JP2000229996A - オクタペプチド、アンギオテンシンｉ変換酵素阻害ペプチド及びその製造方法 - Google Patents
オクタペプチド、アンギオテンシンｉ変換酵素阻害ペプチド及びその製造方法Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 アンギオテンシンＩ変換酵素を阻害すること
により血圧上昇を抑制するペプチドを提供する。 【解決手段】 米糠類、大豆類及び炭素源を含む培地に
納豆菌あるいは枯草菌を接種して、通気攪拌を行うこと
により発酵培養し、この発酵培養液から抽出処理をする
ことにより、アンギオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチド
を製造する。このペプチドは、分子量が２０００以下、
好ましくは６００〜１３００の範囲であり、ペプチドと
しては、Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖ
ａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのアミノ酸配列を有するオクタペ
プチド等が含まれている。これらのペプチドは、水溶性
なので飲食品に容易に添加することができ、また、１２
０℃、３０分間オートクレーブによっても、なおアンギ
オテンシンＩ変換酵素阻害作用を有する。
により血圧上昇を抑制するペプチドを提供する。 【解決手段】 米糠類、大豆類及び炭素源を含む培地に
納豆菌あるいは枯草菌を接種して、通気攪拌を行うこと
により発酵培養し、この発酵培養液から抽出処理をする
ことにより、アンギオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチド
を製造する。このペプチドは、分子量が２０００以下、
好ましくは６００〜１３００の範囲であり、ペプチドと
しては、Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖ
ａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのアミノ酸配列を有するオクタペ
プチド等が含まれている。これらのペプチドは、水溶性
なので飲食品に容易に添加することができ、また、１２
０℃、３０分間オートクレーブによっても、なおアンギ
オテンシンＩ変換酵素阻害作用を有する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、血圧上昇を促進す
るホルモンであるアンギオテンシンＩをアンギオテンシ
ンＩＩに変換するアンギオテンシンＩ変換酵素（以下、
「ＡＣＥ」という。）を阻害する作用を有するペプチド
及びその製造方法に関する。
るホルモンであるアンギオテンシンＩをアンギオテンシ
ンＩＩに変換するアンギオテンシンＩ変換酵素（以下、
「ＡＣＥ」という。）を阻害する作用を有するペプチド
及びその製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】腎臓の傍糸球体紬胞から分泌されるレニ
ンは血中に存在し、これが血中のα２グロブリン画分に
存在するアンギオテンシノーゲンを加水分解することに
より、アミノ酸１０残基からなるアンギオテンシンＩを
生成する。そして、このアンギオテンシンＩは、更にＡ
ＣＥにより加水分解されてアンギオテンシンＩＩを生成
する。このアンギオテンシンＩＩは、副腎皮質からのア
ルドステロンの分泌を促進して、腎尿細管からのナトリ
ウムの再吸収を促進し、循環血液量を増加させると共
に、血管平滑筋を収縮させて血圧を上昇させる。このよ
うなレニン−アンギオテンシン−アルドステロン昇圧系
に作用して、血圧の上昇を抑制する研究が進められた結
果、ＡＣＥの活性を阻害してアンギオテンシンＩＩを生
成を抑制することにより、血庄の上昇抑制をする薬剤と
して、従来からカプトプリル等のＡＣＥ阻害剤が開発さ
れている。
ンは血中に存在し、これが血中のα２グロブリン画分に
存在するアンギオテンシノーゲンを加水分解することに
より、アミノ酸１０残基からなるアンギオテンシンＩを
生成する。そして、このアンギオテンシンＩは、更にＡ
ＣＥにより加水分解されてアンギオテンシンＩＩを生成
する。このアンギオテンシンＩＩは、副腎皮質からのア
ルドステロンの分泌を促進して、腎尿細管からのナトリ
ウムの再吸収を促進し、循環血液量を増加させると共
に、血管平滑筋を収縮させて血圧を上昇させる。このよ
うなレニン−アンギオテンシン−アルドステロン昇圧系
に作用して、血圧の上昇を抑制する研究が進められた結
果、ＡＣＥの活性を阻害してアンギオテンシンＩＩを生
成を抑制することにより、血庄の上昇抑制をする薬剤と
して、従来からカプトプリル等のＡＣＥ阻害剤が開発さ
れている。
【０００３】高血圧対策には、上記ＡＣＥ阻害剤のよう
な降圧薬による薬物療法も重要であるが、同時に運動療
法及び食生活の改善などの生活習慣の改善が不可欠であ
る。そこで、最近は医食同源の考えの下、健康によい食
品を摂取することにより、高血圧の予防・改善を図るこ
とが行われ、このような観点から、食品あるいは食用原
料よりＡＣＥ阻害作用を有する成分を抽出、分離する研
究が進められている。そして、従来から食品あるいは食
用原料より、以下のアミノ酸配列を有するペプチドがＡ
ＣＥ阻害活性を有することが開示されている。
な降圧薬による薬物療法も重要であるが、同時に運動療
法及び食生活の改善などの生活習慣の改善が不可欠であ
る。そこで、最近は医食同源の考えの下、健康によい食
品を摂取することにより、高血圧の予防・改善を図るこ
とが行われ、このような観点から、食品あるいは食用原
料よりＡＣＥ阻害作用を有する成分を抽出、分離する研
究が進められている。そして、従来から食品あるいは食
用原料より、以下のアミノ酸配列を有するペプチドがＡ
ＣＥ阻害活性を有することが開示されている。
【０００４】かつお節由来のペプチド（医学のあゆみ
Ｖｏｌ．２９別冊Ｐ３０−３１） Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ 発酵乳カゼイン由来のペプチド(Ｊ．Ｄａｉｒｙ Ｓ
ｃｉ．Ｖｏｌ．７８，Ｎｏ．４，１９９５) Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ 清酒とその副産物由来のペプチド（日本農芸化学会誌
Ｖｏｌ．６６，Ｎｏ．７，ｐｐ１０８１−１０８７，
１９９２） Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ Ａｒｇ−Ｐｈｅ Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ａｓｎ Ｖａｌ−Ｔｙｒ Ｈｉｓ−Ｔｙｒ シルクタンパク質由来のペプチド（特開平１０−２９
８１９９号公報） Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ
Ｖｏｌ．２９別冊Ｐ３０−３１） Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ 発酵乳カゼイン由来のペプチド(Ｊ．Ｄａｉｒｙ Ｓ
ｃｉ．Ｖｏｌ．７８，Ｎｏ．４，１９９５) Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ 清酒とその副産物由来のペプチド（日本農芸化学会誌
Ｖｏｌ．６６，Ｎｏ．７，ｐｐ１０８１−１０８７，
１９９２） Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ Ａｒｇ−Ｐｈｅ Ｐｈｅ−Ｔｒｐ−Ａｓｎ Ｖａｌ−Ｔｙｒ Ｈｉｓ−Ｔｙｒ シルクタンパク質由来のペプチド（特開平１０−２９
８１９９号公報） Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ Ｇｌｙ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ
【０００５】また、ＡＣＥ阻害作用を有する成分を食品
として摂取することにより高血圧の予防・改善を図るた
めには、特に清涼飲料水へ添加する場合のように、水分
含量の多い食品原料へも添加することができるように、
水溶性成分であることが求められる。更に、食品加工に
おいて加熱工程を経ることにより分解されてＡＣＥ阻害
活性が低下しないように、耐熱性を有する成分であるこ
とがより好ましい。
として摂取することにより高血圧の予防・改善を図るた
めには、特に清涼飲料水へ添加する場合のように、水分
含量の多い食品原料へも添加することができるように、
水溶性成分であることが求められる。更に、食品加工に
おいて加熱工程を経ることにより分解されてＡＣＥ阻害
活性が低下しないように、耐熱性を有する成分であるこ
とがより好ましい。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記実情に
鑑みてなされたものであり、ＡＣＥを阻害することによ
り血圧上昇を抑制するペプチド及びその製造方法を提供
することを目的とする。
鑑みてなされたものであり、ＡＣＥを阻害することによ
り血圧上昇を抑制するペプチド及びその製造方法を提供
することを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは以前、米糠
類及び大豆類を含む培地に枯草菌を接種し、培養させ、
ろ過して製造した発酵液に活性酸素を抑制する効果があ
ることを発見し（特開平６−２８４８７２号公報）、ま
た、特定領域のｐＨの米糠類、大豆類を含む培地に枯草
菌を又は納豆菌を接種し、培養させ、ろ過して製造した
発酵液に、血中アルコール濃度を減少させる効果を見出
している（特開平３−２７２６５７号公報）。そこで引
き続きこれらの発酵物中の成分と生理的作用との関係に
ついて検討したところ、米糠・大豆発酵抽出エキスのス
クリーニングを行う過程において、血圧上昇抑制効果を
有し、水溶性の生理機能性ペプチドを発見し、これらの
ペプチドがＡＣＥ阻害作用を有することを見い出して本
発明を完成するに至った。
類及び大豆類を含む培地に枯草菌を接種し、培養させ、
ろ過して製造した発酵液に活性酸素を抑制する効果があ
ることを発見し（特開平６−２８４８７２号公報）、ま
た、特定領域のｐＨの米糠類、大豆類を含む培地に枯草
菌を又は納豆菌を接種し、培養させ、ろ過して製造した
発酵液に、血中アルコール濃度を減少させる効果を見出
している（特開平３−２７２６５７号公報）。そこで引
き続きこれらの発酵物中の成分と生理的作用との関係に
ついて検討したところ、米糠・大豆発酵抽出エキスのス
クリーニングを行う過程において、血圧上昇抑制効果を
有し、水溶性の生理機能性ペプチドを発見し、これらの
ペプチドがＡＣＥ阻害作用を有することを見い出して本
発明を完成するに至った。
【０００８】即ち、本第１発明のアンギオテンシンＩ変
換酵素阻害ペプチドは、少なくともカルボキシル基末端
（以下、「Ｃ末端」という。）側に、Ｔｙｒ−Ｖａｌ−
Ｔｒｐ−Ｌｙｓのアミノ酸配列を含むことを特徴とす
る。尚、本明細書において、ペプチド中の略称は、当該
分野において一般に使用される３文字表記のものであ
り、次の意味を有する。尚、これらのアミノ酸は、特に
明記していない限りはＬ−アミノ酸及びＤ−アミノ酸の
どちらでもよい。
換酵素阻害ペプチドは、少なくともカルボキシル基末端
（以下、「Ｃ末端」という。）側に、Ｔｙｒ−Ｖａｌ−
Ｔｒｐ−Ｌｙｓのアミノ酸配列を含むことを特徴とす
る。尚、本明細書において、ペプチド中の略称は、当該
分野において一般に使用される３文字表記のものであ
り、次の意味を有する。尚、これらのアミノ酸は、特に
明記していない限りはＬ−アミノ酸及びＤ−アミノ酸の
どちらでもよい。
【０００９】〔中性アミノ酸〕 Ａｌａ：アラニン、Ａｓｎ：アスパラギン、Ｃｙｓ：シ
ステイン、Ｇｌｎ：グルタミン、Ｇｌｙ：グリシン、Ｉ
ｌｅ：イソロイシン、Ｌｅｕ：ロイシン、Ｍｅｔ：メチ
オニン、Ｐｈｅ：フェニルアラニン、Ｐｒｏ：プロリ
ン、Ｓｅｒ：セリン、Ｔｈｒ：スレオニン、Ｔｒｐ：ト
リプトファン、Ｔｙｒ：チロシン、Ｖａｌ：バリン。 〔酸性アミノ酸〕 Ａｓｐ：アスパラギン酸、Ｇｌｕ：グルタミン酸。 〔塩基性アミノ酸〕 Ａｒｇ：アルギニン、Ｈｉｓ：ヒスチジン、Ｌｙｓ：リ
ジン。
ステイン、Ｇｌｎ：グルタミン、Ｇｌｙ：グリシン、Ｉ
ｌｅ：イソロイシン、Ｌｅｕ：ロイシン、Ｍｅｔ：メチ
オニン、Ｐｈｅ：フェニルアラニン、Ｐｒｏ：プロリ
ン、Ｓｅｒ：セリン、Ｔｈｒ：スレオニン、Ｔｒｐ：ト
リプトファン、Ｔｙｒ：チロシン、Ｖａｌ：バリン。 〔酸性アミノ酸〕 Ａｓｐ：アスパラギン酸、Ｇｌｕ：グルタミン酸。 〔塩基性アミノ酸〕 Ａｒｇ：アルギニン、Ｈｉｓ：ヒスチジン、Ｌｙｓ：リ
ジン。
【００１０】本第１発明のアンギオテンシンＩ変換酵素
阻害ペプチドは、少なくともＣ末端部にＴｙｒ−Ｖａｌ
−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのアミノ酸配列を含んでいればよいの
で、Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのアミノ酸配列を
有するテトラペプチドでもよいし、更にＴｙｒのアミノ
基末端（以下、「Ｎ末端」という。）側に、アミノ酸又
は任意のアミノ酸配列を有するペプチドがペプチド結合
により結合しているペプチドでもよい。
阻害ペプチドは、少なくともＣ末端部にＴｙｒ−Ｖａｌ
−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのアミノ酸配列を含んでいればよいの
で、Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのアミノ酸配列を
有するテトラペプチドでもよいし、更にＴｙｒのアミノ
基末端（以下、「Ｎ末端」という。）側に、アミノ酸又
は任意のアミノ酸配列を有するペプチドがペプチド結合
により結合しているペプチドでもよい。
【００１１】本第２発明のＡＣＥ阻害ペプチドは、アミ
ノ酸配列がＩｌｅ−〔Ｘ〕−〔Ｙ〕−〔Ｚ〕−Ｔｙｒ−
Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのオクタペプチドであることを
特徴とする。上記アミノ酸配列中、〔Ｘ〕、〔Ｙ〕及び
〔Ｚ〕は、任意のアミノ酸を意味する。この中では、本
第３発明に示すように、上記〔Ｚ〕は疎水性アミノ酸で
あるものがＡＣＥ阻害活性に優れていることから好まし
い。このような疎水性アミノ酸としては、例えば、Ｇｌ
ｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌ
ｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｐｒｏ、Ｃｙｓ、Ｍｅ
ｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎが挙げられ、この中では本第４発明
に示すように、Ｉｌｅ又はＶａｌがＡＣＥ阻害活性に優
れ、且つ耐熱性を有することから、特に好ましい。ま
た、本第４発明に示すように、上記〔Ｘ〕はＳｅｒ又は
Ｐｒｏであり、上記〔Ｙ〕はＴｙｒ又はＨｉｓであるも
のがＡＣＥ阻害活性に優れていることから好ましい。
ノ酸配列がＩｌｅ−〔Ｘ〕−〔Ｙ〕−〔Ｚ〕−Ｔｙｒ−
Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのオクタペプチドであることを
特徴とする。上記アミノ酸配列中、〔Ｘ〕、〔Ｙ〕及び
〔Ｚ〕は、任意のアミノ酸を意味する。この中では、本
第３発明に示すように、上記〔Ｚ〕は疎水性アミノ酸で
あるものがＡＣＥ阻害活性に優れていることから好まし
い。このような疎水性アミノ酸としては、例えば、Ｇｌ
ｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｉｌ
ｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｐｒｏ、Ｃｙｓ、Ｍｅ
ｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎが挙げられ、この中では本第４発明
に示すように、Ｉｌｅ又はＶａｌがＡＣＥ阻害活性に優
れ、且つ耐熱性を有することから、特に好ましい。ま
た、本第４発明に示すように、上記〔Ｘ〕はＳｅｒ又は
Ｐｒｏであり、上記〔Ｙ〕はＴｙｒ又はＨｉｓであるも
のがＡＣＥ阻害活性に優れていることから好ましい。
【００１２】本第２発明のオクタペプチドとしては、本
第５発明に示すＩｌｅ−Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｙ
ｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのアミノ酸配列を有するオ
クタペプチドはＡＣＥ阻害活性に優れており、また、本
第６発明及び第７発明に示すように、以下のアミノ酸配
列を有するオクタペプチドは、ＡＣＥ阻害活性に優れる
と共に、加熱によってもＡＣＥ活性が喪失しないという
耐熱性をも有するので、特に好ましい。 Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔ
ｒｐ−Ｌｙｓ Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔ
ｒｐ−Ｌｙｓ
第５発明に示すＩｌｅ−Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｙ
ｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのアミノ酸配列を有するオ
クタペプチドはＡＣＥ阻害活性に優れており、また、本
第６発明及び第７発明に示すように、以下のアミノ酸配
列を有するオクタペプチドは、ＡＣＥ阻害活性に優れる
と共に、加熱によってもＡＣＥ活性が喪失しないという
耐熱性をも有するので、特に好ましい。 Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔ
ｒｐ−Ｌｙｓ Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔ
ｒｐ−Ｌｙｓ
【００１３】本第８発明のＡＣＥ阻害ペプチドは、アミ
ノ酸配列がＶａｌ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−
