KR102638321B1 - 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 신규 화합물 및 이의 용도 - Google Patents
바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 신규 화합물 및 이의 용도 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102638321B1 KR102638321B1 KR1020220012335A KR20220012335A KR102638321B1 KR 102638321 B1 KR102638321 B1 KR 102638321B1 KR 1020220012335 A KR1020220012335 A KR 1020220012335A KR 20220012335 A KR20220012335 A KR 20220012335A KR 102638321 B1 KR102638321 B1 KR 102638321B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- present
- compound
- oral
- biofilm
- biofilm formation
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 76
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 title description 13
- 230000003214 anti-biofilm Effects 0.000 title 1
- 230000032770 biofilm formation Effects 0.000 claims abstract description 74
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims abstract description 65
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims abstract description 65
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 63
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims abstract description 45
- 241000194019 Streptococcus mutans Species 0.000 claims abstract description 33
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 30
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 28
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 23
- 201000001245 periodontitis Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 29
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 20
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 15
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 7
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 7
- 208000028169 periodontal disease Diseases 0.000 claims description 7
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940034610 toothpaste Drugs 0.000 claims description 5
- 239000000606 toothpaste Substances 0.000 claims description 5
- 208000007565 gingivitis Diseases 0.000 claims description 4
- 239000002324 mouth wash Substances 0.000 claims description 4
- 229940051866 mouthwash Drugs 0.000 claims description 4
- 229940042125 oral ointment Drugs 0.000 claims description 4
- 229940041678 oral spray Drugs 0.000 claims description 4
- 239000000668 oral spray Substances 0.000 claims description 4
- 239000002966 varnish Substances 0.000 claims description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 69
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 58
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 abstract description 29
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 abstract description 29
- 208000025157 Oral disease Diseases 0.000 abstract description 16
- 208000002925 dental caries Diseases 0.000 abstract description 16
- 208000030194 mouth disease Diseases 0.000 abstract description 16
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 22
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 18
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 17
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerol Substances OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 10
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 10
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 10
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 9
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 9
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 9
- 241000377364 Streptococcus rubneri Species 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 8
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 7
- -1 alkaline earth metal salt Chemical class 0.000 description 7
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 7
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 7
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 6
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 6
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 6
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 6
- OARRHUQTFTUEOS-UHFFFAOYSA-N safranin Chemical compound [Cl-].C=12C=C(N)C(C)=CC2=NC2=CC(C)=C(N)C=C2[N+]=1C1=CC=CC=C1 OARRHUQTFTUEOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010055629 Glucosyltransferases Proteins 0.000 description 5
- 102000000340 Glucosyltransferases Human genes 0.000 description 5
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 5
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 241000192132 Leuconostoc Species 0.000 description 4
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000194024 Streptococcus salivarius Species 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 4
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 4
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 4
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 4
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002670 Fructan Polymers 0.000 description 3
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 3
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 3
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 102100031262 Deleted in malignant brain tumors 1 protein Human genes 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 2
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 2
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- 101000844721 Homo sapiens Deleted in malignant brain tumors 1 protein Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186606 Lactobacillus gasseri Species 0.000 description 2
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 description 2
- 241000917009 Lactobacillus rhamnosus GG Species 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 2
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 101150106026 brpA gene Proteins 0.000 description 2
- 239000002034 butanolic fraction Substances 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 238000002856 computational phylogenetic analysis Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 210000003298 dental enamel Anatomy 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 2
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 2
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 2
- XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N ethyl 2-amino-4-(trifluoromethyl)-1,3-thiazole-5-carboxylate Chemical compound CCOC(=O)C=1SC(N)=NC=1C(F)(F)F XJRPTMORGOIMMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000004088 foaming agent Substances 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 108090001082 glucan-binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 238000002114 high-resolution electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229940059406 lactobacillus rhamnosus gg Drugs 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 2
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N silver(1+) nitrate Chemical compound [Ag+].[O-]N(=O)=O SQGYOTSLMSWVJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GGCZERPQGJTIQP-UHFFFAOYSA-N sodium;9,10-dioxoanthracene-2-sulfonic acid Chemical compound [Na+].C1=CC=C2C(=O)C3=CC(S(=O)(=O)O)=CC=C3C(=O)C2=C1 GGCZERPQGJTIQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 2
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 2
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 2
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 1-methylsulfonylpiperidin-4-one Chemical compound CS(=O)(=O)N1CCC(=O)CC1 RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 2-METHOXYETHANOL Chemical compound COCCO XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 235000006491 Acacia senegal Nutrition 0.000 description 1
- RGCKGOZRHPZPFP-UHFFFAOYSA-N Alizarin Natural products C1=CC=C2C(=O)C3=C(O)C(O)=CC=C3C(=O)C2=C1 RGCKGOZRHPZPFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 206010065687 Bone loss Diseases 0.000 description 1
- 102100037084 C4b-binding protein alpha chain Human genes 0.000 description 1
- PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N Cellulose, microcrystalline Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 PTHCMJGKKRQCBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 101710082261 Competence-stimulating peptide Proteins 0.000 description 1
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007399 DNA isolation Methods 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150107049 Exoc3 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100030860 Exocyst complex component 3 Human genes 0.000 description 1
- 239000004606 Fillers/Extenders Substances 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108091092584 GDNA Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 108010042889 Inulosucrase Proteins 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 1
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 208000029725 Metabolic bone disease Diseases 0.000 description 1
- 101100060897 Methanosarcina acetivorans (strain ATCC 35395 / DSM 2834 / JCM 12185 / C2A) comDE gene Proteins 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010049088 Osteopenia Diseases 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 101710160107 Outer membrane protein A Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010806 PrimeScriptTM RT Reagent kit Methods 0.000 description 1
- 101710136733 Proline-rich protein Proteins 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150049811 SEC6 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- 241000975185 Weissella cibaria Species 0.000 description 1
- 239000003082 abrasive agent Substances 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-RSJOWCBRSA-N aldehydo-D-galacturonic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-RSJOWCBRSA-N 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N aldehydo-D-glucuronic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- HFVAFDPGUJEFBQ-UHFFFAOYSA-M alizarin red S Chemical compound [Na+].O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)C2=C1C=C(S([O-])(=O)=O)C(O)=C2O HFVAFDPGUJEFBQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 229910001860 alkaline earth metal hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N anhydrous glutaric acid Natural products OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 description 1
- 239000012223 aqueous fraction Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012241 calcium silicate Nutrition 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000005260 corrosion Methods 0.000 description 1
- 230000007797 corrosion Effects 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 210000004268 dentin Anatomy 0.000 description 1
- 230000036576 dermal application Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-MDZDMXLPSA-N elaidic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 229960003276 erythromycin Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 101150035967 gtf3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150116229 gtfB gene Proteins 0.000 description 1
- 101150055890 gtfC gene Proteins 0.000 description 1
- 101150110739 gtfD gene Proteins 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 210000003709 heart valve Anatomy 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940071870 hydroiodic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005304 joining Methods 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N lauric acid triglyceride Natural products CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 1
- 235000012149 noodles Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid group Chemical group C(CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)(=O)O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 description 1
- 208000005368 osteomalacia Diseases 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 235000013550 pizza Nutrition 0.000 description 1
- 238000009428 plumbing Methods 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 description 1
- YQUVCSBJEUQKSH-UHFFFAOYSA-N protochatechuic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 YQUVCSBJEUQKSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 235000013580 sausages Nutrition 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001961 silver nitrate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 235000014347 soups Nutrition 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 239000000892 thaumatin Substances 0.000 description 1
- 235000010436 thaumatin Nutrition 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- WKOLLVMJNQIZCI-UHFFFAOYSA-N vanillic acid Chemical compound COC1=CC(C(O)=O)=CC=C1O WKOLLVMJNQIZCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TUUBOHWZSQXCSW-UHFFFAOYSA-N vanillic acid Natural products COC1=CC(O)=CC(C(O)=O)=C1 TUUBOHWZSQXCSW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H17/02—Heterocyclic radicals containing only nitrogen as ring hetero atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
- A01N43/34—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- A01N43/36—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom five-membered rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
- A61K8/602—Glycosides, e.g. rutin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q11/00—Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/16—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing two or more hetero rings
- C12P17/165—Heterorings having nitrogen atoms as the only ring heteroatoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Birds (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Virology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
본 발명의 일 예는 충치 원인균의 성장 억제 활성 또는 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP)를 제공한다. 또한, 본 발명의 일 예는 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP)가 생산하는 신규 화합물 또는 이의 등가 화합물을 제공한다. 본 발명의 일 예에 따른 신규 화합물이나 이의 약학적으로 허용되는 염은 충치균 등에 의해 바이오필름이 형성되는 것을 효과적으로 억제할 수 있다. 또한, 본 발명의 일 예에 따른 신규 유산균 또는 이의 배양액은 충치 원인균인 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)의 증식을 효과적으로 억제하거나 충치, 치주염 등과 같은 구강 질환의 원인이 되는 바이오필름 형성을 효과적으로 억제할 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 예에 따른 신규 화합물 내지 이의 약학적으로 허용되는 염, 신규 유산균 내지 이의 배양물 등은 바이오필름 형성 억제 또는 구강질환 예방 내지 개선을 위한 구강 건강용 조성물의 유효성분으로 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 신규 화합물 등에 관한 것으로서, 더 상세하게는 소정의 유산균으로부터 생산되고 충치 원인균인 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)의 증식을 효과적으로 억제하거나 충치, 치주염 등과 같은 구강 질환의 원인이 되는 바이오필름 형성을 효과적으로 억제할 수 있는 신규 화합물 및 이의 구강 건강 분야에 적용되는 다양한 용도에 관한 것이다.
