KR20070064356A

KR20070064356A - 치환된 2ｈ-1,3-벤족사진-4(3ｈ)온

Info

Publication number: KR20070064356A
Application number: KR1020077009902A
Authority: KR
Inventors: 로버트 엠. 스카로보로그; 미나크쉬 에스. 벤카트라맨; 자오밍 쟁; 안젤리 팬데이
Original assignee: 포톨라 파마슈티컬스, 인코포레이티드
Priority date: 2004-09-29
Filing date: 2005-09-26
Publication date: 2007-06-20
Also published as: ZA200702688B; WO2006039212A2; US20060069093A1; CN101031565B; MX2007003836A; HK1111414A1; AU2005292314A1; CN101031565A; EP1812429A4; IL182180A0; JP2008514703A; EP1812429A2; AU2005292314B2; WO2006039212A3; NZ554211A; CA2581638A1; US7205296B2; BRPI0516181A

Abstract

본 발명의 환자의 이차 허혈 발병의 가능성 및/또는 정도를 감소시키고, 혈전증을 치료하는데 유용한 치환된 벤족사진-4(3H)-온을 제공한다.

Description

치환된 2Ｈ-1,3-벤족사진-4(3Ｈ)온 {SUBSTITUTED 2H-1,3-BENZOXAZIN-4(3H)-ONES}

혈전 합병증은 산업화 사회에서 주된 사망 원인이다. 이러한 합병증의 예는 급성 심근경색증, 불안정형 협심증, 만성 안정형 협심증, 일과성 허혈 발작, 뇌졸중, 말초혈관질환, 자간전증/자간증, 심부정맥혈전증, 색전증, 파종성 혈관내 응고 및 혈전성 혈구감소성 자반증을 포함한다. 혈전성 및 재협착성 합병증은 또한 침습성 시술, 예를 들어 혈관성형술, 경동맥 내막절제술, CABG(관상 동맥 우회 이식술(coronary artery bypass graft)) 후, 혈관 이식술, 스텐트 배치 및 혈관 내 장치 및 보철물의 삽입에 이어 일어난다. 혈소판 응집은 이러한 시술에서 중요한 역할을 한다는 것은 일반적으로 알려져 있다. 통상 맥관 구조 내를 자유롭게 순환하는 혈액 혈소판은 활성화되고 응집하여 파열 죽상경화성 병변 또는 혈관 성형술과 같은 침습성 치료에 의해 유발되는 혈액 흐름 장애를 일으키며 혈전을 형성하고, 혈관 폐색을 야기한다. 혈소판 활성화는 여러 가지 작용제, 예를 들어 콜라겐과 같은 노출된 내피하 기질 분자에 의해, 또는 응고 연쇄반응에 의해 형성되는 트롬빈에 의해 시작될 수 있다.

혈소판 활성화 및 응고의 중요한 매개체는 ADP(아데노신 5'-디포스페이트)이며, 이는 콜라겐 및 트롬빈과 같은 여러가지 제제에 의한 활성화시의 맥관 구조물 내에서 혈액 혈소판으로부터 방출되고, 손상된 혈구, 내피 또는 조직으로부터 방출된다. ADP에 의한 활성화는 보다 많은 혈소판의 동원 및 존재하는 혈소판 응집체의 안정화를 유도한다. 응집을 매개하는 혈소판 ADP 수용체는 ADP 및 이들의 일부 유도체에 의해 활성화되고 ATP(아데노신 5'-트리포스페이트(adenosine 5'-트리phosphate)) 및 이들의 일부 유도체에 의해 억제된다 (Mills, D. C. B. (1996) Thromb. Hemost. 76: 835-856). 그래서, 혈소판 ADP 수용체는 퓨린 및/또는 피리미딘 뉴클레오타이드에 의해 활성화되는 P2 수용체 패밀리에 속한다 (King, B. F. , Townsend-Nicholson, A. & Burnstock, G. (1998) Trends Pharmacol. Sci. 19: 506-514).

선택적 길항제를 사용한 최근 약리학적 데이터는 ADP-의존성 혈소판 응집이 2개 이상의 ADP 수용체의 활성화가 필요로함을 제시한다(Kunapuli, S. P. (1998), Trends Pharmacol. Sci. 19: 391-394; Kunapuli, S. P. & Daniel, J. L. (1998) Biochem. J. 336: 513-523; Jantzen, H. M. et al. (1999) Tlaromb. Hemost. 81: 111-117). 하나의 수용체는 클로닝된 P2Y₁ 수용체와 동일한 것으로 여겨지고, 포스포리파아제 C 활성 및 세포내 칼슘 기동을 매개하고, 혈소판 형상의 변화를 위해 요구된다. 응집에 중요한 두 번째 혈소판 ADP 수용체는 아데닐일 사이클라제 (adenylyl cyclase)의 억제를 매개한다. 이 수용체(P2Y₁₂)를 위한 유전자 또는 cDNA의 분자 클로닝이 최근에 발표되었다(Hollopeter, G. et. al. (2001) Nature 409: 202-207). 이 약리학적 및 신호적 특성에 기초하며 이 수용체는 이전에 P2Y_ADP 라고 불려졌다 (Fredholm, B. B. et al. (1997) TIPS 18: 79-82), P2T_AC (Kunapuli, S. P. (1998), TrendsPharmacol. Sci. 19: 391- 394) 또는 P2Ycyc (Hechler, B. et al. (1998) Blood 92, 152-159).

항혈전 활성을 가지는 ADP-의존성성 혈소판 응집의 다양한 직접적 또는 간접적으로 작용하는 합성 억제제가 보고되었다. 구강에서 활성인 항혈전 티에노피리딘 티클로피딘 및 클로피도그렐(clopidogrel)은 ADP-유도 혈소판 응집, 방사능표시된 ADP 수용체 길항제 2-메틸티오아데노신 5'-디포스페이트와 혈소판의 결합, 및 간접적으로 다른 ADP-의존성 사건(events)을 아마도 불안정하고 비가역적으로 작용하는 대사 물질의 형성을 통해 억제한다(Quinn, M. J. & Fitzgerald, D. J. (1999) Circulation 100: 1667-1667). 예를 들어 AR-C(예전에는 FPL 또는 ARL) 67085MX 및 AR-C69931MX인 내인성 길항제 ATP의 몇몇 퓨린 유도체는 선택적 혈소판 ADP 수용체 길항제이며, 이는 ADP-의존성성 혈소판 응집을 억제하고 동물 혈전 모델에서 효과가 있다 (Humphries et al. (1995), Trends PXIarmacol. Sci. 16,179 ; Ingall, A. H. et al. (1999) J. Med. Chem. 42, 213-230). 새로운 트리아졸로[4,5-d]피리미딘 화합물은 P_2T-길항제로서 개시되어 있다(WO 99/05144). 혈소판 ADP 수용체 억제제로서 트리사이클릭 화합물은 WO 99/36425에 또한 개시되어 있다. 피페라진 유도체는 WO 02/098856에 기재되어 있다. 이러한 항혈전 화합물의 표적은 아데닐일 사이클라제 또는 P2Y₁₂의 억제를 매개하는 혈소판 ADP 수용체로 여겨진다.

이러한 화합물에도 불구하고, 보다 효과적인 혈소판 ADP 수용체 억제제가 필요하다. 특히, 심장 혈관 질환, 특히 혈전증에 관련된 질환의 예방 및/또는 치료에 유용한 항혈전 활성을 가지는 혈소판 ADP 수용체 억제제가 필요하다.

발명의 요약

본 발명은 하기 화학식을 갖는 화합물 및 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:

상기 식에서,

R¹은 C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, 벤질 및 치환된 벤질로부터 선택된 구성원이며; R²는 H 및 C_l-6 알킬로부터 선택된 구성원이며; R³는 H, C_1-6 알킬, C_2-6알케닐, C_2-6 알키닐, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, C_1-6 할로알킬, C_l-6 하이드록시알킬, 할로겐, 시아노 및 -C(O)R^3a로부터 선택된 구성원이며, 여기서, R^3a는 H, 하이드록시, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시, 아미노, C_l-6 알킬아미노 및 디-C_l-6알킬아미노로부터 선택된 구성원이며; R⁴는 H 및 C_1-6 알킬로부터 선택된 구성원이며; R⁵는 H, C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, 벤질, 아릴, C_1-6 알킬렌-N-(R^5a)₂; C_1-6알킬렌-O-(R^5a)로부터 선택된 구성원이며; 여기서 각각의 R^5a는 H 및 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택된 구성원이며, 선택적으로, 질소에 부착된 두개의 R^5a기는 질소 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘 또는 모르폴린 고리를 형성한다.

기호 Ar은 벤젠, 피리딘, 피라진 및 피리미딘으로부터 선택된 방향족 고리를 나타내며, 이들 각각은 1 내지 2개의 R⁶치환체로 치환되거나 비치환되며, 여기서 각각의 R⁶는 독립적으로 할로겐, 시아노, 하이드록시, C_l-6 알킬, C_2-6 알케닐, C_2-6 알키닐, C_l-6 알콕시, C_l-6 할로알킬, C_1-6 할로알콕시, C_3-5 사이클로알킬-알콕시, 아미노, C_l-6 알킬아미노, 디-C_l-6 알킬아미노, -C(=NR^6a)-N(R^6b)₂, -C(O)R^6a, -O(CH₂)_mOR^6b, -(CH₂)_mOR^6b, -O(CH₂)_mN(R ^6b )₂ 및 -(CH₂)_mN(R^6b)₂로부터 선택되며, 여기서 아랫 첨자 m 은 독립적으로, 1 내지 3의 정수이고, 각 R^6a는 독립적으로 H, 하이드록시, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시, 아미노, C_1-6 알킬아미노 및 디-C_l-6 알킬아미노로부터 선택된 구성원이고, 각 R^6b는 H, C_1-4알킬 및 C_1-4 알카노일로부터 독립적으로 선택된 구성원이고, 선택적으로 질소에 부착된 두 개의 R^6b 기는 질소 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘 또는 피페리딘 고리를 형성한다.

문자 L은 결합 또는 -NH-을 나타내는 연결기이다.

기호 R⁷은 H, 할로겐, 시아노, C_1-6알킬, C_2-6 알케닐, C_2-6 알키닐, C_1-6 알콕시 및 C_1-6 할로알킬로부터 선택된 구성원이다.

본원에 제공된 화합물 이외에, 본 발명은 추가로 이러한 화합물을 포함하는 약제 조성물, 및 혈전증을 치료하고, 이차 헌혈 발병을 예방하는데 있어서 본 화합물의 사용 방법을 제공한다.

발명의 상세한 설명

정의

용어 "알킬"은 그 자체 또는 또 다른 치환체의 부분으로서, 달리 진술된바 없다면, 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소 라디칼을 의미하고, 이는 지정된 탄소의 수를 가진다(다시 말해 C_l-8는 1 내지 8의 탄소를 의미한다). 알킬기의 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, t-부틸, 이소부틸, 2차-부틸, n-펜틸, n-헥실, n-헵틸, n-옥틸 등등을 포함한다. 용어 "알케닐"은 탄소 라디칼에 직접적으로 부착된 하나 이상의 이중 결합을 가지는 불포화 알킬기를 지칭한다. 유사하게, 용어 "알키닐"은 하나 이상의 삼중 결합을 가지는 불포화 알킬기를 지칭한다. 이러한 불포화 알킬기의 예는 비닐, 2-프로페닐, 크로틸, 2-이소펜테닐, 2-(부타디에닐), 2,4-펜타디에닐, 3-(1,4-펜타디에닐), 에티닐, 1- 및 3-프로피닐, 3-부티닐, 및 고급 동족체 및 이성질체를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 용어 "사이클로알킬"은 제시된 수의 고리 원자 (예를 들어, C_3-6사이클로알킬)를 가지고 완전히 포화된 또는 고리의 꼭지점 사이에 단지 하나의 이중결합을 가진 탄화수소 고리를 지칭한다. "사이클로알킬"이 C_3-5 사이클로알킬-알킬과 같이 알킬과 조합되어 사용되는 경우에, 사이클로알킬 부분은 3 내지 5개의 탄소 원자를 가지며, 알킬 부분이 1 내지 3개의 탄소 원자를 가지는 알킬렌의 부분(예를 들어, -CH₂-,-CH₂CH₂- 또는 -CH₂CH₂CH₂-)이 된다.

용어 "알콕시", "알킬아미노" 및 "알킬티오" (또는 티오알콕시)는 그들의 관용적인 개념으로 사용되고, 알킬기가 각각 산소 원자, 아미노기, 또는 황 원자를 통해 분자의 나머지 부분에 결합된 것들을 지칭한다. 간략하게, 용어 C_l-6알킬아미노는 메틸, 에틸, 2-메틸프로필, 사이클로부틸 및 사이클로프로필메틸과 같은 직쇄형, 분지형 또는 고리형 알킬기 또는 이들의 조합물을 포함하는 것으로 본다.

용어 "할로" 또는 "할로겐"은 그 자체 또는 또 다른 치환체의 부분으로서 달리 진술된 바 없다면, 플루오르, 염소, 브롬, 또는 요오드 원자를 의미한다. 추가적으로, "할로알킬"과 같은 용어는 모노할로알킬 및 폴리할로알킬을 포함하는 것으로 본다. 예를 들어, 용어 "C_l-4 할로알킬"은 트리플루오로메틸, 2,2,2-트리플루오로에틸, 4-클로로부틸, 3-브로모프로필 등등을 포함하는 것으로 본다.

