KR102491296B1

KR102491296B1 - 배과피를 이용한 피부 미백용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102491296B1
Application number: KR1020210080193A
Authority: KR
Inventors: 이민규
Original assignee: 제이엠퍼시픽(주)
Priority date: 2021-06-21
Filing date: 2021-06-21
Publication date: 2023-01-26
Also published as: KR20220169735A

Abstract

본 발명은 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물을 각각 1 ~ 2.5 : 1 : 1 : 1 ~ 2 중량 비율로 혼합한 혼합물은 우수한 티로시나제 발현저해활성 및 멜라닌 생성저해활성을 나타내고, 피부 자극이 없고 경시변화가 크지 않아서 안전하며, 피부 흡수가 잘 되어 피부 미백용 화장료 성분으로 유용하게 사용될 수 있다.

Description

배과피를 이용한 피부 미백용 화장료 조성물{Skin whitening cosmetic composition using pear peel}

본 발명은 배과피 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물 및 이의 제조방법에 관한 것이다.

희고 고운 피부를 갖고자 하는 것은 모든 사람의 한결 같은 소망이다. 일반적으로 사람의 피부 모발 및 눈 등의 색은 멜라닌 카로틴 및 헤모글로빈 등에 의해 결정된다. 사람의 피부색은 멜라닌 색소를 만드는 멜라노사이트(melanocyte)의 활동성 혈관의 분포 피부의 두께 및 카로티노이드 및 빌리루빈 등인 체내외의 색소 함유 유무와 같은 여러 요인들에 의해 결정되며, 그 중 멜라노 사이트에서 티로시나제 등의 여러 효소가 작용하여 생성되는 멜라닌이라는 흑색색소가 가장 중요하다. 멜라닌 색소의 형성에는 유전적 요인 호르몬 분비 및 스트레스 등과 관련된 생리적 요인 및 자외선 조사 등과 같은 환경적 요인이 영향을 미친다. 멜라닌은 피부에 존재하여 자외선 등으로부터 신체를 보호하는 중요한 기능을 가지고 있지만, 멜라닌이 과잉 생산됨으로써 기미 또는 주근깨 등을 형성할 뿐 아니라 피부 노화를 촉진하며 피부암 유발에도 중요한 작용을 하는 것으로 알려져 있다.

멜라닌의 주요한 기능은 이러한 유해라디칼을 제거하여 이에 의한 손상으로부터 피부를 보호하는 것이다. 따라서 멜라닌의 양이 많다는 것은 물리적 또는 화학적 독성 물질로부터 피부를 보호할 수 있는 효과적인 대응 체계를 가지고 있다는 것을 의미한다. 이러한 멜라닌의 생성을 촉진하는 요인으로서는 햇빛, 자외선 뿐만 아니라 에스트로겐 또는 프로스타글라딘 등이 있다. 멜라닌의 생합성은 표피 기저층에 존재하는 멜라노사이트(melanocyte)의 멜라노좀(melanosome)에서 티로시나제(tyrosinase), TRP-1(tyrosinase-related protein-1), DCT(dopachrome tautomerase) 등 특이적인 효소의 연속적 산화 반응에 의해서 일어나는데, 그 중 멜라닌 합성의 주요 효소인 티로시나제 활성 저해 실험이 멜라닌 중합체 억제제 개발의 초기 단계에서 채택되고 있다. 그러나 티로시나제에 의한 산화 반응 이외에 피부 속 멜라닌의 생성 경로에 영향을 미치는 인자 중에는 Advanced glycation end products(AGEs) 반응 혹은 non-enzymatic glycation 반응이 있다. 당화 반응(glycation)은 당과 단백질의 비효소적인 반응으로 환원당의 카르보닐기(carbonyl)와 단백질의 유리 아미노기인 리신(lysine) 또는 아르기닌(arginine)과 반응하여 초기 당화 생성물인 시프 염기(schiff base)를 형성하고 이렇게 형성된 화합물들이 계속적으로 재배열 교차 결합 등 일련의 반응을 통하여 갈색의 화합물(Browning)인 비가역적 최종당화산물(Advanced glycation end products, AGEs)을 생성하는 반응이다. 이는 단백질의 유리 아미노기인 lysine이나 arginine과 환원당의 carbonyl기가 반응하여 초기 glycation 생성물인 schiff base를 형성하고 이때 형성된 화합물들이 계속적으로 축합, 재전위, 산화, 분열, 고리화 등 일련의 복잡한 반응을 통하여 황갈색 화합물(melanoidine)을 만드는 반응이다. 이러한 AGEs의 생성 및 축적과정이 진행되면 피부에는 멜라닌 색소의 생성과 축적이 일어난다. 이러한 멜라닌의 생성은 기저층의 멜라닌세포(melanocyte)내 멜라닌소체(melanosome) 라는 소기관에서 합성된다. AGEs가 생성될 때 수용체인 receptor for AGE(RAGE)가 receptor site에 작용한다. AGE는 RAGE와 결합한 후에 멜라닌 합성 과정에서 중요한 전사조절인자인 Microphthalmia associated transcription factor(MITF)를 촉진하여, 멜라닌 생성에 있어서 가장 중요한 역할을 하는 효소 티로시나제(tyrosinase)의 발현을 촉진시키고, 최종적으로 멜라닌이 생성된다. 합성된 멜라닌색소는 멜라닌세포의 수지상돌기(dendrite)를 통하여 인접세포인 각질세포(keratinocyte)로 전달되며, 전달된 멜라닌색소는 각질세포를 통하여 피부 내 여러 부위에 분포하게 된다.

