KR20020067680A

KR20020067680A - 육모제

Info

Publication number: KR20020067680A
Application number: KR1020020008204A
Authority: KR
Inventors: 가미무라아야꼬; 다까하시도모야; 미무라다까시; 혼다신끼찌
Original assignee: 교와 핫꼬 고교 가부시끼가이샤
Priority date: 2001-02-16
Filing date: 2002-02-15
Publication date: 2002-08-23
Also published as: EP1252878A3; CA2371400A1; US6562803B2; EP1252878A2; US20020155085A1

Abstract

(과제) 포스파티딘산을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제를 제공하는 것.

(해결수단) 화학식 1 의 포스파티딘산을 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제를 제공한다.

[식 중, R¹은 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알킬, 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알케닐 또는 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알키닐을 나타낸다].

Description

육모제{HAIR-GROWING AGENT}

본 발명은 포스파티딘산을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제에 관한 것이다.

포스파티딘산을 함유하는 모발관련 화장료 또는 의약품에 관한 발명으로는 홀수 직쇄 탄소사슬의 지방산 잔기를 갖는 포스파티딘산, 즉 화학식 2 으로 표시되는 포스파티딘산을 함유하는 육모제가 알려져 있다 (일본 특허공보 소63-41363 호).

[식 중, R²및 R³은 지방족 탄화수소기를 나타내고, R²및 R³중 적어도 한쪽은 짝수의 탄소사슬길이를 갖는 직쇄식 지방족 탄화수소기이다]. 또한, 일본 공개특허공보 소61-7205 호에는, 2 개의 분지쇄 지방산 잔기를 갖는 포스파티딘산을 유효성분으로 하는 세포부활제가 기재되어 있다. 그러나, 짝수 직쇄 탄소사슬의 지방산 잔기만을 지방산 잔기로 갖고, 또한 글리세린 잔기의 2-위치에 아세틸기를 갖는 포스파티딘산을 함유하는 육모제는 알려져 있지 않다. 또, 홀수의 탄소 사슬 길이를 갖는 지방산과, 비오틴 또는 비타민B₁₂를 유효성분으로 하는 세포부활제가 알려져 있다 (일본 공개특허공보 소61-15809 호).

또, 육모제의 활성 성분으로 사용하는 것은 아니지만, 육모활성성분인 미녹시딜에 첨가되는 리포솜용 제제 기제로서 포스파티딘산이 사용되는 것이 알려져 있다 (US 5030442).

포스파티딘산을 함유하는 몇몇 인지질의 혼합물에 탈모억제효과가 있는 것 (WO 97/09989), 또 인지질 혼합물을 함유하는 육모제가 알려져 있다 (DE 3222016, DE4113346).

프로안트시아니딘을 함유하는 육모제가 WO96/00561 에 기재되어 있다. 또 토코페롤 [모(毛)의 의학, 283면(1987년), 분꼬도;헤어사이언스, 80페이지(1986년), 사단법인 일본모발과학협회], 판토텐산 및 비오틴 [프레그런스 저널, 95-103페이지 (1989년), 프레그런스 저널사], 및 프로테인키나아제 C 특이적 저해제 [Skin Pharmacology and Applied Skin Physiology,13, 133-142 (2000)] 가 각각 육모작용을 갖는 것이 알려져 있다. 그러나, 포스파티딘산과, 프로안트시아니딘, 토코페롤, 토코페롤 유도체, 판토텐산, 판토텐산 유도체, 프로테인키나아제 C 특이적 저해제 또는 약리학적으로 허용되는 그의 염, 및 비오틴으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 성분을 유효성분으로 하는 육모제에 대해서는 알려져 있지 않다.

본 발명의 목적은 포스파티딘산을 유효성분으로 하는 두발의 육모ㆍ발모효과가 우수한 육모제를 제공하고, 또 상기 포스파티딘산과, 프로안트시아니딘, 토코페롤, 토코페롤 유도체, 판토텐산, 판토텐산 유도체, 프로테인키나아제 C 특이적 저해제 또는 약리학적으로 허용되는 그의 염, 및 비오틴으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 성분을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제 등을 제공하는 것이다.

본 발명은 하기에 관한 것이다.

(1) 화학식 1 의 포스파티딘산을 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제:

[화학식 1]

(2) 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알킬기가 운데실, 트리데실, 펜타데실 또는 헵타데실이고, 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알케닐이 펜타데세닐 또는 헵타데세닐인 상기 (1) 기재의 육모제.

(3) 상기 (1) 또는 (2) 에 기재된 포스파티딘산과, 프로안트시아니딘, 토코페롤, 토코페롤 유도체, 판토텐산, 판토텐산 유도체, 프로테인키나아제 C 특이적 저해제 또는 약리학적으로 허용되는 그의 염, 및 비오틴으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 성분을 유효성분으로 함유하는 육모제.

(4) 프로안트시아니딘을 함유하는 것을 특징으로 하는 상기 (1) 또는 (2) 에 기재된 육모제.

(5) 프로안트시아니딘이 프로시아니딘 B-1, 프로시아니딘 B-2, 프로시아니딘 B-3, 프로시아니딘 C-1 및 프로시아니딘 C-2 로 구성되는 군에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상의 프로안트시아니딘인 상기 (4) 에 기재된 육모제.

(6) 토코페롤 또는 토코페롤 유도체를 함유하는 것을 특징으로 하는 상기 (1), (2), (4) 또는 (5) 중의 어느 하나에 기재된 육모제.

(7) 토코페롤 또는 토코페롤 유도체가 dl-α-토코페롤, d-α-토코페롤, 아세트산 dl-α-토코페롤, 아세트산 d-α-토코페롤 및 니코틴산 dl-α-토코페롤로 구성되는 군에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상의 토코페롤 또는 토코페롤 유도체인 상기 (6) 기재의 육모제.

(8) 판토텐산 또는 판토텐산 유도체를 함유하는 것을 특징으로 하는 상기 (1), (2) 또는 (4) ∼ (7) 중 어느 하나에 기재된 육모제.

(9) 판토텐산 또는 판토텐산 유도체가 판토텐산칼슘, 판토텐산나트륨, D-판토테닐알코올, DL-판토테닐알코올 및 판토테닐에틸에테르로 구성되는 군에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상의 판토텐산 또는 판토텐산 유도체인 상기 (8) 에 기재된육모제.

(10) 프로테인키나아제 C 특이적 저해제 또는 약리학적으로 허용되는 그의 염을 함유하는 것을 특징으로 하는 상기 (1), (2) 또는 (4) ∼ (9) 중 어느 하나에 기재된 육모제.

(11) 프로테인키나아제 C 특이적 저해제가 카르포스틴C, 헥사데실포스포콜린, 팔미토일-DL-카르니틴 및 폴리믹신B 에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상의 프로테인키나아제 C 저해제인 상기 (10) 기재의 육모제.

(12) 비오틴을 함유하는 것을 특징으로 하는 상기 (1), (2) 또는 (4) ∼ (11) 중 어느 하나에 기재된 육모제.

(13) 실질적으로 미녹시딜을 함유하지 않는 상기 (1) ∼ (12) 중 어느 하나에 기재된 육모제.

(발명의 실시형태)

화학식 1 의 각 기의 정의에 있어서, 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알킬로는 예컨대 탄소수 1 ∼ 23, 바람직하게는 7 ∼ 19 의, 보다 구체적으로는 메틸, 프로필, 펜틸, 헵틸, 노닐, 운데실, 트리데실, 펜타데실, 헵타데실, 노나데실, 헨에이코실, 트리코실 등을 들 수 있고, 보다 바람직하게는 운데실, 트리데실, 펜타데실 또는 헵타데실을 들 수 있다. 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알케닐로는 예컨대 탄소수 3 ∼ 23, 바람직하게는 7 ∼ 19 의, 보다 구체적으로는 알릴, 1-프로페닐, 2-펜테닐, 4-펜테닐, 펜타디에닐, 헵테닐, 노네닐, 운데세닐, 트리데세닐, 펜타데세닐, 헵타데세닐, 노나데세닐, 헨에이코세닐, 트리코세닐 등을 들 수 있고, 보다 바람직하게는 펜타데세닐 또는 헵타데세닐을 들 수 있다. 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알키닐로는 예컨대 탄소수 3 ∼ 23, 바람직하게는 7 ∼ 19 의, 보다 구체적으로는 프로피닐, 펜티닐, 헵티닐, 노닐, 운데시닐, 트리데시닐, 펜타데시닐, 헵타데시닐, 노나데시닐, 헨에이코시닐, 트리코시닐 등을 들 수 있다. 알케닐 및 알키닐에 있어서의 불포화결합의 개수 및 위치는 특별히 한정되지 않는다.

이들 포스파티딘산은 주로 화학합성에 의해 얻을 수 있다 [Journal of Biological Chemistry,189, 235-247 (1951) 참조]. 즉, 지방산을 글리세린의 1-위치에 도입한 후, 글리세린의 2-위치에 아세틸기를 도입, 글리세린의 3-위치를 인산화함으로써 얻을 수 있다. 각 합성 단계에서는 필요에 따라 보호기를 도입한다. 또한 인지질 유도체의 효소분해에 의해, 예컨대 포스파티딜콜린 유도체를 원료로 하는 경우, 포스포리파제 D 등의 효소를 사용하여 콜린과의 인산 결합을 가수분해함으로써, 목적으로 하는 포스파티딘산을 얻을 수도 있다 [참조: 오꾸야마 나오미, 지질의 생화학 (생화학실험강좌 3), 일본생화학회편, 289페이지(1974년), 도교카가꾸도진]. 그러나, 제조법은 이들에 한정되지 않고, 임의의 방법으로 수득되는 포스파티딘산을 본 발명에서 사용할 수 있다.

본 발명에 사용되는 프로안트시아니딘은 화학식 3 의 프라반-7-올 유도체 등을 구성단위로 하여 중합한 화합물군을 말한다:

[식 중, R⁴및 R⁵는 상동이거나 또는 상이할 수 있으며, 수소원자 또는 수산기를 나타낸다].

프라반-7-올 유도체의 구체예로는 카테킨, 에피카테킨, 가로카테킨, 에피가로카테킨, 아프제레틴, 에피아프제레틴 등을 들 수 있고, 이들 광학이성체도 모두 포함되지만, 본 발명에서는 에피카테킨 또는 카테킨을 구성단위로 하는 프로안트시아니딘이 보다 바람직하게 사용된다.

화학식 3 으로 표시되는 프라반-7-올 유도체의 결합양식은 임의의 것이 포함되며, 프라반-7-올 유도체가 2 개 중합된 2 량체의 한 예로는 화학식 4 의 결합 양식을 가진 것이며, 3 량체 이상의 중합체로는 상동이거나 또는 상이한 결합 양식들이 조합된 양식일 수 있다:

[식 중, R⁶및 R⁷그리고 R^6a및 R^7a는 각각 상기 R⁴및 R⁵와 동일한 의미이다].

본 발명에 사용되는 프로안트시아니딘은 프라반-7-올 유도체의 2 량체 이상이면 되지만, 바람직하게는 2 ∼ 10 량체, 보다 바람직하게는 2 ∼ 5 량체, 보다 더 바람직하게는 2 ∼ 3 량체이다. 프라반-7-올 유도체의 2 량체로서는, 예컨대 에피카테킨-(4β→8)-카테킨 등과 같은 에피카테킨과 카테킨의 결합체, 에피카테킨-(4β→8)-에피카테킨 등과 같은 에피카테킨의 2 량체, 카테킨(4α→8)-카테킨 등과 같은 카테킨의 2 량체 등을 들 수 있고, 프라반-7-올 유도체의 3 량체로서는, 예컨대 에피카테킨-(4β→8)-에피카테킨-(4β→8)-에피카테킨 등과 같은 에피카테킨의 3 량체, 카테킨-(4α→8)-카테킨-(4α→8)-카테킨 등과 같은 카테킨의 3 량체, 에피카테킨-(4β→8)-에피카테킨-(4β→8)-카테킨 등과 같은 에피카테킨과 카테킨의 혼합 3 량체 등을 들 수 있다.

또, 이들 프로안트시아니딘에 몰식자산이나 글루코스, 람노스 등의 당류가부가된 화합물도 본 발명에 사용되는 프로안트시아니딘에 포함된다.

프로안트시아니딘은, 포도속, 사과속, 대맥속, 감속, 야자나무속, 카카오속, 소나무속, 강낭콩속, 낙화생속, 등에 속하는 포도, 사과, 대맥, 감, 야자, 카카오, 소나무, 팥, 땅콩 등의 각종 식물로부터 추출정제하여 얻어지는 것 외, 화학합성에 의해서도 얻을 수 있다.

예컨대, 프로안트시아니딘의 식물로부터의 추출정제는 다음과 같은 공지된 방법으로 실시할 수 있다.

원료인 식물의 과실, 종자, 잎, 줄기, 뿌리, 뿌리줄기 등을 적당한 시기에 채취한 후, 그대로 또는 통상 공기건조 등의 건조공정을 실시하여 추출원료로 한다. 건조된 식물체로부터 프로안트시아니딘의 추출을 실시하는 경우는, 공지된 방법[Chemical & Pharmaceutical Bulletin,3, 3218(1990) 및 동,40, 889-898(1992)] 에 준하여 실시할 수 있다.

즉, 원료를 분쇄하거나 또는 가늘게 절단한 후, 용매를 사용하여 추출을 실시한다. 추출용매로서는, 물, 에탄올, 메탄올, 이소프로필알콜 등의 알콜류, 아세톤, 메틸에틸케톤 등의 케톤류, 아세트산메틸, 아세트산에틸 등의 에스테르류 등의 친수성 또는 친유성 용매를, 단독으로 또는 혼합용매로 이용할 수 있다. 추출온도는 통상 0 ∼ 100℃, 바람직하게는 5 ∼ 50℃ 이다. 추출시간은 1 시간 ∼ 10 일간 정도이고, 용매량은 건조원료에 대해 통상 1 ∼ 30 배 중량, 바람직하게는 5 ∼ 10 배 중량이다. 추출조작은 교반 또는 침지방치에 의해 실시하고, 필요에 따라 2 ∼ 3 회 반복한다.

상기 조작으로 수득한 조추출액으로부터 불용성 잔사를 여과 또는 원심분리에 의해 제거한 추출액, 또는 식물의 착즙액이나 수액으로부터의 프로안트시아니딘의 정제방법은, 공지된 임의의 분리정제방법일 수 있지만, 2상 용매분배법, 컬럼 크로마토그래피법, 분취 고속액체 크로마토그래피법 등을 단독으로 또는 조합하여 사용하는 것이 바람직하다. 예컨대 2상 용매분배법으로는, 상기 추출액으로부터 유용성 성분이나 색소를 n-헥산, 석유에테르 등에 의해 추출제거하는 방법, 이 추출액으로부터 n-부탄올, 메틸에틸케톤 등의 용매와 물의 분배에 의해, 용매상으로 프로안트시아니딘을 회수하는 방법 등을 들 수 있다. 컬럼 크로마토그래피법으로서는 순상계 실리카겔을 사용하는 방법, 역상계 실리카겔을 사용하는 방법, 담체로서 다이아이온 HP-20, 세파비즈 SP-207 등을 사용하는 흡착 컬럼 크로마토그래피법, 담체로서 세파덱스 LH-20 등을 사용하는 겔여과법 등을 들 수 있고, 이들을 단독으로 또는 조합하여 사용하고, 반복하여 사용할 수도 있다. 분취 고속액체 크로마토그래피법으로서는, 옥타데실실리카 등을 사용하는 역상계의 컬럼을 사용하는 방법, 실리카겔 등을 사용하는 순상계의 컬럼을 사용하는 방법 등을 들 수 있다.

상기 정제방법에 의해, 상기 추출액으로부터 염류 등 수용성의 이온성 물질, 당류ㆍ다당류 등의 비이온성 물질, 유분, 색소 등을 제거하여 프로안트시아니딘을 정제할 수 있다.

또, 포도유래 프로안트시아니딘은 문헌[Acta Dermato Venereologica,78, 428-432(1998)]에 기재된 방법 또는 그 방법에 준하여, 프로시아니딘B-1[에피카테킨-(4β→8)-카테킨], 프로시아니딘B-2[에피카테킨-(4β→8)-에피카테킨], 프로시아니딘B-3[카테킨-(4α→8)-카테킨], 프로시아니딘C-1[에피카테킨-(4β→8)-에피카테킨-(4β→8)-에피카테킨] 및 프로시아니딘C-2[카테킨-(4α→8)-카테킨-(4α→8)-카테킨] 은 문헌[The Journal of Investigative Dermatology,112, 310-316 (1999)] 에 기재된 방법 또는 그 방법에 준하여 각각 추출정제할 수 있다.

프로안트시아니딘의 화학합성에 의한 제조는, 에피카테킨 또는 카테킨의 2 량체의 제조방법이 기재되어 있는 문헌[Journal of Chemical Society, Perkin Transaction I, 1535-1543(1983) 또는 Phytochemistry,25, 1209-1215 (1986)] 에 기재된 방법 또는 이들에 준한 방법에 의해 실시할 수 있다.

프로안트시아니딘을 본 발명의 유효성분으로 사용할 경우, 프로안트시아니딘은 1 종 또는 2 종 이상 혼합해도 되고, 구체적인 예로는, 포도종자유래 프로안트시아니딘, 사과유래 프로안트시아니딘, 대맥유래 프로안트시아니딘, 소나무유래 프로안트시아니딘, 정제프로시아니딘올리고머, 프로시아니딘 B-1, 프로시아니딘 B-2, 프로시아니딘 B-3, 프로시아니딘 C-1, 프로시아니딘 C-2 등에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상을 들 수 있고, 그 중에서도 프로시아니딘 B-1, 프로시아니딘 B-2, 프로시아니딘 B-3, 프로시아니딘 C-1 및 프로시아니딘 C-2 에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상이 바람직하게 사용된다.

본 발명에 사용되는 토코페롤 또는 토코페롤 유도체로서는, 예컨대 시판되고 있는 천연 유래품, 합성품 모두 사용할 수 있고, 또 아세트산에스테르나 니코틴산에스테르 등의 유도체를 사용할 수도 있다. 구체적으로는 dl-α-토코페롤, d-α-토코페롤, 아세트산 dl-α-토코페롤, 아세트산 d-α-토코페롤, 니코틴산 dl-α-토코페롤 등을 들 수 있다.

본 발명에 사용되는 판토텐산 또는 판토텐산 유도체로서는, 예컨대 시판되고 있는 천연 유래품, 합성품 모두 사용할 수 있고, 판토텐산 또는 판토텐산 유도체이면 어떤 것이라도 되고, 구체적으로는 판토텐산칼슘, 판토텐산나트륨, D-판토테닐알콜, DL-판토테닐알콜, 판토테닐에틸에테르 등을 들 수 있다.

본 발명에 사용되는 프로테인키나아제 C 특이적 저해제로서는, 프로테인키나아제 C 를 특이적으로 저해하는 임의의 것을 사용할 수 있는데, 바람직하게는 프로테인키나아제 C (PKC) 저해활성과 프로테인키나아제A (PKA) 저해활성을 이하에 나타내는 PKC 저해활성 측정법 및 PKA 저해활성 측정법으로 측정했을 때, PKA 의 50% 저해정수 (이하, PKA-IC₅₀으로 약기함) 및 PKC 의 50% 저해정수 (이하, PKC-IC₅₀으로 약기함) 의 비 (이하, PKA-IC₅₀/PKC-IC₅₀으로 약기함) 가 3 이상, 바람직하게는 3 ∼ 10⁹, 보다 바람직하게는 10 ∼ 10⁹인 프로테인키나아제 저해제가 사용된다. 구체적으로는 카르포스틴 C, 헥사데실포스포콜린, 팔미토일-DL-카르니틴 및 폴리믹신 B 또는 이들의 약리학적으로 허용되는 염 등에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상을 들 수 있다.

약리학적으로 허용되는 이들의 염으로서는, 염산염, 브롬화수소산염, 황산염, 질산염, 포름산염, 아세트산염, 벤조산염, 말레산염, 푸말산염, 숙신산염, 타르타르산염, 시트르산염, 옥살산염, 메탄술폰산염, 톨루엔술폰산염, 아스파라긴산염, 글루타민산염 등을 들 수 있다.

PKC 저해활성 측정법 및 PKA 저해활성 측정법에 대해 이하에 나타낸다.

(1) PKC 저해활성 측정법

PKC 저해활성의 측정은, 요시카와 등의 방법 [Journal of Biological Chemistry,257, 13341(1982)] 에 준하여 실시할 수 있다.

2.5 μ㏖ 아세트산마그네슘, 50 ㎍ 히스톤 타입 ⅢS (시그마사 제조), 20 ㎍ 포스파티딜세린, 0.8 ㎍ 다이올레인, 25 n㏖ 염화칼슘, 5 ㎍ 조효소 (요시카와 등의 방법으로 래트의 뇌로부터 부분정제한 것) 및 5 μ㏖ 트리스염산 완충액 (pH 7.5) 을 함유하는 250 ㎕ 수용액에 검체를 함유하는 상기 수용액 (10 ㎕) 을 첨가하여, 30℃ 에서 3 분간 인큐베이트한다. 인큐베이트 후, 1.25 n㏖ [γ-³²P] ATP (5 ∼ 10 ×10³cpm/n㏖) 를 첨가하여, 30℃ 에서 3 분간 인산화반응을 실시하고, 25% 트리클로로아세트산을 첨가하여 반응을 정지시킨다. 이 반응액을 아세트산셀룰로스막 (포어 사이즈 0.45 ㎛) (토요로시사 제조) 으로 여과하고, 5% 트리클로로아세트산으로 4 회 세정 후, 이 막 위에 잔류하는 방사 활성을 측정하여 검체값으로 한다. 또, 상기 조작을 검체를 첨가하지 않고 실시하고, 방사활성을 측정하여 대조값으로 한다.

대조값에 대해, 50% 의 검체값을 나타낼 때의 검체의 몰농도를 PKC 의 50% 저해정수 (PKC-IC₅₀) 로 한다.

(2) PKA 저해활성 측정법

PKA 저해활성의 측정은, 쿠오 (Kuo) 등의 방법[Biochemistry,64, 1349(1969)] 에 준하여 실시할 수 있다.

5 μ㏖ 트리스염산 완충액 (pH 6.8), 2.5 μ㏖ 의 아세트산마그네슘, 100 ㎍ 히스톤 타입 ⅡS (시그마사 제조), 0.25 n㏖ c-AMP 및 200 ㎍ 조효소 [쿠오 (Kuo) 등의 방법으로 송아지의 심장으로부터 부분정제한 것] 를 함유하는 250 ㎕ 의 수용액에 검체를 함유하는 상기 수용액 (10 ㎕) 을 첨가하여, 30℃ 에서 3 분간 인큐베이트한다. 인큐베이트 후, 1.25 n㏖ [γ-³²P] ATP (5 ∼ 10 ×10³cpm/n㏖) 를 첨가하여, 30℃ 에서 3 분간 인산화반응을 실시하고, 25% 트리클로로아세트산을 첨가하여 반응을 정지시킨다. 이 반응액을 아세트산셀룰로스막 (포어 사이즈 0.45 ㎛) (토요로시사 제조) 으로 여과하고, 5% 트리클로로아세트산으로 4 회 세정 후, 이 막 위에 잔류하는 방사 활성을 측정하여 검체값으로 한다. 또, 상기 조작을 검체를 첨가하지 않고 실시하고, 방사 활성을 측정하여 대조값으로 한다.

대조값에 대해, 50% 의 검체값을 나타낼 때의 검체의 몰농도를 PKA 의 50% 저해정수 (PKA-IC₅₀) 로 한다.

본 발명에 사용되는 비오틴으로서는, 예컨대 시판되고 있는 천연 유래품, 합성품 모두 사용할 수 있고, D-비오틴이 바람직하다.

본 발명의 육모제의 제형으로서는, 포스파티딘산, 또는 이 포스파티딘산과, 프로안트시아니딘, 토코페롤, 토코페롤 유도체, 판토텐산, 판토텐산 유도체, 프로테인키나아제 C 특이적 저해제 또는 약리학적으로 허용되는 그의 염, 및 비오틴으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 성분을 배합할 수 있는 임의의 제형을 사용할 수 있다. 예컨대, 적당한 의약 기제와 배합하여 액상 또는 고형상의 육모제로 사용할 수 있다.

액상 또는 고형상의 육모제형으로서는, 헤어 리퀴드, 헤어 토닉, 헤어 로션 등의 액상 제형, 연고, 헤어크림 등의 고형상 제형을 들 수 있고, 각각 바람직한 기제에 본 발명에 사용되는 포스파티딘산, 또는 이 포스파티딘산과, 프로안트시아니딘, 토코페롤, 토코페롤 유도체, 판토텐산, 판토텐산 유도체, 프로테인키나아제 C 특이적 저해제 또는 약리학적으로 허용되는 그의 염, 및 비오틴으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 성분을 첨가하여, 통상적인 방법으로 제조할 수 있다.

본 발명의 육모제 중의 포스파티딘산의 함유량은 포스파티딘산의 종류나 물성에 유래하는 경피 흡수성에 따라 크게 다른데, 단독 또는 혼합물로서 통상 0.01 ∼ 5.0 중량% (이하, 간단하게 % 라고 함), 바람직하게는 0.01 ∼ 3.0%, 보다 바람직하게는 0.1 ∼ 1.0% 이다. 프로안트시아니딘의 함유량은 정제도에 따라 다른데, 통상 0.01 ∼ 10.0%, 바람직하게는 0.1 ∼ 5.0%, 보다 바람직하게는 0.3 ∼ 2.0% 이다. 토코페롤 또는 토코페롤 유도체의 함유량은 통상 0.01 ∼ 2%, 바람직하게는 0.05 ∼ 2%, 보다 바람직하게는 0.05 ∼ 1% 이다. 판토텐산 또는 판토텐산 유도체의 함유량은 통상 0.01 ∼ 2%, 바람직하게는 0.05 ∼ 1%, 보다 바람직하게는 0.1 ∼ 0.5% 이다. 프로테인키나아제 C 저해제 또는 약리학적으로 허용되는 그의 염의 함유량은 저해활성의 강도나 물성에 유래하는 경피 흡수성에 따라 크게 다른데, 단독으로 또는 혼합물로서 통상 0.00001 ∼ 1%, 바람직하게는0.0001 ∼ 1%, 보다 바람직하게는 0.001 ∼ 0.1% 이다. 비오틴의 함유량은 통상 0.0001 ∼ 0.1%, 바람직하게는 0.001 ∼ 0.1%, 보다 바람직하게는 0.001 ∼ 0.05% 이다.

액상 제형에 바람직한 기제로서는, 육모제에 통상 사용되고 있는 것, 예컨대 정제수, 에틸알콜, 다가알콜류 등을 들 수 있고, 필요에 따라 첨가제를 첨가해도 된다.

다가 알콜로서는, 글리세롤, 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 등을 들 수 있다.

첨가제로서는, 계면활성제, 비타민류, 소염제, 살균제, 호르몬제, 생약 엑기스, 팅크류, 청량제, 보습제, 산화방지제, 금속이온 봉쇄제, 향료 등을 들 수 있다.

계면활성제로서는, 폴리옥시에틸렌(60)경화피마자유, 폴리옥시에틸렌(8)올레일에테르, 폴리옥시에틸렌(10)올레일에테르, 모노올레인산폴리옥시에틸렌(10), 폴리옥시에틸렌(30)글리세릴모노스테아레이트, 모노스테아린산솔비탄, 모노스테아린산폴리옥시에틸렌 (30)글리세릴, 모노올레인산폴리옥시에틸렌(20)솔비탄, 자당지방산에스테르, 모노올레인산헥사글리세린, 모노라우린산헥사글리세린, 폴리옥시에틸렌환원라놀린, 폴리옥시에틸렌(20)라놀린알콜, 폴리옥시에틸렌(25)글리세릴피로글루타민산이소스테아린산디에스테르, N-아세틸글루타민이소스테아릴에스테르 등을 들 수 있다.

비타민류로서는, 니코틴산벤질, 니코틴산아미드, 염산피리독신, 리보플라빈등을 들 수 있다.

소염제로서는, 글리틸리틴산디칼륨, β-글리틸레틴산, 알란토인, 염산디펜히드라민, 구아이아줄렌, l-멘톨 등을 들 수 있다.

살균제로서는, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 히노키티올, 트리클로산, 클로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레졸신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리실산, 진크피리티온, 염화벤잘코늄, 감광소301호, 모노니트로과이어콜나트륨 등을 들 수 있다.

호르몬제로서는, 에티닐에스트라디올, 에스트론, 에스트라디올 등을 들 수 있다.

생약 엑기스로서는, 월년초 엑기스, 마늘 엑기스, 당근 엑기스, 알로에 엑기스, 키나 엑기스, 동충하초 엑기스, 사프란 엑기스 등을 들 수 있다.

팅크류로서는, 고추 팅크, 생강 팅크, 칸타리스 팅크 등을 들 수 있다

청량제로서는, 고추 팅크, 1-멘톨, 캠퍼 등을 들 수 있다.

보습제로서는, L-피롤리돈카르복실산, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 등을 들 수 있다.

산화방지제로서는, 부틸히드록시아니솔, 이소프로필갈레이트, 몰식자산프로필, 에리소르빈산 등을 들 수 있다.

금속이온 봉쇄제로서는, 에틸렌디아민테트라아세테이트 또는 그 염 등을 들 수 있다.

향료로서는, 오렌지유, 레몬유, 베르가모트유, 라임유, 레몬 그래스유, 라벤더유 등과 같은 천연향료 및 멘톨, 로즈 옥사이드, 리나로올, 시트랄, 아세트산리나릴 등과 같은 합성향료를 들 수 있다.

상기 액상 제형을 분무제로서 사용할 때에는 가연 가스, 불연 가스 등을 사용할 수 있다. 가연 가스로서는 LPG (액화 석유 가스), 디메틸에테르 등을 들 수 있고, 불연 가스로서는 질소 가스, 탄산 가스 등을 들 수 있다.

고체상 제형의 기제로서는, 바세린, 고형 파라핀, 식물유, 광물유, 라놀린, 납류, 매크로골 등을 들 수 있고, 필요에 따라 상기 첨가제, 에틸알콜, 이소프로필알콜 등과 같은 저급 알콜 등을 첨가할 수도 있다.

본 발명의 육모제의 투여량은 연령, 체중, 증상, 치료효과, 투여방법, 처리시간 등에 따라 다르지만, 성인 1 인당 1 회에 포스파티딘산으로서 0.1∼250 ㎎, 바람직하게는 1∼100 ㎎ 이 1 일 1 회 내지 수 회, 경피 투여된다.

다음에 실시예에 따라 본 발명을 상세하게 설명한다.

실시예

실시예 1 : 조성물 1 및 조성물 2 의 제조

1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산0.4%

에틸알콜70%

1,3-부틸렌글리콜3%

N-아세틸글루타민이소스테아릴에스테르0.25%

폴리옥시에틸렌(25)글리세릴피로글루타민산이소스테아린산디에스테르

0.25%

상기 혼합물에 정제수를 첨가하여 100% 로 하고, 이것을 교반하면서 균일하게 하여 조성물 1 을 조제한다.

상기 조성물에서 1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산 대신에 정제수를 첨가하여 조성물 2 를 조제한다.

실시예 2 : 조성물 3 및 조성물 4 의 제조

1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산0.4%

프로시아니딘 B-21%

에틸알콜70%

1,3-부틸렌글리콜3%

N-아세틸글루타민이소스테아릴에스테르0.25%

0.25%

프로시아니딘 B-2 는 문헌[The Journal of Investigative Dermatology,112, 310-316 (1999)] 에 기재된 방법에 따라 제조한다.

상기 혼합물에 정제수를 첨가하여 100% 로 하고, 이것을 교반하면서 균일하게 하여 조성물 3 을 조제한다.

상기 조성물에서 1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산 대신에 정제수를 첨가하여 조성물 4 를 조제한다.

실시예 3 : 조성물 5 및 조성물 6 의 제조

1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산0.4%

dl-α-토코페롤1.0%

에틸알콜70%

1,3-부틸렌글리콜3%

N-아세틸글루타민이소스테아릴에스테르0.25%

0.25%

상기 혼합물에 정제수를 첨가하여 100% 로 하고, 이것을 교반하면서 균일하게 하여 조성물 5 를 조제한다.

상기 조성물에서 1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산 대신에 정제수를 첨가하여 조성물 6 을 조제한다.

실시예 4 : 조성물 7 및 조성물 8 의 제조

1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산0.4%

판토테닐에틸에테르0.3%

에틸알콜70%

1,3-부틸렌글리콜3%

N-아세틸글루타민이소스테아릴에스테르0.25%

0.25%

상기 혼합물에 정제수를 첨가하여 100% 로 하고, 이것을 교반하면서 균일하게 하여 조성물 7 을 조제한다.

상기 조성물에서 1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산 대신에 정제수를 첨가하여 조성물 8 을 조제한다.

실시예 5 : 조성물 9 및 조성물 10 의 제조

1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산0.4%

비오틴0.05%

에틸알콜70%

1,3-부틸렌글리콜3%

N-아세틸글루타민이소스테아릴에스테르0.25%

0.25%

상기 혼합물에 정제수를 첨가하여 100% 로 하고, 이것을 교반하면서 균일하게 하여 조성물 9 를 조제한다.

상기 조성물에서 1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산 대신에 정제수를 첨가하여 조성물 10 을 조제한다.

참고예 1 : 1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산 (1-O-올레오일-2-O-아세틸포스파티딘산) 의 합성

1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산의 합성은 문헌[Journal of Medicinal Chemistry, 2038-2044 (1986)]에 기재된 방법 또는 이에 준한 방법으로 실시할 수 있다. 1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세롤 (후나코시사 제조) (20.0 ㎎) 의 클로로포름 (8.0 ㎖) 용액을, 옥시염화인 700 ㎕, 트리에틸아민 1000 ㎕ 및헥산 50 ㎖ 의 혼합용액에 실온 하에서 교반하면서 적가한다. 15 시간 교반한 후, 정제수 10 ㎖ 를 첨가하고 다시 실온 하에서 1 시간 교반한다. 유기층을 취득하며, 실리카겔 박층 크로마토그래피 플레이트를 사용하여 클로로포름 : 메탄올 : 아세트산 : 물 = 170 : 25 : 25 : 6 의 이동상으로 전개한 후, 목적물을 포함한 밴드를 수득한다. 이 실리카겔분에 디에틸에테르를 첨가하여 유기층을 취득한다. 다시 이 유기층을 감압 하에서 농축시켜 1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산 55 ㎎ 을 얻는다.

다음으로 본 발명의 육모제 작용에 대해서 시험예로 구체적으로 나타낸다.

시험예 1 : 마우스 모포 상피세포 배양에 대한 촉진효과

모포 상피세포의 분리 및 배양은 Tanigaki 등의 방법 [Archives of Dermatological Research,284, 290-296 (1992)] 을 개변하여 실시한다.

즉, 생후 4 일된 C3H 마우스 (닛뽕 찰슬리버) 의 등부분 피부를 채취하여 500 단위/㎖ 의 디스파제 (고오도 슈세이) 및 5% 소 태아 혈청 (FCS) 을 함유한 MEM 배지 (Eagle's Minimum Essential Medium) 에서 4℃, 16 시간 처리한다.

얻어진 피부 절편에서 피부를 박리하고, 진피층을 0.25% 콜라게나제 N-2 (닛따 젤라틴) 및 10% FCS 를 함유한 DMEM 배지 (Dulbecco's modified Eagle Medium) 에서 37℃, 1시간 처리하여 진피 현탁액을 얻는다. 진피 현탁액을 212 미크론의 나이론 메시 (닛뽕 리카가꾸 키까이) 로 여과한 후, 여과액을 1000rpm 으로 5분간 원심분리하여 모포 조직을 함유한 펠릿을 얻는다. 펠릿에 칼슘 마그네슘 프리 PBS (Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline) 용액을 첨가하여 피펫으로 현탁한후, 15 분간 정치함으로써 모포 조직을 침강시킨다. 얻은 모포 조직을 사용하여 상기 펠릿에서 수행한, 칼슘 마그네슘 프리 PBS 용액의 첨가, 피펫에 의한 현탁, 15 분간 정치, 침강조작과 동일한 조작을 3 회 반복한다.

얻어진 모포 조직에 0.1% 에틸렌디아민4아세트산 (EDTA)-0.25% 트립신 (기부코사 제조) 을 첨가하여 37℃ 에서 5 분간 처리한 후, 10% FCS 를 함유한 DMEM 배지를 첨가하여 3 ×10⁵/㎖ 의 세포 농도의 모포 조직 세포액을 조제한다. 모포 조직 세포액을 24 웰 콜라겐코트 플레이트 (이와끼 글래스사 제조) 에 1㎖/웰씩 파종하여 37℃, 5% CO₂하에서 24 시간 배양한다.

배양 후 MCDB153 배지 (교꾸또 세이야꾸사 제조) 에 소 인슐린 (시그마사 제조) 5 ㎎/L; 마우스 상피 증식인자 (EGF) (다까라 슈조사 제조) 5 ㎍/L; 소 하수체 추출물 (교꾸또 세이야꾸사 제조) 40 ㎎/L; 인체 트랜스페린 (시그마사 제조) 10 ㎎/L; 하이드로코티존 (시그마사 제조) 0.4 ㎎/L; 프로게스테론 (코라보라티브 리서치사 제조) 0.63 ㎍/L; O-포스포에탄올아민 (시그마사 제조) 14 ㎎/L; 에탄올아민 (시그마사 제조) 6.1 ㎎/L; 페니실린 (와꼬오사 제조) 50 U/㎖; 스트렙토마이신 (와꼬오사 제조) 50 ㎍/㎖; 참고예 1 에서 얻은 1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산, 및/또는 프로시아니딘 B-2 또는 dl-α-토코페롤을 함유한 DMSO 용액 (1/100 체적 첨가함) 을 첨가한 배지로 배지 교환하고, 다시 37℃, 5% CO₂존재하에서 5 일간 배양한다. 또한, 배지는 하루 간격으로 교환한다.

또, 상기 배지에서 1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산, 및/또는 프로시아니딘 B-2 또는 dl-α-토코페롤을 함유한 DMSO 용액 대신에 DMSO 만을 1/100 체적량 첨가한 배지에서 배양한 것을 대조군으로 한다.

세포증식도의 측정은 MTT [3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸륨 브로미드] 를 사용한 방법으로 실시한다 [실험의약 별책, 바이오매뉴얼 UP 시리즈 분자생물학 연구를 위한 배양세포실험법, p. 89-92, 요오도사 (1995)].

24 웰 마이크로 플레이트 (2 ㎠/웰) 의 각 웰에, 배양액 1 ㎖ 에 대하여 1/10 체적의 MTT 의 PBS 용액 (5 ㎎/㎖) 을 첨가하여 흔들어서 균일하게 하고, 37℃, 5% CO₂존재 하에서 4 시간 배양한다. 4 시간 후 배양액을 흡인하고 각각의 플레이트에 1 ㎖ 의 0.04 mol/L HCl 이소프로필알콜 용액을 첨가하여 웰 안에 생성된 포르마잔이 완전히 녹을 때까지 혼화한다.

650 ㎚ 를 대조로 하고 570 ㎚ 에서의 흡광도를 측정하여 세포의 증식도를 측정한다.

본 발명의 화합물의 증식촉진활성을 표 1 에 나타낸다.

시험군	유효성분 (농도)	대조군의 증식을 100 으로 하였을 때의 상대 증식도
1	1-O-올레오일-2-O-아세틸글리세릴-3-인산 (1μmol/L)	327
2	프로시아니딘B-2 (30μmol/L)	295
3	dl-α-토코페롤 (30μmol/L)	178
4	시험군1+프로시아니딘B-2 (30μmol/L)	368
5	시험군1+dl-α-토코페롤 (30μmol/L)	351

표 1 에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 포스파티딘산은 현저한 마우스 모포 상피세포 증식촉진활성을 나타낸다. 또한, 프로안트시아니딘, 토코페롤 각각의 마우스 모포 상피세포 증식촉진활성은 상기 포스파티딘산과 혼합함으로써 증강된다.

시험예 2 : 마우스의 발모에 대한 효과

오가와 등의 방법 [The Journal of Dermatology,10, 45-54 (1983)] 을 참고로 마우스를 이용한 발모 효과를 시험한다.

털 주기의 휴지기에 있는 생후 9 주된 C3H/HeSlc 수컷 마우스 (1군 4∼5 마리) 의 등부분 털을 전기 이발기와 전기 면도기로 제거해 실시예 1 내지 5 에서 제조된 조성물 1 내지 10 를 하루에 1 회, 제모 부분에 200 ㎕ 씩 균일하게 도포한다. 또, 조성물 2 를 대조군으로 한다.

시험 도포 개시 18 일 후, 마우스의 등부분 피부를 채취하여 사진 촬영한 후, 화상해석 처리장치 (아비오닉스사 제조, 스피카Ⅱ) 를 이용하여 등부분의 피부 전체면적에 대한 발모부의 100 분율을 구하고, 피검약제군의 발모율의 값에서 대조군의 발모율의 값을 뺀 값을 증가 발모 면적율 (%) 로 한다.

결과를 표 2 에 나타낸다.

조성물	증가 발모 면적율 (%)
2 (대조군)	0
1	52
3	65
4	45
5	66
6	40
7	58
8	16
9	59
10	11

표 2 에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 포스파티딘산을 함유한 육모제에서는 현저한 마우스의 발모 촉진효과가 있음을 알 수 있다. 또한, 프로안트시아니딘,토코페롤, 판토텐산 유도체, 비오틴 각각의 발모 촉진효과는 포스파티딘산을 혼합함으로써 증강된다.

본 발명에 따르면, 1-위치의 지방산 잔기 부분이 짝수 직쇄의 탄소사슬의 지방산 잔기로 구성되고, 2-위치가 아세틸기인 포스파티딘산을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 두발의 육모ㆍ발모효과가 우수한 육모제, 또한 상기 포스파티딘산과 프로안트시아니딘, 토코페롤, 토코페롤 유도체, 판토텐산, 판토텐산 유도체, 프로테인키나아제 C 특이적 저해제 또는 약리학적으로 허용되는 그의 염 및 비오틴으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 성분을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제를 제공할 수 있다.

Claims

화학식 1 의 포스파티딘산을 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제:

[화학식 1]

[식 중, R¹은 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알킬, 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알케닐 또는 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알키닐을 나타낸다].
제 1 항에 있어서, 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알킬기가 운데실, 트리데실, 펜타데실 또는 헵타데실이고, 홀수 직쇄의 탄소사슬의 알케닐이 펜타데세닐 또는 헵타데세닐인 육모제.
제 1 항 또는 제 2 항에 기재된 포스파티딘산과, 프로안트시아니딘, 토코페롤, 토코페롤 유도체, 판토텐산, 판토텐산 유도체, 프로테인키나아제 C 특이적 저해제 또는 약리학적으로 허용되는 그의 염, 및 비오틴으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상의 성분을 유효성분으로 함유하는 육모제.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 프로안트시아니딘을 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제.
제 4 항에 있어서, 프로안트시아니딘이 프로시아니딘 B-1, 프로시아니딘 B-2, 프로시아니딘 B-3, 프로시아니딘 C-1 및 프로시아니딘 C-2 로 구성되는 군에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상의 프로안트시아니딘인 육모제.
제 1 항, 제 2 항, 제 4 항 또는 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서, 토코페롤 또는 토코페롤 유도체를 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제.
제 6 항에 있어서, 토코페롤 또는 토코페롤 유도체가 dl-α-토코페롤, d-α-토코페롤, 아세트산 dl-α-토코페롤, 아세트산 d-α-토코페롤 및 니코틴산 dl-α-토코페롤로 구성되는 군에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상의 토코페롤 또는 토코페롤 유도체인 육모제.
제 1 항, 제 2 항 또는 제 4 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, 판토텐산 또는 판토텐산 유도체를 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제.
제 8 항에 있어서, 판토텐산 또는 판토텐산 유도체가 판토텐산칼슘, 판토텐산나트륨, D-판토테닐알코올, DL-판토테닐알코올 및 판토테닐에틸에테르로 구성되는 군에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상의 판토텐산 또는 판토텐산 유도체인 육모제.
제 1 항, 제 2 항 또는 제 4 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서, 프로테인키나아제 C 특이적 저해제 또는 약리학적으로 허용되는 그의 염을 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제.
제 10 항에 있어서, 프로테인키나아제 C 특이적 저해제가 카르포스틴C, 헥사데실포스포콜린, 팔미토일-DL-카르니틴 및 폴리믹신B 에서 선택되는 1 종 또는 2 종 이상의 프로테인키나아제 C 저해제인 육모제.
제 1 항, 제 2 항 또는 제 4 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서, 비오틴을 함유하는 것을 특징으로 하는 육모제.
제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서, 실질적으로 미녹시딜을 함유하지 않는 육모제.