KR20040065498A

KR20040065498A - 알러지성피부염 및 피부가려움 완화효과를 갖는 천연조성물

Info

Publication number: KR20040065498A
Application number: KR1020030002488A
Authority: KR
Inventors: 이원경; 이민호; 노경옥; 박상기; 노석선
Original assignee: 주식회사 엘지생활건강
Priority date: 2003-01-14
Filing date: 2003-01-14
Publication date: 2004-07-22

Abstract

본 발명은 알러지성피부염 및 피부가려움 완화효과를 갖는 천연조성물에 관한 것으로서, 화피, 자완, 백선피, 부평초 추출물이 알러지성피부염과 가려움의 주된 인자인 히스타민(histamine)의 유리를 탁월하게 억제하는 것으로부터 착안하여 상기 천연추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성 피부염 및 가려움 완화효과를 갖는 조성물을 제공한다.

Description

알러지성피부염 및 피부가려움 완화효과를 갖는 천연조성물 {Allergic dermatitis and skin itching relieving composition containing natural herb extract}

본 발명은 수종의 천연추출물이 알러지성피부염과 가려움의 주된 인자인 히스타민(histamine)의 유리를 탁월하게 억제하는 것으로부터 착안하여 상기 천연추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성피부염 및 가려움 완화효과를 갖는 조성물에 관한 것이다. 더욱 구체적으로는 화피, 자완, 백선피, 부평초 중 적어도 1종의 추출물을 유효성분으로 함유하는 알레르기성피부염 및 피부가려움 완화효과를 갖는 조성물에 관한 것이다.

알러지질환은 문명이 발달된 곳일수록 심각한 문제가 되고 있으며, 미국의 경우 약 20종 이상의 알러지질환으로 고통받고 있으며(Scientific American, 1993년 9월), 그 중에서 피부염, 천식, 비염 등이 가장 많은 것으로 알려져 있다. 우리나라의 경우도 알러지질환으로 고통받는 환자의 수가 선진국 수준이며 매년 증가하는 추세에 있고 특히 소아아토피를 비롯한 소아질환이 급증하고 있다. 따라서 많은 연구자들이 이러한 알러지질환에 의한 경제적, 생리적, 심리적 부담을 경감시키기위한 치료제 개발에 심혈을 기울이고 있다.

일반적으로 인체에서 알러지는 피부에서 아토피성 피부염, 두드러기, 기관지 천식, 알러지성 비염, 알러지성 각막염 등의 형태로 나타나며, 비만세포가 1차적인 역할을 하며 비만세포에서 유리된 히스타민이 혈관투과성을 촉진시키고 염증계세포들이 조직내로 침윤되는 것을 유도하게 된다. 따라서 알러지질환의 치료에 사용되는 크로몰린산나트륨(Na-cromolyn)이나 케토티펜(ketotifen)은 효과적인 히스타민 유리억제제로 알려져 있다.

피부에서 유발되는 알러지의 기작은 크게 초기단계(early phase)와 후기단계(late phase)로 나누어 볼 수 있는데, 초기단계에서는 조직속의 대식세포 (macrophage)에서 외부항원에 의해서 T-helper cell이 활성화되고 B cell에서 IgE가 생성되면, 비만세포막의 고친화성 IgE수용체(FcRI)에 결합한 복수의 IgE항체에 진드기, 꽃가루 등의 다가항원이 결합하여 가교를 이루며, 수용체(FcRI)가 응집하고 이 수용체(FcRI)의 가교 및 응집에 의하여 비만세포가 활성화되어 세포질내의 칼슘이온(Ca²⁺) 농도 등이 상승하여 탈과립이 일어나면서 비만세포내에 저장되어 있던 히스타민이 분비된다.

이외에 세포막의 인지질에 작용하는 효소로서 포스포리페이스 A2 (phospholipase A2), 포스포리페이스 D(phospholipase D)가 있는데, 포스포리페이스 A2는 포스파디딜콜린(phosphatidylcholine)에서 아라키돈산(arachidonic acid)를 생성하고 포스포리페이스 D(phospholipase D)는 포스파디딜콜린에서 포스파티딘(phosphatidine)을 생성하여 탈과립시에 히스타민과 같이 비만세포내에 미리 저장되어 있는 화학전달물질(preformed mediator)이 유리되는 것과 동시에 새로 합성된 프로스타글란딘(prostaglandin), 류코트리엔(leukotriene) 등이 함께 분비되어 혈관확장, 혈관투과성 항진, 기관지 평활근의 수축이나 분비항진 등의 작용을 하게 되어 제1형 즉시형 알러지반응을 유발한다.

후기단계(late phase)는 염증반응이 주가 되며 1차 유발물질들이 유리된 다음 히스타민, 세로토닌(serotonin) 및 류코트리엔 이외에 호산구나 호중구 등 염증세포의 주화성 인자로 작용하는 NCF, ECF, PAF 등이 조직내로 침윤되고 이들에 의해 염증반응이 진행되어 알러지 유발부위의 조직학적 변화들이 유발된다.

비만세포에 대한 자극은 위에서 언급한 IgE에 의한 자극 이외에 렉틴(lectin)이나 아나필라톡신(anaphylatoxin) 등의 비면역적인 자극이 있다. 그외에 칼슘이온 운반체(calcium ionophore A23187), 컴파운드 48/80등의 히스타민 유리촉진제, 코데인, 모르핀, 섭스탄스 피(substance P) 등의 약재도 비만세포를 탈과립하여 히스타민을 유리시키는 물질로 알려져 있으며, 분비된 히스타민이 혈관 내피세포와 결합하면 혈관세포의 수축이 일어나서 혈액속의 플라스마(plasma)를 조직으로 삼출(extravasation)시키며, 또한 내피세포는 혈관 근육세포를 이완시키는 프로스타사이클린(prostacyclin)과 산화질소(nitric oxide)와 같은 물질의 합성을 유도하여 혈관팽창(vaso- dilataion)을 유발한다. 위와 같은 기작에 의하여 히스타민 분비에 의하여 부종(wheal), 발적(flare), 가려움(itching)의 반응을 나타내며 이는 제 1형 즉시형 과민반응의 전형적인 현상이다.