Ｖａｌ−〔Ａ〕−Ｌｙｓのオクタペプチドであることを
特徴とする。上記アミノ酸配列中、〔Ａ〕は、任意のア
ミノ酸を意味する。この中では、本第９発明に示すよう
に、上記〔Ａ〕がＴｒｐ又はＧｌｙであるオクタペプチ
ドは、低用量でのＡＣＥ阻害活性に優れると共に、耐熱
性にも優れていることから、特に好ましい。
ノ酸配列がＶａｌ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−
Ｖａｌ−〔Ａ〕−Ｌｙｓのオクタペプチドであることを
特徴とする。上記アミノ酸配列中、〔Ａ〕は、任意のア
ミノ酸を意味する。この中では、本第９発明に示すよう
に、上記〔Ａ〕がＴｒｐ又はＧｌｙであるオクタペプチ
ドは、低用量でのＡＣＥ阻害活性に優れると共に、耐熱
性にも優れていることから、特に好ましい。
【００１４】本第１０発明のＡＣＥ阻害ペプチドは、ア
ミノ酸配列がＶａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ
−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓのオクタペプチドあることを
特徴とする。このオクタペプチドも、特に低用量でのＡ
ＣＥ阻害活性に優れているという特徴を有する。
ミノ酸配列がＶａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ
−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓのオクタペプチドあることを
特徴とする。このオクタペプチドも、特に低用量でのＡ
ＣＥ阻害活性に優れているという特徴を有する。
【００１５】本第１１発明のＡＣＥ阻害ペプチドは、米
糠類、大豆類及び炭素源を含む培地に納豆菌あるいは枯
草菌を接種し、発酵培養して得られた発酵培養液から抽
出され、平均分子量が２０００以下であることを特徴と
する。上記「米糠類」とは、米胚芽、脱脂米胚芽、米
糠、脱脂米糠等をいい、上記「大豆類」とは、脱脂大
豆、キナ粉、大豆粉、大豆カス、これらの加水分解物等
をいう。また、上記「炭素源」としては、通常用いられ
るものを使用でき、例えば、グルコース、デキストリ
ン、乳糖及びデンプン等の１種又は２種以上を用いるこ
とができる。通常、これらの添加割合は、米糠類を１０
０重量部とする場合、大豆類が１〜２０重量部、好まし
くは１０〜２０重量部であり、炭素源は２０〜８０重量
部、好ましくは４０〜６０重量部である。これらの範囲
にある場合には、菌の発育に最も好ましいからである。
このようにして発酵培養により得られるＡＣＥ阻害ペプ
チドの平均分子量は、通常２０００以下、好ましくは６
００〜２０００、更に好ましくは６００〜１３００であ
る。平均分子量がこの範囲を外れるものは、いずれもＡ
ＣＥ阻害活性が低下する傾向があるため好ましくない。
糠類、大豆類及び炭素源を含む培地に納豆菌あるいは枯
草菌を接種し、発酵培養して得られた発酵培養液から抽
出され、平均分子量が２０００以下であることを特徴と
する。上記「米糠類」とは、米胚芽、脱脂米胚芽、米
糠、脱脂米糠等をいい、上記「大豆類」とは、脱脂大
豆、キナ粉、大豆粉、大豆カス、これらの加水分解物等
をいう。また、上記「炭素源」としては、通常用いられ
るものを使用でき、例えば、グルコース、デキストリ
ン、乳糖及びデンプン等の１種又は２種以上を用いるこ
とができる。通常、これらの添加割合は、米糠類を１０
０重量部とする場合、大豆類が１〜２０重量部、好まし
くは１０〜２０重量部であり、炭素源は２０〜８０重量
部、好ましくは４０〜６０重量部である。これらの範囲
にある場合には、菌の発育に最も好ましいからである。
このようにして発酵培養により得られるＡＣＥ阻害ペプ
チドの平均分子量は、通常２０００以下、好ましくは６
００〜２０００、更に好ましくは６００〜１３００であ
る。平均分子量がこの範囲を外れるものは、いずれもＡ
ＣＥ阻害活性が低下する傾向があるため好ましくない。
【００１６】本第１２発明のＡＣＥ阻害ペプチドは、１
２０℃、３０分間オートクレーブを行った後のＡＣＥ活
性の割合が、オートクレーブ前のＡＣＥ活性に対して１
２０％以下であることを特徴とする。生理活性ペプチド
は、そのまま摂取する他、飲食物に添加して用いること
もできるが、その場合は、食品加工において、製造・殺
菌のための加熱工程が加えられることが多いので、加熱
工程が加わってもなおＡＣＥ阻害作用を維持・増進する
ことができる耐熱性を有することが望ましい。従って、
本第１２発明のＡＣＥ阻害ペプチドは、耐熱性を有する
ことから、より好適に飲食物に添加して用いることがで
きる。オートクレーブ前のＡＣＥ活性に対するオートク
レーブ後のＡＣＥ活性の割合は、（オートクレーブ後の
ＡＣＥ活性）×１００／（オートクレーブ前のＡＣＥ活
性）により求められるものであり、この値は通常１２０
％以下、好ましくは１００％以下、更に好ましくは８０
％以下、最も好ましくは５０％以下である。この値が１
２０％を超える場合は、オートクレーブ後のＡＣＥ活性
が大きいこと、即ち加熱によりＡＣＥ阻害作用が失われ
たことを意味するので好ましくない。
２０℃、３０分間オートクレーブを行った後のＡＣＥ活
性の割合が、オートクレーブ前のＡＣＥ活性に対して１
２０％以下であることを特徴とする。生理活性ペプチド
は、そのまま摂取する他、飲食物に添加して用いること
もできるが、その場合は、食品加工において、製造・殺
菌のための加熱工程が加えられることが多いので、加熱
工程が加わってもなおＡＣＥ阻害作用を維持・増進する
ことができる耐熱性を有することが望ましい。従って、
本第１２発明のＡＣＥ阻害ペプチドは、耐熱性を有する
ことから、より好適に飲食物に添加して用いることがで
きる。オートクレーブ前のＡＣＥ活性に対するオートク
レーブ後のＡＣＥ活性の割合は、（オートクレーブ後の
ＡＣＥ活性）×１００／（オートクレーブ前のＡＣＥ活
性）により求められるものであり、この値は通常１２０
％以下、好ましくは１００％以下、更に好ましくは８０
％以下、最も好ましくは５０％以下である。この値が１
２０％を超える場合は、オートクレーブ後のＡＣＥ活性
が大きいこと、即ち加熱によりＡＣＥ阻害作用が失われ
たことを意味するので好ましくない。
【００１７】本第１４発明〜本第１９発明のオクタペプ
チドは、以下のアミノ酸配列を有する新規なオクタペプ
チドであることを特徴とする。 Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔ
ｒｐ−Ｌｙｓ Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔ
ｒｐ−Ｌｙｓ Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔ
ｒｐ−Ｌｙｓ Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｇ
ｌｙ−Ｌｙｓ Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｔ
ｒｐ−Ｌｙｓ Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇ
ｌｙ−Ｌｙｓ
チドは、以下のアミノ酸配列を有する新規なオクタペプ
チドであることを特徴とする。 Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔ
ｒｐ−Ｌｙｓ Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔ
ｒｐ−Ｌｙｓ Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔ
ｒｐ−Ｌｙｓ Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｇ
ｌｙ−Ｌｙｓ Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｔ
ｒｐ−Ｌｙｓ Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇ
ｌｙ−Ｌｙｓ
【００１８】以上のようにして得られた本発明のＡＣＥ
阻害ペプチドは、水溶性であると共に、ＡＣＥ阻害作用
により血圧降下作用を有することから、飲食品に添加す
る他、本第１３発明のように、本発明のＡＣＥ阻害ペプ
チドを有効成分として少なくとも１種含有する血圧降下
剤として用いることもできる。また、本発明のＡＣＥ阻
害ペプチドは、塩酸塩、硫酸塩の無機酸や、コハク酸
塩、クエン酸塩、酒石酸塩等の有機酸により、製薬工業
上及び薬理学上許容される塩を付加したペプチド等とす
ることができる。このようにして、本発明のＡＣＥ阻害
ペプチドは、例えば、飲食品等に添加したり、あるいは
医薬上許容される他の添加物を添加することにより製剤
化して用いることができ、その結果、固形状、液状等と
して経口投与等により摂取する他、通常のペプチド系医
薬の投与に使用されている静脈注射、筋肉内注射、皮下
注射、あるいは鼻内投与等を採用することができる。
阻害ペプチドは、水溶性であると共に、ＡＣＥ阻害作用
により血圧降下作用を有することから、飲食品に添加す
る他、本第１３発明のように、本発明のＡＣＥ阻害ペプ
チドを有効成分として少なくとも１種含有する血圧降下
剤として用いることもできる。また、本発明のＡＣＥ阻
害ペプチドは、塩酸塩、硫酸塩の無機酸や、コハク酸
塩、クエン酸塩、酒石酸塩等の有機酸により、製薬工業
上及び薬理学上許容される塩を付加したペプチド等とす
ることができる。このようにして、本発明のＡＣＥ阻害
ペプチドは、例えば、飲食品等に添加したり、あるいは
医薬上許容される他の添加物を添加することにより製剤
化して用いることができ、その結果、固形状、液状等と
して経口投与等により摂取する他、通常のペプチド系医
薬の投与に使用されている静脈注射、筋肉内注射、皮下
注射、あるいは鼻内投与等を採用することができる。
【００１９】本第２０発明のＡＣＥ阻害ペプチドの製造
方法は、米糠類、大豆類及び炭素源を含む培地に納豆菌
あるいは枯草菌を接種して、通気攪拌を行うことにより
発酵培養し、この発酵培養液から抽出処理をすることに
より、アンギオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチドを製造
することを特徴とする。この発酵培養の条件について
は、発酵が行われる限り特に制限はないが、通常、ｐＨ
が７．５〜１０、好ましくは８．５〜１０、培養温度が
４０〜４５℃程度である。ｐＨを調節する場合は、アル
カリ剤として炭酸水素ナトリウム等を用いることができ
る。尚、この製造方法において、培地原料にプロテアー
ゼを用いることができる。この場合は、大豆ペプチドを
更に分解するので有用である。このように発酵により得
られた発酵培養液から、純度が高いＡＣＥ阻害ペプチド
を抽出する方法については特に限定はなく、常法、例え
ばゲルろ過、イオン交換クロマトグラフィー又は逆相高
速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等により行うこ
とができる。
方法は、米糠類、大豆類及び炭素源を含む培地に納豆菌
あるいは枯草菌を接種して、通気攪拌を行うことにより
発酵培養し、この発酵培養液から抽出処理をすることに
より、アンギオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチドを製造
することを特徴とする。この発酵培養の条件について
は、発酵が行われる限り特に制限はないが、通常、ｐＨ
が７．５〜１０、好ましくは８．５〜１０、培養温度が
４０〜４５℃程度である。ｐＨを調節する場合は、アル
カリ剤として炭酸水素ナトリウム等を用いることができ
る。尚、この製造方法において、培地原料にプロテアー
ゼを用いることができる。この場合は、大豆ペプチドを
更に分解するので有用である。このように発酵により得
られた発酵培養液から、純度が高いＡＣＥ阻害ペプチド
を抽出する方法については特に限定はなく、常法、例え
ばゲルろ過、イオン交換クロマトグラフィー又は逆相高
速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等により行うこ
とができる。
【００２０】
【発明の実施の形態】以下、実施例により本発明を具体
的に説明する。 （１）ＡＣＥ阻害ペプチドの製造 米糠・大豆発酵抽出エキスの製造 まず、以下に示す方法により本発明のペプチドの原料と
なる米糠・大豆発酵抽出エキスを製造した。即ち、培地
原料として脱脂米糠を３０ｋｇ、大豆かすを３ｋｇ、苦
汁を５ｋｇ、水を５００ｋｇを使用して培地を調製し
た。尚、この培地のｐＨは９前後であった。 上記培地を
１２１℃、３０分にて殺菌し、その後冷却し、次いで、
納豆菌（製造元；成瀬醗酵化学研究所）０．０５ｋｇを
接種し、４０〜４５℃にて約４８時間、通気、撹拌して
培養させて培養物を得た。その後、この培養物を圧搾ろ
過し、活性炭及びパーライトで処理をして脱臭、脱色を
し、ほぼ透明の米糠・大豆発酵抽出エキスを得た。尚、
この活性炭としては、粉末活性炭（活性炭Ｓ、活性炭Ｋ
等）、粒状活性炭（活性炭ＳＧ等）の種々のものを使用
でき、パーライトとしては、「パーライトＮｏ．４１８
０」（ダイカラインオリエント株式会社製）を使用し
た。
的に説明する。 （１）ＡＣＥ阻害ペプチドの製造 米糠・大豆発酵抽出エキスの製造 まず、以下に示す方法により本発明のペプチドの原料と
なる米糠・大豆発酵抽出エキスを製造した。即ち、培地
原料として脱脂米糠を３０ｋｇ、大豆かすを３ｋｇ、苦
汁を５ｋｇ、水を５００ｋｇを使用して培地を調製し
た。尚、この培地のｐＨは９前後であった。 上記培地を
１２１℃、３０分にて殺菌し、その後冷却し、次いで、
納豆菌（製造元；成瀬醗酵化学研究所）０．０５ｋｇを
接種し、４０〜４５℃にて約４８時間、通気、撹拌して
培養させて培養物を得た。その後、この培養物を圧搾ろ
過し、活性炭及びパーライトで処理をして脱臭、脱色を
し、ほぼ透明の米糠・大豆発酵抽出エキスを得た。尚、
この活性炭としては、粉末活性炭（活性炭Ｓ、活性炭Ｋ
等）、粒状活性炭（活性炭ＳＧ等）の種々のものを使用
でき、パーライトとしては、「パーライトＮｏ．４１８
０」（ダイカラインオリエント株式会社製）を使用し
た。
【００２１】ＡＣＥ阻害ペプチドの抽出、分画、精製 上記方法により製造された米糠・大豆発酵抽出エキスか
ら、ゲルろ過カラムクロマトグラフィーを用いて、ＡＣ
Ｅ阻害活性を有するペプチドを分画、回収した。カラム
としてＢｉｏ−ＧｅｌＰ４（ＢＩＯ−ＲＡＤ社製）を用
い、蒸留水により、流速１ｍｌ／ｍｉｎの条件で溶出を
行うことにより、米糠・大豆発酵抽出エキスから、分子
量８００〜１３００の範囲のＡＣＥ阻害活性を有するペ
プチドを分画、回収した。そして、ゲルろ過後の分画を
集め、逆相カラムによるＨＰＬＣを用いて、ＡＣＥ阻害
ペプチドを単離・精製した。逆相カラムとしてμｂｏｎ
ｄａｓｐｈｅｒｅＣ１８（Ｗａｔｅｒｓ社製）を用い、
蒸留水により、流速１ｍｌ／ｍｉｎの条件で溶出させる
ことにより、ＡＣＥ阻害ペプチドを単離した。
ら、ゲルろ過カラムクロマトグラフィーを用いて、ＡＣ
Ｅ阻害活性を有するペプチドを分画、回収した。カラム
としてＢｉｏ−ＧｅｌＰ４（ＢＩＯ−ＲＡＤ社製）を用
い、蒸留水により、流速１ｍｌ／ｍｉｎの条件で溶出を
行うことにより、米糠・大豆発酵抽出エキスから、分子
量８００〜１３００の範囲のＡＣＥ阻害活性を有するペ
プチドを分画、回収した。そして、ゲルろ過後の分画を
集め、逆相カラムによるＨＰＬＣを用いて、ＡＣＥ阻害
ペプチドを単離・精製した。逆相カラムとしてμｂｏｎ
ｄａｓｐｈｅｒｅＣ１８（Ｗａｔｅｒｓ社製）を用い、
蒸留水により、流速１ｍｌ／ｍｉｎの条件で溶出させる
ことにより、ＡＣＥ阻害ペプチドを単離した。
【００２２】アミノ酸のアミノ酸配列 上記方法により単離・精製され、ＡＣＥ阻害活性を有す
ることが確認されたペプチドのアミノ酸配列は以下の通
りである。尚、このアミノ酸配列の分析は、島津製作所
製タンパク質シークエンサー「ＰＰＳＱ−１０」を用い
て行った。 〔１〕Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｖａ
ｌ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ 〔２〕Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａ
ｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ 〔３〕Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａ
ｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ 〔４〕Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｖａ
ｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ 〔５〕Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａ
ｌ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ 〔６〕Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａ
ｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ
ることが確認されたペプチドのアミノ酸配列は以下の通
りである。尚、このアミノ酸配列の分析は、島津製作所
製タンパク質シークエンサー「ＰＰＳＱ−１０」を用い
て行った。 〔１〕Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｖａ
ｌ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ 〔２〕Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａ
ｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ 〔３〕Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａ
ｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ 〔４〕Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｈｉｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｖａ
ｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ 〔５〕Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａ
ｌ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ 〔６〕Ｉｌｅ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａ
ｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ
【００２３】（２）ＡＣＥ阻害活性の評価 実施例及び比較例の調製 上記によりアミノ酸配列が判明した［１］〜［６］の米
糠・大豆発酵抽出エキス由来のペプチドと同じアミノ酸
配列を持つペプチドを合成して、実施例１〜６とした。
また、以下のアミノ酸配列を有するペプチドを合成し
て、比較例１及び２とした。尚、実施例１〜６及び比較
例１〜２の各ペプチドは、以下に示すＦｍｏｃ法により
合成したものである。 比較例１：Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ 比較例２：Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−
Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ 比較例１は、酒粕由来のＡＣＥ阻害ぺプチドであり、比
較例２はアンギオテンシンＩＩレセプター阻害ペプチド
として知られている（比較例１：日本農芸化学会誌Ｖｏ
ｌ．６６，Ｎｏ．７ ｐｐ，１０８１−１０８７，１９
９２、比較例２：Ｂｉｏｃｈｅ Ｖｏｌ．８５，ｐｐ，
２５１８−２５２２，１９８８）。
糠・大豆発酵抽出エキス由来のペプチドと同じアミノ酸
配列を持つペプチドを合成して、実施例１〜６とした。
また、以下のアミノ酸配列を有するペプチドを合成し
て、比較例１及び２とした。尚、実施例１〜６及び比較
例１〜２の各ペプチドは、以下に示すＦｍｏｃ法により
合成したものである。 比較例１：Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ 比較例２：Ｖａｌ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−
Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ 比較例１は、酒粕由来のＡＣＥ阻害ぺプチドであり、比
較例２はアンギオテンシンＩＩレセプター阻害ペプチド
として知られている（比較例１：日本農芸化学会誌Ｖｏ
ｌ．６６，Ｎｏ．７ ｐｐ，１０８１−１０８７，１９
９２、比較例２：Ｂｉｏｃｈｅ Ｖｏｌ．８５，ｐｐ，
２５１８−２５２２，１９８８）。
【００２４】〔ペプチドの合成方法〕実施例１〜６及び
比較例１〜２の各ペプチドは、公知のペプチド合成法と
して常用される固相法の一つであるＦｍｏｃ法によっ
て、以下のように行った。まずＣ末端アミノ酸のＦｍｏ
ｃ誘導体をｐ−アルコキシベンジルアルコール樹脂に導
入し、以後、ピペリジンによるＦｍｏｃ基の除去、対応
する保護アミノ酸の縮合を繰り返すことにより、保護ペ
プチド樹脂を合成する。最後に、ピペリジンによるＦｍ
ｏｃ基の除去及びトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）処理によ
る側鎖保護基の除去により、実施例１〜６及び比較例１
〜２の各ペプチドを１ｍｇ合成した。合成した実施例１
〜６及び比較例１〜２の各ペプチドの純度はいずれも９
５％以上であった
比較例１〜２の各ペプチドは、公知のペプチド合成法と
して常用される固相法の一つであるＦｍｏｃ法によっ
て、以下のように行った。まずＣ末端アミノ酸のＦｍｏ
ｃ誘導体をｐ−アルコキシベンジルアルコール樹脂に導
入し、以後、ピペリジンによるＦｍｏｃ基の除去、対応
する保護アミノ酸の縮合を繰り返すことにより、保護ペ
プチド樹脂を合成する。最後に、ピペリジンによるＦｍ
ｏｃ基の除去及びトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）処理によ
る側鎖保護基の除去により、実施例１〜６及び比較例１
〜２の各ペプチドを１ｍｇ合成した。合成した実施例１
〜６及び比較例１〜２の各ペプチドの純度はいずれも９
５％以上であった
【００２５】ＡＣＥ阻害活性の測定 ＡＣＥ阻害活性の測定原理は以下の通りである。即ち、
ＡＣＥ評品と実施例又は比較例のペプチドを３７℃で一
定時間反応させ、残存するＡＣＥ評品が合成基質ｐ−ヒ
ドロキシベンゾイル−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕを作用
し、ｐ−ヒドロキシベンゾイルグリシンを遊離させる。
この遊離したｐ−ヒドロキシベンゾイルグリシンにヒプ
リカーゼを作用させ、ｐ−ヒドロキシ安息香酸とグリシ
ンに分解し、このｐ−ヒドロキシ安息香酸をメタ過ヨウ
素酸ナトリウムの作用により、４−アミノアンチピリン
と酸化縮合させ、キノンイミン色素を生成させる。そし
て、このキノンイミン色素を波長５０５ｎｍで比色計に
より測定した（文献：ＣＬＩＮ．ＣＨＥＭ．Ｖｏｌ．２
７，Ｎｏ．１１，１９２２−１９２５．１９８１）。
ＡＣＥ評品と実施例又は比較例のペプチドを３７℃で一
定時間反応させ、残存するＡＣＥ評品が合成基質ｐ−ヒ
ドロキシベンゾイル−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕを作用
し、ｐ−ヒドロキシベンゾイルグリシンを遊離させる。
この遊離したｐ−ヒドロキシベンゾイルグリシンにヒプ
リカーゼを作用させ、ｐ−ヒドロキシ安息香酸とグリシ
ンに分解し、このｐ−ヒドロキシ安息香酸をメタ過ヨウ
素酸ナトリウムの作用により、４−アミノアンチピリン
と酸化縮合させ、キノンイミン色素を生成させる。そし
て、このキノンイミン色素を波長５０５ｎｍで比色計に
より測定した（文献：ＣＬＩＮ．ＣＨＥＭ．Ｖｏｌ．２
７，Ｎｏ．１１，１９２２−１９２５．１９８１）。
【００２６】ＡＣＥ阻害活性は、測定キットとして富士
レビオ株式会社製、商品名「ＡＣＥカラー」（体外診断
用医薬品、承認番号（６１ＡＭ）４０６８）を用いて、
上記測定原理に基づいて測定した（機器試薬Ｖｏｌ．１
０，Ｎｏ．１，ｐｐ７１−７６．１９８７参照）。ま
た、ＡＣＥ評品として、ヒト由来のＡＣＥ（シグマ社
製、Ａ−２５８０ Ｌｏｔ２７Ｈ３９１８１）を用い
た。上記「ＡＣＥカラー」を用いたヒト血清中のＡＣＥ
の基準値は１８．５〜４７．５ＩＵ／ｍｌである（文
献：日胸疾会誌ＸＬＩＩ.４ Ｐ３０４−３０８ 昭和５
８年）。上記「ＡＣＥカラー」により、上記ＡＣＥ評品
を表１のごとくの希釈し、以下に示す方法により測定し
て検量線を作成した結果、図１に示すように、１０ＩＵ
／Ｌ以下の測定は感度上不可能と考えられ、一方、２０
〜５０ＩＵ／Ｌまで、即ち０．０２ＩＵ／ｍｌ以上にお
いては感度を示した。よって、ＡＣＥ阻害ペプチドの活
性測定は、本測定方法で十分確認することができる。
レビオ株式会社製、商品名「ＡＣＥカラー」（体外診断
用医薬品、承認番号（６１ＡＭ）４０６８）を用いて、
上記測定原理に基づいて測定した（機器試薬Ｖｏｌ．１
０，Ｎｏ．１，ｐｐ７１−７６．１９８７参照）。ま
た、ＡＣＥ評品として、ヒト由来のＡＣＥ（シグマ社
製、Ａ−２５８０ Ｌｏｔ２７Ｈ３９１８１）を用い
た。上記「ＡＣＥカラー」を用いたヒト血清中のＡＣＥ
の基準値は１８．５〜４７．５ＩＵ／ｍｌである（文
献：日胸疾会誌ＸＬＩＩ.４ Ｐ３０４−３０８ 昭和５
８年）。上記「ＡＣＥカラー」により、上記ＡＣＥ評品
を表１のごとくの希釈し、以下に示す方法により測定し
て検量線を作成した結果、図１に示すように、１０ＩＵ
／Ｌ以下の測定は感度上不可能と考えられ、一方、２０
〜５０ＩＵ／Ｌまで、即ち０．０２ＩＵ／ｍｌ以上にお
いては感度を示した。よって、ＡＣＥ阻害ペプチドの活
性測定は、本測定方法で十分確認することができる。
【００２７】
【表１】
【００２８】上記測定キット「ＡＣＥカラー」を用い、
以下の手順に従って、実施例及び比較例のＡＣＥ阻害活
性を測定した。試薬であるＡＣＥ溶液は、上記ＡＣＥ評
品の１Ｕｎｉｔを殺菌注射用蒸留水（株式会社大塚製薬
製）を用いて１００ｍＵ／１０ｍｌに希釈し、３０分間
室温に放置して調製した。ペプチド溶液として、実施例
１〜６及び比較例１〜２の各ペプチドを、殺菌注射用蒸
留水（株式会社大塚製薬製）にそれぞれ０、５、１０、
２０、４０、５０μｇ加えて調製した。そして、このペ
プチド溶液０．０５ｍｌを、上記ＡＣＥ溶液０．０５ｍ
ｌに添加して３７℃で１時間反応させて検体溶液とし
た。次に、ホウ酸緩衝液（ｐＨ８．３、０．１２Ｍホウ
酸及び０．７ＭＮａＣｌを含む）に基質溶液（ｐ−ヒド
ロキシベンゾイル−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕを１０ｍ
Ｍ、４−アミノアンチピリンを２．５ｍＭ及びヒプリカ
ーゼを３ＩＵ／ｍｌ含む）を添加して、３７℃で３分間
加温し、この基質溶液を上記反応後の検体溶液に０．５
ｍｌ分注した。混合後、３７℃で２０分インキュベート
し、その後、反応停止発色液（ＥＤＴＡ−Ｎａを３ｍ
Ｍ、トリトンＸ−１００を０．２％、メタ過ヨウ素酸ナ
トリウムを６．５ｍＭ含む）を１．５ｍｌ添加して３７
℃で３分間インキュベートすることにより、反応を停止
させて発色をさせた。そして、分析器として「コバス
ミラ」（ロシュ社製）を用い、精製水を対照として、波
長５０５ｎｍにおける生成したキノンイミン色素を測定
し、図１に示す検量線より、１分間あたりのＡＣＥ阻害
活性をタンパク質単位あたりで換算して求めた（単位：
ＩＵ／Ｌ）。その結果を、以下の表２及び図２に示し
た。表２は各ペプチド濃度におけるＡＣＥ活性（ＩＵ／
Ｌ）とペプチド濃度が０μｇの場合に対するＡＣＥ活性
の変化率（％）を表したものである。また、図２は、表
２のＡＣＥ活性の変化率（％）の結果をプロットしたも
のである。尚、ＡＣＥの活性値（ＩＵ／Ｌ）は以下の式
により計算した。また、５０％阻害量（μｇ）は、図２
のグラフの直線の傾きから計算した。
以下の手順に従って、実施例及び比較例のＡＣＥ阻害活
性を測定した。試薬であるＡＣＥ溶液は、上記ＡＣＥ評
品の１Ｕｎｉｔを殺菌注射用蒸留水（株式会社大塚製薬
製）を用いて１００ｍＵ／１０ｍｌに希釈し、３０分間
室温に放置して調製した。ペプチド溶液として、実施例
１〜６及び比較例１〜２の各ペプチドを、殺菌注射用蒸
留水（株式会社大塚製薬製）にそれぞれ０、５、１０、
２０、４０、５０μｇ加えて調製した。そして、このペ
プチド溶液０．０５ｍｌを、上記ＡＣＥ溶液０．０５ｍ
ｌに添加して３７℃で１時間反応させて検体溶液とし
た。次に、ホウ酸緩衝液（ｐＨ８．３、０．１２Ｍホウ
酸及び０．７ＭＮａＣｌを含む）に基質溶液（ｐ−ヒド
ロキシベンゾイル−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕを１０ｍ
Ｍ、４−アミノアンチピリンを２．５ｍＭ及びヒプリカ
ーゼを３ＩＵ／ｍｌ含む）を添加して、３７℃で３分間
加温し、この基質溶液を上記反応後の検体溶液に０．５
ｍｌ分注した。混合後、３７℃で２０分インキュベート
し、その後、反応停止発色液（ＥＤＴＡ−Ｎａを３ｍ
Ｍ、トリトンＸ−１００を０．２％、メタ過ヨウ素酸ナ
トリウムを６．５ｍＭ含む）を１．５ｍｌ添加して３７
℃で３分間インキュベートすることにより、反応を停止
させて発色をさせた。そして、分析器として「コバス
ミラ」（ロシュ社製）を用い、精製水を対照として、波
長５０５ｎｍにおける生成したキノンイミン色素を測定
し、図１に示す検量線より、１分間あたりのＡＣＥ阻害
活性をタンパク質単位あたりで換算して求めた（単位：
ＩＵ／Ｌ）。その結果を、以下の表２及び図２に示し
た。表２は各ペプチド濃度におけるＡＣＥ活性（ＩＵ／
Ｌ）とペプチド濃度が０μｇの場合に対するＡＣＥ活性
の変化率（％）を表したものである。また、図２は、表
２のＡＣＥ活性の変化率（％）の結果をプロットしたも
のである。尚、ＡＣＥの活性値（ＩＵ／Ｌ）は以下の式
により計算した。また、５０％阻害量（μｇ）は、図２
のグラフの直線の傾きから計算した。
【００２９】 ＡＣＥ活性（ＩＵ／Ｌ）＝〔（Ａ−Ｂ）×Ｖ×１０6〕／１２０００×２０×ｖ ＝（Ａ−Ｂ）×８７．５ 〔Ａ：検体の吸光度、Ｂ：ブランクの吸光度、Ｖ：反応
総量（２．１ｍｌ）、ｖ：検体量（０．１ｍｌ）、１２
０００：キノンイミン色素のモル吸光係数、２０：反応
時間（分）〕
総量（２．１ｍｌ）、ｖ：検体量（０．１ｍｌ）、１２
０００：キノンイミン色素のモル吸光係数、２０：反応
時間（分）〕
【００３０】
【表２】
【００３１】（３）耐熱性の評価 本発明のペプチドの耐熱性を、以下に示す方法により評
価した。上記実施例１〜６及び比較例１〜２の各ペプチ
ド５μｇ／ｍｌをセラミチューブに入れ、１２０℃で３
０分間オートクレーブを行い、その後、実施例１〜６及
び比較例１〜２の各ペプチドの温度を室温に戻した後
に、これらのＡＣＥ阻害活性を、上記（２）ＡＣＥ阻害
活性の評価の項で述べた測定方法と同じ方法により測定
し、加熱前後におけるＡＣＥ阻害活性の変化を調べた。
その結果を表３及び図３に示す。
価した。上記実施例１〜６及び比較例１〜２の各ペプチ
ド５μｇ／ｍｌをセラミチューブに入れ、１２０℃で３
０分間オートクレーブを行い、その後、実施例１〜６及
び比較例１〜２の各ペプチドの温度を室温に戻した後
に、これらのＡＣＥ阻害活性を、上記（２）ＡＣＥ阻害
活性の評価の項で述べた測定方法と同じ方法により測定
し、加熱前後におけるＡＣＥ阻害活性の変化を調べた。
その結果を表３及び図３に示す。
【００３２】
【表３】
【００３３】（４）実施例の効果 表２及び図２の結果より、比較例１は１２μｇでＡＣＥ
の５０％阻害活性が認められた。比較例２はアンギオテ
ンシンＩＩのレセプターと結合阻害を起こすペプチドで
あり、本実施例でも特に高濃度ではＡＣＥ阻害作用はあ
まりよくない結果となっている。これに対し、実施例１
〜６ではいずれもＡＣＥ阻害作用が見られ、５０％阻害
活性が認められる量も３．８〜７．５μｇと、比較例１
の１２μｇと比べていずれも低かった。この中でも、特
に実施例２、３及び６は２０μｇ以上の高用量になると
ＡＣＥ阻害作用が著しく現れていることが分かる。ま
た、実施例１及び実施例４の場合、５０μｇでのＡＣＥ
阻害作用は、比較例１とほぼ同じくらいであるが、５０
％阻害活性が認められる量はそれぞれ７．５μｇ、４．
６μｇといずれも比較例１よりも低く、また、１０μｇ
以下の低用量でのＡＣＥ阻害作用も比較例１よりも優れ
ていることが分かる。これは特に実施例４によく現れて
いる。更に、実施例５は、高用量になるとＡＣＥ阻害作
用がかなり悪くなるが、５０％阻害活性が認められる量
は実施例の中では最も低い３．８μｇであり、また、５
μｇという低用量でのＡＣＥ阻害作用は、その他の実施
例及び比較例よりも優れていることが分かる。
の５０％阻害活性が認められた。比較例２はアンギオテ
ンシンＩＩのレセプターと結合阻害を起こすペプチドで
あり、本実施例でも特に高濃度ではＡＣＥ阻害作用はあ
まりよくない結果となっている。これに対し、実施例１
〜６ではいずれもＡＣＥ阻害作用が見られ、５０％阻害
活性が認められる量も３．８〜７．５μｇと、比較例１
の１２μｇと比べていずれも低かった。この中でも、特
に実施例２、３及び６は２０μｇ以上の高用量になると
ＡＣＥ阻害作用が著しく現れていることが分かる。ま
た、実施例１及び実施例４の場合、５０μｇでのＡＣＥ
阻害作用は、比較例１とほぼ同じくらいであるが、５０
％阻害活性が認められる量はそれぞれ７．５μｇ、４．
６μｇといずれも比較例１よりも低く、また、１０μｇ
以下の低用量でのＡＣＥ阻害作用も比較例１よりも優れ
ていることが分かる。これは特に実施例４によく現れて
いる。更に、実施例５は、高用量になるとＡＣＥ阻害作
用がかなり悪くなるが、５０％阻害活性が認められる量
は実施例の中では最も低い３．８μｇであり、また、５
μｇという低用量でのＡＣＥ阻害作用は、その他の実施
例及び比較例よりも優れていることが分かる。
【００３４】また、表３及び図３の結果より、比較例１
はＡＣＥ阻害作用を有しているものの、加熱後にＡＣＥ
活性が向上していることから、加熱によりＡＣＥ阻害作
用が低下していること、即ち、耐熱性が低いことが分か
る。これに対し、実施例１〜６の場合、実施例２及び実
施例５は加熱によりＡＣＥ阻害作用が低下しているが、
比較例１と比べてその低下割合は低いことから、比較例
１よりも耐熱性を有するペプチドであることが分かる。
また、実施例３及び実施例６は加熱前後でＡＣＥ活性に
大きな変化が見られないことから、耐熱性に優れている
ペプチドであることが分かる。更に、Ｃ末端から２番目
のアミノ酸のみが異なるペプチドである実施例１及び実
施例４は、加熱後のＡＣＥ活性が低いことから、加熱に
よりかえってＡＣＥ阻害作用が維持ないし増強されてい
ることが分かる。
はＡＣＥ阻害作用を有しているものの、加熱後にＡＣＥ
活性が向上していることから、加熱によりＡＣＥ阻害作
用が低下していること、即ち、耐熱性が低いことが分か
る。これに対し、実施例１〜６の場合、実施例２及び実
施例５は加熱によりＡＣＥ阻害作用が低下しているが、
比較例１と比べてその低下割合は低いことから、比較例
１よりも耐熱性を有するペプチドであることが分かる。
また、実施例３及び実施例６は加熱前後でＡＣＥ活性に
大きな変化が見られないことから、耐熱性に優れている
ペプチドであることが分かる。更に、Ｃ末端から２番目
のアミノ酸のみが異なるペプチドである実施例１及び実
施例４は、加熱後のＡＣＥ活性が低いことから、加熱に
よりかえってＡＣＥ阻害作用が維持ないし増強されてい
ることが分かる。
【００３５】尚、本発明においては、前記具体的実施例
に示すものに限られず、目的、用途に応じて本発明の範
囲内で種々変更した実施例とすることができる。例え
ば、本発明のＡＣＥ阻害ペプチドの製造方法としては、
天然物から製造する場合でも、米糠・大豆発酵抽出エキ
スから分離精製するだけでなく、その他の天然物から発
酵あるいは抽出してもよい。また、Ｂｏｃ法やＦｍｏｃ
法等のペプチド合成法により、上記アミノ酸配列を有す
るペプチドを人工的に合成して製造してもよく、更に、
本発明のペプチドをコードする組み替えＤＮＡを用いて
遺伝子工学的手法等により製造してもよい。また、使用
形態についてもＡＣＥ阻害作用を失わない限りは特に限
定はなく、例えば、発酵又は人工合成等によって得られ
た本発明の粗ペプチドを精製することなくそのまま用い
てもよく、又は、精製後の本発明のペプチドを単独で、
あるいは２種以上混合して使用してもよい。
に示すものに限られず、目的、用途に応じて本発明の範
囲内で種々変更した実施例とすることができる。例え
ば、本発明のＡＣＥ阻害ペプチドの製造方法としては、
天然物から製造する場合でも、米糠・大豆発酵抽出エキ
スから分離精製するだけでなく、その他の天然物から発
酵あるいは抽出してもよい。また、Ｂｏｃ法やＦｍｏｃ
法等のペプチド合成法により、上記アミノ酸配列を有す
るペプチドを人工的に合成して製造してもよく、更に、
本発明のペプチドをコードする組み替えＤＮＡを用いて
遺伝子工学的手法等により製造してもよい。また、使用
形態についてもＡＣＥ阻害作用を失わない限りは特に限
定はなく、例えば、発酵又は人工合成等によって得られ
た本発明の粗ペプチドを精製することなくそのまま用い
てもよく、又は、精製後の本発明のペプチドを単独で、
あるいは２種以上混合して使用してもよい。
【００３６】
【発明の効果】本発明に係るペプチドは、ＡＣＥを阻害
するよって血圧上昇を抑制する効果を有することから、
摂取することにより高血圧の予防・改善を図ることがで
きる。特に耐熱性を有するものの場合、食品加工におい
て加熱工程を経ることにより分解されてＡＣＥ阻害活性
が低下しないことから、健康食品として摂取することに
より、日常の食生活において血圧上昇を抑制することが
できる。また、本発明に係るペプチドは、人工合成の
他、天然物である米糠・大豆を発酵させて、その発酵抽
出エキスから分離・精製して製造することもできること
から、水溶性で食品に添加し易く、しかも安全性が高
い。
するよって血圧上昇を抑制する効果を有することから、
摂取することにより高血圧の予防・改善を図ることがで
きる。特に耐熱性を有するものの場合、食品加工におい
て加熱工程を経ることにより分解されてＡＣＥ阻害活性
が低下しないことから、健康食品として摂取することに
より、日常の食生活において血圧上昇を抑制することが
できる。また、本発明に係るペプチドは、人工合成の
他、天然物である米糠・大豆を発酵させて、その発酵抽
出エキスから分離・精製して製造することもできること
から、水溶性で食品に添加し易く、しかも安全性が高
い。
【００３７】
【配列表】<110>株式会社東洋発酵（TOYO HAKKO CO., L
TD.） <120>オクタペプチド、アンギオテンシンＩ変換酵素阻
害ペプチド及びその製造方法 <130> P1541 <160> ６ <210> 1 <211> 8 <212> PRT <213> Oryza sativa L. <400> 1 <210> 2 <211> 8 <212> PRT <213> Oryza sativa L. <400> 2 <210> 3 <211> 8 <212> PRT <213> Oryza sativa L. <400> 3 <210> 4 <211> 8 <212> PRT <213> Oryza sativa L. <400> 4 <210> 5 <211> 8 <212> PRT <213> Oryza sativa L. <400> 5 <210> 6 <211> 8 <212> PRT <213> Oryza sativa L. <400> 6
TD.） <120>オクタペプチド、アンギオテンシンＩ変換酵素阻
害ペプチド及びその製造方法 <130> P1541 <160> ６ <210> 1 <211> 8 <212> PRT <213> Oryza sativa L. <400> 1 <210> 2 <211> 8 <212> PRT <213> Oryza sativa L. <400> 2 <210> 3 <211> 8 <212> PRT <213> Oryza sativa L. <400> 3 <210> 4 <211> 8 <212> PRT <213> Oryza sativa L. <400> 4 <210> 5 <211> 8 <212> PRT <213> Oryza sativa L. <400> 5 <210> 6 <211> 8 <212> PRT <213> Oryza sativa L. <400> 6
【図１】本実施例のＡＣＥ活性を測定するために用いた
検量線を示したグラフである。
検量線を示したグラフである。
【図２】本実施例のペプチドの添加量（μｇ）と、ペプ
チド無添加の場合のＡＣＥ活性を１００％とした場合の
ＡＣＥ活性の割合（％）を示したグラフである。
チド無添加の場合のＡＣＥ活性を１００％とした場合の
ＡＣＥ活性の割合（％）を示したグラフである。
【図３】本実施例の加熱前に対する加熱後のＡＣＥ活性
の変化率（％）を示したグラフである。
の変化率（％）を示したグラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） //(Ｃ１２Ｐ 21/02 Ａ６１Ｋ 37/02 Ｃ１２Ｒ 1:07） (Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:125） Ｃ０７Ｋ 123:00 (72)発明者 岡田 利孝 愛知県大府市追分町３丁目89番地 株式会 社東洋発酵内 (72)発明者 山田 拓毅 愛知県大府市追分町３丁目89番地 株式会 社東洋発酵内 Ｆターム(参考） 4B064 AG23 BA09 BA10 CA02 CB06 CC03 CD22 CE08 CE10 DA01 DA10 4C084 AA02 AA06 AA07 BA01 BA02 BA16 BA17 CA04 CA14 CA15 DC40 MA17 MA52 MA59 MA66 ZA422 ZC172 4H045 AA10 AA20 AA30 BA15 CA31 CA33 DA57 EA01 EA23 FA33 FA73 GA01 GA22 GA25 HA02 HA03
Claims (20)
- 【請求項１】 少なくともカルボキシル基末端側に、Ｔ
ｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのアミノ酸配列を含むこ
とを特徴とするアンギオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチ
ド。 - 【請求項２】 アミノ酸配列がＩｌｅ−〔Ｘ〕−〔Ｙ〕
−〔Ｚ〕−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのオクタペ
プチドであることを特徴とするアンギオテンシンＩ変換
酵素阻害ペプチド。（上記アミノ酸配列中、〔Ｘ〕、
〔Ｙ〕及び〔Ｚ〕は、任意のアミノ酸を意味する。） - 【請求項３】 上記〔Ｚ〕が疎水性アミノ酸である請求
項２に記載のアンギオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチ
ド。 - 【請求項４】 上記〔Ｘ〕はＳｅｒ又はＰｒｏであり、
上記〔Ｙ〕はＴｙｒ又はＨｉｓであり、上記〔Ｚ〕がＩ
ｌｅ又はＶａｌである請求項２又は３に記載のアンギオ
テンシンＩ変換酵素阻害ペプチド。 - 【請求項５】 アミノ酸配列がＩｌｅ−Ｓｅｒ−Ｈｉｓ
−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのオクタペ
プチドであることを特徴とするアンギオテンシンＩ変換
酵素阻害ペプチド。 - 【請求項６】 アミノ酸配列がＩｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ
−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのオクタペ
プチドであることを特徴とするアンギオテンシンＩ変換
酵素阻害ペプチド。 - 【請求項７】 アミノ酸配列がＩｌｅ−Ｐｒｏ−Ｔｙｒ
−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓのオクタペ
プチドであることを特徴とするアンギオテンシンＩ変換
酵素阻害ペプチド。 - 【請求項８】 アミノ酸配列がＶａｌ−Ａｌａ−Ｈｉｓ
−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−〔Ａ〕−Ｌｙｓのオクタペ
プチドであることを特徴とするアンギオテンシンＩ変換
酵素阻害ペプチド。（上記アミノ酸配列中、〔Ａ〕は、
任意のアミノ酸を意味する。） - 【請求項９】 上記〔Ａ〕がＴｒｐ又はＧｌｙである請
求項８に記載のアンギオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチ
ド - 【請求項１０】 アミノ酸配列がＶａｌ−Ａｌａ−Ａｓ
ｐ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓのオクタ
ペプチドであるアンギオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチ
ド。 - 【請求項１１】 米糠類、大豆類及び炭素源を含む培地
に納豆菌あるいは枯草菌を接種し、発酵培養して得られ
た発酵培養液から抽出され、平均分子量が２０００以下
であることを特徴とするアンギオテンシンＩ変換酵素阻
害ペプチド。 - 【請求項１２】 １２０℃、３０分間オートクレーブを
行った後のアンギオテンシンＩ変換酵素活性の割合が、
オートクレーブ前のアンギオテンシンＩ変換酵素活性に
対して１２０％以下である請求項１乃至請求項１１のい
ずれかに記載のアンギオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチ
ド。 - 【請求項１３】 有効成分として、請求項１乃至請求項
１２のいずれかに記載のアンギオテンシンＩ変換酵素阻
害ペプチドを少なくとも１種含有することを特徴とする
血圧降下剤。 - 【請求項１４】 アミノ酸配列がＩｌｅ−Ｓｅｒ−Ｈｉ
ｓ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓであるこ
とを特徴とするオクタペプチド。 - 【請求項１５】 アミノ酸配列がＩｌｅ−Ｓｅｒ−Ｔｙ
ｒ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓであるこ
とを特徴とするオクタペプチド。 - 【請求項１６】 アミノ酸配列がＩｌｅ−Ｐｒｏ−Ｔｙ
ｒ−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓであるこ
とを特徴とするオクタペプチド。 - 【請求項１７】 アミノ酸配列がＶａｌ−Ａｌａ−Ｈｉ
ｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓであるこ
とを特徴とするオクタペプチド。 - 【請求項１８】 アミノ酸配列がＶａｌ−Ａｌａ−Ｈｉ
ｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓであるこ
とを特徴とするオクタペプチド。 - 【請求項１９】 アミノ酸配列がＶａｌ−Ａｌａ−Ａｓ
ｐ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓであるこ
とを特徴とするオクタペプチド。 - 【請求項２０】 米糠類、大豆類及び炭素源を含む培地
に納豆菌あるいは枯草菌を接種して、通気攪拌を行うこ
とにより発酵培養し、この発酵培養液から抽出処理をす
ることにより、アンギオテンシンＩ変換酵素阻害ペプチ
ドを製造することを特徴とするアンギオテンシンＩ変換
酵素阻害ペプチドの製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11030663A JP2000229996A (ja) | 1999-02-08 | 1999-02-08 | オクタペプチド、アンギオテンシンｉ変換酵素阻害ペプチド及びその製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP11030663A JP2000229996A (ja) | 1999-02-08 | 1999-02-08 | オクタペプチド、アンギオテンシンｉ変換酵素阻害ペプチド及びその製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000229996A true JP2000229996A (ja) | 2000-08-22 |
Family
ID=12309995
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP11030663A Pending JP2000229996A (ja) | 1999-02-08 | 1999-02-08 | オクタペプチド、アンギオテンシンｉ変換酵素阻害ペプチド及びその製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2000229996A (ja) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003013565A1 (fr) * | 2001-08-08 | 2003-02-20 | Toyo Hakko Co., Ltd. | Materiaux fonctionnels, agonistes sod, hypotensifs et thrombolytiques, leur procede de production et souches microbiennes a utiliser |
| EP2004673A1 (en) * | 2006-03-29 | 2008-12-24 | Sergey V. Litvinov | Immunomodulating oligopeptides |
| JP2009143880A (ja) * | 2007-12-18 | 2009-07-02 | Tiens Japan Inc | 有害物質消去作用を呈するベータグルカンペプチド誘導体及びその製造方法 |
| JP2013032333A (ja) * | 2011-07-01 | 2013-02-14 | Raffine International:Kk | 大豆米糠発酵組成物及びその製造方法、並びに、抗高血圧組成物及び飲食品 |
| JP2014132012A (ja) * | 2014-02-18 | 2014-07-17 | Rheology Kino Shokuhin Kenkyusho:Kk | Ｔｒｐ含有ペプチド |
| WO2017002894A1 (ja) * | 2015-07-01 | 2017-01-05 | サントリーホールディングス株式会社 | 血圧降下用組成物 |
| JP2018104373A (ja) * | 2016-12-27 | 2018-07-05 | 株式会社東洋発酵 | 更年期不定愁訴緩和剤 |
| CN112852909A (zh) * | 2021-01-25 | 2021-05-28 | 韩山师范学院 | 一种混合菌种固态发酵虾头制备ace抑制肽的方法 |
-
1999
- 1999-02-08 JP JP11030663A patent/JP2000229996A/ja active Pending
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003013565A1 (fr) * | 2001-08-08 | 2003-02-20 | Toyo Hakko Co., Ltd. | Materiaux fonctionnels, agonistes sod, hypotensifs et thrombolytiques, leur procede de production et souches microbiennes a utiliser |
| EP2004673A1 (en) * | 2006-03-29 | 2008-12-24 | Sergey V. Litvinov | Immunomodulating oligopeptides |
| JP2009143880A (ja) * | 2007-12-18 | 2009-07-02 | Tiens Japan Inc | 有害物質消去作用を呈するベータグルカンペプチド誘導体及びその製造方法 |
| JP2013032333A (ja) * | 2011-07-01 | 2013-02-14 | Raffine International:Kk | 大豆米糠発酵組成物及びその製造方法、並びに、抗高血圧組成物及び飲食品 |
| JP2014132012A (ja) * | 2014-02-18 | 2014-07-17 | Rheology Kino Shokuhin Kenkyusho:Kk | Ｔｒｐ含有ペプチド |
| WO2017002894A1 (ja) * | 2015-07-01 | 2017-01-05 | サントリーホールディングス株式会社 | 血圧降下用組成物 |
| JPWO2017002894A1 (ja) * | 2015-07-01 | 2018-04-19 | サントリーホールディングス株式会社 | 血圧降下用組成物 |
| JP2018104373A (ja) * | 2016-12-27 | 2018-07-05 | 株式会社東洋発酵 | 更年期不定愁訴緩和剤 |
| CN112852909A (zh) * | 2021-01-25 | 2021-05-28 | 韩山师范学院 | 一种混合菌种固态发酵虾头制备ace抑制肽的方法 |
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