KR20040024053A

KR20040024053A - 작두콩과 금송혼합 추출물을 이용한 피부화장료

Info

Publication number: KR20040024053A
Application number: KR1020020055538A
Authority: KR
Inventors: 이충우
Original assignee: 이충우
Priority date: 2002-09-12
Filing date: 2002-09-12
Publication date: 2004-03-20
Also published as: KR100508528B1

Abstract

본 발명은 작두콩과 금송전초 혼합 추출물을 이용한 피부화장료에 관한 것으로 피부개선 효과 중, 특히 피부미백효과와 주름방지효과, 항산화효과, 육모효과, 항염효과, 여드름방지효과가 탁월한 작두콩의 물, 메탄올, 에탄올, 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린 각각 및 이들의 혼합액으로 추출한 작두콩과 금송 혼합 추출물로 피부화장료의 성분으로서 적용가능한 것이다.

Description

작두콩과 금송혼합 추출물을 이용한 피부화장료{Skin Cosmetics using horse bean and Golden larch extract}

본 발명은 작두콩과 금송혼합 추출물을 이용한 피부화장료에 관한 것으로 특히 피부 미백효과와 주름방지효과, 항산화효과, 항염효과, 육모효과, 여드름방지 효과 등 피부개선효과가 탁월한 피부화장료의 성분으로서 작두콩의 물, 메탄올, 에탄올, 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린 각각의 추출물 및 이들의 혼합액으로 추출한 추출물을 함유한 피부화장료에 관한 것이다.

일반 피부외용제에서는 화장품, 의약품, 의약부외품 등이 있고 특히 피부손상의 방지 및 개선을 목적으로 한 피부외용제에 대해서는 종래부터 천연물로부터 추출한 원료를 시작으로 여러가지의 원재료를 배합하여 사용하고 있다. 예를들면, 인삼추출물과 감초추출물, 차전초 등의 추출물, 콜라겐 등의 천연고분자, 아미노산, 비타민 등의 피부세포활성제 혹은 글리세린, 1,3-부틸렌글리콜 등의 보습제 등이 피부손상의 방지 및 개선을 목적으로 피부화장료에 이용되어 오고 있었다. 그러나 이들 종래의 피부손상 방지 및 개선에 이용되어 온 물질을 사용함에 있어 자연상태에서 자란 식물 채취는 물론 인공재배한 것을 사용하고있는데, 같은 물질이라도 채취시기나 채취장소에 따라 효능효과가 다른 것은 공지의 사실이다(Proc, Jpn, Assoc, Mycotoxical, No. 30, 1989). 특히 식물의 경우에 있어 피부의 미백효과나 면역부활효과, 항산화효과같은 특이한 효과를 얻기위해서는 그 식물의 채취부위나 채취시기, 채취장소에 따라 효과가 많이 차이나는데 문제점이 있었다.

본 발명에 사용한 작두콩은 학명이Canavalia gladiataDC이며, 고려시대 왕실에서만 약재나 식품으로 사용되어온 왕실작물이며 조선시대이후 고려말살정책으로 인하여 재배가 금지되어온 토종 전통식물이다. 작두콩은 열매가 활 모양으로 구부러진 꼬투리여서 그 모양이 작두같다 하여 작두콩 또는 도두라고 일컬어진다.

작두콩의 형태 및 특징은 한해살이 풀이며 잎은 세 개의 긴 닭알 모양 쪽잎으로 된 겹잎이며 3중겹침 형태를 지닌다. 연한 붉은색 또는 가지색의 꽃이 피고 씨의 배꼽길이는 씨길이의 절반이다. 생식질은 흰색꽃의 흰색립, 흰색꽃의 적색립, 적색꽃의 적색립으로 3종류의 재배종이 존재하며 한발, 강산성, 사질토양, 그늘진곳 등에 저항성이 큰 작물이다. 작두콩의 분포는 열대아시아, 아프리카, 인도지방에 널리 분포하고 해발 1000m이내에서 주로 재배되며, 동남아시아 및 우리나라에서도 재배되는 작물이다. 작두콩의 주요성분은 씨에는 우레아제, 혈구응집소, 카나바린 및 단백질, 기름등이 존재하며 혈구응집소는 Concanavalin A등의 여러 가지 글로불린으로 되어있다. 이 성분은 종양세포에 대한 특수작용이 있는 것으로 알려져 있다. 이외에 글루코시다제, 아르기나제등이 있으며 다른 콩과 작물에 비하여 비타민 B군, 비타민 C, 나이아신이 3∼5배 가량 더 많이 존재한다.

