KR102396513B1 - 버섯의 감마-아미노부티르산 함량 증가용 조성물 - Google Patents
버섯의 감마-아미노부티르산 함량 증가용 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR102396513B1 KR102396513B1 KR1020190177401A KR20190177401A KR102396513B1 KR 102396513 B1 KR102396513 B1 KR 102396513B1 KR 1020190177401 A KR1020190177401 A KR 1020190177401A KR 20190177401 A KR20190177401 A KR 20190177401A KR 102396513 B1 KR102396513 B1 KR 102396513B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- mushroom
- sodium alginate
- gaba
- composition
- mushrooms
- Prior art date
Links
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 136
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 title claims abstract description 126
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 68
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 title claims abstract description 68
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 33
- IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-2,4-dioxo-1,3-diazinane-5-carboximidamide Chemical compound CN1CC(C(N)=N)C(=O)NC1=O IXPNQXFRVYWDDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 74
- 239000000661 sodium alginate Substances 0.000 claims description 74
- 235000010413 sodium alginate Nutrition 0.000 claims description 74
- 229940005550 sodium alginate Drugs 0.000 claims description 74
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 241000195473 Sargassum fulvellum Species 0.000 claims description 3
- 241000264279 Sargassum fusiforme Species 0.000 claims description 3
- 241001260874 Sargassum horneri Species 0.000 claims description 3
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 claims description 3
- 241000218691 Cupressaceae Species 0.000 claims 2
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 abstract description 19
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 240000001462 Pleurotus ostreatus Species 0.000 description 26
- 235000001603 Pleurotus ostreatus Nutrition 0.000 description 26
- 230000036541 health Effects 0.000 description 21
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 16
- 240000000599 Lentinula edodes Species 0.000 description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 210000001787 dendrite Anatomy 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241001474374 Blennius Species 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 9
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 5
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 5
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 5
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 210000002243 primary neuron Anatomy 0.000 description 5
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 4
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 4
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 235000012149 noodles Nutrition 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 239000001965 potato dextrose agar Substances 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 4
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 4
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 4
- LOTKRQAVGJMPNV-UHFFFAOYSA-N 1-fluoro-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(F)C([N+]([O-])=O)=C1 LOTKRQAVGJMPNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000191482 Cantharellus cibarius Species 0.000 description 3
- 241001070941 Castanea Species 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101150009249 MAP2 gene Proteins 0.000 description 3
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 3
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 239000002585 base Substances 0.000 description 3
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 3
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 3
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 3
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 3
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 229920000729 poly(L-lysine) polymer Polymers 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 3
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 2
- 235000014036 Castanea Nutrition 0.000 description 2
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 2
- AEMOLEFTQBMNLQ-VANFPWTGSA-N D-mannopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-VANFPWTGSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011511 Diospyros Nutrition 0.000 description 2
- 244000236655 Diospyros kaki Species 0.000 description 2
- 101150014889 Gad1 gene Proteins 0.000 description 2
- 102100035902 Glutamate decarboxylase 1 Human genes 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010019133 Hangover Diseases 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 2
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 2
- 101150018665 MAPK3 gene Proteins 0.000 description 2
- 241001504654 Mustela nivalis Species 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 2
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 2
- 244000252132 Pleurotus eryngii Species 0.000 description 2
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 2
- 241000121220 Tricholoma matsutake Species 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 2
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000000748 compression moulding Methods 0.000 description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 2
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 2
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000005712 elicitor Substances 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 2
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 2
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 2
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 238000010149 post-hoc-test Methods 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000012132 radioimmunoprecipitation assay buffer Substances 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 2
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M .beta-Phenylacrylic acid Natural products [O-]C(=O)\C=C\C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-VOTSOKGWSA-M 0.000 description 1
- FTZIQBGFCYJWKA-UHFFFAOYSA-N 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium Chemical compound S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 FTZIQBGFCYJWKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N Ala-Gln Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HJCMDXDYPOUFDY-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 239000012103 Alexa Fluor 488 Substances 0.000 description 1
- 244000291564 Allium cepa Species 0.000 description 1
- 235000002732 Allium cepa var. cepa Nutrition 0.000 description 1
- 235000001270 Allium sibiricum Nutrition 0.000 description 1
- 235000003062 Artemisia nova Nutrition 0.000 description 1
- 241001249165 Artemisia nova Species 0.000 description 1
- 241000512259 Ascophyllum nodosum Species 0.000 description 1
- 235000000023 Auricularia auricula Nutrition 0.000 description 1
- 240000005710 Auricularia polytricha Species 0.000 description 1
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000167854 Bourreria succulenta Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 235000004936 Bromus mango Nutrition 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000282988 Capreolus Species 0.000 description 1
- 241000195628 Chlorophyta Species 0.000 description 1
- 235000007516 Chrysanthemum Nutrition 0.000 description 1
- 244000189548 Chrysanthemum x morifolium Species 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N Cinnamic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-SREVYHEPSA-N 0.000 description 1
- 240000009226 Corylus americana Species 0.000 description 1
- 235000001543 Corylus americana Nutrition 0.000 description 1
- 235000007466 Corylus avellana Nutrition 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 244000265913 Crataegus laevigata Species 0.000 description 1
- 235000013175 Crataegus laevigata Nutrition 0.000 description 1