용어 "아릴"은 달리 진술된 바 없다면, 전형적으로 방향족과 같은 폴리불포화된 탄화수소기를 의미하며, 이는 단일 고리 또는 함께 융합되거나 공유적으로 연결된 다중 고리(최대 3개 고리)일 수 있다. 전형적인 아릴기는 페닐, 나프틸, 바이페닐 등이다. 용어 "헤테로아릴"은 N, O, 및 S로부터 선택된 하나 내지 다섯 개의 헤테로원자를 함유하는 아릴기(또는 고리)를 지칭하며, 여기서 질소 및 황 원자는 선택적으로 산화되고 질소 원자는 선택적으로 사급화(quaternized)된다. 헤테로아릴기는 헤테로원자를 통해 분자의 나머지 부분에 부착될 수 있다. 헤테로아릴기의 비제한적 예는 1-피롤릴, 2-피롤릴, 3-피롤릴, 1-피라졸릴, 3-피라졸릴, 2-이미다졸릴, 4-이미다졸릴, 피라지닐, 2-옥사졸릴, 4-옥사졸릴, 5-옥사졸릴, 3-이속사졸릴, 4-이속사졸릴, 5-이속사졸릴, 2-티아졸릴, 4-티아졸릴, 5-티아졸릴, 2-푸릴, 3-푸릴, 2-티에닐, 3-티에닐, 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜, 2-피리미딜, 4-피리미딜, 5-벤조티아졸릴, 푸리닐, 2-벤지미다졸릴, 벤조피라졸릴, 5-인돌릴, 1-이소퀴놀릴, 5-이소퀴놀릴, 2-퀴녹살리닐, 5-퀴녹살리닐, 3-퀴놀릴, 및 6-퀴놀릴을 포함한다. 상기 진술된 아릴 및 헤테로아릴 고리 계 각각의 치환체는 하기된 허용되는 치환체의 군으로부터 선택된다.

본원에서 사용된 것과 같이, 용어 "헤테로원자"는 산소(O), 질소(N), 황(S), 및 규소(Si)를 포함하는 것으로 본다.

용어 "약제학적으로 허용되는 염"은 상대적으로 무독성 산 또는 염기로 제조된 활성 화합물의 염을 포함하는 것으로 보며, 본원에서 설명된 화합물에서 발견되는 특정 치환체에 의존한다. 본 발명의 화합물이 상대적으로 산성 작용기를 포함하는 경우에, 염기 부가 염은 순수하거나 적절한 불활성 용매 내 요망되는 염기의 충분한 양을 가진 이러한 화합물의 중성 형태와 접촉하여 획득될 수 있다. 약제학적으로 허용되는 염기 부가 염의 예는 나트륨, 칼륨, 칼슘, 암모늄, 유기 암모늄, 아연 또는 마그네슘 염, 또는 유사한 염을 포함한다. 본 발명의 화합물이 상대적으로 염기성 작용기를 함유하는 경우에, 산 부가 염은 순수하거나 적절한 불활성 용매 내 충분한 양의 요망되는 산을 가진 이러한 화합물의 중성 형태와 접촉하여 획득될 수 있다. 약제학적으로 허용되는 산 부가 염의 예는 염산, 브롬산, 질산, 탄산, 일수소탄산, 인산, 일수소인산, 이수소인산, 황산, 일수소황산, 요오드화수소산, 또는 아인산 등과 같은 무기산으로부터 뿐만 아니라 아세트산, 프로피온산, 이소브티르산, 말론산, 벤조산, 숙신산, 수베르산, 푸마르산, 만델산, 프탈산, 벤젠설폰산, p-톨릴설폰산, 시트르산, 타르타르산, 메탄설폰산 등과 같은 상대적으로 무독성인 유기산으로부터 파생된 것들을 포함한다. 또한 알기네이트 및 이와 유사한 것과 같은 아미노산의 염 및 글루쿠론산 또는 갈락투노르산 등과 같은 유기산의 염도 포함된다(예를 들어, Berge, S. M. , et al, "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19). 본 발명의 정확한 특정 화합물은 화합물이 염기 또는 산 부가 염으로 전환되도록 하는 염기성 및 산성 작용기를 함유한다.

화합물의 중성 형태는 통상적인 방법에서 염기 또는 산을 가진 염과 접촉하고 모 화합물(parent compound)을 분리하여 재생될 수 있다. 화합물의 모 형태(parent form)는 극성 용매 내에서의 용해성과 같은 특정 물리적 특성에서 다양한 염 형태와 다르지만, 그렇지 않다면 염은 본 발명의 목적을 위한 화합물의 모 형태와 동일하다.

염의 형태에 추가하여, 본 발명은 프로드러그 형태인 화합물을 제공한다. 본원에 기재된 화합물의 프로드러그는 생리학적 조건 하에서 쉽게 화학적 변화를 겪어 본 발명의 화합물을 제공하는 화합물이다. 추가적으로는 프로드러그는 생체 외 환경에서 화학적 또는 생화학적 방법에 의해 본 발명의 화합물로 전환될 수 있다. 예를 들어, 프로드러그가 적절한 효소 또는 화학적 시약을 가진 경피용 패치 저장소에 배치되는 경우에 프로드러그는 본 발명의 화합물로 천천히 전환될 수 있다.

본 발명의 특정 화합물은 비용매화된 형태뿐만 아니라 용매화된 형태로 존재할 수 있고, 수화된 형태를 포함한다. 일반적으로는, 용매화된 형태는 비용매화된 형태와 동일하고 본 발명의 범위 내로 포함되도록 의도된다. 본 발명의 특정 화합물은 다중 결정 또는 무정형 형태로 존재할 수 있다. 일반적으로는, 모든 물리적 형태는 본 발명에 의해 고려된 용도에 적합하도록 동일하고, 본 발명의 범위 내에 있도록 의도된다.

본 발명의 특정 화합물은 비대칭형 탄소 원자(키랄 중심) 또는 이중 결합을 가지며; 라세미체, 부분입체이성질체, 기하이성질체 및 개개의 이성질체(예를 들어, 독립된 거울상이성질체)는 모두 본 발명의 범위 내에 포함되도록 의도된다.

본 발명의 화합물은 또한 이러한 화합물을 구성하는 하나 이상의 원자에 동위원소 원자의 비천연적인 비율을 함유한다. 예를 들어, 화합물은 예를 들어 트리디윰(³H), 요오드-125(¹²⁵I), 인-32(³²P) 또는 탄소-14(¹⁴C)와 같은 방사능 동위원소로 방사능 표지될 수 있다. 본 발명의 화합물의 모든 동위 원소 변형물은 방사능이거나 아니더라도 본 발명의 범위 내에 포함되도록 의도된다.

일반

구체예의 상세한 설명

화합물

상기의 관점에서, 본 발명은 한 양태에서, 하기 화학식을 갖는 화합물 및 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:

(I)

상기 식에서,

R¹은 C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, 벤질 및 치환된 벤질로부터 선택된 구성원이며; R²는 H 및 C_l-6 알킬로부터 선택된 구성원이며; R³는 H, C_1-6 알킬, C_2-6알케닐, C_2-6 알키닐, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, C_1-6 할로알킬, C_l-6 하이드록시알킬, 할로겐, 시아노 및 -C(O)R^3a로부터 선택된 구성원이며, 여기서, R^3a는 H, 하이드록시, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시, 아미노, C_l-6 알킬아미노 및 디-C_l-6알킬아미노로부터 선택된 구성원이며; R⁴는 H 및 C_1-6 알킬로부터 선택된 구성원이며; R⁵는 H, C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, 벤질, 아릴, C_1-6 알킬렌-N-(R^5a)₂; C_1-6알킬렌-O-(R^5a)로부터 선택된 구성원이며; 여기서 각각의 R^5a는 H 및 C_1-6 알킬로부터 독립적으로 선택된 구성원이며, 선택적으로, 질소에 부착된 두개의 R^5a그룹은 질소 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘 또는 모르폴린 고리를 형성한다.

기호 Ar은 벤젠, 피리딘, 피라진 및 피리미딘으로부터 선택된 방향족 고리를 나타내며, 이들 각각은 1 내지 2개의 R⁶치환체로 치환되거나 비치환되며, 여기서 각각의 R⁶는 독립적으로 할로겐, 시아노, 하이드록시, C_l-6 알킬, C_2-6 알케닐, C_2-6 알키닐, C_l-6 알콕시, C_l-6 할로알킬, C_1-6 할로알콕시, C_3-5 사이클로알킬-알콕시, 아미노, C_l-6 알킬아미노, 디-C_l-6 알킬아미노, -C(=NR^6a)-N(R^6b)₂, -C(O)R^6a, -O(CH₂)_mOR^6b, -(CH₂)_mOR^6b, -O(CH₂)_mN(R ^6b )₂ 및 -(CH₂)_mN(R^6b)₂로부터 선택되며, 여기서 아랫 첨자 m 은 독립적으로, 1 내지 3의 정수이고, 각 R^6a는 독립적으로 H, 하이드록시, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시, 아미노, C_1-6 알킬아미노 및 디-C_l-6 알킬아미노로부터 선택된 구성원이고, 각 R^6b는 H, C_1-4알킬 및 C_1-4 알카노일로 구성되는 군으로부터 독립적으로 선택된 구성원이고, 선택적으로 질소에 부착된 두 개의 R^6b 기는 질소 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘 또는 피페리딘 고리를 형성한다.

문자 L은 결합 또는 -NH-인 연결기이다.

특정 그룹의 구체예가 바람직하다.

바람직한 한 구체예에서, 본 발명의 화합물은 하기 화학식을 갖는다:

(Ia)

상기 식에서, 아래첨자 n은 0 내지 2의 정수이다. 나머지 R 기 (R¹, R², R³, R⁴, 및 R⁶)는 화학식 I과 관련하여 상기 제공된 의미를 가진다. n이 0 또는 1이고; R¹은 C_1-4 알킬, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, 또는 할로치환된 벤질이며; R²는 H이며; R³는 H, C_1-4 알킬, C_2-4 알케닐, C_2-4 알키닐, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5사이클로알킬-알킬, C_1-4 할로알킬, 시아노 또는 -C(O)R^3a이며; R⁴는 H 또는 C_1-4 알킬이며; R⁵는 H 또는 C_1-4 알킬, C_1-4 할로알킬, -CN, -C≡CH 또는 -CONH₂이며; R⁶은존재하는 경우, 할로겐, C_1-4 알킬, C_1-4 알콕시, C_3-5사이클로알킬-알콕시, -O(CH₂)_mOR^6b 및 -O(CH₂)mN(R^6b)₂로 구성된 군으로부터 선택되며, 여기서 아랫첨자 m은 1 또는 2이며, 각각의 R^6b는 독립적으로, H, C_1-4알킬 및 C_1-4알카노일로 구성된 군으로부터 선택되며; R⁷은 H, C_1-4 알킬 또는 할로겐인 구체예가 추가로 바람직하다. R¹이 C_1-4 알킬이며; R⁴는 H 또는 CH₃이며; R⁵는 H 또는 CH₃이며; R⁶은 존재하는 경우, 할로겐, C_1-4 알킬 및 C_1-4알콕시로 구성된 군으로부터 선택되고; R⁷은 할로겐 또는 C_l-4 알킬인 구체예가 여전히 더욱 바람직하다. R¹이 메틸이고; R⁴는 H이며; R⁵는 H 또는 CH₃이며; R⁷은 클로로이며, 티에닐 고리의 5번 위치에 부착되며; n은 0 또는 1이고, R⁶은 존재하는 경우, 할로겐, C_1-4 알킬, -OCH₂CH₂OH, -OCH₂CH₂OCH₃, -OCH₂OCH₃, -OCH₂CH₂OC(O)CH₃ 및 -O(CH₂)₂N(CH₃)₂로 구성된 군으로부터 선택된 구체예가 더욱 바람직하다.

또 다른 바람직한 구체예에서, 본 발명의 화합물은 하기 화학식을 갖는다:

(Ib)

상기 식에서, 아랫첨자 n은 0 내지 2의 정수이다. 나머지 R 기 (R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶ 및 R⁷)는 화학식 I과 관련하여 상기 제공된 의미를 가진다.

(Ic)

(Id)

(Ie)

상기 식에서, 아랫첨자 n은 0 내지 2의 정수이다. 나머지 R 기 (R¹, R², R³, R⁴, R⁵, R⁶ 및 R⁷)는 화학식 I과 관련하여 상기 제공된 의미를 가진다. 일부 바람직한 화합물에서, R⁶은 플루오로이다.

본 발명의 특히 바람직한 화합물은 하기 화학식을 갖는다:

본 발명의 또 다른 바람직한 화합물은 하기 화학식을 갖는다:

당업자의 실시에 일치하여, 비라벨링된 결합 (예를 들어, 비라벨링된 말단을 갖는 결합)은 메틸 (CH₃) 그룹을 나타내는 것을 의미한다.

일반적인 합성법

I

이 화합물을 제조하는데 사용되는 출발 물질 및 시약은 일반적으로는 알드리치 케미칼사(Aldrich Chemical Co.)와 같은 상업 공급자로부터 입수할 수 있거나, 문헌 [Fieser 및 Fieser's Reagentsfor Organic Synthesis; Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-15; Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, Elsevier Science Publishers, 1989, Volumes 1-5 및 Supplementals; 및 Organic Reactions, Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-40]와 같은 참고 문헌에서 제시된 절차인 당업자에 알려진 방법에 의해 제조된다. 하기 합성 반응식은 본 발명의 화합물이 이 방법에 의해 합성될 수 있다는 것을 보여주는 단지 몇몇 방법의 예시적인 것이며, 이 합성 반응식에서 다양한 변경은 발생할 수 있고 본 출원서의 개시 자료를 참조한 당업자에게 암시될 것이다.

