KR20040101499A

KR20040101499A - 암페낙 또는 네파페낙을 이용한 혈관 내피 성장 인자 매개혈관 장애 치료 방법

Info

Publication number: KR20040101499A
Application number: KR10-2004-7016542A
Authority: KR
Inventors: 데이비드피. 빙가만; 마이클에이. 카핀; 다니엘에이. 가마체; 그라프구스타브; 존엠. 야니
Original assignee: 알콘, 인코퍼레이티드
Priority date: 2002-05-03
Filing date: 2003-04-16
Publication date: 2004-12-02
Also published as: CN1649575A; JP2005525408A; CA2483275A1; US20050143468A1; PL373787A1; AU2003231730A1; EP1507522A2; WO2003092669A2; BR0309747A; MXPA04010132A; US20030207941A1; WO2003092669A3

Abstract

혈관 내피 성장 인자 매개된 혈관 장애를 치료하기 위한, 네파페낙을 포함하는 암페낙 및 유도체의 용도.

Description

암페낙 또는 네파페낙을 이용한 혈관 내피 성장 인자 매개 혈관 장애 치료 방법{Method of treating vascular endothelial growth factor mediated vascular disorders using amfenac or nepafenac}

특정한 비스테로이드 항염증제 (nonsteroidal antiinflammatory drugs, NSAIDs)가 특정한 염증 모델에서 혈관의 유출 뿐만 아니라 병리학적 증상에서 새로운 혈관의 형성(혈관신생)을 저해할 수 있다는 것이 이전에 보고된 바 있다. 혈관의 투과성 및 혈관신생에 영향을 미치는 대부분의 NSAIDs의 능력은 사이클로옥시게나아제 효소(COX-1 및 -2)를 차단하는 그들의 능력과 관련되어 있는 것으로 나타난다. COX-1 및 -2의 차단은 PGE₂와 같은 염증 매개자에 있어서의 감소와 관련된다. 또한, PGE₂저해는 혈관 내피 성장 인자 (VEGF)의 감소된 발현 및 생산을 만드는 것으로 나타난다. VEGF는 전임상 모델의 눈에서 혈관의 누출 및 혈관신생을 만들어내는 것으로 알려져 있다. 또한, VEGF의 증가된 수준이 당뇨망막병증 및 연령-관련 황반 변성을 가진 환자들의 눈의 신생혈관 조직 및 세포외액에서 발견된 바 있다. 따라서, NSAIDs는 PGE₂수준 및 VEGF 발현 및 활성에 대한 그의 효과를 조정함으로써 혈관의 누출 및 혈관신생을 저해할 수 있다. 이러한 이론은 COX-2 저해제의 전신 투여가 PGE₂및 VEGF 조직 수준을 감소시켜 종양 유도 혈관신생을 예방함을 증명하는 동물 종양 모델을 포함하는 연구에 의해 지지된다. 이러한 모델에서, VEGF 활성 및 혈관신생은 계속된 COX-2 차단 동안 외인성 PGE₂를 가함으로써 복구된다. 그러나, 선택적인 COX 저해제가 맥락막의 혈관신생을 저해하는 것으로 나타나지 않아 NSAIDs는 안구의 혈관신생 (NV)의 동물 모델에 있어서 가변적 활성을 가짐을 보였다. 사실, 이들 연구는 CNV의 발달에 있어서 COX-1 및/또는 COX-2의 역할에 의문을 불러일으켰다.

3-벤조일페닐아세트산 및 그의 특정 유도체는 항염증성 활성을 갖는 것으로 알려져 있다. 미국 특허 제 4,254,146호, 제 4,045,576호, 제 4,126,635호, 및 제 4,503,073호, 및 영국 특허 출원 제 2,071,086A호 및 제2,093,027A호는 항염증성 활성을 갖는 다양한 3-벤조일페닐아세트산, 그의 염, 에스테르 및 수화물을 개시하고 있다. 미국 특허 제 4,568,695호는 항염증성 활성을 갖는 2-아미노-3-벤조일페닐에틸 알콜을 개시하고 있다. 미국 특허 제 4,313,949호는 항염증성 활성을 갖는 2-아미노-3-벤조일-페닐아세트아미드를 개시하고 있다.

2-아미노-3-벤조일벤젠아세트산 (암페낙) 및 2-아미노-3-(4-클로로-벤조일)벤젠아세트산의 특정한 유도체는 또한 경구 투여시 위장관 부작용을 최소로 갖거나 또는 갖지 않는 비스테로이드 항염증성 전구약물을 발견하기 위한 시도에 있어서 Walsh 등. , J. Med Chem., 33: 2296-2304 (1990)에 의해 평가된 바 있다.

미국 특허 제 4,683,242호는 염증 제어 및 통증 완화를 위한 2-아미노-3-벤조일페닐아세트산, 그의 염, 및 에스테르, 그리고 수화물 및 알콜화물의 경피 투여를 교시하고 있다.