- 244000301850 Cupressus sempervirens Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-BZINKQHNSA-N D-Guluronic Acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-BZINKQHNSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 1
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 description 1
- 235000005206 Hibiscus Nutrition 0.000 description 1
- 235000007185 Hibiscus lunariifolius Nutrition 0.000 description 1
- 244000284380 Hibiscus rosa sinensis Species 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 244000303199 Lamium album Species 0.000 description 1
- 235000009199 Lamium album Nutrition 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 240000007228 Mangifera indica Species 0.000 description 1
- 235000014826 Mangifera indica Nutrition 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 206010029216 Nervousness Diseases 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 241000233855 Orchidaceae Species 0.000 description 1
- 102000038030 PI3Ks Human genes 0.000 description 1
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 241000237503 Pectinidae Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000199919 Phaeophyceae Species 0.000 description 1
- 108090000430 Phosphatidylinositol 3-kinases Proteins 0.000 description 1
- 244000155172 Podocarpus elatus Species 0.000 description 1
- 235000003209 Podocarpus elatus Nutrition 0.000 description 1
- 235000014441 Prunus serotina Nutrition 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 244000088415 Raphanus sativus Species 0.000 description 1
- 235000006140 Raphanus sativus var sativus Nutrition 0.000 description 1
- 241000206572 Rhodophyta Species 0.000 description 1
- 241001412173 Rubus canescens Species 0.000 description 1
- 241000316887 Saissetia oleae Species 0.000 description 1
- 235000009184 Spondias indica Nutrition 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 241000609666 Tuber aestivum Species 0.000 description 1
- 244000274883 Urtica dioica Species 0.000 description 1
- 235000009108 Urtica dioica Nutrition 0.000 description 1
- 240000006794 Volvariella volvacea Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 240000003307 Zinnia violacea Species 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 235000013334 alcoholic beverage Nutrition 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N aldehydo-D-glucuronic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000004531 blood pressure lowering effect Effects 0.000 description 1
- 235000021329 brown rice Nutrition 0.000 description 1
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 1
- FNAQSUUGMSOBHW-UHFFFAOYSA-H calcium citrate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O.[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O FNAQSUUGMSOBHW-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000001354 calcium citrate Substances 0.000 description 1
- 239000003518 caustics Substances 0.000 description 1
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 235000019693 cherries Nutrition 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 229930016911 cinnamic acid Natural products 0.000 description 1
- 235000013985 cinnamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 230000001054 cortical effect Effects 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 206010015037 epilepsy Diseases 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000012812 general test Methods 0.000 description 1
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 235000009569 green tea Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 description 1
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 description 1
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 description 1
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N hypochlorous acid Chemical compound ClO QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000004068 intracellular signaling Effects 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 229940069445 licorice extract Drugs 0.000 description 1
- 239000011344 liquid material Substances 0.000 description 1
- 239000010871 livestock manure Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N methyl p-hydroxycinnamate Natural products OC(=O)C=CC1=CC=CC=C1 WBYWAXJHAXSJNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 235000019462 natural additive Nutrition 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 230000009965 odorless effect Effects 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 235000013550 pizza Nutrition 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010814 radioimmunoprecipitation assay Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000012898 sample dilution Substances 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 235000020637 scallop Nutrition 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000011343 solid material Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 230000024001 sorocarp development Effects 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 1
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011269 tar Substances 0.000 description 1
- 230000009967 tasteless effect Effects 0.000 description 1
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 235000013337 tricalcium citrate Nutrition 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000004304 visual acuity Effects 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
- A01N43/02—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms
- A01N43/04—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom
- A01N43/14—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings
- A01N43/16—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings with oxygen as the ring hetero atom
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
- A01G18/00—Cultivation of mushrooms
- A01G18/20—Culture media, e.g. compost
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L31/00—Edible extracts or preparations of fungi; Preparation or treatment thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/322—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the health of the nervous system or on mental function
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Botany (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
본 발명은 버섯의 감마-아미노부티르산(Gamma-amino butyric acid, GABA) 함량 증가용 조성물에 관한 것으로 본 발명의 조성물을 버섯에 처리하면 버섯 내의 기능성 물질로서 GABA의 함량을 증대시킬 수 있는바, 건강기능식품 및 의약품 분야에 유용하게 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 버섯의 감마-아미노부티르산(Gamma-amino butyric acid, GABA) 함량 증가용 조성물에 관한 것이다.
감마-아미노부티르산(Gamma-amino butyric acid, GABA)은 억제성 신경전달 물질로서, 혈압상승을 억제하고 시력증진에 효과가 있으며, 불안감, 초조감 등을 진정시키는 작용을 하는 것으로 알려진 물질이다. 동물의 경우 뇌, 심장, 폐, 신장 등에 분포되어 있으며, 식물의 경우 발아 현미, 녹차 등에서 주로 발견되고 있다.
스트레스에 시달리는 현대인, 특히 수험생, 알코올 과다 섭취자 등의 경우에는, 뇌와 혈중 GABA 농도가 낮은 것으로 보고되어 있으며, 체내 GABA 농도의 극심한 부족은 발작, 경련, 간질 증세를 일으키는 것으로 알려져 있어서, 이들 증세를 완화 내지는 치료하기 위해서, 체내 GABA 농도를 높이기 위한 목적의 식품 또는 약제 개발이 이루어지고 있다.
버섯은 널리 사용하는 식품 재료로서, 식용 버섯에는 다양한 아미노산을 비롯하여 비타민류, 단백질, 효소류 등 많은 영양 성분이 함유되어 있다. 또한 최근에는 버섯으로부터 다양한 약용학적 가치도 발굴되고 있는데, 예를 들어 콜레스테롤 억제, 고혈압 예방, 항암효과 등이 폭넓게 연구되고 있다.
다만, 이러한 다양한 생리활성 물질을 포함하는 버섯에서 GABA 함량 증가를 위한 방법에 대한 연구는 전무한 실정이다.
이에 버섯의 기능성 성분 특히, GABA의 함량을 증가시키고, GABA의 함량을 높인 버섯 유래 건강기능식품의 개발이 필요하다.
본 발명은 버섯의 감마-아미노부티르산(Gamma-amino butyric acid, GABA) 함량 증가용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 GABA 함량이 증가된 버섯의 생산방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 GABA 함량이 증가된 버섯을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 GABA 함량이 증가된 버섯을 포함하는 신경 안정용 건강기능식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.
1. 알긴산 나트륨(sodium alginate)을 포함하는 버섯의 감마-아미노부티르산(Gamma-amino butyric acid, GABA) 함량 증가용 조성물.
2. 위 1에 있어서, 상기 알긴산 나트륨은 괭생이 모자반(Sargassum horneri), 모자반(Sargassum fulvellum) 또는 톳(Sargassum fusiforme) 유래 알긴산 나트륨인, 조성물.
3. 위 1에 있어서, 상기 알긴산 나트륨은 중합도(degree of polymerization, DP)가 2 내지 7인, 조성물.
4. 위 1에 있어서, 알긴산 나트륨은 조성물 총 중량의 0.05 내지 10% 포함되는, 조성물.
5. 위 1에 있어서, 상기 버섯은 꽃송이버섯인, 조성물.
6. 버섯에 알긴산 나트륨(sodium alginate)을 처리하는 단계를 포함하는 GABA 함량이 증가된 버섯의 생산방법.
7. 위 6에 있어서, 상기 버섯은 꽃송이버섯인, 방법.
8. 위 6 및 7 중 어느 한 항의 방법으로 생산된 GABA 함량이 증가된 버섯.
9. 위 8의 버섯을 포함하는 신경 안정용 건강기능식품.
