KR20010017748A

KR20010017748A - 방울비짜루(남옥대)로부터 단리되는 신물질인 아스파올리고닌

Info

Publication number: KR20010017748A
Application number: KR1019990033413A
Authority: KR
Inventors: 김금숙; 박창기; 성재덕; 김현태; 한상익; 곽용호; 임무상
Original assignee: 김강권; 대한민국(관리부서:농촌진흥청)
Priority date: 1999-08-13
Filing date: 1999-08-13
Publication date: 2001-03-05
Also published as: KR100341795B1

Abstract

본 발명은 방울비짜루(남옥대)로부터 단리되어 천연에서 처음으로 보고되는 물질(Aspaoligonin)에 관한 것이다.

Description

방울비짜루(남옥대)로부터 단리되는 신물질인 아스파올리고닌 {ASPAOLIGONIN}

본 발명은 방울비짜루(남옥대)로부터 천연에서 처음으로 단리, 보고되는 물질 아스파올리고닌(Aspaoligonin)에 관한 것이다.

방울비짜루(Asaragus oligoclonos Maxim.)는 백합과에 속하는 다년생 초본으로 약간 육질인 뿌리줄기를 약용으로 쓰며 예로부터 해수, 천식 및 가래가 배출되는 증상에 사용하였다.(중국 본초도감, 려강출판사, 185p) 중국, 일본, 한국 및 러시아에 주로 분포하고 있으며 이 식물로부터 분리된 성분은 보고된 바 없다.

이에 본 발명자들은 방울비짜루(남옥대)로부터 지금까지 천연에서 보고 되지 않은 새로운 스테로이드계 사포닌(Steroid Saponin) 1종을 단리하였다. 단리된 화합물은 분광학적 방법으로 그 구조를 확인하였다.

본 발명은 상기한 바와 같이 동작되는 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여 창안된 것으로서, 본 발명의 주 목적은 아스파올리고닌을 추출하려는데 있다.

도 1 은 아스파올리고닌의 화학 구조도이고,

도 2 는 화학식 1의 화합물의 질량분석스펙트럼도1이고,

도 3 은 화학식 1의 화합물의 질량분석스펙트럼도2이고,

도 4 는 화학식 1의 화합물의 적외선흡광도스펙트럼도이고,

도 5 는 화학식 1의 화합물의 수소핵자기공명스펙트럼도1이고,

도 6 은 화학식 1의 화합물의 수소핵자기공명스펙트럼도2이고,

도 7 은 화학식 1의 화합물의 수소핵자기공명스펙트럼도3이고,

도 8 은 화학식 1의 화합물의 탄소핵자기공명스펙트럼도이고,

도 9 는 화학식 1의 화합물의 무변조증강극성전달스펙트럼(DEPT)도이고,

도 10 은 화학식 1의 화합물의 수소-수소 상관성분광스펙트럼도1

(₁H-₁H COSY 1)이고,

도 11 은 화학식 1의 화합물의 수소-수소 상관성분광스펙트럼도2

(₁H-₁H COSY 2)이고,

도 12 는 화학식 1의 화합물의 헤테로핵다중양자상관성스펙트럼 1

(HMQC 1)도이고,

도 13 은 화학식 1의 화합물의 헤테로핵다중양자상관성스펙트럼 2

(HMQC 2)도이고,

도 14 는 화학식 1의 화합물의 헤테로핵다중결합연결스펙트럼 1

(HMBC 1)도이고,

도 15 는 화학식 1의 화합물의 헤테로핵다중결합연결스펙트럼 2

(HMBC 2)도이고,

도 16 은 화학식 1의 화합물을 추출하는 방법의 흐름도이다.

본 발명은 방울비짜루(남옥대)로부터 단리되는, 화학식 1로 표시되는 아스파 올리고닌을 제공한다.

〈화학식 1〉

이하 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명의 예시일 뿐이므로 본 발명이 하기의 실시예에 의하여 한정되는 것으로 간주되어서는 안된다.

우선 방울비짜루로부터 아스파올리고닌을 단리하는 방법에 관하여 첨부된 도면 도 16을 참고로 하여 설명한다. 건조된 방울비짜루 뿌리줄기 3킬로그램을 분쇄(S100)하여 실온에서 메탄올(MeOH)을 사용하여 5회 추출(S110)하고 여과액을 모아 진공농축(S120)하여 1062그램의 추출물을 얻었다. 이 추출물을 증류수에 현탁하여 에테르(Et₂O)로 3회 탈지(S130)한 후, 수층을 다시 수포화 부탄올(n-BuOH)를 사용하여 5회 추출(S140)하여 부탄올 분획 125그램을 얻었다. 부탄올 분획 30그램을 실리카겔 칼럼 크로마토그라피(용출제, CHCl₃/MeOH/H₂O (20:3:1 → 6:4:1), 기울기 용출)하여 20개의 분획으로 나누었고(S150), 이 중 5번째 분획은 세팍 C₁₈(Sep-Pak C₁₈)를 사용하여 (용출제, H₂O→20%MeOH→100%MeOH, 기울기 용출) 정제(S160)한 후 최종 아스파올리고닌 94밀리그램을 순수하게 단리하였다.

이후 화학식 1의 화합물의 이화학적 특성에 대하여 설명한다.

방울비짜루 뿌리줄기에서 분리한 화학식 1의 화합물의 이화학적 특성은 다음과 같다.

물질의 상상은 흰색 가루상이다.

분자량은 756(FAB⁺(high resolution), m/z:755.5675[M]⁺)

화학식 1의 화합물의 질량분석(MS) 스펙트럼은 도 2, 3에 제시하였다.

본 화합물의 분자식은 C₃₉H₆₄O₁₄로 표현되고, 녹는점은 238~243。C(분해)이다.

비선광도[α]는 -5.4545。(c=0.22, 피리딘)이고, 적외선 흡광도는:3370(OH), 982, 917, 896, 850(인텐서티 917〉896, 23S 스피로케탈)이다. 화학식 1의 화합물의 적외선 흡광도 스펙트럼은 첨부된 도면 도 4에 제시되어있다.

피리딘-d₅을 용매로 하여 측정한 수소 핵자기공명 스펙트럼 결과는 다음과 같고, 표 1과 2에 화학식 1의 화합물의 각 수소에 대한 스펙트럼 데이터를 제시하였고, 도 5, 6, 7에 스펙트럼을 제시하였다.

(피리딘-d₅, δ):- 0.96(3H, s), 1.02(3H, s), 1.07(3H, d, J =7.08Hz), 1.23(3H, d, J=7.08Hz), 4.96(1H, d, J=7.32Hz, H-1 of inner glucose), 5.40(1H, d, J=7.80Hz, H-1 of terminal glucose)

피리딘-d₅을 용매로 하여 측정한 비당부의 탄소 핵자기 공명 스펙트럼 결과는 다음과 같고, 표 1에 화학식 1의 화합물의 비당부의 각 탄소에 대한 스펙트럼 데이터를 제시하였다.

(피리딘-d₅, δ): 9.50, 16.24, 17.42, 21.03, 24.05, 25.73, 26.53, 26.74, 26.81, 27.04, 27.37, 30.65, 30.95, 31.63, 32.50, 35.28, 36.12, 36.90, 40.08, 45.29, 45.46, 52.84, 64.92, 75.28, 90.02, 90.36, 110.25

피리딘-d₅을 용매로 하여 측정한 당부의 탄소 핵자기 공명 스펙트럼 결과는 다음과 같고, 표 2에 화학식 1의 화합물의 당부의 각 탄소에 대한 스펙트럼 데이터를 제시하였다.

(피리딘-d₅, δ): 62.65, 62.85, 71.57, 71.76, 77.03, 77.91, 78.12, 78.20, 78.52, 83.13, 101.89, 105.94

첨부된 도면 도 8에 화학식 1의 화합물의 탄소 핵자기공명스펙트럼을 제시하였다. 표 1의 화학식 1의 화합물의 비당부의 수소 및 탄소핵자기공명스펙트럼 데이터와 표 2의 화학식 1의 화합물의 당부의 수소 및 탄소핵자기공명스펙트럼 데이터에 각각 비당부와 당부의 1차, 2차, 3차 등 탄소의 종류를 제시하였으며 도 9에 무변조증강극성전달스펙트럼을 제시하였다.

도 10, 11에 화학식 1의 화합물의 수소-수소 상관성분광스펙트럼(¹H-¹H COSY)을 제시하였다. 도 12, 13에는 화학식 1의 화합물의 헤테로핵다중양자상관성스펙트럼을 제시하였으며 도 14, 15에는 헤테로핵다중결합연결스펙트럼(HMQC, HMBC)를 제시하였다.

상기한 목적을 달성하기 위해 본 발명을 첨부 도면에 의거하여 좀더 상세히 설명하면 더욱 명백해질 것이다.

하기에서 본 발명을 설명함에 있어, 관련된 공지 기능 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명은 생략할 것이다. 그리고 후술되는 용어들은 본 발명에서의 기능을 고려하여 정의된 용어들로서 이는 사용자, 운용자의 의도 또는 관례 등에 따라 달라질 수 있다. 그러므로 그 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다.

이와 같은 본 발명에 의하면 신물질의 발명으로 이 물질의 약리활성의 검정 후 의약품으로의 개발 가능성이 있으며,

전통적 민간 생약인 방울비짜루(남옥대)는 유효성분이 밝혀지지 않아 지표성분의 설정이 어려우므로 본 발명으로 방울비짜루의 지표 성분 설정 및 생약의 규격화에 적용할 수 있으며,

방울비짜루의 성분 연구로서 새로운 약용작물을 개발, 육성하기 위한 기초 자료로 활용할 수 있는 매우 유익한 발명임이 명백하다.

Claims

방울비짜루(남옥대)로부터 추출된 화학식 1로 표현되는 아스파올리고닌.

〈화학식 1〉
방울비짜루(남옥대)에 있어서,

건조된 방울비짜루 뿌리줄기를 분쇄하는 제 1단계;

분쇄된 뿌리줄기를 실온에서 메탄올을 사용하여 5회 추출하는 제 2단계;

상기 추출물의 여과액을 모아 진공농축하는 제 3단계;

상기 진공농축물을 증류수에 현탁하여 에테르로 3회 탈지하는 제 4단계;

상기 탈지된 물질의 수층을 수포화 부탄올을 사용하여 5회 추출하여 부탄올 분획을 얻는 제 5단계;

상기 부탄올 분획을 실리카겔 칼럼 크로마토그라피하여 20개의 분획으로 나누는 제 6단계;

상기 20개의 분획 중 5번째 분획을 세팍 C₁₈을 사용하여 정제하는 제 7단계를 포함하여 이루어진, 아스파올리고닌 추출 방법.