KR20030036651A - 고형상 글리세롤분해 - Google Patents

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Abstract

ⅰ) 리파제 ; ⅱ) 적어도 14 중량% 이상의 글리세롤 ; 및 ⅲ) 글리세라이드 ; 및 선택적으로는 ⅳ) 레시틴으로 구성되어 (ⅳ)가 존재하지 않는 경우 글리세라이드(ⅲ)가 약 5와 약 35 사이의 요오드 수치 및 20℃에서 약 75% 이상의 고형 지방 함량을 지님을 특징으로 하는 반응 혼합물로부터 40% 이상의 모노글리세라이드를 지닌 고형을 제조하기 위한 효소적 고형상 반응. 또한 본 발명은 40% 이상의 모노글리세라이드를 지닌 고형상을 제조하기 위한 고형상 반응 혼합물을 제조하기 위한 방법에 관한 것이다.

Description

고형상 글리세롤분해{Solid phase glycerolysis}
리파제(lipase)는 수년간 제빵 산업에 이용되어왔고, 다른 다양한 적용이 발달되어 왔다. 그러나 연구는 특정한 적용시 리파제의 이용과 관계된 결점이 종종 있다는 것을 나타냈다. 특히 빵-만들기에 리파제의 사용에 대한 제한 인자 중의 하나는 효소 공격에 일부분만이 유용한 밀가루와 같은 특정한 물질이 약 2%의 지질만을 함유한다는 것이다. 따라서 최근의 연구는 빵-만들기에 리파제를 사용함에 있어서 이익을 증진시키기 위해 리파제를 지질과 결합시키는 가능성에 중점을 두었다.
유럽 특허출원 제0585988호(Gist Brocades)는 모노글리세라이드 형성의 결과로서 리파제가 반죽에 첨가될 때 증진된 항-부패 효과가 수득되었음을 개시하였다. 그러나 반죽에 첨가된 리파제가 모노글리세라이드를 글리세롤과 자유 지방산으로 용이하게 분해할 수도 있기 때문에 모노글리세라이드의 수준이 최저량까지만 증가함을 나타내었다(WO 98/45453, Danisco A/S). 이러한 효과는 첨가된 지방산/오일을 함유한 반죽뿐만 아니라 내생적 지질만을 함유한 반죽에서도 관찰된다.
일부 리파제는 매우 낮은 수분 환경 내에서 작용할 수 있음이 잘 알려져 있다. McNeill et al, [JAOCS, Vol. 68, no. 1(January 1991), 1-5], Bornscheuer et al, [Enzyme and Microbial Technology, 17:578-586, 1995] 및 Thide et al, [JAOCS, Vol. 71, no. 3(March 1994), 339-342]는 특정한 리파제를 첨가하고, 글리세롤분해 반응을 지방/오일의 녹는점 아래에서 발생하게 함으로서 지방/오일의 혼합물 내에서의 글리세롤분해 반응을 수행하는 것이 가능하다는 것을 나타내었다. 그러나 McNeill et al은 또한 수소화된 탈로(tallow)과 같은 충분히 경화된 지방의 고형상 내에서 글리세롤분해를 수행하는 것이 상당히 어렵다는 것을 기술하였다.
본 발명은 식품 산업에 이용하기 위한 활성 성분의 결합에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 매우 높은 수준의 모노글리세라이드(monoglyceride)를 지닌 생성물을 산출하는 고형상 글리세롤분해 반응에 관한 것이다.
도 1은 리파제 억제제의 존재 및 부재 모두의 경우 반죽 표본으로의 고형상 글리세롤분해 생성물(2192-6-1C)의 첨가하는 효과를 나타낸 것이다. 효과는 반죽내에 잔존하는 자유 지방산의 천분율로 측정되었다. 도 1의 더한 참조는 실시예 내에 나타나 있다.
도 2는 P-에테르 : 메틸-t-부틸-케톤(MTBK) : 아세트산(70 : 30 : 1)로의 용출, 바나듐산염 용액으로 염색 및 100℃로의 가열 후 고형상 글리세롤분해 반응 생성물의 TLC 분석의 일반적인 예(2135-135)를 나타낸 것이다.
본 발명은 상기-논의된 선행 기술에서 부딪혔던 문제점을 해결하고자 한다 특히 본 발명은 모노글리세라이드의 산출량을 증진시키고, 경화된 지방으로 글리세롤분해를 수행하는 것과 관련된 문제점을 완화하고자 한다.
따라서 가장 넓은 견지에서 본 발명은 경화된 지방, 글리세롤, 리파제 및 선택적으로 레시틴(lecithin)을 결합함으로서 40% 이상의 모노글리세라이드를 지닌 고형을 제조하기 위한 효소적 고형상 반응을 제공하는 것이다.
더욱 특별하게는 본 발명은 반응 혼합물로부터 40% 이상의 모노글리세라이드를 지닌 고형을 제조하기 위한 효소적 고형상 반응을 제공하는 것이다;
상기 반응 혼합물은
(ⅰ) 리파제 ;
(ⅱ) 적어도 14% 이상의 글리세롤 ; 및
(ⅲ) 글리세라이드 ;
및 선택적으로는
(ⅳ) 레시틴 ;
으로 구성되어 (ⅳ)가 존재하지 않는다면 글리세라이드(ⅲ)는 약 5와 약 35 사이의 요오드 수치 및 20℃에서 약 75%의 고형 지방 함량을 지닌다.
특히 본 발명은 분말로 제조될 수 있고, 제어된 온도 조건하에서 보관될 수 있는 경화된 지방, 글리세롤, 리파제 및 선택적으로 레시틴의 혼합물을 제공한다. 이후 글리세롤분해 반응은 분말화된 형태로 발생한다.
이러한 방법으로 높은 수준의 모노글리세라이드, 활성 리파제 및 선택적으로 레시틴을 함유한 분말화된 생성물을 수득하는 것이 가능하다. 이러한 반응 생성물은 모노글리세라이드로서 빵-만들기 산업에서 상업적으로 중요하다. 더욱이 레시틴(존재하는 경우)은 반죽 강화에 기여하는 한편 리파제는 증가된 반죽 안정성 및 크럼(crumb) 구조에 기여한다.
본 발명의 고형상 반응 혼합물은 글리세라이드로 구성된다.
바람직한 실시태양에서 글리세라이드는 약 1 중량% 내지 약 86 중량%의 양으로 반응 혼합물 내에 존재한다.