한편, 본 발명에서 사용된 천연물의 일반적인 성상 및 약리작용은 다음과 같다.

백선피(Dictamnus dasycarpusTurcz.)는 백선 또는 검화라고 불리는 여러해살이풀의 부리껍질로서, 가을에 뿌리를 캐어 물로 씻고 껍질을 벗겨서 말린다. 알칼로이드가 0.13% 함유되어 있고 딕탐닌(딕타민)이 0.02~0.03% 정도 함유되어 있으며, 그 외에 스킴미아닌, 트리고넬린, 콜린, 딕탐노락톤, 프락시넬론, 딕탐놀리드, 오바쿠론 등이 함유되어 있다. 백선피 달인액은 열내림작용이 있으며 물 우림액은 여러가지 병원성진균을 억제한다. 동의치료에서는 사지불안, 중풍에 쓰이는 약으로 알려져 있으며, 벌레떼기약, 간헐열, 머리아픔, 류머티즘, 척수신경근염 등에 열내림약, 아픔멎이약, 진정약, 오줌내기약으로 쓴다. 또한 습진, 사상균성 피부질환, 태선, 악창, 옴, 두드러기, 대머리 등에 우림약을 만들어서 바른다.

부평초(Spirodela polyrhizaSchleiden)는 물위에 떠있는 한해살이풀로 흔히 개구리밥이라고 불려진다. 달걀모양의 잎이 2~5개 붙어있고 그 아랫면은 가지색을 띤다. 5~11개의 가는 뿌리가 있다. 전국 각지의 논, 늪지, 저수지에서 자라며, 여름과 가을에 전초를 거두어 맑은 물에 씻어 그늘에 얇게 펴서 말린다. 요오드, 브롬, 초산칼슘, 염화칼슘 등 무기물이 있고 유효성분은 정확히 알려지지 않았다. 같은 속 식물에서는 47개의 플라보노이드가 확인되었다. 달임약은 동물실험결과 혈압내림작용과 강심작용이 있는 것으로 나타났으며, 동의치료에서 오줌내기약, 땀내기약, 곪은 것을 푸는 약으로 쓰며, 민간에서는 신선한 잎을 뱀에 물린데 붙이며 백반, 종양, 단독, 문둥병 등에도 쓴다.

자완(Aster tataricusL. fil.)은 개미취라고 하며 높이 1~2 m의 여러해살이풀이다. 자완은 뿌리부분이며 가을에 캐어 물에 씻어 햇볕에 말린다. 알려진 주성분으로는 트리터피노이드(triterpenoid)인 프리델린, 에피프리델린, 시오논, 결정성 사포닌, 쿠마린 화합물, 퀘세틴이 있다. 달임액은 동물실험에서 거담작용이 있으며 기침멎이 작용도 있다. 동의치료에서는 기침가래약으로 폐결핵, 피가래, 기관지염, 천식, 감기에 쓴다.

화피(Betula platyphyllaSukaz.)는 자작나무의 껍질로 봄 또는 여름철에 벗겨 햇볕에 말린다. 주성분은 트리터피노이드 성분인 베툴린, 올레아놀산, 방향족 알코올인 베툴로시드, 카로틴 아스코르브산이다. 껍질부분에는 방부작용이 있어 곰팡이와 균의 침투를 막고 약한 오줌내기작용와 열물내기작용이 있다. 동의에서도 주로 열내림약으로 쓰고 위병에 쓴다.

종래의 피부알러지 및 가려움 예방 및 완화를 위한 기술은 항히스타민제의 복용 또는 스테로이드제제를 외용제로 도포함으로써 효과적으로 억제할 수 있다. 그러나 이들 약물은 복용시 중추신경 장애, 소화기 장애나 혼몽상태를 초래할 수 있어 이러한 부작용을 극복할 수 있는 천연유래의 소재를 발굴하려는 노력들이 지속되고 있으나, 현재로서는 감초추출물 등이 항염증원료로서 많이 부각되고 있을 뿐 천연물에서는 뚜렷한 소재가 없는 상황이다. 그리고 점점 사회가 고도화되어가면서 알러지성 질환이 급증하는 추세에 있으며, 갈수록 질환의 치료보다는 예방차원의 중요성이 더욱 부각되어지고 있다.

이에 본 발명자들은 알러지성피부염 및 피부가려움 완화소재를 발굴하기 위하여, 앞에서 언급한 초기단계에서 히스타민의 유리를 억제함으로써 알러지성피부염 및 피부가려움을 효과적으로 완화/예방할수 있다는 발상에서 천연의 다양한 소재들로부터 탐색한 결과, 그 중 화피, 자완, 백선피, 부평초 추출물이 히스타민 유리억제 및 동물실험과 임상실험에서 효과가 매우 탁월함을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 상기 천연추출물 중의 적어도 하나 이상을 유효성분으로 하는 함유하는 히스타민 유리억제제를 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 히스타민 유리억제제를 포함하는 화장품 및 식품을 제공하는 것이다.

본 발명은 화피, 자완, 백선피 및 부평초 중 적어도 1종의 추출물을 유효성분으로 함유하는 히스타민 유리억제효과를 갖는 조성물에 관한 것이다.

