KR102661429B1 - 비누풀 추출물을 포함하는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지용 조성물 - Google Patents

비누풀 추출물을 포함하는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR102661429B1
KR102661429B1 KR1020210077147A KR20210077147A KR102661429B1 KR 102661429 B1 KR102661429 B1 KR 102661429B1 KR 1020210077147 A KR1020210077147 A KR 1020210077147A KR 20210077147 A KR20210077147 A KR 20210077147A KR 102661429 B1 KR102661429 B1 KR 102661429B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
fine dust
skin
extract
soap
cosmetic composition
Prior art date
Application number
KR1020210077147A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20220167887A (ko
Inventor
성준엽
조혜선
이승호
Original Assignee
주식회사 한국인삼공사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 한국인삼공사 filed Critical 주식회사 한국인삼공사
Priority to KR1020210077147A priority Critical patent/KR102661429B1/ko
Publication of KR20220167887A publication Critical patent/KR20220167887A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102661429B1 publication Critical patent/KR102661429B1/ko

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

본 발명은 비누풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지용 조성물 및 이를 다양하게 이용하는 기술에 관한 것이다.

Description

비누풀 추출물을 포함하는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지용 조성물{Composition for preventing skin cell death caused by particulate matter comprising saponaria officinalis}
본 발명은 미세먼지에 의한 세포 손상을 방지하는 활성을 갖는 식물 추출물 및 이의 용도에 관한 것이다.
미세먼지(particulate matter)는 눈에 보이지 않을 정도로 작은 크기의 먼지를 말한다. 미세먼지는 아황산가스, 질소 산화물, 납, 오존, 일산화 탄소 등을 포함하는 대기오염 물질이며, 화석 연료 등을 태울 때 생기는 매연, 자동차 배기가스, 건설 현장의 날림 먼지, 공장 내 분말 형태의 원자재, 부자재, 및 소각장 연기 등에서 발생하여 대기 중 장기간 떠다닌다. 통상적으로 입자의 지름이 10μm 이하인 것을 미세먼지로 정의하고, 입자의 지름이 2.5um 이하인 경우 초미세먼지라고 부른다.
이러한 미세먼지는 입자의 지름이 사람 머리카락 굵기의 1/5 내지 1/7배 정도로 매우 작아 인체의 비강, 구강, 기관지에서 걸러지지 않고 깊숙하게 침투된다. 상기의 유해 물질과 흡착된 형태로 몸속에 들어와 기도, 폐, 심혈관, 뇌 등 각 기관의 염증반응을 유발하여 호흡기 질환, 심혈관계 질환들을 유발하거나 이들 질환을 더 악화시키는 것으로 알려져 있다. 또한, 미세먼지는 입자의 크기가 피부의 모공의 5분의 1 정도로 작기 때문에 미세먼지가 피부 안으로 침투하면 피부 바깥 층의 보호막 기능이 손상되고 자극에 대해 민감해진다.
미세먼지에 포함된 다환방향족탄화수소(polycyclic aromatic hydrocarbon, PAH)는 피부 모낭을 통해 피부 속으로 들어와 멜라닌 세포와 색소 반점을 증가시키며, 콜라겐 합성 감소와 분해를 증가시켜 주름 생성 및 탄력을 저하시켜 피부의 노화를 촉진한다. 다환방향족탄화수소는 아릴 탄화수소 수용체(Aryl hydrocarbon receptor, AHR)와 결합하여 핵 내로 이동하고, 핵 내로 이동한 AHR은 ARNT(AHR nuclear translocator)와 복합체 AHR/ARNT를 형성한다. 이 복합체 "AHR/ARNT"는 DNA상 AHRE(AHR responsive element), DRE (Dioxin responsive element), XRE(Xenobiotic responsive element) 서열에 결합하여, 활성산소종(ROS, reactive oxygen species)을 발생시키거나, CYP1A1, CYP1A2, CYP1B1 등의 효소를 통해 독성물질을 발생시켜 세포 손상을 유도하고, 다양한 염증 매개 인자, 멜라닌 합성 관련 전사인자인 작은 안구증 연관 전사 요소(Microphthalmiaassociated transcription factor; Mitf), 주름 생성 관련 효소인 메트릭스 메탈로프로테아제(Matrix metalloproteases; MMPs)의 발현을 증가시켜 피부에서는 피부염, 색소 과형성(기미, 주근깨 등), 주름 등을 일으키게 된다.
