KR20120115963A - 마 추출물을 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

마 추출물을 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR20120115963A
KR20120115963A KR1020120038175A KR20120038175A KR20120115963A KR 20120115963 A KR20120115963 A KR 20120115963A KR 1020120038175 A KR1020120038175 A KR 1020120038175A KR 20120038175 A KR20120038175 A KR 20120038175A KR 20120115963 A KR20120115963 A KR 20120115963A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
extract
composition
hemp
pulp
hexane
Prior art date
Application number
KR1020120038175A
Other languages
English (en)
Inventor
표석능
권순태
Original Assignee
성균관대학교산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 성균관대학교산학협력단 filed Critical 성균관대학교산학협력단
Publication of KR20120115963A publication Critical patent/KR20120115963A/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A61K31/202—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids having three or more double bonds, e.g. linolenic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/575—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of three or more carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, ergosterol, sitosterol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/894—Dioscoreaceae (Yam family)
    • A61K36/8945—Dioscorea, e.g. yam, Chinese yam or water yam
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/326—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having effect on cardiovascular health
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

본 발명은 마 (Dioscorea batatas Decne) 과육 또는 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물, 상기 조성물을 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 및 마 과육 또는 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 대식세포에 의한 염증 억제용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 마 (Dioscoreabatatas Decne)의 과육 및 과피 추출물은 대동맥 내 지질의 침착 및 병변조직의 발생을 감소시키고, 혈관 내 대식세포에 의한 염증을 현저히 억제시키는 효과를 나타내므로, 인체 내 부작용의 우려가 없는 동맥경화 등의 심혈관계 질환의 예방 및 치료제로서 유용하게 사용할 수 있다.

Description

마 추출물을 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물{Composition for prevention or treatment of cardiovascular disease containing extracts of Dioscorea batatas Decne}
본 발명은 마 (Dioscorea batatas Decne) 과육 또는 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물, 상기 추출물을 유효성분으로 포함하는 대식세포에 의한 염증 억제용 조성물, 상기 추출물을 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 및 상기 추출물로부터 에틸 팔미테이트, 에틸 리놀레이트 또는 베타-시토스테롤을 제조하는 방법에 관한 것이다.
최근 성인병 증가와 더불어 동맥경화, 고지혈증, 심근경색 등의 심혈관계 질환이 크게 증가하고 있다. 대표적인 심혈관계 질환으로서 동맥경화는 지질대사와 관련된 유전적 요인과 식습관, 흡연, 운동부족 등의 환경적 요인에 의하여 동맥이 경화되는 질환으로, 뇌동맥 또는 관상동맥에서 일어나기 쉬우며, 이로 인하여 심장질환, 뇌혈관 질환 등의 심혈관계 질환으로 발전하게 된다. 뇌동맥경화의 경우에는 두통, 현기증, 정신장애 등을 나타내고 뇌연화증의 원인이 되며, 관상동맥경화의 경우에는 심장부에 동통과 부정맥을 일으켜 협심증, 심근경색 등의 원인이 되는 것으로 알려져 있다. 또한, 이로 인해 고혈압, 심장병, 뇌일혈 등이 유발되어, 동맥경화로 인한 질병이 현대 사회에 있어, 특히 50?60대의 남성들에게 가장 큰 사망요인으로 부각되고 있다.
혈관 내벽의 플라그 (plaque) 형성 및 혈관파열은 심근경색 발병의 주요한 요인이며, 동맥경화의 초기 발생에 관한 가설은 혈관벽의 손상에 대한 만성 염증과정으로 제시되고 있다. 이는 유전적 변이, 과산화물, 고혈압, 당뇨, 혈장 호모시스테인 농도 증가 또는/및 미생물 감염 등의 원인에 의하여 혈관 내피세포가 정상적인 항상성을 유지하지 못하는 기능부전 상태가 되는 것이다. 구체적으로, 상기의 원인들로 인하여 혈중 저밀도 지방단백질 (low-density lipoprotein; LDL)이 산화, 당결합, 집적화, 당단백 결합 등을 거쳐 변형-LDL (highly modified-LDL; HM-LDL)로 변화하게 되고, 이들은 혈관 내피세포 및 평활근을 자극하고 손상을 유발한다. 이로 인하여, 내피세포의 혈관세포부착물질-1 (vascular cell adhesion molecule-1; VCAM-1)의 발현 및 염증세포의 염증매개인자 방출이 촉진되면 LDL은 내피세포 아래에 유입 및 축적되고, 축적된 LDL 및 산화된 HM-LDL은 다시 대식세포, T 임파구 등의 면역세포의 유입 및 활성화를 유발하는 과정을 되풀이하여 병변의 염증반응을 촉진시키게 된다. 그 다음, 유입된 대식세포나 임파구로부터 방출된 가수분해효소, 염증매개인자, 성장인자 등의 작용으로 병반은 괴사하게 되고, 괴사된 병소 부위로 단핵구의 유입, 평활근의 이동 및 분화, 섬유성 조직의 형성 등의 반복적인 과정이 이루어진다. 상기 과정을 통해 병변 조직은 HM-LDL을 핵으로 한 괴사조직에 섬유질이 덮인 복잡한 구조의 섬유질 병변으로 발달하게 되며, 발달된 병변 조직으로부터 혈전이 생성되고, 동맥벽의 근육층은 더욱 두꺼워지며 혈관은 점점 좁아지게 되어 심혈관계 질환에 따른 여러 장기의 손상이 야기될 수 있다.