합성 반응식의 출발 물질 및 중간체는 요망된다면 통상적 기술을 사용하여 분리될 수 있고, 정제될 수 있으며, 제한되는 것은 아니지만, 여과, 증류, 결정, 크로마토그래피 등을 포함한다. 상기 물질은 통상적 수단을 사용하여 특징될 수 있으며, 여기서 통상적 수단은 물리 상수 및 스펙트럼 데이터를 포함한다.

이와 반대로 명시된 것이 없다면, 바람직하게 본원에 기재된 반응은 불활성 기체 하 대기 압력에서 약 -78도℃ 내지 약 150℃ 범위의 반응 온도, 더욱 바람직하게는 약 0℃ 내지 약 125℃, 및 가장 바람직하게 및 통상적으로는 약 20℃인 상온(또는 주위온도)에서 수행된다.

반응식 A는 R³, R⁴ 및 R⁵ = H; R¹, R², R⁶은 상기 기술된 바와 같을 수 있으며, Ar은 치환된 아릴 및 헤테로아릴이며, R⁷은 클로로인 화학식 I의 화합물을 제조하기 위한 방법을 기술한다.

화학식 I의 화합물은 4,5-디플루오로살리실산과 아세트산 무수물을 반응시키고, 이어서 다양한 니트로아릴 화합물과 반응하여 아미드로 전환된 옥살릴 클로라이드를 갖는 산성 클로라이드 형성물과 반응시킴으로써 제조될 수 있다. 염기성 조건하에 탈아세틸화시켜 살리실아미드 3을 제공한다. 중간체 살리실아미드 3을 파라포름알데히드와 벤족사지논 화합물로 사이클화시켰다. 7-플루오로기는 100-120℃에서 디메틸 설폭시드중의 다양한 아민 또는 아닐린으로 대체되어 중간체 5를 제공할 수 있다. 화합물 5의 니트로기는 당업자에게 공지된 공정에 의해 환원되어 유리 아미노 기를 생성시킬 수 있다. 예를 들어, 환원 방법은 적합한 용매 전형적으로 알코올중에서 적합한 촉매 (예를 들어, 10% 탄소상 팔라듐)으로 수소화됨으로써 수행될 수 있다. 설포닐우레아 연결 형성은 환원된 생성물 아민 6을 실온에서 디클로로메탄중의 5-클로로티오펜-2-설폰아미드, N,N'-디숙시니미딜 카보네이트 및 테트라메틸구아니딘의 사전 혼합된 용액으로 처리하여 설포닐우레아 7을 제공하거나, 아민 6을 환류 톨루엔중의 5-클로로-티오펜-2-설폰아미드의 에틸 카르바메이트로 처리하여 설포닐우레아 7을 제공함으로써 달성될 수 있다.

반응식 B는 L이 -NH-이며; R³, R⁴ 및 R⁵ = H; R¹, R², R⁶은 상기 기술된 바와 같을 수 있으며, Ar은 치환된 아릴 및 헤테로아릴이며, R⁷은 클로로인 화학식 I의 화합물의 제법을 기술한다.

변화되는 Ar 그룹을 갖는 화학식 I의 화합물은 먼저 5 단계로 공통의 중간체 6을 합성함으로써 제조될 수 있다 (반응식 B). 반응식 A로부터의 산성 클로라이드는 p-메톡시벤질아민으로 처리된 후, 파라포름알데히드와 사이클화되어 벤족사지논 고리 시스템을 제공할 수 있다. 디플루오로 중간체 4는 다양한 아민 또는 아닐린 특히, 메틸아민으로 처리되어 7-플루오로기를 대체하여 중간체 5를 제공할 수 있다. 그 후, p-메톡시벤질 작용기는 수소화되어 공통의 중간체 6을 제공할 수 있다. 다양한 할로-치환된 니트로방향족 화합물은 방법 A를 이용하여 화합물 6과 결합될 수 있으며, 이는 탄산세슘과 같은 염기의 존재하에 알킬화된 후, 촉매적 수소화 또는 주석(II) 디클로라이드 디히드레이트를 사용하여 니트로기를 환원시켜 화합물 7을 제공한다. 또한, 다양한 할로-치환된 아릴아민은 방법 B를 이용하여 화합물 6과 결합될 수 있으며, 이는 구리 촉매된 결합에 의해 화합물 7을 제공한다. 설포닐우레아 연결 형성은 생성물 아민 7을 환류 톨루엔중의 5-클로로-티오펜-2-설폰아미드의 에틸 카르바메이트로 처리하여 설포닐우레아 8를 제공하거나, 실온하에 디클로로메탄중의 5-클로로티오펜-2-설폰아미드, N,N'-디숙시니미딜 카르보네이트 및 테트라메틸구아니딘으로 처리하여 설포닐 우레아 8을 제공함으로써 달성될 수 있다. 하기 상세히 제공된 실시예는 제공된 일반적인 방법에 의해 제조된 화합물을 나타낸다.

반응식 C는 L이 결합이며; R³, R⁴ 및 R⁵ = H; R¹, R², R⁶은 상기 기술된 바와 같을 수 있으며, Ar은 치환된 아릴 및 헤테로아릴이며, R⁷은 클로로인 화학식 I의 화합물의 제법을 기술한다.

아실설폰아미드가 링커인 화학식 I의 화합물은 화합물 2의 산성 클로라이드를 적합하게 치환된 메틸-4-아미노벤조에이트로 처리하여 아미드 중간체를 제공함으로써 제조될 수 있다. 염기성 조건하에 탈아세틸화시켜 살리실아미드 3을 제공한다. 중간체 살리실아미드 3은 파라포름알데히드와 벤족사지논 화합물 4로 사이클화되었다. 7-플루오로기는 100-120℃에서 디메틸 설폭시드중의 다양한 아민 또는 아닐린으로 대체되어 중간체 5를 제공할 수 있다. 화합물 5의 에스테르는 적합한 용매 또는 용매 혼합물 예컨대, 디옥산/물 또는 THF/물중의 수산화리튬으로 처리함으로써 카르복실산으로 전환될 수 있다. 카르복실산의 아실 설폰아미드 7로의 전환은 용매로서 디클로로메탄 또는 DMF중의 EDC, DMAP 및 적합하게 치환된 설폰아미드로 처리함으로써 달성된다.

조성물

본 발명의 또 다른 측면에서, 화학식 I, Ia, Ib, Ic, Id 또는 Ie의 화합물이 독립적으로 또는 조합되어 약제학적으로 허용되는 담체와 혼합되는 약제학적 조성물이 제공된다.

본 발명의 약제학적 조성물은 용액 또는 현탁액의 형태일 수 있다. 혈전증 장애의 치료방법으로 본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물은 예를 들어, 경구 투여를 위한 정제, 캡슐 또는 엘릭시르, 좌제, 살균 용액 또는 현탁액 또는 주사 투여 등, 또는 조형품으로 통합된 것과 같은 형태 또한 될 수 있다.

정제, 캡슐 및 이와 유사한 것에 통합될 수 있는 전형적 애주번트는 제한되는 것은 아니지만, 아카시아, 옥수수 전부 또는 겔라틴과 같은 바인더 및 마이크로크리스탈 셀룰로오즈와 같은 부형제, 옥수수 전분 또는 알긴산과 같은 분해제, 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제, 설탕 또는 락토즈와 같은 감미제, 또는 향미료를 포함한다. 투여 형태가 캡슐인 경우에, 상기 물질에 추가적으로 물, 염류, 또는 지방유와 같은 액체 담체를 포함할 수 있다. 다양한 형태의 다른 물질은 코팅제 또는 투여 단위의 물리적 형태의 변형제로 사용될 수 있다. 투여를 위한 살균 조성물은 통상적 약제학적 방법에 따라 조제될 수 있다. 예를 들어, 오일 또는 합성 지방 예를 들어 올레이트와 같은 운반체 내에서 또는 리포솜 내에서 활성 화합물의 분해 또는 현탁이 요망될 수 있다. 완충제, 보존제, 항산화제 및 이와 유사한 것은 용인된 약제학적 방법에 따라 통합될 수 있다.

추가적으로는, 화학식 I, Ia, Ib, Ic, Id 또는 Ie의 화합물, 또는 본 발명의 화합물을 함유하는 약제학적 조성물의 투약 형태는 치료적 투여를 위해 사용되기 위해 살균되어야 한다. 살균은 0.2 마이크론막과 같은 살균막을 통한 여과를 통하여 또는 다른 통상의 방법에 의하여 쉽게 달성될 수 있다. 제형은 전형적으로 고체 형태, 바람직하게는 동결건조 형태로 저장될 것이다. 투약의 바람직한 경로는 경구이지만, 화학식 I, Ia, Ib, Ic, Id 또는 Ie의 화합물 또는 본 발명의 약제학적 조성물의 투약 형태는 정맥내(거환 및/또는 주입법), 피하내, 근육내, 결장으로(colonically), 직장으로, 비강으로, 경피로 또는 복막내로 주사에 의한 투여 또한 될 수 있다. 다양한 투여 형태는 제한되는 것은 아니지만, 좌약, 이식 환약 또는 작은 실린더, 에어로졸, 구강 투여 제제 및 국소 제제 예를 들어 연고, 점적제 및 피부용 패치를 포함하는 것과 같이 이용될 수 있다. 본 발명의 화학식 I, Ia, Ib, Ic, Id 또는 Ie의 화합물, 및 약제학적 조성물은 생분해성 폴리머 또는 예를 들어 실라스틱(SILASTIC), 실리콘 고무 또는 상업적으로 유용한 다른 폴리머와 같은 합성 실리콘과 같은 불활성 물질을 이용할 수 있는 이식물과 같은 조형품에 또한 통합될 수 있다. 본 발명의 화합물 및 약제학적 조성물은 리포솜 전달 체계, 예를 들어 작은 단층 소포, 큰 단층 소포 및 다중층 소포의 형태로 또한 제공될 수 있다. 리포솜은 다양한 지질, 예를 들어 콜레스테롤, 스테아릴아민 또는 포스파티딜콜린으로부터 당업자에게 알려진 방법을 사용하여 형성될 수 있다.

치료/투여 방법

또 다른 측면에서, 본 발명은 포유동물에 치료학적 유효량의 화학식 I, Ia, Ib, Ic, Id 또는 Ie의 화합물를 독립적으로 또는 상기 설명된 본 발명의 약제학적 조성물의 부분으로 투여함으로써 포유동물의 혈전증의 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명의 화학식 I, Ia, Ib, Ic, Id 또는 Ie의 화합물, 및 본 발명의 화학식 I, Ia, Ib, Ic, Id 또는 Ie의 화합물을 함유하는 약제학적 조성물은 심장 혈관 질환, 특별하게는 혈전증과 관련된 것들의 예방 또는 치료를 위해 독립적으로 또는 다중-성분 치료 요법의 부분으로 사용되기 적절하다. 예를 들어, 본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물은 임의의 혈전증, 특별하게는 혈소판-의존 혈전증 적응증, 제한되지는 않지만, 급성 심근 경색, 불안정 협심증, 만성 안정 협심증, 일과성 허혈 발작, 질식, 말초 혈관 질환, 자간전증/자간증, 심경 정맥 혈전증, 색전증, 파종혈관내응고 및 혈소판 감소성 자반증, 침입성 수술 후의 혈전증과 재협착 합병증, 예를 들어, 혈관 성형술, 경동맥 내막 절제술, 포스트 CABG(관상 동맥 회로 이식술(coronary artery bypass graft)), 혈관 이식술, 스텐트 이식 및 혈관내 장치 및 보철물의 삽입을 포함하는 것을 위한 약품 또는 치료제로서 사용될 수 있다.

본 발명의 화합물 및 약제학적 조성물은 다른 치료제 또는 진단제와 함께 포유동물 내의 혈전증의 예방 또는 치료를 위한 다중-성분 치료 요법의 부분으로 또한 사용될 수 있다. 특정 바람직한 구체예에서, 본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물은 일반적으로 허용되는 약제학적 방법에 따라 이러한 증상을 위해 전형적으로 처방되는 다른 화합물 예를 들어 항응고성제, 혈전용해제, 또는 혈소판응집억제제, 조직플라스미노겐활성제, 우로키나아제(urokinase), 프로우로키나아제(prourokinase), 스트렙토키나아제, 헤파린, 아스피린, 또는 와파린을 포함하는 다른 항혈전제와 함께 투여될 수 있다. 그리고, 본 발명의 화합물과 함께 투여될 수 있는 다른 작용제는 항혈소판 화합물, 섬유소용해제, 항염증 화합물, 콜레스테롤-저감제, 혈압저감제 및 세로토닌 차단제를 포함한다. 적절한 항혈소판 화합물은 GPIIB-IIIa 길항제, 아스피린, 포스포디에스테라아제 III 억제제 및 트롬복산 A2 수용체 길항제를 포함한다. 적절한 항응고제는 트롬빈 억제제, 쿠마딘(coumadin)(와파린), 헤파린 및 로베녹스^®(Lovenox^®)를 포함한다. 적절한 항염증 화합물은 비스테로이드성 항염증제, 사이클로옥시게나아제-2 억제제 및 류마티스 관절염 제제를 포함한다. 본 발명의 화합물과 함께 이 작용제의 동시 투여는 혈전용해제의 줄어든 용량의 적용에 또한 적합할 수 있고, 그 결과 잠재적 출현 부작용을 줄일 수 있다. 본 발명의 화합물 및 약제학적 조성물은 또한 상승 방식으로 재폐색을 막고 성공적 혈전 용해 치료 및/또는 관류 시간을 줄이는 역할을 할 수 있다.

