KR102580918B1 - 스티그마스테롤을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents
스티그마스테롤을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 치료용 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102580918B1 KR102580918B1 KR1020210069122A KR20210069122A KR102580918B1 KR 102580918 B1 KR102580918 B1 KR 102580918B1 KR 1020210069122 A KR1020210069122 A KR 1020210069122A KR 20210069122 A KR20210069122 A KR 20210069122A KR 102580918 B1 KR102580918 B1 KR 102580918B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- ovarian cancer
- stigmasterol
- composition
- cells
- preventing
- Prior art date
Links
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 110
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 110
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 99
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 99
- HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N UNPD88870 Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)=CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 99
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 99
- 235000016831 stigmasterol Nutrition 0.000 title claims abstract description 99
- HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N stigmasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N 0.000 title claims abstract description 99
- 229940032091 stigmasterol Drugs 0.000 title claims abstract description 99
- BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N stigmasterol Natural products CCC(C=CC(C)C1CCCC2C3CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 99
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 47
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 23
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims abstract description 20
- 230000036541 health Effects 0.000 claims abstract description 18
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 13
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 90
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 claims description 22
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 claims description 17
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 claims description 15
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 claims description 14
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 14
- 230000007727 signaling mechanism Effects 0.000 claims description 13
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 claims description 12
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 claims description 12
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 claims description 9
- 230000009702 cancer cell proliferation Effects 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 230000028161 membrane depolarization Effects 0.000 claims description 5
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 4
- 230000005033 autophagosome formation Effects 0.000 claims description 3
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 3
- 102000010400 1-phosphatidylinositol-3-kinase activity proteins Human genes 0.000 claims 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 abstract description 12
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 abstract description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 22
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 18
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 102000003993 Phosphatidylinositol 3-kinases Human genes 0.000 description 13
- 108090000430 Phosphatidylinositol 3-kinases Proteins 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 11
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 10
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 8
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 7
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 7
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 6
- 102000019149 MAP kinase activity proteins Human genes 0.000 description 6
- 108040008097 MAP kinase activity proteins Proteins 0.000 description 6
- 239000002253 acid Chemical class 0.000 description 6
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 6
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- -1 organic base salts Chemical class 0.000 description 6
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 5-bromodeoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 5
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 5
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000012826 P38 inhibitor Substances 0.000 description 5
- 239000012828 PI3K inhibitor Substances 0.000 description 5
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 5
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 5
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 5
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 5
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 5
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 5
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 5
- 229940043441 phosphoinositide 3-kinase inhibitor Drugs 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- APERIXFHHNDFQV-UHFFFAOYSA-N [2-[2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]-5-methylphenoxy]ethoxy]-4-[3,6-bis(dimethylamino)xanthen-9-ylidene]cyclohexa-2,5-dien-1-ylidene]-bis(carboxymethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C12=CC=C(N(C)C)C=C2OC2=CC(N(C)C)=CC=C2C1=C(C=1)C=CC(=[N+](CC(O)=O)CC(O)=O)C=1OCCOC1=CC(C)=CC=C1N(CC(O)=O)CC(O)=O APERIXFHHNDFQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 4
- GOOXRYWLNNXLFL-UHFFFAOYSA-H azane oxygen(2-) ruthenium(3+) ruthenium(4+) hexachloride Chemical compound N.N.N.N.N.N.N.N.N.N.N.N.N.N.[O--].[O--].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Cl-].[Ru+3].[Ru+3].[Ru+4] GOOXRYWLNNXLFL-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 4
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 4
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 4
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 4
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 4
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 4
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 4
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 4
- XDFNWJDGWJVGGN-UHFFFAOYSA-N 2-(2,7-dichloro-3,6-dihydroxy-9h-xanthen-9-yl)benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C1C2=CC(Cl)=C(O)C=C2OC2=CC(O)=C(Cl)C=C21 XDFNWJDGWJVGGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010055717 JNK Mitogen-Activated Protein Kinases Proteins 0.000 description 3
- 239000012825 JNK inhibitor Substances 0.000 description 3
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 3
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ACPOUJIDANTYHO-UHFFFAOYSA-N anthra[1,9-cd]pyrazol-6(2H)-one Chemical compound C1=CC(C(=O)C=2C3=CC=CC=2)=C2C3=NNC2=C1 ACPOUJIDANTYHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 3
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 3
- 230000004611 cancer cell death Effects 0.000 description 3
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 3
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 3
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 3
- QDITZBLZQQZVEE-YBEGLDIGSA-N (5z)-5-[(4-pyridin-4-ylquinolin-6-yl)methylidene]-1,3-thiazolidine-2,4-dione Chemical compound S1C(=O)NC(=O)\C1=C\C1=CC=C(N=CC=C2C=3C=CN=CC=3)C2=C1 QDITZBLZQQZVEE-YBEGLDIGSA-N 0.000 description 2
- MQUYTXDAVCOCMX-UHFFFAOYSA-N 6-phenyl-2-imidazo[2,1-b][1,3,4]thiadiazolesulfonamide Chemical compound N1=C2SC(S(=O)(=O)N)=NN2C=C1C1=CC=CC=C1 MQUYTXDAVCOCMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000016614 Autophagy-Related Protein 5 Human genes 0.000 description 2
- 108010092776 Autophagy-Related Protein 5 Proteins 0.000 description 2
- 108010014380 Autophagy-Related Protein-1 Homolog Proteins 0.000 description 2
- 102000016956 Autophagy-Related Protein-1 Homolog Human genes 0.000 description 2
- 102000004072 Beclin-1 Human genes 0.000 description 2
- 108090000524 Beclin-1 Proteins 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 108010007457 Extracellular Signal-Regulated MAP Kinases Proteins 0.000 description 2
- 102000007665 Extracellular Signal-Regulated MAP Kinases Human genes 0.000 description 2
- OUVXYXNWSVIOSJ-UHFFFAOYSA-N Fluo-4 Chemical compound CC1=CC=C(N(CC(O)=O)CC(O)=O)C(OCCOC=2C(=CC=C(C=2)C2=C3C=C(F)C(=O)C=C3OC3=CC(O)=C(F)C=C32)N(CC(O)=O)CC(O)=O)=C1 OUVXYXNWSVIOSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- 101150112014 Gapdh gene Proteins 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000692892 Homo sapiens Regulator of microtubule dynamics protein 3 Proteins 0.000 description 2
- 101001050288 Homo sapiens Transcription factor Jun Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 102100026409 Regulator of microtubule dynamics protein 3 Human genes 0.000 description 2
- HDAJDNHIBCDLQF-RUZDIDTESA-N SCH772984 Chemical compound O=C([C@@H]1CCN(C1)CC(=O)N1CCN(CC1)C=1C=CC(=CC=1)C=1N=CC=CN=1)NC(C=C12)=CC=C1NN=C2C1=CC=NC=C1 HDAJDNHIBCDLQF-RUZDIDTESA-N 0.000 description 2
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100023132 Transcription factor Jun Human genes 0.000 description 2
- 102100032026 Vesicle-associated membrane protein-associated protein B/C Human genes 0.000 description 2
- 101710189833 Vesicle-associated membrane protein-associated protein B/C Proteins 0.000 description 2
- 102000004962 Voltage-dependent anion channels Human genes 0.000 description 2
- 108090001129 Voltage-dependent anion channels Proteins 0.000 description 2