첫 번째 바라직한 관점에서 본 발명의 고형상 반응 혼합물은 레시틴으로 구성된다. 레시틴의 존재시 반응 혼합물의 글리세라이드는 충분히 경화된 지방을 포함한 어떤 경화된 지방도 된다.
"경화된 지방" 또는 "수소화된 지방"이라는 용어는 수소첨가 반응에 노출된 지방이다(Ullmanns Encyclopedia of Industrial Chemistry, Sixth Edition, Fats and Fatty Oils, 4.3 and 8). 일반적으로 지방은 예를 들어 니켈, 팔라듐 또는 백금 촉매와 같은 변환 금속 촉매의 존재시 촉매적 수소첨가가 된다.
충분히 경화된 지방은 요오드 수치가 통상의 IUPAC 기술에 의해 측정된 5 이하의 요오드 수치(Ⅳ)를 지닌 지방으로 정의된다(International Union of Pure and Applied Chemistry(IUPAC), Standard Method for the Analysis of Oils, Fats and Derivatives, Method 2.205).
선행기술이 고형상 글리세롤분해 과정으로부터의 높은 모노글리세라이드 함량을 지닌 생성물을 달성하는데 있어서의 레시틴의 이용을 개시하거나 제안한 적이 없다는 것을 주지해야 한다.
두 번째 관점에서 본 발명의 반응 혼합물은 레시틴으로 구성되지 않는다. 레시틴의 부재시 본 반응 혼합물의 글리세라이드는 약 5와 약 35 사이의 요오드 수치 및 20℃에서 약 75% 이상의 고형 지방 함량을 지닌다.
고형 지방 함량(SFC)이라는 용어는 IUPAC Method 2.150(International Union of Pure and Applied Chemistry(IUPAC), Standard Method for the Analysis of Oils, Fats and Derivatives)에 따라 정의되고, 측정된다.
따라서 지방 및 오일에 관련해 사용된 "고형"이라는 용어는 의문의 오일/지방이 상기-논의된 고형 지방 함량에 대한 정의에 따라 고형 지방을 함유함을 의미한다.
글리세라이드 또는 지방의 "요오드 수치"는 상기-논의된 IUPAC 방법에 의해 측정된다.
따라서 40% 이상의 모노글리세라이드를 지닌 생성물을 달성하기 위해 레시틴 부재시 반응 혼합물의 글리세라이드 구성성분은 충분히 경화된 지방 단독으로 구성되지 않아야 한다. 대신에 원하는 수준의 모노글리세라이드를 지닌 생성물을 달성하기 위해 글리세라이드 구성성분은 적어도 하나 이상의 불포화된 지방으로 구성되어야 한다. 일부의 경우 글리세라이드는 불포화된 지방 또는 불포화된 지방의 혼합물이고, 불포화된 지방 또는 혼합물은 약 5와 약 35 사이의 요오드 수치를 지닌다. 또다른 경우 글리세라이드 구성성분은 적어도 하나 이상의 불포화 지방 및 적어도 하나 이상의 포화된 지방의 혼합물로서 혼합물의 요오드 수치는 약 5와 약 35 사이이다.
본 발명의 바람직한 실시태양에서 레시틴의 부재시 반응 혼합물의 글리세라이드 구성성분은 약 5와 약 25 사이의 요오드 수치를 지닌다.
더욱 바람직한 실시태양에서 레시틴의 부재시 글리세라이드는 약 5와 약 15 사이의 요오드 수치를 지닌다. 훨씬 더 바람직하게는 레시틴의 부재시 글리세라이드는 약 5와 약 10 사이의 요오드 수치를 지닌다.
선행 기술은 40%를 초과하는 모노글리세라이드 함량을 지닌 생성물을 산출하고, 본 발명의 경화된 지방을 이용하는데 적당한 고형상 글리세롤분해 방법을 개시하지 않았다는 것을 주지해야한다. 또한 선행 기술은 이러한 고형상 글리세롤분해 반응 혼합물을 취급하기에 적당한 기술을 제안하지도 않았다.
바람직하게는 본 발명의 글리세라이드는 야자유, 해바리기유, 포도씨유, 대두유, 홍화유, 목화씨유, 그라운드너트(ground nut)유, 옥수수유, 올리브유, 땅콩유, 라드(lard), 탈로(tallow) 또는 그의 혼합물로부터 유도된다.
본 발명의 바람직한 실시태양에서 반응 혼합물의 글리세라이드는 트리글리세라이드이다.
또다른 바람직한 실시태양에서 상기 글리세라이드는 다이글리세라이드이다.
"트리글리세라이드"라는 용어는 바람직하게는 글리세롤과 지방산의 트리에스테르(triester)를 의미한다. 더욱 바람직하게는 트리글리세라이드는 글리세롤과 C4∼C24지방산의 트리에스테르이다.
바람직하게는 트리글리세라이드는 14개 탄소 이하의 지방산 체인 길이를 지닌 트리글리세라이드, 4∼14개 탄소의 지방산 체인 길이를 지닌 트리글리세라이드지니고, 6∼14개 탄소의 지방산 체인 길이를 지니 트리글리세라이드, 8∼14개 탄소의 지방산 체인 길이를 지닌 트리글리세라이드, 10∼14개 탄소의 지방산 체인 길이를 지닌 트리글리세라이드, 12개 탄소의 지방산 체인 길이를 지닌 트리글리세라이드, 16∼24개 탄소의 지방산 체인 길이를 지닌 트리글리세라이드, 16∼22개 탄소의 지방산 체인 길이를 지닌 트리글리세라이드, 18∼22개 탄소의 지방산 체인 길이를 지닌 트리글리세라이드, 18∼20개 탄소의 지방산 체인 길이를 지닌 트리글리세라이드 및 그의 혼합물 및 유도체로부터 선택된다.
본 발명의 매우 바람직한 실시태양에서 반응 혼합물에 사용된 트리글리세라이드는 경화된 야자 스테아린(stearin)이다.
야자 스테아린은 제어된 냉각 조건하에서 야자유를 결정화하고, 낮은-용해 액상(야자 올레인(olein)) 및 높은-용해 고형상(야자 스테아린)을 산출하도록 분리함으로서 수득된다. 더욱 상세한 것은 Bailey's Industrial Oil and Fat Products, Fifth Edition, Volume 2, page 321에 나타나 있다. 분획화된 야자 스테아린이라는 용어는 이러한 처리에 의해 수득가능한 분리된 야자 스테아린 구성성분을 나타낸다.
