KR20070094956A - 약-내성 증식성 질병의 치료 - Google Patents

Abstract

상기 식에서 Ar¹, Ar², X, n, * 및 R이 본 명세서에서 정의된 바와 같은 화학식 I에 따른 α,β-불포화 술폰, 술폭시드 및 술폰아미드는 ATP-경쟁적 키나아제 억제제에 의한 치료에 내성이 있는 증식성 질병의 치료에 유용하다.

증식성 질병, 종양, 암, 내성, 이메티닙, ATP-경쟁적 억제제, 돌연변이

Description

약-내성 증식성 질병의 치료{TREATMENT OF DRUG-RESISTANT PROLIFERATIVE DISORDERS}

본 발명은 ATP-경쟁적 키나아제 억제제인 치료제에 내성을 갖는 증식성 질병의 치료에 관한 것이다.

I. ATP-경쟁적 키나아제 억제제에 대한 증식성 질병의 내성

단백질 키나아제는 세포 증식을 조절하는 것으로 나타났다. 단백질 키나아제의 억제는 증식성 질병, 특히 암에 대한 새로운 치료제 개발에 잠재력을 가진 연구 분야로 등장했다.

단백질 키나아제의 억제는 ATP-경쟁적 저분자(small molecule)의 투여에 의해 치료학적으로 성취되었다. 이러한 억제제는 키나아제의 효소적 활성을 방해하고 그에 따라 세포적 기질의 인산화를 저해한다. 키나아제의 ATP-경쟁적 저분자 억제제의 예가 표 1에 나타난다.

ATP-경쟁적 키나아제 억제제는 치료학적으로 억제제가 투여되는 질병과 관련된 목표 증식 세포에서 선택적인 압착을 발생시키는 것으로 나타났다. 이러한 선택 적 압착은 흔히 목표 세포에서의 내성 발달을 야기한다. 내성은 표적된 키나아제의 돌연변이로부터 발생할 수도 있다.

표 1: 키나아제의 ATP-경쟁적 저분자 억제제

화합물 이름 화합물 구조

PD180970

화합물 이름 화합물 구조

A. BCR - ABL 관련 증식성 질병

1. 상기 질병의 분자적 기초

만성골수성백혈병(Chronic Myelogenous Leukemia, CML 흔히 chronic myeloid leukemia라고 불림)은 특정한 염색체, 즉 필라델피아(Philadelphia) 또는 Ph¹ 크로모좀 이상과 관련되는 최초의 종양성 질병이었다. 분자 수준에서, 가장 두드러지는 특징은 원암유전자(proto oncogene)가 c-abl의 크로모좀 9의 긴 팔에서 크로모좀 22의 bcr(breakpoint cluster region)로 전좌(translocation)되어 잡종유전자(hybrid gene)bcr- abl의 형성을 야기하는 것이다. 일반적으로 상기 c-abl 원암유전자는 티로신 키나아제 활성을 갖는 단백질(ABL)을 암호화한다. bcr - abl 잡종유전자를 갖는 세포에서는 원암유전자 BCR - ABL이 발현된다. ABL의 티로신 키나아제 활성과 비교할 때 상기 BCR - ABL의 키나아제 활성은 실질적으로 증가한다.

일반적으로 필라델피아 크로모좀 CML 환자에서 발견되는 상기 BCR-ABL융합 단백질은 약 210 킬로달톤(p210wt 또는 p210BCR-ABL)의 단백질이다. 상기 융합 전사는 전형적으로 ABL 엑손 2에 결합한 BCR 엑손 13 또는 14로부터 야기된다(Chissoe et al(1995) Genomics 27:67-82). 따라서 상기 p210wt의 ABL 부분은 c-ABL 유전자의 엑손 2-11로 구성된다. 특정 BCR-ABL 대립형질(allele)의 ABL 티로신 키나아제 부분의 위치를 확인하기 위한 문헌의 일반적인 관습은 엑손 1a을 이용한 선택적 스플라이싱(alternative splicing)으로부터 야기되는 c-ABL에 대한 아미노산 넘버링(numbering)을 이용하는 것이다(단백질 ID AAB60394.1 및 GenBank Accession number U07563). 따라서 본 명세서에서 인용한 상기 돌연변도 마찬가지로 상기 서열이 SEQ ID NO:1로 제공되는 스플라이스 변종(splice varient)의 아미노산 넘버링이 실마리가 된다. SEQ ID NO:1의 최초 26 아미노산은 ABL 엑손 1a 에 의해 암호화되고 BCR-ABL 융합 단백질 p210wt에서는 발견되지 않는다. 상기 엑손 2에 의해 암호화되는 아미노산 서열은 원암유전자 ABL의 E27로 시작되며 이는 엑손 1이 이용하는 선택적 스플라이싱으로부터 야기된 전사의 결과이다. 상기 단백질 키나아제 도메인은 대략 ILe 242에서 아미노산 493까지이다. 상기 넘버링 시스템에서, 인산염(phosphate)-결합 루프(p-loop)는 아미노산 249-256, 촉매 영역은 아미노산 361-367 그리고 활성 루프는 아미노산 380-402이다.

상기 ATP-경쟁적 티로신 키나아제 억제제 이메티닙(imatinib)은 티로신 키나아제 ABL , KIT 및 혈소판 유래 성장인자 수용체(PDGFR)의 억제에 매우 효율적이다. 이메티닙의 치료적 투여는 CML 및 급성 임파구성 임파종(acute lymphoblastic lymphoma)의 치료에서 임상의 효능을 실증한다. BCR - ABL은 또한 이메티닙에 의한 ABL의 억제가 세포 증식을 방해하는 것으로 나타난 특발성 폐섬유증(idiopathic pulmonary fibrosis)에 관련된다. Daniels et al ., J. Clin . Invest., 114, 1308-16(2004). 그러나, 이메티닙-치료받은 환자 중 일부는 이메티닙-내성 세포가 발생하는 경우 병이 재발한 것으로 다루어진다.

(2) BCR - ABL 의 돌연변이가 이메티닙 내성을 수여한다.

이메티닙 내성은 이메티닙 결합 위치에서 키나아제의 돌연변이 결과로 생길 수 있다. 돌연변이는 키나아제의 촉매 도메인에서 일어날 수 있으며, 이는 이른바 '게이트키퍼(gatekeeper)' 잔기 Thr315, 및 결합하는 동안 이메티닙에 접촉하는 다른 잔기를 포함한다(예컨데, Phe 317 및 Phe 359). 그 밖의 돌연변이가 이메티닙 결합시에 일어나는 형태적 변화에 관련된 키나아제 구조 영역인, ATP 결합 도메인(p-loop) 및 활성 루프에서 일어난다.

BCR - ABL에 대한 이메티닙의 결합은 Thr 315 하이드록실기에 수소결합의 형성과 관련된다. 315 위치에서 이소루신의 트레오닌으로의 치환은 이메티닙 내성 CML에서 가장 빈번한 BCR - ABL 돌연변이 중 하나이다. Thr315의 보다 크고 비-수소 결합성인 이소루신으로의 교체는 이메티닙의 결합을 직접 방해한다. Thr 315은 이메티닙의 결합에 필수적이지만, BCR - ABL에 대한 결합에는 요구되지 않는다. 따라서, 상기 촉매 활성, 그리고 그에 따른 BCR - ABL의 종양-촉진 기능이 T315I 돌연변이체에 보유된다.

이메티닙 결합은 또한 키나아제 p-루프의 돌연변이에 의해 영향을 받는다. 재발 CML 및Ph+ ALL 환자의 BCR - ABL 서열 분석은 Tyr253 및Glu 255에서의 p-루프 돌연변이를 찾아냈다. 이러한 위치에서의 아미노-산 치환체는 이메키팁 결합을 위해 요구되는 변형 p-루프 형태를 방해할 수 있다. 이는 생체 내에서 관찰된 내성과 Y253F 및 E255K와 같은 BCR - ABL p-루프의 돌연변이의 영향을 받은 환자에서의 특히 나쁜 예후와 일치한다(Branford et al ., Blood, 102, 276-283(2003)).

이메티닙의 결합은 불활성, 비인산화 상태의 BCR - ABL 활성 루프와 관련되어 있다. H396R과 같은 이러한 영역에서의 돌연변이는 닫힌 형태의 활성 루프를 불안 정화하고 그에 따라 이메티닙 억제를 방해한다.

이메티닙 결합 위치에서 멀리 떨어진, 다른 그룹의 점 돌연변이(point mutation)가 상기 키나아제 도메인의 카복시-말단에 위치한다. 이 그룹에 속하는 가장 빈번하게 탐지되는 BCR - ABL 돌연변이는 M351T이다. 상기 M351T 돌연변이는 모든 임상의 이메티닙 내성의 15-20%를 설명한다(Hochhaus et al ., Leukemia, 18, 1321-31(2004)). M351T 돌연변이는 이메티닙과의 직접적인 접촉에 있어서 잔기의 명확한 위치 선정에 영향을 미치는 것으로 나타난다(Cowan-Jacob et al ., Mini Rev . Med . Chem., 4, 285-299(2004), 및 Shah et al., Cancer Cell, 2, 117-125(2002)).

상기 BCR - ABL 돌연변이는 이메티닙 내성과 관련된 대부분의 BCR - ABL 돌연변이를 설명한다. 그러나, 이메티닙의 존재 하에서 BCR - ABL-유도된 세포 증식을 위해 선택된 세포 스크리닝(cellular screening) 과정과 결합한 총-길이 BCR - ABL의 돌연변이적 분석은 상기 키나아제 도메인 외부의 돌연변이가 이메티닙과 키나아제 상호작용을 약화시키고 그에 따라 표적 내성에 공헌하는 것을 밝혔다(Azam, et al., Cell, 112, 831-843(2003)).

임상적으로 이메티닙 같은 ATP-경쟁적 키나아제 억제제에 대한 내성 발달과 관련된 BCR - ABL 돌연변이는 하기를 포함한다: G250E, F317L, Y253F, H396R, F311L, M351T, T315I, H369P, E255V, Y253H, Q252H, M244V, L387M, E355G, E255K 및 F359V. von Bubnoff et al ., Leukemia 17, 829-838(2003); Cowan-Jacob, et al ., Mini Rev . Med . Chem . 4, 285-299(2004); Hochhaus, et al ., Leukemia 18, 1321- 1331(2004); Nardi, et al ., Curr . Opin . Hematol. 11, 35-43(2004); Ross, et al., Br . J. Cancer 90, 12-19; 및 Daub et al ., Nature Reviews Drug Discovery, 3, 1001-10(2004) 참조.

상기 치료제 PD180970, BMS-354825 및 AP23464는 일부 이메티닙-내성 증식성 질병에 대해 효과를 나타냈다(Dau et al., supra). 그러나, 모든 BCR - ABL 돌연변이에 대해 효과를 보이는 작용제는 나타나지 않았다. 나아가, T315I 돌연변이에 의해 수여된 내성에 효과적인 작용제는 없었다.

B. 혈소판 유래 성장인자( PDGF ) 관련 증식성 질병

혈소판-유래 성장인자 수용체(PDGFR)는 또 다른 티로신 키나아제이다. BCR -ABL 암단백질(oncoprotein)을 발생시키는 크로모좀의 전좌와 유사한 분자 메카니즘은 이메티닙-민감성 PDGFR 융합 단백질 PDGFRα(SEQ ID NO: 2) 및 PDGFRβ(SEQ ID NO: 3) 을 만드는 것으로 나타났다. PDGFRα 및 PDGFRβ은 특발성 호중구증가 증후군(idiopathic hypereosinophilic syndrome) 및 만성골수단구성백혈병 (chronic myelomonocytic leukemia)에 각각 관련되어 있다(Apperley et al ., N. Engl J. Med., 347, 481-487(2002), 및 Cools et al ., N. Engl J. Med, 348, 1201-14(2003)). 호구증가 증후군에서는, 과도한 호산구(eosinophil)의 증식이 흔히 FIP1L1과 PDGFRα 융합의 결과로 생기는 키메라(chimeric) Fip1-유사(FIP1L1)-PDGFR 단백질의 구조적인 티로신 키나아제 활성을 야기한다.

PDGFR 및 원암유전자 c-kit는 악성 섬유성 조직구종(malignant fibrous histocytoma)(MFH)과 관련되어 있다. 이메티닙은 목표 키나아제 중 하나 또는 두 개 모두를 발현하는 세 개의 MFH 세포주(TNMY1, GBS-1 및 Nara-F)의 세포 증식 억제를 설명해왔다(Kawamoto et al ., Anticanver Res ., 24, 2675-9(2004)).

PDGFRβ은 또한 전립선암(prostate cancer)(Hofer et al ., Neoplasia, 6, 503-12(2004)), 안드로겐 의존성 전립선암(Mathew et al ., J. Clin . Oncol., 22, 3323-9(2004)) 및 피부섬유육종(dermatofibrosarcoma)(Klener et al ., Cas . Lek Cesk, 143, 582-3(2004))과 관련된다.

PDGFR 및 BCR - ABL은 또한 자궁내막양암종(endometrioid endometrial carcinoma)(EEC) 및 유두양 장액성 자궁내막암 (uterine papillary serous carcinoma)(UPSC)와 관련된다(Slomovitz et al ., Gyneco . Oncol., 95, 32-36(2004)).

PDGFRβ은 또한 척색종(chordoma)과 관련되고, 이메티닙의 임상적 투여는 척색종 환자의 그룹에서 항암 활성을 갖는 것으로 나타났다(Casali et al ., Cancer , 1, 2086-97(2004)).

PDGFRα 및 PDGFRβ은 실질적으로 모든 신경교종(glioma) 세포주 및 인간으로부터 막 분리한 인간 악성 성상세포종(astrocytoma)의 분리물에서 발현된다. 이메티닙은 누드 마우스의 생체 내에서 인간 교아세포종(glioblastoma) 세포(U343 및 U87)의 성장을 억제하는 것으로 나타났다(Kilic et al ., Cancer Res., 60, 5143-50(2000)).

한 연구에서, 탐지가능한 FIP1L1-PDGFR 유전자 융합을 갖는 다섯 명의 이메 티닙-치료한 환자 중 다섯 명이 완전한 혈액학적 감소를 경험하였다(Cools et al ., Id). 다섯 중 한 명의 환자는 결국 재발하여 이메티닙에 내성이 있는 것으로 밝혀졌다. 상기 이메티닙 내성은 αPDGFR αATP 결합 위치의 점 돌연변이가 원인이다. 상기 트레오닌-에서-이소루신으로의 치환(T674I)은 BCR - ABL의 게이트키퍼 잔기의 T315I 돌연변이에 상응하는 위치에서 발생한다.

상기 BCR - ABL의 게이트키퍼 잔기는 PDGFR, KIT, EGFR, SRC 및 P38을 포함하는 일부 키나아제의 게이트키퍼 잔기에 상응한다. 키나아제-관련 질병의 치료의 임상적 진보에도 불구하고, 임상적으로 중요한 돌연변이가 PDGFR, KIT, 및 EGFR의 키나아제 도메인에서 확인되었다. 이러한 돌연변이 중 일부는 BCR - ABL에서 발생하는 돌연변이와 상응하고, 게이트키퍼 잔기를 포함한다. 상기 게이트키퍼 잔기의 이소루신, 또는 메티오닌 같은 보다 큰 잔기로의 돌연변이는 키나아제 , SRC 및 EGFR에서 ATP-경쟁적 억제제 SB203580, PP1 및 PD153035 각각에 대한 내성을 수여하는 것으로 나타났다(Eyers et al ., Chem . Biol., 5, 321-328(1998); Liu et al ., Chem . Biol., 8, 257-266(1999); 및 Blencke et al ., J. Biol . Chem., 278, 15435-40(2003)).

C. KIT 관련 증식성 질병

위 및 소장의 중간엽(mesenchymal) 종양인, 위장관기질종양(gastrointestinal stromal tumor)(GIST)은 KIT 티로신 키나아제 수용체(SEQ ID NO: 4)를 발현한다. GIST 세포는 흔히 구조적 키나아제에 이르는 KIT 키나아제 도 메인 내의 활성 지점 돌연변이를 포함한다. 쥐에서 활성 KIT 돌연변이의 발현은 인간 GISTs와 유사한 종양을 유발하는 것으로 나타났다(Sommer et al ., Proc . Natl . Acad. Sci ., 100, 6706-11(2003)). C-kit 발현은 또한 소뇌의 원시 외배엽성 종양(primitive neuroectodermal tumor)인 수모세포종(medulloblastoma)에 관련되며, 이는 가장 흔한 소아 악성 중앙신경조직 종양이다. 열 개의 수모세포종 시료의 연구에서, 모두가 c-kit를 발현하였다(Chilton-Macneill et al ., Pediatr . Dev . Pathol., 7, 493-8(2004)). C-kit는 또한 많은 자궁 평활근 육종(uterine uterine leiomyosarcoma)에서 발현되는 것으로 나타난다(Raspollini et al ., Clin . Cancer Res., 10, 3500-3(2004)).