본 발명의 조성물을 버섯에 처리하면 버섯 내의 기능성 물질로서 GABA의 함량을 증가시킬 수 있는바, 건강기능식품 및 의약품 분야에 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 엘리시터를 처리한 꽃송이 버섯의 성장 사진이다.
도 2는 ELISA kit를 이용하여 측정한 알긴산 나트륨 처리한 꽃송이버섯 균사체(A) 및 자실체(B)의 GABA 함량이다.
도 3은 알긴산 나트륨을 처리한 꽃송이버섯의 GABA와 표준 GABA의 HPLC 분석 결과이다.
도 4는 HPLC를 이용하여 측정한 알긴산 나트륨 처리한 꽃송이버섯 균사체(A) 및 자실체(B)의 GABA 함량이다.
도 5는 알긴산 나트륨을 처리한 꽃송이버섯의 MTT assay 결과이다.
도 6은 알긴산 나트륨을 처리한 0.1mg/㎖ 농도의 꽃송이버섯의 수상돌기 보호 효과를 확인한 도이다.
도 7은 알긴산 나트륨을 처리한 1mg/㎖ 농도의 꽃송이버섯의 수상돌기 보호 효과를 확인한 도이다.
도 8은 엘리시터 처리한 꽃송이 버섯의 신경세포 내 신호전달경로 변화를 확인한 도이다.
도 2는 ELISA kit를 이용하여 측정한 알긴산 나트륨 처리한 꽃송이버섯 균사체(A) 및 자실체(B)의 GABA 함량이다.
도 3은 알긴산 나트륨을 처리한 꽃송이버섯의 GABA와 표준 GABA의 HPLC 분석 결과이다.
도 4는 HPLC를 이용하여 측정한 알긴산 나트륨 처리한 꽃송이버섯 균사체(A) 및 자실체(B)의 GABA 함량이다.
도 5는 알긴산 나트륨을 처리한 꽃송이버섯의 MTT assay 결과이다.
도 6은 알긴산 나트륨을 처리한 0.1mg/㎖ 농도의 꽃송이버섯의 수상돌기 보호 효과를 확인한 도이다.
도 7은 알긴산 나트륨을 처리한 1mg/㎖ 농도의 꽃송이버섯의 수상돌기 보호 효과를 확인한 도이다.
도 8은 엘리시터 처리한 꽃송이 버섯의 신경세포 내 신호전달경로 변화를 확인한 도이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 알긴산 나트륨(sodium alginate)을 포함하는 버섯의 감마-아미노부티르산(Gamma-amino butyric acid, GABA) 함량 증가용 조성물을 제공한다.
알긴산 나트륨은 백색-엷은 황색을 띤 섬유상, 알갱이, 과립 또는 분말로 거의 냄새가 없으며, 맛이 없는 고분자 물질이다. 알긴산 나트륨은 통상적으로 시판되는 것을 이용한 것일 수 있고, 해조류로부터 추출한 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
해조류는 갈조류, 녹조류, 홍조류 등을 포함할 수 있다. 예를 들어, 모자반, 괭생이 모자반, 톳, 다시마, 미역, 감태, 김, 우뭇가사리, 청각, 파래 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 더욱 구체적으로 알긴산 나트륨은 괭생이 모자반(Sargassum horneri), 모자반(Sargassum fulvellum) 또는 톳(Sargassum fusiforme) 유래 알긴산 나트륨일 수 있다.
상기 알긴산나트륨은 공지된 방법으로 해조류로부터 추출된 것일 수 있다. 예를 들면 해조류를 알칼리 처리 후 산 처리하거나, 산 처리 후 알칼리 처리하여 추출된 것일 수 있다.
알칼리는 Na2CO3 등의 약염기 혹은 NaOH 등의 강염기 일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 산은 HCl, H2SO4, HF, HNO3, HClO4 등의 강산일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
알칼리 처리는 가열 하에 수행된 것일 수 있다. 예를 들면 40℃ 내지 120℃ 등으로 가열된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
산 처리는 적정 크기의 분자량을 갖는 알긴산 나트륨이 얻어지도록 수행된 것일 수 있고, 예를 들면 12시간 내지 36시간 수행되어 얻어진 것일 수 있다.
알긴산 나트륨은 예를 들면 그 중합도(DP)가 1 내지 10, 구체적으로 2 내지 7인 것일 수 있다. 구체적으로 알긴산 나트륨은 글루론산(guluronate) 또는 만누론산(mannuronate), 또는 이들이 혼합된 단량체가 1 내지 10개, 2 내지 7개 결합된 것일 수 있다. 알긴산 나트륨은 그 원료, 채취시기 및 산의 처리시기와 시간 등에 따라 분자량에 큰 차이가 있을 수 있다. 상기 범위 내의 분자량을 가진 알긴산 나트륨을 사용하면, 버섯의 GABA 함량 증가 효과를 극대화할 수 있다.
알긴산 나트륨은 조성물 총 중량의 0.05 내지 10% 포함될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. 예를 들어 알긴산 나트륨은 증류수에 0.05 내지 10 중량%, 구체적으로 0.07 내지 5 중량%, 더욱 구체적으로 0.09 내지 3 중량% 포함될 수 있다. 상기 알긴산 나트륨의 농도는 버섯 재배 조건에 따라 적절히 선택될 수 있다.
조성물은 버섯 재배를 위한 첨가물을 더 포함할 수 있다. 첨가물은 버섯 재배용 배지 또는 배지 혼합물일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
조성물은 상기 성분들을 용해 또는 분산시키는 용매 또는 분산매를 더 포함할 수 있다. 용매 또는 분산매로는 알긴산 나트륨이 용해 또는 분산될 수 있는 것이라면 특별한 제한이 없으며 예를 들면, 물, 메탄올, 에탄올 또는 이들의 혼합물일 수 있고, 구체적으로 물일 수 있다. 다만, 100% 에탄올, 100% 메탄올 등은 버섯의 생육을 저해할 수 있으므로, 물과 혼합되거나, 물만을 사용하는 것이 보다 바람직하다.
조성물은 알긴산 나트륨을 포함함으로써, 이를 이용하여 버섯을 재배하는 경우 다량의 GABA를 함유하는 버섯을 생산할 수 있다.