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- MVCOAUNKQVWQHZ-UHFFFAOYSA-N doramapimod Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1N1C(NC(=O)NC=2C3=CC=CC=C3C(OCCN3CCOCC3)=CC=2)=CC(C(C)(C)C)=N1 MVCOAUNKQVWQHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- SCMLRESZJCKCTC-KMYQRJGFSA-N gtpl8173 Chemical compound C12=CC=C(CSCC)C=C2C2=C(CNC3=O)C3=C3C4=CC(CSCC)=CC=C4N4C3=C2N1[C@]1(C)[C@@](O)(C(=O)OC)C[C@H]4O1 SCMLRESZJCKCTC-KMYQRJGFSA-N 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 230000027829 mitochondrial depolarization Effects 0.000 description 2
- 235000012149 noodles Nutrition 0.000 description 2
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000009822 protein phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 235000021067 refined food Nutrition 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N (S)-camphorsulfonic acid Chemical compound C1C[C@@]2(CS(O)(=O)=O)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 1-methylsulfonylpiperidin-4-one Chemical compound CS(=O)(=O)N1CCC(=O)CC1 RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026802 72 kDa type IV collagenase Human genes 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 102100034283 Annexin A5 Human genes 0.000 description 1
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010011485 Aspartame Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 238000009010 Bradford assay Methods 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 1
- 102100029855 Caspase-3 Human genes 0.000 description 1
- 102100026550 Caspase-9 Human genes 0.000 description 1
- 108090000566 Caspase-9 Proteins 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- 102100023583 Cyclic AMP-dependent transcription factor ATF-6 alpha Human genes 0.000 description 1
- 101710104774 Cyclic AMP-dependent transcription factor ATF-6 alpha Proteins 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 1
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 description 1
- 101000627872 Homo sapiens 72 kDa type IV collagenase Proteins 0.000 description 1
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 1
- 101000975421 Homo sapiens Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor type 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001011906 Homo sapiens Matrix metalloproteinase-14 Proteins 0.000 description 1
- 101000990902 Homo sapiens Matrix metalloproteinase-9 Proteins 0.000 description 1
- 101000911513 Homo sapiens Uncharacterized protein FAM215A Proteins 0.000 description 1
- 101000638886 Homo sapiens Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 1
- 101000808011 Homo sapiens Vascular endothelial growth factor A Proteins 0.000 description 1
- 108010032354 Inositol 1,4,5-Trisphosphate Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000007640 Inositol 1,4,5-Trisphosphate Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100024037 Inositol 1,4,5-trisphosphate receptor type 2 Human genes 0.000 description 1
- 108091006081 Inositol-requiring enzyme-1 Proteins 0.000 description 1
- 229940118135 JNK inhibitor Drugs 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 102100030216 Matrix metalloproteinase-14 Human genes 0.000 description 1
- 102100030412 Matrix metalloproteinase-9 Human genes 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical class C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 244000046109 Sorghum vulgare var. nervosum Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N Sulfurous acid Chemical compound OS(O)=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 235000005764 Theobroma cacao ssp. cacao Nutrition 0.000 description 1
- 235000005767 Theobroma cacao ssp. sphaerocarpum Nutrition 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 102100026728 Uncharacterized protein FAM215A Human genes 0.000 description 1
- 102100031358 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 1
- 102100039037 Vascular endothelial growth factor A Human genes 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- QOMNQGZXFYNBNG-UHFFFAOYSA-N acetyloxymethyl 2-[2-[2-[5-[3-(acetyloxymethoxy)-2,7-difluoro-6-oxoxanthen-9-yl]-2-[bis[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]amino]phenoxy]ethoxy]-n-[2-(acetyloxymethoxy)-2-oxoethyl]-4-methylanilino]acetate Chemical compound CC(=O)OCOC(=O)CN(CC(=O)OCOC(C)=O)C1=CC=C(C)C=C1OCCOC1=CC(C2=C3C=C(F)C(=O)C=C3OC3=CC(OCOC(C)=O)=C(F)C=C32)=CC=C1N(CC(=O)OCOC(C)=O)CC(=O)OCOC(C)=O QOMNQGZXFYNBNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 238000009098 adjuvant therapy Methods 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-RSJOWCBRSA-N aldehydo-D-galacturonic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-RSJOWCBRSA-N 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N anhydrous glutaric acid Natural products OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 239000000605 aspartame Substances 0.000 description 1
- 235000010357 aspartame Nutrition 0.000 description 1
- IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N aspartame Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)OC)CC1=CC=CC=C1 IAOZJIPTCAWIRG-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- 229960003438 aspartame Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 210000004957 autophagosome Anatomy 0.000 description 1
- 235000015241 bacon Nutrition 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000001164 bioregulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 1
- 235000001046 cacaotero Nutrition 0.000 description 1
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical class [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- FNAQSUUGMSOBHW-UHFFFAOYSA-H calcium citrate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O FNAQSUUGMSOBHW-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000001354 calcium citrate Substances 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000005773 cancer-related death Effects 0.000 description 1
- 235000013574 canned fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000007963 capsule composition Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 238000002038 chemiluminescence detection Methods 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 238000009096 combination chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000014510 cooky Nutrition 0.000 description 1
- 238000010219 correlation analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 230000036576 dermal application Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 239000008157 edible vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000010685 fatty oil Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000012812 general test Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 108010017007 glucose-regulated proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 description 1
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 description 1
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000000185 intracerebroventricular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N lauric acid triglyceride Natural products CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940069445 licorice extract Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000007721 medicinal effect Effects 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 235000019462 natural additive Nutrition 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 235000021096 natural sweeteners Nutrition 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 235000006408 oxalic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 1
- WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N pamoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC=3C4=CC=CC=C4C=C(C=3O)C(=O)O)=C(O)C(C(O)=O)=CC2=C1 WLJNZVDCPSBLRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 229940068065 phytosterols Drugs 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 150000004804 polysaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000003938 response to stress Effects 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N schardinger α-dextrin Chemical compound O1C(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC(C(O)C2O)C(CO)OC2OC(C(C2O)O)C(CO)OC2OC2C(O)C(O)C1OC2CO HFHDHCJBZVLPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000000892 thaumatin Substances 0.000 description 1
- 235000010436 thaumatin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 235000013337 tricalcium citrate Nutrition 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
- A61K31/575—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of three or more carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, ergosterol, sitosterol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/308—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on cancer prevention
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/30—Other Organic compounds
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
본 발명은 스티그마스테롤(stigmasterol)을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 스티그마스테롤을 유효성분으로 함유하는, 난소암 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상기 스티그마스테롤을 포함하는 조성물은 난소암 세포주의 세포 증식을 억제하고 세포 사멸을 유도하는 바, 이를 이용하여 난소암을 효과적으로 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
상기 스티그마스테롤을 포함하는 조성물은 난소암 세포주의 세포 증식을 억제하고 세포 사멸을 유도하는 바, 이를 이용하여 난소암을 효과적으로 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
Description
본 발명은 스티그마스테롤을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
난소암은 부인과 질병으로 인한 사망 사례들 중에서 주요한 여성 사망 원인으로 손꼽힌다. 미국에서는 2018년에 대략 22,240명의 새로운 난소암 환자가 발생하였으며, 14,070명이 난소암으로 인해 사망하였다. 암으로 인한 사망률 중 난소암으로 인한 사망 사례는 5위에 달한다.
난소암의 예후가 좋지 않은 이유는 난소암 발병 초기에 증상이 거의 없기 때문에 조기 진단이 어렵고 진행성 난소암의 경우 항암제 내성을 가지고 있기 때문이다. 난소암이 초기에 진단되었을 때 5년 생존율이 90% 이상에 달하지만, 후기에 발견되어 전이가 진행된 상태라면 5년 생존율이 30% 이하로 급감하게 된다.