이메티닙에 대한 이차 내성 형성이 적어도 하나의 GIST 환자에서 보고되었다. 상기 내성은 KIT 키나아제 도메인의 T670I 돌연변이에 의해 유발되었다; 상기 돌연변이 위치는 BCR - ABL T315I 게이트키퍼 잔기에 대응한다(Demitri et al ., N. Engl J. Med, 347, 472-480(2002)). 상기 돌연변이는 고형 종양의 전이성 병변에 한정되었으며, 계속되는 이메티닙 요법이 이루어지는 동안 진행한 반면 다른 병변은 여전히 이메티닙 치료에 반응하였다(Tamborini et al ., Gastroenterology, 127, 294-299, (2004)).

다른 이차 KIT 돌연변이인, Y823D는 이메티닙 치료하는 동안 나타나서 심각한 이메티닙 내성을 수여하는 것으로 나타났다. 이러한 점돌연변이는 ABL 활성 루프 내 주요 인산화 위치인 Tyr393에 대응하는 위치에 있다(Wakai et al ., Br . J. Cancer, 90, 2059-61(2004)). 야생형 ABL에서 이 위치의 인산화는 활성 루프의 불 활성 형태를 불안정하게 한다(Schindler et al ., Science , 289, 1938-42(2000)). Y823D KIT 돌연변이가 인산화된 ABL의 Tyr393을 모방하고, 그게 따라 유사한 이메티닙 내성을 수여할 수 있음이 제시되었다(Daub et al ., Nature Reviews Drug Discovery, 3, 1001-10(2004)).

또 다른 돌연변이가 KIT 활성화 루프에서 특성화되었다. 상기 KIT 단백질 내의 키나아제-활성화 D816V 돌연변이는 일차 이메티닙 내성을 수여하고 인간의 비만세포증(mastocytosis) 질병의 원인으로 확인되었다(Me et al ., Blood, 99, 2059-61(2002)).

D. EGFR 관련 증식성 질병

표피성장인자수용체(epidermal growth factor receptor)(EGFR, SEQ ID NO:5)는 또 다른 티로신 키나아제이다. EGFR 억제제인 게피티닙(gefitinib)이 확립된 화학요법 치료에 반응을 하지 않는 비소세포폐암(non-small-cell lung cancer)(NSCLCs)의 치료제로 승인되었다(Muhsin et al ., Rev . Drug Discov., 2, 515-516(2003) 및 Cohen et al., Clin. Cancer Res., 10, 1212-18(2004)). 이메티닙-난치성 T315I BCR - ABL 돌연변이를 유발하는 상기 C-내지-T 단일-뉴클레오티드 돌연변이 또한 대응하는 게이트키퍼 잔기 Thr766을 메티오닌 잔기(T766M)로 대체하여 게피티닙에 대한 EGFR의 민감도를 현저하게 감소시킨다(Blenke et al ., Chem . Biol., 11, 691-791(2004), 및 Blenke et al ., J. Biol . Chem, 178, 15435-40(2003)).

Ⅱ. 이메티닙 내성 극복을 위한 이전의 시도

PD180970과 같은 피리도[2,3-d]피리미딘이 H396P와 같은 BCR - ABL 활성 루프 돌연변이의 암-촉진 활성을 억제하는 것으로 나타났다(La Rosee et al ., Cancer Res., 62, 7149-53(2002), 및 von Bubnoff et al ., Cancer Res ., 9, 1267-73(2003)). 이러한 화합물은 또한 임상적으로 흔한 Tyr253 또는 Glu255 관련 p-루프 돌연변이를 포함하는 BCR - ABL 을 억제한다. PD180970은 또한 약 15-20%의 이메티닙-내성 CML 경우를 설명하는 M351T 돌연변이를 포함하는 BCR - ABL 을 억제하는 것으로 나타났다(Kantarjian et al ., Blood, 101, 473-475(2003)).

가장 처음 설명한 원암유전자 SRC는 비수용체 티로신 티나아제(non-receptor tyrosine kinases)이다. 상기 SRC 및 ABL 억제제들인 BMS-354825 및 AP23464(표 1)은 BCR - ABL을 포함하는 이메티닙 내성과 관련된 임상적으로 흔한 특정 돌연변이 억제에서 피리도[2,3-d]피리미딘과 유사한 활성을 나타냈다(Shah et al ., Science , 305, 399-401(2004) 및 O'Hare et al ., Blood, 104, 2532-39(2004)).

Ⅲ. α,β-불포화 술폰 , 술폭시드 및 술폰아미드

특정 α,β-불포화 술폰, 술폭시드 및 술폰아미드, 특히 스티릴벤질 술폰, 스티릴벤질 술폭시드 및 스티릴 술폰아미드는 항증식(antiproliferative), 방사선 보호(radioprotective), 화학 보호(chemoprotective) 활성을 갖는 것으로 나타났다. 미국 특허 6,599,932, 6,576,675, 6,548,553, 6,541,475, 6,486,210, 6,414,034, 6,359,013, 6,201,154, 6,656,973 및 6,762,207을 참조할 수 있다. 그러나, α,β-불포화 술폰, 술폭시드 및 술폰아미드 중 어느 것도 ATP-경쟁적 키나아제 억제제 치료에 내성을 갖는 키나아제-의존 증식성 질병의 치료에서 활성을 갖는 것으로 보고되지 않았다.

키나아제 돌연변이에 기인한 약의 내성 극복에 일부 진보가 이루어졌다. 그러나, ATP-경쟁적 키나아제 억제제에 의한 치료에 내성이 있는 증식성 질병, 특히 암을 치료할 수 있고 이러한 내성의 발달을 예방하는 새로운 치료법이 요구된다. 나아가, ATP-경쟁적 키나아제 억제제의 치료에 내성이 있는 증식성 질병, 특히 암의 발현을 예방하거나 지연시킬 수 있는 새로운 치료법이 요구된다.

본 발명의 요약

본 발명의 일 구현에 의하면, ATP-경쟁적 키나아제 억제제의 치료에 내성이 있는 키나아제-의존 증식성 질병, 특히 암의 치료 방법이 개체에 제공된다. 상기 방법은 이러한 치료가 필요한 개체에 화학식 I에 따른 화합물 중 적어도 하나를 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다:

상기 식에서: Ar¹ 및 Ar²는 치환된 아릴 및 치환되지 않은 아릴 및 치환된 헤테로 아릴 및 치환되지 않은 헤테로 아릴로부터 독립적으로 선택되며;

X는 N 또는 CH이며;

n은 1 또는 2이며;

R은 -H 또는 -(C₁-C₈)하이드로카빌이며; 및

*은 X가 CH이고, R이 -H가 아닌 경우, X 탄소 상의 치환체의 형태는 R-, S- 또는 R- 및 S-의 어떠한 혼합이며; 또는 이들의 염인 것을 나타내며;

X가 N인 경우, n이 2인 것을 조건으로 한다.

본 발명의 다른 구현에 의하면, 키나아제-의존 증식성 질병을 겪는 개체에서, ATP-경쟁적 키나아제 억제제의 투여를 포함하는 치료에 대한 내성의 발달을 예방 또는 지연하는 방법이 제공된다. 상기 방법은 상술한 바와 같이, 이러한 치료가 필요한 개체에 화학식 I에 따른 화합물 중 적어도 하나를 유효량으로 투여하는 단계를 포함한다. 일 구현에 의하면, 상기 방법은 나아가 적어도 하나의 ATP-경쟁적 키나아제 억제제를 유효량으로 투여하는 단계를 더 포함한다.

ATP-경쟁적 키나아제 억제제의 치료에 대한 키나아제-의존 증식성 질병의 내성은 키나아제-의존 증식성 질병에 관련된 키나아제 단백질 서열의 돌연변이에 기인한다.

본 발명의 일 구현에 의하면, 다루어지는 상기 키나아제-의존 증식성 질병은 적어도 하나의 ATP-경쟁적 BCR - ABL 억제제에 대해 내성이 있다.

본 발명의 일 구현에 의하면, BCR - ABL의 ATP-경쟁적 억제제에 대한 내성은 BCR-ABL 단백질의 키나아제 도메인 내의 하나 또는 그 이상의 아미노산 잔기의 돌연변이에 기인한다. 몇몇의 구현에 의하면, 상기 내성은 BCR - ABL p-루프 내의 적어도 하나의 잔기의 돌연변이에 의해 발생한다. 특정 구현에 의하면, 상기 돌연변이는 BCR - ABL Tyr 253 또는 Glu 255의 교체를 포함한다. 다른 구현에 의하면, 상기 내성은 BCR - ABL 활성 루프 내의 적어도 하나의 잔기의 돌연변이로 발생한다. 특정 구현에 의하면, 상기 돌연변이는 His 396의 교체(alternation)이다.

바람직한 구현에 의하면, 상기 ATP-경쟁적 BCR - ABL 억제제는 이메티닙(imatinib)이다.

다른 구현에 의하면, BCR - ABL의 ATP-경쟁적 억제제에 대한 내성은 F317L, H396R, M351T, H396P, Y253H, M244V, E355G, F359V, G250E, Y253F, F311L, T315I, E255V, Q252H, L387M, E255K로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 돌연변이를 포함하는 BCR - ABL 단백질 내의 돌연변이에 기인한다.

본 발명의 일부 구현에 의하면, ATP-경쟁적 키나아제 억제제 치료에 내성이 있는 상기 키나아제-의존 증식성 질병은 만성 골수성백혈병, 급성 임파구성 임파종, 특발성 폐섬유증, 특발성 호중구증가 증후군, 만성 골수단구성백혈병, 악성 섬유성 조직구종, 전립선암, 안드로겐 의존성 전립선암, 피부섬유육종, 자궁내막양암종, 유두양 장액성 자궁내막암, 척색종, 신경교종, 악성 성상세포종, 교아세포종, 위장관기질종, 수모세포종, 자궁 평활근 육종, 및 비소세포폐암으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.

본 발명의 일 구현에 의하면, 상기 키나아제-의존 증식성 질병은 적어도 하나의 KIT의 ATP-경쟁적 억제제에 내성을 가지며, 상기 내성은 KIT 단백질의 하나 또는 그 이상의 아미노산 잔기의 돌연변이에서 기인한다. 일 구현에 의하면, 상기 돌연변이는 KIT 키나아제 도메인 내에 있다.

특정 구현에 의하면, KIT 단백질 내 돌연변이는 Tyr670, Tyr23 또는 Asp816 중 적어도 하나의 교체를 포함한다. 다른 구현에 의하면, KIT 단백질 내 돌연변이는 T670I, Y823D 및 D816V로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 돌연변이를 포함한다.

본 발명의 일 구현에 의하면, 상기 키나아제-의존 증식성 질병은 적어도 하나의 EGFR의 ATP-경쟁적 억제제에 내성을 가지며, 상기 내성은 EGFR 단백질 내의 하나 또는 그 이상의 아미노산 잔기의 돌연변이에서 기인한다. 일 구현에 의하면, 상기 돌연변이는 EGFR 키나아제 도메인 내에 있다.

특정 구현에 의하면, 상기 EGFR 돌연변이는 Thr 766의 교체를 포함한다. 이러한 하나의 돌연변이는 돌연변이 T766M이다.

본 발명의 다른 구현에 의하면, 상기 키나아제-의존 증식성 질병은 적어도 하나의 PDGFRα의 억제제에 내성을 갖으며, 상기 내성은 PDGFRα단백질 내의 하나 또는 그 이상의 아미노산 잔기의 돌연변이에서 기인한다. 일 구현에 의하면, 상기 돌연변이는 PDGFRα 키나아제 도메인 내에 있다.

특정 구현에 의하면, 상기 PDGFRα 돌연변이는 Thr 674의 교체를 포함한다. 이러한 하나의 돌연변이는 돌연변이 T674I이다.

본 발명의 다른 구현에 의하면, 상기 키나아제-의존 증식성 질병은 적어도 하나의 PDGFRβ의 억제제에 내성을 갖으며, 상기 내성은 PDGFRβ단백질 내의 하나 또는 그 이상의 아미노산 잔기의 돌연변이에서 기인한다. 일 구현에 의하면, 상기 돌연변이는 PDGFRα 키나아제 도메인 내에 있다.

특정 구현에 의하면, 상기 PDGFRβ 돌연변이는 Thr 681의 교체를 포함한다. 이러한 하나의 돌연변이는 돌연변이 T681I이다.

본 발명의 일 구현에 의하면, 화학식I의 치환된 아릴 또는 헤테로 아릴 Ar¹ 상의 치환체는 할로겐, -(C₁-C₈)하이드로카빌, -C(=O)R², -NR² ₂, -NHC(=O)R³, -NHSO₂R³, -NH(C₂-C₆)알킬렌-C(=O)R⁶, -NHCR²R⁴C(=O)R⁶, -C(=O)OR², -C(=O)NR² ₂, -NO₂, -CN, -OR², -OC(=O)R³, -OSO₂R³, -O(C₂-C₆)알킬렌-C(=O)R⁶, -OCR²R⁴C(=O)R⁶, -P(=O)(OR²)₂, -OP(=O)(OR²)₂, -O(C₂-C₆ 알킬렌)N(C₁-C₃)알킬)₂, -NHC(=NH)NHR², -(C₁-C₆)할로알킬, -O(C₁-C₆)할로알킬; -SO₂NH₂; 및 -N=CH-R⁷로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택될 수 있고; 화학식I의 치환된 아릴 또는 헤테로 아릴 Ar² 상의 치환체는 -(C₁-C₈)하이드로카빌, -C(=O)R², 할로겐, -NO₂, -CN, -OR², -C(=O)OR², -NR² ₂, -(C₁-C₆)할로알킬; -SO₂NH₂; 및 -O(C₁-C₆)할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택될 수 있으며;

상기 식에서:

각각의 R²는 -H 및 -(C₁-C₈)하이드로카빌로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며;

각각의 R³은 -(C₁-C₈)하이드로카빌, -O(C₁-C₈)하이드로카빌, 치환된 및 치환되지 않은 아릴, 치환된 및 치환되지 않은 헤테로사이클릴(C₁-C₃)알킬, 치환된 및 치환되지 않은 헤테로아릴(C₁-C₃)알킬, -(C₂-C₁₀)헤테로알킬, -(C₁-C₆)할로알킬, -CR²R⁴NHR⁵, -NR² ₂, -(C₁-C₃)알킬렌NH₂, -(C₁-C₃)알킬렌-N((C₁-C₃)알킬)₂, -(C₁-C₃)퍼플루오로알킬렌-N((C₁-C₃)알킬)₂, -(C₁-C₃)알킬렌-N⁺((C₁-C₃)알킬)₃, -(C₁-C₃)알킬렌-N+(CH₂CH₂OH)₃, -(C₁-C₃)알킬렌-OR², -(C₁-C₄)알킬렌-CO₂R², -(C₁-C₄)알킬렌-C(=O)할로겐, 할로(C₁-C₃)알킬-, -(C₁-C₃)알킬렌-C(=O)(C₁-C₃)알킬, 및 -(C₁-C₄)퍼플루오로알킬렌-CO₂R²로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며;

각각의 R⁴는 -H, -(C₁-C₆)알킬, -(CH₂)₃-NH-C(NH₂)(=NH), -CH₂C(=O)NH₂, -CH₂CO₂R², -CH₂SH, -(CH₂)₂C(=)O-NH₂, -(CH₂)₂CO₂R², -CH₂-(2-이미다졸릴), -(CH₂)₄-NH₂, -(CH₂)₂-S-CH₃, 페닐, -CH₂-페닐, -CH₂-OH, -CH(OH)-CH₃, -CH₂-(3-일돌릴), 및-CH₂-(4-히드록시페닐)로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며;

각각의 R⁵는 -H, -C(=O)(C₁-C₇)하이드로카빌 및 펩티딜 잔기의 말단 아미노기 내의 1 내지 3 아미노산을 포함하는 카복시 말단-결합된 펩티딜 잔기가 -NH₂, -NHC(=O)(C₁-C₆)알킬, -NH(C₁-C₆)알킬, -N(C₁-C₆알킬)₂ 및 -NHC(=O)O(C₁-C₇)하이드로카빌로 이루어진 그룹으로부터 선택된 작용기로서 존재하며;

각각의 R⁶은 -OR², -NR² ₂, 및 펩티딜 잔기의 말단 카복실기 내의 1 내지 3 아미노산을 포함하는 아미노 말단-결합된 펩티딜 잔기가 -CO₂R² 및 -C(=O)NR² ₂로 이루어진 그룹으로부터 선택된 작용기로서 존재하며; 및

각각의 R⁷은 치환 및 미치환 아릴 및 치환 및 미치환 헤테로아릴로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며;

Ar¹ 및 Ar² 상의 치환체의 최대 수는 상기 치환체가 결합되는 고리의 치환 가능한 수소의 개수와 같음을 조건으로 한다.