미국 특허 제 4,910,225호는 눈, 코 또는 귀의 염증 제어에 대해 국소 투여하기 위한 특정한 벤조일페닐아세트산을 교시하고 있다. '225 특허에서는 오직 아세트산 만을 개시하고 있을 뿐; 에스테르 또는 아미드를 언급하거나 눈, 코 및 귀에의 국소 투여를 위한 항염증제로서 교시하고 있지는 않다.

미국 특허 제 5,475,034호는 안과적 염증성 장애 및 안구 통증 치료에 유용한, 네파페낙을 포함하는 3-벤조일페닐아세트산의 특정 아미드 및 에스테르를 함유하는 국소적으로 투여가능한 조성물을 개시하고 있다. '034 특허 15번째 컬럼, 35-39줄에 따르면, "그러한 장애는, 이에 제한되는 것은 아니나, 포도막공막염, 상공막염, 각막염, 외과적으로 유도된 염증 및 안구내염을 포함한다."

미국 특허 제 6,066,671호는 GLC1A 녹내장 치료를 위한 네파페낙을 포함하는 3-벤조일페닐아세트산의 특정 아미드 및 에스테르 유도체의 국소적 사용을 개시하고 있다.

미국 출원 시리얼 넘버 09/929,381를 갖고 있는 것에서는 공통적으로 특정 3-벤조일페닐아세트산 및 유도체가 혈관신생-관련 장애 치료에 유용함을 밝히고 있다.

본 출원은 2002년 5월 3일 제출된 U.S. S. N. 60/377,429의 우선권을 주장하고 있다. 본 발명은 혈관 내피 성장 인자 (vascular endothelial growth factor, VEGF) 매개된 혈관 장애를 치료 또는 예방하기 위한 2-아미노-3-벤조일벤젠 아세트산 (암페낙)의 용도에 관한 것이다.

후안부 혈관신생 (neovascularization, NV)은 선진국에서 후천성 실명의 두 가지 가장 공통적인 원인: 삼출성 연령-관련 황반 변성 (age-related mascular degeneration, AMD) 및 증식성 당뇨망막병증을 야기하는 시력을 위협하는 병리학이다. 최근 삼출성 AMD에서 발생하는 후안부 NV에 대해 오직 승인된 치료는 비쥬다인과 함께 하는 레이져 광응고 또는 광선역학요법이다; 두 치료법은 망막에 국소화된 레이저 유도 손상을 가져오는 침범된 맥관계의 폐색을 포함한다. 유리체절제술이 있는 외과적 시술 및 막의 제거는 증식성 당뇨망막병증을 가진 환자들에게 현재 이용가능한 선택일 뿐이다. 엄밀히 말하자면 후안부 NV에 대한 사용을 위한 약학적 치료는 승인된 바 없다.

황반 부종을 이끄는 당뇨 환자들에 있어서의 고혈당증에 의해 유도된 망막의 미소혈관에서의 변화에 덧붙여, 신생혈관 막의 증식 또한 혈관 누출 및 망막의 부종과 관련되어 있다. 부종이 황반에 영향을 미치는 경우, 시력은 악화된다. 당뇨망막병증에 있어서, 황반 부종은 시력 손실의 주요한 원인이다. 혈관신생성 장애과 같이 레이저 광응고는 부종 증상을 안정화시키거나 해결하기 위해 이용된다. 불행하게도, 레이저 광응고는 세포파괴적 방법으로, 부종이 추가로 진행되는 것을 예방하기는 하나, 손상된 눈의 시야를 변경할 것이다.

후안부 NV 및 부종에 대한 효과적인 약학적 치료법은 환자들에게 실질적인 효능을 제공함으로써 침해성 외과적 방법 또는 손상을 일으키는 레이저 방법을 피하도록 할 것이다. NV의 효과적인 치료는 환자의 삶의 질 및 사회에서의 생산성을 개선할 것이다. 또한, 실명에 대한 원조 및 건강 관리를 제공하는 것과 관련된 사회 비용을 극적으로 감소시킬 수 있을 것이다.