현재, 심혈관계 질환 치료제 중 임상적으로 사용되고 있는 동맥경화 치료제는 대표적으로 스타틴계열의 약물로서 주로 총콜레스테롤 및 저밀도 지방단백질의 생합성을 저해함으로써 혈관에 콜레스테롤이 축적되는 것을 억제하는 효과를 가진다. 그러나, 이러한 약물들은 비용이 비쌀 뿐만 아니라, 당뇨 고위험군에게 선택적인 투여가 필요하며, 최근에는 이러한 스타틴계열 약물이 수면장애, 기억상실, 성적 기능이상, 우울증, 간질성 폐질환 등을 포함한 부작용의 우려가 있다고 알려지고 있다.
따라서, 동맥경화 등의 심혈관계 질환의 치료에 사용할 수 있는 치료제로서,인체에 부작용의 우려가 없는 안전한 천연물 소재의 심혈관계 질환의 치료제 개발이 절실히 요구되고 있다.
이에, 본 발명자들은 인체에 부작용이 없으면서 쉽게 얻을 수 있는 천연물 소재의 심혈관계 질환 치료제를 개발하기 위하여 예의 노력한 결과, 마 (Dioscoreabatatas Decne)의 과육 및 과피 추출물이 대동맥 내 지질의 침착 및 병변조직의 발생을 감소시키고, 혈관 내 대식세포에 의한 염증을 현저히 억제시키는 것을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 마 (Dioscorea batatas Decne) 과육 또는 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 추출물을 유효성분으로 포함하는 대식세포에 의한 염증 억제용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 추출물을 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 추출물로부터 에틸 팔미테이트, 에틸 리놀레이트 또는 베타-시토스테롤을 제조하는 방법을 제공하는 것이다.
상기의 과제를 해결하기 위한 하나의 양태로서, 본 발명은 마(Dioscorea batatas Decne)의 과육 또는 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.
본 발명에서, "예방"이란 조성물의 투여에 의해 심혈관계 질환에 의한 증상을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미하며, "치료"란 조성물의 투여에 의해 심혈관계 질환에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
마과(Dioscoreaceae) 식물은 외떡잎 식물 백합목의 덩굴성 여러해살이풀로서, 열대지방에 많이 자생하고 있으며, 세계적으로 10속 650 여종 정도가 자라고 있고, 한국에는 마(Dioscorea batatas Decne), 참마 (Dioscorea japonica Thunb), 도꼬로마 (Dioscorea tokoro) 등을 비롯하여 12 여종이 있다. 이 중에서 본 발명은 마의 과육 또는 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서, "마(Dioscorea batatas Decne)"는 한국에서 자생하는 외떡잎 식물 백합목 마과의 덩굴성 여러해살이풀로서 한의학에서는 마의 과경을 산약(山藥)으로도 부르고 있다.
마과 식물은 예부터 지사제, 피부미용, 소화성 궤양치료 등의 용도로 사용되어 왔으나, 마과의 식물 중 마가 대식세포에 의한 염증을 억제하며, 혈과 내 지질 침착을 저해하는 활성이 있음은 알려진 바가 없었다.
본 발명자들은 마 과육 및 과피 추출물을 제조하고 이의 유효성분을 분석한 결과, 에틸 팔미테이트(ethyl palmitate), 에틸 리놀레이트(ethyl linoleate), 베타-시토스테롤(β-sitosterol) 등이 포함되었으나, 기존에 도꼬로마 등의 마에 함유되어 있는 활성성분인 디오스게닌(Diosgenin)은 포함되지 않음을 확인하였다(도 1). 또한, 마 과육 및 과피 추출물의 동맥의 지질 침착 억제 효과(도 2), 괴사성 핵 및 섬유화 형성 억제 효과(도 3), 동맥경화 표지인자(혈청 내 총 콜레스테롤, 산화 LDL 콜레스테롤 및 C 반응성 단백) 감소 효과(도 4) 및 대식세포에 의한 염증 억제 효과(도 5) 등을 확인함으로써, 한국에서 자생하는 마의 심혈관계 질환의 예방 또는 치료 용도를 규명하였다. 특히, 본 발명자들은 마 추출물의 심혈관계 질환의 예방 또는 치료 용도를 확인하고자, 마 과육 및 과피 메탄올 추출물에 물을 가한 다음 헥산으로 재추출하여 디오스게닌을 포함하지 않은 마 과육 및 과피 헥산 추출물을 제조하고, 마 과육 및 과피 헥산 추출물이 상기 효과를 나타냄을 확인하였다.
본 발명에서, 상기 마 과육 또는 과피 추출물은 물, C1 내지 C4의 알코올 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 용매로 추출할 수 있다. 수용성 알코올의 경우 알코올의 비율은 0.1 내지 100% 범위이며, 알코올의 경우는 메탄올, 에탄올 또는 부탄올을 사용할 수 있으며, 바람직하게 상기 마 과육 또는 과피 추출물은 메탄올 추출물일 수 있다.
상기 마의 과육 또는 과피 추출물은 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물 및 이들 조정제물 또는 정제물 중 어느 하나 이상을 포함할 수 있다.
상기 마 과육 또는 과피 추출물을 제조하는 방법은 초음파 추출법, 여과법 및 환류추출법 등 당업계의 통상적은 추출방법을 사용할 수 있다.
또한, 상기 마 과육 또는 과피 추출물은 C1 내지 C4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 추출물을 물에 현탁한 후 헥산을 가하여 재추출할 수 있으며, 바람직하게는 마 과육 또는 과피에 메탄올을 가하여 얻은 메탄올 추출물을 물에 현탁한 후 헥산으로 재추출할 수 있다.
본 발명에서, 상기 마 과육 또는 과피 추출물은 혈관 내 괴사성 핵, 섬유화 형성 저해 활성 또는 대식세포에 의한 염증 억제 활성을 나타낼 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서는, 마 과육 또는 과피 추출물의 혈관 내 괴사성 핵 및 섬유화 형성 저해 활성(도 3) 및 대식세포에 의한 염증 억제 활성(도 5)을 확인하였다.
