KR20050083919A - Ｒｒｅ 및 ｃｔｅ를 포함하는 유전자 작제물 및 조성물 및이의 용도 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열 및 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 유전자 작제물에 관한 것이다. 본 발명은 하나 이상의 핵산 분자가 HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하고 하나 이상의 핵산 분자가 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 2개 이상의 핵산 분자를 포함하는 조성물에 관한 것이다. 핵산 분자를 포함하는 당해 유전자 작제물 및 조성물에서, 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열은 하나의 RRE 및 하나 이상의 CTE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열을 적어도 일부 포함한다. 본 발명은 또한 개체내에서 면역원에 대한 면역반응을 유도하는 방법, 단백질을 개체에게 전달하는 방법 및 단백질을 생산하는 방법에 관한 것이다.

Description

ＲＲＥ 및 ＣＴＥ를 포함하는 유전자 작제물 및 조성물 및 이의 용도{Genetic constructs and compositions comprising RRE and CTE and uses thereof}
본 발명은 개선된 유전자 작제물에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 핵산 분자의 핵산 서열이 암호화하는 단백질을 고수준으로 발현시키는데 사용될 수 있는 핵산 분자에 관한 것이다. 본 발명은 또한 개선된 DNA 백신 및 유전자 치료법에 관한 것이다.
HIV-1 Rev-RRE는 널리 공지되어 있지만 완전히 이해되지 않고 있다. HIV 구조 단백질을 암호화하는 유전자들, 즉, HIV 유전자 gag, pol 및 env 각각은 HIV 단백질 Rev에 의해 인지되는 RRE를 함유하고 있는 것으로 공지되어 있다. 당해 서열은 HIV 단백질 Rev와 반응하는 것으로 공지되어 있다. RRE를 함유하는 세포내 핵산 분자는 세포내 존재하는 Rev와 결합하여 세포질로 수송된다. 이러한 수송은 유사한 작제물중에 RRE 또는 Rev의 부재하에 관찰되는 것과 비교하여 고수준의 유전자 발현을 유도한다. 본원에 참조로서 인용되는 미국 특허 제5,554,528호 및 제5,604,114호는 HIV RRE 서열을 기재하고 있다. 본원에 참조로서 인용되는 미국 특허 제5,650,309호 및 제5,665,577호는 HIV RRE 서열을 포함하는 벡터를 기재하고 있다.
CTE 시스템은 널리 공지되어 있고 특히, 본원에 참조로서 인용되는 미국 특허 제5,585,263호 및 제5,880,276호에 기재되어 있다. 당해 시스템에 따라, 숙주 단백질은 mRNA상의 CTE 서열을 인지하고 이를 핵으로부터 세포질로 수송한다. 당해 수송은 유사한 작제물중에 RRE 또는 Rev의 부재하에 관찰되는 것과 비교하여 고수준의 유전자 발현을 유도한다. CTE 시스템은 또한 문헌[참조: Bray, M., S. Prasad, J. W. Dubay, E. Hunter, K.-T. Jeang, D. Rekosh, and M.-L. Hammarskjold(1994)]에 기재되어 있다. 메이슨-화이저(Mason-Pfizer) 몽키 바이러스 게놈 기원의 소형 요소가 사람 면역결핍 바이러스 1형을 Rev와는 무관하게 발현시키고 복제시킨다[문헌참조: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91:1256-1260; Saavedra, C., B. Felber, and E. Izaurralde. 1997]. 시미안 레트로바이러스-1 구성적 수송 요소는 HIV-1 RRE와는 다르게 세포성 mRNA의 방출을 위해 요구되는 인자를 사용한다[문헌참조: Curr. Biol.619-628, Ernst RK, Bray M, Rekosh D, Hammarskjold ML.(1997) Secondary structure and mutational analysis of the Mason-Pfizer monkey virus RNA constitutive transport element. RNA. 3(2):210-22; and Kang Y, Bogerd HP, Cullen BR.(2000). Analysis of cellular factors that mediate nuclear export of RNAs bearing the Mason-Pfizer monkey virus constitutive transport element, J Virol. 74(13):5863-71, 본원에 참조로서 인용됨].