기미 주근깨 또는 색소 침착 등과 같은 피부 색소 이상 침착 증상과 자외선 노출 등에 의해 발생된 과도한 멜라닌 색소 침착을 치료 또는 경감시켜 주기 위해서, 이전부터 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체 타이로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용해 왔는데, 이들은 불충분한 미백효과, 피부자극 및 경시변화가 높아 피부에 대한 안전성 문제, 화장료 배합 시 제형 및 안정성 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다.

이에, 본 발명자들은 종래기술의 문제점을 개선하기 위해 천연물질을 유효성분으로 함유하는 미백 화장료 조성물을 개발하고자 노력한 결과, 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물의 혼합물이 자극이 없어 안전하고, 경시변화가 크지 않으며, 피부 흡수가 잘되며, 우수한 피부 미백 활성을 나타내는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.

대한민국 공개특허 제10-2004-0087644호 대한민국 공개특허 제10-2015-0010530호 대한민국 등록특허 제10-2016062호

본 발명의 목적은 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또다른 목적은 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물을 혼합하는 공정을 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물을 각각 1 ~ 2.5 : 1 : 1 : 1 ~ 2 중량 비율로 혼합한 혼합물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물을 각각 1 ~ 2.5 : 1 : 1 : 1 ~ 2 중량 비율로 혼합하는 단계를 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물의 제조방법을 제공한다.

본 발명에 따른 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물의 혼합물은 피부 자극이 없고 경시변화가 크지 않아서 안전하고, 피부 흡수가 잘 되며, 우수한 피부 미백 활성을 나타내므로, 피부 미백 화장료 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.

특히, 본 발명에 따른 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물의 혼합물의 피부 미백 활성은 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물, 황련 추출물 각각의 단독 사용의 경우에 비해 현저히 우수한 것으로 나타내어 우수한 피부 미백 화장료 조성물을 제조할 수 있다.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 구성 또는 기능에 대한 상세한 설명은 생략할 수 있다.

본 명세서 및 특허청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적 의미로 한정되어 해석되지 아니하며, 본 발명의 기술적 사항에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야 한다.

본 명세서에 기재된 실시예와 도면에 도시된 구성은 본 발명의 바람직한 실시예이며, 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것이 아니므로, 본 출원 시점에서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있다.

본 발명은 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물을 각각 1 ~ 2.5 : 1 : 1 : 1 ~ 2 중량 비율로 혼합한 혼합물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에서 일컫는 "추출물"은 원료로부터 임의의 방법으로 추출된 물질을 의미하며, 이렇게 추출된 추출액, 이로부터 얻을 수 있는 농축액, 상기 농축액의 건조물 및 분말을 제한 없이 모두 포함하는 의미로 사용된다.

상기 추출물은 원료 또는 이의 건조물로부터 추출하여 얻을 수 있으며, 상기 추출물의 원료는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다.

