KR20080071609A

KR20080071609A - 골관절염 치료를 위한 ａ3 아데노신 수용체 아고니스트의용도

Info

Publication number: KR20080071609A
Application number: KR1020087015391A
Authority: KR
Inventors: 니나 피쉬맨
Original assignee: 캔-파이트 바이오파마 리미티드
Priority date: 2005-11-30
Filing date: 2006-11-29
Publication date: 2008-08-04
Also published as: EP1959939A1; AU2006321165B2; BRPI0619395A2; WO2007063538A1; DK1959939T3; US10265337B2; CN101330909A; CN101330909B; US20080300213A1; CA2622879C; US20160263142A1; EP1959939B1; AU2006321165A1; JP2009517458A; JP5339916B2; CA2622879A1; ES2379591T3; KR101101252B1; JP2013166789A; ATE540673T1

Abstract

본 발명은 골관절염(OA)를 가진 포유동물의 치료제로서 약제학적 조성물을 제조하기 위한 A₃ 아데노신 수용체 아고니스트(A3AR 아고니스트)의 용도, OA를 치료하거나 진행을 방지하는데 효과적인 A₃AR 아고니스트의 용량을 제공한다. 본 발명에 따른 바람직한 A₃AR 아고니스트는 IB-MECA와 CI-IB-MECA이다. A₃AR 아고니스트는 메토트렉세이트(MTX), 와 같은, 다른 약물과 조합하여 투여될 수 있다. 본 발명은 또한 A₃AR 아고니스트의 용량을 포함하는 골관절염 치료제를 위한 약제학적 조성물을 제공한다.

골관절염, 아데노신 수용체, 아고니스트

Description

골관절염 치료를 위한 Ａ3 아데노신 수용체 아고니스트의 용도{USE Of A3 ADENOSINE RECEPTOR AGONIST IN OSTEOARTHRITIS TREATMENT}

본 발명은 치료법, 특히 골관절염 치료에 관한 것이다.

과거에 퇴행성 관절염으로 알려졌던, 골관절염은 가장 일반적인 형태의 관절염이다. 관절의 비정상 또는 손상 또는 관절의 손상없이 발생하는 관절 질환이다. 이 질환은 관절의 연골의 퇴보에 의한 것도 포함한다. 시간이 지나면서, 관절의 뼈 끝부분을 덮고 있는 연골은 찢어지기 시작하여 완전히 닳아 없어지면, 뼈들이 서로 마찰하여 통증을 유발하게 된다. 관절의 통증 때문에 이를 둘러싼 근육의 사용이 줄어들게 되어, 근육의 강도가 약해지게 된다.

골관절염의 일반적인 증상은 경직, 움직임의 제한, 통증, 관절 기형이며, 영향을 받은 관절은 부종, 일과성 열감(熱感)과 관절의 비정상적 비대를 나타낸다.

골관절염의 발생빈도는 남자와 여자가 비슷하다. 그러나, 남자들은 골반부 감염침공으로 인해 더 잦은 빈도의 질환을 겪지만, 여자들은 관절의 숫자에 보다 많은 영향을 받는다. 골관절염의 위험 요인은 노화(유병율은 나이가 들어감에 따라 상당히 증가한다), 비만증, 선천성 고관절 이형성증, 사고나 운동으로 이한 외상, 관절염의 전력, 약물, 특정한 직업군, 수술이나 유전을 포함한다. 골관절염 그 자체는 사람의 인생에 큰 영향을 미치지 않지만, 오랜 시간 동안 지속적으로 겪는 만성적인 골관절염은 통증과 관절의 기형을 일으켜서 인생의 질을 축소시킨다. 특히, 무릎의 골관절염은 만성 장애의 주요한 원인으로 알려져 있다.

골관절염의 치료를 위해서 다양한 약물과 치료법이 개발되고 사용되고 있다. 치료의 주요 목적은 통증을 경감시키고, 관절의 기능을 유지시키며 관절의 기능적 이상으로 인한 장애를 방지하는 것이다.

현재는 이러한 연골 손상의 효과를 반전시키는 약학적 치료법이 알려져 있지 않다. 오히려 골관절염 치료법들은 주로 증상을 치료하는 것을 목적으로 하고 있다. 이 점에 있어서는 골관절염은 항염증 효과 뿐만 아니라 진통효과를 가지는 수많은 비스테로이드성 항염증 약물(NSAIDs, 예를 들면 디클로페낙, 아스피린과 이부프로펜) 뿐만 아니라 프로스타글란딘의 합성을 막는 코르티코스테로이드 타입(예를 들면 하이드로코르티손과 베타메타손)의 항염증 물질을 사용하여 치료되어 왔다. 그러나 이들의 심각한 부작용 때문에 이러한 약물은 특별한 주의를 가지고 사용되었다.

따라서, 골관절염 치료를 위한 새로운 방법을 모색하고 개발할 필요성이 계속되고 있다.

본 발명은 포유동물의 골관절염 치료를 위한 약제학적 조성물의 제조를 위한 A₃ 아데노신 수용체 아고니스트(A₃AR 아고니스트)의 용도를 제공한다.

바람직하게는, 본 발명은 포유동물의 골관절염 치료방법을 제공하는데, 상기 방법은 상기 치료가 필요한 포유동물에게 골관절염을 치료하거나 진행을 방지하는데 효율적인 용량의 A₃AR 아고니스트을 투여하는 것을 포함한다.

더 바람직하게는, 본 발명은 활성 성분의 A₃AR 아고니스트와 약제학적으로 수용가능한 캐리어를 포함하는 포유동물의 골관절염 치료를 위한 약제학적 조성물을 제공한다.

A₃AR 아고니스트의 약제학적 용도는 단독으로 사용되거나 다른 약물 예를 들면 메토트렉세이트(MTX), 스테로이드, NSAIDS와 기타 다른 약물과 조합하여 사용될 수 있다.

본 발명은 이하에서 골관절염 치료가 필요한 포유동물에게 A₃AR 아고니스트를 투여하는 것을 포함하는 골관절염 치료를 위한 치료방법에 관련하여 상세한 설명에서 구체적으로 설명한다. 상기의 치료방법에 부가하여, 본 발명에 포함된 것은 효과적인 용량의 A₃AR 아고니스트와 약제학적으로 수용가능한 캐리어를 포함하는 골관절염의 치료를 위한 약제학적 조성물 뿐만 아니라 골관절염을 겪는 포유동물에 투여할 약제학적 조성물 제조를 위한 A₃AR 아고니스트의 용도이다.

명세서와 청구항에 사용된 용어들은 문맥에서 명확히 표현하지 않는 한, 복수개(plular) 뿐만 아니라 단수개(singular)도 포함한다. 예를 들면, "A ₃ AR 아고니스트" 용어는 하나 또는 그 이상의 아고니스트를 포함한다.