적용 대상인 버섯은 GABA 생성능(GABA 경로, GABA shunt)을 가진 모든 버섯이 제한 없이 사용될 수 있다. 예를 들면, 가죽밤그물버섯, 갈색솔방울버섯, 개암다발버섯, 검은비늘버섯, 고무버섯, 국수버섯, 굴털이(젖버섯), 그물버섯, 기와버섯(청버섯), 꽃송이버섯, 꾀꼬리버섯, 노란구름벚꽃버섯(흑갈색벚꽃버섯), 노란달걀버섯, 노랑난버섯, 노루궁뎅이버섯, 느타리버섯, 능이버섯, 달걀버섯, 댕구알버섯, 덕다리버섯, 독청버섯아재비, 두엄먹물버섯, 땅송이, 마른산그물버섯, 만가닥버섯, 말불버섯, 맛버섯(나도팽나무버섯), 망태버섯, 모래배꼽버섯, 목이버섯, 방추광대버섯, 밤버섯, 배불뚝이깔대기버섯, 배젖버섯, 버터애기버섯, 볏짚버섯, 북방처녀버섯, 붉은점박이광대버섯, 뽕나무버섯부치, 뿔나팔버섯, 새송이버섯, 석이버섯, 소혀버섯, 솔버섯, 솜귀신그물버섯, 송이버섯, 싸리버섯, 안장버섯, 양송이버섯, 옥수수깜부기버섯, 우산버섯, 잎새버섯, 왕송이버섯, 자주국수버섯, 젖버섯, 젓비단그물버섯, 접시껄껄이그물버섯, 족제비눈물버섯, 졸각버섯, 좀나무싸리버섯, 참부채버섯, 찹쌀떡버섯, 처녀버섯, 청머루무당버섯, 치마버섯, 큰갓버섯, 턱수염버섯, 털밤그물버섯, 트러플, 팽이버섯, 표고버섯, 푸른우유버섯, 풀버섯, 풍선끈적버섯, 피즙갈색깔때기버섯, 황금무당버섯, 황소비단그물버섯, 흰가시광대버섯, 흰달걀버섯, 흰우단버섯, 흰우산버섯 또는 흰그물버섯 등을 포함할 수 있고, 바람직하게는 꽃송이버섯일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
버섯은 균사체 또는 자실체일 수 있다.
본 발명의 조성물은 균사체 또는 자실체에 처리될 수 있고, 자실체 형성 전의 균사체에 처리될 수도 있다.
본 발명은 버섯에 알긴산 나트륨을 처리하는 단계를 포함하는 GABA 함량이 증가된 버섯의 생산방법을 제공한다.
알긴산 나트륨은 예를 들어, 용매에 분산 또는 용해된 것일 수 있다. 용매는 증류수일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 방법은 버섯 균사체 또는 자실체에 알긴산 나트륨을 처리하는 것일 수 있다.
알긴산 나트륨은 버섯 균사체의 성숙 이후에 처리될 수 있다. 균사체가 성숙되면 자실체가 형성되는 것으로, 구체적으로 버섯은 (1차) 균사가 접합/조직화하여 2차 균사가 형성될 수 있고, 또한, 2차 균사가 접합/조직화하여 3차 균사를 형성하거나, 시원체를 형성하고, 이후에 자실체가 형성될 수 있다. 본 발명에서 알긴산 나트륨은 2차 균사의 형성 이후, 3차 균사의 형성 이후, 시원체의 형성 이후, 또는 보다 구체적으로 버섯 균사체가 성숙하여 자실체로 발전하기 전인 프리모달(primordial) 상태에서 처리될 수 있다. 이때 알긴산 나트륨은 균사체에 처리될 수 있다.
또한, 본 발명에서 알긴산 나트륨은 자실체 형성 중 또는 자실체 형성 이후에도 처리될 수 있다. 이때 알긴산 나트륨은 균사체 또는 자실체에 처리될 수 있다. 자실체 형성 중이라는 것은 자실체의 자루 형성 중 또는 갓 형성 중 일 수 있고, 자실체 형성 이후는 갓의 형성 이후일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
알긴산 나트륨은 매일 또는 일정 시간 간격을 두고 처리될 수 있다. 알긴산 나트륨의 처리 시간과 양은 버섯의 재배 조건에 따라 적절하게 선택될 수 있다. 예를 들어 하루에 1회 내지 4회, 구체적으로 아침, 저녁으로 2회 처리될 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니다. 1회 분무량은 버섯 배양용기 당 2 내지 10 ㎖, 구체적으로 3 내지 8 ㎖ 처리할 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
알긴산 나트륨은 버섯을 재배할 때 침봉, 침수, 살수 또는 분무 등의 방법으로 처리될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
알긴산 나트륨의 처리 방법은 구체적인 예를 들면, 골목(버섯 재배용 나무)에 침봉 호스를 찔러넣어 알긴산 나트륨 용액을 공급하는 것일 수 있고, 용기 내에 알긴산 나트륨 용액을 채우고, 골목을 담그는 방식일 수 있고, 버섯 재배사 내에 분사노즐을 이용하여 알긴산 나트륨 용액을 뿌리는 것일 수 있고, 각각의 골목에 스프레이를 이용하여 분무하는 방식일 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
배지는 버섯의 배양 시 필요한 영양원 등을 공급할 수 있는 액체 또는 고형의 재료를 포함할 수 있다. 예를 들어, 배지는 톱밥, 면실피, 비트펄프, 원목, 한천배지, PDB(Potato dextrose broth) 액체배지, 밀가루 액체배지, MCM(mushroom complete medium) 액체배지 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 버섯은 통상의 버섯 재배 방법으로 통상의 기술자에 공지된 방법으로 생산될 수 있다. 예를 들어 버섯 재배용 배지의 형태는 병배지, 판배지, 성형배지, 봉지 배지 등 배지의 형태와 형상은 다양하게 적용될 수 있다. 또한, 버섯 재배사의 형태는 비닐하우스, 판넬재배사, 유리온실 등에서 선반형 다층구조 재배, 지면균상 재배 방법 등 다양한 재배 환경에서도 적용될 수 있다.
본 발명은 상기 방법으로 생산된 GABA 함량이 증가된 버섯을 제공한다.
본 발명의 방법으로 생산된 버섯은 GABA 함량이 현저히 증가된 것일 수 있다. 예를 들면 알긴산 나트륨 무처리 버섯 대비 GABA 함량이 1.5배 내지 10배, 1.5배 내지 7배, 1.5 내지 5배 등이 증가된 것일 수 있다.
본 발명은 상기 방법으로 생산된 GABA 함량이 증가된 버섯을 포함하는 신경 안정용 건강기능식품을 제공한다.
