KR20040004402A - 세포의 시토졸내로 분자를 전달시키는 조성물 - Google Patents

세포의 시토졸내로 분자를 전달시키는 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 분자가 엔도좀, 리소좀 또는 다른 세포구획부에 흡수되어 엔도좀, 리소좀 또는 다른 세포 구획 막을 파괴하기 위해 감광성 화합물의 광활성을 사용하므로서 다수의 세포를 죽이지 않고 세포의 시토졸로 분자를 방출하기 위한 조성물을 기술하고 있다.

Description

세포의 시토졸내로 분자를 전달시키는 조성물{COMPOSITION FOR TRANSFER OF MOLECULES INTO THE CYTOSOL OF CELLS}
본 발명은 광역학적 처리에 의해 다수의 세포를 죽이지 않고 광역학적 처리를 사용하여 엔도좀과 리소좀 막을 파괴시키므로서 세포에 분자를 도입시키는 조성물에 관한 것이다.
대다수의 분자들은 세포 막에 쉽게 침투할 수 없다. 살아있는 세포의 시토졸에 분자를 도입시키는 방법은 생물학적 과정을 조작하고 연구하는데 유용한 도구이다. 오늘날 가장 일반적으로 사용되는 방법들 중에는 현미주사, 적혈구 유령세포 매개 용해와 리포좀 용해, 피노좀의 삼투용해, 찰상장착, 전기영동, 칼슘 포스페이트와 바이러스 매개 형질전환이 있다. 이러한 기술들이 비록 많은 경우에서 비실용적이고, 시간 소비적이고 효과가 없거나 중요한 세포 괴사를 야기시킬지라도 배지에서 세포를 연구하기 위해서는 유용하다. 따라서 이들은 세포가 기능적으로 유지되어야 하는 생물학적, 의학적 연구 또는 치료학에 사용하는데 최적이지 않다.
포르피린과 많은 다른 감광성 화합물은 세포와 조직에서 세포파괴 효과를 야기시키는 것으로 잘 알려져 있다. 이러한 효과들은 감광성 화합물이 광에 노출될 때 세포와 세포구조의 막을 분해시키고 결국 파괴가 대규모라면 세포를 죽이는 단선 'O2를 방출한다는 사실에 근거를 두고 있다. 이러한 효과들은 몇몇 형태의 종양성 질병을 치료하기 위해 사용되어왔다. 이 치료는 광역학적 치료(PDT)라고 일컬어지고 감광성 및 종양국소화 색소 주입에 이어 광에 종양 부위를 노출시키는 것에 기초를 두고 있다. 세포파괴 효과는 주로 단선 산소의 형성을 통해 매개된다. 반응성 중간제는 세포에서 매우 짧은 수명(<0.04μs)을 갖는다. 따라서, PDT의 기본적인 세포독성 효과는 광에 노출되는 동안 실행되는데 'O2의 형성 부위에 매우 근접하는 동안 실행된다. 'O2는 단백질(히스티딘, 트립토판, 메티오닌, 시스테인, 티로신), DNA(구아닌), 불포화지방산과 콜레스테롤과 반응하여 산화시킨다. PDT의잇점들 중 하나는 광에 노출되지 않은 조직은 영향을 받지 않는다는 것이다. 원하지 않는 세포 군, 예를들면 종양 세포를 파괴하기 위한 PDT사용에 관한 광범위한 문헌이 있다. 몇가지 특허는 광역학적 화합물 단독 또는 보다 세포특이적인 복합체를 만드는 종양세포 수용체 결정인자를 향해있는 면역글로블린과 콘쥬게이트된 광역학적 화합물에 관한 것이다. 헤마토포르피린 유도체와 같은 어떤 광화학적 화합물은 더욱이 악성 세포에 농축되는 고유 능력을 갖는다. 바람직하지 않은 세포를 파괴시키는 것에 관한 것인, 이러한 방법과 화합물은 노르웨이 특허 제 173319, 노르웨이 특허출원 제 90 0731, 90 2634, 90 1018, 94 1548, 85 1897, 93 4837, 92 4151 및 89 1491호에 기술되어 있다.
PCT/US93/00683에는, 약물 전달 시스템이 기술되어 있는데 이 시스템은 코폴리머성 캐리어에 부착된 항암성 약물과 광활성 가능한 약물로 구성된다. 투여시 이 복합체는 세포흡수작용과 식균작용에 의해 세포내부로 들어가고 엔도좀과 리소좀 내부에 위치될 것이다. 리소좀에서 항종양성 화합물과 폴리머 사이의 결합은 가수분해되고 항 종양성 화합물은 리소좀막을 통해 쉽게 시토졸내로 확산할 수 있다. 따라서, 이 방법은 리소좀 막을 가로질러 확산할 수 있는 작은 분자 화합물로 방법을 제한한다. 확산을 위한 시간의 지체후 적당한 파장과 에너지의 광원이 광활성 가능 화합물을 활성화시키는데 적용된다. 항암 약물과 광활성 가능 약물의 조합된 효과는 세포를 파괴하는 것이다. 따라서 알려진 광활성 화합물의 모든 용도는 세포구조를 광범위하게 파괴하여 세포파괴사시키는 것과 관련된다. 엔도좀/리소좀 막의 국소화된 파열이후 시토졸내로 막 불투과성 분자를 방출시키는 방법은알려져 있지 않다.
본 발명의 목적은 배지 또는 조직에 있는 살아있는 세포의 시토졸로 분자를 이송시키는 방법을 제공하는 것으로서 이 목적은 세포를 광활성가능 화합물, 시토졸로 이송될 분자에 노출시키는데 이들의 흡수는 다양한 캐리어에 의해 용이하게 될 수 있으며, 엔도좀과 리소좀막 파괴하여 대부분세포의 기능성을 파괴하지 않고 시토졸로 분자를 방출하기에 적절한 파장 및 에너지를 광에 세포를 노출시키므로서 이루어질 수 있다. 감광제와 시토졸로 전달되는 분자는 해당분자의 흡수를 용이하게하는 적절한 캐리어와 함께 개별적으로 접합 또는 부착될 수 있다.
이러한 목적은 첨부된 특허청구범위를 특징으로하는 본 발명에 의해 얻어진다.