일반적으로 세균이나 진균 등은 물체 표면에 부착하여 바이오필름이라는 집합체를 형성한다. 바이오필름의 점착성은 표면에 존재하는 고분자 매트릭스에서 유래한다. 고분자 매트릭스는 다당류와 단백질 등으로 구성되며, 다당류의 수산화기들 사이에 수소결합으로 인해 강하게 밀집되어 있다. 바이오필름은 구강, 피부, 주방, 욕실, 배관 등 다양한 공간에 존재하며, 한번 형성된 바이오필름은 쉽게 제거되지 않기 때문에 빠른 세균 증식의 원인이 된다. 바이오필름 형성은 표면 물질의 부식, 병원균에 의한 감염 등의 원인이 되며, 구강 내에서는 충치 등과 같은 구강 질환을 유발하기도 한다. 바이오필름은 당 성분 등에 의해 만들어지는 복합체 내에 수용된 미생물 집단으로서, 상피, 폐 및 심장과 같은 표면 뿐만 아니라 중앙 정맥 및 비뇨기 카테터, 자궁 내 장치 및 보철 심장판막과 같은 이식된 의료장치에 형성될 수 있다. 바이오필름은 미생물에 많은 이점을 제공하며, 특히 항생제에 대한 내성을 증가시킨다. 이로 인해 바이오필름에 관한 감염 및 합병증의 발생이 증가하고 치료가 힘들어진다. 또한, 미생물의 바이오필름은 숙주 면역계에 영향을 미쳐 미생물의 생존이 증가하게 된다.
치아우식증(Dental caries)은 충치라고도 불리며, 아동 및 성인의 60~90%에서 나타나는 세계 주요 질환 중 하나이다. 치아우식증은 치아면에 부착된 박테리아 (bacteria)가 만들어낸 산(acid)에 의해 치아 및 상이질(dentine)의 에나멜질 (enamel)이 부식되는 질환이다. 충치를 유발하는 구강유해균으로는 다양한 종이 있는데, 대표적으로 스트렙토코커스 속(Streptococcus spp.)에 속하는 세균이 있다. 특히, 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)는 그람 양성균의 진균성 세균이며 충치의 주요 원인균으로 알려져 있다(Wang 및 Ren, 2017). 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)는 치아 표면에 부착하여 세포외다당류를 생산하는 글루코실전이효소(GTFs, glucosyltransferases)를 통해 바이오필름(biofilm)을 형성하게 된다(Bowen and Koo, 2011). 치아 표면의 법랑질 층(enamel layer)에 부착된 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) 등의 미생물 군집에 의해 형성된 경구 바이오필름은 쉽게 제거되지 못하기 때문에 바이오필름 형성의 초기 단계에 이를 억제하는 것이 중요하다(Marsh, 2006; Zijnge et al., 2010; Islamet al., 2008).
충치균의 성장이나, 증식을 억제 하기 위한 방법으로 다양한 연구가 보고되어 왔다. 일반적으로 충치를 예방하기 위해 페니실린(penicillin), 에리쓰로마이신(erythromycin), 테트라사이클린(tetracycline)과 같은 항생제(antibiotic)가 사용되어 왔지만, 이들을 장기간으로 사용하면 항생제에 대한 내성이 발생하는 한계가 있다. 그 외에도 천연 물질을 이용하여 구강유해균를 저해하거나, 바이오필름 형성에 관여하는 글루코실전이효소(glucosyltransferase, GTase)의 활성 저해 등에 대한 연구가 이루어졌으나 이러한 방법들은 지속적인 효과가 나타나지 않거나, 구강유해균 뿐만 아니라 구강내 정상 미생물의 성장이나 증식을 억제하는 문제가 있다. 바이오필름 형성 억제 또는 충치 예방과 관련하여, 대한민국 등록특허공보 제10-1763518호에는 알리자린(Alizarin)을 포함하는 바이오필름 형성을 억제하거나 바이오필름에 의해서 유발되는 감염성 질환(예를 들어, 충치, 치주염)을 예방하기 위한 조성물이 개시되어 있다. 또한, 대한민국 등록특허공보 제10-1921309호에는 바이오필름 형성 억제능이 65% 이상인 바이셀라 사이베리아(Weissella cibaria) 균주, 그 배양물, 그 파쇄물 또는 그 추출물을 유효성분으로 포함하는 충치 예방용 조성물이 개시되어 있다.
따라서, 구강내 건강을 유지하면서 동시에 효과적으로 바이오필름 형성을 억제하거나 충치를 예방할 수 있는 기술 개발이 요구되고 있는 실정이다.
본 발명은 종래의 기술적 배경하에서 도출된 것으로서, 본 발명의 목적은 충치균 등에 의해 바이오필름이 형성되는 것을 효과적으로 억제할 수 있는 신규 화합물을 제공하는데에 있다. 또한, 본 발명의 목적은 상기 신규 화합물의 용도를 제공하는데에 있다. 또한, 본 발명의 목적은 상기 신규 화합물의 생산을 통해 바이오필름 형성을 억제하고 충치균의 성장이나 증식을 억제할 수 있는 신규 유산균 및 이의 용도를 제공하는데에 있다.
본 발명의 발명자들은 타액(Saliva)에서 유산균들을 스크리닝하고, 스크리닝된 유산균들 중 충치균 성장에 대한 길항 효능 및 바이오필름 형성 억제 효능이 우수한 유산균을 선별하였다. 또한, 본 발명의 발명자들은 선별한 유산균의 배양액을 다양한 용매로 계통분획하고, 사이즈 배제 크로마토그래피(Size-exclusion chromatography, SEC) 및 역상 개방 칼럼 크로마토그래피(Reverse phase open column chromatography, ORP)를 순차적으로 수행하여 바이오필름 형성 억제 효능이 우수한 신규 화합물을 분리하였다.
상기 목적을 해결하기 위하여, 본 발명의 일 예는 하기 화학식 1로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 화합물을 제공한다.
[화학식 1]
상기 화학식 1에서,
p는 1 내지 10의 정수에서 선택되고,
q는 1 내지 30의 정수에서 선택되고,
r은 1 내지 30의 정수에서 선택되며,
X는 수소 원자, 탄소소가 1 내지 10인 알킬기, 티올기(SH), 아민기(NH2) 또는 하이드록실기(OH)에서 선택된다.
상기 목적을 해결하기 위하여, 본 발명의 일 예는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는, 바이오필름 형성 억제용 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명의 일 예는 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는, 바이오필름에 의해 유발되는 구강질환 예방 또는 개선용 조성물을 제공한다.
상기 목적을 해결하기 위하여, 본 발명의 일 예는 충치 원인균의 성장 억제 활성 또는 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP)를 제공한다.
상기 목적을 해결하기 위하여, 본 발명의 일 예는 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 포함하는, 바이오필름 형성 억제용 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명의 일 예는 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 포함하는, 충치 원인균 또는 바이오필름에 의해 유발되는 구강질환 예방 또는 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 예에 따른 신규 화합물이나 이의 약학적으로 허용되는 염은 충치균 등에 의해 바이오필름이 형성되는 것을 효과적으로 억제할 수 있다. 또한, 본 발명의 일 예에 따른 신규 유산균 또는 이의 배양액은 충치 원인균인 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)의 증식을 효과적으로 억제하거나 충치, 치주염 등과 같은 구강 질환의 원인이 되는 바이오필름 형성을 효과적으로 억제할 수 있다. 따라서, 본 발명의 일 예에 따른 신규 화합물 내지 이의 약학적으로 허용되는 염, 신규 유산균 내지 이의 배양물 등은 바이오필름 형성 억제 또는 구강질환 예방 내지 개선을 위한 구강 건강용 조성물의 유효성분으로 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 실시예에서 스크리닝한 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주의 계통관계도(phylogenetic tree)를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주의 바이오필름 형성 억제 효능을 측정한 결과이다.