R³ 또는 R⁷을 포함하는 치환된 아릴 또는 헤테로아릴기 상의 치환체는 바람직하게는 -(C₁-C₆)알킬, -(C₁-C₆)알콕시, 할로겐, -C(=O)(C₁-C₆)알킬, -NH₂, -NH(C₁-C₆)알킬, -N(C₁-C₆)알킬)₂, -NHC(=O)(C₁-C₆)알킬, -NO₂, -CN, (C₁-C₆)할로알킬, -(C₁-C₆)알킬렌-NH₂, -CO₂H, CONH₂, C(=N)NH₂, 및 헤테로사이클릴(C₁-C₆)알킬로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며; 여기서 헤테로사이클릴 고리는 헤테로사이클릴(C₁-C₆)알킬을 포함하고 임의로 -(C₁-C₆)알킬 또는 C(=O)(C₁-C₆)알킬로 치환된다.

R³을 포함하는 치환된 헤테로사이클릴기 상의 치환체는 바람직하게는 -(C₁-C₆)알킬, -(C₁-C₆)알콕시, 할로겐, -C(=O)(C₁-C₆)알킬, -CO₂H, 및 CONH₂로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며;

본 발명의 일부 바람직한 구현에 의하면, Ar¹은 페닐이다. 본 발명의 다른 바람직한 구현에 의하면, Ar²은 페닐이다. 본 발명의 또 다른 바람직한 구현에 의하면, Ar¹ 및 Ar²은 모두 페닐이다.

바람직하게는, Ar¹ 및 Ar²가 모두 페닐인 경우, Ar¹ 및 Ar²은 모두 적어도 단일-치환된다.

본 발명의 일부 구현에 의하면, Ar¹ 및 Ar²을 포함하는 화학식 I 화합물의 상기 아릴 및 헤테로아릴기는 단일-, 이- 또는 삼-치환된다. 다른 구현에 의하면, 상기 Ar¹ 및 Ar²을 포함하는 아릴 및 헤테로아릴기는 치환 가능한 모든 위치에 치환된다.

R은 바람직하게는 -H 또는 -(C₁-C₈)알킬이며, 가장 바람직하게는 -H 또는 -(C₁-C₆)알킬이다.

바람직한 구현에 의하면, 치환된 아릴 또는 헤테로아릴 Ar¹ 상의 치환체는 할로겐, -NR² ₂, -NHCR²R⁴(=O)R⁶, -OR², -OCR²R⁴C(=O)R⁶, 및 -OP(=O)(OR²)₂로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며; 그리고 치환된 아릴 또는 헤테로아릴 Ar² 상의 치환체는 (C₁-C₈)하이드로카빌, 할로겐, -OR², -C(=O)OR², 및 -NR² ₂로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된다.

더욱 바람직한 구현에 의하면, 치환된 아릴 또는 헤테로아릴 Ar¹ 상의 치환체는 할로겐, -NH₂, -NHCHR⁴C(=O)R², -OH, -OCHR⁴C(=O)OR², 및 -OP(=O)(OR²)₂로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며; 그리고 치환된 아릴 또는 헤테로아릴 Ar² 상의 치환체는 (C₁-C₆)알킬, 할로겐, -OR², -C(=O)OR², 및 -NR² ₂로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된다.

가장 바람직한 구현에 의하면, 치환된 아릴 또는 헤테로아릴 Ar¹ 상의 치환체는 할로겐, -NH₂, -NHCH(CH₃)C(=O)H, -NHCH₂C(=O)OH, -OH, -OCH(CH₃)C(=O)OH, 및 -OCH₂C(=O)OH로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며; 그리고 치환된 아릴 또는 헤테로아릴 Ar² 상의 치환체는 -(C₁-C₃)알킬, 할로겐, -O(C₁-C₆)알킬, -C(=O)OR², 및 -NR² ₂로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택된다.

화학식 I에 의한 바람직한 화합물은 예를 들어: (E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)아세트산; (E)-(라세믹)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)프로판산; (R)-(E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)프로판산; (S)-(E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)프로판산; (E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술피닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)아세트산; (E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술피닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)프로판산; (E)-2,4,6-트리메톡시스티릴-N-(3-카복시페닐아미노-4-메톡시-페닐)술폰아미드; (S)-(E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)-2-페닐아세트산; (R)-(E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)-2-페닐아세트산; (라세믹)-(E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)-2-페닐아세트산; (E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)-2-메틸프로판산; (E)-1-(2-(4-브로모벤질술포닐)비닐)-2,4-디플루오로벤젠; 및 약학적으로 허용되는 이들의 염을 포함한다.

본 발명의 특정 구현에 의하면, 상기 화학식 I에 의한 화합물은 실질적으로 반대 거울상이성질체(opposite enantiomer) 프리(free)인, 단리된 광학 이성질체를 포함한다. 바람직한 일 부-구현에 의하면, 상기 단리된 광학 거울상이성질체는 *로 표시된 원자에서 (R)- 절대 배열(absolute configuration)을 갖고, 실질적으로 (R)-거울상이성질체 프리(free)이다.

본 발명은 또한 (1) 개체에서 ATP-경쟁적 키나아제 억제제의 치료에 내성을 갖는 키나아제-의존 증식성 질병의 치료, 또는 (2) 키나아제 의존 증식성 질병을 겪는 개체에서, ATP-경쟁적 키나아제 억제제 투여를 포함하는 치료법에 대한 내성 발달의 예방 또는 지연을 위한 의약 제조를 위한 화학식 I에 의한 화합물, 또는 약학적으로 허용되는 이들의 염의 용도를 위한 것이다.

정의

상기 용어 "개체"는 인간 및 인간이 아닌 동물을 포함한다.

증식성 질병, 특히 암을 겪는 환자의 치료와 관련하여 "유효량"이란 표현은 비정상적으로 높은 속도로 증식하는 세포의 성장을 억제하거나 또는 택일적으로 이러한 세포, 바람직하게는 암 세포의 아포토시스(apoptosis)을 유도하여 증식성 질병, 특히 암을 겪는 환자에게 투여하는 경우, 증식성 세포에서 치료법적으로 유용하고 선택적인 세포 독성 효과의 결과를 나타내는 화학식 I 화합물의 양을 나타낸다. 상기 용어 "유효량"은 비정상적으로 증식성인 세포의 성장을 억제하거나 또는 이러한 세포의 아포토시스를 유도하는 양의 활성 대사 산물로 대사될 수 있는 화학식 I 화합물의 포괄적인 양이다.

상기 표현 "증식성 질병"은 체내에서 비정형적으로 촉진된 속도로 세포들이 만들어지는 질병을 의미한다. 상기 표현 "키나아제-의존 증식성 질병"은 단백질 키나아제 발현에 의해 비정상적으로 높은 세포 증식이 유도되는 증식성 질병을 나타낸다.

상기 용어 "종양"은 비정상적인 세포 증식에서 기인하며, 생리학적 기능을 제공하지 않는 조직의 비정상적인 성장을 의미한다. 종양은 양성 종양, 즉 주변 조직에 침투하지 않고 개체의 생명을 위태롭게 하지 않는 종양일 수 있다. 종양성(cancerous) 종양은 악성일 수 있고, 즉 주변 조직에 침투 및/또는 전이하는 경향이 있으며, 즉 종양의 본래 위치에서 떨어진 신체 조직으로 퍼진다.

상기 표현 "키나아제 억제제"는 키나아제의 키나아제 활성을 억제하는 작용제를 나타낸다.

상기 표현 "ATP-경쟁적 키나아제 억제제"는 상기 키나아제 상의 APT 결합 위치에 대해 ATP와 경쟁하여 상기 키나아제를 억제하는 키나아제 억제제를 의미한다.

상기 용어 "알킬"은 그 자체 또는 다른 치환체의 일부로서, 다르게 진술된 바 없다면, (C_x-C_y)알킬과 같은 표현으로 지시된 탄소 원자 수를 갖는 다이- 및 멀티-라디칼을 포함하는 직쇄, 분지쇄 또는 고리쇄 포화 하이드로카본 라디칼을 의미한다. x<y인 경우 상기 표현 (C_x-C_y)알킬은, 최소의 x 탄소 원자 및 최대의 y 탄소 원자를 포함하는 알킬 쇄를 나타낸다. 예시들은: 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, tert-부틸, 펜틸, 네오펜틸, 헥실, 시클로헥실 및 시클로프로필메틸을 포함한다. 바람직하게는 (C₁-C₃)알킬, 특히 에틸, 메틸 및 이소프로필이다.

상기 용어 "시클로알킬"은 적어도 하나의 시클릭 구조를 포함하는 알킬기를 나타낸다. 예시들은: 시클로헥실, 시클로펜틸, 노르보닐, 아다만틸 및 시클로프로필메틸을 포함한다. 바람직하게는 (C₃-C₁₂)시클로알킬, 특히 시클로펜틸, 노르보닐 및 아다만틸이다.

상기 용어 "알킬렌" 은 지시된 탄소 원자 수를 갖는 2가 알킬 라디칼을 나타내며(즉, (C₁-C₆)은 -CH₂-; -CH₂CH₂- -CH₂CH₂CH₂CH₂-; -CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-; 및 -CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-를 의미한다), 또한 예를 들어 -CH₂CH(CH₃)CH₂CH₂- 및 -CH(CH₃)CH(CH₃)-와 같은 분지쇄 2가 구조, 및 예를 들어 1,3-시클로펜틸과 같은 2가 고리 구조를 포함한다.

상기 용어 "아릴렌"은 그 자체 또는 다른 치환체의 일부로서, 다르게 정의된 바 없다면, 2가 아릴 라디칼이다. 바람직하게는 2가 페닐 라디칼, 또는 "페닐렌"기, 특히 1,4-2가 페닐 라디칼이다.

상기 용어 "헤테로아릴렌"은 그 자체 또는 다른 치환체의 일부로서, 다르게 정의된 바 없다면, 2가 헤테로아릴 라디칼이다. 바람직하게는 5- 또는 6-원자 모노시클릭 헤테로아릴이다. 더욱 바람직하게는 예를 들어 2,5-2가 피롤, 티오펜, 퓨란, 티아졸, 옥사졸, 및 이미다졸과 같은 피리딘, 피페라진, 피리미딘, 피라진, 퓨란, 티오펜, 피롤, 티아졸, 이미다졸 및 옥사졸로 이루어진 그룹으로부터 선택된 2가 헤테로아릴 고리를 포함하는 헤테로아릴렌 부이다.

상기 용어 "알콕시"는 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되어, 다르게 정의된 바 없다면, 상기에서 정의된 바와 같이, 산소 원자를 통해 나머지 분자에 연결되는 지시된 수의 탄소 원자를 갖는, 예를 들어 메톡시, 에톡시, 1-프로폭시, 2-프로폭시(이소프로폭시) 및 고급 동족체(higher homologue) 및 이성질체와 같은 알킬기를 의미한다. 바라직하게는 (C₁-C₆)알콕시, 특히 에톡시 및 메톡시이다.

본 발명의 화합물에 나타날 수 있는 상기 알킬 및 알콕시기 내의 탄소 쇄(chain)는 고리쇄, 직쇄 또는 분지쇄일 수 있으며, 직쇄가 바람직하다. 상기 표현 "(C₁-C₆)알킬"은 따라서 1, 2, 3, 4, 5 또는 6 개의 탄소를 포함하는 알킬기로 확장된다. 상기 표현 "(C₁-C₆)알콕시"는 따라서 1, 2, 3, 4, 5 또는 6 개의 탄소를 포함하는 알콕시기로 확장된다.

상기 용어 "하이드로카빌"은 오직 수소 및 탄소 원자만을 포함하는 어떠한 부를 나탄낸다. 상기 용어는 예를 들어, 알킬, 알케닐, 알키닐, 아릴 및 벤질 기를 포함한다. 바람직하게는 (C₁-C₇)하이드로카빌이다. 더 바람직하게는 (C₁-C₆)알킬 및 (C₃-C₁₂)시클로알킬이다.

상기 용어 "헤테로알킬"은 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되어, 다르게 정의된 바 없다면, 지시된 탄소 원자 및 O, N, 및 S로 이루어진 그룹으로부터 선택된 하나 혹은 두 개의 헤테로 원자로 이루어진 안정한 직쇄 또는 분지쇄 라디칼을 의미하며, 여기서 질소 및 황 원자는 임의로 산화될 수 있고 상기 질소 헤테로 원자는 임의로 쿼터나이즈(quaternized)된다. 상기 헤테로 원자(들)은 헤테로알킬기의 가장 멀리 떨어진 탄소 원자에 부착할 뿐만 아니라, 헤테로알킬기의 나머지 와 그 부착된 단편 사이를 포함한 헤테로알킬기의 어떠한 위치에 있을 수 있다. 예시는: -O-CH₂-CH₂-CH₃, -CH₂-CH₂CH₂-OH, -CH₂-CH₂-NH-CH₃, _-CH_{2 -S-}CH_{2 -}CH₃, 및 -CH₂CH₂-S(=O)-CH₃을 포함한다. 예를 들어 -CH₂-NH-OCH₃, 또는 -CH₂-CH₂-S-S-CH₃와 같이 두 개의 원자까지 연속적일 수 있다

상기 용어 "할로" 또는 "할로겐"은 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되어, 다르게 정의된 바 없다면, 플루오린, 크로린, 브로민, 또는 이오딘 원자를 의미한다.

상기 용어 "방향족(aromatic)"은 방향족 특성인 (4π+2) 비편재화된(delocalized) π(pi) 전자 갖는 하나 혹은 그 이상의 다중불포화 고리가 있는 카보시클릭 또는 헤테로시클릭을 나타낸다. 상기 용어 "방향족(aromatic)"은 오직 탄소 고리 원자만을 포함하는 고리계뿐만 아니라 고리 원자로서 하나 혹은 그 이상의 비-탄소 원자를 포함하는 계를 포함하는 것으로 의도된다. 하나 또는 그 이상의 비-탄소 원자를 포함하는 계는 "헤테로아릴" 또는 "헤테로방향족" 계로 알려질 수 있다. 상기 용어 "방향족"은 따라서 "아릴" 및 "헤테로아릴" 고리계를 포함하는 것으로 생각된다.

단독 또는 다른 용어와 함께 사용되는 상기 용어 "아릴"은 다르게 정의된 바 없다면, 하나 또는 그 이상의 고리(전형적으로 1, 2 또는 3 고리)를 포함하는 카보시클릭 방향족계를 의미하며 여기서 이러한 고리는 바이페닐과 같이 펜던트 방식으로 함께 부착되거나, 또는 나프탈렌과 같이 융합될 수 있다. 예시들은 치환되거나 치환되지 않을 수 있는 페닐, 안트라실, 및 나프틸을 포함한다. 이전에 언급된 아릴부의 나열은 대표적인 것으로서, 이에 제한되는 것은 아니다.

상기 용어 "헤테로시클" 또는 "헤테로시클릴" 또는 "헤테로시클릭"은 단독으로 또는 다른 용어와 함께 사용되어, 다르게 정의된 바 없다면, 미치환된 혹은 치환된, 안정한, 모노시클릭 혹은 폴리시클릭 헤테로시클릭 고리계를 의미하며, 탄소 원자 및 N, O, 및 S로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 헤테로 원자를 포함하며 여기서 상기 질소 및 황 헤테로 원자는 임의로 산화될 수 있고, 상기 질소 원자는 임의로 쿼터나이즈(quaternized) 될 수 있다. 상기 헤테로시클릭계는 다르게 정의된 바 없다면, 안정한 구조를 제공하는 어떠한 헤테로 원자 또는 탄소 원자에 부착될 수 있다.

헤테로시클릴기는, 포화된 및 부분적 포화된 및 모노시클릭 및 폴리시클릭 부분적 포화된 모노시클릭 및 폴리시클릭과 같은, 모노시클릭 및 폴리시클릭 헤테로아릴기 및 방향족이 아닌 모노시클릭 및 폴리시클릭기를 포함한다.

상기 용어 "헤테로아릴" 또는 "헤테로방향족"은 방향족 특성을 갖는 헤테로시클릭을 나타내며, 모노시클릭 헤테로아릴기 및 폴리시클릭 헤테로아릴기 모두를 포함한다. 폴리시클릭 헤테로아릴기는 부분적으로 포화된 하나 혹은 그 이상의 고리를 포함할 수 있다.

모노시클릭 헤테로아릴기의 예는 피리딜; 피라지닐; 피리미디닐, 특히 2- 및 5-피리미디닐; 피리다지닐; 티에닐; 퓨릴; 피롤릴, 특히 2-피롤릴 및 1-알킬-2-피롤릴; 이미다졸릴, 특히 2-이미다졸릴; 티아졸릴, 특히 2-티아졸릴; 옥사졸릴, 특히 2-옥사졸릴; 피라졸릴, 특히 3- 및 5- 피라졸릴, 이소티아졸릴, 1,2,3-트리아졸릴, 1,2,4,-트리아졸릴, 1,3,4-트리아졸릴, 테트라졸릴, 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,3-옥사디아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴; 및 1,3,4-옥사디아졸릴을 포함한다.