관련된 방법에서, 본 발명의 화합물은 이차 허혈의 예방에 유용한다. 이 방법에서, 본 발명의 화합물 또는 이들의 약제학적 조성물은 일차 허혈로 고생하는 환자에 충분한 양으로 투여되어 2차 발병의 발생을 예방하거나 줄인다. 일반적으로는, 일차 및/또는 이차 허혈 발병은 심근 경색, 안정 또는 불안정 협심증, 경피경혈관심장동맥확장술 후의 급성 재폐색, 재협착, 혈전 발작, 일과성 허혈 발작, 가역성 허혈 신경 결손 및 간헐성 파행으로부터 선택된다.

본 발명의 화합물 및 약제학적 조성물은 생체 내, 일반적으로 포유동물 예를 들어 영장류,(예를 들어, 인간), 양, 말, 소, 돼지, 개, 고양이, 래트 및 쥐 내에서, 또는 시험관 내에서 활용될 수 있다. 상기 정의된 본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물의 생물학적 특성은 예를 들어 항혈전 효력을 평가하는 생체 내 연구 로 당업자에게 잘 알려진 방법, 및 지혈효과 및 혈액작용 파라미터에 의해 쉽게 특징될 수 있다.

본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물을 사용하는 치료가 필요한 대상 (전형적으로 포유동물)에 최적의 효과를 제공할 용량을 투여할 수 있다. 투여의 용량 및 방법은 대상에 따라 다양할 것이고 포유동물 치료 형태, 성별, 무게, 음식물, 동시 약물, 전반적 병의 상태, 사용되는 화학식 I, Ia, Ib, Ic, Id 또는 Ie의 특별한 화합물, 화합물 또는 약리학적 화합물이 사용되는 특정 용도, 및 의약계 당업자가 인식하는 다른 요소와 같은 요소에 의존할 것이다.

치료학적 유효량은 시험관 내 또는 생체 내 방법에 의해 결정될 수 있다. 각각의 특별한 본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물을 위해, 개개의 정량은 요구되는 최적의 용량을 통해 결정될 수 있다. 치료학적 유효량의 범위는 투여 경로, 치료 목적 및 환자의 상태에 영향을 받을 것이다. 피하용 주사에 의한 주입에서, 용량을 체액에 전달하는 것으로 가정될 수 있다. 다른 투여 경로에서, 흡수율은 약리학에서 잘 알려진 방법에 의해 각각의 화합물을 개별적으로 검정하여야 한다. 따라서, 요법사는 용량을 적정하고 투여 경로를 요구되는 대로 변경하여 최적의 치료 효과를 얻도록 할 필요가 있을 수 있다.

유효량 수준의 결정, 즉 요망되는 결과를 얻기 위한 필요한 용량 수준, 다시 말해, 혈소판 ADP 수용체 억제는 당업자에 의해 쉽게 결정될 것이다. 전형적으로는, 본 발명의 화합물 또는 약제학적 조성물의 적용은 낮은 용량 수준에서 시작되어 용량 수준은 점점 요망되는 효과가 달성될 때까지 증가된다. 본 발명의 화합물 및 조성물은 일일 용량으로 나눠진 단일 또는 복수(Several) 요법에서 약 0.01 내지 1000mg/kg 범위의 용량내에서 유효량이 경구 투여될 수 있다. 약제학적으로 허용되는 담체가 본 발명의 약제학적 조성물에서 사용된다면, 전형적으로 약 5 내지 500mg의 화학식 I, Ia, Ib, Ic, Id 또는 Ie의 화합물은 허용되는 약제학적 통례에 의해 요구한 대로 약제학적으로 허용되는 담체와 배합되며, 제한되는 것은 아니지만, 생리적으로 허용되는 운반체, 담체, 부형제, 바인더, 보존제, 안정제, 염료, 향료, 등등을 포함한다. 이 조성물에서 활성 성분의 양은 지시된 범위 내에서 적절한 용량이 얻어지는 정도이다.

하기 제조방법 및 실시예는 당업자가 더욱 명확하게 이해하고 본 발명을 실행할 수 있도록 제공된다. 이 것들은 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 간주되어서는 안되며, 단지 이들을 도시하고 대표하는 것이다.

이 화합물을 제조하는데 사용되는 출발 물질 및 시약은 일반적으로는 알드리치 케미칼사(Aldrich Chemical Co.)와 같은 상업 공급자로부터 입수할 수 있거나, 문헌 [Fieser 및 Fieser's Reagentsfor Organic Synthesis; Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-15; Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, Elsevier Science Publishers, 1989, Volumes 1-5 및 Supplementals; 및 Organic Reactions, Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-40]와 같은 참고 문헌에서 제시된 절차 인 당업자에 알려진 방법에 의해 제조된다. 하기 합성 반응식은 본 발명의 화합물이 이 방법에 의해 합성될 수 있다는 것을 보여주는 단지 몇몇 방법의 예시적인 것이며, 이 합성 반응식에서 다양한 변경은 발생할 수 있고 본 출원서의 개시 자료를 참조한 당업자에게 암시될 것이다.

합성 반응식의 출발 물질 및 중간체은 요망된다면 통상적 기술을 사용하여 단리될 수 있고, 정제될 수 있으며, 제한되는 것은 아니지만, 여과, 증류, 결정, 크로마토그래피 등을 포함한다. 상기 물질은 통상적 수단을 사용하여 특징될 수 있으며, 여기서 통상적 수단은 물리 상수 및 스펙트럼 데이터를 포함한다.

실시예 1

4,5-디플루오로-2-하이드록시-N-(4-니트로페닐)벤즈아미드

피리딘 (2 mL)중의 4,5-디플루오로-2-하이드록시벤조산 (1 g, 6 mmol, U.S. 특허 No. 6,166,246 (Kazuto Umezv)의 방법에 의해 제조된) 용액에 아세트산 무수물 (0.8 mL, 7 mol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2hr 동안 교반하였다. 여기에 10% HCl (10 mL)을 첨가하고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 에틸 아세테이트를 증발시키고 잔류물을 디클로로메탄 (10 mL)중에 용해시켰다. 이 용액에 옥살릴 클로라이드 (1 mL) 및 몇 방울의 디메틸포름아미드를 첨가하고, 1hr 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 제거하고, 산성 클로라이드를 디클로로메탄 (10mL)중에 용해시킨 후, p-니트로아닐린 (0.880 mL, 6.5 mmol)의 디클로로메탄 용액 (10mL)에 서서히 첨가하였다. HPLC 결과 반응 혼합물은 2hr 후 새로운 피크를 나타내었으며, 출발 물질이 완전히 사라졌다. 디클로로메탄을 제거하고, 잔류물을 메탄올중에 용해시키고, 여기에 10% NaOH 수용액 (3 mL)을 첨가하고, 1hr 동안 혼합물을 교반하였다. 메탄올을 제거하고, 잔류물을 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 에틸 아세테이트 층을 건조시키고, 여과시키고 증발시켜 1.5g (85%)의 N-(4-메톡시벤질)-4,5-디플루오로-2-하이드록시벤즈아미드를 백색 고형물로서 수득하였다.

실시예 2

6,7-디플루오로-3-(4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온

톨루엔 (5ml)중의 4,5-디플루오로-2-하이드록시-N-(4-니트로페닐)벤즈아미드 (0.13 g, 0.44 mmol)에 파라포름알데히드 (0.3 g, 10mmol) 및 p-톨루엔설폰산 (0.01 g, 0.05mmol)을 첨가하고, 물을 공비 제거하면서 반응물을 120℃로 3hr 동안 가열하였다. 포화된 중탄산나트륨 (10ml)을 첨가하고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수성 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 0.11mg (81%)의 6,7-디플루오로-3-(4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e] [1,3]옥사진-4-온을 제공하였다.

실시예 3

6-플루오로-7-(메틸아미노)-3-(4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온

디메틸 설폭시드 (0.5m1)중의 6,7-디플루오로-3-(4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (0.05 g, 0.16 mmol)에 메틸 아민 (0.3ml, 테트라히드로푸란중의 2M 용액)을 첨가하고, 반응물을 140℃로 lhr 동안 가열하였다. 물을 첨가하고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수성 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 0.42mg (81%)의 6-플루오로-7-(메틸아미노)-3-(4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온을 제공하였다.

실시예 4

3-(4-아미노페닐)-6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e1][1,3] 옥사진-4-온

Ar 하에 에탄올 (6 mL)중의 6-플루오로-7-(메틸아미노)-3-(4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (0.108 g, 0.33 mmol) 현탁액에 10% Pd/C (0.04 g, 0.03 mmol Pd)를 첨가하였다. 혼합물을 1atm H2 하에 밤새 수소화시키고, 셀라이트를 통해 여과시키고 농축시켜 0.096 g (98%)의 3-(4-아미노페닐)-6-플 루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온을 제공하였다.

실시예 5

1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)페닐)우레아

무수 1,4-디옥산 (3 mL)중의 3-(4-아미노페닐)-6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (실시예 4) (130 mg, 0.45 mmol) 및 (5-클로로-티오펜-2-설포닐)-카르밤산 에틸 에스테르 (150 mg, 0.53 mmol, 1.2 eq)의 혼합물을 110℃에서 2hr 동안 가열하였다. 냉각시, 반응물을 진공하에 농축시키고, 미정제 잔류물을 HPLC (C-18)에 의해 정제하여 86mg (37%)의 순수한 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3 -(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)페닐)우레아를 제공하였다.

실시예 6

4,4-디플루오로-2-하이드록시-N-(3-메틸-4-니트로페닐)벤즈아미드

실시예 7

6,7-디플루오로-3-(3-메틸-4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온

실시예 8

6-플루오로-3-(3-메틸-4-니트로페닐)-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온

실시예 9

3-(4-아미노-3-메틸페닐)-6-플루오로-7-(메틸아미노)2,3-디히드로[e][1,3]옥사진-4-온

실시예 10

1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)-2-메틸페닐)우레아

2-(클로로카르보닐)-4,5-디플루오로페닐 아세테이트 (실시예 1) 및 3-메틸-4-니트로벤젠아민으로 실시예 1에 기술된 것과 유사한 결합 공정을 수행하였다. 실시예 2에 기술된 바와 같이 파라포름알데히드를 사용하여 고리 사이클화를 수행하였다. 불소의 메틸 아민 대체는 실시예 3에 개략된 공정과 유사하게 수행하였다. 니트로기의 환원은 실시예 4에 개략된 공정을 이용하여 수행하였다. 설포닐우레아 우레아를 형성하기 위한 결합은 실시예 5에 기술된 방법을 이용하여 달성되어 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)-2-메틸페닐)우레아를 제공하였다.

실시예 11

4,4-디플루오로-2-하이드록시-N-(2-메톡시-4-니트로페닐)벤즈아미드

실시예 12

6,7-디플루오로-3-(2-메톡시-4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e][1,3] 옥사진-4-온

실시예 13

6-플루오로-3-(2-메톡시-4-니트로페닐)-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3] 옥사진-4-온

실시예 14

3-(4-아미노-2-메톡시페닐)-6-플루오로-7-(메틸아미노)2,3-디히드로[e][1,3]옥사진-4-온

실시예 15

1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)-3-메톡시페닐)우레아

2-(클로로카르보닐)-4,5-디플루오로페닐 아세테이트 (실시예 1) 및 2-메톡시-4-니트로벤젠아민으로 실시예 1에 기술된 것과 유사한 아미드 결합 공정을 수행하였다. 실시예 2에 기술된 바와 같이 파라포름알데히드를 사용하여 고리 사이클화를 수행하였다. 불소의 메틸 아민 대체는 실시예 3에 개략된 공정과 유사하게 수행하였다. 니트로기의 환원은 실시예 4에 개략된 공정을 이용하여 수행하였다. 설포닐우레아 우레아를 형성하기 위한 결합은 실시예 5에 기술된 방법을 이용하여 달성되어 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)-3-메톡시페닐)우레아를 제공하였다.

실시예 16

N-(2-(2-에톡시에톡시)-4-니트로페닐)-4,5-디플루오로-2-하이드록시벤즈아미드

실시예 17

3-(2-에톡시에톡시)-4-니트로페닐)-6,7-디플루오로-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온

실시예 18

6-플루오로-3-(2-에톡시에톡시-4-니트로페닐)-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조 [e][1,3]옥사진-4-온

실시예 19

3-(4-아미노-2-에톡시에톡시페닐)-6-플루오로-7-(메틸아미노)2,3-디히드로[e][1,3]옥사진-4-온

실시예 20

1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(3-(2-에톡시에톡시)-4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)페닐)우레아

2-(클로로카르보닐)-4,5-디플루오로페닐 아세테이트 (실시예 1) 및 2-(2-에톡시에톡시)-4-니트로벤젠아민으로 실시예 1에 기술된 것과 유사한 아미드 결합 공정을 수행하였다. 실시예 2에 기술된 바와 같이 파라포름알데히드를 사용하여 고리 사이클화를 수행하였다. 불소의 메틸 아민 대체는 실시예 3에 개략된 공정과 유사하게 수행하였다. 니트로기의 환원은 실시예 4에 개략된 공정을 이용하여 수행하였다. 설포닐우레아 우레아를 형성하기 위한 결합은 실시예 5에 기술된 방법을 이용하여 달성되어 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(3-(2-에톡시에톡시)-4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)페닐)우레아 를 제공하였다.