게다가, 상기에서 사용된, "포함하는" 용어는 방법이나 조성물이 인용된 요소들을 포함하지만, 다른 요소들을 제외하는 것은 아니라는 것을 의미하기 위한 것이다. 비슷한 의미의 "~를 필수적으로 구성하는" 용어는 인용된 요소들은 포함하지만 골관절염에 대해 필수적인 중요한 치료적 활성을 갖는 다른 요소들을 제외하는 방법과 조성물을 정의하기 위해 사용된다. 예를 들면, A₃AR 아고니스트를 필수적으로 구성하는 조성물은 그러한 활성을 갖는 오로지 무의미한 용량(골관절염에 무의미한 효과를 가지는 용량)의 다른 활성 성분을 포함하지 않거나 포함한다. 또한, 상기에서 정의한 A₃AR 아고니스트를 필수적으로 구성하는 조성물은 분리와 정제에서 나온 미량의 오염물, 인산염 생리식염 완충액, 부형제, 방부제 기타 등등과 같은 약제학적으로 수용가능한 캐리어를 제외하지 않는다. "구성하는" 용어는 다른 요소보다 훨씬 미량의 요소를 제외하는 것을 의미한다. 각각의 이러한 변환된 용어에 의해 정의된 실시예들은 본 발명의 범주안에서 사용된다.

게다가, 모든 수치값, 예컨대, 농도 또는 용량 또는 그로부터 나온 수치 범위는 서술된 값의 20% 까지, 때로는 10%까지 달라지는 (+) 또는 (-) 근사값이다. 모든 수치값이 "약 "이라는 용어를 붙여서 항상 명확하게 서술하지 않더라도 이해되어야 한다. 항상 명확하게 서술되지 않더라도, 여기서 설명된 시약은 단지 예시이며 그에 대응하는 것은 기술분야에서 알려져 있다는 것 역시 이해되어야 한다.

본 발명은 골관절염을 겪는 포유동물에 대한 골관절염을 치료하는 방법, 즉 효율적인 양의 A₃AR 아고니스트를 상기의 포유동물에게 투여하는 것을 포함하는 방법을 제공한다.

본 발명의 명세서에서 사용한 "치료" 용어는 골관절염이나 그로부터 야기된 하나 또는 그 이상의 증상을 조종하고/하거나 완화하는 것 뿐만 아니라 질환의 증상을 반전시키는 골관절염의 치료, 골관절염의 진행을 방지하는 것을 포함한다. 따라서, 바람직한 치료 효과를 달성하기 위하여 A₃AR 아고니스트를 치료학상으로 효과적인 용량으로 투여하는 것을 말한다. 바람직한 치료학적 효과는 다음의 증상 즉, 경직, 통증과 관절 기형, 관절 부종, 일과성 열감(hot flashes)과 비정상적 관절 비대의 증상 중의 어느 하나를 감소시키는 것 또는 골관절염이 발생하기 전의 그러한 증상의 징후를 방지하는 것 뿐만 아니라, 포유동물의 운동성을 개선, 관절의 붓기와 압통을 감소, 관절과 주변 조직의 악화 속도를 늦추거나 방지, 골관절염의 만성 단계에서 야기된 비가역적으로 손상되는 속도를 늦춤, 질환의 급성발작 사이의 경감 주기를 증가, 골관절염을 발생시키는 쓰라림을 줄이기 또는 골관절염으로부터 더욱 빠른 회복을 제공하는 것을 포함하며, 여기에 한정되지 않는다.

본발명의 명세서의 치료는 질환의 결과로서 연골에 야기된 손상의 반전 뿐만 아니라 골관절염의 진행(예컨대, 운동선수와 같이, 질환을 진행시키는 높은 소인을 가지고 있는 포유동물에 있어서)을 방지하는 것도 포함한다.

A₃AR 아고니스트에 있어서, 그러한 물질은 업계에 알려져 있고 손쉽게 이용될 수 있다. 일반적으로 A₃AR 아고니스트는 특히 아데노신 A₃ 수용체("A₃R ")에 결합되어, 상기의 수용체를 완전히 또는 부분적으로 활성시켜 치료학적 효과(이러한 특정한 경우에, 반-골관절염 효과)를 야기시킬 수 있는 화합물이다. 따라서 A₃AR 아고니스트는 결합을 통해서 최고의 효과와 A₃AR의 활성을 발휘할 수 있는 분자이다. 이는, A₃AR 아고니스트가 투여된 용량에 있어서 그것이 오로지 A₃R에만 결합하여 활성화시키는 것을 의미한다. 바람직한 실시예에서, A₃AR 아고니스트는 사람 A₃AR에 대해 1000 nM 미만, 바람직하게는 500 nM 미만, 유리하게는 200 nM 미만과 100 nM 미만까지, 전형적으로는 50 nM 미만, 바람직하게는 20 nM 미만, 더 바람직하게는 10 nM 미만이고 이상적으로는 5 nM 미만의 결합 친화력(K_i)을 가진다. K_i가 낮아질수록, A₃R을 활성시키고 따라서 치료학적인 효과를 달성하게 하는데 효과가 있는 A₃AR 아고니스트(사용될 수 있는)의 용량은 더 적어진다.

어떤 A₃AR 아고니스트는 낮은 친화성(즉, 더 높은 K_i)을 갖는 다른 수용체와 결합해서 활성화시킬 수 있다는 것을 주목해야 한다. A₃R에 대한 친화성이 다른 아데노신 수용체에 대한 친화성보다 적어도 3배(예컨대, A₃R에 대한 K_i 은 적어도 3배 더 낮다), 바람직하게는 10배, 이상적으로는 20배 그리고 가장 바람직하게는 적어도 50배 더 높은 아고니스트라면, 본 발명의 명세서에서 분자(즉 A₃R과 결합해서 활성화킴으로써 최고의 효과를 발휘하는 분자)는 A₃AR 아고니스트로 간주될 것이다.

다른 인간 아데노신 수용체에 대한 상대적인 친화성 뿐만 아니라 인간 A₃R에대한 A₃AR 아고니스트의 친화성은 결합 측정(binding assay)과 같은 수많은 측정에 의해 결정될 수 있다. 결합 측정의 예는 수용체를 가지는 막(membrane)이나 세포를 제공하고 방사선 아고니스트를 대체하는 A₃AR 아고니스트의 능력을 측정; 각각의 인간 아데노신 수용체를 전시하는 세포를 이용하고, 기능의 측정에 있어서 활성화하거나 비활성화하는 A₃AR 아고니스트의 능력을 측정하고, 경우에 따라서는 cAMP 수준을 증가시키거나 감소시켜서 측정되는 아데닐레이트 시클라제에서의 효과와 같은 신호를 보내는 것을 포함한다. 분명히, 투여된 A₃AR 아고니스트의 수준이 증가하여 혈액 수치가, 다른 아데노신 수용체의 Ki의 수치에 근접하는 수치에 이르면, 상기의 수용체의 활성은 그러한 투여가 있은 후에 발생하고, 게다가 A₃R의 활성도 발생한다. 그래서 A₃AR 아고니스트가 바람직한 용량으로 투여되면, 도달되는 혈액 수치는 본래대로 오로지 A₃R 활성만을 일으킨다.