방향족이 아닌 모노시클릭 헤테로시클의 예는 아지리딘, 옥시란, 티란, 아제티딘, 옥세탄, 티에탄, 피롤리딘, 피롤린, 이미다졸린, 피라졸리딘, 디옥솔란, 1,4-디옥산, 1,3-디옥산, 술폴란, 테트라하이드로퓨란, 티오판, 피페라진, 모르폴린, 티오모르폴린, 테트라하이드로피란, 호모피페라진, 호모피페리딘, 1,3-디옥세판, 헥사메틸렌옥사이드 및 피페리딘과 같은 포화 모노시클릭기; 및 1,2,3,6-테트라하이드로피리딘, 1,4-디하이드로피리딘, 2,3-디하이드로퓨란, 2,5-디하이드로퓨란, 2,3-디하이드로피란, 1,2-디하이드로티아졸, 1,2,-디하이드로옥사졸, 1,2-디하이드로이미다졸 및 4,7-디하이드로-1,3-디옥세핀과 같이 부분적으로 포화된 모노시클릭기를 포함한다.

폴리시클릭 헤테로아릴기의 예는 인돌릴, 특히 3-, 4-, 5-, 6- 및 7-인돌릴, 퀴놀릴, 이소퀴놀릴, 특히 1- 및 5-이소퀴놀릴, 신놀리닐, 퀴녹살리닐, 특히 2- 및 5-퀴녹살리닐, 퀴나졸리닐, 프탈라지닐, 1,8-나프티리디닐, 1,4-벤조디옥사닐, 쿠마린, 벤조퓨릴, 특히 3-, 4-, 1,5-나프티리디닐, 5-, 6- 및 7-벤조퓨릴, 1,2-벤지속사졸릴, 벤조티에닐, 특히 3-, 4-, 5-, 6-, 및 7-벤조티에닐, 벤족사졸릴, 벤즈티아졸릴, 특히 2-벤조티아졸릴 및 5-벤조티아졸릴, 퓨리닐, 벤즈이미다졸릴, 특히 2-벤즈이미다졸릴, 베즈트리아졸릴, 티옥산티닐, 카르바졸릴, 카르볼리닐, 아크리디닐, 피롤리지디닐, 테트라하이드로퀴놀릴; 1,2,3,4-테트라하이드로이소퀴놀릴; 디하이드로쿠마리닐; 2,3-디하이드로벤조퓨릴; 2,3-디하이드로벤조티에닐, N-메틸-2-인돌리닐; 및 인돌리닐을 포함한다.

비-방향족 폴리시클릭 헤테로시클의 예는 피롤리지디닐 및 퀴놀리지디닐을 포함한다.

비-방향족 헤테로시클 부 및 헤테로아릴 부의 상술한 목록은 대표적인 것으로, 이에 한정하는 것은 아니다.

바람직한 헤테로아릴기는 2-, 3- 및 4-피리딜; 피라지닐; 2- 및 5-피리미디닐; 3-피리다지닐; 2- 및 3-티에닐; 2- 및 3-퓨릴; 피롤릴; 특히 N-메틸피롤-2-일; 2-이미다졸릴; 2-티아졸릴; 2-옥사졸릴; 피라졸릴; 특히 3- 및 5-피라졸릴; 이소티아졸릴; 1,2,3-트리아졸릴; 1,2,4-트리아졸릴; 1,3,4-트리아졸릴; 테트라졸릴, 1,2,3-티아디아졸릴; 1,2,3-옥사디아졸릴; 1,3,4-티아디아졸릴 및 1,3,4-옥사디아졸릴; 인돌릴, 특히 2-, 3-, 4-, 5-, 6- 및 7-인돌릴; 신놀릴닐; 퀴녹살리닐, 특히 2- 및 5-퀴녹살리닐; 퀴나졸리닐, 특히 2-, 5-, 6-, 7- 및 8-퀴나졸리닐; 프탈라지닐; 1,8-나프티리디닐; 1,5-나프티리디닐, 특히 1,5-나프티리딘-3-일 및 1,5-나프티리딘-4-일; 1,4-벤조디옥사닐; 쿠마린; 벤조퓨릴, 특히 1-, 3-, 5-, 6- 및 7-벤조퓨릴; 1,2-벤지속사졸릴; 벤조티에닐, 특히 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 및 7-벤조티에닐; 벤족사졸릴; 벤즈티아졸릴, 특히 2-벤조티아졸릴 및 5-벤조티아졸릴; 퓨리닐; 벤즈이미다졸릴, 특히 2-벤즈이미다졸릴; 벤즈트리아졸릴; 티옥산티닐; 카르바졸릴; 카르볼리닐; 및 아크리디닐, 특히 6-아크리디닐이다.

더욱 바람직한 헤테로아릴기는 2,3- 및 4-피리디닐; 2- 및 3-티에닐; 2- 및 3-퓨릴; 2-피롤릴; 2-이미다졸릴; 2-티아졸릴; 2-옥사졸릴; 2- 및 3-인돌릴; 2-, 및 3-벤조퓨릴; 3-(1,2-벤지속사졸릴); 2-, 및 3-벤조티에닐; 2-벤족사졸릴; 1- 및 2-벤즈이미다졸릴, 2-, 3- 및 4-퀴놀리닐; 및 2- 및 5-벤즈티아졸릴이다. 가장 바람지한 헤테로아릴기는 2- 및 3-인돌릴; 2- 및 3-피롤릴, 2-, 및 3-벤조퓨릴; 및 2-, 및 3-벤조티에닐이다.

상기 용어 "치환된"은 수소가 다른 기에 부착된 치환체로 대체된 원자 또는 원자의 그룹을 의미한다. 아릴 및 헤테로아릴에 대해, 상기 용어 "치환된"은 치환이 허용되는 곳에서의 어떠한 수준의 치환, 즉 모노-, 다이-, 트리-, 테트라-, 또는 펜타-치환을 나타낸다. 상기 치환체는 독립적으로 선택되고, 치환은 어떠한 화학적으로 접근가능한 위치일 수 있다.

상기 α,β-불포화(아릴 또는 헤테로아릴)술폰, 술폭시드 및 술폰아미드는 이중결합 존재에 기인한 이성질체(isomerism)에 의해 특성화된다. 상기 이성질체는 일반적으로 시스-트랜스 이성질체로 언급되지만, 보다 광범위한 명명 규칙(naming convention)은 E 및 Z 명칭을 사용한다. 화합물은 Cahn-Ingold-Prelog 시스템에 의해 명명된다, the IUPAC 1974 Recommendations, Section E: Stereochemistry, in Nomenclature of Organic Chemistry, Jhon Wiley&Sons, Inc., New York, NY, 4^th ed., 1992, p.127-138. 상기 명명 시스템을 이용하여, 이중결합에 관한 상기 네 그룹이 일련의 규칙에 따라 우선순위가 매겨진다. 그 후, 이중 결합의 같은 편에 보다 높은 순위의 두 그룹을 갖는 이성질체가 Z로 지시된다(독일어로 "zuzammen"은 함께를 의미한다). 두 개의 보다 높은 순위 그룹이 이중결합의 반대편에 있는 다른 이성질체가, E로 지시된다(독일어로 "entgegen"은 반대를 의미한다). 따라서 탄소-탄소 이중결합 상의 네 그룹이 A가 가장 낮은 순위 그리고 D가 가장 높은 순위로 매겨지는 경우, A>B>C>D, 상기 이상질체는 스킴 1과 같이 명명될 것이다.

본 발명은 E-배열(configuration)의 α,β-불포화(아릴 및 헤테로아릴)술폰, 술폭시드 및 술폰아미드를 고찰한다.

화학식 I에 따른 일부α,β-불포화(아릴 및 헤테로아릴)술폰, 술폭시드 및 술폰아미드는 X가 CH이고 R이 -H가 아닌 경우, X에서의 키랄 중심에 기인한 이성질체(isomerizm)에 의해 특성화될 수 있다. 키랄 중심에 기인한 상기 이성질체는 "거울상이성질체(enantiomer)"라 불리는 겹쳐지지 않는(nonsuperimposable) 이성질체 쌍을 포함한다. 순수 화합물의 단일 거울상이성질체는 광학적으로 활성이다, 즉 이들은 평행편광(plane-polarized light)의 면을 회전할 수 있다. 단일의 거울상이성질체를 Cahn - Ingold - Prelog 시스템에 의해 나타내었다. March, Advanced Organic Chemistry, 4^th Ed., (1992), p.109. 네 그룹의 우선 순위가 결정되면, 상기 분자는 배향되어 낮은 순위의 그룹이 관찰자로부터 멀리 향한다. 그 후, 다른 그룹이 내림차순으로 시계방향으로 진행되며, 상기 분자는 (R)로 지시되고 다른 그룹이 내림차순으로 반시계방향으로 진행되는 경우, 상기 분자는 (S)로 지시된다. 하기의 스킴 1에서 나타나는 예에서, 상기 Cahn - Ingold - Prelog 순위는 A>B>C>D이다. 가장 낮은 순위의 원자, D는 관찰자로부터 멀리 배향된다.

다르게 지시된 바 없다면, 두 절대 배열(absolute configuration) 및 그 혼합은 화학식 I의α,β-불포화(아릴 및 헤테로아릴)술폰, 술폭시드 및 술폰아미드의 견지에 포함된다.

상기 표현 (R)- 또는 (S)-거울상이성질체의 "실질적으로 프리(free)"는 광학적으로 활성인 화학식 I 화합물 언급시에 사용되는 경우, 화합물의 (R)- 및 (S)-거울상이성질체가 분리되어 상기 조성물이 80 중량% 또는 그 이상의 단일 거울상이성질체인 것을 의미한다. 바람직하게, 상기 조성물은 90 중량% 또는 그 이상의 단일 거울상이성질체이다. 보다 바람직하게, 상기 조성물은 95 중량% 또는 그 이상의 단일 거울상이성질체이다. 가장 바람직하게, 상기 조성물은 99 중량% 또는 그 이상의 단일 거울상이성질체이다.

따라서, 실질적으로 (S)-거울상이성질체 프리(free)인 화학식 I에 따른 화합물의 (R)-거울상이성질체는 (R)-거울상이성질체를 80 중량% 또는 그 이상 포함하고 마찬가지로 20 중량% 또는 그 이하의 (S)-거울상이성질체를 불순물로 함유하는 화합물을 의미한다.

단리된 광학 이성질체는 잘-알려진 키랄 분리 기술에 의해 라세믹 혼합물로부터 분리될 수 있다. 이러한 방법 중 하나에 따르면, 화학식 I의 구조를 갖는 화합물의 라세믹 혼합물, 또는 이들의 키랄 중간체가 컬럼의 일련의 DAICEL CHIRALPAK 패밀리(Daicel Chemical Industries, Ltd., Tokyo, Japan)의 멤버와 같은 적절한 키랄 컬럼을 이용한 HPLC에 의해 99 중량%의 순수 광학 이성질체로 분리된다. 상기 컬럼은 제조사의 지시에 따라 작동된다.

화학식 I에 따른 화합물에 대해, 하나 이상의 키랄 중심이 분자 내에 존재할 수 있다. 두 개의 키랄 중심의 존재는 두 쌍의 거울상이성질체를 기인한다. 거울-상 이성질체들 사이의 관계만을 거울상이성질체(enantiomeric)라고 칭한다. 단일의 거울상이성질체와 추가적인 키랄 중심의 결과로 존재하는 다른 이성질체 사이의 관계는 "부분입체이성질체(diastereomeric)"이라 칭한다. 부분입체이성질체 쌍은 정상 및 역상 크로마토그래피, 및 결정화를 포함하는 알려진 분리 기술에 의해 분해될 수 있다. 두 개의 키랄 중심을 함유하는 화학식 I에 따른 본 발명의 화합물은 단리된 부분입체이성질체, 예컨데 (R,R), (R,S), (S,R), (S,S); 단리된 부분입체이성질체 쌍, 예컨데 (R,R) 및 (R,S), 또는 (S,R), 및 (S,S); 및 어떠한 비율의 부분입체이성질체 혼합물 모두를 포함하는 것으로 이해된다.

본 명세서에서 개시된 화합물에 체계적인 명칭을 제공하기 위해 본 명세서에서 사용된 명명법은 컴퓨터 프로그램 패키지, CHEMDRAW^®, CambridgeSoft Corporation, Cambridge, MA 02140을 이용하여 유도될 수 있다.

본 발명의 상세한 설명

본 발명에 의하면, 특정한 α,β-불포화 술폰 술폭시드 및 술폰아미드, 또는 약학적으로 허용되는 이들의 염이 ATP-경쟁적 키나아제 억제제의 처리에 내성을 갖는 키나아제-의존 증식성 질병 내의 목표 세포의 증식 억제에 효과를 갖는다.

상기 화합물은 목표 키나아제 내의 돌연변이에 의해 질병이 ATP-경쟁적 키나아제 억제제의 치료에 내성을 갖게 된 개체의 증식성 질병의 치료에 사용될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 상기 화합물은 목표 키나아제, BCR - ABL의 점돌연변이에 의해 발생한 이메티닙-내성 CML 및 ALL의 치료를 위해 투여될 수 있다. 본 발명의 상기 화합물은 KIT, PDGFRα, PDGFRβ, EGFR, SRC 및 P38의 발현에 의해 특성화되는 증식성 질병과 같은 키나아제 돌연변이에 의해 치료법에 대해 난치성이 된 다른 키나아제-의존 증식성 질병에 대해 사용될 수 있다. 이러한 키나아제의 돌연변이는 이메티닙 및 다른 ATP-경쟁적 키나아제 억제제의 결합을 방해하는 것으로 나타났다.

키나아제 발현에 의해 유도될 수 있는 증식성 질병은 예를 들어 만성 골수성백혈병, 급성 임파구성 임파종, 특발성 폐섬유증, 특발성 호중구증가 증후군, 만성 골수단구성백혈병, 악성 섬유성 조직구종, 전립선암, 안드로겐 의존성 전립선암, 피부섬유육종, 자궁내막양암종, 유두양 장액성 자궁내막암, 척색종, 신경교종, 악성 성상세포종, 교아세포종, 위장관기질종, 수모세포종, 자궁 평활근 육종, 및 비소세포폐암을 포함한다.

I. ATP-경쟁적 키나아제 억제제에 내성이 있는 증식성 질병의 확인

이메티닙-처리된 만성 골수성백혈병(CML)에서 BCR - ABL 키나아제 도메인 내의 돌연변이는 CML에서 이메티닙에 대한 내성을 획득하는 주요 메카니즘이다. 마찬가지로, 예를 들어 PDGFR, KIT, EGFR, SRC 및 P38의 다른 키나아제를 암호화하는 유전자의 키나아제 도메인 내의 돌연변이는 돌연변이되지 않은 키나아제와 비교할 때 항증식성 활성을 갖는 단백질 키나아제 억제제에 내성을 획득하는 주된 메카니즘과 관련되어왔다.

약 내성의 경우에 대한 개입에서, 본 발명의 방법을 사용하여 하기의 대상의 세포에서 키나아제 돌연변이, 특히 대상의 종양(neoplastic) 세포의 탐지가 수행될 수 있다. 돌연변이는 예를 들어 종양 세포와 같은 목표 세포 내의 대상 관련 키나아제 유전자의 서열분석(sequencing), 및 내성-수여 돌연변이의 데이타은행에 대해 상기 서열을 비교하여 탐지될 수 있다. 직접적인 DNA 서열분석에 더하여, 당해 기술분야에 알려진 하기의 방법 또한 키나아제 돌연변이를 탐지하는데 이용될 수 있다: 단일 나선 구조의 다형성 분석(single strand conformation polymorphism, SSCP), 변성 농도 구배 겔 전기영동(denaturing gradient gel electrophoresis ,DGGE), 화학적 미스매치 쪼갬(chemical mismatch cleavage, CMC), 효소적 미스매치 쪼갬(enzyme mismatch cleavage, CMC), 이형접합자 분석(heteroduplex analysis) 및 DNA 마이크로어레이(microarray)의 이용.

본 발명의 일 구현에 의하면, 이메티닙-처리된 대상에서 BCR - ABL mRNA 의 양적인 중합효소 연쇄 반응(polymerase chain reaction, RQ-PCR)이 환자의 내성 우려를 탐지하기 위해 사용될 수 있다. bcr - abl 발현에서 두 배 또는 그 이상의 증가를 나타내는 이메티닙-처리된 대상의 상당 부분이 탐지가능한 BCR - ABL 돌연변이를 나타내었으며, BCR - ABL에서의 이러한 증가가 이메티닙-불활성화 BCR - ABL 키나아제 도메인 돌연변이에 대한 환자의 테스트에서 일차 지시자로 작용할 수 있음을 나타낸다(Branford et al ., Blood, 104, 2926-32(2004)). ATP-경쟁적 키나아제 억제제 치료를 받는 대상의 세포에서 증가된 BCR - ABL 발현은 가능한 내성-수여 BCR - ABL 돌연변이, 특히 BCR - ABL 키나아제 도메인에서의 확인을 위해 돌연변이 분석의 필요를 제안할 수 있다.