실시예 21

실시예 22

실시예 23

실시예 24

실시예 25

1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(3-(2-(디메틸아미노)에톡시)-4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3 (4H)-일)페닐)우레아

2-(클로로카르보닐)-4,5-디플루오로페닐 아세테이트 (실시예 1) 및 2-(2-(디 메틸아미노)에톡시)-4-니트로벤젠아민으로 실시예 1에 기술된 것과 유사한 아미드 결합 공정을 수행하였다. 실시예 2에 기술된 바와 같이 파라포름알데히드를 사용하여 고리 사이클화를 수행하였다. 불소의 메틸 아민 대체는 실시예 3에 개략된 공정과 유사하게 수행하였다. 니트로기의 환원은 실시예 4에 개략된 공정을 이용하여 수행하였다. 설포닐우레아 우레아를 형성하기 위한 결합은 실시예 5에 기술된 방법을 이용하여 달성되어 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(3-(2-(디메틸아미노)에톡시)-4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)페닐)우레아를 제공하였다.

실시예 26

(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)-2,6-디메틸페닐)우레아

2-(클로로카르보닐)-4,5-디플루오로페닐 아세테이트 (실시예 1) 및 3,5-디메틸-4-니트로벤젠아민으로 실시예 1에 기술된 것과 유사한 아미드 결합 공정을 수행하였다. 실시예 2에 기술된 바와 같이 파라포름알데히드를 사용하여 고리 사이클화를 수행하였다. 불소의 메틸 아민 대체는 실시예 3에 개략된 공정과 유사하게 수행하였다. 니트로기의 환원은 실시예 4에 개략된 공정을 이용하여 수행하였다. 설포닐우레아 우레아를 형성하기 위한 결합은 실시예 34에 기술된 DSC 방법을 이용하여 달성되어 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)-2,6-디메틸페닐)우레아를 제공하였다.

실시예 27

1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)-2-메톡시페닐)우레아

2-(클로로카르보닐)-4,5-디플루오로페닐 아세테이트 (실시예 1) 및 3-메톡시-4-니트로벤젠아민으로 실시예 1에 기술된 것과 유사한 아미드 결합 공정을 수행하 였다. 실시예 2에 기술된 바와 같이 파라포름알데히드를 사용하여 고리 사이클화를 수행하였다. 불소의 메틸 아민 대체는 실시예 3에 개략된 공정과 유사하게 수행하였다. 니트로기의 환원은 실시예 4에 개략된 공정을 이용하여 수행하였다. 설포닐우레아 우레아를 형성하기 위한 결합은 실시예 34에 기술된 방법을 이용하여 달성되어 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)-2-메톡시페닐)우레아를 제공하였다.

실시예 28

1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e] [1,3]옥사진-3(4H)-일)-2-(2-메톡시에톡시)페닐)우레아

2-(클로로카르보닐)-4,5-디플루오로페닐 아세테이트 (실시예 1) 및 3-(2-메톡시에톡시-4-니트로벤젠아민으로 실시예 1에 기술된 것과 유사한 아미드 결합 공정을 수행하였다. 실시예 2에 기술된 바와 같이 파라포름알데히드를 사용하여 고 리 사이클화를 수행하였다. 불소의 메틸 아민 대체는 실시예 3에 개략된 공정과 유사하게 수행하였다. 니트로기의 환원은 실시예 4에 개략된 공정을 이용하여 수행하였다. 설포닐우레아 우레아를 형성하기 위한 결합은 실시예 34에 기술된 DSC 방법을 이용하여 달성되어 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)-2-(2-메톡시에톡시)페닐)우레아를 제공하였다.

실시예 29

N-(4-메톡시벤질)-4,5-디플루오로-2-하이드록시벤즈아미드

피리딘 (2 mL)중의 4,5-디플루오로-2-하이드록시벤조산 (1 g, 6 mmol, US0061666246) 용액에 아세트산 무수물 (0.8 mL, 7 mol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 2hr 동안 교반하였다. 여기에 10% HCl (10 mL)을 첨가하고, 아세테이트 중간체를 에틸 아세테이트로 추출하였다. 에틸 아세테이트를 증발시키고, 잔류물을 디클로로메탄 (10 mL)중에 용해시켰다. 이 용액에 옥살릴 클로라이드 (1 mL) 및 몇 방울의 디메틸포름아미드를 첨가하고, lhr 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 산성 클로라이드를 디클로로메탄 (10mL)중에 재용해시키고, p-메톡시벤질아민 (0.855 mL, 6.5 mmol)의 디클로로메탄 용액 (10mL)에 서서히 첨가하였다. HPLC 결과 반응 혼합물은 2hr 후 새로운 피크를 나타내었으며, 출발 물질이 완전히 사라졌다. 디클로로메탄을 제거하고, 잔류물을 메탄올중에 용해시키고, 여기에 10% NaOH 수용액 (3 mL)을 첨가하고, 1hr 동안 혼합물을 교반하였다. 메탄올을 제거하고, 잔류물을 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 에틸 아세테이트 층을 건조시키고, 여과시키고 증발시켜 1.5g (85%)의 N-(4-메톡시벤질)-4,5-디플루오로-2-하이드록시벤즈아미드를 백색 고형물로서 수득하였다.

실시예 30

3-(4-메톡시벤질)6,7-디플루오르-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온

N-(4-메톡시벤질)-4,5-디플루오로-2-하이드록시벤즈아미드 (1.5 g, 5 mmol)의 톨루엔 용액 (25 mL)에 파라포름알데히드 (0.450 g, 15mmol) 및 파라-톨루엔설폰산 (0.01g, 0.05mmol)을 첨가하고, 물을 공비 제거하면서 반응물을 110℃로 3hr 동안 가열하였다. 포화된 중탄산나트륨 (50ml)을 첨가하고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수성 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 1.3g (86%)의 3-(4-메톡시벤질)6,7-디플루오르-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온을 제공하였다.

실시예 31

3-(4-메톡시벤질)6-플루오로-7-(메틸아미노)2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온

디메틸 설폭시드 (10m1)중의 3-(4-메톡시벤질)6,7-디플루오르-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (1.15 g, 3.7 mmol)에 메틸 아민 (2.5mL, 5mmol, 테트라히드로푸란중의 2M 용액)을 첨가하고, 반응물을 120℃로 lhr 동안 가열하였다. 물을 첨가하고, 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하고, 무수성 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 1g (85%)의 3-(4-메톡시벤질)6-플루오로-7-(메틸아미노)2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온을 제공하였다.

실시예 32

6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3] 옥사진-4-온

3-(4-메톡시벤질)6-플루오로-7-(메틸아미노)2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (1 g, 3.5 mmol)에 트리플루오로아세트산 (5 mL)을 첨가하고, 반응물을 80℃에서 4hr 동안 가열하였다. RP-HPLC에 의해 새로운 피크가 형성되었으며, SM 피크가 사라졌음을 확인하였다. 트리플루오로아세트산을 진공하에 제거하고, 잔류물을 에틸 아세테이트중에 현탁시키고, 포화된 중탄산나트륨 용액으로 세척하였다. 에틸 아세테이트를 건조시키고, 여과시키고 증발시키고, 디에틸 에테르로 분쇄하여 6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온을 회백색 고형물 (0.500 g, 72%)로서 제공하였다.

실시예 33

3-(3-(2-(디메틸아미노)에톡시)-4-니트로페닐)-6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온

방법 A: 치환된 4-플루오로니트로벤젠 사용

무수 디메틸포름아미드 (2 mL)중의 용액 6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (실시예 32) (54 mg, 0.27 mmol) 및 3-2-(5-플루오로-2-니트로페녹시)-N,N-디메틸에탄아민 (67.7 mg, 0.297 mmol, 1.1 eq)의 용액에 분말의 탄산 세슘 (0.351 g, 1.08 mmol, 4 eq)을 첨가하였다. 혼합물을 65-70℃에서 5hr 동안 강하게 교반시키고, 냉각시킨 후, 물을 첨가하고, 목적하는 생성물을 에틸아세테이트로 추출하였다. 이러한 미정제 잔류물을 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제하여 70 mg (65%)의 순수한 니트로-아릴 생성물을 제공하였다. RP-HPLC: 2.08 min; ES-MS (M+H)⁺ = 405;

실시예 34

1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(2-(2-(디메틸아미노)에톡시)-4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3-(4H)페닐)우레아

상기 니트로 중간체 (60 mg, 0.145 mmol)를 에틸 아세테이트 (2 mL)중의 10% Pd/C (26 mg, 0.024 mmol Pd) 및 1 atm H₂를 이용한 촉매적 수소화 조건하에 6hr 동안 환원시켜 50 mg (87%)의 3-(4-아미노-3-(2-(디메틸아미노)에톡시페닐)-6-플루오르-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온을 제공하였다. ES-MS (M+H)⁺ = 375.

디클로로메탄 (5 mL)중의 5-클로로티오펜-2-설폰아미드 (0.036g, 0.180 mmol) 및 N,N'-디숙시니미딜 카보네이트 (DSC, 0.050 g, 0.195 mmol)의 현탁액에 테트라메틸구아니딘 (TMG, 0.040 mL)을 첨가하였다. 생성 용액을 실온에서 15hr 동안 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 아세토니트릴 (3 mL)중의 3-(4-아미노-3-(2-(디메틸아미노)에톡시페닐)-6-플루오르-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1, 3]옥사진-4-온 (0.055 g, 0.15 mmol) 용액을 첨가하였다. 생성 용액을 70℃에서 9hr 동안 교반하였다. 반응물을 디클로로메탄으로 희석하고, 0.5N HCl로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시키고, 농축시켜 미정제 설포닐우레아를 제공하였다. 이를 HPLC (C-18)에 의해 정제하여 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(2-(2-(디메틸아미노)에톡시)-4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3-(4H)페닐 우레아 (44 mg, 50%)를 제공하였다.

실시예 35

실시예 36

실시예 37

실시예 33 (방법 A)에 기술된 것과 유사한 불소 대체 공정을 6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (실시예 32) 및 5-플루오로-N,N-디메틸-2-니트로벤즈아미드로 수행하였다. 실시예 4에 개략된 공정을 이용하여 니트로기의 환원을 수행하였다. 실시예 5에 기술된 방법으로 설포닐우레아 우레아를 형성하기 위한 결합을 달성하여 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(2-(디메틸카르바모일)-4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조 [e][1,3] 옥사진-3(4H)-일)페닐)우레아를 제공하였다.

실시예 38

실시예 39

실시예 33에 기술된 것과 유사한 불소 대체 공정을 6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (실시예 32) 및 5-플루오로-N,N-디메틸-2-니트로벤즈아미드로 수행하였다. 실시예 4에 개략된 공정을 이용하여 니트로기의 환원을 수행하였다. 실시예 5에 기술된 방법으로 설포닐우레아 우레아를 형성하기 위한 결합을 달성하여 1-(2-카르바모일-4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소 -2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)페닐)-3-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)우레아를 제공하였다.

실시예 40

방법 B: 치환된 4-할로아닐린 또는 5-할로-2-아미노피리딘 및 피리미딘 사용

디옥산 (1ml)중의 6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (0.05g, 0.25 mmol) 및 5-요오도피리딘-2-아민 (0.067g, 0.304mmol)에 인산칼륨 (0.08g, 0.377mmo1)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 5분 동안 탈기시키고, 여기에 트란스-디아미노 사이클로헥산 (0.004g, 0.03mmol) 및 이어서 구리 (I) 요오다이드 (0.006g, 0.03mmol)를 첨가하고, 혼합물을 100℃로 1시간 동안 가열하였다. 물을 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트 (3x10m1)로 추출하고, 무수성 황산나트륨으로 건조시키고 농축시켰다. 생성물을 추가로 역상 HPLC (C 18)로 정제하여 순수한 3-(6-아미노피리딘-3-일)-6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (0.017g, 23%)을 첨가하였다.

실시예 41

1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(5-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)피리딘-2-일)우레아

실시예 5에 기술된 설포닐우레아 우레아 형성법과 유사하게, 3-(6-아미노피리딘-3-일)-6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (0.017g, 0.058 mmol) 및 (5-클로로-티오펜-2-설포닐)-카르밤산 에틸 에스테르 (0.026g, 0.096mmol)를 결합시켜 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(5-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)피리딘-2-일)우레아 (0.007g, 24%)를 제공하였다.

실시예 42

1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(5-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e] [1,3]옥사진-3(4H)-일)-3-메틸피리딘-2-일)우레아

디옥산 (10 mL)에 5-브로모-3-메틸피리딘-2-아민 (2 g, 10.6 mmol), 요오드화나트륨 (3.2 g, 21.4 mmoL), 요오드화구리 (0.190 g, 1.06 mmol)를 첨가하고, 용액을 탈기시킨 후 테트라메틸에탄-1,2-디아민 (0.803 mL, 1.06 mmol)을 첨가하고, 이 혼합물을 밤새 110℃에서 가열하였다. 냉각 후, 물을 첨가하고, 미정제 생성물을 에틸 아세테이트로 추출하였다. 잔류물을 칼럼 크로마토그래피에 의해 정제하여 5-요오도-3-메틸피리딘-2-아민을 베이지색 고형물 (2.3 g, 93%)로서 제공하였다.