기존에 출시된 안티 폴루턴트 제품들은 전하를 이용하여 미세먼지의 피부 흡착을 막거나 피부 장벽을 강화시키는 원료를 사용하고 있었다(KR 2018-0014354 A (2018.02.08)). 이는 미세먼지와 같은 환경오염 물질의 직접적인 작용 기전을 막는 것이 아닌 간접적인 보호 효과를 나타낸다. 환경오염 물질이 피부에 직접 접촉되어 피부 세포에 영향을 줄 경우 이를 저해시키는 원료나 제품의 개발은 미미한 실정이다.
본 발명의 일 목적은 미세먼지에 의해 유도되는 세포의 손상을 효과적으로 방지하는 활성을 보유한 식물 추출물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 일 목적은 상기 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 피부세포 손상 방지용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 일 목적은 상기 식물 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의해 유발되는 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 측면은 비누풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명의 다른 측면은 비누풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 피부세포 손상 방지용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 측면은 비누풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의해 유발되는 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 비누풀 추출물은 미세먼지에 의한 세포 손상 방지 활성이 매우 우수하여, 미세먼지로부터 피부 세포의 손상을 보호하기 위한 활성 물질로 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 비누풀 추출물은 미세먼지에 의해 유발되는 다양한 질환의 치료제로도 개발될 수 있다.
본 발명의 효과는 상기에서 언급한 효과로 제한되지 아니하며, 언급되지 않은 또 다른 효과들은 하기의 기재로부터 당업자에게 명확히 이해될 수 있을 것이다.
도 1은 인간 각질형성세포 HaCaT에서 미세먼지 처리에 의해 감소된 세포 성장율이 비누풀 추출물의 처리에 의해 뚜렷하게 증가함을 보여주는 그래프이다.
도 2는 인간 각질형성세포 HaCaT에서 미세먼지 처리에 의해 증가된 CYP1A1의 발현이 비누풀 추출물의 처리에 의해 뚜렷하게 감소함을 보여주는 그래프이다. 여기서 대조구는 비누풀 추출물 대신 α-Naphthoflavone(α-NF)을 처리한 양성대조군을 의미한다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 일 측면은 비누풀(Saponaria officinalis) 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지용 조성물을 제공한다.
상기 “비누풀(Saponaria officinalis)”은 석죽과에 속하며, 이의 아종, 변종을 포함함은 물론이다. 또한, 본 발명의 비누풀은 당업계에서 자명하고 본 발명의 예방, 개선 및 치료 목적과 동일 또는 유사한 용도로 사용할 수 있는 동속생약을 포함한다.
상기 “추출물”은 상기 비누풀의 추출처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 예를 들어, 본 발명의 상기 추출물은 추출 후 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있다.
상기 비누풀 추출물은 비누풀의 천연, 잡종 또는 변종 식물로부터 추출될 수 있고, 식물 조직 배양물로부터도 추출할 수 있다. 또한, 비누풀의 잎, 줄기, 뿌리, 꽃, 및 씨앗 등으로부터 추출될 수 있다.
상기 비누풀 추출물을 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등일 수 있고, 이들은 단독으로 수행되거나 2종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.
