KR20090009839A

KR20090009839A - 면역조절 올리고펩티드

Info

Publication number: KR20090009839A
Application number: KR1020087026538A
Authority: KR
Inventors: 세르게이 브이. 리트비노프
Original assignee: 세르게이 브이. 리트비노프
Priority date: 2006-03-29
Filing date: 2007-03-29
Publication date: 2009-01-23
Also published as: WO2007110772A1; TW200838558A; RU2503684C2; CN101448850B; EP1840133A1; US20090074802A1; CN101448850A; EP2004673A1; WO2007110772A8; RU2008142772A

Abstract

본 발명은 일반식 X-P-Y, 바람직하기는 I-P-Y의 면역조절 펩티드, 및/또는 이 아미노산 서열을 포함하는 올리고펩티드 및/또는 이들 펩티드와의 컨쥬게이트 제공한다. 또한 이들 펩티드와 컨쥬게이트를 갖는 약제학적 조성물을 제공한다.

면역조절 올리고펩티드, 면역활성 강화방법,

Description

면역조절 올리고펩티드{IMMUNOMODULATING OLIGOPEPTIDES}

본 발명은 면역 분야, 특히 면역조절 올리고펩티드에 관한 것이다.

생물학적으로 활성인 짧은 폴리펩티드 서열(올리고펩티드)의 연구는 1970년대 후반부터 시작되었고, 그때 면역에 영향을 미치는 제1 흉선 기원 펩티드가 발견되었다.

이와 같은 펩티드는 트리펩티드 Tyr-Gly-Gly (YGG) (Imreg으로도 알려져 있다; US 4,699,898)이고 이것은 약한 티모미메틱(thymomimetic)이다. 다른 예는 터프친 (또한 타프신이라 명명)과 그것의 밀접한 유사체 리진으로 각각 서열 Thr-Lys-Pro-Arg (TKPR)과 Gly-Gln-Pro-Arg (GQPR)을 갖는다. 예를 들면, Biondi et al., Int. J. Peptide Protein Res. 37, 112- 121, 1991 및 Verdini et al., J. Med. Chem. 34, 3372-3379, 1991을 참조하라. 터프친과 그것의 유사체는, 예를 들면 로코키닌의 중사슬 내에서 발견되는 IgG의 단편이다. 터프친은 잘 알려진 대식세포 활성제로 NK 활성을 자극한다고 알려져 있다. 다른 단편들은 펜타펩티드 티모펜틴으로, Arg-Lys-Asp-Val-Tyr (RKDVY) 또는 그것의 테트라펩티드 Arg-Lys-Asp-Val(RKDV)와 그것의 유사체 스플레노펩틴 Arg-Lys-Glu-Val-Tyr (RKEVY) (US 5,091,510; Audhya et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81, 2847-2849, 1984)이 다. 이들은 T 세포의 표현형 분화를 유도하고 IL-2 생산을 증가시키는 약한 능력의 티모미메트릭이다. 갈색 해조류 아이제닌 형(Form brown marine algae eisenin)이 단리되었고, L-pyroGlu-L-Gln-L-Ala (Kojima et al., J. Immunother. 13, 36-42, 1993) 이것은 인간의 말초 혈액 림프구(PBLs)의 천연 세포독성을 증대시키는 면역상 활성을 나타낸다.

일반 도해 X-R₁-R₂-R₃-R₄-Y에 따른 올리고펩티드는 US 5,980,913에 기재되어 있고, 여기서 X는 H 또는 아세틸로 이루어진 군으로부터 선택되고; R₁은 D 또는 L-리신, 아르기닌, 오르니틴 그리고 히스티딘으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R₂ 는 D 또는 L-아스파라진, 알라닌, 프랄린, 글루타민, 세린, 트레오닌 및 발린으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R₃는 D- 또는 L-프롤린; 알라닌, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 발린 및 글리신으로 이루어진 군으로부터 선택되고; R₄는 D 또는 L-티로신, 시스테인, 세린, 트레오닌, 페닐알라닌, 트립토판 및 히드시딘으로 이루어진 군으로부터 선택되고; 그리고 Y는 OH, NH₂ 그리고 OC_1-6 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기에 특이적으로 서열 (D,L)Lys-Asn/Gln-Pro/Gly-Tyr (K[N/Q][P/G]Y)을 포함하는 여러 펩티드가 기재된다. 이들 펩티드는 면역 결핍의 치료에 유용한 것으로 나타나있다.

더우기, 디펩티드 Glu-Trp (EW, Timogen)와 트리펩티드 또는 테트라펩티드 X-Glu-Trp-Y가 기재되고(WO 89/06134; WO 93/08815 및 US 6,159,940), 여기서 X와 Y는 실질적으로 모든 천연 아미노산일 수 있다. 또한 네오겐으로도 불리는 이들 트리펩티드 Ile-Glu-Trp (IEW)는 면역 및/또는 조혈 질병의 치료를 위한 치료법에도 사용되어왔다.

상기 중에서 생물학적 작용을 갖는다고 알려진 여러 올리고펩티드들을 표 1에 기재한다. 이들은 그들의 기원에 따라 3개의 주요 그룹으로 나눌 수 있다:

1. 흉선, 비장 또는 골수조직으로부터의 분리물, 이들은 면역세포 성장과 기능적 분화의 다양한 단계에서 면역 시스템에 적용되는 펩티드로 보인다.

2. 원칙적으로 대식세포의 기능과 관련된 (우유 카제인, 면역글로불린 등으로부터와 같은)면역 조절 기능을 갖는 단백질 분해 산물.

3.면역과 신경 시스템간의 복잡한 상호작용을 통해 미생물의 면역반응에 영향을 미치는 신경조절 펩티드.

역사적으로, 이와 같은 화합물의 발전 방향은 생물학적 활성을 갖는 천연 발생 펩티드의 연구와 추가 개발을 기초로 하고, 여전히 대부분 그것을 기초로 한다. 짧은 생물학적 펩티드를 생성하려는 몇몇 시도가 시토신에서의 가장 짧은 기능적 모티브, 점착 단백질과 몇몇 표면 수용체를 동정하고자 하는 여러 연구 그룹에 의해 이루어졌다.

이것을 넘어 현재는 필수적인 생물학적 성질을 증명하는 올리고펩티드에 대한 고가의 스크리닝을 수행하는 것이 행해졌다. 본 발명자들은 선택적인 펩티드 면역조절제에 대한 요구가 여전히 있다고 믿는다.

스크리닝 프로그램 중에 본 발명자들은 새로운 종류의 면역활성 올리고펩티드를 발견하였다.