본 발명에서, 상기 심혈관계 질환은 바람직하게 고질혈증, 고혈압, 동맥경화, 관상동맥심장병, 심근경색으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 질환일 수 있으며, 보다 바람직하게는 동맥경화일 수 있다.
한편, 본 발명의 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물은 약제학적 조성물일 수 있으며, 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다.
약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 상기 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 하나 이상의 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용된다. 경구투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테로 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
상기 약제학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가질 수 있다.
상기 본 발명의 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 개체 종류 및 중증도, 연령, 성별, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 그리고 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 조성물은 심혈관계 질환의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로, 수술, 호르몬 치료, 약물 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
다른 하나의 양태로서, 본 발명은 상기 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 약제학적으로 유효한 양으로 심혈관계 질환의 발병 또는 발병가능성이 있는 개체에게 투여하는 단계를 포함하는 심혈관계 질환의 치료방법을 제공한다.
상기 심혈관계 질환은 바람직하게 고질혈증, 고혈압, 동맥경화, 관상동맥심장병, 심근경색으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 질환일 수 있으며, 보다 바람직하게는 동맥경화일 수 있다.
본 발명에서, "개체"란 심혈관계 질환이 이미 발병되었거나 발병될 수 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미한다.
본 발명의 조성물은 기존의 심혈관계 질환의 치료제와 병행하여 투여할 수 있다.
상기 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있으며, 목적하는 바에 따라 복강 내 투여, 정맥 내 투여, 근육 내 투여, 피하 투여, 피 내 투여, 경구 투여, 비 내 투여, 폐 내 투여, 직장 내 투여될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다. 또한, 상기 조성물은 활성 물질이 표적 세포로 이동할 수 있는 임의의 장치에 의해 투여될 수 있다.
또 다른 하나의 양태로서, 마의 과육 또는 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 대식세포에 의한 염증 억제용 조성물을 제공한다.
바람직하게, 상기 조성물은 고질혈증, 고혈압, 동맥경화, 관상동맥심장병, 심근경색으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 심혈관계 질환의 예방 또는 치료를 위해 사용될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서는, 마 과육 또는 과피 추출물이 대식세포에 의한 염증을 억제하는 활성을 가지고 있으며(도 5), 이의 세포 내 작용기전으로 마 과육 또는 과피 추출물이 iNOS의 발현량을 감소시키고, MAPK 인산화를 억제시킴을 확인하였다(도 6 및 7). 또한, 마 과육 또는 과피 추출물이 맥관평활근 세포에서 세포부착분자의 발현을 억제하며(도 10), 이에 따라 혈관 내 대식세포의 부착이 억제될 수 있음을 확인하였다(도 11).
또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 마의 과육 또는 과피 추출물을 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다. 즉, 본 발명의 마 과육 또는 과피 추출물을 포함하는 조성물은 심혈관계 질환의 예방 또는 개선을 목적으로 식품에 첨가될 수 있다.
상기 심혈관계 질환은 바람직하게 고질혈증, 고혈압, 동맥경화, 관상동맥심장병, 심근경색으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 질환일 수 있으며, 보다 바람직하게는 동맥경화일 수 있다.
본 발명의 조성물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
또 다른 하나의 양태로서, 본 발명은 마의 과육 또는 과피를 용매로 추출하는 단계를 포함하는 에틸 팔미테이트, 에틸 리놀레이트 또는 베타-시토스테롤을 제조하는 방법을 제공한다.
구체적으로, 본 발명의 마의 과육 또는 과피 추출물로부터 에틸 팔미테이트, 에틸 리놀레이트 또는 베타-시토스테롤을 제조하는 방법은 (ⅰ) 마의 과육 또는 과피를 물, C1 내지 C4의 알코올 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 용매로 추출하여 1차 추출물을 수득하는 단계; (ⅱ) 상기 1차 추출물을 헥산으로 재추출하여 2차 추출물을 수득하는 단계; 및, (ⅲ) 상기 2차 추출물을 클로로포름으로 재추출하여 에틸 팔미테이트(ethyl palmitate), 에틸 리놀레이트(ethyl linoleate) 또는 베타-시토스테롤(β-sitosterol)을 수득하는 단계를 포함한다.
본 발명자들은 마의 과육 또는 과피 추출물이 공통적으로 에틸 팔미테이트(ethyl palmitate), 에틸 리놀레이트(ethyl linoleate) 또는 베타-시토스테롤(β-sitosterol)을 포함함을 확인하고, 상기 추출물로부터 상기 에틸 팔미테이트, 에틸 리놀레이트 또는 베타-시토스테롤을 제조하는 방법을 개발하였다.
즉, 마의 과육 또는 과피 추출물을 물, C1 내지 C4의 알코올 및 이들의 혼합용매 바람직하게는 메탄올을 사용하여 1차 추출물을 수득하고, 상기 1차 추출물을 다시 헥산으로 재추출하여 2차 추출물을 수득한 다음, 상기 2차 추출물을 클로로포름으로 추출하여 최종 추출물을 수득하고, 이를 대상으로 GC/MS 분석을 수행한 결과, 에틸 팔미테이트, 에틸 리놀레이트 및 베타-시토스테롤로 구성됨을 확인하였다(표 2).
따라서, 상술한 3단계의 추출방법을 이용하여 마의 과육 또는 과피 추출물로부터 에틸 팔미테이트, 에틸 리놀레이트 및 베타-시토스테롤을 제조할 수 있음을 확인하였다.
본 발명의 마의 과육 및 과피 추출물은 대동맥 내 지질의 침착 및 병변조직의 발생을 감소시키고, 혈관 내 대식세포에 의한 염증을 현저히 억제시키는 효과를 나타내므로, 인체 내 부작용의 우려가 없는 동맥경화 등의 심혈관계 질환의 예방 및 치료제로서 유용하게 사용할 수 있다.
