KR102310337B1 - 복합 소화 효소 생산능 및 항균 활성을 갖는 락토코커스 락티스 q1 균주 및 이의 용도 - Google Patents
복합 소화 효소 생산능 및 항균 활성을 갖는 락토코커스 락티스 q1 균주 및 이의 용도 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102310337B1 KR102310337B1 KR1020200168796A KR20200168796A KR102310337B1 KR 102310337 B1 KR102310337 B1 KR 102310337B1 KR 1020200168796 A KR1020200168796 A KR 1020200168796A KR 20200168796 A KR20200168796 A KR 20200168796A KR 102310337 B1 KR102310337 B1 KR 102310337B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- strain
- lactococcus lactis
- antibacterial activity
- culture
- antibacterial
- Prior art date
Links
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 title claims abstract description 65
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 52
- 241000194035 Lactococcus lactis Species 0.000 title claims abstract 12
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 title description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 25
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 claims abstract description 16
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims abstract description 15
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 claims abstract description 13
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 12
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims abstract description 9
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 17
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims description 6
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims description 6
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims description 6
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 6
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 6
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 6
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 6
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 claims description 5
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 claims description 5
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 claims description 5
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims description 5
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 claims description 5
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims description 5
- 101710196208 Fibrinolytic enzyme Proteins 0.000 claims description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 claims 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 24
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 19
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 16
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 abstract description 12
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 abstract description 12
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 abstract description 10
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 9
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 abstract description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 7
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract description 6
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 abstract description 5
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 abstract description 4
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 abstract description 4
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 abstract description 4
- 241000233866 Fungi Species 0.000 abstract description 3
- 244000057717 Streptococcus lactis Species 0.000 description 53
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 10
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 8
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 8
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 8
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 7
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 5
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 5
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 5
- 235000021109 kimchi Nutrition 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LWFUFLREGJMOIZ-UHFFFAOYSA-N 3,5-dinitrosalicylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=CC([N+]([O-])=O)=C1O LWFUFLREGJMOIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 3
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 2
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 2
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 2
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 2
- LVZSQWIWCANHPF-UHFFFAOYSA-N p-nitrophenyl palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 LVZSQWIWCANHPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 240000002234 Allium sativum Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 description 1
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 1
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 1
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 240000004160 Capsicum annuum Species 0.000 description 1
- 235000008534 Capsicum annuum var annuum Nutrition 0.000 description 1
- 235000007862 Capsicum baccatum Nutrition 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 239000004278 EU approved seasoning Substances 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- DKNPRRRKHAEUMW-UHFFFAOYSA-N Iodine aqueous Chemical compound [K+].I[I-]I DKNPRRRKHAEUMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- NVNLLIYOARQCIX-MSHCCFNRSA-N Nisin Chemical compound N1C(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)[C@@H]([C@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)[C@H](N)[C@H](C)CC)CSC[C@@H]1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]2C(NCC(=O)N[C@H](C)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CS[C@@H]2C)C(=O)N[C@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]2C(N[C@H](C)C(=O)N[C@@H]3C(=O)N[C@@H](C(N[C@H](CC=4NC=NC=4)C(=O)N[C@H](CS[C@@H]3C)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N[C@H]([C@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=3NC=NC=3)C(=O)N[C@H](C(C)C)C(=O)NC(=C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(O)=O)=O)CS[C@@H]2C)=O)=O)CS[C@@H]1C NVNLLIYOARQCIX-MSHCCFNRSA-N 0.000 description 1
- 108010053775 Nisin Proteins 0.000 description 1
- 244000088415 Raphanus sativus Species 0.000 description 1
- 235000006140 Raphanus sativus var sativus Nutrition 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 244000273928 Zingiber officinale Species 0.000 description 1
- 235000006886 Zingiber officinale Nutrition 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003579 anti-obesity Effects 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000001728 capsicum frutescens Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000002996 emotional effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000004611 garlic Nutrition 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000008397 ginger Nutrition 0.000 description 1
- 244000000058 gram-negative pathogen Species 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- PWPJGUXAGUPAHP-UHFFFAOYSA-N lufenuron Chemical compound C1=C(Cl)C(OC(F)(F)C(C(F)(F)F)F)=CC(Cl)=C1NC(=O)NC(=O)C1=C(F)C=CC=C1F PWPJGUXAGUPAHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000004630 mental health Effects 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 1
- 239000004309 nisin Substances 0.000 description 1
- 235000010297 nisin Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 238000013081 phylogenetic analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000009938 salting Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
- A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/99—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
- A61Q17/005—Antimicrobial preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/324—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the immune system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/46—Streptococcus ; Enterococcus; Lactococcus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Virology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Birds (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
본 발명은 복합 소화 효소 생산능 및 항균 활성을 갖는 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) Q1(KCTC14136BP) 균주 및 이의 용도에 관한 것으로, 보다 상세하게는 단백질, 녹말, 지질 및 섬유소 분해 효소를 생산하며, 그람 음성균인 대장균(Escherichia coli) 및 진균인 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 모두 항균력을 지닌 락토코커스 락티스 Q1 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 생균제 조성물, 항균제 조성물, 화장품 원료, 발효 식품 및 건강기능 식품에 관한 것이다.