실시예 40에 기술된 공정과 유사하게, 6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (0.100 g, 0.51 mmol) 및 5-요오도-3-메틸피리딘-2-아민 (0.119g, 0.53mmol)를 결합시키고, 역상 HPLC 정제 후 순수한 3-(6-아미노피 리딘-3-일)-6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (0.020g, 13%)을 수득하였다. ES-MS (M+H)⁺ = 303.

실시예 5에 기술된 설포닐우레아 우레아 형성법과 유사하게, 3-(6-아미노-5-메틸피리딘-3-일)-6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (0.010g, 0.034 mmol) 및 (5-클로로-티오펜-2-설포닐)-카르밤산 에틸 에스테르 (0.048g, 0.166mmol)를 결합시켜 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(5-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)-3-메틸피리딘-2-일)우레아 (0.016g, 85%)를 제공하였다.

실시예 43

1 -(5-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)피리딘-2 -일)-3-(5-메틸티오펜-2-일설포닐)우레아

실시예 5에 기술된 설포닐우레아 우레아 결합법과 유사하게, 3-(6-아미노피 리딘-3-일)-6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온을 에틸 5-메틸티오펜-2-일설포닐카르바메이트와 결합시켜 1-(5-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)피리딘-2-일)-3-(5-메틸티오펜-2-일설포닐)우레아를 수득하였다.

실시예 44

1-(5-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)피리딘-2-일)-3-(5-메톡시티오펜-2-일설포닐)우레아

실시예 5에 기술된 설포닐우레아 우레아 결합법과 유사하게, 3-(6-아미노피리딘-3-일)-6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온을 3-메톡시-5-메틸티오펜-2-일설포닐카르바메이트와 결합시켜 1-(5-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e] [ 1,3]옥사진-3 (4H)-일)피리딘-2-일)-3-(5-메톡시티오펜-2-일설포닐)우레아를 수득하였다.

실시예 45

1-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)-3-(5-메톡시티오펜-2일설포닐)우레아

실시예 34에 기술된 설포닐우레아 우레아 형성법과 유사하게, 5-메톡시티오펜-2-설폰아미드를 3-(4-아미노-3-(4-아미노페닐)-6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온과 결합시켜 미정제 설포닐우레아를 제공하였다. 이를 HPLC (C-18)에 의해 정제하여 1-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)-3-(5-메톡시티오펜-2일설포닐)우레아 (100mg, 45%)을 제공하였다.

실시예 46

1-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][l,3]옥사진-3(4H)-일)-3-(5-메틸티오펜-2일설포닐)우레아

실시예 5에 기술된 설포닐우레아 우레아 형성법과 유사하게, 3-(4-아미노페닐)-6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (실시예 4)을 5-메틸-티오펜-2-설포닐-카르밤산 에틸 에스테르와 결합시켜 1-(5-메틸티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)페닐)우레아를 수득하였다.

실시예 47

5-클로로-4-플루오로-2-하이드록시-N-(4-니트로페닐)벤즈아미드

디옥산 (2 mL)중의 4-플루오로-2-하이드록시벤조산 (1 g, 6.14 mmol, 2,4-디플루오로벤조산으로부터 공지된 방법으로 합성, US Patent 6,166,246) 용액에 설푸릴 클로라이드 (2.5 mL, 5 equiv)의 디클로로메탄 용액 (5 mL)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 24hr 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, 4-플루오로-5-클로로살리실산을 백색 고형물 (1.2 g, 98%)로서 수집하였다. 고형물을 디클로로메탄 첨가된 피리딘 (2.5 mL, 5 equiv) 및 이어서 아세트산 무수물 (1.14 mL, 12.07 mmol)에 현탁시키고, 반응물을 실온에서 1hr 동안 교반하였다. 여기에 10% HCl을 첨가하고, 목적하는 아세테이트를 디클로로메탄으로 추출하였다. 디클로로메탄을 건조시키고 (MgSO4), 여과하고, 증발시켜 아세테이트를 회백색 고형물로서 제공하였다. 아세테이트 (0.275 g, 1.18 mmol)의 디클로로메탄 용액 (5 mL)에 옥살릴 클로라이드 (0.258 mL, 2.96 mmol) 및 몇 방울의 디메틸포름아미드를 첨가하고, lhr 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 산성 클로라이드를 디클로로메탄 (10mL)중에 재용해시키고, p-니트로아닐린 (0.163 g, 1.18 mmol)의 디클로로메탄 용액 (10mL)에 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물은 2hr 후 HPLC에 의해 새로운 피크가 관찰되었으며, 출발 물질이 완전히 사라졌음이 확인되었다. 디클로로메탄을 제거하고, 잔류물 (0.300 g, 0.851 mmol)을 메탄올중에 용해시키고, 여기에 고형의 탄산칼륨 (58 mg, 0.5 eq)을 첨가하고, 1hr 동안 혼합물을 교반하였다. 메탄올을 제거하고, 잔류물을 산성화시키고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 에틸 아세테이트 층을 건조시키고, 여과시키고 증발시켜 200 mg (77%)의 5-클로로-4-플루오로-2-하이드록시-N-(4-니트로페닐)벤즈아미드를 황갈색 고형물로서 수득하였다. RP-HPLC: 3.0 min; ES-MS (M+H)⁺ = 311.

실시예 48

6-클로로-7-플루오로-3-(4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조 [e][1,3]옥사진-4-온

실시예 2의 고리 사이클화 공정과 유사하게, 4-플루오로-5-클로로-2-하이드록시-N-(4-니트로페닐)벤즈아미드 (0.13 g, 0.44 mmol)를 파라포름알데히드 (0.3 g, lOmmol) 및 파라-톨루엔설폰산 (0.01g, 0.05mmol)으로 처리하여 0.11mg (81%)의 6-클로로-7-플루오로-3-(4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온을 제공하였다.

실시예 49

6-클로로-7-(메틸아미노)-3-(4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온

실시예 3에 유사하게, 메틸 아민 대체를 6-클로로-7-플루오로-3-(4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (0.21 g, 0.16 mmol) 및 메틸 아민 (0.3m1, 테트라히드로푸란중의 2M 용액)을 수행하여 0.134mg (81%)의 6-클로로-7-(메틸아미노)-3-(4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온을 제공하였다.

실시예 50

3-(4-아미노페닐)-6-클로로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온

Ar 하에 에틸 아세테이트 (6 mL)중의 6-클로로-7-(메틸아미노)-3-(4-니트로페닐)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (0.108 g, 0.33 mmol) 현탁액에 10% Pt(S)/C (0.04 g)을 첨가하였다. 혼합물을 밤새 1atm H2에서 수소화시키고, 셀라이트를 통해 여과시키고 농축시켜 0.096 g (98%)의 3-(4-아미노페닐)-6-플루오로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온을 제공하였다.

실시예 51

1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-클로로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)페닐)우레아

실시예 5에 기술된 설포닐우레아 형성법과 유사하게, 3-(4-아미노페닐)-6-클로로-7-(메틸아미노)-2,3-디히드로벤조[e][1,3]옥사진-4-온 (실시예 47) (44 mg, 0.15 mmol) 및 (5-클로로-티오펜-2-설포닐)-카르밤산 에틸 에스테르 (59 mg, 0.22 mmol)를 결합시켜 1-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-3-(4-(6-클로로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)페닐)우레아를 제공하였다.

실시예 52

4-(4,5-디플루오로-2-하이드록시벤즈아미도)벤조에이트

실시예 1에 기술된 방법과 유사하게, 2-(클로로카르보닐)-4,5-디플루오로페닐 아세테이트 (0.2g, 0.85mmol) 및 메틸 4-아미노벤조에이트 (0.174g, 1.lmmol)를 결합시켜 메틸 4-(4,5-디플루오로-2-하이드록시벤즈아미도)벤조에이트 (0.186g, 64%)를 수득하였다. RP-HPLC: 2.61 min; ES-MS (M+H)⁺ = 308.0.

실시예 53

메틸 4-(6,7-디플루오로-4-옥소-2H-벤조[e][l,3]옥사진-3(4H)-일)벤조에이트

실시예 2에 기술된 방법과 유사하게, 4-(4,5-디플루오로-2-하이드록시벤즈아미도)벤조에이트 (0.08g, 0.25mmol) 및 파라포름알데히드 (0.250g, 9mmol)를 반응시켜 메틸 4-(6,7-디플루오로-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)벤조에이트 (0.078g, 93%)를 제공하였다.

실시예 54

메틸 4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)벤조에이트

실시예 3에 기술된 방법과 유사하게, 4-(6,7-디플루오로-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)벤조에이트 (0.1g, 0.31mmol)를 메틸아민 (0.8m1, THF중 2M, 1.2mmol)과 반응시켜 메틸 4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)벤조에이트 (0.092g, 88%)를 제공하였다.

실시예 55

4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)일)벤조산

메틸 4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)벤조에이트 (0.05g, 0.15mmol)를 디옥산 (2m1)중에 용해시키고, 여기에 물 (0.5m1)중의 수산화나트륨 (0.012g, 0.3mmol)을 첨가하고, 혼합물을 4hr 동안 실온에서 교반하였다. 용매를 진공하에 제거하고, 잔류물을 산성화시키고, 에틸 아세테이트 (2x10ml)로 추출하고, 무수성 황산나트륨으로 건조시키고 농축시켜 4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)벤조산 (0.02g, 41%)을 제공하였다. RP-HPLC: 1.8 min; ES-MS (M+H)⁺ = 317.0.

실시예 56

N-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일) 벤즈아미드

메틸렌 클로라이드 (2m1)중의 4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)벤조산 (0.02g, 0.063mmol)에 1-[3-(디메틸아미노)프로필]-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드 (0.013g, 0.068mmol), N,N-디메틸피리딘-4-아민 (0.008g, 0.068mmol) 및 이어서 5-클로로티오펜-2-설폰아미드 (0.014g, 0.07mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 8hr 동안 교반하였다. 용매를 제거하고, 생성물을 HPLC (C18)로 정제하여 N-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일) 벤즈아미드 (0.005g, 15%)를 제공하였다.

실시예 57

N-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)-2-플루오로-4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)벤즈아미드

실시예 1에 기술된 방법과 유사하게, 2-(클로로카르보닐)-4,5-디플루오로페닐 아세테이트 (0.2g, 0.85mmol) 및 메틸-2-플루오로- 4-아미노벤조에이트 (0.174g, 1.1mmol)를 결합시켜 메틸 4-(4,5-디플루오로-2-하이드록시벤즈아미도)-2-플루오로벤조에이트 (0.186g, 64%)를 수득하였다. RP-HPLC: 2.61 min; ES-MS (M+H)⁺ = 326.0. 이러한 중간체를 포름알데히드와 사이클화시키고, 7-플루오로를 메틸아민으로 상기 방법과 유사하게 대체시켜 메틸 4-(6-플루오로-7-메틸아미노-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)벤조에이트를 제공하였다. 메틸 에스테르를 실시예 55에 기술된 바와 같이 가수분해한 후, 실시예 56에 기술된 바와 같이 5-클로로티오펜-2-설폰아미드와 결합시켰다. 용매를 제거하고, 생성물을 HPLC (C18)로 정제하여 N-(5-클로로티오펜-2-일설포닐)2-플루오로-4-(6-플루오로-7-(메틸아미노)-4-옥소-2H-벤조[e][1,3]옥사진-3(4H)-일)벤즈아미드 (0.005g, 15%)를 제공하였다.

실시예 58

3-(2-메톡시에톡시)-4-니트로벤젠아민

4 ml 무수 THF중의 2-메톡시-에탄올 용액에 tert-부톡시드 (378mg, 3.37 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 생성 혼합물을 5 ml 건조 THF중의 2,4-디플루오로-1-니트로-벤젠 (536 mg, 3.37 mmol) 용액에 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반하고, 에틸 아세테이트로 희석하고, 염수로 세척하였다. 유기층을 혼합하고, 진공하에 농축시켜 4-플루오로-2-(2-메톡시-에톡시)-1-니트로-벤젠을 제공하였다. 4-플루오로-2-(2-메톡시-에톡시)-1-니트로-벤젠 (1.35g, 6.3 mmol)을 디메틸 설폭시드중의 p-메톡시벤질아민 (1.64 mL, 12.6 mmol)으로 80℃의 밀봉된 튜브 에서 4hr 동안 처리하였다. 에틸 아세테이트 및 물로 추출 후, N-(4-메톡시벤질)3-(2-메톡시에톡시)-4-니트로벤젠아민 중간체를 분리하였다. RP-HPLC: 2.13 min; ES-MS (M+H)⁺ = 346; 이러한 중간체에 트리플루오로아세트산을 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 1hr 동안 가열하여 p-메톡시벤질 작용기를 탈보호하여 최종 생성물 3-(2-메톡시에톡시)-4-니트로벤젠아민을 제공하였다.

실시예 59

2-(5-플루오로-2-니트로페녹시)-N,N-디메틸에탄아민

2-(5-플루오로-2-니트로페녹시)-N,N-디메틸에탄아민을 2-디메틸아미노-에탄올로부터 실시예 58에 기술된 공정을 이용하여 수득하였다.