상기 추출물의 함량이 너무 적으면 히스타민 유리억제효과가 미미하며, 너무 많으면 효과는 유사함에 비하여 색상과 냄새와 같은 성상 및 사용감이 나빠지므로, 바람직한 추출물의 함량은 조성물 전체중량에 대하여 0.01 내지 10 중량%이다.

본 발명의 조성물은 상기 히스타민 유리억제효과로 인하여 알러지성피부염 및 피부가려움 완화효과를 갖으며, 따라서 알러지성피부염 및 피부가려움 예방 및 치료용으로 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물을 알러지성피부염 및 피부가려움 예방 및 치료용으로 사용할 때에는, 피부에 적용하는 외용제가 바람직하다.

본 발명의 조성물을 제조하는 방법은 화피, 자완, 백선피 및 부평초 중 적어도 1종 이상을 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, n-헥산 및 클로로포름 중에서 선택되는 1종 또는 2종 이상의 혼합용매를 이용하여 상온에서 냉침 및 감압농축법에 의하여 추출하는 단계를 포함한다. 이와 같이 수득한 천연추출물을 희석, 첨가, 혼합하여 다양한 제형의 제품을 제조할 수 있다.

상기 제품의 일종으로, 본 발명은 화피, 자완, 백선피 및 부평초 중 적어도 1종의 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성피부염 및 피부가려움 완화효과를 갖는 건강보조 기능성식품 및 화장품을 제공한다. 건강보조 기능성식품의 경우, 상기 추출물의 1일 섭취량이 너무 적으면 알러지성피부염 및 피부가려움 완화효과가 미미하며, 너무 많으면 효과는 유사함에 비하여 색상과 냄새와 같은 성상 및 복용감이 나빠지므로, 바람직하게는 상기 추출물의 1일 섭취량이 0.3 내지 30.0 g/일이 되도록 한다.

이하, 실험예 및 실시예를 들어 본 발명은 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실험예 및 실시예에 의해 본 발명의 권리범위가 한정되는 것은 아니다.

제조예 1: 천연추출물의 제조

본 발명에서 사용된 천연물의 추출방법에 대하여 설명하면 다음과 같다. 천연생약을 건조후 분쇄기로 50메쉬 정도의 입자로 분쇄한 다음 5배량의 추출용매에서 2일간 냉침한 후 추출원액을 여과한 다음 용매를 완전히 제거한 것을 1차 추출물로 사용하였다.

이 때 각 원료의 추출을 위하여, 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, n-헥산, 클로로포름 중에서 선택되는 1종 또는 2종 이상의 용매를 혼합하여 추출에 사용하는 것이 바람직하다.

실험예 1: Rat 비만세포에서의 히스타민 유리억제력 평가실험

Rat 비만세포에서의 히스타민 유리 억제력을 평가하기 위하여 8주령 이상의 웅성 Sprague Dawley 랫트(SD rat)를 이용하였다. 8주령 이상의 SD rat에게 실험 이틀전부터 먹이를 주지 않아서 장관의 부피를 줄여서 복수 채취가 용이하도록 하였다. 표피를 핀셋으로 잡고 가위로 표피를 절개하고 buffer 30㎖를 복강에 넣고 30초간 맛사지한 다음 파스퇴르피펫을 이용하여 복수를 채취하였다. 채취한 복수 1㎖을 22.5% metrizamide용액 2㎖ 층 위에 층이 혼합되지 않도록 넣은 다음 비중차이에 의해 원심분리하여 복수내에서 선택적으로 비만세포만을 분리하였다. 분리된 비만세포에 compound 48/80(이하 Co48/80)을 처리하여 히스타민을 유리시켰고, 상기 제조예 1에서 제조한 추출물을 dimethyl sulfoxide(DMSO)에 녹여 세포배양 배지에 100분의 1의 부피로 처리하여 최종농도가 0.01%, 0.001%, 0.0001%가 되도록 미리 30분간 비만세포에 처리한 후에 Co48/80 50㎍/㎖를 15분간 처리하여 히스타민이 유리되도록 하였다.

유리된 히스타민을 정량하기 위하여 부탄올과 헵탄을 이용하여 상등액에서 히스타민을 추출/정제하였고 분리된 히스타민에 o-phthaldi-aldehyde를 결합시켜 excitation 360nm, emission 440nm에서 형광을 측정하여 유리된 히스타민의 양을 결정하였다. 비만세포에서의 히스타민 유리억제율은 다음의 수학식 1에 의하여 계산하였다.

억제율(%) = [(A-B)/A]×100

A : Co48/80 단독 처리시의 히스타민 유리율

B : 시료 처리시의 히스타민 유리율

상기의 억제율 계산방법에 의한 실험결과는 다음의 표 1과 같다.

추출물의 히스타민 유리억제율(%)

추출물＼농도(%)	0.0001	0.001	0.01
Ketotifen	21.0	22.5	38.1
화피	62.2	69.2	88.9
자완	9.4	73.3	79.0
백선피	20.2	73.4	70.8
부평초	44.9	54.0	58.0

상기의 방법에 의하여 rat 비만세포에서의 히스타민 유리억제 효과를 확인한 결과, 양성대조군인 ketotifen과 동등수준 이상의 탁월한 히스타민 유리억제효과를 보였다.

