KR20060058107A - 골 형성 촉진제 - Google Patents

골 형성 촉진제 Download PDF

Info

Publication number
KR20060058107A
KR20060058107A KR1020067002707A KR20067002707A KR20060058107A KR 20060058107 A KR20060058107 A KR 20060058107A KR 1020067002707 A KR1020067002707 A KR 1020067002707A KR 20067002707 A KR20067002707 A KR 20067002707A KR 20060058107 A KR20060058107 A KR 20060058107A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
lactoperoxidase
bone
promoting
bone formation
milk
Prior art date
Application number
KR1020067002707A
Other languages
English (en)
Other versions
KR101186090B1 (ko
Inventor
무츠미 모토우리
히로아키 마츠야마
요시카즈 모리타
아츠시 세리자와
히로시 가와카미
Original Assignee
유키지루시 뉴교 가부시키가이샤
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 유키지루시 뉴교 가부시키가이샤 filed Critical 유키지루시 뉴교 가부시키가이샤
Publication of KR20060058107A publication Critical patent/KR20060058107A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101186090B1 publication Critical patent/KR101186090B1/ko

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12YENZYMES
    • C12Y111/00Oxidoreductases acting on a peroxide as acceptor (1.11)
    • C12Y111/01Peroxidases (1.11.1)
    • C12Y111/01007Peroxidase (1.11.1.7), i.e. horseradish-peroxidase
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K20/00Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10Organic substances
    • A23K20/189Enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/19Dairy proteins
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/44Oxidoreductases (1)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

본 발명은 골아 세포의 분화를 촉진함으로써 골 형성을 촉진하는 골 형성 촉진제 및 골 형성 촉진용 식음료, 의약 또는 사료를 제공하는 것을 목적으로 한다.
락토페록시다제 및/또는 락토페록시다제를 트립신 등의 프로테아제로 분해한 분해물을 유효 성분으로 하는 골아 세포의 분화를 촉진함으로써 골 형성을 촉진하는 골 형성 촉진제, 및 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 배합한 골 형성 촉진용 식음료, 의약 또는 사료가 제공된다.

Description

골 형성 촉진제{OSTEOGENESIS PROMOTER}
본 발명은 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 유효 성분으로 하는 골 형성 촉진제에 관한 것이다. 또한, 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 배합한 골 형성 촉진용 식음료, 의약 또는 사료에 관한 것이다.
최근, 고령화에 따라, 골 다공증, 골절, 요통 등의 각종 골 질환이 증가하는 경향이 있다. 골 조직에서는, 끊임없이 골 형성과 골 흡수가 이루어지고, 젊을 때에는 골 형성과 골 흡수의 밸런스가 유지되지만, 나이가 듦에 따라 여러 가지의 원인으로 그 밸런스가 골 흡수 쪽으로 기운다(언커플링). 그리고, 이 상태가 장기간 계속되면 골 조직이 취약해져서, 골 다공증, 골절, 요통 등의 각종 골 질환을 발생시키게 된다. 이 언커플링을 방지할 수 있으면, 골 다공증, 골절, 요통 등의 각종 골 질환을 예방할 수 있을 것으로 생각된다.
종래부터, 언커플링을 방지하고, 각종 골 질환을 예방 또는 치료하는 방법으로서, (1) 식이에 의한 칼슘 보급, (2) 가벼운 운동, (3) 일광욕, (4) 약품 치료 등이 행해지고 있다. 식이에 의한 칼슘 보급에는 탄산칼슘, 인산칼슘 등의 칼슘염이나 난각, 어골분 등의 천연 칼슘제가 사용되고 있다. 그러나, 이것들은 반드시 경구 섭취에 적합한 소재라고는 할 수 없다. 가벼운 운동은 조깅이나 산책 등이 좋 다고 하지만, 몸이 약해져 있는 경우에는 가벼운 운동도 귀찮은 것인데, 하물며 누워지내는 노인으로서는 운동은 거의 불가능하다. 일광욕은 활성화 비타민 D3의 보급이라는 점에서는 좋다고 하지만, 이것만으로는 불충분하다. 약품 투여에는 1α-히드록시비타민 D3나 칼시토닌 제제 등이 사용되고 있고, 골 다공증의 치료에는 유효하다는 것이 알려져 있다. 그러나, 이들 물질은 의약 그 자체이며, 식품 소재로서 사용 가능한 것은 아니다.
한편, 본 발명자들은 식품 소재로서 사용 가능한 골 형성 촉진 작용이나 골 흡수 억제 작용을 갖는 물질을 얻기 위해, 젖 중에 존재하는 골 형성 촉진 인자 및 골 흡수 억제 인자를 계속 탐색해 왔다. 본 발명자들은 그 과정에서, 락토페록시다제가 골아 세포의 분화를 촉진함으로써 골 형성 촉진 작용을 갖는 것을 발견하였다. 골아 세포는 골 형성에서 중심적인 역할을 하고 있는 세포로, 골 조직 표면에 존재하고, 골 기질 단백질을 분비하고 있다. 이 골 기질 단백질에 인산칼슘의 결정이 침착하여 딱딱한 골 조직이 완성된다.
한편, 파골 세포는 조혈간 세포로부터 발생하고, 해면골 표면에 존재하며, 뼈를 용해하는 세포이다. 파골 세포가 골 기질을 용해하고(골 흡수), 그 후, 골아 세포가 골 기질을 합성함으로써, 골의 형성이나 성장(모델링), 대사(리모델링)가 일어난다고 생각되고 있다. 본원 발명은 락토페록시다제가 이 골 대사에 있어서 골 형성에서 중심적인 역할을 하고 있는 골아 세포의 분화를 촉진함으로써 골 형성 촉진 작용을 가지며, 또한 골 강화 작용을 갖는 것을 발견한 것이다.
락토페록시다제는 젖 중에 많이 존재하고, 힘철(heme iron)을 함유하는 분자 량 약 8 만의 당 단백질이다. 락토페록시다제 함량은 인유에 비해 우유 중에 많고, 인유 중에는 0.01 mg/100 ml 이하인데 반해, 우유 중에는 약 3 mg/100 ml이다. 또한, 락토페록시다제의 기능으로서는 과산화수소의 존재하에서, 여러 가지 물질을 산화한다. 즉, 티오시안산(SCN-)이 락토페록시다제에 의해 산화된 경우에 생기는 히포티오시아네이트(OSCN-)는 소정의 종류의 미생물의 증식을 저해한다. SCN-은 체내에서의 대사 산물이며, 통상 젖 중에 존재하고 있기 때문에, 과산화수소를 생산하는 미생물은 우유 중에서의 락토페록시다제에 의한 증식 저해를 받아 버린다. 이와 같이 락토페록시다제는 젖이 갖는 항균 작용의 하나로서 기능하고 있다고 생각되어, 락토페록시다제 시스템이라고도 불리우고 있다. 락토페록시다제의 이용에 대해서는, 발효유에 락토페록시다제를 배합함으로써, 제품의 유통 및 보존 중 과도한 신맛의 상승을 억제하고, 유통 기한을 통해서 적절한 신맛을 유지하는 기술(예컨대, 특허 문헌 1 참조), 노화 방지제(예컨대, 특허 문헌 2 참조), 저우식 영양 조성물(예컨대, 특허 문헌 3 참조), 동물의 피부병 치료제(예컨대, 특허 문헌 4 참조) 등이 알려져 있지만, 골아 세포 분화 촉진 작용을 갖는 것은 아직 명확해져 있지 않고, 골 강화의 목적으로는 이용되지 않는다.