실시예 60

약리학적 검정

본 발명에 따른 각 화합물의 약리학적 활성을 하기 실험관내 검정으로 측정하였다.

I. 실험관내 ADP-매개된 혈소판 응집의 억제

ADP-유도 인간 혈소판 응집에 대한 본 발명의 화합물의 효과는 바람직하게는 96-웰 마이크로역가 검정에서 평가되었다 (일반적으로 문헌 [Jantzen, H.M. et al. (1999) Thrornb. Hemost. 81:111-117]의 공정 참조). 인간 정맥을 건강하고 약물복용이 없는 자원자로부터 PGI₂ (1.6μM PGI₂/10ml 혈액을 함유하는 1.25ml ACD; PGI₂는 Sigma, St.Louis, MO로부터 입수)를 함유하는 ACD (85mM 나트륨 시트레이트, 111mM 글루코오스, 71.4mM 시트르산)로 수집하였다. 혈소판-풍부 혈장 (PRP)을 20분 동안 실온에서 160 x g로 원심분리하여 제조하였다. 세척된 혈소판은, 10분 동안 730 x g에서 PRP를 원심분리하고, 혈소판 펠렛을 1U/ml 아피라아제 (grade V, Sigma, St.Louis, MO)를 함유하는 CGS (13mM 나트륨 시트레이트, 30mM 글루코오스, 120mM NaCl; 2ml CGS/10ml 원래의 혈액 부피)중에 재현탁시킴으로써 제조하였다. 15분 동안 37℃에서 인큐베이션시킨 후, 730 x g로 10분 동안 원심분리하여 혈소판을 수집하고, 0.1% 소태 혈청 알부민, 1mM CaCl₂ 및 1mM MgCl₂를 함유하는 헤페스-티로드 완충액 (Hepes-Tyrode's beffer: 10mM Hepes, 138mM NaCl, 5.5mM 글루코오스, 2.9mM KCl, 12mM NaHCO₃, pH 7.4)중에 3x10⁸ 혈소판/ml의 농도로 재현탁시켰다. 이러한 혈소판 현탁액을 응집 검정에 사용하기 전에 37℃에서 45분 초과로 유지하였다.

ADP-의존성 응집 억제를 바람직하게는 96-웰 평평한 바닥 마이크로역가 플레이트에서 마이크로역가 플레이트 쉐이커(microtiter plate shaker) 및 문헌[Frantantoni et al., Am. J. Clin. Patrol. 94: 613 (1990)]에 설명된 과정과 유사한 플레이트 리더(plate reader)를 사용하여 검정하였다. 모든 단계를 상온에서 수행하였다. 헤페스티로드 완충액/0.1% BSA중의 0.2 mL/웰의 총 반응 부피는 0.6% DMSO중에 4.5 x 10⁷ 아피라아제-세척된 혈소판, 0.5mg/ml 인간 피브리노겐 (American diagnostica, Inc., Greenwich, CT), 시험 화합물의 계열 희석(대조 웰에 대해서는 완충액)을 포함한다. 약 5분 실온에서 사전인큐베이션시킨 후에, ADP를 2μM 최종 농도가 되도록 첨가하였으며, 이는 준최대 응집을 유도한다. 완충액을 ADP 대신에 대조군 웰(ADP^-대조군)의 한 세트에 첨가하였다. 샘플의 OD를 그 다음에 650 nm에서 마이크로역가 플레이트 리더(캐나다 멘로 파크(Menlo Park) 몰레큘러 디바이스(Molecular Devices)의 소프트맥스)를 사용하고 0분 판독하여 검정하였다. 그 플레이트를 그 다음에 5분 동안 마이크로역가 플레이트 쉐이커에서 진탕시키고 플레이트 리더에서 5분 판독을 달성하였다. 응집은 t=0일 때에 비하여 t=5 일 때 650 nm에서 OD 감소로부터 검정하였고, 비응집된 대조군 샘플에서 변화량을 수정한 후 ADP 대조군 샘플 내 감소 %로 표현된다.

혈소판으로의 [ ³ H]2-MeS-ADP의 결합 억제

먼저 본 발명에 따른 화합물이 상기 검정으로 ADP-의존성 혈소판 응집을 억제한다는 것을 결정하였고, 두 번째 검정은 그러한 억제가 혈소판 ADP 수용체와 상호작용에 의해 매개되는지를 결정하기 위해 사용된다. 두 번째 검정을 사용하여, [³H]2-MeS-ADP 와 전체 혈소판의 결합에 대하여 이러한 화합물의 억제 능력이 결정된다. [³H]2-MeS-ADP 결합 실험은 일상적으로 병원 혈액 은행에서 표준 과정에 의해 수집된 폐기된(outdated) 인간 혈소판으로 수행된다. 아피라아제-세척 폐기된 혈소판은 하기와 같이 제조된다(달리 언급된 바가 없다면 모든 단계는 상온에서 진행된다).

폐기된 혈소판 현탁액을 1 부피의 CGS로 희석시키고 45 분 동안 1900 x g에서 원심분리에 의해 펠렛(pellet)화 하였다. 혈소판 펠렛을 1 U/ml 아피라아제 (V 등급, Sigma, St.Louis, MO)을 함유하는 CGS에서 3-6 x 10⁹ 혈소판/ml로 재현탁시키고 15분 동안 37℃에서 인큐베이션시켰다. 20분 동안 730 x g로 원심분리 후, 펠렛을 6.66x10⁸ 혈소판/ml 농도로 0.1% BSA (Sigma, St.Louis, MO)을 함유하는 헤페스-티로드 완충액에서 재현탁시켰다. 결합 실험을 혈소판을 45분을 초과하여 정지시킨 후에 수행하였다.

대안적으로, 결합 실험을 상기 항목 I.(시험관 내 ADP-매개 혈소판 응집 억제)에서 설명된 것과 같이 준비된 신선한 인간 혈소판으로 수행하였으며, 다만 혈소판을 6.66x10⁸ 펠렛/ml 농도로 0.1% BSA (Sigma, St.Louis, MO)을 함유하는 헤페 스-티로드의 완충액에서 재현탁시키는 것은 예외이다. 매우 유사한 결과를 신선한 혈소판 및 폐기된 혈소판으로 수득하였다.

삼중수소화 잠재 길항제 리간드 [³H]2-MeS-ADP (Jantzen, H.M. et al. (1999) Thromb. Hemost. 81: 111-117)를 사용하는 혈소판 ADP 수용체 결합 검정이 96-웰 마이크로역가 형식에 조화시켰다. 0.1 % BSA를 가진 0.2 ml 헤페스-티로드의 완충액 및 0.6% DMSO의 검정 부피에서, 1 x lO⁸아피라제-세척된 혈소판을 96-웰 평평한 바닥 마이크로역가 플레이트에서 5분 동안 시험 화합물의 계열 희석으로 lnM [³H]2-MeS-ADP ([³H]2-메틸티오아데노신-5'-디포스페이트, 암모늄 염; 특이활성도 48-49 Ci/mmole, 애머샴 라이프 사이언스 인크(Amersham Life Science, Inc.), 알링톤 하이트, IL 또는 NEN 라이프 사이언스 프로덕트(NEN Life Science Products), 보스턴, MA로부터 통상 합성에 의해 수득됨)의 첨가 전에 사전인큐베이션시켰다. 총 결합을 시험 화합물의 부재시에 결정하였다. 비특이적 결합에 대한 샘플은 10^-5 M의 표지되지 않은 2-MeS-ADP (RBI, Natick, MA)를 함유한다. 15분 동안 상온에서 인큐베이션 후에, 비결합 방사리간드를 빠른 여과 및 96-웰 세포 수집기(미니디스크(Minidisc) 96, 스카트론 인스트루먼트(Skatron Instruments), 스테링(Sterling), VA) 및 8x12 GF/C 유리섬유 필터 매트(glassfiber filtermats) (Printed Filtennat A, for 1450 Microbeta, Wallac Inc. , Gaithersburg, MD)을 사용하는 차가운(4-8℃) 결합 세척 완충액(Binding Wash Buffer) (10 mM Hepes pH 7.4, 138 mM NaCI)로 2회 세척에 의해 분리하였다. 필러매트상에서 혈소판-결합 방사능을 신틸레이션 카운터(scintillation counter) (마이크로베타(Microbeta) 1450, 왈락 인크(Wallac Inc.), 가이테르스버그(Gaithersburg), MD)로 검정하였다. 특이적 결합을 총 결합으로부터 비특이적 결합의 감산으로 검정하였고, 시험 화합물의 존재 하에서 특이적 결합은 시험 화합물 희석의 부재 하에서 특이 결합의 %로 표현되었다.

표 1

ARB 및 PRP 검정에서 합성된 화합물의 활성

하기 표에서, PRP 검정에서 활성은 다음과 같이 제시된다: +++, IC₅₀ < 10 μM; ++, 10μM < IC₅₀ < 30μM; +, IC₅₀ > 30μM. ARB 검정에서의 활성은 다음과 같이 제시된다: +++, IC₅₀ <0.05μM, ++, 0.05μM <IC₅₀<0.5μM; +, IC₅₀>0.5μM.

앞선 검토, 구체예 및 실시예는 단지 특정 바람직한 구체예의 상세한 설명을 제공하는 것으로 이해되어야 한다. 다양한 변형 및 균등물은 본 발명의 취지 및 범위로부터 벗어남 없이 만들어질 수 있음은 당업자에게 명백할 것이다. 상기에서 인용되고 검토된 모든 특허, 저널 내용 및 다른 서류는 본원에 참조문헌으로 인용되었다.

Claims

하기 화학식을 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:

상기 식에서,

R¹은 C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, 벤질 및 치환된 벤질로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며;

R²는 H 및 C_l-6 알킬로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며;

R³는 H, C_1-6 알킬, C_2-6알케닐, C_2-6 알키닐, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, C_1-6 할로알킬, C_l-6 하이드록시알킬, 할로겐, 시아노 및 -C(O)R^3a로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며, 여기서, R^3a는 H, 하이드록시, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시, 아미노, C_l-6 알킬아미노 및 디-C_l-6알킬아미노로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며;

R⁴는 H 및 C_1-6 알킬로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며;

R⁵는 H, C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, 벤질, 아릴, C_1-6 알킬-N-(R^5a)₂; C_1-6알킬-O-(R^5a)로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며; 여기서 각각의 R^5a는 H 및 C_1-6 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택된 구성원이며, 선택적으로, 질소 원자에 부착된 두개의 R^5a기는 질소 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘 또는 모르폴린 고리를 형성하며;

Ar은 벤젠, 피리딘, 피라진 및 피리미딘으로 구성된 군으로부터 선택된 방향족 고리를 나타내며, 이들 각각은 1 내지 2개의 R⁶치환체로 치환되거나 비치환되며,

여기서 각각의 R⁶는 독립적으로 할로겐, 시아노, 하이드록시, C_l-6 알킬, C_2-6 알케닐, C_2-6 알키닐, C_l-6 알콕시, C_l-6 할로알킬, C_1-6 할로알콕시, C_3-5 사이클로알킬-알콕시, 아미노, C_l-6 알킬아미노, 디-C_l-6 알킬아미노, -C(=NR^6a)-N(R^6b)₂, -C(O)R^6a, -O(CH₂)_mOR^6b, -(CH₂)_mOR^6b, -O(CH₂)_mN(R ^6b )₂ 및 -(CH₂)_mN(R^6b)₂로 구성된 군으로부터 선택되며,

여기서 아랫첨자 m은 독립적으로, 1 내지 3의 정수이고, 각 R^6a는 독립적으로 H, 하이드록시, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시, 아미노, C_1-6 알킬아미노 및 디-C_l-6 알킬아미노로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이고, 각 R^6b는 독립적으로 H, C_1-4알킬 및 C_1-4 알카노일로 구성되는 군으로부터 선택된 구성원이고, 선택적으로 질소에 부착된 두 개의 R^6b 기는 질소 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘 또는 피페리딘 고리를 형성하며;

L은 결합 및 -NH-로 구성된 군으로부터 선택된 연결기이며;

R⁷은 H, 할로겐, 시아노, C_1-6알킬, C_2-6 알케닐, C_2-6 알키닐, C_1-6 알콕시 및 C_1-6 할로알킬로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이다.
제 1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물:

상기 식에서, 아랫첨자 n은 0 내지 2이다.
제 1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물:

상기 식에서, 아랫첨자 n은 0 내지 2이다.
제 1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물:

상기 식에서, 아랫첨자 n은 0 내지 2이다.
제 1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물:

상기 식에서, 아랫첨자 n은 0 내지 2이다.
제 2항에 있어서, n이 0 또는 1이고; R¹은 C_1-4 알킬, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, 또는 할로치환된 벤질이며; R²는 H이며; R³는 H, C_1-4 알킬, C_2-4 알케닐, C_2-4 알키닐, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5사이클로알킬-알킬, C_1-4 할로알킬, 시아노 또는 -C(O)R^3a이며; R⁴는 H 또는 C_1-4 알킬이며; R⁵는 H 또는 C_1-4 알킬, C_1-4 할로알킬, -CN, -C≡CH 또는 -CONH₂이며; R⁶은존재하는 경우, 할로겐, C_1-4 알킬, C_1-4 알콕시, C_3-5사이클로알킬-알콕시, -O(CH₂)_mOR^6b 및 -O(CH₂)mN(R^6b)₂로 구성된 군으로부터 선택되며, 여기서 아랫첨자 m은 1 또는 2이며, 각각의 R^6b는 독립적으로, H, C_1-4알킬 및 C_1-4알카노일로 구성된 군으로부터 선택되며; R⁷은 H, C_1-4 알킬 또는 할로겐인 화합물.
제 6항에 있어서, R¹이 C_1-4 알킬이며; R⁴는 H 또는 CH₃이며; R⁵는 H 또는 CH₃이며; R⁶은 존재하는 경우, 할로겐, C_1-4 알킬 및 C_1-4알콕시로 구성된 군으로부터 선택되고; R⁷은 할로겐 또는 C_l-4 알킬인 화합물.
제 7항에 있어서, R¹이 메틸이고; R⁴는 H이며; R⁵는 H 또는 CH₃이며; R⁷은 클로로이며, 티에닐 고리의 5번 위치에 부착되며; n은 0 또는 1이고, R⁶은 존재하는 경우, 할로겐, C_1-4 알킬, -OCH₂CH₂OH, -OCH₂CH₂OCH₃, -OCH₂OCH₃, -OCH₂CH₂OC(O)CH₃ 및 -O(CH₂)₂N(CH₃)₂로 구성된 군으로부터 선택되는 화합물.
제 1항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물:
제 1항에 있어서, 하기로 구성된 군으로부터 선택된 화합물:
약제학적으로 허용되는 담체 및 하기 화학식을 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 약제 조성물:

상기 식에서,

R¹은 C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, 벤질 및 치환된 벤질로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며;

R²는 H 및 C_l-6 알킬로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며;

R³는 H, C_1-6 알킬, C_2-6알케닐, C_2-6 알키닐, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, C_1-6 할로알킬, C_l-6 하이드록시알킬, 할로겐, 시아노 및 -C(O)R^3a로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며, 여기서, R^3a는 H, 하이드록시, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시, 아미노, C_l-6 알킬아미노 및 디-C_l-6알킬아미노로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며;

R⁴는 H 및 C_1-6 알킬로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며;

R⁵는 H, C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, 벤질, 아릴, C_1-6 알킬-N-(R^5a)₂; C_1-6 알킬-O-(R^5a)로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며; 여기서 각각의 R^5a는 H 및 C_1-6 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택된 구성원이며, 선택적으로, 질소 원자에 부착된 두개의 R^5a기는 질소 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘 또는 모르폴린 고리를 형성하며;

Ar은 벤젠, 피리딘, 피라진 및 피리미딘으로 구성된 군으로부터 선택된 방향족 고리를 나타내며, 이들 각각은 1 내지 2개의 R⁶치환체로 치환되거나 비치환되며,

여기서 각각의 R⁶는 독립적으로 할로겐, 시아노, 하이드록시, C_l-6 알킬, C_2-6 알케닐, C_2-6 알키닐, C_l-6 알콕시, C_l-6 할로알킬, C_1-6 할로알콕시, C_3-5 사이클로알킬-알콕시, 아미노, C_l-6 알킬아미노, 디-C_l-6 알킬아미노, -C(=NR^6a)-N(R^6b)₂, -C(O)R^6a, -O(CH₂)_mOR^6b, -(CH₂)_mOR^6b, -O(CH₂)_mN(R ^6b )₂ 및 -(CH₂)_mN(R^6b)₂로 구성된 군으로부터 선택되며,

여기서 아랫첨자 m은 독립적으로, 1 내지 3의 정수이고, 각 R^6a는 독립적으로 H, 하이드록시, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시, 아미노, C_1-6 알킬아미노 및 디-C_l-6 알킬아미노로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이고, 각 R^6b는 독립적으로 H, C_1-4알킬 및 C_1-4 알카노일로 구성되는 군으로부터 선택된 구성원이고, 선택적으로 질소에 부착된 두 개의 R^6b 기는 질소 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘 또는 피페리딘 고리를 형성하며;

L은 결합 및 -NH-로 구성된 군으로부터 선택된 연결기이며;

R⁷은 H, 할로겐, 시아노, C_1-6알킬, C_2-6 알케닐, C_2-6 알키닐, C_1-6 알콕시 및 C_1-6 할로알킬로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이다.
제 11항에 있어서, 상기 화합물이 하기로 구성된 군으로부터 선택된 화학식을 갖는 약제 조성물:

상기 식에서, 아랫첨자 n은 0 내지 2의 정수이다.
제 12항에 있어서, n이 0 또는 1이고; R¹은 C_1-4 알킬, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, 또는 할로치환된 벤질이며; R²는 H이며; R³는 H, C_1-4 알킬, C_2-4 알케닐, C_2-4 알키닐, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5사이클로알킬-알킬, C_1-4 할로알킬, 시아노 또는 -C(O)R^3a이며; R⁴는 H 또는 C_1-4 알킬이며; R⁵는 H 또는 C_1-4 알킬, C_1-4 할로알킬, -CN, -C≡CH 또는 -CONH₂이며; R⁶은존재하는 경우, 할로겐, C_1-4 알킬, C_1-4 알콕시, C_3-5사이클로알킬-알콕시, -O(CH₂)_mOR^6b 및 -O(CH₂)mN(R^6b)₂로 구성된 군으로부터 선택되며, 여기서 아랫첨자 m은 1 또는 2이며, 각각의 R^6b는 독립적으로, H, C_1-4알킬 및 C_1-4알카노일로 구성된 군으로부터 선택되며; R⁷은 H, C_1-4 알킬 또는 할로겐인 약제 조성물.
제 13항에 있어서, R¹이 C_1-4 알킬이며; R⁴는 H 또는 CH₃이며; R⁵는 H 또는 CH₃이며; R⁶은 존재하는 경우, 할로겐, C_1-4 알킬 및 C_1-4알콕시로 구성된 군으로부터 선택되고; R⁷은 할로겐 또는 C_l-4 알킬인 약제 조성물.
제 14항에 있어서, R¹이 메틸이고; R⁴는 H이며; R⁵는 H 또는 CH₃이며; R⁷은 클로로이며, 티에닐 고리의 5번 위치에 부착되며; n은 0 또는 1이고, R⁶은 존재하는 경우, 할로겐, C_1-4 알킬, -OCH₂CH₂OH, -OCH₂CH₂OCH₃, -OCH₂OCH₃, -OCH₂CH₂OC(O)CH₃ 및 -O(CH₂)₂N(CH₃)₂로 구성된 군으로부터 선택되는 약제 조성물.
제 11항에 있이서, 상기 화합물이 하기로 구성된 군으로부터 선택된 약제 조성물:
치료학적 유효량의 하기 화학식의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 피검체에 투여하는 것을 포함하여, 피검체의 혈전증을 치료하는 방법:

상기 식에서,

R¹은 C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, 벤질 및 치환된 벤질로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며;

R²는 H 및 C_l-6 알킬로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며;

R³는 H, C_1-6 알킬, C_2-6알케닐, C_2-6 알키닐, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, C_1-6 할로알킬, C_l-6 하이드록시알킬, 할로겐, 시아노 및 -C(O)R^3a로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며, 여기서, R^3a는 H, 하이드록시, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시, 아미노, C_l-6 알킬아미노 및 디-C_l-6알킬아미노로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며;

R⁴는 H 및 C_1-6 알킬로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며;

R⁵는 H, C_1-6 알킬, C_1-6 할로알킬, 벤질, 아릴, C_1-6 알킬-N-(R^5a)₂; C_1-6 알킬-O-(R^5a)로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이며; 여기서 각각의 R^5a는 H 및 C_1-6 알킬로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택된 구성원이며, 선택적으로, 질소 원자에 부착된 두개의 R^5a기는 질소 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘 또는 모르폴린 고리를 형성하며;

Ar은 벤젠, 피리딘, 피라진 및 피리미딘으로 구성된 군으로부터 선택된 방향족 고리를 나타내며, 이들 각각은 1 내지 2개의 R⁶치환체로 치환되거나 비치환되며,

여기서 각각의 R⁶는 독립적으로 할로겐, 시아노, 하이드록시, C_l-6 알킬, C_2-6 알케닐, C_2-6 알키닐, C_l-6 알콕시, C_l-6 할로알킬, C_1-6 할로알콕시, C_3-5 사이클로알킬-알콕시, 아미노, C_l-6 알킬아미노, 디-C_l-6 알킬아미노, -C(=NR^6a)-N(R^6b)₂, -C(O)R^6a, -O(CH₂)_mOR^6b, -(CH₂)_mOR^6b, -O(CH₂)_mN(R ^6b )₂ 및 -(CH₂)_mN(R^6b)₂로 구성된 군으로부터 선택되며,

여기서 아랫첨자 m은 독립적으로, 1 내지 3의 정수이고, 각 R^6a는 독립적으로 H, 하이드록시, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시, 아미노, C_1-6 알킬아미노 및 디-C_l-6 알킬아미노로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이고, 각 R^6b는 독립적으로 H, C_1-4알킬 및 C_1-4 알카노일로 구성되는 군으로부터 선택된 구성원이고, 선택적으로 질소에 부착된 두 개의 R^6b 기는 질소 원자와 함께 아제티딘, 피롤리딘, 피페리딘 또는 피페리딘 고리를 형성하며;

L은 결합 및 -NH-로 구성된 군으로부터 선택된 연결기이며;

R⁷은 H, 할로겐, 시아노, C_1-6알킬, C_2-6 알케닐, C_2-6 알키닐, C_1-6 알콕시 및 C_1-6 할로알킬로 구성된 군으로부터 선택된 구성원이다.
제 17항에 있어서, 상기 화합물이 항혈소판 화합물, 항응고제, 섬유소용해제, 항염증 화합물, 콜레스테롤-저감제, 혈압저감제 및 세로토닌 차단제로부터 선택된 제 2 치료제와 함께 투여되는 방법.
제 18항에 있어서, 상기 제 2 치료제가 GPIIB-IIIa 길항제, 아스피린, 포스포디에스테라아제 III 억제제 및 트롬복산 A2 수용체 길항제로 구성된 군으로부터 선택된 항혈소판 화합물인 방법.
제 18항에 있어서, 상기 제 2 치료제가 트롬빈 억제제, 쿠마딘, 헤파린 및 로베녹스^®(Lovenox^®)로 구성된 군으로부터 선택된 항응고제인 방법.
제 18항에 있어서, 상기 제 2 치료제가 비스테로이드성 항염증제, 사이클로옥시게나아제-2 억제제 및 류마티스 관절염 제제로 구성된 군으로부터 선택된 항염증 화합물인 방법.
제 18항에 있어서, 상기 화합물이 경구 투여되는 방법.
제 17항에 있어서, 상기 화합물이 하기로 구성된 군으로부터 선택되는 방법:

상기 식에서, 아랫첨자 n은 0 내지 2의 정수이다.
제 23항에 있어서, n이 0 또는 1이고; R¹은 C_1-4 알킬, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5 사이클로알킬-알킬, 또는 할로치환된 벤질이며; R²는 H이며; R³는 H, C_1-4 알킬, C_2-4 알케닐, C_2-4 알키닐, C_3-5 사이클로알킬, C_3-5사이클로알킬-알킬, C_1-4 할로알킬, 시아노 또는 -C(O)R^3a이며; R⁴는 H 또는 C_1-4 알킬이며; R⁵는 H 또는 C_1-4 알킬, C_1-4 할로알킬, -CN, -C≡CH 또는 -CONH₂이며; R⁶은존재하는 경우, 할로겐, C_1-4 알킬, C_1-4 알콕시, C_3-5사이클로알킬-알콕시, -O(CH₂)_mOR^6b 및 -O(CH₂)mN(R^6b)₂로 구성된 군으로부터 선택되며, 여기서 아랫첨자 m은 1 또는 2이며, 각각의 R^6b는 독립적으로, H, C_1-4알킬 및 C_1-4알카노일로 구성된 군으로부터 선택되며; R⁷은 H, C_1-4 알킬 또는 할로겐인 방법.
제 24항에 있어서, R¹이 C_1-4 알킬이며; R⁴는 H 또는 CH₃이며; R⁵는 H 또는 CH₃이며; R⁶은 존재하는 경우, 할로겐, C_1-4 알킬 및 C_1-4알콕시로 구성된 군으로부터 선택되고; R⁷은 할로겐 또는 C_l-4 알킬인 방법.
제 25항에 있어서, R¹이 메틸이고; R⁴는 H이며; R⁵는 H 또는 CH₃이며; R⁷은 클로로이며, 티에닐 고리의 5번 위치에 부착되며; n은 0 또는 1이고, R⁶은 존재하는 경우, 할로겐, C_1-4 알킬, -OCH₂CH₂OH, -OCH₂CH₂OCH₃, -OCH₂OCH₃, -OCH₂CH₂OC(O)CH₃ 및 -O(CH₂)₂N(CH₃)₂로 구성된 군으로부터 선택되는 방법.
제 17항에 있이서, 상기 화합물이 하기로 구성된 군으로부터 선택되는 방법:
치료학적 유효량의 제 1항에 따른 화합물을 이의 약제학적으로 허용되는 염 과 함께 일차 허혈 발병을 겪은 환자에 투여하는 것을 포함하여, 이차 허혈 발병을 예방하는 방법.
제 28항에 있어서, 상기 일차 및/또는 이차 허혈 발병이 심근 경색, 안정 또는 불안정 협심증, 경피경혈관심장동맥확장술 후의 급성 재폐색, 재협착, 혈전 발작, 일과성 허혈 발작, 가역성 허혈 신경 결손 및 간헐성 파행으로부터 선택되는 방법.