하지만, 난소암을 진단받은 환자들의 75% 이상이 난소 근처 또는 복강으로 전이가 일어난 뒤에야 난소암을 진단받고 있고, 난소암 치료 후 약 70% 정도의 환자들은 항암제 내성과 함께 재발을 나타낸다. 파클리탁셀과 시스플라틴 병용 화학 요법은 1996년 난소암 환자 치료의 표준으로 도입된 이래 지속적으로 사용되며, 개선된 수술, 보조 치료 및 화학 요법 약물의 조합에도 불구하고 난소암은 지속적으로 재발하고 있다.
스티그마스테롤(stigmasterol)은 파이토스테롤(phytosterol)의 일종으로 채소, 견과류, 씨앗, 허브, 가식성 오일 등에 함유되어 있으며 LDL 콜레스테롤 감소를 통한 심혈관 질환 개선, 피부암, 위암, 유방암, 전립선암 등에서의 항암 효과가 있다고 보고되었다.
하지만, 스티그마스테롤이 난소암 발병 및 진행에 대해 어떠한 치료 및 예방적 효과를 가지는지에 대한 연구는 알려진 바가 없다.
본 발명의 목적은 안전하고 부작용이 적은 천연물 유래 물질을 포함하는 난소암 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 데에 있다.
상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 스티그마스테롤(stigmasterol)을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 스티그마스테롤(stigmasterol); 및 PI3K 또는 MAPK 신호전달기전 억제제;를 포함하는 난소암 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 스티그마스테롤(stigmasterol)을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 스티그마스테롤(stigmasterol); 및 PI3K 또는 MAPK 신호전달기전 억제제;를 포함하는 난소암 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명은 스티그마스테롤(stigmasterol)을 유효성분으로 함유하는 난소암 세포 내 칼슘이온 농도 증진용 시약 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 시험관 내(in vitro)에서 난소암 세포에 스티그마스테롤(stigmasterol)을 처리하는 단계를 포함하는 난소암 세포 내 칼슘이온 증진 방법을 제공한다.
본 발명에 따른 스티그마스테롤은 난소암 세포주에서 세포사멸 신호를 유도하고, 미토콘드리아 탈분극과 활성산소(ROS) 생성을 증가시키며, 세포질과 미토콘드리아 내 칼슘이온 농도를 비정상적으로 증가시킴으로써, 난소암 세포주의 세포사멸을 일으킬 수 있다.
또한, 상기 스티그마스테롤은 난소암 세포주의 세포 증식과 세포 주기를 조절하여 세포 성장을 억제하며, 세포 이동을 감소시키고 세포 성장과 관련된 신호전달기전을 억제할 수 있는 바, 이러한 스티그마스테롤을 이용하여 난소암을 효과적으로 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
도 1은 스티그마스테롤 처리에 따른 난소암 세포의 세포 사멸 양상을 분석한 것이다.
도 2는 스티그마스테롤 처리에 따른 난소암 세포의 미토콘드리아 막 전위 및 활성산소종(ROS) 생성 변화를 나타낸 것이다.
도 3은 스티그마스테롤 처리에 따른 난소암 세포 내 칼슘이온 변화를 분석한 것이다.
도 4는 스티그마스테롤 처리에 따른 난소암 세포의 소포체 스트레스, 소포체-미토콘드리아 축 및 자가포식 조절 변화를 나타낸 것이다.
도 5는 스티그마스테롤 처리에 따른 난소암 세포의 세포 증식 변화 및 이와 관련된 신호전달기전을 분석한 것이다.
도 6은 스티그마스테롤 및 신호전달기전 억제제 병용처리에 따른 단백질 인산화 효소 양상을 분석한 것이다.
도 7은 스티그마스테롤 및 칼슘 조절 물질인 루테늄 레드(ruthenium red)의 병용처리에 따른 세포 사멸 양상을 분석한 것이다.
도 8은 스티그마스테롤에 의한 이주성 양상을 분석한 것이다.
도 9는 스티그마스테롤이 난소암 세포주에서의 매커니즘을 개략적으로 나타낸 것이다.
도 2는 스티그마스테롤 처리에 따른 난소암 세포의 미토콘드리아 막 전위 및 활성산소종(ROS) 생성 변화를 나타낸 것이다.
도 3은 스티그마스테롤 처리에 따른 난소암 세포 내 칼슘이온 변화를 분석한 것이다.
도 4는 스티그마스테롤 처리에 따른 난소암 세포의 소포체 스트레스, 소포체-미토콘드리아 축 및 자가포식 조절 변화를 나타낸 것이다.
도 5는 스티그마스테롤 처리에 따른 난소암 세포의 세포 증식 변화 및 이와 관련된 신호전달기전을 분석한 것이다.
도 6은 스티그마스테롤 및 신호전달기전 억제제 병용처리에 따른 단백질 인산화 효소 양상을 분석한 것이다.
도 7은 스티그마스테롤 및 칼슘 조절 물질인 루테늄 레드(ruthenium red)의 병용처리에 따른 세포 사멸 양상을 분석한 것이다.
도 8은 스티그마스테롤에 의한 이주성 양상을 분석한 것이다.
도 9는 스티그마스테롤이 난소암 세포주에서의 매커니즘을 개략적으로 나타낸 것이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명하기로 한다.
본 발명은 스티그마스테롤(stigmasterol)을 유효성분으로 함유하는, 난소암 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 명세서에서, "스티그마스테롤(stigmasterol)"은 하기 화학식 1로 표시되는 식물성 스테롤(phytosterol) 중 하나로, 세포막의 구조와 생리를 유지하는 주요 기능을 가지고 있으며, 앞서 상술한 바와 같이, LDL 콜레스테롤 감소를 통한 심혈관 질환 개선 효과와 피부암, 위암, 유방암, 전립선암 등에서의 항암 효과가 있다고 보고되었으나, 난소암에서의 항암 효과는 아직 알려진 바 없다.
<화학식 1>
상기 스티그마스테롤은 이와 동일한 효능을 갖는 범위 내에서 약학적 또는 식품학적으로 허용가능한 염의 형태로 사용할 수 있다.
본 명세서에서, "약학적 또는 식품학적으로 허용가능한"이란, 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 것을 의미한다.
상기 염은 약학적 또는 식품학적으로 허용가능한 염기성 염 또는 산성염 중 어느 하나의 형태로 사용할 수 있다. 염기성염은 유기 염기염, 무기 염기염 중 어느 하나의 형태로 사용할 수 있으며, 나트륨염, 칼륨염, 칼슘염, 리튬염, 마그네슘염, 세슘염, 아미늄(aminium)염, 암모늄염, 트리에칠아미늄염 및 피리디늄염으로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.
산성염은 유리산(free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 유리산으로는 무기산과 유기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 브롬산, 황산, 아황산, 인산, 이중 인산, 질산 등을 사용할 수 있고, 유기산으로는 구연산, 초산, 말레산, 말산, 퓨마르산, 글루코산, 메탄설폰산, 벤젠설폰산, 캠퍼설폰산, 옥살산, 말론산, 글루타릭산, 아세트산, 글리콘산, 석신산, 타타르산, 4-톨루엔설폰산, 갈락투론산, 엠본산, 글루탐산, 시트르산, 아스파르탄산, 스테아르산 등을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않고 당업계에서 통상적으로 사용되는 다양한 무기산 및 유기산을 이용하여 형성되는 염이 모두 포함될 수 있다.