본 발명은 어떤 분자를 살아있는 세포의 시토졸에 전달시키는 방법에 관한 것으로 그 후에 분자는 시토졸에서 입수가능하고 세포는 그 기능성을 유지할 것이다. 이것은 세포에 의해 취해져서 면역글로블린 및 시토졸내로 전달되는 분자에 콘쥬게이트되거나 별도로 캐리어 분자와 함께 콘쥬게이트된 엔도좀, 리소좀, 및 다른 세포성 격막에 위치되는 광활성 화합물에 세포를 노출시키고, 엔도좀, 리소좀 또는 다른 세포성 격막만이 파열되도록 감광성 화합물을 활성화시키고 세포가 광활성화된 화합물의 작용과 엔도좀/리소좀 함량의 가능한 활성에 의해 그것의 작용성을 잃는 세포없이 시토졸에 방출된 분자를 활성화시키기 위해 적당한 파장의 광에 세포를 노출시키므로서 수행된다.
본 발명은 첨부된 도면에 의거하여 상세히 기술된다 ;
도 1은 세포성 시토졸에 분자가 본 발명에 의해 어떻게 도입될 수 있는지의 설명한 것이다. 감광제(S)와 선택분자(M)는 세포에 의해 흡수되고(I은 흡수과정을 개시하는 플라즈마 막의 함입을 설명한다) 두 물질 모두 같은 소포내에서 끝난다(Ⅱ). 이러한 소포가 광에 노출될 때 소포 막은 파괴되고 내용물은 방출된다(Ⅲ) ;
도 2는 TPPS2a 의 부재 또는 존재시 및 50초 광 노출하에서 겔로닌으로 처리한 후에 NHIK 3025세포에서 단백질 합성을 설명한 것이다. 기호 : ○, TPPS2a + 광 ; ● -TPPS2a -광 ; ∇, +TPPS2a -광 ; ▼, -TPPS2a +광. 세포는 3.2μg/㎖ TPPS2a와 지시된 농도의 겔로닌으로 밤새처리되었고 모든 경우에서 주어진 동등량의 광이 조사되었다. 단백질 합성은 광에 24시간 노출시킨 후 3[H] 류신의 단백질로의 도입을 측정하므로서 측정되었다.
도 3은 도 2에 도시된 바와같이 TPPS2a와 광 단독(○) 또는 0.2μg/㎖(▽) 또는 2.0μg/㎖ 겔로닌과 조합하여 처리된 세포의 용량 반응 곡선을 도시한 것이다.
도 4는 2.0μg/㎖ 겔로닌의 부존재 및 존재하에서 3.2μg/㎖ TPPS2a 와 광으로 처리한 후에 NHIK 3025에서의 단백질을 합성을 설명한 것이다. 기호 : ●,TPPS2a -겔로닌 ; ○, TPPS2a +겔로닌. 세포는 겔로닌의 부존재 및 존재하에서 TPPS2a로 밤새 처리된 후 지시된 양의 광에 노출되었다. 단백질 합성은 단백질에 3[H]류신의 도입을 측정하므로서 측정되었다.
도 5는 1μg/㎖ 겔로닌의 부존재 및 존재하에서 25μg/㎖ A1PcS2와 광으로 처리한 후에 V79세포에서의 단백질 합성을 도시한 것이다. 기호 : ●감광제 + 독소 ; ○감광제.
도 6은 : 1μg/㎖ 겔로닌의 부존재 및 존재하에서 0.3μg/㎖ TPPS2a와 광으로 처리한 후에 H146세포에서의 단백질 합성을 도시한 것이다. 기호 : 도 5에서와 같음.
도 7은 1μg/㎖ 겔로닌의 부존재 및 존재하에서 1μg/㎖ TPPS2a 와 광으로 처리한 후에 V79세포에서의 단백질 합성을 도시한 것이다. 기호 : 도 5에서와 같음.
도 8은 1μg/㎖ 아그로스틴의 부존재 및 존재하에서 3.2μg/㎖ TPPS2a 와 광으로 처리한 후에 NHIK 3025세포에서의 단백질 합성을 도시한 것이다. 기호 : 도 5에서와 같음.
도 9는 1μg/㎖ 사포린의 부존재 및 존재하에서 3.2μg/㎖ TPPS2a 와 광으로 처리한 후에 NHIK 3025세포에서의 단백질 합성을 도시한 것이다. 기호 : 도 5에서와 같음.
도 10은 1μg/㎖ 겔로닌의 부존재 및 존재하에서 0.25μg/㎖ 3-THPP 와 광으로 처리한 후에 NHIK 3025 세포에서의 단백질 합성을 도시한 것이다. 기호 : 도 5에서와 같음.
도 11은 1μg/㎖ 겔로닌의 부존재 및 존재하에서 3μg/㎖ TPPS2a와 광으로 처리한 후에 COS-7 세포에서의 단백질 합성을 도시한 것이다. 기호 : 도 5에서와 같음.
도 12는 TPPS4의 부존재 및 존재하에서 겔로닌으로 처리하고 50초동안 광에 노출시킨 후에 NHIK 3025 세포에서의 단백질 합성을 도시한 것이다. 기호 : ■ TPPS4 + 광 ; ▼ -TPPS4 -광 ; ◇ +RPPS4 -광. 세포는 75μg/㎖ TPPS4 와 지시된 농도의 겔로닌으로 밤새 처리되고 모든 경우에서 동등량의 광으로 처리되었다. 단백질 합성은 24시간 광에 노출시킨 후 3[H]류신의 단백질로의 도입을 측정하므로 측정된다.
도 13은 18시간 동안 3μg/㎖ TPPS2a 로 처리하고 광에 노출시키기 전에 TTPS2a 부존재 및 3μg/㎖ 겔로닌 부존재 및 존재하에서 4시간 처리한 후에 OHS세포에서 단백질 합성을 도시한 것이다. 세포는 리소좀 단백질 감성을 억제하기 위해 50μM 클로로퀴논 또는 10mM NH4Cl에서 같은 4시간 동안 배양되었다.