상기 비누풀 추출물을 추출하는데 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올 등의 C1~C4의 저급 알코올; 글리세린, 부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 등의 다가 알코올; 및 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 아세톤, 벤젠, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 탄화수소계 용매; 또는 이들의 혼합물을 사용할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 상기 비누풀 추출물은 비누풀을 물, C1~C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출할 수 있다.
상기 미세먼지(particulate matter, PM)는 입자 지름이 10 μm 이하인 것으로 외부로부터 세포 내에 유입되어 세포의 성장과 정상적인 대사 과정을 방해할 수 있는 화합물이라면 어느 것이든 포함할 수 있고, 예를 들어 다환방향족 탄화수소(polycyclic aromatic hydrocarbons, PAHs)를 포함 할 수 있다.
상기 다환방향족 탄화수소는 세포 내부로 유입되면 AhR과 결합하여 여러 유전자군의 발현을 유도할 수 있고, 이에 따라 CYP1A1, CYP1A2, CYP1B1, COX-2, MMPs 등의 발현이 증가되어 나타날 수 있는바, 상기와 같은 유전자들의 발현량의 변화를 확인함으로써 상기 비누풀 추출물의 미세먼지에 대산 세포 보호 효과를 확인할 수 있다.
상기 “미세먼지에 의한 세포 손상”은 미세먼지에 의해 유도된 활성 산소종 또는 독성물질에 의해 유도될 수 있으며, 이에 따라 세포 성장 억제나 세포사멸이 진행될 수 있고 피부세포에서 이를 구성하는 각종 섬유 단백질의 합성이 저해되고 분해 효소의 발현이 증가될 수 있다.
상기 “세포 손상”은 피부 세포, 호흡기 세포 또는 각막 세포의 손상 일 수 있다.
본 발명의 구체적인 실시예에서는 상기 비누풀 추출물이 가지는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지 효과를 확인하기 위하여, 각질형성세포에 미세먼지와 함께 비누풀 추출물을 처리하여 세포 성장률을 확인한 결과, 미세먼지에 의해 감소된 세포 성장률이 비누풀 추출물의 처리에 의해 증가하는 것을 확인하였다.
또한, 상기 비누풀 추출물의 미세먼지에 의한 세포 손상 방지의 작용 기전을 확인하기 위하여, 각질형성세포에 미세먼지와 함께 비누풀 추출물을 처리하여 CYP1A1의 발현량을 확인한 결과, 미세먼지에 의해 증가된 CYP1A1의 발현이 비누풀 추출물의 처리에 의해 뚜렷하게 감소하는 것을 확인하였다.
따라서, 상기 비누풀 추출물은 미세먼지의 세포 내 유입에 의한 세포의 손상을 방지하고, 미세먼지의 직접적인 작용 기전을 억제할 수 있는 활성을 가짐이 분명하므로, 상기 비누풀 추출물을 미세먼지에 의한 세포 손상 방지를 위한 조성물의 유효성분으로 유용하게 사용할 수 있다.
본 발명의 다른 일 측면은 비누풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 세포 손상 방지용 화장료 조성물을 제공한다.
상기 미세먼지에 의한 피부 세포의 손상은 예컨대 피부노화, 피부 주름의 증가, 피부 탄력의 손상, 피부 색의 손상, 색소 과형성, 기미, 주근깨, 피부의 건조, 피부 염증, 접촉성 피부염, 아토피성 피부염, 또는 건선을 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 피부 노화, 피부 주름의 증가, 피부 탄력의 손상, 피부 색의 손상, 색소 과형성, 기미, 주근깨, 피부의 건조, 피부 염증, 접촉성 피부염, 아토피성 피부염, 또는 건선의 개선을 위한 용도로 사용할 수 있다.
상기 화장료 조성물은 비누풀 추출물의 화장품학적 유효량(cosmetically effective amount); 및 화장품학적으로 허용되는 담체를 포함할 수 있다.
상기 "화장품학적 유효량"은 본 발명의 조성물이 미세먼지에 의한 피부 세포 손상 방지 효능을 달성하는 데 충분한 양을 의미한다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다. 본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르를 이용할 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
상기 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
상기 화장료 조성물은 유효성분으로서의 비누풀 추출물과 상기 담체 성분 이외에, 화장료 조성물에 통상적으로 사용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제를 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 일 측면은 비누풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의해 유발되는 질환의 치료 또는 예방용 조성물을 제공한다.
