KR102416050B1 - 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 하기 단계들을 포함하는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법을 제공한다: a) 완충제를 포함하는 제1 수용액을 제공하는 단계로서, 상기 용액은 2.0 내지 4.0의 범위의 pH를 갖는, 상기 제공하는 단계; b) 상기 제1 수용액에 파노비노스타트를 용해시켜 제2 수용액을 제공하는 단계; 및 c) 파노비노스타트를 포함하는 상기 제2 수용액을 사이클로덱스트린을 포함하는 제3 수용액과 혼합하여 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 제4 수용액을 형성시키는 단계. 또한, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 인공 뇌척수액(CSF) 용액 및 뇌종양의 치료에서를 비롯한 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 의학 용도가 제공된다.

Description

사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물
본 발명은 히스톤 데아세틸라제(histone deacetylase: HDAC) 저해제의 약제학적 제형, 이러한 제형의 제조 방법, 및 뇌종양, 특히 신경교종의 치료에서의 상기 제형의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 약제학적 조성물 및 제형, 그리고 산재성 내재성 뇌교종(diffuse intrinsic pontine glioma: DIPG)과 같은 신경교종을 비롯한 뇌종양의 치료에서 사용하기 위한, 이러한 조성물 및 제품을 제조하고 투여하는 방법에 관한 것이다.
히스톤 데아세틸라제(HDAC) 저해제는 각종 암의 치료를 위하여 중요한 잠재력을 보인다. 파노비노스타트(Panobinostat)(Farydak®, LBH-589, 2-(E)-N-하이드록시-3-[4[[[2-(2-메틸-1H-indol-3-일)에틸]아미노]메틸]페닐]-2-프로펜아마이드)는 다발성 골수종의 치료에 사용되는 비선택적 HDAC 저해제이다. 파노비노스타트와 방사선의 병용 요법이 고형 종양의 치료를 위하여 제안되었다(WO2007/050655). 그러나, 파노비노스타트를 비롯한 하이드록사메이트 화합물은 불량한 수성 용해도 및 안정성을 나타낸다(WO2009/039226). 적어도 1종의 알코올을 이용해서 산화 및 가수분해를 저감시키는 파노비노스타트 제형이 제안되어 있다(WO2008/086330).
문헌[Wehrmann et al., PLOS ONE, 2012, Vol. 7, Issue 10, e48561]은 보리노스타트(vorinostat), 파노비노스타트, 베타-사이클로덱스트린 및 이들의 조합물에 의해 니만-픽 C형 섬유아세포 중의 세포내 콜레스테롤 수준의 저하를 기재한다.
문헌[Grasso et al., Nature Medicine, 2015, Vol. 21, No. 6, pp. 555-559]은 멀티-히스톤 데아세틸라제 저해제인 파노비노스타트가 시험관내 및 DIPG 동소 이종이식 모델 둘 다에서 치료적 효능을 입증한 것을 보고하고 있다. 그러나, 파노비노스타트는 이종이식 종양-보유 마우스에 전달-강화 전달(convection-enhanced delivery: CED)을 위하여 다이메틸 설폭사이드(DMSO)에 제형화되었다. DMSO는 온화한 산화제이며, 인간에서 임상 사용을 위하여 많은 단점을 갖는다.
WO2015/191931은 소수성 약물(HDAC 저해제일 수 있음), 이의 전구약물, 이의 염, 이의 아이소폼 또는 이들의 조합물; 사이클로덱스트린, 이의 전구약물, 이의 염 또는 이들의 조합물; 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 또는 이들의 조합물; 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 함유하는 약제학적 조성물뿐만 아니라, 뇌 질환의 치료에서의 용도를 비롯한 이의 의학적 용도를 기술한다.
WO2008/002862는 히스톤 데아세틸라제의 저해제 및 B 비타민을 함유하는 약제학적 조성물 및 증식성 장애의 치료에서의 용도를 비롯한 이의 의학적 용도를 기술한다.
문헌[Hockly et al., PNAS, 2003, Vol. 100(4), pp. 2041-2046]은, 경구 투여된, HDAC 저해제인 수베로일아닐라이드 하이드록삼산(SAHA)을 이용한 헌팅턴병의 마우스 모델의 치료를 기술한다.
US2013177499는 뇌종양에 대한 활성제를 위한 전달 비히클로서의 박테리아 유래 소세포의 용도를 제안한다.
WO2013/135727은 인공 뇌척수액(cerebrospinal fluid: CSF)에서 카보플라틴의 조성물을 이용하는 전달 강화 전달(convection enhanced delivery: CED)에 의한 신경교종의 치료 방법을 기술한다.
신경교종을 비롯한 뇌종양의 치료를 위한 (예컨대, CED를 통한) 중앙 투여에 순응하고 안정적인 약제학적 제형을 위한 충족되지 않은 요구가 남아 있다. 본 발명은 이들 및 기타 요구에 대처한다.
광범위하게는, 본 발명은 전달-강화 전달(CED)을 통한 뇌에의 투여에 적합한 HDAC 저해제인 파노비노스타트의 조성물 및 제형에 관한 것이다. 본 발명자들은 놀랍게도 "pH 브리징(bridging)" 방법이 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린 및 파노비노스타트의 수용성의 안정적인 복합체 또는 부가물을 제조하는 편리한 경로를 제공하는 것임을 발견하였다. 이어서, 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물이 인공 뇌척수액(CSF)에 가용성인 것을 발견하였다. 본 명세서의 실시예에 기재된 바와 같이, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물은 우수한 HDAC 저해 활성도, 시험관내 종양 세포 사멸 활성도 ƒZ고 예비 인간 임상 연구에서 산재성 내재성 뇌교종(DIPG)에 대해서 강력한 생체내 치료적 활성도를 나타낸다. 본 발명의 제조 방법 및 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 특별한 이점은 이들이 다이메틸 설폭사이드(DMSO)와 같은 원치 않는 제제를 회피한다는 점이다. 특히 고농도에서의 DMSO는, 인간 사용을 위한 약제에서 바람직하지 않고 파노비노스타트의 안정성에 부정적으로 영향을 미칠 수 있는 온화한 산화제이다.
따라서, 제1 양상에서, 본 발명은 하기를 포함하는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법을 제공한다:
a) 완충제를 포함하는 제1 수용액을 제공하는 단계(상기 용액은 2.0 내지 4.0의 범위의 pH를 지님);
b) 상기 제1 수용액에 파노비노스타트를 용해시켜 제2 수용액을 제공하는 단계; 및
c) 파노비노스타트를 포함하는 상기 제2 수용액을 사이클로덱스트린을 포함하는 제3 수용액과 혼합하여 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 제4 수용액을 형성하는 단계.
사이클로덱스트린은 약제학적 용도에 적합한 임의의 사이클로덱스트린, 예컨대, 알파-, 베타- 또는 감마-사이클로덱스트린일 수 있다. 특정 경우에, 사이클로덱스트린은 베타-사이클로덱스트린이다. 바람직하게는, 사이클로덱스트린은 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린이다.
완충제는 임의의 약제학적으로 허용 가능한 산(및 이의 접합체 염기)을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 완충제는 시트르산 및 시트레이트, 예를 들어 시트르산 및 시트르산나트륨을 포함한다. 완충제의 농도는 0.01M 내지 1M의 범위 예컨대, 0.1M일 수 있다.
제1 수용액의 pH는 2.0 내지 4.0, 예를 들어 2.5 내지 3.5의 범위이다. 바람직하게는, 제1 수용액의 pH는 약 3.0이다. 이 pH에서 파노비노스타트 유리 염기는 양호한 수성 용해도를 나타낸다. 실제로, 제2 수용액 중의 파노비노스타트의 농도는 1mM 내지 20mM의 범위이다. 예를 들어, 파노비노스타트 유리 염기는 pH 3.0에서 시트르산염 완충액 중 10mM 농도에서 가용성이다. 제1 수용액에 파노비노스타트를 용해시키는 단계는 1분 내지 20분의 기간 동안, 예컨대, 10분 동안 진탕 및/또는 혼합하는 것을 포함할 수 있다.
몇몇 경우에, 상기 제3 수용액 중 사이클로덱스트린(예컨대, 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린)의 농도는 10 ㎎/㎖ 내지 200 ㎎/㎖의 범위일 수 있다. 예를 들어, 제3 용액은 수중 100 ㎎/㎖의 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린일 수 있다.
몇몇 경우에, 본 발명의 제1 양상의 방법은 하기 단계를 더 포함한다:
d) 6.0 내지 8.0의 범위의 pH를 갖는 제5 수용액을 제공하기 위하여, 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 상기 제4 수용액에 충분한 양의 염기를 첨가하는 단계.
몇몇 경우에, 본 발명의 제5 양상의 방법은 상기 제5 수용액을 건조시켜 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 고형물을 형성시키는 단계를 더 포함한다. 이와 같이 해서, 건조된 고형물(예컨대, 동결건조된 케이크)은 중성 pH로 또는 이에 가깝게 재구성하기 위하여 준비된 중성 부근의 pH를 갖는다.
몇몇 경우에, 본 발명의 제1 양상의 방법은 상기 제4 수용액을 건조시켜 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 고형물을 형성시키는 단계를 더 포함한다. 이와 같이 해서 건조된 고형물(예컨대, 동결건조된 케이크)은 비교적 산성 pH를 지니며, 이는, 예컨대, 임의의 재구성, 재수화 또는 용해 단계 전에, 동안에 또는 후에, 중성 pH(대략 7)로 또는 이를 향하여 조절될 수 있거나 또는 조절되지 않을 수도 있다.
어느 경우에도(즉, 제5 또는 제4 수용액의 건조), 상기 건조는 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 동결건조된 고형물을 형성하기 위하여 감압 하에 냉동-건조(동결건조)시키는 것을 포함할 수 있다. 적합한 냉동-건조 조건은, 진공(0.053mbar) 하에 대략 2시간 동안 -52℃로 냉각시키는 것을 포함한다. 그러나, 냉동-건조/동결건조를 위한 각종 수법 및 조건은 공지되어 있고 본 명세서에서 상정되는 건조 단계(들)에서 사용 준비가 된 것을 발견할 수 있다는 것이 이해될 것이다. 일반적으로 말해서, 동결건조는 용액 내 모든 성분이 냉동될 때까지 용액이 냉각되는 냉동 단계를 포함한다. 이것은 -40℃ 미만, 예컨대, -50℃ 미만으로 온도를 낮추는 것을 포함할 수 있다. 냉동 후에, 1차 건조 단계가 있다. 1차 건조 단계에서 냉동 동안 형성된 얼음은 승화에 의해 제거된다. 1차 건조 단계는 감압, 예컨대, 10 mbar(1㎪) 미만, 또는 0.1 mbar(10㎩) 미만에서 수행될 수 있다. 1차 건조 단계는 냉동 단계 동안 사용된 온도보다 높은 온도에서 수행될 수 있다. 1차 건조 단계에 이어서 2차 건조 단계가 수행될 수 있다. 2차 건조 단계의 온도는 1차 건조 단계의 온도보다 높을 수 있다. 동결건조는, 몇몇 경우에, 1시간 초과, 예컨대, 2 또는 3시간 또는 심지어 그 이상 걸릴 수 있다.
몇몇 경우에, 용액은 10% w/w 미만, 선택적으로 5% w/w 미만의 함수량(water content)을 지니는 동결건조된 고형물, 예컨대, 케이크, 분말 또는 과립 덩어리로 건조된다. 동결건조된 고형물은 약제학적으로 허용 가능한 고형물, 예컨대, 약제학적으로 허용 가능한 케이크일 수 있다.
몇몇 경우에, 본 발명의 이 양상의 방법은 재구성 용액에 용해시킴으로써, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는, 건조된 고형물, 예컨대, 동결건조된 고형물을 재구성하는 단계를 더 포함한다. 재구성 용액은 바람직하게는 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물이 가용성인 약제학적으로 허용 가능한 용액이다. 특히, 재구성 용액은 인공 뇌척수액(CSF), 링거 용액, 주사용수(water for injection: WFI) 및 완충된 염 용액으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 소정의 경우에, 예를 들어, 중추신경계(CNS)로의 투여가 의도된 경우에, 재구성 용액은 인공 CSF를 포함할 수 있다.
몇몇 경우에, 냉동-건조 단계와 후속의 재구성 단계 사이에 상당한 지연이 있을 수 있다. 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 동결건조된 고형물은 상당한 저장 수명을 초래하는 양호한 안정성을 나타낼 수 있다. 대응하는 수용액과 비교해서 동결건조된 고형물의 안정성 및/또는 상대적인 압착성은 동결건조된 고형물을 저장 및/또는 선적을 위해 매력적이게 만든다. 재구성 단계는 환자에게 투여 직전에 수행될 수 있다. 몇몇 경우에, 재구성은 환자에게 투여 전에 최대 24, 48 또는 72시간 수행될 수 있다. 투여 시간에 가깝게 재구성을 수행함으로써, 인공 CSF 용액을 형성하는 염의 1종 이상이 사이클로덱스트린-작용된 핵화 또는 다른 핵화제의 결과로서 결정화될 기회가 더 적다.
몇몇 경우에, 상기 방법은 재구성 전에, 동안에 또는 후에 용액의 pH를 조절하는 단계를 더 포함한다. 특히 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물이 pH를 먼저 중화시키는 일 없이 냉동-건조된 경우(즉, 제4 수용액이 건조된 경우), 예를 들어, pH를 6.0 내지 8.0으로 하기 위하여 충분한 양의 염기를 첨가함으로써, pH를 조절하는 것이 필요할 수 있다.
몇몇 경우에, 본 발명의 제3 양상의 방법은 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 제5 수용액을 인공 뇌척수액(CSF) 용액과 혼합하여 인공 CSF 중에 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 제6 수용액을 제공하는 단계를 더 포함한다.
몇몇 경우에, 인공 CSF 중의 파노비노스타트의 농도(제6 수용액 또는 인공 CSF에 재구성된 고형물)는 1μM 내지 100μM, 예컨대, 1μM 내지 20μM의 범위이다. 이 농도 범위는 약물의 효율적인 항종양 농도에 대응하는 것으로 여겨진다. 제6 수용액, 또는 인공 CSF에 재구성된 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 냉동-건조된 고형물은, 편리하게는, 치료될 환자, 예컨대, 신경교종을 앓고 있거나 이를 지니는 것으로 의심되는 사람 또는 기타 포유류에게 투여하기 위한 용액일 수 있다.
몇몇 경우에, 본 발명의 제1 양상의 방법은 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 냉동-건조된 고형물 및/또는 상기 용액 중 적어도 1종을 여과 및/또는 멸균시키는 단계를 더 포함한다. 전형적으로, 상기 방법은, 예컨대, 치료적 투여를 위한 준비에 있어서, 인공 CSF 중에 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 냉동-건조된 고형물을 재구성함으로써 형성된 용액 또는 제6 수용액을 멸균 여과시키는 단계를 포함할 수 있다.
몇몇 경우에, 상기 방법은 적어도 하나의 전달-강화 전달(CED) 카테터에 인공 CSF 중 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 냉동-건조된 고형물을 재구성함으로써 형성된 용액 또는 제6 수용액의 적어도 일부를 도입하는 단계를 더 포함한다. CED 카테터 또는 카테터들은 치료될 환자의 머리에 이식용(또는 사전 이식된) 마이크로카테터일 수 있다.
제2 양상에서, 본 발명은 본 발명의 제1 양상의 방법에 의해 제조된 또는 제조 가능한 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 제공한다.
사이클로덱스트린 복합체가 나노입자의 형태를 취할 수 있는 것이 보고된 바 있다(예컨대, 문헌[He et al., Micron, 2008, Vol. 39, pp. 495-516] 참조). 실제로, 원자력 현미경(atomic force microscopy: AFM) 및 전자 현미경 연구는 β-사이클로덱스트린을 비롯한 사이클로덱스트린이, 대략 60㎚의 수력학적 반경(hydrodynamic radius)을 갖는, 용액 중 농도 의존적 응집체를 형성하는 것을 나타낸다. 따라서, 본 발명의 제2 양상의 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물은, 몇몇 경우에, 나노입자 또는 나노튜브의 형태를 취할 수 있다. 특히, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물은 10㎚ 내지 500㎚, 예컨대, 10㎚ 내지 100㎚ 또는 심지어 50㎚ 내지 100㎚의 범위의 직경을 갖는 나노입자의 형태일 수 있다. 나노입자 및/또는 나노튜브는 (예컨대, 용액 중에서) 자기조립(self-assemble)될 수 있다. 나노입자 및/또는 나노튜브는 가역적, 예컨대, 용액 중에 단량체성 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 형성할 수 있다. 몇몇 경우에, 나노입자 및/또는 나노튜브 자가조립 및 역전은 농도 및/또는 온도 의존적일 수 있다.
제3 양상에서, 본 발명은 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물, 예컨대, 본 발명의 제2 양상의 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 인공 뇌척수액(CSF) 용액을 제공한다. 인공 CSF 용액은 본 발명의 제1 양상의 방법에 의해 제조될 수 있거나, 또는 제조 가능할 수 있다. 몇몇 경우에, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물은 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린-파노비노스타트이다.
바람직하게는, 본 발명의 제2 양상의 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물 및/또는 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 본 발명의 제3 양상의 인공 뇌척수액(CSF) 용액에는 다이메틸 설폭사이드(DMSO)가 실질적으로 무함유(free)이다. 특히, 이 용액은 1000 미만의 백만분율(ppm), 예컨대, 100 미만의, 10 미만의 또는 심지어 1 미만의 ppm의 DMSO의 농도(v/v)를 가질 수 있다.
특히, 본 발명의 제2 양상의 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물 및/또는 본 발명의 제3 양상의 인공 뇌척수액(CSF) 용액에는 유기 용매(예를 들어, 아세톤, 테트라하이드로퓨란, 다이클로로메탄, 아세토나이트릴, 다이메틸폼아마이드 및 DMSO)가 실질적으로 무함유일 수 있다. 예를 들어, 용액은 1000 미만의 백만분율(ppm), 예컨대, 100 미만, 10 미만 또는 심지어 1 미만의 ppm의 유기 용매의 농도 또는 임의의 유기 용매의 총 농도(v/v)를 가질 수 있다.
제4 양상에서, 본 발명은 본 발명의 제3 양상의 인공 CSF 용액을 포함하는 전달-강화 전달(CED) 카테터를 제공한다.
제5 양상에서, 본 발명은, 의약에서 사용하기 위한, 본 발명의 제3 양상의 인공 뇌척수액(CSF) 용액 또는 본 발명의 제2 양상의 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 제공한다.
제6 양상에서, 본 발명은, 포유류 대상체에서 뇌종양의 치료 방법에서 사용하기 위한, 본 발명의 제3 양상의 인공 뇌척수액(CSF) 용액 또는 본 발명의 제2 양상의 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 제공한다.
몇몇 경우에, 뇌종양은 신경교종, 예컨대, 뇌간 신경교종, 별아교세포종(예컨대, 다형성 신경교아종), 핍지교종, 희돌기별아교세포종 또는 산재성 내재성 뇌교종(DIPG)을 포함할 수 있다.
몇몇 경우에, 치료 방법은 전달-강화 전달(CED)을 통한 상기 포유류 대상체의 뇌에의 인공 CSF 용액의 투여를 포함한다.
제7 양상에서, 본 발명은 포유류 대상체의 뇌종양의 치료 방법을 제공하되, 해당 방법은 치료적 유효량의 본 발명의 제3 양상의 인공 뇌척수액(CSF) 용액 또는 본 발명의 제2 양상의 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 이를 필요로 하는 포유류 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.
몇몇 경우에, 뇌종양은 신경교종, 예컨대, 뇌간 신경교종, 별아교세포종(예컨대, 다형성 신경교아종), 핍지교종, 희돌기별아교세포종 또는 산재성 내재성 뇌교종(DIPG)을 포함할 수 있다.
몇몇 경우에, 상기 방법은 전달-강화 전달(CED)을 통한 상기 포유류 대상체의 뇌에의 인공 CSF 용액의 투여를 포함한다.
본 발명에 따르면, 대상체는 인간, 반려동물(예컨대, 개 또는 고양이), 실험실 동물(예컨대, 마우스, 래트, 토끼, 돼지 또는 비인간 영장류), 가축 또는 농장 동물(예를 들어, 돼지, 소, 말 또는 양)일 수 있다. 바람직하게는, 대상체는 인간이다. 대상체는, 소정의 경우에, 특히 종양이 DIPG 종양인 경우에, 인간 어린이, 예컨대, 10세 미만(예컨대, 1 내지 5세)일 수 있다.
본 발명은 이러한 조합이 분명하게 허용 가능하지 않거나 또는 명백하게 회피되도록 개시된 경우를 제외하고 기재한 양상과 바람직한 특징의 조합을 포함한다. 본 발명의 이들 및 추가적인 양상 및 실시형태는 이하에서 더욱 상세하게 그리고 수반되는 실시예 및 도면을 참조하여 기재된다.
도 1의 a) 72시간 처리 후의 U87MG 세포에 대항한 HP-β-CD 파노비노스타트(정사각형), 사이클로덱스트린(삼각형) 및 인공 CSF(원형); b) 48시간 처리 후의 U87MG 세포에 대항한 HP-β-CD 파노비노스타트(정사각형), 사이클로덱스트린(삼각형) 및 인공 CSF(원형); c) 72시간 처리 후의 HEPG2 세포에 대항한 HP-β-CD 파노비노스타트(정사각형), 사이클로덱스트린(삼각형) 및 인공 CSF(원형); 및 d) 72시간 처리 후의 U87MG(원형), HEPG2(마름모꼴) 및 h19(삼각형) 세포에 대항한 HP-β-CD 파노비노스타트에 대한 약물 농도(μM)에 대해서 플롯한 MTT-평가된 세포 생존율(%)을 도시한다. 오차 막대는 3벌의 샘플의 플러스 또는 마이너스 표준 편차를 나타낸다. N=1 실험적 모사물.
도 2의 a)는 72시간 처리 후의 HP-β-CD 파노비노스타트 농도(μM)에 대해서 플롯된 SF8628 DIPG 세포의 세포 생존율(%); b) 72시간 처리(원형), 6시간 처리(정사각형) 및 30분 처리(마름모꼴) 후의 HP-β-CD 파노비노스타트 농도의 log10 용량에 대해 플롯된 세포 생존율(생세포 %)을 도시한다. 오차 막대는 3벌의 샘플의 플러스 또는 마이너스 표준 편차를 나타낸다.
도 3은 15℃ 내지 25℃에서 24주 저장 시험 동안 시간 경과에 따른 파노비노스타트 농도(μM)를 도시한다. 저장된 HP-β-CD 파노비노스타트 부가물의 측정된 파노비노스타트 농도는 전체 24주 연구 기간에 대해서도 현저하게 안정적이었다.
도 4는 15℃ 내지 25℃에서 24주 저장 시험 동안 시간에 대해 플롯된 퍼센트로서의 총 불순물(마름모꼴)을 도시한다. 상대 유지 시간(relative retention time: RRT) 0.86(정사각형) 및 RRT 1.12(삼각형)는 주된 파노비노스타트 약물 피크의 어느 한쪽의 크로마토그램 피크를 지칭한다. 플롯은 RRT 피크 및 총 불순물%가 연구 기간 전체를 통해 안정적으로 낮게 유지된 것을 나타내며, 이것은 파노비노스타트 분해 생성물의 형성이 무시할 만 것임을 의미한다.
본 발명을 설명함에 있어서, 이하의 용어가 이용될 것이며, 다음에 나타낸 바와 같이 정의되도록 의도된다.
"파노비노스타트"(Farydak®, LBH-589, 2-(E)-N-하이드록시-3-[4[[[2-(2-메틸-1H-인돌-3-일)에틸]아미노]메틸]페닐]-2-프로펜아마이드)는 이하에 묘사된 화학 구조를 갖는 비선택적 HDAC 저해제이다:
Figure 112018099854817-pct00001
본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 문맥이 달리 (예컨대, "유리 염기 파노비노스타트"로서 기재하는 등) 특정하지 않는 한, "파노비노스타트"는 염 형태(예컨대, 파노비노스타트 시트레이트, 파노비노스타트 락테이트 등)를 포함한다. 파노비노스타트를 비롯하여 데아세틸라제 저해제로서 유용한 하이드록사메이트 유도체를 제조하기 위한 방법은 WO2002/022577(이의 전체 내용은 참고로 본 명세서에 명백하게 편입됨)에 상세히 기재되어 있다.
"사이클로덱스트린"은 환식 올리고당이며, 구체적으로는 α-사이클로덱스트린, β-사이클로덱스트린, 및 γ-사이클로덱스트린을 포함한다. 사이클로덱스트린은 전형적으로 약제학적으로 허용 가능한 사이클로덱스트린이다. 특정 경우에, 사이클로덱스트린은 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린이다.
"전달-강화 전달(CED)"은 뇌종양 내로 또는 그 부근에 수술적으로 위치되는 1개 이상의 매우 작은 카테터를 통해서 뇌에 직접 약물을 전달하는 방법이다. 카테터의 설치는, 예컨대, 오프-타깃(off-target) 효과를 최소화하기 위하여 입체적으로 유도될 수 있다. WO2013/135727(이의 전체 내용은 참고로 본 명세서에 명백하게 편입됨)은, 인공 뇌척수액(CSF)에 카보플라틴의 조성물을 이용한 전달 강화 전달(CED)에 의해 신경교종을 치료하는 방법을 기재한다. CED는 전형적으로 인라인 멸균화 필터(in-line sterilising filters)를 이용한다. 많은 멸균화 필터가 DMSO(예를 들어, 셀룰로스 아세테이트; 셀룰로스 나이트레이트; 폴리카보네이트; 폴리에터 설폰; 사토브란 P(Sartobran P); 몇몇 PVDF; PVC; 메트리세트(Metricet); 나일론(Nylon); 및 PES)와 양립될 수 없다. 따라서, CED 전달을 위한 파노비노스타트 인공 CSF 제형은, DMSO와 같은 소정의 유기 용매가 실질적으로 함유되어 있지 않은 것이 바람직하다. 그러므로, CED 전달을 위한 제형에 본 발명의 사이클로덱스트린-파노비노스타트의 사용은 통상적으로 이용되는 인라인 멸균화 필터의 맥락에서 유리하다.
"인공 뇌척수액(CSF)"
인공 뇌척수액(CSF)은 CSF의 전해질 농도와 정합하도록 의도된다. 바람직하게는, 인공 CSF는 고순도 물 및 분석 등급의 시약으로 제조되거나, 또는 의료 및 상업적 공급처(예컨대, 영국 소재의 써던 데본 헬스케어(South Devon Healthcare) NHS 파운데이션 트러스트(Foundation Trust) 또는 영국 브리스톨 소재의 토크리스 바이오사이언스(Tocris Bioscience))로부터 획득될 수 있다. 인공 CSF 중 최종 이온 농도는 (mM 단위로) 다음과 같다:
Na 150;
K 3.0;
Ca 1.4;
Mg 0.8;
P 1.0;
Cl 155.
선택적으로, 각 이온 구성성분은 위에 나열된 농도값으로부터 플러스 또는 마이너스(±) 10%, ± 5%, ± 2%, ± 1% 또는 ± 0.5%의 농도일 수 있다. 또한 선택적으로, 인공 CSF는 인간 CSF에서 전형적으로 발견되는 농도에서 글루코스 및/또는 1종 이상의 단백질을 더 포함할 수 있다. 바람직한 경우에, 인공 CSF는 글루코스 또는 단백질을 포함하지 않는다.
다음은 예로서 제시되고, 청구범위의 범주에 대한 제한으로서 해석되어서는 안 된다.
실시예
실시예 1 - 파노비노스타트-2- 하이드록시프로필 -β- 사이클로덱스트린 부가물의 제조 절차
파노비노스타트 유리 염기는 물에 난용성이다. 이것은 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(HP-β-CD)(450 ㎎/㎖)의 농축된 수용액 중에서 유사하게 불용성이다. 그러나, 파노비노스타트는 시트르산염 완충액에 pH 3.0에서 가용성이다.
용액 A: 수중 0.1M 시트르산
시트르산(시그마 알드리치(Sigma Aldrich) C-0759; 로트 번호 21K0042)(2.101g)을 칭량해서 100㎖의 초순수에 용해시켰다.
용액 B: 수중 0.1M 시트르산나트륨
시트르산나트륨(삼염기성)(시그마 알드리치 C3434; 로트 번호 1304640/41807230 (2.944g)을 칭량해서 100㎖의 초순수에 용해시켰다.
용액 C: 0.1M 시트르산염 완충액
용액 A(82㎖) 및 용액 B(18㎖)를 250㎖ 두란 플라스크(Duran flask)에 첨가하고 잠시 혼합하여 [C]를 형성하였다. 시트르산염 완충액의 pH를 측정하여 pH 3.0인 것을 확인하였다.
용액 D: 시트르산염 완충액 중 10mM 파노비노스타트 용액(25㎖)
농도 = 10mM = 0.01M
용적 = 25㎖ = 0.025ℓ
따라서 요구되는 몰수 = 2.5x10-4
파노비노스타트의 분자량 = 349.43 g/㏖
따라서 요구되는 파노비노스타트의 질량 = 82.36mg
이와 같이 해서, 파노비노스타트 유리 염기(81.0mg)를 칭량해서 용액 C(24.59㎖)에 용해시켰다.
이 혼합물을 오비탈 쉐이커(orbital shaker)에서 10분 동안 진탕시켜 맑은 무색 용액 [D]를 제공하였다.
용액 E: 100㎎/ ㎖의 수중 2- 하이드록시프로필 -β- 사이클로덱스트린 (20㎖)
2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린은 1460 g/㏖의 평균 분자량을 갖는다. 간소화를 위하여 다음과 같이 제조하였다.
농도 = 100㎎/㎖.
2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(시그마 알드리치 H107; 로트 번호 048K0672)(2.004g)을 칭량해서 20.04㎖의 초순수에 용해시켰다. 이 혼합물을 오비탈 쉐이커에서 10분 동안 진탕시켜 맑은 무색 용액 [E]를 제공하였다.
용액 F: 파노비노스타트 - 2- 하이드록시프로필 -β- 사이클로덱스트린 부가물(5mM)
등용적의 용액 D(2㎖) 및 E(2㎖)를 팔콘 튜브(Falcon tube)에서 혼합하였다. 맑은 무색 용액을 잠시 와류시켜 균질화시켰다.
용액 G: 파노비노스타트 - 2- 하이드록시프로필 -β- 사이클로덱스트린 부가물(3.125mM)
주사용의 중성 용액(대략 pH 7)을 제조하기 위하여, [F]의 샘플(1㎖)을 NaOH(aq)(0.6㎖, 0.2M)와 혼합하여 맑은 무색 용액(용적 1.6㎖)을 제공하였다.
용액 H: aCSF (인공 뇌척수액) 중 파노비노스타트 - 2- 하이드록시프로필 -β- 사이클로덱스트린 부가물의 멸균 용액( 10μM )
aCSF 파트 1 용액(써던 데본 헬스케어; 로트 번호 1407292)(155.5㎖)을 250㎖ 두란 플라스크에 첨가하였다. 용액 [G](0.5㎖)를 이어서 피펫을 통해서 첨가하여 aCSF 중 파노비노스타트의 최종 용액을 농도 10μM로 제공하였다. 이 용액을 잠시 혼합하고 나서 스테리플립(SteriFlip) 멸균 필터 카트리지를 사용해서 라미너 플루 후드(laminar flow hood)에서 필터 멸균시켰다. 이어서 맑은 무색 용액을 4℃에서 저장하였다.
실시예 2 - HDAC 효소 검정
DMSO에 용해된 파노비노스타트의 저해 활성도 및 HP-β-CD 파노비노스타트 부가물(실시예 1에 기재된 바와 같이 제조됨)의 저해 활성도를 HDAC 유형 1 내지 11에 대해서 비교하였다. 양자는 11 HDAC에 대해서 10μM에서 시작하여 3배 연속 희석된 단일 수행식 10-용량 IC50 모드에서 시험하였다. HDAC 참조 화합물인, 트라이코스타틴 A((R,2E,4E)-6-(4-(다이메틸아미노)벤조일)-N-하이드록시-4-메틸헵타-2,4-다이엔아마이드) 및 TMP 269(N-((4-(4-페닐티아졸-2-일)테트라하이드로-2H-피란-4-일)메틸)-3-(5-(트라이플루오로메틸)-1,2,4-옥사다이아졸-3-일)벤즈아마이드)를 10μM에서 시작하여 3배 연속 희석으로 10-용량 IC50에서 시험하였다.
기질(substrate)은 다음과 같았다:
HDAC 1, 2, 3, 6, 10에 대한 기질: p53 잔기 379-382로부터의 형광원 펩타이드(Fluorogenic peptide)(RHKK(Ac)AMC)
HDAC 4, 5, 7, 9 및 11에 대한 기질: 형광원 HDAC 클래스2a 기질(트라이플루오로아세틸 라이신)
HDAC 8에 대한 기질: p53 잔기 379-382로부터의 형광원 펩타이드(RHK(Ac)K(Ac)AMC)
IC50 값은 S자 용량-반응 방정식에 기초한 그라프패드 프리즘 4(GraphPad Prism 4) 프로그램을 이용해서 계산하였다. 블랭크(DMSO) 값은 곡선 적합화를 위한 1.00E-012의 농도로서 입력하였다.
각 HDAC 효소에 대항한 각 화합물에 대한 IC50 값은 이하에 나타낸다.
Figure 112018099854817-pct00002
이 결과는 HP-β-CD 파노비노스타트가 HDAC 효소 1 내지 11의 범위에 걸쳐서 DMSO 중 파노비노스타트와 동등한 것을 나타낸다.
실시예 3 - 시험관내 세포 독성
HP-β-CD 파노비노스타트의 세포독성은 간세포성 암종 및 교모세포종에서 평가되었다.
U87MG(교모세포종) 및 HEPG2(간세포성 암종) 세포주를 증가하는 용량의 HP-β-CD 파노비노스타트, 사이클로덱스트린 단독 또는 인공 뇌척수액(인공-CSF) 단독에 48시간 또는 72시간 중 어느 한쪽 동안 노출시켰다. 이어서 세포 생존율을 MTT 시약을 사용해서 평가하였다. HP-β-CD 파노비노스타트의 IC50은 대략 0.01μM인 것으로 결정되었다(도 1a 내지 도 1d 참조). 사이클로덱스트린 단독 및 인공 CSF 단독은 시험된 조건 하에서 본질적으로 비독성이었다.
HP-β-CD 파노비노스타트의 세포독성은 인간 SF8628 DIPG 세포(미국 소재의 UCSF에서의 굽타 그룹(Gupta group)으로부터 기증됨)에서 평가하였다.
형광성 생-사 세포 생존율 검정(fluorescent live-dead cell viability assay)(인비트로젠사(Invitrogen))을 이용하였다. 세포는 10μM, 5μM, 3μM, 1μM, 0.3μM, 0.1μM, 0.03μM 및 0.01μM의 용량에서 72시간 동안 인공 CSF 중 HP-β-CD 파노비노스타트의 존재에서 3벌로 배양하였다. 이 검정은 3가지 상이한 통로에서 3회 반복하였다. 세포 생존율은 살아있는 대조군과 죽은 대조군(및 비히클 단독 대조군)과 비교되었다. 용량 반응 곡선은 그라프패드 프리즘 소프트웨어를 사용해서 플롯팅하였다(도 2a 참조). IC50 값은 0.01μM인 것으로 계산되었다.
이들 결과는 HP-β-CD 파노비노스타트 부가물로서 제형화된 파노비노스타트가 중성 pH에서 인공 CSF에 가용성이고 시험관내에서 신경교종을 포함하는 소정 범위의 종양 세포주, 특히, DIPG 세포에 대해서 강력한 암세포 사멸 활성도를 나타낸다.
DIPG 세포에 대한 HP-β-CD 파노비노스타트의 시간-과정을 조사하기 위하여, 세포를 HP-β-CD 파노비노스타트의 존재 하에 72시간, 6시간 및 30분 동안 5μM, 3μM, 1μM, 0.3μM, 0.1μM, 0.03μM, 0.01μM의 용량에서 3개의 개별의 세포 통로에서 3벌로 배양하였다. 짧은 시점 항온처리(6시간 및 30분)는 72시간 후 투약에서 평가하였다. 이 결과는 도 2b에 도시되어 있다. IC50 값은 이하의 각 시점에 대해서 나타낸다:
Figure 112018099854817-pct00003
이들 결과는 세포독성 농도에 대한 짧은 노출도 항종양 효능에 충분할 수 있는 것을 나타낸다. 약동학적 데이터는 CED-기반 전달에 대한 인공 CSF 중 HP-β-CD 파노비노스타트가 카테터 선단으로부터 신속하게 확산되는 것을 시사한다.
실시예 4 - 파노비노스타트 제형에 대한 용해도 및 안정성
문헌 연구로부터, 파노비노스타트는 DMSO/물 혼합상에 용해될 수 있음이 확인되었다. CED 접근법을 통해서 환자의 뇌에 직접 약물을 투여하기 위하여, 여과된 인공 뇌척수액(CSF)이 희석제로서 사용되어야 한다.
CED-기반 전달의 맥락에서, 약물 용액은 전형적으로 스케줄링된 투여하기 전날에 제조된다. 환자가 월요일에 CED 처리를 받도록 스케줄링된 경우, 약물 용액은 금요일에 제조되어 월요일까지 냉장고에 보관되어야 한다. 따라서, 인공 CSF 중에 제조된 파노비노스타트의 용액은 4℃에서 적어도 48시간 동안 명백히 안정적이어야 한다.
이 연구는 DMSO/aCSF 혼합물 중에 성공적으로 도달할 수 있는 파노비노스타트의 농도 및 4℃ 및 실온에서의 이의 안정성을 결정하기 위한 것이다.
DMSO 중 파노비노스타트의 스톡 용액은 70㎎/㎖ ≡ 0.2M ≡ 200mM에서 제조하였다.
이 용액으로부터, 많은 DMSO 작용 용액을 DMSO 중 희석에 의해 20mM, 10mM, 5mM, 2mM 및 1mM로 제조하였다.
이들 용액은 인공 CSF(aCSF)로 50:50으로 희석하였으며 이하의 결과를 제공하였다.
Figure 112018099854817-pct00004
20mM 용액을 aCSF로 더욱 희석시켜 이하의 농도를 제공하였다. 와류에 의한 혼합 후에, 샘플을 60초 동안 원심분리시켰다.
Figure 112018099854817-pct00005
10mM 용액을 aCSF로 더욱 희석시켜 이하의 농도를 제공하였다. 와류에 의한 혼합 후에, 샘플을 60초 동안 원심분리시켰다.
Figure 112018099854817-pct00006
DMSO:aCSF 비가 중요한 것은 명백하다. 유용한 작업 농도는, DMSO 비가 대략 ~50% v/v인 경우가 아닌 한, 5mM 내지 1mM에서 제조될 수 있다. 인간 생체내 사용을 위하여, 특히 50% v/v 정도의 농도에서의 DMSO의 존재는 바람직하지 않다.
비교로써, HP-β-CD 파노비노스타트 부가물은 4℃에서 적어도 48시간 동안 인공 CSF에서 가용성이고 안정적이다.
파노비노스타트(10mM)의 스톡 용액을 제조하고 DMSO 또는 시트르산염 완충액(pH 3) 중 하나에 용해시켰다. 샘플을 (시스템의 과부하를 피하기 위하여) HPLC에 의한 분석을 허용하기 위하여 희석시켰다. 피크 면적을 제조 후 0, 100시간 및 150시간에 두 용액에 대해서 측정하였다. 샘플을 실온에서 분석 과정에 걸쳐서 저장하였다. 퍼센트 변화는 피크 면적에 기초하여 계산하고 제로 시점에서의 분석과 비교하였다. 하나의 모사물을 분석하고 각 샘플에 대해서 7.2㎕(칼럼 상의 0.25㎍에 상당함)를 주입하였다. 평가된 스톡 용액의 농도는 10mM이었다.
칼럼: 아센티스 익스프레스 펩타이드(Ascentis Express Peptide), ES-C18, 10㎝ x 4.6㎜
이동상: 아세토나이트릴(유기) 중 0.1% 트라이플루오로아세트산(TFA) 및 수중 0.1% 트라이플루오로아세트산
HPLC: 애질런트 1260 인피니티(Agilent 1260 infinity)
사용된 HPLC 조건:
Figure 112018099854817-pct00007
결과:
100시간째에, DMSO 용액은 파노비노스타트 농도가 2.8%만큼 감소된 반면, 시트레이트 용액은 0.4%만큼 감소된 것을 나타낸다. 마찬가지로, 150시간에, DMSO 용액 중의 파노비노스타트는 4.4%만큼 감소된 반면, 시트레이트 용액 중의 파노비노스타트는 단지 1%만큼 감소되었다.
Figure 112018099854817-pct00008
어떠한 특정 이론에 의해 얽매이길 원치 않지만, 본 발명자들은 시트레이트 용액 중의 것과 비교해서 DMSO 중의 파노비노스타트의 비교적 낮은 안정성이 DMSO의 산화 속성 및 파노비노스타트에 대한 이의 작용에 기인될 수 있는 것으로 여겨진다. 이것에 비추어, 파노비노스타트를 실질적으로 DMSO-무함유 용액으로 조제하는 것이 바람직할 것이다.
인공 CSF 중 HP-β-CD-파노비노스타트의 용액은 40μM 파노비노스타트의 초기 농도에서 제조하고 수개의 분취액을 세워둔 밀봉된 바이알에 5℃에서 저장하였다. 샘플을 각종 시점(t=0, 제1일, 제8일, 제18일 및 제22일)에서 취하여 파노비노스타트 농도는 HPLC에 의해 측정하였다. 나머지 파노비노스타트는 t=0에서 시작 농도의 퍼센트로서 표현된다. 그 결과는 다음과 같았다:
Figure 112018099854817-pct00009
최대 그리고 22일을 포함하는 측정된 시점 모두에서, 파노비노스타트의 농도는 본질적으로 변하지 않았다: 초기 농도 99% 초과. 이들 결과는 인공 CSF에 조제된 HP-β-CD-파노비노스타트가 현저하게 안정적인 것을 입증한다.
실시예 5 - CED를 통한 HP-β-CD 파노비노스타트에 의한 인간 DIPG 환자 치료
DIPG를 지닌 단일 환자(5세 여아)를 인공 CSF 중 HP-β-CD-파노비노스타의 직접 CED 주입에 의해 치료하였다.
환자는 CED를 통한 약물의 반복 투여를 가능하게 하는 두개골 장착된 경피 포트를 포함하는 사전-이식된 약물 전단 시스템을 지녔다.
인공 CSF 중 HP-β-CD-파노비노스타트는 위에서 기재된 바와 같이 제조하였다. 10μM의 농도에서의 HP-β-CD-파노비노스타트는 4개의 카테터에 걸쳐서 분배된 12㎖의 총 주입 용적에 대해서 약 8시간의 기간에 걸쳐서 주입/전달되었다. 상담사 지도 하의 소아과 마취제 케어를 제공하였다. 연속적인 생리학적 모니터링이 존재하였고, 신경학적 기능의 시간적 평가가 얻어졌다. 이것은 사지 및 뇌신경 기능의 정확한 기록을 포함하였다.
CED를 통한 인공 CSF 중 HP-β-CD-파노비노스타트의 투여는 내성이 좋은 것으로 확인되었고 부작용이 관찰되지 않았다.
실시예 6 - HP-β-CD- 파노비노스타트 부가물의 동결건조
HP-β-CD-파노비노스타트 부가물의 2개의 배취는 실시예 1에 기재된 방법에 따라서 제조하였다.
제1 배취는 방출시켜서 장기 안정성 시험 동안 4℃에서 저장하였다. 42일에, 가시적인 입자가 생성물의 (전체는 아니고) 많은 바이알에서 관찰되었다. 이들 입자의 분석은 무기 염만을 함유하는 것으로 보였다(즉, 이들은 사이클로덱스트린 또는 파노비노스타트 화합물 중 어느 한쪽도 함유하지 않았다). 에너지-분산형 X-선 분광법(EDX)에 의한 분석은 마그네슘 및 인의 존재를 나타내었고, 따라서 가시적인 입자는 인산마그네슘 결정인 것으로 결론지어졌다.
임의의 특정 이론에 의해 얽매이길 원치 않지만, 본 발명자들은 인공 CSF(aCSF) 중 사이클로덱스트린-부가물의 나노입상체 형태의 존재가 aCSF에 존재하는 소정의 염의 핵화를 촉구할 수 있는 것으로 믿고 있다. 인공 CSF는 다양한 농도에서 염의 혼합물을 함유하다. 이들 염의 일부는 다른 것보다 내재적으로 더 낮은 용해도를 지니며, 따라서 시간 경과에 따라서 핵화될 공산이 더 많다. 이미-고형인 나노입상체 형태인 것으로 생각되는 비교적 커다란 질량의 사이클로덱스트린의 용액에의 첨가는 이 핵화를 잘 가속시킬 수 있다.
본 발명자들은 동결건조 단계를 도입함으로써 개선될 수 있다는 이론을 제시하였다. 즉, 이들 더 낮은 용해도 염이 HP-β-CD-파노비노스타트 부가물을 가진 용액 중에서 소비되는 시간을 최소화함으로써, 즉, 투여 직전에 재구성함으로써, 본 발명자들은 무기염의 점차적인 결정화의 문제를 피할 것으로 예상한다.
본 실시예에서, 동결건조 공정은 HP-β-CD-파노비노스타트 부가물을 함유하는 샘플을 진공(0.053mbar) 하에 대략 2시간 동안 -52℃로 냉각시키는 것을 포함하였다. 그러나, 실질적으로 건조된 고형물(예컨대, 10% w/w 미만, 5% w/w 미만, 또는 심지어 2% w/w 미만의 함수량)을 수득한다는 조건 하의 다른 동결건조 절차가 상정된다. 당업자라면 본 발명과 관련하여 용도를 발견하게 될 다수의 냉동-건조 공정을 알아차릴 것이다.
인공 CSF 중 HP-β-CD-파노비노스타트 부가물의 제조를 위한 변형된 공정(여기서 HP-β-CD-파노비노스타트 부가물은 주사 준비된 용액을 제공하기 위하여 전달 시간에 aCSF에 재구성하기 전에 저장/선적을 위하여 동결건조됨)은 이하에 기재한다.
용액 A: 수중 0.1M 시트르산
시트르산(시그마 알드리치 C-0759; 로트 번호 21K0042)(2.101g)을 칭량해서 100㎖의 초순수에 용해시켰다.
용액 B: 수중 0.1M 시트르산나트륨
시트르산나트륨(삼염기성)(시그마 알드리치 C3434; 로트 번호 1304640/41807230)(2.944g)을 칭량해서 100㎖의 초순수에 용해시켰다.
용액 C: 0.1M 시트르산염 완충액
용액 A(82㎖) 및 용액 B(18㎖)를 250㎖ 두란 플라스크에 첨가하고 잠시 혼합하여 [C]를 형성하였다. 시트르산염 완충액의 pH를 측정하여 pH 3.0인 것을 확인하였다.
용액 D: 시트르산염 완충액 중 10mM 파노비노스타트 용액(25㎖)
농도 = 10mM = 0.01M
용적 = 25㎖ = 0.025ℓ
따라서 요구되는 몰수 = 2.5x10-4
파노비노스타트의 분자량 = 349.43 g/㏖
따라서 요구되는 파노비노스타트의 질량 = 82.36mg
이와 같이 해서, 파노비노스타트 유리 염기(81.0㎎)를 칭량하여 용액 C(24.59㎖)에 용해시켰다.
이 혼합물을 오비탈 쉐이커에서 10분 동안 진탕시켜 맑은 무색 용액 [D]를 제공하였다.
용액 E: 수중 100㎎/ ㎖의 2- 하이드록시프로필 -β- 사이클로덱스트린 (20㎖)
2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린은 1460 g/㏖의 평균 분자량을 갖는다. 간략화를 위하여 다음과 같이 제조하였다.
농도 = 100㎎/㎖. 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린(시그마 알드리치 H107; 로트 번호 048K0672)(2.004g)을 칭량하여 20.04㎖의 초순수에 용해시켰다. 이 혼합물을 10분 동안 오비탈 쉐이커에서 진탕시켜 맑은 무색 용액 [E]를 제공하였다.
용액 F: 파노비노스타트 - 2- 하이드록시프로필 -β- 사이클로덱스트린 부가물 (5mM)
등용적의 용액 D(2㎖) 및 E(2㎖)를 팔콘 튜브에서 혼합하였다. 맑은 무색 용액을 잠시 와류시켜 균질화시켰다.
용액 G: 파노비노스타트 - 2- 하이드록시프로필 -β- 사이클로덱스트린 부가물 (3.125mM)
중성 용액(대략 pH 7)을 제조하기 위하여, [F]의 샘플(1㎖)을 NaOH(aq)(0.6㎖, 0.2M)와 혼합하여 맑은 무색 용액(용적 1.6㎖)을 제공하였다.
동결건조된 용액 G: 2㎖의 부가물 용액 G를 진공(0.053mbar) 하에 대략 2시간 동안 -52℃로 냉각시킴으로써 동결건조시켜 고형 케이크를 제조하였다. 이어서, 동결건조된 고형물은, 필요에 따라서, 예컨대, 전달 개소에 선적하기 위하여 보존될 수 있다.
용액 H: aCSF (인공 뇌척수액) 중 파노비노스타트 - 2- 하이드록시프로필 -β-사이클로덱스트린 부가물의 멸균 용액( 40μM )
10㎖의 aCSF를 첨가하여 aCSF 중 40μM의 파노비노스타트의 용액을 제공함으로써 2㎖의 상기 용액 G로부터의 동결건조된 고형물 케이크를 재구성하였다. 이 용액은 처리를 필요로 하는 용량 또는 용적에 따라서 더욱 희석될 수 있다.
실시예 7 - HP-β-CD- 파노비노스타트 부가물의 장기 저장 안정성
HP-β-CD-파노비노스타트 부가물의 장기 안정성은 -25℃ 내지 -15℃(데이터 제시 생략), 2℃ 내지 8℃(데이터 제시 생략), 및 15℃ 내지 25℃(도 3 및 도 4)에서 저장된 t=0에서부터 총 24주까지의 간격에서 파노비노스타트 농도 및 불순물 농도를 측정함으로써 평가하였다.
도 3에 나타낸 바와 같이, 파노비노스타트 농도는 15℃ 내지 25℃에서 24주 기간에 걸쳐서 매우 안정적인 것으로 판명되었다. -25℃ 내지 -15℃ 및 2℃ 내지 8℃에 대한 등가의 농도 플롯은 또한 38μM 내지 45μM의 범위 내에 남아 있는 측정된 농도를 갖는 유사한 프로파일을 나타내었다.
15℃ 내지 25℃에서 시간 경과에 따라서 파노비노스타트의 가능한 분해는 HPLC에 의한 주된 파노비노스타트 화합물 피크의 어느 한쪽의 피크를 측정함으로써 평가하였다(도 4에서 RRT 0.86 및 RRT 1.12 참조). 퍼센트로서의 총 불순물은 또한 도 4에 도시되어 있다. 도 4는 불순물이 24주의 연구의 지속기간 동안 매우 낮은 수준(대략 1% 이하)에서 유지된 것을 나타낸다. 매우 유사한 결과는 동일 시간 기간에 걸쳐서 -25℃ 내지 -15℃ 및 2℃ 내지 8℃에서 저장 동안 나타났다.
종합하면, 파노비노스타트 농도 및 불순물 측정치는 HP-β-CD-파노비노스타트 부가물이 적어도 최대 24주의 기간에 걸쳐서 실온에서도 안정적인 것을 나타낸다.
본 명세서에 인용된 모든 참고문헌은 그들의 전문이 참고로 그리고 각각의 개개 간행물 또는 특허 또는 특허 출원이 그들의 전문이 참고로 편입되는 것을 나타내는 것과 동일한 정도로 모든 목적을 위하여 본 명세서에 포함된다.
본 명세서에 기재된 구체적 실시형태는 예로서, 제한의 방법에 의하지 않고 제공된다. 본 명세서의 임의의 부제는 단지 편의를 위해 포함되며, 어떠한 방식으로도 본 개시내용을 제한하는 것으로 해석되어서는 안 된다.

Claims (39)

1000부/백만(ppm) 미만의 농도의 아세톤, 테트라하이드로퓨란, 다이클로로메탄, 아세토나이트릴, 다이메틸폼아마이드 및 다이메틸 설폭사이드(DMSO)를 갖는 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물(cyclodextrin-panobinostat adduct)의 제조 방법으로서,
a) 완충제를 포함하는 제1 수용액을 제공하는 단계로서, 상기 제1 수용액은 2.0 내지 4.0의 범위의 pH를 갖는, 상기 제공하는 단계;
b) 상기 제1 수용액에 파노비노스타트를 용해시켜 제2 수용액을 제공하는 단계;
c) 파노비노스타트를 포함하는 상기 제2 수용액을 사이클로덱스트린을 포함하는 제3 수용액과 혼합하여 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 제4 수용액을 형성시키는 단계; 및
d) 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 상기 제4 수용액에 충분한 양의 염기를 첨가하여, 6.0 내지 8.0의 범위의 pH를 갖는 제5 수용액을 제공하는 단계를 포함하되,
상기 사이클로덱스트린은 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린인, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제1항에 있어서,
상기 완충제는 시트르산 및 시트레이트를 포함하는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제1항에 있어서, 상기 제5 수용액을 건조시켜 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 고형물을 형성시키는 단계를 더 포함하는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제3항에 있어서, 상기 건조시키는 것은 감압 하에 냉동-건조시켜 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 동결건조된 고형물을 형성시키는 것을 포함하는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제3항에 있어서, 상기 고형물은 10% w/w 미만의 함수량(water content)을 갖는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제5항에 있어서, 상기 고형물은 5% w/w 미만의 함수량(water content)을 갖는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제3항에 있어서, 재구성 용액에 용해시킴으로써 상기 고형물을 재구성하는 단계를 더 포함하는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제7항에 있어서, 상기 재구성 용액은 인공 뇌척수액(cerebrospinal fluid: CSF), 링거 용액, 주사용수(water for injection: WFI), 또는 완충된 염 용액을 포함하는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제8항에 있어서, 재구성 전에, 동안에 또는 후에 상기 용액의 pH를 조절하는 단계를 더 포함하는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제1항에 있어서, 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 상기 제5 수용액을 인공 뇌척수액(CSF) 용액과 혼합하여 인공 CSF 중에 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 제6 수용액을 제공하는 단계를 더 포함하는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제9항에 있어서, 상기 인공 CSF 중 파노비노스타트의 농도는 1μM 내지 20μM의 범위인, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제1항에 있어서, 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 상기 용액 중 적어도 하나를 여과, 멸균, 또는 여과 및 멸균시키는 단계를 더 포함하는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제3항에 있어서, 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 상기 고형물을 여과, 멸균, 또는 여과 및 멸균화시키는 단계를 더 포함하는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제9항에 있어서, 인공 CSF 중 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 적어도 일부를 적어도 하나의 전달-강화 전달(convection-enhanced delivery: CED) 카테터에 도입하는 단계를 더 포함하는, 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물의 제조 방법.
제8항에 규정된 바와 같은 방법에 의해 제조된 또는 제조 가능한 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 재구성된 용액으로서,
상기 용액은 1000 ppm 미만의 농도(v/v)의 아세톤, 테트라하이드로퓨란, 다이클로로메탄, 아세토나이트릴, 다이메틸폼아마이드 및 다이메틸 설폭사이드(DMSO)를 갖고, 상기 재구성된 용액의 pH가 6.0 내지 8.0의 범위 내인, 재구성된 용액.
제15항에 있어서, 상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물은 나노입자 또는 나노튜브의 형태인, 재구성된 용액.
사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물을 포함하는 인공 뇌척수액(CSF) 용액으로서,
상기 용액은 1000 ppm 미만의 아세톤, 테트라하이드로퓨란, 다이클로로메탄, 아세토나이트릴, 다이메틸폼아마이드 및 다이메틸 설폭사이드(DMSO)의 농도(v/v)를 가지며,
상기 사이클로덱스트린-파노비노스타트 부가물은 2-하이드록시프로필-β-사이클로덱스트린-파노비노스타트인, 인공 CSF 용액.
제17항에 있어서, 상기 용액은 제9항 내지 제14항 중 어느 한 항에 규정된 바와 같은 방법에 의해 제조된 또는 제조 가능한, 인공 CSF 용액.
제17항에 있어서, 상기 용액은 다이메틸 설폭사이드(DMSO) 무함유(free)인, 인공 CSF 용액.
제17항에 있어서, 상기 용액은 어떠한 유기 용매도 무함유인, 인공 CSF 용액.
제17항의 인공 CSF 용액을 포함하는, 전달-강화 전달(CED) 카테터.
포유류 대상체에서 뇌종양의 치료 방법에서 사용하기 위한, 제17항에 규정된 바와 같은 인공 뇌척수액(CSF) 용액.
제22항에 있어서, 상기 뇌종양은 신경교종을 포함하는, 인공 CSF 용액.
제23항에 있어서, 상기 신경교종은 산재성 내재성 뇌교종(diffuse intrinsic pontine glioma: DIPG)을 포함하는, 인공 CSF 용액.
제22항에 있어서, 상기 치료 방법은 전달-강화 전달(CED)을 통해서 상기 포유류 대상체의 뇌에 상기 인공 CSF 용액의 투여를 포함하는, 인공 CSF 용액.
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Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109715141A (zh) * 2016-07-08 2019-05-03 兰迪斯制药公司 治疗和/或预防溶酶体贮积病和其它单基因代谢性疾病的组合物和方法
JPWO2018124033A1 (ja) * 2016-12-26 2019-11-14 富士フイルム株式会社 脂質粒子組成物および医薬組成物
GB202020359D0 (en) 2020-12-22 2021-02-03 Midatech Pharma Wales Ltd Pharmaceutical compositions and use thereof in combination therapy for brain cancer
WO2024041744A1 (en) * 2022-08-26 2024-02-29 Biodexa Ltd. Combination therapy for brain cancer

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6951885B2 (en) 2000-08-10 2005-10-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Pharmaceutical composition
CN101189003B (zh) 2005-05-13 2012-02-08 托波塔吉特英国有限公司 Hdac抑制剂的药物制剂
WO2007127839A2 (en) 2006-04-26 2007-11-08 The Regents Of The University Of California Compositions and methods for convection enhanced delivery of high molecular weight neurotherapeutics
BRPI0713013A2 (pt) 2006-06-26 2012-04-03 Novartis Ag compostos orgánicos
ITRM20070038A1 (it) 2007-01-26 2008-07-27 Uni Degli Studi Di Roma La Sapienza Forme solubili di complessi di inclusione di inibitori dell istone deacetilasi e ciclodestrine loro processi di preparazione e impieghi in campo farmaceutico
CL2008002786A1 (es) 2007-09-20 2009-05-15 Novartis Ag Torta farmceuticamente aceptable, formada por liofilizacion, que comprende: n-hidroxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1h-indol-3-il]-etil]-amino]-metil]-fenil]-2e-2-propenamida o una sal, un regulador de ph seleciondo de lactato o acidop lactico, fodfato o acido fosforico o una combinacion y un agente de volumen; proceso de elaboracion.
GB201204263D0 (en) 2012-03-12 2012-04-25 Renishaw Plc Giloma treatment
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