디 - 및 테트라설폰화 알루미늄 프탈로시아닌, 설폰화 테트라페닐포르핀(TPPSn), 나일블루, 염소 e6 유도체, 유로포르피린 Ⅰ, 필로에리트린 및 가능하게는 헤마토포르피린과 메틸렌 블루를 포함하는 다수의 약물은 배지에서 세포의 엔도좀과 리소좀에 위치한다고 기록되어있다. 이것은 대부분 경우 흡수 활성 때문이다. 본 발명자들은 그들의 리소좀에 감광제를 함유하는 세포의 광 노출이 리소좀의 투과성 및 감광제의 방출을 야기한다는 것을 알았다. 어떤 경우, 예를들면 TPPS2a 와 TPPS1에서는 실질적인 양의 리소좀 효소 활성이 PDT후 시토졸에서 발견되는데 이것은 리소좀 함량이 그들의 활성을 잃지 않고 시토졸내로 방출될 수 있다는 것을 나타낸다. 감광 색소의 이러한 효과는 본 연구에 따라 일반적으로 엔도좀과 리소좀으로부터 흡수된 분자를 방출시키기 위해 사용될 수 있다.
세포성 세포질내로 바람직하게는 엔도좀 및/또는 리소좀에 국소되어야 하는 캐리어 분자와 면역글로블린과 함께 또는 별개로 세포의 시토졸내로 운반시키는 것을 원하는 분자의 도입은 먼저 감광 색소에 세포 또는 조직을 노출시키므로서 이루어진다. 둘째로, 세포 또는 조직은 광역학적 반응을 야기하는 적당한 파장 및 에너지의 광에 노출된다. 이 광역학적 반응은 리소좀 및/또는 엔도좀 막의 파괴를 야기하고 이러한 소낭의 내용물은 시토졸내로 방출된다.
본 발명의 원리는 도 1에 도시되어 있다. 세포에 도입되는 감광제와 분자는 같은 구획부에 위치된다. 외부적으로 첨가된 분자는 리소좀과 엔도좀 이외에 예를들면 골기(Golgi) 기구와 내부 원형질 망상조직과 같은 다른 내부세포구획부에 축적될 수 있다는 것이 강조되어야 한다. 이러한 경우, 같은 구획부에 위치한 감광성 화합물은 광과 조합하여 광투여량과 감광화 화합물의 결합이 세포의 기능성을 파괴하지 않는다는 조건하에서 같은 목적에 사용될 수 있다.
본 발명은 감광제 예를들면 TPPS2a (인접한 페닐기에 2설포네이트기를 갖는 테트라페닐포르핀)가 광과 조합하여 세포의 큰 프랙션을 괴사시키지 않고 기능적으로 완전한 리소좀내용물의 방출을 유도할 수 있다는 본 발명자들의 시험관내 증명에 기초를 두고 있다. 같은 효과가 다른 감광성 화합물 단독 또는 감광제를 엔도좀/리소좀 또는 다른 세포내 구획부로 향하게하기 위한 벡터로서 사용되는 다른 분자 또는 입자에 조합 또는 결합된 감광성 화합물을 사용하므로서 얻어질 수 있다. 이러한 벡터는 조직 또는 세포 특이성 항체 또는 세포 표면에 결합하는 리간드일 수 있어서 수용체 매개 세포 이물 흡수를 통한 감광제의 흡수를 증가시킨다. 또다른 벡터는 재구성된 LDL-입자의 사용이다. 이러한 입자는 또한 수용체 매개 세포이물흡수에 의해 흡수된다. LDL입자당 감광제 분자의 수와 LDL-입자에 대한 결합은 이 방법으로 천연 LDL에 미리 결합된 것과 비교할 때 증가 될 수 있다.
본 발명은 실험관내 용도로 제한되지 않고, 원위치처리 또는 생체외처리 에 이은 처리된 세포의 주입에 의해 생체내에 사용될 수 있다. 엔도좀과 리소좀내로 흡수는 시험관내 처리를 위해 상기 기술된 것과 같은 방법으로 강화될 수 있다. 모든 조직은 감광제가 표적 세포에 의해 흡수되고 광이 적당히게 전달되는 한 처리될 수 있다.
본 발명은 감광제와 광 모두에 기초를 두고 있다. 광은 감광제에 의해 흡수되거나 간접적으로 감광제를 여기 상태로 유도하여야 한다. 따라서 사용 파장 영역은 감광제에 좌우된다. 노출광은 단색성 또는 시준될 필요는 없다. 적당한 파장을 방출하는 모든 광원이 사용될 수 있다.
놀랍게도 본 발명에 따른 광역학적 작용은 리소좀 성분을 방출하는 잠재적인 세포파괴 효과를 중성화하는 것으로 보인다. 따라서, 본 발명자들은 리소좀 카테프신이 실제적으로 HNIK 3025 세포의 배양에서 TPPS2a의 광역학 작용에 의해 억제된다는 것을 입증했다. 이것은 본 발명의 놀라운 효과로서 엔도좀/리소좀 막을 파괴시키므로서 시토졸내로 분자를 전달시킨 후 세포의 생존 능력과 기능성을 유지하는 것을 돕는다.
실험적 및 임상적 사용의 실시예
1) 암치료
몇몇의 감광제는 우선적으로 종양 조직에 축적되는데 주위 조직 위의 종양에 대한 선택도는 보통 2-3의 인자이지만 이 인자는 뇌 조직과 같은 어떤 경우는 30까지 높을 수 있다. 암치료의 임상적 관심이지만 시토졸내로 낮거나 없는 흡수력에 의해 제한되는 분자는 본 발명에 의해 시토졸내로 도입될 수 있다. 하기에 예시된 바와같이 겔로닌은 이러한 분자의 예이다. 몇 개의 다른 분자들은 단독으로 또는 다른 분자들(예를들면, 항체, 트랜스페린, 감광제, 재구성된 LDL-입자 위의 아포 B)에 결합되어 사용될 수 있다. 이러한 조합치료의 잇점은 1) 적고 부독성 용량의 광이 리소좀과 엔도좀의 파괴에 충분하기 때문에 종양 조직의 깊은 층의 세포파괴효과가 강화되고 ; 2) PDT가 단지 종양 국소화 부위에만 주어지기 때문에 독소의 특이성이 강화된다는 것이다.
2) 유전자 치료
유전자치료, 즉 환자 세포에 유전자의 치료적인 전이는 암, 낭포성 섬유증, 심장혈관질병과 많은 다른 질병과 같은 많은 유전적 장애를 치료하기위한 방법으로서 전망이 있다. 오늘날 주요문제는 생체안에서 일어나거나 어떤 경우 생체 외에서 수행될 수 있는 트랜스펙션이다. 오늘날, 가장 자주 사용된 벡터, 즉 세포내로 DNA분자를 전달하는 것을 돕는 구조물은 바이러스의 다른 형태, 특히 레트로- 및 아데노바이러스이다. 이러한 방법의 단점은 벡터의 낮은 안정성, 제한된 특이성, 낮은 생산량 및 인간세포내로 바이러스-DNA의 도입이다.