Ⅱ. 화합물의 투여

상기 화합물은 경구 및 비경구 투여를 포함하는 어떠한 경로를 통해 투여될 수 있다. 경구 투여는 예를들어 정맥, 근육, 동맥, 복강, 비강, 직장, 질, 방광(intravesical)(예컨데, 방광에), 경피, 국부적(topical) 또는 피하 주사를 포함한다. 또한, 후에 나타나도록 하기 위해 약의 체계적 또는 국소적 방출로, 조절된 배합물에서 환자의 몸에 약을 점적주사(instillation)하는 것 또한 본 발명의 견지에 포함된다. 예를 들어, 상기 약은 순환으로 조절된 방출, 또는 종양 성장의 부위로의 방출을 위해 데폿(depot)에 국지화될 수 있다.

하나 또는 그 이상의 화학식 I 화합물이 동일 또는 다른 경로로 동시에, 또는 치료하는 동안 다른 시기에 투여될 수 있다.

화학식 I 화합물 및 ATP-경쟁적 키나아제 억제제 모두가 환자에게 투여되는 경우, 바람직한 스케줄 및 투여량은 ATP-경쟁적 키나아제 억제제에 대한 바람직한 방식에 의해 결정될 수 있다. 상기 치료의 진행은 개체마다 다르고, 당해 기술분야의 일반적인 숙련자들은 주어진 임상 상황에서 용이하게 ATP-경쟁적 키나아제 억제제 투여의 적절한 복용량과 스케줄을 결정할 수 있다.

증식성 질병의 치료를 위한 치료적 효과를 확득하기 위한 화학식 I 화합물의 특정 투여량은 당연히 환자의 크기, 무게, 나이 및 성별, 증식성 질병의 성격 및 단계, 증식성 질병의 공격성, 및 상기 화합물의 투여 경로를 포함하는 각 환자의 특정한 상황에 의해 결정될 수 있다.

예를 들어, 약 0.01 내지 약 50 mg/kg/일, 더 바람직하게는 약 0.05 내지 약 25 mg/kg/일의 일일 투여량이 사용될 수 있다. 특히 약 0.5 내지 약 10.0 mg/kg/일 투여량, 예를 들어 약 5.0 mg/kg/일이 바람직하다. 상기 투여량은 복수의 투여, 예를 들어 두 번의 2.5 mg/kg 투여로 제공될 수 있다. 보다 높거나 낮은 투여량이 고찰될 수 있다.

화학식 I 화합물 및 ATP-경쟁적 키나아제 억제제 모두가 환자에게 투여되는 경우, 상기 두 약에 대한 투여 경로는 같거나 다를 수 있다. 상기 약은 동일 또는 상이한 날에 투여될 수 있다. 일 구현에 의하면, 상기 약은 다음 날에 투여될 수 있다. 동일한 날에 약의 투여는 동시 또는 투여까지의 각 기간이 24 시간 이내인 실질적으로 동시인 투여를 포함한다.

종양성(leukemic) 증식성 질병, 특히 만성 골수성백혈병에 대한 투여요법(dosing regimens)은 하기를 포함할 수 있다.

bcr - abl 유전자의 키나아제 도메인 내 돌연변이에 기인한 이메티닙-내성인 만성 상태 CML 환자에 대한, 치료는 약 1.5 mg/kg/일 내지 약 4 mg/kg/일의 화학식 I 화합물의 일일 구강 투여를 포함한다. 치료 3달 후에도 바라는 치료의 결과가 획득되지 않는 경우, 3달 마다 수행되는 관찰과 함께 상기 투여량이 약 0.5 내지 1.5 mg/kg/일 증가분까지 증가 된다. 질병 진행의 양상에서, 상기 투여량은 바라는 치료 결과가 획득될 때까지 약 1.0 내지 약 3.0 mg/kg/일의 증가분으로 증가된다.

가속기(accelerated phase) 또는 아세포기(blast phase)의 CML 환자에 대해, 치료는 약 2.5 mg/kg/일 내지 약 4.5 mg/kg/일의 화학식 I 화합물의 일일 구강 투여를 포함한다. 치료 3달 후에도 바라는 치료의 결과가 획득되지 않는 경우, 3달 마다 수행되는 관찰과 함께 상기 투여량이 약 0.5 내지 1.5 mg/kg/일 증가분까지 증가 된다. 질병 진행의 양상에서, 상기 투여량은 바라는 치료 결과가 획득될 때까지 약 1.0 내지 약 3.0 mg/kg/일의 증가분으로 증가된다.

매일 400mg 이메티닙으로 처리하는 과정 동안에 이메티닙-내성이 된 CML 환자에 대한 치료에서, 상기 이메티닙 투여량은 매일 600 또는 800mg까지 증가되고 약 2.0 내지 5.0 mg/kg/일의 화학식 I 화합물의 매일의 경구 투여량이 추가된다. 치료 3달 후에도 바라는 치료의 결과가 획득되지 않는 경우, 3달 마다 수행되는 관찰과 함께 화학식 I화합물의 상기 투여량이 약 0.5 내지 1.5 mg/kg/일 증가분까지 증가 된다. 질병 진행의 양상에서, 상기 화학식 I 화합물의 투여량은 바라는 치료 결과가 획득될 때까지 약 1.0 내지 약 3.0 mg/kg/일의 증가분으로 증가된다.

CML 환자에 대한 일차치료법(first-line therapy)으로, 치료는 이메티닙 및 화학식 I화합물의 조합을 포함한다. 매일 이메티닙 400mg 및 화학식 I 화합물 1.0 내지 4.0 mg/kg/일의 구강 투여량이 투여된다. 치료 3달 후에도 바라는 치료의 결과가 획득되지 않는 경우, 3달 마다 수행되는 관찰과 함께 화학식 I화합물의 상기 투여량이 약 0.5 내지 1.5 mg/kg/일 증가분까지 증가 된다. 질병 진행의 양상에서, 상기 이메티닙 투여량은 매일 600 또는 800mg까지 증가되고 화학식 I 화합물의 매일의 투여량은 바라는 치료 결과가 획득될 때까지 약 1.0 내지 약 3.0 mg/kg/일의 증가분으로 증가된다.

상기 각각의 요법에서, 상기 환자가 숨을 거두거나 또는 질병의 말기 단계와 같은 다른 요소가 상기 치료의 중지를 지시할 때까지, 용인되는 독성의 가정과 함께 치료는 계속된다. 질병 상태 관찰의 빈도는 당해 기술분야의 숙련자에 의해 필요에 따라 조절될 수 있다.

질병 상태의 관찰은 당해 기술분야에 잘 알려져 있다. 종양성 증식성 질병, 특히 만성 골수성백혈병의 관찰을 위한 질병 표지로서 혈액 검사, 골수 세포의 세포적 관찰(cytogenic monitoring)(예컨데 Philadelphia-양성 중기(metaphase)의 퍼센트) 및 분자 표지(예컨데, RQ-PCR 또는 FISH(fluorescence in situ hybridization)에 의한 분자 재배열에 의해 측정된 bcr-abl mRNA 전사의 양)를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다.

Ⅲ. 약학 조성물

상기 화학식 I 화합물은 약학적으로 허용되는 담체와 함께 약학 조성물의 형태로 투여될 수 있다. 이러한 배합물 내 상기 활성 성분은 0.1 내지 99.99 중량 퍼센트를 구성할 수 있다. "약학적으로 허용되는 담체"는 배합물의 다른 성분과 양립 가능하고 수혜자에게 유해하지 않은 어떠한 담체, 희석제 또는 부형제를 의미한다.

바람직하게 상기 활성 작용제는 선택된 투여 경로 및 표준 약학 실무를 기초로 선택된 약학적으로 허용되는 담체와 함께 투여된다. 상기 활성 작용제는 약학적 조제 분야의 표준 실무에 따른 제형(dosage form)으로 배합될 수 있다. Alphonso Gennaro, ed., Remington's Pharmaceutical Sciences , 18th Ed., (1990) Mack Publishing Co., Easton, PA. 적절한 제형은 예를 들어 정제, 캡슐, 용액, 비경구적 용액(parenteral solution), 트로키제, 좌약, 또는 서스펜션을 포함한다.

비경구적 투여로, 상기 활성 작용제는 적절한 담체 또는 물, 기름(특히 식물성 기름), 에탄올, 염수 용액, 수성 덱스트로스(글루코스) 및 관련된 당 용액, 글리세롤, 또는 프로필렌 글리콜 혹은 폴리에티렌 글리콜 등의 글리콜과 같은 희석제와 혼합될 수 있다. 비경구적 투여를 위한 용액은 바람직하게는 수용성 염 또는 그 활성 작용제를 포함한다. 안정화제, 항산화제 및 보존제 또한 첨가될 수 있다. 적절한 항산화제는 술파이트, 아스코르브산, 시트르산 및 그 염, 및 나트륨 EDTA를 포함한다. 적절한 보존제는 벤잘코늄 클로라이드, 메틸- 또는 프로필-파라벤, 및 클로르부탄올을 포함한다. 비경구적 투여를 위한 상기 조성물은 수성 또는 비수성 용액, 분산, 서스펜션 또는 에멀젼의 형태를 취할 수 있다.

경구 투여를 위해, 상기 활성 작용제는 정제, 캡슐, 필(pill), 파우더, 그래뉼 또는 다른 적절한 경구 제형의 제조를 위해 하나 또는 그 이상의 고형 불활성 성분과 배합될 수 있다. 예를 들어, 상기 활성 작용제는 충전제, 결합제, 휴멕턴트(humectant), 붕해제, 용액 지연제, 흡수 촉진제, 습윤제 흡수제 또는 윤활제와 같은 적어도 하나의 부형제와 배합될 수 있다. 정제의 일 구현에 의하면, 상기 활성 작용제는 카복시메틸셀룰로오스 칼슘, 마그네슘 스테아레이트, 만니톨 및 전분과 조합될 수 있고, 그 후 통상적인 정제화 방법에 의해 정제로 형성될 수 있다.

Ⅳ. 화학식 I에 의한 화합물의 염

화학식 I 화합물은 염의 형태를 취할 수 있다. 상기 용어 "염"은 본 발명 화화합물인 자유산 또는 자유염의 추가염을 포함한다. 상기 용어 "약학적으로-허용되는 염"은 약학적인 적용에서의 이용을 가능하게 하는 범위 내의 독성 프로파일을 갖는 염을 나타낸다.

적절한 약학적으로-허용되는 산 추가 염은 무기산으로부터 또는 유기산으로부터 제조될 수 있다. 무기산의 예는 하이드로클로르산, 하이드로브롬산, 하이드로이오드산, 니트르산, 카르본산, 술폰산 및 인산을 포함한다. 적절한 유기산은 유기산의 알리파틱, 시클로알리파틱, 아로마틱, 아랄리파틱, 헤테로시클릭, 카복실릭 및 술포닉 클래스로부터 선택될 수 있으며, 그 예는 포름산, 아세트산, 프로피온산, 숙신산, 글리콜산, 글루콘산, 락트산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 글루쿠론산, 말레산, 푸마르산, 피루브산, 아스파르트산, 글루탐산, 벤조산, 안트라닐산, 살리실산, 4-히드록시벤조산, 페닐아세트산, 만델산, 파모산, 메탄술폰산, 에탄술폰산, 벤젠술폰산, 판토텐산, 트리플루오로메탄술폰산, 2-히드록시에탄술폰산, 톨루엔술폰산, 술파닐산, 시클로헥실아미노술폰산, 스테아르산, 알긴산, γ-히드록시부티르산, 갈락타르산 및 갈락투론산을 포함한다.

적절한 약학적으로-허용가능한 화학식 I 화합물의 염기 추가 염은 예를 들어, 알칼리 금속, 알칼리 토금속 및 예컨데 칼슘, 마그네슘, 포타슘, 소디움 및 아연 염과 같은 전이금속 염을 포함하는 금속염을 포함한다. 약학적으로-허용되는 염기 추가 염은 또한 예를 들어 N,N'-디벤질에틸렌디아민, 클로로프로카인, 클로린, 디에탄올아민, 에틸렌디아민, 메글루민(N-메틸글루카민) 및 프로카인과 같은 기초 아민으로부터 만들어진 유기 염을 포함한다.

이러한 모든 염은 화학식 I에 의한 대응 화합물로부터 통상적인 방법으로 예를 들어 적절한 산 또는 염기를 화학식 I에 의한 화합물과 반응시켜 제조할 수 있다.

Ⅴ. 본 발명의 실시에 유용한 α,β-불포화 술폰 , 술폭시드 및 술폰아미드의 제조

α,β-불포화 술폰 D1 (여기서 Ar¹, Ar², R 및 *은 화학식 I 화합물에서 정의된 바와 같다)은, 벤질술포닐 아세트산 C1 과 함께 방향족 알데히드의 Knoevenagel 축합에 의해 제조될 수 있다. 상기 과정은 Reddy et al ., Acta . Chim . Hung. 115:269-71(1984); Reddy et al ., Sulfur Letters 13:83-90(1991); Reddy et al ., Synthesis No. 4,322-323(1984); 및 Reddy et al., Sulfur Letters 7:43-48(1987)에 의해 설명되었으며, 상기 전체 문헌은 본 명세서에 참고 문헌으로 편입된다. Knoevenagel 축합에 의한 일반적인 합성이 하기 스킴 3에 설명되었다.

스킴 3에서 사용된 출발 벤질술포닐 아세트산 C1 은 대응하는 벤질머캅토아세트산 B 의 산화에 의해 제조할 수 있다. 상기 산화는 술피드를 술폰으로 산화하기에 적절한 어떠한 산화 조건을 이용하여 수행될 수 있다. 적절한 작용제는 하이드로겐 퍼옥시드와 같은 퍼옥시드, 메타-클로로퍼옥시벤조산(MCPBA)와 같은 퍼애시드(peracid) 및 OXONE®(포타슘 퍼옥시모노술페이트) 같은 퍼술페이트를 포함한다. 상기 산화 반응은 바람직하게는 적절한 용매의 존재 하에서 수행된다. 적절한 용매는 예를 들어 물, 어세트산 또는 디클로로메탄(DCM)과 같은 비-극성 용매를 포함한다.

상기 벤질머캅토아세트산 B 는 머캅토아세트산을 벤질 화합물 A2 와 반응시키거나, 또는 할로아세트산을 벤질머캅탄 A1 과 반응시켜 제조할 수 있다.

스킴 3에 설명된 바와 같이 α,β-불포화 술폭시드는 벤질술피닐 아세트산 C2 와 함께 방향족 알데히드의 Knoevenagel 축합에 의해 제조될 수 있다.

스킴 3의 술폭시드 D2 의 제조에서 사용된 출발 벤질술피닐 아세트산 C2 는 대응하는 벤질머캅토아세트산 B 의 산화에 의해 제조할 수 있다. 상기 산화는 술피드를 술폰으로 산화하기에 적절한 어떠한 산화 조건을 이용하여 수행될 수 있다. 적절한 작용제는 하이드로겐 퍼옥시드와 같은 퍼옥시드, 메타-클로로퍼옥시벤조산(MCPBA)와 같은 퍼애시드(peracid) 및 OXONE®(포타슘 퍼옥시모노술페이트) 같은 퍼술페이트를 포함한다. 상기 반응은 바람직하게는 적절한 용매의 존재 하에서 수행된다. 적절한 용매는 예를 들어 물, 어세트산 또는 디클로로메탄(DCM)과 같은 비-극성 용매를 포함한다. 상기 술폭시드로의 산화는 일반적으로 감소된 온도에서 예를 들어 약 10℃ 내지 약 25℃에서 수행되고, 상기 산화 반응은 술폰으로 과-산화되기 전에 반응을 종료하도록 관찰된다.

α,β-불포화 술폰아미드 G (여기서 Ar¹, Ar² 및 R은 화학식 I 화합물에서 정의된 바와 같다)는, 아릴아미노술포닐 아세트산 F 와 함께 방향족 알데히드의 Knoevenagel 축합에 의해 스킴 4에 나타난 바와 같이 제조될 수 있다.

α,β-불포화 술폰아미드 G 는 택일적으로 방향족 아민 E 를 방향족 술포닐할라이드 H 와 반응시켜 스킴 5에 나타난 바와 같이 제조할 수 있다. 상기 방향족 술포닐할라이드 H 는 바람직하게는 방향족 올레핀 J 를 술퍼릴 클로라이드와 반응시켜 제조할 수 있다.

화학식 I 화합물의 제조는 하기의 US 특허 중 하나 혹은 그 이상에 설명되어 있으며, 상기 전체 문헌은 참고문헌으로 본 명세서에 편입된다: 6,599,932, 6,576,675, 6,548,553, 6,541,475, 6,486,210, 6,414,034, 6,359,13, 6,201,154, 6,656,973 및 6,762,207.

