KR20120123869A - 매생이, 파래 및 모자반 추출물을 함유한 피부 진정 및 자극완화 효과를 갖는 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 피부 진정 및 피부자극완화 효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 주요 구성 해조추출물로서 매생이, 파래 및 모자반 추출물을 혼합하여 민감성 피부를 보호하여 피부 진정 효과 및 피부자극완화 효과를 가지는 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

Description

매생이, 파래 및 모자반 추출물을 함유한 피부 진정 및 자극완화 효과를 갖는 화장료 조성물{The cosmetic composition containing that seaweed fulvescens, green algae and gulfweed has effect of skin soothing and abirritation}

본 발명은 피부진정 및 피부자극완화 효과를 가지는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 주요 구성 해조추출물로서 매생이, 파래 및 모자반의 혼합 추출물을 포함하는 피부진정 효과 및 피부자극완화 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

일반적으로 민감성 피부는 피부조직이 정상 이상으로 섬세하고 얇아서 물리적, 화학적인 변화나 생리적인 내부변화, 외부 환경적인 요인에 따라 민감하게 반응하여 가벼운 피부자극에 의해서도 자주 피부병변을 일으키는 피부를 말한다. 이러한 민감성 피부에 의해 생기는 피부병변으로는 습진, 주사형 피부염, 접촉성 피부염 등을 들 수 있으며 그중에서도 가장 대표적인 질환으로 아토피성 피부염을 들 수 있다.

아토피 피부염은 주로 유아기 혹은 소아기에 시작되는 만성적이고 재발성의 염증성 피부질환으로 가려움증과 피부 건조증, 특징적인 습진을 동반한다. 유아기에는 얼굴과 팔다리의 펼쳐진 쪽 부분에 습진으로 시작되지만, 성장하면서 특징적으로 팔이 굽혀지는 부분과 무릎 뒤의 굽혀지는 부위에 습진의 형태로 나타나게 되며, 성장하면서 자연히 호전되는 경향을 보이나 최근에는 환경적인 요인과 스트레스 등으로 인해 성인이 되어 아토피가 처음 발병하는 경우도 급속히 증가하는 추세이다. 어른의 경우 접히는 부위 피부가 두꺼워지는 태선화(lichenification)가 나타나고, 유소아기에 비해 얼굴에 습진이 생기는 경우가 많다. 아토피 피부염은 세계적으로 증가하는 추세이며 유병률이 인구의 20%라는 보고도 있다.

해양생물 중에서 해조류는 일반 농산채소류에 비해 단백질, 지질, 탄수화물 등 일반성분 뿐 아니라 다양한 종류의 필수 미량원소를 풍부하게 함유하고 있으며, 특히 해조류의 알칼리 이온은 체내의 산성 노폐물과 결합하여 배설됨으로써 신진대사 작용을 활발하게 돕는 한편 열악한 환경인 바다 속에서 독특한 방어체계를 가짐으로써 인체에 2차적으로 발생될 수 있는 독성제거에도 크게 기여하여, 콜레스테롤 저하와 중금속 등의 유해물질을 흡착, 배출하는 능력이 뛰어나며, 또한 해조류의 종류에 따라 특이한 생리 활성을 나타내는 성분을 함유하고 있어 건강기능성 식품으로 주목 받고 있다.

그 중 녹조류인 파래(Enteromorpha prolifera)와 매생이(capsosiphon fulvescens)는 조단백질과 필수 아미노산 함량은 다른 해조류에 비하여 높고 Fe나 Se와 같은 무기질과 비타민 A, C 및 오메가 3계열의 지방산도 다량 함유하고 있어서 영양학적으로 우수하다. 모자반은(Sargassum fulvellum) 모자반 속에 속하는 난해성 다년생 갈조 식물류로서 비타민 A, C 등의 함량이 높고, 함유한 다당류 대부분이 알긴산과 laminaran 및 fucoidan 등으로 구성되어 있다.

이에 본 발명자들은, 피부진정 및 피부자극완화에 효과가 있는 해조류 유래 천연물질을 찾고자 한 결과, 본 발명의 매생이, 파래, 모자반 추출물이 피부진정 및 피부자극완화에 효과가 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위한 것으로서, 민감성 피부 및 일반적인 피부에 대해 진정효과 및 피부자극완화 효과를 위한 천연물로서 매생이, 파래, 모자반으로 구성되는 혼합물을 저온 초음파 추출하여 제조하여 민감성 피부에 대해 피부진정 및 자극완화효과가 우수한 화장료를 제공하는 것이다.

하나의 양태로서, 본 발명은 매생이, 파래 및 모자반의 혼합 추출물을 포함하는 피부 진정 효과 및 피부자극완화 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다.

매생이, 파래 및 모자반의 혼합 추출물은 에탄올을 사용하여 추출할 수 있으며 각각 저온 초음파추출법을 이용하여 추출한 용액을 사용하였다.

상기 실시예를 통해 살펴본 바와 같이, 본 발명은 매생이, 파래 및 모자반의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염, 자극완화 및 면역증강용 화장료 조성물에 관한 것으로, 상기 혼합 추출물은 iNOS의 효과적인 저해 효과, 항균, 항산화 활성을 확인할 수 있었다. 따라서, 상기 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 항염, 피부진정 및 자극완화 화장료 조성물로서의 사용이 기대된다.

도 1은 본 발명의 혼합 추출물의 농도에 따른 DPPH 소거능에 의한 항산화 효과 결과를 나타낸 것이다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예 및 실험예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 이에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.

매생이, 파래, 모자반으로 구성되는 혼합추출물의 제조 방법

완전 건조시킨 매생이, 파래, 모자반에 대하여 각각 100g을 생약 분쇄기를 이용하여 10 내지 200 메쉬 크기로 분쇄한 후, 80%(v/v) 에탄올 수용액 500ml를 가하여 초음파 진동에 넣고 초음파 진동을 가하여 세포막내의 것을 포함한 유효성분이 에탄올 속에 추출되게 한 후 상온에서 24시간 냉침 시킨 후, 0.40㎛ 여과지를 이용하여 제균 여과하였다. 여과된 추출물을 45℃에서 감압 농축하여 각각의 농축액을 수득하였다.

본 발명에 따른 혼합추출물을 함유하는 화장료 조성물의 제조

하기 표 1에 나타난 바와 같이 조성 비율로 화장료를 제조하였다.

번호	성분	함량(중량%)
1	매생이, 파래, 모자반으로 구성되는 혼합추출물 (실시예 1)	5
2	사이클로펜타실록산	3
3	피이지-10디메치콘/비닐디메치콘크로스폴리머	1
4	부틸렌글라이콜	10
5	농글리세린	5
6	세라마이드	3
7	판테놀	0.5
8	알란토인	0.3
9	카보머	0.3
10	방부제	미량
11	향료	미량
12	정제수	잔량

상기 표1에 기재된 9, 12번을 일정한 온도에서 균질화 시킨 후 2, 3, 4, 5 및 6번을 일정한 온도에서 서서히 첨가하여 균질화하여 실온이 될 때까지 서서히 식힌다. 그 후, 1, 7, 8, 10 및 11번을 투입하여 분산시켜 안정화하고 실온에서 약 1시간 교반 후 24시간 숙성시켜 본 발명에 따른 화장료를 제조하였다.

(실험예1)

병원성 미생물을 이용한 항균력 효과 시험

실시예 1에 대하여 병원성 미생물에 대한 항균력 효과를 측정하였다.

세균으로서 대장균(Escherichia coli KCTC 2571), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus KCTC 1918), 녹농균(Pseudomonas aeruginosa KCTC 2513)를 각각 Nutrient agar(Difco 사)에, 효모균으로서 칸디다 알비칸스(Candida albicans KCTC 7965), 진균으로서 아스퍼질러스 니게르(Aspergillus niger KCTC 6911)를 각각 Sabouraud dextrose agar(Difco 사)에 배양하여 사용하였다.

페이퍼 디스크(Paper disk)에 기지농도의 추출물 용해액을 묻혀 시험균주가 도포된 고체 한천배지에 올려놓고 배양한 후 디스크 주변의 억제대 (growth inhibition halo)의 크기를 측정하였다. 이때 억제대가 클수록 항균 활성이 강한 것을 나타내며, 얻어진 결과를 하기 표 3에 나타내었다. 대조군으로서는 화장품 방부제로 널리 사용되는 phenonip(Clariant 사)을 사용하였다.

확산법에 의한 혼합 추출물의 억제대

		시료	E. coli	S. aureus	P. aeruginosa	C. albicans	A. niger
실험군		실시예 1의 혼합추출물	17	18	18	15	15
비교군	Positive control	phenonip	23	24	22	18	19
	Negative control	EtOH	0	0	0	0	0

상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 실시예 1의 혼합추출물은 제시한 모든 균주에 대해 강한 활성을 보였다.

(실험예2)

본 발명의 혼합 추출물의 농도에 따른 DPPH 소거능에 의한 항산화 효과

활성 산소에 의한 피부 노화 과정은 지질 과산화, DNA 산화, 멜라닌 생성, 결합조직의 절단 및 비정상적인 교차 결합들을 포함한다. 이들 반응들은 거의 대부분 라디칼 반응으로서 자동산화반응 과정이 포함된다. 생체 내에서 자동산화반응을 차단시키는 역할은 항산화제가 담당하고 있다. 전자를 주는 능력으로서 환원력이 클수록 강한 항산화제가 된다.

항산화제의 환원력을 측정하는 시약으로 1,1-diphenyl-2 picrylhydrazyl radical(DPPH)가 있다. DPPH는 화합물내 질소 중심의 안정화된 구조의 라디칼로 존재한다. 517nm에서 최대 흡수를 나타내며 환원되면 517nm에서 흡수가 없어진다.

본 발명의 혼합 추출물의 환원력의 크기는 라디칼 소거활성(Scavenging activity,

SC50)으로 표시하며 SC50은 DPPH의 농도가 50% 감소하는데 필요한 농도를 나타내며, 도 1은 본 발명에 의해 제조된 혼합 추출물의 DPPH 소거능에 의한 항산화 효과를 나타내는 그래프로서, 이를 더욱 상세하게 설명하면, 혼합 추출물에 대하여 농도별 SC50을 측정하여 나타난 결과를 나타낸 것으로, 추출물의 농도를 각각 0.2, 0.4, 0.8(%, V/V)에서 테스트하였을 때 농도에 비례하게 DPPH 소거능력이 증가하여 항산화 작용이 우수하여 피부 진정효과가 우수함을 알 수 있었다.

(실험예3)

본 발명의 혼합 추출물의 세포독성에 관한 실험

세포 독성 및 세포 생존율을 알아보기 위하여 살아있는 세포의 미토콘드리아 내에존재하는 숙신산탈수소효소(succinate dehydrogenase or mitochondrial dehydrogenase)에 의해서 수용성이고 노란색의 염인 MTT(3-[4,5-dimethylthiazole -2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide)가 수불용성인 파란색의 포르마잔(formazan) 유도체로 환원되는 원리를 이용한 MTT 분석법을 실시하였다.

MTT 분석(assay)은 살아있는 세포의 수를 측정함으로서 세포 증식이나 독성에 많이 사용되는 실험법으로, 생성된 포르마잔(formazan) 유도체는 용해제(보통 dimethylsulfoxide 사용)를 넣고 용해시킨 후 흡광도를 측정하였다. 좀 더 자세히 설명하면, 인간 섬유아세포 세포주(human fibroblasts cell line; ATCC, CRL-2310)를 1x10cells/㎖의 농도로 하여 24 웰(well)에 접종하였다. 배지는 소혈청 10%를 함유한 DMEM(Dubelcco's Modified Eagle Medium, BRL, USA)을 사용하였다. 접종 후 24시간 후 소혈청 2%를 함유한 DMEM으로 교체하고, 시험 시료를 50㎍/㎖의 농도로 10㎕ 첨가 한 후 3일 동안 37℃, 5% CO2 인큐베이터에서 배양하였다. 배양이 끝난 후 상등액을 제거 하고 다시 PBS(phosphate buffered saline) 200㎕씩을 가하여 세척하고 MTT 용액을 웰(well)당 1.0㎖씩 가한 후 4시간 후에 MTT를 제거하고 DMSO를 웰(well)당 1.0㎖씩 가한 후 하룻밤 37℃에서 인큐베이션 후 570nm에서 흡광도를 측정 하였고, 그 실험 결과를 표 3에 나타내었다.

혼합 추출물의 세포독성

	농도(㎍/㎖)	세포 생존율(%)
실시예 1의 혼합 추출물	1	103.2
	10	100.5
	50	101.8

(실험예4)

본 발명의 혼합 추출물의 iNOS 활성 저해에 관한 실험

마우스의 대식세포인 Raw 264.7 세포를 이용하여 인위적으로 유발시킨 염증의 억제 효과를 알아보기 위하여 iNOS(inducible Nitric Oxide Synthase, 유도성 나이트릭 옥사이드 생성 효소)의 활성을 측정하였다. 페놀-레드(phenol-red)가 들어있지 않은 10% FBS-DMEM (Fetal Bovine Serum, 소태아혈청, Dulbecco's Modified Eagle Medium, GIBCO사) 배지에 8 x 105cells/㎖ 세포를 현탁시켜 24웰(well)에 접종하여 부착시켰다. 24시간 후, 시험 시료(실시예 1)를 농도별로 처리하여 18시간 배양한 후 1㎍/㎖의 리포폴리사카라이드(LPS, lipopolysaccharide, Sigma사)를 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 그 후, 상층액을 회수하여 96웰(well)에 100㎕씩 넣고 그리스 시약(Griess reagent, 시그마 사)을 동량 첨가하여 상온에서 10분간 가볍게 흔들어 주어 570nm에서 흡광도를 측정하였다. 소듐 나이트리트를 표준품으로하여 검량선을 작성하고 각 시료를 첨가한 배양액 중의 나이트릭 옥사이드 생성량을 측정하였다. LPS를 처리한 군의 나이트릭옥사이드의 생성량을 100%로 하여 각 시료의 iNOS 생성억제효과(%)를 구하였으며, 결과는 표 4에 나타내었다. 대조구는 배지만을 처리한 군이며, α-bisabolol은 항염 및 자극완화제로 사용되는 물질이다.

시료	농도(㎍/㎖)	억제효과(%)
대조구		0
LPS + α-bisabolol	1	7.5
	10	23.6
	50	55.3
LPS + 실시예 1	1	6.8
	10	24.2
	50	53.2

실험결과, 실시예 1의 혼합추출물은 iNOS의 활성을 농도 의존적으로 저해시킴을 알 수 있다.

Claims (3)

1. 매생이, 파래 및 모자반의 혼합 추출물을 포함하는 화장료 조성물.
2. 제 1항에 있어서, 전체 화장품 조성물에 대해 0.1 내지 20중량%로 함유되는 것을 특징으로 하는, 피부진정 및 자극완화 효과를 가지는 화장료 조성물.
3. 제 1항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 항균, 항산화 및 항염증 화장료 조성물.

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