안티센스 DNA 또는 전체 유전자로서의 DNA는 엔도좀 및/또는 리소좀의 광화학적으로 야기된 파열에 의해 세포내로 도입될 수 있다. 이 치료는 생체내에서 수행될 수 있다.
3) 실험적 사용
본 발명은 배지에 있는 세포 예를들면 유전자, 항체, 조작된 단백질 및 일반적으로 플라즈마 막을 통과할 수 없는 화합물로 매우 다양한 분자를 도입시키기 위해 사용될 수 있다.
본 발명은 또한 하기의 제한되지 않는 실시예에 의해 보다 상세히 설명된다.
실시예 1. 이 실시예는 광역학적 처리가 단백질 합성 억제 화합물을 시토졸내로 방출한다는 것을 입증한다.
다수의 식물 독소는 시토졸로 들어가서 효소적으로 리보좀의 기능을 불활성시키므로서 세포를 죽인다. 대부분의 세포파괴성 식물 단백질은 디설피드 브릿지에 의해 함께 결합된 2개의 폴리펩티드 쇄, A와 B로 이루어진다. 쇄 B의 기능은 세포의 표면에 단백질을 결합시키는 것이고 반면에 쇄 A는 효소활성을 포함한다. 겔로닌은 무세포 시스템에서 단백질 합성을 효과적으로 방해하는 식물 독소이지만 완전한 세포에서는 약간의 효과 또는 어떤 효과도 갖지 않는다. 완전한 세포에서의 낮은 세포파괴성 효과는 아마도 겔로닌에서 쇄 B의 결핍때문일 것이다.
NHIK 3025 세포를 TPPS2a(식Ⅰ) 및 겔로닌과 개별적으로 또는 함께 18시간 동안 배양시키고 세포가 광에 노출되기 전에 TPPS2a 및 겔로닌이 없는 배지에서 1시간동안 배양했다. 단백질 합성은 광에 24시간 노출후 측정되었다. 세포들만을 10-20%를 죽이는 광역학적 치료는 30-40%(도2)까지 단백질 합성을 감소시켰다. 도 2에 도시된 바와같이 겔로닌 단독으로는 광의 존재 및 부존재시 어느 정도까지 단백질 합성을 억제한다. 그러나, 단백질 합성은 IC50=0.2μg/㎖ 겔로닌과 PDT 및 겔로닌을 조합시키므로서 완전히 억제한다. 따라서 광역학적 처리가 없을 때 겔로닌은 근본적으로 시토졸로 들어가지 않는다. 이 실시예는 TPPS2a 와 광이 세포성 시토졸내로 기능적으로 완전한 거대분자를 도입시키기 위해 사용될 수 있다는 것을 나타낸다.
실시예 2.이 실시예는 광(색소에 의해 흡수되는 파장을 갖는)의 조사량이 생존 세포 프랙션의 크기를 결정하는데 어떻게 사용될 수 있는지 설명하고 있다.
NHIK 3025 세포는 TPPS2a 및 겔로닌과 실시예1의 도면에 따라 배양되었다.
세포의 클론원성 생존은 광에 24시간 노출 후 측정되었다. 도 3에 도시된 바와같이 사실상 모든 세포는 광 노출이 증가될 때 TPPS2a와 광에 의해 죽었다. 이것은 PDT로 원하지 않는 세포를 파괴하는 것에 관한 선행기술과 일치한다. 겔로닌이 첨가될 때 생존률은 단백질 합성에 대한 겔로닌의 억제효과로 인하여 하락하는데 이는 현재 겔로닌이 시토졸에 방출된다는것을 나타낸다. 첨가된 겔로닌의 증가된 농도는 광 불활성에 대한 세포의 증가된 감수성으로 표시된 바와같이 시토졸에서 많은 겔로닌을 유도한다.
따라서 본 발명은 각 경우에서 생존 수준을 설정하고 살아있는 세포의 요구되는 프랙션을 유지하는 감광성 화합물과 광 노출의 조합을 선택할 가능성을 제공한다.
실시예 3.이 실시예는 변화하는 광 조사량이 상대적인 단백질 합성에 의해 측정된 바와같이 시토졸에 방출된 겔로닌의 양을 어떻게 조절하는지를 설명한 것이다.
NHIK 3025 세포를 실시예 1의 설계에 따라 TPPS2a와 겔로닌과 함께 배양했다.
도 4는 50초의 독소 용량이상의 광 조사량이 상대적인 단백질 합성에 의해 측정된 바와같이 시토졸내의 겔로닌 프랙션을 증가시켰다는 것을 도시한 것이다.
실시예 4-11은 다른 세포주에서 다른 감광제 및 독소와 함께 본 발명에 따른 방법의 사용을 설명하고 있다. 감광제의 세포내위치는 리소좀(TPPS4, TPPS2a , AlPcS2al)와 여분의 리소좀(3-THPP)이다. 하기의 약어가 사용된다 : 인접한 페닐고리에 2개의 설포네이트기를 갖는 알루미늄 프탈로시아닌의 경우 AlPcS2a ; 4개의 설포네이트기를 갖는 메조-테트라페닐포르핀의 경우 TPPS4 ; 인접한 페닐고리에 2개의 설포네이트기를 갖는 메조-테트라페닐포르핀 경우 TPPS2a ; 테트라 하이드록실페닐 포르핀의 경우 THPP. 사용된 세포주는 인간 목의 암종페닐(NHIK 3025), 중국 햄스터 폐 섬유아세포(V79), SV40-형질전환된 아프리카 녹색원숭이 신장 (CVI-원숭이 섬유아세포형 세포) (COS-7), 인간 골육종 세포(OHS) 및 작은 세포 폐암 세포(H146)이다. 모든 실험은 실시예1에서와 같이 설계되었다.