본 발명의 락토코커스 락티스 Q1 균주 또는 이의 배양물은 유산균 및 효모와 같은 유용미생물(effective microorganism)에는 항균활성이 나타나지 않아 병원성 세균에 대하여 특이적으로 항균 활성 및 길항 효과가 우수하여, 유용미생물과의 복합미생물로 제공할 수 있는 장점이 있다.
본 발명의 락토코커스 락티스 Q1 균주 또는 이의 배양물은 유산균 및 효모와 같은 유용미생물(effective microorganism)에는 항균활성이 나타나지 않아 병원성 세균에 대하여 특이적으로 항균 활성 및 길항 효과가 우수하여, 유용미생물과의 복합미생물로 제공할 수 있는 장점이 있다.
Description
본 발명은 복합 소화 효소 생산능 및 항균 활성을 갖는 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) Q1 균주 및 이의 용도에 관한 것으로, 보다 상세하게는 단백질, 녹말, 지질 및 섬유소 분해 효소를 생산하며, 그람 음성균인 대장균과 진균인 칸디다균에 모두 항균력을 지닌 락토코커스 락티스 Q1 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 생균제 조성물, 항균제 조성물, 화장품 원료, 발효 식품 및 건강기능 식품에 관한 것이다.
김치는 배추나 무와 같은 재료를 소금에 절인 후 고춧가루, 마늘, 생강 등의 양념 및 젓갈을 넣어 만드는 한국의 전통적인 발효식품이다. 김치는 비타민A와 비타민C가 풍부하며 발효과정으로 인해 체내에 유익한 균들을 생성하도록 도움을 주며 항산화 및 면역 자극효과가 있으며 항비만 효과를 가지고 있다. 특히 김치에 포함되어 있는 유산균은 염증 반응을 억제하고 질병을 유발하는 미생물의 생장을 억제하고 비타민과 아미노산을 생산하며 무기물의 흡수 및 독소 제거에 도움을 준다. 또한 천식조절 및 알레르기 위험을 억제하고 감정 및 정신건강 도움을 주며 김치에 포함되어 있는 비타민과 항균 성분이 풍부하여 노화를 억제하고 암을 예방하면서 면역을 증강시키는 효능을 가지고 있다.
한편, 락토코커스는 연쇄상구균에 해당하며 우유 등에 존재하는 구형의 유산균으로 주로 치즈 제조 시에 사용된다. 락토바실러스나 비피도박테리아가 사람의 체온과 같은 37도에서 잘 자라는 반면, 이 유산균은 이 보다 낮은 20-25도에서 잘 자라는 특성이 있으며 발효 과정 중 풍미성분을 생산하여 치즈 특유의 냄새를 나게 한다. 이 속에 속하는 유산균들 중에는 니신(nisin)이라는 항균 물질을 생산하는 유산균이 존재한다. 대표적으로 Lactococcus lactis가 있다.
본 발명은 상기와 같은 필요성에 따라 안출된 것으로서, 단백질, 지질, 녹말 및 섬유소를 분해할 수 있는 복합 소화 효소 생산능을 가지고, 그람 음성균인 대장균(Escherichia coli) 및 진균인 칸디다 알비칸스(Candida albicans)와 같은 병원성 세균에 대한 항균 활성이 우수한 락토코커스 락티스 Q1 균주 및 이의 배양물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명은 상기 락토코커스 락티스 Q1 균주 및 이의 배양물과 이를 유효성분으로 함유하는 생균제 조성물, 항균제 조성물, 화장품 원료, 발효 식품 및 건강기능 식품을 제공하고자 한다.
상기의 해결하고자 하는 과제를 위한 본 발명에 따른 락토코커스 락티스 Q1(KCTC14136BP) 균주는 복합 소화 효소 생산능을 가지고, 항균 활성을 갖는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 실시예로서, 상기 균주는 단백질분해효소(protease), 전분분해효소(amylase), 섬유소분해효소(cellulase) 및 지질분해효소(lipase) 중 어느 하나를 생산할 수 있어 단백질, 전분, 지질 및 섬유소에 대하여 소화 효소 생산능을 가지고, 그람 음성균인 대장균(Escherichia coli) 및 진균인 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대하여 항균 활성을 가지는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 다른 실시예로서, 상기 락토코커스 락티스 Q1 균주의 배양물을 제공하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 실시예로서, 상기 락토코커스 락티스 Q1 균주의 배양물의 배양 방법은 상기 락토코커스 락티스 Q1 균주를 121℃에서 15분간 멸균된 MRS 배지에 접종하여 30℃, 180rpm의 조건에서 24시간 동안 배양하여 종균을 제조 하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 실시예로서, 상기 락토코커스 락티스 Q1 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 함유하는 생균제 조성물, 항균제 조성물, 환경 정화용 조성물, 발효 식품 또는 건강기능 식품을 제공하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 락토코커스 락티스 Q1 균주는 단백질, 지질, 녹말 및 섬유소를 분해할 수 있는 복합 소화 효소 생산능을 가지고, 그람 음성균인 대장균(Escherichia coli) 및 진균인 칸디다 알비칸스(Candida albicans)과 같은 병원성 세균에 대한 항균 활성이 우수하다.