실험예 2: 국소투여시 Co48/80에 의해 유발된 알러지억제효과 평가

히스타민 유리억제력 평가를 위한 실험동물모델로는 6~7주령 웅성 Sprague-Dawley rat(SD rat)를 사용하였으며, 히스타민유리 유발물질로는 컴파운드 48/80(Co 48/80)을 사용하였다. 실험동물의 등 부위의 피부에 주사할 곳 12위치를 선정하여 그 중 6부위에 추출물시료를 주사하고 척추를 중심으로 대칭되는 6부위에는 추출물시료를 녹인 용매를 주사한 다음 30분 경과후 컴파운드 48/80을 주사하였다. 추출물시료는 에탄올추출물을 감압, 농축한 다음 phosphate buffered saline(PBS)에 희석하여 사용하였으며, 각 추출물의 최종농도는 주사부위당 각각 0.5㎎, 0.05㎎, 0.005㎎이 되게 하였다. 약효물질을 피내주사한 다음 동시에 실험동물의 꼬리 부분에 1% 에반스블루(Evans blue) 500㎕를 정맥주사한 후 1시간 동안 방치하였으며, 그 후 치사시켜 주사부위를 절삭하여 에반스블루용액이 조직으로 삼출된 부분을 가위로 잘라내었다. 잘라낸 조직을 1N KOH 용액 1㎖에 담그고 37℃에서 밤새 반응시켜 완전히 녹인 다음 여기에 0.6N 인산용액(phosphoric acid)+아세톤(5:13) 9㎖를 가하여 원심분리하고 상등액을 620nm에서 스펙트로포토미터 (spectrophoto meter)로 측정하여 에반스블루의 양을 결정하였다. 알러지억제율은 다음의 수학식 2에 의하여 계산하였다.

억제율(%) = [(A-B)/A]×100

A : 시료를 녹인 용매주사 후 Co48/80을 주사한 부위에서 추출한 에반스블루의 양

B : 시료주사후 Co48/80을 주사한 부위에서 추출한 에반스블루의 양

상기의 억제율 계산방법에 의한 실험결과는 다음의 표 2와 같다.

천연추출물의 알러지억제효과 동물실험(억제율: %)

추출물＼농도(mg/부위)	0.005	0.05	0.5
Ketotifen	-	-	91.4
화피	32.2	85.5	87.7
자완	10.2	68.2	85.9
백선피	20.4	63.3	70.0
부평초	50.0	52.0	60.5

각 천연추출물을 피부조직내에 국소투여한 다음 Co48/80에 의해 유발된 알러지의 억제정도를 평가한 결과, 각 추출물들은 농도의존적인 효과를 나타내었고 양성대조군으로 사용된 ketotifen과 동등수준의 효과를 나타내었다.

실험예 3: 사람 피부에 대한 Co48/80에 의해 유발된 알러지 억제효과 평가

상기 실험예 1 및 2에서 비만세포 및 동물실험 모델로 효능을 평가한 결과, 본 발명의 천연추출물은 in vitro와 in vivo 평가에서 탁월한 효과를 나타내었다. 따라서 사람 피부를 Co48/80로 자극하여 알러지반응을 일으키고 그 억제효과를 확인하기 위하여 각 추출물을 글리세린과 계면활성제를 이용한 간단한 제형에 혼합하여 사람 피부에 대한 효과를 평가하였다. 추출물 제형 100㎍ 정도의 양을 피시험자 10명의 등 견갑골 아래쪽 부위에 hill top chamber와 스캔포어 테이프(scanpore tape)를 이용하여 도포한 후 16시간 이후 제거하였다. 시료제거 1시간 이후 시료적용 부위에 Co48/80 1%용액을 한방울 떨어뜨린 다음 시린지 니들(syringe needle)로 프릭(prick)하고 10분후에 유발된 발적의 면적을 계산하였다.

사람피부에 대한 알러지억제효과는 base를 100으로 보았을 때의 상대비로 평가하였으며, 그 결과는 표 3과 같다. 여기서, 상기 상대비 수치가 작을수록 알러지억제효과가 우수한 것이며, base의 조성은 세토스테아릴알콜 2.5중량%, 미네랄오일 10중량%, 글리세린 10중량% 및 트윈60 2.5중량%이다. 양성대조군으로는 일반적으로피부알러지 치료시 바르는 제제로 사용하는 스테로이드제제를 사용하였으며 그 유효성분 함량은 0.05%이었다.

천연추출물의 사람피부 알러지 억제효과(상대비)

농도(%)	0.01	0.1	1.0	10.0	15.0
Base	100	100	100	100	100
스테로이드	45.2			-	-
화피	75.2	58.9	55.7	55.0	60.0
자완	80.1	60.1	56.3	58.1	59.0
백선피	78.0	78.1	65.0	60.0	61.0
부평초	85.2	78.0	75.0	70.0	-

표 3에서 보는 같이, 0.01~15.0% 농도범위에서 사람피부에 대한 유효성을 평가하였을 때 0.01~10.0% 범위에서 농도의존적으로 상승효과를 보였으며, 스테로이드제제와 비교하였을 경우 동일농도에서는 효과가 다소 낮게 나왔으나 스테로이드 자체의 부작용을 고려하면 천연추출물이 사람피부 알러지억제효과에 대한 우수성을 가지고 있는 것으로 판단되었다. 천연추출물을 15.0% 적용하였을 경우 천연물 자체의 색깔이 매우 강하거나 또는 그 효과가 10.0% 적용시와 동등수준 또는 낮게 나왔다. 따라서 천연추출물의 함량을 0.01~10.0%에서 적용하는 것이 바람직하다.