도 3은 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 바이오필름 형성 억제 활성이 우수한 6번 소분획물(RP6) 및 10번 소분획물(RP10)을 얻는 과정을 개략적으로 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 분리된 신규 화합물 Paragassericin A의 바이오필름 형성 억제 효능을 측정한 결과이고, 도 5는 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 분리된 신규 화합물 Paragassericin B의 바이오필름 형성 억제 효능을 측정한 결과이다.
도 6은 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 분리된 신규 화합물 Paragassericin A가 바이오필름 형성 관련 유전자의 발현에 미치는 영향을 측정한 결과이다.
도 2는 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주의 바이오필름 형성 억제 효능을 측정한 결과이다.
도 3은 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 바이오필름 형성 억제 활성이 우수한 6번 소분획물(RP6) 및 10번 소분획물(RP10)을 얻는 과정을 개략적으로 나타낸 것이다.
도 4는 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 분리된 신규 화합물 Paragassericin A의 바이오필름 형성 억제 효능을 측정한 결과이고, 도 5는 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 분리된 신규 화합물 Paragassericin B의 바이오필름 형성 억제 효능을 측정한 결과이다.
도 6은 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 분리된 신규 화합물 Paragassericin A가 바이오필름 형성 관련 유전자의 발현에 미치는 영향을 측정한 결과이다.
이하, 본 발명에서 사용한 용어를 설명한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "조성물"은 2가지 이상의 성분이 균일하게 혼합되어 있는 상태의 물질을 의미하며, 완제품뿐만 아니라 완제품 제조를 위한 중간 소재를 포함하는 개념이다.
본 발명에서 사용되는 용어 "약학적으로 허용가능한" 이란 생물체를 상당히 자극하지 않고 투여 활성 물질의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는 것을 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "예방"은 본 발명의 조성물의 투여로 특정 질환의 증상을 억제하거나 진행을 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "개선"은 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소 또는 완화시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 사용되는 용어 "배양물"은 미생물을 공지의 액체 배지 또는 고체 배지에서 배양시켜 수득한 산물을 의미하여, 배양된 미생물이 포함되는 개념이이다. 구체적으로 상기 배양물은 미생물 배양액일 수도 있고, 미생물 배양액을 고형화한 고체상일 수도 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "구강질환"은 치아를 포함하여 구강 내에서 발생할 수 있는 모든 질환을 의미하는 것으로, 구체적으로 구강 조직 내에서 파골세포 수 감소, 조골세포 수 증가, 해면골 소실 부피 감소, 치조골 부피 증가, 염증세포 수 감소 및 구강 유해세균에 대한 항균 효과로 인해 예방, 개선 및/또는 치료될 수 있는 모든 질환을 포함한다. 보다 구체적으로, 상기 구강질환은 치조골 파손(alveolar bone breakage), 치조골다공증(alveolar bone osteoporosis), 치조골연화증(alveolar bone osteomalacia), 치조골감소증(alveolar bone osteopenia), 충치(dental caries), 치은염(gingivitis) 및 치주염(periodontitis)으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 질환일 수 있으며, 이에 특별히 제한되는 것은 아니다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명의 일 측면은 바이오필름 형성 억제 효능이 우수한 신규 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다. 본 발명의 일 예에 따른 신규 화합물은 하기 화학식 1로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는다.
[화학식 1]
상기 화학식 1에서, p는 1 내지 10의 정수에서 선택되고, 바람직하게는 1 내지 6의 정수에서 선택되고, 더 바람직하게는 1 내지 4의 정수에서 선택된다. 또한, 상기 q는 1 내지 30의 정수에서 선택되고, 바람직하게는 2 내지 26의 정수에서 선택되고, 더 바람직하게는 4 내지 20의 정수에서 선택된다. 또한, 상기 r은 1 내지 30의 정수에서 선택되고, 바람직하게는 2 내지 14의 정수에서 선택되며, 더 바람직하게는 4 내지 12의 정수에서 선택된다. 또한, 상기 X는 수소 원자, 탄소소가 1 내지 10인 알킬기, 티올기(SH), 아민기(NH2) 또는 하이드록실기(OH)에서 선택되고, 바람직하게는 수소 원자, 티올기(SH), 아민기(NH2) 또는 하이드록실기(OH)에서 선택되며, 더 바람직하게는 티올기(SH), 아민기(NH2) 또는 하이드록실기(OH)에서 선택된다.
상기 화학식 1로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 가지는 화합물은 바람직하게는 하기 화학식 2, 하기 화학식 3, 하기 화학식 4로 표시되는 화학 구조를 가진다.
[화학식 2]
상기 화학식 2에서, q는 2 내지 26의 정수에서 선택되고, r은 2 내지 14의 정수에서 선택되며, X는 수소 원자, 탄소소가 1 내지 10인 알킬기, 티올기(SH), 아민기(NH2) 또는 하이드록실기(OH)에서 선택된다.
[화학식 3]
상기 화학식 3에서, p는 1 내지 6의 정수에서 선택되고,
q는 2 내지 26의 정수에서 선택되고, r은 2 내지 14의 정수에서 선택된다.
[화학식 4]
상기 화학식 4에서, p는 1 내지 6의 정수에서 선택되고, q는 2 내지 26의 정수에서 선택되고, X는 수소 원자, 탄소소가 1 내지 5인 알킬기, 티올기(SH), 아민기(NH2) 또는 하이드록실기(OH)에서 선택된다.
또한, 상기 화학식 1로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 가지는 화합물은 더 바람직하게는 하기 화학식 5, 하기 화학식 6으로 표시되는 화학 구조를 가진다.
[화학식 5]
[화학식 6]
상기 화학식 5로 표시되는 화학 구조를 가지는 화합물의 명칭은 1-O-oleoyl-3-O-[β-D-4-amino-4-deoxy-arabinofuranosyl-(1→5)-O-β-D-4-amino-4-deoxy-arabinofuranosyl]-glycerol이고, 상기 화학식 6으로 표시되는 화학 구조를 가지는 화합물의 명칭은 1-O-nervonoyl-3-O-[β-D-4-amino-4-deoxy-arabinofuranosyl-(1→5)-O-β-D-4-amino-4-deoxy-arabinofuranosyl]-glycerol이다. 상기 화학식 5로 표시되는 화학 구조를 가지는 화합물 및 상기 화학식 6으로 표시되는 화학 구조를 가지는 화합물은 후술하는 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645(수탁번호 : KACC 81194BP) 균주의 배양액에서 분리된 것으로서, 충치 원인균, 특히 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)에 의해 바이오필름이 형성되는 것을 효과적으로 억제할 수 있다.
본 발명의 일 측면은 상기 화학식 1 내지 6으로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 가지는 신규 화합물의 약학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다. 본 발명에서 신규 화합물의 약학적으로 허용가능한 염으로는 유리산 (free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 산부가염은 통상의 방법, 예를 들면 화합물을 과량의 산 수용액에 용해시키고, 이 염을 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴과 같은 수혼화성 유기 용매를 사용하여 침전시켜서 제조한다. 동 몰량의 화합물 및 물 중의 산 또는 알코올(예, 글리콜 모노메틸에테르)을 가열하고 이어서 상기 혼합물을 증발시켜서 건조시키거나, 또는 석출된 염을 흡인 여과시킬 수 있다. 이때, 유리산으로는 유기산과 무기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 인산, 황산, 질산, 주석산 등을 사용할 수 있고, 유기산으로는 메탄설폰산, p-톨루엔설폰산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 시트르산, 말레인산 (maleic acid), 숙신산, 옥살산, 벤조산, 타르타르산, 푸마르산, 만데르산, 프로피온산 (propionic acid), 젖산 (lactic acid), 글리콜산 (glycollic acid), 글루콘산 (gluconic acid), 갈락투론산, 글루탐산, 글루타르산 (glutaric acid), 글루쿠론산 (glucuronic acid), 아스파르트산, 아스코르빈산, 카본산, 바닐릭산, 히드로 아이오딕산 등을 사용할 수 있다. 또한, 염기를 사용하여 상기 신규 화합물의 약학적으로 허용 가능한 금속염을 제조할 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리토 금속염은, 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리토 금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물염을 여과한 후 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속염으로서는 특히 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 적합하며, 또한 이에 대응하는 은염은 알칼리 금속 또는 알칼리토 금속염을 적당한 은염(예, 질산은)과 반응시켜 얻는다.
