KR102470357B1 - 락토코커스 락티스 q1 균주를 포함하는 면역증진용 조성물 - Google Patents

락토코커스 락티스 q1 균주를 포함하는 면역증진용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 김치에서 유래한 기탁번호가 KCTC14136BP인 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주의 용도에 관한 것으로, 구체적으로 락토코커스 락티스 Q1 균주의 수지상세포의 표면인자 및 사이토카인 증가 효과를 통한 면역증진 용도에 관한 것이다.

Description

락토코커스 락티스 Q1 균주를 포함하는 면역증진용 조성물 {Composition for enhancing immunity comprising of lactococcus lactis Q1}
본 발명은 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주를 포함하는 면역증진용 조성물에 관한 것이다.
면역은 체내에 존재하는 자기방어체계로서 인체가 외부로부터 침입해 오는 각종 물질이나 생명체를 자기 자신에 대한 이물질로 인식하여 제거하고 대사시키는 과정이다. 외부 자극에 의한 손상이나 병원 미생물의 침입으로부터 자신을 방어하기도 하지만 염증반응 등과 같이 자기 자신의 조직에 손상을 줄 수도 있다. 면역기능의 변화를 조절하여 정상으로 회복시키거나 변화의 폭을 줄여 주는 작용으로 면역기능 억제나 면역기능 증강으로 구분된다. 과민면역 반응 완화는 외부 물질에 대해 불리하게 반응하여 초래되는 알레르기 반응 자기항원 또는 변형된 자기항원에 대한 반응 등 바람직하지 않게 증가된 면역 반응을 억제시키는 것을 의미한다. 이러한 여러 원인으로 인해 면역기능에 장애가 발생하는 문제점을 극복하기 위하여, 다양한 면역 증강제 및 치료제가 사용되고 있으나, 부작용 문제들이 있고, 주로 시판되는 것은 예방보다는 치료용으로 복용되는 것으로, 부작용이 없어 장기 복용이 가능하고, 예방용으로도 적합한 면역증진용 조성물이 요구되는 실정이다.
김치는 배추나 무와 같은 재료를 소금에 절인 후 고춧가루, 마늘, 생강 등의 양념 및 젓갈을 넣어 만드는 한국의 전통적인 발효식품이다. 김치는 비타민A와 비타민C가 풍부하며 발효과정으로 인해 체내에 유익한 균들을 생성하도록 도움을 주며 항산화 및 면역 자극효과가 있으며 항비만 효과를 가지고 있다. 특히 김치에 포함되어 있는 유산균은 염증 반응을 억제하고 질병을 유발하는 미생물의 생장을 억제하고 비타민과 아미노산을 생산하며 무기물의 흡수 및 독소 제거에 도움을 준다. 또한 천식조절 및 알레르기 위험을 억제하고 감정 및 정신건강 도움을 주며 김치에 포함되어 있는 비타민과 항균 성분이 풍부하여 노화를 억제하고 암을 예방하면서 면역을 증강시키는 효능을 가지고 있다.
한편, 락토코커스는 연쇄상구균에 해당하며 우유 등에 존재하는 구형의 유산균으로 주로 치즈 제조 시에 사용된다. 락토바실러스나 비피도박테리아가 사람의 체온과 같은 37도에서 잘 자라는 반면, 이 유산균은 이 보다 낮은 20-25도에서 잘 자라는 특성이 있으며 발효 과정 중 풍미성분을 생산하여 치즈 특유의 냄새를 나게 한다. 이 속에 속하는 유산균들 중에는 니신(nisin)이라는 항균 물질을 생산하는 유산균이 존재한다. 대표적으로 락토코커스 락티스가 있다.
한국등록특허 제2310337호는 복합 소화 효소 생산능 및 항균 활성을 갖는 락토코커스 락티스 Q1 균주 및 이의 용도가 개시되어 있고, 한국공개특허 제2015-0019934호는 락토코커스 락티스를 이용한 어류의 면역 증진 방법이 개시되어 있으며, 한국등록특허 제1898138호는 면역 조절 T 세포를 유도하는 락토코커스 락티스 BFE920 균주를 포함하는 수산양식 기능성 사료 첨가제가 개시되어 있으나, 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주의 면역증진 효과에 관해 개시된 바 없다.
1. 한국등록특허 제2310337호 2. 한국공개특허 제2015-0019934호 3. 한국등록특허 제1898138호
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명자들은 기탁번호가 KCTC14136BP인 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주를 사균화한 후 이를 면역세포의 일종인 수지상 세포에 처리한 결과 수지상 세포의 표면 발현 인자를 증가시키는 한편, 수지상 세포의 사이토카인 분비를 증가시키는 등 면역증진을 의미하는 마커들이 뚜렷하게 활성화되는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 기탁번호 KCTC14136BP인 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주를 유효성분으로 포함하는 면역증진용 조성물을 제공한다.
상기 균주는 사균체인 것일 수 있고, 더욱 바람직하게 상기 사균체는 80℃에서 1시간 동안 열처리하여 제조된 것일 수 있다.
본 발명은 기탁번호 KCTC14136BP인 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주를 유효성분으로 포함하는 면역저하로 인한 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
상기 면역저하로 인한 질환은 천식, 비염, 부비강염, 결막염, 알러지, 아토피성 피부염 및 두드러기로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것일 수 있다.
본 발명은 기탁번호 KCTC14136BP인 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주를 유효성분으로 포함하는 면역저하로 인한 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 김치에서 유래한 기탁번호가 KCTC14136BP인 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주가 마우스 골수 유래 수지상 세포에서 표면 발현인자 및 사이토카인 발현 증가 효과를 보였으므로, 면역증진용 또는 면역저하로 인한 질환 예방 또는 개선용 약학, 식품 또는 화장료 조성물로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 구현 예에 따른 락토코커스 락티스 Q1 균주의 마우스 골수 유래 수지상 세포에서 표면 발현인자에 대한 효과를 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 일 구현 예에 따른 락토코커스 락티스 Q1 균주의 마우스 골수 유래 수지상 세포에서 사이토카인에 대한 효과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명의 바람직한 구현예에 대하여 상세히 설명한다. 또한, 하기의 설명에서는 구체적인 구성요소 등과 같은 많은 특정 사항들이 도시되어 있는데, 이는 본 발명의 보다 전반적인 이해를 돕기 위해서 제공된 것일 뿐 이러한 특정 사항들 없이도 본 발명이 실시될 수 있음은 이 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게는 자명하다 할 것이다. 그리고, 본 발명을 설명함에 있어서, 관련된 공지 기능 혹은 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 기탁번호 KCTC14136BP인 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주를 유효성분으로 포함하는 면역증진용 조성물을 제공한다.
상기 균주는 김치에서 유래한 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
상기 균주는 생 균주 또는 약독화 균주일 수 있다. "약독화"는 균주의 병원성을 감소시키도록 변형시키는 것을 의미한다.　약독화는 균주를 대상체에 투여할 경우 독성 및 다른 부작용을 감소시킬 목적으로 이루어진다.　약독화 균주는 당업계에 공지된 다양한 방법을 통하여 제조될 수 있다. 예를 들어, 약독화는 균주가 숙주 세포에서 생존하도록 하는 독성인자(virulence factor)을 결실시키거나 파괴하여 달성될 수 있다. 상기 결실 및 파괴는 당업계에 잘 알려져 있으며, 예컨대, 상동성 재조합, 화학적 변이유발, 조사 변이유발 또는 트랜스포존 변이유발 등과 같은 방법에 의해 실시된다.
또한, 상기 균주는 사균체인 것일 수 있고, 더욱 바람직하게 상기 사균체는 80℃에서 1시간 동안 열처리하여 제조된 것일 수 있다.
본 발명은 기탁번호 KCTC14136BP인 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주를 유효성분으로 포함하는 면역저하로 인한 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어, "예방"이라 함은 질환의 원인으로부터 발생을 억제하거나 지연시키는 것을 의미한다.
본 명세서에서, "치료"라 함은 완전히 치유하지 않아도 증상의 진전 및/또는 악화를 억제하여 손상의 진행을 멈추거나, 또는 증상의 일부 혹은 전부를 개선하여 치유의 방향으로 유도하는 것을 의미한다.
상기 면역저하로 인한 질환은 천식, 비염, 부비강염, 결막염, 알러지, 아토피성 피부염 및 두드러기로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 것일 수 있다.
본 발명의 조성물은 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 질환의 예방 및 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 약물 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은, 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제제화될 수 있으며, 산제, 정제, 캡슐제, 주사제 및 액제가 보다 바람직하다. 이러한 제제화는 약제학 분야에서 통상적으로 행하여지는 방법으로 수행될 수 있으며, Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
상기 약학 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 및 광물유 등을 포함한다.
제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 추가로 사용하여 조제될 수 있다.
경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로오스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다.
경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁액, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween), 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서 본 발명의 조성물은 1 일 0.01 내지 99.9 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 99 중량%로 포함될 수 있다. 일일 투여량은 약 0.1 내지 1,000 mg/kg으로, 바람직하게는 100~300 mg/kg일 수 있다.
본 발명은 기탁번호 KCTC14136BP인 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주를 유효성분으로 포함하는 면역저하로 인한 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에서 용어 “개선”은 본 발명의 균주를 유효성분으로 포함하는 조성물의 투여로 면역저하로 인한 질환이 호전 또는 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 조성물을 식품에 포함하여 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 건강기능식품 또는 건강기능식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합량은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 바람직하게는 15 중량부 이하, 보다 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가할 수 있다. 그러나, 건강 조절 및 위생을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물을 포함할 수 있는 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없으며, 구체적인 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있고, 통상적인 의미에서의 건강기능식품을 모두 포함할 수 있으며, 동물을 위한 사료로 이용되는 식품을 포함할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에서 포함할 수 있는 다른 성분에는 특별히 제한이 없으며 통상의 식품과 같이 여러 가지 생약추출물, 식품 보조 첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 포함할 수 있다.
또한, 상기 언급한 바와 같이 식품 보조 첨가제를 추가로 첨가할 수도 있는바 식품 보조 첨가제는 당업계에 통상적인 식품 보조 첨가제, 예를 들어 향미제, 풍미제, 착색제, 충진제, 안정화제 등을 포함한다.
상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 다이사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외에 향미제로서 천연 향미제 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
상기 건강 기능(성) 식품 (functional food)이란, 특정보건용 식품(food for special health use, FoSHU)와 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미한다. 여기서 "기능(성)"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 식품의 제형 또한 식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 발명의 식품 조성물은 보조제로 섭취가 가능하다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
<실시예 1> 락토코커스 락티스 Q1( Lactococcus lactis Q1 ) 균주의 사균화
본 발명의 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주는 기탁번호가 KCTC14136BP이고, 구체적인 균주의 분리 및 동정 과정은 한국등록특허 제2310337호에 기재된 바와 같다.
(1) 액체 배지를 플라스크에 제조하고 균주를 접종하여 배양(37도, 24시간).
(2) 코니컬 튜브에 배양액을 넣고 8,000~10,000×g, 5min 원심분리한 후 PBS로 세척(3회 반복).
(3) 워터베스에서 열처리하여 사균화(80℃, 1시간).
(4) 건조시킨 후 중량 및 균체수를 확인.
<실시예 2> 사균체 균수의 확인
(1) 사균체 0.1g을 정확히 측정해 이를 5,000배 희석.
(2) 희석된 용액을 1시간 동안 초음파를 활용해 분산.
(3) 분산이 완료된 희석액을 다시 2배, 4배 희석하여 준비.
(4) 준비된 최종 샘플을 다시 30분간 초음파 처리하여 분산.
(5) 상온에 정치하여 안정화시킨 후 혈구계산판(hemocytometer)에 유입시켜 현미경 관찰
(6) 희석배율 산식에 대입하여 균체수(ea/g) 산출
<비교실시예> 대조군(Control)
유산균 간 차이를 보기 위해 자사 보유 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) 균주를 양성 대조군으로 상기 실시예 1 및 실시예 2의 사균화 방법을 적용하여 준비하였다.
대조군으로 사용된 락토코커스 락티스 유산균은 김치에서 직접 분리하였으며, DNA 염기서열을 분석한 결과 BLAST 데이터베이스에 기 등록된 락토코커스 락티스 균주들과 99%의 일치율을 보여 락토코커스 락티스 균종임을 확인하였다(결과생략).
<실시예 3> 세포 배양
마우스 골수 유래 수지상 세포(mouse bone marrow-derived dendritice cells)를 배양하여 사용하였다. 간략하면, C57BL/6 마우스로부터 골수 채취용 조사를 이용해 대퇴부 골수를 채취하였다. 채취한 골수를 세척한 후 적혈구를 염화암모늄을 이용하여 제거하였다. 분리한 세포를 6-웰 플레이트에서 RPMI 1640 (10% FBS (Fetal bovine serum, 송아지 혈청), 2 mM L-글루타민, 100 U/ml 페니실린/스트렙토마이신, 50 μM 머캅토에탄올, 0.1 mM 비필수 아미노산, 1 mM 피루브산 나트륨, 20 ng/ml GM-CSF, 0.5 ng/ml IL-4)을 첨가하여 8일 동안 배양하였다. GM-CSF 및 IL-4는 수지상 세포로의 분화를 유도하기 위하여 사용하였다.
유산균 처리 농도는 2.5×107 세포, 5×107 세포 또는 1×108 세포였다. 수지상 세포 활성화에 대한 양성 대조군으로 LPS(lipopolysaccharide)를 사용하였다.
<실시예 4> 수지상세포 표면 발현인자: CD80, CD86, MHC-I, MHC-II
수지상세포는 활성화(성숙화) 시 표면 발현인자을 증가 시킴으로써 T 세포와의 상호 작용이 효과적으로 이루어진다. 예를 들어 특정 약물이나 미생물 처리 시 수지상세포의 표면 발현인자를 증가 시킨다면 면역 증진을 유도할 수 있음을 예측할 수 있다.
이러한 수지상세포의 활성화(성숙화)를 확인하기 위하여, 먼저 모든 세포의 성숙도를 균일하게 하기 위하여 GM-CSF와 IL-4가 함유된 OptiMEM 배지에서 유지한 후, 수지상세포에 2.5×107　세포,　5×107　세포　또는　1×108　농도의 유산균 및 100 ng/ml 농도의 LPS를 각각 24시간 처리한 후 수지상 세포를 회수하였다. 비 특이적인 결합을 억제하기 위하여 1 μg/ml의 Fcγ I/III을 4℃에서 20분간 처리한 후, 수지상 세포의 성숙도 분석을 위해 항-CD11c-PE-Cy7, 항-CD80-APC, 항-CD86-FITC, 항-MHC I-PE및 항-MHC-II-PerCp-Cy5.5와 같은 세포 표면인자 항체를 이용하여 염색한 후 유세포분석기를 통하여 분석하였다.
그 결과 락토코커스 락티스 Q1은 LPS를 처리한 그룹 또는 대조그룹과 비교하여 CD80, CD86, MHC-I 및 MHC-II의 발현을 크게 증가시키는 것으로 나타났다. 또한 농도 의존적인 경향도 뚜렷하여 락토코커스 락티스 Q1 유산균 사균체의 면역반응 증진효과가 더 뛰어날 수 있다는 것을 보여주었다(도 1).
결과적으로 대조군인 락토코커스 락티스 유산균 사균체와 실험군인 락토코커스 락티스 Q1 유산균 사균체를 수지상세포에 다양한 농도로 처리하였을 때 실험군과 대조군 모두 수지상 세포의 표면 발현인자 (CD80, CD86, MHC-I, MHC-II)를 증가 시켰다. 중요한 것은 실험군이 대조군보다 훨씬 높게 증가 시켰다. 이러한 결과는 동일한 처리 조건에서 락토코커스 락티스 Q1 균주의 유산균 사균체가 일반적인 락토코커스 락티스 균종의 유산균 사균체보다 수지상세포의 활성화(성숙화)를 더욱더 강력히 유도할 수 있음을 시사하는 것이다(도 1).
<실시예 5> 사이토카인 발현: TNF-α, IL12p70
수지상세포는 활성화(성숙화) 시 다양한 사이토카인들을 분비할 수 있다.
따라서 유산균에 의한 수지상세포의 사이토카인 분비능을 확인하기 위해 수지상 세포에 2.5×107　세포,　5×107　세포　또는　1×108　농도의 유산균 또는 대조군으로 100 ng/ml의 LPS 를 처리한 후 24 시간 동안 배양하였다. 상층액을 TNF-α 및 IL-12p70에 대한 ELISA 키트(ebioscience)에 적용하여 사이토카인 분비량을 측정하였다. TNF-α는 전염증성 사이토카인으로써 T 세포의 활성화를 도울 수 있으며, IL-12p70은 naive T 세포의 분화를 Th1세포로 유도할 수 있는 사이토카인으로서 세포내 기생 감염성 질환 및 암 등에 대한 방어 면역을 유도하는데 중요한 작용을 할 수 있다.
락토코커스 락티스 Q1을 처리한 후 수지상세포의 사이토카인 발현능을 측정하였다. 그 결과 락토코커스 락티스 Q1 균주 유산균 사균체는 대조군과 비교해 사이토카인 발현량을 크게 증가시키는 것으로 나타났다. 또한 농도가 높아질수록 강한 활성을 나타내 5×107 수준 농도부터는 LPS와 비교해서도 더 높은 면역자극 효과를 나타내었다(도 2).
결과적으로 사균체는 생균체보다 TNF-α 및 IL-12p70을 강력히 유도하여 Th1 세포의 분화를 촉진할 수 있을 것으로 예상되며, 결국 세포내 기생 감염성 질환(intracellular bacteria and virus) 및 암 등에 대한 방어면역을 형성할 것으로 예상된다(도 2).

Claims (11)

  1. 기탁번호 KCTC14136BP인 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주를 유효성분으로 포함하는 면역증진용 조성물
  2. 제1항에 있어서, 상기 균주는 사균체인 것을 특징으로 하는 면역증진용 조성물
  3. 제2항에 있어서, 상기 사균체는 80℃에서 1시간 동안 열처리하여 제조된 것을 특징으로 하는 면역증진용 조성물
  4. 기탁번호 KCTC14136BP인 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주를 유효성분으로 포함하는 천식, 비염, 부비강염, 결막염, 알러지, 아토피성 피부염 및 두드러기로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 면역저하로 인한 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물
  5. 제4항에 있어서, 상기 균주는 사균체인 것을 특징으로 하는 면역저하로 인한 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물
  6. 제5항에 있어서, 상기 사균체는 80℃에서 1시간 동안 열처리하여 제조된 것을 특징으로 하는 면역저하로 인한 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물
  7. 삭제
  8. 기탁번호 KCTC14136BP인 락토코커스 락티스 Q1(Lactococcus lactis Q1) 균주를 유효성분으로 포함하는 천식, 비염, 부비강염, 결막염, 알러지, 아토피성 피부염 및 두드러기로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상인 면역저하로 인한 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물
  9. 제8항에 있어서, 상기 균주는 사균체인 것을 특징으로 하는 면역저하로 인한 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물
  10. 제9항에 있어서, 상기 사균체는 80℃에서 1시간 동안 열처리하여 제조된 것을 특징으로 하는 면역저하로 인한 질환 예방 또는 개선용 식품 조성물
  11. 삭제
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