도 1은 누드 마우스에서 1 ×10⁶ 세포의 정맥 주사에 후속적인 32D/BCR - ABL ^T315I 세포의 생체 내 성장에 대한 화합물 1, 이메티닙 또는 염수의 효과 그래프이다. 데이타는 10 필드 +/- SEM(n=10) 당 32D/BCR - ABL ^T315I 세포의 평균 개수로 좌표에 표시되었다.

도 2는 화합물 1(100mg/kg), 이메티닙(100mg/kg) 또는 염수가 투여된 마우스 개체의 체중 플롯이다. 상기 세 투여 그룹 내의 마우스 각각의 중량이 매일 결정되었다. 상기 평균 체중이 출발 체중의 퍼센트로서 좌표에 표시되었다.

도 3은 염수 또는 염수에 용해된 화합물 1(100mg/kg)을 정맥 주사(꼬리 정맥 주사)한 CD-1 마우스에서 조혈(hematopoietic) 콜로니 형성의 그래프이다.

도 4(a)는 다양한 농도의 화합물 1 또는 이메티닙과 함께 72 시간 인큐베이션한 후 잔존하는 CML K562세포의 생존율 퍼센트의 플롯이다.

도 4(b)는 다양한 농도의 화합물 1 또는 이메티닙과 함께 72 시간 인큐베이션한 후 마우스 세포 32Dc13.BCR - ABL의 생존율 퍼센트의 플롯이다.

도 5(a)는 다양한 농도의 화합물 1 또는 이메티닙과 함께 72 시간 인큐베이션한 후 BCR - ABL T315I-발현 세포의 생존율 퍼센트의 플롯이다.

도 5(b)는 다양한 농도의 화합물 1 또는 이메티닙과 함께 72 시간 인큐베이션한 후 BCR - ABL E255K-발현 세포의 생존율 퍼센트의 플롯이다.

도 5(c)는 다양한 농도의 화합물 1 또는 이메티닙과 함께 72 시간 인큐베이션한 후 BCR - ABL Y253H-발현 세포의 생존율 퍼센트의 플롯이다.

도 5(d)는 다양한 농도의 화합물 1 또는 이메티닙과 함께 72 시간 인큐베이 션한 후 BCR - ABL G250E-발현 세포의 생존율 퍼센트의 플롯이다.

도 6은 BCR - ABL의 야생형 또는 이메티닙-내성 형성을 발현하기 위해 형질감염(transfect)되고 화합물 2로 처리된 32Dc13 세포의 성장 그래프이다.

도 7은 다양한 농도의 화합물 4와 함께 72 시간 인큐베이션 후, 야생형 BCR -ABL, 또는 상기 BCR - ABL 돌연변이 G250E, T315I 또는 M351T를 발현하는 세포의 생존율 퍼센트의 플롯이다.

본 발명의 실시는 하기의 예에 의해 설명되나, 이에 제한하는 것은 아니다.

실시예에서:

"화합물 1"은 (E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)프로판 산:

"화합물 2"는 (E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)아세트 산:

"화합물 3"은 (E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)-2-메틸프로판산의 소디움 염:

"화합물 4"는 (E)-1-(2-(4-브로모벤질술포닐)비닐)-2,4-디플루오로벤젠:

실시예 1: 이메티닙 내성 BCR - ABL ^T315I 를 발현하는 세포의 생체 내 성장에 대한 (E)-2-(5-((2,4,6-트 리메톡시 스티릴술포닐) 메틸 )-2- 메톡시페닐아미노 )프로판 산(화합물 1)의 효과

A. 32 Dc13 세포주

32Dc13 세포(Rovera et al., Oncogene, 1, 29-35(1987))가 10%의 FBS, 1U/mL 페니실린스트렙토마이신 및 10% WEHI-3B 조절된 매질이 IL-3(Ymer et al., Nature, 317, 255-258(1985)) 공급원으로 보충되는 Iscove's Modified Dulbecco's Medium 에서 보존되었다.

B. 야생형 및 BCR - ABL 의 이메티닙 -내성 돌연변이 세대

공개된 bcr - abl 돌연변이(Shah et al ., Oncogene 22, 7389-85(2003))에 대응하며 이메티닙 내성과 관련된 올리고뉴클레오티드가 PCR-기초한 특정위치돌연변이 (site directed mutagenesis)를 이용하여 이러한 돌연변이를 총-길이의 bcr - abl cDNA에 도입하는데 이용되었다(Myers et al ., PCR Technology , eds. Erlich, H.A., Stockton Press, London(1989)). 모든 구조는 서열 분석을 통해 확인되었다. 야생-형 및 이메티닙 내성 형의 BCR - ABL을 암호화하는 pCDNA3-기초 발현 플라스미드가 활성적으로 증식하는 32Dc13 세포에 상술한 일렉트로포레이션(electroporation)에 의해 도입되고(Kumar et al ., Mol . Cell . Biol ., 23, 6631-45(2003)) 세포들이 IL-3의 부존재 하에서 선택되었다. BCR - ABL 단백질의 발현은 하기에서 설명되는 바와 같이 웨스턴 블롯 및 키나아제 어세이에 의해 결정된다.

C. T315I 세포의 생체 내 성장 분석

흉선을 제거한(athymic) 암컷 누드 마우스(ncr/ncr)에 돌연변이 BCR - ABL ^T315I을 발현하는 1×10⁶ 32Dc13 세포가 꼬리 정맥으로 정맥주사 되었다. 세포 주입 후 24시간 후 매일 염수(운반체), 화합물 1(100mg/kg) 또는 이메티닙(100 mg/kg)을 복 강 주사하여 치료(투약 그룹 당 10 마우스의 3그룹)가 시작되었다. 이메티닙 주사는 독성 때문에 10일 후에 종료되었다.

(ⅰ) 이메티닙 및 화합물 1의 독성

실험 동물의 체중을 이틀마다 잰다. 상기 체중 데이타는 도 2에 나타난다. 상기 화합물 1 처리된 마우스는 체중 감소, 주름진 털, 기면, 비정상적인 배설물과 같은 독성의 신호를 나타내지 않았다. 반대로, 10 일간의 이메티닙 투여는 약 투여를 중단하는 결과를 가져온 20%를 초과하는 체중의 손실로 판단된 바와 같은 몇몇의 독성을 나타냈다.

(ⅱ) T315I 세포의 생체 내 성장 분석

처리된 마우스의 혈액 도말 표본(blood smears)이 치료 시작 후 7 및 14일 후에 수행되었다. 각 마우스의 혈액 한 방울이 유리 슬라이드에 도말표본되고, 공기 건조되고 변형된 Wright stain(Sigma)로 염색되었다. 상기 혈액 내 T315I 세포는 파란색의 염색과 크기의 차이에 의해 쉽게 가시화된다. 10 필드 당 T315I 세포의 수가 직립 Olympus 현미경 위의 40× 대물렌즈를 이용하여 동일한 밀도의 적혈구 세포를 갖는 시야의 10 필드를 세어 결정되었다. 본 연구에서 상기 T315I 세포의 생체 내 성장이 도 1에 나타난다. 화합물 1로 처리된 마우스 혈액 내 T315I 세포 수가 운반체 및 이메티닙 처리된 그룹에서 발견되는 세포의 수와 비교할 때 7 및 14일에 상당히 감소하였다.

실시예 2: 조혈( hematopoietic ) 콜로니 형성 어세이( assay )

생체 내 일반 조혈 세포 집단에 대한 화합물 1의 효과를 실험하기 위해, 일반적인 염수(염수 단독 또는 대조군으로서) 내의 본 화합물 100 mg/kg의 투여량이 정맥(꼬리 정맥 주사)으로 CD-1 마우스에 주사되었다(그룹 당 10 동물). 이러한 마우스에서 유래한 일반 골수 세포의 생체 내 조혈 콜로니 형성에 대한 상기 효과는 투여 24시간 후에 결정되었다. 골수 세포는 상기 마우스로부터 24시간 후에 추출되고 2 ×10⁵ 세포가 계통(lineage) 특이적인 콜로니 형성을 위해 적절한 사이토카인을 함유하는 메틸셀룰로스 상에서 평판 배양되었다. 콜로니들은 인큐베이션 후 5 내지 14일에 계산되었다. 상기 골수 콜로니 형성 어세이에 대한 데이타가 도 3에 나타난다. 화합물 1의 투여로 에리스로이드, 미엘로이드 또는 림포이드 계통의 콜로니 형성에 감소가 나타나지 않았다.

실시예 3: BCR - ABL 발현 세포주에 대한 화합물 1의 활성

A. 세포주

K562 세포가 10%의 FBS 및 1U/mL 페니실린-스트렙토마이신이 보충되는 RPMI(Roswell Park Memorial Institute) 매질에서 보존되었다.

32Dc13 세포(Rovera et al ., Oncogene , 1, 29-35(1987))가 10%의 FBS, 1U/mL 페니실린-스트렙토마이신 및 10% WEHI-3B 상태의 매질이 IL-3(Ymer et al ., Nature, 317, 255-258(1985)) 공급원으로서 보충되는 Iscove's Modified Dulbecco's Medium에서 보존되었다.

B. 이메티닙 또는 화합물 I 처리에서의 세포 생존율

이소적으로(ectopically) 야생-형 p210 ^{BCR - ABL} 종양단백질(oncoprotein)을 발현하는 K562 세포 및 마우스 32Dc13.BCR - ABL 세포가 다양한 농도의 화합물 1과 함께 72 시간 동안 인큐베이션되었다. 세포 생존율은 그 후 트리판 블루 배제법(trypan blue exclusion)에 의해 결정되었다. 운반체-처리된 대조군과 비교한 퍼센트 생존율 세포가 결정되었다. 두 세포주 모두에서, 화합물 1과의 인큐베이션은 도 4a 및 4b에 나타난 바와 같이 10-15nM의 LD₅₀으로 생존율의 빠른 감소의 결과를 가져왔다. 상기 세포 생존율 어세이는 또한 이메티닙을 이용하여 수행되었다. 상기 이메티닙의 LD₅₀은 100nM보다 큰 것으로 나타났다(도 4a 및 4b). 이메티닙에 대한 상기 데이타는 공개된 데이타(O'Dwyer, Id.)와 일치한다.

화합물 1 및 이메티닙 모두는 BCR - ABL ⁺ 세포의 증식을 억제한다. 화합물 1은 이메티닙에서 나타난 농도보다 10배 적은 농도에서 BCR - ABL ⁺ 세포주의 증식을 억제한다.

실시예 5: 이메티닙 -내성 종양 세포주에 대한 화합물 1의 활성

공개된 문헌에 대응하는 돌연변이(Shah et al ., Oncogene, 22, 7389-7395(2003))가 bcr - ablcDNA에 도입되었고, 이는 그 후 활성적으로 증식하는 32Dc13 세포(Rovera et al ., Oncogene 1, 29-35(1987))에 하기의 절차에 따라 도입되었다.

공개된 bcr - abl 돌연변이(Shah et al., Oncogene 22, 7389-85(2003))에 대응하며 이메티닙 내성과 관련된 올리고뉴클레오티드가 PCR-기초한 특정위치돌연변이 (site directed mutagenesis)를 이용하여 이러한 돌연변이를 총-길이의 bcr - abl cDNA에 도입하는데 이용되었다(Myers et al ., PCR Technology , eds. Erlich, H.A., Stockton Press, London(1989)). 모든 구조는 서열 분석을 통해 확인되었다. 야생-형 및 이메티닙 내성 형의 BCR - ABL을 암호화하는 pCDNA3-기초한 발현 플라스미드가 활성적으로 증식하는 32Dc13 세포에 상술한 일렉트로포레이션(electroporation)에 의해 도입되고(Kumar et al ., Mol . Cell . Biol., 23, 6631-45(2003)) 세포들이 IL-3의 부존재 하에서 선택되었다. BCR - ABL 단백질의 발현은 웨스턴 블롯 및 키나아제 어세이에 의해 결정된다.

형질감염체(transfectant)가 IL-3의 부존재 하에서 선택되었다. 상기 각각의 돌연변이 BCR - ABL 단백질의 발현 및 활성이 웨스턴 블롯 및 키나아제 어세이로 확인되었다(데이타 나타내지 않음). 모든 돌연변이가 야생-형 p210 ^{BCR - ABL} 발현 세포에 비해 이전에 공개된 연구와 필적할만한 수준의 이메티닙 내성을 수여하였다(데이타 나타내지 않음)(Azam et al ., Cell, 112, 831-843(2003)).

상기 형질감염 세포는 그 후 다양한 농도의 화합물 1 또는 이메티닙의 존재 하에서 배양되었다. 생존 가능한 세포의 총 개수가 처리-후 72시간 후에 트리판 블루 배제법에 의해 결정되었다. 운반체-처리된 대조군과 비교할 때 생존 가능한 세포의 퍼센트가 결정되었다. T315I 돌연변이를 발현하는 세포를 포함한 모든 형질감 염 세포주가 화합물 1의 성장 억제 활성에 매우 민감한 것으로 나타났다. GI⁵⁰(50%의 성장 억제를 획득하는 농도)의 관점에서 발현된 상기 세포주의 민감성은, 표 2에 16 개의 임상적으로 관련된 BCR - ABL 돌연변이에 대해 나열된다.

BCR - ABL 돌연변이를 발현하는 선택된 네 개의 세포주 T315I, E255K, Y253H 및 G250E의 결과가 도 5a, 5b, 5c 및 5d에 각각 나타난다.

실시예 6: 이메티닙 -내성 종양 세포에 대한 화합물 2((E)-2-(5-((2,4,6- 트리메톡시스티릴술포닐 ) 메틸 )-2- 메톡시페닐아미노 ) 아세트 산 )의 활성

표 2에 열거된 상기 세포주가 250 nM 화합물 2 또는 이메티닙의 존재 하에서 배양되었다. 그 결과가 도 6에 나타난다. 모든 세포주가 화합물 2의 성장-억제 활성에 민감했다.

실시예 7: 만성 상태 이메티닙 -내성 CML 의 치료

만성 골수성백혈병 진단을 받은 성인 환자가 이메티닙-내성이 있는 것으로 나타났다. 백혈병 세포에 의해 발현되는 bcr - abl 유전자의 서열분석이 bcr - abl 키나아제 도메인 내의 돌연변이 존재를 확인하였다. 상기 환자의 질병은 만성 상태이다(10% 미만의 아세포(blast), 또는 20% 아세포(blast) 및 전골수구(promyelocyte)가 혈액 또는 골수 시료 내에서 조합되었다). 상기 환자는 하기의 투여요법을 이용하여 화합물 1로 치료되었다: 200 mg의 화합물 1이 매일 1회 구강 투여되었다. 치료는 증식성 질병의 증거가 사라질 때까지 또는 허용할 수 없는 독성이 나타날 때까지 계속되었다. 가속기에 대한 질병 진행의 양상에서(골수 또는 혈액 시료가 10% 이상의 아세포를 갖지만(또는 20% 아세포 및 전골수구와 조합됨) 30% 미만의 아세포 및 전골수구), 화합물 1의 일일 복용량이 300mg까지 증가되었다. 필요한 경우에, 허용할 수 없는 독성이 나타나지 않는 경우라면, 바라는 치료 결과를 얻기 위해 복용량이 추가로 증가된다.

실시예 8: 아세포기( blast phase ) 이메티닙 -내성 CML 의 치료

만성 골수성백혈병 진단을 받은 성인 환자가 이메티닙-내성이 있는 것으로 나타났다. 백혈병 세포에 의해 발현되는 bcr - abl 유전자의 서열분석이 bcr - abl 키나아제 도메인 내의 돌연변이 존재를 확인하였다. 상기 환자의 질병은 아세포기이다. 상기 아세포기(blast phase)(급성기(acute phase) 또는 아세포위기(blast crisis)로도 알려짐)는 골수 및/또는 혈액 시료가 30% 이상의 아세포 및 전골수구를 갖는 것으로 특성화된다. 상기 환자는 하기의 투여요법을 이용하여 화합물 1로 치료되었다: 300 mg의 화합물 1이 매일 1회 구강 투여되었다. 치료는 증식성 질병의 증거가 사라질 때까지 또는 허용할 수 없는 독성이 나타날 때까지 계속되었다. 질병 진행의 양상에서, 단일 투여량 또는 임의로 매일 두 번의 200mg 투여량으로 투여되어, 상기 투여량이 400mg까지 증가되었다. 필요한 경우에, 허용할 수 없는 독성이 나타나지 않는 경우라면, 바라는 치료 결과를 얻기 위해 복용량이 추가로 증가된다.

실시예 9: 이메티닙을 이용한 일차치료에 후속적인 CML 의 치료

만성 골수성백혈병 진단을 받은 성인 환자가 이메티닙으로 일차적으로 치료되었다. 시간이 지남에 따라, 상기 환자의 질병이 이메티닙-내성이 된다. 백혈병 세포에 의해 발현되는 bcr - abl 유전자의 서열분석이 bcr - abl 키나아제 도메인 내의 돌연변이 존재를 확인하였다. 상기 환자의 치료요법이 하기와 같은 병용요법으로 변화되었다: 이메티닙이 환자에 의해 용인되는 최대 투여량까지 증가되고(800 mg) 매일 두 번 400mg 투여량으로 투여되었다. 300mg의 투여량의 화합물 1이 또한 매일 한 번 구강 투여되었다. 치료는 증식성 질병의 증거가 사라질 때까지 또는 허용할 수 없는 독성이 나타날 때까지 계속되었다. 질병 진행의 양상에서, 상기 화합물 1의 양이 바라는 치료 효과를 얻기 위해 필요한 만큼 증가되었다.

실시예 10: 두 약을 이용한 CML 의 일차( first - line ) 치료

성인 환자가 새로이 만성 골수성백혈병 진단을 받았다. 이메티닙에 대한 민 감성은 알려지지 않았다. 일차 치료로, 상기 환자에게 하기의 투여요법을 이용하여 이메티닙 및 화합물 1의 조합을 투여한다: 이메티닙 400mg 및 100mg의 화합물 1을 포함하는 투여량으로 매일 일회 경구 투여한다. 치료는 증식성 질병의 증거가 사라질 때까지 또는 허용할 수 없는 독성이 나타날 때까지 계속되었다. 질병 진행의 양상에서, 이메티닙의 투여량이 600mg까지 증가되었고 화합물 1의 투여량이 200mg까지 증가되었다. 필요한 경우, 허용할 수 없는 독성이 나타나지 않는 경우라면, 이메티닙(800 mg까지) 및 화합물 1 중 하나 또는 모두의 투여량이 추가로 증가된다.

실시예 11: 화합물 3((E)-2-(5-((2,4,6- 트리메톡시스티릴술포닐 ) 메틸 )-2- 메톡시페 닐아미노)-2- 메틸프로판산 소디움 염)의 이메티닙 -내성 종양 세포주에 대한 활성

표 3에 열거된 상기 세포주가 다양한 농도의 화합물 3((E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)-2-메틸프로판산 소디움 염)의 존재 하에서 배양되었다. 상기 야생형은 이소적으로(ectopically) 야생-형 p210 ^{BCR - ABL} 종양단백질(oncoprotein)을 발현하는 32Dc13.BCR - ABL 세포를 포함한다. 생존 가능한 세포의 총 개수는 처리-후 72 시간 후 트리판 블루 배제법에 의해 결정된다. 운반체-처리된 대조군과 비교하여 생존 가능한 세포의 퍼센트가 결정된다. GI₅₀으로 표현되는 상기 세포주의 민감성이 표 3에 나열된다. 모든 세포주가 화합물 3의 성장-억제 활성에 민감했다.

표 3: 화합물 3-유발된 세포의 성장 억제.

실시예 12: 화합물 4((E)-1-(2-(4- 브로모벤질술포닐 )비닐)-2,4- 디플루오로벤젠 )의 이메티닙-내성 종양 세포주에 대한 활성

야생-형 p210 ^{BCR - ABL} 종양단백질(32Dc13.BCR - ABL) 또는 BCR - ABL 돌연변이 G250E, T315I 또는 M351T를 발현하는 세포를 다양한 농도의 화합물 4((E)-1-(2-(4-브로모벤질술포닐)비닐)-2,4-디플루오로벤젠)와 인큐베이션하였다. 생존 가능한 세포의 총 개수는 처리-후 72 시간 후 트리판 블루 배제법에 의해 결정된다. 우난체-처리된 대조군과 비교하여 생존 가능한 세포의 퍼센트가 결정된다. 그 결과는 도 7에 나타난다. 모든 세포주가 화합물 4의 성장-억제 활성에 민감했다.

본 명세서에서 언급된 모든 문헌은 침고문헌으로 편입된다. 당해 기술분야의 숙련자는, 본 발명 내에서 본질적인 한, 본 발명이 목적을 수행하고 상술한 결과와 효과를 획득하기 위해 용이하게 적응될 수 있음을 이해할 것이다. 본 발명은 이들의 정신과 본질적 속성을 벗어나지 않고 다른 특정한 형태로 구체화될 수 있고, 따라서, 본 발명의 견지를 나타내는 한 전술한 상세한 설명보다 첨부된 청구항에 대해 참고문헌이 된다.

<110> Temple University-of the Commonwealth System of Higher Education <120> TREATMENT OF DRUG-RESISTANT PROLIFERATIVE DISORDERS <150> US 60/641,378 <151> 2005-01-05 <160> 5 <170> KopatentIn 1.71 <210> 1 <211> 1130 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 Met Leu Glu Ile Cys Leu Lys Leu Val Gly Cys Lys Ser Lys Lys Gly 1 5 10 15 Leu Ser Ser Ser Ser Ser Cys Tyr Leu Glu Glu Ala Leu Gln Arg Pro 20 25 30 Val Ala Ser Asp Phe Glu Pro Gln Gly Leu Ser Glu Ala Ala Arg Trp 35 40 45 Asn Ser Lys Glu Asn Leu Leu Ala Gly Pro Ser Glu Asn Asp Pro Asn 50 55 60 Leu Phe Val Ala Leu Tyr Asp Phe Val Ala Ser Gly Asp Asn Thr Leu 65 70 75 80 Ser Ile Thr Lys Gly Glu Lys Leu Arg Val Leu Gly Tyr Asn His Asn 85 90 95 Gly Glu Trp Cys Glu Ala Gln Thr Lys Asn Gly Gln Gly Trp Val Pro 100 105 110 Ser Asn Tyr Ile Thr Pro Val Asn Ser Leu Glu Lys His Ser Trp Tyr 115 120 125 His Gly Pro Val Ser Arg Asn Ala Ala Glu Tyr Leu Leu Ser Ser Gly 130 135 140 Ile Asn Gly Ser Phe Leu Val Arg Glu Ser Glu Ser Ser Pro Gly Gln 145 150 155 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Phe Pro Lys Pro Glu His Gln Gln Trp Ile Tyr Met Asn 340 345 350 Arg Thr Phe Thr Asp Lys Trp Glu Asp Tyr Pro Lys Ser Glu Asn Glu 355 360 365 Ser Asn Ile Arg Tyr Val Ser Glu Leu His Leu Thr Arg Leu Lys Gly 370 375 380 Thr Glu Gly Gly Thr Tyr Thr Phe Leu Val Ser Asn Ser Asp Val Asn 385 390 395 400 Ala Ala Ile Ala Phe Asn Val Tyr Val Asn Thr Lys Pro Glu Ile Leu 405 410 415 Thr Tyr Asp Arg Leu Val Asn Gly Met Leu Gln Cys Val Ala Ala Gly 420 425 430 Phe Pro Glu Pro Thr Ile Asp Trp Tyr Phe Cys Pro Gly Thr Glu Gln 435 440 445 Arg Cys Ser Ala Ser Val Leu Pro Val Asp Val Gln Thr Leu Asn Ser 450 455 460 Ser Gly Pro Pro Phe Gly Lys Leu Val Val Gln Ser Ser Ile Asp Ser 465 470 475 480 Ser Ala Phe Lys His Asn Gly Thr Val Glu Cys Lys Ala Tyr Asn Asp 485 490 495 Val Gly Lys Thr Ser Ala Tyr Phe Asn Phe Ala Phe Lys Gly Asn Asn 500 505 510 Lys Glu Gln Ile His Pro His Thr Leu Phe Thr Pro Leu Leu Ile Gly 515 520 525 Phe Val Ile Val Ala Gly Met Met Cys Ile Ile Val Met Ile Leu Thr 530 535 540 Tyr Lys Tyr Leu Gln Lys Pro Met Tyr Glu Val Gln Trp Lys Val Val 545 550 555 560 Glu Glu Ile Asn Gly Asn Asn Tyr Val Tyr Ile Asp Pro Thr Gln Leu 565 570 575 Pro Tyr Asp His Lys Trp Glu Phe Pro Arg Asn Arg Leu Ser Phe Gly 580 585 590 Lys Thr Leu Gly Ala Gly Ala Phe Gly Lys Val Val Glu Ala Thr Ala 595 600 605 Tyr Gly Leu Ile Lys Ser Asp Ala Ala Met Thr Val Ala Val Lys Met 610 615 620 Leu Lys Pro Ser Ala His Leu Thr Glu Arg Glu Ala Leu Met Ser Glu 625 630 635 640 Leu Lys Val Leu Ser Tyr Leu Gly Asn His Met Asn Ile Val Asn Leu 645 650 655 Leu Gly Ala Cys Thr Ile Gly Gly Pro Thr Leu Val Ile Thr Glu Tyr 660 665 670 Cys Cys Tyr Gly Asp Leu Leu Asn Phe Leu Arg Arg Lys Arg Asp Ser 675 680 685 Phe Ile Cys Ser Lys Gln Glu Asp His Ala Glu Ala Ala Leu Tyr Lys 690 695 700 Asn Leu Leu His Ser Lys Glu Ser Ser Cys Ser Asp Ser Thr Asn Glu 705 710 715 720 Tyr Met Asp Met Lys Pro Gly Val Ser Tyr Val Val Pro Thr Lys Ala 725 730 735 Asp Lys Arg Arg Ser Val Arg Ile Gly Ser Tyr Ile Glu Arg Asp Val 740 745 750 Thr Pro Ala Ile Met Glu Asp Asp Glu Leu Ala Leu Asp Leu Glu Asp 755 760 765 Leu Leu Ser Phe Ser Tyr Gln Val Ala Lys Gly Met Ala Phe Leu Ala 770 775 780 Ser Lys Asn Cys Ile His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Ile Leu Leu 785 790 795 800 Thr His Gly Arg Ile Thr Lys Ile Cys Asp Phe Gly Leu Ala Arg Asp 805 810 815 Ile Lys Asn Asp Ser Asn Tyr Val Val Lys Gly Asn Ala Arg Leu Pro 820 825 830 Val Lys Trp Met Ala Pro Glu Ser Ile Phe Asn Cys Val Tyr Thr Phe 835 840 845 Glu Ser Asp Val Trp Ser Tyr Gly Ile Phe Leu Trp Glu Leu Phe Ser 850 855 860 Leu Gly Ser Ser Pro Tyr Pro Gly Met Pro Val Asp Ser Lys Phe Tyr 865 870 875 880 Lys Met Ile Lys Glu Gly Phe Arg Met Leu Ser Pro Glu His Ala Pro 885 890 895 Ala Glu Met Tyr Asp Ile Met Lys Thr Cys Trp Asp Ala Asp Pro Leu 900 905 910 Lys Arg Pro Thr Phe Lys Gln Ile Val Gln Leu Ile Glu Lys Gln Ile 915 920 925 Ser Glu Ser Thr Asn His Ile Tyr Ser Asn Leu Ala Asn Cys Ser Pro 930 935 940 Asn Arg Gln Lys Pro Val Val Asp His Ser Val Arg Ile Asn Ser Val 945 950 955 960 Gly Ser Thr Ala Ser Ser Ser Gln Pro Leu Leu Val His Asp Asp Val 965 970 975 <210> 5 <211> 1186 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 5 Leu Glu Glu Lys Lys Val Cys Gln Gly Thr Ser Asn Lys Leu Thr Gln 1 5 10 15 Leu Gly Thr Phe Glu Asp His Phe Leu Ser Leu Gln Arg Met Phe Asn 20 25 30 Asn Cys Glu Val Val Leu Gly Asn Leu Glu Ile Thr Tyr Val Gln Arg 35 40 45 Asn Tyr Asp Leu Ser Phe Leu Lys Thr Ile Gln Glu Val Ala Gly Tyr 50 55 60 Val Leu Ile Ala Leu Asn Thr Val Glu Arg Ile Pro Leu Glu Asn Leu 65 70 75 80 Gln Ile Ile Arg Gly Asn Met Tyr Tyr Glu Asn Ser Tyr Ala Leu Ala 85 90 95 Val Leu Ser Asn Tyr Asp Ala Asn Lys Thr Gly Leu Lys Glu Leu Pro 100 105 110 Met Arg Asn Leu Gln Glu Ile Leu His Gly Ala Val Arg Phe Ser Asn 115 120 125 Asn Pro Ala Leu Cys Asn Val Glu Ser Ile Gln Trp Arg Asp Ile Val 130 135 140 Ser Ser Asp Phe Leu Ser Asn Met Ser Met Asp Phe Gln Asn His Leu 145 150 155 160 Gly Ser Cys Gln Lys Cys Asp Pro Ser Cys Pro Asn Gly Ser Cys Trp 165 170 175 Gly Ala Gly Glu Glu Asn Cys Gln Lys Leu Thr Lys Ile Ile Cys Ala 180 185 190 Gln Gln Cys Ser Gly Arg Cys Arg Gly Lys Ser Pro Ser Asp Cys Cys 195 200 205 His Asn Gln Cys Ala Ala Gly Cys Thr Gly Pro Arg Glu Ser Asp Cys 210 215 220 Leu Val Cys Arg Lys Phe Arg Asp Glu Ala Thr Cys Lys Asp Thr Cys 225 230 235 240 Pro Pro Leu Met Leu Tyr Asn Pro Thr Thr Tyr Gln Met Asp Val Asn 245 250 255 Pro Glu Gly Lys Tyr Ser Phe Gly Ala Thr Cys Val Lys Lys Cys Pro 260 265 270 Arg Asn Tyr Val Val Thr Asp His Gly Ser Cys Val Arg Ala Cys Gly 275 280 285 Ala Asp Ser Tyr Glu Met Glu Glu Asp Gly Val Arg Lys Cys Lys Lys 290 295 300 Cys Glu Gly Pro Cys Arg Lys Val Cys Asn Gly Ile Gly Ile Gly Glu 305 310 315 320 Phe Lys Asp Ser Leu Ser Ile Asn Ala Thr Asn Ile Lys His Phe Lys 325 330 335 Asn Cys Thr Ser Ile Ser Gly Asp Leu His Ile Leu Pro Val Ala Phe 340 345 350 Arg Gly Asp Ser Phe Thr His Thr Pro Pro Leu Asp Pro Gln Glu Leu 355 360 365 Asp Ile Leu Lys Thr Val Lys Glu Ile Thr Gly Phe Leu Leu Ile Gln 370 375 380 Ala Trp Pro Glu Asn Arg Thr Asp Leu His Ala Phe Glu Asn Leu Glu 385 390 395 400 Ile Ile Arg Gly Arg Thr Lys Gln His Gly Gln Phe Ser Leu Ala Val 405 410 415 Val Ser Leu Asn Ile Thr Ser Leu Gly Leu Arg Ser Leu Lys Glu Ile 420 425 430 Ser Asp Gly Asp Val Ile Ile Ser Gly Asn Lys Asn Leu Cys Tyr Ala 435 440 445 Asn Thr Ile Asn Trp Lys Lys Leu Phe Gly Thr Ser Gly Gln Lys Thr 450 455 460 Lys Ile Ile Ser Asn Arg Gly Glu Asn Ser Cys Lys Ala Thr Gly Gln 465 470 475 480 Val Cys His Ala Leu Cys Ser Pro Glu Gly Cys Trp Gly Pro Glu Pro 485 490 495 Arg Asp Cys Val Ser Cys Arg Asn Val Ser Arg Gly Arg Glu Cys Val 500 505 510 Asp Lys Cys Lys Leu Leu Glu Gly Glu Pro Arg Glu Phe Val Glu Asn 515 520 525 Ser Glu Cys Ile Gln Cys His Pro Glu Cys Leu Pro Gln Ala Met Asn 530 535 540 Ile Thr Cys Thr Gly Arg Gly Pro Asp Asn Cys Ile Gln Cys Ala His 545 550 555 560 Tyr Ile Asp Gly Pro His Cys Val Lys Thr Cys Pro Ala Gly Val Met 565 570 575 Gly Glu Asn Asn Thr Leu Val Trp Lys Tyr Ala Asp Ala Gly His Val 580 585 590 Cys His Leu Cys His Pro Asn Cys Thr Tyr Gly Cys Thr Gly Pro Gly 595 600 605 Leu Glu Gly Cys Pro Thr Asn Gly Pro Lys Ile Pro Ser Ile Ala Thr 610 615 620 Gly Met Val Gly Ala Leu Leu Leu Leu Leu Val Val Ala Leu Gly Ile 625 630 635 640 Gly Leu Phe Met Arg Arg Arg His Ile Val Arg Lys Arg Thr Leu Arg 645 650 655 Arg Leu Leu Gln Glu Arg Glu Leu Val Glu Pro Leu Thr Pro Ser Gly 660 665 670 Glu Ala Pro Asn Gln Ala Leu Leu Arg Ile Leu Lys Glu Thr Glu Phe 675 680 685 Lys Lys Ile Lys Val Leu Gly Ser Gly Ala Phe Gly Thr Val Tyr Lys 690 695 700 Gly Leu Trp Ile Pro Glu Gly Glu Lys Val Lys Ile Pro Val Ala Ile 705 710 715 720 Lys Glu Leu Arg Glu Ala Thr Ser Pro Lys Ala Asn Lys Glu Ile Leu 725 730 735 Asp Glu Ala Tyr Val Met Ala Ser Val Asp Asn Pro His Val Cys Arg 740 745 750 Leu Leu Gly Ile Cys Leu Thr Ser Thr Val Gln Leu Ile Thr Gln Leu 755 760 765 Met Pro Phe Gly Cys Leu Leu Asp Tyr Val Arg Glu His Lys Asp Asn 770 775 780 Ile Gly Ser Gln Tyr Leu Leu Asn Trp Cys Val Gln Ile Ala Lys Gly 785 790 795 800 Met Asn Tyr Leu Glu Asp Arg Arg Leu Val His Arg Asp Leu Ala Ala 805 810 815 Arg Asn Val Leu Val Lys Thr Pro Gln His Val Lys Ile Thr Asp Phe 820 825 830 Gly Leu Ala Lys Leu Leu Gly Ala Glu Glu Lys Glu Tyr His Ala Glu 835 840 845 Gly Gly Lys Val Pro Ile Lys Trp Met Ala Leu Glu Ser Ile Leu His 850 855 860 Arg Ile Tyr Thr His Gln Ser Asp Val Trp Ser Tyr Gly Val Thr Val 865 870 875 880 Trp Glu Leu Met Thr Phe Gly Ser Lys Pro Tyr Asp Gly Ile Pro Ala 885 890 895 Ser Glu Ile Ser Ser Ile Leu Glu Lys Gly Glu Arg Leu Pro Gln Pro 900 905 910 Pro Ile Cys Thr Ile Asp Val Tyr Met Ile Met Val Lys Cys Trp Met 915 920 925 Ile Asp Ala Asp Ser Arg Pro Lys Phe Arg Glu Leu Ile Ile Glu Phe 930 935 940 Ser Lys Met Ala Arg Asp Pro Gln Arg Tyr Leu Val Ile Gln Gly Asp 945 950 955 960 Glu Arg Met His Leu Pro Ser Pro Thr Asp Ser Asn Phe Tyr Arg Ala 965 970 975 Leu Met Asp Glu Glu Asp Met Asp Asp Val Val Asp Ala Asp Glu Tyr 980 985 990 Leu Ile Pro Gln Gln Gly Phe Phe Ser Ser Pro Ser Thr Ser Arg Thr 995 1000 1005 Pro Leu Leu Ser Ser Leu Ser Ala Thr Ser Asn Asn Ser Thr Val Ala 1010 1015 1020 Cys Ile Asp Arg Asn Gly Leu Gln Ser Cys Pro Ile Lys Glu Asp Ser 1025 1030 1035 1040 Phe Leu Gln Arg Tyr Ser Ser Asp Pro Thr Gly Ala Leu Thr Glu Asp 1045 1050 1055 Ser Ile Asp Asp Thr Phe Leu Pro Val Pro Glu Tyr Ile Asn Gln Ser 1060 1065 1070 Val Pro Lys Arg Pro Ala Gly Ser Val Gln Asn Pro Val Tyr His Asn 1075 1080 1085 Gln Pro Leu Asn Pro Ala Pro Ser Arg Asp Pro His Tyr Gln Asp Pro 1090 1095 1100 His Ser Thr Ala Val Gly Asn Pro Glu Tyr Leu Asn Thr Val Gln Pro 1105 1110 1115 1120 Thr Cys Val Asn Ser Thr Phe Asp Ser Pro Ala His Trp Ala Gln Lys 1125 1130 1135 Gly Ser His Gln Ile Ser Leu Asp Asn Pro Asp Tyr Gln Gln Asp Phe 1140 1145 1150 Phe Pro Lys Glu Ala Lys Pro Asn Gly Ile Phe Lys Gly Ser Thr Ala 1155 1160 1165 Glu Asn Ala Glu Tyr Leu Arg Val Ala Pro Gln Ser Ser Glu Phe Ile 1170 1175 1180 Gly Ala 1185