따라서, 본 발명은 올리고펩티드에 관한 것으로, 이것은 일반식 X-Pro-Tyr (X-P-Y)을 갖는 트리펩티드리고, 여기서 X는 Ile (I), Val (V), Ala (A), Trp (W), Pro (P), Leu (L), Phe (F), Gly (G), Glu (E) 및 Asn (N)로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고, 여기서 모든 아미노산은 D 또는 L 배열일 수 있다. 특히 바람직하기는, 올리고펩티드 I-P-Y이다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 상기 트리펩티드를 N-터미날에 포함하는 올리고펩티드에 관한 것이다.

특이적으로, 본 발명은: IPYKTTKS, KTTKSIPY, IPYVGVAPG, VGVAPGIPY, IPYVGV, VGVIPY, IPYIEW, IEWIPY, EWIPY, IPYKE, KEIPY, IPYKPR, KPRIPY, IPYTEPR, TEPRIPY, IPYKD, KDIPY, IPYKNPY, KNPYIPY, IPYKNPW, KNPWIPY, IPYTKPR, IPYGQPR, IPYTAEEK, IPYALTTE, IPYRKEVY, GPAIPY, KDIPIPY, TQPIPY, GQPIPY, TAEIPY, ALTIPY, RKEIPY, IPYEKX₁, EKX₁IPY, IPYX₁EK X₁EKIPY, IPYEWX₁, EWX₁IPY IPYX₁VY, X₁VYIPY, IPYX₁PY, X₁PYIPY, IPYPRX₁, 그리고 PRX₁IPY 로 이루어진 군으로부터 선택되는 올리고펩티드에 관한 것으로, 여기서, X₁ 은 A, V, G, I, P, W, F, N, Q, T, R, K, E, D 및 Y로 이루어진 군으로부터 선택된다. 특히 바람직하기는, IEWIPY 올리고펩티드이다.

또 다른 구현예에서, 상기 올리고펩티드는 N-터미날에서 아세틸화되고, 팔미트산에 컨쥬게이트되고 또는 상기 올리고펩티드의 팔미트 산이다.

본 발명에 따른 상기 올리고펩티드 또는 본 발명에 따른 컨쥬게이트는 치료법, 특히 T-세포의 활성자 및/또는 시토킨의 유도 방출 및/또는 T-세포 의존 체액의 증가 및/또는 세포 면역 반응 및/또는 자가면역반응의 억제에 유용하다.

또 다른 구현예는 본 발명에 따른 올리고펩티드 또는 컨쥬게이트와 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물이다. 이 약제학적 화합물은 상기와 같은 동일한 치료적 목적에 사용될 수 있다.

선택적으로, 본 발명은 면역조절자로서 사용하기 위한, 바람직하기는 T-세포의 활성 및/또는 시토킨의 방출을 유도 및/또는 T-세포 의존 체액성 및/또는 세포성 면역 반응의 증가 및/또는 자가 면역 반응의 억제에 이용하기 위한, 의약을 제조하기위한 본 발명에 따른 올리고펩티드 또는 컨쥬게이트의 용도를 포함한다.

또 다른 본 발명의 일부는 백신에 본 발명의 약제학적 조성물을 첨가함에 의한, 백신의 면역원성을 증가시키는 방법이다.

본 발명의 추가의 부분은 본 발명에 따른 약제학적 조성물로 포유동물을 치료하는 방법에 관한 것으로, 여기서 상기 포유 동물은 바람직하기는, 인간, 소, 돼지, 양, 개, 고양이 및 동물원 동물로 이루어진 군으로부터 선택된다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 본 발명의 펩티드와 면역반응성을 강화시키려는 펩티드를 용융시킴에 의해 펩티드에 면역반응성을 제공하고 펩티드의 면역 반응성을 강화하는 것을 포함한다.

도 1은 면역화 후 마우스 혈청과 대조에서 (각각 IgG1, IgG2a, IgG2b 및 IgM의) 면역 글로불린 농도에 대한 B134 (트리펩티드 Ile-Pro-Tyr; 진한 회색선)와 B211 (올리고펩티드 IEWIPY, 밝은 회색선)의 효과를 나타낸다.

도 2는 B134 (진한 회색 막대) 또는 B211 (밝은 회색 막대)으로 백신화된 결과로서 변역 반응 관련 유전자(인터로킨, 시토킨 및 시토킨 수용체)의 발현에서의 변화를 나타낸다. 대조 표면을 0으로 맞추었다.

본 발명에 따른 올리고펩티드는 9개 아미노산의 최대 길이를 갖는 펩티드 고리를 통해 연결된 아미노산들로 이루어진 화학적 화합물이다. 올리고펩티드는 천연적으로 발생하는 아미노산(표 2 참조) 또는 노르로이신, 오르니틴, 노르발린, 스타틴, 데스모신, GABA, 사르코신, 이소데스모신, 알로-이소로이신, 베타-알라닌과 같은 비-천연적으로 발생하는 아미노산, 및 2-아미노아디프산, 3-아미노아디프산, 2-아미노부티르산, 피페리딘산, 6-아미노카프론산, 2-아미노헵타논산, 2-아미노이소브티르산, 3-아미노이소부티르산, 2-아미노피멜린산, 2,4-디아미노부티르산, 2,2'-디아미노피멜린산, 2,3-디아미노프로피온산, N-에틸글리신, N-에틸아스파라긴, 모든-히드록시라이신, 히드록시라이신, 3-히드록시프롤린, 4-히드록시프롤린, N-메틸이소로이신, 6-N-메틸라이신, N-메틸발린 및 기타와 같은 그들의 유도체로 이루어질 수 있다(추가의 예는 Hunt, S., The nonprotein amino acids. In: Chemistry and Biochemistry of the Amino Acids. Barrett, G. C. (ed.), Chapman and Hall, London, 1985를 참조). 추가로, 올리고펩티드는 모든 L 아미노산, 또는 모든 D 아 미노산 또는 그들의 조합을 포함할 수 있다. 또한 올리고펩티드의 염, 특히, 팔미드산염을 포함하고, 추가로 또한 올리고펩티드와 팔미트산의 컨쥬게이트를 포함한다.

본 출원에서, 펩티드는 하기 표에 따른 그들의 3글자 코드에 의해 또는 그들의 한글자 IUPAC 코드로 명시된다:

Table 2. 천연발생 아미노산 목록

알라닌 Ala A

아르기닌 Arg R

아스파라긴 Asn N

아스파르트산 Asp D

시스테인 Cys C

글루타민 Gln Q

글루타민산 Glu E

글리신 Gly G

히스티딘 His H

이소로이신 Ile I

로이신 Leu L

리신 Lys K

메티오닌 Met M

페닐알라닌 Phe F

프랄린 Pro P

세린 Ser S

트레오닌 Thr T

트립토판 Trp W

티로신 Tyr Y

발린 Val V

D- 또는 L-이소입체이성질체가 특별히 표시되면, 이것은 특별한 의미가 있고, 표시가 없으면, 아미노산은 L- 또는 D-이성질체일 수 있다.