작두콩의 일반적으로 알려진 효능은 작두콩은 쥐눈이콩, 돌콩등과 함께 콩주에서 약효가 높은 것으로 알려져 있고 작두콩의 3가지 재배종중에서 흰색꽃의 흰색립이 건강에 좋은 성분이 많이 함유되어 있는 것으로 알려져 있으며 그의 약리 효과는 매우 다양하면서도 뛰어나다. 작두콩의 약리 효능을 몇가지로 요약하면 다음과 같다. 화농성 질환, 위나 장이 허냉하여 생긴 염증이나 궤양, 신장이 허약해서 생기는 허리아픔 음위 유정 정력감퇴, 혈액순환장애, 변비 및 비만등의 치료에 탁월한 효능이 전해진다. 작두콩에 대한 국내외 연구현황을 보면, 작두콩의 물성이나 특정 기능성 성분 등에 대한 국내의 연구는 거의 없으며 일반 성분에 대한 보고(한국 식품연구소, 1995)가 전부이다. 한방의학에서는 혈구응집작용물질, 당뇨병, 항암작용, 치질 등에 대한 효능을 경험적 처방에 활용하고 있다(약초의 성분과 이용, 1991). 일부에서는 작두콩을 지역특화작목으로 지정하여 주산단지(충북 진천)를 조성하여 생산조합이 결성되고 있으며(동양일보, 1997. 12. 11), 백화점에서의 판매와 일본으로의 수출을 추진중에 있는 농가도 있다.(부산일보, 1998. 7. 20). 작두콩의 이용방법으로는 물에 넣고 끓여 그 물을 이용하거나 분말화해서 복용하는 고적적 방법 (조규형, 1998)이 고작이며, 현대인의 소비취향에 맞는 간편하고 위생적인 건강식품이나 제약, 미용 등의 이용 개발기술이 필요한 실정이다. 그러므로 작두콩을 가공하기 위해서 먼저 선행되어야 할것이 이 작두콩의 물리적인 특성, 텍스쳐, 특정성분들이 만들어내는 구조등을 연구하여 작두콩만이 가지는 기능성 성분의 최소한의 손실을 가지며 가공할 수 있도록 하는 연구가 필요하다고 할 수 있다.

중국의 경우를 보면 한방에서의 약리작용에 대한 연구문헌이 많고 오래 전부터 치료식, 병후회복식, 자양강장식으로 이용하는 민간약으로 많이 이용되어 왔으며(조규형, 1998), 일본에서도 옛부터 알레르기 비염, 진핵, 치질 및 축농증치료제로 이용되어 왔고(일본두류기금협회, 1995), 현재도 이들의 치료제로서 약국에서 상용판재하고 있다. 현재일본과 중국에서는 생리활성물질의 구조분석, 약리작용과 검증연구가 진행되고 있으며, 식품 개발도 진행중인 것으로 알려져 있으며, 일본의 종묘회사에서 종자를 보급하고 있으며, 채소용이나 종실용으로 소비되고 있다.

작두콩의 일반 성분, 특정성분의 구조, 물리화학적 성질, 유전적 특성, 특정성분의 분리에 대한 보고가 다수 있으며 그의 이용으로는 대부분 가축의 사료에 사용할 때 그에 따른 가축의 영향이나 비료로 사용할 때 토질의 영향에 초점이 맞춰져 있는 현황이다. 따라서 본 발명에서는 작두콩의 피부에 외용시 미용적인 측면을 새로이 개발하여 본 발명에 이르게 된 것이다.

금송(錦松)은 학명이Sciadopitys verticillata이며, 낙우송과(Taxodiaceae)의 식물이다. 어원은 Sciadopitys는 그리스어로 skias(우산)과 pitos(소나무)의 합성어이며, verticillata는 돌려나기식물이라는 의미이다. 세계3대 조경수로서 전정을 하지 않아도 수형이 조각품과 같이 귀품이 있어 조경수로 주로 이용되는 식물이다.

