KR20010032771A

KR20010032771A - 크로모글릭산 화합물의 의약 용도

Info

Publication number: KR20010032771A
Application number: KR1020007006067A
Authority: KR
Inventors: 시라하세히로아키; 요시미아키히사; 나카무라쇼헤이; 간다마모루; 후카타후미오
Original assignee: 교토 야쿠힝 고교 가부시키가이샤
Priority date: 1997-12-03
Filing date: 1998-11-30
Publication date: 2001-04-25
Also published as: AU1263099A; CA2312699A1; EP1040826A1; WO1999027926A1; US6262108B1

Abstract

본 발명은 항류마티스 작용, 항염증 작용 및 면역조절 작용을 갖기 때문에 류마트즘 치료에 유리하게 사용될 수 있고, 부작용이 적으면서 만성 류마티스 관절염을 조절하는데에 효과적인 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물에 관한 것이다.

이 화합물은 항-I형 알레르기 활성 및 항-IV형 알레르기 활성을 갖기 때문에 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염, 예를들어 IV형 알레르기 반응이 관여하는 접촉성 피부염, I형 및 IV형 알레르기성 반응이 관여하는 아토피성 피부염등의 치료에 유리하게 사용될 수 있다.

Description

크로모글릭산 화합물의 의약 용도{Medicinal use of cromoglycic acid compounds}

전형적인 류마티스성 질병 - 만성 류마티스성 관절염(이하, RA)-은 주증상이 만성 다발성관절염(polyarthritis cronica)인 전신성 결합-조직의 질병이고, 자가면역 질병의 하나이다. 이들의 일반적인 질병 유형은 점진적이고 만성인 다발성 관절염이다. 이는 다양한 임상적 유형, 예를들어, 자발적인 경쾌(remission)를 보이는 형, 관절의 매우 점진적인 파괴 및 흡수(absorption)를 보이는 형(예, 이단성 관절염(arthritis dissecans))등을 포함한다. 이들의 임상적 증상은 관절염, 관절의 종창(swelling), 통증, 변형, 아침의 뻣뻣함, 류마토이드 결절, 혈관염등을 포함한다.

현재 RA의 내과적 치료에서는 비스테로이드성 항염증제(예, 아스피린, 인도메타신, 디클로페낙 소듐, 이부프로펜, 록소프로펜 소듐, 피록시캄, 아피록시캄, 나프록센등), 부신피질스테로이드제(예, 프레드니솔론등의 관절내 주입 및 경구 투여), 면역조절제(예, 금제제, D-페니실라민, 부실라민, 아크타리트등), 면역억제제(예, 메토트렉세이트, 미조리빈등)등이 사용된다. 그럼에도 불구하고, 이들 약제는 충분한 치료 효과를 주지 못하고, 오히려 다양한 부작용을 일으킨다. 예를들어, 비스테로이드성 항염증제는 소화성 궤양, 신장애, 간장애등을 일으킬 수 있고, 부신피질 스테로이드제는 감염 질병, 당뇨병, 만월 안, 소화성 궤양, 부신피질기능부전, 혈전성 정맥염, 골다공증등을 유발 및 악화시킬 수 있고, 면역조절제는 피부장애, 신장애, 구내염등을 일으킬 수 있고, 면역 억제제는 간장애, 백혈구 감소, 혈소판 감소등을 일으킬 수 있으며, 이들의 일부는 심한 부작용을 일으킨다.

전형적인 알레르기성 피부염은 접촉성 피부염, 아토피성 피부염등을 포함한다.

접촉성 피부염은 물질이 피부에 접촉하여 발병하는 피부의 염증이다. 질병의 발병은 예를들어 특정한 물질, 예를들어 식물(예, 옻등), 화장품, 세제, 의류, 시판되는 외용약등이 피부에 접촉하고, 물질이 개개인의 저항 역치를 넘어 자극 성질을 나타내거나, 개개인이 접촉시 물질에 의해 감작화될 때 나타난다. 접촉성 피부염의 발병은 물질의 생리화학적 성질, 감작화 활성, 접촉 빈도, 개개인의 소인등에 의해 일어난다. 이 질병의 형은 자극성 피부염, 광독성 피부염, 알레르기성 피부염, 광알레르기성 피부염, 접촉 두드러기, 전신접촉형 피부염등을 포함한다. 접촉성 피부염의 임상적 증상은 홍반, 부종, 구진, 소수포, 짓무름, 양진(itching)등이 수반되는 급성 습진을 포함하고, 이의 반복은 태선화 및 침윤을 수반하는 습진이 된다. 이들 질병의 발병 메카니즘은 T 세포에 의해 야기되는 IV형 알레르기 반응(지연형 알레르기 반응)과 관련된 것으로 생각되고 있다. IV형 알레르기 반응은 감작화된 T 세포와 항원의 반응에 의해 유도되고, 이는 감작화된 T-세포로부터 림포킨을 방출하여 세포독성을 일으키고, 이는 다시 상기 알레르기 반응을 유도한다.