핵산 분자내 암호화 서열의 발현을 증진시키기 위해 개선된 시스템이 제공될 필요가 있다. 핵산 분자내 암호화 서열을 고수준으로 발현시키는 개선된 백신, 면역화 방법 및 유전자 치료 방법 및 조성물을 제공할 필요가 있다.
발명의 요약
본 발명은 HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열 및 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 유전자 작제물에 관한 것이다. 당해 유전자 작제물에서 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열은, 하나의 RRE 및 하나 이상의 CTE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열을 적어도 일부 포함한다.
본 발명은 또한 하나 이상의 핵산 분자가 HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하고 하나 이상의 핵산 분자가 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 2개 이상의 핵산 분자를 포함하는 조성물에 관한 것이다. 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열은 하나의 RRE 및 하나 이상의 CTE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열을 적어도 일부 포함한다. 목적하는 단백질은 일반적으로 HIV-1 Rev와는 상이한 단백질이다.
본 발명은 추가로, 개체에서 면역원에 대해 면역 반응을 유도하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 몇몇 방법은 HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열 및 면역원에 대한 암호화 서열을 포함하는 유전자 작제물을 개체에게 투여하는 단계를 포함한다. 면역원에 대한 암호화 서열은 하나의 RRE 및 하나 이상의 CTE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열을 적어도 일부 포함한다. 본 발명의 몇몇 방법은 2개 이상의 핵산 분자를 포함하는 조성물을 개체에게 투여하는 단계를 포함한다. 하나 이상의 핵산 분자는 HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하고 하나 이상의 핵산 분자는 면역원에 대한 암호화 서열을 포함한다. 면역원에 대한 암호화 서열은 하나의 RRE 및 하나 이상의 CTE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열을 적어도 일부 포함한다.
본 발명은 추가로 단백질을 개체에 전달하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 몇몇 방법은 HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열 및 특정 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 유전자 작제물을 개체에게 투여하는 단계를 포함한다. 당해 단백질에 대한 암호화 서열은 하나의 RRE 및 하나 이상의 CTE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열을 적어도 일부 포함한다. 본 발명의 몇몇 방법은 2개 이상의 핵산 분자를 포함하는 조성물을 개체에게 투여하는 단계를 포함한다. 하나 이상의 핵산 분자는 HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하고 하나 이상의 핵산 분자는 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함한다. 당해 단백질에 대한 암호화 서열은 하나의 RRE 및 하나 이상의 CTE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열을 적어도 일부 포함한다.
본 발명은 추가로, 세포내에서 단백질을 생산하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 몇몇 방법은 HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열 및 특정 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 유전자 작제물을 포함하는 세포를 배양하는 단계를 포함한다. 당해 단백질에 대한 암호화 서열은 하나의 RRE 및 하나 이상의 CTE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열을 적어도 일부 포함한다. 본 발명의 몇몇 방법은 2개 이상의 핵산 분자를 포함하는 세포를 배양하는 단계를 포함한다. 하나 이상의 핵산 분자는 HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하고 하나 이상의 핵산 분자는 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함한다. 당해 단백질에 대한 암호화 서열은 하나의 RRE 및 하나 이상의 CTE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열을 적어도 일부 포함한다.
도 1 내지 5는 3개의 플라스미드중 하나를 투여한 후 HIV-1 Env에 대해 유도된 면역 반응을 비교한 데이타를 보여주는데, 각각의 플라스미드는 Env 암호화 서열이 RRE를 포함하는 Env를 암호화하고 있다. 당해 데이타는 하기 실시예에 기재되어 있다.
본 발명에 따라, 핵산 분자에는 mRNA상에 존재하는 경우 mRNA를 핵에서 세포질로 이송시키고 세포내에서 단백질 생산을 증가시키는 2개의 상이한 수송 요소가 공급된다. 2개의 수송 요소는 서로 독립적으로 작동하고 함께 사용되는 경우 단순히 부가적 효과 이상으로 단백질 생산을 크게 증진시킨다.
