KR19980039743A - 콜레스테롤 저하제 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 콜레스테롤 저하제 조성물에 관한 것이다. 더욱 구체적으로, 본 발명은 스쿠알렌 합성효소 억제활성이 있는 정향(Caryophylli flos) 추출성분인 유게놀(eugel)을 함유하는 콜레스테롤 저하제 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르는 조성물은 콜레스테롤 생합성 과정에서 스쿠알렌 합성효소를 억제함으로써 결국 혈중 콜레스테롤 농도를 저하시키므로 항고지혈증제 또는 고지혈증의 치료, 예방제 또는 지질대사 개선제 또는 동맥경화치료 및 예방제로 사용될 수 있다.

Description

콜레스테롤 저하제 조성물

본 발명은 콜레스테롤 저하제 조성물에 관한 것이다. 더욱 구체적으로, 본 발명은 정향(Caryophylli flos)의 추출성분인 유게놀을 함유하는 콜레스테롤 저하제 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르는 조성물은 항고지혈증제 또는 고지혈증의 치료, 예방제 또는 지질대사 개선제 또는 동맥경화 치료 및 예방제로 효과적으로 사용할 수 있다.

최근에 생활여건이 향상되고 식생활이 서구화되고, 또한 인간의 수명이 점차 고령화됨에 따라서 고지혈증 환자 및 그로 인한 동맥경화증 환자의 수가 급증하는 추세가 두드러지게 나타나고 있다. 고지혈증이란 음식물을 통하여 콜레스테롤, 중성지방등의 지질이 과잉섭취되거나 지질의 대사이상으로 인해 혈액중에 과잉의 지질이 존재하는 상태이다. 고지혈증은 지질에 동맥벽에 침착하여 나타나는 것으로, 일반적으로 중년 이후에 많이 발생한다. 한편, 젊은 사람에게서도 고지혈증이 나타날 수 있는데, 이는 대부분의 경우에 유전성 대사장해에 의한 것으로, 가족성 고지혈증이라고 일컬어진다. 고지혈증은 동맥경화와 직접적인 관계가 있고, 대동맥, 관상동맥, 뇌저동맥 등에 죽상경화를 일으키기 쉬우며, 특히 관상동맥에 잘 발생하여 협심증과 심근경색의 원인이 되기도 한다. 고지혈증은 전술한 바와 같이 동맥경화등의 혈관장해를 일으키는 원인이 되며, 이에 대한 일반적인 치료방법으로는 식이요법, 치료적 운동 및 약물요법 등과 같은 여러가지 치료법이 실시된다. 이중 약물요법에 사용되는 약제로는 콜레스테롤의 체내흡수를 저해하는 약제, 지질대사를 촉진하는 약제 및 콜레스테롤의 생합성을 저해하는 약제등이 있다. 흡수저해제로서는 음이온교환수지 제제의 콜레스티라민, 리놀산아미드 유도체인 메리나미드 및 대두유의 불검화물인 소이스테롤 등이 있으며, 지질대사를 촉진하는 약제로는 리포단백질 리파제의 활성을 높이고, 리포단백질의 이화작용을 촉진시키는 헤파린 및 덱스트란황산 등이 있다. 생합성저해제로서는 프로브콜과 클로피브레이트 제제 및 3-히드록시-3-메틸글루타릴 조효소 A(HMG-CoA) 환원효소의 저해제인 로바스타린 등이 알려져 있다. 그러나, 이러한 약제들은 경미하지만 소화기 증상, 간장해, 소화관 장해 및 담석증 등의 부작용이 있는 것으로 알여져 있다.

한편, 콤팩틴(Compactin)등의 HMG-CoA 환원효소 저해제에 대한 기초적인 연구에 의해 동물세포에 있어서의 콜레스테롤 대사조절기구에 관한 중요한 지식들이 많이 얻어졌다. 그중 하나로는 동물세포의 생육에 있어서는 콜레스테롤 이상으로 메바론산 이후의 이소펜테닐피로린산 및 팔네실피로린산으로부터 생성되는 비스테롤 산물이 중요하다는 지적이 있다[참고：J.L. Goldstein 및 M.S. Brown, Nature, 343, 425-430(1990)].

따라서, 본 발명의 목적은 생체내에서 콜레스테롤 생합성을 효과적으로 억제시킬 수 있는 콜레스테롤 저하제 조성물을 제공하는데 있다.