본 발명의 반응 혼합물은 선택적으로는 레시틴으로 구성된다. 레시틴의 존재시 요오드 수치에 관련된 제한 조건 및 글리세라이드 구성성분의 고형 지방 함량(20℃에서의)은 적용하지 않는다.
정의의 방법으로 레시틴은 인산의 콜린(choline) 에스테르에 연결된 스테아르산, 팔미트산 및 올레인산 다이글리세라이드의 혼합물로 구성된다(Merck Index, 12th Edition, 5452).
바람직하게는 레시틴 존재시 레시틴은 식물 레시틴, 분말화된 레시틴, 합성 레시틴 또는 가수분해된 레시틴으로부터 선택된다. 바람직하게는 레시틴은 대두 레시틴이다.
바람직하게는 레시틴 존재시 레시틴은 총 반응 혼합물의 약 1∼50 중량%의 양이다.
본 발명의 반응 혼합물은 리파제로 더욱 구성된다. 리파제는 야생형 리파제 또는 돌연변이 리파제가 될 수 있다. 리파제는 재조합 DNA 기술의 이용으로 제조된다.
리파제는 많은 다른 원료로부터 유도된다.
바람직하게는 리파제는 슈도모나스종(Pseudomonas sp.), 크로모박테리움 비스코숨(Chromobacterium viscosum), 슈도모나스 세파시아(Pseudomonas cepacia), 슈도모나스 스투체리(Pseudomonas stutzeri), 슈도모나스 플로우레센스(Pseudomonas flourescens), 뮤코 메이헤이(Mucor meihei) 또는 캔디다 안타티카(Candida antaritica)로부터 유도된다.
본 발명의 반응 혼합물은 총 반응 혼합물의 적어도 14 중량% 이상의 양의 글리세롤로 더욱 구성된다.
바람직한 실시태양에서 글리세롤은 총 반응 혼합물의 14∼25 중량%의 양으로 존재한다.
더욱 바람직하게는 글리세롤은 총 반응 혼합물의 16∼19 중량%의 양으로 존재한다.
본 발명의 반응 혼합물은 하나 이상의 부가적인 구성성분으로 더욱 구성된다. 이러한 부가적인 구성성분은 예를 들어 산화 안정성을 증진시키는 산화방지제를 포함한다.
반응 혼합물은 글리세롤 운반을 돕는 하나 이상의 고형 담체로 더욱 구성된다. 적당한 고형 담체의 예는 섬유질, 사탕무 섬유질, 하이드로콜로이드(hydrocolloid), 탄산칼슘, 인산삼칼슘, 실리콘 및 융합된 실리콘을 포함한다.
일부의 경우 고형상 글리세롤분해에 앞서 스프레이 결정화 지방의 제한 중의 하나는 글리세롤이 분말을 다소 기름기 있게 만들 수 있다는 것이다. 이러한 문제점을 완화하기 위해 글리세롤용 고형 담체가 반응 혼합물에 첨가되어 글리세롤의 운반 시스템으로서 작용한다. 글리세롤용 고형 담체의 이러한 예 중의 하나는 사탕무 섬유질인 피브렉스(Fibrex)이다. 고형 담체의 존재는 반응 혼합물의 증진된 과정을 가능하게 하여 더 좋은 질의 생성물을 이끈다. 더욱이 고형 담체의 존재는 또한 증가된 수분 흡수를 가능하게 하여 제빵 및 빵-만들기와 같은 특정한 적용에 유리하다. 더욱 특별하게는 빵-만들기에서의 증가된 수분 흡수는 빵의 증가된 습도 및 신선도에 기여한다.
일반적으로 본 발명의 반응 혼합물의 성분은 고형 분말로 처리되고, 제어된 온도 조건 하에서 보관된다. 이후 높은 산출량으로 원하는 모노글리세라이드 생성물을 형성하는 글리세롤분해가 고형상에서 발생한다.
바람직한 실시태양에서 본 발명의 효소적 고형상 반응 내에서 형성된 모노글리세라이드는 -10∼50℃ 사이의 온도에서 형성된다.
매우 바람직한 실시태양에서 모노글리세라이드는 25∼45℃ 사이의 온도에서 형성된다.
본 발명의 반응으로부터 수득된 고형상 글리세롤분해 생성물은 제빵 및 다른 적용에 이용된다.
일반적으로 고형상 글리세롤분해 생성물이 이용되면, 예를 들어 반죽에 첨가될 때 리파제는 여전히 활성적이다. 일부의 경우 활성 리파제가 존재하는 것이 유리하다. 실제로 실험은 모노글리세라이드 및 레시틴이 증가된 부드러움에 기여하는 한편 리파제 및 레시틴은 반죽 강화 효과를 지니기 때문에 활성 리파제를 함유한 본 발명에 따라 제조된 글리세롤분해 생성물이 특정한 제빵 적용에 특히 중요함을 나타내었다.
그러나 또다른 특정한 적용시 리파제 활성 수준은 종종 너무 높고, 역효과를 유발한다. 따라서 본 반응 혼합물로부터 제조된 글리세롤분해 생성물은 리파제 억제자, 예를 들어 염화제2철(FeCl3)과 결합된다. 이러한 방법으로 필요한 경우리파제 활성은 적용에 따라 다르게 조절될 수 있다.
본 발명의 더한 관점은 40% 이상의 모노글리세라이드를 지닌 고형을 제조하기 위해 효소적 고형상 반응 혼합물을 제조하는 방법에 관한 것으로 상기 방법은 :
(ⅰ) 지방상(fat phase)을 형성하기 위해 글리세라이드를 선택적으로는 레시틴과 함께 용해시키고 ;
(ⅱ) 총 혼합물의 적어도 14 중량% 이상의 양으로 존재하는 글리세롤 내에 상기 리파제의 지방상 용액을 첨가시키고, 결과 혼합물을 교반하고 ;
(ⅲ) 상기 혼합물을 균질화시키고 ;
(ⅳ) 상기 혼합물이 상기 효소적 고형상 반응 혼합물을 형성하도록 처리하는
것으로 구성된다.
하나의 바람직한 실시태양에서 본 발명의 반응 혼합물은 이후 스프레이 결정화된다.
스프레이 결정화는 멜트(melt)를 원자화하는데 이용되는 스프레이 드라이와 유사한 유니트 오퍼레이션(unit operation)이다. 상기 기술은 스프레이 타워를 이용하고, 관련 분야의 업자에게 익숙할 것이다. 첫 번째로 액상 멜트는 스프레이 노즐(spary nozzel) 또는 휠(wheel)에 의해 원자화되어 작은 액체 입자를 형성한다. 이후 입자는 스프레이 타워 내의 냉각 공기의 흐름에 의해 그들의 녹는점이하로까지 냉각되어 원자화된 멜트가 미세 입자 또는 분말로 결정화되게 한다. 스프레이 결정화에 대한 더한 참고는 Ulmanns Encyclopedia, Sixth Edition, Crystallization and Precipitation, 10.4에 나타나 있다. 선택적으로는 스프레이 결정화후 입자가 극저온 제분에 의해 더욱 처리된다.
또다른 바람직한 실시태양에서 본 발명의 효소적 고형상 반응 혼합물은 이후 펠렛화되고, 박편되고 또는 압출되고, 선택적으로는 연마된다.
펠렛화(pelleting)는 멜트로부터 고형 펠렛을 수득하기 위해 이용되는 유니트 오퍼레이션이다. 상기 기술은 당분야에 잘 알려져 있고, 멜트가 침전된 위로 냉각된 금속 벨트를 이용한다. 일반적으로 멜트는 작은 구멍을 통해 침전되어 냉각 벨트 상에서 응결하는 작은 드로플렛(droplet)을 형성한다. 펠렛화에 대한 더욱 상세한 사항은 Perry's Chemical Engineer's Handbook, Sixth Edition, Equipment for Fusion of Solids, p. 11-45에 나타나 있다.
박편화(flaking)는 멜트로부터 고형을 수득하는데 이용되는 당업자에게 잘 알려진 유니트 오페리이션이다. 상기 기술은 금속 켄베이어 벨트 상에 금속을 결정화시키거나 냉각 유니트로 드럼을 회전시키는 것을 포함한다. 이후 고형화된 물질은 칼로 드럼 또는 벨트를 스크레이프(scrape)한다. 상기 기술의 더욱 상세한 사항은 Perry's Chemical Engineer's Handbook, Sixth Edition, Equipment forFusion of Solids, p. 11-45에 나타나 있다. 박편화 처리로부터 수득된 물질은 이후 극저온 제분(또는 낮은 온도 연마)에 의해 분말로 전환된다.
본 발명의 더욱 바람직한 관점은 고형상 반응에 의해 수득된 글리세롤분해 생성물로 구성된 식료품에 관한 것이다. "식료품"이라는 용어에 의해 인간 또는 동물 소비에 적당한 물질을 의미한다.
바람직하게는 글리세롤분해 생성물로 구성된 식료품은 식빵, 케이크, 단 반죽 생성물, 라이네이트된 반죽, 액체 배터(batter), 머핀, 도우넛, 비스킷, 크래커 및 쿠키를 포함한 제빵식품; 쵸코렛, 사탕, 캬라멜, 할라와(halawa), 무설탕 및 설탕이 가미된 껌, 풍선껌, 소프트 풍선껌, 츄잉껌 및 푸딩을 포함한 과자류; 샤페트, 바람직하게는 아이스크림 및 아이스밀크를 포함하는 냉동 유제품을 포함한 냉동식품; 커피크림, 거품크림, 커스타드크림, 우유음료 및 요구르트를 포함한 유제품; 무스, 거품야채크림, 가공된 육류를 포함하는 육류; 식용 오일 및 지방, 탄산 또는 무탄산 거품 식품, 오일-인-워터(oil-in-water) 에멀젼, 워터-인-오일 에멀젼, 마가린, 쇼트닝 및 저지방 및 극저지방 스프레드; 드레싱, 마요네즈, 딥(dip), 크림베이스소스, 크림베이스스프, 음료, 양념 에멀젼, 소스 및 마요네즈로부터 선택된다.
본 발명은 수반된 실시예 및 도면에 의해 기술될 것이다.
재료
리파제: #2402 LIPOSAMPseudomanas sp.리파제
EUROPA-Bioproducts, UK로부터의 크로모박테리움 비스코숨 (뱃치 #2402, #2450 및 #2474) 리파제
경화된 야자 스테아린, 038500:
낙하 지점 약 60℃
F.F.A. 최대 1.0%
요오드 수치 최대 2
분획화된 야자 스테아린: Palmotex 98T, Aarhus Olie, 덴마크 :
요오드 수치 35
F.F.A. 최대 0.1
고형 지방 인덱스
10℃ 75-90
20℃ 60-75
30℃ 40-50
35℃ 32-42
경화된 야자 스테아린, Grindsted PS 101 :
낙하 지점 약 60℃
F.F.A. 최대 1.0%
요오드 수치 최대 2
분말화된 레시틴, Sternpur, Stern Lecithin & Soja GmbH & Co., KB,
함브루크 :
불용성 아세톤 최소 96%
물 최대 1%
산 수치 최대 35
대두 레시틴003175 :
불용성 아세톤 최소 62%
산 수치 20∼26mg KOH/g
물 최대 1%
가수분해된 레시틴: 레시틴 H, 036702 :
산 수치 28∼45mg KOH/g
글리세롤 99.5%
방법
박막 크로마토그래피(TLC)
반응 생성물은 멀크사로부터의 Kieselgel F 60 플레이트를 이용한 TLC에 의해 분석되었다.
용출 시스템 : P-에테르 : 메틸-t-부틸-케톤(MTBK) : 아세트산(70 : 30 : 1)
발달 : 바나듐산염 용액 내에 담그고, 100℃로 가열됨
기체 크로마토그래피
WCOT 융합된 실리콘 컬럼 12.5m ×0.25mm ID ×0.1㎛ 5% 페닐-메틸-실리콘(Crompack사의 CP Sil 8 CB)으로 장착된 Perkin Elmer 8420 Capillary 기체 크로마토그래피
담체 : 헬륨
주입 : 스플릿으로 1.5㎕
검출기 : FID. 385℃
오븐 프로그램1234
오븐 온도 : ℃ 80 200 240 360
등온선, 시간, 분200 10
온도율, ℃/분201012
표본 준비: 50mg의 지질이 내부 표준 헵타데칸(heptadecane), 2mg/ml를 함유한 12ml의 헵탄 : 피리딘(2 : 1) 내에 용해된다. 500㎕의 표본은 크림프바이알(crimp vial)로 옮겨진다. 100㎕의 MSTFA(N-메틸-N-트리메틸시릴-트리플루오아세타미드)가 첨가되고, 90℃에서 15분 동안 반응된다.