사용되는 수송 시스템 각각은 공지되어 있다. 하나는 HIV-1 Rev-Rev 반응 요소(RRE) 시스템이다. 또 다른 하나는 메이슨 화이저 몽키 바이러스로부터 분리된 CTE 시스템이다. 본 발명에 따라, 유전자 작제물은 하나의 RRE 및 하나 이상의 CTE 둘다를 포함한다. 추가로, 당해 작제물에는 HIV-1 Rev 암호화 서열이 제공되어 RRE를 매개하고 수송시키는데 요구되는 Rev 단백질을 갖는 세포를 제공한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "유전자 작제물"은 암호화 서열의 발현에 필요한 요소들에 작동적으로 연결된, 단백질을 암호화하는 핵산 서열(암호화 서열)을 포함하는 핵산 분자를 언급한다. 몇몇 양태에서, 유전자 작제물은 DNA이고, 바람직하게는 바이러스 벡터의 플라스미드 또는 게놈이다. 몇몇 양태에서, 유전자 작제물은 RNA이고 바람직하게는 레트로바이러스 벡터의 게놈이다.
본 발명에 따라, Rev에 대한 암호화 서열 및 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 유전자 작제물이 제공된다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "목적하는 단백질"은 생리학적 또는 면역학적 활성 서열을 갖는 단백질을 포함하는 임의의 단백질을 언급하고 단, 당해 단백질은 RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열을 적어도 일부 포함하고 당해 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 mRNA는 하나 이상의 CTE를 포함한다. 몇몇 양태에서, 목적하는 단백질은 HIV 구조 단백질이고 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 mRNA는 하나 이상의 CTE를 포함한다. 몇몇 양태에서, 목적하는 단백질은 HIV 구조 단백질의 적어도 일부 및 비-HIV 부분을 포함하는 융합 단백질이다. 몇몇 양태에서, 비-HIV 부분은 RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질 또는 이의 단편을 추가로 포함하는 면역학적 또는 생리학적 활성 단백질 또는 이의 면역학적 또는 생리학적 활성 단편일 수 있다. 목적하는 단백질이 HIV 구조 단백질이 아닌 경우, 즉 이것이 융합 단백질인 경우, 비-HIV 서열의 특성은 유전자 작제물이 백신인지 또는 유전자 치료제인지를 결정한다. 즉, 목적하는 단백질인 융합 단백질이 면역원인 경우, 당해 작제물은 백신용으로 면역반응을 유도하는데 사용되거나 단백질 생산을 위한 출발 물질로서 사용될 수 있다. 융합 단백질이 생물학적으로 활성이고 비면역원성인 경우 당해 작제물은 유전자 치료제 또는 단백질 생산을 위한 출발물질로서 사용될 수 있다.
본 발명은 또한 2개 이상의 핵산 분자(이중 하나 이상은 HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하고 이중 또 하나 이상은 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함한다)를 갖는 조성물을 제공한다. 몇몇 양태에서, 핵산 분자는 DNA 분자이고, 바람직하게는 플라스미드이다.
본 발명의 핵산 작제물 및 본 발명의 조성물의 핵산 분자는 RRE를 포함하는 gag, pol, env 및 이의 단편으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 암호화 서열을 포함한다. 즉, 본 발명은 gag, pol 또는 env에 의해 암호화된 HIV 단백질을 고수준으로 발현시키는데 사용될 수 있거나 또한 이들은 RRE를 포함하는 gag, pol, 또는 env 유전자 생성물의 일부를 포함하는 융합 단백질을 고수준으로 발현시키는데 사용될 수 있다. 유전자 작제물은 또한 Rev 단백질이 생산되도록, 조절 요소에 작동적으로 연결된 HIV-1 Rev 단백질을 암호화하는 암호화 서열을 포함한다. 당해 조성물은 Rev 단백질이 생산되도록, 조절 요소에 작동적으로 연결된 HIV-1 Rev 단백질을 암호화하는 암호화 서열을 포함하는 핵산 분자를 포함한다.