실시예 4.이 실시예는 독소로서 겔로닌을 갖는/갖지않는 V79 세포에서 감광제 AlPcS2a 의 사용과 관련한 것이다(도 5). 특정 광 조사량(조사시간)을 선택하므로서 독소없이는 단백질 합성에서 적은 감소에 의해 도시된 바와같이 거의 세포 손상이 없는 반면에 겔로닌을 가질때는 단백질 합성이 매우 감소된다. 이것은 비록 AlPcS2a의 세포내 국소화가 리소좀일지라도 근본적으로 세포의 손상없이 리소좀을 통해 세포의 세포질내로 겔로닌 분자의 전달을 나타낸다(Moan, J., Berg, K., Anholt, H.와 Madslien, K. (1994). 광화학치료를 위한 감광제로서 의 설폰화 알루미늄 프탈로시아닌. V79 세포에서 국소화, 염료형광성 및 감광성에 대한 소량의 광 조사량의 효과 Int. J. Cancer 58 : 865-870).
실시예 5.이 실시예는 근본적으로 세포의 생존력에 영향을 미치지 않고 H146 세포내로 독소 겔로닌의 전달을 설명하고 있다(도 6). TPPS2a는 세포에 위치한 리소좀인 것으로 알려져 있다. (Berg, K., Western, A., Bommer, J.와 Moan, J.(1990) 인간 암종 세포주에서 설폰화된 메조-테트라페닐포르핀의 세포내 국소화. Photochem. Photobiol. 52:481-487 ; Berg, K., Madslien, K., Bommer J.C., Oftebro, R., Winkelman, J.C. 와 Moan, J. (1991). NHIK 3025 세포에서 설폰화된 메조-테트라페닐포르핀의 광 유도 재국소화 및 조사량 분류의 효과. Photochem, Photobiol. 53:203-210 ; Berg, K와 Moan, J.(1994). 광화학적 표적으로서의 리소좀. Int. J. Cancer, 59 : 814-822).
실시예 6.이 실시예는 감광제로서 TPPS2a를 사용하여 V79 세포에서 본 발명에 따른 방법을 입증하고 있다 (도 7).
실시예 7.이 실시예는 감광제 TPPS2a를 사용하여 독소 아그로스틴을 NHIK3025세포내로 전달하는 것을 입증하고 있다 (도 8).
실시예 8.이 실시예는 TPPS2a를 사용하여 NHIK 3025 세포내로 독소 사포린의 전달을 입증하고 있다 (도9).
실시예 9.이것은 감광제(3-THPP)가 내세포성 소낭(즉, 엔도좀과 리소좀)으로 들어가지 않을 때 (Peng, Q.,Danielsen, H.E. 와 Moan, J.(1994). 암의 광역학적 치료를 위한 유력한 감광제 : 종양세포와 조직에서 감광성 형광물의 형광 검출을 위한 공초점 레이저 조사 현미경의 응용. Proceedings of Microscopy, Holography 및 Interferometry in Biomedicine. SPIE Vol. 2083 : 71-82) 겔로닌을 갖거나 또는 갖지 않은 3THPP의 단백질 합성 효과 사이에는 큰 차이가 없다는 것을 입증하는 비교실시예이다 (도 10). 따라서, 겔로닌은 세포의 시토졸로 전달되지 않는다.
실시예 10.이 실시예는 본 발명에 따라 TPPS2a를 사용하므로서 COS-7 세포내로의 겔로닌의 전달하는 것을 설명하고 있다 (도 11).
실시예 11.이 실시예는 본 발명에 따라 TPPS2a를 사용하므로서 OHS세포내로 겔로닌을 전달하는 것을 설명하고 있다 (도 13). 이 세포주에서 리소좀에서 상당한 단백질 감성이 있는데, 이것은 본 실시예에서 50μM클로로퀴논 또는 10mM NH4Cl에서 4시간 동안 세포를 배양시키므로서 억제된다.
실시예 12.실시예 1과 유사한 본 실시예는 세포가 TPPS4및 다른 농도의 겔로닌과 함께 배양되어 광에 노출되었을 때 겔로닌 농도의 작용으로 NHIK 3025 세포내로 겔로닌을 전달하는 것을 설명하고 있다(도12). 세포가 겔로닌으로만 배양되고 광에 노출되었을 때, 또는 광에 노출없이 TPPS4와 겔로닌으로 배양되었을 때 세포내로 겔로닌의 어떤 전달도 얻어지지 않았다.
이 실시예들은 다른 분자가 다른 감광제와 광 조사량을 사용하여 다양한 세포에 있는 세포 시토졸로 도입될 수 있다는 것을 설명하고 있다. 외생 분자는 도입될 분자 및 감광제가 같은 세포성 구획부로 전달되는 한 세포를 죽이지 않는 감광제와 광의 양을 조사한 후 세포 시토졸내로 도입될 수 있다. 생물학적 구획부에 대한 광화학적 효과는 그 구획부에서의 감광제의 양, 제공되는 광의 량 및 광원의 스펙트럼 특성에 좌우된다. 배지에서 세포에 대한 광화학적 효과를 평가하는 가장 좋은 방법은 처리 24시간 이상 지난다음 세포 생존을 측정하는 것이다. 상기에 제시한 처리 24시간 후 세포를 죽이는 효과와 단백질 합성의 억제 사이에는 좋은 상호관계가 있다 (데이타는 도시되지 않음).

Claims (7)

  1. a) 시토졸에 방출되는 세포성 처리-변형 화합물과 광 활성시 내세포 구획부 막을 파열시키는 감광성 화합물 모두가 부착된, 엔도좀, 리소좀 또는 다른 세포내 구획부와 같은 세포내 구획부로 이동을 용이하게하는 캐리어,
    b) 적어도 하나의 캐리어가 시토졸에 방출되는 화합물을 부착하고 다른 유사한 또는 유사하지 않은 캐리어는 감광성 화합물에 부착되는 몇 개의 캐리어, 및
    c)시토졸에 방출되는 화합물 또는 감광성 화합물 어느 것에든 결합된 캐리어
    의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택된 요소를 포함하는 것을 특징으로 하는 캐리어; 감광제; 및 시토졸에 방출되는 화합물;
    모두를 포함하는 온혈 동물 또는 세포배지에서 종양 및 다른 증식성 질병의 세포처리의 변형을 위한 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서, 시토졸에 방출되는 상기 화합물이 항종양성 화합물인 조성물.
  3. 제 2 항에 있어서, 항종양성 화합물이 겔로닌인 조성물.
  4. 제 1 항에 있어서, 시토졸에 방출되는 화합물이 DNA, 올리고(데옥시) 뉴클레오티드, mRNA, 안티센스 DNA, 당, 단백질, 펩티드, 막 불투과성 약물, 다른 막불투과성 분자와 상기 언급된 분자의 공유결합적으로 또는 비-공유결합적으로 결합된 조성물을 함유하는 그룹으로부터 선택되는 조성물.
  5. 제 1 항에 있어서, 감광성 화합물이 포르피린, 프탈로시아닌, 퍼퓨린, 염소, 벤조포르피린, 나프탈로시아닌, 양이온성 색소, 테트라사이클린, 리소좀속 약산 및 이들의 유도체를 함유하는 그룹으로부터 선택된 조성물.
  6. 제 3 항에 있어서, 감광성 화합물이 인접한 페닐기에 2개의 설포네이트기를 갖는 테트라페닐포르핀인 조성물.
  7. 제 1 항에 있어서, 캐리어가 감광성 화합물의 흡수를 촉진시키는 부위 지시 분자 또는 시토졸로 방출되는 분자로부터 선택된 조성물.
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Families Citing this family (82)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NO180167C (no) 1994-09-08 1997-02-26 Photocure As Fotokjemisk fremgangsmåte til å innföre molekyler i cellers cytosol
US6176842B1 (en) * 1995-03-08 2001-01-23 Ekos Corporation Ultrasound assembly for use with light activated drugs
US6210356B1 (en) * 1998-08-05 2001-04-03 Ekos Corporation Ultrasound assembly for use with a catheter
JP4383545B2 (ja) * 1997-03-19 2009-12-16 ルーシド インコーポレーテッド 共焦点顕微鏡使用法を利用する細胞手術
US6676626B1 (en) 1998-05-01 2004-01-13 Ekos Corporation Ultrasound assembly with increased efficacy
US6582392B1 (en) 1998-05-01 2003-06-24 Ekos Corporation Ultrasound assembly for use with a catheter
EP2138191A1 (en) 1998-01-05 2009-12-30 University Of Washington Enhanced transport using membrane disruptive agents
US6399769B1 (en) * 1998-01-20 2002-06-04 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Method of making sulfanatophenyl substituted porphines
GB9905911D0 (en) * 1999-03-15 1999-05-05 Photocure As Method
AU6871800A (en) * 1999-09-09 2001-04-17 Center For Advanced Science And Technology Incubation, Ltd. Method of piercing membrane and apparatus therefor
IL154044A0 (en) * 2000-07-21 2003-07-31 Essentia Biosystems Inc Multi-component pharmaceutical compositions containing a complex of a positively charged backbone and a negatively charged backbone and methods for the preparation thereof
US20040220100A1 (en) * 2000-07-21 2004-11-04 Essentia Biosystems, Inc. Multi-component biological transport systems
KR100980153B1 (ko) * 2000-11-29 2010-09-03 피씨아이 바이오테크 에이에스 사이토졸 내로의 분자 전달을 위한 광화학적 내부이행
KR101180548B1 (ko) * 2000-11-29 2012-09-06 피씨아이 바이오테크 에이에스 사이토졸 내로의 바이러스 매개된 분자 전달을 위한 광화학적 내부이행
US20020098472A1 (en) * 2000-11-30 2002-07-25 Erlach Julian Van Method for inserting a microdevice or a nanodevice into a body fluid stream
US20020137901A1 (en) * 2001-01-22 2002-09-26 Cavanaugh Philip Gerard Synthesis, and photodynamic therapy-mediated anti-cancer, and other uses of chlorin e6-transferrin
US20030031655A1 (en) * 2001-02-08 2003-02-13 Sequitur, Inc. Methods of light activated release of ligands from endosomes
DK1407787T3 (da) * 2001-06-20 2009-06-02 Dainippon Sumitomo Pharma Co Fremgangsmåde til fremme af nukleinsyreoverförsel
GB0121023D0 (en) 2001-08-30 2001-10-24 Norwegian Radium Hospital Res Compound
ATE319378T1 (de) 2001-12-03 2006-03-15 Ekos Corp Katheter mit mehreren ultraschall-abstrahlenden teilen
US7141044B2 (en) * 2001-12-11 2006-11-28 Ekos Corporation Alternate site gene therapy
WO2003064625A2 (en) 2002-02-01 2003-08-07 Sequitur, Inc. Oligonucleotide compositions with enhanced efficiency
US20060009409A1 (en) * 2002-02-01 2006-01-12 Woolf Tod M Double-stranded oligonucleotides
US20030166282A1 (en) * 2002-02-01 2003-09-04 David Brown High potency siRNAS for reducing the expression of target genes
US8226629B1 (en) 2002-04-01 2012-07-24 Ekos Corporation Ultrasonic catheter power control
US20040248094A1 (en) * 2002-06-12 2004-12-09 Ford Lance P. Methods and compositions relating to labeled RNA molecules that reduce gene expression
GB0215534D0 (en) * 2002-07-04 2002-08-14 Ecole Polytech Selective photochemotherapy using oligonucleotide targeting agents
US20040029275A1 (en) * 2002-08-10 2004-02-12 David Brown Methods and compositions for reducing target gene expression using cocktails of siRNAs or constructs expressing siRNAs
US6921371B2 (en) * 2002-10-14 2005-07-26 Ekos Corporation Ultrasound radiating members for catheter
JP2006517790A (ja) * 2003-01-09 2006-08-03 インヴィトロジェン コーポレーション ポリペプチド−核酸複合体の細胞の送達および活性化
US7332477B2 (en) * 2003-07-10 2008-02-19 Nitto Denko Corporation Photocleavable DNA transfer agent
EP1667732B1 (en) * 2003-09-29 2010-04-21 Nitto Denko Corporation Biodegradable polyacetals for in vivo polynucleotide delivery
US20080318319A1 (en) * 2003-12-19 2008-12-25 Yoshiko Minakuchi Novel Method of Nucleic Acid Transfer
CA3031270A1 (en) 2004-03-03 2005-12-22 Revance Therapeutics, Inc. Compositions and methods for topical diagnostic and therapeutic transport
EP1729821B1 (en) * 2004-03-03 2013-07-17 ReVance Therapeutics, Inc. Compositions and methods for topical application and transdermal delivery of botulinum toxins
US9211248B2 (en) 2004-03-03 2015-12-15 Revance Therapeutics, Inc. Compositions and methods for topical application and transdermal delivery of botulinum toxins
GB0415263D0 (en) * 2004-07-07 2004-08-11 Norwegian Radium Hospital Res Method
US20060094781A1 (en) * 2004-11-04 2006-05-04 Syneron Medical Ltd. Method of treating extracellular matrix
FR2877943B1 (fr) * 2004-11-16 2008-09-05 Univ De Coimbra Nouveaux derives de porphyrine, notamment chlorines et/ou bacteriochlorine, et leurs applications en therapie photodynamique
RU2007136616A (ru) 2005-03-03 2009-04-10 Риванс Терапьютикс, Инк. (Us) Композиция и способ для местного применения и чрескожного введения ботулинового токсина
SG160358A1 (en) * 2005-03-03 2010-04-29 Revance Therapeutics Inc Compositions and methods for topical application and transdermal delivery of an oligopeptide
US7674452B2 (en) * 2005-03-16 2010-03-09 Nitto Denko Corporation Polymer coating of cells
BRPI0501037B8 (pt) * 2005-03-18 2021-07-27 Fund De Amparo A Pesquisa Do Estado De Sao Paulo uso de crotamina e composição
US8518414B2 (en) * 2005-11-17 2013-08-27 Revance Therapeutics, Inc. Compositions and methods of topical application and transdermal delivery of botulinum toxins with reduced non-toxin proteins
WO2007109584A1 (en) * 2006-03-16 2007-09-27 University Of Washington Temperature-and ph-responsive polymer compositions
GB0613753D0 (en) * 2006-07-11 2006-08-23 Norwegian Radium Hospital Res Method
EP2099496A2 (en) * 2006-12-08 2009-09-16 Massachusetts Institute of Technology Delivery of nanoparticles and/or agents to cells
AU2007340162B2 (en) * 2006-12-29 2013-08-01 Revance Therapeutics, Inc. Compositions and methods of topical application and transdermal delivery of botulinum toxins stabilized with polypeptide fragments derived from HIV-TAT
CN101583274A (zh) * 2006-12-29 2009-11-18 雷文斯治疗公司 使用反向序列hiv-tat多肽的运输分子
US10182833B2 (en) 2007-01-08 2019-01-22 Ekos Corporation Power parameters for ultrasonic catheter
US7981688B2 (en) 2007-03-08 2011-07-19 University Of Washington Stimuli-responsive magnetic nanoparticles and related methods
PL2170181T3 (pl) 2007-06-22 2014-08-29 Ekos Corp Sposób i aparat do leczenia wylewów wewnątrzczaszkowych
WO2009079415A1 (en) * 2007-12-14 2009-06-25 Ekos Corporation Ultrasound pulse shaping
GB0811955D0 (en) 2008-06-30 2008-07-30 Pci Biotech As Method
US8426214B2 (en) * 2009-06-12 2013-04-23 University Of Washington System and method for magnetically concentrating and detecting biomarkers
GB0914287D0 (en) 2009-08-14 2009-09-30 Pci Biotech As Compositions
GB0914286D0 (en) 2009-08-14 2009-09-30 Pci Biotech As Method
US9080933B2 (en) 2009-11-09 2015-07-14 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Stimuli-responsive polymer diagnostic assay comprising magnetic nanoparticles and capture conjugates
US20110117668A1 (en) * 2009-11-09 2011-05-19 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Self-powered smart diagnostic devices
GB201208548D0 (en) 2012-05-15 2012-06-27 Pci Biotech As Compound and method
CA2906279A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Pci Biotech As A method of generating antigen presenting cells using photochemical internalisation
GB2517707B (en) 2013-08-28 2020-09-02 Pci Biotech As A device for light-induced rupture of endocytic vesicles to effect the delivery of an antigen
JP6684215B2 (ja) 2013-08-28 2020-04-22 ピーシーアイ バイオテック エイエス 予防接種用化合物および免疫化用化合物、ならびに予防接種方法および免疫化方法
AU2014390262B2 (en) 2014-04-11 2020-11-26 Pci Biotech As Method of treating melanoma
NZ729408A (en) 2014-08-28 2021-12-24 Pci Biotech As A method of photochemical internalization (pci) utilizing a antigenic molecule, a photosensitizing agent, and a cytokine
GB201503776D0 (en) 2015-03-05 2015-04-22 Pci Biotech As Compound and method
WO2016201136A1 (en) 2015-06-10 2016-12-15 Ekos Corporation Ultrasound catheter
WO2018069536A1 (en) 2016-10-14 2018-04-19 Pci Biotech As Treatment of cholangiocarcinoma with tpcs-2a induced photochemical internalisation of gemcitabine
GB201718631D0 (en) * 2017-11-10 2017-12-27 Pci Biotech As Method
GB201801169D0 (en) * 2018-01-24 2018-03-07 Pci Biotech As Method
EP3823668A1 (en) 2018-07-16 2021-05-26 DCPrime B.V. A combination product for use in tumor vaccination
CA3133410A1 (en) 2019-04-25 2020-10-29 Dcprime B.V. Methods of tumor vaccination
CN110711249B (zh) * 2019-09-19 2020-10-27 北京化工大学 一种溶酶体膜包覆纳米颗粒的制备方法
AU2021244937A1 (en) 2020-03-27 2022-11-03 Mendus B.V. In vivo use of modified cells of leukemic origin for enhancing the efficacy of adoptive cell therapy
EP4127139A1 (en) 2020-03-27 2023-02-08 Mendus B.V. Ex vivo use of modified cells of leukemic origin for enhancing the efficacy of adoptive cell therapy
CN114163508A (zh) * 2020-09-11 2022-03-11 王月志 能破坏细胞的氨基酸序列及相关核苷酸序列和相关的应用
US20220168407A1 (en) 2020-11-05 2022-06-02 Dcprime B.V. Use of tumor-independent antigens in immunotherapies
GB202101726D0 (en) 2021-02-08 2021-03-24 Pci Biotech As Method
AU2022235341A1 (en) 2021-03-12 2023-09-21 Mendus B.V. Methods of vaccination and use of cd47 blockade
GB202115451D0 (en) 2021-10-27 2021-12-08 Pci Biotech As Method
WO2024068795A1 (en) 2022-09-27 2024-04-04 Pci Biotech As Method for releasing viral vectors
GB202404168D0 (en) 2024-03-22 2024-05-08 Pci Biotech As Method

Family Cites Families (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU563827B2 (en) 1982-07-01 1987-07-23 Millipore Corp. Filtration apparatus
US4649151A (en) * 1982-09-27 1987-03-10 Health Research, Inc. Drugs comprising porphyrins
US4704255A (en) 1983-07-15 1987-11-03 Pandex Laboratories, Inc. Assay cartridge
US5066274A (en) * 1985-04-30 1991-11-19 Nippon Petrochemicals Company, Ltd. Tetrapyrrole therapeutic agents
US5076950A (en) 1985-12-20 1991-12-31 Syntex (U.S.A.) Inc. Magnetic composition for particle separation
US4895706A (en) 1986-10-28 1990-01-23 Costar Corporation Multi-well filter strip and composite assemblies
US5095030A (en) * 1987-01-20 1992-03-10 University Of British Columbia Wavelength-specific cytotoxic agents
HU204856B (en) 1987-08-12 1992-02-28 Orszagos Mueszaki Fejlesztesi Process for releasing cell mixtures and tissues from undesired populations and for producing monoclonal antibody - hematoporphyrin conjugates
NO891491D0 (no) * 1987-08-12 1989-04-11 Peter Nemeth Prosedyre for befrielse av celleblandinger og vev for uoenskede populasjoner.