GABA는 포유류의 중추신경계에서 억제성 신경전달물질로 작용하고, 숙취해소, 불안감해소, 고혈압강하, 인슐린 효과의 증대, 우울증 해소 등의 효과가 있다.
본 발명의 건강기능식품은 GABA를 고함량으로 포함하는 버섯을 포함하고 있어, GABA의 유용한 성분을 인체에 전달할 수 있으며, 이에 GABA가 가지는 건강기능성을 그대로 누릴 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 건강기능식품은 숙취 해소 효능, 신경 안정 효능, 혈압 강하 효능 등의 건강기능성을 가지며, 특히 신경 안정에 탁월한 효과가 있다.
본 발명의 건강기능식품은 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공할 수 있다.
본 발명의 건강기능식품이라 함은, 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.
본 발명의 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.
식품 첨가물 공전에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류 첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
예를 들어, 정제 형태의 건강기능식품은 상기 추출물을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다.
캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 상기 추출물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 상기 추출물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.
환 형태의 건강기능식품은 상기 추출물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다.
과립 형태의 건강기능식품은 상기 추출물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.
건강기능식품은 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류. 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복함제 및 건강보조식품류 등일 수 있다.
건강기능식품은 영양제의 용도로 경구 적용될 수 있으며, 적용 형태는 특별히 제한되지 않는다. 예를 들면 경구 투여되는 경우, 하루 섭취량은 5000mg 이하인 것이 바람직하고, 하루 섭취량이 2000mg 이하인 것이 보다 바람직하며, 하루 섭취량이 500 내지 1500mg, 또는 650mg인 것이 가장 바람직하다. 캡슐제 또는 정제로 제제화하는 경우, 1일 1회 1정을 물과 함께 투여할 수 있다.
상기 알긴산 나트륨 및 이의 추출방법, 버섯 및 이의 생산방법에 관련된 구체적인 설명은 상술한 바와 같다.
이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다.
재료 및 방법
1. 꽃송이버섯 공시균주 및 생장
꽃송이버섯 균주는 전남산림자원연구소가 채집 및 선발한 JF02-06 균주로, PDA 배지에 계대하여 분양받아 사용하였으며, 국내외의 꽃송이버섯 균사 생장의 최적 조건에 대한 연구 결과를 토대로 배양하였다. 꽃송이 버섯은 25±1 ℃ incubator (JSSI-300CL, JSR, Korea)에서 암배양하였으며, 균사의 면적이 petri-dish 전체 면적의 90-95% 정도가 되었을 때(프리모달 상태) 실험 배지에 계대하였고, 배지에 0.1 중량% 및 0.5 중량%의 엘리시터를 혼합하여 배양하였다. 분리된 원균은 4℃에 보관하며 3-4개월마다 새로운 PDA에 계대하였다. 균사 생장은 petri-dish 중앙에 균사체를 접종하고 수직으로 교차하는 지름의 길이를 측정하여 평균값을 생장 길이로 하였고 배양일 수에 따라 신장한 양을 기록하였다. 자실체가 형성된 이후에 엘리시터는 아침, 저녁으로 하루 2회 분무하였으며, 분무량은 배양 용기 당 5㎖로 하여 하루 총 10㎖를 분무하여 배양하였다. 자실체에 엘리시터는 프리모달 상태에서 자실체의 갓 형성 때까지 처리되었다. 자실체의 생장은 8주 간 생장 및 변화를 관찰하였다. 이때. 엘리시터 종류 및 첨가 비율은 표 1에 나타내었으며(표 1과 같은 약자로 명명함), 각 엘리시터 처리 후의 생장사진은 도 1(A(대조군), B(sigma사 알긴산 나트륨), C(괭생이모자반 알긴산 나트륨), D(모자반 알긴산 나트륨), C(톳 알길산 나트륨)에 나타내었다.
| 엘리시터 | 농도 (%) | 약자 | |
| 균사체 | 자실체 | ||
| 무처리 (사용 안 함) | - | M CON | F CON |
| 시그마 sodium alginate | 0.1 | AM1 | AF1 |
| 0.5 | AM2 | AF2 | |
| 괭생이모자반 sodium alginate | 0.1 | BM1 | BF1 |
| 0.5 | BM2 | BF2 | |
| 모자반 sodium alginate | 0.1 | CM1 | CF1 |
| 0.5 | CM2 | CF2 | |
| 톳 sodium alginate | 0.1 | DM1 | DF1 |
| 0.5 | DM2 | DF2 | |
2. 알긴산 나트륨(엘리시터) 제조
괭생이모자반, 모자반, 톳에서 추출한 알긴산 나트륨(sodium alginate)을 엘리시터로 사용하였다. 대조군으로 sigma사의 알긴산 나트륨을 사용하였다. 25 g의 해조류를 2%(w/v) formaldehyde(수용액) 800 ㎖로 24시간 동안 상온에서 전처리 후 증류수로 세척하고, 0.2 M HCl(수용액) 800 ㎖로 24시간 동안 전처리하였다. 전처리가 완료된 해조류를 증류수로 세척하여 2%(w/v) Na2CO3(수용액) 1L로 3시간 동안 100℃에서 알긴산 나트륨을 추출하였다. 추출물을 필터로 여과 후 10,000 rpm에서 30분 동안 원심분리하여 상등액을 수거하고, 3배 부피의 에탄올을 첨가하여 알긴산 나트륨을 침전시켰다. 이를 아세톤으로 세척하고, 48시간 동안 60℃에서 건조하였다. 건조된 알긴산 나트륨을 0.1 중량% 및 0.5 중량%가 되도록 증류수에 용해시켜 알긴산 나트륨 수용액을 제조하였다.
3. GABA 측정
3.1. ELISA Kit
GABA 정량은 QuickDetectTM GABA ELISA Kit (Biovision)를 사용하여 측정하였다. Sandwich 정량법을 사용하였으며, GABA 용액 (16.88 pg/mL ~ 324.00 pg/mL)으로 standard curve를 작성하여 시료의 GABA 함량을 계산하였다. 꽃송이버섯 (균사체, 자실체) 건조 시료는 막자사발로 분쇄 후 분말화하고, 이를 PBS(pH 7.40)에 녹여 5%(w/v) 용액을 제조하여 실험하였다. 40 ㎕ sample dilution buffer와 10 ㎕ sample을 microplate의 각각의 well에 넣고 잘 혼합시켰다. 100 ㎕ HRP-Conjugate reagent를 각각의 well에 넣고 30분 동안 37℃에서 sealer로 microplate를 덮은 상태에서 혼합시켰다. 각각의 well에 남아있는 용액을 제거하고 세척용액을 이용하여 5번 정도 세척하였다. 50 ㎕ Chromogen Solution A와 50 ㎕ Chromogen Solution B를 각각의 well에 넣고 15분 동안 37℃에서 빛을 차단하고 혼합시켰다. 그 후, 50 ㎕ stop solution을 첨가하고 450 nm에서 흡광값을 측정하였다.