아토피성 피부염은, 환자가 특정 물질에 과민증인 아토피성 소인을 갖기때문에, 외래성 소인, 즉 다양한 항원에 의해 발병한다. 임상적 증상은 뚜렷한 양진, 피부의 비후, 침윤, 태선화등을 포함한다. 이 질병의 발병 메카니즘은 IgE가 관여하는 I형 알레르기 반응(즉시형 과민증)을 포함하는 것으로 말해져 왔다. 그러나, 이는 확정적이 아니다. 최근에, IV 형 알레르기 반응이 이 질병의 발병에 관련된 것으로 여겨지고, 사실, 이 질병의 임상적 증상은 전해진 바에 따르면, IV형 알레르기 반응에 의해 야기되는 상기 언급된 접촉성 피부염의 증상과 매우 유사하다.

현재, 항-히스타민제 및 스테로이드제가 접촉성 피부염에 대한 치료제로서 사용되어 왔고, 이들 및 소위 항알레르기제의 일부가 아토피성 피부염에 대해 주로 사용되어 왔다.

항히스타민제의 예에는 디펜히드라민 하이드로클로라이드, 메퀴타진, 프로메타진 하이드로클로라이드, 클로르페니라민 말리에이트등이 있고, 이들은 주로 이치니스(itchiness)를 감소시키기위해 사용되어 왔다.

스테로이드제로서는 프레드니솔론, 하이드로코르티손 부티레이트, 덱사메타손 발레레이트, 베타메타손, 디프로피오네이트, 클로베타솔 프로피오네이트등이 사용되어 왔다. 이들은 치료효과를 나타내는 한편, 유발 감염증, 속발성부신피질기능부전(secondary adrenal cortical insufficiency), 당뇨병, 소화성 궤양, 다모(hirsutism), 탈모, 색소침착등의 부작용을 일으키고, 이들은 바람직한 치료제라고 말할 수 없다.

항알레르기제로서는 트라닐라스트, 케토티펜 푸마레이트, 옥사토미드, 아젤라스틴 하이드로클로라이드등이 사용되어 왔다. 이들중 어느 것도 만족스러운 치료 효과를 나타내지않고, 접촉성 피부염에 대해 사용되지 않는다.

일반적으로, 트라닐라스트, 옥사토미드, 페리롤라스트 포타슘, 레피리나스트, 에메다스틴 디푸마레이트, 에피나스틴 하이드로클로라이등과 같은 소위 항알레르기제는 비효과적이거나, IV형 알레르기 반응에 의해 주로 야기된다고 여겨지는 접촉성 피부염 및 아토피성 피부염에 대해 만족스러운 치료 효과를 나타내지 못한다. 이는 IgE가 관여한 I형 알레르기 반응(즉시형 과민증)에 대해서만 소위 항알레르기제의 억제 작용을 갖고, IV형 알레르기 반응-억제 작용을 나타내는데에 대한 실패에 기인된다고 가정된다(Kobayashi, K. et al.: Japan Pharmacol. 63, 73-81 (1993), Takemori Omori et al.: Folia Pharmacol. Jpn. 80, 261-270(1982), Yanagihara, Y. et al.: Japan. J. Pharmacol. 51, 93-100(1989), Kazuo Takahashi et al.: Folia Pharmacol. Jpn. 88, 245-254(1986), Tadayuki Saito et al.: Folia Pharmacol. Jpn. 89, 55-62(1987), Kamei, C. et al.: Arzneim.-Forsch./Drug Res. 41(II), 1150-1153).

그러므로, 염증 부위에서의 IV형 알레르기 반응-억제 작용은 알레르기성 피부염, 특히 접촉성 피부염 및 아토피성 피부염의 치료에 필수적인 것으로 여겨진다.

상기-언급된 다양한 상황에서, RA 증상의 경감 및 억제에 효과적이고 부작용이 적은 항류마티스제, 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염에 대한 매우 안전하고 효과적인 치료제, 특히 접촉성 피부염용 치료제 및 아토피성 피부염에 대한 치료제가 요망되어 왔다.

본 발명은 크로모글릭산 화합물의 약제학적 용도에 관한 것이다. 보다 특히, 본 발명은 항류마티스제, IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염 치료제, 및 I 형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염 치료제, 특히 접촉성 피부염 치료제 및 아토피성 피부염 치료제로서의 크로모글릭산 화합물의 약제학적 용도에 관한 것이다.

그러므로, 본 발명의 목적은 RA의 치료에 효과적이고 부작용이 적은 항류마티스제를 제공하는 것이다.

또한, 본 발명의 목적은 IV형 알레르기 반응이 관여하는 접촉성 피부염과 같은 알레르기성 피부염, I형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 아토피성 피부염등과 같은 알레르기성 피부염에 효과적인 매우 안전한 치료제를 제공하는 것이다.

본 발명자들은 상기 언급된 목적을 달성하기 위한 시도에서 다양한 연구를 수행하여, 후에 언급될 화학식(I)의 크로모글릭 산 화합물[이하, 또한 크로모글릭산 화합물(I)이라 언급됨]이 RA의 주 증상인 다발성관절염의 증상을 억제한다는 것을 밝혀냈다. 본 발명자들은 또한 크로모글릭산 화합물(I)이 IV형 알레르기 반응이 관여하는 접촉성 피부염, I형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 아토피성 피부염등과 같은 알레르기성 피부염의 치료에 효과적이라는 것을 밝혀내어 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명은 다음을 제공한다.

1. 활성 성분으로서 화학식(I)의 크로모글릭 산 화합물을 함유하는 류마티스성 질병의 치료제:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.

2. 활성 성분으로서 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 함유하는, IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료제.

3. 활성 성분으로서 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 함유하는, I형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료제.

4. 활성 성분으로서 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 함유하는 접촉성 피부염의 치료제.

5. 활성 성분으로서 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 함유하는 아토피성 피부염의 치료제.

6. 유효량의 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 투여하는 것을 함유하는 류마티스성 질병의 치료방법.

7. 유효량의 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 투여하는 것을 포함하는, IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료방법.

8. 유효량의 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 투여하는 것을 포함하는, I형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료방법.

9. 유효량의 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 투여하는 것을 포함하는 접촉성 피부염의 치료방법.

10. 유효량의 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 투여하는 것을 포함하는 아토피성 피부염의 치료방법.

11. 류마티스성 질병의 치료제를 제조하기 위한 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물의 용도.

12. IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료제를 제조하기 위한 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물의 용도.

13. I형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료제를 제조하기 위한 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물의 용도.

14. 접촉성 피부염의 치료제를 제조하기 위한 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물의 용도.

15. 아토피성 피부염의 치료제를 제조하기 위한 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물의 용도.

16. 유효량의 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는 류마티스 질병의 치료용 약제학적 조성물.

17. 유효량의 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는, IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료용 약제학적 조성물.

18. 유효량의 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는, I형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료용 약제학적 조성물.

19. 유효량의 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는 접촉성 피부염의 치료용 약제학적 조성물.

20. 유효량의 상기 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는 아토피성 피부염의 치료용 약제학적 조성물.

21. 상기 16항의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물은 류마티스성 질병을 치료하는데에 사용될 수 있거나 사용되어야 한다는 그와 관련된 문구를 포함하는 시판 패키지.

22. 상기 17항의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물은 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염을 치료하는데에 사용될 수 있거나 사용되어야 한다는 그와 관련된 문구를 포함하는 시판 패키지.

23. 상기 18항의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물은 I형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염을 치료하는데에 사용될 수 있거나 사용되어야 한다는 그와 관련된 문구를 포함하는 시판 패키지.

24. 상기 19항의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물은 접촉성 피부염을 치료하는데에 사용될 수 있거나 사용되어야 한다는 그와 관련된 문구를 포함하는 시판 패키지.

25. 상기 20항의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물은 아토피성 피부염을 치료하는데에 사용될 수 있거나 사용되어야 한다는 그와 관련된 문구를 포함하는 시판 패키지.

화학식(I)의 R¹및 R²에서 비치환된 저급 알킬의 예는 바람직하게는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, t-부틸등과 같은 탄소원자 1 내지 4개를 갖는 직쇄 또는 측쇄 알킬이다.

본 발명의 크로모글릭산 화합물(I)은 공지되 화합물이고 그자체로서 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 예를들어, 크로모글릭산 화합물(I)은 JP-A-62-81380에 개시된 방법, 즉 화학식(II)의 화합물(II)를 화학식(III)의 화합물(III) 또는 화학식(IV)의 화합물(IV)의 화합물과 반응시켜 제조할 수 있다:

상기 식에서,

R¹및 R²는 상기 정의된 바와 같다.

상기 반응에서, 화합물(III)는 유리 카복실산 또는 그의 반응성 유도체로서 반응시킨다.

이렇게 제조된 크로모글릭산 화합물(I)은 비경구 투여(경피 투여, 정맥내 주입, 근육내 주입, 피하 주입, 관절내 주입, 건내(intratendonic) 주입등) 또는 경구 투여에 적절한 투여 형태, 예를들어 캡슐, 정제, 미세 과립, 과립, 건식 시럽, 주사제, 현탁액, 유제, 연고, 로션, 크림, 액체, 점안제, 에어로졸등으로 공지된 방법에 의해 제형화될 수 있고, 항류마티스제 및 알레르기성 피부염 치료제, 예를들어 접촉성 피부염 치료제, 아토피성 피부염 치료제등으로서 사용될 수 있다.

항류마티스제 및 알레르기성 피부염 치료제는, 필요한 경우, 통상적인 첨가제, 예를들어 부형제(예를들어, 전분, 락토즈, 슈가, 탄산 칼슘, 인산칼슘등), 결합제(예를들어, 전분, 아라비아 검, 카복시메틸셀룰로즈, 하이드록시프로필셀룰로즈, 결정성 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈등), 윤활제(예를들어, 마그네슘 스테아레이트, 활석등), 붕해제(예를들어, 칼슘 카복시메틸셀루로즈, 활석등), 현탁화제(예를들어, 메틸셀룰로즈 등), 안정화제, 유화제, 가용화제, 교정약, 완충제등을 함유할 수 있다.

본 발명에 따라 수득된 항류마티스제는, 항류마티스성 작용, 항염증 작용 및 면역 조절 작용을 갖고 RA 증상을 억제하는데에 효과적이므로, 류마티즘을 치료하는데에 유리하게 사용될 수 있다.

본 발명에 따라 수득된 알레르기성 피부염 치료제는 항-I형 알레르기 활성 및 항-IV형 알레르기 활성을 가진다. 그러므로, 상기 치료제는 알레르기성 피부염용 치료제, 특히 접촉성 피부염 및 아토피성 피부염 치료제로서 유리하게 사용될 수 있다.

상기 치료제가 투여되는 경우, 1일 투여량은 바람직하게는 1 내지 4회 투여된다. 투여량은 환자의 증상, 연령, 체중등에 따라 변화하는 한편, 활성 성분인 크로모글릭산 화합물(I)의 양으로 환산했을 때, 성인 경우 1 일 투여량은 5-1500 mg이다.

본 발명은 하기에서 실시예 및 실험 실시예를 참조하여 보다 상세히 설명될 것이다. 본 발명은 이들로 한정되지 않는다.

실시예 1

디에틸 아세토아세틸크로모그리케이트의 합성

메틸렌 클로라이드(700 ml)를 디에틸 크로모글리케이트(25 g, 47.7 mmol) 및 4-디메틸아미노피리딘(2.9 g, 23.8 mmol, 0.5배 몰)에 첨가하고, 현탁액을 얻기위하여 교반하는 동안, 디케텐(8.0 g, 95 mmol)을 5℃에서 매 30분마다 4회 첨가했다(총 32 g, 380 mmol, 8배 몰). 혼합물을 5-10℃에서 2.5 시간 교반하였다. 반응 혼합물을 5% 수성 시트르산 용액(500 ml) 및 포화 염수(500 ml)로 세척하고, 무수 황산 나트륨상에서 건조시켰다. 건조제를 여과하고, 메틸렌 클로라이드를 감압하에서 증발시켰다. 수득된 잔류물을 뜨겁게 하면서(65-70℃) 99.5% 에탄올(160 ml)에 용해시키고, 결정이 침전되기 시작할 때 까지 감압하에서 농축시키고, 이어서 이를 5℃에서 15시간동안 정치시켰다. 침전된 결정을 여과에 의해 모으고, 연속적으로 찬 에탄올 및 이소프로필 에테르로 세척하며, 건조시켜 36g의 수율로 디에틸 아세토아세틸크로모글리케이트의 결정을 수득하였다.

실험 실시예 1

급성 독성 시험

상기 실시예 1에서 제조된 크로모글릭산 화합물을 현탁액의 형태로 숫컷 ICR 마우스(그룹당 3)에 경구투여하였다. 그 결과를 하기 표 1에 나타낸다.

표 1

	LD₅₀(mg/kg)
실시예 1에서 제조된 화합물	＞1000

제형화 실시예 1

하기 처방의 정제를 통상적인 방법에 의해 제조하였다.

실시예 1의 화합물 5 mg

폴리비닐피롤리돈 20 mg

전분 75 mg

마그네슘 스테아레이트 2 mg

실험 실시예 2

마우스에서 디에틸 아세토아세틸크로모글리케이트에 의한 콜라겐-유도된 관절염의 억제

Courtenay 등(Courtenay, J.S. et al.: 이종성 II형 콜라겐에 대한 면역화는 마우스에서 관절염을 유도한다, Nature, 283:666, 1980)의 방법에 따라, 숫컷 DBA/1J 마우스(CHARLES RIVER JAPAN INC.)를 소의 II형 콜라겐으로 감작화시켜 콜라겐-유도된 관절염(류마티스성 관절염)을 유도하였다. 관절염이 발병후, 디에틸 아세토아세틸크로모글리케이트를 경구투여하여 그의 억제 효과를 조사하였다. 방법을 하기에 상세히 설명한다.

숫컷 DBA/1J 마우스(8주 령)를 1주일동안 예비-사육시키고 체중에 기초하여 하기 3 그룹으로(그룹당 8-10 ) 분리했다.

(1) 정상 그룹

(2) 대조 그룹

(3) 치료 그룹

소 II형 콜라겐(2 mg)을 0.01 M 아세트산(1 ml)에 용해시키고, 동등량의 프로인드(Freund)의 완전 어쥬번트에 현탁시키며, 그의 0.1 ml를 9주령의 대조 그룹 및 치료 그룹에서 꼬리의 기부에 피내주사하고, 3주후의 12주령에서 제 2 주사를 하였다.

콜라겐 첫회 주사후 31일째 부터 출발하여 치료의 종료시까지, 각 그룹의 마우스에 대해 사지의 적색화(redness), 종창 및 강직성의 수준에 대해 블라인드(blind) 시험 방법에 의해 1주에 2회 스코어(관절염 스코어)를 매겼다. 스코어는 Bjork 등의 방법(Bjork, J. and Kleinau, S.: Paradoxical effects of LS-2616(Linomide) treatment in the type II collagen arthritis model in mice, Agents and Actions, 27:319-321, 1989)의 방법과 유사한 방법에 따라 매겨졌고, 여기에서 정상은 0점, 하나의 발가락(digit)에서의 염증은 1점, 사지의 두개이상의 발가락에 염증이 있고 중수(metacarpal) 영역 및 중족(metatarsal) 영역은 정상, 또는 사지의 하나의 발가락 및 중수 영역 및 중족 영역에서 염증은 2점, 사지의 발가락들 및 중수 영역 및 중족 영역에서의 염증은 3점을 매겼고, 각 마우스는 총 0 내지 12점의 스코어가 매겨진다).

콜라겐의 첫회 주사후 38일째, 관절염의 발병이 대조 그룹 및 치료 그룹에서 발견되었다. 관절염 스코어는 그룹들사이에 변화가 없었다.

치료를 콜라겐의 첫회 주사후 41일째부터 6주일동안 계속하였다. 즉, 디에틸 아세토아세틸크로모글리케이트를 0.5% 메틸셀룰로즈 용액에 용해시키고, 치료그룹의 마우스에 디에틸 아세토아세틸크로모글리케이트로 환산해서 100 mg/kg/일의 투여량으로 6주동안 1일 1회 강제적으로 경구 투여하였다. 0.5% 메틸셀룰로즈 용액(10 ml/kg/일)을 같은 방법으로 대조 그룹에 투여하였다.

치료 개시전 3일째 및 치료 개시후 38일째에 얻어진 각 그룹의 관절염 스코어를 표 2에 나타낸다. U-검정에 의해 대조 그룹과 비교 검정한 결과 치료 38일째의 치료 그룹의 관절염 스코어에서 유의적인 개선이 나타났다.

표 2 관절염 스코어

	첫회 콜라겐 주사후 38일째(치료개시전 3일)	첫회 콜라겐 주사후 79일째(치료개시후 38일째)
정상 그룹	0.00±0.00	0.00±0.00**
대조 그룹	1.70±0.53	10.70±0.49
치료 그룹	1.83±0.61	6.36±1.30**

각 값은 평균치±표준오차(n=8-10)를 나타낸다.

**: p＜0.01 (대조 그룹과 관련된 U-검정)

치료 개시후 42일 째, 에테르 마취하에 경동맥으로부터 채혈한후 마우스를 탈혈사시켰다. 혈액중의 항-소 II형 콜라겐 항체역가(antibody titer)를 Stuart 등의 방법(Stuart, J. M. et al.: Nature and specificity of the immune response to collagen in type II collagen-induced arthritis in mice, J. Clin. Invest., 69:673-683, 1982)에 따른 ELISA 방법으로 측정하였다. 그 결과를 표 3에 나타낸다. ANOVA 방법에 의해 대조 그룹과 비교 검정한 결과 치료 그룹에서 유의적인 혈중 항-소 II형 콜라겐 항체 역가의 감소가 밝혀졌다.

표 3 혈중 항-소 II형 콜라겐 항체 역가

	첫회 콜라겐 주사후 83일째(치료개시후 42일째)
정상 그룹	0.000±0.000 **
대조 그룹	0.301±0.005
치료 그룹	0.203±0.010 **

각 값은 평균치±표준오차(n=8-10)를 나타낸다.

**: p＜0.01 (대조 그룹에 대한 ANOVA 방법 시험)

또한, 전신을 X-레이 사진 찰영을 하고, 사지의 발(feet) 및 발가락(digit)의 뼈의 파괴상태를 Gliman등(Gliman S.C. et al.: Immunological abnomalities in rats with adjuvant-induced arthritis, II. Effect of antiarthritic therapy on immune function in relation to disease development, Int. J. Immunopharmacol., 9:9-16, 1987)의 기준에 따라 블라인드 시험에 의해 스코어를 매겼다(X-레이 스코어) 여기에서, 정상은 0점, 하나의 관절 파괴는 1점, 전체는 아니고 두개이상의 관절의 파괴는 2점, 및 모든 관절의 파괴는 3점을 매겼고, 각 마우스는 총 0 내지 12의 스코어를 갖는다. 그 결과를 표 4에 나타낸다. U-검정에 의해 대조 그룹과 비교 검정한 결과 치료된 그룹에서 X-레이 스코어에서 유의적인 개선이 밝혀졌다.

표 4 X-레이 스코어

	첫회 콜라겐 주사후 83일째(치료개시후 42일째)
정상 그룹	0.00±0.00**
대조 그룹	10.20±0.40
치료 그룹	5.80±1.10**

각 값은 평균치±표준오차(n=8-10)를 나타낸다.

**: p＜0.01 (대조 그룹에 대한 U-검정)

이 실험에서 사용된 마우스에서의 콜라겐-유도된 관절염은 인간 RA에 가장 유사한 자가면역 관절염의 시험 모델의 하나이다.

디에틸 아세토아세틸크로모글리케이트의 투여는 콜라겐-유도된 관절염(류마티스성 관절염)의 증상을 억제하였고, X-레이 사진에서 입증된 바와 같이 사지의 발 및 발가락의 뼈의 파괴를 억제했다. 이로부터, 화합물은 항-염증 작용 및 항류마티스 작용을 갖는다는 것이 예시된다. 더구나, 혈중 항-소 콜라겐 항체역가에서의 증가 억제는 이 화합물의 일부의 면역 조절 작용을 나타낸다.

실험 실시예 3

디에틸 아세토아세틸크로모글리케이트에 의한 IV형 알레르기성 피부염-억제 작용

숫컷 6주령 ICR 마우스(Clea Japan, Inc.)를 각각 8-9 마리의 마우스를 갖는 대조 그룹과 투여 그룹의 2개 그룹으로 분리했다. 각 그룹경우 14일동안 하루에 2회 0.5% 메틸셀룰로즈 용액(10 ml/kg)을 대조 그룹에 강제적으로 경구 투여하고 디에틸 아세토아세틸크로모글리케이트(100 mg/kg)를 투여 그룹에 강제적으로 경구 투여하였다. 투여 8일째의 첫회 투여후 펜토바르비탈 소듐(55 mg/kg)을 각 마우스에 복강내 투여하고, 복부를 제모하였다. 아세톤-올리브유(혼합비 4:1)에 용해시킨 5% 피크릴 클로라이드를 제모된 부위(직경 약 2 cm)에 도포하였다. 도포후 5일째(투여 12일째)의 첫회투여후, 모든 마우스를 에테르로 마취하고, 양쪽 이개(auricle)의 두께를 dial thickness gauge(Mitutoyo Co.)를 사용하여 측정하였다. 아세톤-올리브유(혼합비, 1:4)에 용해시킨 0.5% 피크릴 클로라이드(10 ㎕)를 우측 이개의 양쪽에 도포하고, 아세톤-올리브유(10 ㎕, 혼합비 1:4)를 좌측 이개의 양쪽에 도포하였다. 이 항원 챌린지로부터 48시간후, 양쪽 이개의 두께를 에테르 마취하에서 dial thickness gauge를 사용하여 측정하였다.

용매가 도포된 이개의 두께와 항원이 도포된 이개의 두께사이의 차이를 각 마우스에 대해 측정하였다. 그 결과를 표 5에 나타낸다. t-검정에 의한 대조 그룹과의 비교 검정한 결과 이개의 종창에 대해 유의적인 억제 작용을 나타냈다.

표 5 0.5% 피크릴 클로라이드 용액 도포 48시간후의 이개 두께의 증가

(단위: mm)

	대조 그룹	투여 그룹
항원 도포후 이개 두께에서의 증가	0.045±0.003	0.031±0.003**

각 값은 평균치±표준 오차(n=8-9)를 나타낸다.

**: p＜0.01(대조 그룹에 대한 t-검정)

실험 실시예 4

디에틸 아세토아세틸크로모글리케이트의 I형 및 IV형 알레르기성 피부염 억제 작용의 시험

Nogai 등의 방법(Naoki Inagaki and Hiroichi Nagai, The 8th Spring Meeting of Japanese Society of Allergology, 1996)에 따라 I형 및 IV형 알레르기성 피부염에 대한 디에틸 아세토아세틸크로모글리케이트의 억제 작용을 검토하였다.

본 발명에 따르면, I형 알레르기 반응이 IV형 알레르기성 반응외에 항원에 의한 반복 접촉 감작화에 기인하여 유도된다. 따라서, 이 방법은 인간의 아토피성 피부염의 우수한 동물 모델로서 제안되었다. 이 방법을 하기에 상세히 설명한다.

숫컷 6-주령 BALB/c 마우스(Japan SLC, Inc.)를 각각 10 마리의 마우스를 포함하는 대조 그룹과 투여 그룹의 두 그룹으로 분리했다. 각 그룹경우 36일동안 하루에 2회 0.5% 메틸셀룰로즈 용액(10 ml/kg)을 대조 그룹에 강제적으로 경구 투여하고, 디에틸 아세토아세틸크로모글리케이트(100 mg/kg)를 투여 그룹에 강제적으로 경구 투여하였다. 각 마우스의 양쪽 이개의 두께를 투여 1일째의 첫회 투여전에 에테르 마취하에서 dial thickness gauge(Mitutoyo Co.)로 측정하였다. 투여 8일째의 초기 투여후에 각 마우스의 양쪽 이개의 두께를 에테르 마취하에서 dial thickness gauge로 측정하였다. 아세톤-올리브유(혼합비 3:1)에 용해시킨 0.2% 디니트로플루오로벤젠(DNFB)을 좌측 및 우측 이개에 25㎕ 씩 도포하였다. 도포 24시간후, 각 마우스의 양쪽 이개의 두께를 에테르 마취하에서 dial thickness gauge로 측정하였다. 그후, 유사한 조작을 1주 간격으로 4회 반복하였다. 5번째 도포시, 양쪽 이개의 두께를 또한 도포하고 1 시간 및 4시간후에 측정하였다. 각 마우스의 양쪽 이개의 두께에서의 변화를 첫회 도포전 양쪽 이개의 두께의 측정값으로부터 계산하였다. 각 마우스의 좌측 및 우측 이개의 두께에서의 변화값의 평균값을 마우스의 변화값으로 했다. 그 결과를 표 6에 나타낸다.

표 6

0.2% DNFB 용액의 반복 도포에 의해서 이개의 두께에서의 증가

(단위:mm)

	대조 그룹	투여 그룹(100 mg/kg)
1회째 도포전	0.008±0.003	0.008±0.002
1회째 도포 24시간후	0.011±0.002	0.012±0.002
2회째 도포전	0.033±0.003	0.029±0.003
2회째 도포 24시간후	0.048±0.004	0.037±0.003*
3회째 도포전	0.042±0.005	0.035±0.003
3회째 도포 24시간후	0.092±0.009	0.061±0.005**
4회째 도포전	0.049±0.004	0.040±0.005
4회째 도포 24시간후	0.141±0.012	0.095±0.009**
5회째 도포전	0.059±0.006	0.048±0.005
5회째 도포 1시간후	0.098±0.012	0.058±0.007*
5회째 도포 4시간후	0.063±0.007	0.056±0.007
5회째 도포 24시간후	0.182±0.015	0.122±0.010**

각 값은 평균±표준 오차(n=8-9)를 나타낸다.

*: p＜0.05, **:p＜0.01(대조 그룹에 대한 t-검정)

제 1 회 도포전 이개의 두께는 양쪽 그룹에서 차이가 나지 않는다. 0.2% DNFB용액의 반복 도포에 의해 시간에 따라 이개의 두께가 증가하였다. t-검정에 의한 대조 그룹과의 비교 검정은 투여 그룹에 있어서 2회째 도포이후 이개의 종창에 대한 유위적인 억제 작용을 나타냈다.

5회째 도포 1시간후 이개의 두께에 있어서 I형 알레르기성 반응인 일과성 이개 두께의 현저한 증가가 관찰되었다. 그러나, 이개의 종창에 대한 유의적인 억제 작용이 투여 그룹에서 나타났다.

본 발명에서 사용하려는 크로모글릭산 화합물(I)은 항류마티스 작용, 항염증 작용 및 면역조절 작용을 갖는다. 이 화합물은 만성 류마티스성 관절염 증상의 억제에 효과적이고, 통상적인 항류마티스제에 비교해서 부작용이 적다. 그러므로, 활성 성분으로서 이 화합물을 함유하는 본 발명의 항류마티스제는 종래의 항류마티스제보다 안전성이 높고, 류마티스성 관절염의 치료에 유리하게 사용될 수 있다.

본 발명에서 사용되는 크로모글릭산 화합물(I)은 항-I형 알레르기 활성 및 항-IV형 알레르기 활성을 갖고, 통상적인 항알레르기성 제제는 충분한 효과를 나타내는데 실패한, IV형 알레르기 반응에 의해 유도된 접촉성 피부염 및 I형 및 IV형 알레르기성 반응에 의해 유도된 아토피성 피부염에 주로 효과적이다. 그러므로, 활성 성분으로서 이 화합물을 함유하는 본 발명의 알레르기성 피부염 치료제는 일반적으로 IV형 알레르기성 반응이 관여하는 알레르기성 피부염, 특히 항원성 물질과 피부등의 접촉에 의해 야기되는 피부염과 같은 알레르기성 피부염에 효과적인 치료제로서 유리하게 사용될 수 있다.

본 출원은 일본국에 출원된 출원 제 332553/1997 호에 기초하고, 이의 내용은 참고로 본 명세서에 인용된다.

Claims

활성 성분으로서 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 함유하는 류마티스성 질병의 치료제:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
활성 성분으로서 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 함유하는 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료제:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
활성 성분으로서 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 함유하는 I형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료제:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
활성 성분으로서 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 함유하는 접촉성 피부염의 치료제:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
활성 성분으로서 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 함유하는 아토피성 피부염의 치료제:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
유효량의 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 투여하는 것을 포함하는 류마티스성 질병의 치료방법:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
유효량의 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 투여하는 것을 포함하는, IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료방법:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
유효량의 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 투여하는 것을 포함하는, I형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염 치료방법:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
유효량의 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 투여하는 것을 포함하는 접촉성 피부염의 치료방법:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
유효량의 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물을 투여하는 것을 포함하는 아토피성 피부염의 치료방법:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
류마티스성 질병의 치료제를 제조하기 위한 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물의 용도:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료제를 제조하기 위한 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물의 용도:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
I형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료제를 제조하기 위한 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물의 용도:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
접촉성 피부염의 치료제를 제조하기 위한 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물의 용도:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
아토피성 피부염의 치료제를 제조하기 위한 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물의 용도:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
유효량의 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는 류마티스 질병의 치료용 약제학적 조성물:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
유효량의 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는, IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료를 위한 약제학적 조성물:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
유효량의 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는, I형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염의 치료용 약제학적 조성물:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
유효량의 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는 접촉성 피부염의 치료용 약제학적 조성물:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
유효량의 화학식(I)의 크로모글릭산 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는 아토피성 피부염의 치료용 약제학적 조성물:

상기 식에서,

R¹및 R²는 각각 비치환된 저급 알킬이다.
제 16 항의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물은 류마티스성 질병을 치료하는데에 사용될 수 있거나 사용되어야 한다는 그와 관련된 문구를 포함하는 시판 패키지.
제 17 항의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물은 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염을 치료하는데에 사용될 수 있거나 사용되어야 한다는 그와 관련된 문구를 포함하는 시판 패키지.
제 18 항의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물은 I형 및 IV형 알레르기 반응이 관여하는 알레르기성 피부염을 치료하는데에 사용될 수 있거나 사용되어야 한다는 그와 관련된 문구를 포함하는 시판 패키지.
제 19 항의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물은 접촉성 피부염을 치료하는데에 사용될 수 있거나 사용되어야 한다는 그와 관련된 문구를 포함하는 시판 패키지.
제 20 항의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물은 아토피성 피부염을 치료하는데에 사용될 수 있거나 사용되어야 한다는 그와 관련된 문구를 포함하는 시판 패키지.