또한, 상기 스티그마스테롤은 약학적 또는 식품학적으로 허용되는 염뿐만 아니라, 통상의 방법에 의해 제조될 수 있는 모든 염, 수화물, 용매화물, 유도체 등을 모두 포함할 수 있다. 부가염은 통상의 방법으로 제조할 수 있고, 수혼화성 유기용매, 예를 들면 아세톤, 메탄올, 에탄올, 또는 아세토니트릴 등에 녹여 과량의 유기염기를 가하거나 무기염기의 염기 수용액을 가한 후 침전시키거나 결정화시켜서 제조할 수 있다. 또는 이 혼합물에서 용매나 과량의 염기를 증발시킨 후 건조시켜서 부가염을 얻거나 또는 석출된 염을 흡인 여과시켜 제조할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 조성물은 난소암 세포의 증식을 억제하고, 세포 사멸을 유도할 수 있다.
보다 상세하게는, 상기 조성물은 난소암 세포의 미토콘드리아의 막 전위 탈분극을 유도하고, 활성산소종(ROS) 생성을 증가시키며, 세포질(cytosol) 및 미토콘드리아의 칼슘이온 농도를 증가시킴으로써 세포 사멸을 유도할 수 있다.
상기 조성물은 난소암 세포 내 소포체 스트레스를 증가시키고, 소포체-미토콘드리아 축을 조절하며, 오토파고좀(autophagosome) 형성을 유도할 수 있다.
또한, 상기 조성물은 난소암 세포 증식과 관련된 PI3K(phosphatidylinositol-3-kinase) 또는 MAPK(mitogen-activated protein kinase) 신호전달기전을 억제할 수 있다.
상기 조성물은 이러한 효과를 가진 스티그마스테롤을 유효성분으로 함유함으로써, 난소암 예방 또는 치료를 위한 약학 조성물로 활용할 수 있다.
본 발명은 스티그마스테롤(stigmasterol); 및 PI3K 또는 MAPK 신호전달기전 억제제;를 포함하는 난소암 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 신호전달기전 억제제는 PI3K 억제제, ERK1/2(extracellular signal-regulated kinase) 억제제, JNK(c-Jun NH2-terminal kinase) 억제제 및 P38 억제제로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상일 수 있고, 보다 상세하게는, PI3K 억제제는 LY294002, Wortmmanin, LY3023414, ME401, GSK1059615 등일 수 있고, ERK1/2 억제제는 U0126, FR180204, SCH772984, PD98059 등일 수 있으며, JNK 억제제는 SP600125, AEG3482, CEP1347, BI78D3 등일 수 있고, P38 억제제는 SB203580, SB202190, BIRB796, JX-401 등일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 조성물은 난소암 세포 증식 억제 및 세포 사멸 효과를 가진 스티그마스테롤과 상기 PI3K 또는 MAPK 신호전달기전 억제제를 병용함으로써 난소암 치료의 시너지 효과를 나타낼 수 있고, 이에 보다 효과적으로 난소암을 예방 또는 치료할 수 있다.
본 명세서에서, "예방"이란, 본 발명에 따른 약학 조성물 또는 건강기능식품 조성물의 투여에 의해 난소암, 또는 이의 적어도 하나 이상의 증상의 발생을 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미한다. 또한, 재발을 예방하거나 방지하기 위해 상기 질병에 차도가 있는 대상의 치료를 포함한다.
본 명세서에서, "치료"란, 본 발명에 따른 약학 조성물의 투여에 의해 난소암, 또는 이의 적어도 하나 이상의 증상을 완화, 감소, 또는 소멸시키는 등 그 증세를 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
본 명세서에서, "약학 조성물"이란, 특정한 목적을 위해 투여되는 조성물로, 본 발명의 목적상 난소암, 또는 이의 적어도 하나 이상의 증상을 예방하거나 또는 치료하기 위해 투여되는 것을 의미한다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 약학적 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 상기 약학 조성물은 제형에 따라 약학적으로 허용가능한 적절한 담체와 배합될 수 있고, 필요에 따라, 부형제, 희석제, 분산제, 유화제, 완충제, 안정제, 결합제, 붕해제, 용제 등을 더 포함하여 제조될 수 있다. 상기 적절한 담체 등은 본 발명에 따른 스티그마스테롤의 활성 및 특성을 저해하지 않는 것으로, 투여 형태 및 제형에 따라 달리 선택될 수 있다.
상기 약학 조성물은 어떠한 제형으로도 적용될 수 있고, 보다 상세하게는 통상의 방법에 따라 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 비경구형 제형으로 제형화하여 사용될 수 있다.
상기 경구형 제형 중 고형 제형은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등의 형태로, 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로스, 락토오스, 솔비톨, 만니톨, 셀룰로오스, 젤라틴 등을 섞어 조제할 수 있고, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 포함될 수 있다. 또한, 캡술제형의 경우 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체를 더 포함할 수 있다.
상기 경구형 제형 중 액상 제형은 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
상기 비경구 제형은 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함될 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 이에 제한되지 않고, 당해 기술 분야에 알려진 적합한 제제를 모두 사용 가능하다.
또한, 상기 약학 조성물은 치료 효능의 증진을 위해 칼슘이나 비타민 등을 더 첨가할 수 있다.
본 발명에 따른 약학 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여될 수 있다.
본 명세서에서, "약학적으로 유효한 양"이란, 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미한다.
상기 약학 조성물의 유효 용량 수준은 사용 목적, 환자의 연령, 성별, 체중 및 건강 상태, 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 달리 결정될 수 있다. 예를 들어, 일정하지는 않지만 일반적으로 0.001 내지 100mg/kg으로, 바람직하게는 0.01 내지 10mg/kg을 일일 1회 내지 수회 투여될 수 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
상기 약학 조성물은 난소암이 발생할 수 있는 임의의 동물에 투여할 수 있고, 상기 동물은 예를 들어, 인간 및 영장류뿐만 아니라 소, 돼지, 말, 개 등의 가축 등을 포함할 수 있다.
상기 약학 조성물은 제제 형태에 따른 적당한 투여 경로로 투여될 수 있고, 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다. 투여 방법은 특히 한정할 필요 없이, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피부 도포, 호흡기내 흡입, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내(intracere-broventricular) 주사 등의 통상적인 방법으로 투여될 수 있다.
상기 약학 조성물은 난소암의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로 사용될 수 있고, 수술 또는 다른 약물치료 등과 병용하여 사용될 수 있다.
본 발명은 스티그마스테롤(stigmasterol)을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상술한 바와 같이, 상기 조성물은 난소암 세포의 증식을 억제하고, 세포 사멸을 유도할 수 있다. 보다 상세하게는, 상기 조성물은 난소암 세포의 미토콘드리아의 막 전위 탈분극을 유도하고, 활성산소종(ROS) 생성을 증가시키며, 세포질(cytosol) 및 미토콘드리아의 칼슘이온 농도를 증가시킴으로써 세포 사멸을 유도할 수 있다. 상기 조성물은 난소암 세포 내 소포체 스트레스를 증가시키고, 소포체-미토콘드리아 축을 조절하며, 오토파고좀(autophagosome) 형성을 유도할 수 있다.
또한, 상기 조성물은 난소암 세포 증식과 관련된 PI3K(phosphatidylinositol-3-kinase) 또는 MAPK(mitogen-activated protein kinase) 신호전달기전을 억제할 수 있다.
상기 조성물은 이러한 효과를 가진 스티그마스테롤을 유효성분으로 함유함으로써, 난소암 예방 또는 개선을 위한 건강기능식품 조성물로 활용할 수 있다.
