KR20060007105A - 한약재와 곤약을 이용한 비만 또는 고지혈증의 치료 및예방용 약제학적 조성물 - Google Patents
한약재와 곤약을 이용한 비만 또는 고지혈증의 치료 및예방용 약제학적 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 한약재를 이용한 비만 또는 고지혈증의 치료 및 예방용 약제조성물에 관한 것이다.
본 발명은 하수오, 택사, 오미자, 결명자, 차조기, 산수유, 산사자, 강황, 휘첨, 반하, 익지, 도인 및 방기로 이루어진 한약재를 추출한 추출물과 곤약의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 고지혈증의 치료 및 예방용 약제조성물을 제공한다.
본 발명은 체중증가를 억제하고, 식욕을 감소시키며 중성지방과 콜레스테롤 농도를 효과적으로 저하시킴으로써 고지혈증 및 지질대사개선에 유용한 기능성식품 및 치료제 개발에 유용하게 사용될 수 있다.
곤약, 한약재추출물, 비만억제효과, 항고지혈증 효과, 기능성식품
Description
도 1은 본 발명의 조성물과 고지방식이를 동시투여시 마우스의 체중변화를 나타낸 그래프이고,
도 2는 본 발명의 조성물과 고지방식이를 동시투여시 마우스의 섭취식이량 변화를 나타낸 그래프이고,
도 3은 고지방식이로 비만을 유도한 마우스 모델에서 본 발명의 조성물을 투여시 체중변화를 나타낸 그래프이고.
도 4는 본 발명의 조성물과 고지방식이를 동시투여시 마우스 혈청중의 콜레스테롤, 중성지방 및 HDL콜레스테롤의 함량변화를 나타낸 그래프이고,
도 5는 고지방식이로 비만을 유도한 마우스 모델에서 본 발명의 조성물을 투여시 마우스 혈청중의 콜레스테롤, 중성지방 및 HDL콜레스테롤의 함량변화를 나타낸 그래프이다.
본 발명은 한약재과 곤약을 이용한 비만 또는 고지혈증의 치료 및 예방용 약제학적 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 13종의 한약재 추출물과 곤약을 혼합하여 부작용은 전혀 없으면서 식욕을 억제하여 비만을 예방 또는 치료하고 혈중 총콜레스테롤과 중성 지방은 저감하면서 HDL-콜레스테롤 수치를 증가하여 고지혈증을 예방 또는 치료할 수 있는 비만 또는 고지혈증의 치료 및 예방용 약제학적 조성물에 관한 것이다.
현대사회에 들어오면서 영양의 과다섭취와 운동량의 부족으로 전세계적으로 비만인구가 급격히 증가하고 있는 실정이다.
이때, 비만은 체내에 필요이상의 에너지원이 지방세포에 축적된 상태로서 지방조직의 증가에 의하여 건강에 심각한 영향을 줄 수 있는 체중증가 상태를 의미하며, 체질량지수(Body Mass Index; BMI)가 25∼30인 경우를 과체중으로 정의하고 있다.
비만은 당뇨병 2 타입, 동맥경화, 고혈압, 고지혈증 및 관절염 등의 다양한 고질적인 만성성인병의 원인이 되고 있으며, 또한 비만 치료는 주요 퇴행성 질환의 예방과 치료에 선행되어야 하는 핵심사항이다.
그러나 상기와 같은 비만 치료에 있어서, 미국 FDA에 의해서 승인을 받아 국내에서도 시판되고 있는 제니칼(Xenical)과 리덕틸(Meridia/Reductil) 등은 부작용 및 약효의 미약성으로 인해 매출이 17∼25%의 감소추세에 있다(Gura, 2003; Bioword Today, 2003년 3월 31일).
즉, 제니칼은 리파아제의 기능을 억제하여 지방을 몸 밖으로 배출하는 작용을 하나 지방 흡수를 차단하기 때문에 지용성인 비타민과 β-카로틴도 흡수하지 못하므로 매일 비타민을 함께 복용해야 하며, 흡수되지 않은 지방이 장 속에 남아 배에 가스가 차 있어 복부 팽만감과 기름이 많이 낀 대변이 나오는 부작용이 있다.