이 식물에 대한 인체에 미치는 효능효과적인 연구는 전무한 실정이다.

본 발명에서는 이 식물의 전초를 가지고 인체에 미용적인 측면을 연구한 결과 본 발명에 이르게 된 것이다.

이와같이 작두콩과 금송이 여러 가지 약리효과가 거론되고 있는 것은 사실이지만 이의 추출물이 화장품분야에서 피부화장료로 사용된 예는 없다.

본 발명은 앞에서 말한 종래기술의 문제점을 거울삼아 각종 피부손상의 방지 및 개선효과가 우수하고 안전성면에서도 우수한 피부화장료를 제공하는 것이다. 상기한 목적을 달성하기위한 본 발명의 작두콩과 금송 혼합추출물은 한반도의 자연상태에서 성장한 것을 가지고 물, 메탄올, 에탄올, 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린 각각과 이들의 혼합액으로 추출한 추출물이다. 또한 상기한 작두콩과 금송 혼합추출물은 피부화장료의 성분으로서 적용가능하며 이때 함유량은 0.01 내지 100%인 것이 바람직하다.

본 발명에서는 작두콩과 금송 혼합 추출물로부터 물, 메탄올, 에탄올, 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린 각각과 이들의 혼합용매로 추출한 추출물에서 화장품에 이용할 수 있는 효과가 입증되고 화장품에 함유시 우수한 항산화효과, 미백효과, 주름방지효과, 항염효과, 육모효과 등이 발견되어 본 발명을 하게 된 것이다. 우선, 작두콩과 금송 혼합추출물의 피부화장료에 대한 이용가능성을 확인하기 위하여 미백효과, 항산화효과, 주름방지효과, 항염효과, 육모효과, 안티아크네효과 등을 조사했다. 시료로 사용하기위해 작두콩과 금송전초를 실온에서 중량의 변화가 없을 때까지 건조시킨 후, 같은 량씩 넣고 일반적인 기계적으로 분쇄하여 분말로 하였다. 이 혼합분말 100g을 30% 프로필렌글리콜수용액 200g을 가하여 60℃에서 48시간 물중탕하여 추출한 후 0.45㎛ 여과지로 여과한 액과 작두콩과 금송전초 혼합분말 100g을 화장품용으로 사용하는 30% 에탄올 수용액 200g에 실온에서 10일간 방치한 후 0.45㎛(㎛)로 제균여과한 것, 그리고 작두콩과 금송전초 혼합분말 100g을 증류수 200g에 첨가하고 80℃에서 48시간 물중탕하여 처리한 후 400메쉬크기의 쇠그물망으로 작두콩과 금송전초분말 여과액을 분리하고 계속해서 0.45㎛ 제균여과지로 여과한 것을 시료로 사용하였다. 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물을 피부화장료로 응용하기 위한 효과 테스트로 리놀산의 자동산화억제 방법을 이용한 항산화효과 테스트에서 작두콩과 금송전초 혼합분말 에탄올 추출물은 일반적으로 항산하화효과가 우수하다고 알려진 대조군인 상황버섯추출물(45%)과 비타민 이(42.3%)에 비해 우수한 항산화효과(72%)를 가진 것으로 나타났다.

티로시나제 활성 저해능, 미생물(균주명:Streptomyces bikiniensis)의 멜라닌 생성 저해능, 비16-에프1 멜라노마 세포의 멜라닌 생성 저해능 등의 실험으로 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물에 대한 미백효과를 조사하였다. 그 결과 티로시나제 활성을 50% 저해하는 농도(IC₅₀)는 0.03% 이하였고, 0.002%의 농도에서 미생물의 멜라닌 생성 영역을 28밀리미터 저해하였다. 또한 B16 -F1 멜라노마 세포의 멜라닌 생성을 저해하는 최소 농도는 0.02%로 나타나 피부외용제 특히 화장료로서 우수한 효과를 나타냈다. 본 발명의 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물을 함유한 피부화장료로서의 적용예는 현재 어느곳에도 없다. 이 작두콩과 금송추출물의 피부화장료에의 배합량은 한정된 것은 아니지만 0.001중량%내지 100중량%가 적당한 것으로 나타났으며, 너무 적은 함량에서는 효과를 기대하기 어렵고, 경우에 따라서는 추출물 자체를 피부외용제로 사용해도 탁월한 효과를 보였다. 또한 본 발명의 추출물은 물에 쉽게 혼화되고 유지와 유기성 용매에는 혼화가 어렵지만 현탁상태에서도 피부화장료에 배합은 가능하고 효과에 대하여 어떠한 영향도 주지 않는다. 본 발명의 피부외용제는 피부화장료로서 이용되는 것이 적당하며 일반 피부화장료에 배합되는 보통의 성분 예를들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 필요한 만큼 적용배합하는 것이 가능하다. 역시 본 발명에서 피부화장료는 피부에 사용하는 것을 널리 알리고 예를들면, 화장수, 유액, 크림, 팩 등의 화장료와 특히 미백화장료에 응용이 대표적이다.

이하, 실시예에 의해 본 발명을 보다 상세히 설명한다.

이들 실시예는 본 발명의 예시적인 기재일 뿐이며 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되는 것은 아니다.

실시예1

작두콩과 금송은 한반도에서 자생한 것을 사용하였으며, 시료로 사용하기위해 작두콩과 금송을 실온에서 중량의 변화가 없을 때까지 건조시킨 후, 일반적인 기계적인 방법으로 분쇄하여 위 두가지 작두콩과 금송을 동량씩 혼합 사용하였다.

용매추출하기위해서 용매를 여러 가지로 선택하였는데, 물, 메탄올, 에탄올, 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜과 글리세린 각각과 이들의 조합에 의한 것이다.

물에 의한 추출은 물에 50%되게 작두콩과 금송전초 혼합분말을 동량씩 넣고 60℃에서 48시간 물중탕한 후 400메쉬되는 쇠그물망으로 여과하여 작두콩과 금송과 여과된 액을 분리하였다. 계속해서 분리된 여과액을 0.45㎛ 여과지로 제균여과하여 시료로 사용하였다. 에탄올에 의한 추출은 물에 대한 에탄올 30%용액에 작두콩과금송 50%되게 15일간 실온에 방치 한 후 400메쉬되는 그물망으로 여과하여 작두콩과 금송과 여과액을 분리하고 이 분리된 여과액을 0.45㎛ 여과지로 여과하여 시료로 하고 다음의 실시예와 같은 효능효과시험을 하였다. 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜과 물의 혼합물에 의한 추출에서는 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜과 물의 비율을 8대2와 4대6의 중량비료 혼합하고 이 혼합액에 50중량%되게 작두콩과 금송을 첨가하고 60℃에서 48시간 가열처리한 후 400메쉬되는 쇠그물망으로 여과하여 작두콩과 금송 혼합분말과 여과액을 분리한 다음 여과액을 0.45㎛ 여과지로 여과하여 시료로 하였다.

실시예2

본 실시예는 자동산화가 잘 되는 물질인 리놀산을 이용하여 이 자동산화를 억제하는 정도를 상호비교한 것이다. 8㎖ 캡튜브에 10mM 리놀산용액 3㎖와 4mg/㎖로 조정한 샘플 0.075㎖를 첨가한 후 4℃에 방치한다. 상기의 혼합액 0.1㎖를 24시간 후에 75% 에탄올수용액 4.7㎖가 든 시험관에 첨가하여 교반한 후, 30% 티오시안산암모니움용액 0.1㎖와 염화제1철 시약 0.1㎖를 첨가하고 3분간 방치한 후 발색시켜 500nm에서 흡수파장을 측정하여 물질의 항산화효과 시료를 넣지않은 대조군과 비교하여 항산화효과를 %로 측정했다. 리놀산 자동산화를 이용한 항산화효과 시험에서 실시예1에 의해 추출한 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물은 항산화효과가 대조군에 비해 뛰어났으며 비타민 E(42.3%)에 비해 우수한 항산화효과(72%)를 가진 것으로 나타났다(표 1).

표 1

실시예3

피부의 왕성한 세포대사는 세포의 분화를 활성화하기 위해 충분한 에너지를 생성한다. 이것은 노화로부터 피부를 보호하는 역할을 한다. 나이가 들어가고, 스트레스가 많은 경우 세포들의 감소가 일어나고 그들의 대사는 줄어든다. 피부는 활력과 투명도가 감소하게 된다. 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물을 함유한 크림을 가지고 사용자시험을 한 결과, 눈에 띄는 개선효과를 볼 수 있었다. 40-50세의 여성 10명에 대해 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물을 5% 함유한 유중수(O/W)형 크림을 하루에 2회씩 사용한 경우의 피부표면상태 변화를 미세주름측정기(모델명 : skin visiometer 400, 독일)로 측정한 결과, 추출물을 함유하지 않은 크림에 비하여 2배이상의 양호한 잔주름개선효과를 보였다(표2).

측정부위는 눈주위 부위를 측정했으며, 얼굴 미간을 중심으로 반으로 나눈 후 한쪽은 A, 다른 한쪽은 B품을 도포하여 사용전과 사용 50일 후에 피부잔주름 감소효과를 관찰 하였다.

표 2

(N=10명 평균)

실시예4

본 실험은 실시예1에 의해 추출한 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물의 미백효과를 알아보기위해 티로시나제라는 효소가 기능억제되는 정도를 보고 미백효과를 판단한 것이다. 티로시나제는 생체내에서 티로신이라는 물질이 산화되는 과정을 촉진하여 멜라닌이 생성되게 도와주는 효소이다. 본 실시예에서는 이 효소(시그마(미국))의 기능을 억제하여 티로신이 산화되어 멜라닌이라는 흑색의 고분자를 형성하는 것을 억제하는 정도를 보는 방법(Pomerantz S. H., The tyrosine hydroxylase activity of mammalian tyrosinase, J. Biochem., 24, 161-168(1966))을 응용해 미백효과로 판정하였다. 상백피 추출물 (원액, 10, 1, 0.1, 0.01의 증류수에 대한 부피/부피 %), 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물 (원액, 0.5, 0.05, 0.005, 0.0005의 증류수에 대한 부피/부피 %), 고직산, 알부틴, 하이드로퀴논, 피-메톡시페놀(1, 0.1, 0.01, 0.001, 0.0001의 증류수에 대한 부피/부피 %)을 시료로 사용하여 티로시나제 활성 억제효과를 조사하였다.

티로시나제에 대한 저해활성은 시료 152㎕를 마이크로플레이트(96웰)에 넣고, 0.1몰 인산완충액(pH6.86) 150㎕ 1.5mM 엘-티로신용액 25㎕를 넣은 후, 2,380유니트/㎖ 머쉬룸 티로시나제(0..05mol 인산완충액, pH6.86) 7㎕를 첨가하여 30℃에서 10분간 반응시킨 후 마이크로플레이트를 사용하여 490nm에서 측정하였다. 티로시나제에 대한 저해율(%)은 다음식에 의하여 계산하였으며, IC₅₀값은 효소활성 저해율 50%에 달하는 저해물질의 농도로 결정하였다(표3).

저해율(%) = {[(D-C)-(B-A)] / (D-C)} × 100

A : 저해제를 넣은 것의 반응 전 흡광도

B : 저해제를 넣은 것의 반응 후 흡광도

C : 저해제를 넣지 않은 것의 반응 전 흡광도

D : 저해제를 넣지 않은 것의 반응 후 흡광도

티로시나제 활성 억제작용시험결과 작두콩과 금송전초 혼합분말 각 추출물의 IC₅₀값은 0.2%이하로 나타났다. 이는 상황버섯보다 효과가 높았으며 기존에 미백효과가 우수한 것으로 알려지고 있는 알부틴보다도 우수한 효과를 가지는 것으로 나타났다.

표3

실시예5

본 실험은 방선균에 대한 멜라닌 생성 억제작용을 측정한 것으로 사용된 균주(Streptomyces bikiniensisNRRL B-1049)는 KCTC(Korean Collection for Type Culture, 기탁번호 9172)로부터 분양받아 사용하였다.

