KR102389552B1

KR102389552B1 - Mdm2 저해제 및 이 저해제를 사용하는 치료 방법

Info

Publication number: KR102389552B1
Application number: KR1020167031180A
Authority: KR
Inventors: 샤오멩 왕; 안젤로 아길라; 리우 리우; 지안펭 루; 도나 매키천
Original assignee: 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 미시간
Priority date: 2014-04-17
Filing date: 2015-04-16
Publication date: 2022-04-22
Also published as: EP3131544A1; CN106794171A; US9745314B2; ES2712973T3; JP2020100662A; EP3131544B1; AU2015247646B2; IL248211A0; IL248211B; KR20160136450A; JP6909323B2; CN111718354A; NZ724963A; SG10201913742TA; IL269462B; JP6694827B2; US20150299211A1; AU2015247646A1; EP3131544A4; KR20220054697A

Abstract

MDM2 및 MDM2-관련된 단백질의 저해제 및 이 저해제를 함유하는 조성물이 개시된다. p53과 MDM2 사이의 상호작용의 저해가 이점을 제공하는 질환 및 병태, 예컨대 암의 치료에서 MDM2 저해제를 사용하는 방법이, 또한 개시된다.

Description

MDM2 저해제 및 이 저해제를 사용하는 치료 방법{MDM2 INHIBITORS AND THERAPEUTIC METHODS USING THE SAME}

본 발명은 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질의 저해제 및 병태 및 질환을 치료하는 방법에 관한 것이고, 상기 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질의 저해는 이점을 제공한다.

공격적인 암세포 표현형은 다양한 유전적 및 후생유전적 변이의 결과이며, 이는 세포내 신호전달 경로의 조절상실 (deregulation)을 야기한다 (Ponder, Nature 411:336 (2001)). 암세포는 전형적으로 세포자멸적 프로그램을 실행하지 못하며, 정상적인 세포자멸사 기구에서의 결함으로 인한 적절한 세포자멸사의 결여가 암의 특징으로 간주된다 (Lowe 등, Carcinogenesis 21:485 (2000)). 정상적인 세포자멸적 기구에서의 결함으로 인해 암세포가 세포자멸적 프로그램을 실행하지 못하는 것은 종종 화학요법, 방사선, 또는 면역요법-유도된 세포자멸사에 대한 내성 증가와 연관된다. 세포자멸사 결함으로 인한 현 치료 프로토콜에 대한 상이한 기원의 인간 암의 일차 또는 획득된 내성이 현재의 암 요법에서 주요 문제이다 (Lowe 등, Carcinogenesis 21:485 (2000); Nicholson, Nature 407:810 (2000)). 따라서, 암 환자의 생존 및 삶의 질을 개선하기 위해 새로운 분자 표적-특이적 항암 요법을 설계하고 개발하고자 하는 현재 및 미래의 노력들은 세포자멸사에 대한 암세포 내성을 특이적으로 표적화하는 전략을 포함해야 한다.

p53 종양 억제자는 세포 주기 진행, 노화, 및 세포자멸사를 제어하는데 있어 중추적 역할을 한다 (Vogelstein 등, Nature 408:307 (2000); Goberdhan, Cancer Cell 7:505 (2005)). MDM2 및 p53은 자가-조절성 피드백 루프의 부분이다 (Wu 등, Genes Dev . 7:1126 (1993)). MDM2는 p53에 의해 전사적으로 활성화되며, 반대로 MDM2는 적어도 3가지 기전에 의해 p53 활성을 억제한다 (Wu 등, Genes Dev . 7:1126 (1993)). 첫째, MDM2 단백질이 p53 전사활성화 도메인에 직접 결합하여 p53-매개된 전사활성화를 억제한다. 둘째, MDM2 단백질은 핵 유출 신호 서열 (nuclear export signal sequence)을 함유하며, p53에 결합시, p53의 핵 유출을 유도하여, p53이 표적화된 DNA에 결합하는 것을 방지한다. 셋째, MDM2 단백질은 E3 유비퀴틴 리가제이며, p53에 결합시 p53 분해를 촉진할 수 있다.

과거에 MDM2의 고친화성 펩타이드-기반 저해제가 성공적으로 설계되어 왔음에도 불구하고 (Garcia-Echeverria 등, Med . Chem . 43:3205 (2000)), 이들 저해제는 좋지 않은 세포 투과성 및 생체내 생체이용률 때문에 적합한 치료용 분자는 아니다. 지난 몇 년간, 강력한, 비-펩타이드, 소분자 MDM2 저해제를 발견하였다는 보고가 있었다. 예를 들면, 미국 특허 제7,851,626호; 제8,088,815호; 제7,759,383호; 제7,737,174; 및 8,629,141; 미국 특허 출원 공개 제2012/0046306호; 제2010/0152190호; 제2011/0112052호; 제2012/0122947호; 국제 특허 출원 공개 WO 제2011/153509호; WO 제2013/049250호; 문헌, Vassilev 등 Science 2004, 303, 844-48; Vu, 등 ACS Med . Chem . Lett ., 2013, 4 (5), 466-69; Zhang , 등 ACS Med . Chem . Lett ., 2014, 5 (2), 124-27; Ding 등., J. Med . Chem ., 2013, 56 (14), 5979-83; Shu, 등 Org . Process Res. Dev ., 2013, 17 (2), 247-56; Zhao, 등 J. Med . Chem ., 2013, 56 (13), 5553-61; Zhao, 등 J. Am. Chem . Soc., 2013, 135 (19), 7223-34; Sun 등 J. Med . Chem ., 2014, 57 (4), 1454-72; Turiso 등, J. Med. Chem ., 2013, 56 (10), 4053-70; 및 Rew 등 J. Med . Chem ., 2012, 55 (11), 4936-54)을 참고한다. 이러한 주요한 발전에도 불구하고, 치료적 적용에서 사용될 수 있는 적합한 이화학적 및 약리적 특성을 갖는 강력한, 비-펩타이드 MDM2 저해제를 확인하는 것이 여전히 요구된다.

본 발명은 MDM2-p53 상호작용을 억제하고, 따라서 치료적 적용을 위해 p53 및 p53-관련된 단백질의 기능을 활성화하도록 설계된 화합물을 제공한다.

발명의 요약

본 발명은 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질의 저해제, 상기 저해제를 포함하는 조성물, 및 병태 및 질환의 치료적 처치에서 상기 저해제를 사용하는 방법에 관한 것이고, 여기서 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질의 저해 활성은 이점을 제공한다.

따라서, 본 발명은 그것의 화학 용액 안정성의 개선을 설명할 뿐만 아니라 인간 골육종의 동물 모델에서 완벽한 종양 퇴행을 달성하는 것을 포함하는, 예기치 못한 개선된 항종양 활성을 나타내는 구조식 (I)의 화합물을 제공한다.

더 상세하게는, 본 발명은 구조식 (I)로 나타낸 화합물 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:

식 중,

은

및

로 구성된 군으로부터 선택되고;

B는 C_4-7카보사이클릭 고리이고;

R₁은 H, 치환된 또는 비치환된 C_1- ₄알킬, 치환된 또는 비치환된 사이클로알킬, 치환된 또는 비치환된 헤테로사이클로알킬, OR^a, 또는 NR^aR^b이고;

n은 0, 1, 또는 2이고;

R_2, R_3, R_4, R_5, R_7, R_8, R_9, 및 R₁₀은, H, F, Cl, CH₃, 및 CF₃로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;

R₆은

또는

이고;

R^a는 수소 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-4알킬이고;

R^b는 수소 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-4알킬이고;

R^c 및 R^d는 고리 B의 하나의 탄소 원자에 대한 치환체이고, 여기서

R^c는 H, C_1- ₃알킬, C_1- ₃알킬렌OR^a, OR^a, 또는 할로이고;

R^d는 H, C_1- ₃알킬, C_1- ₃알킬렌OR^a, OR^a, 또는 할로이거나; 또는

R^c 및 R^d는, 이들이 부착된 탄소와 함께 합쳐져서, 임의로 산소 원자를 함유하는 4 내지 6-원 스피로 치환체를 형성하고; 그리고

R^e는 -C(=O)OR^a, -C(=O)NR^aR^b, 또는 -C(=O)NHSO₂CH₃이다.

일 구현예에서, 본 발명은 치료적 유효량의 구조식 (I)의 화합물을 치료를 필요로 하는 개체에게 투여하여 병태 또는 질환을 치료하는 방법을 제공한다. 관심 병태 또는 질환은 MDM2 및 MDM-2 관련된 단백질의 저해에 의해 치료 가능하고, 그 예는 암 또는 과증식성 장애이다.

구조식 (I)의 화합물은 p53 또는 p53-관련된 단백질 및 MDM2 또는 MDM2-관련된 단백질 사이의 상호작용을 억제한다. 따라서, 또 다른 구현예에서, 본 방법은 기능적 p53 또는 p53-관련된 단백질을 함유하는 세포 노화, 세포 주기 정지, 및/또는 세포자멸사를 유도하기 위해 제공되고, 상기 방법은, 상기 세포를 구조식 (I)의 화합물과 접촉시키는 것을 포함한다.