상기 추출물을 원료로부터 추출하여 수득할 때, 추출 방법으로는 용매 추출법, 초음파 추출법, 여과법 및 환류 추출법 등 종래 알려진 통상적인 추출 방법을 모두 사용할 수 있으며, 용매 추출법이나 환류 추출법을 이용함으로써 제조할 수 있다. 상기 추출 과정은 수회 반복할 수 있으며, 이후에 농축 또는 동결건조 등의 단계를 추가적으로 거칠 수 있다. 구체적으로, 수득한 추출물을 감압 농축하여 농축액을 얻고, 상기 농축액을 동결건조시킨 후 분쇄기를 이용하여 고농도의 추출 분말을 제조할 수 있다. 추출물은 추출물을 추가적으로 분획하여 얻은 분획물도 포함한다.

상기 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물을 추출용매로 하여 추출될 수 있다. 상기 유기용매는 알코올, C₁-C₄의 저급 알코올, 헥산(n-헥산), 에테르, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 메틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸아세테이트, 벤젠 및 이들의 혼합용매로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있고, 에탄올일 수 있다. 물 및 유기용매의 혼합물을 추출 용매로 사용하는 경우, 물 및 유기용매의 혼합물은 물 및 C₁-C₄의 저급 알코올의 혼합물일 수 있고, 물 및 에탄올의 혼합물일 수 있다.

상기 물 및 에탄올의 혼합물은 40%(v/v) 내지 90%(v/v) 에탄올 수용액, 45%(v/v) 내지 85%(v/v) 에탄올 수용액, 50%(v/v) 내지 80%(v/v) 에탄올 수용액, 55%(v/v) 내지 75%(v/v) 에탄올 수용액, 또는 60%(v/v) 내지 75%(v/v) 에탄올 수용액일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다. 상기 에탄올 수용액이 하한값 미만의 농도일 경우에는 추출물을 분획하더라도 미백 효과가 나타나지 않는다. 상기 에탄올 수용액이 상한값을 초과하는 농도일 경우에는 화장료 조성물에 포함시킬 때에 제형 입자 안정도가 떨어지며, 미백 효과가 낮아진다. 또한, 상기 에탄올 수용액이 상한값을 초과하는 농도일 경우 분획물이 높은 농도의 에탄올을 함유하게 되고, 별도의 에탄올 제거 공정 없이 분획물을 화장료 조성물에 첨가시 피부 자극, 독성을 유발할 수 있고, 물성의 안정도 저하를 초래할 수 있다. 이러한 문제점을 해결하기 위해서 별도의 공정을 통하여 에탄올을 제거할 경우 분획물의 미백 효능이 떨어질 수 있으며, 에탄올 제거 공정이 추가됨으로써 원료 생산비가 증가되는 단점이 있다.

추출은 0℃ 내지 100℃, 10℃ 내지 70℃, 10℃ 내지 50℃, 10℃ 내지 35℃, 또는 20℃ 내지 35℃에서 실시될 수 있으나, 이에 한정되지 아니한다. 추출은 1시간 내지 36시간, 2시간 내지 30시간, 3시간 내지 10시간 또는 4시간 내지 6시간 동안 실시될 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다. 추출은 1회 내지 5회 실시될 수 있고, 2회 내지 3회 실시될 수 있으나, 이에 한정하지 않는다. 추출 조건 중 추출 온도 및 시간이 하한값 미만이거나, 추출 횟수가 상한값을 초과하여 실시될 경우에는 미백 효능이 떨어질 수 있다.

상기 분획물 제조시 사용되는 유기 용매는, 예컨대 C₅-C₁₀ 알칸 등 일 수 있다. 상기 분획물은 0℃ 내지 100℃, 2℃ 내지 90℃, 5℃ 내지 80℃, 10℃ 내지 70℃, 10℃ 내지 60℃, 또는 실온에서 제조될 수 있다. 상기 분획물 제조시 유기 용매 처리 후 정치 시간은 12시간 내지 36시간, 12시간 내지 30시간, 15시간 내지 30시간, 17시간 내지 25시간, 또는 20시간 내지 25시간일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다.