(Streptomyces bikiniensisNRRL B-1049)를 papavizas' VDYA agar slant 배지(V-8 juice 200㎖, glucose 2g, yeast extract 2g, CaCO₃1g, agar 20g, 증류수 800㎖, pH7.2)에서 2주간 28℃로 배양시켜 포자를 생성시킨 후 멸균수로 포자 현탁액을 만들었다. 0.2%의 yeast extract를 첨가한 ISP No. 7 평판배지에 포자 현탁액 0.2㎖씩을 도포한 후 배지표면에 시료를 적신 페이퍼 디스크에 시료양을 30㎍/paper disc로 도포하고 28℃에서 배양하였다. 48시간 배양 후 생성된 멜라닌 생성 저해환의 크기를 멜라닌생성 저해물질로 알려진 4-하이드록시아니솔을 대조구로 하여 멜라닌생성 저해여부를 관찰하였다(표4).

작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물의Streptomyces bikiniensisNRRL B-1049에 대한 melanin 생성저해활성은 작두콩과 금송전초 혼합분말 에탄올 추출물의 경우 28mm의 멜라닌 생성저해환을 나타내었다. 이러한 저해활성은 강력한 멜라닌 생성저해제인 4-히드록시아니솔보다 우수한 활성을 나타내었다.

표4

실시예6

본 실험은 작두콩과 금송전초 혼합분말의 물, 메탄올, 에탄올, 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린 각각과 이들의 혼합액으로 추출한 추출물의 피부미백효과를 알아보기위해 세포수준에서 관찰한 것이다.

본 실험에 사용된 B16-F1 멜라노마세포는 마우스에서 유래한 세포균주이며 멜라닌이라는 흑색색소를 분비하는 세포이다. 이 세포를 인공배양중에 물질을 처리하여 멜라닌흑색색소가 감소하는정도를 비교평가하였다. 본 실험에 사용된 B16-F1 멜라노마세포는 ATCC(American Type Culture Collection, 기탁번호: 6323)로부터 분양받아 사용하였다. B16 멜라노마 세포의 멜라닌 생합성 저해도 판별은 다음과 같이 행하였다. B16 멜라노마 세포를 5x10³ cells/㎖의 농도로 10% 소태아혈청을 포함하는 Dulbecco's Modified Eagle's Medium(Gibco, USA)에 현탁시켰다. 현탁세포(5㎖)를 조직배양 플라스크에 넣은 후 검정 시료를 0.134% 첨가한 후, 5% 이산화탄소-95% 공기조건으로 37℃에서 배양하였다. 4일간 배양후 배양액의 색으로 멜라닌생성 정도를 1차 판별하고, 세포를 인산완충액으로 씻은 후 트립신처리하여 세포를 플라스크로부터 분리하였다. 세포를 튜브에 모은 후 인산완충액으로 씻고, 원심분리하여 튜브 아래쪽에 침전된 멜라닌 생성양을 기존의 미백제로 알려지고 있는 몇개의 시료와 작두콩과 금송 추출물과의 멜라닌색소분비억제정도를 비교한 것이다. 평가방법은세포배양중에 아무것도 처리하지 않은 것과 각 시료를 처리했을 때의 검은 멜라닌색소 분비정도에 따라 색상이 변화되는 정도를 육안관찰하여 상호비교 평가하였다. 결과적으로 작두콩과 금송 추출물이 멜라닌색소분비를 효과있게 억제한다는 결과를 얻었다(표5).

표5

실시예 7, 8, 9

본 실시예에서는 실시예1에 의해 추출한 각각의 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물을 함유한 화장료의 비교실험을 행하였다. 비교실험에 사용된 크림의 조성은 표6에 나타내었다. 우선 표6에 기록되어 있는 나)상을 가열하여 70℃에 보존한다. 이것에 가)상을 가하여 예비유화 후 호모믹서로 균일하게 유화하고 다음에 서서히 냉각하여 크림(실시예 7-9, 비교예)을 조제한다. 표6의 각 크림을 실험자(20세-35세의 여성) 5명의 얼굴오른쪽에 1일 2회 연속 1개월간 도포하였다. 실험완료 후 얼굴 좌우 양편의 도포부위 피부를 영상분석기로 얼굴색을 비교하여 가장 어두운색을5 중간색을 3, 가장 환한 색을 1로 정하고 그 중간정도를 어림잡아 평가하였다. 표7은 실시예 7로 만든 크림을 사용한 실험자의 안면피부색을 비교예로 만든 크림을 사용한 실험자의 안면사용부위와 비교한 것이다. 표7에서와 같이 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물을 함유한 크림을 도포한 실험자의 안면에서 미백효과가 나타난 것을 알 수 있다.

표 6

표7

실시예 10

마우스를 제모크림으로 등부위에 바른 후 가제를 이용하여 제모한 후 매일 2회씩 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물을 30%함유한 투명젤을 발라 모발의 성장속도를 측정하였다. 대조군 5마리와 시험군 5마리를 대상으로 시간의 경과에 따른 모발의 길이를 측정하였다. 시험군에서는 도포한후 15일째 75-90%의 모발성장율을 보였다. 반면 , 시험물질을 도포하지않은 자연상태의 대조군에서는 65%의 모발성장율을 보였다

표 8

실시예 11

생체는 여러 환경변화에 항상 순응하고 이에 반응한다. 생체의 항상성을 유지하는 가역적 반응에 대하여 조직의 어떠한 기질적 변화를 일으킴으로써 공격을 받는 경우에는, 생체를 방어하고 회복할 목적으로 비가역적인 반응을 일으킨다. 이러한 동적인 일련의 과정이 염증이다. 염증과정에서 파생하는 발열, 동통과 부종은 고통이다. 또한, 생체반응이 과잉방어가 되기도하고, 염증반응에 의해 생명이 위기에 직면하는 경우도 있고 더구나 염증의 원인이 이미 없어졌음에도 불구하고 염증반응이 진행되는 경우도 있다. 이와같은 경우에는 염증반응을 억제하는 일이 유용하다. 염증반응이 줄어든 질환에서는 염증억제가 필요하다. 따라서 이러한 염증억제를 위해 항염증제가 필요로 한다. 이와같은 사실에 의거 항염효과가 있는 원료를 첨가하여 효능효과가 우수한 화장품 개발이 요구되고 있다.

항염효과를 평가하는 방법에는 히아루니다제(Hyaluronidase)의 활성억제효과를 측정하는 방법과 기니아 피그(Guinea pig)를 이용하는 동물시험방법이 있다.

본 발명에서는 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물의 항염효과를 알아보기위해 히아루니다제효소활성 억제를 측정하였다. 히아루니다제는 염증반응기작에 관여하는 여러 요인 중의 하나로 비만세포(mast cell)에서 분비되는 히스타민이라는 물질에 의해 활성화되어 염증을 유발한다. 이러한 사실에 기인하여 히아루니다제와 이 효소의 기질인 히아론산간의 효소-기질반응에 의한 효소의 활성을 흡광도로 측정한다. 실험은 표 9와 같은 시료를 만들어 아래의 순서대로 실시했을때 표 10과 같은 결과를 얻어 작두콩과 금송 추출물의 항염효과의 우수성을 입증하였다.

표 9

가. A와 B를 넣고 37℃에서 20분간 반응, 나. C를 넣고 37℃에서 20분간 반응

다. D를 넣고 37℃에서 40분간 반응, 라. E와 F를 넣고 95℃에서 3분간 반응

마. Cooldown, 바. G를 넣고 37℃에서 20분간 반응(p-DABA는 사용시 Acetic acid에 10배 희석하여 사용), 사. 585nm에서 흡광도 측정(Blank는 Acetate buffer로 잡는다.)

표 10

실시예 12

여드름의 형성은 병리학적인 조건인 피지선의 이상과 연관되어 있다. 즉, 여러가지 요인에 의해 결정되는데, 피지선활성에 있어서 호르몬조절에 의한 피지의 생성률과 피지의 조성에 영향을 받는다. 피지선은 피지분비의 증가에 관여하는 안드로겐이라는 호르몬에 특히 민감하다. 여드름경향을 갖는 피부의 과도한 피지는 테스토스테론이라는 호르몬이 5α-reductase의 작용에 의해 dihydrotestosterone으로 변화되어 증가되기 때문이다. 여드름은 또한 피부상재균인Propionibacterium acnes균이 리파제(lipase)라는 지방분해효소를 내어 피지성분의 트리글리세라이드를 지방산과 글리세롤로 분해하고, 이 분해된 것이 염증반응을 일으키는 것도 한 요인이다.

본 발명에서는 피부상재균인Propionibacterium acnes의 생육 활성을 억제하는 효과를 측정하여 여드름의 생성을 억제하는 정도를 살펴보았다. 시험방법은Propionibacterium acnes균(균쥬번호, KCTC 3314)을 pancreatic peptone(5.6g/L)을 함유한 saline medium(5.5 g/L NaCl, 2.8g/L KH₂PO₄g/L)에서 배양하였다. 이것을 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물을 함유한 것과 함유하지 않은 것, 5g/L의 포도당을 탄소원배지로 넣은 것을 각각 배양하였다. 분화된 균의 양은 48시간 배양 후에 750nm 에서 탁도를 측정하여 평가하였다. 측정결과, 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물 2% 함유배양에서 40% 억제, 8% 함유배양에서 70%로 균의 생육을 효과있게 저지하였다.

이하에 그 외의 실시예를 나타내었다. 즉, 앞에서와 같이 피부개선에 우수한 효과를 나타내었으며 피부미용효과를 나타내었다.

실시예 13

95% 에탄올 8g에 폴리피로리돈 0.05g, 올레일알콜 0.1g, 폴리옥시에틸렌모노올레이트 0.2g, 향료 0.2g, 파라옥시안식향산메틸에스테르 0.1g, 소량의 산화방지제, 소량의 색소를 혼합용해한다. 이것을 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물 0.05g, 글리세린 5g을 정제수 85.33g에 용해한 것 중에 교반첨가하여 피부개선효과가 있는 화장수를 얻는다.

실시예 14

세틸알콜 1.2g, 스쿠알란 10g, 바세린 2g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.2g, 글리세린모노에스테아레이드 1g, 폴리옥시에틸렌(20mol부가)모노올레이트 1g 및 향료 0.1g을 70℃에서 가열혼합용해하여 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물 0.5g, 디프로필렌글리콜 5g, 폴리에틸렌글리콜1500 2g, 트리에탄올아민 0.2g, 정제수 76.2g을 75℃로 가열해서 가열 용해시킨다. 양자를 혼합하여 유화시킨 후 냉각하여 수/유중계형의 피부개선효과가 있는 유액을 얻는다.

실시예 15

95% 에틸알콜 5g에 폴리옥시에틸렌 솔비탄모노올레이트 1.2g, 해조추출물 0.3g, 히야론산나트륨 0.2g, 비타민이 아세테이트 0.2g, 감초산나트륨 0.2g, 파라옥시안식향산에틸에스테르 0.1g, 작두콩과 금송혼합분말 추출물 1g 및 적량의 색소를 혼합하여 피부개선의 효과가 있는 미용액을 얻는다.

본 발명에 의한 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물은 각종 피부개선효과가 탁월하며, 특히 피부 미백효과, 주름방지효과, 항산화효과, 항염효과, 육모효과, 여드름방지효과가 매우 우수하다. 또한, 상술한 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물은 피부화장료에 적용이 가능하며 화장료에 함유시 피부개선효과가 우수하다.

Claims

작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물을 함유한 피부화장료를 특징으로 하는 것
건조, 분쇄한 작두콩과 금송전초 혼합분말을 물, 에탄올, 메탄올, 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 글리세린 각각과 이들의 혼합액으로 혼합액으로 추출한 것을 특징으로하는 것.
건조한 작두콩과 금송전초 혼합분말을 30% 내지 95% 에탄올수용액으로 추출한 것을 특징으로 하는 것.
건조한 작두콩과 금송전초 혼합분말을 물로 열수추출한 것을 특징으로 하는 것.
제2항의 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜과 증류수의 혼합액중 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜과 증류수의 혼합비율이 8대2 내지 4대6인 것을 특징으로 하혀 추출시 온도를 실온 내지 60℃로 가열추출한 후 제균여과한 것을 특징으로 하는 것.
제1항의 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물을 0.001내지 100%를 함유하는 것을 특징으로 하는 피부화장료
제1항의 작두콩과 금송전초 혼합분말 추출물을 함유하는 것을 특징으로 하는 피부화장료중 미백효과, 주름방지효과, 항산화효과, 육모효과, 항염효과, 여드름방지효과를 특징으로하는 것.