도 1은 본 발명의 마의 과육 및 과피 추출물을 대상으로 GC/MS 분석을 수행한 결과를 나타내는 그림이다.
도 2a (11주) 및 도 2b (21주)는 동맥경화 유발된 동물 모델에서 마 과육 헥산 추출물 및 마 과피 헥산 추출물의 동맥의 지질 침착 억제 효과를 나타내는 사진이다.
도 3a (11주) 및 도 3b (21주)는 동맥경화 유발된 동물 모델에서 마 과육 헥산 추출물 및 마 과피 헥산 추출물의 혈관 내 괴사성 핵 (necrotic core) 및 섬유화 (fibrosis) 형성 억제 효과를 나타내는 사진이다.
도 4a는 동맥경화 유발된 동물 모델에서 마 과육 헥산 추출물 및 마 과피 헥산 추출물의 콜레스테롤 감소 효과를 보이는 그래프이다.
도 4b는 동맥경화 유발된 동물 모델에서 마 과육 헥산 추출물 및 마 과피 헥산 추출물의 산화 LDL 콜레스테롤 감소 효과를 보이는 그래프이다.
도 4c는 동맥경화 유발된 동물 모델에서 마 과육 헥산 추출물 및 마 과피 헥산 추출물의 산화 C 반응성 단백 감소 효과를 보이는 그래프이다.
도 5a 및 도 5b는 마 과육 헥산 추출물 (5a) 및 마 과피 헥산 추출물 (5b)의 대식세포에 의한 염증 억제 효과를 보이는 그래프이다.
도 6a 및 도 6b는 마 과육 헥산 추출물 (6a) 및 마 과피 헥산 추출물 (6b)의 iNOS 발현 억제 효과를 보이는 그래프이다.
도 7a 및 도 7b는 마 과육 헥산 추출물 (7a) 및 마 과피 헥산 추출물 (7b)의 MAPK 인산화 억제 효과를 보이는 그래프이다.
도 8a 및 도 8b는 마 과육 헥산 추출물 (8a) 및 마 과피 헥산 추출물 (8b)의 NF-κB 활성 억제 효과를 보이는 그래프이다.
도 9a 및 도 9b는 마 과육 헥산 추출물 (9a) 및 마 과피 헥산 추출물 (9b)의 세포 내 NF-κB 활성 억제 효과를 보이는 그래프이다.
도 10a 및 도 10b는 마 과육 헥산 추출물 (10a) 및 마 과피 헥산 추출물 (10b)이 맥관평활근세포에서 세포부착분자의 발현을 억제시키는 결과를 나타내는 사진이다.
도 11은 마의 과육 및 과피 헥산 추출물이 TNF-α에 의해 유도된 단핵구의 맥관평활근세포 부착을 억제하는 것을 보이는 그래프 및 사진이다.
도 12는 마의 과육 및 과피 헥산 추출물이 MAPK 신호기전의 인산화를 조절할 수 있음을 보이는 사진이다.
도 13은 마의 과육 및 과피 헥산 추출물이 맥관평활근세포 내 NF-κB의 활성을 억제할 수 있음을 보이는 그래프이다.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 마 과육 및 과피 추출물의 제조 및 성분분석
실시예 1-1: 마 과육 및 과피 추출물의 제조
먼저, 마 과육 추출물을 하기와 같이 제조하였다:
마를 수세하고, 과피를 제거한 과육 4480 g을 건조하였다. 740 g의 과육 건조물에 메탄올 3 L를 넣어 7일간 환류추출한 후, 총 여과액을 감압 하에서 농축하여 메탄올 추출물 51.71 g을 얻었다. 이 메탄올 추출물을 물에 부유시키고, 헥산 1.5 L, 클로로포름 1.5 L, 에틸아세테이트 1.5 L 및 부탄올 1.5 L를 넣어 분리층을 형성하여 이것으로부터 각각 헥산 추출물 2.59 g, 클로로포름 추출물 0.40 g, 에틸아세테이트 추출물 0.65 g, 부탄올 추출물 3.78 g 및 물 추출물 43.1 g을 얻었다. 상기 추출물 가운데 헥산 추출물의 항동맥경화 효과에 대해서 실험하였다.
다음으로 마 과피 추출물을 하기와 같이 제조하였다:
마 과피 1160 g을 건조한 후, 160 g의 과피 건조물에 메탄올 3 L를 넣어 7일간 환류추출한 후, 총 여과액을 감압 하에서 농축하여 메탄올 추출물 21.14 g을 얻었다. 이 메탄올 추출물을 물에 부유시키고, 헥산 1.5 L, 클로로포름 1.5 L, 에틸아세테이트 1.5 L 및 부탄올 1.5 L를 넣어 분리층을 형성하여 이것으로부터 각각 헥산 추출물 0.67 g, 클로로포름 추출물 0.18 g, 에틸아세테이트 추출물 0.20 g, 부탄올 추출물 0.84 g 및 물 추출물 19.09 g을 얻었다. 상기 추출물 가운데 헥산 추출물의 항동맥경화 효과에 대해서 실험하였다.
실시예 1-2: 마 과육 및 과피 추출물의 성분분석
상기 실시예 1-1에서 수득한 마의 과육 및 과피 추출물 50mg을 클로로포름으로 10배 희석 후 0.2㎛ PTFF 필터에 여과하여 GC/MS 분석기기(Trace GC Ultra, Thermo electron corporation)를 이용한 GC/MS 분석을 수행하였다(표 1 및 도 1).