더욱 구체적으로, 본 발명의 목적은 인체내에서의 콜레스테롤 생합성 경로에서 스쿠알렌 합성울 저해시킴으로서, 혈중콜레스테롤 및 저밀도 리포단백질 콜레스테롤(LDL-C) 농도를 저하시키는 콜레스테롤 저하제 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명자들은 천연물로부터 스쿠알렌 합성을 저해하는 물질을 면밀히 탐색한 결과, 정향의 추출성분인 유게놀(eugenol)이 전술의 활성을 가지고 있음을 확인하였다. 유게놀은 1929년에 발견되어, 현재 바니린 제조원료, 향료외에 의약품으로는 소독, 해열제, 충치예방 충전제 및 위궤양의 치료제 등으로 널리 사용되고 있으나, 콜레스테롤 생합성에 대한 유케놀의 영향에 대하여는 본 발명이전에 알려져 있지 않았다.

따라서, 본 발명은 정향의 추출성분인 유게놀을 유효성분으로서 함유하는 콜레스테롤 저하제 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 따르는 콜레스테롤 저하제 조성물에서 유효성분으로 사용되는 유게놀은 정향(Caryophylli flos)으로부터 추출되는 정유성분으로서 그의 성상은 다음과 같다.

화학명 : 2-메톡시-4-(2-프로페닐)페놀

분자식 : C₁₀H₁₂O₁₂

분자량 : 164.20

구조식 :

융 점 : -9.2 내지 -9.1℃

성 상 : 무색 혹은 담황색 액체이며, 정향향기가 있다.

용해성 : 알콜, 클로로포름, 에테르에 잘 용해되며, 물에 불용성이다.

본 발명은 이하의 실험예에 의해 더욱 구체적으로 설명되나, 본 발명이 이들에 의해 어떤 식으로든 제한되는 것은 아니다.

(시험예 1 : 콜레스테롤 합성저해 효과)

각 시험화합물을 쥐의 간 마이크로솜 분획(0.1㎎의 단백질 함유) 및 세포질 분획(1㎎의 단백질 함유)에 1mM ATP, 6mM 글루타치온, 5mM 글루코오스-포스페이트, 0.04mM CoA, 0.25mM NAD, 0.25mM NADP 및 0.02mM[1-¹⁴C] 아세트산나트륨을 함유한 0.1M 인산칼륨 완충액(pH 7.4)을 가해 전체 용량을 100㎕로 조정한 다음, 반응을 개시시켰다. 반응액을 37℃에서 2시간동안 반응시킨 후, 15% 수산화칼륨(95% 에탄올 용액) 250㎕를 가하여 반응을 정지시켰다. 이어서 75℃에서 1시간동안 경화시키고 빙냉하에서 증류수 250㎕와 석유에테르 500㎕를 가하여 생성된 콜레스테롤을 추출하였다. 추출물을 농축 건조시켜 수득한 잔류물에 대해 액체 신틸레이션 계수기를 사용하여 방사활성을 측정하였다.

대조군에 대하여는 시험화합물을 첨가하지 않는 것을 제외하고는, 전술한 방법과 동일하게 시험을 수행하였다.

시험화합물의 각각의 농도에서 얻어진 콜레스테롤 생합성 저해효과는 대조군의 방사활성과 비교하여 다음의 식을 이용하여 저해율(%)을 계산함으로써 평가된다.

저해율(%) ＝ (A) － (B) ／ (A)

(상기식에서, (A)는 대조군의 방사활성이며, (B)는 시험군의 방사활성이다)

측정된 결과는 표 1에 나타내었다.

표 1. 콜레스테롤 생합성에 대한 저해효과

(시험예 2 : 스쿠알렌 합성저해 효과)

시험화합물을 쥐의 간 마이크로솜 분획(0.05㎎의 단백질 함유)에 5mM 염화칼륨, 10mM 불화칼륨, 1mM NADPH, 30mM 니코틴아미드, 0.01mM 톨나프테이트 및 0.01mM[1-³H] 팔네실피로포스페이트 암모늄을 함유한 0.1M 인산칼륨 완충액(pH 7.4)을 가해 전체 용량을 100㎕로 조정한 다음, 반응을 개시시켰다. 반응액을 37℃에서 20분 동안 반응시킨 후, 20% 수산화나트륨(95% 에탄올용액) 400㎕를 가하여 반응을 정지시켰다. 이어서 75℃에서 30분 동안 경화시키고, 빙냉하에서 증류수 200㎕와 석유에테르 500㎕를 가하여 생성된 스쿠알렌을 추출하였다. 추출물을 농축 건조시켜 수득한 잔류물을 소량의 클로로포름에 용해시켜 실리카겔 박막 크로마토그라피(전개용매=클로로포름)하여 스쿠알렌을 단리하고 액체 신틸레이션 계수기를 사용하여 방사활성을 측정하였다.

대조군에 대하여는 시험화합물을 첨가하지 않는 것을 제외하고는, 전술한 방법과 동일하게 시험을 수행하였다.

시험화합물의 각각의 농도에서 얻어진 스쿠알렌 합성저해효과는 대조군의 방사활성과 비교하여 다음의 식을 이용하여 저해율(%)을 계산함으로써 평가된다.

저해율(%) = (C)-(D)/(C)

(상기식에서, (C)는 대조군의 방사활성이며, (D)는 시험군의 방사활성이다)

측정된 결과는 표 2에 나타내었다.

표 2. 스쿠알렌 합성에 대한 저해효과

(시험예 3 : 실험적 고지혈증 햄스터에 대한 혈정 콜레스테롤 저하작용)

1) 동물 : 체중 120±5g의 수컷 햄스터(syrian golden, 10-12주령)을 1군에 6마리씩 사용하였다.

2) 사료 : 예비사육 기간에는 마우스용 일반 고형사료(제일제당사 제작)로 사육하였으며, 본 시험기간동안에는 고콜레스테롤 고형사료(콜레스테롤 1%, 콜릭산 0.5% 및 올리브유 5% 함유 고형사료, 일본 오리엔탈 효모사 제작)로 사육하였다.

3) 사육조건 : 온도 25±1℃ 및 습도 55±5%의 사육실에서 12시간 주기로 명암을 바꾸어주면서 2주간의 예비사육시킨후 3군으로 나누었다. 본 시험에서 제1군에는 통상사료, 제2군 및 3군에는 고콜레스테롤 사료를 사용하였으며, 사료와 물은 자유롭게 섭취할 수 있도록 하였다.

4) 실험방법

2주간의 예비사육후에 고콜레스테롤 사료로 10일간 사육하면서, 제3군은 0.2% 메틸셀루로오스에 현탁시킨 유게놀을 400㎎/㎏/5㎖ 용량으로 1일 1회씩, 10일 동안 경구투여하였으며, 제1군 및 2군에는 0.2% 메틸셀루로오스 수용액 만을 경구투여하였다. 시험 10일째에 절식시킨후 햄스터를 희생시켜 혈액을 채취한 후 혈청을 분리하여 혈청내의 트리글리셀라이드(TG), 총 콜레스테롤(TC) 및 고밀도 리포단백질 콜레스테롤(HDL-C) 농도를 혈액 생화학 자동분석기(Ciba-corning사)를 이용하여 측정하였다. 한편, 저밀도 리표단백질 콜레스테롤(LDL-C0) 농도는 다음의 계산식에 의해 산출하였다.

LDL-C = TC - (TG/5 + HDL - C)

측정된 결과는 표 3에 나타내었다.

표 3. 고지혈증 햄스터에 대한 혈청 콜레스테롤 저하효과

* ()내는 제2군의 값을 100%로 했을 때의 퍼센트를 나타냄.

표3에 나타낸 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 본 발명에 따른 유게놀을 사용하였을 경우에는 총 콜레스테롤 및 LDL-C 농도는 현저하게 저하되었다. 따라서, 유게놀은 강한 혈청 지질 저하활성을 가짐을 알 수 있다. 또한, 유게놀은 일정 기간동안 그 약리활성이 지속되므로, 본 발명에 따르는 유게놀을 함유하는 조성물은 고지혈증의 예방 및 치료에 유용한 임상용 약제로 사용될 수 있을 것으로 예상된다.

Claims (3)

1. 유게놀 또는 이의 유도체를 유효성분으로 함유하는 콜레스테롤 저하제 조성물
2. 제1항에 있어서, 경구투여용 제제로 제형화된 콜레스테롤 저하제 조성물.
3. 제1항에 있어서, 고지혈증의 예방 및 치료제로 사용되는 콜레스테롤 저하제 조성물.