KR20080084117A - 진세노사이드 Ｒｏ(ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｏ)를함유하는 조성물 - Google Patents

진세노사이드 Ｒｏ(ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｏ)를함유하는 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)를 유효성분으로 포함하는 항산화용, 항비만용, 발모 및 탈모방지용, 및 태닝용 조성물을 제공한다. 본 발명의 조성물은 피부에 대한 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있으므로, 항산화용, 항비만용, 탈모방지 및 발모용, 또는 태닝용 화장료, 의약 또는 식품 등에 유용하게 사용할 수 있다.
진세노사이드 Ro, 항산화, 항비만, 탈모방지, 발모, 태닝

Description

진세노사이드 Ｒｏ(ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｏ)를 함유하는 조성물{Composition containing ginsenoside Ro}
본 발명은 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)를 유효성분으로 포함하는 조성물에 관한 것이다.
현대사회는 환경오염, 자동차배기가스 등으로 인해 호르몬 불균형 현상의 심화로 탈모 발생율이 높아지고, 발생연령은 낮아지는 한편, 피부면역시스템의 부조화가 초래되어 아토피와 건선 등의 다양한 피부질환이 발생하고 있다. 또한 인스턴트 음식, 육류중심의 식생활변화로 어린나이에도 불구하고 비만으로 고통을 받고 있는 인구가 급격히 증가하고 있다.
따라서, 미적인 차원뿐만 아니라 심각한 사회문제가 되고 있는 여러가지 현상 즉, 내인선노화와 자외선에 의한 주름발생, 기미 또는 주근깨, 비만, 면역불균형, 탈모 등과 같은 현상을 효과적으로 해결할 수 있는 물질개발이 심도깊게 연구되고 있다.
이러한 배경 하에서, 본 발명자들은 안정성이 높으며, 효능이 우수한 화장료 를 찾기 위하여 천연식물을 대상으로 유효물질을 검색한 결과, 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)이 다양한 생리활성을 가지고 있으면서, 안전성과 안정성이 뛰어남을 확인하였다.
진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)은 고려백삼과 고려홍삼에 존재하는 oleanolic acid계 진세노사이드이다. 알려진 활성으로는 항염증 작용, 해독작용, 항트롬빈 작용, 혈소판 응집 억제작용, 항간염작용, 대식세포 활성화 작용 등이 있다고 보고되어 있다.
본 발명자들은 항비만효과, 탈모방지 및 육모효과, 항산화효과가 우수하고 안정성이 높아 피부 부작용이 없는 신규 물질을 개발하고자 노력한 결과, 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명의 하나의 목적은 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)을 포함하는 항비만용, 항산화용, 발모 및 탈모방지용, 및 태닝용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 상기 조성물을 포함하는 항비만용, 항산화용, 발모 및 탈모방지용, 및 태닝용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 상기 조성물을 포함하는 항비만용, 항산화용, 발모 및 탈모방지용, 및 태닝용 약제학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명은 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)를 유효성분으로 포함하는 다양한 용도의 조성물을 제공한다. 이하 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다.
진세노사이드 Ro는 2-메틸-5-(1-메틸에틸)페놀[2-methyl-5-(1-methyl ethyl)phenol] 로서 식물 유래의 화합물이다. 본 발명의 진세노사이드 Ro는 천연 공급원(예를 들어, 고려홍삼, 고려백삼)로부터 분리하여 제조하거나 인공적으로 제조한 것을 사용할 수 있다.
본 발명은 진세노사이드 Ro를 유효성분으로 포함하는 항산화용 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한 진세노사이드 Ro를 유효성분으로 포함하는 항비만용 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한 진세노사이드 Ro를 유효성분으로 포함하는 발모 또는 탈모방지용 조성물을 제공한다.
본 발명은 또한 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)를 유효성분으로 포함하는 태닝용 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물에서, 진세노사이드 Ro의 양은 전체 조성물에 대하여 0.0001 내지 10 중량%가 바람직하다. 0.00001 중량% 미만인 경우에는 상기에서 언 급된 효능이 너무 미약하고, 15 중량%를 초과하는 경우에는 함량의 증가에 따른 효과의 증가가 미비하며 제형의 안정성이 확보되지 않는 문제점이 있다. 보다 바람직하게는 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)은 전체 조성물에 대하여 0.0001 내지 5 중량% 포함된다.
본 발명의 조성물은 화장료 조성물을 포함한다.
본 발명의 화장료 조성물은 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro) 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함한다. 예를 들어 다른 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및/또는 담체를 포함할 수 있다. 또한 상기 화장료 조성물은 상기의 다양한 효과를 증진시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 또한 약제학적 조성물을 포함한다.
본 발명의 약제학적 조성물에서, 유효성분인 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)의 양은 전체 조성물에 대하여 0.0001 내지 10 중량%, 바람직하게는 0.0001 내지 5 중량% 포함할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 진세노사이드 Ro이외에 약제학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물의 제형으로는 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 연고, 크림 등의 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액 등을 비롯하여 약제학적 제제에 적합한 어떠한 형태로든 제형화하여 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 비경구, 경구 등의 다양한 경로로 투여될 수 있으며, 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다. 이때, 비경구 경로로는 경피 투여가 바람직하며, 그 중에서도 국소 도포가 가장 바람직하다.
상기 제제의 투여량은 대상자의 연령, 성별, 체중, 증상, 투여 방법에 의해 상이하나, 외용제의 경우는 1일당 1.0 내지 3.0㎖로 이를 1일 1 내지 5회 도포하여 1개월 이상 계속하는 것이 바람직하다.
또한, 경구형 제형의 경우도 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 0.1 내지 100㎎/㎏의 양을 1일 1회 내지 수회 투여할 수 있다. 또한 그 투여량은 투여경로, 질병의 정도, 성별, 체중, 나이 등에 따라서 증감될 수 있다. 따라서, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
한편, 본 발명의 실시예에서 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)에 대한 피부누적 자극시험 결과 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)은 천연 물질로서 인체에 무해한 물질임이 밝혀졌다. 따라서, 본 발명의 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)은 독성 및 부작용이 거의 없으므로 장기간 사용 시에도 안심하고 사용할 수 있으며, 특히 상기한 바와 같은 화장료 조성물 및 약제학적 조성물 등에 안전하게 적용할 수 있다.
이하 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 그러나 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
실험예 1 : 진세노사이드 Ro ( ginsenoside Ro )의 인체 피부에 대한 안전성 확인
진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)가 인체피부에 안전한지 확인하기 위하여, 피부 안전성 검증 실험을 수행하였다. 이를 위해 하기와 같은 피부누적자극시험을 실시하였다.
스쿠알렌을 베이스로 하고, 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)(제조사: Biopharma, China, 99%) 1%, 5%, 10%를 각각 첨가한 제형 진세노사이드 Ro-1%, 진세노사이드 Ro-5%, 진세노사이드 Ro-10%를 제조하였다. 이들을 사용하여 건강한 30명의 성인을 대상으로 윗팔뚝 부위에 격일로 총 9회의 24시간 누적 첩포를 시행하여 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)가 피부에 자극을 주는지의 여부를 측정하였다.
첩포 방법은 핀 챔버 (Finn chamber, Epitest Ltd, 핀란드)를 이용하였다. 챔버에 상기 각 피부외용제를 15ul씩 적하한 후 첩포를 실시하였다. 매회 피부에 나타난 반응의 정도를 하기 수학식 1을 이용하여 점수화하였으며, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다(하기 표1에서, 반응도에서 ± 는 1점, +는 2점, ++는 4점의 점수를 부여하며, 평균반응도가 3 미만일 때 안전한 조성물로 판정된다).
[수학식 1]
평균반응도=[[반응지수x 반응도/ 총피검자수 x 최고점수 (4점)] x 100 ] ÷ 검사회수 (9회)
시험물질 반응이 나타난 피검자 수 평균반응도
1주 2주 3주
1차 2차 3차 4차 5차 6차 7차 8차 9차
± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋ ± ＋ ＋＋
대조군(스쿠알렌) 2 - - 0 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.18
진세노사이드 Ro-1% 2 - - 0 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.18
진세노사이드 Ro -5% 2 - - 0 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.18
진세노사이드 Ro-10% 2 - - 0 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 0.18
상기 표 1에서 진세노사이드 Ro-1%, 진세노사이드 Ro-5%, 진세노사이드 Ro-10% 모두 ±, +, ++에 해당하는 사람의 수가 각각 2명, 0명, 0명이고, 평균 반응도는 0.18이었다. 따라서, 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)은 뚜렷한 누적자극 양상을 나타내지 않는 인체 피부에 안전한 물질로 판정되었다.
실시예 1: 진세노사이드 Ro ( ginsenoside Ro )의 항산화 효과 확인
먼저 DMSO(dimethylsulfoxide)용매에 녹인 진세노사이드 Ro(제조사:Biopharma, China, 98%) 20 ul를 96 well 플레이트에 넣고 200 uM DPPH(1,1-diphenyl- 2-picrylhydrazyl) 용액을 180ul씩 다시 넣어주어, 진세노사이드 Ro의 처리농도가 10uM, 100uM, 1000uM 가 되게 하였다. 상온에서 30분간 배양(incubation)하였다. 남아있는 DPPH의 양을, 흡광도기계(microplate reader, Bio-Tek ELx8081U, 미국)를 이용하여 540nm에서의 흡광도 측정을 통해 결정하였다(여기서, DPPH는 색을 띄는 라디칼로, 시료의 라디칼 제거능력을 색깔의 변화로 직접 확인할 수 있게 하는 지시약이다). 즉, 항산화 효과는 진세노사이드 Ro 시료에 의한 자유라디칼 제거율을 관찰함으로써, 항산화기능의 유무를 판단하였다. 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)의 항산화 효과는 하기 표 2와 같다.
시료 처리 농도 (uM) superoxide anion제거율 (%)
진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro) 10 8
100 26
1000 42
상기 표 2에 기재된 바와 같이, 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)은 항산화효과를 가지고 있음을 알 수 있다.
실시예 2: 진세노사이드 Ro ( ginsenoside Ro )의 항비만효과 확인
비만억제효과 실험은 일반적으로 잘 알려진, 동물을 이용한 하기 방법으로 실시하였다.
(비만억제활성의 측정방법)Crj : 생후 7주된 ICR 계 수컷 마우스(닛폰챨스리버(주))를 1주일 동안 예비사육한 후, 1군 7마리로 실험에 사용하였다. 동물은 온도 23±1℃, 습도 55±5%, 조명시간 12시간/일(day)로 설정된 항온항실에서 사육하고, 사료에 라보MR (닛폰노산 제)을 사용하며 물은 자유롭게 섭취할 수 있도록 하였다. 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)(제조사:Biopharma, China)는 0.1%, 1%의 농도로, 비트사포닌은 1%의 농도가 되도록 리포좀제형(레시틴 5%에 녹인 것)으로 각각 제조하였다. 각 시료 용액은 마우스 10g당 0.1㎖ 투여되도록 농도를 조정하여, 투여량을 1.5g/kg, 1g/kg으로 하였다. 또한, 대조군은 5% 레시틴 에멀젼으로 하였다. 마우스는 투여하기 전날부터 절식(絶食) 상태로 하여 다음 날 강제로 단회(單回) 투여하였다. 시험기간은 2주일로 하고, 체중 및 일반증상을 측정, 관찰하였다. 그 결과는 하기 표3과 같다.
일수 체중(g)
무처리구 비트사포닌 (1%) 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)(0.1%) 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)(1%)
5 32 32 31 32
10 43 37 33 33
15 55 47 39 37
진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)는 비만억제 효과를 나타내었다. 투여 농도가 높아질수록 그 효능이 우수함을 관찰할 수 있다. 뿐만 아니라, 기존의 항비만제로 알려진 비트사포닌보다 항비만 효과가 우수함을 알 수 있다.
실시예 3: 진세노사이드 Ro ( ginsenoside Ro )의 탈모방지 및 육모효과 확인
탈모방지와 육모효과에 대한 효과를 측정하기 위하여 시료를 방부제(제조사: 한남케미칼, 한국, 제품명: 메틸파라벤)와 점증제(제조사:Shandong Fufeng Fermentation Co., Ltd, 제품명:Xanthan Gum)만 함유한 하이드로젤 베이스로 만들어 시험을 실시하였다. 제조한 발모촉진용 외용액제를 이용하여 약화 또는 방사능노출에 따른 탈모 환자 10명의 탈모부위에 1일 2회 각각 3㏄(시료의 최종 농도 각각 0.1%)씩 6개월간 적용하였다. 시험결과는 하기의 표4와 같으며, 대조군은 한미약품에서 판매 중인 목시딜을 사용하였다(하기의 표4에서, 반응도에서 - 는 육모효과가 없는 상태를 나타내며, +는 육모효과가 1%이내인 효능을 나타내고, ++는 육모효과가 10%이상인 효능을 나타낸다).
무처리군 진세노사이드 Rb1 목시딜 진세노사이드 Ro
반응도 - + ++ ++
실험 결과, 탈모 환자 8명에게서 새로운 모근이 발생하는 등의 우수한 효과가 있는 것으로 나타났고, 상기 표4에서도 나타낸바와 같이 진세노사이드 Ro가 기존의 육모효과와 탈모방지 효과가 알려져 있는 진세노사이드Rb1보다 효능이 우수함을 알 수 있다.
실시예 4: 진세노사이드 Ro ( ginsenoside Ro )의 태닝(tanning)효과 확인
쥐의 색소세포(B16 melanoma cells)를 이용하여 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)에 의한 멜라닌 생성 촉진효과를 측정하였다.
본 실험은 murine melanoma(B-16 F10) 세포를 10%의 FBS(fetal bovine serum)가 함유된 DMEM 배지로 6-well plate에 well당 1× 105 개로 접종한 후, 5 % CO2 및 37 ℃하에서 세포가 well 바닥에 약 80 % 이상 부착될 때까지 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고 시료를 적당 농도로 희석된 배지에 교체하고, 5% CO2 , 37 ℃하에서 3일간 배양하였다. 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)의 농도범위는 세포독성이 없는 1 uM, 10 uM, 100 uM로 결정하였다. 배지를 제거한 세포를 PBS(phosphated buffer saline)로 세척하고, 이것을 트립신으로 처리하여 세포를 회수하였다. 회수된 세포는 hematocytometer를 이용하여 세포수를 측정한 후 5,000 내지 10,000 rpm으로 10분간 원심분리한 다음 상등액을 제거하여 pellet을 얻었다. 이 세포 pellet을 60℃에서 건조한 후, 10% DMSO가 함유된 1M 수산화나트륨액 100 ㎕를 넣어 60 ℃ 항온조에서 세포내 멜라닌을 얻었다. 이 액을 가지고 microplate reader로 490 nm에서 흡광도를 측정하여 세포 일정 수당 멜라닌 양을 구하였다. 그 결과는 하기 표 5와 같다.
% of control(멜라닌 생성율) 표준편차
control (무처리군) 100.00 3.69
DMSO 106.63 5.44
Ginsenoside Ro 1uM 105.74 0.31
Ginsenoside Ro 10uM 106.14 1.75
Ginsenoside Ro 100uM 124.92 0.69
상기 표 5에 기재된 바와 같이, 처리 농도에서 멜라닌 생성율이 무처리군에 비해 증가됨을 관찰할 수 있다. 따라서, 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)를 피부 무자극인 스킨 태닝(skin tanning)용으로 이용 가능함을 알 수 있다.
본 발명에 의하면 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)은 인체 안전성 시험에서 어떠한 독성이나 자극도 발생하지 않아 인체사용에 있어 안전한 물질인 것으로 판명되었으며, 항산화효과, 비만억제효과, 탈모방지 및 육모효과, 및 태닝효과를 가지고 있음이 밝혀졌다. 따라서 본 발명의 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)는 본 발명에서 언급된 용도용 화장료, 의약 또는 식품 등에 유용하게 사용할 수 있다.

Claims (9)

  1. 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)를 유효성분으로 포함하는 항산화용 조성물.
  2. 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)를 유효성분으로 포함하는 항비만용 조성물.
  3. 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)를 유효성분으로 포함하는 발모 또는 탈모방지용 조성물.
  4. 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)를 유효성분으로 포함하는 태닝용 조성물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 진세노사이드 Ro(ginsenoside Ro)가 전체 조성물의 총 중량에 대하여 0.0001 내지 10 중량% 포함되는 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 조성물이 화장료 조성물인 것인 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 조성물이 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데시션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것인 조성물.
  8. 제5항에 있어서, 조성물이 약제학적 조성물인 조성물.
  9. 제8항에 있어서, 조성물이 경피투여 제형인 것을 특징으로 하는 조성물.
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