그리고 리덕틸은 식욕조절 신경호르몬인 세로토닌과 노르아드레날린의 재흡수를 억제시켜 식욕을 떨어뜨리게 하는 약물로서 중독의 위험은 없지만 환자 가운데 약 10%는 체중 감량 효과가 나타나지 않으며 또 혈압상승을 비롯한 각종 부작용이 나타나고, 특히 이탈리아에서는 2명의 환자사망으로 인해 2002년 판매중지가 되어 있다(Gura, 2003).
따라서 부작용이 적고 효과가 선택적으로 나타나는 새로운 형태의 천연 항비만 제품개발이 필요한 실정이다.
한편, 비만외에 다른 원인으로도 발병하는 고혈압, 허혈성 심질환등에 의한 순환기계 질환과 대사성 질환들도 계속 증가추세에 있다.
이중 순환기계 질환에서 고혈압성 질환은 감소하고 있는 반면, 허혈성 심장질환 또는 관상동맥 질환이 주요 관리대상 질환으로 점차 증가하고 있는 데(통계청, 1996), 역학연구에 의해 밝혀진 관상동맥질환의 제1위험인자는 고콜레스테롤혈증으로 알려져 있다.
그러나, 현재 사용되고 있는 고지혈증 치료제인 스타틴(Statin)류는 콜레스테롤 농도를 현저히 낮출 수는 있으나 근육세포 파괴, 간세포 손상, 위궤양 등의 부작용으로 간이나 위 질환자에게는 신중한 처방이 요구되고 있다.
이에, 최근에는 전통 한약재를 비롯한 식물의 추출물을 이용한 연구가 활발해지면서 간이나 신장에 영향을 미치지 않으면서 콜레스테롤 조절을 할 수 있는 천연소재의 개발이 활발히 진행되고 있다.
그리고, 지금까지 단일 한방약재의 고지혈증 개선효과에 대해서는 많은 연구논문이 있다.
이중, 청소, 번 등(영목도생. 정상철리. 복권영증, 1991; 일본약국방해설서 제 12개정 D-132. D-576 광천수점, 동경)은 실험동물의 총콜레스테롤을 억제하며 황금(黃芩)과 황련(黃連)이 동맥경화의 예방 및 치료효과가 있음을 보고하였고, 기무라 등(日본약국방해설서 제 12CtE D-116. 광천서점. 동경)은 황금(黃芩)의 플라보노이드 성분이 고지혈증에서 콜레스테롤과 중성지방을 억제함을 보고하였다.
또한, 치자(梔子)도 혈청 콜레스테롤 억제, 지방질의 감소로 동맥경화증 예방효과가 있음이 보고되었다(Gainer, J. K., Jones, J. R. The use of crocetin in experimental atherosclerosis. Experimentica. 1975:31, 548; Kimura, Y., Okuda, H., Arichi, S. Effect of geniposide isolated from Gardenia jasmonoides on metabolic alterations in high sugar diet-fed rats. Chem. Pharm. Bull. 1982:30, 4444-7, 일본약국방해설서 제 12개정, D-391. 광천서점, 동경).
그리고, 황백(黃柏)의 경우에도 혈청 콜레스테롤 저하작용이 있음이 알려졌다(Vad, B. G., Raman, P. H., Deshmukh, V. K. Indian J. Pharm. 1971:33, 23-7).
또한, 복합방의 경우에는 삼황사심탕(三黃瀉心湯)과 황련해독탕(黃連解毒湯)이 흰쥐의 고지혈증을 감소시키는 효과가 있음이 보고되었다[정명현, 한성준. 생약 복합제제(三黃瀉心湯, 黃連解毒湯)가 흰쥐의 실험적 고지혈증에 미치는 영향. 생약학회지 1996:27, 397-407].
그러나, 아직까지 한방복합제제에 관한 연구는 미흡한 부분이 많기 때문에 보다 많은 연구가 필요한 실정이다.