본 발명의 일 측면은 상기 화학식 1 내지 6으로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 가지는 신규 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 다양한 용도에 관한 것이다. 본 발명의 일 예는 상기 화학식 1 내지 6으로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 가지는 신규 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 바이오필름 형성 억제용 조성물을 제공한다. 상기 바이오필름은 바람직하게는 충치 원인균에 의해 형성된다. 또한, 상기 충치 원인균은 바람직하게는 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)이다. 본 발명의 일 예에 따른 화학식 1 내지 6으로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 가지는 신규 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 충치 원인균에 의한 바이오필름 형성을 효과적으로 억제할 수 있기 때문에, 바이오필름에 의해 유발되는 다양한 구강질환을 예방하거나 개선하는데에 사용될 수 있다. 본 발명의 일 예는 화학식 1 내지 6으로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 가지는 신규 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는, 바이오필름에 의해 유발되는 구강질환 예방 또는 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일 측면은 충치 원인균의 성장이나 증식을 억제하고 바이오필름 형성을 억제할 수 있는 신규 유산균에 관한 것이다. 본 발명의 일 예에 따른 신규 유산균은 충치 원인균의 성장 억제 활성 또는 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP)이다. 상기 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP)는 타액에서 스크리닝된 신규 유산균으로서, 충치 원인균인 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)의 성장이나 증식을 직접적으로 억제하고, 동시에 상기 화학식 5 및 화학식 6으로 표시되는 신규 화합물을 생산하여 바이오필름 형성을 효과적으로 억제한다.
본 발명의 일 측면은 신규 유산균인 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP)의 다양한 용도에 관한 것이다. 본 발명의 일 예는 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 포함하는 바이오필름 형성 억제용 조성물을 제공한다. 상기 바이오필름은 바람직하게는 충치 원인균에 의해 형성된다. 또한, 상기 충치 원인균은 바람직하게는 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)이다. 또한, 본 발명의 일 예는 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 포함하는, 충치 원인균 또는 바이오필름에 의해 유발되는 구강질환 예방 또는 개선용 조성물을 제공한다. 본 발명에서 배양물은 미생물을 배지에서 배양시켜 수득한 산물로서, 미생물을 포함한다. 또한, 상기 배지는 유산균용 배지로 사용되는 공지의 액체 배지 또는 고체 배지에서 선택될 수 있으며, 예를 들어 MRS 액체 배지, MRS 한천 배지, BL 한천 배지일 수 있다.
본 발명의 일 예에 따른 상기 바이오필름 형성 억제용 조성물, 구강질환 예방 또는 개선용 조성물은 사용 목적 내지 양상에 따라 약학 조성물, 식품 첨가제, 식품 조성물(특히 건강기능식품 조성물) 등으로 구체화될 수 있다. 또한, 본 발명의 일 예에 따른 상기 바이오필름 형성 억제용 조성물, 구강질환 예방 또는 개선용 조성물에서 유효성분의 함량은 조성물의 구체적인 형태, 사용 목적 내지 양상에 따라 다양한 범위에서 조정될 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물에서 유효성분의 함량은 크게 제한되지 않으며, 예를 들어 조성물 총 중량을 기준으로 0.01~99 중량%, 바람직하게는 0.5~50 중량%, 더 바람직하게는 1~30 중량%일 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 약학 조성물은 유효성분 외에 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제와 같은 첨가제를 더 포함할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 또한, 본 발명의 약학 조성물은 충치 원인균의 성장이나 증식을 억제하는 활성 또는 바이오필름 형성을 억제하는 활성을 갖는 공지의 유효성분을 1종 이상 더 함유할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 통상의 방법에 의해 경구 투여를 위한 제형 또는 비경구 투여를 위한 제형으로 제제화될 수 있고, 제제화할 경우 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 유효성분에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(Calcium carbonate), 수크로스(Sucrose), 락토오스(Lactose) 또는 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(최근판), Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 목적하는 방법에 따라 인간을 포함한 포유류에 경구 투여되거나 비경구 투여될 수 있으며, 비경구 투여 방식으로는 피부 외용, 복강내주사, 직장내주사, 피하주사, 정맥주사, 근육내 주사 또는 흉부내 주사 주입방식 등이 있다. 본 발명의 약학 조성물의 투여량은 약학적으로 유효한 양이라면 크게 제한되지 않으며, 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설율 및 질환의 중증도에 따라 그 범위가 다양하다. 본 발명의 약학 조성물의 통상적인 1일 투여량은 크게 제한되지 않으나 바람직하게는 유효성분을 기준으로 할 때 0.01 내지 3000 ㎎/㎏ B.W.이고, 더 바람직하게는 0.1 내지 2000 ㎎/㎏ B.W.이며, 하루 1회 또는 수회로 나누어 투여될 수 있다.
또한, 본 발명에 따른 건강기능식품 조성물에서 유효성분의 함량은 조성물 총 중량을 기준으로 0.01~50 중량%, 바람직하게는 0.1~25 중량%, 더 바람직하게는 0.5~10 중량%이나, 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 건강기능식품 조성물은 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐, 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 구체적인 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 발효유, 필름, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 기능수, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강기능식품(health functional food) 외에 이와 유사한 개념을 갖는 식이보충제(dietary supplement) 및 식품보충제(food supplement)를 모두 포함한다. 본 발명의 건강기능식품 조성물은 유효성분 외에 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 더 포함할 수 있으며, 상기 보조 첨가제에는 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 또는 희석제 등이 있다. 본 발명의 건강기능식품 조성물은 유효성분 외에 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 또한, 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강기능식품 조성물은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분들은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 향미제로는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 향미제나 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 향미제 등을 사용할 수 있다.
본 발명의 일 예에 따른 바이오필름 형성 억제용 조성물, 구강질환 예방 또는 개선용 조성물의 바람직한 형태는 의약외품 조성물이다. 본 발명의 일 예는 상기 화학식 1 내지 6으로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 가지는 신규 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 바이오필름 형성 억제용 의약외품 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명의 일 예는 상기 화학식 1 내지 6으로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 가지는 신규 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는, 바이오필름에 의해 유발되는 충치 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명의 일 예는 상기 화학식 1 내지 6으로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 가지는 신규 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는, 바이오필름에 의해 유발되는 치주질환 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명의 일 예는 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 포함하는 바이오필름 형성 억제용 의약외품 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명의 일 예는 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 포함하는, 충치 원인균 또는 바이오필름에 의해 유발되는 충치 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명의 일 예는 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP), 이의 배양물, 이의 파쇄물 또는 이의 추출물에서 선택되는 1종 이상을 유효성분으로 포함하는, 충치 원인균 또는 바이오필름에 의해 유발되는 치주질환 예방 또는 개선용 의약외품 조성물을 제공한다. 상기 치주질환은 치은염 또는 치은염에서 선택된다. 본 발명의 의약외품 조성물은 구강용 의약외품을 포함하는 것일 수 있다. 본 발명의 의약외품 조성물은 상기 유효성분 이외에 구강용 의약외품 조성물에 통상적으로 사용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 연마제, 습윤제, 결합제, 기포제, 감미제, 방부제, 약효성분, 향미제, 색소, 용제, 증백제, 가용화제 또는 pH 조정제를 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 의약외품 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 구체적으로는 치약, 구강청결제, 껌, 캔디류, 구강스프레이, 구강용 연고제, 구강용 바니쉬(varnish), 구강필름 및 잇몸 마사지 크림으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 제형일 수 있으나, 이에 특별히 제한되는 것은 아니다. 하나의 예로서, 본 발명의 의약외품 조성물이 치약의 제형일 경우, 습윤제, 연마제, 결합제, 기포제, 향미제, 감미제, 착색제, 보존제, 약효성분, 용제, pH 조절제 등을 포함할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예를 통하여 보다 구체적으로 설명한다. 다만, 하기 실시예는 본 발명의 기술적 특징을 명확하게 예시하기 위한 것 일뿐, 본 발명의 보호범위를 한정하는 것은 아니다.
1. 타액(Saliva)으로부터 유산균의 분리 및 동정
타액(Saliva)을 멸균된 생리식염수에 희석한 후, 희석액을 pH 지시약인 브로모크레졸퍼플(Bromocresol purple)이 0.002%(w/w)의 함량으로 첨가된 MRS 배지[
proteose peptone 1%(w/w), beef extract 1%(w/w), yeast extract 0.5%(w/w), dextrose 2%(w/w), potassium dihydrogen phosphate 0.2%(w/w), Tween 80 0.1%(w/w), ammonium citrate 0.2%(w/w), sodium acetate 3H2O 0.5%(w/w), MgSO4-7H20 0.01%(w/w), MnSO4-4H20 0.005%(w/w), Bacto-agar 1.5%(w/w)]에 도말하고, 37℃에서 48 hr 동안 배양하였다. 배양이 완료된 후, 주변에 노란색이 형성되는 콜로니(Colony)를 선발하여 균주를 분리하였다. 유산균 콜로니는 유산을 생성하여 pH를 낮추고, pH 지시약인 브로모크레졸퍼플(Bromocresol purple)이 노란색으로 변하게 된다. 분리된 균주로부터 Promega Wizard Genomic DNA isolation Kit를 이용하여 유전체 DNA(genomic DNA)를 추출하고, 추출된 유전체 DNA(genomic DNA)를 주형으로 하고 하기 표 1의 universal primer를 사용하는 중합효소연쇄반응(PCR)을 진행하여 16S rDNA 유전자를 증폭시켰다. 증폭된 유전자 서열을 분석한 후 NCBI database의 유전자 서열과 비교하여 유산균을 동정하였다.