또한, 상기 락토바실러스 플란타럼 Q1 균주 또는 이의 배양물은 유산균 및 효모와 같은 유용미생물(effective microorganism)에는 항균활성이 나타나지 않아 병원성 세균에 대하여 특이적으로 항균 활성 및 길항 효과가 우수하며, 유용미생물과의 복합미생물로 제공할 수 있다.
또한, 상기 락토코커스 락티스 Q1 균주 및 이의 배양물과 이를 유효성분으로 함유하는 생균제 조성물, 항균제 조성물, 화장품 원료, 발효 식품 및 건강기능 식품을 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 락토코커스 락티스 Q1 균주 상등액의 대장균(Escherichia coli)에 대한 항균 활성을 측정한 결과를 나타낸 사진이다.
도 2는 본 발명에 따른 락토코커스 락티스 Q1 균주 상등액의 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대한 항균 활성을 측정한 결과를 나타낸 사진이다.
도 3는 본 발명에 따른 락토코커스 락티스 Q1의 16s rRNA의 염기서열이다.
도 4는 본 발명에 따른 락토코커스 락티스 Q1의 16s rRNA의 염기서열을 기초로 한 다른 세균(bacteria)과의 계통발생론적 관계를 나타내는 계통도이다.
도 2는 본 발명에 따른 락토코커스 락티스 Q1 균주 상등액의 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대한 항균 활성을 측정한 결과를 나타낸 사진이다.
도 3는 본 발명에 따른 락토코커스 락티스 Q1의 16s rRNA의 염기서열이다.
도 4는 본 발명에 따른 락토코커스 락티스 Q1의 16s rRNA의 염기서열을 기초로 한 다른 세균(bacteria)과의 계통발생론적 관계를 나타내는 계통도이다.
이하 본 발명의 실시를 위한 구체적인 실시예를 도면을 참고하여 설명한다. 예시된 도면은 발명의 명확성을 위하여 핵심적인 내용만 확대 도시하고 부수적인 것은 생략하였으므로 도면에 한정하여 해석하여서는 아니 된다.
본 발명은 복합 소화 효소 생산능을 가지고, 항균 활성을 갖는 락토코커스 락티스 (Lactococcus lactis) Q1(KCTC14136BP) 균주를 제공한다.
상기 락토코커스 락티스 Q1은 생물자원센터(KCTC)에 기탁번호 KCTC14136BP로 기탁되었다.
상기 락토코커스 락티스 Q1은 형태학적으로 그람 양성 간균에 해당하며, 락토코커스 락티스와 99%의 상동성을 가지는 균주이다.
상기 락토코커스 락티스 Q1은 단백질분해효소(protease), 전분분해효소(amylase), 섬유소분해효소(cellulase) 및 지질분해효소(lipase) 중 어느 하나를 생산할 수 있어 단백질, 전분, 지질 및 섬유소에 대하여 소화 효소 생산능을 가지고, 그람 음성균인 대장균(Escherichia coli) 및 진균인 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대하여 항균 활성을 가질 수 있다.
본 발명은 상기 락토코커스 락티스 Q1 균주의 배양물을 제공한다. 상기 배양물이란 상기 락토코커스 락티스 Q1 균주를 배양한 배양 배지 또는 배양액, 및 상기 배양 배지 또는 배양액에서 배양한 그 결과물을 포함하는 개념이며, 상기 배양물은 상기 락토코커스 락티스 Q1 균주를 포함하거나 포함하지 않을 수 있다. 상기 배양물은 그 제형이 특별히 한정되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 제형일 수 있다. 예를 들어 상기 배양물은 액체 또는 고체일 수 있으며, 배양물의 원형 상태이거나 그의 농축된 형태 또는 건조된 형태일 수 있다.
보다 구체적으로, 상기 락토코커스 락티스 Q1 균주의 배양물의 배양 방법은 종균을 제조하는 단계, 배양 배지를 제조하는 단계 및 배양 배지에 종균을 접종하여 배양하는 단계를 포함하여 배양할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 락토코커스 락티스 Q1 균주 또는 상기 균주의 배양물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 생균제 조성물, 항균제 조성물, 화장품 원료, 발효 식품 및 건강기능 식품을 제공한다.
상기 생균제 조성물은 인간이나 동물 등 숙주의 건강에 유익한 효과를 나타내는 미생물 또는 그 성분을 의미하는 것으로서, 숙주의 장내의 소화관 벽에 정착하여 다른 유해균의 정착 및 병원균의 증식을 억제하는 역할을 하며, 생균제 조성물이 생산하는 유익한 소화 효소는 영양소의 흡수 및 이용을 용이하게 할 수 있다.
또한, 상기 락토코커스 락티스 Q1 균주 또는 이의 배양물은 유산균 및 효모와 같은 유용미생물(effective microorganism)에는 항균활성이 나타나지 않아 병원성 세균에 대하여 특이적으로 항균 활성 및 길항 효과가 우수하여, 유용미생물과의 복합미생물로 생균제 조성물, 항균제 조성물, 화장품 원료, 발효 식품 및 건강기능 식품을 제공할 수 있다.