또 다른 구현예는 환자에서 과증식성 질환, 예를 들면, 암, 예들 들면, 부신 피질 암, 진행암, 항문암, 재생불량빈혈, 담도암, 방광암, 골 암, 골 전이, 성인의 뇌/CNS 종양, 소아의 뇌/CNS 종양, 유방암, 남성의 유방암, 소아의 암, 미공지된 일차의 암, 캐슬만 질환, 자궁경부암, 결장/직장 암, 자궁내막 암, 식도 암, 유잉 계열의 종양, 안암, 담낭암, 위장 유암종, 위장 기질 종양 (GIST), 임신성 융모성 질환, 호지킨 질환, 카포시 육종, 신장암, 후두 및 하인두 암, 성인의 백혈병 - 급성 림프구 (ALL), 백혈병 - 급성 골수 (AML), 백혈병 - 만성적 림프구성 (CLL), 백혈병 - 만성적 골수성 (CML), 백혈병 - 만성적 골수단구 (CMML), 소아의 백혈병, 간암, 폐암 - 비-소세포, 폐암 - 소세포, 폐 유암종, 피부의 림프종, 악성 중피종, 다발성 골수종, 골수이형성 증후군, 비강 및 부비동 암, 비인두 암, 신경교세포종, 비-호지킨 림프종, 소아의 비-호지킨 림프종, 구강 및 구강인두 암, 골육종, 난소암, 췌장암, 음경암, 뇌하수체 종양, 전립선암, 망막모세포종, 횡문근육종, 타액샘 암, 육종 - 성인 연조직 암, 피부암 - 기저 및 편평상피 세포, 피부암 - 흑색종, 작은 창자 암, 위암, 고환암, 가슴샘 암, 갑상선암, 자궁 육종, 질암, 외음부암, 발덴스트롬 거대글로불린혈증, 또는 윌름스 종양을 치료, 완화 또는 예방하는 방법을 제공하고, 상기 방법은, 상기 환자에게 구조식 (I)의 화합물을 투여하는 것을 포함한다.

본 발명의 또 다른 구현예는 (a) 구조식 (I)의 MDM2 저해제 및 (b) 부형제 및/또는 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 조성물를 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 구현예는 질환 또는 병태에 대해 개체를 치료하는 방법에서 구조식 (I)의 화합물 및 제2 치료적 활성제를 포함하는 조성물을 이용하는 것이고, 여기서 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질의 저해는 이점을 제공한다.

또 다른 구현예에서, 포유동물의 정상 (예를 들면, 비-과증식성) 세포를 화학치료제 및 치료의 독성 부작용으로부터 보호하는 방법이 제공된다. 이러한 방법은 포유동물에게 치료적-유효량의 1종 이상의 구조식 (I)의 화합물을 투여하는 것을 포함한다.

추가 구현예에서, 본 발명은 관심 병태 또는 질환, 예를 들면, 암을 치료하는 약제의 제조를 위한, 구조식 (I)의 MDM2 저해제 및 선택적인 제2 치료제를 포함하는 조성물의 용도를 제공한다.

본 발명의 또 다른 구현예는 (a) 용기, (b1) 구조식 (I)의 MDM2 저해제를 포함하는 포장된 조성물, 및, 임의로, (b2) 관심 질환 또는 병태의 치료에서 유용한 제2 치료제를 포함하는 포장된 조성물, 및 (c) 질환 또는 병태의 치료에서 동시에 또는 순차적으로 투여된 조성물 또는 조성물들의 사용상의 주의사항을 수용하고 있는 포장 삽입물을 포함하는 인간 약제학적 용도를 위한 키트를 제공하는 것이다.

구조식 (I)의 MDM2 저해제 및 제2 치료제, 예를 들면, 항암제는, 단일-단위 용량으로서 함께 또는 다중-단위 용량으로 별개로 투여될 수 있고, 여기서 상기 구조식 (I)의 MDM2 저해제는 제2 치료제 전에 투여되거나 그 반대로 투여된다. 구조식 (I)의 MDM2 저해제의 1종 이상의 용량 및/또는 제2 치료제의 1종 이상의 용량이 투여될 수 있는 것으로 구상된다.

일 구현예에서, 구조식 (I)의 MDM2 저해제 및 제2 치료제는 동시에 투여된다. 관련 구현예에서, 구조식 (I)의 MDM2 저해제 및 제2 치료제는 단일 조성물로부터 또는 별도의 조성물로부터 투여된다. 추가 구현예에서, 구조식 (I)의 MDM2 저해제 및 제2 치료제는 순차적으로 투여된다. 구조식 (I)의 MDM2 저해제는, 본 발명에서 사용된 바와 같이, 용량 당 약 0.005 내지 약 500 밀리그램, 용량 당 약 0.05 내지 약 250 밀리그램, 또는 용량 당 약 0.5 내지 약 100 밀리그램의 양으로 투여될 수 있다.