프라이머 이름 | 프라이머 설명 | 프라이머 염기서열(5'→3') |
universal primer 27F | Forward | AGAGTTTGATCTGGCTCAG |
universal primer 1525r | Reverse | AGGAGGTGATCCAGCC |
그 결과, 5개의 종에 해당하는 총 11개의 균주가 분리되었고, 분리된 균주명은 하기 표 2와 같다.
균주명 | 16S rDNA 서열 분석에 의해 확인된 균주 종 |
MJM60658 | Streptococcus rubneri |
MJM60659 | Streptococcus rubneri |
MJM60660 | Streptococcus rubneri |
MJM60645 | Lactobacillus paragasseri |
MJM60646 | Lactobacillus paragasseri |
MJM60649 | Streptococcus rubneri |
MJM60654 | Streptococcus salivarius |
MJM60655 | Streptococcus salivarius |
MJM60651 | Leuconostoc mesteriodes |
MJM60657 | Leuconostoc mesteriodes |
MJM60648 | Lactobacillus gasseri |
2. 타액에서 분리된 유산균의 충치균 성장에 대한 길항 효능 검증
타액에서 분리된 유산균이 충치 원인균인 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주의 성장을 억제하는 수준을 평가하기 위해 공배양 방법을 통해 길항 작용을 확인하였다. 먼저, 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주를 BHI 액체 배지에 접종하고 37℃에서 18 hr 동안 배양한 후, 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균체가 포함된 배양액을 0.7%(w/w) 농도로 한천(agar)이 첨가된 MRS soft agar medium에 현탁하여 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균체 현탁액을 수득하였다. 이후, 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균체 현탁액을 일반 MRS 한천 고체 배지위에 부어 상부커버 한천층(top cover agar)을 형성하였다. 이후, 유산균 콜로니 1개를 5㎖ MRS 배지에 접종하고, 37℃에서 24 hr 동안 배양한 후, 배양액을 OD600의 값이 1이 되게 조절하였다. 이후, 상부커버 한천층(top cover agar)에 작은 홈을 만들고 균체가 포함된 유산균 배양액 5㎕(OD600=1)를 홈에 로딩한 후 37℃에서 혐기 조건으로 24 hr 동안 배양하였다. 배양이 완료된 후 유산균 콜로니 주변의 억제환(Inhibition zone) 크기를 측정하여 유산균의 충치균 성장에 대한 길항 효능을 평가하였고 그 결과를 하기 표 3에 정리하였다. 또한, 대조군으로 공시균인 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus) GG를 사용하였다.
유산균 균주 구분 | 억제환(Inhibition zone) 크기(㎜) |
Streptococcus rubneri MJM60658 | 24 |
Streptococcus rubneri MJM60659 | 25 |
Streptococcus rubneri MJM60660 | 26 |
Lactobacillus paragasseri MJM60645 | 30 |
Lactobacillus paragasseri MJM60646 | 20 |
Streptococcus rubneri MJM60649 | 0 |
Streptococcus salivarius MJM60654 | 0 |
Streptococcus salivarius MJM60655 | 0 |
Leuconostoc mesteriodes MJM60651 | 1 |
Leuconostoc mesteriodes MJM60657 | 2 |
Lactobacillus gasseri MJM60648 | 15 |
Lactobacillus rhamnosus GG | 25 |
하기 표 3에서 보이는 바와 같이 타액에서 분리된 유산균들 중 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주가 충치 원인균인 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주의 성장을 가장 크게 억제하였다. 이후, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주를 글리세롤 스톡(Glycerol stock)에 보관하고, 이후의 실험에 사용하였다.
3. MJM60645 균주의 계통관계도(phylogenetic tree) 분석 및 특허기탁
분리된 유산균들 중 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주의 성장에 대해 가장 큰 길항 작용을 보인 MJM60645 균주를 정확히 동정하기 위하여 관련 균주와의 상관 관계를 나타내는 계통관계도(phylogenetic tree) 분석을 실시하였다. MJM60645 균주와 관련있는 균주의 16S rDNA 유전자 서열은 EzBioCloud 서버(http://www.ezbiocloud.net/) (Yoon et al., 2017)에서 획득하였고, 진화적 거리는 Kimura 두-매개 변수 모델(Kimura, 1983)을 사용하여 계산하였다. 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주의 계통관계도(phylogenetic tree)는 MEGA6 프로그램(Tamura et al., 2013)을 사용하여 구축되었으며, 관련성(relatedness)은 1000 반복에서 나온 부트스트랩 값(bootstrap value)을 사용하여 NJ(Neighbor-joining) 알고리즘(Sitou 및 Nei, 1987)에 의해 계산되었다. 도 1은 본 발명의 실시예에서 스크리닝한 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주의 계통관계도(phylogenetic tree)를 나타낸 것이다. 도 1에서 보이는 바와 같이 MJM60645 균주는 공시된 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) 균주들과 근접한 관계를 형성하였다. 본 발명의 발명자들은 MJM60645 균주를 최종적으로 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주로 명명하고, 2021년 12월 03일에 공인기탁기관인 국립농업과학원 농업미생물은행(Korean Agricultural Culture Collection, KACC; 주소 : 대한민국 전라북도 완주군 이서면 농생명로 166)에 부다페스트 조약에 의거한 국제특허기탁을 진행하여 수탁번호 KACC 81194BP를 부여받았다. 상기 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주(수탁번호 : KACC 81194BP)는 부다페스트 조약에 규정된 조건을 만족하는 범위 내에서 제3자에게 분양될 수 있다.
4. 락토바실러스 파라가세리(
Lactobacillus paragasseri
)
MJM60645 균주의 바이오필름 형성 억제 효능 검증
글리세롤 스톡(Glycerol stock)에 보관된 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주를 MRS 한천 플레이트(MRS agar plate)에 접종하고 37℃에서 24 hr 동안 배양하여 콜로니를 형성시켰다. 이후, 콜로니 1개를 10㎖ MRS 액체 배지에 접종하고 37℃에서 24 hr 동안 배양한 후, 배양액을 6,000 rpm의 조건으로 약 10분 동안 원심분리하여 상등액을 취하고, 상등액을 0.2㎛ 시린지 필터(syringe filter)로 여과하여 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양 상등액을 준비하였다. 또한, 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주를 BHI 액체 배지에 접종하고 37℃에서 24 hr 동안 배양한 후, 배양액을 0.2%(w/w) 농도로 수크로스(sucrose)가 첨가된 BHI 액체 배지로 희석하여 OD600의 값이 0.01인 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주 배양 희석액을 준비하였다.
이후, 96-well 플레이트의 웰에 0.2%(w/w) 농도로 수크로스(sucrose)가 첨가된 BHI 액체 배지 160㎕, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양 상등액 20㎕, 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주 배양 희석액(OD600=0.01) 20㎕를 첨가하고 37℃에서 혐기 조건으로 24 hr 동안 배양하였다. 이후, 웰에서 상등액과 웰 바닥에 부착되지 않은 세포를 제거하고, 멸균 증류수로 1회 세척한 후, 0.1%(w/w) 농도의 사프라닌(safranin) 용액 125㎕를 웰에 첨가하고 30분 동안 정치시켜 바이오필름을 염색하였다. 이후, 웰에서 다시 상등액을 제거하고, 멸균 증류수로 3회 세척한 후, 70%(w/w) 아세트산 용액 125㎕를 웰에 첨가하고 정치시켜 바이오필름에 흡착된 사프라닌(safranin)을 추출하였다. 이후, 사프라닌(safranin) 추출액의 492 nm에서의 흡광도를 측정하여 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주의 바이오필름 형성 억제 효능을 평가하였다. 대조군으로 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양 상등액 20㎕ 대신 PBS(phosphate buffered saline) 용액 20㎕를 처리한 Blank 군, MRS 액체 배지 20㎕를 처리한 MRS 군 및 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus) GG 균주 배양 상등액 20㎕를 처리한 L.GG군을 사용하였다.
도 2는 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주의 바이오필름 형성 억제 효능을 측정한 결과이다. 도 2에서 'MJM60645'는 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양 상등액을 처리한 실험군이다. 도 2에서 보이는 바와 같이 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양 상등액은 충치 원인균인 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)에 의한 바이오필름 형성을 현저하게 억제시켰다.