GB8721108D0 (en) * 1987-09-08 1987-10-14 Salford University Of Liposomes
US5284647A (en) * 1988-03-18 1994-02-08 Schering Aktiengesellschaft Mesotetraphenylporphyrin complex compounds, process for their production and pharmaceutical agents containing them
US5256532A (en) 1988-05-02 1993-10-26 Zynaxis Technologies, Inc. Methods, reagents and test kits for determination of subpopulations of biological entities
US4925736A (en) * 1988-07-06 1990-05-15 Long Island Jewish Medical Center Topical hematoporphyrin
GB8905001D0 (en) 1989-03-04 1989-04-19 Univ Leicester Screening for natural products of microbial metabolism
US5567687A (en) * 1989-03-06 1996-10-22 University Of Texas Texaphyrins and uses thereof
US4935498A (en) * 1989-03-06 1990-06-19 Board Of Regents, The University Of Texas System Expanded porphyrins: large porphyrin-like tripyrroledimethine-derived macrocycles
US5328470A (en) * 1989-03-31 1994-07-12 The Regents Of The University Of Michigan Treatment of diseases by site-specific instillation of cells or site-specific transformation of cells and kits therefor
US5059619A (en) * 1989-06-14 1991-10-22 Quadra Logic Technologies, Inc. Stable freeze-dried polyhematoporphyrin ether/ester
DE3919873A1 (de) 1989-06-19 1990-12-20 Behringwerke Ag Magnetische protein-konjugate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
GB8916859D0 (en) 1989-07-24 1989-09-06 Dynal As Hapten linking
GB8929297D0 (en) 1989-12-29 1990-02-28 Dynal As Method of separation
US5200084A (en) 1990-09-26 1993-04-06 Immunicon Corporation Apparatus and methods for magnetic separation
US5491068A (en) 1991-02-14 1996-02-13 Vicam, L.P. Assay method for detecting the presence of bacteria
US5179120A (en) * 1991-06-28 1993-01-12 Cytopharm, Inc. Porphycene compounds for photodynamic therapy
PL165249B1 (pl) * 1991-10-29 1994-11-30 Wojskowa Akad Tech Sposób otrzymywania soli kompleksowych hematoporfiryny i jej pochodnych PL PL PL PL PL PL PL
US5376546A (en) * 1991-11-04 1994-12-27 Xoma Corporation Analogs of ribosome-inactivating proteins
US5258453A (en) * 1992-01-21 1993-11-02 University Of Utah Drug delivery system for the simultaneous delivery of drugs activatable by enzymes and light
CA2132094A1 (en) * 1992-03-16 1993-09-30 C. Frank Bennett Oligonucleotide modulation of protein kinase c
WO1993019199A1 (en) 1992-03-20 1993-09-30 Celsis Limited Method and apparatus for the analysis of biological material
CA2118513A1 (en) * 1992-04-24 1993-11-11 David A. Zarling In vivo homologous sequence targeting in eukaryotic cells
WO1994007138A1 (en) 1992-09-14 1994-03-31 Fodstad Oystein Detection of specific target cells in specialized or mixed cell population and solutions containing mixed cell populations
IL107480A0 (en) * 1992-11-03 1994-02-27 Gene Shears Pty Ltd Tnf-x ribozymes and degradation resistant mrna derivatives linked to tnf-x ribozymes
FR2700010B1 (fr) 1992-12-24 1995-03-17 Rocher Yves Biolog Vegetale Méthode et dispositif pour tester la réactivité de cellules à l'égard de produits.
US5374531A (en) 1993-03-22 1994-12-20 Zynaxis, Inc. Immunoassay for determination of cells
US5861310A (en) * 1993-11-03 1999-01-19 Dana-Farber Cancer Institute Tumor cells modified to express B7-2 with increased immunogenicity and uses therefor
US5491084A (en) * 1993-09-10 1996-02-13 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Uses of green-fluorescent protein
US6015897A (en) * 1993-12-07 2000-01-18 Neorx Corporation Biotinamido-n-methylglycyl-seryl-o-succinamido-benzyl dota
US5514340A (en) 1994-01-24 1996-05-07 Magnetix Biotechnology, Inc. Device for separating magnetically labelled cells
NO180658C (no) 1994-03-10 1997-05-21 Oeystein Fodstad Fremgangsmåte og anordning for deteksjon av spesifikke målceller i spesialiserte eller blandede cellepopulasjoner og opplösninger som inneholder blandede cellepopulasjoner
NO180167C (no) 1994-09-08 1997-02-26 Photocure As Fotokjemisk fremgangsmåte til å innföre molekyler i cellers cytosol
US5872007A (en) * 1995-02-17 1999-02-16 Hybridon, Inc. CAPL-specific oligonucleotides and methods of inhibiting metastatic cancer

Also Published As

Publication number Publication date
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NZ509519A (en) 2004-10-29

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