아데노신 A₃AR 아고니스트의 특성과 이를 제조하는 방법은 특히, US 5,688,774; US 5,773,423; US 5,573,772; US 5,443,836; US 6,048,865; WO 95/02604; WO 99/20284; WO 99/06053; WO 97/27173 and WO 01/19360 에서 상세히 설명되고, 이들은 모두 이하에서 참조문헌으로 추가되었다.

다음의 예는 US 5,688,774 의 컬럼 4, 67 줄 - 컬럼 6, 16줄; 컬럼 5, 40-45줄; 컬럼 6, 21-42 줄; 컬럼 7, 1-11 줄; 컬럼 7, 34-36 줄; 그리고 컬럼 7, 60-61 줄에서 구체화되었다:

N⁶-(3-iodobenzyl)-9-methyladenine;

N⁶-(3-iodobenzyl)-9-hydroxyethyladenine;

R-N⁶-(3-iodobenzyl)-9-(2,3-dihydroxypropyl)adenine;

S-N⁶-(3-iodobenzyl)-9-(2,3-dihydroxypropyl)adenine;

N⁶-(3-iodobenzyladenin-9-yl)acetic acid;

N⁶-(3-iodobenzyl)-9-(3-cyanopropyl)adenine;

2-chloro-N⁶-(3-iodobenzyl)-9-methyladenine;

2-amino-N⁶-(3-iodobenzyl)-9-methyladenine;

2-hydrazido-N-(3-iodobenzyl)-9-methyladenine;

N⁶-(3-iodobenzyl)-2-methylamino-9-methyladenine;

2-dimethylamino-N⁶-(3-iodobenzyl)-9-methyladenine;

N⁶-(3-iodobenzyl)-9-methyl-2-propylaminoadenine;

2-hexylamino-N⁶-(3-iodobenzyl)-9-methyladenine;

N⁶-(3-iodobenzyl)-2-methoxy-9-methyladenine;

N⁶-(3-iodobenzyl)-9-methyl-2-methylthioadenine;

N⁶-(3-iodobenzyl)-9-methyl-2-(4-pyridylthio)adenine;

(1S, 2R, 3S, 4R)-4-(6-amino-2-phenylethylamino-9H-purin-9-yl)cyclopentane-l,2,3-triol;

(1S, 2R, 3S, 4R)-4-(6-amino-2-chloro-9H-purin-9-yl)cyclopentane-l,2,3-triol;

(±)-9-[2α,3α-dihydroxy-4β-(N-methylcarbamoyl)cyclopent-lβ-yl)]-N⁶-(3-iodobenzyl)-adenine;

2-chloro-9-(2'-amino-2',3'-dideoxy-β-D-5'-methyl-arabino-furonamido)-N⁶-(3-iodobenzyl)adenine;

2-chloro-9-(2',3'-dideoxy-2'-fluoro-β-D-5'-methyl-arabino furonamido)-N⁶-(3-iodobenzyl)adenine;

9-(2-acetyl-3-deoxy-β-D-5-methyl-ribofuronamido)-2-chloro-N⁶(3- iodobenzyl)adenine;

2-chloro-9-(3-deoxy-2-methanesulfonyl-β-D-5-methyl-ribofuronamido)-N⁶-(3-iodobenzyl)adenine;

2-chloro-9-(3-deoxy-β-D-5-methyl-ribofuronamido)-N⁶-(3-iodobenzyl)adenine;

2-chloro-9-(3,5-l,l,3,3-tetraisopropyldisiloxyl-β-D-5-ribofuranosyl)-N⁶-(3-iodobenzyl)adenine;

2-chloro-9-(2',3'-0-thiocarbonyl-β-D-5-methyl-ribofuronamido)-N⁶-(3- iodobenzyl)adenine;

9-(2-phenoxythiocarbonyl-3-deoxy-β-D-5-methyl-ribofuronamido)-2-chloro-N⁶-(3-iodobenzyl)adenine;

1-(6-benzylamino-9H-purin-9-yl)-1-deoxy-N,4-dimethyl-β-D- ribofuranosiduronamide;

2-chloro-9-(2,3-dideoxy-β-D-5-methyl-ribofuronamido)-N⁶ benzyladenine;

2-chloro-9-(2'-azido-2',3'-dideoxy-β-D-5'-methyl-arabino-furonamido)- N⁶-benzyladenine;

2-chloro-9-(β-D-erythrofuranoside)-N⁶-(3-iodobenzyl)adenine;

N⁶-(benzodioxanemethyl)adenosine;

1-(6-furfurylamino-9H-purin-9-yl)-1-deoxy-N-methyl-β-D- ribofuranosiduronamide;

N⁶-[3-(L-prolylamino)benzyl]adenosine-5-N-methyluronamide;

N⁶-[3-(β-alanylamino)benzyl]adenosine-5'-N-methyluronamide;

N⁶-[3-(N-T-Boc-β-alanylamino)benzyl]adenosine-5'-N-methyluronamide

6-(N'-phenylhydrazinyl)purine-9-β-ribofuranoside-5'-N-methyluronamide;

6-(0-phenylhydroxylamino)purine-9-β-ribofuranoside-5'-N-methyluronamide;

9-(β-D-2',3'-dideoxyerythrofuranosyl)-N⁶-[(3-β-alanylamino)benzyl]adenosine;

9-(β-D-erythrofuranoside)-2-methylamino-N⁶-(3-iodobenzyl)adenine;

2-chloro-N-(3-iodobenzyl)-9-(2-tetrahydrofuryl)-9H-purin-6-amine;

2-chloro-(2'-deoxy-6'-thio-L-arabinosyl)adenine; 및

2-chloro-(6'-thio-L-arabinosyl)adenine.

US 5,773,423 의 컬럼 6, 39줄에서 컬럼 7, 14줄, 특히 공개된 것은 이하의 화학식을 포함하는 화합물이다.

여기서, X ₁ 은 R^aR^bNC(=O), 여기서 R^a와 R^b는 같거나 다를 수 있으며, 수소, C₁-C₁₀ 알킬, 아미노, C₁-C₁₀ 할로알킬, C₁-C₁₀ 아미노알킬, 그리고 C₃-C₁₀ 시클로알킬 로 구성된 그룹에서 선택될 수 있다;

R ₂ 는 수소, 할로(halo), C₁-C₁₀ 알키옥시, 아미노, C₂-C₁₀ 알케닐, 그리고 C₂-C₁₀ 알키닐; 그리고

R ₅ 는 R- 과 S-1-페닐에틸, 치환되지 않은 벤질 그룹, 그리고 C₁-C₁₀ 알킬, 아미노, 할로, C₁-C₁₀ 할로알킬, 니트로, 히드록시, 아세트아미도, C₁-C₁₀ 알콕시, 그리고 황으로 구성된 그룹에서부터 선택된 치환기를 한 개 또는 그 이상의 위치에 치환시킨 벤질 그룹으로 구성된 그룹으로부터 선택된 것이다.

좀더 구체적인 화합물은 R ^a 와 R ^b 가 같거나 다를 수 있고, 수소와 C₁-C₁₀ 알킬, 특히 R ₂ 가 수소 또는 할로, 특히 수소로 이루어진 그룹 중에서 선택된 상기의 화학식으로 된 것들을 포함한다.

부가적으로 구체적인 화합물은 R ^a 가 수소이고 R ₂ 가 수소이고, 특히 R ₅ 가 치환되지 않은 벤질로 된 화합물이다.

좀더 구체적인 화합물은 R ^b 가 C₁-C₁₀ 알킬 이거나 C₃-C₁₀ 시클로알킬, 특히 C₁-C₁₀ 알킬 그리고 특별히 메틸인 화합물이다.

특별히 구체적인 화합물은 R ^a 가 수소이고, R ^b 가 C₃-C₁₀ 알킬 이거나 C₃-C₁₀ 시클로알킬, 그리고 R ₅ 가 R- 또는 S-1-페닐에틸 또는 할로, 아미노, 아세트아미도, C₁-C₁₀ 할로알킬, 그리고 황, 여기서 황 유도체는 트리에틸암모늄 염과 같은 염으로 구성된 그룹에서 선택된 치환기로 한 개 또는 그 이상의 위치에 치환된 벤질인 화합물이다.

US 5,773,423에서 공개된 특히 바람직한 화합물의 실시예는 IB-MECA이다. 게다가, R ₂ 는 R ^d 가 C₁-C₈ 알킬인 화학식 Rd-C=C-인 C₂-C₁₀ 알케닐렌인 화합물은 상기의 공보에서 특히 주목된다. 또한 구체적인 화합물은 R ₂ 가 무엇보다도 수소이고, 특히, R ₂ 가 할로, C₁-C₁₀ 알킬아미노, 또는 C₁-C₁₀ 알킬티오, 그리고, 더 바람직하게는 부가적으로 R ^a 가 수소, R ^b 가 C₁-C₁₀ 알킬, 및/또는 R ₅ 가 치환된 벤질인 화합물이다.

특별히, 그렇게 공개된 화합물은 2-chloro-N⁶-(3-iodobenzyl)-9-[5-(methylamido)-β-D-ribofuranosyl]-adenine, N⁶-(3-iodobenzyl)-2-methylamino-9-[5-(methylamido)-β-D-ribofuranosyl]-adenine, 그리고 N⁶-(3-iodobenzyl)-2-methlythio-9-[5-(methylamido)-β-D-ribofuranosyl]-adenine이다.

더욱이, US 5,773,423 은 컬럼 7, 60 줄에서 컬럼 8, 6 줄에서 A3AR 아고니스트가 하기의 화학식을 가지는 xanthine-7-riboside 를 공개한다.

여기서, X 는 O 이고;

R ₆ 은 R^aR^bNC(=O), 여기서 R ^a 와 R ^b 는 같거나 다를 수 있고, 수소, C₁-C₁₀ 알킬, 아미노, C₁-C₁₀ 할로알킬, C₁-C₁₀ 아미노알킬, 그리고 C₃-C₁₀ 시클로알킬로 구성된 그룹에서 선택된다;

R ₇ 과 R ₈ 은 같거나 다를 수 있고, C₁-C₁₀ 알킬, R-, 그리고 S-1-페닐에틸, 치환되지 않은 벤질 그룹, 그리고 C₁-C₁₀ 알킬, 아미노, 할로, C₁-C₁₀ 할로알킬, 니트로, 히드록시, 아세트아미도, C₁-C₁₀ 알콕시, 그리고 황으로 구성된 그룹으로부터 선택된 치환기로 한 개 또는 그 이상의 위치가 치환된 벤질 그룹으로 구성된 그룹으로부터 선택된다; 그리고

R ₉ 는 할로, 벤질, 페닐, 그리고 C₃-C₁₀ 시클로알킬로 구성된 그룹에서 선택된다.

WO 99/06053은 실시예에서 하기에서 선택된 19-33화합물을 공개한다:

N⁶-(4-biphenyl-carbonylamino)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-(2,4-dichlorobenzyl-carbonylamino)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-(4-methoxyphenyl-carbonylamino)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-(4-chlorophenyl-carbonylamino)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-(phenyl-carbonylamino)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-(benzylcarbamoylamino)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-(4-sulfonamido-phenylcarbamoyl)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-(4-acetyl-phenylcarbamoyl)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-((R)-α-phenylethylcarbamoyl)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-((S)-α-phenylethylcarbamoyl)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-(5-methyl-isoxazol-3-yl-carbamoyl)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-(l,3,4-thiadiazol-2-yl-carbamoyl)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-(4-n-propoxy-phenylcarbamoyl)-adenosine-5'-N-ethyluronamide;

N⁶-bis-(4-nitrophenylcarbamoyl)-adenosine-5'-N-ethyluronamide; 그리고

N⁶-bis-(5-chloro-pyridin-2-yl-carbamoyl-adenosine-5'-N-ethyluronamide.

발명의 실시예에 따르면, A₃AR 아고니스트는 아데노신 A₃AR의 결합과 활성을 통해서 뛰어난 효과를 발휘하는 화합물이며, 일반식 (Ⅰ)의 범위에 들어가는 퓨린 유도체이다.

여기서,

- R ₁₁ 은 알킬, 히드록시알킬, 카르복시알킬 또는 시아노알킬 또는 이하의 일반식(Ⅱ)을 나타낸다.

여기서,

- Y 는 산소, 황 또는 CH₂를 나타낸다;

- X ₁₁ 은 H, 알킬, R^eR^fNC(=O)- 또는 HOR^g-를 나타내며, 여기서

- R ^e 와 R ^f 는 같거나 다를 수 있으며, 수소, 알킬, 아미노, 할로알킬, 아미노알킬, BOC-아미노알킬, 그리고 시클로알킬로 구성된 그룹으로부터 선택되거나, 서로 결합하여 두 개 내지 5개의 탄소 원자를 포함하는 헤테로시클릭 링을 형성한다; 그리고

- R ^g 는 알킬, 아미노, 할로알킬, 아미노알킬, BOC-아미노알킬, 그리고 시클로알킬로 구성된 그룹으로부터 선택된다;

- X ₁₂ 는 H, 히드록실, 알킬아미노, 알킬아미도 또는 히드록실알킬이다;

- X ₁₃ 과 X ₁₄ 는 독립적으로, 수소, 히드록실, 아미노, 아미도, 아지도, 할로, 알킬, 알콕시, 카르복시, 니트릴로, 니트로, 트리플루오로, 아릴, 알크아릴, 티오, 티오에스터, 티오에테르, -OCOPh, _OC(=S)OPh 이거나, X ₁₃ 과 X ₁₄ 는 5-원환 링을 형성하기 위해 >c=S에 연결된 산소이거나, X ₁₂ 와 X ₁₃ 은 하기의 화학식(Ⅲ)을 형성한다.

여기서 R' 과 R" 는 독립적으로 알킬 그룹을 나타낸다;

- R ₁₂ 는 수소, 할로, 알킬에테르, 아미노, 히드라티도, 알킬아미노, 알콕시, 티오알콕시, 피리딜티오, 알케닐.; 알키닐, 티오, 그리고 알키티오 로 구성된 그룹으로부터 선택된다; 그리고

- R ₁₃ 은 화학식 -NR₁₅R₁₆ 의 그룹이며 여기서,

- R ₁₅ 는 수소 원자이거나, 알킬, 치환된 알킬 또는 Z 가 O, S, 상기의 의미를 갖는 R ^e 를 가지는 NR^a 를 갖는 아릴-NH-C(Z)- 로부터 선택된 그룹이다; 그리고

- R ₁₆ 은 R-, S-1-페닐에틸, 벤질, 페닐에틸 또는 치환되지 않거나 알킬, 아미노, 할로, 할로알킬, 니트로, 히드록실, 아세토아미도, 알콕시, 그리고 황산 또는 그로 인한 염; 벤조디옥산메틸, 푸루릴(fururyl), L-프로필알라닐-, 아미노벤질, β-알라닐아미노-, 벤질, T-BOC-β-알라닐아미노벤질, 페닐아미노, 카바모일, 페녹시 또는 시클로알킬로 구성된 그룹에서 선택된 치환기로 한 개 또는 그 이상의 위치에 치환된 아닐라이드 그룹 으로 구성된 그룹에서 선택된다; 또는 R ₁₆ 은 하기의 화학식의 그룹이다;

또는 R ₁₅ 가 알킬 또는 아릴-NH-C(Z)- 일때, R ₁₆ 이 헤테로아릴-NR^a-C(Z)-, 헤테로아릴-C(Z)-, 알카릴-NR^a-C(Z)-, 알카릴-C(Z)-, 아릴-NR-C(Z)- 그리고 아릴-C(Z)으로 구성된 그룹에서 선택되며; Z는 산소, 황 또는 아민; 또는 상기 화합물의 생리학적으로 수용가능한 염을 나타낸다;

바람직한 실시예에 따라, A₃AR 아고니스트는 일반식 (Ⅳ)의 뉴클레오시드 ㅇ유도체이다:

여기서, X ₁ , R ₂ 와 R ₅ 는 상기에서 정의한 그룹과 상기 화합물의 생리학적으로 수용가능한 염이다.

본 발명의 화합물의 치환기의 일부를 형성하는 비고리 탄수화물 그룹(예컨대, 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 아랄킬, 알카릴, 알킬아민, 등등)은 가지형이거나, 비가지형(non-branched)이거나, 바람직하게는 한 개 또는 2 개 내지 12개 탄소 원자를 포함한다.

A3AR 아고니스트의 특정한 그룹은 N⁶-벤질아데노신-5'-우론아미드 유도체이다. 바람직한 N⁶-벤질아데노신-5'-우론아미드 유도체는 N⁶-2-(4- aminophenyl)ethyladenosine (APNEA), N⁶-(4-amino-3-iodobenzyl) adenosine-5'-(N- methyluronamide) (AB-MECA) 그리고 l-deoxy-l-{6-[({3-iodophenyl} methyl)amino]-9H-purine-9-yl}-N-methyl-β-D-ribofuranuronamide (IB-MECA) 그리고 2-chloro-N⁶-(3- iodobenzyl)adenosine- 5'-N-methlyuronamide (Cl-IB-MECA).

다른 실시예에 따르면, A₃AR 아고니스트는 2-purine 위치는 알콕시, 아미노, 알케닐, 알키닐 또는 할로겐으로 치환될수 있는 N⁶-benzyladenosine-5'-N-alkyluronamide-N¹-oxide 또는 N⁶-benzyladenosine-5'-N-dialkyluronamide-N¹-oxide 같은 아데노신의 옥사이드 유도체가 될 수 있다.

A₃AR 아고니스트는 항-골관절염 효과를 달성하는데 충분한 용량으로 투여된다. 설명되듯이, A₃AR 아고니스트의 용량은 질환의 심각성, 의도된 치료학적 투여와와 바람직한 치료학적 투여량에 의존한다. 실험예에 방식으로, 용량은 하루 1mg 이며, 바람직한 투여는 하루에 한번 투여하는 것이며, A₃AR 아고니스트를 포함하는 제약학적 조성물에서 A₃AR 아고니스트의 양은 1 mg 이 될 것이다. 하루치 용량을 하루에 2번으로 나누어 투여할 때에는, 제약학적 조성물에서 활성 성분의 양은 0.5 mg 이 될 것이다.

바람직한 효과를 달성하기 위한 효과적인 용량은 업계에서 알려진 고려사항에 의해 결정된다. 본에서 목적으로 하는 “항-골관절염에 효과적인 용량”은 치료학적 효과, 앞서 설명한 바와 같은 치료학적 효과를 달성하는데 효과적임에 틀림없다.

효과적인 용량은 A₃AR에 대한 A₃AR 아고니스트의 친화성, 체내에서의 분배 수준을 포함하는 다양한 요인, 체내에서의 반감기와 같은 다양한 요인, 바람직하지 않은 부작용, 만약 존재한다면 치료해야할 대상의 나이와 성별과 같은 요인 등에 의존한다. 효과적인 용량은 통상적으로, 효과적인 투여 범위, 내성이 생기는 최대의 용량과 최적의 용량을 찾아내는 것을 목적으로 하는 임상 시험에서 테스트된다. 상기의 임상 시험과 같은 것을 수행하기 위한 방법은 임상 개발의 당업자에게 잘 알려져 있다.

용량은 또한 가끔씩 동물에게 효과적인 것으로 보였던 용량에 기초하여 결정되기도 한다. 쥐(rat)에 투여된 X mg/Kg 의 용량이 업계에서 잘 알려진 가능한 전환 방정식 중의 하나를 사용하여 다른 종에 동등한 용량으로 전환될 수 있다는 것은 잘 알려져 있다.

환산 Ⅰ:

투여량 환산에 따른 체표면적: 인간(70 Kg)에 대한 쥐(rat, 150g)는 1/7 쥐 투여량이다. 이것은 본 발명의 경우에 쥐(rat)에서 0.001-0.4 mg/Kg은 평균 몸무게 70Kg인 인간을 가정할 때, 약 0.14-56 마이크로그램/Kg과 동일하다는 것을 의미하여, 이는 약 0.01 내지 약 4 mg 의 절대 투여량으로 환산될 것이다.

환산 Ⅱ:

하기 환산 인자(conversion factors) : 마우스(mouse)=3, 쥐(rat)=67 .

환산인자와 동물의 무게를 곱하여서 mg/Kg 을 인간 선량당량(human dose equivalent)에 대한 mg/m2 으로 바꾸었다.상기의 방정식에 따르면, 쥐(rat)에서 0.001-0.4 mg/Kg 과 동일한 양은 인간에게 0.16-64 마이크로g/Kg; 즉, 약 70Kg의 몸무게를 가진 인간에게 절대적 투여량은 약 0.011 내지 약 4.4 mg, 환산Ⅰ에서 나타낸 범위와 비슷하다.

환산 Ⅲ:

환산을 위한 또다른 방법은 동물에게 하기의 투여량을 같은 플라즈마 레벨이나 AUC 를 산출하기 위한 투여량으로 정하는 것이다.

따라서, 마우스에 IB-MECA(A₃AR 아고니스트)의 하기의 경구 투여를 한 것에 기초하고, 인간에게 IB-MECA에 있어서 임상 시험에서 했던 측정에 기초하여 건강한 남성 지원자에게 투여하여, 마우스에 있어서 IB-MECA를 1 마이크로그램/Kg -400 마이크로그램/Kg의 용량은 인간에 있어서 0.14-57 마이크로그램/Kg의 용량과 동등하며 즉, 총 용량은 70Kg 인간에게 0.01-4mg 이라는 결론에 이르렀다.

게다가, 상기의 환산방법에 기초하여, IB-MECA와 CI-IB-MECA(또다른 A₃AR 아고니스트)의 바람직한 용량의 범위 4 mg 미만일 것이며, 통상적으로 약 0.01 내지 약 2 mg(각각 약 0.14 -28 마이크로그램/Kg)이며 바람직하게는 약 0.1 내지 1.5 mg(각각 약 1.4-21 마이크로그램/Kg)의 범위 내에 있다. 이러한 용량은 하루에 한번, 두 번 또는 때때로 여러 번 투여될 수 있다.

US 특허출원 공개공보 No. 20050101560과 Fishman et al.[Fishman P. et al., Tolerability, pharmacokinetics, and concentration-dependent hemodynamic effects of oral CFlOl (oral IB-MECA), an A3 adenosine receptor agonist, in healthy young men IntJClin Pharmacol Ther. 42 :534-542, 2004]에서 설명되었듯이 인간 연구는 때때로 필요한 축적되는(이전에 투여된 레벨이 쇠잔하기 전에 잇따른 투여를 하여, 한번의 투여로 발생한 플라즈마 위에 플라즈마 레벨의 상승이 일어난다) 효과를 위해 정확한 용량으로, 수일간 투여한 경우에, IB-MECA 의 레벨이 마우스에서 오직 1.5 시간의 반감기를 가지는 것과 비교하여,약 8-10 시간의 반감기를 가지고 인간 플라즈마에서 쇠잔해진다는 것을 보였다. 상기의 인간 실험에 기초할 때, 하루에 두 번 투여하는 것이 바람직한 용량인 것 같다.

본 발명의 한 실시예에 따르면, A₃AR 아고니스트의 투여는 매일, 하루에 한번 내지 여러 번, 바람직하게는 하루에 한번 또는 두 번, 매번 투여할 때의 투여량을 약 1 내지 약 1000마이크로그램/kg 체중, 바람직하게는 400 마이크로그램/kg 체중, 그리고 200 마이크로그램/kg 체중 보다 더 적게 하여 투여하는 것이 바람직하다.

A₃AR 아고니스트는 약제학적 조성물로 제제화된다. 본 발명의 명세서에서 “조성물 ” 은 다른 첨가제 뿐만 아니라 활성 성분(들)을 단독으로 또는 약제학적으로 수용가능한 캐리어와 함께 조합하는 것을 의미한다. 약물의 안정성을 개선하기 위하거나, 해결율(clearance rate)을 낮추기 위하거나, 느린 방출 특성을 부여하기 위하거나, 바람직하지 않은 부작용을 줄이기 위한 기타 등등의 목적으로 사용하는 캐리어는 때때로 목표 조직에 활성 성분의 전달이나 침투를 개선시키는 효과를 갖는다. 캐리어는 또한 제제에 적합한 향을 제공하기 위하는 등등의 목적으로, 제제(예컨대, 방부제)를 안정화시키는 물질이 될 수도 있다. 캐리어의 실시예로서, 안정제와 보조제는 E. W. Martin, REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES, MacK Pub Co (June, 1990) 를 보면 된다.

본 발명의 명세서의 “약제학적으로 수용가능한 캐리어” 용어는 A₃AR 아고니스트와 반응하지 않고 희석액으로서 제제에 첨가될 수 있는 불활성의, 비독성 물질, 제제를 형성하거나 제제와 밀착한 캐리어 중의 어느 하나를 의미한다.

본 발명의 조성물은 개개 환자의 임상조건, 위치와 투여방법, 투여일정, 환자의 나이, 성별, 몸무게와 의사에게 알려진 다른 요인들을 고려하여 훌륭한 의사에 따라서 투여되고 복용된다. 캐리어의 선택은 조성물을 투여하는데 사용된 특정한 방법에 의해서 뿐만 아니라 특정한 활성 물질에 의해서 부분적으로 결정될 것이다. 따라서, 본 발명의 적절한 약제학적 조성물은 광범위한 다양성이 있다.

A₃AR 아고니스트는 업계에서 알려진 다양한 전달 모드에 의해서 동물에게 투여될 수 있다. 그러나 A₃AR 아고니스트는 경구 투여하는 것이 바람직하다. 캐리어는 제제의 바람직한 형태에 기초하여 선택될 수 있다.

경구 투여에 적절한 캐리어의 전형적인 예는 (a) 물, 염류, 천연 주스, 알코올, 시럽, 등과 같은 희석액에 용해되어 있는 A₃AR 아고니스트의 효과적인 양의 수용액 ; (b) 캡슐(예컨대 예를 들어서, 계면활성제, 윤활제, 그리고 내부 충진제를 포함하는 보통의 딱딱한- 또는 부드러운 껍질의 젤라틴 타입), 정(tablets), 로젠지(lozenges, 여기서 A₃AR 아고니스트는 수크로스와 같은, 플레이버(flavor)에 있거나 A₃AR 아고니스트는 젤라틴과 글리세린과 같은, 내부 베이스에 있다), 그리고 트로키(troches), 고체나 미립자로서 A₃AR 아고니스트의 예정된 양을 포함하는 것; (c) 분말; (d) 적절한 용액 속의 부유물; (e) 적절한 에멀젼; (f)리포좀 제제; 그리고 그 외의 것들을 포함한다.

A₃AR 아고니스트는 또한 국부성 용도로 사용되기 위해 제제화되기도 한다. 그것때문에 A₃AR 아고니스트는 당업자에게 알려진, 국부성 용도에 적합한 크림, 로션, 연고, 젤, 하이드로겔(hydrogel), W/O 에멀젼 그리고 이와 유사한 것을 얻기 위해서 생리학적으로 수용가능한 캐리어와 결합된다.

상기에서 언급하였듯이, A₃AR 아고니스트의 치료학적 용도는 때때로 메토트렉세이트(MTX), 스테로이드, NSAIDS, 그리고 다른 물질과 같은 약물과 조합될 수 있다. 그러한 조합에서 다른 약물과 A3AR 아고니스트의 치료제는 각각의 약물의 투여 예정표에 의존하면서, 동시에 또는 다른 시간대에 환자들에게 투여될 수 있다. MTX는, 예를 들어서, 전형적으로 5 내지 25 mg 범위의 용량으로 일주일에 한번, 매주마다, 경구적으로 또는 비경구적으로 환자에게 투여된다. A₃AR 아고니스트는 전형적으로 더 잦은 투여 예정표에 따라, 예를 들면 하루에 한 번 또는 두 번, 투여된다.

본 발명은 예증되는 방법으로 설명되었고, 그래서 사용된 용어는 제한하기 보다는 설명을 위한 의도로 사용되었음을 이해해야 한다. 분명히, 상기의 설명에 비추어 보아, 본 발명의 많은 변형과 변화가 가능하다. 그러므로, 부가한 청구항의 범위 안에서 이해되도록, 본발명은 이하에서 특별히 설명되어지는 것보다 넓게 실행될 수 있다.

발명을 이해하고 실험에서 어떻게 수행되는지 알아보기 위해서, 관련된 도면을 첨부하여, 본 실시예에 한정되지 않는 바람직한 실시예를 제시할 것이다.

도 1A-1B 는 MTT 분석법 의해 측정된 활막세포(FLS)(도 1A)같은 인간 섬유아세포 또는 쥐(rat) FLS(도 1B)의 증식에서 IB-MECA(CF101) 또는 IB-MECA와 MTX를 조합한 치료제의 효과를 보여주는 막대 그래프이다.

도 2 는 CF101로 처리된 것(-■- CF101)과 아무것도 처리하지 않은 것(-◆- Control)에서, MIA를 주입한 후에 수일간의 작용으로서 동일한 동물에서 MIA가 주입된 무릎(오른쪽 무릎)과 MIA가 주입되지 않은 무릎(왼쪽 무릎)의 직경의 차이를 보여주는 그래프이다. 각 그룹은 5마리의 동물을 포함하였다.

도 3A-3D 는 약물이 처리된 동물(도 3A와 3B, 각각 왼쪽 무릎과 오른쪽 무릎)과 비교한 CF101로 처리된 동물(도 3C와 3D, 각각 왼쪽 무릎과 오른쪽 무릎)에서 경화증이 없는 보통의 경골 골단선을 보여주는 무릎의 방사선적 변화(roentgenographic)를 나타낸 이미지이다.

도 4A-4E 는 OA 쥐(rat)의 CF101 이 처리된(CF101)과 아무것도 처리되지 않은(Control) 무릎 관절로부터 떼어낸 단백질 추출물의 Western Blot 분석한 것이 다; 단백질 추출물은 A₃AR(도 4A), PI3K(도 4B), IKK(도 4C), NF-κB(도 4D), GSK-3β(도 4E)이다.

실험예 1

인간이나 쥐(rat)의 섬유아세포 유사 활막세포(FLS)의 증식에서, IB-MECA(여기서는 때때로 CF101) 단독 또는 MTX와 조합한 경우의 효과를 테스트했다. FLS 증식에서의 효과는 골관절염에서의 잠재적인 치료 효과를 시사한다.

인간 FLS 배양

인간 활액(human synovial fluid) 샘플은 paracenthesis를 겪고 있는 골관절염(OA) 환자에서 수집했다. 활액을 원심분리하여 상청액(supernatant)을 제거하였다. 세포는 2시간동안, 타입 Ⅰ콜라제나스를 포함하는 DMEM에 섞어서, 37℃에서 잘 자라게 한다. 상청액에서 방출된 세포는 원심분리에 의해 얻어서 10% FBS, 2mM 글루타민, 100 U/ml 페니실린, lOO ㎍/ml 스트렙토마이신, 1% 비필수 아미노산, 1% 피브르산 나트륨과 20 nM HEPES 완충액을 포함하는 DMEM에서 37 ℃, 5% CO₂ 인큐베이터에서 배양된다. 하룻밤 배양한 후에, 비부착성 세포(non-adherent cell)는 제거된다. 부착성 세포(FLS)는 1:2 의 비율로 2차배양되고, passage 4 내지10의 세포는 실험에서 이용된다.

FLS의 증식에서, CF101 단독 또는 MTX와 조합한 효과는 MTT 분석법을 사용하 여 테스트하였다. 상기의 세포(5x10⁴/ml 세포)는 성장배지에서 72시간 동안 96-웰 마이크로타이터 플레이트에서 부화되었다. 마지막 24시간 째에 CF101(10 nM)가 배지에 첨가되었다.

쥐 섬유아세포 유사 활막세포 ( FLS ) 배양액

관절염 쥐(rat)에서 유도된 활막조직이 수집되었다. 조직은 잘게 썰어서 DMEM에서 4mg/ml 타입 Ⅰ콜라게나아제와 0.25 w/v 트립신에서 분해되도록 하였다. 혼합물은 37℃에서 4시간 동안 잘 자라게 한다. 방출된 세포는 원심분리에 의해 상청액에서 분리하고 15% FBS, 2mM 글루타민, 100 U/ml 페니실린, lOO ㎍/ml 스트렙토마이신을 포함하는 DMEM에서 37 ℃, 5% CO₂ 인큐베이터에서 배양된다. 하룻밤 배양한 후에, 비부착성 세포(non-adherent cell)는 제거된다. 부착성 세포(FLS)는 1:2 의 비율로 2차배양되고, passage 4 내지10의 세포는 실험에서 이용된다.

FLS의 증식에서, CF101 단독 또는 MTX와 조합한 효과는 MTT 분석법을 사용하여 테스트하였다. 상기의 세포(5x10⁴/ml 세포)는 성장배지에서 72시간 동안 96-웰 마이크로타이터 플레이트에서 부화되었다. 마지막 24시간 째에 CF101(10 nM)가 배지에 첨가되었다.

결과

도 1A와 1B 는 각각, 인간과 쥐(rat) FLS 증식에서 MTT 분석법에 의해 측정된 각각의, CF101 단독, MTX 단독 그리고 CF101과 MTX의 조합의 효과를 보여준다. 보여지듯이, 대조군과 비교한 성장방해(inhibition)의 퍼센트는 상당했다(대조군보다 20% 높다). 분명히 볼 수 있듯이, CF101 단독 또는 MTX와 조합한 CF101 는 FLS에서 상당한 성장방해 효과를 나타냈다.

실험예 2

하기의 연구에서, 실험용 골관절염(OA)의 진행에서 IB-MECA(여기서, 때때로, CF101)의 효과가 측정되었다. 이러한 연구에서, 모노-아이도아세테이트(MIA, mono-iodoacetate) 실험용 모델이 이용되었다. MIA는 OA의 임상적이고 생리학적 성질을 급속하게 재생하는 쥐(rat) 실험용 모델이다. MIA는 in vitro에서 콘드로사이트 사멸(chondrocyte death)을 유도하기 위하여 보여지는 해당작용(glycolysis)의 저해제이다. MIA의 관절내 주사(Intra-Articular Injection)는 설치류(rodent의 관절 연골에서 콘드로사이트 사멸을 유도한다.

특히, 수컷 Wistar rat(~200gr)(Harlan 연구실)을 이소플루란으로 마취하여 오른쪽 다리가 무릎의 90°각도로 구부렸다. MIA는 생리학상 염에 녹여서, 27-레이지, 0.5-인치 바늘을 이용하여, 2 mg, 50 μL의 부피로 각각의 동물의 오른쪽 발에 관절내 주사하였다.

CF101, Oz(PO) 당, 100 ㎍/kg를 함유한 치료제를 관절내 주사후 7일째 되는 날부터 투여하였다.

무릎 반경은 무릎 관절 측정을 위해서 끝부분을 강화하여 개조한 눈금이 있는 디지털 캘리퍼스(digital cailpers)를 이용하여 측정했다. 도 2에서 보여지듯 이, CF101은 대조군 그룹(P=9.48317E-06)과 비교해서 조직(tissue)의 팽창이 진행되는 것을 상당히 저해하였다.

게다가, 대표적으로 무릎에 대한 방사선학적 연구는 약물을 처리한 동물의 경골 골단선에 인접한 경화성 부분이, 골단과 작은 exophite를 가늘어지게 한다는 것을 밝혀냈다. CF101이 처리된 동물에서 경화증(sclerosis)이 없는 정상적인 경골 골단선이 언급되었다.(도 3A-3D, 여기서 도 3A와 3B는 아무것도 처리되지 않은 그룹이고, 도 3C와 3D는 CF101이 처리된 그룹이다)

A3AR의 fate를 살펴보고 NF-kB와 Wnt 신호 전달 경로에 관여하는 중요한 신호전달 단백질(signaling protein)을 정제하기 위하여, 대조군과 CF101이 처리된 동물의 무릎 관절 단백질 추출물은 Western blot 분석법을 행한다. A3AR 는 OA 쥐(rat)의 쥐 무릎 관절로부터 추출된 세포에서 많이 감지되었고 CF101에서 발현 패턴이 약하였는데, 이는 수용체 활성이 발생했다는 것을 증명하는 것이다. 이 후에 PI3K, IKK 와 NF-kB의 발현 패턴이 약해지는데, 이는 CF101을 함유하는 치료제에서 NF-kB 신호전달 경로가 저해되었음을 나타내는 것이다. 게다가, GSK-3β의 발현 정도, Wnt신호전달 경로의 중요한 요소는, CF101 치료제(도 4A-4E)에서 과잉발현되었다.

따라서 이러한 데이터는 CF101, 소형의 경구로 생체이용 가능한 분자 Ⅰ이 OA 동물의 무릎 관절에서 항염증 과정을 경감시킬수 있다는 것을 분명히 보여준다. OA 쥐(rat)에서의 높은 A3AR 발현도와 CF101 치료제에 의해 유도된 NF-kB와 Wnt신호전달 경로의 탈규제는 OA와 싸우기 위해 A3AR을 이용할 수 있다는 시사를 강하게 하고 있다.

Claims

골관절염을 가진 포유동물의 치료제를위한 약제학적 조성물을 제조하는데 사용하는 A₃AR 아고니스트의 용도.
제 1 항에 있어서, 상기의 A₃AR 아고니스트는 IB-MECA와 C1-IB-MECA 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 A₃AR 아고니스트의 용도.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 골관절염을 가진 포유동물의 치료제로서 다른 약물과 함께 약제학적 조성물을 제조하는데 사용되는 A₃AR 아고니스트의 용도.
제 3 항에 있어서, 상기의 또다른 약물은 메토트렉세이트(MTX)인 것을 특징으로 하는 A₃AR 아고니스트의 용도.
치료가 필요한 상기의 포유동물에게 골관절염을 치료하거나 골관절염 진행을 방지하기 위해 상당한 용량의 상기의 A₃AR 아고니스트를 투여하는 것을 포함하는 포유동물의 골관절염 치료방법.
제 5 항에 있어서, 상기의 포유동물은 사람인 것을 특징으로 하는 골관절염 치료방법.
제 5 항 또는 제 6 항에 있어서, 상기의 치료는 치료가 필요한 포유동물에게 A₃AR 아고니스트를 경구투여하는 것을 특징으로 하는 골관절염 치료방법.
제 7 항에 있어서, 상기의 치료는 치료가 필요한 포유동물에게 하루에 한 번 또는 두 번 경구투여 하는 것을 특징으로 하는 골관절염 치료방법.
제 5 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기의 A₃AR 아고니스트는 IB-MECA와 C1-IB-MECA 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 골관절염 치료방법.
제 5 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기의 A₃AR 아고니스트는 1 내지 1000 ㎍/kg체중 을 투여하는 것을 특징으로 하는 골관절염 치료방법.
제 11 항에 있어서, 상기의 A₃AR 아고니스트의 용량은 400 ㎍/kg체중 미만을 투여하는 것을 특징으로 하는 골관절염 치료방법.
제 11 항에 있어서, 상기의 A₃AR 아고니스트의 용량은 200 ㎍/kg체중 미만을 투여하는 것을 특징으로 하는 골관절염 치료방법.
제 12 항에 있어서, 상기의 A₃AR 아고니스트는 1 내지 100 ㎍/kg체중 을 투여하는 것을 특징으로 하는 골관절염 치료방법.
제 5 항 내지 제 13 항에 있어서, A₃AR 아고니스트를 또다른 약물과 조합하여 투여하는 것을 특징으로 하는 골관절염 치료방법.
제 14 항에 있어서, 상기의 다른 약물은 메토트렉세이트인 것을 특징으로 하는 골관절염 치료방법.
활성있는 물질로서 상당한 용량, 즉 골관절염을 치료하는데 유효량의 A₃AR 아고니스트를 포함하는 포유동물의 골관절염 치료제로서의 약제학적 조성물.
제 16 항에 있어서, 상기의 포유동물은 사람인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 16 항 또는 제 17 항에 있어서, 상기의 제약학적 조성물은 경구투여에 적 합한 형태인 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 16 항 내지 제 18 항에 있어서, 상기의 A₃AR 아고니스트는 IB-MECA와 C1-IB-MECA 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 19 항에 있어서, 상기의 A₃AR 아고니스트는 1 내지 1000 ㎍/kg체중 을 투여하는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 19 항에 있어서, 상기의 A₃AR 아고니스트는 400 ㎍/kg체중 미만을 투여하는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 19 항에 있어서, 상기의 A₃AR 아고니스트는 200 ㎍/kg체중 미만을 투여하는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.
제 19 항에 있어서, 상기의 A₃AR 아고니스트는 1 내지 100 ㎍/kg체중 을 투여하는 것을 특징으로 하는 약제학적 조성물.