5. 락토바실러스 파라가세리(
Lactobacillus paragasseri
)
MJM60645 균주 배양액으로부터 신규 화합물의 분리
락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주를 MRS 액체 배지에 접종하고 37℃에서 24 hr 동안 배양한 후, 배양액을 7,000 rpm의 조건으로 약 15분 동안 고속원심분리하여 상등액과 균체를 분리하였다. 이후, 상등액과 에틸아세테이트를 1:1의 부피비로 혼합하고 정치시킨 후 에틸아세테이트층을 취하고 저압농축하여 에틸아세테이트 추출 분획물을 수득하였다. 이후, 에틸아세테이트 추출 분획물을 물에 용해시키고 헥산 및 부탄올 순서대로 분배하여 헥산 가용성 분획물(Hexane fraction), 부탄올 가용성 분획물(Butanol fraction) 및 수 가용성 분획물(Aqueous fraction)을 수득하였다. 각 분획물에 대해 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주에 의한 바이오필름 형성 억제 수준을 측정하였고, 그 결과 부탄올 가용성 분획물(Butanol fraction)의 바이오필름 형성 억제 효능이 가장 높게 나타났다.
이후, 부탄올 가용성 분획물(Butanol fraction)에 대해 사이즈 배제 크로마토그래피(Size-exclusion chromatography, SEC)를 수행하여 총 30개의 분획물을 수득하였다. 사이즈 배제 크로마토그래피(Size-exclusion chromatography, SEC) 수행 조건은 다음과 같다.
* 칼럼 : Sephadex LH20 resin이 충진된 칼럼으로서, 직경 2㎝ 및 길이 75㎝ 임; 용출 용매 : 100% 메탄올
사이즈 배제 크로마토그래피(Size-exclusion chromatography, SEC)를 통해 총 30개의 분획물을 수득하였다. 수득한 분획물을 농축한 후 바이오필름 형성 억제 효능을 평가한 결과, 3번 분획물, 4번 분획물, 5번 분획물, 6번 분획물 및 7번 분획물에서 바이오필름 형성 억제 활성을 나타냈고, 그중에서 활성이 가장 높게 나타난 6번 분획물(SEC6)에 대해 역상 개방 칼럼 크로마토그래피(Reverse phase open column chromatography, ORP)를 수행하였다. 역상 개방 칼럼 크로마토그래피(Reverse phase open column chromatography, ORP) 수행 조건은 다음과 같다.
* 칼럼 : LiChroprep RP-18(40-63M, Merck, Germany) resin이 충진된 칼럼으로서, 직경 2.52㎝ 및 높이 5㎝임; 이동상으로 acetone:H2O 부피비가 (6.5:3.5 → 8:2 → 10:0)인 농도 구배 모드를 사용하여 용출함
역상 개방 칼럼 크로마토그래피(Reverse phase open column chromatography, ORP)를 통해 총 16개의 소분획물을 수득하였다. 수득한 소분획물을 농축한 후 바이오필름 형성 억제 효능을 평가한 결과, 6번 소분획물(RP6) 및 10번 소분획물(RP10)에서 강한 바이오필름 형성 억제 활성을 나타내었다. 도 3은 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 바이오필름 형성 억제 활성이 우수한 6번 소분획물(RP6) 및 10번 소분획물(RP10)을 얻는 과정을 개략적으로 나타낸 것이다.
상기 6번 소분획물(RP6) 및 10번 소분획물(RP10)에 해당하는 화합물의 화학 구조를 확인하기 위해 핵자기공명분광(NMR) 분석 및 질량분석(Mass spectrometer)을 실시하였다. NMR 분석은 Bruker AvanceIII-600 MHz 기기를 사용하였고, 질량분석은 고분해능 텐뎀질량분석기(High resolution LC/MSMS spectrometer, Q-TOF 5600, AB SCIEX)를 사용하였다.
상기 6번 소분획물(RP6)에 해당하는 화합물의 화학 구조 분석 결과는 아래와 같다.
Positive FAB-MS m/z 283 [oleic acid+H]+; Negative FAB-MS m/z 281 [oleic acid-H]-; HR-ESI-MS m/z 619.4218 [M+H]+ (calcd for C31H59N2O10, 619.4164); 1H-NMR (600 MHz, CD3OD, δH) 5.13 (2H, t-like, J=4.8 Hz, H-9',10'), 4.60 (1H, dd, J=4.8, 4.2 Hz, H-2''), 4.47 (1H, d, J= 4.2 Hz, H-1''), 4.22 (2H, dd, J=7.2, 7.2 Hz, H-1), 4.07 (1H, m, H-2'''), 3.97 (1H, d, J=3.5 Hz, H-1'''), 3.90 (1H, overlapped, H-3''), 3.89 (1H, overlapped, H-4''), 3.76 (1H, m, H-4'''), 3.66 (2H, dd, J=7.8, 7.8 Hz, H-3), 3.60 (2H, overlapped, H-5''), 3.60 (2H, overlapped, H-5'''), 3.52 (1H, dd, J=4.8, 4.8 Hz, H-3'''), 3.51 (1H, overlapped, H-2), 2.30 (2H, t, J=7.2 Hz, H-2'), 2.00 (4H, overlapped, H-8',11'), 1.58 (2H, t-like, J=7.2 Hz, H-3'), 1.27 (20H, overlapped, H-4'-7',12'-17'), 0.87 (3H, t, J=7.2 Hz, H-18'); 13C-NMR (150 MHz, CD3OD, δC) 175.3 (s, C-1'), 130.9 (d, C-9'), 130.8 (d, C-10'), 87.3 (d, C-1''), 86.0 (d, C-1'''), 81.9 (d, C-2'''), 81.8 (d, C-2''), 74.4 (d, C-3''), 73.6 (d, C-3'''), 71.3 (d, C-2), 71.1 (d, C-4''), 70.9 (d, C-4'''), 70.1 (t, C-3), 70.0 (t, C-5''), 64.6 (t, C-1), 62.2 (t, C-5'''), 35.0 (t, C-2'), 33.1 (t, C-16'), 30.8-30.2 (t, C-4'-7',12'-15'), 28.1 (t, C-8'), 28.1 (t, C-11'), 26.0 (t, C-3'), 23.7 (t, C-17'), 14.5 (q, C-18').
상기 6번 소분획물(RP6)에 해당하는 화합물은 화학 구조가 하기 화학식 5로 표시되는 1-O-oleoyl-3-O-[β-D-4-amino-4-deoxy-arabinofuranosyl-(1→5)-O-β-D-4-amino-4-deoxy-arabinofuranosyl]-glycerol인 것으로 동정되었고, 본 발명의 발명자들은 화학식 5로 표시되는 화합물을 'Paragassericin A'로 약칭하였다.
[화학식 5]
상기 10번 소분획물(RP10)에 해당하는 화합물의 화학 구조 분석 결과는 아래와 같다.
HR-ESI-MS m/z 747.4981 [M+FA-H]- (calcd for C38H71N2O12, 747.5013); 1H-NMR (600 MHz, CD3OD, δH) 5.31 (2H, m, H-15',16'), 4.60 (1H, dd, J=3.6, 3.6 Hz, H-2''), 4.47 (1H, d, J=3.6 Hz, H-1''), 4.17 (2H, d-like, J=4.8 Hz, H-1), 4.07 (1H, m, H-2'''), 3.96 (1H, br.s, H-1'''), 3.89 (1H, overlapped, H-3''), 3.86 (1H, overlapped, H-4''), 3.77 (1H, m, H-4'''), 3.66 (2H, dd, J=5.6, 5.6 Hz, H-3), 3.60 (2H, overlapped, H-5''), 3.60 (2H, overlapped, H-5'''), 3.52 (1H, dd, J=5.6, 5.6 Hz, H-3'''), 3.51 (1H, overlapped, H-2), 2.30 (2H, t, J=7.2 Hz, H-2'), 2.00 (4H, overlapped, H-14',17'), 1.58 (2H, t-like, J=7.2 Hz, H-3'), 1.26 (32H, overlapped, H-4'-13',18'-23'), 0.87 (3H, t, J=6.6 Hz, H-24'); 13C-NMR (150 MHz, CD3OD, δC) 175.4 (s, C-1'), 130.9 (d, C-15'), 130.8 (d, C-16'), 87.3 (d, C-1''), 86.0 (d, C-1'''), 81.9 (d, C-2'''), 81.8 (d, C-2''), 74.4 (d, C-3''), 73.6 (d, C-3'''), 71.3 (d, C-2), 71.1 (d, C-4''), 70.9 (d, C-4'''), 70.2 (t, C-3), 70.0 (t, C-5''), 64.6 (t, C-1), 62.2 (t, C-5'''), 35.0 (t, C-2'), 33.1 (t, C-22'), 30.8-30.1 (t, C-4'-13',18'-21'), 28.1 (t, C-14'), 28.1 (t, C-17'), 26.0 (t, C-3'), 23.7 (t, C-23'), 14.5 (q, C-24').