계산 : 모노-다이-트리글리세라이드 및 지방산에 대한 반응 인자가 이들 구성성분의 참조 혼합물로부터 측정되었다. 이들 반응 인자에 기초하여 표본 내의 지방산 및 글리세롤이 계산되었다.
모델 반죽
500 Brabender Units(BU)에 대한 10 그램의 덴마크 밀가루(Reform), 0.1g의 건조 효모(LeSaffre), 0.3g의 염 및 물이 6분간 미니 Brabender Farinograph 내에서 혼합되었다. 반죽은 32℃에서 60분간 뚜껑이 있는 플라스틱 비이커에 놓였다. 이후 반죽은 냉동되고, 동결건조되었다.
지질 추출 및 지방산 분석
20g의 충분히 시험된 반죽이 즉시 냉동되었고, 동결건조되었다. 동결건조된 반죽은 커피 제분기 내에서 분쇄되었고, 800 마이크론 스크린을 통해 통과되었다. 2g의 동결건조된 반죽은 나사 뚜껑이 있는 15ml 원심분리 튜브 내로 저울질되고, 10분간 끓는 물 베쓰에 놓였다. 튜브는 Rotamix 내에 놓였고, 대기 온도에서 20분간 45 rpm으로 회전되었다. 이후 튜브는 10분간 끓는 물 베쓰에 놓였고,대기 온도에서 30분간 Rotamix 상에서 회전되었다. 튜브는 5분간 3500g로 원심분리되었고, 5ml의 상청액이 바이알 내로 옮겨졌다. WSB는 질소 증기하에서 증발되어 건조되었다.
추출물 내의 지바산은 715nm에서 이소-옥탄(iso-octan) 측정된 Cu-염으로 분석되었고, 올레인산에 기초한 눈금 곡선에 따라 정량화되었다(Kwon, D.Y., and J.S., Rhee(1986), A Simple and Rapid Colourimetric Method for Determination fo Free Fatty Acid for Lipase Assay,JAOCS63:89).
결과
2133-134. 경화된 야자 스테아린과의 글리세롤분해 반응
충분히 경화된 야자 스테아린, 분획화된 야자 스테아린 및 글리세롤 내에 용존된 리파제가 스프레이 결정화되었다. 조리법은 하기 표 1에 나타나 있다.
2133-134- 1 2 3 4
경화된 야자 스테아린, 038500 g 500 500 500 400
팔모텍스(Palmotex) T98 g 100
글리세롤 : 리파제 A g 88 56
글리세롤 : 리파제 B g 100
글리세롤 : 리파제 C g 88
LIPU/g A B C
글리세롤, 99.5% g 150 100 100
#2402 276700 g 0 0 0.5
#2405 1900000 g 0.2 0.015 0
물 g 6 4 4
절차
경화된 야자 스테아린은 65℃에서 녹았다. 리파제는 물에 용해되었고, 글리세롤이 첨가되었다. 리파제/글리세롤 상이 60℃에서 지방 상 내로 첨가되었다. 혼합물은 60℃에서 교반되었고, 이후 60℃에서 스프레이 베셀로 옮겨졌다. Turrax 혼합기로 강하게 혼합하는 동안 혼합물은 "터널" 스프레이 기술을 이용하여 스프레이 결정화되었다. 터널 스프레이 기술은 지방이 분말로 결정화되는 터널 내로 용해된 지방이 스프레이 노즐을 통해 펌프되는 변형이 있고, 스프레이 결정화와 유사하다. 표본은 25℃ 및 40℃에서 보관되었고, 세 번째 표본이 25℃ 및 40℃ 사이에서 순환되었다. 보관 1일 및 7일 후 표본은 TLC에 의해 분석되었다.
TLC 분석은 표본 제 4호가 일반적으로 높은 수준의 모노글리세라이드를 생성함을 나타내었다. 또한 표본은 GLC 분석되었다(표 2).
2133-134-1 (40℃)/% 2133-134-2 (40℃)/% 2133-134-3 (40℃)/% 2133-134-4 (40℃)/%
글리세롤 8.1 5.1 11.4 1.1
자유 지방산 0.1 0.6 0.5 1.7
모노글리세라이드 22.7 15.8 11.1 69.4
다이글리세라이드 32.8 21.4 20.6 23
트리글리세라이드 35.8 57 56.5 6.2
GLC 분석은 더 높은 수준의 모노글리세라이드가 충분히 경화된 지방과 야자 스테아린(팔모텍스 T98)을 함유한 표본 2133-134-4에서 형성됨을 확인시켰다. 표본 2133-134-4 내의 모노글리세라이드의 수준은 효소적 글리세롤분해가 액상에서 발생할 때 모노글리세라이드의 평형 농도인 20∼25%의 모노글리세라이드와 비교되어야 한다.
또한 이들 결과는 단지 포화된 지방을 지닌(레시틴 없는) 표본 1, 2, 및 3이 표본 4와 비교하여 더 낮은 수준의 모노글리세라이드를 생성함을 나타내었고, 따라서 높은 수준의 모노글리세라이드를 수득하기 위해 반응 혼합물 내에 일부 불포화된 지방을 지니는 것이 필요함을 확인시켰다.
2133-135
불포화된 트리글리세라이드 대신에 레시틴 분말이 다른 농도의 충분히 경화된 야자 스테아린 내로 첨가되었다(표 3).
213-153- 1 2 3 4 5
경화된 야자 스테아린,038500 g 7 8 9 9.5 9.9
레시틴 분말, 074793 g 3 2 1 0.5 0.1
글리세롤 g 2 2 2 2 2
리파제 #2402 g 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01
물 g 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05
절차
경화된 야자 스테아린은 65℃에서 녹았다. 리파제는 물에 용해되었고, 글리세롤이 첨가되었다. 리파제/글리세롤 상이 60℃에서 지방 상 내로 첨가되었고, 60℃에서 1시간 동안 교반되었다. 이후 표본은 Ultra Turrax 혼합기 내에서 균질화되었고, 알루미늄 플레이트 상에서 결정화되었다. 표본은 25℃ 및 40℃에서 보관되었고, 1일 및 7일 후 TLC로 분석되었다.