Claims (32)

1. 치료가 필요한 개체에 화학식 I에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용되는 이들의 염 중 적어도 하나를 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는, ATP-경쟁적 키나아제 억제제 치료에 내성이 있는 키나아제-의존 증식성 질병의 치료 방법 :

   

   상기 식에서:

   Ar¹ 및 Ar²는 치환된 아릴 및 치환되지 않은 아릴 및 치환된 헤테로 아릴 및 치환되지 않은 헤테로 아릴로부터 독립적으로 선택되며;

   X는 N 또는 CH이며;

   n은 1 또는 2이며;

   R은 -H 또는 -(C₁-C₈)하이드로카빌이며; 그리고

   *은 X가 CH이고, R이 -H가 아닌 경우, X 탄소 상의 치환체 형태가 R-, S- 또는 R- 및 S-의 어떠한 혼합인 것을 나타내며;

   X가 N인 경우, n이 2인 것을 조건으로 한다.
2. 제 1항에 있어서, 치환된 아릴 및 치환된 헤테로 아릴 Ar¹ 상의 치환체는 할 로겐, -(C₁-C₈)하이드로카빌, -C(=O)R², -NR² ₂, -NHC(=O)R³, -NHSO₂R³, -NH(C₂-C₆)알킬렌-C(=O)R⁶, -NHCR²R⁴C(=O)R⁶, -C(=O)OR², -C(=O)NR² ₂, -NO₂, -CN, -OR², -OC(=O)R³, -OSO₂R³, -O(C₂-C₆)알킬렌-C(=O)R⁶, -OCR²R⁴C(=O)R⁶, -P(=O)(OR²)₂, -OP(=O)(OR²)₂, -O(C₂-C₆ 알킬렌)N(C₁-C₃)알킬)₂, -NHC(=NH)NHR², -(C₁-C₆)할로알킬, -O(C₁-C₆)할로알킬; -SO₂NH₂; 및 -N=CH-R⁷로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며; 그리고

   치환된 아릴 및 치환된 헤테로 아릴 Ar² 상의 치환체는 -(C₁-C₈)하이드로카빌, -C(=O)R², 할로겐, -NO₂, -CN, -OR², -C(=O)OR², -NR² ₂, -(C₁-C₆)할로알킬; -SO₂NH₂; 및 -O(C₁-C₆)할로알킬로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며;

   각각의 R²는 -H 및 -(C₁-C₈)하이드로카빌로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며;

   각각의 R³은 -(C₁-C₈)하이드로카빌, -O(C₁-C₈)하이드로카빌, 치환된 및 치환되지 않은 아릴, 치환된 및 치환되지 않은 헤테로사이클릴(C₁-C₃)알킬, 치환된 및 치환되지 않은 헤테로아릴(C₁-C₃)알킬, -(C₂-C₁₀)헤테로알킬, -(C₁-C₆)할로알킬, -CR²R⁴NHR⁵, -NR² ₂, -(C₁-C₃)알킬렌NH₂, -(C₁-C₃)알킬렌-N((C₁-C₃)알킬)₂, -(C₁-C₃)퍼플루오로알킬렌-N((C₁-C₃)알킬)₂, -(C₁-C₃)알킬렌-N⁺((C₁-C₃)알킬)₃, -(C₁-C₃)알킬렌-N⁺(CH₂CH₂OH)₃, -(C₁-C₃)알킬렌-OR², -(C₁-C₄)알킬렌-CO₂R², -(C₁-C₄)알킬렌-C(=O)할로겐, 할로(C₁-C₃)알킬-, -(C₁-C₃)알킬렌-C(=O)(C₁-C₃)알킬, 및 -(C₁-C₄)퍼플루오로알킬렌-CO₂R²로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며;

   각각의 R⁴는 -H, -(C₁-C₆)알킬, -(CH₂)₃-NH-C(NH₂)(=NH), -CH₂C(=O)NH₂, -CH₂CO₂R², -CH₂SH, -(CH₂)₂C(=O)-NH₂, -(CH₂)₂CO₂R², -CH₂-(2-이미다졸릴), -(CH₂)₄-NH₂, -(CH₂)₂-S-CH₃, 페닐, -CH₂-페닐, -CH₂-OH, -CH(OH)-CH₃, -CH₂-(3-일돌릴), 및-CH₂-(4-히드록시페닐)로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며;

   각각의 R⁵는 -H, -C(=O)(C₁-C₇)하이드로카빌 및 펩티딜 잔기의 말단 아미노기 내의 1 내지 3 아미노산을 포함하는 카복시 말단-결합된 펩티딜 잔기가 -NH₂, -NHC(=O)(C₁-C₆)알킬, -NH(C₁-C₆)알킬, -N(C₁-C₆알킬)₂ 및 -NHC(=O)O(C₁-C₇)하이드로카빌로 이루어진 그룹으로부터 선택된 작용기로서 존재하며;

   각각의 R⁶은 -OR², -NR² ₂, 및 펩티딜 잔기의 말단 카복실기 내의 1 내지 3 아미노산을 포함하는 아미노 말단-결합된 펩티딜 잔기가 -CO₂R² 및 -C(=O)NR² ₂로 이루어진 그룹으로부터 선택된 작용기로서 존재하며; 그리고

   각각의 R⁷은 치환 및 미치환 아릴 및 치환 및 미치환 헤테로아릴로 이루어진 그룹으로부터 독립적으로 선택되며;

   Ar¹ 및 Ar² 상의 치환체의 최대 수는 상기 치환체가 결합되는 고리의 치환 가능한 수소의 개수와 같음을 조건으로 하는 것을 특징으로 하는 방법.
3. 제 2항에 있어서, 화학식 I에 따른 상기 화합물은 (E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)아세트산; (E)-(라세믹)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)프로판산; (R)-(E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)프로판산; (S)-(E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)프로판산; (E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술피닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)아세트산; (E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술피닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)프로판산; (E)-2,4,6-트리메톡시스티릴-N-(3-카복시페닐아미노-4-메톡시-페닐)술폰아미드; (S)-(E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)-2-페닐아세트산; (R)-(E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)- 2-페닐아세트산; 및 (라세믹)-(E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)-2-페닐아세트산으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
4. 제 2항에 있어서, 화학식 I에 따른 상기 화합물은 (E)-2-(5-((2,4,6-트리메톡시스티릴술포닐)메틸)-2-메톡시페닐아미노)-2-메틸프로판산; (E)-1-(2-(4-브로모벤질술포닐)비닐)-2,4-디플루오로벤젠; 및 약학적으로 허용되는 이들의 염으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
5. 제 2항에 있어서, 화학식 I에 따른 상기 화합물은 반대 거울상 이성질체가 실질적으로 프리(free)인 단리된 광학 이성질체를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
6. 제 5항에 있어서, 상기 단리된 광학 이성질체는 *로 표시된 원자에서 (S)-절대 배열(absolute configuration)을 갖고, 실질적으로 (R)-거울상이성질체 프리(free)인 것을 특징으로 하는 방법.
7. 제 5항에 있어서, 상기 단리된 광학 이성질체는 *로 표시된 원자에서 (R)-절대 배열(absolute configuration)을 갖고, 실질적으로 (S)-거울상이성질체 프리(free)인 것을 특징으로 하는 방법.
8. 제1항에 있어서, 상기 키나아제-의존 증식성 질병은 PD180970, BMS-354825, 이메티닙, SU5416, SU6668, SU11248, AP23464, 게피티닙, 에를로티닙, PD153035, 및 SB203580으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 화합물 중 적어도 하나의 치료에 내성을 갖는 것을 특징으로 하는 방법.
9. 제1항에 있어서, 상기 증식성 질병은 BCR - ABL의 ATP-경쟁적 억제제에 대해 내성을 갖는 것을 특징으로 하는 방법.
10. 제 9항에 있어서, 상기 ATP-경쟁적 BCR - ABL 억제제에 대한 내성은 BCR - ABL 아미노산 잔기의 하나 또는 그 이상의 돌연변이의 결과인 것을 특징으로 하는 방법.
11. 제 10항에 있어서, 상기 BCR - ABL의 ATP-경쟁적 억제제는 이메티닙인 것을 특징으로 하는 방법.
12. 제 10항에 있어서, 상기 돌연변이는 BCR - ABL p-루프 내의 적어도 하나의 잔기의 교체(alternation)를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
13. 제 12항에 있어서, 상기 돌연변이는 Tyr253 또는 Glu255의 교체를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
14. 제 10항에 있어서, 상기 돌연변이는 BCR - ABL 활성 루프 내의 적어도 하나의 잔기의 교체를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
15. 제 14항에 있어서, 상기 돌연변이는 His396의 교체를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
16. 제 10항에 있어서, 상기 돌연변이는 F317L, H396R, M351T, H396P, Y253H, M244V, E355G, F359V, G250E, Y253F, F311L, T315I, E255V, Q252H, L387M 및 E255K로 이루어진 그룹으로부터 선택된 적어도 하나의 돌연변이를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
17. 제 1항에 있어서, 상기 증식성 질병은 만성 골수성백혈병, 급성 임파구성 임파종, 특발성 폐섬유증, 특발성 호중구증가 증후군, 만성 골수단구성백혈병, 악성 섬유성 조직구종, 전립선암, 안드로겐 의존성 전립선암, 피부섬유육종, 자궁내막양암종, 유두양 장액성 자궁내막암, 척색종, 신경교종, 악성 성상세포종, 교아세포종, 위장관기질종, 수모세포종, 자궁 평활근 육종, 및 비소세포폐암으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
18. 제 1항에 있어서, 상기 증식성 질병은 KIT의 ATP-경쟁적 억제제에 내성인 것을 특징으로 하는 방법.
19. 제 18항에 있어서, 상기 ATP-경쟁적 KIT 억제제에 대한 내성은 KIT 아미노산 잔기의 하나 또는 그 이상의 돌연변이 결과인 것을 특징으로 하는 방법.
20. 제 19항에 있어서, 상기 돌연변이는 T670I, Y823D 및 D816V로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법.
21. 제1항에 있어서, 상기 증식성 질병은 표피성장인자수용체(epidermal growth factor receptor)의 ATP-경쟁적 억제제에 내성인 것을 특징으로 하는 방법.
22. 제 21항에 있어서, 상기 ATP-경쟁적 표피성장인자수용체 억제제에 대한 내성은 표피성장인자수용체 아미노산 잔기의 하나 또는 그 이상의 돌연변이의 결과인 것을 특징으로 하는 방법.
23. 제 22항에 있어서, 상기 돌연변이는 돌여변이 T766M을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
24. 제 1항에 있어서, 상기 증식성 질병은 PDGFRα의 ATP-경쟁적 억제제에 내성 인 것을 특징으로 하는 방법.
25. 제24항에 있어서, 상기 PDGFRα의 ATP-경쟁적 억제제에 대한 내성은 PDGFRα 아미노산 잔기의 하나 또는 그 이상의 돌연변이의 결과인 것을 특징으로 하는 방법.
26. 제 25항에 있어서, 상기 돌연변이는 돌연변이 T674I를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
27. 제 1항에 있어서, 상기 증식성 질병은 PDGFRβ의 ATP-경쟁적 억제제에 내성인 것을 특징으로 하는 방법.
28. 제27항에 있어서, 상기 PDGFRβ의 ATP-경쟁적 억제제에 대한 내성은 PDGFRβ 아미노산 잔기의 하나 또는 그 이상의 돌연변이의 결과인 것을 특징으로 하는 방법.
29. 제 28항에 있어서, 상기 돌연변이는 돌연변이 T681I를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
30. 치료가 필요한 개체에 화학식 I에 따른 화합물 또는 약학적으로 허용되는 이 들의 염 중 적어도 하나를 유효량으로 투여하는 단계를 포함하는, 키나아제 의존 증식성 질병을 겪는 개체에서 ATP-경쟁적 키나아제 억제제의 투여를 포함하는 치료에 대한 내성의 발달을 예방 또는 지연하는 방법:

    

    상기 식에서:

    Ar¹ 및 Ar²는 치환된 아릴 및 치환되지 않은 아릴 및 치환된 헤테로 아릴 및 치환되지 않은 헤테로 아릴로부터 독립적으로 선택되며;

    X는 N 또는 CH이며;

    n은 1 또는 2이며;

    R은 -H 또는 -(C₁-C₈)하이드로카빌이며; 그리고

    *은 X가 CH이고, R이 -H가 아닌 경우, X 탄소 상의 치환체 형태가 R-, S- 또는 R- 및 S-의 어떠한 혼합인 것을 나타내며;

    X가 N인 경우, n이 2인 것을 조건으로 한다.
31. 제 30항에 있어서, 적어도 하나의 ATP-경쟁적 키나아제 억제제를 유효량 투여하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
32. 제31항에 있어서, 상기 키나아제-의존 증식성 질병은 PD180970, BMS-354825, 이메티닙, SU5416, SU6668, SU11248, AP23464, 게피티닙, 에를로티닙, PD153035, 및 SB203580으로 이루어진 그룹으로부터 선택된 화합물 중 적어도 하나의 치료에 내성을 갖는 것을 특징으로 하는 방법.

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