상기 10번 소분획물(RP10)에 해당하는 화합물은 화학 구조가 하기 화학식 6으로 표시되는 1-O-nervonoyl-3-O-[β-D-4-amino-4-deoxy-arabinofuranosyl-(1→5)-O-β-D-4-amino-4-deoxy-arabinofuranosyl]-glycerol인 것으로 동정되었고, 본 발명의 발명자들은 화학식 6으로 표시되는 화합물을 'Paragassericin B'로 약칭하였다.
[화학식 6]
6. 분리된 신규 화합물의 바이오필름 형성 억제 효능 검증
스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주를 BHI 액체 배지에 접종하고 37℃에서 24 hr 동안 배양한 후, 배양액을 0.2%(w/w) 농도로 수크로스(sucrose)가 첨가된 BHI 액체 배지로 희석하여 OD600의 값이 0.01인 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주 배양 희석액을 준비하였다.
이후, 96-well 플레이트의 웰에 0.2%(w/w) 농도로 수크로스(sucrose)가 첨가된 BHI 액체 배지 160㎕, 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주 배양 희석액(OD600=0.01) 20㎕ 및 신규 화합물을 웰 내에서 소정의 농도(Paragassericin A의 경우 0.02 mM 내지 0.16 mM; Paragassericin B의 경우 0.0175 mM 내지 0.14 mM)가 되게 첨가하고 37℃에서 혐기 조건으로 24 hr 동안 배양하였다. 상기 신규 화합물은 멸균 증류수에 용해시킨 용액의 형태로 첨가되었다. 이후, 웰에서 상등액과 웰 바닥에 부착되지 않은 세포를 제거하고, 멸균 증류수로 1회 세척한 후, 0.1%(w/w) 농도의 사프라닌(safranin) 용액 125㎕를 웰에 첨가하고 30분 동안 정치시켜 바이오필름을 염색하였다. 이후, 웰에서 다시 상등액을 제거하고, 멸균 증류수로 3회 세척한 후, 70%(w/w) 아세트산 용액 125㎕를 웰에 첨가하고 정치시켜 바이오필름에 흡착된 사프라닌(safranin)을 추출하였다. 이후, 사프라닌(safranin) 추출액의 492 nm에서의 흡광도를 측정하여 신규 화합물 Paragassericin A 및 Paragassericin B의 바이오필름 형성 억제 효능을 평가하였다. 대조군으로 신규 화합물 대신 동일한 양의 멸균 증류수를 처리한 Control 군을 사용하였다.
도 4는 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 분리된 신규 화합물 Paragassericin A의 바이오필름 형성 억제 효능을 측정한 결과이고, 도 5는 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 분리된 신규 화합물 Paragassericin B의 바이오필름 형성 억제 효능을 측정한 결과이다. 도 4 및 도 5에서 신규 화합물 Paragassericin A 및 Paragassericin B의 바이오필름 형성 억제 효능은 Control 군 대비 상대적인 백분율로 나타내었다. 도 3에서 보이는 바와 같이 신규 화합물 Paragassericin A의 IC50 농도는 0.035 mM이었고, 신규 화합물 Paragassericin A의 IC50 농도는 0.028 mM이었다. 상기 IC50 농도는 바이오필름 형성이 Control 군 대비 50% 수준이 되게 억제할 수 있는 처리 농도이다.
7. 분리된 신규 화합물의 바이오필름 형성 관련 유전자 발현에 대한 영향
스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주를 BHI 액체 배지에 접종하고 37℃에서 24 hr 동안 배양한 후, 배양액을 0.2%(w/w) 농도로 수크로스(sucrose)가 첨가된 BHI 액체 배지로 희석하여 OD600의 값이 0.01인 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주 배양 희석액을 준비하였다.
이후, 96-well 플레이트의 웰에 0.2%(w/w) 농도로 수크로스(sucrose)가 첨가된 BHI 액체 배지 1600㎕, 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans) KCTC3065 균주 배양 희석액(OD600=0.01) 200㎕ 및 신규 화합물 Paragassericin A를 웰 내에서의 농도가 0.16 mM이 되게 첨가하고 37℃에서 혐기 조건으로 24 hr 동안 배양하였다. 상기 신규 화합물 Paragassericin A는 멸균 증류수에 용해시킨 0.16 mM 용액의 형태로 첨가되었다. 이후, 웰에서 바이오필름을 긁어 내고, 7,000 rpm에서 10분 동안 원심분리하여 균체를 회수하였다. 회수된 균체로부터 TaKaRa MiniBEST University RNA extraction kit(TAKARA Bio INC, Shiga, Japan)를 사용하여 RNA를 추출하였다. 또한, 추출한 RNA로부터 TaKaRa PrimeScript RT reagent kit with gDNA Eraser(TAKARA Bio INC, Shiga, Japan)를 사용하여 cDNA를 합성하였다. 이후, 바이오필름 형성 관련 유전자의 발현량을 LightCycler® 96 System(Roche, Basle, Switzerland) 및 Quantitative real-time reverse transcription polymerase chain reaction(qRT-PCR) 방법을 사용하여 정량하였다. 상대적인 정량을 위해 16S rRNA를 이용한 2-ΔΔCT 방법을 활용하였다. 대조군으로 신규 화합물 Paragassericin A 대신 동일한 양의 멸균 증류수를 처리한 Control 군을 사용하였다.
유전자명 | 유전자 설명 | 프라이머 서열(5'→3') | |
Forward | Reverse | ||
spaP | Cell surface antigen, SpaP | GACTTTGGTAATGGTTATGCATCAA | TTTGTATCAGCCGGATCAAGTG |
gbpB | Glucan binding protein | CGTGTTTCGGCTATTCGTGAAG | TGCTGCTTGATTTTCTTGTTGC |
ftf | FTF, fructan production |
AAATATGAAGGCGGCTACAACG | CTTCACCAGTCTTAGCATCCTGAA |
gtfB | GTFB, glucan production |
AGCAATGCAGCCAATCTACAAAT | ACGAACTTTGCCGTTATTGTCA |
gtfC | GTFC, glucan production |
GGTTTAACGTCAAAATTAGCTGTATTAGC | CTCAACCAACCGCCACTGTT |
gtfD | GTFD, glucan production |
TGTCTTGGTGGCCAGATAAAC | GAACGGTTTGTGCAGCAAGG |
brpA | Biofilm-regulation protein | CGTGAGGTCATCAGCAAGGTC | CGCTGTACCCCAAAAGTTTAGG |
smu0630 | Biofilm-formation hypothetical protein | GTTAGTTCTGGTTTTGACCGCAAT | CCCTCAACAACAACATCAAAGGT |
comDE | Competence-stimulating peptide | ACAATTCCTTGAGTTCCATCCAAG | TGGTCTGCTGCCTGTTGC |
relA | Guanosine tetra (penta)-phosphate synthetase | ACAAAAAGGGTATCGTCCGTACAT | AATCACGCTTGGTATTGCTAATTG |
16S rRNA | Normalizing internal standard | CCTACGGGAGGCAGCAGTAG | CAACAGAGCTTTACGATCCGAAA |
도 6은 본 발명의 실시예에서, 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 분리된 신규 화합물 Paragassericin A가 바이오필름 형성 관련 유전자의 발현에 미치는 영향을 측정한 결과이다. 도 5에서 신규 화합물 Paragassericin A를 처리한 군의 바이오필름 형성 관련 유전자 발현 수준은 Control 군 대비 상대적인 양으로 나타내었다. 도 6에서 보이는 바와 같이 Control 군에 비해 신규 화합물 Paragassericin A를 처리한 군에서 바이오필름 형성 관련 유전자 발현 수준이 매우 낮았다. 충치균에 의한 바이오필름은 복잡한 단계를 거쳐 형성된다. 이때, 여러개의 발병인자(virulence factor)가 바이오필름의 형성에 참여한다. spaP는 치아 표면에 있는 SAG(salivary agglutinin glycoprotein) 및 프롤린-풍부 단백질(proline-rich protein of acquired pellicle)에 붙음으로써 충치균을 치아 표면에 부착하게 한다. gbpB(glucan binding protein B)는 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)를 글루칸(glucan) 분자에 부착시켜, 미생물과 글루칸(glucan)이 서로 엉키게 하는 역할을 한다. 충치균은 치아 표면에 정착하여 치아 표면에 있는 단백질들과 매트릭스(matrix)를 형성한 후, 수크로스(sucrose를 분해시켜, 세포외 고분자 물질(extracellular polymeric substance, EPS)인 글루칸(glucan)과 프룩탄(fructan)을 형성한다. 이때, 글루칸(glucan)은 글루코실전이효소(glucosyltransferase)인 GTFB, GTFC, GTFD에 의해 형성되며, 프룩탄(fructan은 fructosyltransferase인 FTF에 의하여 형성된다. 형성된 EPS는 바이오필름을 더욱 단단하고 두껍게 만든다. ComDE는 생물막 합성을 조절하는 채석 감지 캐스케이드(quarum sensing cascade)의 일부이며, RelA, Smu630, brpA는 포도당 흡수, 바이오필름 생성, 내산성등에 관여하는 조절 단백질로 충치균에 의한 바이오필름 형성을 조절 한다. 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645 균주 배양액으로부터 분리된 신규 화합물 Paragassericin A 및 Paragassericin B는 충치균의 부착을 어렵게 하고 EPS 생합성 관련 유전자의 발현 수준을 낮추어 최종적으로 바이오필름 형성을 억제하는 것으로 사료된다.