본 발명에 따라, CTE 서열 또는 서열들은 생산될 단백질의 서열에서 조성물의 유전자 작제물 또는 핵산 분자내에 포함된다. 바람직한 양태에서, CTE 서열은 폴리아데닐화 꼬리의 3' 부위에 포함된다. 몇몇 양태에서, 유전자 작제물은 하나 이상의 CTE 서열을 포함할 수 있다. 몇몇 양태에서, 이것은 2개, 3개, 4개 또는 5개의 CTE 서열을 포함할 수 있다.
본 발명은 추가로, 개체내에서 면역원에 대한 면역 반응을 유도하는 방법, 특정 단백질을 개체에 전달하는 방법 및 단백질을 생산하는 방법을 제공한다.
개체내에서 면역원에 대한 면역반응을 유도하는 방법 및 개체에게 특정 단백질을 전달하는 방법은 상기된 바와 같은 유전자 작제물 또는 조성물을 개체에게 투여하는 단계를 포함한다. 면역반응을 유도하는 방법에서, 목적하는 단백질은 면역원성이다. 목적하는 단백질이 HIV 구조 단백질인 경우, 유전자 작제물은 백신이고 목적하는 단백질은 면역원이 되도록 발현된다. 유사하게, 목적하는 단백질이 면역원성 단백질인 경우, 유전자 작제물 또는 조성물은 백신으로서 사용될 수 있고 목적하는 단백질은 면역원이 되도록 발현된다. 면역 반응은 보호 효과 또는 치료 효과를 제공하거나 면역원에 대한 항체 및 항원 특이적 면역 세포를 생산하도록 유도될 수 있다. 당해 항체 및 세포는 수거되어 사용될 수 있다.
본 발명에 의해 암호화될 수 있는 면역원의 예는 HIV 구조 단백질 Gag, Pol, Env 및 이의 단편을 포함한다. 추가로, 본원에 참조로서 인용된 1997년 1월 14일자로 허여된 미국 특허 제5,593,972호에 기재된 바와 같이 면역원이 표적 단백질인 백신이 제조될 수 있다. 당해 면역원은 병원성 단백질, 과증식 질환과 연관된 단백질 또는 알레르기 항원 뿐만 아니라 자가면역 질환과 연관된 단백질일 수 있다. 모든 비-HIV 구조 단백질 면역원에 대해, 면역원성 단백질은 RRE인 HIV 구조 단백질 암호화 서열을 적어도 일부 포함하는 암호화 서열을 포함하는 키메라 유전자에 의해 암호화된 융합 단백질로서 제공되어야만 한다. 면역 반응이 전달되는 본 발명의 양태에서, 본 발명은 보조제, 면역조절 단백질 및 예를 들어, 사이토킨, 케모킨 및 성장 인자와 같은 면역조절 단백질을 암호화하는 유전자 서열과 조합하여 사용될 수 있다.
개체에게 단백질을 전달하는 방법은 상기된 바와 같은 유전자 작제물 또는 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 몇몇 양태에서, 목적하는 단백질은 사이토킨, 성장 인자, 케모킨, 보조자극 분자, 항체, 가용성 수용체, 효소, 응고 인자, 또는 이의 단편이다. 몇몇 양태에서, 목적하는 단백질은 병원성 항원, 발암유전자 해독 생성물 또는 암과 관련된 기타 항원, 자가면역 질환과 연관된 단백질, 이의 알레르기 항원 또는 단편이다. 몇몇 양태에서, 목적하는 단백질은 인슐린, IL-1, IL-2, IL-5, IL-12, IL-15, VEGF, EGF, EPO, GMCSF, GCSF, 이의 수용체, CD28, CD80, CD86, CD40, CD40L, mAb, Fab, F(ab)2, 키메라, 사람화된, 영장류화된, 사람 mAb, Fab, F(ab)2, DNA, tPA, 인자 I-XII 또는 이의 활성 단편이다. 몇몇 양태에서, 목적하는 단백질은 본원에 참조로서 인용된 미국 특허 제5,593,972호에 제시된 바와 같은 항원이다.