이에, 본 발명자는 부작용은 전혀 없으면서 비만을 예방 또는 치료를 하고 고지혈증을 예방 또는 치료할 수 있는 천연 소재의 조성물을 개발하고자 하였으며, 상기 목적에 부합되는 한약재와 곤약을 선정하고, 상기 선정된 한약재의 추출물과 곤약의 혼합물을 제조한 다음, 이의 혼합물이 체중감소 효과와 아울러 체내 중성지방 및 총 콜레스테롤의 축적을 억제하고 혈중 HDL-콜레스테롤을 증가시켜 비만 및 고지혈증 억제와 관련하여 효과적인 천연소재 조성물임을 입증하여, 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 하수오, 택사, 오미자, 결명자, 차조기, 산수유, 산사자, 강황, 휘첨, 반하, 익지, 도인 및 방기로 이루어진 한약재를 추출한 추출물과 곤약의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 고지혈증의 치료 및 예방용 약제조성물을 제공하는 것이다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하수오, 택사, 오미자, 결명자, 차조기, 산수유, 산사자, 강황, 휘첨, 반하, 익지, 도인 및 방기로 이루어진 한약재를 추출한 추출물과 곤약의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 고지 혈증의 치료 및 예방용 약제학적 조성물을 제공한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명하기로 한다.
이때, 사용되는 기술 용어 및 과학 용어에 있어서 다른 정의가 없다면, 이 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 통상적으로 이해하고 있는 의미를 가진다.
또한, 종래와 동일한 기술적 구성 및 작용에 대한 반복되는 설명은 생략하기로 한다.
본 발명에서 사용되는 곤약은 호료작물에 속하는 토란과(형태학적) 또는 천남생과(생태학적)의 다년생 풀인 아모르포팔러스곤약(이명: 구약감자, 구약고구마, 돼지감자)의 덩이줄기 또는 뿌리를 파쇄, 정제하여 얻은 글루코만난에 알칼리성 응고제를 넣어 굳힌 것을 사용하는 데, 수분 흡수 성질이 강하여 공복감을 적게해 주고 변비를 없애주며 성인병 예방에 우수한 비소화성 고분자 식이섬유로 구성되어 있다.
또한, 본 발명은 이미 알려진 곤약의 식이섬유로서의 효능에 비만 및 고지혈증에 유용한 한약재 추출물을 혼합하기 위해, 하수오, 택사, 오미자, 결명자, 차조기, 산수유, 산사자, 강황, 휘첨, 반하, 익지, 도인 및 방기로 이루어진 한약재를 추출한 추출물을 사용한다.
이때, 본 발명에서는 20∼40 중량부의 하수오, 20∼40 중량부의 택사, 20∼40 중량부의 오미자, 20∼40 중량부의 결명자, 20∼40 중량부의 차조기, 20∼40 중량부의 산수유, 20∼40 중량부의 산사자, 20∼40 중량부의 강황, 20∼40 중량부의 휘첨, 20∼40 중량부의 반하, 20∼40 중량부의 익지, 20∼40 중량부의 도인 및 20∼40 중량부의 방기로 이루어진 한약재를 추출한 추출물과 곤약 30∼40 중량부를 혼합하여 사용하는 것이 바람직하고, 더 바람직하게는 상기 13종의 한약재를 각 30g (총 429g)을 혼합하여 추출한 추출물에 곤약 39g을 사용한다. 이는 본 발명에서 상기 13종의 한약재를 모두 동량의 배합비율로 혼합하여 제조한 약제조성물의 비만 및 고지혈증 치료 및 예방 효과가 최적으로 나타나기 때문이다.
그러나, 상기 배합비율로 비만 및 고지혈증을 치료 또는 예방하기에 유효한 비율이라면 다른 배합 비율로도 사용될 수 있음은 당업자라면 잘 알고 있을 것이다.
그리고, 본 발명에 사용된 한약재는 다음과 같은 특성이 이미 한의서나 한약관련서적에 잘 알려져 있다.
먼저, 하수오는 간과 신장을 재생시키고, 혈액을 재보충하여 혈중 콜레스테롤 농도 저하시키는 역할을 한다.
그리고, 택사는 수분을 제거하고 오장을 도우며 기력을 튼튼하게 하는 약재로 혈중 콜레스테롤을 감소시키고 혈압 및 혈중의 당을 낮추는 작용을 한다.
그리고, 오미자는 호흡중추를 자극하고 중추신경계통의 반응성을 높여주며 심장혈관계통의 생리적 기능을 조절하여 피의 순환장애를 개선하는 것이 알려져 있다.
그리고, 결명자는 간의 열을 내리고 눈을 밝게 하며, 이뇨제 작용을 하고 변을 묽게 하여 통변이 잘되게 하는 작용과 혈압을 낮추거나 혈중 콜레스테롤을 낮추 는 역할을 한다.
또한, 차조기는 혈액순환을 원활히 하면서 가래를 삭혀주고, 조혈작용을 하며 리놀산을 풍부히 함유하고 있고, 산수유는 간과 신장을 보호하고 방광의 조절기능을 상승시켜주는 역할을 한다.
그리고, 산사자는 건위, 소화 등의 소화기 및 혈액 순환계 질환과 통증 등에 효과가 있으며, 강황은 근경(根莖)이 약재로 사용되는 데 혈액순환을 촉진하여 어혈을 풀어주거나 혈중 콜레스테롤 강하하는 역할을 한다.
또한, 휘첨은 전초를 약재로 사용하는데 간염, 혈압강하 등에 사용하며, 반하는 괴경을 약재로 사용하는 데, 구토, 두동, 거담, 위내정수(胃內停水)의 치료에 사용되는 것으로 알려져 있다.
그리고, 익지는 열매를 약재로 사용하는데 건위, 정장 등의 작용이 있으며, 도인은 파혈(破血), 거담, 및 어혈 치료제나 장윤활 작용제로, 방기는 부종, 관절통, 신경통 등의 치료제로 사용된다.
그러나, 상기 한약재와 곤약의 적절한 조합에 의해 식욕억제에 의한 비만을 치료 및 예방하거나 혈중에서 총콜레스테롤 및 중성지방은 크게 감소시키면서, HDL 콜레스테롤은 증가시켜 고지혈증을 치료하거나 예방하는 효과에 대해서는 알려진 바가 없다.
한편, 본 발명에서 상기 한약재 추출물은 건조된 약재분말에 추출용매를 가한 다음, 약 80℃의 수욕상에서 3시간 가온하여 추출하고 추출액을 여과한 여액을 감압농축한 후, 동결건조기로 분말상태로 제조하는 것이 바람직하다.
이때, 상기 추출용매는 물, 에탄올, 메탄올 등의 용매를 사용하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 60∼80%의 에탄올을 사용하는 것이 바람직하다.
이는 한약재에서 물과 유기용매에 의해 달리 추출되는 유효성분들을 모두 추출할 수 있으며, 80℃ 전후의 온도에서는 유효성분의 파괴가 거의 일어나지 않고, 3시간이면 충분히 유효성분을 추출할 수가 있기 때문이다.
그리고, 본 발명의 약제조성물은 비만을 유도한 동물에 투여한 실험결과, 복용 2주후 몸무게는 평균적으로 10.5%가 감소되고, 식이섭취량도 초기에 비해 25%를 감소시키는 우수한 체중감소 및 식욕억제효과가 있다.
또한, 투여 1주일후에는 체중이 5.1% 감소하면서 혈중 총콜레스테롤 및 중성지방을 크게 감소시키면서, HDL 콜레스테롤은 증가시켜 우수한 고지혈증 예방효과를 나타낸다.
그리고, in vitro에서 뇌속에서 신경전달물질을 분해하는 모노아민옥시다제의 활성에 대해 본 발명의 조성물이 5.0mg/㎖의 농도에서 24.4%의 효소활성 억제효과를 나타냄으로 세로토닌 생성증가에 의한 식욕감퇴와 이로 인한 체중감소로 비만을 억제한다.
따라서, 본 발명에 따라 제조된 곤약을 첨가한 한약재 추출물의 약제조성물은 체중 감소 효과, 식이섭취량 감소효과가 탁월하고, 그 결과 혈중 중성지방 및 콜레스테롤 농도 저하 효능이 있으므로, 비만, 고콜레스테롤혈증, 고지혈증, 지방간 등을 포함하는 대사성 질환에 대한 건강 기능성 식품 제조 및 개발에 유용하게 응용하여 사용할 수 있다.
보다 구체적으로는 본 발명의 조성물을 유효성분으로 한 비만 및 고지혈증 억제용 약제는 어떠한 제형으로 제조하여도 무방하나, 구체적으로 상기 형태는 정제, 캡슐, 분말, 연고, 용액, 젤, 페이스트, 과립상으로 제조할 수 있다.
그리고, 본 발명의 약제조성물 유효량은 통상적으로 하루에 체중 1㎏당 10∼20 ㎎[10∼20 ㎎/㎏/일(day)]을 복용하는 것이 바람직하고, 더 바람직하게 15 ㎎/㎏/일이 복용되도록 한다. 그러나, 실제 투여량은 경구 투여 형태, 환자의 연령, 성별, 체중 및 환자의 중증도 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되어야 하는 것으로 이해되어야 하며, 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
또한, 상기 범위 내로 제형에 따라 투여하기 위해, 당업자에게 이미 주지되어 있으며 당업자가 용이하게 선정할 수 있는 각종의 부형제, 담체, 또는 희석제 등을 더 포함하여 제조할 수 있다.
이하, 실시예 및 실험예를 들어 본 발명을 상세히 설명하지만, 본 발명이 이들 예로만 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1] 시료의 제조
한약재 390g을 분말로 만들어 둥근 플라스크에 넣고 여기에 70% 에탄올 2ℓ를 가한 다음, 약 80℃의 수욕상에서 3시간 가온하여 추출하였다. 추출액을 여과한 여액을 회전식 증발농축기로 감압 농축한 다음, 얻어진 암갈색 액상의 추출물을 동결건조기로 완전 건조시켜 분말상태로 만들었다. 추출물의 수득량은 45.4g 이었다.
그리고, 상기 한약재 추출물에 39g의 곤약분말을 넣고 균일하게 혼합하여 약 85g의 분말로 제조한 다음, 생리식염수에 현탁하여 실험동물 무게 1kg당 1g의 농도로 경구투여하였다.
[실험예 1] 본 발명과 고지방식이 동시투여시의 체중변화 및 섭취식이량 효과 측정
본 실험은 본 발명에 따라 제조된 조성물이 체중감소 및 식욕억제의 예방효과가 있는지를 확인하기 위하여 상기 실시예 1과 고지방식이를 14일간 동시에 투여하면서 매일의 체중과 식이섭취량을 관찰하였다.
이때, 이용된 실험동물은 고지방 고콜레스테롤 식이(High-fat & high-cholesterol diet)로 비만을 유도한 마우스 모델로 ICR계 웅성 마우스(30±1g)를 사용하였고, 사육조건은 온도는 22±1℃, 습도는 55±5% 그리고 명암은 12시간 낮/밤 사이클을 유지시켰으며, 실험동물에 비만 및 식이성 고지혈증을 유발하기 위해서는 일반사료에 1.5%의 콜레스테롤, 0.5%의 콜산, 그리고 25%의 라드(돼지기름)을 첨가한 고지방식이 사료를 제조하여 투여하였다.
그리고, 대조군은 고지방 식이사료를 14일간 자유섭취케 하여 비만과 고지혈증을 동시에 유발시켰고 실험군은 고지방 식이사료를 자유섭취케 하면서 동시에 시료 1g/kg을 14일간 경구투여하였다.
그러면서, 30초간 측정한 무게를 평균하여 나타내는 특수저울을 사용하여 마우스의 몸무게와 사료섭취량을 매일 측정하여 기록하였다.
이의 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 대조군은 첫날에 비해 14일째는 몸무게가 4.7% 증가하였으나 실시예 1의 투여군(이하 실험군)은 10.5% 감소하였고, 도 2에 도시된 바와 같이, 섭취한 식이량은 대조군은 지속적으로 증가하여 14일째는 첫날의 55.9%까지 증가하였으나 실험군은 첫날에 비해 25% 감소하여 식욕억제 효과가 탁월함을 알 수 있었다.
[실험예 2] 비만유발 후 본 발명의 체중변화 효과 측정
본 실험은 본 발명에 따라 제조된 조성물이 비만이 유발된 마우스 모델에서 체중감소 효과가 있는지를 확인하기 위하여 고지방식이를 10일간 자유섭취시킨 다음, 11일째부터는 상기 실시예1을 1g/kg을 투여하여 몸무게 변화를 관찰하였다.
그 결과, 도 3에 도시된 바와 같이, 10일까지는 비만을 유발시킨 모든 마우스가 3일째 보인 일시적인 체중감소 이외에는 이후로 지속적으로 체중이 증가한 것을 알 수 있다. 그러나 이후 7일간 약재를 투여하면 대조군의 체중이 3.6% 증가한 반면, 실험군은 4.1%의 체중감량 효과를 있음을 알 수 있었다.
[실험예 3] 본 발명과 고지방식이 동시투여시의 고지혈증 억제 효과 측정
본 실험은 본 발명의 약제조성물이 비만과 고지혈증에 대한 치료효과가 있는지를 관찰하기 위하여, 대조군은 고지방 식이사료를 10일간 자유섭취케 하여 비만과 고지혈증을 동시에 유발시켰고 실험군은 비만과 고지혈증이 유발된 실험동물에 약재 1g/kg을 7일간 경구투여한 다음, 체중 감소효과와 혈중 지방질 함량을 동시에 측정하였다
이때, 혈중 지방질 함량은 아산제약 주식회사의 측정 키트들을 각각 사용하였으며, 실험방법으로 혈액시료는 실험군과 미투여군의 마우스에서 각각 혈액을 채취하여 항응고제를 처리한 후 하루 방치하여 생성된 혈청을 피펫으로 취한 다음, 다시 원심분리하여 준비하였고, 상기 준비된 혈청 0.02 ml에 3.0 ㎖의 중성지방 측정 키트액 [리포프로테인리파제 10800 U, 글리세롤키나제 5.4 U, 퍼옥시다제 135000 U, L-α-글리세로 인산옥시다제 160 U를 72 ㎖의 N,N-비스(2-하이드록시에틸)-2-아미노메탄설폰산 완충액에 녹인 용액]과 3.0 ㎖의 총콜레스테롤 측정 키트액(콜레스테롤에스테라제 20.5 KU/ℓ, 콜레스테롤옥시다제 10.7 KU/ℓ, 수산화나트륨 1.81 g/ℓ과 인산일칼륨 13.6 g/ℓ, 페놀 1.88 g/ℓ인 용액) 및 HDL 콜레스테롤 측정 키트액(콜레스테롤에스테라제 20.5 KU/ℓ, 콜레스테롤옥시다제 10.7 KU/ℓ, 수산화나트륨 1.81 g/ℓ과 인산이수소칼륨 13.6 g/ℓ, 페놀 1.88 g/ℓ인 용액)을 각각 섞은 후 37℃에서 5∼10분간 반응시킨 다음, 콜레스테롤과 HDL콜레스테롤은 500 nm에서, 중성지방은 550 nm에서 각각 흡광도를 측정하여 혈중 농도를 측정하였다. 그리고, 정량은 이들의 표준 용액에 대하여 상기와 동일한 방법으로 측정하여 얻어진 표준 농도곡선을 이용하였으며 농도는 mg/dl로 나타내었다.
이의 결과, 도 4에 나타난 바와 같이, 실험군은 투여 1주일후에는 체중이 5.1% 감소되면서(미도시), 혈청중에는 콜레스테롤과 중성지방이 대조군에 비해 각각 8.9%, 29.3% 감소(p<0.05)하였으며 HDL 콜레스테롤은 5.6% 증가(p<0.05)하여 시료투여에 의해 고지혈증이 크게 억제됨을 알 수 있었다.
그러나, 고지방식이만을 투여한 대조군의 혈청에는 정상군의 혈청보다 콜레스테롤과 중성지방이 증가하였고 HDL 콜레스테롤은 감소하여 고지혈증이 유발되었음을 알 수 있었다.
이로써, 본 발명에 따른 조성물이 체중 감소를 유도하면서 혈중 총콜레스테 롤 및 중성지방은 크게 감소시키고, HDL 콜레스테롤은 증가시키는 우수한 고지혈증 개선효과를 가지고 있음을 입증하였다.
[실험예 4] 비만유발후 시료투여시의 고지혈증 억제효과 측정
상기 실험예 2의 동일한 방법으로 수행한 다음, 실험군과 대조군의 마우스의 혈청 내 혈중 지방질을 측정하였다.
이의 결과, 도 5에 도시된 바와 같이, 고지방식이만을 투여한 대조군의 혈청에는 정상군의 혈청보다 콜레스테롤과 중성지방이 증가하였고 HDL 콜레스테롤은 감소하여 고지혈증이 유발되었음을 알 수 있다. 그러나 시험군의 혈청중에는 콜레스테롤과 중성지방이 대조군에 비해 각각 18.9%, 14.2% 감소(p<0.05)하였으며 HDL 콜레스테롤은 6.7% 증가(p<0.05)하여 시료투여에 의해 비만후 발생한 고지혈증을 크게 억제함을 알 수 있었다.