일반식 X-Pro-Tyr (X-P-Y)를 갖는 트리펩티드가 면역조절 특성을 갖는다는 것을 발견하였고, 여기서 X는 Ile (I), Val (V), Ala (A), Trp (W), Pro (P), Leu (L), Phe (F), Gly (G), Glu (E) 및 Asn (N)로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고, 여기서 모든 아미노산은 개별적으로 D 또는 L 배열일 수 있다. 바람직하기는, 상기 트리펩티드는 IPY이고, 이것은 광범위하게 연구되었다(실험 부분 참조).

놀랍게도, 이 트리펩티드가 다른 펩티드와 연결되었을 때 자신의 면역조절 활성을 유지한다는 것을 또한 발견하였고, 여기서 이 펩티드는 또한 면역조절 활성을 갖거나 또는 갖지 않는다. 이것이 (펩티드 IEW와 같이) 면역조절 활성을 갖는다면, 헥사펩티드 IEWIPY 또는 IPYIEW는 모화합물 IEW에 관하여 강화된 면역활성을 나타낼 것이다. IPY 트리펩티드가, 그것이 연결된 펩티드의 N-터미날 또는 C-터미날에 위치하는가에 따른 큰 차이는 보이지 않는다. 그러나, 바람직한 군은 그들의 N-터미날에 IPY를 갖는 펩티드의 군이다. 본 발명에서 복잡하지만, 트리펩티드는 연결된 펩티드의 터미날에 위치되어야 할 필요가 없고, 이것이 환경에 노출될 수 있는 위치에 존재하고 따라서 그것의 기능을 발휘하는 조건으로, 펩티드 서열 내의 트리펩티드를 처리하는 것도 가능하다. 또한, 물론 또 다른 펩티드에 트리펩티드의 도입은 필요하다면, 다른 펩티드의 원 기능을 원래대로 남겨두어야 한다.

펩티드 항원 또는 에피토프에 연결될 때, 이것은 면역 시스템이 상기 항원 또는 에피토프에 항체의 증식을 개시하도록 강화할 것이다. 그러므로, 트리펩티드는 백신화를 위한 면역반응을 증대시키기 위한 이상적인 아주반트이고, 투여의 용이 및 안정성을 위해 트리펩티드는, 그들이 단백질성이라면 항원/에피토프에 연결될 수 있다.

본 발명의 트리펩티드를 포함하는 올리고펩티드의 특정예는 IPYKTTKS, KTTKSIPY, IPYVGVAPG, VGVAPGIPY, IPYVGV, VGVIPY, IPYIEW, IEWIPY, EWIPY, IPYKE, KEIPY, IPYKPR, KPRIPY, IPYTEPR, TEPRIPY, IPYKD, KDIPY, IPYKNPY, KNPYIPY, IPYKNPW, KNPWIPY, IPYTKPR, IPYGQPR, IPYTAEEK5 IPYALTTE, IPYRKEVY, GPAIPY, KDIPIPY, TQPIPY, GQPIPY, TAEIPY, ALTIPY, RKEIPY, IPYEKX₁, EKX₁IPY, IPYX₁EK, X₁EKIPY, IPYEWX₁, EWX₁IPY, IPYX₁VY, X₁VYIPY, IPYX₁PY, X₁PYIPY, IPYPRX₁, 및 PRX₁IPY이고, 여기서 X₁는 A, V, G, I, P, W, F, N, Q, T, R, K, E, D 및 Y로 이루어진 군으로부터 선택된다. 당업자가 이해하는 바와 같이, 목록의 많은 올리고머들은(주요 헥사펩티드) 표 1의 목록에 있고, 즉 그들은 증명된 면역학상의 효과를 갖는 공지의 올리고펩티드이다. 비록 상기 목록은 IPY와의 결합만을 언급하지만, 일반적으로, IPY가 본 발명의 트리펩티드, 즉 일반식 X-Pro-Tyr (X-P-Y)을 갖는 것들로 대체된 모든 조합물들은 면역조절 특성을 갖고, 여기서 X는 Val (V), Ala (A), Trp (W), Pro (P), Leu (L), Phe (F), Gly (G), Glu (E) 및 Asn (N)로 이루어진 군으로부터 선택되고, 그리고 여기서 모든 아미노산은 개별적으로 D 또는 L 배열을 가질 수 있다. 이들 조합물 펩티드의 경우, 생성된 펩티드는 올리고펩티드일 필요는 없다. 특히 트리펩티드가 항원과 결합하는 경우, 생성된 펩티드는 어떠한 길이도 가능하다.

본 발명의 펩티드 또는 펩티드 유도체는 합성적으로 생산되거나 또는 통상의 방법에 의해 적용가능한 재조합에 의해 생산될 수 있다. 특정 구현예의 올리고펩티드를 하기 실험 부분에 상세히 기재하였다. 바람직하기는 본 발명의 올리고펩티드는, 예를 들면, Merrifield (J. Am. Chem. Soc. (1963) 85:2149-2154)에 의해 기재된 바와 같은, 공지의 화학합성기술에 의해 통상적으로 제조된다.

선택적으로, 본 발명의 (올리고)펩티드는 숙주 미생물 또는 세포 내에서 상기 펩티드 중 하나를 암호화하는 핵산 서열을 운반하는 DNA 단편을 암호화하고 발현함에 의해 재조합 DNA 기술로 생산될 수 있다. 핵산 암호화 서열은 합성적으로 제조될 수 있고, 또는 부위-지향된 돌연변이에 의해 기존 핵산 서열로부터 유래될 수 있다. 이들 핵산 서열은 그리고 나서 적합한 발현 벡터로 암호화될 수 있고 그리고 E. coli, 바실루스, 락토바실루스, 스트렙토미스와 같은 적합한 숙주 세포, (CHO , HEK 또는 COS-I세포와 같은) 포유동물 세포, 이스트(예를 들면, 사카로미시스, 키조필룸), 곤충세포 또는 바쿨로바이러스 시스템과 같은 바이러스 발현 시스 템에서 변형 또는 트란스펙션될 수 있다. 본 분야의 당업자는 핵산 서열을 구성하고 그들의 발현을 가능하게 하는 수단을 제공하는 기술에 대한 지식이 있을 것이다.

또한 유전적 엔지니어링 기술을 통해 펩티드에 (D-아미노산과 같은) 비-천연적으로 발생하는 아미노산을 포함시키는 것이 가능하다. 이것은 Noren et al., Science 244:182 (1989) 및 Ellman et al Meth. Enzymol. 202:301 (1991)에 광범위하게 기재되어 있다. 그 후에, 펩티드는 숙주세포의 배양물로부터 단리될 수 있다. 이것은 본 분야에서 적용가능한 통상의 단백질 정제 및 단리 기술에 의해 달성될 수 있다. 이와 같은 기술은 예를 들면, 면역흡착 또는 크로마토그래피를 포함한다. 합성 중 (히스티딘 태그와 같은) 태그를 갖는 펩티드를 제공하는 것도 가능하고, 이것은 신속한 결합과 정제를 가능하게 하고, 그 이후 태그는 활성 펩티드를 얻기 위해 효소적으로 제거된다.