상기 “예방”은 미세먼지에 의해 유발되는 질환으로 인한 증상 또는 이의 합병증으로 인한 증상의 발생의 억제를 의미한다.
상기 용어 “치료”는 이미 발생된 미세먼지에 의해 유발되는 질환 또는 이 질환의 합병증으로 인한 증상의 경감 또는 제거를 의미한다.
상기 미세먼지에 의해 유발되는 질환은 피부 염증, 아토피 피부염, 접촉성 피부염, 지루성 피부염, 여드름, 피부건조증 및 건선으로 구성되는 군에서 선택되는 질환일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
상기 약학적 조성물은 비누풀 추출물의 치료학적 유효량(therapeutically effective amount); 및 약학적으로 허용되는 담체를 포함한다.
상기 "치료학적 유효량"은 본 발명의 조성물이 미세먼지에 의해 유발되는 질환의 치료 또는 예방 효능을 달성하는 데 충분한 양을 의미한다.
상기 약학적으로 허용되는 담체는 제제 시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.
상기 약학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구 투여인 경우에는 정맥내 주입, 피하 주입, 근육내 주입, 복강내 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있다.
상기 약학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다.
상기 약학적 조성물의 일일 투여량은 0.0001~100 mg/kg으로, 바람직하게는 0.001~30 mg/kg의 양을 1일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 아울러, 투여 기간은 1일 내지 2개월일 수 있으나, 질환의 예방 또는 치료 효과가 나타날 때까지 제한 없이 투여될 수 있다.
상기 약학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이 때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
[제조예]
비누풀 추출물의 제조
비누풀(Saponaria officinalis)의 잎과 줄기, 뿌리 및 종자 각각을 건조시켜 분말로 가공한 것을 농촌진흥청의 인삼특작부로부터 공급받아 실험에 사용하였다.
1-1. 비누풀 잎/줄기 추출물의 제조
상기 비누풀 잎과 줄기의 분말 10g에 중량 대비 10배수로 70%(v/v) 에탄올 수용액을 가하여 24시간 동안 25℃에서 추출하여 비누풀 잎/줄기 추출물을 수득하였다. 수득한 비누풀 잎/줄기 추출물을 0.45um 포어 필터로 여과한 후 감압 농축하고 건조하여 비누풀 잎/줄기 추출물 분말을 수득하였다.
1-2. 비누풀 뿌리 추출물의 제조
상기 비누풀 뿌리의 분말 10g에 중량 대비 10배수로 70%(v/v) 에탄올 수용액을 가하여 24시간 동안 25℃에서 추출하여 비누풀 뿌리 추출물을 수득하였다. 수득한 비누풀 뿌리 추출물을 0.45um 포어 필터로 여과한 후 감압 농축하고 건조하여 비누풀 뿌리 추출물 분말을 수득하였다.
1-3. 비누풀 종자 추출물의 제조
상기 비누풀 종자의 분말 10g에 중량 대비 10배수로 70%(v/v) 에탄올 수용액을 가하여 24시간 동안 25℃에서 추출하여 비누풀 종자 추출물을 수득하였다. 수득한 비누풀 종자 추출물을 0.45um 포어 필터로 여과한 후 감압 농축하고 건조하여 비누풀 종자 추출물 분말을 수득하였다.
[실험예 1]
미세먼지에 대한 비누풀 추출물의 피부세포 보호 효과
1-1. 각질형성세포의 준비
실험에 사용한 HaCaT 세포주는 (ATCC, USA)에서 구입하였고 10% FBS 및 1% penicillin/streptomycin을 포함한 DMEM 배지로 37℃, 5% CO2 조건 하에서 배양하였다.
1-2. 미세먼지의 준비
일반적인 디젤 배출가스 입자의 직경이 0.01~10 μm인 것을 고려하여, 0.5 μm 미만의 미세한 입자로 구성된 카본블랙(Sigma, USA)을 미세먼지로 사용하였다.
1-3. MTT 분석
미세먼지 처리에 의한 피부세포의 손상을 비누풀 추출물이 억제할 수 있는지 확인하기 위해 피부세포를 미세먼지에 노출시킨 다음 비누풀 추출물을 농도별로 처리한 후 MTT 분석을 수행하였다.
구체적으로, HaCaT 세포를 1 X 104 cells/well 밀도로 96 well plate에 분주하여 16 시간 배양하였다. Serum-free DMEM 배지 조건에서 50 μg/mL의 카본블랙을 1 시간 전에 처리 한 후 제조예 1에 의해 수득한 비누풀 잎/줄기 추출물을 농도별로 처리하여 24 시간 동안 배양 하였다. 이때, 양성대조군은 비누풀 잎/줄기 추출물 대신 α-Naphthoflavone(α-NF)을 카본블랙과 함께 희석하여 처리하였다. 비누풀 잎/줄기 추출물 대신 5 mg/mL MTT 용액을 각 well에 20 μL씩 첨가하고 3 시간 동안 37 ℃ 조건에서 배양을 진행한 후 배지를 제거하고 DMSO 200 μL를 처리하여 포마잔(formazan)을 녹여냈다. 분광광도계(Biotek, USA)를 사용하여 562 nm에서의 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이 미세먼지 처리에 의해 감소된 각질형성세포의 성장율(proliferation(%))이 비누풀 추출물에 의해 농도의존적으로 유의하게 회복되는 것을 관찰하였다. 특히, 비누풀 잎/줄기 추출물을 50 μg/mL 처리하면 미세먼지 단독처리군에 비해 세포 성장율이 41.5% 증가하는 것을 확인하였다.
이로부터 비누풀 추출물이 미세먼지에 의한 피부세포의 손상을 억제하는 것을 알 수 있다.
[실험예 2]
비누풀 추출물의 추출 부위별 피부세포 보호 효과
미세먼지에 의해 유도되는 피부세포의 손상 억제 효과가 비누풀의 추출 부위에 따라 달라지는지 확인하기 위해 제조예 1 내지 3에서 수득한 비누풀 잎/줄기 추출물, 비누풀 뿌리 추출물 및 비누풀 종자 추출물을 농도별로 처리한 후 MTT 분석을 수행하였다. 비누풀 추출물의 종류를 달리한 것을 제외하고는 상기 실험예 1과 동일한 방법으로 실험을 수행하였고, 그 결과를 [표 1]에 나타내었다.
미세먼지 대비
피부세포활성평가
(%) 		　미처리군 미세먼지 처리군
미세먼지 단독 양성
대조군 		실시예
12.5
(μg/mL) 		25
(μg/mL) 		50
(μg/mL)
비누풀 잎/줄기 추출물 187.81 0 99.45 6.07 17.62 41.47
비누풀 뿌리 추출물 2.26 -0.21 1.65
비누풀 종자 추출물 5.51 3.67 7.14
그 결과, 비누풀 잎/줄기 추출물을 처리하였을 때 미세먼지 처리에 의해 감소된 각질형성세포의 성장율이 현저하게 증가하는 것으로 관찰되었고, 비누풀 뿌리 추출물은 50 μg/mL의 농도에서도 유의적인 변화가 없는 것으로 관철되었다.
[실험예 3]
비누풀 추출물에 의한 CYP1A1의 발현 감소 효과
AhR은 리간드와 결합한 후 핵 내로 이동하여 ARNT와 복합체를 형성한 후 xenobiotic responsive element (XRE)에 결합하여 CYP1A1의 발현을 증가시키는 것으로 알려져 있다. 미세먼지 내에 포함된 AhR 리간드로 알려진 PAHs의 자극을 비누풀 추출물이 억제하는지 확인하기 위해 하위 유전자인 CYP1A1의 발현 정도를 관찰하였다.
구체적으로, HaCaT 세포를 3.5 X 105 cells/well 밀도로 6 well plate에 분주하여 24시간 동안 배양 하였다. 배지를 제거하고 FBS 2%가 함유된 DMEM 배지에 제조예 1에 의해 수득한 농도 별 비누풀 잎/줄기 추출물과 카본블랙을 함께 희석하여 18시간 처리하였다. 이때, 양성대조군은 비누풀 잎/줄기 추출물 대신 α-Naphthoflavone(α-NF)을 카본블랙과 함께 희석하여 처리하였다. 이후 세포를 회수하여 RNA를 분리하였다. 그 다음, RNA 정량 후 preRNA, oligo dT, DEPC DW를 합한 뒤 65℃에서 5분간 반응시키고 얼음에 5분간 시료를 옮겨 놓은 뒤 42℃에서 1시간, 70℃에서 10분간 반응시켜 cDNA를 합성하였다. PCR 프리믹스 및 하기 표 2의 CYP1A1에 대한 프라이머를 이용하여 PCR을 진행하였다. 그 후, 2% 아가로오즈 겔에 러닝하여 CYP1A1의 mRNA 발현 정도를 비교하였다.
서열번호 프라이머 서열 (5'->3')
1 CYP1A1_F TCTTTCTCTTCCTGGCTATC
2 CYP1A1_R CTGTCTCTTCCCTTCACTCT
그 결과, 도 2에 나타난 바와 같이 HaCaT 세포에 50 μg/mL의 카본블랙을 처리하였을 때 증가된 CYP1A1 발현이 비누풀 추출물의 처리에 의해 농도 의존적으로 유의한 감소를 보였다. 특히 비누풀 잎/줄기 추출물을 50 μg/mL 처리하면 미세먼지에 의해 증가된 CYP1A1 mRNA 발현 수준이 31.8% 감소되는 것을 확인하였다.
이로부터, 비누풀 추출물은 미세먼지의 작용 기전을 직접적으로 억제함으로써 미세먼지에 의한 세포 손상을 방지하는 것을 알 수 있다.
<110> Korea Ginseng Corporation <120> Composition for preventing skin cell death caused by particulate matter comprising saponaria officinalis <130> 2021-DPA-4068 <160> 2 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Forward primer for CYP1A1 <400> 1 tctttctctt cctggctatc 20 <210> 2 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Reverse primer for CYP1A1 <400> 2 ctgtctcttc ccttcactct 20