GC/MS 분석 조건
Detector DSQ (Thermo electron corporation)
Autosampler TriPus Autosampler (Thermo electron corporation)
Column THERMO TR-5MS (30m×0.25mm×0.25㎛)
Oven temp. Rate (℃/min) Temp Hold time(min)
Inital - 150 5
Ramp 1 10 250 10
Ramp 2 10 320 10
Inlet temp. 320℃
Split ratio 30:1
MS transfer line temp. 280℃
flow rate 0.9 ml/min
Full scan 50 ~ 650 m/z
도 1은 본 발명의 마의 과육 및 과피 추출물을 대상으로 GC/MS 분석을 수행한 결과를 나타내는 그림이다. 도 1에서 보듯이, 마의 과육 추출물 및 마의 과피 추출물의 최다 성분 peak는 retention time 순서 별로 13.4분에 에틸 팔미테이트(ethyl palmitate), 15.2분에 에틸 리놀레이트(ethyl linoleate), 33.5분에 베타-시토스테롤(β-sitosterol)이 각각 관찰되었다.
아울러, 상기 각 성분의 상대함량을 측정하였다(표 2). 이때, 마 과육 추출물의 농도는 11,170ppm 이고, 마 과피 추출물의 농도는 11,490ppm 이었다.
마 과육 및 과피 추출물의 주성분 함량비
No. RT 화합물명 마 과육 마 과피
면적값 함량비(%) 면적값 함량비(%)
1
2
3		 13.4
15.1
33.47		 Ethyl palmitate
Ethyl linoleate
β-sitosterol		 38649412
63041419
44249546		 26.48
43.20
30.32 		34958798
48894107
44809944		 27.17
38.00
34.83
계 145940377 100 128662849 100
상기 표 2에서 보듯이, 에틸 팔미테이트가 마의 과육 추출물에서 43.20%를 차지하고, 마의 과피 추출물에서 38.00%를 차지하여 상대적으로 가장 높은 수준을 나타내었으며, 베타-시토스테롤은 과육 추출물에서 30.32%를 차지하고, 마의 과피 추출물에서 34.83%를 차지하여 다음으로 높았으며, 에틸 리놀레이트는 과육 추출물에서 26.48%를 차지하고, 마의 과피 추출물에서 27.17%를 차지하여 상대적으로 가장 낮은 수준을 나타내었다. 아울러, 마의 주요 활성물질로 알려진 디오스게닌(diosgenin)은 마의 과육 추출물 및 과피 추출물 어디에서도 검출되지 않았다.
한편, 마의 주성분 중 베타-시토스테롤을 정량하기 위하여, 베타-시토스테롤 표준물질을 이용하여 검량선을 작성한 다음, 마 과육 및 과피 추출물에 포함된 베타-시토스테롤 함량을 산출하였다(표 3). 이때, 함량은 헥산 추출물 100g 당 함량으로 산출하였다.
마의 추출물에 포함된 베타-시토스테롤의 함량
추출물 베타-시토스테롤(g/100g)
마 과육 추출물
마 과피 추출물		 6.52
6.66
실시예 2: 마 추출물의 동맥의 지질 침착 억제 효과 확인
실험동물은 동맥경화 질환모델로 아포지단백질 E(Apolipoprotein E, ApoE) 유전자를 결손시킨 4주령의 생쥐를 일본 SLC사로부터 공급받아 일주일 동안 기본사료(AIN-76A)와 물을 자유롭게 공급하여 순화하였다. 순화 후, 고지방 사료 (Dyets#101556)를 공급하여 동맥경화를 유발시킨 후, 상기 실시예 1에서 제조한 마 과육 헥산 추출물 및 마 과피 헥산 추출물을 200 mg/kg/day 용량으로 주 3회 경구로 투여하였다. 11주 및 21주 동안 마 추출물을 투여한 생쥐를 일정 기간 후에 부검하여 심장 및 동맥을 적출한 다음 급속 냉각으로 고정하여 10 μm 두께의 절편을 만들어 지방을 특이적으로 염색할 수 있는 염색법 (oil-red-o)을 이용하여 대동맥판 부위에서 혈관에 생성된 동맥경화 병변 상태를 관찰하였다. 동일한 실험조건에서 동맥경화의 진행 정도를 비교하기 위하여 유전자를 결손시키지 않은 정상생쥐 및 유전자 결손 생쥐를 동일 고지방 사료를 공급하여 동일한 시기에 부검하여 비교하였다.
그 결과, 도 2a 및 도 2b에서 알 수 있듯이 ApoE 유전자가 결손된 생쥐는 정상 생쥐에 비해 11주 (도 2a) 및 21주 (도 2b) 후에 동맥 혈관 내 지질 침착이 진행되었으며, 마 과육 헥산 추출물 및 마 과피 헥산 추출물을 먹인 쥐에서 지질 침착이 감소되었음을 확인하였다(도 2a 및 2b). 이러한 결과는 마 추출물질이 동맥경화의 진행을 억제하는 효과가 있음을 나타낸다.
< 실시예 3> 마 추출물의 괴사성 핵 및 섬유화 형성 억제 효과 확인
상기 실시예 2에서 만든 심장 및 동맥 절편을 면역염색법 (immunostaining, CD68)을 이용해 대식세포 (macrophage)를 특이적으로 염색하여 혈관 내 대식세포의 침착 정도를 측정하였다. 그 결과, 11주 (도 3a) 및 21주 (도 3b) 동안 마의 과육 및 과피 헥산 추출물을 먹인 생쥐의 혈관 내에 괴사성 핵 (necrotic core) 및 섬유화 (fibrosis) 형성이 감소하였음을 확인할 수 있었다(도 3a 및 3b). 이러한 결과는 마 추출물질이 동맥 혈관 내 염증 진행을 억제할 수 있음을 나타낸다.
< 실시예 4> 마 추출물의 동맥경화 표지인자 감소 효과 확인
상기 실시예 2의 동맥경화를 유발시킨 동물에 마 과육 및 과피 헥산 추출물을 200 mg/kg/day 용량으로 주 3회 경구 투여한 다음 혈액을 채취하여 혈청 중 동맥경화 표지인자인 총 콜레스테롤 (도 4a), 산화 LDL 콜레스테롤 (ox-LDL) (도 4b) 및 C 반응성 단백 (c-reactive protein, CRP) (도 4c)을 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) 방법에 의해 측정하였다. ELISA는 항체 또는 항원에 효소를 표지하고 효소활성을 지표로 하여 항원항체반응의 강도를 확인하고 이를 통해 항원 또는 항체를 정량적으로 측정하는 방법이다.
그 결과, 도 4a, 도 4b 및 도 4c로부터 알 수 있듯이 마의 과육 및 과피 헥산 추출물을 먹인 생쥐는 혈청 중 동맥경화 표지인자가 감소하는 결과를 나타냈으며, 이로부터 마 추출물질이 동맥경화를 억제하는 효과가 있음을 확인할 수 있었다(도 4a, 4b 및 4c).
< 실시예 5> 마 추출물의 대식세포에 의한 염증 억제 효과 확인
상기 실시예에서 확인한 바와 같이 마의 과육 및 과피 헥산 추출물이 생쥐의 동맥경화를 억제시키는 이유를 알아보고자, 대식세포에 의한 염증 억제 효과를 확인하기 위하여 대식세포주 (Raw264.7)에 마 과육 헥산 추출물 (도 5a) 및 과피 헥산 추출물 (도 5b)을 각각 1, 10, 100 ㎍/㎖의 농도로 처리하여 세포가 염증의 상태일 때 분비하는 물질인 산화질소 (nitric oxide, NO)를 ELISA 방법을 이용해 측정하였다. 구체적으로, 대식세포를 96 웰 플레이트 (96-well plate)에 24시간 도안 배양한 후 배양액을 제거하고 마 과육 및 과피 추출물질을 농도별로 첨가하여 1시간 동안 배양하였다. 다시 배양액을 제거하고, 대식세포에 염증을 유발시키기 위하여 LPS와 IFN-γ를 함께 처리하여 24시간 동안 배양한 후 상등액을 취하여 Griess 시약을 가한 다음 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 도 5a와 도 5b에서 알 수 있듯이 마 과육 및 과피 헥산 추출물은 LPS 및 IFN-γ 처리에 의한 산화질소 생성을 억제하므로, 마 추출물질이 대식세포의 염증을 억제하는 효과가 있음을 확인할 수 있었다(도 5a 및 5b).
< 실시예 6> 마 추출물의 iNOS 발현 억제 효과 확인
상기 실시예 5에서 확인한 마 과육 및 과피 추출물이 대식세포의 산화질소 (NO) 생성량을 억제시키는 이유를 알아보고자, 세포 내 작용기전을 확인하기 위하여 세포 내 NO를 생성하는 효소인 유도형 일산화질소합성효소 (inducible nitric oxide synthase, iNOS)의 발현량을 확인하였다. 구체적으로, 상기 실시예 5에서 설명한 방법과 같이 배양한 대식세포의 단백질을 추출하여 iNOS 항체를 이용하여 검출하는 방법 (Western Blot)을 사용하여 그 결과를 도 5a 및 도 5b에 도시하였다. 실험이 같은 동량의 단백질을 추출하여 시행하였음을 나타내기 위하여 α-튜블린의 발현을 표시하였다. 또한, iNOS의 mRNA 발현량을 확인하기 위하여 PCR 방법을 이용하였다. 실험이 동량의 RNA를 사용하여 시행하였음을 나타내기 위하여 GAPDH 발현량을 표시하였다.
그 결과, 마 과육 헥산 추출물 (H1, 도 6a) 및 과피 헥산 추출물 (H2, 도 6b)에 의해서 iNOS의 발현이 억제되었다(도 6a 및 6b). 따라서, 면역세포의 염증반응 시 생성되는 산화질소가 마 추출물질에 의해 억제되는 효과가 있음을 확인할 수 있었다.
< 실시예 7> 마 추출물의 MAPK 의 인산화 억제 효과 확인
유사분열물질-활성화 단백질인산화효소 (mitogen-activated protein kinases, MAPK)는 세포 외부로부터 받은 자극을 세포 내 핵까지 전달하는 대표적인 신호전달경로로, 대식세포의 염증신호를 MAPK의 인산화 과정을 통해 세포 내 핵까지 전달하게 된다. 마의 과육 및 과피 헥산 추출물이 대식세포의 염증을 억제하는 이유를 알아보고자, 마 추출물이 세포 내 신호전달 경로인 MAPK 인산화를 조절하는지 여부를 확인하였다. 대표적인 MAPK로 p-ERK1/2, p-p38, p-JNK/SAPK 항체를 이용하여 검출하는 웨스턴 블랏 방법을 이용하여 인산화된 ERK1/2, p38 및 JNK/SAPK의 발현량을 측정하여 도 7a (마의 과육) 및 도 7b (마의 과피)에 도시하였다.
그 결과, 마의 과육 및 과피 헥산 추출물은 대식세포의 염증 신호기전인 MAPK의 인산화를 억제하는 효과를 가지고 있음을 확인하였다(도 7a 및 7b).
< 실시예 8> 마 추출물의 NF -κB의 활성화 억제 효과 확인
도 8a 및 도 8b는 마의 과육 및 과피 헥산 추출물이 대식세포의 염증과 관련된 유전자를 조절하는 인자인 nuclear factor-κB (NF-κB)의 활성화를 조절하는지 보여주는 결과이다. 도에 표시된 p65는 NF-κB를 구성하는 단백질로, 마의 과육 및 과피 헥산 추출물에 의해서 세포 및 핵에 존재하는 p65의 활성이 억제되는 것을 확인할 수 있었다(도 8a 및 8b).
