KR102396548B1 - 항산화 및 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 항산화 주름개선용 액상 소재 조성물 - Google Patents

항산화 및 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 항산화 주름개선용 액상 소재 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 주름개선용 소재 조성물에 관한 것으로, 본 발명에 따른 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자는 폴리소르베이트계 용해제 및 트리블록공중합체류를 포함함으로써 항산화 주름개선 유효성분의 물에 대한 낮은 용해성 문제를 해결하고 장기안정성이 우수하고 효능 발현이 개선된 항산화 주름개선용 화장료 조성물로 유용하게 사용할 수 있다.

Description

항산화 및 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 항산화 주름개선용 액상 소재 조성물{Nanoparticles that encapsulated with anti-wrinkles, anti-oxidant active ingredient, preparation method thereof and anti-wrinkles cosmetic composition}
본 발명은 항산화 및 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 항산화 주름개선용 액상 소재 조성물에 관한 것이다.
인간의 피부는 전신에 걸쳐 확장되는 복잡한 기관(인간이 가진 가장 넓은 기관)이다. 최외각 기관으로서, 피부는 신체를 유해로부터 보호하기 위한 보호 장벽을 형성한다. 피부는 외적인 인자와 내적인 인자 모두에 의해 혹사당하여, 그로 인해 피부 노화를 초래할 수 있다.
피부 노화는 하기 2가지 방식으로 발생한다.
(1) 생활 연령적 노화(chronological aging)(즉, 자연적인 노화 과정)
(2) 자연적인 노화 과정을 가속화시키는, 일광 중의 자외선을 통한 노화(즉, 광노화(photoaging)).
생활 연령적 노화(chronological aging)는 피부의 얇아짐, 탄력성 상실, 및/또는 일반적인 분해(general degradation)를 초래할 수 있다. 상기 생활 연령적 노화와는 다르게, 상습적인 일광 노출 영역에서 일어난 광노화는, 탄력섬유증(elastosis), 위축(atrophy), 주름, 혈관 변화(즉, 광범위 홍반(diffuse erythema), 출혈(ecchymosis) 및 모세관확장증(telangiectasia), 착색 변화(즉, 흑색증(lentigines), 주근깨, 및 색소과소침착과 색소과다침착의 영역)와 같은 변화, 및/또는 지루성 각화증, 자외선 각화증, 면포반(comedone) 및 낭포(cyst)의 발병을 초래할 수 있다(비특허문헌 1, Indian J Dermatol. 2012 Sep;57(5):343-352. Aging in elderly: chronological versus photoaging). 피부는, 손상으로부터의 보호에 일조하는 자연적인 방어가 갖추어져 있긴 하지만, 이들 방어는 압도(overwhelmed)될 수 있으며, 그로 인해 피부 손상이 유발될 수 있다.
피부 외양 및 탄력성은 광범위한 미용상의 관심사이다. 또한, 최근에는 피부 보호가 건강상의 큰 관심사가 되기도 하였다. 항산화제는 보편적으로, 피부학적 제형 및 미용학적 제형의 치료적 성능 또는 미용학적 성능을 향상시키는 데 사용된다. 그러나, 항산화제가 효과적이기 위해서는, 이들이 비 산화된(unoxidized) 형태로 유지되어야 한다. 그 결과, 국소 투여에 적합한 제형에서 항산화제 안정성의 유지는 종종 도전과제로서 입증되어 왔다.
상기 피부 주름 개선을 위해서, 자유라디칼 소거기능 또는 피부주름 개선을 위한 물질이 화장료 또는 의약품에 배합되어 주름 및 기타 피부 질환을 방지하기 위한 목적으로 사용될 수는 있으나, 해당 물질이 난용성이거나 안정성이 좋지 못하면 실질적인 효과를 기대하기 어려우며, 나아가 안전성에 문제가 생길 수 있다. 이러한 이유로 보다 안전하면서 피부 주름 개선에 효과가 높은 물질을 개발하는 것이 의약품이나 식품 분야뿐만 아니라 화장료 산업 분야에서도 중요한 과제로 대두되어 많은 연구가 진행되고 있다.
아피제닌(apigenin)과 같은 플라보노이드는 각종 과일, 채소류 등에 많으며 강력한 항산화 작용을 하며 염증억제, 면역력 회복까지 도움을 주는 것으로 알려져 있으나 난용성으로 인하여 효능을 발휘하는데 한계가 있다. 따라서, 본 발명에서는 피부에서 항산화 작용을 보다 더 높일 수 있도록 아피제닌을 가용화하여 제품에 적용할 수 있는 액상 제제로 제조하였다.
본 발명의 일 측면에서의 목적은 난용성의 항산화 주름개선 유효성분의 가용화 기술 및 안정성이 우수한 나노입자를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 일 측면에서의 목적은 상기 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 일 측면에서의 목적은 상기 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 유효성분으로 함유하는 액상제제를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 일 측면에서의 목적은 상기 제조방법으로 제조되는 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 일 측면에서의 목적은 상기 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 유효성분으로 함유하는 주름개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 일 측면에서의 목적은 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 유효성분으로 함유하는 피부노화 방지용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여,
본 발명의 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 제공한다.
또한, 본 발명의 다른 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분에, 폴리소르베이트계 용해제를 첨가하여 교반하는 단계(단계 1);
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류를 첨가하여 교반하는 단계(단계 2); 및
물을 첨가하여 분산시키는 단계(단계 3);를 포함하는, 상기 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자의 제조방법을 제공한다.
나아가, 본 발명의 또 다른 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 유효성분으로 함유하는 액상제제를 제공한다.
또한, 본 발명의 다른 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분에, 폴리소르베이트계 용해제를 첨가하여 교반하는 단계(단계 1);
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류를 첨가하여 교반하는 단계(단계 2); 및
물을 첨가하여 분산시키는 단계(단계 3);를 포함하여 제조되며,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 제공한다.
나아가, 본 발명의 또 다른 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 유효성분으로 함유하는 주름개선용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명의 다른 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 유효성분으로 함유하는 피부노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자는 폴리소르베이트계 용해제를 포함함으로써 항산화 주름개선 유효성분의 물에 대한 낮은 용해성 문제를 해결하고 장기안정성이 우수한 항산화 및 주름개선용 액상 소재 조성물로 유용하게 사용할 수 있다.
도 1은 본 발명에서 제공하는 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자의 제조과정과 구조를 나타내는 이미지이다.
도 2는 본 발명의 실시예 1의 나노입자를 제조하여 물에 희석한 사진이다.
도 3은 본 발명의 실시예 2의 나노입자를 제조하여 물에 희석한 사진이다.
도 4는 본 발명의 실시예 3의 나노입자를 제조하여 물에 희석한 사진이다.
도 5는 본 발명의 실시예 4의 나노입자를 제조하여 물에 희석한 사진이다.
도 6은 본 발명의 비교예 1의 분산소재를 제조하여 물에 희석한 사진이다.
도 7은 본 발명의 비교예 2의 분산소재를 제조하여 물에 희석한 사진이다.
도 8은 본 발명의 실시예 2의 나노입자를 물에 희석한 후, 입자사이즈를 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 9는 본 발명의 비교예 2의 분산소재를 물에 희석한 후 입자사이즈를 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 10은 본 발명의 실시예 2에서 제조한 나노입자의 장기안정성을 평가하기 위하여, 시간 경과에 따른 입자 사이즈의 변화를 평가한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 11은 본 발명의 실시예 2에서 제조한 나노입자의 장기 안정성을 평가하기 위하여, 실온(25℃)에서 시간 조건을 변화시킴에 따른 아피제닌 함량의 변화를 관찰한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 12는 본 발명의 실시예 2에서 제조한 나노입자의 장기 안정성을 평가하기 위하여, 가속 조건(40℃)에서 시간 조건을 변화시킴에 따른 아피제닌 함량의 변화를 관찰한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 13은 본 발명의 실시예 2 나노입자 및 비교예 2 분산소재의 ROS 생성 억제 활성을 측정하기 위하여 실험을 진행한 후 세포 내 ROS 정량을 분석한 그래프이다. (시험군: 실시예 2, 대조군: 비교예 2)
도 14는 본 발명의 실시예 2 나노입자 및 비교예 2 분산소재의 ROS 생성 억제 활성을 측정하기 위하여 실험을 진행한 후 세포 내 ROS를 이미징한 그림을 나타낸다. (시험군: 실시예 2, 대조군: 비교예 2)
도 15는 본 발명의 실시예 2에서 제조한 나노입자 및 비교예 2에서 제조한 분산소재의 세포 내 콜라겐(PIP) 생성량을 비교 분석한 결과를 나타내는 그래프이다. (Apigenin micelle 0.2%: 실시예 2, Apigenin 0.2%: 비교예 2)
도 16은 본 발명의 실시예 2에서 제조한 나노입자 및 비교예 2에서 제조한 분산소재의 세포내 콜라게나제 (MMP-1) 활성 억제 효능을 비교 분석한 그래프이다. (Apigenin micelle 0.2%: 실시예 2, Apigenin 0.2%: 비교예 2)
도 17은 본 발명의 실시예 2에서 제조한 나노입자 및 비교예 2에서 제조한 분산소재의 엘라스타제(Elastase) 활성 억제효능을 분석한 그래프이다. (Apigenin micelle 0.2%: 실시예 2, Apigenin 0.2%: 비교예 2)
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
한편, 본 발명의 실시 형태는 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 이하 설명하는 실시 형태로 한정되는 것은 아니다. 또한, 본 발명의 실시 형태는 당해 기술분야에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 더욱 완전하게 설명하기 위해서 제공되는 것이다.
나아가, 명세서 전체에서 어떤 구성요소를 "포함"한다는 것은 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있다는 것을 의미한다.
본 발명의 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 제공한다.
이때, 상기 항산화 주름개선 유효성분은,
아피제닌(Apigenin), 아스코르브산(Ascorbic acid), α-리포산(α-lipoic acid), 글루타치온(Glutathione), 프로필 갈레이트(Propyl gallate), 에피갈로카테킨 갈레이트(Epigallocatechin gallate), 갈로카테킨 갈레이트(Gallocatechin gallate), 에피카테킨(Epicatechin), 갈란긴(Galangin) 등을 사용할 수 있는데, 이는 일실시예일 뿐, 이에 한정되는 것은 아니며 당업자가 통상적으로 사용하는 항산화 주름개선 유효성분을 사용할 수 있다.
또한, 상기 폴리소르베이트계 용해제는,
폴리소르베이트 20(Polysorbate 20), 폴리소르베이트 80(Polysorbate 80), 폴리소르베이트 60(Polysorbate 60), 폴리소르베이트 40(Polysorbate 40), 폴리소르베이트 65(Polysorbate 65) 등을 사용할 수 있으나, 이는 일례일 뿐, 이에 한정되는 것은 아니며 당업자가 통상적으로 사용하는 폴리소르베이트계 용해제라면 한정되지 않고 사용할 수 있다.