실험예 4: 천연추출물의 경구투여(Oral administration)시의 알러지억제효과

전신투여시의 효과를 평가하기 위하여 6~7주령 웅성 Sprague-Dawley rat를 사용하였으며 체중은 180g에서 250g 사이의 것을 사용하였고 히스타민 유리유발물질로는 컴파운드 48/80 (Co 48/80)을 사용하였다. 천연추출물은 에탄올추출물을 감압/농축하여 용매성분을 완전히 제거하고 탈이온수에 희석하여 고형분 농도가 각각 1.0g/kg체중, 0.1g/kg체중, 0.01g/kg체중이 되도록 2㎖씩 경구투여하였고 대조군으로 탈이온수만 2㎖를 경구투여하여 각 군을 5마리씩으로 하였다. 시료를 5일간 매일 1회 투여하였고 5일째 마지막 투여 2시간후에 실험동물의 등 부위를 실험용 면도기로 털을 제거한 다음 피부에 주사할 곳 4위치를 선정하고 각 위치에 컴파운드 48/80용액을 0.05㎎ 피내주사하였고 동시에 실험동물의 꼬리에 1% 에반스블루 (Evansblue) 500㎕를 정맥주사한 후 1시간 동안 방치하였으며 그 후 치사시켜 주사부위를 절삭하여 에반스블루용액이 조직으로 삼출된 부분을 가위로 잘라내었다. 잘라낸 조직을 1N KOH 용액 1㎖에 담그고 37℃에서 밤새 반응시켜 완전히 녹인 다음 여기에 0.6M 인산용액(phosphoric acid)+아세톤(5:13) 9㎖를 가하여 원심분리하고 상등액을 620nm에서 스펙트로포토미터로 측정하여 에반스블루의 양을 결정하였다. 알러지억제율은 다음의 수학식 3에 의하여 계산하였다.

억제율(%) = [(A-B)/A]×100

A = 대조군에서 추출한 에반스블루의 양

B = 시험군에서 추출한 에반스블루의 양

상기의 억제율 계산방법에 의한 천연추출물의 실험결과는 다음의 표 4와 같다.

천연한방추출물 경구투여시의 알러지억제효과(억제율: %)

추출물＼농도(g/kg 체중)	0.01	0.1	1.0
Ketotifen	85.0		-
화피	11.8	50.6	88.2
자완	50.0	70.0	87.7
백선피	25.0	82.0	86.5
부평초	9.6	50.6	84.2

상기의 천연추출물의 유효성평가에서 각각 1.0g/kg체중의 경구투여시 가장 좋은 결과를 보였으며, 그 이상의 농도에서는 투여가 불가능하여 평가하지 못하였고 0.01g/kg체중 이하에서는 거의 효과가 없었다.

상기 실험예를 토대로 본 발명자들은 상기 천연추출물을 그대로 또는 공지의 화장품이나 식품첨가물과 함께 제형화하였으며, 이때 2종 이상의 추출물을 혼합해도 좋다. 각 천연추출물은 오래전부터 생약으로 이용되어 오던 것들이고 추출방법이나 상기 실험농도에서는 안전성에는 문제가 없었다. 각 추출물을 화장품에 첨가할 때 각각의 조성물은 일반적인 각 제품의 베이스를 기본으로 하며, 상기 실험예를 토대로 천연추출물의 함량이 각각의 조성물 전체 중량에 대하여 0.01~10.0중량%가 되도록 첨가하는 것이 바람직하다. 알러지성피부염 및 피부가려움완화 화장품의 경우, 전신로션, 전신세정제, 비누베이스에 각 추출물을 함유시키며, 이밖에 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제 등을 사용할 수 있고, 또한 물성개선을 위하여 점증제, 무기염류, 합성 고분자물질 등을 사용할 수 있다.

상기 실험예의 경구투여시험법에서 천연한방추출물은 0.01~1.0g/kg체중의 투여범위에서 실험동물에 대하여 우수한 효과를 나타내었고 동물에 투여시 안전성에 문제가 없음을 확인하였으며, 이러한 결과를 토대로 천연추출물을 유효성분으로 하여 통상의 제조방법에 의하여 알러지 예방 및 완화 건강식품 조성물을 제조하였다.상기 건강식품 조성물은 통상적으로 사용되는 부형제, 감미제, 향미제등을 추가로 포함할 수 있으며, 통상적인 방법에 의하여 정제, 캅셀제, 산제, 과립, 현탁제, 유화제, 시럽제, 액제와 같은 제제로 제형화할 수 있다.

이하 본 발명을 아래와 같이 히스타민 유리억제 화장품 및 식품의 제조에 대한 실시예 및 비교예에 의거하여 더욱 상세하게 설명한다.

실시예 1 내지 12 및 비교예 1: 전신용로션

다음의 표 5와 같은 조성에 따라 천연추출물을 아래의 중량%별로 준비하고 유상과 수상을 75℃ 배합기에 따로 준비한 후, 유상을 수상에 서서히 첨가하여 호모믹서를 이용하여 3,000 rpm으로 10분간 유화시킨 후 실온까지 냉각시켜 전신용로션을 제조하였다.

전신용로션 실시예(중량%)

원료명	실시예1	실시예2	실시예3	실시예4	실시예5	실시예6	실시예7	실시예8	실시예9	실시예10	실시예11	실시예12	비교예1
C14-22알코올/C12-20 알킬글루코시드*	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5
베헤닐알코올	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
스쿠알란	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0	8.0
바셀린	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
비즈왁스	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0
농글리세린	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
세라마이드	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
화피추출물	5.0	3.0	2.5	1.0	0.1	2.5	2.5	2.5	1.0	1.0	0.1	0.01	-
자완추출물	-	3.0	2.5	1.0	0.1	2.5	2.5	2.5	1.0	1.0	0.1	-	-
백선피추출물	-	3.0	2.5	1.0	0.1	-	1.0	-	-	0.1	-	-	-
부평초추출물	-	3.0	2.5	1.0	0.1	-	-	1.0	-	-	0.1	-	-
방부제	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량
정제수	to 100	to 100	to100	to 100	to 100	to 100	To 100	to100	to 100	to 100	to100	to 100	to 100
* 상품명: MONTANOV L (SEPPIC社, 프랑스)