3.2. HPLC
꽃송이버섯 건조 시료를 막자사발로 분쇄 후 분말화하여 H2O로 5% (w/v) 용액을 제조하여 60℃에서 2시간 동안 추출하였다. 추출물을 12,000 rpm에서 10분 동안 원심분리 후 1-fluoro-2, 4-dinitrobenzene (DNFB)로 유도체화하여 HPLC로 GABA 함량을 분석하였다. 180 ㎕의 꽃송이버섯 버섯 추출물, 180 ㎕의 10 mg/mL DNFB 용액, 100 ㎕의 0.5 M NaHCO3 (pH 9.0), 20 ㎕의 H2O을 혼합하여 교반(vortexing) 후 60℃에서 1시간 동안 반응시켰다. 반응이 끝난 후 실온으로 냉각하고, 400 ㎕의 0.01 M KH2PO4 (pH 7.0)를 첨가하여 15분 동안 암실에서 반응시켰다. HPLC는 Shimadzu LC-20 series (Pump: LC-20AD, Degassor: DGU-20A, Column oven: CTO-20A, UV-VIS detector: SPD-20A, Japan)로 구성되었으며 분석조건은 표 2와 같다.
| HPLC equipment | Shimadzu LC-20 series | |||||||
| Mobile phase | (Sol A) 5 mM CH3COONa (pH 5.7):THF=95:5 (v/v) (Sol B) 0.05% TFA in 80% MeOH |
|||||||
| Column | Shim-pack GIS, ODS (250×4.6 mm, 5.0 ㎛particle size) | |||||||
| Gradient program | Time [min] |
0.01 | 15.00 | 65.00 | 105.00 | 115.00 | 117.00 | 125.00 |
| Sol A | 80 | 70 | 35 | 0 | 0 | 80 | 80 | |
| Sol B | 20 | 30 | 65 | 100 | 100 | 20 | 20 | |
| Oven temperature | 35℃ | |||||||
| UV wavelength | 360 nm | |||||||
| Injection volume | 20 ㎕ | |||||||
| Flow rate | 1.0 mL/min | |||||||
4. 초대 신경세포 배양
ICR 생쥐의 배아기 15.5일의 뇌로부터 대뇌피질 부분을 분리하여 DNase I (Sigma)이 함유된 0.25% 트립신 용액(Gibco)으로 37℃에서 20분 간 처리하고, fetal bovine serum (Gibco)을 처리하여 트립신을 불활성화 시켰다. Poly-L-lysine (Sigma)으로 코팅된 배양용기에서 분리된 세포를 2% B27, Glutamax, penicillin/streptomycin (Invitrogen)이 포함된 Neurobasal medium로 배양시켰다. 신경세포는 37℃, 5% CO2의 배양기에서 발달시키며 3-4일에 한 번씩 반절의 배양액을 새로 교체하였다.
5. 면역형광법
Poly-L-lysine이 코팅된 커버 글라스 위에서 배양된 신경세포에 각각의 시료를 48시간 동안 처리하고 4% paraformaldehyde가 함유된 phosphate buffered saline (PBS)으로 15분 간 고정시킨 후, 0.1% Triton X-100/PBS로 투과성을 증가시켰다. 10% normal goat serum을 첨가하여 blocking buffer로 상온에서 1시간 동안 배양한 후 Map2 (Abcam), GAD67 (Millipore) 항체를 첨가하여 4℃에서 24시간 동안 반응시켰다. AlexaFluor 488, 647 (Invritrogen)이 합체된 2차 항체를 첨가하여 상온에서 1시간 동안 반응시킨 후 유리 슬라이드 위에 mountin 배지를 첨가하여 신경세포 샘플을 안착시켰다. 신경세포는 Nikon A1 공초점현미경을 이용하여 이미지를 획득하였다.
6. MTT assay
초대 신경세포는 poly-L-lysine이 코팅된 배양용기에서 4-5일간 배양 후 각각의 시료를 가하여 24시간 동안 배양기에서 배양하였다. 살아남은 세포는 MTT (3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium), 2 mg/㎖로 1시간 동안 반응시킨 후 dimethyl sulfoxide로 formazan 결정체를 녹여 immunosorbent assay microplate reader (Pharmacia Biotech Ultrospec 2000)를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다.
7. 웨스턴 블롯
신경세포는 각각의 시료를 20분간 처리한 후 radioimmunoprecipitation assay buffer (RIPA) 용액을 처리하여 단백질을 추출하고 8% SDS-PAGE 젤에 걸어 0.22 ㎛ 니트로셀룰로즈 막에 2시간 동안 이동시켰다. 5% 무지방우유가 함유된 tris 버퍼 용액 (TBS)에서 blocking을 시킨 후 phospho-Akt Serine473 (Cell signaling), phospho-Erk 1/2 (Cell signaling), horseradish peroxidase-conjugated actin (Sigma) 항체를 첨가하여 4℃에서 24시간 동안 반응시켰다. 그 후 0.1% tween이 함유된 TBS 용액으로 헹군 후 2차 항체를 첨가하여 chemiluminescence imager, ImageQuant LAS 4000 mini를 이용하여 신호강도를 측정하였다.
8. Dendrite outgrowth 측정
실험 1에서 재배한 각각의 꽃송이 버섯을 0.1mg/㎖ 및 1mg/㎖의 농도의 용액으로 제조하여 48시간 동안 신경세포에 처리한 후 in vitro에서 대뇌 피질의 수상돌기의 길이를 4일째에 측정하였다. 공초점현미경으로 얻어진 이미지를 ImageJ 프로그램과 NeuronJ 플러그인을 이용하여 세포체로부터 발달되는 수상돌기의 길이를 측정하였다.