Claims (13)

  1. 비누풀 추출물을 유효성분으로 포함하는 미세먼지에 의한 피부 세포 손상의 방지 또는 회복용 화장료 조성물로서,
    상기 비누풀 추출물은 비누풀의 잎 및 비누풀의 줄기로 구성되는 군에서 선택되는 적어도 하나의 추출물이고,
    상기 미세먼지에 의한 피부 세포 손상은 CYP1A1이 과발현되는 것이고,
    상기 화장료 조성물은 미세먼지에 노출된 피부 세포의 세포사멸(apoptosis)을 억제하는 것인, 화장료 조성물.
  2. 삭제
  3. 청구항 1에 있어서,
    상기 추출 용매는 물, C1~C4의 알코올 또는 이들의 혼합 용매인 것인, 화장료 조성물.
  4. 삭제
  5. 삭제
  6. 청구항 1에 있어서,
    상기 미세먼지는 다환방향족 탄화수소(polycyclic aromatic hydrocarbons, PAHs)를 포함하는 것인, 화장료 조성물.
  7. 삭제
  8. 청구항 1에 있어서,
    상기 화장료 조성물은 피부 노화, 피부 주름의 증가, 피부 탄력의 손상, 피부의 건조, 피부 염증, 접촉성 피부염, 아토피성 피부염, 및 건선으로 구성되는 군에서 선택되는 적어도 하나를 예방 또는 개선하기 위한 것인, 화장료 조성물.
  9. 삭제
  10. 삭제
  11. 삭제
  12. 삭제
  13. 삭제
KR1020210077147A 2021-06-15 2021-06-15 비누풀 추출물을 포함하는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지용 조성물 KR102661429B1 (ko)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020210077147A KR102661429B1 (ko) 2021-06-15 2021-06-15 비누풀 추출물을 포함하는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지용 조성물

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020210077147A KR102661429B1 (ko) 2021-06-15 2021-06-15 비누풀 추출물을 포함하는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지용 조성물

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20220167887A KR20220167887A (ko) 2022-12-22
KR102661429B1 true KR102661429B1 (ko) 2024-04-26

Family

ID=84578221

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020210077147A KR102661429B1 (ko) 2021-06-15 2021-06-15 비누풀 추출물을 포함하는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지용 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR102661429B1 (ko)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006348054A (ja) 2006-09-22 2006-12-28 Fancl Corp リパーゼ阻害剤
RU2673068C1 (ru) 2017-07-28 2018-11-22 Акционерное общество "Скинкеа" (АО "Скинкеа") Косметическая композиция на основе экстрактов двух растений

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3759714B2 (ja) * 2001-12-27 2006-03-29 株式会社資生堂 幹細胞因子の産生・放出の抑制による掻痒、肌荒れ、敏感肌及び美白用薬剤
KR101821712B1 (ko) * 2013-08-22 2018-01-24 주식회사 아데나 삼칠근 추출물, 비누풀잎 추출물, 검정콩 잎 추출물, 녹두 잎 추출물 및 호랑이콩 잎 추출물을 포함하는 Ｔｈ2-매개 면역 질환 개선, 예방 또는 치료용 조성물

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006348054A (ja) 2006-09-22 2006-12-28 Fancl Corp リパーゼ阻害剤
RU2673068C1 (ru) 2017-07-28 2018-11-22 Акционерное общество "Скинкеа" (АО "Скинкеа") Косметическая композиция на основе экстрактов двух растений

Also Published As

Publication number Publication date
KR20220167887A (ko) 2022-12-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Roy et al. Current updates on Centella asiatica: phytochemistry, pharmacology and traditional uses
KR102065171B1 (ko) 대기오염물질에 의한 피부 손상 방지 및 항노화용 펩타이드와 이의 용도
JP2884466B2 (ja) シソ抽出液、その製造方法およびそれを含有する美白化粧料
KR20190026692A (ko) 신규한 흰무늬엉겅퀴 수과 추출물 및 피부과 및 피부 화장료에서 이의 용도
KR100708779B1 (ko) 리포좀으로 안정화 된 우렁쉥이 또는 멍게 외막 추출물을함유하는 피부 노화 억제 및 주름 개선 화장료 조성물
KR102661429B1 (ko) 비누풀 추출물을 포함하는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지용 조성물
KR100530843B1 (ko) 동충하초 추출물을 유효성분으로 포함하는 항염 조성물
KR102674274B1 (ko) 진세노사이드 Rh1을 포함하는 미세먼지에 의한 세포 손상 방지용 조성물
KR20230135528A (ko) 아스타잔틴, 표피성장인자 및 천연물 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물
KR20180081327A (ko) 사삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부외용제 조성물
KR20130140378A (ko) 민들레 추출물을 포함하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물
JPH07252128A (ja) 皮膚外用剤
JP2007045733A (ja) ヒアルロニダーゼ阻害剤
KR20160069919A (ko) 삼채 추출물을 포함하는 항염증제
KR102481125B1 (ko) 며느리배꼽 추출물을 포함하는 피부 안티폴루션용 조성물
KR20170059615A (ko) 대기오염물질에 의한 피부손상 방지용 화장료 조성물
KR100789634B1 (ko) 멜라닌 생성 억제 활성을 갖는 식물 추출물을 함유하는피부미백용 화장료
JP3673740B2 (ja) 活性酸素消去剤
KR20010018668A (ko) 육계피 추출물을 함유하는 화장료 조성물
KR20020061196A (ko) 황금 추출물을 함유하는 화장료 조성물
JP2005194239A (ja) セラミド合成促進剤及び皮膚外用剤
KR20240009322A (ko) 병풀 유래의 난용성 펜타사이클릭 트리테르페르펜 계열 화합물의 오일 에멀전 및 이를 함유하는 피부 재생, 항염 및 피부자극 완화효능을 갖는 화장료 조성물
KR101549148B1 (ko) 가신새 에탄올 추출물을 유효성분으로 포함하는 자외선에 의한 피부세포 보호용 및 치료용 조성물
KR102673345B1 (ko) 병풀, 컴프리, 및 수국 추출물을 포함하는 피부 개선용 조성물
KR20190029324A (ko) 식물 추출물을 포함하는 피부 가려움증 완화용 화장료 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
E902 Notification of reason for refusal
AMND Amendment
E601 Decision to refuse application
AMND Amendment
X701 Decision to grant (after re-examination)
GRNT Written decision to grant