< 실시예 9> 마 추출물의 NF -κB 프로모터의 발현 억제 효과 확인
상기 실시예 8의 결과를 뒷받침하기 위해 마의 과육 및 과피 헥산 추출물이 세포 내 NF-κB의 활성을 억제하는지 확인하기 위하여 루시퍼라제 분석 (luciferase assay) 방법을 이용하였다. 구체적으로, 루시퍼라제 분석은 대식세포 내에서 염증신호에 의한 유전자 조절, 즉 신호전달 인자의 프로모터 (promoter)의 수준을 측정하는 방법으로 프로모터 뒤에 루시퍼라제 효소가 표지된 벡터를 세포 내로 도입시켜 프로모터 발현량을 형광으로 측정하는 방법이다.
그 결과, 도 9a 및 도 9b에 나타난 바와 같이, 마의 과육 및 과피 헥산 추출물이 대식세포의 LPS 및 IFN-γ에 의해 유도된 NF-κB 프로모터의 발현을 억제하는 것을 확인할 수 있었다(도 9a 및 9b).
< 실시예 10> 마 추출물의 세포부착분자 발현 억제 효과 확인
마우스의 맥관평활근세포인 MOVAS-1 세포주에 마의 과육 및 과피 헥산 추출물을 농도별로 2시간 전처리한 후, 단핵구 부착을 유발시키기 위해 TNF-α를 10 ng/㎖의 농도로 처리하여 8시간 동안 배양한 후 RT-PCR 및 웨스턴 블랏 방법을 이용하여 세포부착분자의 발현량을 측정하였다. 세포부착분자 (cell adhesion molecules; CAMs)는 고혈압과 동맥경화 같은 다양한 혈관 질환에 관여하며, 세포의 표면에 발현하여 다른 세포나 세포외 기질에 부착시키는 역할을 한다. 그 중 VCAM-1 (vascular cell adesion molecule-1)은 막투과성 당단백질로 급성 또는 만성 염증상태나 질병의 유발 과정에서 IL-1β, IFN-γ, 그리고 TNF-α와 같은 염증성 사이토카인 (cytokine)에 의해 조절되며, 초기 동맥경화가 유발된 곳의 내피세포에서 발현이 증가된다.
그 결과, 도 10a 및 도 10b에 나타난 바와 같이, 마의 과육 및 과피 헥산 추출물은 맥관평활근 세포에서 세포부착분자의 발현을 억제하여 혈관 내 섬유반 생성 등의 혈관 막힘을 억제할 수 있는 효과가 있음을 확인하였다(도 10a 및 10b).
< 실시예 11> 마 추출물에 의한 혈관 내 대식세포의 부착 억제 효과 확인
96 웰 플레이트에 맥관평활근 세포주 MOVAS-1을 배양한 후 마의 과육 및 과피 헥산 추출물과 TNF-α (10 ng/㎖)를 처리한 후 배지를 제거하고, 인체 단핵구 세포주인 THP-1 세포를 분주하였다. 37℃, 5% CO2 조건에서 1시간 동안 배양한 후 따뜻한 배지로 두 번 수세하였다. 형광현미경으로 맥관평활근세포에 부착된 THP-1의 수를 세고, 용해 버퍼(lysis buffer)를 이용하여 세포를 용해한 다음 광도계를 이용하여 값을 측정하였다.
그 결과, 도 11에 나타난 바와 같이, 마의 과육 및 과피 헥산 추출물에 의해 단핵구의 맥관평활근세포 부착이 억제되었음을 확인할 수 있었다(도 11). 이러한 결과는 맥관평활근세포에서 VCAM-1의 발현 억제가 단핵구의 이동 및 부착에도 영향을 미치며, 이는 마 추출물질이 혈관 내 대식세포의 부착을 억제할 수 있는 효능이 있음을 나타낸다.
< 실시예 12> 마 추출물의 MAPK 신호기전의 인산화 조절 효과 확인
마의 과육 및 과피 헥산 추출물이 맥관평활근세포의 세포부착분자의 발현을 억제하는 이유를 알아보고자, 마 추출물이 세포 내 신호전달 경로인 유사분열물질-활성화 단백질인산화효소 (mitogen-activated protein kinases, MAPK)의 인산화를 조절하는지 확인하였다. 대표적인 MAPK로 p-ERK1/2, p-p38, p-JNK/SAPK 항체를 이용하여 검출하는 웨스턴 블랏 방법을 이용하여 인산화된 ERK1/2, p38 및 JNK/SAPK의 발현량을 측정하였다.
그 결과, 도 12에서 알 수 있듯이 마의 과육 및 과피 헥산 추출물은 맥관평활근세포의 MAPK 신호기전의 인산화를 조절함으로써 부착분자의 발현을 억제하는 것을 확인하였다(도 12).
실시예 13: 마 추출물의 맥관평활근세포 내 NF -κB의 활성 억제 효과 확인
상기 실시예 10 내지 12의 결과를 뒷받침하기 위해 루시퍼라제 분석 방법을 이용하여 마의 과육 및 과피 헥산 추출물이 맥관평활근세포 내 NF-κB의 활성을 억제하는지 확인하였다.
그 결과, 도 13에 나타난 바와 같이, 마의 과육 및 과피 헥산 추출물은 맥관평활근세포의 TNF-α에 의해 유도된 NF-κB 프로모터의 발현을 억제하였음을 확인하였다(도 13). 이러한 결과는 마 추출물질이 세포 내 신호전달을 조절함으로써 동맥경화를 억제하는 효과가 있음을 나타낸다.