이상에서와 같이 본 발명을 상기의 실시예를 통해 설명하였지만 본 발명이 반드시 여기에만 한정되는 것은 아니며 본 발명의 범주와 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양한 변형실시가 가능함은 물론이다. 따라서, 본 발명의 보호범위는 본 발명에 첨부된 특허청구의 범위에 속하는 모든 실시 형태를 포함하는 것으로 해석되어야 한다.
Claims (16)
- 하기 화학식 2로 표시되는 화학 구조를 가지고, 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 화합물 :
[화학식 2]
상기 화학식 2에서,
q는 7 내지 13의 정수에서 선택되고,
r은 7의 정수이며,
X는 하이드록실기(OH)이다.
- 제1항에 있어서, 하기 화학식 5 또는 화학식 6으로 표시되는 화학 구조를 가지는 것을 특징으로 하는 화합물 :
[화학식 5]
[화학식 6]
- 제2항에 있어서, 상기 화합물은 락토바실러스 파라가세리(Lactobacillus paragasseri) MJM60645(수탁번호 : KACC 81194BP) 균주의 배양액에서 분리된 것을 특징으로 하는 화합물.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에서 선택되는 화합물의 약학적으로 허용가능한 염.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에서 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능함 염을 유효성분으로 포함하는, 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)의 바이오필름 형성 억제용 조성물.
- 제5항에 있어서, 상기 조성물은 치약, 구강청결제, 껌, 캔디류, 구강스프레이, 구강용 연고제 또는 구강용 바니쉬에서 선택되는 제형을 가지는 것을 특징으로 하는, 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)의 바이오필름 형성 억제용 조성물.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에서 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능함 염을 유효성분으로 포함하는, 바이오필름에 의해 유발되는 충치 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
- 제7항에 있어서, 상기 조성물은 치약, 구강청결제, 껌, 캔디류, 구강스프레이, 구강용 연고제 또는 구강용 바니쉬에서 선택되는 제형을 가지는 것을 특징으로 하는 충치 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
- 제7항에 있어서, 상기 바이오필름은 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)에 의해 형성되는 것을 특징으로 하는 충치 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에서 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능함 염을 유효성분으로 포함하는, 바이오필름에 의해 유발되는 치주질환 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
- 제10항에 있어서, 상기 치주질환은 치은염 또는 치주염에서 선택되는 것을 특징으로 하는 치주질환 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
- 제10항에 있어서, 상기 조성물은 치약, 구강청결제, 껌, 캔디류, 구강스프레이, 구강용 연고제 또는 구강용 바니쉬에서 선택되는 제형을 가지는 것을 특징으로 하는 치주질환 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
- 제10항에 있어서, 상기 바이오필름은 스트렙토코쿠스 무탄스(Streptococcus mutans)에 의해 형성되는 것을 특징으로 하는 치주질환 예방 또는 개선용 의약외품 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020220012335A KR102638321B1 (ko) | 2022-01-27 | 2022-01-27 | 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 신규 화합물 및 이의 용도 |
KR1020230096212A KR20230117302A (ko) | 2022-01-27 | 2023-07-24 | 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 신규 균주 및 이의용도 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR1020220012335A KR102638321B1 (ko) | 2022-01-27 | 2022-01-27 | 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 신규 화합물 및 이의 용도 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020230096212A Division KR20230117302A (ko) | 2022-01-27 | 2023-07-24 | 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 신규 균주 및 이의용도 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
KR20230115644A KR20230115644A (ko) | 2023-08-03 |
KR102638321B1 true KR102638321B1 (ko) | 2024-02-19 |
Family
ID=87560571
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020220012335A KR102638321B1 (ko) | 2022-01-27 | 2022-01-27 | 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 신규 화합물 및 이의 용도 |
KR1020230096212A KR20230117302A (ko) | 2022-01-27 | 2023-07-24 | 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 신규 균주 및 이의용도 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
KR1020230096212A KR20230117302A (ko) | 2022-01-27 | 2023-07-24 | 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 신규 균주 및 이의용도 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
KR (2) | KR102638321B1 (ko) |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MX2008015918A (es) * | 2006-06-12 | 2009-01-14 | Anacor Pharmaceuticals Inc | Compuestos para el tratamiento de enfermedad periodontal. |
KR102230517B1 (ko) * | 2019-07-09 | 2021-03-22 | 주식회사 메디오젠 | 충치 억제 활성을 갖는 락토바실러스 살리바리우스를 포함하는 조성물 |
-
2022
- 2022-01-27 KR KR1020220012335A patent/KR102638321B1/ko active IP Right Grant
-
2023
- 2023-07-24 KR KR1020230096212A patent/KR20230117302A/ko active Search and Examination
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
KR20230117302A (ko) | 2023-08-08 |
KR20230115644A (ko) | 2023-08-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR102368627B1 (ko) | 지방 축적 억제용 조성물 | |
CN115087728B (zh) | 新型沙克乳酸杆菌hem224菌株,以及包含所述菌株或其培养物的用于治疗炎症或哮喘的组合物 | |
KR20090083505A (ko) | 락토바실러스 퍼멘텀 bljh101을 이용한인삼추출물의 발효물을 제조하는 방법 및 이를 함유하는조성물 | |
EP2549994B1 (en) | Use of d-fagomine as inhibitor of bacterial adherence to epithelial cells | |
KR20150050726A (ko) | 간 보호 활성을 갖는 발효홍삼농축액 조성물 및 이의 제조방법 | |
KR101560331B1 (ko) | 대추 및 녹용 추출물을 이용한 유산균 발효 음료의 제조방법 | |
KR101909999B1 (ko) | 신규 류코노스톡 메센테로이데스 균주 및 이를 이용한 암 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR20200029187A (ko) | 커피잎 추출물, 프리바이오틱스, 또는 커피잎 추출물 및 프리바이오틱스를 유효성분으로 포함하는 구강 세균 억제용 조성물 | |
KR20200019358A (ko) | 충치균의 생육억제 작용을 갖는 진세노사이드 및 조성물 | |
KR102638321B1 (ko) | 바이오필름 형성 억제 활성을 갖는 신규 화합물 및 이의 용도 | |
WO1998056755A1 (fr) | Substances physiologiquement actives tkr2449, leur procede de preparation et micro-organisme | |
KR101724569B1 (ko) | 루부소사이드 생산하는 신규 제조방법 | |
KR100454226B1 (ko) | 감초추출물의 제조방법 및 감초추출물을 함유한 기능성항충치 물질 | |
KR20170017176A (ko) | 장 내 유산균 증가용 조성물 및 이를 이용한 유산균 생산 방법 | |
JPS6220993B2 (ko) | ||
KR101644607B1 (ko) | 흑미 추출물을 유효성분으로 함유하는 헬리코박터 파이로리 유래 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강식품 | |
KR101685829B1 (ko) | 항산화 활성이 증진된 겨우살이 추출 발효물의 제조방법 | |
KR101668986B1 (ko) | 모나스커스 색소 유도체를 포함하는 비만 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
KR101929565B1 (ko) | 복분자 추출물을 함유하는 바이오필름 형성 억제용 조성물 | |
JP2011502532A (ja) | スピンゴモナス属バクテリア菌株とアスペルギルス属カビ菌株の混合培養方法、それに由来した新規な抗癌抗生物質であるグリオニトリン(glionitrins)、及び前記グリオニトリンまたはその薬学的に許容可能な塩を有効成分として含む製薬組成物 | |
Sakanaka | Green tea polyphenols for prevention of dental caries | |
KR101982223B1 (ko) | 류코노스톡 락티스 cck940을 이용한 올리고당의 제조방법 | |
JP5118333B2 (ja) | 新規抗酸化性リグナン化合物 | |
KR101897644B1 (ko) | 갈대 내생균으로부터 분리된 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 치료 및 예방용 조성물 | |
KR20190126698A (ko) | L-카르니틴이 풍부한 강황 발효산물의 제조 방법 및 이의 용도 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
N231 | Notification of change of applicant | ||
A107 | Divisional application of patent | ||
A302 | Request for accelerated examination | ||
E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
GRNT | Written decision to grant |