이하, 실험예를 기술함으로써 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
<실험예 1> 락토코커스 락티스(
Lactococcus lactis
) Q1 균주의 분리 및 동정
(1) 균주의 분리
락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) Q1 균주를 분리하기 위해서 1차적으로 멸균증류수 9 ㎖에 김치 1g을 넣은 후 10분간 섞어 준 후 나온 상등액을 멸균증류수로 희석하여 MRS agar(Lactobacilli MRS Agar, BD, USA) 고체 배지에 도말하고 37℃에서 24시간 동안 배양한 후 각각의 콜로니를 분리하였다. 선별된 균주를 MRS 고체 배지에 도말하여 순수 분리하였으며, 선별된 균주를 대상으로 효소의 분해능 실험과 항균 실험을 통해 우수한 효과를 가진 균주를 동정 분석하였다.
(2)균주의 동정
(2-1) API 50 CHL kit을 이용한 당의 이용범위 조사
생화학적 동정은 API 50 CHL kit(Biomerieux, France)을 이용하여 탄수화물의 이용성을 확인하였다. 동정하려는 균주를 MRS 고체 배지에 도말하여 37℃에서 24시간 동안 배양한 후 콜로니를 생리식염수 2 ㎖로 현탁시켜서 서스펜션 배지(suspension medium) 5 ㎖에 위 균액을 넣어 분산시킨 후 탁도를 2 맥팔런트(McFarland)로 맞춰준다. 탁도를 맞춘 균액을 API 50 CHL medium 10 ㎖에 접종하여 섞어주고 API 50 CH strip에 150 ㎕씩 접종시킨 뒤 37℃에서 24시간과 48시간 동안 배양하면서 결과를 확인한다. 확인된 결과는 API동정용 시스템(apiwebTM)을 통해 생화학적 결과를 분석하였다.
분석결과 총 49종의 탄수화물에 대한 당의 이용능력을 확인한 결과 분리균은 다양한 당류를 이용하여 산을 생성하였으며 그 특성은 표 1에 나타내었다.
그리고 순수 분리된 균주에 대한 API 50 CHB kit의 결과를 API동정용 시스템(apiwebTM)으로 확인한 결과 99.6%의 유사성으로 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis)인 것을 확인하였다.
[표 1]
(2-2) 16s rRNA 염기서열을 이용한 균주의 분석
유전학적 동정은 미생물 내에 존재하는 genomic DNA를 추출하여 동정에 이용이 되는 16s rRNA를 PCR 방법을 이용하여 증폭한 뒤 정제 과정을 거친 PCR 단편을 유전자 분석센터인 (주)마크로젠에 염기서열 분석을 의뢰하였다.
염기서열 분석을 통해 얻은 균주의 염기서열은 National Center for Biotechnology Information(NCBI) 홈페이지 내에 존재하는 GeneBank database (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi?PROGRAM=blastn&PAGE_TYPE=BlastSearch&LINK_LOC=blasthome)에서 BLASTN로 검색하여 기존에 보고된 미생물의 16s rRNA와 유사도를 비교하였다.
도 3는 본 발명에 따른 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) Q1의 16s rRNA의 염기서열이고, 도 5는 본 발명에 따른 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) Q1의 16s rRNA의 염기서열을 기초로 한 다른 세균(bacteria)과의 계통발생론적 관계를 나타내는 계통도이다.
상기 도 3 및 서열목록에 나타낸 바와 같이, 16s rRNA 염기서열을 분석한 결과 1,433개의 염기를 확인하다(서열번호 1).
상기 도 4에 나타낸 바와 같이, 16S rRNA 염기서열을 이용하여 계통발생론적으로 분석한 결과 Lactococcus lactis strain CBA3619(accession No: CP042408.1) 16s rRNA 유전자와 99%(1428/1429)의 유사율을 나타냈으므로 분리 균주를 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) Q1로 명명하였다.
<실험예 2> 락토코커스 락티스(
Lactococcus lactis
) Q1 균주의 항균력 실험
(1) 그람 음성 병원성 세균에 대한 항균력 실험
본 실험에서 사용된 대장균(Escherichia coli)은 인간과 동물의 장에 존재하며 복통과 설사 및 장염을 일으키는 균으로 대표적인 그람 음성 병원균으로서 LB(Luria Bertani) 액체 배지에 접종하여 30℃, 180rpm의 조건으로 21시간 동안 배양하여 얻은 균체를 1 x 107 cfu/㎖로 맞춰서 LB 고체 배지에 100 ㎕를 도말하였다. 도말된 LB 고체 배지 위에 페이퍼 디스크(ADVANTEC, Japan)를 얹고 항균물질 50 ㎕를 흡착시키고 30℃에서 24시간 배양한 후 생육저해를 나타내는 투명환(clear zone)의 직경(mm)을 측정하는 페이퍼 디스크법으로 실험하였다. 항균물질은 락토코커스 락티스 Q1 균주를 MRS 액체 배지에 접종하여 30℃, 180rpm의 조건으로 18시간 동안 배양한 배양액을 8,000 x g에서 원심분리한 후에 얻은 상등액을 0.2 ㎛ membrane filter로 여과하여 항균활성 측정시료로 사용하였다.
도 1은 본 발명에 따른 락토코커스 락티스 Q1 균주 상등액의 대장균(Escherichia coli)에 대한 항균활성을 측정한 결과를 나타낸 사진으로서, 대장균에 항균활성이 나타나면서 투명환(clear zone)이 생성되어 락토코커스 락티스 Q1 균주 또는 이의 배양물이 그람 음성 병원성 세균에 강한 항균력을 확인하였다.
(2) 병원성 진균에 대한 항균력 실험
본 실험에서 사용된 칸디다 알비칸스(Candida albicans)는 피부질환을 야기시키는 대표적인 효모형 병원균으로서 SDB 액체 배지에 접종하여 30℃, 180rpm의 조건으로 21시간 동안 배양하여 얻은 균체를 1 x 107 cfu/㎖로 맞춰서 SDA 고체 배지에 100 ㎕를 도말하였다. 도말된 SDA 고체 배지 위에 페이퍼 디스크(ADVANTEC, Japan)를 얹고 항균물질 50 ㎕를 흡착시키고 30℃에서 24시간 배양한 후 생육저해를 나타내는 투명환(clear zone)의 직경(mm)을 측정하는 페이퍼 디스크법으로 실험하였다. 항균물질은 락토코커스 락티스 Q1 균주를 MRS 액체 배지에 접종하여 30℃, 180rpm의 조건으로 18시간 동안 배양한 배양액을 8,000 x g에서 원심분리한 후에 얻은 상등액을 0.2 ㎛ membrane filter로 여과하여 항균활성 측정시료로 사용하였다.
도 2는 본 발명에 따른 락토코커스 락티스 Q1 균주 상등액의 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대한 항균활성을 측정한 결과를 나타낸 사진으로서, 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 항균활성이 나타나면서 투명환(clear zone)이 생성됨으로서 락토코커스 락티스 Q1 균주 또는 이의 배양물이 병원성 진균에도 강한 항균력을 확인하였다.
본 페이퍼 디스크 항균력 실험을 통해서 그람 음성 병원성 세균과 병원성 진균에 모두 항균력을 가지고 있으므로 락토코커스 락티스 Q1 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 사용하여 항균용 조성물, 생균제 조성물, 환경정화용 조성물과 같이 다양한 분야에 제공될 것으로 기대된다. 또한 발효식품의 발효과정을 빠르고 안전하게 진행시키며 장기간 보존을 위한 화학방부제의 역할을 대체할 수 있는 천연보존제로 사용할 수 있다.
(3) 비병원성 세균에 대한 항균력 실험
본 실험에서 사용된 유산균 및 효모는 유용미생물로 알려져 있으며 유용성과 안정성이 확보된 균주로 MRS 및 SDB 액체 배지에 접종하여 37℃, 180rpm의 조건으로 36시간동안 배양하여 얻은 균체를 1 x 107 cfu/㎖로 맞춰서 MRS 및 SDA 고체 배지에 100㎕를 도말하였다. 도말된 MRS 및 SDA 고체 배지 위에 페이퍼 디스크(ADVANTEC, Japan)를 얹고 항균물질 50 ㎕를 흡착시키고 30℃에서 24시간 배양한 후 생육저해를 나타내는 투명환(clear zone)의 직경(mm)을 측정하는 페이퍼 디스크법으로 실험하였다. 항균물질은 락토코커스 락티스 Q1 균주를 MRS 액체 배지에 접종하여 30℃, 180rpm의 조건으로 18시간 동안 배양한 배양액을 8,000 x g에서 원심분리한 후에 얻은 상등액을 0.2㎛ membrane filter로 여과하여 항균활성 측정시료로 사용하였다. 그 결과 유산균 및 효모와 같은 유용미생물에는 투명환이 형성되지 않았기 때문에 항균활성을 나타내지 않았다.
또한 TSA 액체 배지에 유산균과 락토바실러스 플란타럼 Q1 균주를 같이 접종하여 30℃, 180rpm의 조건으로 36시간 동안 배양하였을 때 두 균주 모두 107 cfu/㎖ 이상의 생균수가 측정됨에 따라 락토코커스 락티스 Q1 균주와 비병원성 균주가 생장하면서 상호보완적인 공생관계를 유지하고 있는 것을 확인하였다.
본 연구에서 분리하여 얻은 락토코커스 락티스 Q1 균주 또는 이의 배양물은 유용미생물에는 항균활성이 나타나지 않았지만 대장균(Escherichia coli)과 칸디다 알비칸스(Candida albicans)과 같은 병원성 세균 및 진균에 대하여 특이적으로 항균활성 및 길항효과가 우수함을 알 수 있었으며 프로바이오틱스 유산균과의 복합미생물로서의 가능성을 확인하였다.
<실험예 4> 락토코커스 락티스(
Lactococcus lactis
) Q1 균주의 효소 활성 측정
락토코커스 락티스 Q1 균주의 효소 활성을 측정하기 위하여 균주를 102 cfu/㎖의 농도로 50 ㎖의 MRS 액체 배지에 접종하였다. 30℃에서 180 rpm으로 24시간 배양된 배양액을 1 ㎖을 취하여 10,000 g로 10분간 원심분리한 후, 상등액을 pore의 지름이 0.45 m인 membrane syringe filter로 제균한 것을 조효소로 사용하였다.