9. 통계
실험 결과는 3회 반복 측정하여 평균과 표준편차로 나타내었고, 통계처리는 SPSS (version 23.0)를 사용하였다 GABA 함량에 대한 ANOVA 분석 후 p value가 0.05 이하인 범위에서 유의적 차이를 확인하였고, Duncan's multiple range test로 사후검정하여 a, b, c 문자로 표시하였다. MTT assay와 dendrite outgrowth 결과에 대한 ANOVA 분석 후 p value가 0.001 이하인 범위에서 유의적 차이를 확인하였고, Bonferroni’s comparison test로 사후검정하였다.
실험결과
1. GABA 측정
1.1. ELISA KIT
GABA ELISA Kit로 균사체의 GABA 함량 측정 결과, 모자반 유래 알긴산 나트륨을 0.1% 농도로 처리한 시료 (CM1)의 GABA 함량이 가장 높았다(도 2, 표 3). 자실체에서는 대조군보다 모자반 유래 알긴산 나트륨을 0.1%와 0.5% 농도로 처리한 시료 (CF1, CF2)에서 유의적으로 GABA 함량이 약 3.5~5배 정도 증가하였다.
| Sample | GABA contents (mg/g) |
Sample | GABA contents (mg/g) |
| M CON | 1.13±0.28 | F CON | 0.68±0.22 |
| AM1 | 2.01±0.20 | AF1 | 2.02±0.21 |
| AM2 | 2.00±0.15 | AF2 | 2.81±0.09 |
| BM1 | 2.20±0.48 | BF1 | 2.44±0.07 |
| BM2 | 2.17±0.25 | BF2 | 2.14±0.10 |
| CM1 | 2.50±0.10 | CF1 | 3.19±0.25 |
| CM2 | 2.39±0.18 | CF2 | 2.58±0.30 |
| DM1 | 2.17±0.15 | DF1 | 2.91±0.32 |
| DM2 | 2.12±0.16 | DF2 | 2.23±0.10 |
1.2. HPLC
HPLC 분석결과는 도 3과 같다. 엘리시터 첨가 배지에서 배양된 꽃송이버섯의 GABA 함량 분석 후 one-way ANOVA를 수행하였다 (도 4 및 표 4). 균사체는 0.1% 모자반 알긴산 나트륨 첨가 배지 (CM1) 에서 3.28±0.07 mg/g으로 가장 높은 GABA 함량을 보였고, 자실체는 0.1% 모자반 알긴산 나트륨 첨가 배지 (CF1)에서 2.90±0.09 ㎎/g으로 가장 높은 GABA 함량을 보였고, 0.5% 모자반 알긴산 나트륨 첨가 배지 (CF2)에서 1.93±0.10 mg/g으로 가장 낮은 GABA 함량을 보였으나, 대조군 대비 전체적으로 GABA함량이 증가함을 알 수 있었다.
| Sample | GABA contents (mg/g) |
Sample | GABA contents (mg/g) |
| M CON | 1.56±0.08 | F CON | 0.82±0.10 |
| AM1 | 2.57±0.03 | AF1 | 1.61±0.07 |
| AM2 | 2.87±0.03 | AF2 | 2.35±0.18 |
| BM1 | 3.20±0.02 | BF1 | 2.47±0.01 |
| BM2 | 2.69±0.02 | BF2 | 2.53±0.07 |
| CM1 | 3.28±0.07 | CF1 | 2.90±0.09 |
| CM2 | 2.80±0.05 | CF2 | 1.93±0.10 |
| DM1 | 3.12±0.12 | DF1 | 2.13±0.07 |
| DM2 | 2.90±0.06 | DF2 | 2.22±0.03 |
3. 독성실험결과
꽃송이버섯 균사체와 자실체의 모자반 알긴산 나트륨을 0.1% 농도로 처리한 시료 (CM1, CF1)를 배양된 초대 신경세포에 24시간 동안 처리하여 신경세포 생존률을 분석한 결과 균사체 CM1의 5 ㎎/㎖의 농도를 제외하고는 각각의 시료에서 대조군과 비교하여 유의적인 차이를 보이지 않았다(도 5). 이는 균사체 CM1의 2 ㎎/㎖, 자실체의 5 ㎎/㎖농도까지 꽃송이 버섯이 신경세포에 독성 효과를 보이지 않음을 나타낸다.
4. 초대신경세포 수상돌기 발달 결과
면역형광법을 이용하여 초대 신경세포를 Map2양성/GAD67음성인 흥분성신경세포와 Map2양성/GAD67양성인 억제성신경세포로 분류하였고 ImageJ/NeuronJ 프로그램을 이용하여 하나의 신경세포에서 발달하는 총 수상돌기의 길이를 측정하였다. 결과적으로, 0.1 ㎎/㎖ 농도에서는 각각의 대조군에 비하여 신경세포의 수상돌기의 발달에 유의적인 차이가 없었으나 (도 6), 1 ㎎/㎖ 농도의 자실체 시료인 CF1에서는 대조군에 비해 억제성신경세포가 아닌, 흥분성 신경세포의 수상돌기 길이가 유의적으로 감소하였음을 발견하였다 (도 7).
6. 신경세포 내 신호전달경로의 변화 결과
꽃송이버섯 균사체와 자실체의 모자반 알긴산 나트륨을 0.1% 농도로 처리한 시료 (CM1, CF1)를 초대 신경세포에 20분 동안 처리하여 웨스턴 블롯팅을 이용하여 Akt와 Erk1/2의 인산화를 살펴보았다. 결과적으로 균사체와 자실체의 무처리군과 비교하였을 때 시료에 의한 세포 내 신호전달의 변화는 관찰되지 않았다 (도 8). 이는 꽃송이버섯 추출물이 흥분성 신경세포의 수상돌기 발달에 영향을 미치는 경로가 Phosphoinositide 3-kinase/Akt 혹은 mitogen-activated protein kinase (MAPK)/Erk1/2 신호전달체계가 아닌 다른 경로를 통하여 조절함을 나타내는 것으로 예상된다.
Claims (9)
- 알긴산 나트륨(sodium alginate)을 포함하는 버섯의 감마-아미노부티르산(Gamma-amino butyric acid, GABA) 함량 증가용 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 알긴산 나트륨은 괭생이모자반(Sargassum horneri), 모자반(Sargassum fulvellum) 또는 톳(Sargassum fusiforme) 유래 알긴산 나트륨인, 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 알긴산 나트륨은 중합도(degree of polymerization, DP)가 2 내지 7인, 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 알긴산 나트륨은 조성물 총 중량의 0.05 내지 10% 포함되는, 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 버섯은 꽃송이버섯인, 조성물.
- 버섯에 청구항 1 내지 5 중 어느 한 항의 조성물을 처리하는 단계를 포함하는 GABA 함량이 증가된 버섯의 생산방법.
- 청구항 6에 있어서, 상기 버섯은 꽃송이버섯인, 방법.
- 삭제
- 삭제
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020190177401A KR102396513B1 (ko) | 2019-12-30 | 2019-12-30 | 버섯의 감마-아미노부티르산 함량 증가용 조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020190177401A KR102396513B1 (ko) | 2019-12-30 | 2019-12-30 | 버섯의 감마-아미노부티르산 함량 증가용 조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20210084899A KR20210084899A (ko) | 2021-07-08 |
| KR102396513B1 true KR102396513B1 (ko) | 2022-05-10 |
Family
ID=76893520
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020190177401A KR102396513B1 (ko) | 2019-12-30 | 2019-12-30 | 버섯의 감마-아미노부티르산 함량 증가용 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102396513B1 (ko) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102677806B1 (ko) | 2021-11-16 | 2024-06-25 | 국립군산대학교 산학협력단 | 가바의 함량이 증진된 효소가바쌀 조성물 및 이를 이용한 면류의 제조방법 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000512666A (ja) | 1996-05-22 | 2000-09-26 | ベン―グリオン ユニバーシティー オブ ザ ネゲブ | 細胞培養および移植用の多糖スポンジ |
| KR101799400B1 (ko) * | 2017-06-19 | 2017-11-20 | 조선대학교산학협력단 | 아미노산을 포함하는 꽃송이버섯 균사체의 배양배지 조성물 및 이를 이용한 감마-아미노부티르산이 증진된 꽃송이버섯 균사체 생산 방법 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20070005950A (ko) * | 2005-07-05 | 2007-01-11 | 이인경 | γ-아미노부틸산이 강화된 버섯 배양물의 제조방법 |
| KR101778260B1 (ko) | 2016-01-25 | 2017-09-13 | 충남대학교산학협력단 | 가바 함유량이 높은 김치의 제조 방법 |
-
2019
- 2019-12-30 KR KR1020190177401A patent/KR102396513B1/ko active IP Right Grant
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000512666A (ja) | 1996-05-22 | 2000-09-26 | ベン―グリオン ユニバーシティー オブ ザ ネゲブ | 細胞培養および移植用の多糖スポンジ |
| KR101799400B1 (ko) * | 2017-06-19 | 2017-11-20 | 조선대학교산학협력단 | 아미노산을 포함하는 꽃송이버섯 균사체의 배양배지 조성물 및 이를 이용한 감마-아미노부티르산이 증진된 꽃송이버섯 균사체 생산 방법 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| QIAO Chun-nan et al., ‘Immobile glutamate decarboxylase by sodium alginate’, Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 2008, V.29, No.1, pp. 16-18,22* |
| 이은지, 이삼빈, "Ceriporia lacerata 배양액과 고정화 Lactobacillus plantarum K154를 이용한 감마아미노뷰티르산 생산 최적화", KOREAN J. FOOD SCI. TECHNOL. Vol. 47, No. 4, pp. 438~445 (2015.)* |
| 조한교, ‘배지의 아미노산 첨가가 꽃송이버섯 균사체 성장과 γ-aminobutyric acid (GABA) 생산에 미치는 영향’, 석사학위논문, 조선대학교 대학원 (2016.)* |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20210084899A (ko) | 2021-07-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TW200944120A (en) | Artificial cultivation method for antrodia camphorata | |
| TWI226370B (en) | Isolate of Antrodia camphorata, process for producing a culture of the same and product obtained thereby | |
| KR101908392B1 (ko) | 버섯주의 제조 방법 | |
| KR102396513B1 (ko) | 버섯의 감마-아미노부티르산 함량 증가용 조성물 | |
| KR101411531B1 (ko) | 바나듐을 함유하는 새싹유채의 재배방법 및 이의 방법으로 재배된 새싹유채와 이를 포함하는 당뇨용 기능성 조성물 | |
| KR101174905B1 (ko) | 무독화 옻술 제조방법 | |
| JP3911427B2 (ja) | 新規セスキテルペン系化合物、その製造方法及び組成物 | |
| JP4109572B2 (ja) | 冬虫夏草菌糸体の培養方法及び組成物 | |
| KR101253527B1 (ko) | 숙지황 제조방법 | |
| KR930003886B1 (ko) | 콜레스테롤 저하 기능을 갖는 음식물의 제조방법 | |
| Maľučká et al. | Antioxidant activity and infrared spectroscopy analysis of alcoholic extracts obtained from Paecilomyces hepiali (ascomycetes) | |
| KR100644243B1 (ko) | 동충하초의 재배용 조성물 및 이를 이용한 재배 방법 | |
| KR100723316B1 (ko) | 복령균사체 발효쌀을 이용한 영양강화 기능성 면류 및 그제조방법 | |
| KR100581532B1 (ko) | 노루궁뎅이 버섯 열수추출물의 제조방법 및 이로부터제조되는 노루궁뎅이 버섯 죽 | |
| KR100987395B1 (ko) | 발아 쥐눈이콩을 이용한 기능성 건과류의 제조 방법 | |
| KR101933050B1 (ko) | 콩 발아배아 추출물을 이용한 저염 기능성 된장 및 이의 제조방법 | |
| KR102575880B1 (ko) | 베타글루칸 함량이 증진된 혼합균사체 및 이의 제조방법 | |
| KR20190042174A (ko) | 떫은 맛이 감소된 아로니아 분말 및 이의 제조방법 | |
| KR20190014858A (ko) | 발효곡물 및 그 제조방법 | |
| KR101470523B1 (ko) | 유동층 과립기를 이용한 상황버섯 균사 배양미 과립의 제조 방법 | |
| JP6716623B2 (ja) | エリスロポエチン誘導作用を示す組成物及びその製造方法 | |
| TWI395813B (zh) | 牛樟芝菌絲體固態醱酵產物粗多醣體之製備方法 | |
| KR101784136B1 (ko) | 비타민 c 함량이 증진된 버섯 및 이의 재배용 배지 조성물 | |
| JP4614158B2 (ja) | 新規セスキテルペン系化合物及びその製造方法 | |
| CN116158305A (zh) | 米蕈松露的固态植菌栽培方法、培植基、米蕈松露营养补充品的制法及颗粒结构 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant |