KR20010072146A

KR20010072146A - 카르니틴 및 카로티노이드를 포함하는 산화 방지성 증식억제 조성물

Info

Publication number: KR20010072146A
Application number: KR1020017001339A
Authority: KR
Inventors: 카바쟈클라우디오
Original assignee: 피에트로 폴라; 시그마-타우 헬스사이언스 에스.피.에이
Priority date: 1998-08-03
Filing date: 1999-07-29
Publication date: 2001-07-31
Also published as: AR021172A1; AU5064199A; HK1039062A1; JP2002522382A; SK1252001A3; TR200100333T2; CA2338035A1; NO20010532L; CN1311674A; HUP0102807A2; IS5816A; MA26666A1; ITRM980516A0; WO2000007581A2; IT1302125B1; EE200100052A; NO20010532D0; TNSN99152A1; IL140797A0; ITRM980516A1

Abstract

유리 라디칼 및 지질 과산화 현상에 의해 유발된 다양한 변화 및 병리학적 상태들의 예방 및/또는 치료를 위한, 특징적인 유효 성분으로서 프로피오닐 L-카르니틴 및 하나 이상의 카로티노이드, 전형적으로는 토마토로부터 추출된 라이코펜을 포함하는 조성물이 개시되어 있으며, 상기 조성물은 식이성 보충식, 식이성 지지체 또는 실제적인 의약품의 형태를 취할 수 있다.

Description

카르니틴 및 카로티노이드를 포함하는 산화 방지성 증식 억제 조성물{Antioxidant, antiproliferous composition, comprising a carnitine and a carotenoid}

카로티노이드는 이중 결합들의 공액 시스템을 갖는 탄소수 40 이하의 테르펜 성질(테트라테르펜)의 장쇄 식물성 안료 그룹이다. 카로티노이드는 고등 식물, 엽록체, 및 클로로필이 없는 식물(일부 구근류 및 다수의 꽃 및 과일들, 예를 들어 토마토(익는 동안 클로로필이 증가한다))의 부분들에 배치된 색소체에 존재하며; 또한 녹조류, 일부 광합성 세균 및 일부 진균에서 발견되기도 한다. 카로티노이드는 광합성에서 클로로필에 대해 상보적인 역할, 즉 약간의 광선을 흡수하고 그 에너지를 상기 클로로필 자체에 전달하는 역할을 한다.

600 개 이상의 카로티노이드가 식물계에 존재하지만, 이들 중 단지 40 개만이 인간의 음식물에 존재하며 단지 14 개만이 소화관에서 흡수되고, 나머지는 비-흡수성 에폭사이드들로 이루어진다. 이들 14 개 중에서 가장 통상적인 것은 라이코펜, α-카로틴, β-카로틴, 루테인, 제아산틴 및 β-크립토크산틴이다.

라이코펜에는 11 개의 선형으로 공액된 이중 결합이 존재하며(반면에 β-카로틴에는 9 개가 존재한다) 상기는 가장 긴 선형으로 공액된 이중 결합 쇄를 갖는 카로티노이드이다.

상기 특정한 구조와 산화방지제로서의 그의 보다 큰 효능간의 관계가 또한 특허 청구되어 있다.

라이코펜과 β-카로틴간에 대사적인 상호작용이 존재하지만, 라이코펜은 자신을 체내에서 β-카로틴(탄소 쇄의 2 개의 측쇄 상의 트리메틸사이클로헥사닐 고리를 특징으로 한다)으로 전환시킬 수 없다.

다른 한편으로, β-카로틴은 자체를 상기 쇄의 환원을 통해 트랜스-레티놀과 레티노산으로 전환시킬 수 있으며 프로비타민 A로서 작용할 수 있다.

이들 화합물은 상당한 산화방지 능력을 특징으로 하나, 이들 중에서도 라이코펜은 최대의 활성 산소(singlet oxygen) 차단 능력을 제공하는 것으로, 이는 예를 들어 β-카로틴의 능력보다 2 배 이상 크다.

라이코펜은 특히 지방의 존재 하에서 체내에서 흡수되며 혈액 및 조직에서 그의 2 개의 이성체 형태인 시스- 및 트랜스-라이코펜으로 발견된다.

모든 카로티노이드들처럼, 라이코펜도 체내에서 합성될 수 없으며, 오직 식품으로 섭취해야 한다.

다수의 식품들, 예를 들어 파파야, 핑크 그레이프푸르트, 시금치, 살구, 우유 및 달걀이 카로티노이드를 함유하나, 무엇보다도 토마토가 가장 많은 양의 라이코펜을 함유한다.

라이코펜이 흥미있는 것은, 그의 상당한 산화방지 능력 이외에, 레티놀로 전환될 필요없이 β-카로틴과 같이 프로비타민 A 작용을 갖는 카로니토이드 자체가 일부 형태의 종양들에 대해 보호 효과를 발휘할 수도 있음을 밝힌 다수의 전염병학 연구의 결과에 기인한다. 다수의 기대되는 연구 및 소급적인 연구들은 카로틴이 풍부한 채소 및 과일의 소비 또는 높은 혈장 카로틴 농도와 종양 위험성, 특히 폐암위험성간의 역 상관관계를 밝혔다. 이러한 결과는 단지 비타민 A의 전구체로서의 카로티노이드에 기인하였다. 그러나, 최근의 임상적인 시험들은 음식물과 함께 β-카로틴을 단독으로 취하면 상기 비타민이 없는 음식물을 섭취한 집단에 비해 종양 위험성에 있어서 이점을 제공하지 못함을 보였다.

동일한 부정적인 결과들이 흡연자 그룹 또는 석면증의 위험이 있는 개인들에게서 얻어졌다. 이들 데이터를 보다 철저히 분석한 결과 β-카로틴이외의 카로티노이드들이 다른 시험들에서 탐지된 보호 효과를 달성하는데 기여할 수 있는 것으로 밝혀졌다.

라이코펜을 특별하게 특징짓고 체내에서 발휘될 수 있는 유리한 생물학적 효과의 기초가 되는 것으로 여겨지는 것은 가장 현저하게는 활성 산소(유리 라디칼의 생성에서 가장 반응성인 산소 생성물들 중 하나)에 대한 그의 강력한 산화방지 작용이다. 라이코펜은 그의 활성 산소에 대한 작용 이외에 산소의 다른 반응성 종들, 예를 들어 과산화 수소 및 산화 질소로부터 세포 및 조직을 보호함에 있어서 또한 대단한 활성이 있다.

라이코펜의 이러한 특별한 활성들은 다른 모든 천연 산화방지제들 중에서 가장 두드러진 위치에 놓이는 것으로, 부분적으로 음식물과 함께 라이코펜을 섭취하여 발휘될 수 있는 유리한 건강-증진 효과들의 원인이 될 수 있다.

실제로, 심근 경색증을 앓고 있는 대상자들뿐만 아니라 높은 혈중 콜레스테롤 또는 트리글리세라이드 농도의 존재로 인해 잠재적으로 상기 질환의 위험이 있는 대상자들은 대조군에 비해 β-카로틴 및 특히 라이코펜 모두의 혈중 농도가 매우 낮게 존재하는 것으로 밝혀졌다. 이는 라이코펜에 의해 발휘된 지질과산화 방지 효과와 관련될 수도 있음이 또한 상기 라이코펜이 LDL 중에 존재하며 그의 산화를 방지할 수도 있음을 입증하는 연구로부터 분명해진다.

라이코펜의 지질과산화 방지 효과가 또한 세포 배양액(C3H/10T1/2 세포) 상에서 측정 시 종양성 전환을 방지하는 β- 및 α-카로틴의 효과보다 우수함이 확인되었다. 라이코펜의 지질과산화 방지 활성은 또한 그의 죽상경화증 및 죽상경화성 혈관 손상을 방지하는 능력, 및 또한 그의 IGF-억제 및 연접성 세포내 연통 향상 활성과 함께 종양 세포 증식을 방지하는 능력을 설명한다.

라이코펜은 래트에서 유방 종양의 자발적인 발병과, 백혈병 세포(H1-60 전골수구성 백혈병 세포 주)뿐만 아니라 생체외에서 래트 신경교종 C-6 세포의 성장 또는 화학 약제에 의해 유발된 종양 전환을 억제함에 있어서 가장 효능있는 카로티노이드이다.

전염병학 연구는 음식물과 함께 라이코펜을 섭취하는 것과 전립선 종양의 발병 위험성 간의, 상기 라이코펜을 상기의 특정 질병의 예방 수단으로 정의할 수 있을만큼의 역 상관관계를 입증하였다. 이는 유방 및 폐 종양의 위험성에 대해서도 사실이다.

루테인 및 제아산틴처럼 라이코펜이 예방 작용을 발휘할 수 있는 또 다른 질병은 망막의 노인성 황반변성(AMD)이다.

L-카르니틴 및 그의 알카노일 유도체는 대사 수준에서, 특히 산화 및 β-산화를 통한 지방산의 이용에 관해서 중요한 역할을 수행할 수 있는 것으로 잘 알려져 있다.

실제로, L-카르니틴은 음식물로 섭취하든지 또는 체내에서 합성되는지 간에 지방산의 이용에 있어서 대사적으로 가장 활성인 기관들, 예를 들어 골격 근 및 심장에서 혈액에 의해 농축된다.

L-카르니틴 결핍에 의해 근병증이 유발될 수도 있는 반면, L-카르니틴의 경구 투여는 이러한 근병증의 임상적인 상태를 개선시킨다. 글루코스의 미토콘드리아 산화에서도 역시 L-카르니틴은 에너지 생산에서 중요한 기능을 수행하여, 심장 및 근육 수준에서 정상적인 에너지 대사에 필요한 L-카르니틴의 적합한 수준을 생성시킨다.

그의 투여는 관상 동맥 부전을 앓고 있는 대상자의 침습 내성뿐만 아니라 관 혈류 자체 및 심기능 대상부전의 임상적인 영향들을 개선시킨다.

L-카르니틴 및 그의 유도체, 특히 프로피오닐 L-카르니틴의 다른 생물학적 성질로서 세포막을 안정화시키고 이를 산화 과정에 의해 유발된 병변에 대해 보호하는 능력이 있다.

본 발명은 환경 공해로 인한 유리 라디칼의 존재 및 죽상경화, 혈관, 심장 또는 대뇌 류의 지질과산화 현상에 의해 야기되는 질병; 전립선, 자궁, 유방 또는 결장 조직을 포함한 조직의 증식성 변화; 망막의 백내장 및 황반변성을 포함한 시력 및 망막의 변화의 예방 및/또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.

따라서, 상기 조성물은 지지 또는 예방 작용, 또는 엄격하게는 치료 작용에 따라 식이성 보충식 또는 실제적인 의약품의 형태를 취하고 그의 작용을 발휘할 수 있으며, 이때 상기 조성물은 상기가 사용되는 특정한 개인에 관하여 그 작용이 발휘되도록 되어 있다.

보다 특히, 본 발명은

(a) 프로피오닐 L-카르니틴 또는 그의 약리학적으로 허용가능한 염, 및 임의로 또 다른 "카르니틴"(여기에서 "카르니틴"이 의미하는 것은 L-카르니틴, 또는 아세틸 L-카르니틴, 발레릴 L-카르니틴 및 이소발레릴 L-카르니틴을 포함하는 그룹중에서 선택된 알카노일 L-카르니틴, 또는 그의 약리학적으로 허용가능한 염이다); 및

(b) 카로티노이드, 바람직하게는 라이코펜, α-카로틴, β-카로틴, 제아산틴, 크립토크산틴, 루테인 및 이들의 혼합물 중에서 선택된 카로티노이드, 또는 이러한 카로티노이드들을 함유하는 천연 식물성 생성물들의 추출물, 전형적으로는 토마토 추출물(라이코페르시콘 에스쿨렌툼(Lycopersicon esculentum))을 함께 포함하는, 경구, 비경구, 직장, 경피 또는 안내 점적 주입(ocular instillation)에 의해 투여될 수 있는 조성물에 관한 것이다.

놀랍게도, 본 발명에 이르러, 특징 성분으로서 (a) 프로피오닐 L-카르니틴 또는 그의 약리학적으로 허용가능한 염, 및 (b) 라이코펜, α-카로틴, β-카로틴, 제아산틴, 크립토크산틴, 루테인 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹 중에서 선택된 카로티노이드의 배합물을 함유하는 조성물이 그의 성분들에 의해 발휘된 강력한 상승 효과의 결과로서, 환경 공해로 인한 유리 라디칼의 존재 및 죽상경화, 혈관, 심장 또는 대뇌 류의 지질과산화 현상에 의해 유발되는 손상; 전립선, 자궁, 유방 및 결장 조직을 포함한 조직의 증식 이상; 및 망막의 백내장 및 황반변성을 포함한 시력 및 망막 질환의 예방 및/또는 치료에 대단히 효과적인 것으로 밝혀졌다.

또한 성분 (a)가 유리하게는 L-카르니틴, 아세틸 L-카르니틴, 발레릴 L-카르니틴 및 이소발레릴 L-카르니틴, 및 그의 약리학적으로 허용가능한 염 및 혼합물을 포함하는 그룹 중에서 선택된 "카르니틴"을 추가로 포함할 수 있으며 성분 (b)가 상기 성분을 함유하는 식물성 생성물의 추출물, 예를 들어 토마토(라이코페르시콘 에스쿨렌툼, 솔라나세아에(Solanaceae) 과) 추출물일 수도 있음이 밝혀졌다.

상기 (a):(b)의 중량 비는 1:0.1 내지 1:10의 범위이다.

독성 시험

카르니틴과 그의 유도체들, 및 라이코펜과 다른 카르티노이드들, 예를 들어 루테인, 제아산틴 및 크립토크산틴뿐만 아니라 β-카로틴은 모두 특히 경구 투여 시 낮은 독성을 제공하며 잘 허용된다.

이러한 유리한 특징들은 래트에게 고 용량의 L-카르니틴(1 g/㎏), 또는 프로피오닐 L-카르니틴(1 g/㎏), 또는 L-카르니틴(250 ㎎/㎏) + 프로피오닐 L-카르니틴(250 ㎎/㎏) + 아세틸 L-카르니틴(250 ㎎/㎏) + 이소발레릴 L-카르니틴(250 ㎎/㎏)을 투여하고, 또한 라이코펜 50 ㎎/㎏ 또는 5% 라이코펜 함유 천연 토마토 추출물 1 g/㎏을 투여함으로써 수행된 시험에서 확인되었다.

또한, 래트에게 경구 투여된 프로피오닐 L-카르니틴 1 g/㎏ 및 라이코펜 50 ㎎/㎏의 배합물은 잘 허용되며 상기에 의해 처리된 동물에서 사망은 일어나지 않은 것으로 나타났다.

이는 카르니틴 혼합물[L-카르니틴(250 ㎎/㎏) + 프로피오닐 L-카르니틴(250 ㎎/㎏) + 아세틸 L-카르니틴(250 ㎎/㎏) + 이소발레릴 L-카르니틴(250 ㎎/㎏)]을 라이코펜 50 ㎎/㎏과 함께 투여한 결과에 대해서도 사실이다.

유사한 유리한 결과들이 연장된 기간(30 일)에 걸쳐 래트에게 프로피오닐 L-카르니틴(500 ㎎/㎏), 또는 다양한 카르니틴들의 혼합물[L-카르니틴(150 ㎎/㎏) + 프로피오닐 L-카르니틴(150 ㎎/㎏) + 아세틸 L-카르니틴(150 ㎎/㎏) + 이소발레릴 L-카르니틴(150 ㎎/㎏)]을 라이코펜 25 ㎎/㎏과 함께 매일 경구 투여함에 의해서도 얻어졌다.

30 일의 끝에서, 상기와 같이 처리된 래트에서 어떠한 사망률이나 독성 징후도 나타나지 않았다. 물리 화학적 시험 결과들, 적혈구 세포 수 및 백혈 구 세포 수는 상기 처리의 끝에서 주요 기관에 대해 수행된 조직 검사 결과 상기 처리된 동물에서 정상적이었다.

사염화 탄소에 의해 독성화시킨 단리된 간 세포에 대한 시험

본 원에 개시된 본 발명에 따른 조성물에 의해 발휘되는 유리 라디칼에 대한 산화방지 및 보호 활성을 평가하기 위해서, 사염화 탄소에 의해 유발된 독성화에 대한 상기 조성물의 효과를 단리된 간 세포 배양액 상에서 분석하였다.

사염화 탄소(CCl₄)가 세포 막의 지질과산화를 유발시키며 이에 의해 세포가 괴사될 수도 있음은 널리 공지되어 있다.

래트 간 세포의 배양액 상에서 수행된 이들 시험은 유리 라디칼의 방출과 관련된 CCl₄의 지질 과산화 및 독성 효과가 상기 배양액 중의 L-카르니틴, 아세틸 L-카르니틴, 프로피오닐 L-카르니틴 및 이소발레릴 L-카르니틴이 서로 1:1의 중량비로 이루어진 카르니틴 혼합물(100 ㎎/ℓ)의 존재에 의해, 특히 라이코펜(20 ㎎/ℓ) 또는 5% 라이코펜 함유 토마토 추출물과 배합 시 감소될 수 있음을 입증하였다.

이들 시험을 수행하기 위해서, 문헌[Seglen F.O.,Meth. Cell. Biol. Chem., 264, 4747, 1989]에 개시된 방법을 사용하여 래트의 간으로부터 취한 간 세포를 단리시켰다.

CCl₄에 의해 유발된 세포 막 상의 병변들, 및 카르니틴 혼합물 또는 프로피오닐 L-카르니틴 또는 라이코펜, 뿐만 아니라 이들의 배합물에 의해 발휘된 보호 효과를 세포 배양액의 상등액에 대해 알라닌 아미노트랜스퍼라제(AlaAT) 및 아스파테이트 아미노트랜스퍼라제(aspaAT) 모두를 분석(Beckman 700-Encore 2 Auto-biochemistry Assay System)함으로써 평가하였다.

CCl₄의 지질 과산화 효과에 대해 제공된 보호를 평가하기 위해서, 티오바르비투르산 방법(Ohkawa H.Anal. Biochem., 95, 351, 1979)을 사용하여 말로닐알데히드를 측정하였다.

상기 처리의 끝에서 간 세포의 세포 진단을 빛과 전자 현미경 하에서 포르말린 또는 글루타르알데히드로 고착시킨 후에 수행하였다. 이들 시험 결과를 검사한 결과 세포막의 병변 및 CCl₄-유발된 지질 과산화에 대한 간 세포의 보호에 있어서 카르니틴 혼합물과 라이코펜, 및 프로피오닐 L-카르니틴과 라이코펜간에 놀라울 정도의 상승효과가 존재하는 것으로 밝혀졌다.

카르니틴, 특히 프로피오닐 L-카르니틴과 라이코펜간의 이러한 상승효과는 또한 지질 과산화 효과의 지표인 말로닐알데히드의 측정으로부터 명백하다.

상기 간 세포의 세포학적 검사는 프로피오닐 L-카르니틴과 라이코펜으로 처리한 후의 괴사 세포의 감소를 확인시키나; 특히 초미세 구조 검사 시, 대조군(CCl₄)의 세포들에는 헤모크롬 이상, 불규칙적인 핵막, 미토콘드리아에서의 미토콘드리아 릉의 소실 및 리보솜 수의 감소가 존재한 반면, CCl₄에 노출되었을 뿐만 아니라 카르니틴과 라이코펜에 노출된 세포들에는 뜻밖에도 완전한 세포막과 핵, 및 규칙적인 이질 염색질, 뿐만 아니라 규칙적인 미토콘드리아 및 리보솜 수가 존재하였다.

조직학적 외관의 정상화는 카르니틴 혼합물과 라이코펜의 결합된 활성에 노출된 간 세포에서 놀랍게도 현저한 반면, 배합된 것이 아닌 단일 화합물들 단독의효과들은 현저하지 않았으며, 따라서 이는 카르니틴과 라이코펜간의 현저한 상승효과를 입증한다.

실험적으로 유발시킨 백내장 시험

눈 백내장의 원인이 될 수 있는 인자들 중에서 그의 병인론적 중요성에 비추어 망막으로의 혈액 공급 장애와 함께, 손상된 글루코스 대사뿐만 아니라 유리 라디칼 및 지질 과산화가 기준이 되므로, 본 발명자들은 문헌[Gabbay K.H.,N. Engl. J. Med., 288, 831, 1973]에 개시된 방법에 따라 갈락토오스가 풍부한 음식물을 사용하여 래트에서 눈 백내장의 발생을 실험적으로 유발시켰다.

약 8 일의 상기 처리 후에, 래트에서, 중증도와 관련하여 문헌[Sippel T.O.,Invest. Ophthalmol., 5, 568, 1966]에 개시된 방법에 따라 단계 I, II 및 III의 증가 정도로 분류되는 수정체 혼탁이 얻어진다. 이들 시험에서 얻어진 결과는갈락토오스와 함께 카르니틴 혼합물(서로 동일한 중량의 L-카르니틴, 아세틸 L-카르니틴, 프로피오닐 L-카르니틴 및 이소발레릴 L-카르니틴의 배합물 400 ㎎/㎏, 경구 투여), 또는 프로피오닐 L-카르니틴(400 ㎎/㎏), 또는 라이코펜(5 ㎎/㎏), 또는 5% 라이코펜 함유 천연 토마토 추출물(100 ㎎/㎏), 또는 이들 생성물을 함께 8 일간 투여하여 갈락토오스에 의해 유발된 눈의 병변에 대한 중증도가 감소되었음을 입증한다. 그러나, 수정체 혼탁의 발생은 상기 8 일의 갈락토오스 처리 기간 동안 카르니틴 혼합물과 라이코펜, 또는 프로피오닐 L-카르니틴과 라이코펜의 배합물을 상기 실험적으로 처리된 래트에게 동시에 투여한 경우에 거의 완전히 억제되었다.

토끼에서 실험적인 죽상경화증 시험

본 시험에서, 카르니틴 혼합물, 프로피오닐 L-카르니틴, 라이코펜 및 5% 라이코펜 함유 천연 토마토 추출물 각각 또는 이들의 다양한 배합물들의 실험적으로 유발시킨 토끼의 죽상경화증에 대한 효과를 평가하였다.

이들 시험을 위해서, 평균 체중 2.9 ㎏의 일단의 뉴질랜드 토끼를 사용하여, 이들에게 콜레스테롤 0.5 중량%의 표준 음식물을 30 일간 계속 공급하였다. 매일 동일한 동물들에게 카르니틴 혼합물(서로 동일한 중량의 L-카르니틴, 아세틸 L-카르니틴, 프로피오닐 L-카르니틴 및 이소발레릴 L-카르니틴의 배합물) 400 ㎎/㎏, 또는 프로피오닐 L-카르니틴 400 ㎎/㎏, 또는 라이코펜 5 ㎎/㎏, 또는 5% 라이코펜 함유 천연 토마토 추출물 100 ㎎/㎏, 또는 다양한 이들 생성물의 배합물에 상응하는 용량의 콜레스테롤-풍부 음식물을 공급하였다. 상기 30 일간의 처리의 끝에서, 혈액 샘플을 각 동물 귀의 중추 동맥으로부터 취하고 이를 문헌[Hatch F.T.,Adv. Lipid Res., 6, 1, 1968]의 방법에 따라 지질단백질의 존재를 분석하는데 사용하였다.

이어서 동물들을 죽이고 이들 각각으로부터 간을 취하여 각 문헌[Dehoff J.L.,Clin. Chem., 24, 433, 1978; Levy A.,Advances in Automated Analysis(Technicon Corp.)497, Thurman, Miami 1972]의 방법에 따라 전체 콜레스테롤 및 트리글리세라이드를 분석하는데 사용하였다. 대동맥 및 심장을 또한 단리하여 중중도에 따라 I 내지 IV의 병변 등급으로 문헌[Klurfeld D.M.,J. Med., 10, 35, 1979]의 방법에 따라 죽상경화성 병변의 존재를 평가하는데 사용하였다.

이들 시험의 결과는 상기 두 카르니틴들 모두와 또한 보다 적은 정도의 라이코펜이 고지질 식이에 의해 토끼에서 유발시킨 콜레스테롤 및 트리글리세라이드의 증가에 대해 보호 효과를 발휘하지만, 이들을 함께 사용한 경우에만 실제적으로 완전한 보호에 대한 명백한 결과가 얻어짐을 나타낸다.

실제로, 카르니틴과 라이코펜의 배합물로 처리된 동물들은 개별적인 생성물들 각각에 의해 생성된 효과들의 합에 의해 성취될 수 없는 보호 정도를 나타낸다. 이들 시험의 결과는 또한 본 원에 개시된 본 발명에 따른 조성물에 의해 발휘되는효과들의 현저한 상승작용을 입증한다.

증식억제 활성 시험과 오르니틴 데카복실라제 활성의 평가

공지된 바와 같이, 래트에게 피하 투여된 텔레옥시딘은 포르볼 미리스테이트처럼 상기에 의해 처리된 동물들의 피부에서 증식 이상을 야기시키며, 이는 심지어 종양-유형의 각화 돌기를 형성시킬 수 있다.

상기 증식 이상은 오르니틴 데카복실라제 효소의 증가를 수반하며, 일반적으로 모든 병리학적 증식 활성화의 경우에서와 같이, 상기 오르니틴 데카복실라제 활성의 증가는 유발된 병변의 중증도에 비례한다. 이들 시험에서, 0.2 cc의 수용액 중에 용해된 텔레옥시딘을 마우스의 제모된 등에 5 ㎍/마우스의 용량으로 피하 주입하였다. 이러한 처리에 앞서 7 일간에 걸쳐 시험 동물들에게 서로 동일한 중량의 L-카르니틴, 아세틸 L-카르니틴, 프로피오닐 L-카르니틴 및 이소발레릴 L-카르니틴의 배합물로 이루어진 카르니틴 혼합물 단독(400 ㎎/㎏), 또는 프로피오닐 L-카르니틴 단독(400 ㎎/㎏), 또는 천연 토마토 카로티노이드 추출물(5% 라이코펜 함유, 100 ㎎/㎏) 단독, 또는 라이코펜 단독(5 ㎎/㎏), 또는 카르니틴 혼합물과 라이코펜 또는 라이코펜-함유 추출물의 배합물, 또는 프로피오닐 L-카르니틴과 라이코펜 또는 라이코펜-함유 추출물의 배합물을 경구 투여하였다. 또 다른 시험 셋트에서, 이들 생성물을 200 ㎎/cc 농도의 카르니틴 혼합물, 또는 200 ㎎/cc 농도의 5% 라이코펜 함유 카로티노이드 추출물, 또는 5 ㎎/cc 농도의 라이코펜이 얻어질 때까지 상기 생성물들을 먼저 디메틸설폭사이드에, 이어서 라놀린에 적합하게 분산시킨 후에 텔레옥시딘의 주입 30 분 전에 상기 마우스의 피부에 적용시켰다.

다양한 제제들을 텔레옥시딘을 주입한 피부 영역에 0.3 cc의 용량으로 적용하고 상기 주입된 영역을 차단용 붕대로 보호하였다.

텔레옥시딘이 주입된 피부 영역에서 오르니틴 데카복실라제의 분석을 위해서, 주입 후 5 시간 째에 문헌[O'Brien T.G.,Cancer Res., 35, 1662, 1975; Nakadate T.,Cancer Res., 42, 2841, 1982]에 개시된 방법의 공정을 채택하였다. 상피 추출물의 단백질 농도를 로우리 방법(Lowry O H.,J: Biol. Chem., 193, 265, 1951)을 사용하여 측정하였다. 이들 시험의 결과는 카르니틴 혼합물과 천연 토마토 추출물 중의 카로티노이드 모두, 뿐만 아니라 프로피오닐 L-카르니틴 단독 및 라이코펜 단독으로는 증식 현상 및 오르니틴 데카복실라제 활성의 증가에 대해 단지 약간의 보호 효과만을 발휘하지만, 상기 보호 효과는 대조적으로 이들 생성물들을 함께 사용하는 경우에 놀랍게도 유효한 것으로 나타났으며, 이는 뜻밖의 놀라운 상승효과를 입증한다.

본 발명에 따른 조성물의 예시적이고 비-제한적인 예를 하기에 나타낸다.

1) 카르니틴 혼합물 500 ㎎

(L-카르니틴 125 ㎎, 아세틸 L-카르니틴 125 ㎎,

프로피오닐 L-카르니틴 125 ㎎, 이소발레릴 L-카르니틴 125 ㎎)

천연 토마토 추출물(5% 라이코펜 함유) 100 ㎎

2) 카르니틴 혼합물 300 ㎎

(L-카르니틴 75 ㎎, 아세틸 L-카르니틴 75 ㎎,

프로피오닐 L-카르니틴 75 ㎎, 이소발레릴 L-카르니틴 75 ㎎)

천연 토마토 추출물(5% 라이코펜 함유) 50 ㎎

3) 프로피오닐 L-카르니틴 500 ㎎

천연 토마토 추출물(5% 라이코펜 함유) 100 ㎎

4) 프로피오닐 L-카르니틴 250 ㎎

천연 토마토 추출물(5% 라이코펜 함유) 50 ㎎

5) 프로피오닐 L-카르니틴 500 ㎎

라이코펜 5 ㎎

6) 프로피오닐 L-카르니틴 250 ㎎

라이코펜 2.5 ㎎

7) 카르니틴 혼합물 300 ㎎

(L-카르니틴 75 ㎎, 아세틸 L-카르니틴 75 ㎎,

프로피오닐 L-카르니틴 75 ㎎, 이소발레릴 L-카르니틴 75 ㎎)

라이코펜 5 ㎎

8) 카르니틴 혼합물 300 ㎎

(L-카르니틴 75 ㎎, 아세틸 L-카르니틴 75 ㎎,

프로피오닐 L-카르니틴 75 ㎎, 이소발레릴 L-카르니틴 75 ㎎)

라이코펜 2.5 ㎎

9) 카르니틴 혼합물 300 ㎎

(L-카르니틴 75 ㎎, 아세틸 L-카르니틴 75 ㎎,

프로피오닐 L-카르니틴 75 ㎎, 이소발레릴 L-카르니틴 75 ㎎)

카로티노이드 복합체 300 ㎎

(토마토, 핑크 그레이프푸르트, 당근, 오렌지 꽃으로부터의 천연 추출물)

10) 프로피오닐 L-카르니틴 400 ㎎

라이코펜 2.5 ㎎

β-카로틴 5 ㎎

α-카로틴 2 ㎎

루테인 5 ㎎

제아산틴 1 ㎎

11) 프로피오닐 L-카르니틴 350 ㎎

라이코펜 5 ㎎

난쟁이 부채꼴 야자(Serenoa repens) 50 ㎎

피제움 아프리카눔(Pygeum africanum) 추출물 50 ㎎

12) 카르니틴 혼합물 300 ㎎

(L-카르니틴 75 ㎎, 아세틸 L-카르니틴 75 ㎎,

프로피오닐 L-카르니틴 75 ㎎, 이소발레릴 L-카르니틴 75 ㎎)

천연 토마토 추출물(5% 라이코펜 함유) 100 ㎎

난쟁이 부채꼴 야자(Serenoa repens) 추출물 50 ㎎

피제움 아프리카눔 추출물 50 ㎎

선인장 꽃(Opuntia ficus indica) 추출물 50 ㎎

아연 글리시네이트 50 ㎎

셀레늄(1-셀레늄 메티오닌) 50 ㎎

비타민 E 10 ㎎

CoQ₁₀10 ㎎

13) 카르니틴 혼합물 400 ㎎

(L-카르니틴 100 ㎎, 아세틸 L-카르니틴 100 ㎎,

프로피오닐 L-카르니틴 100 ㎎, 이소발레릴 L-카르니틴 100 ㎎)

천연 토마토 추출물(5% 라이코펜 함유) 100 ㎎

덩굴월귤로부터 추출된 안토시아닌 50 ㎎

포도로부터 추출된 폴리페놀 10 ㎎

비타민 E 10 ㎎

셀레늄 메티오닌 50 ㎎

14) 프로피오닐 L-카르니틴 300 ㎎

β-카로틴 5 ㎎

라이코펜 5 ㎎

루테인 3 ㎎

카테친 5 ㎎

리포산 5 ㎎

CoQ₁₀10 ㎎

비타민 C 100 ㎎

비타민 PP 25 ㎎

비타민 B₆25 ㎎

비타민 B₁₂250 ㎎

타우린 100 ㎎

L-카르니틴 또는 알카노일 L-카르니틴의 약리학적으로 허용가능한 염이 의미하는 것은 이들 유효 성분과 불필요한 독성 또는 부작용을 생성시키지 않는 산과의 임의의 염이다. 이들 산은 약학 분야의 전문가들에게 잘 알려져 있다.

적합한 염의 비 제한적인 예로는 하기와 같은 것들이 있다: 클로라이드; 브로마이드; 요오다이드; 아스파테이트, 산 아스파테이트; 시트레이트, 산 시트레이트; 타르트레이트; 포스페이트, 산 포스페이트; 푸마레이트, 산 푸마레이트; 글리세로포스페이트; 글루코스 포스페이트; 락테이트; 말리에이트, 산 말리에이트; 오로테이트; 옥살레이트, 산 옥살레이트; 설페이트, 산 설페이트; 트리클로로아세테이트; 트리플루오로아세테이트 및 메탄설포네이트.

FDA-승인된 약리학적으로 허용가능한 염의 목록이 문헌[Int. J. of Pharm.33(1986), 201-217]에 개시되어 있으며, 이는 본 발명에 참고로 인용되어 있다.

본 발명에 따른 조성물은 비타민, 조효소, 미네랄 물질 및 산화방지제를 또한 포함할 수 있다.

특정한 투여 경로를 고려하여 상기 조성물의 제조에 사용하기에 적합한 부형제는 약학 및 식품 산업 분야의 전문가들에게 명백할 것이다.

상술한 바와 같이, 본 발명에 따른 조성물은 환경 공해로 인한 유리 라디칼의 존재 및 죽상경화, 혈관, 심장 또는 대뇌 류의 지질과산화 현상에 의해 야기되는 질병; 전립선, 자궁, 유방 또는 결장 조직을 포함한 조직의 증식성 변화; 망막의 백내장 및 황반변성을 포함한 시력 및 망막의 변화의 예방 및/또는 치료를 위해 유용하게 사용할 수 있다.

Claims

(a) 프로피오닐 L-카르니틴 또는 그의 약리학적으로 허용가능한 염; 및

(b) 카로티노이드

를 포함하는 배합 조성물.
제 1 항에 있어서, 성분 (a)가 L-카르니틴, 아세틸 L-카르니틴, 발레릴 L-카르니틴, 이소발레릴 L-카르니틴 및 이들의 약리학적으로 허용가능한 염 및 혼합물을 포함하는 그룹 중에서 선택된 "카르니틴"을 추가로 포함하는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 카로티노이드가 라이코펜, α-카로틴, β-카로틴, 제아산틴, 크립토크산틴, 루테인 및 이들의 혼합물을 포함하는 그룹 중에서 선택된 조성물.
제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, (a):(b)의 중량비가 1:0.1 내지 1:10인 조성물.
제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 성분 (b)가 상기 성분 자체를 함유하는 식물 추출물의 형태로 존재하는 조성물.
제 5 항에 있어서, 식물 추출물이 토마토(라이코페르시콘 에스쿨렌툼(Lycopersicon esculentum)) 추출물인 조성물.
제 6 항에 있어서, 토마토 추출물이 약 2 내지 20 중량%의 라이코펜을 포함하는 조성물.
제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, L-카르니틴 또는 알카노일 L-카르니틴의 약리학적으로 허용가능한 염이 클로라이드; 브로마이드; 요오다이드; 아스파테이트, 산 아스파테이트; 시트레이트, 산 시트레이트; 타르트레이트; 포스페이트, 산 포스페이트; 푸마레이트, 산 푸마레이트; 글리세로포스페이트; 글루코스 포스페이트; 락테이트; 말리에이트, 산 말리에이트; 오로테이트; 산 옥살레이트; 설페이트, 산 설페이트; 트리클로로아세테이트; 트리플루오로아세테이트 및 메탄설포네이트를 포함하는 그룹중에서 선택되는 조성물.
제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서, 비타민, 조효소, 미네랄 물질 및 산화방지제를 추가로 포함하는 조성물.
제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서, 경구 투여가능한 식이성 보충식의 형태인 조성물.
제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서, 경구, 비경구, 직장, 경피 또는 안내 점적 주입에 의해 투여가능한 약제 형태인 조성물.
환경 공해로 인한 유리 라디칼의 존재 및 죽상경화, 혈관, 심장 또는 대뇌 류의 지질과산화 현상에 의해 야기되는 질병; 전립선, 자궁, 유방 또는 결장 조직을 포함한 조직의 증식성 변화; 망막의 백내장 및 황반변성을 포함한 시력 및 망막의 변화를 예방하기 위한, 제 10 항의 식이성 보충식.
환경 공해로 인한 유리 라디칼의 존재 및 죽상경화, 혈관, 심장 또는 대뇌 류의 지질과산화 현상에 의해 야기되는 질병; 전립선, 자궁, 유방 또는 결장 조직을 포함한 조직의 증식성 변화; 망막의 백내장 및 황반변성을 포함한 시력 및 망막의 변화를 치료하기 위한, 제 11 항의 약제.
제 12 항에 있어서, 고체, 반-고체 또는 액체 형태의 식이성 보충식.
제 13 항에 있어서, 고체, 반-고체 또는 액체 형태의 약제.
제 14 항에 있어서, 정제, 로젠지, 환제, 캡슐, 과립 또는 시럽 형태의 식이성 보충식.
제 15 항에 있어서, 정제, 로젠지, 환제, 캡슐, 과립, 시럽, 바이알, 세안약 또는 점적제 형태의 약제.