본 발명은 스티그마스테롤(stigmasterol); 및 PI3K 또는 MAPK 신호전달기전 억제제;를 포함하는 난소암 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
상기 신호전달기전 억제제는 PI3K 억제제, ERK1/2(extracellular signal-regulated kinase) 억제제, JNK(c-Jun NH2-terminal kinase) 억제제 및 P38 억제제로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상일 수 있고, 보다 상세하게는, PI3K 억제제는 LY294002, Wortmmanin, LY3023414, ME401, GSK1059615 등일 수 있고, ERK1/2 억제제는 U0126, FR180204, SCH772984, PD98059 등일 수 있으며, JNK 억제제는 SP600125, AEG3482, CEP1347, BI78D3 등일 수 있고, P38 억제제는 SB203580, SB202190, BIRB796, JX-401 등일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 조성물은 난소암 세포 증식 억제 및 세포 사멸 효과를 가진 스티그마스테롤과 상기 PI3K 또는 MAPK 신호전달기전 억제제를 병용함으로써 난소암 예방 또는 개선의 시너지 효과를 나타낼 수 있고, 이에 보다 효과적으로 난소암을 예방 또는 개선할 수 있다. 이에 상응하는 특징들은 상술된 부분에서 대신할 수 있다.
본 명세서에서, "개선"이란, 본 발명에 따른 건강기능식품 조성물의 섭취에 의해 난소암, 또는 이의 적어도 하나 이상의 증상을 완화, 감소, 또는 소멸시키는 등 그 증세를 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
본 명세서에서, "건강기능식품"이란, 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 포함하며, 영양 공급 외에도 본 발명의 목적상 난소암의 예방, 생체 방어, 면역, 회복 등의 생체 조절 기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료 효과가 높은 식품을 의미한다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물에 있어서, 상기 건강기능식품은 난소암의 예방 또는 개선 목적으로, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 시럽 또는 음료 등으로 제조될 수 있다. 상기 건강기능식품이 취할 수 있는 형태에는 제한이 없으며, 상기 약학 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가될 수 있다.
상기 건강기능식품은 통상적인 의미의 식품을 모두 포함할 수 있다. 예를 들어, 음료 및 각종 드링크, 과실 및 그의 가공식품(과일통조림, 잼 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(햄, 베이컨 등), 빵류 및 면류, 쿠키 및 스낵류, 유제품(버터, 치즈 등) 등이 가능하며, 통상적인 의미에서의 기능성 식품을 모두 포함할 수 있다. 또한 동물을 위한 사료로 이용되는 식품도 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 건강기능식품 조성물은 당업계에서 통상적으로 사용되는 식품학적으로 허용 가능한 식품 첨가제(식품 첨가물) 및 적절한 기타 보조 성분을 더 포함하여 제조될 수 있다. 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전처에 승인된 식품첨가물공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정할 수 있다. 상기 '식품첨가물공전'에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료 제제, 타르색소제제 등의 혼합 제제류 등을 들 수 있다.
상기 기타 보조 성분은 예를 들어, 향미제, 천연 탄수화물, 감미제, 비타민, 전해질, 착색제, 펙트산, 알긴산, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산화제 등을 추가로 함유할 수 있다. 특히, 상기 천연 탄수화물로는 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로오스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜을 사용할 수 있으며, 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 건강기능식품에 함유된 상기 스티그마스테롤, 또는 이의 식품학적으로 허용가능한 염의 유효 용량은 난소암 예방 또는 개선 등 그 사용 목적에 따라 적절하게 조절될 수 있다.
상기 건강기능식품 조성물은 식품을 원료로 하여 일반 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 난소암 예방 또는 개선을 위한 보조제로 섭취될 수 있다.
본 발명은 스티그마스테롤(stigmasterol)을 유효성분으로 함유하는, 난소암 세포 내 칼슘이온 농도 증진용 시약 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 시험관 내(in vitro)에서 난소암 세포에 스티그마스테롤(stigmasterol)을 처리하는 단계를 포함하는, 난소암 세포 내 칼슘이온 증진 방법을 제공한다.
이에 상응하는 특징들은 상술된 부분에서 대신할 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
<
실험예
1> 난소암 세포주에서의
스티그마스테롤의
영향 확인
<실험방법>
1. 세포배양
난소암 세포주인 ES2, OV90 세포는 American Type Culture Collction에서 구매하여 사용하였으며, 세포의 단층배양을 위해서 MACOY’s 배지에 10% 소태아혈청 (Fetal bovine serum, FBS)을 함께 혼합하여 사용하였다.
2. 실험 재료
후보 조성물질인 스티그마스테롤(stigmasterol)은 Sigma에서 합성된 제품(cat number: S2424)으로, 처리 전 디메틸 설폭사이드(dimethyl sulfoxide, DMSO)로 희석하였다. 조성물에 의한 신호전달메커니즘을 확인하기 위하여 사용된 항체들은 Cell Signaling Techonology, Santa Cruz Biotechnology 사로부터 구매하였다.
3.
BrdU를
이용한 세포 증식 능력 분석
난소암 세포의 증식 능력에 스티그마스테롤이 미치는 영향을 확인하기 위하여 배양한 5×103개의 세포와 배지 100μL을 96 well에 분주하고 스티그마스테롤을 용량 의존적(0, 5, 10, 20μg/mL)으로 처리하여 48시간 동안 배양한 다음, BrdU 키트 (Cat No: 1167229001, Roche)를 사용하여 제조사의 매뉴얼에 따라 실험을 수행하였다.
48시간 인큐베이션 이 후, 10μM BrdU를 각 well에 추가적으로 넣어 37℃/5% CO2 인큐베이터 내에서 2시간 동안 배양하였다. ES2, OV90 세포에 BrdU를 라벨링(labeling) 하고 세포를 고정하여 anti-BrdU-POD 용액을 상온에서 90분 인큐베이션 시킨 이 후 3차례 세척하였다. 마지막으로 100μL의 3,3’,5,5’-테트라메틸벤지딘 (3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine) 기질(substrate)로 세포를 반응시켜 ELISA 리더기를 사용하여 370nm, 492nm 내 흡광도를 측정하여 세포 증식 능력을 분석하였다.
4.
스페로이드
분석(Spheroid Assay)
ES2 및 OV90 세포를 배양 접시(3×103 cells)의 커버에 떨어뜨리고, 비히클(vehicle) 또는 스티그마스테롤 처리하여 72시간 동안 배양하였다.
암 형태(cancer morphology)는 DM3000 현미경 (Leica,Wetzlar, Germany)으로 관찰하고, 종양 면적(tumor area)은 ImageJ 소프트웨어 (http://rsb.info.nih.gov/ij/docs/index.html)를 사용하여 계산하였으며, 3D 밀도는 ReViSP 소프트웨어 (https://sourceforge.net/projects/revisp/)를 사용하여 추정하였다.
5.
프로피디움
요오드화물(
Propidium
iodide; PI) 염색을 이용한 세포 주기 분석
스티그마스테롤에 의한 난소암 세포의 세포주기 변화를 확인하기 위하여 5×105 세포를 6 well에 70~80% 세포가 찰 때까지 배양하였다. 이 후, 스티그마스테롤을 용량 의존적(0, 5, 10, 20μg/mL)으로 처리하여 48시간 동안 37℃/5% CO2 인큐베이터 내에서 배양하였다. 이 후, 트립신을 사용하여 세포를 배양 접시에서 떼어 PBS로 워싱을 진행하고 1mL의 1× 바인딩 버퍼(binding buffer)를 사용하여 세포를 천천히 혼합하고 원심분리하여 세포 펠렛(pellet)을 얻었다.
다음, 200μL의 1× binding buffer로 세포 현탁배양하여 브라운 1.5mL 튜브에 100μL 넣고 RNase 5μL, PI 5μL을 함께 혼합하여 세포를 1시간 동안 실온에 두어 염색하였다. 이 후 1× binding buffer를 400μL 추가하여 5mL FACS 튜브에 염색된 용액을 옮겨 유세포 분석기를 사용하여 형광 강도를 분석하여 각 세포 주기에 해당하는 세포의 수를 측정하였다.
6.
아넥신
V(
Annexin
V)와
프로피디움
요오드화물(
Propidium
iodide; PI) 염색을 통한 세포사멸 분석
스티그마스테롤에 의한 난소암 세포의 사멸 효과를 확인하기 위하여 FITC Annexin V 세포 사멸 진단 키트 I (BD Biosciences)를 사용하여 실험을 진행하였다.
먼저, 5×105 세포를 6 well에 배양한 후, 스티그마스테롤을 용량의존적(0, 5, 10, 20μg/mL)으로 처리하여 48시간 동안 37℃/5% CO2 인큐베이터 내에서 배양하였다. 이 후, 트립신을 사용하여 세포를 배양 접시에서 떼어 PBS로 워싱을 진행하고 1mL의 1× binding buffer를 사용하여 세포를 천천히 혼합하고 원심분리하여 세포 pellet을 얻었다. 다음, 200μL의 1× binding buffer로 세포 현탁배양하여 브라운 1.5mL 튜브에 100μL 넣고 Annexin V 5μL, PI 5μL을 함께 혼합하여 세포를 15분 동안 실온에 두어 염색하였다. 이 후 1× binding buffer를 400μL 추가하여 5mL FACS 튜브에 염색된 용액을 옮겨 유세포 분석기를 사용하여 형광 강도를 분석하여 사멸된 세포의 수를 측정하였다.
7.
Fluo
-4와
rhod
-2 염색을 통한 세포(
cytosolic
) 및 미토콘드리아 내부 칼슘 농도 분석
스티그마스테롤에 의한 난소암 세포의 세포질 또는 미토콘드리아 내 칼슘 농도를 확인하기 위하여 3μM의 fluo-4-아세톡시메틸 에스터(acetoxymethyl ester; AM) (Invitrogen)와 3μM rhod-2를 사용하여 실험을 진행하였다.
먼저, 5×105 세포를 6 well에 배양하였다. 이 후, 스티그마스테롤을 용량의존적 또는 칼슘이온 조절 물질(ruthenium red)과 병용으로 처리하여 48시간 동안 37℃/5% CO2 인큐베이터 내에서 배양하였다. 이 후, 트립신을 사용하여 세포를 배양 접시에서 떼어 PBS로 워싱을 진행하고 3μM의 fluo-4 또는 3μM rhod-2를 37℃/5% CO2 인큐베이터 내에서 20분간 염색하여 PBS로 워싱을 진행한 다음, FACS 튜브에 염색된 용액을 옮겨 유세포 분석기를 사용하여 형광 강도를 분석하여 사멸된 세포의 수를 측정하였다.
8.
JC
-1 염색을 통한 미토콘드리아 막 전위 측정
JC-1 미토콘드리아 막 전위 (MMP) 변화는 mitochondria staining kit (Cat No: CS0390, Sigma-Aldrich)를 사용하여 측정하였다.
5×105 개의 ES2, OV90 세포를 6 well에 배양하고 배양 접시의 70~80% 세포가 찰 때까지 배양한 후, 스티그마스테롤을 용량의존적(0, 5, 10, 20μg/mL) 또는 칼슘이온 조절 물질(ruthenium red)과 병용으로 처리하여 48시간 동안 37℃/5% CO2 인큐베이터 내에서 배양하였다. 이 후, 트립신을 사용하여 세포를 배양 접시에서 떼어 원심분리하여 세포 pellet을 얻었고, 세포는 JC-1 staining solution 에 풀어준 후 37℃/5% CO2 인큐베이터 내에서 20분 간 인큐베이션 하였다. 염색된 세포는 다시 원심분리하여 1× JC-1 staining buffer로 워싱한 후 유세포 분석기를 사용하여 형광 강도를 분석하였다.
9.
DCFH
-DA를 이용한 세포 내
ROS
(Reactive oxygen species) 측정
난소암 세포주 내 ROS 생성에 스티그마스테롤이 미치는 영향을 확인하기 위하여 페록사이드(peroxide) 존재 하에 2’,7’-디클로로플루오레신(2’,7’-dichlorofluorescin; DCF)으로 변환되어 형광을 띠는 2’,7’-디클로로플루오게신 디아세테이트(2’,7’-dichlorofluorescin diacetate; DCFH-DA, Sigma)를 사용하였다.
ES2, OV90 세포를 트립신을 통해 떼어내고 원심분리를 통해 세포 pellet을 얻은 다음, PBS로 한번 워싱하고 10μM의 DCFH-DA를 37℃ 인큐베이터 내에서 30분 동안 인큐베이션 하였다. 이 후 세포를 PBS에 의해 두 번 워싱하고 스티그마스테롤을 용량의존적으로 1시간 동안 37℃ 인큐베이터 내에서 인큐베이션 하였다. 처리된 세포는 PBS로 다시 워싱하고 유세포 분석기를 사용하여 DCF 형광강도를 분석하였다.
10. 단백질 발현 분석 (
웨스턴블롯
)
ES2, OV90 세포에 스티그마스테롤을 용량 의존적 또는 신호전달기전 억제제와 병용 처리한 다음 ES2, OV90 세포로부터 전체 단백질을 추출하여 Bradford protein assay (Bio-Rad, Hercules, CA, USA)로 단백질을 정량하였다. 이 후, 추출한 단백질을 95℃에서 5분간 변성하였으며 10% SDS/PAGE 젤을 이용하여 전기영동 수행한 뒤, 니트로셀룰로오스 막(nitrocellulose membrane)으로 옮겨주고, 1차 항체와 2차 항체를 차례로 인큐베이션 시킨 다음 chemiluminescence detection (SuperSignal West Pico, Pierce, Rockford, IL, USA) 시약을 사용하여 ChemiDoc EQ system과 Quantity One software (Bio-Rad) 기기를 사용하여 타겟 단백질의 발현을 분석하였다.
하기 표 1은 본 실험에 사용된 항체를 나타낸 것이다.
11. Quantitative RT-
PCR
난소암 세포 내 스티그마스테롤을 처리한 후 합성한 cDNA를 대상으로 quantitative RT-PCR을 수행하였다.
프라이머는 Primer 3 프로그램을 이용하여 약 80-150 bp로 디자인하였으며, SYBR green (Sigma-Aldrich)을 이용한 real-time PCR 검출 시스템 (Applied Biosystems)을 실시하였다. 각 유전자 및 GAPDH 유전자의 분석은 세 번에 걸쳐서 반복 수행되었으며 발현량을 확인하기 위해 표준 곡선 및 Ct 값을 GAPDH 유전자의 발현량으로 표준화시켜 분석하였다.
* PCR 조건: 94℃, 3분 (변성 단계) 및 40 사이클 (94℃, 20초-변성; 60℃, 40초-어닐링; 72℃, 1분-연장하는 것으로 구성된 사이클)을 실시하는 단계.
온도가 10초당 0.5℃의 속도로 55℃에서 95℃까지 증가시켜 연속적인 형광 측정을 획득함으로써 융해곡선 프로그램 분석을 실시하였다. Ct 값에 의해 얻어진 융해곡선에 따라 quantitative RT-PCR 산물을 동정하였고 상대적인 유전자 발현양상을 2-ΔΔCt 방법에 따라 분석하였다.
12. 통계분석
본 실험결과는 SAS (statistical analysis system) 통계프로그램을 이용하여 평균과 표준오차를 계산하였고, 일원배치분산분석 (one-way ANOVA)을 실시하였다. P < 0.05 수준에서 유의성 검정을 실시하였다.
<실험결과>
1.
스티그마스테롤에
의한 난소암 세포사멸 양상 분석
스티그마스테롤에 의해 난소암 세포주 ES2, OV90 세포의 변화양상을 분석하기 위하여 먼저 스티그마스테롤을 용량 의존적(0, 5, 10, 20μg/mL)으로 처리하여 세포사멸 연관 단백질의 발현을 확인한 결과, 도 1A 및 1B에 나타난 바와 같이, caspase-3, caspase-9의 clevage가 유도되었으며 세포사멸 단백질 BAK(BCL-s antag- onist/killer), BAX(BCL-2-associated X protein)의 발현도 증가하는 것으로 나타났다 (TUBA(alpha-tubulin): control).
또한, 난소암 3D 배양세포를 통하여 스티그마스테롤의 효과를 검증한 결과 3D 스페로이드 배양세포의 크기가 감소하는 것으로 나타났으며 (도 1C 및 1D), 아넥신 V(annexin V)와 프로피디움 요오드화물(propidium iodide; PI) 염색으로 세포 사멸 양상을 확인한 결과, 스티그마스테롤 농도가 증가할수록, 사멸 세포도 증가하는 것으로 나타남을 확인할 수 있다 (도 1E 및 1F). 이러한 결과는 세포주기 확인 시 sub-G1기의 증가시킴에 따라 세포 증식을 억제하고 세포 사멸을 유도하는 양상을 나타내었다 (도 1G-1H).
2.
스티그마스테롤에
의한 미토콘드리아 막 전위 변화, 활성산소, 칼슘이온 조절 분석
JC-1 염료를 사용하여 스티그마스테롤에 의한 미토콘드리아 막 전위 변화를 조사한 결과, 도 2A 및 2B에 나타난 바와 같이, 스티그마스테롤을 처리한 경우 난소암 ES2, OV90 세포 내 용량의존적으로 미토콘드리아 막 전위 탈분극이 유도됨을 확인하였다.
또한, 스티그마스테롤에 의한 세포 내 ROS 변화를 확인하기 위해 DCF 형광강도를 분석한 결과, 도 2C 및 2D에 나타난 바와 같이, 스티그마스테롤을 처리한 경우 난소암 ES2, OV90 세포 내 용량의존적으로 ROS 생성이 증가됨을 확인하였다.
스티그마스테롤에 의한 난소암 ES2, OV90 세포의 세포질(cytosol)과 미토콘드리아의 칼슘이온 변화를 Fluo-4-AM 및 Rhod-2 염색으로 확인한 결과, 도 3에 나타난 바와 같이, 스티그마스테롤이 세포질 내 칼슘이온과 미토콘드리아의 칼슘이온을 증가시키며 세포 사멸을 유도함을 확인할 수 있다.
3.
스티그마스테롤에
의한 난소암 세포 내 소포체-미토콘드리아 축 조절 및 자가포식 분석
스티그마스테롤의 용량의존적 처리(0, 5, 10, 20 μg/mL)을 통해 ES2, OV90 세포 주 내 소포체 스트레스 변화 양상을 확인하기 위해 소포체 스트레스 반응 인자인 IRE1α(inositol-requiring enzyme 1α), ATF6α(activating transcription factor 6α), PERK(PKR-like ER resident kinase), GADD153(growth arrest andDNAdamage-induced-153), eIF2α(eukaryotic translation-initiation factor 2α), 및 GRP78(glucose-regulated protein 78) 단백질의 인산화 또는 활성을 웨스턴블롯을 통해 분석한 결과, 도 4A 및 4B에 나타난 바와 같이, 스티그마스테롤이 용량의존적으로 난소암 세포주 내에 소포체 스트레스를 증가시키는 것을 확인하였다.
이 후, 스티그마스테롤에 의하여 소포체-미토콘드리아 축을 조절하는 단백질 VDAC(voltage-dependent anion channel), IP3R1(inositol 1,4,5-triphosphate receptor 1). IP3R2, VAPB(vesicle-associated membrane protein-associated protein B/C), 및 FAM82A2(family with sequence similarity 82, member a2)의 발현을 확인하였다. 그 결과, 도 4C 및 4D에 나타난 바와 같이, 소포체와 미토콘드리아 표면에 존재하는 단백질들의 발현이 증가함에 따라 소포체-미토콘드리아 접촉 현상이 증가하고 이에 따라 소포체로부터 칼슘이온 분비가 일어나며, 이는 미토콘드리아 내 칼슘이온 농도 증가로 이어지는 양상을 야기하는 원인이 됨을 확인할 수 있다.
또한, 스티그마스테롤에 의해 난소암 세포 내 자가포식(autophagy) 양상을 확인하기 위하여 자가포식을 검증할 수 있는 단백질, ULK1(UNC-51-like kinase 1), beclin-1 (BECN1), 및 ATG5(autophagy-related 5)의 발현을 스티그마스테롤 용량의존적 처리 시 웨스턴블롯을 통하여 확인하였다. 그 결과, 도 4E 및 4F에 나타난 바와 같이, 난소암 세포 내 스티그마스테롤의 처리는 소포체-미토콘드리아 접촉을 통하여 과도한 칼슘이온 분비를 야기시키고 이는 곧 오토파고좀(autophagosome) 형성을 유도하는 양상을 나타냄을 확인할 수 있다.
4.
스티그마스테롤에
의한 난소암 세포 증식 억제 및 신호전달기전 분석
스티그마스테롤에 의한 난소암 세포 증식을 분석하기 위하여 BrdU를 사용하여 세포 증식 양상을 확인한 결과, 도 5A 및 5B에 나타난 바와 같이, 스티그마스테롤의 용량이 증가할수록 난소암 세포주의 사멸이 유도됨을 확인할 수 있다.
또한, 세포의 증식과 연관된 PI3K 및 MAPK 신호전달기전 구성 단백질 인산화효소들의 인산화 양상을 웨스턴 블롯을 통해 분석한 결과, 도 5C 및 5D에 나타난 바와 같이, AKT, P70S6K, S6, ERK1/2, JNK 및 P38 단백질의 인산화가 감소함을 확인할 수 있다. 이를 통해, 스티그마스테롤이 PI3K 및 MAPK 신호전달기전 불활성화를 통하여 난소암 세포의 증식을 억제시킴을 확인할 수 있다.
더불어, 난소암 세포 내 PI3K 억제제 (LY294002; 20μM), ERK1/2 억제제 (U0126; 20μM), JNK 억제제 (SP600125; 20μM), P38 억제제 (SB203580; 20μM)를 스티그마스테롤과 병용 처리한 경우, 도 6에 나타난 바와 같이, 앞서 확인한 단백질 인산화 양상이 스티그마스테롤 단독 처리 시보다 각 신호전달기전 억제제와 병용 처리하였을 때 더욱 감소함을 확인할 수 있다. 즉, 스티그마스테롤과 PI3K 및 MAPK 억제를 병용하여 난소암 세포 증식을 더욱 효율적으로 억제할 수 있음을 알 수 있다.
5.
스티그마스테롤과
칼슘이온 조절 간 상관관계 분석
세포 내 칼슘이온을 조절하는 루테늄 레드(ruthenium red)를 스티그마스테롤과 병용 처리한 경우, 도 7에 나타난 바와 같이, 스티그마스테롤에 의해 증가하였던 세포사멸 (도 7A 및 7B), 미토콘드리아 막 전위 탈분극 (도 7C 및 7D) 및 미토콘드리아 칼슘이온 수치 (도 7E 및 7F)가 기저레벨을 향하여 감소하였다. 이를 통해, 스티그마스테롤에 의한 난소암 세포 사멸양상은 세포 내 칼슘이온을 조절함에 따라 야기됨을 검증할 수 있다.
6.