젖의 골 강화 작용에 대해서, 본 출원인은 젖 중에 미량으로 밖에 존재하지 않는 염기성 단백질에 골아 세포 증식 촉진 작용, 골 강화 작용 및 골 흡수 억제 작용이 있는 것을 발견하여 특허 출원하였다(예컨대, 특허 문헌 5 참조). 그러나, 이 염기성 단백질 중에 함유되어 있는 락토페록시다제에 골 형성 촉진 작용이 있는 것은 알려져 있지 않다.
특허 문헌 1: WO 92/13064호 공보
특허 문헌 2: 일본 특허 공개 평5-124980호 공보
특허 문헌 3: 일본 특허 공개 평9-107917호 공보
특허 문헌 4: 일본 특허 공개 평7-233086호 공보
특허 문헌 5: 일본 특허 공개 평8-151331호 공보
발명의 개시
발명이 해결하고자 하는 과제
본 발명자들은 골아 세포 증식 촉진 작용, 골 강화 작용 및 골 흡수 방지 작용을 갖는 물질을 탐색하는 과정에서, 락토페록시다제가 골아 세포의 분화를 촉진함으로써 골 형성 촉진 작용 및 골 강화 작용을 갖는 것을 발견하였다. 그리고, 락토페록시다제의 분해물도 골아 세포의 분화를 촉진함으로써, 동일한 작용을 갖는 것을 발견하고, 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
따라서, 본 발명은 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 유효 성분으로 하는 신규 골 형성 촉진제를 제공하는 것을 과제로 한다. 또한, 본 발명은 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 배합하여 골 형성 촉진 작용을 부여한 식음료, 의약품 또는 사료의 제공을 과제로 한다.
골 다공증이라는 질병의 성질상, 일상의 식사 중에, 기호적으로도 문제없이 장기적·직접적으로 경구 섭취할 수 있고, 또한 직접적으로 골 형성 촉진 작용을 뼈에 부여하며, 골 다공증의 예방 또는 개선 치료 효과를 기대할 수 있는 골 형성 촉진제 및 골 형성 촉진용 식음료, 의약 또는 사료의 제공을 과제로 한다.
과제를 해결하기 위한 수단
락토페록시다제는 포유 동물의 젖으로부터 조제한다. 공급원으로서는 소, 물소, 사람, 돼지, 양, 염소, 말 등의 젖을 들 수 있다. 락토페록시다제는 공지의 물질로서, 이것을 제조하기 위해서는 공지의 방법, 예컨대 탈지유나 유청 등의 젖 원료를 양이온 교환 수지와 접촉시켜 염기성 단백질을 흡착시키고, 이를 0.1 내지 1.0 M의 염 농도로 용출시키며, 역침투(RO) 막이나 전기 투석(ED)법 등에 의해 탈염 및 농축하고, 필요에 따라서 건조시킴으로써 얻을 수 있다. 또한, 술폰화 담체를 이용하여 락토페록시다제를 정제하는 방법(일본 특허 공개 평3-109400호 공보)을 공업적으로 유리하게 이용할 수도 있다. 또한, 본원 발명에서는 유전자 공학적인 방법에 의해 생산된 락토페록시다제, 예컨대 국제 특허 출원 WO 91-06639호 명세서에 기재된 재조합 LPO 등도 사용할 수 있다. 또한, 락토페록시다제는 시판 제품도 있고, 시그마(Sigma)사 및 세더마(Sederma)사 등이 판매하고 있다.
락토페록시다제 분해물은 상기한 락토페록시다제를 트립신, 판크레아틴, 키모트립신, 펩신, 파파인, 칼리크레인, 카텝신, 서몰리신, V8 프로테아제 등의 단백질 분해 효소로 분해한 펩티드 혼합물로서, 분자량이 10,000 이하가 되도록 분해하는 것이 바람직하다.
발명의 효과
본 발명의 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 유효 성분으로 하는 골 형성 촉진제 및 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 배합한 골 형성 촉진용 식음료, 의약, 사료 등은 골아 세포의 분화를 촉진함으로써 골 형성 작용이 촉진되기 때문에, 골 강화 작용을 가지며, 또한 골 다공증 등의 각종 골 질환의 예방이나 개선에 유용하다. 또한, 본 발명의 골 형성 촉진제 및 골 형성 촉진용 식음료은 원료의 입수가 용이하고, 항상 일정한 품질을 얻을 수 있으며, 복잡한 공정을 필요로 하지 않고 저렴하게 제조할 수 있고, 또한 대량 조제할 수 있다고 하는 이점이 있다.
도 1은 골 다공증 래트에 본 발명의 실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제를 투여한 경우의 대퇴골 파단 응력의 대조(락토페록시다제 무첨가)와의 비교를 나타낸다.
발명을 실시하기 위한 최선의 형태
본 발명의 골 형성 촉진제를 투여할 때에는, 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 그대로의 상태로 이용할 수도 있지만, 필요에 따라, 통상의 방법에 따라서, 젖당, 전분 등으로 부형하고, 분말제, 과립제, 정제, 캡슐제로 하거나, 또는 드링크제 등에 제제화하여 이용할 수도 있다. 나아가서는, 이 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 우유, 유음료, 커피 음료, 쥬스, 젤리, 비스킷, 빵, 면, 소시지 등의 식음료에 배합하여, 골아 세포의 분화를 촉진함으로써 골 형성 촉진을 도모하는 것도 가능하다. 또한, 염화칼슘, 탄산칼슘, 젖산칼슘, 난각, 우유 유래의 칼슘 등의 흡수성이 양호한 칼슘제를 병용함으로써, 골 형성 촉진 작용을 한층 더 높일 수 있다. 또한, 이들 유효 성분을 사료에 함유시켜 가축이나 집에서 기르는 새 등의 골 형성을 촉진할 수도 있다.
골 형성 촉진 효과를 얻기 위해서는, 본 발명의 골 형성 촉진제, 및 골 형성 촉진용 식음료의 유효량으로서, 성인에 있어서, 고형물 환산으로 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 10 mg/일 이상, 경구 섭취하는 것이 바람직하다. 그리고, 골 형성 촉진제에는 고형물 환산으로 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 5 mg 내지 100 g/100 g, 골 형성 촉진용 식음료에는 고형물 환산으로 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 5 mg 내지 10 g/100 g 배합하는 것이 바람직하다.
이와 같이, 본 발명의 골 형성 촉진제를 섭취함으로써, 골아 세포의 분화를 촉진함으로써 골 형성이 촉진되고, 골 다공증 등의 각종 골 질환을 예방 또는 개선할 수 있다. 또한, 골 강화 작용도 확인되었다. 또한, 락토페록시다제는 원래 젖 유래의 성분이며, 래트에서의 급성 독성은 확인되지 않았다.
이하에 실시예 및 시험예를 나타내어, 본 발명에 대해서 보다 상세히 설명하지만, 이들은 단순히 예시하는 것일 뿐이며, 본 발명은 이들에 의해 전혀 한정되지 않는다.
실시예 1
양이온 교환 수지인 술폰화 키토펄(후지 보세키사제) 400 g을 충전한 컬럼(직경 5 cm×높이 30 cm)을 탈이온수로 충분히 세정한 후, 이 컬럼에 미살균 탈지유 40 l(pH 6.7)를 유속 25 ml/min으로 통과시켰다. 액을 통과시킨 후, 컬럼을 탈이온수로 충분히 세정하고, 1.5 M 염화나트륨을 함유하는 0.02 M 탄산 완충액(pH 7.0) 으로 용출시켰다. 그리고 락토페록시다제를 함유하는 용출 분획을 S-Sepharose FF 컬럼(아머샴 바이오 사이언스제)에 흡착시키고, 탈이온수로 충분히 세정하며, 10 mM 인산 완충액(pH 7.0)으로 평형화한 후, 0 내지 1 M NaCl의 직선 경사(liner gradient)로 흡착한 분획을 용출시켜, 락토페록시다제를 함유하는 분획을 회수하였다. 그리고 이 분획을 HiLoad 16/60 Superdex 75 pg(아머샴 바이오 사이언스제)를 이용한 겔 여과 크로마토그래피로 처리하여, 락토페록시다제 11 g을 얻었다. 또한, 이와 같이 하여 얻어진 락토페록시다제의 순도는 91 %이며, 그대로 골 형성 촉진제로서 사용 가능하다.
실시예 2
실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제 5 mg을 물 10 ml에 현탁하고, 최종 농도 0.01 중량%가 되도록 단백질 분해 효소인 트립신(시그마사제)을 첨가하고, 37℃에서 1 시간 효소 처리하였다. 그리고, 90℃에서 5 분간 가열 처리하여 효소를 불활성화한 후, 동결 건조하여 락토페록시다제 분해물 4.1 mg을 얻었다. 이와 같이 하여 얻어진 락토페록시다제 분해물을 겔 여과법으로 분석한 바, 이 락토페록시다제 분해물의 분자량은 10,000 이하인 것을 알 수 있었다.