단백질분해효소(protease)의 활성은 카세인(casein)을 100 mM Tris-HCl buffer (pH 7.5)에 1%가 되도록 용해하여 기질 용액으로 사용하고, 기질 용액 0.5 ㎖에 조효소 0.5 ㎖를 가하여 30℃에서 1시간 반응시킨 후 0.5 ㎖의 40% (w/v) trichloroacetic acid(TCA) 용액을 가하여 반응을 정지시킨 후 실온에서 15분간 방치하였다. 12,000 g로 15분 동안 원심분리한 후 상등액을 취하여 가용성 peptide 양을 280 nm에서 흡광도로 측정하였다. 표준곡선은 L-tyrosine 용액을 사용하였으며, 효소활성 단위인 1 unit은 1분간 1 g에 상당하는 tyrosine을 생성하는 효소의 양으로 정의하였다.
전분분해효소(amylase)의 활성은 1% (w/v) soluble starch 0.5 ㎖에 0.5 ㎖의 조효소를 가하여 30℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 차가운 1N HCl 1 ㎖을 가하여 반응을 정지시킨 후 0.1 ㎖의 Lugol's iodine 용액을 가하여 발색시켰다. 증류수를 가하여 25 ㎖로 정용한 후, 620 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준곡선은 maltose 용액을 사용하였으며, 효소활성 단위는 1분간 0.01%의 soluble starch를 줄이는데 상당하는 효소의 양을 1 unit으로 정의하였다.
섬유소분해효소(cellulase)의 활성은 Carboxymethyl cell㎕ose(CMC)를 기질로 하여 효소 반응 후에 유리된 환원당을 3,5-dinitrosalicylic acid(DNS) 방법으로 다음과 같이 정량함으로써 측정하였다. 증류수에 현탁시킨 1.0% (w/v) CMC 용액 0.5 ㎖, 100 mM Tris-HCl buffer (pH 7.5) 0.25 ㎖와 효소용액 0.25 ㎖를 혼합하여 55℃에서 15분 동안 반응시켰다. DNS 시약 3 ㎖를 첨가하여 반응을 정지시키고 끓는 물에서 5분 동안 방치하여 발색시킨 후 540 nm에서 흡광도를 측정하고 포도당(glucose)을 표준시료로 사용하여 동일 조건하에서 발색시켜 조사한 흡광도와 비교함으로써 유리된 환원당의 양을 결정하였다. 효소활성도 1.0 unit는 위의 조건하에서 1분 동안 CMC로 부터 1 mol의 glucose에 상응하는 환원당을 생성하는 효소의 양으로 정의하였다.
지질분해효소(lipase)의 활성은 기질로 사용한 p-nitrophenyl palmitate로부터 효소 작용으로 인해 생성되어진 p-nitrophenol의 양을 측정함으로써 결정하였다. 아세토나이트릴(acetonitrile)에 녹인 10 mM p-nitrophenyl palmitate 10㎕, 완충액인 100mM Tris-HCl buffer (pH 7.5) 350 ㎕에 조효소 10㎕를 넣고 즉시 섞어준 후 45℃에서 30분간 반응하였다. p-nitrophenol의 생성량 증가는 흡광도 405 nm에서 측정하였다. 효소 활성(unit)은 1분동안 생성된 1 μ㏖의 p-nitrophenol을 생성하는데 필요한 효소의 양으로 정의하였다.
그 결과 각각의 효소 활성은 표 2와 같다.
[표 2]
배양액에서 얻은 조효소를 통해 단백질분해효소(protease), 전분분해효소(amylase), 섬유소분해효소(cellulase) 그리고 지질분해효소(lipase)가 모두 생산되었음을 확인하였으며, 효소의 활성이 좋기 때문에 락토코커스 락티스 Q1 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 사용하여 발효 식품 또는 건강기능 식품으로 활용할 수 있는 것이다.
이상에서는 실시 예를 참조하여 설명하였지만, 해당 기술 분야의 숙련된 당업자는 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.
<110> CUOME BIO Co., Ltd.
