suitable additives according to the use and method.

아래의 실시에는 본 발명의 내용을 설명하나, 본 발명의 내용이 여기에 한정되지는 않는다.
Although the content of this invention is demonstrated to the following implementation, the content of this invention is not limited to this.

실시 예 1. Example 1. 감귤꽃잎수Citrus petals 원액의 제조 Preparation of Stock

건조된 감귤꽃 원료500g을 2 리터의 초저온 액체질소를 넣은 후, 믹서로 10,000 rpm에서 6분 동안 완전히 분쇄한다. 분쇄 시 완전한 분쇄를 위하여 2분 간격으로 액체질소를 500 ml씩 더 주입하였다. 분쇄가 끝난 후 상온에서 10분 정도 방치하면 꽃잎이 물리적으로 완전히 파쇄된 상태가 된다. 이로 인해 꽃잎 식물세포를 구성하는 액포의 물이 흘러나와 완전히 빨간색의 걸쭉한 상태의 꽃잎 파쇄물을 얻을 수 있었다. 확보된 꽃잎 파쇄물을 1 m 여과지로 여과하여 여과액을 얻었고 이를 감귤꽃잎수 원액이라 명명하였다. 감귤꽃잎수 원액의 건조중량은 70g이었다.
500 g of dried citrus fruit raw materials are charged with 2 liters of cryogenic liquid nitrogen, and then thoroughly ground in a mixer at 10,000 rpm for 6 minutes. In order to completely grind during the grinding process, 500 ml of liquid nitrogen was added at two minute intervals. After grinding, if left at room temperature for 10 minutes, the petals are physically completely broken. As a result, water from the vacuoles constituting the petal plant cells flowed out to obtain a thick red flake of petals. The obtained petal crush was filtered through 1 m filter paper to obtain a filtrate, which was named as citrus petal stock solution. The dry weight of the citrus petal stock solution was 70 g.

실시 예 2. Example 2. 감귤꽃잎수Citrus petals 추출물의 제조 Preparation of extract

70g의 꽃잎수 원액을, 선행등록특허(제10-0782599호)에서 제공된 천연방부성분을 2% 첨가한 물을 용재로 사용하여 상온에서 3일간 담가서 추출한 후 여과하여 최종적으로 감귤꽃잎수 추출물을 얻었다. 이 감귤꽃잎수 추출물을 냉각콘덴서가 달린 증류장치에서 7도로 감압농축하여 23g(건조중량)의 추출물을 수득하였다.
70g of the petal water stock solution was extracted by soaking for 3 days at room temperature using water containing 2% of the natural preservative ingredient provided in the prior registration patent (No. 10-0782599) as a solvent, followed by filtration to obtain a citrus petal extract. . The citrus petal extract was concentrated under reduced pressure at 7 degrees in a distillation apparatus equipped with a cooling capacitor to obtain an extract of 23 g (dry weight).

실시예Example 3 : 피부개선  3: skin improvement 화장료Cosmetics 조성물의 제조 Preparation of the composition

영양크림Nutrition Cream

실시 예 1, 2의 추출물을 함유한 영양 크림의 제조 예는 하기 표 1에 나타낸 바와 같다.  수상인 정제수, 트리 에탄올 아민, 프로필렌 글리콜을 70℃로 가열 용해하였다.  여기에 유상인 지방산, 유성성분, 유화제 및 방부제를 70℃로 가열 용해한 액을 첨가하여 유화시켰다.  유화가 완료되면 상기 용액을 45℃로 냉각시킨 후, 병풀 및 목련추출물과 향을 첨가하고 분산시킨 다음 30℃로 냉각하였다. Examples of the preparation of nutritional creams containing the extracts of Examples 1 and 2 are as shown in Table 1 below. Purified water, triethanolamine, and propylene glycol, which were aqueous phases, were dissolved by heating at 70 ° C. The oily fatty acid, an oily component, an emulsifier, and the preservative were melt | dissolved by adding the liquid which heated and melted at 70 degreeC here. After the emulsification was completed, the solution was cooled to 45 ° C., followed by adding and dispersing centella and magnolia extract and flavor, and then cooling to 30 ° C.

추출물을 함유한 영양크림의 성분 및 함량 Components and Contents of Nutritional Cream Containing Extract 성분ingredient 함량 (중량 %)Content (% by weight) 실시 예 1 추출물, 실시 예 2 추출물Example 1 Extract, Example 2 Extract 0.10.1 유동 파라핀Liquid paraffin 5.05.0 세틸아릴 알코올Cetylaryl alcohol 1.51.5 폴리글리세릴-3 메칠 글루코스 디스테아레이트Polyglyceryl-3 Methyl Glucose Distearate 1.51.5 글리세릴 스테아레이트Glyceryl stearate 0.50.5 스쿠알란Squalane 2.02.0 프로필렌 글리콜Propylene glycol 2.02.0 글리세린glycerin 6.06.0 트리 에탄올 아민Triethanolamine 0.20.2 카르복시 비닐폴리머Carboxy Vinyl Polymer 0.20.2 토코페릴 아세테이트Tocopheryl acetate 0.30.3 방부제, 향Preservative, incense 미량a very small amount 정제수Purified water 잔량Balance 합계Sum 100100

비교 제조 예 : Comparative manufacturing example: 정제수를Purified water 함유한 크림 Cream containing

상기 추출물을 함유한 영양크림의 제조 예에서 추출물을 첨가하지 않고 정제수로 대체한 크림의 조성은 다음과 같다. In the preparation example of the nutrition cream containing the extract, the composition of the cream replaced with purified water without the extract is as follows.

성분ingredient 함량 (중량%)Content (% by weight) 호호바 오일Jojoba oil 4.04.0 유동 파라핀Liquid paraffin 5.05.0 세틸아릴 알코올Cetylaryl alcohol 1.51.5 폴리글리세릴-3 메칠 글루코스 디스테아레이트Polyglyceryl-3 Methyl Glucose Distearate 1.51.5 글리세릴 스테아레이트Glyceryl stearate 0.50.5 스쿠알란Squalane 2.02.0 프로필렌 글리콜Propylene glycol 2.02.0 글리세린glycerin 6.06.0 트리 에탄올 아민Triethanolamine 0.20.2 카르복시 비닐폴리머Carboxy Vinyl Polymer 0.20.2 토코페릴 아세테이트Tocopheryl acetate 0.30.3 방부제, 향Preservative, incense 미량a very small amount 정제수Purified water 잔량Balance 합계Sum 100100

실시 예 4 감귤꽃의 인체에 대한 보습시험Example 4 Moisturizing Test of Human Body of Citrus Flowers

TEWA(Tewameter TM210, Germany) 증발계를 사용하여 경피수분손실 (transepidermal water loss, TEWL) 정도를 측정하였다.  측정은 상기에서 제조된 각각의 추출물을 함유한 크림과 시료를 전혀 포함하지 않은 크림을 각각 처리하고 4주 후 1회 보습정도를 측정하여 통계학적으로 비교하였다.  모든 측정은 공기의 이동이 없고 직사광선이 없는 실내온도는 22℃, 상대 습도는 40%로 유지되는 항온 항습실에서 측정하였다.   표 3에서 제시된 것처럼, 비교 예의 감귤꽃을 함유하지 않은 경우, 수분손실 감소 정도가 미미하였다. 반면, 실시 예의 감귤꽃을 함유한 경우, 보습효과가 뛰어남을 알 수 있었다. The degree of transepidermal water loss (TEWL) was measured using a TEWA (Tewameter TM210, Germany) evaporator. The measurement was performed by treating the cream containing each extract prepared above and the cream containing no sample at all and measuring the degree of moisturizing once after 4 weeks, and statistically compared. All measurements were taken in a constant temperature and humidity room with no air movement, no direct sunlight, and a room temperature of 22 ° C and a relative humidity of 40%. As shown in Table 3, when the citrus flowers of the comparative example were not contained, the degree of water loss reduction was insignificant. On the other hand, when containing the citrus flowers of the embodiment, it was found that the moisturizing effect is excellent.

TEWL변화 (단위:g/㎡/h)TEWL change (unit: g / ㎡ / h) 팩의 종류Type of pack 시험자수Test embroidery 처리 전Before processing 처리 후After processing 평균±평균오차Mean ± mean error 평균±표준편차Mean ± SD 무처리군Untreated group 3030 23.85±2.4223.85 ± 2.42 22.18±3.5622.18 ± 3.56 비교 예Comparative example 3030 22.76±3.1522.76 ± 3.15 19.52±3.4819.52 ± 3.48 실시 예Example 3030 23.84±3.4323.84 ± 3.43 10.65±2.2510.65 ± 2.25

실시 예 5 감귤꽃의 인체에 대한 미백효과 시험Example 5 Whitening Effect Test of Citrus Flowers on Human Body

감귤꽃의 피부에 대한 직접적인 미백효과를 검증하기 위하여 증맹검법에 따라 크로마미터(Minolta사, chromameter CR-300)를 이용해서 명도를 측정하였다. 팔 위쪽부위에 자외선을 0.86 J/m2씩 1일 1회 3일간 쪼인 다음 감귤꽃을 함유한 크림과 함유하지 않은 크림을 1일 2회 15일간 20~30세의 남성 15명, 여성 15명에게 도포하여, 도포 전과 도포 후의 명도를 측정 비교해서 색소 침착의 소실 정도를 산출하였다.In order to verify the direct whitening effect of citrus flowers on the skin, brightness was measured using a chromameter (Minolta, chromameter CR-300) according to the visual inspection method. Sunlight 0.86 J / m 2 at the upper part of the arm once a day for 3 days, and then creams containing citrus and non-creams twice a day for 15 days for 20 to 30 males and 15 females. The degree of disappearance of pigmentation was calculated by measuring the lightness before coating and after coating.

[수학식 1] [Equation 1]

미백효과 (%)= (도포전의 명도값-도포 후의 명도값/도포 전의 명도값) X 100Whitening effect (%) = (brightness value before application-brightness value after application / brightness value before application) X 100

표 4에서 제시된 것처럼 비교 예의 감귤꽃을 함유하지 않은 경우, 미백효과가 거의 나타나지 않는 반면, 실시 예의 감귤꽃을 함유한 경우, 미백효과가 뛰어남을 알 수 있었다.As shown in Table 4, when the citrus flower of the comparative example is not contained, the whitening effect is hardly observed, whereas when the citrus flower of the example is contained, the whitening effect is excellent.

구분division 미백 효과 (%)Whitening Effect (%) 무처리군Untreated group 1.5%1.5% 비교 예Comparative example 15.215.2 실시 예Example 65.465.4

실시 예 6. 감귤꽃의 입욕효능시험Example 6. Bathing efficacy test of citrus flowers

감귤꽃의 입욕효능을 시험하기 위해 40명 (남자 20명, 여자 20명)의 실험자를 대상으로 피부진정효과 및 보습효과에 대하여 설문조사를 실시하였다.In order to test the bathing efficacy of citrus flowers, 40 participants (20 males and 20 females) were surveyed for skin soothing and moisturizing effects.

입욕은 욕조에 물을 가득 채운 후, 건조된 감귤꽃잎 15g을 투여하고 5 ~ 10분 후 유의한 성분들이 우러나기 시작하면 10분~20분 동안 입욕하고, 입욕수의 온도는 38 ~ 40 도로 유지하였으며, 설문조사는 3회에 걸쳐 입욕 후 실시하였다.After bathing, fill the bathtub with water, administer 15g of dried citrus petals, and after 5-10 minutes, begin to bathe for 10 ~ 20 minutes when significant ingredients begin to emerge, and the temperature of the bath is maintained at 38-40 degrees. The survey was conducted three times after bathing.

피부 보습효과, 진정효과 및 피로회복 정도에 대하여 만족감을 나타내는 피험자들의 연령별 숫자 및 응답자 대비 만족 피험자수를 효과율로 나타내었다.The age-specific number of subjects showing satisfaction with skin moisturizing effect, sedative effect and fatigue recovery, and the number of satisfied subjects compared with respondents were expressed as the effective ratio.

보습효과Moisturizing effect 피로회복Fatigue Recovery 진정작용Sedation 성별gender 남 (20명)Male (20) 남 (20명)Male (20) 여 (20명)Female (20) 여 (20명)Female (20) 남 (20명)Male (20) 여 (20명)Female (20) 20대20's 33 33 33 44 33 33 30대30s 44 44 44 44 44 33 40대40 spaces 44 33 44 44 33 44 50대50s 33 33 33 33 33 33 만족 피험자수/응답자수Satisfied Subjects / Respondents 27/4027/40 29/4029/40 26/4026/40 효과율Effectiveness rate 67.5%67.5% 72.5%72.5% 65%65%

상기 표 5에서 나타낸 것과 같이 감귤꽃을 사용하여 3회 입욕하는 것만으로도 보습, 진정효과 Moisturizing, soothing effect only by bathing three times using citrus flowers as shown in Table 5 above

피로회복에 있어서 현저한 효과가 있다는 것을 알 수 있다
It can be seen that there is a significant effect on fatigue recovery.

실시 예 7. 멜라닌 생성 억제효과 측정Example 7 Measurement of Melanin Inhibition Effect

쥐의 색소세포(B16 melanoma cells)를 이용하여 감귤꽃수에 의한 멜라닌 생성 억제효과를 측정하였으며, 이를 멜라닌 생성을 억제하는 것으로 알려진 알부틴에 의한 멜라닌 생성 억제효과와 비교하였다.B16 melanoma cells were used to measure the inhibitory effect of melanin production by citrus blossoms and compared with the inhibitory effect of melanin production by arbutin known to inhibit melanogenesis.

본 실험은 B16 melanoma cells을 10%의 FBS(fetal bovine serum)가 함유된 DMEM 배지로 6-well microplate에 well 당 1×105 개로 접종하고 5% CO2 및 37℃하에서 세포가 well 바닥에 약 80% 이상 부착될 때까지 배양하였다. 이어 배지를 제거하고 시료를 적당 농도로 희석된 배지에 교체하고, 5% CO2 및 37℃하에서 3일 동안 배양하였다. 감귤꽃수의 농도범위는 세포독성이 없는 1 ppm, 10 ppm 및 100 ppm 으로 결정하였다. 배지를 제거한 세포를 PBS(phosphate buffered saline)로 세척하고, 이를 트립신으로 처리하여 세포를 회수하였다. 회수된 세포는 헤모토사이토미터(hematocytometer)를 이용하여 세포수를 측정하고, 5,000 내지 10,000 rpm으로 10분 동안 원심분리한 다음 상층액을 제거하여 침전물을 얻었다. 이 세포 침전물을 60℃에서 건조시키고 10% DMSO가 함유된 1 M 수산화나트륨액 100 ml를 넣어 60℃ 항온조에서 세포내 멜라닌을 얻었다. 이를 490 nm의 파장에서 흡광도를 측정하여 세포 일정 수당 멜라닌 양을 구하였다. In this experiment, B16 melanoma cells were inoculated in DMEM medium containing 10% fetal bovine serum (FBS) in 6-well microplates at 1 × 10 5 per well, and at 5% CO 2 and 37 ° C, Incubate until at least 80% attachment. The medium was then removed and the sample was replaced with medium diluted to the appropriate concentration and incubated at 5% CO 2 and 37 ° C. for 3 days. The concentration range of citrus blossoms was determined to be 1 ppm, 10 ppm and 100 ppm without cytotoxicity. The cells from which the medium was removed were washed with PBS (phosphate buffered saline) and treated with trypsin to recover the cells. The recovered cells were measured by using a hematocytometer to measure the cell number, centrifuged at 5,000 to 10,000 rpm for 10 minutes, and the supernatant was removed to obtain a precipitate. The cell precipitate was dried at 60 ° C., and 100 ml of 1 M sodium hydroxide solution containing 10% DMSO was added to obtain intracellular melanin in a 60 ° C. thermostat. The absorbance was measured at a wavelength of 490 nm to determine the amount of melanin per cell.

시료sample 처리 농도 (ppm)Treatment Concentration (ppm) 멜라닌 생성 억제율 (%)Melanin production inhibition rate (%) 알부틴Arbutin 5050 3030 감귤꽃수Citrus 1One 22 1010 1616 5050 3535

상기 표 6 에 기재된 바와 같이, 처리 농도에서 감귤꽃수는 알부틴보다 멜라닌 생성 억제율이 높음을 알 수 있다. 또한, 감귤꽃수의 멜라닌 생성 억제 활성은 농도-의존적이라는 것을 알 수 있다.
As shown in Table 6, it can be seen that citrus blossom water at the treatment concentration has a higher melanin inhibition rate than arbutin. In addition, it can be seen that the melanin production inhibitory activity of citrus blossoms is concentration-dependent.

실시 예 8. Example 8. 감귤꽃수에On citrus blossom 의한  by 세포내Intracellular 타이로시네이즈Tairosineiz (( tyrosinasetyrosinase ) 활성억제 효과 측정) Activity Inhibition Effect Measurement

쥐의 색소세포(B16 melanoma cells)를 이용하여 감귤꽃수에 의한 멜라닌 생성 억제효과를 측정하고, 이를 멜라닌 생성을 억제하는 것으로 알려진 알부틴에 의한 세포내 타이로시네이즈 활성 억제효과와 비교하였다.Rat pigment cells (B16 melanoma cells) were used to measure the inhibitory effect of melanin production by citrus blossoms and compared it with the inhibitory effect of intracellular tyrosinase activity by arbutin known to inhibit melanin production.

본 실험은 B16 melanoma cells 를 10%의 FBS (fetal bovine serum)가 함유된 DMEM배지로 6-well microplate에 well 당 1×105개로 접종한 후 5% CO2, 37℃ 하에서 세포가 well 바닥에 약 80% 이상 부착될 때까지 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 시료를 적당 농도로 희석된 배지에 교체한 후 5% CO2, 37℃하에서 3일간 배양하였다. 감귤꽃수의 농도범위는 세포독성이 없는 1 ppm, 5 ppm 및 10 ppm 으로 결정하였다. 배지를 제거한 세포를 PBS(phosphate buffer saline)로 세척하고, 이것을 트립신으로 처리하여 세포를 회수하였다. 회수된 세포는 헤모토사이토미터(hematocytometer)를 이용하여 세포수를 측정한 후 5,000내지 10,000 rpm으로 10분간 원심분리한 다음 상층액을 제거하여 침전물을 얻었다. 이 세포 침전물을 용해 완충액을 이용하여 분쇄한 후, 12,000rpm으로 10분간 원심분리하여 상층액을 수집하였다. 이 액을 492 nm파장에서 흡광도를 측정하여 세포 일정 수당 타이로시네이즈 활성을 구하였다. 그 결과를 하기 표 7 에 나타내었다.In this experiment, B16 melanoma cells were inoculated with DMEM medium containing 10% of FBS (fetal bovine serum) in 6-well microplates at 1 × 10 5 per well, and the cells were placed at the bottom of the well at 5% CO 2 and 37 ° C. Incubated until at least about 80% adhered. After incubation, the medium was removed, the sample was replaced with a medium diluted to an appropriate concentration, and then incubated at 5% CO 2 , 37 ° C for 3 days. The concentration range of citrus blossoms was determined to be 1 ppm, 5 ppm and 10 ppm without cytotoxicity. The cells from which the medium was removed were washed with PBS (phosphate buffer saline) and treated with trypsin to recover the cells. The recovered cells were measured by using a hematocytometer (hematocytometer) and then centrifuged at 5,000 to 10,000 rpm for 10 minutes, and then the supernatant was removed to obtain a precipitate. The cell precipitate was pulverized using lysis buffer and then centrifuged at 12,000 rpm for 10 minutes to collect supernatant. This solution was measured for absorbance at 492 nm wavelength and cell constant allowance tyrosinase activity was determined. The results are shown in Table 7 below.

시료sample 처리농도 (ppm)Treatment concentration (ppm) 세포내 타이로시네이즈 활성 억제율 (%)Inhibition rate of intracellular tyrosinase activity (%) 알부틴Arbutin 55 4040
감귤꽃수

Citrus
1One 1010
55 3232 1010 4545

실시 예 9. Example 9. 히알루로니데이즈Hyaluronidays 활성 억제시험 Activity inhibition test

96-well microplate에 55℃로 가온된 hyaluronic acid-agarose mixture를 100 ㎕씩 분주한 후 실온에 방치하여 gel화시켰다. 100㎕ hyaluronidase (40 unit)를 가하고 37℃에서 배양한 후 상층액을 버리고, 10%(w/v) cetylpyridinium chloride를 100㎕ 가하여 실온에서 30분 방치하고 595 nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과를 표 8에 나타내었다.100 μl of the hyaluronic acid-agarose mixture warmed to 55 ° C. was dispensed on a 96-well microplate and gelated by standing at room temperature. 100 μl hyaluronidase (40 unit) was added thereto, and cultured at 37 ° C., and then the supernatant was discarded. 100 μl of 10% (w / v) cetylpyridinium chloride was added thereto and left at room temperature for 30 minutes, and the absorbance was measured at 595 nm. The results are shown in Table 8.

시료sample 처리농도 (ppm)Treatment concentration (ppm) 히알루로니데이즈 활성(%)Hyaluronidase Activity (%) 무처리군Untreated group 00 100%100%
감귤꽃수

Citrus
1One 9595
1010 50.550.5 2020 32.432.4

Hyaluronidase는 hyaluronic acid 를 가수분해하는 효소이다. Hyaluronic acid는 피부나 연골조직의 세포 외 기질(extracellular matrix)에 존재하는 구성 물질로 space-filling, structure-stabilizing, cell-coating과 같은 기능을 담당하며 피부의 보습 기능에 있어서 중요한 작용을 하는 물질로 알려져 있다. 특히 hyaluronic acid는 자기보다 200배에 해당하는 수분을 함유할 수 있는 능력을 가진 물질로서 피부에서 이 물질의 감소는 피부가 건조되는 원인이 되기도 한다. 이 실험에서는 감귤꽃수가 hyaluronidase 활성에 어떠한 영향을 미치는 지에 대하여 관찰하였다. 관찰결과 무처리군에 비해 감귤꽃수 처리군이 히알루로니데이즈 활성을 현저하게 억제하는 것을 알 수 있었다.
Hyaluronidase is an enzyme that hydrolyzes hyaluronic acid. Hyaluronic acid is a constituent substance present in the extracellular matrix of skin or cartilage tissue. It is responsible for space-filling, structure-stabilizing, and cell-coating, and is an important substance in the moisturizing function of skin. Known. In particular, hyaluronic acid is a substance that can contain 200 times more moisture than its own. The reduction of this substance in the skin may cause the skin to dry. In this experiment, the effect of citrus flower water on hyaluronidase activity was observed. Observation results showed that citrus blossom water treatment group significantly inhibited hyaluronidase activity compared to the untreated group.

실시 예 10. 히아루론산 합성 증진시험Example 10. Hyaluronic Acid Synthesis Enhancement Test

사람 섬유아세포(human normal fibroblast cells)에 시료추출물을 10ppm에서 24시간 동안 처리한 후, 최종적으로 세포를 분쇄(lysis)한 후 세포시료를 확보하였다. 하이루론산의 농도는 Hyaluronan Enzyme-linked Immunosorbent Assay(ELISA) kit(Echelon Biosciences Inc., UT, U.S.A.)을 이용하여 측정하였다. 그 결과를 하기 표 9에 나타내었다.After treating the sample extract with 10ppm for 24 hours to human normal fibroblast cells, the cells were finally lysed to obtain a cell sample. The concentration of hyaluronic acid was measured using a Hyaluronan Enzyme-linked Immunosorbent Assay (ELISA) kit (Echelon Biosciences Inc., UT, U.S.A.). The results are shown in Table 9 below.

시료sample 처리농도 (ppm)Treatment concentration (ppm) 히아루론산 농도(?g/ml)Hyaluronic Acid Concentration (? G / ml) 무처리군Untreated group 00 4.864.86
감귤꽃수

Citrus
1One 6.216.21
1010 19.6419.64 2020 25.5625.56

상기 표 9에서 제시하듯, 감귤꽃수가 무처리군에 비해 히알루론산 생합성을 높은 수준으로 촉진시킴을 알 수 있다.
As shown in Table 9, it can be seen that citrus blossom water promotes hyaluronic acid biosynthesis to a higher level than the untreated group.

실시 예 11. Example 11. 감귤꽃수의Citrus 인체 피부에 대한 안전성 시험 Safety test for human skin

감귤꽃수의 인체피부에 대한 안전성 검증을 위해 피부누적자극시험을 실시하였다.A cumulative skin irritation test was conducted to verify the safety of citrus blossoms on human skin.

추출한 감귤꽃수를 정제수로 희석하여 10 ppm, 20 ppm, 50 ppm 농도로 제조하고, 이를 사용하여 건강한 30명의 성인을 대상으로 윗팔뚝 부위에 격일로 총 9회의 24시간 누적첩포를 시행하는 것에 의하여 감귤꽃수가 피부에 자극을 주는지의 여부를 측정하였다.By diluting the extracted citrus blossoms with purified water at 10 ppm, 20 ppm, and 50 ppm concentrations, the citrus fruits were subjected to a total of 9 24-hour cumulative patching on the upper forearm every other day for 30 healthy adults. Whether the number of flowers irritated the skin was measured.

첨포방법은 핀 챔버(Finn chamber, Epitest Ltd, 핀란드)를 이용하였다. 챔버에 상기 각 피부 외용제를 15㎕씩 적하한 후 첩포를 실시하였다. 매회 피부에 나타난 반응의 정도를 하기 수학식 2를 이용하여 점수화 하였으며, 그 결과를 하기 표 10에 나타내었다.Pinnacle method (Finn chamber, Epitest Ltd, Finland) was used. 15 µl of each of the external preparations for skin was added dropwise to the chamber, followed by patching. The degree of response to the skin each time was scored using Equation 2 below, and the results are shown in Table 10 below.

[수학식 2]&Quot; (2) "

평균반응도 = [[{(반응지수 X 반응도) / (총 피검자수 X 최고점수(4점))}] X 100] ÷ 검사회수 (9회)Average Responsiveness = [[{(Response X Responsiveness) / (Total Number of Subjects X Highest Score (4 points))}] X 100] ÷ Number of Tests (9)

반응도에서 ± (a)는 1점, + (b)는 2점, ++ (c) 는 4점의 점수를 부여하며, 평균 반응도가 3 미만일 때 안전한 조성물로 판정된다.In the reactivity, ± (a) is 1 point, + (b) is 2 points, and ++ (c) is 4 points, and when the average reactivity is less than 3, it is determined as a safe composition.

시험
물질
exam
matter
반응이 나타난 피검자 수Number of subjects who responded 평균
반응도
Average
Reactivity
1주1 week 2주2 weeks 3주3 weeks 1차Primary 2차Secondary 3차Third 1차Primary 2차Secondary 3차Third 1차Primary 2차Secondary 3차Third a b ca b c a b ca b c a b ca b c a b ca b c a b ca b c a b ca b c a b ca b c a b ca b c a b ca b c 대조군
(정제수)
Control group
(Purified water)
0 - -0 - - - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- 1 - -One - - - - ---- - - ---- 0.090.09
감귤
꽃수
Citrus
Flower
10ppm10ppm 0 - -0 - - - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- 0.000.00
20ppm20 ppm 0 - -0 - - - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- 0.000.00 50ppm50 ppm 0 - - 0 - - - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- - - ---- 1 - -One - - - - ---- - - ---- 0.090.09

상기 표 10에 기재된 바와 같이, 감귤꽃수가 인체 피부에 대한 자극도가 없는 것으로 나타났다.
As shown in Table 10, citrus blossoms were found to have no irritation to human skin.

실시 예 12. 항산화 효과Example 12. Antioxidant Effect

수퍼옥사이드 디스뮤테이즈(Superoxide dismutase)(SOD)는 수퍼옥사이드 음이온(Superoxide anion)를 H2O2와 O2로 전환시키는 항산화효소로 알려져 있다. 이 실험은 잔틴 옥시다아제(Xanthine oxidase)에 의해 발생한 수퍼옥사이드 음이온이 시험에 사용된 시료에 의해 제거된 비율을 관찰함으로써, 시료의 항산화능을 평가하는 방법이다. 실험은 Dojindo(일본)에서 구입한 키트(SOD Assay Kit-WST)를 사용하여 실시하였으며, 제조사의 프로토콜에 따라 실험하였다. 간략하게 효과는 시료에 의한 수퍼옥사이드 음이온 제거율을 관찰함으로써, 항산화기능의 유무를 판단하였다. 실험 결과는 표 11에 정리되어 있다.Superoxide dismutase (SOD) is known as an antioxidant enzyme that converts superoxide anions into H 2 O 2 and O 2 . This experiment is a method of evaluating the antioxidant capacity of a sample by observing the rate at which the superoxide anion generated by Xanthine oxidase was removed by the sample used in the test. The experiment was carried out using a kit purchased from Dojindo (Japan) (SOD Assay Kit-WST), and was tested according to the manufacturer's protocol. In brief, the effect was determined by observing the removal rate of superoxide anion by the sample, the presence or absence of antioxidant function. The experimental results are summarized in Table 11.

시료sample 처리 농도 (ppm)Treatment Concentration (ppm) 수퍼옥사이드 음이온 제거율 (%)Superoxide Anion Removal Rate (%) 감귤꽃수Citrus 1One 55 1010 1414 2020 3232

상기 표 11에 기재된 바와 같이, 본 발명의 감귤꽃수는 농도의존적으로 항산화효과를 가지고 있음을 알수 있다.
As shown in Table 11, it can be seen that citrus blossoms of the present invention have an antioxidant effect in a concentration-dependent manner.

실시 예 13. Example 13. 산화적Oxidative 스트레스에 대한 세포보호효과 Cytoprotective effect against stress

사람의 피부섬유아세포 (Epidermal human fibroblast)를 이용하여 감귤꽃수의 산화적스트레스에 대한 세포보호효과를 세포생존률의 비교를 통해서 측정하였다.The cytoprotective effect of citrus blossoms against oxidative stress using epidermal human fibroblasts was measured by comparing cell viability.

본 실험은 피부섬유아세포를 10%의 FBS (fetal bovine serum)가 함유된 DMEM배지로 12-well microplate에 well 당 5×104개로 접종한 후 5% CO2, 37℃하에서 세포가 well 바닥에 약 80% 이상 부착될 때까지 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 시료를 적당 농도로 희석된 배지에 교체한 후 5% CO2, 37℃ 하에서 1시간동안 전처리 후 H2O2를 처리하여 2일간 배양하였다. 감귤꽃수의 농도범위는 세포독성이 없는 10 ppm, 20 ppm, 100 ppm 으로 결정하였다. 배지를 제거한 세포를 PBS(phosphate buffer saline)로 세척하고, 1%의 MTT((3-[4, 5-dimethylthiazol-2-yl]-2, 5-diphenyl tetrazolium bromide)가 포함된 DMEM배지로 교체 후 3시간 뒤 상등액을 제거한 DMSO로 녹인 후 540nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다. 실험결과는 표 12에 나타내었다.This study was a skin fibroblast cells in the well bottom under 10% of FBS (fetal bovine serum) is in a DMEM medium was inoculated to 12-well microplate 5 × 10 4 pieces per well 5% CO 2, 37 ℃ Incubated until at least about 80% adhered. After incubation, the medium was removed, the sample was replaced with a medium diluted to an appropriate concentration, and then incubated for 2 days by treatment with H 2 O 2 after pretreatment at 5% CO 2 , 37 ° C. for 1 hour. The concentration range of citrus blossoms was determined to be 10 ppm, 20 ppm and 100 ppm without cytotoxicity. The cells from which the medium was removed were washed with PBS (phosphate buffer saline) and replaced with DMEM medium containing 1% MTT ((3- [4, 5-dimethylthiazol-2-yl] -2, 5-diphenyl tetrazolium bromide). After 3 hours, the supernatant was dissolved in DMSO, and the absorbance was measured at a wavelength of 540 nm.

산화스트레스Oxidative stress 시료sample 처리농도 (ppm)Treatment concentration (ppm) 세포생존률 (%)Cell survival rate (%) 무처리No treatment 무처리No treatment 무처리No treatment 100100 H2O2
처리
H 2 O 2
process
무처리No treatment 무처리No treatment 5656
감귤꽃수Citrus 1010 6767 2020 6969 5050 7171

표 12에서 나타낸 바와 같이 감귤꽃수가 H2O2에 처리에 대한 세포 보호효과를 가지는 것을 알 수 있다.As shown in Table 12, it can be seen that citrus blossoms have a protective effect on H 2 O 2 treatment.

Claims (11)

건조된 감귤류 꽃 또는 감귤류 꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 상태개선용 화장료 조성물Cosmetic composition for improving skin condition comprising dried citrus flower or citrus flower extract as an active ingredient 제 1항에 있어서, 감귤류란 온주밀감, 한라봉, 제주레몬, 금귤, 병귤, 동정귤, 홍귤, 하귤, 청귤, 편귤, 인창귤, 영귤, 동정귤, 천혜향, 진지향, 청견, 문단, 당유자, 사두감, 세미놀 등의 시트러스류를 총칭하는 경우 According to claim 1, citrus fruits are Wenzhou mandarin, Hallabong, Jeju lemon, kumquat, bottle tangerine, tangerine tangerine, red tangerine, mandarin orange, blue mandarin orange, cinnamon tangerine, inchang mandarin orange, young mandarin orange, mandarin orange, cheonhyehyang, jinjihyang, hearing, paragraph, sugar yuja When generically citrus such as dead skin, semi-nut, etc. 감귤류 꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 조성물Antioxidant composition comprising citrus flower extract as an active ingredient 감귤류 꽃 추출물을 유효성분으로 포함하는 산화스트레스 억제 조성물Oxidative stress inhibitory composition comprising citrus flower extract as an active ingredient 제 1항에 있어서, 상기 피부의 상태개선은 피부미백, 진정보습을 특징으로 하는 조성물According to claim 1, wherein the condition of the skin improvement is characterized in that the skin whitening, true information moisture 피부나 두피의 건조를 막거나 추가적인 보습을 위하여 유효성분으로 감귤류 꽃수 원액을 함유하는 화장료 조성물Cosmetic composition containing citrus saline solution as an active ingredient to prevent drying of the skin or scalp or for additional moisturizing 제 1항 또는 5항 내지 6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 화장료 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물The composition according to any one of claims 1 to 5, wherein the composition is a cosmetic composition. 제 7항에 있어서, 상기 조성물은 스킨, 로션, 크림, 에센스, 세럼, 파운데이션, 팩, 비누, 클렌저류, 샴푸, 린스, 헤어토닉, 패치, 미스트의 제형으로 구성된 그룹에서 하나 이상의 제형을 가짐을 특징으로 하는 조성물8. The composition of claim 7, wherein the composition has one or more formulations in the group consisting of skin, lotion, cream, essence, serum, foundation, pack, soap, cleanser, shampoo, rinse, hair tonic, patch, mist. Characteristic composition 제 8항에 있어서 상기원액을 조성물에 대하여 0.01%에서 10%까지 사용한 경우The method according to claim 8, wherein the stock solution is used in an amount of 0.01% to 10% based on the composition. 제 8항에 있어서 감귤류 꽃 추출물을 10%에서 100%까지 사용한 경우The method of claim 8 wherein the citrus flower extract is used from 10% to 100% 제 8항에 있어서 건조된 꽃잎, 생꽃잎 또는 꽃잎 절편의 상태로 사용한 경우The method of claim 8 used in the form of dried petals, petals or petal fragments.
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KR20180008102A (en) * 2016-07-15 2018-01-24 제주대학교 산학협력단 COSMETIC COMPOSITION INCLUDED SETOKA(((Citrus unshiu × C. sinensis) × C. reticulata) × (C. reticulata × C. sinensis)) EXTRACTION
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