TLC-분석은 분말화된 레시틴이 경화된 야자 스테아린과 결합될 때 높은 수준의 모노글리세라이드가 생성됨을 나타내었다. 또한 이는 7일 동안 40℃에서 보관된 표본의 GLC 분석에 의해 확인되었다(표 4).
GLC 분석 2133-135-1 2133-135-2 2133-135-3
% w/w % w/w % w/w
글리세롤 4.9 4.8 7.5
자유 지방산 3.2 2.8 2
모노글리세라이드 68.8 67.8 49.6
다이글리세라이드 10.2 12.5 15.5
트리글리세라이드 0.3 4.1 29.7
표 4로부터 레시틴 분말이 경화된 야자 스테아린의 글리세롤분해 반응을 증진시킴이 명확해졌다. 가장 높은 수준의 글리세롤분해는 지방 상의 30%의 분말화된 레시틴에서 수득되었다.
2133-139. 글리세롤 수준 및 분말화된 레시틴 대신의 대두 레시틴의 시험
글리세롤분해 반응에 대한 글리세롤 수준의 효과는 경화된 야자 스테아린으로 시험되었다. 분말화된 레시틴이 특정한 식료품으로의 적용에 있어서, 예를 들어 튀김 마가린의 경우 항상 최상의 레시틴 선택이 아니기 때문에 대두 레시틴은 분말화된 레시틴 대신에 시험되었다(표 5).
2133-139 3 4
충분히 경화된 야자 스테아린 g 8 8
대두 레시틴 g 2 2
글리세롤/리파제 A g 2 1
A
글리세롤 99.5% 순도 g 10
리파제 #2402 g 0.05
물 g 0.25
이들 표본은 상기 기술된 바와 동일한 방법으로 제조되었고, 7일간 보관되었고, GLC에 의해 분석되었다(표 6).
2133-139 3 4
% w/w % w/w
글리세롤 4.7 4.8
모노글리세라이드 65.5 20.3
다이글리세라이드 21.7 30.2
트리글리세라이드 5.6 44.5
이러한 실험은 대두 레시틴 역시 경화된 야자 스테아린의 글리세롤분해를 촉진시킴을 확인시켰다. 모노글리세라이드로의 전환을 위한 충분히 높은 수준의 글리세롤 수준을 지니는 중요성도 이러한 실험에서 확인되었다.
2192-6. 고형상 글리세롤분해를 위한 다른 리파제의 시험
레시틴 분말과 경화된 야자 스테아린의 글리세롤분해 반응은 "터널" 스프레이 시스템에 의해 분말을 생성함으로서 반복되었다. 슈도모나스종(Pseudomonas sp.)로부터의 #2402와 크로모박테리움 비스코숨(Chromobacterium viscosum)으로부터의 #2450이 시험되었다(표 7).
2192-6- 1 2 3 4
경화된 야자 스테아린 g 350 350 350 560
레시틴 분말, 074793 g 150 150 150 140
글리세롤 g 100 100 75 105
리파제 #2402 g 0.4 0.5
리파제 #2450 g 0.1 0.05
물 g 2.5 2.5 2.5 3.5
절차
경화된 야자 스테아린 및 레시틴 분말이 함께 용해되었고, 60℃로 냉가되었다. 리파제는 물에 용해되었고, 글리세롤이 첨가되었다. 글리세롤 내에 용해된 리파제는 지방 상 내로 첨가되었고, 55℃에서 1시간 동안 교반되었다. 혼합물은 Turrax 혼합기를 이용하여 균질화되었고, 60℃에서 스프레이되었다.
스프레이 결정화된 분말의 표본이
A) 25℃
B) 40℃
C) 온도 사이클 35℃-45℃
에서 보관되었다.
보관 7일 후 표본이 GLC로 분석되었다(표 8).
2192-6- 1B 2B 3B 4B 1C 2C 3C 4C
% % % % % % % %
글리세롤 6.3 6.2 7.6 7.1 6.9 6.4 7.5 5.8
모노글리세라이드 54.3 56.6 27.6 26.0 49.6 58.8 29.8 35.4
다이글리세라이드 24.1 19.7 36.9 46.3 27.9 23.9 42.0 34.0
트리글리세라이드 1.5 3.1 3.1 8.5 1.4 3.1 12.6 11.5
결과는 모노글리세라이드의 수준이 40℃에서 보관된 표본 보다 온도 사이클된 표본에서 더 높지 않음을 나타내었다.
표본 3 및 4는 낮은 비율의 글리세롤을 함유하였고, 상기와 같이 낮은 수준의 모노글리세라이드를 생성하였다(표 6).
2192-18 다른 수준의 대두 레시틴의 시험
분말화된 레시틴이 특정한 적용에 있어서 적당하지 않기 때문에 반응은 그 대신에 일반적인 대두 레시틴을 이용하여 시험되었다. 경화된 야자 스테아린과 대두 레시틴을 함유한 글리세롤분해용 표본이 표 9에 나타난 바와 같이 제조되었다.
2192-18- 1 2 3 4
경화된 야자 스테아린 g 7.5 8 8.5 9
대두 레시틴 g 2.5 2 1.5 1
글리세롤, 99.5% 순도 g 2 2 2 2
리파제 #2450 g 0.002 0.002 0.002 0.002
물 g 0.05 0.05 0.05 0.05
절차
경화된 야자 스테아린과 대두 레시틴이 60℃에서 용해되었다. 리파제는 물에 용해되었고, 글리세롤이 첨가되었다. 리파제/글리세롤 혼합물이 55℃에서 지방 상 내로 첨가되었고, 10분간 교반되었다.
표본은 균질화되었고, 결정화되었으며
(A) 25℃에서 7일간 보관되었고, 12시간 동안 35-45℃의 온도 사이클되었다.
(B) 40℃에서 7일간 보관되었다.
표본은 GLC에 의해 분석되었다(표 10).
2192-18 1A 2A 3A 4A 1B 2B 3B 4B
% w/w % w/w % w/w % w/w % w/w % w/w % w/w % w/w
% 글리세롤 3.4 3.2 2.9 3.4 3.3 2.5 1.9 1.4
% FFA 1.2 1.1 0.4 0.4 1.1 0.5 0.4 0.3
% 모노글리세라이드 78.6 77.3 80.5 75.2 79.6 81.8 86.2 85.9
% 다이글리세라이드 4.6 4.6 2.6 3.3 5.3 3.9 2.8 1.9
% 트리글리세라이드 2.4 7.3 7.1 15 2.2 3.4 3 7
이들 결과는 대두 레시틴이 분말화된 레시틴 대신에 사용될 때 글리세롤분해에 의해 수득된 모노글리세라이드 수준의 유의적인 증가를 나타내었다. 또한 가장 낮은 수준의 레시틴을 지닌 표본 3 및 4는 가장 높은 수준의 모노글리세라이드를 나타냄이 주목할 만 하고, 결과는 고형상 글리세롤분해에 의해 경화된 지방의 모노글리세라이드로의 높은 전환을 수득하기 위해 단지 적은 양의 대두 레시틴이 요구됨을 확인시켰다.
2192-22 레시틴의 다른 타입 시험
실험 2192-18은 "터널" 스프레이에 의해 대규모로 반복되었고, 대두 레시틴과 가수분해된 레시틴(레시틴 H) 모두가 시험되었다(표 11).
2192-22- 1 2
Grindsted PS 101 g 425 450
대두 레시틴 75
레시틴 H g 50
글리세롤 g 100 100
리파제 #2450 g 0.1 0.1
물 g 2.5 2.5
Grindsted PS 101과 레시틴이 70℃에서 용해되었다. 리파제는 물에 용해되었고, 글리세롤이 첨가되었다. 리파제/글리세롤 상이 60℃에서 지방 상 내로 첨가되었다. 이후 표본은 5분간 균질화되었고, "터널" 스프레이 기술을 이용하여 스프레이 결정화되었다. 표본은 25℃ 및 40℃에서 보관되었다. 보관 동안 표본은 1, 2, 및 6일 후 취해졌고, TLC로 분석되었다. 보관 7일 후 표본은 40℃에서보관되었고, GLC에 의해 분석되었다(표 12).
2192-22 1 2
% w/w % w/w
글리세롤 2 1.9
FFA 1.9 1.9
모노글리세라이드 84.5 83.6
다이글리세라이드 6.4 8.7
트리글리세라이드 0.7 1.2
총계 95.6 97.4
표 12 내의 결과는 분말 형태에서 글리세롤분해에 의한 높은 수준의 모노글리세라이드를 제조하기 위해 경화된 야자 스테아린과 결합한 대두 레시틴 및 레시틴 H 모두를 이용하는 것이 가능함을 확인시켰다.
2192-37 글리세롤의 담체를 함유한 고형상 글리세롤분해
이러한 실험에서 리파제 크로모박테리움 비스코숨 #2474가 7.5%의 대두 레시틴과 결합된 충분히 경화된 야자 스테아린, Grindsted PS 101의 고형상 글리세롤분해를 위한 촉매로서 사용되었다. 대두 레시틴 대신에 10%의 분획화된 야자 스테아린, 팔모텍스 T98이 Grindsted PS 101과 결합하여 시험되었다. 이러한 팔모텍스 T98과의 결합에 있어서, 분말이 스프레이 결정화에 의한 조리법으로부터 용이하게 수득될 수 있었다.
고형상 글리세롤분해가 뒤따르는 지방의 스프레이 결정화 이용의 제한 중의 하나는 글리세롤이 미끌거리는 분말을 제조한다는 점이다. 이는 글리세롤의 운반 시스템으로 작용하는 글리세롤용 고형 담체를 첨가함으로서 제거된다. 하기의 실험에서 사탕무 섬유질 FIBREX가 이러한 이론을 시험하기 위해 첨가되었다. 실험의 조리법이 표 13에 나타난 바와 같다.
1 2 3
Grindsted PS 101 g 462.5 450 450
대두 레시틴 g 37.5 50
Fibrix g 60
팔모텍스 T98 g 50
글리세롤 g 100 100 100
리파제 #2474 g 0.05 0.05 0.05
물 g 2.5 2.5 2.5
표본은 하기의 절차에 따라 제조되었다 :
Grindsted PS 101 및 대두 레시틴 또는 팔모텍스 T98은 함께 용해되었고, 60℃로 냉각되었다. 리파제 #2474는 물에 용해되었고, 글리세롤이 첨가되었다. Fibrex가 스프레이 결정화 전에 첨가되었다. 혼합물은 Ultra Turrax 혼합에 의해 균질화되었고, 스프레이 결정화되었다. 표본은 40℃에서 7일간 보관되었고, GLC에 의해 분석되었다.
GLC 분석으로부터의 결과는 표 14에 나타나 있다.
1 2 3
% 글리세롤 1.6 4.6 4.4
% 자유 지방산 0.9 1.1 1.7
% 모노글리세라이드 89.2 62.2 59.4
% 다이글리세라이드 4.6 15.2 13.5
% 트리글리세라이드 0.8 20.8 13.2
표 14는 충분히 경화된 야자 스테아린의 매유 효과적인 고형상 글리세롤분해가 7.5%의 대두 레시틴의 첨가하고 촉매로서 크로모박테리움 비스코숨 리파제를 이용함으로서 달성됨을 확인시켰다.
또한 결과는 대두 레시틴이 부분적으로 포화된 지방에 의해 치환될 때 고형상 글리세롤분해가 덜 효과적임을 확인시켰다. 더욱이 Fibrix와 같은 사탕무 섬유질의 첨가는 글리세롤분해의 정도를 감소시킨다. 이러한 효과는 효소를 덜 효과적이게 하는 반응 혼합물 내에서의 물과의 경쟁에 기인한다.
2192-39 리파제 억제
고형상 글리세롤분해 생성물은 제빵 및 다른 적용에 이용된다. 그러나 리파제는 반죽 및 특정한 적용에 첨가될 때 여전히 활성적이고, 리파제 활성의 수준이 너무 높아서 역효과를 유발한다.
이를 더욱 연구하기 위해 반죽 시스템 내에서 고형상 글리세롤분해 생성물 2192-6-1C를 리파제 억제제와 결합하는 효과를 연구하기 위해 실험이 수행되었다. 초기 시험은 염화제2철이 특정한 리파제에 대한 효과적인 억제제임을 나타내었다.
모델 반죽은 상기 조리법에 따라 표 15에 나타난 첨가에 의해 제조되었다. 반죽은 물-포화된 부탄올과 측정된 자유 지방산의 양으로 추출되었다.