펩티드 자체가 암호화되거나 발현될 수 없지만, 암호화되거나 발현될 수 있는 펩티드와 매우 유사하다면, 상기 방법은 펩티드와 유사한 펩티드를 제조하는데 적용될 수 있고, 이어서 상기 펩티드를 최종 펩티드를 제조하기 위해 화학적 또는 효소적 기술로 변화시키는 하나 이상의 단계가 적용된다.

올리고펩티드는 또한 펩신, 파라인 등과 같은 광분해 효소를 사용하여 긴 펩티드로부터 올리고 펩티드를 쪼개어 얻을 수 있다.

펩티드를 제조하는데 사용될 수 있는 몇몇 추가의 광범위한 요약은 다음에 기재된다: W. F. Anderson, Nature 392 Supp., 30 April 1998, p. 25-30; Pharmaceutical Biotechnology, Ed. D. J. A. Crommelin and R. D. Sindelar, Harwood Academic Publishers, 1997, p. 53-70, 167-180, 123-152, 8-20; Protein Synthesis: Methods and Protocols, Ed. R. Martin, Humana Press, 1998, p. 1-442; Solid-Phase Peptide Synthesis, Ed. G. B. Fields, Academic Press, 1997, p. 1-780; Amino Acid and Peptide Synthesis, Oxford University Press, 1997, p. 1-89.

청구항 1 내지 3 중 어느 한 항에 따른 신규한 펩티드는 본 분야의 당업자에 의해 쉽게 제조될 수 있다.

본 발명의 특정 구현예는 본 발명의 어느 올리고펩티드를 팔미트산(헥사데카논산, C₁₆H₃₂O₂)의 컨쥬게이트 또는 올리고펩티드와 팔미트산의 반응에 의해 형성된 염에 의해 형성된다. 이와 같은 컨쥬게이션은 피부와 다른 상피 조직을 통해 본 발명의 펩티드의 더 나은 투과를 허용한다. 유사하기는, N-터미날에서 아미노산이 아세틸화될 수 있다. 그러므로, 또한 본 발명의 바람직한 일부는 트리펩티드 IPY이고, 여기서 이소로이신 모이어티가 아세틸화되고, 또는 상기 펩티드가 팔미트산 또는 필리트산염 형태의 펩티드에 컨쥬게이트된다.

본 발명의 약제학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양의 본 발명의 하나 이상의 올리고펩티드 또는 컨쥬게이트를 포함한다. 일단 제제화되면, 본 발명의 약제학적 조성물은 치료적으로 유효한 양으로 그것을 필요로 하는 주체에게 직접 투여될 수 있다.

본 조성물의 직접 전달은 국소 적용 또는 경구적, 비경구적, 피하적, 설하, 비강내, 병변내, 복막내, 정맥내 또는 근육내, 폐내 또는 조직의 세포간 공간으로의 전달과 같은 다른 투여 형태로 일반적으로 수행된다.

약제학적 조성물은 또한 적합한 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하고, 캡슐제, 정제, 트로치제, 당과제, 필제, 드롭스제, 좌약제, 분말제, 분사제, 백신, 연고제, 페이스트제, 크림제, 흡입제, 패치제, 에어로졸제 등의 형태일 수 있다. 약제학적으로 허용가능한 담체로서, 특정 투약 형태에 가장 적합하고 펩티드 또는 펩티드 컨쥬게이트와 양립할 수 있는, 어느 용매, 희석제 또는 다른 액체 비히클, 분산 또는 현탁보조제, 표면활성제, 등장제, 증점제 또는 유화제, 보존제, 캡슐화제, 고형 결합제 또는 광택제가 사용될 수 있다.

그러므로, 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용가능한 담체를 함유할 수 있다. 용어 "약제학적으로 허용가능한 담체"는 또한 항체 또는 폴리펩티드와 같은 치료적 약제, 유전자 및 다른 치료적 약제의 투여를 위한 담체를 포함한다. 상기 용어는 스스로는 면역학적 효과를 갖지 않는 어느 약제학적 담체를 말하고, 이것은 불필요한 독성이 없이 투여될 수 있다. 적합한 담체는 단백질, 당, 폴리락트산, 폴리글리콜산, 중합성 아미노산, 아미노산 공중합체 및 불활성 바이러스 입자와 같은 크고 느리게 대새하는 거대 분자일 수 있다. 이와 같은 담체는 본 분야의 당업자에게 잘 알려져 있다.

올리고펩티드 또는 컨쥬게이트의 염은 공지의 방법으로 제조되고, 이것은 통상적으로 펩티드 또는 컨쥬게이트를 약제학적으로 허용가능한 산과 혼합하여 산부 가염을 형성하거나 또는 약제학적으로 허용가능한 염기와 혼합하여 염기 부가염을 형성하는 것을 포함한다. 산 또는 염기가 약제학적으로 혀용가능한지는 고려하는 화합물의 특정의 의도된 용도를 고려하여 본 분야의 당업자에 의해 쉽게 결정될 수 있다. 예를 들면, 엑스 비보 적용에 받아들일 수 있는 모든 산과 염기가 치료적 조성물로 사용되지 않고, 국소적으로 적용할 수 있는 모든 산과 염기가 비경구적으로 적용될 수 있지 않다. 의도된 용도에 따라, 약제학적으로 허용가능한 산은 포름산, 아세트산, 프로피온산, 락트산, 글리콜산, 옥살산, 피루브산, 숙신산, 말레산, 말론산, 시나민산, 술폰산, 염화수소산, 브롬화수소산, 질산, 과염소산, 인산 및 티오시안산과 같은 유기 및 무기산을 포함하고, 이것은 펩티드와 컨쥬게이트의 유리 아미노기와 암모늄 염을 형성한다. 특히 바람직하기는, 본 발명의 올리고펩티드의 염을 생성하기 위한 팔미트산이다. 펩티드의 유리 카르복실기와 기능적 등가물과 카르복실산염을 형성하는, 약제학적으로 허용가능한 염은 에틸아민, 메틸아민, 디메틸아민, 트리에틸아민, 이소프로필아민, 디이소프로필아민, 및 다른 모노-, 디- 그리고 트리알킬아민 뿐 아니라 아릴아민을 포함한다. 더우기, 또한 약제학적으로 허용가능한 용매화합물이 포함된다.

본 발명에서 약제학적으로 허용가능한 염으로, 예를 들면, 염화수소산, 브롬화수소산, 인산, 황산 등과 같은 미네랄산염; 그리고 아세테이트, 프로피오네이트, 말로네이트, 벤조에이트와 같은 유기산의 염을 사용할 수 있다. 약제학적으로 허용가능한 부형제의 완전한 논의는 Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Pub. Co., N.J. 1991)에서 이용할 수 있다.