세포내에서 단백질을 생산하는 방법은 상기된 바와 같은 조성물의 유전자 작제물 또는 2개 이상의 핵산 분자를 포함하는 세포를 배양하는 단계를 포함한다. 당해 방법에서, 세포는 RRE 시스템 및 CTE 시스템이 활성인 임의의 세포일 수 있다. 몇몇 양태에서, 당해 세포는 포유동물 세포이다. 몇몇 양태에서, 세포는 사람 세포이다.
바람직한 양태에서, 유전자 작제물은 직접 투여에 의해 환자에게 전달될 수 있는 플라스미드이다. DNA를 직접 환자에게 전달하는데 사용될 수 있는 다수의 방법이 있다. 본원에 참조로서 인용된 미국 특허 제5,593,972호에 기재된 것들 뿐만 아니라 기타 방법은 본원에 참조로서 인용된 미국 특허 제5,739,118호 및 미국 특허 제5,981,505에 기재된 것들을 포함한다. 추가로, <www.dnavaccine.com>에 개시된 본원에 참조로서 인용되는 특허 및 공보에 기재된 방법은 본원에 기재된 개선책에 사용될 수 있다. 예를 들어, 당해 발명은 리포펙틴, 양이온성 지질, 음이온성 지질, 리포좀, 형질감염제 및 세포 표적화제와 같은 임의의 플라스미드 전달 시스템과 화합될 수 있다.
바람직한 양태에서, 플라스미드 DNA는 근육내 주사에 의해 개체에게 투여된다. 플라스미드 DNA 뿐만 아니라, 주사가능한 조성물은 부피바카인 또는 본원에 참조로서 인용되는 PCT 출원 번호 제PCT/US94/00899호에 기재된 것들을 포함하는 관련 조성물과 같은 촉진제를 포함할 수 있다.
플라스미드에서의 용도 뿐만 아니라, 본 발명의 작제물은 발현시키고자 하는 단백질을 암호화하는 DNA가 핵에서 전사되는, 레트로바이러스 또는 기타 바이러스 또는 비-바이러스 벡터와 같은 기타 유전자 전달 시스템에 유용할 수 있다.
도 1 내지 5에 첨부된 데이타는 각각 Env를 암호화하는 3개의 플라스미드중 하나를 투여한 후 HIV-1 Env에 대해 유도된 면역 반응을 비교한 것이다. Env 암호화 서열은 RRE를 포함한다. 데이타는 CTE를 포함하는 Env 및 Rev에 대한 암호화 서열의 조합이, 단지 Env 및 Rev에 대한 암호화 서열 또는 CTE를 갖는 Env의 암호화 서열만을 포함하는 유전자 작제물을 투여한 후에 관찰되는 것과 비교하여 증진된 면역 반응을 유도함을 명백하게 보여준다.

Claims (23)

  1. a) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열 및
    b) i) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 적어도 일부의 암호화 서열 및 ii) 하나 이상의 CTE를 포함하는, 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열
    을 포함하는 유전자 작제물.
  2. 제1항에 있어서, DNA 분자인 유전자 작제물.
  3. 제2항에 있어서, 플라스미드인 유전자 작제물.
  4. 제1항에 있어서, 목적하는 단백질이 하나 이상의 CTE를 포함하는 HIV 구조 단백질인 유전자 작제물.
  5. 제1항에 있어서, 목적하는 단백질이 HIV 구조 단백질의 적어도 일부 및 비-HIV 부분을 포함하는 융합 단백질인 유전자 작제물.
  6. 제1항에 있어서, 목적하는 단백질이 HIV 구조 단백질의 적어도 일부 및 면역원성 비-HIV 부분을 포함하는 융합 단백질인 유전자 작제물.
  7. 제1항에 있어서, 1 내지 5개의 CTE를 포함하는 유전자 작제물.
  8. a) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자 및
    b) i) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    ii) 하나 이상의 CTE를 포함하는, 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자
    를 포함하는, 2개 이상의 핵산 분자를 포함하는 조성물.