1 2 3
고형상 글리세롤분해 2192-6-1C % 0 0.5 0.5
염화제2철, 2% 수용액 % 0 0 1
지방산 분석으로부터의 결과는 도 1에 나타나 있다. 결과는 고형상 글리세롤분해 생성물을 리파제 억제제와 결합하고, 반죽에서의 리파제 활성을 억제시키는 것이 가능함을 나타낸다.
본 발명의 기술된 방법 및 시스템의 다양한 변형 및 변이는 본 발명의 범위 및 정신에 벗어남이 없이 당업자에게 명백할 것이다. 화학 또는 관련된 분야의 업자에게 분명한 본 발명을 수행하기 위한 기술된 방법의 변형은 하기의 청구함의 범위 내에 있다.

Claims (18)

  1. ⅰ) 리파제 ;
    ⅱ) 적어도 14 중량% 이상의 글리세롤 ; 및
    ⅲ) 글리세라이드 ;
    및 선택적으로는
    ⅳ) 레시틴 ;
    으로 구성되어 (ⅳ)가 존재하지 않는 경우 글리세라이드(ⅲ)가 약 5와 약 35 사이의 요오드 수치 및 20℃에서 약 75% 이상의 고형 지방 함량을 지님을 특징으로 하는 반응 혼합물로부터 40% 이상의 모노글리세라이드를 지닌 고형을 제조하기 위한 효소적 고형상 반응
  2. 제 1항에 있어서, (ⅳ)가 없는 경우 글리세라이드(ⅲ)가 약 5와 약 15 사이의 요오드 수치를 지님을 특징으로 하는 효소적 고형상 반응
  3. 상기한 어느 한 항에 있어서, 상기 글리세라이드는 트리글리세라이드임을 특징으로 하는 효소적 고형상 반응
  4. 제 1항 내지 제 3항에 있어서, 상기 글리세라이드는 다이글리세라이드임을 특징으로 하는 효소적 고형상 반응
  5. 제 3항 또는 제 4항에 있어서, 상기 글리세라이드는 야자유, 해바리기유, 평지씨유, 대두유, 홍화유, 목화씨유, 그라운드너트유, 옥수수유, 올리브유, 땅콩유, 라드, 탈로 또는 그의 혼합물로부터 유도됨을 특징으로 하는 효소적 고형상 반응
  6. 제 3항에 있어서, 상기 트리글리세라이드는 경화된 야자 스테아린임을 특징으로 하는 효소적 고형상 반응
  7. 상기한 어느 한 항에 있어서, 상기 레시틴은 식물 레시틴, 분말화된 레시틴, 합성 레시틴 또는 가수분해된 레시틴으로부터 선택됨을 특징으로 하는 효소적 고형상 반응
  8. 상기한 어느 한 항에 있어서, 상기 리파제는 슈도모나스종(Pseudomonassp.), 크로모박테리움 비스코숨(Chromobacterium viscosum), 슈도모나스 세파시아(Pseudomonas cepacia), 슈도모나스 스투체리(Pseudomonas stutzeri), 슈도모나스 플로우레센스(Pseudomonas flourescens), 뮤코 메이헤이(Mucor meihei) 또는 캔디다 안타티카(Candida antaritica)로부터 유도됨을 특징으로 하는 효소적 고형상 반응
  9. 상기한 어느 한 항에 있어서, 상기 레시틴은 약 1∼50 중량%의 양으로 존재함을 특징으로 하는 효소적 고형상 반응
  10. 상기한 어느 한 항에 있어서, 상기 글리세라이드는 약 1∼86 중량%의 양으로 존재함을 특징으로 하는 효소적 고형상 반응
  11. 상기한 어느 한 항에 있어서, 상기 글리세롤은 약 14∼25 중량%의 양으로 존재함을 특징으로 하는 효소적 고형상 반응
  12. 상기한 어느 한 항에 있어서, 상기 반응 혼합물은 뒤이어 스프레이 결정화됨을 특징으로 하는 효소적 고형상 반응
  13. 상기한 어느 한 항에 있어서, 상기 모노글리세라이드는 -10℃와 50℃ 사이의 온도에서 형성됨을 특징으로 하는 효소적 고형상 반응
  14. ⅰ) 글리세라이드를 선택적으로는 레시틴으로 용해시켜 지방상을 형성하고 ;
    ⅱ) 상기 지방상을 글리세롤 내의 리파제 용액 내로 첨가시켜 글리세롤이 총 혼합물의 적어도 14 중량% 이상의 양으로 존재함을 특징으로 하고, 결과 혼합물을 교반시키고 ;
    ⅲ) 상기 혼합물을 균질화하고 ;
    ⅳ) 상기 혼합물을 상기 효소적 고형상 반응 혼합물을 형성하도록 처리하는
    것으로 구성된, 40% 이상의 모노글리세라이드를 지닌 고형을 제조하기 위한 효소적 고형상 반응 혼합물을 제조하기 위한 방법
  15. 제 14항에 있어서, 상기 효소적 고형상 반응 혼합물은 뒤이어 스프레이 결정화됨을 특징으로 하는 방법
  16. 제 14항에 있어서, 상기 효소적 고형상 반응 혼합물은 뒤이어 펠렛화되고, 박편화되거나 또는 압출되고, 선택적으로는 연마됨을 특징으로 하는 방법
  17. 제 1항 내지 제 13항의 어느 한 항의 고형상 반응으로부터 수득된 글리세롤분해 생성물로 구성된 식료품
  18. 식빵, 케이크, 단 반죽 생성물, 라이네이트된 반죽, 액체 배터(batter), 머핀, 도우넛, 비스킷, 크래커, 쿠키, 쵸코렛, 사탕, 캬라멜, 할라와(halawa), 껌, 무설탕 및 설탕이 가미된 껌, 풍선껌, 소프트 풍선껌, 츄잉껌, 푸딩, 샤페트, 냉동 유제품, 아이스크림, 아이스밀크, 커피크림, 거품크림, 커스타드크림, 우유음료 및 요구르트, 무스, 거품야채크림, 육류, 가공된 육류, 식용 오일, 지방, 탄산 또는 무탄산 거품 식품, 오일-인-워터(oil-in-water) 에멀젼, 워터-인-오일 에멀젼, 마가린, 쇼트닝, 스프레드, 저지방 및 극저지방 스프레드, 드레싱, 마요네즈, 딥(dip), 크림베이스소스, 크림베이스스프, 음료, 양념 에멀젼, 소스 및 마요네즈로부터 선택됨을 특징으로 하는 제 17항에 따른 식료품
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