[실험예 5] 본 발명이 모노아민옥시다제 활성변화에 미치는 영향
본 실험은 뇌에서 식욕을 조절하는 신경전달물질인 세로토닌이나 아드레날린과 같은 모노아민류가 식욕을 유발하는 신경호르몬의 일종암에 착안하여 이들 신경전달물질을 분해하는 효소인 모노아민옥시다제 (monoamine oxidase, MAO)의 활성에 대한 본 발명에 따른 조성물의 효과를 분석하여 식욕억제효과를 규명하고자 하였다.
모노아민옥시다제 (monoamine oxidase, MAO)의 활성을 측정하기 위한 효소원은 다음과 같은 방법을 수행하였다.
먼저, 실험동물에서 뇌조직을 적출한 다음, 소량의 0.32M의 냉 수크로오스 용액으로 한 번 세척하고, 상기 수크로오스 용액으로 10%(w/v) 마쇄균질액을 만든 다음, 상기 균질액을 1,000×g에서 10분간 원심분리하여 상징액(supernatant)과 펠렛(pellet)으로 분리하였고, 상기 펠렛을 소량의 수크로오스 수용액으로 2회 세척하고 상징액과 세척액을 합쳐 12,000×g에서 20분간 다시 원심분리하였다.
그리고, 얻어진 펠렛(미토콘드리아 분획)을 수크로오스 용액으로 한번 세척한 다음, 효소원으로 사용하였다. 이때, 상기 실험은 0~4℃에서 수행하였다.
그런다음, 상기 효소원으로부터 획득한 약 1mg의 펠렛, 50mM 트리즈마-염산 완충액 (pH 8.2) 3㎖ 및 1mM 염산 벤질아민 0.5㎖의 반응액에 상기 실시예 1을 DMSO(디메틸설폭사이드)에 각각 1mg/㎖, 2mg/㎖ 및 5mg/㎖의 농도로 용해한 것을 첨가하였다.
그리고, 상기 혼액을 37℃에서 30분간 배양한 다음, 반응시험관을 즉시 냉수로 냉각하고, 여기에 3% 황산아연 1㎖를 가하고 볼텍스(vortex)로 균일하게 혼합하고 약 30분 방치한 후, 생성된 침전물은 제거하고, 상징액을 5분간 원심분리하고 250nm에서 흡광도 측정하였다. 공시험용 시료(blank)는 상기 반응액을 100℃에서 5분간 가열하여 효소반응을 정지시킨 다음, 측정에 사용하였다.
이의 in vitro 실험결과, 상기 실시예 1 조성물을 5.0mg/㎖의 농도로 처리한 시료의 모노아민옥시다제 활성이 24.4% 억제됨을 알 수 있었다(미도시).
이러한 결과로 유추해 보면, 본 발명에 따른 조성물은 모노아민옥시다제 효소활성을 크게 억제시킴으로써, 세로토닌(serotonin)을 증가시켜 식욕감소효과가 나타나는 것으로 판단된다.
상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 곤약첨가 한약재 추출물은 체중증가를 억제하고, 식욕을 감소시키며 중성지방과 콜레스테롤 농도를 효과적으로 저하시킴으로써 고지혈증 및 지질대사개선에 유용한 기능성식품 및 치료제 개발에 유용하게 사용될 수 있다.
Claims (2)
- 하수오, 택사, 오미자, 결명자, 차조기, 산수유, 산사자, 강황, 휘첨, 반하, 익지, 도인 및 방기로 이루어진 한약재를 추출한 추출물과 곤약의 혼합물을 유효성분으로 함유하는 비만 또는 고지혈증의 치료 및 예방용 약제학적 조성물.
- 제 1 항에 있어서,상기 혼합물은 20∼40 중량부의 하수오, 20∼40 중량부의 택사, 20∼40 중량부의 오미자, 20∼40 중량부의 결명자, 20∼40 중량부의 차조기, 20∼40 중량부의 산수유, 20∼40 중량부의 산사자, 20∼40 중량부의 강황, 20∼40 중량부의 휘첨, 20∼40 중량부의 반하, 20∼40 중량부의 익지, 20∼40 중량부의 도인 및 20∼40 중량부의 방기로 이루어진 한약재를 추출한 추출물과 곤약 30∼40 중량부를 혼합한 것임을 특징으로 하는 비만 또는 고지혈증의 치료 및 예방용 약제학적조성물.
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