  9. 제8항에 있어서, 핵산 분자가 DNA 분자인 조성물.
  10. 제9항에 있어서, DNA 분자가 플라스미드인 조성물.
  11. 제8항에 있어서, 목적하는 단백질이 하나 이상의 CTE를 포함하는 HIV 구조 단백질인 조성물.
  12. 제9항에 있어서, 목적하는 단백질이 HIV 구조 단백질의 적어도 일부 및 비-HIV 부분을 포함하는 융합 단백질인 조성물.
  13. 제8항에 있어서, 목적하는 단백질이 HIV 구조 단백질의 적어도 일부 및 면역원성 비-HIV 부분을 포함하는 융합 단백질인 조성물.
  14. 제8항에 있어서, 하나 이상의 핵산 분자가,
    i) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    ii) 1 내지 5개의 CTE를 포함하는, 목적하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 조성물.
  15. a) i) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열 및
    ii) 1) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    2) 하나 이상의 CTE를 포함하는 면역원에 대한 암호화 서열을 포함하는 유전자 작제물을 포함하는 조성물; 또는
    b) i) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자 및
    ii) 1) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    2) 하나 이상의 CTE를 포함하는 면역원에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자를 포함하는, 2개 이상의 핵산 분자를 포함하는 조성물
    을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는, 개체내에서 상기 면역원에 대한 면역반응을 유도하는 방법.
  16. 제15항에 있어서,
    i) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열 및
    ii) 1) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    2) 하나 이상의 CTE를 포함하는 면역원에 대한 암호화 서열
    을 포함하는 유전자 작제물을 포함하는 조성물을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  17. 제15항에 있어서,
    i) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자 및
    ii) 1) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    2) 하나 이상의 CTE를 포함하는 면역원에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자
    를 포함하는 2개 이상의 핵산 분자를 포함하는 조성물을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  18. a) i) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열 및
    ii) 1) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    2) 하나 이상의 CTE를 포함하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 유전자 작제물을 포함하는 조성물; 또는
    b) i) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자 및
    ii) 1) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    2) 하나 이상의 CTE를 포함하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자를 포함하는 2개 이상의 핵산 분자를 포함하는 조성물
    을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는 개체에게 단백질을 전달하는 방법.
  19. 제18항에 있어서,
    i) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열 및
    ii) 1) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    2) 하나 이상의 CTE를 포함하는 단백질에 대한 암호화 서열
    을 포함하는 유전자 작제물을 포함하는 조성물을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  20. 제18항에 있어서,
    i) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자 및
    ii) 1) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    2) 하나 이상의 CTE를 포함하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자
    를 포함하는 2개 이상의 핵산 분자를 포함하는 조성물을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  21. a) i) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열 및
    ii) 1) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    2) 하나 이상의 CTE를 포함하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 유전자 작제물; 또는
    b) i) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자 및
    ii) 1) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    2) 하나 이상의 CTE를 포함하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자를 포함하는 2개 이상의 핵산 분자
    를 포함하는 세포를 배양하는 단계를 포함하는, 세포내에 단백질을 생산하는 방법.
  22. 제21항에 있어서,
    i) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열 및
    ii) 1) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    2) 하나 이상의 CTE를 포함하는 단백질에 대한 암호화 서열
    을 포함하는 유전자 작제물을 포함하는 세포를 배양하는 단계를 포함하는 방법.
  23. 제21항에 있어서,
    i) HIV-1 Rev에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자 및
    ii) 1) RRE를 포함하는 HIV 구조 단백질에 대한 암호화 서열의 적어도 일부 및
    2) 하나 이상의 CTE를 포함하는 단백질에 대한 암호화 서열을 포함하는 하나 이상의 핵산 분자
    를 포함하는 2개 이상의 핵산 분자를 포함하는 유전자 작제물을 포함하는 세포를 배양하는 단계를 포함하는 방법.
KR1020057009084A 2002-11-19 2003-11-19 Ｒｒｅ 및 ｃｔｅ를 포함하는 유전자 작제물 및 조성물 및이의 용도 KR101159519B1 (ko)

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