시험예 1
실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제 및 실시예 2에서 얻어진 락토페록시다제 분해물에 대해서 골아 세포 분화 촉진 작용을 조사하였다. 즉, 인간 유래 전 골아 세포 MG63 세포를 10 % 우태아 혈청을 함유하는 DMEM 배지(플로우 래보래토리즈 사제)로 2×104/ml의 세포수로 96웰 플레이트에 파종하고, 5 % CO2 존재하, 37℃에서 4 일간 배양하여, 시험용 배양 세포로 하였다. 그리고, 배지를 1 % 우태아 혈청을 함유하는 배지로 교환하여, 실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제 용액을 최종 농도가 10, 및 100 ㎍/ml가 되도록, 또한 실시예 2에서 얻어진 락토페록시다제 분해물 용액(90℃에서 5 분간 가열 처리한 것과 미가열 처리한 것)을 최종 농도 100 ㎍/ml가 되도록 배지에 첨가하고, 37℃에서 5 일간 배양하였다. 배양 상청을 회수하고, Procollagen TypeI C-peptide EIA Kit(Takara MK 101)로 배양 상청중의 I형 콜라겐량을 측정함으로써 골아 세포 분화 촉진 활성을 조사하였다. 대조로서, 락토페록시다제 무첨가의 것을 이용하였다. 콜라겐량은 각각의 샘플의 I형 콜라겐 측정량의 대조인 I형 콜라겐 측정량에 대한 비율(%)로 나타내었다. 그 결과를 표 1에 나타낸다.
최종 농도 콜라겐량(%)
대조(무첨가) - 100±6
실시예 1 10 ㎍/ml 191±4
실시예1 100 ㎍/ml 188±6
실시예 2 100 ㎍/ml 191±13
실시예 2(미가열) 100 ㎍/ml 224±11
실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제 및 실시예 2에서 얻어진 락토페록시다제 분해물을 첨가한 군은 모두 대조(락토페록시다제 무첨가)군에 비해 I형 콜라겐량이 증가되어 있고, 골아 세포 분화 촉진 작용을 갖는 것을 알 수 있다.
또한, 락토페록시다제 분해물 쪽이, 락토페록시다제보다 I형 콜라겐량의 생산이 많아지는 경향이 있고, 보다 강한 골아 세포 증식 활성을 갖는 것을 알 수 있다.
시험예 2
실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제에 대해서, 동물 실험에 의해 골 강화 작용을 조사하였다. 동물 실험에는 4 주령의 SD계 암컷 래트를 이용하였다. 1 주간의 예비 사육 후, 난소 적출 수술을 실시한 후, 칼슘 결핍식으로 5 주간 사육하여 동물 실험에 제공하였다. 또한, 난소를 적출하고, 칼슘 결핍식으로 5 주간 사육한 래트는 명확하게 골 다공증 상태에 있었다.
이 골 다공증 상태를 야기한 래트를 1군 6 마리씩, 락토페록시다제 무첨가 대조군(A군), 락토페록시다제 1.0 중량% 투여군(B군)의 2 시험군으로 나누어, 각각 다음 표 2에 나타내는 시험 사료로 4 개월과 1 주간 사육하였다. 또한, 각 시험 사료의 질소 함량(17.06 %)이 동일해지도록 카세인으로 조정하였다. 또한, 각 시험 사료에 대해서는 100 g당, 칼슘 300 mg, 인 230 mg 및 마그네슘 50 mg을 배합하였다.
A군 B군
카세인 20.0 18.9(중량%)
옥수수 전분 15.0 15.0
셀룰로스 5.0 5.0
옥수수유 5.0 5.0
비타민 혼합물 1.0 1.0
미네랄 혼합물 2.65 2.65
자당 51.05 51.15
DL-메티오닌 0.3 0.3
락토페록시다제(실시예 1) - 1.0
4개월과 일주일 후, 각 시험군의 래트의 양측 대퇴골 및 경골을 적출하여, 대퇴골에 대해서는 골 파단력 측정 장치(레오미터·맥스 RX-1600형, 아이테크노제)로 골 강도를 측정하였다. 그 결과를 도 1에 도시한다. 이에 따르면, 대퇴골 파단 응력은 대조군(A군: LPO 첨가)에 비해, 락토페록시다제 투여군(B군: LPO)에서 높은 값을 나타냈다.
실시예 3
(골 형성 촉진제의 제조)
실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제 100 mg에, 함수 결정 포도당 93.4 g, 탄산칼슘 5 g, 당 에스테르 1 g, 향료 0.5 g을 첨가하고, 혼화한 후, 정제 형태로 타정하여, 본 발명의 골 형성 촉진제를 제조하였다.