실험예 5: 피부국소 도포시 전신용로션의 Co48/80에 의해 유발된 알러지억제 효과

상기 실시예 1 내지 12 및 비교예 1에서 제조한 전신용 로션을 도포하였을때 Co48/80에 의해 유발된 알러지의 억제효과를 확인하기 위하여, 100㎍ 정도의 양을 피시험자 20명의 등 견갑골 아래쪽 부위에 hill top chamber와 스캔포어 테이프(scanpore tape)를 이용하여 도포한 후 16시간 이후 제거하였다. 시료제거 1시간 이후에 시료적용 부위에 Co48/80 1%용액을 한방울 떨어뜨린 다음 시린지 니들로 프릭(prick)하고 10분후에 유발된 발적의 면적을 계산하였다. 전신용로션의 사람피부에 대한 알러지억제효과는 base를 100으로 보았을 때의 상대비로 평가하였으며, 그 결과는 표 6과 같다. 여기서, 상기 상대비 수치가 작을수록 알러지억제효과가 우수한 것이다.

전신용로션의 알러지억제효과

실시예1

실시예2

실시예3

실시예4

실시예5

실시예6

실시예7

실시예8

실시예9

실시예10

실시예11

실시예12

비교예1

상대적억제비율

58.0

59.1

55.7

60.0

78.2

58.2

57.0

56.9

78.3

78.0

79.2

85.9

100

성상/사용감

양호

나쁨

양호

상기의 결과에서 단독으로 평가하였을 때 가장 효과가 좋았던 화피를 단독으로 처방하였을 경우와 다른 추출물과 복합적으로 처방하였을 경우를 비교하면, 화피를 단독으로 적용하였을 경우보다 백선피, 부평초, 자완과 함께 처방하였을 때 Co48/80에 의해 유발된 알러지의 억제효과가 우수하게 나타났다.

표 5의 실시예로 효과평가를 하였을 때 추출물 함량이 높을수록 효과가 증가하였으나 10%를 넘을 경우 효과는 비슷함에 비해 제품성상 및 사용감이 나빴고 0.01% 미만에서는 억제효과가 미미하였다. 따라서 본 발명에 사용된 추출물 함량은 0.01~10.0% 범위내에서 Co48/80에 의해 유발된 알러지의 억제효과가 우수한 것으로 나타났다.

실험예 6: 전신용로션의 피부가려움 완화효과평가

상기 실시예 3 및 비교예 1에 따른 전신용로션의 피부가려움 완화효과를 평가하기 위하여 아토피피부를 가진 1~10세 유아 및 소인 100명을 대상으로 선정하였고, 아토피증상에 따라 3단계로 구분하여 실시예 3 및 비교예 1의 전신용로션에 대하여 각각 50명씩 평가를 수행하였다. 도포방법은 시험시료를 이중맹검법(double - blinded test)에 의하여 각각 오른쪽과 왼쪽으로 나누어 전신에 도포하도록 하였고, 가능한 시험시료의 효과에 영향을 미칠 수 있는 다른 보습제의 사용은 금지하였다. 평가는 1개월 사용 후 사용자의 부모가 아래의 5점 만족척도로 평가하도록 하였고, 그 결과는 다음의 표 7과 같다.

전신로션 사용후의 피부가려움 완화효과

증상정도	분류	피부저자극	각질피부 개선효과	가려움개선효과	염증완화 효과
심함	실시예3	3.78	3.65	3.68	3.54
심함	비교예1	3.30	3.26	3.05	3.20
보통	실시예3	3.95	3.83	3.85	3.71
보통	비교예1	3.45	3.40	3.15	3.28
약함	실시예3	4.05	3.95	3.88	3.80
약함	비교예1	3.50	3.38	3.08	3.35

알러지성피부염인 아토피성피부염의 종합적 평가인 상기 평가결과에 따르면, 천연추출물이 복합적으로 처방된 실시예 3의 전신로션은 비교예 1에 비하여 아토피 피부의 유/소아의 대표적인 증상에 전 평가항목에서 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 특히 아토피 피부증상이 다소 약하거나 보통인 유/소아에서 개선효과가 뚜렷함을 보였다. 비록 아토피피부 증세가 매우 심한 환자에 있어서는 그 개선정도가 보통이거나 약한 피시험자에 비해 낮았지만, 꾸준한 사용 및 기존에 알려진 스테로이드 제제와 병행하여 사용한다면 그 효과가 우수할 것으로 기대된다.

실시예 13 내지 24 및 비교예 2: 전신세정제

다음의 표 8과 같은 조성에 따라 전신세정제 베이스와 천연추출물을 중량%별로 각각 첨가하여 혼합기에서 교반, 가열, 탈기, 냉각 등의 과정을 거쳐 조성물질이 균일하게 혼합되도록 전신세정제 조성물을 제조하였다.

전신세정제 실시예(단위: 중량%)

원료명	실시예13	실시예14	실시예15	실시예16	실시예17	실시예18	실시예19	실시예20	실시예21	실시예22	실시예23	실시예24	비교예2
N-라우릴-L-글루타민산트리에탄올아민(30%수용액)	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0	20.0
N-라우릴메틸타우린나트륨(30%수용액)	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0
라우린산트리에탄올아민	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0
미리스틴산트리에탄올아민	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0	10.0
라우릴이미다졸리니움베타인	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
라우로일디에탄올아미드	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0	5.0
글리세린	5.0	5.0	5.0	5.0	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
화피추출물	5.0	3.0	2.5	1.0	0.1	2.5	2.5	2.5	1.0	1.0	0.1	0.01	-
자완추출물	-	3.0	2.5	1.0	0.1	2.5	2.5	2.5	1.0	1.0	0.1	-	-
백선피추출물	-	3.0	2.5	1.0	0.1	-	1.0	-	-	0.1	-	-	-
부평초추출물	-	3.0	2.5	1.0	0.1	-	-	1.0	-	-	0.1	-	-
향료	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량
방부제	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량
정제수	to100	to100	to100	to100	to100	to100	to100	to100	to100	to100	to100	to100	to100

실험예 7: 피부국소 도포시 전신용세정제의 Co48/80에 의해 유발된 알러지 억제효과

상기 실시예 13 내지 24 및 비교예 2에서 제조한 전신용 세정제로 세척하였을 때 Co48/80에 의해 유발된 알러지의 억제효과를 확인하기 위하여, 피시험자 20명의 전완(forearm) 2㎝×㎝부위에 시료 10%수용액 0.5㎖를 시린지로 조금씩 떨어뜨리면서 문질러서 거품을 형성한 후 30초간 기다렸다가 10초간 흐르는 물에 세척하였다. 세척 후 Co48/80 1%용액을 한방울 떨어뜨린 다음 시린지 니들로 프릭(prick)하고 10분후에 유발된 발적의 면적을 계산하였다. 전신용 세정제의 사람피부에 대한 알러지억제효과는 base를 100으로 보았을 때의 상대비로 평가하였으며, 그 결과는 표 9와 같다. 여기서, 상기 상대비 수치가 작을수록 알러지억제효과가 우수한 것이다.

전신세정제의 알러지억제 효과

원료명

실시예13

실시예14

실시예15

실시예16

실시예17

실시예18

실시예19

실시예20

실시예21

실시예22

실시예23

실시예24

비교예2

상대적억제비율

68.0

69.1

65.7

70.0

88.2

68.2

67.0

66.9

88.3

88.0

89.2

90.9

100

성상/사용감

양호

나쁨

양호

상기의 결과를 통해 천연추출물을 함유한 전신세정제가 함유하지 않은 것보다 Co48/80에 의해 유발된 알러지의 억제효과가 탁월한 것으로 나타났다. 상기 결과에서 보듯이 각 추출물은 각각 10.0% 이하에서 농도의존적인 경향을 보였으며 0.01% 미만 첨가시 억제효과가 거의 없었고 10.0% 이상에서는 오히려 효과가 증가하지 않을 뿐 아니라 제품의 성상(색상 및 냄새)과 사용감이 나빠지는 것으로 나타났다. 따라서 본 발명에 사용된 추출물의 함량은 0.01~10.0% 범위내에서 Co48/80에 의해 유발된 알러지의 억제효과가 우수한 것으로 나타났다.

실시예 25 내지 36 및 비교예 3: 비누

다음의 표 10과 같은 조성에 따라 비누 베이스(수분 및 각종 첨가제 포함)와추출물을 혼합기에서 잘 혼합한 후, 비누제조기계에서 압출, 절단, 형타하여 고형 비누형태의 비누조성물을 제조하였다.

비누 실시예(단위: 중량%)

원료명	실시예25	실시예26	실시예27	실시예28	실시예29	실시예30	실시예31	실시예32	실시예33	실시예34	실시예35	실시예36	비교예3
비누베이스(수분 13%포함)	95.0	88.0	90.0	96.0	99.6	95.0	94.0	94.0	98.0	97.9	99.7	100	100
화피추출물	5.0	3.0	2.5	1.0	0.1	2.5	2.5	2.5	1.0	1.0	0.1	0.01	-
자완추출물	-	3.0	2.5	1.0	0.1	2.5	2.5	2.5	1.0	1.0	0.1	-	-
백선피추출물	-	3.0	2.5	1.0	0.1	-	1.0	-	-	0.1	-	-	-
부평초추출물	-	3.0	2.5	1.0	0.1	-	-	1.0	-	-	0.1	-	-
향료	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량
색소	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량	적량

실험예 8: 피부국소 도포시 비누의 Co48/80에 의하여 유발된 알러지의 억제효과

상기 실시예 25 내지 36 및 비교예 3에서 제조한 비누로 세척하였을 때 Co48/80에 의하여 유발된 알러지의 억제효과를 확인하기 위하여, 피시험자 20명의 전완(forearm) 2㎝×㎝부위에 시료 4% 수용액 0.5㎖를 시린지로 조금씩 떨어뜨리면서 문질러서 거품을 형성한 후 30초간 기다렸다가 10초간 흐르는 물에 세척하였다. 세척 후 Co48/80 1%용액을 한방울 떨어뜨린 다음 시린지 니들로 프릭(prick)하고 10분후에 유발된 발적의 면적을 계산하였다. 비누의 사람피부에 대한 알러지억제효과는 base를 100으로 보았을 때의 상대비로 평가하였으며, 그 결과는 표 11과 같다. 여기서, 상기 상대비 수치가 작을수록 알러지억제효과가 우수한 것이다.

비누의 알러지억제효과

원료명

실시예25

실시예26

실시예27

실시예28

실시예29

실시예30

실시예31

실시예32

실시예33

실시예34

실시예35

실시예36

비교예3

상대적억제비율

72.0

72.6

69.0

73.5

92.6

71.6

70.4

70.2

92.7

92.4

93.7

95.4

100

성상/사용감

양호

나쁨

양호

상기 표 11에서 보는 바와 같이, 추출물을 함유한 비누가 함유하지 않은 것보다 Co48/80에 의하여 유발된 알러지의 억제효과가 탁월한 것으로 나타났다. 추출물의 함량이 10.0% 이하에서 농도의존적인 경향을 보였으며 0.01% 미만 첨가시 억제효과가 낮은 것으로 나타났고 10.0% 이상은 제품의 성상(색상 및 냄새)이 나빠지는 것으로 나타나 평가하지 않았다. 따라서 본 발명에 사용된 비누에 적용되는 천연추출물의 함량은 0.01~10.0% 범위내에서 Co48/80에 의하여 유발된 알러지의 억제효과가 우수한 것으로 나타났다.

상기의 결과를 종합하여 볼 때 천연추출물 0.01~10.00중량%를 함유하는 전신용로션, 전신세정제 및 비누의 경우에서 Co48/80에 의해 유발된 알러지의 억제효과가 우수한 평가되었으며, 가려움증 예방 및 완화효과 또한 뛰어난 것으로 평가되었다.

실시예 37 내지 39 및 비교예 4: 알러지 예방 및 완화용 건강보조식품 조성물

<실시예 37>

건조된 백선피, 부평초, 자완, 화피를 식용에 적합하다고 판정된 주정에 4시간 동안 침지한 다음 60~70℃에서 12시간 동안 추출하고 스프레이 드라이하여 분말화한 추출물 10.00g, 비타민 C 0.05g, 인삼분말 20.00g, 기타 감미제 및 향미제9.95g을 혼합하여 총중량 40.00g의 건강보조식품을 제조하였다.

<실시예 38>

건조된 백선피, 부평초, 자완, 화피를 식용에 적합하다고 판정된 주정에 4시간 동안 침지한 다음 60~70℃에서 12시간 동안 추출하고 스프레이 드라이하여 분말화한 추출물 5.00g, 비타민 C 0.05g, 인삼분말 20.00g, 기타 감미제 및 향미제 14.95g을 혼합하여 총중량 40.00g의 건강보조식품을 제조하였다.

<실시예 39>

건조된 백선피, 부평초, 자완, 화피를 식용에 적합하다고 판정된 주정에 4시간 동안 침지한 다음 60~70℃에서 12시간 동안 추출하고 스프레이 드라이하여 분말화한 추출물 1.00g, 비타민 C 0.05g, 인삼분말 20.00g, 기타 감미제 및 향미제 18.95g을 혼합하여 총중량 40.00g의 건강보조식품을 제조하였다.

<비교예 4>

비타민 C 0.05g, 인삼분말 20.00g, 기타 감미제 및 향미제 19.95g을 혼합하여 총중량 40g의 건강보조식품을 제조하였다.

실험예 9: 건강보조식품 조성물의 알러지성피부염 및 가려움완화 효과

상기 실시예 37 내지 39 및 비교예 4에서 제조한 건강보조식품의 알러지성피부염 및 가려움완화효과를 평가하기 위하여, 10세~20세 사이의 피부에 알러지소인을 가진 성인을 대상으로 상기와 같이 제조한 건강보조식품을 1일 최대 3회로 제한하고 2개월간 자유롭게 섭취하게 한 다음 피부알러지 및 가려움완화 만족도를 다음과 같은 5점 척도로 평가하였으며, 그 결과는 표 12와 같다.

	실시예37	실시예38	실시예39	비교예4
평균만족도	3.92	3.83	3.66	3.20

상기 결과에서 추출혼합물 10g을 함유한 제제를 상기의 방법대로 섭취하였을 때 가장 우수한 효과를 나타내었고 그 이하의 농도에서는 농도의존적인 모습을 보였다. 상기의 방법으로 섭취시 바람직한 추출물의 섭취량은 최소 0.3g/day에서 최대 30.00g/day가 되며, 그 함량범위에서 우수한 효과를 나타내었다.

이상 설명한 바와 같이, 본 발명에 따른 화피, 자완, 백선피, 부평초 추출물을 유효성분으로 함유하는 천연조성물은 알러지의 주된 인자인 히스타민의 유리를 억제하여 매우 탁월한 알러지성피부염(allergic dermatitis)및 가려움(itching) 완화효과를 나타낸다.

Claims

화피, 자완, 백선피 및 부평초 중에서 선택되는 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 함유하는 히스타민 유리억제효과를 갖는 조성물.
제 1 항에 있어서, 상기 추출물의 함량이 조성물 전체중량에 대하여 0.01 내지 10 중량%인 것을 특징으로 하는 히스타민 유리억제효과를 갖는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 히스타민 유리억제효과에 의해 알러지성피부염 및 피부가려움 완화효과를 나타내는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 3 항에 있어서, 상기 조성물이 피부에 적용하는 외용제임을 특징으로 하는 조성물.
제 4 항에 있어서, 상기 외용제가 화장료 조성물임을 특징으로 하는 조성물.
화피, 자완, 백선피, 부평초 중에서 선택되는 1종 이상을 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, n-헥산 및 클로로포름 중에서 선택되는 1종 또는 2종 이상의 혼합용매를이용하여 상온에서 냉침 및 감압농축법에 의하여 추출하는 단계를 포함하는 히스타민 유리억제효과를갖는 조성물의 제조방법.
화피, 자완, 백선피 및 부평초 중에서 선택되는 1종 이상의 추출물을 유효성분으로 함유하는 알러지성피부염 및 피부가려움 완화효과를 갖는 건강보조 기능성식품.
제 7 항에 있어서, 상기 추출물이 건조물로서 0.3 g 내지 30.0 g/일 투여되도록 처방된 것을 특징으로 하는 건강보조 기능성식품.