KR102667411B1 - 동충하초 인공 재배 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명의 일 실시예에 따른 동충하초 인공 재배 방법은 (a) 겉껍질이 제거된 수수대를 분쇄하여 수수대 배지를 준비하는 단계와, (b) 기 채취된 동충하초 조각을 평판 배지에 배양하여 단포자 균주를 분리하는 단계와, (c) 분리된 단포자 균주를 액체 배지에서 배양하여 동충하초 균액을 제조하는 단계와, (d) 동충하초 재배에 이용되는 곤충의 내장을 제거하고 소독을 진행하는 단계와, (e) 동충하초 재배 용기에 상기 (a) 단계의 수수대 배지 및 상기 (d) 단계의 곤충을 순차적으로 올려놓은 후 밀봉하여 멸균 상태를 유지하는 단계와, 멸균 완료된 동충하초 재배 용기 내에 상기 (c) 단계의 동충하초 균액을 접종한 후 일정 기간 배양하여 동충하초를 생산하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.
Description
본 발명은 동충하초 인공 재배 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 수수대를 이용한 식용 곤충 동충하초의 인공 재배 방법에 관한 것이다.
동충하초는 자낭균류(Ascomycetes) 맥각균목(Clavicipitales) 동충하초과(Clavicipitaceae)에 속하는 소형 버 섯류로서, 겨울에는 곤충 몸속에 있다가 여름에는 풀(草)처럼 돋아 나오는 모습에서 붙여진 이름이다.
동충하초 가 형성되는 메카니즘에 대하여 설명하면, 동충하초균이 분생포자나 자낭포자를 형성하여 살아있는 곤충의 관절, 소화기 등의 부분에 부착한 후 곤충 체내의 영양분을 섭취하면서 균사를 형성하여 결국 곤충을 죽게 만들 고, 겨울이 지나고 여름이 되어 온도와 습도가 높아지면 땅 속에 묻혀 있던 곤충의 몸에서 버섯이 나와 땅 밖으로 돋아나게 된다. 이렇게 동충하초는 균사로 채워진 죽은 곤충과 그 몸에서 나온 버섯을 합친 것을 의미한다.
동충하초는 머리, 자루 및 기주의 세 부분으로 구분되어 있으며, 머리부분은 번식에 쓰이는 포자를 담은 기관이 고 머리부분을 지탱하고 있는 긴 부분이 자루이다. 머리부분과 자루부분을 합쳐 자실체 또는 버섯이라 하며, 자루의 끝 부분은 번데기의 몸에서부터 돋아나 있다. 머리부분은 공 모양, 양끝이 뾰족한 원기둥 모양, 주걱 모양 등으로 불록해지며, 그 표면 또는 표피 아래에 여러 개의 자낭각을 이룬다.
동충하초는 일반적으로 수분, 지방, 조단백, 탄수화물 및 회분으로 구성되어 있으며, 단백질 중에는 인체에 필수적인 아미노산이 약 18종 정도 함유되어 있다. 또한 동충하초에는 충초다당과 충초산과 같은 특수한 성분이 함유되어 있어 빈혈, 피로, 고혈압, 폐결핵, 천식 등의 치료제로 알려져 있고, 곤충에 기생하는 속성 때문에 효과적인 해충방제를 제공하면서도 환경오염을 예방할 수 있는 생물농약으로서의 효용도 매우 크다.
동충하초는 중국에서 예로부터 '황제의 불로장수 비약'으로 전승되어 오던 것으로, 본초강목에도 '상용하면 허약 체질을 튼튼하게 하고 면역력을 높이는 분명한 효과가 있다'라고 기록하고 있으며, 종균 배양 중에 얻어진 균사체는 약용으로 사용되는 만니톨을 생산할 뿐아니라 그 밖의 다른 유용물질을 가진 것으로 알려져 있다. 또한 자실체에는 퀸산(quinic acid)의 이성질체로 알려진 코디세핀(cordycepin)이란 성분을 가지고 있는데, 코디세핀은 기주 곤충에 대해서는 독소로 작용하고 항균, 항바이러스 및 항암 작용을 하는 활성 물질로, 노환과 관련된 각종 질병에 탁월한 효과를 가진 것으로 알려져 있다. 이와 같은 우수한 작용효과에도 불구하고 자연상태로 생장된 동충하초 자실체를 채집하는 것은 매우 어렵기 때문에 동충하초 자실체를 안정적으로 공급하기 위한 인공재배 기술이 요구되고 있다.
등록특허 제10-2053612호는 굼벵이 동충하초의 인공 재배방법에 관한 것으로, (1) 동충하초균을 고체배지에서 배양하여 단포자를 분리하는 단계; (2) 상기 (1) 단계의 분리된 단포자를 액체배지에서 배양하여 동충하초 균액을 준비하는 단계; 및 (3) 상기 (2) 단계에서 준비된 동충하초 균액을 생톱밥, 미강, 설탕 및 EM(effective microorganisms)을 혼합하고 수분 함량을 60~65%로 조절하여 55~65일 동안 발효시킨 발효톱밥배지와 멸균된 굼벵이에 각각 접종하고 23~25℃에서 10~15일 동안 배양하여 동충하초 자실체를 유도하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 굼벵이 동충하초의 인공 재배방법으로서, 상기 EM은 유산균, 효모균 및 고초균을 혼합한 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 실시예는 겉 껍질을 제거하고 분쇄한 수수대 배지를 사용하여 동충하초를 재배함에 따라 곤충 사체 내의 수분 조절을 용이하게 하고, 이로 인해 동충하초가 자연산과같이 자랄 수 있는 최적의 조건이 형성되어 양질의 동충하초를 재배할 수 있는 동충하초 인공 재배 방법을 제공하고자 한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 동충하초 인공 재배 방법은 (a) 겉껍질이 제거된 수수대를 분쇄하여 수수대 배지를 준비하는 단계와, (b) 기 채취된 동충하초 조각을 평판 배지에 배양하여 단포자 균주를 분리하는 단계와, (c) 분리된 단포자 균주를 액체 배지에서 배양하여 동충하초 균액을 제조하는 단계와, (d) 동충하초 재배에 이용되는 곤충의 내장을 제거하고 소독을 진행하는 단계와, (e) 동충하초 재배 용기에 상기 (a) 단계의 수수대 배지 및 상기 (d) 단계의 곤충을 순차적으로 올려놓은 후 밀봉하여 멸균 상태를 유지하는 단계와, 멸균 완료된 동충하초 재배 용기 내에 상기 (c) 단계의 동충하초 균액을 접종한 후 일정 기간 배양하여 동충하초를 생산하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 (a) 단계의 수수대 배지 준비 단계에서 상기 수수대는 옥수수, 단수수, 수수 또는 이들의 조합 중 선택된 어느 하나를 이용할 수 있으며, 상기 분쇄된 수수대에 설탕 또는 증류수를 첨가하여 수분함량을 60 ~ 80%로 조절하는 것을 특징으로 한다.
상기 (b) 단계의 단포자 균주를 분리하는 단계는 상기 채취된 동충하초를 1 ~ 5%의 락스에 10 ~ 20분간 침지하는 단계와, 상기 침지된 동충하초를 꺼내어 멸균수로 세척하는 단계와, 상기 세척된 동충하초를 SDA(sabouraud dextrose agar) 평판 배지 중앙에 접종하고, 20 ~ 25도의 배양기 내에서 10 ~ 20일동안 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 (c) 단계의 동충하초 균액을 제조하는 단계는 상기 액체 배지는 YMB(yeast malt broth)의 액체 배지를 이용하며, 20 ~ 25도의 배양기에서 3 ~ 7일동안 배양하는 것을 특징으로 한다.
상기 (d)단계에서 사용되는 곤충은 굼벵이, 장수 풍뎅이, 귀뚜라미, 거저리 또는 식용 달팽이를 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 (d)단계에서 사용되는 곤충은 상기 곤충을 끓는 물에 2 ~ 7분간 침지하는 단계와, 상기 침지된 곤충을 꺼내어 냉각시키는 단계와, 상기 냉각된 곤충을 절식하여 내장을 제거하는 단계를 더 포함하는 특징으로 한다.
상기 (e) 단계의 상기 동충하초 재배용기는 폴리프로필렌 용기를 사용하며, 상기 재배용기 내에 5 ~ 10g의 수수대를 일정 두께로 배치하고, 상기 수수대 상부에 곤충을 올려놓은 후 고압 멸균기에서 115 ~ 125℃ 에서 15~20분 동안 멸균 과정을 진행하는 단계와, 상기 멸균 과정이 진행된 상기 재배용기를 실온에서 21 ~ 25℃의 온도로 식히는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 한다.
상기 (f) 단계에서 상기 동충하초 균액 접종 후 22 ~ 27℃의 온도 및 60 ~ 80%의 습도에서 300 ~ 500 lux 이하의 광(1일 16시간)을 조사하고, 1일 4 ~ 6회의 환기를 진행하여 10 ~ 13일 동안 배양하는 단계와, 상기 배양 용기 내에 동충하초 자실체의 형성이 확인되면 15 ~ 20℃온도로 조절하여 관리하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 한다.
개시된 기술은 다음의 효과를 가질 수 있다. 다만, 특정 실시예가 다음의 효과를 전부 포함하여야 한다거나 다음의 효과만을 포함하여야 한다는 의미는 아니므로, 개시된 기술의 권리범위는 이에 의하여 제한되는 것으로 이해되어서는 아니 될 것이다.
본 발명의 일 실시예에 따른 동충하초 인공 재배 방법은 겉 껍질을 제거하고 분쇄한 수수대 배지를 사용하여 동충하초를 재배함에 따라 곤충 사체 내의 수분 조절을 용이하게 하고, 이로 인해 동충하초가 자연산과같이 자랄 수 있는 최적의 조건이 형성되어 양질의 동충하초를 재배할 수 있는 효과를 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 동충하초 인공 재배 방법을 설명하기 위한 도면이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예의 수수대 배지 준비 과정을 도시한 사진도이다.
도 3은 본 발명의 일 실시에의 SDA 평판 배지를 설명하기 위한 사진도이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 SDA 평판 배지에 동충하초 균주를 접종한 모습을 도시한 사진도이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 SDA 평판 배지에서 단포자균을 분리한 모습을 도시한 사진도이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에서 사용되는 곤충들의 소독 후 모습 및 재배된 동충하초를 도시한 사진도이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따라 재배된 동충하초를 도시한 사진도이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따라 옥수수대를 이용하여 재배한 굼벵이 동충하초를 도시한 사진도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예의 수수대 배지 준비 과정을 도시한 사진도이다.
도 3은 본 발명의 일 실시에의 SDA 평판 배지를 설명하기 위한 사진도이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 SDA 평판 배지에 동충하초 균주를 접종한 모습을 도시한 사진도이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 SDA 평판 배지에서 단포자균을 분리한 모습을 도시한 사진도이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에서 사용되는 곤충들의 소독 후 모습 및 재배된 동충하초를 도시한 사진도이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따라 재배된 동충하초를 도시한 사진도이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따라 옥수수대를 이용하여 재배한 굼벵이 동충하초를 도시한 사진도이다.
본 발명에 관한 설명은 구조적 내지 기능적 설명을 위한 실시예에 불과하므로, 본 발명의 권리범위는 본문에 설명된 실시예에 의하여 제한되는 것으로 해석되어서는 아니 된다. 즉, 실시예는 다양한 변경이 가능하고 여러 가지 형태를 가질 수 있으므로 본 발명의 권리범위는 기술적 사상을 실현할 수 있는 균등물들을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 또한, 본 발명에서 제시된 목적 또는 효과는 특정 실시예가 이를 전부 포함하여야 한다거나 그러한 효과만을 포함하여야 한다는 의미는 아니므로, 본 발명의 권리범위는 이에 의하여 제한되는 것으로 이해되어서는 아니 될 것이다.
한편, 본 출원에서 서술되는 용어의 의미는 다음과 같이 이해되어야 할 것이다.
"제1", "제2" 등의 용어는 하나의 구성요소를 다른 구성요소로부터 구별하기 위한 것으로, 이들 용어들에 의해 권리범위가 한정되어서는 아니 된다. 예를 들어, 제1 구성요소는 제2 구성요소로 명명될 수 있고, 유사하게 제2 구성요소도 제1 구성요소로 명명될 수 있다.
어떤 구성요소가 다른 구성요소에 "연결되어"있다고 언급된 때에는, 그 다른 구성요소에 직접적으로 연결될 수도 있지만, 중간에 다른 구성요소가 존재할 수도 있다고 이해되어야 할 것이다. 반면에, 어떤 구성요소가 다른 구성요소에 "직접 연결되어"있다고 언급된 때에는 중간에 다른 구성요소가 존재하지 않는 것으로 이해되어야 할 것이다. 한편, 구성요소들 간의 관계를 설명하는 다른 표현들, 즉 "~사이에"와 "바로 ~사이에" 또는 "~에 이웃하는"과 "~에 직접 이웃하는" 등도 마찬가지로 해석되어야 한다.
단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한 복수의 표현을 포함하는 것으로 이해되어야 하고, "포함 하다"또는 "가지다" 등의 용어는 실시된 특징, 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부분품 또는 이들을 조합한 것이 존재함을 지정하려는 것이며, 하나 또는 그 이상의 다른 특징이나 숫자, 단계, 동작, 구성요소, 부분품 또는 이들을 조합한 것들의 존재 또는 부가 가능성을 미리 배제하지 않는 것으로 이해되어야 한다.
각 단계들에 있어 식별부호(예를 들어, a, b, c 등)는 설명의 편의를 위하여 사용되는 것으로 식별부호는 각 단계들의 순서를 설명하는 것이 아니며, 각 단계들은 문맥상 명백하게 특정 순서를 기재하지 않는 이상 명기된 순서와 다르게 일어날 수 있다. 즉, 각 단계들은 명기된 순서와 동일하게 일어날 수도 있고 실질적으로 동시에 수행될 수도 있으며 반대의 순서대로 수행될 수도 있다.
여기서 사용되는 모든 용어들은 다르게 정의되지 않는 한, 본 발명이 속하는 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가진다. 일반적으로 사용되는 사전에 정의되어 있는 용어들은 관련 기술의 문맥상 가지는 의미와 일치하는 것으로 해석되어야 하며, 본 출원에서 명백하게 정의하지 않는 한 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미를 지니는 것으로 해석될 수 없다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 동충하초 인공 재배 방법을 설명하기 위한 도면이다.
도 1을 참조하면, 먼저, 수수대 배지를 준비한다(단계 S100). 수수대(도 2의 '200')는 옥수수, 단수수, 수수 또는 이들의 조합 중 선택된 어느 하나를 이용할 수 있다. 수수대 배지를 준비하는 과정은 다음과 같다. 먼저, 수수대를 건조시킨 후 겉 껍질을 제거한다(도 2의 (a) 참조).
이어서, 건조된 수수대를 분쇄기를 이용하여 일정 크기로 분쇄한다(도 2의 (b) 참조). 분쇄된 수수대에 설탕 또는 증류수를 첨가하여 수수대 배지를 준비한다. 수수대 배지의 수분 함량은 60 ~ 80%로 조절하는 것이 바람직하나 반드시 이에 한정하지는 않는다. 수수대 배지에 한약재를 더 첨가할 수 있다. 한약재는 황기, 하수오 및 이들의 조합 중 선택된 어느 하나를 사용할 수 있다.
다음으로, 동충하초 단포자 균주를 분리한다(단계 S110). 단포자 균주를 분리하는 단계는 자연에서 동충하초 버섯의 신선한 자실체를 채취하고, 채취된 동충하초를 1 ~ 5%의 락스에 10 ~ 20분간 침지한다. 이어서, 침지된 동충하초를 꺼내어 멸균수로 세척한다. 멸균수 세척 과정은 3 ~ 5회 정도 진행하는 것이 바람직하다. 이후, 세척된 동충하초를 무균 시험관에 보관하여 접종을 준비한다.
보관된 동충하초는 수술 칼날을 이용하여 일정 크기로 조각낸다. 이때, 수술 칼날은 멸균하여 사용하는 것이 바람직하다. 이후 일정 크기로 조각 낸 동충하초 조각을 도 3에 도시된 바와 같은 SDA(sabouraud dextrose agar) 평판 배지(300) 중앙에 접종한다(도 4 참조). 이후, 20 ~ 25도의 배양기 내에서 10 ~ 20일동안 배양한다. 상기 동충하초의 단포자 균주가 평판 배지의 2/3 이상 번식하면 평판 배지에서 단포자 균주를 분리한다(도 5 참조).
그 다음, 분리된 단포자 균주를 액체 배지에서 배양하여 동충하초 균액을 제조한다(단계 S120). 상기 액체 배지는 YMB(yeast malt broth)의 액체 배지를 이용하며, 액체 배지 제조 장치에서 제조할 수 있다. 액체 배지는 증류수 1리터에 18 ~ 23g의 YMB를 용해시킨 후 고압 멸균을 진행하여 제조할 수 있다. 액체 배지 배양병에 제조된 액체 배지를 넣고, 분리된 동충하초 단포자 균주를 추가한 후 20 ~ 25도의 배양기에서 3 ~ 7일동안 배양하여 동충하초 균액을 제조한다.
그리고, 동충하초 재배에 사용할 곤충의 배양 전 전처리 과정을 진행한다(단계 S130).
동충하초 재배에 이용되는 곤충은 도 6a에 도시된 바와 같이 굼벵이, 장수 풍뎅이, 귀뚜라미, 거저리, 매미 또는 식용 달팽이를 사용할 수 있다. 일반적으로 굼벵이는 변태를 하는 곤충류에서 나타나는 유충으로, 농가에서 인공사육에 성공한 풍뎅이류 굼벵이로는 장수풍뎅이(Allomyrina dichotoma), 흰점박이꽃무지(Protaetia brevitarsis seulensis), 점박이꽃무지 (Protaetia orientalis submarmorea) 등의 굼벵이가 있으며, 특정 종에 한정하지 않는다. 전처리 과정은 곤충을 끓는 물에 2 ~ 7분간 침지하고, 침지된 곤충을 꺼내어 냉각시킨다. 이어서, 냉각된 곤충을 절식하여 내장을 제거하여 준비하도록 한다. 특히, 굼벵이와 장수 풍뎅이는 내장이나 분변이 완전히 제거되지 않으면 이취감이 있기 때문에 내장 제거 과정을 반드시 진행하는 것이 바람직하다.
이어서, '단계 S110'을 통해 준비된 수수대 배지 및 '단계 S310'을 통해 전처리가 진행된 곤충을 소독한다(단계 S140). 동충하초 재배 용기에 수수대 배지를 편평하게 펼쳐서 올려놓는다. 이때, 상기 동충하초 재배용기는 폴리프로필렌 용기를 사용하는 것이 바람직하며, 수수대 배지는 5 ~ 10g을 사용하는 것이 바람직하다. 본 발명의 일 실시예와 같이 수수대 배지를 이용하면 동충하초의 재배 시 수분 조절이 용이하여 굼벵이를 포함한 곤충 내에서 동충하초가 자라는데 최상의 조건이 되므로 양질의 동충하초를 생산할 수 있다.
상기 수수대 배지 상부에 내장이 제거된 곤충을 올려놓은 후 고압 멸균기에서 115 ~ 125℃ 에서 15~20분 동안 멸균 과정을 진행한다. 멸균 과정이 진행된 재배용기를 실온에서 21 ~ 25℃의 온도로 식혀서 접종을 준비한다.
다음으로, 동충하초 균액을 접종한 후 일정 기간 배양하여 동충하초를 생산한다(단계 S150). '단계 S140'통해 소독된 수수대 배지 및 곤충을 포함하는 재배 용기를 22 ~ 27℃의 온도 및 60 ~ 80%의 습도에서 300 ~ 500 lux 이하의 광(1일 16시간)을 조사하고, 1일 4 ~ 6회의 환기를 진행하여 10 ~ 13일 동안 배양한다.
상기 배양 용기 내에 동충하초 자실체의 형성이 확인되면 15 ~ 20℃온도로 조절하여 관리하며, 총 배양 일수가 15일 이상 지나면 동충하초 자실체가 발생하여 곤충 동충하초를 수확할 수 있다(도 6b 참조). 도 7은 인공 재배된 동충하초를 도시한 사진도로, 도 7의 (a)는 장수 풍뎅이 동충하초, 도 7의 (b)는 귀뚜라미 동충하초, 도 7의 (c)는 거저리 동충하초를 각각 도시한 것이다. 도 8은 옥수수대 배지에 한약재를 첨가하여 재배한 굼벵이 동충하초를 도시한 사진도로, 도 8a는 병에서 재배한 모습을 도시한 사진도이다.
상기 재배방법으로 배양된 동충하초는 인공 재배될 수 있는 종류의 동충하초라면 어느 것이든 적용될 수 있으며, 코디셉스 밀 리타리스(Cordyceps militaris), 코디셉스 타카오몬타나 (Cordyceps takaomontana), 코디셉스 스카라베이콜라 (Cordyceps scarabaeicola), 코디셉스 스페코세팔라(Cordyceps sphecocephala), 코디셉스 트리센트리 (Cordyceps tricentri), 코디셉스 시넨시스(Cordyceps sinensis), 코디셉스 누탄스(Cordyceps nutans), 패실로 마이세스 자포니카(Paecilomyces japonica), 패실로마이세스 테누이페스 (Paecilomyces tenuipes)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상술한 바와 같이, 수수대를 이용하여 동충하초를 인공 재배함으로써, 동충하초가 자연산과 같이 자랄 수 있는 조건이 형성되므로 자연 재배의 어려움을 해소하고 양질의 동충하초를 재배할 수 있는 효과를 제공한다.
상기에서는 본 발명의 바람직한 실시예를 참조하여 설명하였지만, 해당 기술 분야의 숙련된 당업자는 하기의 특허 청구의 범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.
200 : 수수대
300 : SDA 평판 배지
300 : SDA 평판 배지
Claims (8)
- (a) 겉껍질이 제거된 수수대를 분쇄하여 수수대 배지를 준비하고, 상기 수수대는 옥수수, 단수수, 수수 또는 이들의 조합 중 선택된 어느 하나를 이용할 수 있으며, 상기 분쇄된 수수대에 설탕 또는 증류수를 첨가하여 수분함량을 60 ~ 80%로 조절한 다음 황기, 하수오 및 이들의 조합 중 선택된 어느 하나를 더 첨가하는 단계;
(b) 기 채취된 동충하초 조각을 평판 배지에 배양하여 단포자 균주를 분리하는 단계;
(c) 분리된 단포자 균주를 액체 배지에서 배양하여 동충하초 균액을 제조하는 단계;
(d) 동충하초 재배에 이용되는 곤충의 내장을 제거하고 소독을 진행하는 단계;
(e) 동충하초 재배 용기에 상기 (a) 단계의 수수대 배지 및 상기 (d) 단계의 곤충을 순차적으로 올려놓은 후 밀봉하여 멸균 상태를 유지하는 단계; 및
(f) 멸균 완료된 동충하초 재배 용기 내에 상기 (c) 단계의 동충하초 균액을 접종한 후 일정 기간 배양하여 동충하초를 생산하는 단계를 포함하되,
상기 (b) 단계의 단포자 균주를 분리하는 단계는 상기 채취된 동충하초를 1 ~ 5%의 락스에 10 ~ 20분간 침지하는 단계; 상기 침지된 동충하초를 꺼내어 멸균수로 세척하는 단계; 및 상기 세척된 동충하초를 SDA(sabouraud dextrose agar) 평판 배지 중앙에 접종하고, 20 ~ 25도의 배양기 내에서 10 ~ 20일동안 배양하는 단계를 포함하고,
상기 (d)단계의 곤충의 내장을 제거하는 단계는 상기 곤충을 끓는 물에 2 ~ 7분간 침지하는 단계; 상기 침지된 곤충을 꺼내어 냉각시키는 단계; 및 상기 냉각된 곤충을 절식하여 내장을 제거하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 동충하초 인공 재배 방법.
- 삭제
- 삭제
- 제1 항에 있어서,
상기 (c) 단계의 동충하초 균액을 제조하는 단계는
상기 액체 배지는 YMB(yeast malt broth)의 액체 배지를 이용하며, 20 ~ 25도의 배양기에서 3 ~ 7일동안 배양하는 것을 특징으로 하는 동충하초 인공 재배 방법.
- 제1 항에 있어서,
상기 (d)단계에서 사용되는 곤충은 굼벵이, 장수 풍뎅이, 귀뚜라미, 거저리 또는 식용 달팽이를 포함하는 것을 특징으로 하는 동충하초 인공 재배 방법.
- 삭제
- 제1 항에 있어서,
상기 (e) 단계의 상기 동충하초 재배용기는 폴리프로필렌 용기를 사용하며,
상기 재배용기 내에 5 ~ 10g의 수수대를 일정 두께로 배치하고, 상기 수수대 상부에 곤충을 올려놓은 후 고압 멸균기에서 115 ~ 125℃에서 15~20분 동안 멸균 과정을 진행하는 단계; 및
상기 멸균 과정이 진행된 상기 재배용기를 실온에서 21 ~ 25℃의 온도로 식히는 단계;
를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 동충하초 인공 재배 방법.
- 제1 항에 있어서,
상기 (f) 단계에서 상기 동충하초 균액 접종 후
22 ~ 27℃의 온도 및 60 ~ 80%의 습도에서 300 ~ 500 lux 이하의 광(1일 16시간)을 조사하고, 1일 4 ~ 6회의 환기를 진행하여 10 ~ 13일 동안 배양하는 단계; 및
상기 재배 용기 내에 동충하초 자실체의 형성이 확인되면 15 ~ 20℃온도로 조절하여 관리하는 단계
를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 동충하초 인공 재배 방법.
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