치료적 조성물에서 약제학적으로 허용가능한 담체는 물, 살린, 글리세롤 및 에탄올과 같은 액체를 함유할 수 있다. 이에 더하여, 습윤제, 유화제, pH 완충물질, 등과 같은 보조적 물질이 이와 같은 비히클에 존재할 수 있다. 통상적으로, 치료적 비경구 조성물은 액체 용액 또는 현탁액으로서 주사가능하게 제조되고; 주사되기 전에 액체 비히클 중의 용액 또는 현탁액으로 적합한 고체 형태로 제조될 수 있다. 리포솜이 약제학적으로 허용가능한 담체의 정의 내에 포함된다.

치료적 처리를 위해, 올리고펩티드 또는 컨쥬게이트가 상기와 같이 생산될 수 있고 그것을 필요로 하는 주체에 적용될 수 있다. 펩티드 또는 펩티드-컨쥬게이트는 어느 적합한 경로에 의해, 바람직하기는 그와 같은 경로에 적합된 약제학적 조성물의 형태로 그리고 의도된 치료에 효과적인 투여량으로 주체에 투여될 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 (예를 들면, 통상의 백신에서 사용되는) 항원 또는 에피토프와 같은 다른 활성약제 또는 표 1의 어느 펩티드와 같은 다른 면역학적 활성 화합물을 함유할 수 있다. 또한, (AZT와 같은) 항-바이러스 약제, (GM-CSF EPO와 같은) 항-빈혈제와의 결합도 본 발명에 속한다고 간주된다. 가장 바람직하기는, 본 발명의 펩티드는 백신과 공동-투여된다. 상기와 같이, 펩티드는 또한 상기 면역학적 활성 화합물과 컨쥬게이트되거나 또는 다른 결합될 수 있다.

인간 또는 동물 주체의 신체에서 면역조절반응을 일으키는데 요구되는 펩티드 또는 펩티드-컨쥬게이트의 치료적으로 유효한 투여량은, 예를 들면 동물 모델을 사용하여, 당업자에 의해 쉽게 결정될 수 있다.

본 명세서에 사용되는 바에 따른 용어 "치료적으로 유효한 양"은 치료적 양, 즉 면역조절 반응을 나타내기 위한, 본 발명에 따른 올리고펩티드 또는 펩티드-컨쥬게이트의 양을 말한다. 본 분야의 당업자는 본 실시예에 증명된 바와 같이, 체액성 면역 반응 또는 여러 유전자의 활성화를 위한 세포 활성화를 결정함에 의해 면역조절 작용을 나타내도록 요구되는 펩티드의 양을 결정할 수 있다. 주체에 대한 정확한 유효량은 주체의 크기와 건강, 병태의 특성 및 정도 그리고 투여를 위해 선택된 약제 또는 약제 조합물에 의존 할 것이다. 그러므로, 미리 정확한 유효량을 명시하는 것은 유용하지 않다. 그러나, 주어진 상황에 대한 유효량은 반복적인 실험과, 임상의학자와 실험자의 판단으로 결정될 수 있다. 특히, 본 발명의 조성물은 T-세포 활성화 및/또는 시토킨 방출 유도 및/또는 T-세포 의존 분비선 및/또는 세포형 면역 반응의 증가 및/또는 면역반응의 감소에 의해, 예를 들면, 자가면역반응의 억제에 의해, 포유동물, 바람직하기는 인간, 또는 개, 고양이, 돼지, 소 등과 같은 가축에서의 면역반응을 강화하는데 사용될 수 있다. 임상의학자가 초기 투여량을 확립하도록 하는 방법들은 본 분야에 알려져 있다. 투여되도록 결정된 투여량은 안전하고 효과가 있어야 한다.

본 발명의 목적을 위해, 유효한 투여량은 투여될 개인 또는 동물에서 올리고펩티드 또는 펩티드-컨쥬게이트의 약 0.01 μg/kg 내지 50 mg/kg, 바람직하기는 0.5 μg/kg 내지 약 10 mg/kg이다. 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물의 치료적 효과를 달성하기 위한 투여량은 당업자에 의해 쉽게 결정될 수 있다.

본 발명의 또 다른 구현예에서, 본 발명의 올리고펩티드 또는 펩티드-컨쥬게 이트 또는 조성물들은 주체의 신체에 삽입된 조절된 또는 지속된 방출 매트릭스로부터 투여될 수 있다.

본 발명의 화합물을 점막관통(transmicosal) 제형으로 투여하는 것이 유리할 것이다. 이 투여 경로는 비침투성 및 환자-적합성이고; 특히 상처와 통증의 치료에 있어서, 특히 화합물이 소화계의 유체에서 안정하지 않거나 또는 장으로부터 효과적으로 흡수되기에 너무 큰 경우, 경구 투여와 비교하여 화합물의 개선된 생체적합성을 가져온다. 점막관통 투여는, 예를 들면, 코, 볼, 설하, 잇몸 또는 질내 제형을 통해 가능하지만, 특히 이 적용에서는 상처-치료 효과를 개량하기 위해 개방된 상처에 투여하는 것을 예상할 수 있다. 이들 제형은 공지의 기술에 의해 제조될 수있다; 이들은 대표적인 비내 드롭스 또는 분사제, 삽입제, 필름제, 패치제, 겔제, 연고제, 또는 정제로 제형화될 수 있다. 바람직하기는, 점막관통 제형에 사용하기 위한 부형제는 점막점착을 제공하고, 따라서 제형이 흡수 부위에 접촉하는 시간을 연장시키고, 그것에 의해 흡수 정도를 잠재적으로 증가시키는 하나 이상의 물질을 포함할 수 있다.

추가의 구현예에서, 화합물은 계량된 투여 흡입기, 분무기, 에어로졸 분사기, 또는 건식분말 흡입기를 사용하여 폐 경로를 통해 투여될 수 있다. 이러한 종류의 투여형은 백신화의 경우 탁월하게 적용할 수 있다. 적합한 제형화는 공지의 방법과 기술에 의해 제조될 수 있다. 피부에 바르는, 직장, 또는 눈 투여는 몇몇 경우에 실행할 수 있다. 비-비경구 투여 경로가 선택된다면, 적절한 제형은 생체적합성 강화제를 함유할 수 있고, 이것은 화합물의 가용성을 증가시키는 어느 물질 또는 물질들의 혼합물일 수 있다. 이것은 예를 들면, 효소 억제제 또는 항산화제에 의해서와 같은, 열화로부터 화합물을 보호함으로써 달성될 수 있다. 더욱 바람직하기는, 강화제는, 통상적으로 점막층인, 흡수 장벽의 투과성을 증사시킴에 의해 화합물의 생체적합성을 증가시킨다. 투과 강화제는 여러 메카니즘을 거쳐 작용할 수 있다; 몇몇은 점막의 유동성을 증가시키는 반면, 다른 것은 점막 세포간의 틈 결합을 열거나 넓힌다. 또 다른 것은 점막세포층을 덮는 점액의 점도를 감소시킨다. 생체적합성 강화제 중에서 콜산 유도체, 포스포리피드, 에탄올, 지방산, 올레산, 지방산 유도체, EDTA, 카르보머, 폴리카르보필, 및 키토산과 같은 양쪽 친매성 물질이 바람직하다

실시예에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 올리고펩티드는 T-헬퍼 세포 의존 항원에 대한 면역 반응의 정상 과정과 관련된 유전자의 활성을 통해 체액성 면역반응의 수준을 증가시킴에 의해, 면역 시스템의 활성에 관하여 강한 면역조절 활성을 갖는다는 것을 발견하였다.