실시예 4
(골 형성 촉진용 유음료의 제조)
실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제를 1 l당 1 g이 되도록 생유에 첨가하고, 균질 압력 120 kg/cm2로 균질화한 후, 75℃에서 15 초간 가열 살균하여, 본 발명의 골 형성 촉진용 유음료를 제조하였다.
실시예 5
(골 형성 촉진용 유음료의 제조)
실시예 2에서 얻어진 락토페록시다제 분해물을 1 l당 1 g이 되도록 생유에 첨가하고, 균질 압력 120 kg/cm2로 균질화한 후, 75℃에서 15 초간 가열 살균하여, 본 발명의 골 형성 촉진용 유음료를 제조하였다.
실시예 6
(골 형성 촉진용 음료의 제조)
실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제 40 g을 젖산으로 pH 3.2로 조정한 탈이온수 50 l에 용해한 후, 설탕 1 kg, 향료 10 g을 용해하여, 90℃에서 15 초간 가열 살균하였다. 이를 50 ml씩 덮개가 있는 유리병에 밀봉 충전하여, 본 발명의 골 형성 촉진용 음료를 제조하였다.
실시예 7
(골 형성 촉진용 비스킷의 제조)
실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제 0.005(중량%), 밀가루 50.0(중량%), 설탕 20.0(중량%), 식염 0.5(중량%), 마가린 12.5(중량%), 계란 12.1(중량%), 물 4.1(중량%), 탄산수소나트륨 0.1(중량%), 중탄산암모늄 0.2(중량%), 탄산칼슘 0.5(중량%)의 비율로 원료를 혼합하고, 반죽을 작성하여 성형한 후 구워 본 발명의 골 형성 촉진용 비스킷을 제조하였다.
실시예 8
(골 형성 촉진용 젤리의 제조)
실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제 0.0005(중량%), 과당 20.0(중량%), 그래뉴 당 15.0(중량%), 물엿 5.0(중량%), 한천 1.0(중량%), 향료 0.11(중량%), 칼슘 0.1(중량%), 물 58.79(중량%)의 비율로 원료를 혼합한 후, 용기에 충전하고, 가열 멸균하여,본 발명의 골 형성 촉진용 젤리를 제조하였다.
실시예 9
(골 형성 촉진용 가공 치즈의 제조)
실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제 0.005(중량%), 고다 치즈 43.0(중량%), 체다 치즈 43.5(중량%), 시트르산나트륨 2.0(중량%), 젖 유래 칼슘 1.0(중량%), 물 10.5(중량%)의 비율로 원료를 혼합한 후, 85℃에서 유화하여, 본 발명의 골 형성 촉진용 가공 치즈를 제조하였다.
실시예 10
(골 형성 촉진용 유아용 조제 분유의 제조)
실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제 0.001(중량%), 탈지유 75.61(중량%), 유청 단백질 농축물 2.36(중량%), 젖당 13.86(중량%), 미네랄 혼합물 0.32(중량%), 수용성 비타민 혼합물 0.32(중량%), 지용성 비타민을 함유하는 지방 7.53(중량%)의 비율로 원료를 혼합하여,본 발명의 골 형성 촉진용 유아용 조제 분유를 제조하였다.
실시예 11
(도그 푸드의 제조)
실시예 1에서 얻어진 락토페록시다제 0.001(중량%), 대두박 12.0(중량%), 탈지 분유 14.0(중량%), 대두유 4.0(중량%), 옥수수유 2.0(중량%), 팜유 28.0(중량%), 옥수수 전분 15.0(중량%), 밀가루 9.0(중량%), 왕겨(bran) 2.0(중량%), 비타민 혼합물 9.0(중량%), 미네랄 혼합물 2.0(중량%), 셀룰로스 3.0(중량%)의 비율로 원료를 혼합하여,본 발명의 골 형성 촉진용 개 사육용 사료(도그 푸드)를 제조하였다.
본 발명의 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 유효 성분으로 하는 골 형성 촉진제, 및 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 배합한 골 형성 촉진용 식음료, 의약, 사료 등은 골아 세포의 분화를 촉진함으로써 골 형성 작용이 촉진되기 때문에, 인간이나 가축의 골 강화에 유용하며, 또한 골 다공증 등의 각종 골 질환의 예방이나 개선에 유용하다.

Claims (2)

  1. 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 유효 성분으로 하는 골 형성 촉진제.
  2. 락토페록시다제 및/또는 그 분해물을 배합한 골 형성 촉진용 식음료, 의약 또는 사료.
KR1020067002707A 2003-08-15 2004-08-13 골 형성 촉진제 KR101186090B1 (ko)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JPJP-P-2003-00293829 2003-08-15
JP2003293829A JP4536341B2 (ja) 2003-08-15 2003-08-15 骨形成促進剤
PCT/JP2004/011689 WO2005016373A1 (ja) 2003-08-15 2004-08-13 骨形成促進剤

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20060058107A true KR20060058107A (ko) 2006-05-29
KR101186090B1 KR101186090B1 (ko) 2012-09-25

Family

ID=34191009

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020067002707A KR101186090B1 (ko) 2003-08-15 2004-08-13 골 형성 촉진제

Country Status (8)

Country Link
US (1) US20060228345A1 (ko)
EP (1) EP1656948A4 (ko)
JP (1) JP4536341B2 (ko)
KR (1) KR101186090B1 (ko)
CN (1) CN1835766B (ko)
CA (1) CA2533641C (ko)
NZ (1) NZ545958A (ko)
WO (1) WO2005016373A1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20150036667A (ko) * 2012-07-31 2015-04-07 유키지루시 메그밀크 가부시키가이샤 신규 단백질 소재

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007223910A (ja) * 2006-02-21 2007-09-06 Snow Brand Milk Prod Co Ltd 抗炎症剤
US8580740B2 (en) 2007-11-01 2013-11-12 Megmilk Snow Brand Co., Ltd. Bone resorption inhibitory food material for inhibiting bone resorption
CN101842385B (zh) * 2007-11-01 2013-11-27 雪印惠乳业株式会社 破骨细胞形成抑制用食品原材料
NZ584888A (en) * 2007-11-01 2012-08-31 Megmilk Snow Brand Co Ltd Bone-strengthening food material
JPWO2009057281A1 (ja) * 2007-11-01 2011-03-10 雪印乳業株式会社 骨芽細胞分化促進及び破骨細胞分化抑制用食品素材
CN102149394A (zh) * 2008-07-10 2011-08-10 伊兰·埃利亚斯 利用蛋壳多肽的方法
WO2010028432A1 (en) * 2008-09-11 2010-03-18 Healthlinx Limited Protocols for treating bone disorders
JP2009215301A (ja) * 2009-04-27 2009-09-24 Morinaga Milk Ind Co Ltd プロテアーゼ阻害剤
WO2011037957A2 (en) * 2009-09-24 2011-03-31 U.S. Foods & Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for bone repair, maintenance and regeneration
JP2013079216A (ja) * 2011-10-04 2013-05-02 Snow Brand Milk Products Co Ltd 感覚改善剤
DK2880997T3 (da) 2012-07-31 2019-07-29 Megmilk Snow Brand Co Ltd Drik og fremgangsmåde til fremstilling deraf
EP2880984B1 (en) 2012-07-31 2018-01-03 Megmilk Snow Brand Co. Ltd. Powdered milk product, and method for producing same
JP6124420B2 (ja) * 2012-07-31 2017-05-10 雪印メグミルク株式会社 発酵乳類及びその製造方法
AU2012386762B2 (en) * 2012-07-31 2016-05-05 Megmilk Snow Brand Co., Ltd. Fermented milk product, and method for producing same
EP2880986B1 (en) 2012-07-31 2018-01-03 Megmilk Snow Brand Co. Ltd. Cheese and method for producing same
CN102872479B (zh) * 2012-10-31 2014-10-29 胡懿郃 异种骨移植替代材料的制备方法
KR101364690B1 (ko) 2013-11-04 2014-02-20 김호현 대나무를 유효성분으로 포함하는 골 성장 촉진용 조성물
JP6941417B2 (ja) * 2016-02-04 2021-09-29 雪印メグミルク株式会社 軟骨機能改善剤
JP6562957B2 (ja) * 2017-02-28 2019-08-21 雪印メグミルク株式会社 発酵乳類及びその製造方法
JP6562956B2 (ja) * 2017-02-28 2019-08-21 雪印メグミルク株式会社 飲料及びその製造方法
JP6357266B2 (ja) * 2017-06-07 2018-07-11 雪印メグミルク株式会社 骨疾患の予防又は治療用タンパク質素材
CN113004384B (zh) * 2021-02-20 2022-10-18 中国海洋大学 一种海参肠促成骨肽的制备方法及其应用

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
LU85479A1 (fr) * 1984-07-25 1986-02-12 Oleofina Sa Compositions antibacteriennes de nourriture pour animaux et procede pour les preparer
JPH0248534A (ja) * 1988-07-28 1990-02-19 Bio Serae Sa:Soc 抗菌組成物の配合方法及び配合された抗菌組成物
JP2686831B2 (ja) 1989-09-22 1997-12-08 雪印乳業株式会社 鉄結合性蛋白質を分離、精製し、採取する方法
WO1991006639A1 (en) 1989-11-03 1991-05-16 Ideon Corporation Recombinant production of lactoperoxidase
JP3103167B2 (ja) * 1991-10-30 2000-10-23 雪印乳業株式会社 老化防止剤
JP3112637B2 (ja) * 1994-09-30 2000-11-27 雪印乳業株式会社 骨強化剤
JPH08165249A (ja) * 1994-12-14 1996-06-25 Snow Brand Milk Prod Co Ltd 骨強化作用を有する組成物
CA2373485A1 (en) * 1999-05-14 2000-11-23 Peter Francis Fennessy Microbially resistant compositions

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20150036667A (ko) * 2012-07-31 2015-04-07 유키지루시 메그밀크 가부시키가이샤 신규 단백질 소재
KR20200011584A (ko) * 2012-07-31 2020-02-03 유키지루시 메그밀크 가부시키가이샤 신규 단백질 소재

Also Published As

Publication number Publication date
EP1656948A1 (en) 2006-05-17
KR101186090B1 (ko) 2012-09-25
JP2005060321A (ja) 2005-03-10
AU2004264757A1 (en) 2005-02-24
US20060228345A1 (en) 2006-10-12
NZ545958A (en) 2009-04-30
JP4536341B2 (ja) 2010-09-01
CN1835766A (zh) 2006-09-20
CN1835766B (zh) 2012-06-20
WO2005016373A1 (ja) 2005-02-24
CA2533641A1 (en) 2005-02-24
EP1656948A4 (en) 2007-12-26
CA2533641C (en) 2015-04-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101186090B1 (ko) 골 형성 촉진제
EP0704218B1 (en) Bone reinforcing agent and foods and drinks product containing the same
US6344437B1 (en) Medicine drink food and feed having an action of strengthening bone
JP2974604B2 (ja) 塩基性タンパク質組成物、塩基性ペプチド組成物及びその利用
US9861687B2 (en) Protein material
US20080206226A1 (en) Agent for promoting osteogenesis and/or inhibiting bone resorption
US8647619B2 (en) Osteogenesis promoter
AU723386B2 (en) An agent promoting bone formation and inhibiting bone resorption
US20190091304A1 (en) Novel protein material

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
N231 Notification of change of applicant
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20150820

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160906

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20170822

Year of fee payment: 6

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20180824

Year of fee payment: 7