<120> LACTOCOCCUS LACTIS Q1 STRAIN HAVING COMPLEX DIGESTIVE
PRODUCTIVITY AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY AND USES THEREOF
<130> Pn-2020-0329
<160> 1
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 1449
<212> DNA
<213> Lactococcus lactis
<400> 1
tggggaatct gcctttgagc gggggacaac atttggaaac gaatgctaat accgcataac 60
aactttaaac acaagtttta agtttgaaag atgcaattgc atcactcaaa gatgatcccg 120
cgttgtatta gctagttggt gaggtaaagg ctcaccaagg cgatgataca tagccgacct 180
gagagggtga tcggccacat tgggactgag acacggccca aactcctacg ggaggcagca 240
gtagggaatc ttcggcaatg gacgaaagtc tgaccgagca acgccgcgtg agtgaagaag 300
gttttcggat cgtaaaactc tgttggtaga gaagaacgtt ggtgagagtg gaaagctcat 360
caagtgacgg taactaccca gaaagggacg gctaactacg tgccagcagc cgcggtaata 420
cgtaggtccc gagcgttgtc cggatttatt gggcgtaaag cgagcgcagg tggtttatta 480
agtctggtgt aaaaggcagt ggctcaacca ttgtatgcat tggaaactgg tagacttgag 540
tgcaggagag gagagtggaa ttccatgtgt agcggtgaaa tgcgtagata tatggaggaa 600
caccggtggc gaaagcggct ctctggcctg taactgacac tgaggctcga aagcgtgggg 660
agcaaacagg attagatacc ctggtagtcc acgccgtaaa cgatgagtgc tagatgtagg 720
gagctataag ttctctgtat cgcagctaac gcaataagca ctccgcctgg ggagtacgac 780
cgcaaggttg aaactcaaag gaattgacgg gggcccgcac aagcggtgga gcatgtggtt 840
taattcgaag caacgcgaag aaccttacca ggtcttgaca tactcgtgct attcctagag 900
ataggaagtt ccttcgggac acgggataca ggtggtgcat ggttgtcgtc agctcgtgtc 960
gtgagatgtt gggttaagtc ccgcaacgag cgcaacccct attgttagtt gccatcatta 1020
agttgggcac tctaacgaga ctgccggtga taaaccggag gaaggtgggg atgacgtcaa 1080
atcatcatgc cccttatgac ctgggctaca cacgtgctac aatggatggt acaacgagtc 1140
gcgagacagt gatgtttagc taatctctta aaaccattct cagttcggat tgtaggctgc 1200
aactcgccta catgaagtcg gaatcgctag taatcgcgga tcagcacgcc gcggtgaata 1260
cgttcccggg ccttgtacac accgcccgtc acaccacggg agttgggagt acccgaagta 1320
ggttgcctaa ccgcaaggag ggcgcttcct aaggtaagac cgatgactgg ggtgaagtcg 1380
taacaaggta gccgtatcgg aaggtgcggc tggatcacct tcctttctag ctggatcacc 1440
tccttagag 1449
Claims (9)
- 단백질분해효소(protease), 전분분해효소(amylase), 섬유소분해효소(cellulase) 및 지질분해효소(lipase) 중 어느 하나의 소화 효소 생산능을 가지고, 대장균(Escherichia coli) 및 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대하여 항균 활성을 갖는 락토코커스 락티스(Lactococcus lactis) Q1(KCTC14136BP) 균주.
- 삭제
- 삭제
- 제1항에 기재된 상기 락토코커스 락티스 Q1(KCTC14136BP) 균주의 배양액.
- 제1항에 기재된 상기 락토코커스 락티스 Q1(KCTC14136BP) 균주 또는 상기 균주의 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 생균제 조성물.
- 제1항에 기재된 상기 락토코커스 락티스 Q1(KCTC14136BP) 균주 또는 상기 균주의 배양액을 유효성분으로 함유하고 대장균(Escherichia coli) 및 칸디다 알비칸스(Candida albicans)에 대하여 항균 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 항균제 조성물.
- 제1항에 기재된 상기 락토코커스 락티스 Q1(KCTC14136BP) 균주 또는 상기 균주의 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 화장품 원료.
- 제1항에 기재된 상기 락토코커스 락티스 Q1(KCTC14136BP) 균주 또는 상기 균주의 배양액을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 발효 식품.
- 삭제
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020200168796A KR102310337B1 (ko) | 2020-12-04 | 2020-12-04 | 복합 소화 효소 생산능 및 항균 활성을 갖는 락토코커스 락티스 q1 균주 및 이의 용도 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020200168796A KR102310337B1 (ko) | 2020-12-04 | 2020-12-04 | 복합 소화 효소 생산능 및 항균 활성을 갖는 락토코커스 락티스 q1 균주 및 이의 용도 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR102310337B1 true KR102310337B1 (ko) | 2021-10-07 |
Family
ID=78609673
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020200168796A KR102310337B1 (ko) | 2020-12-04 | 2020-12-04 | 복합 소화 효소 생산능 및 항균 활성을 갖는 락토코커스 락티스 q1 균주 및 이의 용도 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102310337B1 (ko) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114480167A (zh) * | 2021-12-23 | 2022-05-13 | 美益添生物医药(武汉)有限公司 | 乳酸乳球菌md-622及其应用 |
| KR102470357B1 (ko) | 2022-02-15 | 2022-11-25 | 주식회사 큐옴바이오 | 락토코커스 락티스 q1 균주를 포함하는 면역증진용 조성물 |
| CN116286561A (zh) * | 2023-05-17 | 2023-06-23 | 佛山科学技术学院 | 一株产蛋白酶的耐酸乳酸乳球菌霍氏亚种及其应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20000021520A (ko) | 1998-09-30 | 2000-04-25 | 변유량 | 천연 항균물질을 생산하는 락토코커스 락티스 미생물(케이에프씨씨 11047). |
| KR20130118625A (ko) * | 2012-04-20 | 2013-10-30 | 조선대학교산학협력단 | 항진균 활성을 갖는 락토바실러스 플란타룸 및 이를 포함하는 항진균 조성물 |
-
2020