스티그마스테롤
의한 난소암 세포주 이주성 억제 양상 분석
난소암 세포주 전이와 관련하여 세포의 이주성과 관련 유전자들의 발현을 스티스마스테롤 적용에 따라 분석한 결과, 도 8에 나타난 바와 같이, 스티그마스테롤을 난소암 세포주에 적용 시 난소암 세포주의 이주성이 현저하게 감소하였으며 (도 8A 및 8B), 이주성 및 혈관형성에 관련된 유전자인 VEGFA, PLAU, MMP2, MMP9, MMP14가 모두 감소하는 것으로 확인되었다 (도 8C 및 8D). 이를 통해, 스티그마스테롤이 난소암 세포주의 이주성을 억제시킴을 확인할 수 있다.
종합하여 보면, 스티그마스테롤은 ES2 및 OV90 난소암 세포주에서 용도 의존적으로 세포 사멸 신호(apoptotic signals)를 유도하고, 미토콘드리아 탈 분극과 ROS 생성을 증가시키며, 세포질과 미토콘드리아에서 칼슘 수치를 비정상적으로 증가시킴으로써, 난소암 세포주의 세포 사멸을 일으켰다. 또한, 스티그마스테롤은 난소암 세포주의 세포 증식과 세포 주기를 조절하여 세포 성장을 억제하였으며, 세포 이동을 감소시키고 세포 성장과 관련된 신호 전달 단계를 억제한 바, 스티그마스테롤은 난소암의 신규한 치료 전략이 될 수 있음을 보여준다 (도 9).
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 즉, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다.
Claims (10)
- 스티그마스테롤(stigmasterol) 및 SB203580을 유효성분으로 함유하는, 난소암 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 제 1 항에 있어서,
상기 조성물은,
난소암 세포의 미토콘드리아의 막 전위 탈분극을 유도하고, 활성산소종(ROS) 생성을 증가시키며, 세포질(cytosol) 및 미토콘드리아의 칼슘이온 농도를 증가시키는 것을 특징으로 하는, 약학 조성물. - 제 1 항에 있어서,
상기 조성물은,
난소암 세포 내 소포체 스트레스를 증가시키고, 소포체-미토콘드리아 축을 조절하며, 오토파고좀(autophagosome) 형성을 유도하는 것을 특징으로 하는, 약학 조성물. - 제 1 항에 있어서,
상기 조성물은,
난소암 세포 증식과 관련된 PI3K 또는 MAPK 신호전달기전을 억제하는 것을 특징으로 하는, 약학 조성물. - 삭제
- 삭제
- 스티그마스테롤(stigmasterol) 및 SB203580을 유효성분으로 함유하는, 난소암 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 삭제
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210069122A KR102580918B1 (ko) | 2021-05-28 | 2021-05-28 | 스티그마스테롤을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 치료용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210069122A KR102580918B1 (ko) | 2021-05-28 | 2021-05-28 | 스티그마스테롤을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 치료용 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20220160900A KR20220160900A (ko) | 2022-12-06 |
| KR102580918B1 true KR102580918B1 (ko) | 2023-09-22 |
Family
ID=84407548
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020210069122A KR102580918B1 (ko) | 2021-05-28 | 2021-05-28 | 스티그마스테롤을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 치료용 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102580918B1 (ko) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103450310A (zh) | 2013-08-19 | 2013-12-18 | 南昌大学 | 豆甾醇衍生物及其在制备抗癌药物中的应用 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101404468B1 (ko) * | 2011-12-01 | 2014-06-10 | 제주대학교 산학협력단 | 밀감 잎 추출물로부터 분리된 화합물을 유효성분으로 함유하는 항암용 약학조성물 |
| KR101404948B1 (ko) | 2012-08-23 | 2014-06-10 | 부경대학교 산학협력단 | 나비쿨라 인서타로부터 분리된 스티그마스테롤 및 5 베타-히드록시시토스타놀을 함유하는 간암의 예방 또는 치료용 조성물 |
| KR101745504B1 (ko) * | 2014-10-13 | 2017-06-12 | 서울대학교산학협력단 | 잠분으로부터 항암 활성을 갖는 보미폴리올 및 스티그마스테롤을 분리하는 방법 |
| KR102498800B1 (ko) * | 2019-08-16 | 2023-02-10 | 고려대학교 산학협력단 | 크리소파놀을 포함하는 난소암 또는 유방암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
-
2021
- 2021-05-28 KR KR1020210069122A patent/KR102580918B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103450310A (zh) | 2013-08-19 | 2013-12-18 | 南昌大学 | 豆甾醇衍生物及其在制备抗癌药物中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20220160900A (ko) | 2022-12-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20060188590A1 (en) | Compositions for treating diabetes or obesity | |
| JP2021020916A (ja) | 乳酸金属塩を含む、がんを処置するための薬学的組成物 | |
| EP3566705B1 (en) | Composition for preventing or treating metastatic ovarian cancer, endometrial cancer or breast cancer | |
| US10376530B2 (en) | Pharmaceutical composition for preventing or treating gleevec-resistant leukemia containing ginsenoside F1 or ginsenoside Rg3 as an active ingredient | |
| JP2017534578A (ja) | ジペノサイド（ｇｙｐｅｎｏｓｉｄｅ）ｌｘｘｖを含む、子宮頸癌の予防又は治療用組成物 | |
| JP2018516841A (ja) | ジペノサイド７５の抗糖尿病効果 | |
| US12059450B2 (en) | Anticancer pharmaceutical composition containing IF1 as active ingredient | |
| KR102580918B1 (ko) | 스티그마스테롤을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR102374440B1 (ko) | 후코스테롤을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 치료용 조성물 | |
| JP2017145236A (ja) | ＡＧＥｓ関連反応抑制剤、ＡＧＥｓ関連疾患の予防治療用薬剤、並びにサプリメント、機能性食品及び化粧料組成物 | |
| KR102693663B1 (ko) | 진토닌을 포함하는 근위축 또는 악액질의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| KR20180137971A (ko) | 신경 세포사 억제 활성을 갖는 황칠 열수 추출물을 포함하는 퇴행성 신경 질환 예방 및 치료용 조성물 | |
| KR101971800B1 (ko) | 우슬 추출물 및 왕불류행 추출물을 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| KR20210067878A (ko) | 죽엽 추출물을 유효성분으로 함유하는 남성 호르몬 의존성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물 | |
| US10799477B2 (en) | Pharmaceutical composition for preventing or treating LDL cholesterol-related diseases, containing ribosome-binding preparation | |
| KR102371992B1 (ko) | 유파틸린을 유효성분으로 함유하는 난소암 예방 또는 치료용 조성물 | |
| JP5985062B2 (ja) | アルトカルプス・アルティリスの果実、葉、若しくは幹の抽出物、又はそれらの画分を有効成分として含有するがんの予防又は治療のための組成物 | |
| KR102349013B1 (ko) | 멜라토닌을 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| KR102070305B1 (ko) | 아출 추출물을 포함하는 암의 예방 및 치료용 조성물 | |
| KR102688974B1 (ko) | 캄페스테롤을 포함하는 난소암 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| KR102434348B1 (ko) | 케르세틴, 루테올린, 델피니딘 또는 이들의 혼합물을 포함하는 자궁내막증 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| KR102368413B1 (ko) | 시린가레지놀을 포함하는 신경병증성 통증 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR20240040430A (ko) | 아피제닌을 포함하는 대장암 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| KR101926021B1 (ko) | 텔렉타디엄 동나이엔스 추출물을 유효성분으로 하는 대장암 예방 또는 치료용 약학 조성물 | |
| KR20230168537A (ko) | 유파틸린을 포함하는 대장암 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right |