상기 추출물의 분획물은 미백 개선 효과를 높이기 위해서 추가로 통상의 정제 공정을 수행할 수 있으며, 추가 정제 공정을 통해서 얻어진 정제물도 본 발명에 포함된다. 본 발명에 따른 분획물을 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등으로 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 활성 분획물도 본 발명의 분획물에 포함된다. 여러 성분이 혼합되어 있는 분획물을 농도구배 컬럼 크로마토그래피 등을 통하여 활성 성분의 성질에 따라 분리하여서 보다 미백 개선 효과가 높은 특정 활성 분획물을 제조할 수 있다.

상기 컬럼 크로마토그래피는 실리카겔, 세파덱스, LH-20, ODS 겔, RP-18, 폴리아미드, 도요펄(Toyopearl) 및 XAD 수지로 이루어진 군으로부터 선택된 충진제를 이용하여 활성 분획물을 분리 및 정제할 수 있다. 컬럼 크로마토그래피는 필요에 따라 적절한 충진제를 선택하여 수차례 실시할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명에 있어서, 상기 배과피 추출물은 알부틴 또는 알부틴을 다량 함유하는 분획물인 것이 바람직하다.

상기 배과피 추출물은 i) 배과피를 에탄올 또는 에탄올 수용액으로 추출하여 배과피 추출물을 제조하는 단계; ii) 상기 배과피 추출물을 에틸아세테이트로 분획하여 배과피 분획물을 제조하는 단계; iii) 상기 배과피 분획물을 여과 후 농축하여 여과 농축물을 제조하는 단계; 및, iv) 상기 여과 농축물을 용매 분획하여 지용성 성분을 제거한 후, 물층을 농축하여 물층 농축물을 정제하는 단계;를 포함하는 방법으로 제조된 정제물이 바람직하다. 이때, 상기 단계 iii)에서 여과하여 얻어진 여과액을 감압농축하는데, 감압농축물을 함유하는 용액의 용량은 용액중의 에탄올이 제거 되도록 감압농축되는 것이 바람직하다. 또한, 단계 iv)에서 여과액농축물을 증류수로 현탁한 후 용매분획하여 지용성성분을 제거하는 제거단계를 포함하는데, 제거단계에서 사용되는 증류수와 유기용매는 동량이고 여과액농축물 1중량부 당 200 내지 300부피비가 사용되고, 용매분획은 2회 이상 이루어지는 것이 바람직하며, 사용되는 용매로는 약간의 물에 대한 용해성을 갖고 지용성성분을 용해할 수 있는 공지된 모든 용매를 사용할 수 있다. 또한, 단계 iv)에서 정제는 알코올수용액을 용출용매로 사용하는 컬럼크로마토그래피에 의해 이루어지는데, 보다 고순도의 천연알부틴을 수득하기 위해 컬럼크로마토그래피에서 얻어진 용출획분에 대해 분취용 고속액체크로마토그래피가 더 수행될 수 있다.

본 발명의 미백용 화장료 조성물은 상기 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 5 ~ 20 중량% 포함되는 것이 바람직하고, 8 ~ 15 중량% 포함되는 것이 더욱 바람직하다.

본 발명의 미백용 화장료 조성물은 멜라닌 생성을 근본적으로 억제함으로써 뛰어난 미백 효과를 제공하고, 피부 색소 침착 및 피부톤 다운 현상을 개선할 수 있다. 상기 피부 미백은 멜라닌의 합성을 저해하여 멜라닌 색소의 피부 침착을 억제하거나 방지하는 모든 작용을 나타내며, 상기 색소의 피부 침착은 멜라닌의 합성 증가로 인해 피부의 색깔이 어두워지는 모든 작용 또는 그 상태를 나타낸다.

본 발명의 화장료 조성물은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 기제, 보조제 및 첨가제를 사용하여 액체 또는 고체 형태로 제조될 수 있다. 액체 또는 고체 형태의 화장품으로는, 예를 들면 이에 한정되지는 않으나 화장수, 크림제, 로션제, 입욕제 등의 형태를 포함할 수 있다.

화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 기제, 보조제 및 첨가제는 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면 물, 알코올, 프로필렌글리콜, 스테아르산, 글리세롤, 세틸알코올, 유동 파라핀 등이 있다.

본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 추출물뿐만 아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 본 기술 분야에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸아세테이트, 벤질알코올, 벤질벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용 방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.

상기 제조방법에 있어서, 상기 추출물은 원료 또는 이의 건조물로부터 추출하여 얻을 수 있으며, 상기 추출물의 원료는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다.

상기 제조방법에 있어서, 상기 추출물을 원료로부터 추출하여 수득할 때, 추출 방법으로는 용매 추출법, 초음파 추출법, 여과법 및 환류 추출법 등 종래 알려진 통상적인 추출 방법을 모두 사용할 수 있다. 상기 추출 과정은 수회 반복할 수 있으며, 이후에 농축 또는 동결건조 등의 단계를 추가적으로 거칠 수 있다.

상기 제조방법에 있어서, 상기 추출물은 추출물을 추가적으로 분획하여 얻은 분획물도 포함하고, 상기 추출물의 분획물은 미백 개선 효과를 높이기 위해서 추가로 통상의 정제 공정을 수행할 수 있으며, 추가 정제 공정을 통해서 얻어진 정제물도 본 발명에 포함된다. 본 발명에 따른 분획물을 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등으로 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 활성 분획물도 본 발명의 분획물에 포함된다.

상기 제조방법에 있어서, 상기 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 5 ~ 20 중량% 포함되는 것이 바람직하고, 8 ~ 15 중량% 포함되는 것이 더욱 바람직하다.

상기 제조방법에 있어서, 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 기제, 보조제 및 첨가제를 사용하여 액체 또는 고체 형태로 제조될 수 있다.

상기 제조방법에 있어서, 본 발명의 추출물뿐만 아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

상기 제조방법에 있어서, 화장료 조성물은 본 기술 분야에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등의 제형으로 제조될 수 있다.

이하, 제조예, 실시예 및 실험예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하기로 한다.

이들 제조예, 실시예 및 실험예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 제조예, 실시예 및 실험예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명한 것이다.

< 제조예 1> 배과피 추출물의 제조

전남 나주에서 수확한 배를 수확 당일 과육과 과피를 분리하여 배의 과피만을 시료로 사용하였다. 분리 직후의 배과피(3 ~ 5 wt%)를 암실에서 80% EtOH에 방치한 후 환류냉각 10℃에서 3 ~ 6시간 동안 추출하였다. 추출 후 여과한 여과액을 모아 감압농축한 후 건조하여 추출물을 얻었다.

< 제조예 2> 배과피 분획물의 제조

상기 <제조예 1>에서 제조한 배과피 에탄올 추출물을 증류수로 현탁 후, 에틸아세테이트를 이용하여 물층과 에틸아세테이트층으로 3회 용매분획함으로써 지용성 성분을 제거하였다. 그 후 용매분획분 중 물층을 취한 후 물층에 공존하는 유리당 등 극성화합물들의 제거를 위해, 얻어진 물층을 감압농축하여 물층 농축물을 얻은 후, 소량으로 MeOH에 용해시킨 다음, 0.45um syringe filter로 여과한 다음, 컬럼 250 mmx 10 um phenomex C18 0.4 mL/min 280 nM Isogradient에 charge한 후 아세토니트릴/물 92%(v/v) 용액으로 용출시켜 고농도의 알부틴을 얻을 수 있었다.

< 제조예 3> 땅콩새싹 추출물의 제조

파종한 날로부터 7 ~ 12일째 수확한 땅콩새싹 100 g을 세척, 건조 및 분쇄한 후, 암실에서 80% EtOH에 방치한 후 환류냉각 10℃에서 3 ~ 6시간 동안 추출하였다. 추출 후 여과한 여과액을 모아 감압농축한 후 건조하여 추출물을 얻었다.

< 제조예 4> 호장근 추출물의 제조

세척, 건조 및 분쇄된 호장근 100 g을 암실에서 80% EtOH에 방치한 후 환류냉각 10℃에서 3 ~ 6시간 동안 추출하였다. 추출 후 여과한 여과액을 모아 감압농축한 후 건조하여 추출물을 얻었다.

< 제조예 5> 황련 추출물의 제조

세척, 건조 및 분쇄된 황련 100 g을 암실에서 80% EtOH에 방치한 후 환류냉각 10℃에서 3 ~ 6시간 동안 추출하였다. 추출 후 여과한 여과액을 모아 감압농축한 후 건조하여 추출물을 얻었다.

< 실시예 1> 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물의 혼합물의 제조

상기 제조된 배과피 추출물 4 g, 땅콩새싹 추출물 1.5 g, 호장근 추출물 1.5 g 및 황련 추출물 3 g을 혼합하여 얻은 혼합물에 대해 상기 혼합물 중량대비 900%의 물을 첨가하여 혼합 추출물을 제조하였다.

< 실시예 2> 배과피 분획물 , 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물의 혼합물의 제조

상기 제조된 배과피 분획물 4 g, 땅콩새싹 추출물 1.5 g, 호장근 추출물 1.5 g 및 황련 추출물 3 g을 혼합하여 얻은 혼합물에 대해 상기 혼합물 중량대비 900%의 물을 첨가하여 혼합 추출물을 제조하였다.

< 실험예 1> 세포 내 티로시나제 활성 저해평가

상기 제조예 및 실시예 1-2의 추출물들의 세포 내 티로시나제 활성 저해능을 확인하였다. 이를 확인하기 위하여 아래와 같이 시험하였다.

구체적으로, Mouse melanoma 세포인 B16F10 세포를 10% Fetal bovine serum (FBS), 2% HEPES, 1% Antibiotic-Antimycotic이 포함된 DMEM 배지에서 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 배양된 B16F10 세포를 1× rypsin-EDTA로 떼어내고, 6-well plate에 well 당 1×10⁵ cell로 깔은 후에 24시간 동안 배양한 다음, 이틀째와 사흘째에 제조예 및 실시예 1-2를 각각 1μM α-MSH이 포함된 배지에 처리하여 배양하였다. 닷새째에 배지를 제거하고, DPBS로 씻어낸 후, 용혈 완충액을 넣고 세포를 분쇄하였다. 4℃, 13,000 rpm에서 20분간 원심분리한 후 상층액을 취한 다음, 96-well plate에 50μl씩 넣었다. 그리고 50μl의 2 mg/ml L-DOPA를 넣고 37℃에서 1시간 반응시킨 후, 흡광계를 이용하여 475 nm에서 흡광도를 측정하여 티로시나제 활성 저해능을 평가하였다.

구분	tyrosinase activity (%)
생리식염수 100 ppm	500
알부틴 100 ppm	380
제조예 1 25 ppm	450
제조예 1 50 ppm	400
제조예 1 100 ppm	370
제조예 3 25 ppm	490
제조예 3 50 ppm	470
제조예 3 100 ppm	450
제조예 4 25 ppm	460
제조예 4 50 ppm	420
제조예 4 100 ppm	380
제조예 5 25 ppm	450
제조예 5 50 ppm	410
제조예 5 100 ppm	380
실시예 1 25 ppm	220
실시예 1 50 ppm	180
실시예 2 25 ppm	150
실시예 2 50 ppm	100

그 결과, 표 1에서 확인되는 바와 같이 제조예의 단독 추출물들과 비교하여 실시예 1 및 2의 추출물의 혼합물에서 현저히 우수한 세포내 티로시나제 활성 저해 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

< 실험예 2> 멜라닌 생성 저해 확인

상기 제조예 및 실시예 1-2의 추출물들의 멜라닌 생성 저해능을 확인하였다. 이를 확인하기 위하여 아래와 같이 시험하였다.

구체적으로, Mouse melanoma 세포인 B16F10 세포를 10% Fetal bovine serum (FBS), 2% HEPES, 1% Antibiotic- Antimycotic이 포함된 DMEM 배지에서 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 배양된 B16F10 세포를 1× trypsin-EDTA로 떼어내고, 6-well plate에 well 당 1×10⁵ cell로 깔은 후에 24시간 동안 배양한 다음, 이틀째와 사흘째에 제조예 및 실시예 1-2를 각각 1μM α-MSH이 포함된 배지에 처리하여 배양하였다. 닷새째에 배지를 제거하고, DPBS로 씻어낸 후, 스크랩퍼로 세포를 수확한 다음 70℃에서 세포를 건조 시켰다. 1N NaOH 용액을 70℃에서 30분간 멜라닌 용해시킨 후, 흡광계를 이용하여 490 nm에서 흡광도를 측정하여 멜라닌 생성저해 효과를 평가하였다.

구분	melanin content (%)
생리식염수 100 ppm	350
알부틴 100 ppm	230
제조예 1 25 ppm	330
제조예 1 50 ppm	290
제조예 1 100 ppm	260
제조예 3 25 ppm	410
제조예 3 50 ppm	380
제조예 3 100 ppm	350
제조예 4 25 ppm	350
제조예 4 50 ppm	320
제조예 4 100 ppm	310
제조예 5 25 ppm	350
제조예 5 50 ppm	310
제조예 5 100 ppm	290
실시예 1 25 ppm	150
실시예 1 50 ppm	120
실시예 2 25 ppm	120
실시예 2 50 ppm	100

그 결과, 표 2에서 확인되는 바와 같이 제조예의 단독 추출물들과 비교하여 실시예 1 및 2의 추출물의 혼합물에서 현저히 우수한 멜라닌 생성저해 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다.

< 제형예 1> 세럼의 제조

상기 실시예 1을 함유한 세럼을 하기의 표 3의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.

원료	함량(중량%)
실시예 1의 추출물	10.0
밀납	1.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄 세스퀴올레이트	0.5
미네랄 오일	7.0
소르비탄 스테아레이트	0.5
친유형 모노스테아린산 글리세린	1.0
스테아린산	1.5
글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트	1.0
프로필렌글리콜	3.0
카르복시폴리머	0.1
트리에탄올아민	0.1
페녹시에탄올	적량
정제수	to 100

< 제형예 2> 크림의 제조

상기 실시예 1을 함유한 세럼을 하기의 표 4의 조성 및 함량으로 통상의 방법에 따라 제조하였다.

원료	함량(중량%)
실시예 1의 추출물	10.0
시어버터	2.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄 세스퀴올레이트	0.8
미네랄 오일	7.0
디메치콘	3.0
소르비탄 스테아레이트	0.5
친유형 모노스테아린산 글리세린	1.0
세테아릴알코올	2.0
글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트	1.0
프로필렌글리콜	3.0
카르복시폴리머	0.1
트리에탄올아민	0.1
페녹시에탄올	적량
정제수	to 100

< 실험예 3> 제형 안정도 확인

상기 제형예 1 및 2에서 제조한 제형에 대하여 실온(25℃), 냉장(4℃) 및 항온(50℃)으로 일정하게 유지되는 실내, 냉장고 및 인큐베이터에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관 및 관찰(변색, 변취 및 분리)하며, 안정성을 확인하였다. 결과는 하기 표 5에 나타내었다.

온도 조건	안정성(변색, 변취 및 분리)
온도 조건	제형예 1	제형예 2
실온(25℃)	0	0
냉장(4℃)	0	0
항온(50℃)	0	0

< 제형 안정 등급 >

0: 변화 없음 1: 미세한 변화 2: 변화 3: 극심한 변화

상기 표에서 나타낸 바와 같이 제형예 1 및 2의 제형 모두 25℃, 4℃ 및 50℃ 온도 조건하에서 변색 변취 및 분리 현상이 나타나지 않고 안정함이 확인되었다.

Claims

배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물을 각각 1 ~ 2.5 : 1 : 1 : 1 ~ 2 중량 비율로 혼합한 혼합물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물은 각각 물, C₁ ~ C₄ 알코올 또는 이들의 혼합물을 용매로 추출한 추출물, 또는 이들의 유기용매 분획물인 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 배과피 추출물은
i) 배과피를 에탄올 또는 에탄올 수용액으로 추출하여 배과피 추출물을 제조하는 단계;
ii) 상기 배과피 추출물을 에틸아세테이트로 분획하여 배과피 분획물을 제조하는 단계;
iii) 상기 배과피 분획물을 여과 후 농축하여 여과 농축물을 제조하는 단계; 및
iv) 상기 여과 농축물을 용매 분획하여 지용성 성분을 제거한 후, 물층을 농축하여 물층 농축물을 정제하는 단계;를 포함하는 방법으로 제조된 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물은 화장료 조성물 전체 중량에 대하여 5 ~ 20 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 피부 미백용 화장료 조성물.
배과피 추출물, 땅콩새싹 추출물, 호장근 추출물 및 황련 추출물을 각각 1 ~ 2.5 : 1 : 1 : 1 ~ 2 중량 비율로 혼합하여 혼합물을 제조하는 단계를 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물의 제조방법.