상기 폴리소르베이트계 용해제는 항산화 주름개선 유효성분을 마이셀화 시키기 위하여 용해시키는 역할을 수행한다.
한편, 상기 폴리소르베이트계 용해제에 의한 항산화 주름개선 유효성분의 용해도를 더욱 향상시키기 위하여 폴리에틸렌글리콜, 크레모포어, 솔루톨 HS(Solutol HS 15) 등을 더 혼합하여 사용할 수도 있다.
나아가, 상기 [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류는,
폴록사머 184(Poloxamer 184), 폴록사머 185(Poloxamer 185), 폴록사머 188(Poloxamer 188), 폴록사머 124(Poloxamer 124), 폴록사머 237(Poloxamer 237), 폴록사머 338(Poloxamer 338), 폴록사머 407(Poloxamer 407) 등을 사용할 수 있으나, 이는 일례일 뿐, 이에 한정되는 것은 아니며 당업자가 통상적으로 사용하는[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류라면 한정되지 않고 사용할 수 있다.
상기 [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류는 마이셀 형성의 역할을 수행한다.
또한, 상기 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자는,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부 기준,
폴리소르베이트계 용해제 50 내지 120 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 80 내지 160 중량부;를 포함할 수도 있다.
나아가, 상기 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자는,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부 기준,
폴리소르베이트계 용해제 80 내지 90 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 110 내지 130 중량부;를 포함할 수도 있다.
몇 가지 다른 측면에서,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부 기준,
상기 폴리소르베이트계 용해제는 40 내지 140 중량부만큼 포함될 수도 있고, 50 내지 140 중량부만큼 포함될 수도 있고, 60 내지 140 중량부만큼 포함될 수도 있고, 70 내지 140 중량부만큼 포함될 수도 있고, 80 내지 140 중량부만큼 포함될 수도 있고, 85 내지 140 중량부만큼 포함될 수도 있고, 30 내지 130 중량부만큼 포함될 수도 있고, 30 내지 120 중량부만큼 포함될 수도 있고, 30 내지 110 중량부만큼 포함될 수도 있고, 30 내지 100 중량부만큼 포함될 수도 있고, 30 내지 90 중량부만큼 포함될 수도 있고, 30 내지 85 중량부만큼 포함될 수도 있고, 40 내지 130 중량부만큼 포함될 수도 있고, 50 내지 120 중량부만큼 포함될 수도 있고, 60 내지 110 중량부만큼 포함될 수도 있고, 70 내지 100 중량부만큼 포함될 수도 있고, 80 내지 90 중량부만큼 포함될 수도 있고, 40 내지 90 중량부만큼 포함될 수도 있고, 40 내지 50 중량부만큼 포함될 수도 있고, 85 중량부만큼 포함될 수도 있다.
만약, 상기 폴리소르베이트계 용해제가, 상기 특정한 범위 미만으로 포함되는 경우에는 항산화 주름개선 유효성분의 분산이 불완전해 추후 사용 시 항산화 주름개선 유효성분의 방출이 어려워지는 문제가 발생하고, 상기 특정한 범위를 초과하여 포함되는 경우에는 항산화 주름개선 유효성분의 안정성 개선이 미비하여 시약이 낭비되는 문제가 발생한다.
몇 가지 다른 측면에서,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부 기준,
상기 [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류는 50 내지 200 중량부만큼 포함될 수도 있고, 60 내지 200 중량부만큼 포함될 수도 있고, 70 내지 200 중량부만큼 포함될 수도 있고, 80 내지 200 중량부만큼 포함될 수도 있고, 90 내지 200 중량부만큼 포함될 수도 있고, 100 내지 200 중량부만큼 포함될 수도 있고, 110 내지 200 중량부만큼 포함될 수도 있고, 50 내지 190 중량부만큼 포함될 수도 있고, 50 내지 180 중량부만큼 포함될 수도 있고, 50 내지 170 중량부만큼 포함될 수도 있고, 50 내지 160 중량부만큼 포함될 수도 있고, 50 내지 150 중량부만큼 포함될 수도 있고, 50 내지 140 중량부만큼 포함될 수도 있고, 50 내지 130 중량부만큼 포함될 수도 있고, 50 내지 120 중량부만큼 포함될 수도 있고, 50 내지 190 중량부만큼 포함될 수도 있고, 60 내지 180 중량부만큼 포함될 수도 있고, 70 내지 170 중량부만큼 포함될 수도 있고, 80 내지 160 중량부만큼 포함될 수도 있고, 90 내지 150 중량부만큼 포함될 수도 있고, 100 내지 140 중량부만큼 포함될 수도 있고, 110 내지 130 중량부만큼 포함될 수도 있고, 115 내지 125 중량부만큼 포함될 수도 있고, 40 내지 95 중량부만큼 포함될 수도 있고, 40 내지 60 중량부만큼 포함될 수도 있고, 120 중량부만큼 포함될 수도 있다.
만약, 상기 [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류가,
상기 특정한 범위 미만으로 포함되는 경우에는 주름개선 유효성분의 침전이 발생하는 문제가 발생하고, 상기 특정한 범위를 초과하여 포함되는 경우에는 입자크기가 증가하여 안정성이 떨어지거나 겔형태로 제조되어 흐름성이 없어 제품에 적용하기 힘들어지는 문제가 발생한다.
상기 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자의 평균 직경은 5 내지 150 nm 범위일 수 있고, 5 내지 100 nm 범위일 수 있고, 10 내지 50 nm 범위일 수 있고, 50 내지 100 nm 범위일 수 있고, 10 내지 100 nm 범위일 수 있고, 20 내지 70 nm 범위일 수 있다. 본 발명의 일 측면에서 제공하는 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자의 제조과정과 구조를 도 1에 나타내었다.
또한, 본 발명의 다른 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분에, 폴리소르베이트계 용해제를 첨가하여 교반하는 단계(단계 1);
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류를 첨가하여 교반하는 단계(단계 2); 및
물을 첨가하여 분산시키는 단계(단계 3);를 포함하는, 상기 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자의 제조방법을 제공한다.
이하, 본 발명에 따른 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자의 제조방법을 단계별로 상세히 설명한다.
본 발명에 따른 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자의 제조방법에 있어서, 상기 단계 1은 항산화 주름개선 유효성분에, 폴리소르베이트계 용해제를 첨가하여 교반하는 단계이다. 상기 단계 1의 교반은 항산화 주름개선 유효성분의 성상이 투명성을 띌때까지 수행할 수 있다.
또한, 상기 교반 온도의 경우, 10 내지 95℃에서 수행할 수 있고, 더욱 구체적으로는 25℃ 온도에서 교반을 시작하여 파우더가 모두 용해제에 분산되었을 때 60℃에서 100℃까지 온도를 높여 교반시키며 더 바람직하게는 80℃에서 90℃에서 교반시킬 수 있다.
본 발명에 따른 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자의 제조방법에 있어서, 상기 단계 2는 상기 단계 1의 결과물에 [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류를 첨가하여 교반하는 단계이다.
이때, 상기 교반온도는 10 내지 95℃에서 수행할 수 있고, 더욱 구체적으로는 60℃ 내지 100℃일 수 있고, 80℃ 내지 90℃가 바람직하다. 또한, 상기 교반은 초음파 처리를 통해 수행할 수도 있다.
본 발명에 따른 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자의 제조방법에 있어서, 상기 단계 3은 물을 첨가하여 분산시키는 단계이다. 이때, 물은 증류수를 사용하는 것이 바람직하다.
나아가, 본 발명의 또 다른 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 유효성분으로 함유하는 액상제제를 제공한다. 이때, 상기 액상제제는 경피흡수제 형태가 바람직하다.
또한, 본 발명의 다른 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분에, 폴리소르베이트계 용해제를 첨가하여 교반하는 단계(단계 1);
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류를 첨가하여 교반하는 단계(단계 2); 및
물을 첨가하여 분산시키는 단계(단계 3);를 포함하여 제조되며,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 제공한다.
상기 제조방법의 각 단계별 설명은 전술한 바와 동일하므로, 중복 설명을 회피하기 위해 생략한다.
나아가, 본 발명의 또 다른 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 유효성분으로 함유하는 주름개선용 화장료 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명의 다른 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 유효성분으로 함유하는 피부노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.
나아가, 본 발명의 다른 일 측면은,
항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
[폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 유효성분으로 함유하는 산화 주름개선용 액상 소재 조성물을 제공한다.
상기 항산화 주름개선용 액상 소재 조성물에 있어서, 나노입자의 구체적인 설명은 상기 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자에 대한 구체적인 설명과 동일하다. 본 발명의 나노입자를 유효성분으로 함유하는 항산화 주름개선용 액상 소재 조성물을 제조함에 있어서, 통상적으로 함유되는 나노입자를 유효성분으로 함유하는 항산화 주름개선용 화장료 조성물에 본 발명의 나노입자가 50 내지 90 중량부, 바람직하게는 80 또는 90 중량부로 첨가될 수 있다.
또한, 본 발명의 액상 소재 조성물에는 본 발명의 나노입자에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 피부미용 개선용 조성물에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.
또한, 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
본 발명에 따른 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자는 폴리소르베이트계 용해제를 포함함으로써 항산화 주름개선 유효성분의 물에 대한 낮은 용해성 문제를 해결하고 장기안정성이 우수한 항산화 및 주름개선용 액상 소재 조성물로 유용하게 사용할 수 있으며, 이는 후술하는 실시예 및 실험예에 의해 직접적으로 뒷받침될 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예 및 실험예를 통해 상세히 설명한다.
단, 후술하는 실시예 및 실험예는 본 발명을 일 측면에서 구체적으로 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 이에 제한되는 것은 아니다.
<실시예> 항산화 주름개선 유효성분, 폴리소르베이트계 용해제, 및 트리블록공중합체류를 포함하는 나노입자의 제조
항산화 주름개선 유효성분으로써 아피제닌을 사용하였고, 폴리소르베이트계 용해제로써 폴리소르베이트 20을 사용하였으며 트리블록공중합체류로써 F127 (폴록사머 407)을 사용하여 나노입자를 제조하였다.
실시예의 조성은 아래 표 1에 나타내었다.
아피제닌 폴리소르베이트 20
(트윈 20)		 F127
(폴록사머 407)
실시예 1 10 850 850
실시예 2 10 850 1200
실시예 3 10 650 850
실시예 4 10 650 1200
상기 표 1에서,
수치 단위는 mg 이다.
보다 구체적으로,
아피제닌에 용해제로 폴리소르베이트 20 (트윈 20)을 첨가하여 25℃에서 모든 파우더가 분산될 때까지 혼합한 후, 교반 온도를 서서히 90℃까지 올렸다. 90℃에서 분산된 아피제닌의 성상이 투명성을 띌 때 트리블록공중합체류인 F127 (폴록사머 407)을 첨가한 후, 90℃의 같은 온도에서 용융한 후 물에 녹여, 표제의 나노입자를 제조하였다.
<비교예> 항산화 주름개선 유효성분, 및 폴리소르베이트계 용해제를 포함하는 분산소재의 제조
항산화 주름개선 유효성분으로써 아피제닌, 및 폴리소르베이트계 용해제로써 폴리소르베이트 20 (트윈 20)을 사용하여 나노입자가 형성되지 않은 분산 소재를 아래와 같이 제조하였다.
비교예의 조성은 아래 표 2에 나타내었다.
아피제닌 폴리소르베이트 20
(트윈 20)
비교예 1 20 650
비교예 2 20 850
상기 표 2에서,
수치 단위는 mg 이다.
보다 구체적으로,
아피제닌에 용해제로 폴리소르베이트 20 (트윈 20)을 첨가하여 25℃에서 모든 파우더가 분산될 때까지 혼합한 후, 교반 온도를 서서히 90℃까지 올렸다. 90℃에서 분산된 아피제닌의 성상이 투명성을 띌 때 물에 분산시켰다.
상기 실시예 1 내지 4에서 제조한 나노입자와, 비교에 1 내지 2에서 제조한 분산소재를 육안으로 관찰하였으며, 그 결과를 도 2 내지 7에 나타내었다.
도 2는 본 발명의 실시예 1의 나노입자를 제조하여 물에 희석한 사진이다.
도 3은 본 발명의 실시예 2의 나노입자를 제조하여 물에 희석한 사진이다.
도 4는 본 발명의 실시예 3의 나노입자를 제조하여 물에 희석한 사진이다.
도 5는 본 발명의 실시예 4의 나노입자를 제조하여 물에 희석한 사진이다.
도 6은 본 발명의 비교예 1의 분산소재를 제조하여 물에 희석한 사진이다.
도 7은 본 발명의 비교예 2의 분산소재를 제조하여 물에 희석한 사진이다.
도 2 내지 7에 나타난 바와 같이,
실시예 1 및 실시예 2를 제외한, 실시예 및 비교예들은 제조 후 침전물이 생기거나 불투명한 성상을 보이는 등 불안정한 형태를 띄었다. 실시예 1 또한 제조 직후는 투명한 액상으로 제조되었으나 시간이 지난 후 상분리 현상이 일어나 불안정한 형태를 띄었다.
이 때, 용액이 투명하고 침전물이 없으며 색의 변화가 없으면 나노입자가 안정하게 제조된 것이고, 침전물이 있으면 나노입자 자체가 안정하지 못한 것이다. 따라서, 아피제닌 10 mg, 폴리소르베이트 20 (트윈 20) 850 mg, F127 (폴록사머 407) 1200 mg을 사용한 실시예 2 조성으로 제조시 가장 안정한 나노입자를 제조할 수 있는 것을 알 수 있다.
<실험예 1> 나노입자의 입자사이즈 평가
본 발명에 따른 실시예 및 비교예에서 제조한 나노입자의 입자사이즈를 비교 평가하기 위하여 ELS(ELS-Z, Otsuka, Japan) 기기를 사용하였다.
용해제의 용량이 동일하지만 투명하게 나노입자로 제조된 실시예 2번과 나노입자로 제조되지 않은 비교예 2의 입도 크기를 비교하였으며 그 결과를 하기 도 8, 도 9에 나타내었다.
도 8은 본 발명의 실시예 2의 나노입자를 물에 희석한 후, 입자사이즈를 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 9는 본 발명의 비교예 2의 분산소재를 물에 희석한 후 입자사이즈를 측정한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 8 및 도 9에 나타난 바와 같이,
나노입자로 제조된 실시예에서 제조한 나노입자는 입자 사이즈의 분포 정도가 차이났으며 실시예 2번의 입도 크기는 22.59773nm로 나노입자로써 작은 입자 크기를 가지는 것을 확인할 수 있었으며, 나노입자로 제조되지 않은 비교예 2에서는 입도 크기가 1647.701nm로 큰 입자크기를 나타내었다.
따라서, 나노입자로 제조된 아피제닌의 경우 입자 사이즈가 작으므로, 나노입자로 제조되지 않은 아피제닌에 비하여 피부투과율이 높아져 항산화 및 주름개선 효능 발현에 대한 효율이 개선된다.
<실험예 2> 나노입자 안정성 평가를 위한 나노입자의 입자사이즈 측정
본 발명에 따른 실시예 2에서 제조한 나노입자의 장기안정성을 평가하기 위하여, 제조한 나노입자를 각각 실온(25℃) 및 40℃에 두고, 시간에 따른 입자사이즈를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 3 및 도 10에 나타내었다.
기간 25℃ 40℃
0개월 100% (기준)
1개월 97.4% 98.5%
2개월 98.0% 97.3%
3개월 100.4% 100.3%
6개월 95.1% -
상기 표 3에서,
- 는 측정하지 않음을 의미한다.
도 10은 본 발명의 실시예 2에서 제조한 나노입자의 장기안정성을 평가하기 위하여, 시간 경과에 따른 입자 사이즈의 변화를 평가한 결과를 나타내는 그래프이다.
실시예 2에서 제조한 나노입자의 경우, 침전물이 생겨 입도 크기가 커지는 현상이 나타나지 않고, 100 nm이하의 입도 크기로 변화가 거의 발생하지 않는 것으로 나타났다. 따라서, 본 발명에 따른 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자는, 나노입자로 제조되었을 때 장기 안정성이 우수하다.
<실험예 3> 장기안정성 평가를 위한 항산화 주름개선 유효성분인 아피제닌 함량 측정
본 발명에 따른 실시예 2에서 제조한 나노입자의 장기 안정성을 평가하기 위한 함량 측정을 위하여, 각각 실온(25℃)에서 6개월 및 40℃에서 3개월 동안 두고 HPLC(High performance liquid chromatography)를 통한 아피제닌 함량 변화를 측정하였다. 그 결과를 하기 표 4 및 도 11 내지 도 12에 나타내었다.
기간 25℃ 40℃
0개월 100% (기준)
1개월 97.4% 98.5%
2개월 98.0% 97.3%
3개월 100.4% 100.3%
6개월 95.1% -
상기 표 4에서,
- 는 측정하지 않음을 의미한다.
도 11은 본 발명의 실시예 2에서 제조한 나노입자의 장기 안정성을 평가하기 위하여, 실온(25℃)에서 시간 조건을 변화시킴에 따른 아피제닌 함량의 변화를 관찰한 결과를 나타내는 그래프이다.
도 12는 본 발명의 실시예 2에서 제조한 나노입자의 장기 안정성을 평가하기 위하여, 가속 조건(40℃)에서 시간 조건을 변화시킴에 따른 아피제닌 함량의 변화를 관찰한 결과를 나타내는 그래프이다.
상기 표 4와 도 11 및 도 12에 나타난 바와 같이,
실시예 2에서 제조한 나노입자는 육안으로도 색상의 변화가 없었고 HPLC 측정 결과 아피제닌 함량이 일정하게 유지되는 것으로 나타났다.
따라서, 장기 안정성 향상 측면에서, 아피제닌을 실시예 2의 조성으로 나노입자로 제조하였을 때 함량이 안정하게 유지됨을 알 수 있다.
<실험예 4> 나노입자의 항산화 효능 평가
과산화수소(H2O2)에 의해 유도되는 세포 내 활성산소 (reactive oxygen species, ROS) 생성 억제 활성을 측정하고자 DCF-DA assay를 통하여, 실시예에서 제조한 나노입자와, 비교예에서 제조한 분산소재의 항산화 효능을 평가하였다. 보다 구체적으로, 나노입자 형성 유무에 따라 항산화 효능을 확인하기 위하여 실시예 2의 나노입자 및 비교예 2의 분산소재의 항산화 효능을 비교하였다. 실시예 2 및 비교예 2는 EZ Cytox Cell Viability assay kit를 이용하여 세포 독성을 확인하였고 독성이 없는 농도에서 실험을 진행하였다.
인간 각질형성 세포주(Human keratinocyte cell line)인 HaCaT 세포는 CLS Cell Lines Service LLC., Germany에서 분양받아 100 units/ ㎖ penicillin strept omycin과 10% fetal bovine serum(FBS)이 함유된 DMEM 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 배양기에서 배양하였으며, 2 내지 3일에 한번씩 계대 배양을 시행 후 평가에 사용하였다. 세포내 활성산소(ROS) 변화를 측정하기 위하여 DCF DA assay 를 이용하였다. HaCaT 세포를 24 well plate에 1.0×105 cells/well로 접종하여 24 시간동안 배양한 후, 시료를 농도별로 24시간 전처리하고, PBS 세척 후 H2O2 300μM 의 농도로 3시간 후처리하여 추가 배양하였다. 세포내 ROS 를 측정하기 위한 염료(dye)인 DCF DA (dichlorofluorescein diacetate)를 100μM 첨가하여 30분 동안 배양한 후, Oxiselect TM Intracellular ROS assay Kit(CELLBIOLABS, INC.)를 이용하여 세포내 ROS 생성 억제량을 480nm/530nm 에서 측정하였고 형광현미경으로 형광 발현 정도를 측정하였다. 상기 결과는 도 13 및 도 14에 나타내었다.
도 13은 본 발명의 실시예 2 나노입자 및 비교예 2 분산소재의 ROS 생성 억제 활성을 측정하기 위하여 실험을 진행한 후 세포 내 ROS 정량을 분석한 그래프이다. (시험군: 실시예 2, 대조군: 비교예 2)
도 14는 본 발명의 실시예 2 나노입자 및 비교예 2 분산소재의 ROS 생성 억제 활성을 측정하기 위하여 실험을 진행한 후 세포 내 ROS를 이미징한 그림을 나타낸다. (시험군: 실시예 2, 대조군: 비교예 2)
ROS 측정 도구인 DCF DA assay는 세포막 투과 후 ROS 와 반응하여 형광을 나타내며 산화적 스트레스에 의한 세포손상을 측정하기 위한 방법으로 보편적으로 사용되고 있다. 비교예 2의 분산소재는 실시예 2의 나노입자보다 세포독성이 높아 희석배수를 높여 진행하였다.
도 13 및 도 14에 나타난 바와 같이,
H2O2에 의해 세포내 발생하는 ROS의 억제 효능을 확인한 결과, HaCaT cell에서 H2O2를 300μM 처리시 H2O2를 처리하지 않았을 때 보다 ROS가 증가하였으며, 실시예 2의 나노입자를 0.003 내지 0.050% 농도로 처리 시 0.050%에서 56.88%, 비교예 2의 분산소재는 0.0003 내지 0.0050% 농도로 처리 시 0.0050%에서 29.43% 억제하는 것을 확인하였다.
<실험예 5> 나노입자의 콜라겐 합성 효능 평가
아피제닌 나노입자 소재의 콜라겐 합성효능을 평가하기 위하여 실시예 2와 비교예 2의 세포독성을 MTT assay를 통하여 확인한 후 독성이 없는 농도에서 두 샘플의 콜라겐 합성능을 비교하였다.
HDFs (ATCC,USA)는 성인 피부에서 분리한 Primary cell을 사용하였으며 HDFs는 배양접시의 바닥에 접종한 후 1% Antibiotic-Antimycotic, 10% FBS를 함유하는 DMEM/F12 3:1 혼합 배지를 첨가하여 37℃, 5% CO2 배양기(HERAcell 150i, Thermo, USA) 내에서 배양하였다. HDFs는 24-well plate에 5×104 cells/well로 접종하여 24시간 배양한 뒤, 그 후 각 농도별로 희석한 시험물질이 포함된 FBS 미함유 배지로 교환한 후 24시간 배양하였다. 24시간 후 각각의 배양한 상층액은 10,000 rpm에서 10분간 원심분리하였고, Debris가 제거된 상층액으로 Procollagen의 양을 Procollagen Type I C-Peptide (PIP) ELISA Kit을 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 콜라겐 생성 정도는 총 단백질량으로 보정하여 평가하였고, 양성대조군은 TGF-β1 (최종처리농도 0.00001 %)을 이용하여 비교하였다. 콜라겐 합성 효능의 비교 결과를 도 15에 나타내었다.
도 15는 본 발명의 실시예 2에서 제조한 나노입자 및 비교예 2에서 제조한 분산소재의 세포 내 콜라겐(PIP) 생성량을 비교 분석한 결과를 나타내는 그래프이다. (Apigenin micelle 0.2%: 실시예 2, Apigenin 0.2%: 비교예 2)
도 15에 나타난 바와 같이,
세포 내 콜라겐(PIP) 생성량분석을 한 결과, 비교예 2의 분산소재(Apigenin 0.2%)는 0.01% 내지 0.039% 농도 범위에서 44.56% 내지 109.44%까지, 실시예 2의 나노입자(Apigenin micelle 0.2%)는 0.001% 내지 0.039% 농도 범위에서 20.90% 내지 147.46%까지 용매 대조군(x축에서 0%에 해당함) 대비 세포내 콜라겐 생성량을 유의하게 증가시키는 것으로 나타났다.
<실험예 6> 나노입자의 세포내 콜라게나제 (MMP-1) 활성 억제 효능 평가
아피제닌 나노입자의 세포내 콜라게나제(MMP-1) 활성 억제능을 분석하기 위하여 실시예 2에서 제조한 나노입자와, 비교예 2에서 제조한 분산소재의 세포독성을 MTT assay를 통하여 확인한 후, 독성이 없는 농도에서 두 샘플의 콜라게나제(MMP-1) 억제능을 비교하였다.
HDFs (ATCC,USA)는 성인 피부에서 분리한 Primary cell을 사용하였으며 HDFs는 배양접시의 바닥에 접종한 후 1% Antibiotic-Antimycotic, 10% FBS를 함유하는 DMEM/F12 3:1 혼합 배지를 첨가하여 37℃, 5% CO2 배양기(HERAcell 150i, Thermo, USA) 내에서 배양하였다. HDFs는 24-well plate에 5×104 cells/well로 접종하여 24시간 배양하였다. 배양후 각 농도별로 희석한 시험물질이 포함된 FBS 미함유 배지로 교환한 후 48시간 배양하였다. 48시간 배양후 상층액은 10,000 rpm에서 10분간 원심분리하였고, Debris가 제거된 상층액으로 MMP-1 Human ELISA Kit를 이용하여 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. 콜라게나제 활성 억제 효능의 결과는 도 16에 나타내었다.
도 16은 본 발명의 실시예 2에서 제조한 나노입자 및 비교예 2에서 제조한 분산소재의 세포내 콜라게나제 (MMP-1) 활성 억제 효능을 비교 분석한 그래프이다. (Apigenin micelle 0.2%: 실시예 2, Apigenin 0.2%: 비교예 2)
도 16에 나타난 바와 같이,
비교예 2 (Apigenin 0.2%)는 0.005% 내지 0.039% 농도 범위에서 18.47% 내지 50.77% 까지, 실시예 2 (Apigenin micelle 0.2%)는 0.002% 내지 0.039% 농도 범위에서 15.72% 내지 70.87% 까지, 용매 대조군(x축에서 0%에 해당함) 대비 세포내 콜라게나제 활성을 유의하게 감소시키는 것으로 나타났다.
<실험예 7> 나노입자의 세포내 엘라스타제(Elastase) 활성 억제 효능 평가
아피제닌 나노입자 소재의 엘라스타제 활성 억제 효능을 평가하기 위하여 실시예 2에서 제조한 나노입자와, 비교예 2에서 제조한 분산소재의 세포독성을 MTT assay를 통하여 확인한 후, 독성이 없는 농도에서 두 샘플의 엘라스타제 활성 억제능을 비교하였다.
HDFs (ATCC,USA)는 성인 피부에서 분리한 Primary cell을 사용하였으며 HDFs는 배양접시의 바닥에 접종한 후 1% Antibiotic-Antimycotic, 10% FBS를 함유하는 DMEM/F12 3:1 혼합 배지를 첨가하여 37℃, 5% CO2 배양기(HERAcell 150i, Thermo, USA) 내에서 배양하였다. HDFs를 100 mm 배양 접시에 5×104 cells/dish로 접종하여 배양하였고, 배양된 세포는 0.1% Triton X-100·0.2 M Tris-HCl (pH8.0) 용액을 넣어 용해하였으며, 이 세포 용해액을 4℃에서 10,000 rpm으로 20분간 원심분리한 후 상층액을 취하여 이를 엘라스타제를 포함하는 효소액으로 사용하였다. 엘라스타제 효소액을 정량하여 96-well plate에 100 μg씩 넣고 0.2 M Tris-HCl (pH 8.0) 완충액을 넣어 80μL가 되도록 하였다. 시험물질은 완충액에 희석하여 10 μL씩 첨가하고 엘라스타제의 기질인 STANA 10 mM 용액을 각 well 당 10μL씩 넣고 37℃ 오븐기(JSOF-150, JSR, Korea)에서 90분 동안 반응시킨 후, 405 nm에서 흡광도를 측정하여 엘라스타제 활성을 평가하였다. 양성 대조군으로는 Phosphoramidon (최종처리농도 0.0006%)을 이용하여 비교하였다. 엘라스타제 활성 억제 효능은 도 17에 나타내었다.
도 17은 본 발명의 실시예 2에서 제조한 나노입자 및 비교예 2에서 제조한 분산소재의 엘라스타제(Elastase) 활성 억제효능을 분석한 그래프이다. (Apigenin micelle 0.2%: 실시예 2, Apigenin 0.2%: 비교예 2)
도 17에 나타난 바와 같이,
비교예 2 (Apigenin 0.2%)에서 제조한 분산소재는 0.001% 내지 0.039% 농도 범위에서 1.16% 내지 4.82% 까지, 실시예 2 (Apigenin micelle 0.2%)에서 제조한 나노입자는 0.002% 내지 0.039% 농도 범위에서 1.83% 내지 6.16%까지 용매 대조군(x축에서 0%에 해당함) 대비 엘라스타제 활성을 유의하게 감소시키는 것으로 나타났다.

Claims (15)

  1. 난용성의 항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
    폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
    [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하고,
    상기 항산화 주름개선 유효성분 및 폴리소르베이트계 용해제는 나노입자 안에 봉입되는 것을 특징으로 하는,
    항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자.
  2. 제1항에 있어서,
    항산화 주름개선 유효성분은,
    아피제닌(Apigenin), 아스코르브산(Ascorbic acid), α-리포산(α-lipoic acid), 글루타치온(Glutathione), 프로필 갈레이트(Propyl gallate), 에피갈로카테킨 갈레이트(Epigallocatechin gallate), 갈로카테킨 갈레이트(Gallocatechin gallate), 에피카테킨(Epicatechin), 갈란긴(Galangin)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자.
  3. 제1항에 있어서,
    폴리소르베이트계 용해제는,
    폴리소르베이트 20(Polysorbate 20), 폴리소르베이트 80(Polysorbate 80), 폴리소르베이트 60(Polysorbate 60), 폴리소르베이트 40(Polysorbate 40) 및 폴리소르베이트 65(Polysorbate 65)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자.
  4. 제1항에 있어서,
    [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류는, 폴록사머 184(Poloxamer 184), 폴록사머 185(Poloxamer 185), 폴록사머 188(Poloxamer 188), 폴록사머 124(Poloxamer 124), 폴록사머 237(Poloxamer 237), 폴록사머 338(Poloxamer 338) 및 폴록사머 407(Poloxamer 407)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자.
  5. 제1항에 있어서,
    항산화 주름개선 유효성분 1 중량부 기준,
    폴리소르베이트계 용해제 50 내지 120 중량부; 및
    [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 80 내지 160 중량부;로 포함되는 것을 특징으로 하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자.
  6. 제1항에 있어서,
    항산화 주름개선 유효성분 1 중량부 기준,
    폴리소르베이트계 용해제 80 내지 90 중량부; 및
    [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 110 내지 130 중량부;로 포함되는 것을 특징으로 하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자.
  7. 제1항에 있어서,
    항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자의 평균 직경은 5 내지 150 nm인 것을 특징으로 하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자.
  8. 항산화 주름개선 유효성분에, 폴리소르베이트계 용해제를 첨가하여 교반하는 단계(단계 1);
    [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류를 첨가하여 교반하는 단계(단계 2); 및
    물을 첨가하여 분산시키는 단계(단계 3);를 포함하는, 제1항의 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자의 제조방법.
  9. 제8항에 있어서,
    상기 단계 1의 교반은 항산화 주름개선 유효성분의 성상이 투명성을 띌때까지 수행하는 것을 특징으로 하는, 나노입자의 제조방법.
  10. 제8항에 있어서,
    상기 단계 1 및 단계 2의 교반은 10 내지 95℃에서 수행하는 것을 특징으로 하는, 나노입자의 제조방법.
  11. 항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
    폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
    [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 포함하는 것을 특징으로 하는 액상제제.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 액상제제는 경피흡수제 형태인 것을 특징으로 하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자를 포함하는 것을 특징으로 하는 액상제제.
  13. 항산화 주름개선 유효성분에, 폴리소르베이트계 용해제를 첨가하여 교반하는 단계(단계 1);
    [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류를 첨가하여 교반하는 단계(단계 2); 및
    물을 첨가하여 분산시키는 단계(단계 3);를 포함하여 제조되며,

    항산화 주름개선 유효성분 1 중량부;
    폴리소르베이트계 용해제 30 내지 140 중량부; 및
    [폴리에틸렌옥사이드(PEO)-폴리프로필렌옥사이드(PPO)-폴리에틸렌옥사이드(PEO)] 형태의 트리블록 공중합체류 40 내지 200 중량부;를 포함하는, 항산화 주름개선 유효성분이 봉입된 나노입자.
  14. 제1항의 나노입자를 포함하는 것을 특징으로 하는 주름개선용 화장료 조성물.
  15. 제1항의 나노입자를 포함하는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.
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