그러므로, 이것은 본 발명의 올리고펩티드가 T-세포의 활성화에 적용될 수 있고, 그것에 의해 시토킨의 방출을 유도하고, 그것에 의해 다른 면역학적 및 비-면역학적 세포 개체군의 활성에 영향을 미칠 수 있다는 것을 의미한다. 특히, 본 발명의 올리고펩티드는 면역학적 세포 개체군의 증식, 분화 및 활성화를 자극할 수 있다는 것을 발견하였다.

이것을 치료적으로 적용할 수 있는 적용 중 하나는 상피 조직에 있는 T-세포에 영향을 미치고, 여기서 이들 T-세포는 상피세포의 성장, 상처 치유 및 머리카락 성장과 같은 과정을 수행한다. 또 다른 적용은 T 세포에 대한 효과를 외부 항원에 대한 체액성 및 세포성 면역 반응을 높이는데 사용하는 것이다. 이것은 올리고펩티드를 면역반응을 증가시키기 위해 백신의 아주반트로 사용할 수 있다는 것을 의미한다. 그러므로, 본 발명의 펩티드는 모든 세균성 및/또는 바이러스성 감염에 사용될 수 있다. 이 용도는 치료적이지만, 또한 본 발명의 펩티드의 예방적 투여도 예상된다. 후자의 경우, 면역학적 저항의 일반적인 증가를 얻을 수 있을 것이다.

펩티드는 또한 면역 시스템을 자극할 수 있기 때문에, 인간을 포함하여 포유동물에 유용하다. 수의학적 적용에서, 이것은 돼지, 소, 고양이, 개, 말 그리고 동물원 동물과 같은 가축에 특히 유용하다.

더우기 본 발명의 올리고펩티드는 자가면역 질병의 치료에서 중요한 역할을 할 수 있다.

본 발명은 다음의, 비-제한적 예에 의해 설명될 수 있다.

실시예

실시예 1. 마우스의 T-세포 의존성 항원에 대한 체액성 면역 반응에서 B134 및 B211의 효과.

펩티드 Ile-Pro-Tyr(IPY, B134) 및 IEWIPY(B211)가 본 출원에 포함되는 펩티드계에 대한 생물학적 활성의 예시로 제공되었다.

B134의 효과를 조사하기 위하여, XPY계, 근교계 SPF 마우스(Balb/cAwNCrl, 7 내지 8 주 령, Charles River Laboratories GmbH, Germany) 표본을 KLH, T-세포 의존성 항원으로 면역화하였다. 한 그룹 당 3마리의 마우스를 완전 프로인트 아주반 트 (50/50 v/v)의 존재하에 피하에 주사하였다. 항원(100μl 중 20μg)과 면역보강제(Sigma, #F-5881)의 혼합물을 유화시켜 목부위에 주사하였다. 같은 날 20μg의 면역조절제 B134 또는 B211를 200μl의 PBS에 복막내 주사하였다. 혈액 시료 (50 내지 70μl)를 마우스의 하지정맥으로부터 7, 14, 21, 및 28일에 채취하였다. 혈청 시료를 마우스의 하지정맥으로부터 7, 14, 21, 및 28일에 채취하였다. 혈청은 37℃에서 2시간 동안 혈액을 응고시켜 제조하고, 그 다음 8℃에서 18시간 동안, Eppendorf-형 원심분리기로 10,000rpm에서 원심분리 하였다. 혈청을 4℃에서 항체 안정제(SkyTec ABB500)로 희석하여 저장하고, 동시에 ELISA로 분석하였다. 마지막 분석의 경우, 96 웰 ELISA 플레이트 (Greiner, #655061)를 4℃에서 하룻밤, 인산염 용액(PBS), 0.2μg/웰 에서 KLH (용해성, Sigma H7017)로 도포하였다. 희석된 혈청을 실온에서 1시간 동안 항원(200μg/웰)과 배양하고, 그 다음 PBS/0.1% Tween-20으로 세척하였다. KLH에 마우스 항체의 결합을 제조자의 프로토콜에 따라 HRP (Southern Biotechnology Ltd., 항-마우스 IgM #1021-05, 항-마우스 IgGl #1070-05, 항-마우스 IgG2a # 1080-05, 항-마우스 IgG2b #1090-05)와 결합된, 동종형 특이 항-마우스 면역글로불린을 이용하여 검출하였다. TMB를 기질로서 사용하였다. 결과를 Bio-Rad Microplate Reader Model 550으로 분석하고, 광학밀도를 595nm에서 측정하였다.

도 1에 보여주는 결과는 실험 마우스에서 채취한 혈청의 적정 경사를 나타낸다. 사용된 혈청의 희석도는 단계1/2(각각 X축 1 내지 6을 가리킴)를 갖는 1/300 내지 1/20,000이다. 혈청 반응성은 ELISA에서 시료로 나타낸 O. D.로 제공된다. 점 은 3개의 혈청에서 채취한(조건 당 3마리의 마우스에서 채취한) 시료의 평균 반응성을 나타낸다. 편차 막대는 95% 신뢰구간을 나타낸다.

도 1로부터 알 수 있는 바와 같이, 단일 주사 후 28일에 특이 항체 역가는 실질적으로 면역글로불린으로 면역화된 마우스와 면역글로불린으로 면역화되지 않은 마우스 사이에서 다르다. 따라서, B211의 존재하에 면역화된 마우스로부터 채취한 혈청의 특이 IgGl의 역가는 약 16 시간 이상이고, 게다가 IgG2a 및 IgG2b의 역가는 항원으로만 면역화된, 대조 마우스의 4 시간 이상이었다. B134의 경우 차이는 분석된 모든 동종형보다 약 2 시간 이상이었다.

실시예 2. PCR 분석으로 측정된 바와 같이 마우스 비장세포의 유전자 발현에서 B134의 효과.

근교계 SPF Balb/c 마우스 (암컷, 12주령)를 항원이나 펩티드 또는 항원 및 펩티드의 혼합물로 주사하였다. 주사의 경우, 25μg의 펩티드를 250μl의 멸균 PBS에 용해하였다. 주사는 인슐린 바늘을 사용하여 목 주위의 피하에 수행하였다. 대조 마우스는 PBS로만 주사하였다. 항원 주사의 경우: 250μl의 멸균 양 적혈구 세포(SRBC from Quad Five inc., Cat # 643-100) 부유액을 옆구리의 복막내에 주사하였다. 부유액을 PBS로 2회 세척된 2 ml의 원천 부유액으로 제조하고, 2 ml에서 다시 부유하였다. 10 μl의 50% 부유액을 250 μl의 PBS에서 희석하고 주사하였다. 48시간 후 마우스를 죽이고 비장을 추출하여 RNALater (Ambion Inc., Cat # 7021)에 담그고 즉시 RNALater의 추출 시료 위를 -70℃에서 동결하고 RNA를 추출할때까지 온도를 유지시킨다. RNA 추출 및 PCR 배열 분석은 그들이 만든 프로토 콜(www.superarray.com)에 따라 SuperArray Inc의 서비스로 수행하였다.

결과

PCR 데이타를 기초로하여 mRNA 발현의 변화는 발현에 대한 대조 수준의 차이가 3배(증가뿐 아니라 감소) 이상이면 통계적으로 중요하다는 것을 발견하였다. 84개의 유전자에 대한 발현 분석으로부터, 모든 시료에 있는 유전자의 75 내지 85% 수준은 통계적으로 대조 시료 (항원뿐 아니라 면역글로불린 (나타내지 않음)이 아닌 PBS로 주사된 마우스의 비장)와 다르지 않았다. 명확한, 통계적으로 중요한 차이는 사이토키닌 및 케모키닌 유전자의 갯수, 및 각 수용체 IL-4, IL-Il, Sppl, IL-10EA 및 작은 범위 IL- If6, IL-13, IL- 17b, IL-20, IL-6 및 IL-IRl에서 발견되었다.

표 1. 공지된 펩티드

Claims

의약에서의, 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 올리고펩티드의 용도:

a) 일반식 X-Pro-Tyr (X-P-Y)의 트리펩티드 (여기서 X는 Ile (I), Val (V), Ala (A), Trp (W), Pro (P), Leu (L), Phe (F), Gly (G), Glu (E) 및 Asn (N)로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있고, 여기서 모든 아미노산은 개별적으로 D 또는 L 배열일 수 있다);

b) N-터미날에 상기 트리펩티드를 포함하는 올리고펩티드; 그리고

c)IPYKTTKS, KTTKSIPY, IPYVGVAPG, VGVAPGIPY, IPYVGV, VGVIPY, IPYIEW, IEWIPY, EWIPY, IPYKE, KEIPY, IPYKPR, KPRIPY, IPYTEPR, TEPRIPY, IPYKD, KDIPY, IPYKNPY, KNPYIPY, IPYKNPW, KNPWIPY, IPYTKPR, IPYGQPR, IPYTAEEK, IPYALTTE, IPYRKEVY, GPAIPY, KDIPIPY, TQPIPY, GQPIPY, TAEIPY, ALTIPY, RKEIPY, IPYEKX₁ EKX₁IPY, IPYX₁EK, X₁EKIPY, IPYEWX₁, EWX₁IPY, IPYX₁VY, X₁VYIPY, IPYX₁PY, X₁PYIPY, IPYPRX₁, 및 PRX₁IPY으로 이루어진 군으로부터 선택되는 올리고펩티드 (여기서, X₁은 A, V, G, I, P, W, F, N, Q, T, R, K, E, D 및 Y로 이루어진 군으로부터 선택된다).
제1항에 있어서, 상기 올리고펩티드는 면역조절자로서, 바람직하기는 T-세포의 활성자 및/또는 시토킨 방출 및/또는 T-세포 의존 체액성 및/또는 세포성 면역 반응의 증가를 위한 유도자 및/또는 자가면역반응의 억제자로서 사용되는 것인 용도.
면역조절자로서 사용하기 위한 의약, 바람직하기는 T-세포의 활성 및/또는 시토킨의 방출을 유도 및/또는 T-세포 의존 체액성 및/또는 세포성 면역 반응의 증가 및/또는 자가면역반응의 억제에 사용하기 위한 의약의 제조를 위한, 하기로 이루어진 군으로부터 선택되는 올리고펩티드의 용도:

a) 일반식 X-Pro-Tyr (X-P-Y)의 트리펩티드 (여기서 X는 Ile (I), Val (V), Ala (A), Trp (W), Pro (P), Leu (L), Phe (F), Gly (G), Glu (E) 및 Asn (N)으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다), 여기서 모든 아미노산은 개별적으로 D 또는 L 배열일 수 있다);

b) N-터미날에 상기 트리펩티드를 포함하는 올리고펩티드; 그리고

c)IPYKTTKS, KTTKSIPY, IPYVGVAPG, VGVAPGIPY, IPYVGV, VGVIPY, IPYIEW, IEWIPY, EWIPY, IPYKE, KEIPY, IPYKPR, KPRIPY, IPYTEPR, TEPRIPY, IPYKD, KDIPY, IPYKNPY, KNPYIPY, IPYKNPW, KNPWIPY, IPYTKPR, IPYGQPR, IPYTAEEK, IPYALTTE, IPYRKEVY, GPAIPY, KDIPIPY, TQPIPY, GQPIPY, TAEIPY, ALTIPY, RKEIPY, IPYEKX₁ EKX₁IPY, IPYX₁EK, X₁EKIPY, IPYEWX₁, EWX₁IPY, IPYX₁VY, X₁VYIPY, IPYX₁PY, X₁PYIPY, IPYPRX₁, 및 PRX₁IPY으로 이루어진 군으로 부터 선택되는 올리고펩티드(여기서, X₁은 A, V, G, I, P, W, F, N, Q, T, R, K, E, D 및 Y로 이루어진 군으로부터 선택된 다).
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 올리고펩티드는 팔미트산염이고 또는 상기 올리고펩티드는 변형되고 그리고 상기 변형은 팔미트산과의 컨쥬게이션 및 N-터미날 아세틸화의 군으로부터 선택되는 것인 용도.
일반식 X-Pro-Tyr (X-P-Y)의 트리펩티드로, 여기서 X는 Ile (I), Val (V), Ala (A), Trp (W), Pro (P), Leu (L), Phe (F), Gly (G), Glu (E) 및 Asn (N)으로 이루어진 군으로부터 선택되고 그리고 여기서 최소한 하나의 아미노산은 D 배열인 트리펩티드.
트리펩티드 Ile-Pro-Tyr 또는 상기 트리펩티드의 팔미트산 염으로, 여기서 N-터미날 이소로이신은 임의로 아세틸화거나 또는 상기 아미노산 중 어느 것은 임의로 팔미트산에 컨쥬게이트된 것인 트리펩티드.
N-터미날에 일반식 X-Pro-Tyr (X-P-Y)의 트리펩티드를 포함하는 올리고펩티드로, 여기서 X는 Ile (I), Val (V), Ala (A), Trp (W), Pro (P), Leu (L), Phe (F), Gly (G), Glu (E) 및 Asn (N)으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 모든 아미노산은 개별적으로 D 또는 L 배열인 올리고펩티드.
IPYKTTKS, KTTKSIPY, IPYVGVAPG, VGVAPGIPY, IPYVGV, VGVIPY, IPYIEW, IEWIPY, EWIPY, IPYKE, KEIPY, IPYKPR, KPRIPY, IPYTEPR, TEPRIPY, IPYKD, KDIPY, IPYKNPY, KNPYIPY, IPYKNPW, KNPWIPY, IPYTKPR, IPYGQPR, IPYTAEEK, IPYALTTE, IPYRKEVY, GPAIPY, KDIPIPY, TQPIPY, GQPIPY, TAEIPY, ALTIPY, RKEIPY, IPYEKX₁ EKX₁IPY, IPYX₁EK, X₁EKIPY, IPYEWX₁, EWX₁IPY IPYX₁VY, X₁VYIPY, IPYX₁PY, X₁PYIPY, IPYPRX₁ 및 PRX₁IPY으로 이루어진 군으로부터 선택되는 올리고펩티드로, 여기서 X₁ 은 A, V, G, I, P, W, F, N, Q, T, R, K, E, D 그리고 Y로 이루어진 군으로부터 선택되는 올리고펩티드.
올리고펩티드 IEWIPY.
제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 N-터미날 아미노산은 아세틸화되거나 또는 상기 아미노산 중 어느 것은 팔미트산에 컨쥬게이트되는 올리고펩티드 또는 상기 올리고펩티드의 팔미트산염.
하기의 올리고펩티드와 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물로, 상기 올리고펩티드는

a) 일반식 X-Pro-Tyr (X-P-Y)의 트리펩티드 (여기서 X는 Ile (I), Val (V), Ala (A), Trp (W), Pro (P), Leu (L), Phe (F), Gly (G), Glu (E) 및 Asn (N)로 이 루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 모든 아미노산은 개별적으로 D 또는 L 배열이다); 또는

b) N-터미날에 상기 트리펩티드를 포함하는 올리고펩티드; 또는

c)IPYKTTKS, KTTKSIPY, IPYVGVAPG, VGVAPGIPY, IPYVGV, VGVIPY, IPYIEW, IEWIPY, EWIPY, IPYKE, KEIPY, IPYKPR, KPRIPY, IPYTEPR, TEPRIPY, IPYKD, KDIPY, IPYKNPY, KNPYIPY, IPYKNPW, KNPWIPY, IPYTKPR, IPYGQPR, IPYTAEEK, IPYALTTE, IPYRKEVY, GPAIPY, KDIPIPY, TQPIPY, GQPIPY, TAEIPY, ALTIPY, RKEIPY, IPYEKX₁ EKX₁IPY, IPYX₁EK, X₁EKIPY, IPYEWX₁, EWX₁IPY, IPYX₁VY, X₁VYIPY, IPYX₁PY, X₁PYIPY, IPYPRX₁,및 PRX₁IPY으로 이루어진 군으로부터 선택되는 올리고펩티드 (여기서 X₁ 는A, V, G, I, P, W, F, N, Q, T, R, K, E, D 및 Y로 이루어진 군으부터 선택된다); 또는

d) 상기 a), b) 및 c) 기재된 어느 올리고펩티드의 팔미트산염; 또는

e) 상기 a), b) 또는 c)에 기재되고, 변형된 올리고펩티드 (여기서 상기 변형은 팔미트산과 컨쥬게이트화와 N-터미날 아세틸화로 이루어진 군으로부터 선택된다)인 약제학적 조성물.
트리펩티드 IPY와 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
올리고펩티드 IEWIPY와 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
제11항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 약제학적 조성물을 포함하는 백신.
제11항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 포유동물의 면역 시스템을 강화하는 방법.
제15항에 있어서, 상기 포유동물은 인간, 소, 돼지, 양, 개, 고양이 그리고 동물원 동물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인 방법.
제11항 내지 제13항 중 어느 한 항에 따른 약제학적 조성물을 상기 백신 조성물에 첨가함에 의해 백신 조성물의 면역원성 활성을 증가시키는 방법.
펩티드를 다음으로 이루어진 군으로부터 선택되는 올리고펩티드와 융합함에 의해 펩티드에 면역반응성을 부여하거나, 펩티드의 면역반응성을 강화하는 방법:

a) 일반식 X-Pro-Tyr (X-P-Y)의 트리펩티드 (여기서 X는 Ile (I), Val (V), Ala (A), Trp (W), Pro (P), Leu (L), Phe (F), Gly (G), Glu (E) 및 Asn (N)으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 모든 아미노산은 개별적으로 D 또는 L 배열 이다);

b) N-터미날에 상기 트리펩티드를 포함하는 올리고펩티드;

c) IPYKTTKS, KTTKSIPY, IPYVGVAPG, VGVAPGIPY, IPYVGV, VGVIPY1 IPYIEW, IEWIPY, EWIPY, IPYKE, KEIPY, IPYKPR, KPRIPY, IPYTEPR, TEPRIPY, IPYKD, KDIPY, IPYKNPY, KNPYIPY, IPYKNPW, KNPWIPY, IPYTKPR, IPYGQPR, IPYTAEEK, IPYALTTE, IPYRKEVY, GPAIPY, KDIPIPY, TQPIPY, GQPIPY, TAEIPY, ALTIPY, RKEIPY, IPYEKX₁, EKX₁IPY, IPYX₁EK, X₁EKIPY, IPYEWX₁, EWX₁IPY, IPYX₁VY, X₁VYIPY, IPYX₁PY, X₁PYIPY, IPYPRX 및 PRX₁IPY으로 이루어진 군으로부터 선택되는 올리고펩티드(여기서 X₁는 A, V, G, I, P, W, F, N, Q, T, R, K, E, D 및 Y로 이루어진 군으로부터 선택된다);

d) 상기 a), b) 및 c) 기재된 어느 올리고펩티드의 팔미트산염; 또는

e) 상기 a), b) 또는 c)에 기재되고, 변형된 올리고펩티드(여기서 상기 변형은 팔미트산과의 컨쥬게이트 및 N-터미날 아세틸화로 이루어진 군으로부터 선택된다),

여기서 바람직하기는 상기 펩티드의 N-터미날은 올리고펩티드의 C-터미날과 융합됨.