- 2020-12-04 KR KR1020200168796A patent/KR102310337B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20000021520A (ko) | 1998-09-30 | 2000-04-25 | 변유량 | 천연 항균물질을 생산하는 락토코커스 락티스 미생물(케이에프씨씨 11047). |
| KR20130118625A (ko) * | 2012-04-20 | 2013-10-30 | 조선대학교산학협력단 | 항진균 활성을 갖는 락토바실러스 플란타룸 및 이를 포함하는 항진균 조성물 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| BioRes., Vol.5(3), pp.6385-6403(2020.02.) * |
| The Korean Journal of Microbiology, Vol. 47, pp.74-80(2011.) * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114480167A (zh) * | 2021-12-23 | 2022-05-13 | 美益添生物医药(武汉)有限公司 | 乳酸乳球菌md-622及其应用 |
| CN114480167B (zh) * | 2021-12-23 | 2024-01-12 | 美益添生物医药(武汉)有限公司 | 乳酸乳球菌md-622及其应用 |
| KR102470357B1 (ko) | 2022-02-15 | 2022-11-25 | 주식회사 큐옴바이오 | 락토코커스 락티스 q1 균주를 포함하는 면역증진용 조성물 |
| CN116286561A (zh) * | 2023-05-17 | 2023-06-23 | 佛山科学技术学院 | 一株产蛋白酶的耐酸乳酸乳球菌霍氏亚种及其应用 |
| CN116286561B (zh) * | 2023-05-17 | 2023-07-28 | 佛山科学技术学院 | 一株产蛋白酶的耐酸乳酸乳球菌霍氏亚种及其应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR102310337B1 (ko) | 복합 소화 효소 생산능 및 항균 활성을 갖는 락토코커스 락티스 q1 균주 및 이의 용도 | |
| Xu et al. | Probiotic potential and amylolytic properties of lactic acid bacteria isolated from Chinese fermented cereal foods | |
| Rajoka et al. | Isolation and evaluation of probiotic potential of lactic acid bacteria isolated from poultry intestine | |
| Thapa et al. | Microbial diversity in ngari, hentak and tungtap, fermented fish products of North-East India | |
| Manhar et al. | In vitro evaluation of celluloytic Bacillus amyloliquefaciens AMS1 isolated from traditional fermented soybean (Churpi) as an animal probiotic | |
| Ratanaburee et al. | Selection of γ‐aminobutyric acid‐producing lactic acid bacteria and their potential as probiotics for use as starter cultures in T hai fermented sausages (N ham) | |
| KR101734361B1 (ko) | 장류의 유해 미생물에 대한 항균 활성, 항산화 활성 및 세포외 효소 분비능이 있고, 바이오제닉 아민을 생성하지 않는 전통장류 유래의 바실러스 서틸리스 scm146 균주 및 이의 용도 | |
| Díaz-Vergara et al. | Encapsulated whey–native yeast Kluyveromyces marxianus as a feed additive for animal production | |
| KR102310336B1 (ko) | 복합 소화 효소 생산능 및 항균 활성을 갖는 락토바실러스 플란타럼 q1 균주 및 이의 용도 | |
| CN113080461A (zh) | 一种具有抑制奇异变形杆菌生长作用的益生菌及其发酵液和应用 | |
| Singh et al. | Antimicrobial, antioxidant and probiotics characterization of dominant bacterial isolates from traditional fermented fish of Manipur, North-East India | |
| Rezaei et al. | Isolation of lactic acid probiotic strains from Iranian camel milk: technological and antioxidant properties | |
| Khisti et al. | Isolation and identification of Saccharomyces cerevisiae from caterpillar frass and their probiotic characterization | |
| Kesen et al. | Beneficial characteristics and evaluation criteria of probiotics | |
| KR20150101789A (ko) | 복합 효소 생산능 및 항균 활성을 갖는 바실러스 서브틸리스 bk418 균주 및 이의 용도 | |
| Sen et al. | Molecular characterization and in vitro analyses of a sporogenous bacterium with potential probiotic properties | |
| Yang et al. | Stress tolerance, safety, and probiotic traits of cholesterol-decreasing Bifidobacterium BLH1 isolated from Guizhou red sour soup, a traditional Chinese fermented food | |
| KR100850743B1 (ko) | 바실러스 서브틸리스 및 이를 이용한 생균제 | |
| Kafilzadeh et al. | Isolation of amylase producing aquatic Actinomycetes from the sediments of mangrove forests in south of Iran | |
| CN113061550B (zh) | 一株乳杆菌新菌株z6及其在食品中的应用 | |
| Khalili Samani et al. | Bacteriocin activity of various iranian honey‐associated bacteria and development of a simple medium for enhanced bacteriocin activity | |
| Irza et al. | Isolation, Characterization, Molecular Identification of Probiotic Bacteria from Meconium | |
| Sukumar et al. | Study of the probiotic potential of lactic acid bacteria isolated from a variety of Indian fermented food | |
| Ling et al. | Enzyme profile of Lactobacillus strain GG by a rapid API ZYM system: a comparison of intestinal bacterial strains | |
| Gondaliya et al. | Determination of Probiotic Properties of L. fermentum MT308789 and L. oris MT308790 Isolated from Mother Breast Milk.(2021) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |