KR20090093363A - Cosmetic composition comprising the extract of Polygonum multiflorum showing skin whitening and anti-aging activity - Google Patents
Cosmetic composition comprising the extract of Polygonum multiflorum showing skin whitening and anti-aging activityInfo
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Abstract
Description
본 발명은 적하수오 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백 및 피부 노화방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a skin whitening and skin anti-aging cosmetic composition containing a drop sewage extract as an active ingredient.
[문헌 1] 박수남 외, 식물유래 성분의 미백화장품(기능성화장품)에의 응용, 서울산업대학교 논문집, 52, pp205-220, 2001[Summary 1] Park, Soo Nam et al., Application of plant-derived components to whitening cosmetics (functional cosmetics), Seoul National University of Technology, 52, pp205-220, 2001
[문헌 2] Tong X et al., Mol . Cell Biol ., 27(1), pp283-96, 20072 Tong X et al., Mol . Cell Biol . , 27 (1), pp283-96, 2007
[문헌 3] Romero G.C. et al., J. Clin . Invest ., 99(4), pp635-642, 19973 Romero GC et al., J. Clin . Invest . , 99 (4), pp635-642, 1997
[문헌 4] 손애량, 이승자, 한국미용학회지, 6(1), pp239-254, 2000[Document 4] Son Ae-Ryang, Seung-Jae Lee, Journal of Korean Aesthetic Society, 6 (1), pp239-254, 2000
[문헌 5] 山孝一 良 and hearing, V. J.. メラニソ産生の 制御因子. Fragnance Journal, 6, pp24-28, 1990[Reference 5] 山 孝 一 良 and hearing, VJ.メ ラ ニ ソ 産生 の 制 御 因子. Fragnance Journal , 6, pp24-28, 1990
[문헌 6] Jackson I.J. et al., EMBO J., 11, pp519, 1992Jackson IJ et al., EMBO J. , 11, pp519, 1992
[문헌 7] Lee J. et al., Biochem . Pharmacol ., 74(7), pp960-968, 2007Lee J. et al., Biochem . Pharmacol . , 74 (7), pp 960-968, 2007
[문헌 8] Huang SC. et al., Biochem . Pharmacol ., 69(2), pp221-32, 2004Document 8 Huang SC. et al., Biochem . Pharmacol ., 69 (2), pp 221-32, 2004
[문헌 9] JimC. et al., J. Cell Sci ., 114(Pt 12), pp2335-44, 2004[Reference 9] JimC. et al., J. Cell Sci . , 114 (Pt 12), pp2335-44, 2004
[문헌 10] 일본특허공개평 4-9320호[Patent 10] Japanese Patent Laid-Open No. 4-9320
[문헌 11] 일본특허공개평 6-192062호[Document 11] Japanese Patent Laid-Open No. 6-192062
[문헌 12] 일본특허공개평 56-7710호[Patent Document 12] Japanese Patent Laid-Open No. 56-7710
[문헌 13] 일본특허공개평 4-9315호[Patent 13] Japanese Patent Laid-Open No. 4-9315
[문헌 14] 이상희, 麻黃 및 麻黃膏의 미백효과에 관한 연구. 경희대학교 동서의학대학원, 2001[Document 14] A Study on the Whitening Effect of Sang-Hee Lee, Ph.D. Kyung Hee University Graduate School of East-West Medicine, 2001
[문헌 15] 손동석 외, 加減西施玉容散의 미백효과에 관한 연구. 대한안이비인후피부과학회지. 15(2), pp104-117, 2002[Study 15] A Study on the Whitening Effect of 加減 西 施玉容 散. Korean Journal of Ophthalmology & Otolaryngology & Dermatology. 15 (2), pp 104-117, 2002
[문헌 16] Hosoi J. et al., Cancer Res ., 45, pp1474-1478, 198516 Hosoi J. et al., Cancer Res ., 45, pp 1474-1478, 1985
[문헌 17] Mason HS, Paterson EW, Biochim . Biophys . Acta ., 111, pp134-146, 1965Document 17 Mason HS, Paterson EW, Biochim . Biophys . Acta . , 111, pp134-146, 1965
자외선은 피부 노화 및 주름살 형성의 주요한 원인으로 작용하고 있다. 자외선은 파장에 따라 UVA, UVB, UVC로 나눠지는데, UVB (290~320 nm)는 주로 피부의 표피층까지 침투하여 멜라닌 (melanin) 합성을 자극하고, UVA (320~400 nm)는 진피층까지 도달하여 활성산소의 생성을 유발하며 피부 각질세포 및 진피세포에 손상을 준다 (박수남 외, 식물유래 성분의 미백화장품 (기능성화장품)에의 응용. 서울산업대학교 논문집. 52, pp205-220, 2001). UV 등의 외부 스트레스는 피부각질세포로부터 α-MSH와 같은 성장 호르몬과 함께 TGF-beta, PGE2 등을 분비하는데, 이러한 사이토카인류는 멜라노사이트에 존재하는 수용체에 결합하여 세포기능을 활성화 시킨다 (Tong X et al., Mol . Cell Biol ., 27(1), pp283-96, 2007). 활성화된 멜라노사이트 (melanocyte)는 멜라노좀 (melanosome)에서 페놀류의 고분자 물질인 멜라닌을 합성하는데, 이러한 멜라닌은 외부 스트레스로부터 피부를 방어하는 기전의 일환으로 작용하게 된다 (Romero G.C. et al. J. Clin . Invest., 99(4), pp635-642, 1997). 각질세포 (keratinocyte)에 의해 분비된 α-MSH에 의해 자극된 멜라노사이트로부터 생성된 멜라닌은 수상돌기 (dendrite)등을 통하여 다시 각질세포 등에 전해져서 스트레스에 의한 세포상해를 억제하는 작용을 나타내게 한다 (손애량, 이승자. 한국미용학회지, 6(1), pp239-254, 2000).Ultraviolet rays are a major cause of skin aging and wrinkle formation. UV light is divided into UVA, UVB, and UVC according to the wavelength. UVB (290-320 nm) penetrates the skin's epidermis, stimulates melanin synthesis, and UVA (320-400 nm) reaches the dermis. Induces the generation of free radicals and damages skin keratinocytes and dermal cells. External stress such as UV secretes TGF-beta, PGE2, etc. from the keratinocytes with growth hormones such as α-MSH, and these cytokines bind to receptors present in melanocytes to activate cellular functions. X et al., Mol . Cell Biol ., 27 (1), pp 283-96, 2007). Activated melanocytes synthesize melanin, a polymer of phenols, in the melanosome, which acts as part of a mechanism to protect the skin from external stress (Romero GC et al. J. Clin) . Invest. , 99 (4), pp 635-642, 1997). Melanin produced from melanocytes stimulated by α-MSH secreted by keratinocytes is transmitted to keratinocytes again through dendrite and the like to suppress the cellular injury caused by stress. Ahn So-Ryang, Seung-Jae Lee, Korean Journal of Beauty Research, 6 (1), pp239-254, 2000).
멜라닌의 합성은 멜라노사이트의 멜라노좀 내에 존재하는 티로시나아제 (tyrosinase)의 작용을 통해 이루어진다. 이 티로시나아제는 L-티로신을 산화시켜 L-도파 (L-DOPA)를 만드는 티로신 하이드록시라제 (tyrosine hydroxylase)로 작용하며, 도파를 산화시켜 도파퀴논 (DOPAquinone)을 만드는 도파 산화제 (DOPA oxidase)로 작용하여 멜라닌을 합성하는 효소이다 (山孝一 良 and hearing, V. J.. メラニソ産生の 制御因子, Fragnance Journal, 6, pp24-28, 1990). 따라서 멜라닌 생성을 억제하는 피부 미백제 개발에는 타이로시나제의 활성을 억제하는 것이 필수적이다. TRP-2 (tyrosinase related protein-2)는 도파크롬 타우토머라제 (DOPAchrome tautomerase)로 알려져 있는 효소로서 도파크롬 (DOPAchrome)을 이용하여 DHICA (5,6-dihydroxy indole-2-carboxylic acid)를 생성한다. DHICA (5,6-dihydroxy indole-2-carboxylic acid)는 TRP-1 (tyrosinase related protein-1)에 의해 산화되어 IQCA (indole-2 -carboxylic acid)를 생성하는데, IQCA (indole-2 -carboxylic acid)는 흑갈색을 나타낸다 (Jackson I.J. et al. EMBO J., 11, 519, 1992).The synthesis of melanin is accomplished through the action of tyrosinase present in the melanosome of melanocytes. This tyrosinase acts as a tyrosine hydroxylase that oxidizes L-tyrosine to make L-DOPA, and a dopa oxidase that oxidizes dopaquinone to form dopaquinone. with an enzyme that acts synthetic melanin (山孝一良and hearing, VJ.メラニソ産生の制御因子, Fragnance Journal , 6, pp 24-28, 1990). Therefore, in the development of skin whitening agents that inhibit melanin production, �²� which inhibits the activity of tyrosinase is essential. TRP-2 (tyrosinase related protein-2) is an enzyme known as dopachrome tautomerase that produces DHICA (5,6-dihydroxy indole-2-carboxylic acid) using dopachrome. do. DHICA (5,6-dihydroxy indole-2-carboxylic acid) is oxidized by tyrosinase related protein-1 (TRP-1) to produce indole-2 -carboxylic acid (IQCA), which is indole-2 -carboxylic acid ) Is dark brown (Jackson IJ et al. EMBO J. , 11, 519, 1992).
한편, 멜라노사이트가 활성화되어 멜라닌 세포 생합성 (melanogenesis)가 진행될 때, 아데닐 사이클라아제 (adenylate cyclase)의 활성이 증가하여 cAMP (cyclic adenosine monophosphate) 농도가 증가한다. PKA (protein kinase A)는 cAMP-의존적 단백질 키나제 (protein kinase)로서 각종 효소의 활성을 조절하고, 세포 증식에 관여하는 것으로 알려져 있다. PKA의 활성 증가는 타이로시나제의 인산화와 활성 증가를 유발하며 이러한 과정은 멜라닌 합성 증가로 이어진다 (Lee J. et al., Biochem . Pharmacol ., 74(7) pp960-8, 2007). 따라서, PKA 발현을 억제하는 경우 타이로시나제의 활성화를 방지를 통하여 멜라닌 생성을 억제하게 된다. PKC (Protein kinase C)은 여러 효소를 인산화하여 활성을 증가시키며, 세포의 증식을 자극한다. PKC의 활성이 증가하면 멜라노사이트의 기능이 증가하며, 티로시나아제의 인산화 및 활성증가를 유발한다. 따라서 PKC 발현을 억제하는 경우 티로시나아제의 활성화를 억제하여 멜라닌 생성을 억제한다. 멜라노사이트 세포 내에 존재하는 AKT (serine/threonine kinase)는 ERK (extracellular signal-regulated kinase), CREB (cyclic-AMP response element binding protein), RSK-1 (ribosomal S6 kinase) 등과 함께 세포 기능을 조절하는 신호전달 단백질로 유전자 발현을 조절하는 인자로 알려져 있다 (Huang SC et al., Biochem. Pharmacol ., 69(2), pp221-32, 2004). ERK와 AKT (serine/threonine kinase)의 발현이 증가하면 MITF (microphthalmia transcription factor)의 발현이 억제되어 티로시나아제 발현을 억제한다 (JimC. et al., J. Cell Sci ., 114(Pt 12), pp2335-44, 2004). MITF (microphthalmia transcription factor)의 억제는 티로시나아제의 발현억제를 통하여 멜라닌 색소 생성을 억제할 수 있다. 따라서 MITF의 발현 억제를 통한 색소 생성 억제 물질 개발은 유의적인 일이 될 수 있다.Meanwhile, when melanocytes are activated and melanogenesis progresses, the activity of adenyl cyclase (adenylate cyclase) increases to increase the concentration of cAMP (cyclic adenosine monophosphate). PKA (protein kinase A) is a cAMP-dependent protein kinase that regulates the activity of various enzymes and is involved in cell proliferation. Increased PKA activity leads to increased phosphorylation and activity of tyrosinase and this process leads to increased melanin synthesis (Lee J. et al., Biochem . Pharmacol . , 74 (7) pp960-8, 2007). Therefore, when PKA expression is inhibited, melanin production is inhibited through prevention of tyrosinase activation. Protein kinase C (PKC) phosphorylates several enzymes to increase activity and stimulate cell proliferation. Increased PKC activity increases melanocyte function, leading to increased phosphorylation and activity of tyrosinase. Therefore, inhibition of PKC expression inhibits melanin production by inhibiting tyrosinase activation. Serine / threonine kinase (AKT) present in melanocytes, together with extracellular signal-regulated kinase (ERK), cyclic-AMP response element binding protein (CREB), and ribosomal S6 kinase (RSK-1) Transfer proteins are known to be factors that regulate gene expression (Huang SC et al., Biochem. Pharmacol . , 69 (2), pp221-32, 2004). Increased expression of ERK and AKT (serine / threonine kinase) inhibits the expression of MITF (microphthalmia transcription factor), which inhibits tyrosinase expression (JimC. Et al., J. Cell Sci . , 114 (Pt 12), pp 2233-44, 2004). Inhibition of the MITF (microphthalmia transcription factor) can inhibit the production of melanin through the inhibition of the expression of tyrosinase. Therefore, the development of pigment inhibitors by inhibiting the expression of MITF can be significant.
이미 아스코르빈산 (일본특허공개평 4-9320호), 하이드로퀴논 (일본특허공개평 6-192062호), 코직산 (일본특허공개평 56-7710호), 알부틴 (일본특허공개평 4-9315호) 및 일부의 화합물들이 티로시나아제 저해 활성을 가지고 있어 미백 화장료의 원료로 이용되고 있으나, 처방계 중에서의 안정성이 떨어져 분해되어 착색되거나, 이취의 발생, 생체 레벨에서의 효능, 효과의 불분명 및 안전성 문제 등으로 그 사용이 제한되고 있는 실정이다. 그리고 티로시나제의 억제 효과는 입증되었으나, 실제 생체 레벨과 유사한 실험에서는 그 효과가 낮게 나타난다. 따라서 생체 레벨과 유사한 멜라노사이트 세포 배양에 의한 저해 효과가 요구되고 있는 실정이다. 또한 하이드로퀴논은 발암성 물질로 규정되어 사용이 금지되고 있다. 코직산 및 아스코르빈산은 매우 불안정한 물질로서, 소량 함유한 화장료를 실온에서 수주일동안 보관하면 갈변현상이 발생한다. Ascorbic acid (Japanese Patent Laid-Open Publication No. 4-9320), hydroquinone (Japanese Patent Laid-Open Publication No. 6-192062), kojic acid (Japanese Patent Laid-Open Publication No. 56-7710), and arbutin (Japanese Patent Laid-Open Publication No. 4-9315) ) And some compounds have tyrosinase inhibitory activity and are used as raw materials for whitening cosmetics, but due to poor stability in the prescription system, they are degraded and colored, or off-flavor, efficacy at the biological level, unclear and safety The use is limited due to problems. And the inhibitory effect of tyrosinase has been demonstrated, but the effect is low in experiments similar to the actual biologic level. Therefore, the inhibitory effect of the melanocyte cell culture similar to the biological level is required. Hydroquinone is also regulated as a carcinogenic substance and is prohibited from use. Kojic acid and ascorbic acid are very unstable substances and browning occurs when a small amount of cosmetics are stored for several weeks at room temperature.
오래 전부터 멜라닌 생성을 억제하여 미백 효과 기능을 지닌 기존 원료가 갖는 문제점을 해결하기 위해서 한방제로 사용되고 있는 생약, 야채, 과일, 꽃 등의 안전성이 뛰어난 식물추출물로부터 비정상적인 멜라닌 생성을 억제할 수 있는 여러 가지 효과를 가진 추출물을 찾고자 하는 노력이 있어 왔다.In order to solve the problems of existing raw materials with whitening effect by suppressing melanin production for a long time, various kinds of abnormal melanin production can be suppressed from high-efficiency plant extracts such as herbal medicines, vegetables, fruits, and flowers. Efforts have been made to find extracts that have an effect.
한약재를 이용한 미백 관련 연구 결과, 마황, 마황고 및 사백산의 미백 효과가 보고되었으며 (이상희, 麻黃 및 麻黃膏의 미백효과에 관한 연구, 경희대학교 동서의학대학원, 2001), 서시옥용산 등의 복합처방에 의한 미백효과도 보고되었다(손동석 외, 加減西施玉容散의 미백효과에 관한 연구, 대한안이비인후피부과학회지, 15(2), pp104-117, 2002). As a result of research on whitening with herbal medicines, the whitening effect of ephedra, ephedra and sabaeksan has been reported (Lee Sang-hee, research on the whitening effect of huang and huang), Graduate School of East-West Medical Science, Kyung Hee University, 2001, etc. The whitening effect of multiple prescriptions has also been reported (Song et al., Et al., A Study on the Whitening Effect of Ginseng sulphate, Journal of Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology, 15 (2), pp104-117, 2002).
적하수오는 여러해살이 덩굴풀로서, 덩굴 길이는 3~4 m까지 서로 엉켜붙어 감기면서 자란다. 뿌리 줄기는 굳은 나무질이며 옆으로 뻗고 끝에는 여러 가지 모양의 덩이뿌리가 생긴다. 덩이뿌리껍질과 목질부의 세로줄이 있는 줄기의 모습이 붉으스름하다고 하여 적하수오라고 부른다.Drainage is a perennial vine grass, with vine lengths growing up to 3-4 m. The rhizome is a hard wood, stretched to the side, and ends have various shaped tubers. The stems with tuber bark and the vertical strip of wood are called reddish red.
적하수오의 덩이뿌리에는 옥시메틸안트라키논 유도체와 그 밖에 약 45%의 농마, 8%의 기름, 레시틴 등이 들어 있으며, 효능으로는 간, 신장, 정혈을 보하며, 힘줄과 뼈를 든든하게 하고, 신허로 인한 유정, 허리와 무릎이 나른한데, 혈과 진액이 부족하여 대변이 막히는데, 목임파절 결핵, 옹종창독, 치질, 산후병 등에 쓰인다고 알려져 있다. The lump of red sessau contains oxymethylanthraquinone derivatives, about 45% of horses, 8% of oil, and lecithin.Its effects include liver, kidney, and blood, and strengthen tendons and bones. It is known that it is used for tuberculosis, tuberculosis, tuberculosis, hemorrhoids, and postpartum disease, due to lack of blood and essence.
이에 본 발명자들은 적하수오 추출물의 멜라닌 생성 억제 효과, 티로시나아제 활성 억제 효과 및 티로시나아제, TRP-1, TRP-2, PKA, PKC, MITF 유전자의 발현 억제 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.The present inventors to complete the present invention by confirming the melanin production inhibitory effect, tyrosinase activity inhibitory effect and tyrosinase, TRP-1, TRP-2, PKA, PKC, MITF gene expression inhibitory effect It became.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 적하수오 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백 및 피부 노화방지용 화장료 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a skin whitening and skin anti-aging cosmetic composition containing a drop sewage extract as an active ingredient.
본원에서 정의되는 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이들의 혼합용매, 헥산, 프로필렌글리콜, 초산에칠, 부틸렌글리콜, 에테르 또는 클로로포름, 바람직하게는 탄소수 1 내지 4의 저급알코올, 더욱 바람직하게는 에탄올 또는 클로로포름에 가용한 추출물을 포함한다.Extracts as defined herein include water, lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms or mixed solvents thereof, hexane, propylene glycol, ethyl acetate, butylene glycol, ether or chloroform, preferably lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms, more Preferably the extract is soluble in ethanol or chloroform.
이하, 본 발명의 추출물을 수득하는 방법을 상세히 설명한다.Hereinafter, the method for obtaining the extract of the present invention will be described in detail.
본 발명의 적하수오 추출물은, 건조된 적하수오를 세절하여 무게(g)의 3 내지 50 배, 바람직하게는 10 배 중량비의 물, 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이들의 혼합용매, 헥산, 프로필렌글리콜, 초산에칠, 부틸렌글리콜, 에테르 또는 클로로포름, 바람직하게는 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 또는 클로로포름, 더욱 바람직하게는 에탄올 또는 클로로포름으로, 20 내지 100 ℃, 바람직하게는 50 내지 80 ℃에서 30분 내지 20시간, 바람직하게는 1 내지 5시간 동안 열수 추출, 환류냉각 추출, 초음파 추출 등의 추출방법, 바람직하게는 환류냉각 추출의 추출방법으로 본 발명의 적하수오 추출물을 수득할 수 있다.The dripping sewage extract of the present invention is chopped dried dripping sewage, 3 to 50 times the weight (g), preferably 10 times the weight ratio of water, lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms or a mixed solvent thereof, hexane, propylene Glycol, ethyl acetate, butylene glycol, ether or chloroform, preferably lower alcohol or chloroform having 1 to 4 carbon atoms, more preferably ethanol or chloroform, 20 to 100 ° C., preferably 50 to 80 ° C. Extraction of sewage extract of the present invention can be obtained by extraction methods such as hot water extraction, reflux cooling extraction, ultrasonic extraction, and preferably reflux cooling extraction for minutes to 20 hours, preferably 1 to 5 hours.
본 발명은 상기의 제조공정으로 얻어진 적하수오 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백 및 피부 노화방지용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a skin whitening and skin anti-aging cosmetic composition containing a drop of sewage extract obtained by the above manufacturing process as an active ingredient.
상기 적하수오 추출물은 피부 미백 및 피부 노화방지용 화장료 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.001 내지 90 중량%, 바람직하게는 0.01 내지 10 중량%로 사용이 가능하다. The drip extract is a skin whitening and skin anti-aging cosmetic composition, the extract can be used in 0.001 to 90% by weight, preferably 0.01 to 10% by weight based on the total weight of the composition.
또한, 본 발명의 적하수오 추출물을 포함하는 상기 화장료 조성물은 화장수, 스킨, 로션, 영양로션, 영양크림, 마사지 크림, 에센스, 팩, 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등이 있다.In addition, the cosmetic composition comprising the drip extract of the present invention includes a lotion, skin, lotion, nutrition lotion, nutrition cream, massage cream, essence, pack, cleansing, face wash, soap, treatment, essence.
본 발명의 화장료는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함한다. 수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염 (티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체 (아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다. Cosmetics of the present invention comprises a composition selected from the group consisting of water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, polymer peptides, polysaccharides, sphingolipids and seaweed extract. The water-soluble vitamins may be any compound that can be incorporated into cosmetics, but preferably vitamin B1, vitamin B2, vitamin B6, pyridoxine, pyridoxine, vitamin B12, pantothenic acid, nicotinic acid, nicotinic acid amide, folic acid, vitamin C, vitamin H, and the like. Their salts (thiamine hydrochloride, sodium ascorbate salt, etc.) and derivatives (ascorbic acid-2-sodium phosphate salt, ascorbic acid-2-magnesium phosphate salt, etc.) may also be used in the water-soluble vitamins that can be used in the present invention. Included. The water-soluble vitamins can be obtained by conventional methods such as microbial transformation, purification from microorganism culture, enzyme or chemical synthesis.
유용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E (d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체 (팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산 d1-알파토코페롤, 니코틴산 d1-알파 토코페롤비타민 E. DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등)도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. 유용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 취득할 수 있다. The oil-soluble vitamin may be any compound that can be incorporated into cosmetics, but preferably vitamin A, carotene, vitamin D2, vitamin D3, vitamin E (d1-alpha tocopherol, d-alpha tocopherol, d-alpha tocopherol), and the like. , Derivatives thereof (ascorbic palmitate, ascorbic stearate, ascorbic acid dipalmitate, acyl acetate d1-alphatocopherol, nicotinic acid d1-alpha tocopherolvitamin E. DL-pantothenyl alcohol, D-pantothenyl alcohol, pantothenylethyl Ethers, etc.) are also included in the oil-soluble vitamins used in the present invention. Oil-soluble vitamins can be obtained by conventional methods such as microbial transformation, purification of microorganism culture, enzyme or chemical synthesis.
고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다. 고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 (나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다. The polymer peptide may be any compound as long as it can be incorporated into cosmetics. Preferably, collagen, hydrolyzed collagen, gelatin, elastin, hydrolyzed elastin, keratin and the like can be given. Polymeric peptides can be purified and obtained by conventional methods such as purification from microbial cultures, enzymatic methods or chemical synthesis methods, or can be purified and used from natural products such as dermis and pig silk such as pigs and cattle. The polymer polysaccharide may be any compound as long as it can be blended into cosmetics. Preferably, hydroxyethyl cellulose, xanthan gum, sodium hyaluronate, chondroitin sulfate or a salt thereof (sodium salt, etc.) may be mentioned. For example, chondroitin sulfate or its salt, etc. can be normally purified from a mammal or fish.
스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.The sphingolipid may be any compound as long as it can be blended into cosmetics. Preferably, ceramide, phytosphingosine, sphingosaccharide lipid, etc. may be mentioned. Sphingo lipids can usually be purified from mammals, fish, shellfish, yeasts or plants by conventional methods or obtained by chemical synthesis.
해초 엑기스로는 화장품 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조 엑기스, 녹조 엑기스 등을 들 수 있으며, 또, 이들의해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다. The seaweed extract may be any compound as long as it can be cosmetically blended, but may preferably include brown algae extract, red algae extract, green algae extract, and the like. Also, calginine, arginic acid, sodium arginate and argin purified from these seaweed extracts may be used. Potassium ginate and the like are also included in the seaweed extract used in the present invention. Seaweed extract can be obtained by purification from seaweed by conventional methods.
본 발명의 화장료에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다. In addition to the said essential component, you may mix | blend the cosmetics of this invention with the other components normally mix | blended with cosmetics as needed.
이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한제, 정제수 등을 들 수 있다.Other components that may be added include fats and oils, humectants, emollients, surfactants, organic and inorganic pigments, organic powders, ultraviolet absorbers, preservatives, fungicides, antioxidants, plant extracts, pH adjusters, alcohols, pigments, flavorings, Blood circulation accelerators, cooling agents, limiting agents, purified water and the like.
유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.Examples of the fat or oil component include ester fats, hydrocarbon fats, silicone fats, fluorine fats, animal fats, and vegetable fats and oils.
에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리 (카프릴, 카프린산) 글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디 (카프릴, 카프린산) 프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소소테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에텔, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아리리, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.As ester fats and oils, glyceryl tri2-ethylhexanoate, cetyl 2-ethylhexanoate, isopropyl myristate, butyl mystinate, isopropyl palmitate, ethyl stearate, octyl palmitate, isocetyl isostearate, and stearic acid Butyl, ethyl linoleate, isopropyl linoleate, ethyl oleate, isocetyl acid isocetyl, isostyl acid isostearyl, isostaryl palmitate, octylate acid octyldodecyl, isostearic acid isetyl, diethyl sebacate, adipine Acid isopropyl, isoalkyl neopentane, tri (capryl, capric acid) glyceryl, trimethyl ethyl trimethylolpropane, trimethyl stearate trimethylol propane, tetra 2-ethylhexanopenta lysitol Cetyl caprylate, lauric acid decyl, hexyl laurate, decyl myristin, myristin acid myristyl, myritic acid cetyl, stearyl stearate, decyl oleate, lysinooleic acid Teyl, isostearyl laurate, isotridecyl myristin, isocetyl palmitate, octyl stearate, isocetyl stearate, isodecyl oleate, octyl dodecyl oleate, octyl dodecyl linoleate, isopropyl isopropyl acid, 2-ethylhexanoic acid cetostearyl, 2-ethylhexanoic acid stearyl, hexyl isostearate, ethylene glycol dioctanoate, ethylene glycol dioleate, propylene glycol dicapric acid, propylene glycol di (capryl, capric acid), Dicaprylic acid propylene glycol, dicapric acid neopentyl glycol, dioctanoate neopentyl glycol, tricaprylate glyceryl, triundecyl glyceryl, triisopalmitinate glyceryl, triisostearate glyceryl, octylate octadodode Sil, isostearyl octanoate, octyl isononate, hexyl decyl neodecanoate, octyl dodecyl neodecanoate, isocetyl isostearate, isostearate isostearic acid , Isostearic acid octyldecyl, polyglycerol oleic acid ester, polyglycerol isostearic acid ester, triisocetyl citrate, triisoalkyl citrate, triisooctyl citrate, lauric lactate, myristyl lactate, cetyl lactate, octyldecyl lactate, citric acid Triether, acetyl triethyl citrate, acetyl tributyl citrate, trioctyl citrate, diisostearyl malic acid, 2-ethylhexyl hydroxystearate, di2-ethylhexyl succinate, diisobutyl adipicate, diisopropyl sebacinate Dioctyl sebacate, stearic acid cholesterol, isostearic acid cholesterol, hydroxystearate cholesterol, oleic acid cholesteryl, oleic acid dihydrocholesteryl, isostearic acid phyteryl, phosphate oleate , 12-stealoyl hydroxystearate isocetyl, 12-stealoyl hydroxystearate stearic acid, 12-s Allo one hydroxy stearic acid and the like esters such as cetearyl source.
탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.Hydrocarbon-based fats and oils, such as squalene, a liquid paraffin, alpha-olefin oligomer, isoparaffin, ceresin, paraffin, a liquid isoparaffin, polybutene, microcrystal wax, and a vaseline, etc. are mentioned as a hydrocarbon-type fats and oils.
실리콘계 유지로서는 폴리메틴실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산메틸세틸옥시실록산 공증합체, 디메틸실록산메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다. As silicone fats and oils, polymethine silicone, methylphenyl silicone, methylcyclopolysiloxane, octamethyl polysiloxane, decamethyl polysiloxane, dodecamethylcyclosiloxane, dimethylsiloxane methylcetyloxysiloxane copolymer, dimethylsiloxane methyl steoxysiloxane copolymer, and alkyl modified silicone Oil, amino modified silicone oil, etc. are mentioned.
불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.Perfluoro polyether etc. are mentioned as fluorine-based fats and oils.
동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.As animal or vegetable fats and oils, avocado oil, almond oil, olive oil, sesame oil, rice bran oil, soybean oil, soybean oil, corn oil, rapeseed oil, almond oil, palm kernel oil, palm oil, castor oil, sunflower oil, grape seed oil, cottonseed oil, palm oil , Cucumber nut oil, Wheat germ oil, Rice germ oil, Shea butter, Walnut colostrum, Marker demia nut oil, Meadow home oil, Egg yolk oil, Ujima oil, Mink oil, Orange rape oil, Jojoba oil, Canderry wax, Carnabas wax And animal or plant fats and oils, such as liquid lanolin and hardened castor oil.
보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.Examples of the moisturizing agent include a water-soluble low molecular moisturizer, a fat-soluble molecular moisturizer, a water-soluble polymer, and a fat-soluble polymer.
수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산타느륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B (중합도 n=2 이상), 폴리프로필렌글리콜 (중합도 n=2 이상), 폴리글리세린B (중합도 n=2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다. 지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다. 수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다. 지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈에이코센 공중합체, 폴리미닐피롤리돈헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다.As a water-soluble low molecular moisturizer, serine, glutamine, sorbitol, mannitol, pyrrolidone- carboxylate titanium, glycerin, propylene glycol, 1, 3- butylene glycol, ethylene glycol, polyethylene glycol B (polymerization degree n = 2 or more), polypropylene Glycol (polymerization degree n = 2 or more), polyglycerol B (polymerization degree n = 2 or more), lactic acid, lactic acid salt, etc. are mentioned. Examples of the fat-soluble low molecular humectants include cholesterol and cholesterol esters. As the water-soluble polymer, carboxyvinyl polymer, polyasparaginate, tragacanth, xanthan gum, methyl cellulose, hydroxymethyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose, carboxymethyl cellulose , Water soluble chitin, chitosan, dextrin and the like. Examples of the fat-soluble polymers include polyvinylpyrrolidoneecocene copolymers, polyminylpyrrolidone hexadecene copolymers, nitrocellulose, dextrin fatty acid esters, polymer silicones, and the like.
에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.Examples of the emollient include long-chain acyl glutamic acid cholesteryl esters, hydroxy stearic acid cholesterol, 12-hydroxystearic acid, stearic acid, rosin acid, lanolin fatty acid cholesteryl esters, and the like.
계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다. 비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌) 솔비탄지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEPOP (폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.As surfactant, nonionic surfactant, anionic surfactant, cationic surfactant, amphoteric surfactant, etc. are mentioned. Examples of nonionic surfactants are self-emulsifying glycerin monostearate, propylene glycol fatty acid esters, glycerin fatty acid esters, polyglycerol fatty acid esters, sorbitan fatty acid esters, POE (polyoxyethylene) sorbitan fatty acid esters, POE glycerin fatty acid esters, and POE alkyls. Ether, POE fatty acid ester, POE hardened castor oil, POE castor oil, POEPOP (polyoxypropylene) copolymer, POEPOP alkyl ether, polyether modified silicone, lauric alkanolamide, alkylamine oxide, hydrogenated soybean phospholipid, etc. Can be mentioned.
음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인삼염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다.Anionic surfactants include fatty acid soaps, alpha-acyl sulfonates, alkyl sulfonates, alkyl allyl sulfonates, alkyl naphthalene sulfonates, alkyl sulfates, POE alkyl ether sulfates, alkylamide sulfates, alkyl phosphates, POE alkylphosphates, and alkylamides. Phosphates, alkyloylalkyltaurine salts, N-acylamino acid salts, POE alkyl ether carboxylate salts, alkyl sulfosuccinate salts, sodium alkyl sulfo acetates, acylated hydrolyzed collagen peptide salts, perfluoroalkyl phosphate esters, and the like. have.
양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리에틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸멘질암모늄, 보름화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다.Examples of cationic surfactants include alkyltriethylammonium chloride, stearyltrimethylammonium chloride, stearyl trimethylammonium chloride, cetostearyltrimethylammonium chloride, distearyldimethylammonium chloride, stearyldimethylmenzyl ammonium, behenyltrimethylammonium, Benzalkonium chloride, diethylaminoethyl stearate, dimethylaminopropyl stearate, lanolin derivatives, quaternary ammonium salts, and the like.
양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.Examples of amphoteric surfactants include the carboxybetaine type, the amide betain type, the sulfobetain type, the hydroxysulfobetain type, the amide sulfobetain type, the phosphobetaine type, the aminocarboxylate type, the imidazoline derivative type, and the amideamine type. An amphoteric surfactant etc. are mentioned.
유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체 등의 무기 안료; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.Organic and inorganic pigments include silicic acid, silicic anhydride, magnesium silicate, talc, sericite, mica, kaolin, bengala, clay, bentonite, titanium film mica, bismuth oxychloride, zirconium oxide, magnesium oxide, zinc oxide, titanium oxide, aluminum oxide Inorganic pigments such as calcium sulfate, barium sulfate, magnesium sulfate, calcium carbonate, magnesium carbonate, iron oxide, ultramarine blue, chromium oxide, chromium hydroxide, calamine, and composites thereof; Polyamide, Polyester, Polypropylene, Polystyrene, Polyurethane, Vinyl Resin, Urea Resin, Phenol Resin, Fluoro Resin, Silicon Resin, Acrylic Resin, Melamine Resin, Epoxy Resin, Polycarbonate Resin, Divinylbenzene Styrene Copolymer, Silk Organic pigments such as powder, cellulose, CI pigment yellow, CI pigment orange, and composite pigments of these inorganic pigments and organic pigments;
유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘등의 아미드술폰산 다가금속염; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다. As organic powder, Metal soaps, such as a calcium stearate; Alkyl phosphate metal salts such as zinc sodium cetyl acid, zinc lauryl acid and calcium laurate; Acylamino acid polyvalent metal salts such as N-lauroyl-beta-alanine calcium, N-lauroyl-beta-alanine zinc, and N-lauroylglycine calcium; Amide sulfonic acid polyvalent metal salts, such as N-lauroyl-taurine calcium and N-palmitoyl-taurine calcium; N-epsilon-lauroyl-L-lysine, N-epsilon-palmitolyzine, N-alpha-paratoylol nitin, N-alpha-lauroyl arginine, N-alpha-cured fatty acid acyl arginine Acyl basic amino acids; N-acylpolypeptides, such as N-lauroyl glycyl glycine; Alpha-amino fatty acids such as alpha-aminocaprylic acid and alpha-aminolauric acid; Polyethylene, polypropylene, nylon, polymethyl methacrylate, polystyrene, divinylbenzene styrene copolymer, ethylene tetrafluoride and the like.
자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘텔, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메녹시계피산옥틸, 다파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4‘-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-ρ-(카르보-2’-에틸헥실-1‘-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.Examples of the ultraviolet absorber include paraaminobenzoic acid, ethyl paraaminobenzoate, amyl paraaminobenzoic acid, octyl paraaminobenzoate, ethylene glycol salicylate, phenyl salicylate, octyl salicylate, benzyl salicylate, butylphenyl salicylate, homomentel salicylic acid and benzyl cinnamic acid. , Paramethoxy cinnamic acid-2-ethoxyethyl, paramethoxy cyanic acid octyl, daparamethoxy cinnamic acid mono-2-ethylhexane glyceryl, paramethoxy cinnamic acid isopropyl, diisopropyl diisopropyl cinnamic acid ester mixture, uro Canonic acid, ethyl urokanoate, hydroxymethoxybenzophenone, hydroxymethoxybenzophenonesulfonic acid and salts thereof, dihydroxymethoxybenzophenone, dihydroxymethoxybenzophenone sodium sulfonate, dihydroxybenzophenone , Tetrahydroxybenzophenone, 4-tert-butyl-4'-methoxydibenzoylmethane, 2,4,6-trianilino-ρ- (carbo-2'-ethylhexyl-1'-oxy) -1 , 3,5-triazine, 2- (2-hi And the like can be mentioned hydroxy-5-methylphenyl) benzotriazole.
살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있다.As fungicides, hinokithiol, trichloric acid, trichlorohydroxydiphenyl ether, chlorhexidine gluconate, phenoxyethanol, resorcin, isopropylmethylphenol, azulene, salicylic acid, ginxitlionone, benzalkonium chloride, photosensitive Sodium No. 301, sodium mononitrohydrol, undecylenic acid, and the like.
산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다. Examples of the antioxidant include butylhydroxyanisole, propyl gallic acid, and erythorbic acid.
pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.Examples of the pH adjuster include citric acid, sodium citrate, malic acid, sodium malate, fmaric acid, sodium pmarate, succinic acid, sodium succinate, sodium hydroxide, sodium dihydrogen phosphate, and the like.
알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.Examples of the alcohol include higher alcohols such as cetyl alcohol.
또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 내지 5 중량%, 보다 바람직하게는 0.01 내지 3 중량%로 배합된다.Moreover, the compounding component which may be added other than this is not limited to this, Although any said component can be mix | blended within the range which does not impair the objective and effect of this invention, Preferably it is 0.01-5 weight% with respect to a total weight, More preferably, Is formulated at 0.01 to 3% by weight.
본 발명의 화장료는 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.The cosmetic of the present invention may take the form of a solution, an emulsion, a viscous mixture, or the like.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함한다.Ingredients included in the cosmetic composition of the present invention may include components commonly used in cosmetic compositions in addition to the extract as an active ingredient, for example, conventional auxiliaries such as stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavors and Carrier.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등을 들 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may be prepared in any formulation commonly prepared in the art, and includes, for example, milky lotion, cream, lotion, pack, foundation, lotion, essence, hair cosmetic, and the like.
구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저의 제형을 포함한다.Specifically, the cosmetic composition of the present invention skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisturizing lotion, nutrition lotion, massage cream, nutrition cream, moisturizing cream, hand cream, foundation, essence, nutrition essence, Formulations of packs, soaps, cleansing foams, cleansing lotions, cleansing creams, body lotions and body cleansers.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal carriers, vegetable fibers, waxes, paraffins, starches, tracantes, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonites, silicas, talc or zinc oxide, etc. may be used as carrier components. Can be.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used, in particular in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane Propellant such as butane or dimethyl ether.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1, 3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solvating or emulsifying agent is used as the carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 , Fatty acid esters of 3-butylglycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상 회석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the dosage form of the present invention is a suspension, liquid carriers such as water, ethanol or propylene glycol, suspensions such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol esters and polyoxyethylene sorbitan esters, and microcrystals are used as carrier components. Soluble cellulose, aluminum metahydroxy, bentonite, agar or tracant and the like can be used.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, the carrier component is an aliphatic alcohol sulfate, an aliphatic alcohol ether sulfate, a sulfosuccinic acid monoester, an isethionate, an imidazolinium derivative, a methyltaurate, a sarcosinate, a fatty acid amide. Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, linolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters and the like can be used.
본 발명에 의한 적하수오 추출물은 멜라닌 생성 억제 효과, 티로시나아제 활성 억제 효과 및 티로시나아제, TRP-1, TRP-2, PKA, PKC, MITF 유전자의 발현 억제 효과를 나타내므로, 피부 미백 및 피부 노화방지용 화장료 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.Drainage extract according to the present invention shows melanin production inhibitory effect, tyrosinase activity inhibitory effect and tyrosinase, TRP-1, TRP-2, PKA, PKC, MITF gene expression inhibitory effect, skin whitening and skin It can be usefully used as an anti-aging cosmetic composition.
도 1은 적하수오 추출물 농도에 따른 B16F10 세포로부터 멜라닌 유리에 미치는 영향을 나타낸 도이고,1 is a diagram showing the effect on melanin release from B16F10 cells according to the concentration of drip extract,
도 2는 적하수오 추출물 농도에 따른 머쉬룸 타이로시나제 (mushroom tyrosinase) 활성에 미치는 영향을 나타낸 도이며,2 is a diagram showing the effect on the activity of mushroom tyrosinase (mushroom tyrosinase) according to the concentration of the drip extract;
도 3는 적하수오 추출물 농도에 따른 B16F10 세포로부터 멜라닌 생성에 미치는 영향을 나타낸 도이며,Figure 3 is a diagram showing the effect on melanin production from B16F10 cells according to the concentration of drip sewage,
도 4는 적하수오 추출물 농도에 따른 티로시나아제 발현에 비치는 영향을 나타낸 도이고, Figure 4 is a view showing the effect on the tyrosinase expression according to the concentration of Drip Sewage,
도 5는 적하수오 농도에 따른 TRP-1 (tyrosinase related protein-1) 발현에 미치는 영향을 나타낸 도이며,5 is a diagram showing the effect on the expression of TRP-1 (tyrosinase related protein-1) according to the concentration of drip,
도 6은 적하수오 농도에 따른 TRP-2 (tyrosinase related protein-2) 발현에 미치는 영향을 나타낸 도이고, 6 is a diagram showing the effect on the expression of tyrosinase related protein-2 (TRP-2) according to the concentration of drip,
도 7은 적하수오 농도에 따른 PKA (protein kinase A) 발현에 미치는 영향을 나타낸 도이며,7 is a diagram showing the effect on the expression of PKA (protein kinase A) according to the concentration of drip,
도 8은 적하수오 농도에 따른 PKC (protein kinase C) 발현에 미치는 영향을 나타낸 도이고, 8 is a diagram showing the effect on the expression of PKC (protein kinase C) according to the concentration of drip,
도 9는 적하수오 농도에 따른 MITF (microphthalmia transcription factor) 발현에 미치는 영향을 나타낸 도이다.Figure 9 is a diagram showing the effect on the expression of microphthalmia transcription factor (MITF) according to the concentration of dropping water.
이하, 본 발명을 하기에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예, 참조예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 이에 의해 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by the following. However, the following Examples, Reference Examples and Experimental Examples are merely illustrative of the present invention, but the content of the present invention is not limited thereto.
실시예 1. 적하수오의 에탄올 가용 추출물 제조Example 1 Preparation of Soluble Ethanol Soluble Extract
적하수오 (전북 완주산) 100 g을 에탄올 (1 L)에 2시간 환류 추출한 후 (70oC) 감압 농축하여 냉동건조 시켜 적하수오 에탄올 추출물 13.8 g (이하 “PM”이라 명명함)을 수득하여 DMSO (dimethylsulfoxide, Sigma)에 녹인 후 0.22 um 기공 크기를 가지는 여과지 (Milipore)를 이용하여 멸균하고 사용 시까지 냉장 보관하였다. 배양된 세포에 사용하기 직전 실험농도에 맞도록 DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium, GiPMo BRL Co. USA) 배지로 조정하여 하기 실험의 시료로 사용하였다.100 g of dripping sewage (Wanju, Jeonbuk) was refluxed in ethanol (1 L) for 2 hours (70 o C), concentrated under reduced pressure and freeze-dried to obtain 13.8 g of ethanol extract (hereinafter referred to as “PM”). After dissolving in DMSO (dimethylsulfoxide, Sigma), sterilized by using a filter paper (Milipore) having a pore size of 0.22 um and refrigerated until use. DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium, GiPMo BRL Co. USA) medium was used as a sample of the following experiment to fit the experimental concentration immediately before use in cultured cells.
실시예 2. 적하수오의 클로로포름 분획 추출물 제조Example 2 Preparation of Chloroform Fraction Extract of Drainage
상기 실시예 1에서 수득한 PM 1L를 감압 농축시킨 후, 증류수 1L에 재현탁시켰다. 재현탁된 혼합물에 클로로포름을 200 ml 가하고 격렬히 흔들어 추출하고 분획깔때기를 이용하여 클로로포름 층을 취하였다. 이 과정을 세 번 반복하여 시행하고, 얻어진 클로로포름 층을 합하여 감압 농축한 다음 동결 건조하여 4.2 g의 시료 (이하 "PM-C"이라 명명함)를 얻었다. PM 1L obtained in Example 1 was concentrated under reduced pressure, and then resuspended in 1 L of distilled water. 200 ml of chloroform was added to the resuspended mixture, and the mixture was shaken vigorously and extracted, and a chloroform layer was taken using a separatory funnel. This process was repeated three times, and the obtained chloroform layers were combined, concentrated under reduced pressure, and lyophilized to obtain 4.2 g of a sample (hereinafter referred to as "PM-C").
참조예 1. 세포 배양 방법Reference Example 1. Cell Culture Method
멜라노사이트 B16F10 세포 (서울대학교 한국세포주은행)는 10% FBS (Fetal bovine serum, Gibco) 및 페니실린/스트렙토마이신 (100 IU-50 ug/ml, Sigma)이 포함된 DMEM 배지 (Dulbecco's Modified Eagle Medium, GiPMo BRL Co. 미국)를 사용하였으며, 1일 1회 배지를 교환하였다. FBS는 잔존하는 보체성분을 불활성화시키기 위해 실온에서 녹인 후 열 불활성화 (56℃ 워터 베스에서 30분간 가열)하여 사용하였으며, 배지는 0.2 ㎛ 멤브레인 필터 (Gibco)로 여과 후 사용하였다. 세포에 각 조건 별로 96웰 플레이트 (서린과학, 한국)에는 웰당 100 ㎕, 24웰 플레이트에는 웰당 500 ul로 배지를 넣어주었다. 세포를 회수할 때는 트립신-EDTA 1 ml을 가하여 37℃에서 1분간 반응시킴으로써 부착된 세포를 분리하고 배지 4 ml을 넣고 원심분리 (1,000 rpm, 3분)를 하여 세척한 후 실험에 사용하거나 필요시 액체질소에서 냉동 보관하였다. 세포는 37℃, 5% CO2를 사용한 CO2 배양기에서 배양하여 하기 실험예에 사용하였다.Melanosite B16F10 cells (Seoul National University Cell Line Bank) were treated with DMEM medium (Dulbecco's Modified Eagle Medium, GiPMo) containing 10% FBS (Fetal bovine serum, Gibco) and penicillin / streptomycin (100 IU-50 ug / ml, Sigma). BRL Co. USA) was used and medium was changed once a day. FBS was dissolved at room temperature to inactivate the remaining complement components and then heat inactivated (heated for 30 minutes in a 56 ° C. water bath), and the medium was used after filtration with a 0.2 μm membrane filter (Gibco). In each cell, 100 μl per well was put into a 96-well plate (Surin Science, Korea) and 500 ul per well was put into a 24-well plate. To recover the cells, add 1 ml of trypsin-EDTA and react for 1 minute at 37 ° C to separate the adhered cells, add 4 ml of medium, wash them by centrifugation (1,000 rpm, 3 minutes), and then use them in the experiment. Frozen in liquid nitrogen. The cells were cultured in a CO 2 incubator using 37 ° C., 5% CO 2 and used in the following experimental examples.
실험예 1. 멜라닌 유리 억제 효과 측정Experimental Example 1. Measurement of melanin free inhibitory effect
멜라닌 유리 억제 효과를 알아보기 위해 호세이 등의 방법 (Hosoi J. et al., Cancer Res ., 45, pp1474-1478, 1985)을 이용하여 하기와 같이 실험을 수행하였다.Hosei J. et al., Cancer for the study of melanin free inhibitors Res . , 45, pp1474-1478, 1985) was performed as follows.
상기 참조예 1의 B16F10 세포를 2x104 세포/ml의 농도로 6웰 플레이트에 넣고 6시간 배양하여 부착한 다음, 상기 실시예 1에서 수득한 PM을 농도별로 첨가하여 1, 2, 3일간 배양한 후 0.05% 트립신-EDTA를 처리하여 세포를 분리한 다음, PBS로 희석하여 헤마토사이토미터 (Hematocytometer, Fuchs-Rosenthal, 독일)로 세포수를 계측하였다. UV와 같은 외부 스트레스를 받으면 피부 각질세포로부터 유리되며, 멜라노사이트에 존재하는 수용체에 결합하여 기능을 나타내는 성장호르몬의 일종인 α-MSH 10 μM만을 처리한 대조군 및 α-MSH 10 μM와 세포 독성이 없는 농도인 PM 300, 150, 75, 37 ug/ml을 함께 처리한 시험군으로 나누어 72시간 처리하여 세포 배양액에 유출되는 멜라닌을 측정하였다. 약 24시간 후부터 멜라닌 생성을 현미경 관찰할 수 있었다.The B16F10 cells of Reference Example 1 were placed in a 6-well plate at a concentration of 2 × 10 4 cells / ml, and incubated for 6 hours, followed by incubation for 1, 2, and 3 days by adding the PM obtained in Example 1 by concentration. Cells were then isolated by treatment with 0.05% trypsin-EDTA, and then diluted with PBS to measure the number of cells with a hematocytometer (Hematocytometer, Fuchs-Rosenthal, Germany). When exposed to external stress such as UV, it is released from skin keratinocytes, and control group treated with only α-MSH 10 μM, a type of growth hormone that binds to receptors present in melanocytes, and α-MSH 10 μM and cytotoxicity Melanin outflowed into the cell culture was measured by dividing the test group, which was treated with PM 300, 150, 75, and 37 ug / ml, which had no concentration, for 72 hours. From about 24 hours, melanin production could be observed under a microscope.
실험결과, 도 1에 나타난 바와 같이 α-MSH 10 uM을 처리한 대조군에 비해 PM 300, 150, 75, 37 ug/ml의 농도로 처리한 시험군의 멜라닌 생성량이 농도의존적으로 현저하게 억제됨을 확인할 수 있었다. Experimental results, as shown in Figure 1 compared to the control group treated with α-MSH 10 uM melanin production of the test group treated with a concentration of 300, 150, 75, 37 ug / ml PM concentration was significantly inhibited significantly Could.
실험예 2. 머쉬룸 티로시나아제 (Mushroom tyrosinase) 활성에 미치는 영향 측정Experimental Example 2 Determination of the Effect on Mushroom Tyrosinase Activity
티로시나아제 활성에 미치는 영향을 알아보기 위해 매슨 및 피터슨 등의 방법 (Mason HS, Paterson EW, Biochim. Biophys. Acta., 111, pp134-146, 1965)을 이용하여 하기와 같이 실험을 수행하였다.In order to determine the effect on tyrosinase activity, experiments were performed using Masson and Peterson et al. (Mason HS, Paterson EW, Biochim. Biophys. Acta. , 111, pp134-146, 1965) as follows.
0.1 M 인산 완충액 (pH 6.8) 150 ul, 3 mM L-티로신 수용액 20 ul와 상기 실시예 1에서 수득한 PM을 300, 150, 75, 37 ug/ml의 농도와 α-MSH 10 uM을 함께 처리한 시험군 및 α-MSH 10 uM만을 처리한 대조군을 각각 20 ul 차례대로 가한 다음, 2500 U/ml 머쉬룸 티로시나아제 (Sigma) 10 ul를 가하여 반응을 시작하였다. 반응은 37℃에서 30분간 배양하여 10분 간격으로 405 nm에서 흡광도를 측정하였고, 하기 수학식 1을 이용하여 티로시나아제 활성도를 구하였다.0.1 M phosphate buffer (pH 6.8) 150 ul, 3 mM L-tyrosine aqueous solution 20 ul and the PM obtained in Example 1 were treated with 300, 150, 75, 37 ug / ml concentration of α-MSH 10 uM together One test group and a control group treated with only 10 uM of α-MSH were added 20 ul each, followed by addition of 10 Uul of 2500 U / ml mushroom tyrosinase (Sigma) to start the reaction. The reaction was incubated for 30 minutes at 37 ℃ was measured for absorbance at 405 nm at intervals of 10 minutes, to determine the tyrosinase activity using the following equation (1).
실험 결과, 도2에 나타난 바와 PM 300, 150, 75 ug/ml의 농도에서 티로시나아제 활성이 농도의존적으로 억제됨을 확인할 수 있었다. As a result, it was confirmed that tyrosinase activity was inhibited in a concentration-dependent manner as shown in FIG. 2 at PM 300, 150, and 75 ug / ml.
A : 대조군 반응액의 흡광도A: absorbance of the control reaction solution
A' : 대조군의 티로시나아제 대신 완충액을 가한 반응액의 흡관도A ': uptake of reaction solution in which buffer was added instead of tyrosinase in the control group
B : 검액이 첨가된 반응액의 흡광도B: absorbance of the reaction solution to which the test solution was added
B'B ' : B 반응액 중 : In B reaction solution 티로시나제Tyrosinase 내신 Internal 완충액을Buffer 가한 반응액의 흡광도 Absorbance of the reaction solution
실험예Experimental Example 3. 멜라닌 생성량 측정 3. Measurement of melanin production
멜라닌 생합성 억제 효과를 알아보기 위해 호세 등의 방법 (Hosoi J. et al., Cancer Res ., 45, pp1474-1478, 1985)을 이용하여 하기와 같이 실험을 수행하였다.To investigate the inhibitory effects of melanin biosynthesis, the method of Jose et al. (Hosoi J. et al., Cancer Res . , 45, pp1474-1478, 1985) was performed as follows.
참조예 1의 배양된 B16F10 세포에 상기 실시예 1에서 수득한 PM을 300, 150, 75, 37 ug/ml의 농도와 α-MSH 10 uM을 함께 처리한 시험군 및 α-MSH 10 uM만을 처리한 대조군을 2 일간 배양한 다음, PBS로 2회 씻고 1,500 x rpm으로 5분간 원심분리하였다. 10% DMSO가 함유된 1 N 수산화나트륨 300 ul를 넣고 80°C에서 1시간 동안 처리하여 용해시켰다. 세포내에서 생성되는 멜라닌을 정량하기 위하여 475 nm에서 흡광도를 측정하고 합성 멜라닌을 표준으로 사용하여 결정하였다. 워싱 완충액으로 3번 다시 씻어 내고 효소 접합체 (enzyme conjugate) 100 ㎕를 가한 다음, 22oC에서 45분간 배양 시켰다. 다시 3번 씻어낸 다음 기질용액 100 ㎕를 가하고 22oC에서 30분간 배양시킨 다음 정지 용액 (stop solution) 50 ㎕를 가하고 450 nm에서 흡광도 값을 구했다.In the cultured B16F10 cells of Reference Example 1, only the test group treated with the concentrations of 300, 150, 75, 37 ug / ml and α-MSH 10 uM and the α-MSH 10 uM were treated with the PM obtained in Example 1 above. One control was incubated for 2 days, then washed twice with PBS and centrifuged for 5 min at 1,500 x rpm. 300 ul of 1 N sodium hydroxide containing 10% DMSO was added and dissolved at 80 ° C. for 1 hour. To quantify melanin produced in cells, absorbance was measured at 475 nm and determined using synthetic melanin as a standard. After washing again with washing buffer three times and adding 100 μl of the enzyme conjugate (enzyme conjugate), and incubated for 45 minutes at 22 ° C. After washing 3 times, 100 μl of substrate solution was added, incubated for 30 minutes at 22 ° C., 50 μl of stop solution was added, and the absorbance value was determined at 450 nm.
실험 결과, 도 3에 나타난 바와 같이 대조군에 비해 PM 300, 150, 75, 37 ug/ml을 처리한 시험군에서 멜라닌 생성이 농도 의존적으로 억제됨을 확인할 수 있었다. As a result, as shown in FIG. 3, it was confirmed that melanin production was inhibited in a concentration-dependent manner in the test group treated with PM 300, 150, 75, 37 ug / ml, as compared to the control group.
실험예Experimental Example 4. 유전자 발현에 대한 영향 4. Impact on gene expression
상기 실시예 1의 PM 추출물의 티로시나아제, TRP-1, TRP-2, PKA, PKC 및 MITF 유전자 발현에 대한 영향을 알아보기 위해 하기와 같이 실험을 수행하였다.In order to determine the effect on tyrosinase, TRP-1, TRP-2, PKA, PKC and MITF gene expression of the PM extract of Example 1 was performed as follows.
4-1. 총 4-1. gun RNARNA 분리 detach
참조예 1에서 배양된 B16F10 세포에 α-MSH 10 μm만을 처리한 음성대조군 및 PM 200, 100, 50, 25 ㎍/ml의 농도와 α-MSH 10 μm을 함께 처리한 시험군에 1 ml 트리졸 용액 (인비트로젠, 미국)를 처리하여 총 RNA를 분리하였다. 분리한 RNA에 100 ㎕ 페놀과 100 ㎕ 클로로포름 : 아이소아밀알코올 (24:1)을 넣고 잘 섞은 후 원심분리하는 과정을 2번 반복하여 상층액을 분리한다. 0.5 ml 아이소프로필 알코올을 이용하여 RNA를 침전시킨 후 70% 에탄올로 세척하고 자연 건조시킨다. RNAase free water (인비트로젠, 미국)에서 RNA를 녹인 후 RNase-free DNase (인비트로젠, 미국)를 첨가하고 -70℃에서 저장하였다. 1 ml trizol to a negative control group treated with only α-MSH 10 μm in B16F10 cells cultured in Reference Example 1 and a test group treated with a concentration of PM 200, 100, 50, 25 μg / ml and α-MSH 10 μm The solution (Invitrogen, USA) was processed to separate total RNA. 100 μl phenol and 100 μl chloroform: isoamyl alcohol (24: 1) were added to the isolated RNA, and the mixture was mixed well and centrifuged twice to separate the supernatant. RNA is precipitated using 0.5 ml isopropyl alcohol, washed with 70% ethanol and dried naturally. After RNA was dissolved in RNAase free water (Invitrogen, USA), RNase-free DNase (Invitrogen, USA) was added and stored at -70 ° C.
4-2. cDNA 제조 4 -2. cDNA manufacturing
상기 실험예 4-1에서 분리한 음성대조군 (이하 "C"라 명명함) 및 시험군 각각의 total RNA액 (13 ug RNA 함유)에 올리고dT 1 ㎕을 넣은 후 조심스럽게 혼합한 다음, 70oC에서 5분간 배양하였다. 프라이머가 풀리도록 실온에서 약 10분간 방치한 다음, 사스크립트 버퍼 (cyscript buffer), 0.1 M DTT, dUTP 뉴클레오티드, dUTP 시다이-표지된 뉴클레오티드, 사스크립트 역전사효소 (Cyscript reverse transcriptase)를 첨가한 후, 아주 조심스럽게 혼합하였다. 이 후, 42oC에서 90분간 배양한 후, 얼음 상에 방치하였다. 여기에 2.5 M 수산화나트륨을 가한 후 37oC에서 15분간 배양하였으며, 2 M HEPES 버퍼를 가하여 중화시켜 cDNA를 제조하였다.Up to the experimental example of the negative control group isolated from 4-1 (the "C" La name card) and the test group each total RNA solution (containing 13 ug RNA) and mixed gently and then insert the dT 1 ㎕ Watch Next, 70 o Incubated for 5 minutes at C. Leave primers at room temperature for about 10 minutes to release the primers, then add cyscript buffer, 0.1 M DTT, dUTP nucleotides, dUTP seeded-labeled nucleotides, Cyscript reverse transcriptase, and then add Mix carefully. Thereafter, the cells were incubated at 42 ° C. for 90 minutes and then left on ice. 2.5 M sodium hydroxide was added thereto, followed by incubation at 37 ° C. for 15 minutes, and neutralized by adding 2 M HEPES buffer to prepare cDNA.
4-3. 4-3. ReverseReverse TranscriptionTranscription -- PolymerasePolymerase ChainChain ReactionReaction ( ( RTRT -- PCRPCR ))
올리고dT 12-18 (프로메가, 미국), 반응 버퍼 (50 mM 트리스-염산, 75 mM 염화칼륨, 3 mM 염화마그네슘, 10 mM DTT, pH 8.3), 1 mM dNTP (Biotools, 스페인)및 200 unit M-MLV-RT (Moloney murine leukemia virus reverse transcriptase, 프로메가, 미국)를 분리한 RNA에 처리하여 역전사를 수행함으로써 cDNA를 합성하였다. PCR은 총 부피 15 ㎕에 10x PCR 버퍼, 0.2 mM dNTPs, 2 pmole의 센스 및 안티센스 프라이머를 넣은 혼합액에 cDNA와 1.25unit의 Taq 중합효소 (Biotools, 스페인)을 넣어 PCR을 시행하였다. 대조군 (이하 "N"이라 명명함)은 프라이머가 첨가되지 않은 vehicle의 값을 나타낸다. PCR 조건은 94℃ 4분, 30 사이클의 [94℃ (30초), 59℃ (30초), 72℃ (45초)], 72℃ 10분이었다 (Perkin Elmer, 미국) 증폭된 PCR 산물을 2% 아가로즈 겔에 전기영동하여 농도 분석 프로그램인 젤-프로 분석기 3,1 (Gel-Pro analyzer 3.1, 미디어 사이버네틱스, 미국)을 이용하여 분석하였다. OligodT 12-18 (Promega, USA), reaction buffer (50 mM tris-hydrochloric acid, 75 mM potassium chloride, 3 mM magnesium chloride, 10 mM DTT, pH 8.3), 1 mM dNTP (Biotools, Spain) and 200 unit M CDNA was synthesized by reverse transcription by processing -MLV-RT (Moloney murine leukemia virus reverse transcriptase, Promega, USA). PCR was performed by adding cDNA and 1.25units of Taq polymerase (Biotools, Spain) to a mixture containing 10 × PCR buffer, 0.2 mM dNTPs, 2 pmole sense and antisense primers in a total volume of 15 μl. The control (hereinafter referred to as "N") represents the value of vehicle without the addition of the primer. PCR conditions were 94 ° C. 4 min, 30 cycles [94 ° C. (30 sec), 59 ° C. (30 sec), 72 ° C. (45 sec), 72 ° C. 10 min (Perkin Elmer, USA). 2% agarose gel was electrophoresed and analyzed using Gel-Pro analyzer 3,1 (Gel-Pro analyzer 3.1, Media Cybernetics, USA).
4-4. 4-4. RealReal timetime RTRT -- PCRPCR
시험관에 정량한 RNA 5 ug, 50 ng/㎕의 랜덤 헥사머 (random hexamer) 3 ㎕, 10 mM dNTP 1 ㎕를 넣고 DEPC-H2O를 가하여 10 ㎕의 RNA/프라이머 혼합물을 만들었다. 실험용 samPMe을 65°C에서 5분간 배양시킨 후 1분 이상 얼음에 방치하였다. 반응 혼합물로 10배의 RT 버퍼 2 ㎕, 25 mM 염화마그네슘 4 ㎕, 0.1 M DTT 2 ㎕, RNAaseOUT (프로메가, 미국) 1 ㎕을 섞어 준비하였다. 반응 혼합물을 RNA/프라이머 혼합물에 가하여 섞고 실온에 2분간 방치한 후, SuperScript II RT (프로메가, 미국) 1 ㎕ (50 units)를 가하고 25oC에 10분간 배양시켰다. 다시 42oC에서 50분간 배양 시킨 다음, 70oC에서 15분간 가열하여 불활성 시키고 얼음 상에서 식혔다. RNase (프로메가, 미국) 1 ㎕를 가하고 다시 37oC에서 20분간 배양 시킨 다음, 사용 시까지 -20oC에 보관하였다. 각각의 옵티컬 튜브 (optical tube, 프로메가)에 2배의 사이버 그린믹스 (SYBR Green Mix, 프로메가) 12.5 ㎕, cDNA 0.2 ㎕, 5 pmol/㎕ 프라이머 쌍 혼합 1 ㎕, 11.3 ㎕ H2O를 넣고, 50oC 2 분 1 사이클, 95oC 10분 1 사이클, 95oC 15초, 60oC 30초, 72oC 30초 40 사이클, 72oC 10분 1 사이클로 증폭시켰다. PCR을 마친 후 튜브를 꺼낸 다음, 반응액 5 ul를 사용하여 3% 아가로스 겔에서 PCR 특이성을 측정했다. SDS 7000 소프트웨어를 사용하여 리얼 타임 PCR (real time PCR) 결과를 분석하였다. 통계처리는 스튜던트의 t-검정을 이용해 개별 비교를 하였으며, p값이 0.05 미만일 때 유의한 차이가 있는 것을 판정하였다.5 ug of RNA, 50 ng / μl of random hexamer, 3 μl of random hexamer and 1 μl of 10 mM dNTP were added to the test tube, and DEPC-H 2 O was added to prepare 10 μl of RNA / primer mixture. Experimental samPMe was incubated at 65 ° C. for 5 minutes and then left on ice for at least 1 minute. The reaction mixture was prepared by mixing 2 µl of 10-fold RT buffer, 4 µl of 25 mM magnesium chloride, 2 µl of 0.1 M DTT, and 1 µl of RNAaseOUT (Promega, USA). The reaction mixture was added to the RNA / primer mixture, left to stand at room temperature for 2 minutes, then 1 μl (50 units) of SuperScript II RT (Promega, USA) was added and incubated at 25 ° C. for 10 minutes. Incubated at 42 o C for 50 min, then inactivated by heating at 70 o C for 15 min and cooled on ice. 1 μl of RNase (Promega, USA) was added, incubated at 37 ° C. for 20 minutes, and then stored at −20 ° C. until use. Into each optical tube (Promega) add 12.5 μl of 2x SYBR Green Mix (promega), 0.2 μl cDNA, 1 μl 5 pmol / μl primer pair mixture, 11.3 μl H 2 O , 50 ° C. 2 minutes 1 cycle, 95 ° C. 10 minutes 1 cycle, 95 ° C. 15 seconds, 60 ° C. 30 seconds, 72 ° C. 30 seconds 40 cycles, 72 ° C. 10 minutes 1 cycle. After completing the PCR, the tube was taken out, and PCR specificity was measured on a 3% agarose gel using 5 ul of the reaction solution. Real time PCR results were analyzed using SDS 7000 software. Statistical treatments were compared individually using Student's t-test and determined that there was a significant difference when the p-value was less than 0.05.
실험결과, 도 4 내지 도6에 나타난 바와 같이 티로시나아제, TRP-1 (tyrosinase related protein-1) 및 TRP-2 (tyrosinase related protein-2)는 음성대조군 내에서 발현이 증가했으며, 상기 실시예 1에서 수득한 PM 200, 100, 50, 25 ug/ml의 농도에서 증가한 유전자 발현을 농도의존적으로 현저하게 억제됨을 확인할 수 있었다. As a result, as shown in Figures 4 to 6, tyrosinase, tyrosinase related protein-1 (TRP-1) and tyrosinase related protein-2 (TRP-2) increased expression in the negative control group, Example Gene expression increased at a concentration of 200, 100, 50, 25 ug / ml obtained in 1 was confirmed to be significantly suppressed in a concentration-dependent.
PKA (protein kinase A)는 도 7에 나타난 바와 같이, PM 200 및 100 ug/ml의 농도에서 증가한 유전자 발현을 현저히 억제하였으나, PM 50 및 25 ug/ml의 농도에서는 영향을 주지 못했음을 확인할 수 있었다. As shown in FIG. 7, PKA (protein kinase A) significantly inhibited the increased gene expression at PM 200 and 100 ug / ml concentration, but did not affect PM 50 and 25 ug / ml concentration. .
또한, PKC-β (protein kinase C-β) 및 MITF (microphthalmia transcription factor)는 도 8 내지 도 9에 나타난 바와 같이, 음성대조군에서는 발현이 증가하였으며, PM 200, 100, 50, 25 ug/ml의 농도에서 증가한 유전자 발현이 농도의존적으로 현저하게 억제됨을 확인할 수 있었다. In addition, PKC-β (protein kinase C-β) and MITF (microphthalmia transcription factor) as shown in Figures 8 to 9, the expression was increased in the negative control group, PM 200, 100, 50, 25 ug / ml Gene expression increased in concentration was confirmed to be significantly suppressed in a concentration-dependent.
따라서 상기 실시예 1에서 수득한 PM은 티로시나아제, TRP-1, TRP-2, PKA, PKC 및 MITF 유전자 발현을 억제하는데 탁월한 효과가 있음을 확인할 수 있었다.Therefore, it was confirmed that the PM obtained in Example 1 has an excellent effect on inhibiting tyrosinase, TRP-1, TRP-2, PKA, PKC and MITF gene expression.
하기에 상기 조성물의 제제예를 설명하나, 이는 본 발명을 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.Examples of the formulation of the composition are described below, but are not intended to limit the present invention but to explain in detail only.
제제예 1. 친수성 연고제의 제조Formulation Example 1 Preparation of Hydrophilic Ointment
실시예 1의 PM 9.00%9.00% PM of Example 1
백색 바세린 36.00%White Vaseline 36.00%
스테아릴 알콜 31.00%Stearyl Alcohol 31.00%
에텔(또는 메틸)ρ-옥시벤조에이트 미량Trace amounts of ether (or methyl) ρ-oxybenzoate
프로필렌 글리콜 19.00%Propylene Glycol 19.00%
라우릴 황산 나트륨 2.40%Sodium Lauryl Sulfate 2.40%
프로필 ρ-옥시벤조에이트 미량Trace amount of propyl ρ-oxybenzoate
계 100.00%Total 100.00%
제제예 2. 유연화장수(스킨)의 제조Formulation Example 2 Preparation of Soft Cosmetics (Skin)
실시예 1의 PM 2.00%2.00% PM of Example 1
글리세린 5.00%Glycerin 5.00%
트리에탄올아민 0.50%Triethanolamine 0.50%
토코페릴 아세테이트 1.00%Tocopheryl Acetate 1.00%
유동파라핀 5.00%Liquid Paraffin 5.00%
스쿠알란 5.00%Squalane 5.00%
마카다미아너트 오일 15.00%Macadamia Nut Oil 15.00%
폴리솔베이트60 1.00%Polysorbate60 1.00%
솔비탄세스퀴올레이트 1.00%Solbitan Sesquioleate 1.00%
카르복실비닐폴리머 0.20%Carboxyl Vinyl Polymer 0.20%
방부제 미량Preservative traces
향 미량Trace amount
정제수 잔량Purified water level
계 100.00%Total 100.00%
제제예 3. 밀크로션의 제조Formulation Example 3 Preparation of Milk Croissant
실시예 1의 PM 5.00%5.00% PM of Example 1
1,3-부틸렌글리콜 4.00%1,3-butylene glycol 4.00%
글리세린 3.00%Glycerin 3.00%
올레일알코올 0.05%Oleyl Alcohol 0.05%
폴리솔베이트20 1.00%Polysorbate20 1.00%
방부제 미량Preservative traces
향 미량Trace amount
정제수 잔량Purified water level
계 100.00%Total 100.00%
제제예 4. 영양 크림의 제조Formulation Example 4 Preparation of Nutritious Cream
실시예 1의 PM 2.00%2.00% PM of Example 1
글리세린 5.00%Glycerin 5.00%
트리에탄올아민 0.50%Triethanolamine 0.50%
토코페릴 아세테이트 1.00%Tocopheryl Acetate 1.00%
우동파라핀 5.00%Udon paraffin 5.00%
스쿠알란 5.00%Squalane 5.00%
마카다미아너트 오일 15.00%Macadamia Nut Oil 15.00%
폴리솔베이트60 1.00%Polysorbate60 1.00%
솔비탄세스퀴올레이트 1.00%Solbitan Sesquioleate 1.00%
카르복실비닐폴리머 0.20%Carboxyl Vinyl Polymer 0.20%
방부제 미량Preservative traces
향 미량Trace amount
정제수 잔량Purified water level
계 100.00%Total 100.00%
제제예 5. 맛사지 크림의 제조Formulation Example 5 Preparation of Massage Cream
실시예 1의 PM 2.00%2.00% PM of Example 1
바세린 5.00%Vaseline 5.00%
유동파라핀 30.00%Liquid Paraffin 30.00%
밀납 3.00%Beeswax 3.00%
폴리솔베이트60 1.00%Polysorbate60 1.00%
솔비탄세스퀴올레이트 1.00%Solbitan Sesquioleate 1.00%
1,3-부틸렌글리콜 5.00%1,3-butylene glycol 5.00%
글리세린 5.00%Glycerin 5.00%
방부제 미량Preservative traces
향 미량Trace amount
정제수 잔량Purified water level
계 100.00%Total 100.00%
<110> HWANG, Gwi Seo YOO, Dong Youl <120> Cosmetic composition comprising the extract of Polygonum multiflorum showing skin whit <130> DIF/2007-10-0011/SJ <160> 14 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for tyrosinase <400> 1 ggccagcttt caggcagagg t 21 <210> 2 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for tyrosinase <400> 2 ctaaaacggg tacttcgtgg t 21 <210> 3 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for TRP-1 <400> 3 gctgcaggag ccttctttct c 21 <210> 4 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for TRP-1 <400> 4 tctggtcgtc acgtcgcaga a 21 <210> 5 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for TRP-2 <400> 5 ggccagcttt caggcagagg t 21 <210> 6 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for TRP-2 <400> 6 ccgtgggtaa ccagtgttgg c 21 <210> 7 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for PKA <400> 7 tcccgttcct ggtcaaactt 20 <210> 8 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for PKA <400> 8 aagaagcgac tggtcggata t 21 <210> 9 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for PKC-beta <400> 9 agaaccacaa attcaccgcc 20 <210> 10 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for PKC-beta <400> 10 gtagctgtct ctccaagagt 20 <210> 11 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for MITF <400> 11 tagacatgcc agccaagtcc 20 <210> 12 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for MITF <400> 12 atttttccct cgagtgtcgc 20 <210> 13 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for GAPDH <400> 13 cagcctcgtc ccgtagacaa a 21 <210> 14 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for GAPDH <400> 14 cggccacgac tcatacagca c 21<110> HWANG, Gwi Seo YOO, Dong Youl <120> Cosmetic composition comprising the extract of Polygonum multiflorum showing skin whit <130> DIF / 2007-10-0011 / SJ <160> 14 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for tyrosinase <400> 1 ggccagcttt caggcagagg t 21 <210> 2 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for tyrosinase <400> 2 ctaaaacggg tacttcgtgg t 21 <210> 3 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for TRP-1 <400> 3 gctgcaggag ccttctttct c 21 <210> 4 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for TRP-1 <400> 4 tctggtcgtc acgtcgcaga a 21 <210> 5 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for TRP-2 <400> 5 ggccagcttt caggcagagg t 21 <210> 6 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for TRP-2 <400> 6 ccgtgggtaa ccagtgttgg c 21 <210> 7 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for PKA <400> 7 tcccgttcct ggtcaaactt 20 <210> 8 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for PKA <400> 8 aagaagcgac tggtcggata t 21 <210> 9 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for PKC-beta <400> 9 agaaccacaa attcaccgcc 20 <210> 10 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for PKC-beta <400> 10 gtagctgtct ctccaagagt 20 <210> 11 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for MITF <400> 11 tagacatgcc agccaagtcc 20 <210> 12 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for MITF <400> 12 atttttccct cgagtgtcgc 20 <210> 13 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> sense primer for GAPDH <400> 13 cagcctcgtc ccgtagacaa a 21 <210> 14 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> antisense primer for GAPDH <400> 14 cggccacgac tcatacagca c 21
Claims (4)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020080018852A KR20090093363A (en) | 2008-02-29 | 2008-02-29 | Cosmetic composition comprising the extract of Polygonum multiflorum showing skin whitening and anti-aging activity |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020080018852A KR20090093363A (en) | 2008-02-29 | 2008-02-29 | Cosmetic composition comprising the extract of Polygonum multiflorum showing skin whitening and anti-aging activity |
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Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20140135068A (en) * | 2013-05-15 | 2014-11-25 | 주식회사 사임당화장품 | Anti-wrinkle cosmetic composition containing Polygonum multiflorum extract |
KR20190123650A (en) * | 2018-04-24 | 2019-11-01 | 곽희옥 | Preparing method for cosmeticcomposition using fermenation in scoria cave |
KR102079090B1 (en) * | 2018-08-10 | 2020-02-19 | (주)뷰애드 | Cosmetic composition containing Polygonum multiflorum stem extract |
KR20220017278A (en) * | 2020-08-04 | 2022-02-11 | 주식회사 이엔코스 | Low irritating cosmetic composition for skin whitening comprising albutin, Polygonum tinctorium leaf and Brassica napus whole plant |
-
2008
- 2008-02-29 KR KR1020080018852A patent/KR20090093363A/en not_active Application Discontinuation
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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KR20140135068A (en) * | 2013-05-15 | 2014-11-25 | 주식회사 사임당화장품 | Anti-wrinkle cosmetic composition containing Polygonum multiflorum extract |
KR20190123650A (en) * | 2018-04-24 | 2019-11-01 | 곽희옥 | Preparing method for cosmeticcomposition using fermenation in scoria cave |
KR102079090B1 (en) * | 2018-08-10 | 2020-02-19 | (주)뷰애드 | Cosmetic composition containing Polygonum multiflorum stem extract |
KR20220017278A (en) * | 2020-08-04 | 2022-02-11 | 주식회사 이엔코스 | Low irritating cosmetic composition for skin whitening comprising albutin, Polygonum tinctorium leaf and Brassica napus whole plant |
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