암페낙은 COX-1 및 COX-2 효소의 활성을 강력하게 저해하는 것으로 알려진 NSAID이다. 기대치않게도, 암페낙은 소 망막의 미세혈관 내피 세포 분석을 이용한 용량-반응 유형에 있어서 VEGF-유도된 세포 증식 및 모세관 형성을 모두 저해하는 것으로 밝혀졌다. 우리의 지식에, COX 저해를 독립적으로 일으키는 NSAIDs에 의한 VEGF 효과 상의 이 차단, 즉, VEGF에 의해 일반적으로 유도되는 혈관신생전의(proangiogenic) 신호를 차단하는 능력은 다른 NSAIDs과 비교하여 암페낙에 관련하여는 독특하다. 이 독특한 활성은 국소적 네파페낙 (암페낙의 전구약물)이 국소적 VOLTAREN^ⓡ및 ACULAR^ⓡ가 효과가 없는 경우, 마우스 모델에서 맥락막의 NV를 저해한다는 우리의 이전의 발견을 설명하는데 다소 도움을 줄 수 있다. 이 신규한 항혈관신생 활성이 사람에게서 일어난다면, 암페낙 (및 국소적 네파페낙)은 VEGF 신호전달을 포함하는 질환 및 다른 NSAIDs가 덜 효과적인 질환 상태를 보다 효과적으로 치료하기 위해 사용할 수 있다. 암페낙(국소적 네파페낙)에 대한 잠재적 징후인 VEGF의 상향조절과 관련된 안과적 장애는 삼출성 연령관련황반변성, 증식성 당뇨망막병증, 망막 정맥 폐색, 증식성 유리체망막병증, 신생혈관 녹내장, 각막 혈관신생, 망막 미세혈관병증 및 망막 (황반) 부종을 포함한다. 또한, 암페낙이 전임상 모델에서의 국소적 각막 적용을 따르는 후안부에 도달하는 능력을 가진 네파페낙의활성 대사체이기 때문에, 네파페낙의 국소적 안구 투여를 이용하여 이들 VEGF-매개된 안구 장애를 치료하는 것이 가능하다. .

본 발명에 따라, 암페낙의 국소적 또는 전신적 투여가 VEGF 매개된 혈관 장애를 치료 및/또는 예방하는데 사용되는 반면, 네파페낙의 치료학적 유효량은 눈에 국소적으로 투여된다.

VEGF 매개된 혈관 이상의 치료 또는 예방에 사용되는 암페낙 또는 네파페낙의 투여량은 예방 또는 치료될 이상의 유형, 환자의 나이 및 체중, 그리고 투여의 제형/경로에 따라 결정될 것이다. 국소적 안구 투여에 대해 의도된 조성물은 일일 1 회 내지 수 회 1-2 방울로, 일반적으로 약 0.001 내지 약 4.0% (w/v), 바람직하게는 약 0.01 내지 약 0.5% (w/v)의 양으로 투여될 것이다. 같은 방식으로, 다른 제형을 위한 대표적인 투여량은 주사 또는 국소 투여에 대해서는 대략 1-100 mg의 암페낙/일/성인, 경구 투여에 대해서는 대략 10-1000 mg의 암페낙/성인이며, 각각 일일 1회 내지 수 회 투여된다.

추가적인 치료제가 네파페낙 또는 암페낙의 사용을 보충하기 위해 추가될 수 있다.

하기 실시예는 본 발명의 다양한 면을 설명하기 위해 표현된 것이나, 본 발명의 범위를 어떠한 면으로 제한하는 것은 아니다. 퍼센테이지는 중량/부피 기초로 표현된다.

실시예 1 : 하기 제제는 본 발명에서 유용한 국소적 조성물 중 대표적인 것이다.

제제 1

네파페낙 0.01-0.5%

폴리소르베이트 80 0.01%

벤잘코늄 클로라이드 0.01% + 10% 초과

디소듐 EDTA 0. 1%

단염기 소듐 포스페이트 0.03%

이염기 소듐 포스페이트 0.1 %

소듐 클로라이드 q.s. 290-300 mOsm/Kg

NaOH 및/또는 HCl로의 pH 조정 pH 4.2-7. 4

물 q.s. 100%

제제 2

네파페낙 0.01-0.5%

하이드록시프로필 메틸셀룰로스 0.5%

폴리소르베이트 80 0.01%

벤잘코늄 클로라이드 0.01% + 5% 초과

디소듐 EDTA 0.01%

이염기 소듐 포스페이트 0.2%

소듐 클로라이드 q.s. 290-300 mOsm/Kg

NaOH 및/또는 HCl로의 pH 조정 pH 4.2-7.4

물 q.s. 100%

제제 3

네파페낙 0.1 + 6% 초과

카르보폴 974P 0.08%

틸록사폴 0.01%

글리세린 2.4%

디소듐 EDTA 0.01%

벤잘코늄 클로라이드 0.01%

NaOH 및/또는HCl로의 pH 조정 pH 7.5± 0.2

물 q.s. 100%

실시예 2

BRMEC (소 망막의 미세혈관 내피 세포, Bovine Retinal Microvascular Endothelial Cell) 증식에 대한 AL06295A(암페낙)의 효과

VEGF-유도 BRMEC 증식을 수정된 MTT 분석을 이용하여 측정하고, BRMEC를 96-웰 플레이트(Corning) 중 피브로넥틴/하이알루론산 기질 상으로 3 X10³으로 플래이팅했다. 성장 배지를 2일 동안 가하고, 뒤따라 밤새 혈청이 없는 배지(serum free medium (SFM)), 이어서 100㎕의 SFM 중 0 또는 25ng/ml VEGF를 함유하는 테스트 배지를 가했다. 24 시간 후 37 ℃/5% C0₂, 25㎕의 MTT (3-(4, 5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐 테트라졸륨 브로마이드)를 각각의 웰에 가하고, 4시간 동안 배양했다. 이어서 100㎕의 용해 완충액(50: 50 DMF: H₂0 + 2.0% 아세트산 및 0.05% HCl 중 20% SDS)을 각각의 웰에 가하고, 플래이트를 밤새 37 ℃에서 배양하고 570nm에서 읽었다(SPECTRAmax 190, Molecular Devices; Sunnyvale, CA). AL06295를 이용한 실험에 대해, 25ng/ml VEGF를 0.1, 0.3, 1.0 또는 3μM의 화합물과 배합했다.

결과는 1 및 3μM 투여량의 암페낙이 VEGF 유도 BRMEC 증식을 유의미하게 감소시긴타는 것을 나타냈다, 도 1 참조.

실시예 3

BRMEC 튜브 형성에 대한 AL06295A (암페낙)의 효과

5 ㎍/ml 피브로넥틴 및 5㎍/ml 라미닌을 함유하는 1 부피의 1Ox RPMI-1640 배지, 8 부피의 비트로겐 100 (Cohesion; Palo Alto, CA), 및 1 부피의 0.2 N NaOH의 혼합물을 제조하고, 400㎕를 24 웰 플래이트의 각각의 웰에 가했다.

37℃에서 3시간 동안 배양하여 고체화된 겔을 얻은 후, 10⁴BRMEC를 각각의 웰에 가하고, 성장 배지에서 3일 동안 배양했다. 그리고나서, 배지를 조심스럽게 빨아내고, 200㎕의 겔 용액을 세포들의 꼭대기에 층을 올리고, 37℃에서 1시간 동안 배양했다. 24시간 성장 배지를 가한 다음, 혈청이 없는(SF) 배지 + VEGF 또는 SF 배지 + VEGF 및 AL06295A를 각각의 웰에 가했다. 겔을 24시간 후 평가했다.

정량적 분석을 위해, 치료 그룹 당 6개의 필드를 튜브를 포함하는 지역으로부터 선택했다; 7개의 웰을 각각의 치료를 위해 사용했다. 튜브의 길이를 디지털화된 이미지로 측정하고, 데이터는 ㎛로 시야 당 총 길이로서 도 2에 표현했다. 결과는 모든 투여량의 암페낙이 BRMECs에서 VEGF 유도 모세관 형성을 강력하게 저해함을 보여준다.

본 발명은 특정한 바람직한 구체예를 참고로 하여 기재하였으나; 그의 특별한 또는 필수적인 특징으로부터 벗어나지 않는 다른 특이적 형태 또는 변형으로 구체화될 수 있음을 이해해야할 것이다. 그러므로 상기 기술된 구체예는 모든 면에 있어서 설명하는 것으로 여겨지며, 이전의 설명에 따라 부가된 청구항에 의해 나타나는 본 발명의 범위를 제한하는 것이 아니라고 여겨진다

Claims

약제학적 유효량의 암페낙을 투여하는 것을 포함하는 혈관 내피 성장 인자 매개된 혈관 장애의 치료 방법.
제 1항에 있어서, 상기 장애가 삼출성 연령관련황반변성, 증식성 당뇨망막병증, 망막 정맥 폐색, 증식성 유리체망막병증, 신생혈관 녹내장, 각막 혈관신생, 망막 미세혈관병증, 및 망막 (황반) 부종으로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 것인 방법.
약제학적 유효량의 네파페낙을 투여하는 것을 포함하는 혈관 내피 성장 인자 매개된 혈관 장애의 치료 방법.
제 3항에 있어서, 상기 장애가 삼출성 연령관련황반변성, 증식성 당뇨망막병증, 망막 정맥 폐색, 증식성 유리체망막병증, 신생혈관 녹내장, 각막 혈관신생, 망막 미세혈관병증, 및 망막 (황반) 부종으로 구성되는 그룹으로부터 선택되는 것인 방법.
제 1항에 있어서, 상기 장애가 안과적 장애인 것을 특징으로 하는 방법.
제 3항에 있어서, 상기 장애가 안과적 장애인 것을 특징으로 하는 방법.
제 2항에 있어서, 상기 장애가 망막(황반) 부종인 방법.
제 4항에 있어서, 상기 장애가 망막(황반) 부종인 방법.
제 2항에 있어서, 상기 장애가 증식성 당뇨망막병증인 방법.
제 4항에 있어서, 상기 장애가 증식성 당뇨망막병증인 방법.