Claims (11)

  1. 마(Dioscorea batatas Decne)의 과육 또는 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 알코올 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 용매로 추출한 것인 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 C1 내지 C4의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출하고, 헥산으로 재추출한 것인 조성물.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 추출물은 메탄올로 추출하고, 헥산으로 재추출한 것인 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 에틸 팔미테이트(ethyl palmitate), 에틸 리놀레이트(ethyl linoleate), 베타-시토스테롤(β-sitosterol) 또는 이들의 조합을 포함하는 것인 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 추출물은 혈관 내 괴사성 핵 (necrotic core), 섬유화 (fibrosis) 형성 저해 활성 또는 대식세포에 의한 염증 억제 활성을 갖는 것인 조성물.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 심혈관계 질환은 고질혈증, 고혈압, 동맥경화, 관상동맥심장병, 심근경색으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 질환인 것인 조성물.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
  9. 마(Dioscorea batatas Decne) 과육 또는 과피 추출물을 유효성분으로 포함하는 대식세포에 의한 염증 억제용 조성물.
  10. 마(Dioscorea batatas Decne)의 과육 또는 과피를 용매로 추출하는 단계를 포함하는 에틸 팔미테이트, 에틸 리놀레이트 또는 베타-시토스테롤을 제조하는 방법.
  11. 제10항에 있어서,
    (ⅰ) 마의 과육 또는 과피를 물, C1 내지 C4의 알코올 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 용매로 추출하여 1차 추출물을 수득하는 단계; (ⅱ) 상기 1차 추출물을 헥산으로 재추출하여 2차 추출물을 수득하는 단계; 및 (ⅲ) 상기 2차 추출물을 클로로포름으로 재추출하여 에틸 팔미테이트(ethyl palmitate), 에틸 리놀레이트(ethyl linoleate) 또는 베타-시토스테롤(β-sitosterol)을 수득하는 단계에 의하여 수행되는 것인 방법.
KR1020120038175A 2011-04-11 2012-04-12 마 추출물을 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물 KR20120115963A (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20110033503 2011-04-11
KR1020110033503 2011-04-11

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR20120115963A true KR20120115963A (ko) 2012-10-19

Family

ID=47284470

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020120038175A KR20120115963A (ko) 2011-04-11 2012-04-12 마 추출물을 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR20120115963A (ko)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104116797A (zh) * 2014-08-19 2014-10-29 黑龙江江恒医药科技有限公司 一种精制冠心片及其制备方法
CN105055845A (zh) * 2015-09-17 2015-11-18 南京正亮医药科技有限公司 一种用于治疗心脏供血不足的药物制剂
CN105168854A (zh) * 2015-09-22 2015-12-23 禤燕华 一种治疗冠心病的中药组合物及其制备方法

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104116797A (zh) * 2014-08-19 2014-10-29 黑龙江江恒医药科技有限公司 一种精制冠心片及其制备方法
CN105055845A (zh) * 2015-09-17 2015-11-18 南京正亮医药科技有限公司 一种用于治疗心脏供血不足的药物制剂
CN105168854A (zh) * 2015-09-22 2015-12-23 禤燕华 一种治疗冠心病的中药组合物及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102579460B (zh) 用增强代谢活性的丹参衍生物治疗肥胖和代谢综合症
KR101793153B1 (ko) 검정콩잎 추출물 및 이로부터 분리한 플라보놀배당체를 유효성분으로 함유하는 대사증후군의 예방 또는 치료용, 또는 항산화용 조성물
AU2015384339B2 (en) Composition for preventing or treating valve calcification, containing DPP-4 inhibitor
KR101158856B1 (ko) 콩잎 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 비만, 고지혈증, 동맥경화, 지방간, 당뇨 또는 대사증후군의 예방 또는 치료용 조성물
US8652542B2 (en) Composition for preventing or treating arteriosclerosis
JPWO2010134373A1 (ja) メタボリックシンドロームの予防剤及び／又は治療剤
JP2019513382A (ja) 益智抽出物を有効成分として含む高尿酸血症または高尿酸血症関連の代謝障害の予防、改善または治療のための組成物
JP2012051940A (ja) ビワ葉抽出物を含有する飲食品及び医薬品
US10543241B2 (en) Methods and materials for reducing multiple risk factors associated with the metabolic syndrome
KR102534210B1 (ko) 노봉방 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
WO2016182161A1 (ko) 복분자 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 pcsk9 유전자의 발현 억제를 통한 저밀도 지단백 수용체 증가용 조성물 및 이의 용도
KR20120115963A (ko) 마 추출물을 포함하는 심혈관계 질환의 예방 또는 치료용 조성물
US20070110833A1 (en) Composition comprising the alcohol compound isolated from the extract of cucurbitaceae family plant having anti-adipogenic and anti-obesity activity
KR101820096B1 (ko) 콩 발아배아 추출물을 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
KR20130081929A (ko) 디에콜 화합물을 유효성분으로 함유하는 인슐린 저항성 또는 고인슐린혈증 예방 및 치료용 조성물
KR20150012926A (ko) 구절초 추출물을 포함하는 항비만 조성물
KR101669717B1 (ko) 캡시코시드 g를 포함하는 항비만 조성물
KR20200056367A (ko) 유파틸린을 유효성분으로 포함하는 비만 예방, 치료, 또는 개선용 조성물
KR100981350B1 (ko) 스코폴린 및 그의 유도체의 신규 용도
KR101794080B1 (ko) 삼백초, 황금 등의 혼합 추출물을 이용한 폐암에 대한 항암제 조성물
KR102445820B1 (ko) 미아베모자반 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
US20240189226A1 (en) Pharmaceutical composition for preventing or treating obesity or non-alcoholic fatty liver containing polygalin c as active ingredient
KR101557557B1 (ko) 엔드리케리아 아노말라 추출물을 포함하는 항비만 조성물
KR101289895B1 (ko) 비만 및 지방간 개선제 조성물
KR20140019277A (ko) Ｔｒａｉｌ을 포함하는 대사성 질환의 예방 또는 치료용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
WITN Withdrawal due to no request for examination