본 발명의 이들 및 다른 구현예 및 특징은 바람직한 구현예의 하기 상세한 설명으로부터 분명해질 것이다.

도면의 간단한 설명

도 1A는 1:1 CH₃CN/H₂O에서 화합물 AA-MI-061, 화합물 번호 2, 화합물 번호 7, 및 화합물 번호 8에 대한 순도 % 대 시간 (일)의 그래프를 포함한다.

도 1B는 1:1 MeOH/H₂O에서 화합물 AA-MI-061, 화합물 번호 2, 화합물 번호 7, 및 화합물 번호 8에 대한 순도 % 대 시간 (일)의 그래프를 포함한다.

도 1C는 세포 배양 배지에서 화합물 AA-MI-061, 화합물 번호 2, 화합물 번호 7, 및 화합물 번호 8에 대한 순도 % 대 시간 (일)의 그래프를 포함한다.

도 2A는 SJSA-1 이종이식 모델에서 종양 퇴행을 위한 다양한 시험된 화합물의 효능을 보여주는 평균 종양 부피 (mm³) 대 시간 (일)의 그래프를 포함한다.

도 2B는 SJSA-1 이종이식 모델에서 종양 퇴행을 위한 다양한 시험된 화합물의 효능을 보여주는 평균 종양 부피 (mm³) 대 시간 (일)의 그래프를 포함한다.

도 3은 SJSA-1 이종이식 모델에서 종양 퇴행을 위한 화합물 번호 8의 다양한 용량 및 용량 스케줄의 효능을 보여주는 평균 종양 부피 (mm³) 대 시간 (일)의 그래프를 포함한다.

바람직한 구현예의 상세한 설명

스피로-옥신돌-기반의 길항제는 p53-MDM2 상호작용의 저해제의 부류이며, 미국 특허 제7,759,383호, 제7,737,174호, 및 제8,629,141호에 기재되어 있다. 일부 스피로-옥신돌 MDM2 저해제는 양성자성 (protic) 용액에서, 하나의 부분입체이성질체로부터 3개의 다른 부분입체이성질체로 빠르게 전환되었다 (Zhao, 등 J Am Chem Soc. 2013, 135(19):7223-34). 미국 특허 제8,629,141호에 기재된 것들과 같이, 스피로-옥신돌 MDM2 저해제의 화학적 안정성을 개선하기 위한 노력이 있었다. 예를 들면, 반응식 1에 나타난 화합물은 덜 강력한 부분입체이성질체로부터 미국 특허 제8,629,141호에서의 MDM2 저해제와 같이 더 강력하고 화학적으로 더 안정한 부분입체이성질체로 빠르게 이성질화하는 것으로 나타났다.

반응식 1. MDM2에 대한 덜 강력한 부분입체이성질체로부터 MDM2에 대한 더 강력한 부분입체이성질체로의 전환

카복사마이드 치환체 R이 AA-MI-061에서와 같이 벤조산일 때, 상기 화합물은 MDM2에 대한 높은 결합 친화성, SJSA-1 세포에서 강력한 세포 성장 억제 및 SJSA-1 이종이식을 갖는 SCID 마우스에서 90% 종양 퇴행 (100 mg/kg, 1회, 매일 투여)을 입증하였다 (도 2A). 상기 벤조산 카복사마이드 치환체를 함유하는 몇 가지 다른 부류의 스피로-옥신돌 화합물 (미국 특허 출원 공개 2011, US 제20110130398호, Shu 등 Org. Process Res. Dev., 2013, 17 (2), 247-56, 및 Zhang 등 ACS Med. Chem. Lett., 2014, 5 (2), 124-27) 및 피롤리딘 (Ding 등 J. Med. Chem., 2013, 56 (14), 5979-83, 및 미국 특허 출원 공개 US 제20100152190호, 2010)은 MDM2에 대한 높은 결합 친화성, 동물에서 우수한 경구 약동학, 및 인간 암의 동물 모델에서 강한 항종양 활성을 나타내었다. 이는 새로운 MDM2 저해제 (반응식 II)를 설계하기 위해 상기 벤조산 기의 대체를 조사하는 것을 촉발시켰다.

반응식 2. 벤조산 기의 대체를 이용하여 설계된 새로운 MDM2 저해제.

본 발명에 따라, AA-MI-061에서 카복사마이드의 벤조산 치환체가 비-고전적 벤조산 생동등체 (bioisostere) (J. Med. Chem. 2012, 55, 3414), 예컨대 바이사이클로[1.1.1]펜탄-1-카복실산 기 또는 바이사이클로[2.2.2]옥탄-1-카복실산 기으로 대체되었고, 이는 각각 화합물 번호 1 및 화합물 번호 2를 생산하였다 (반응식 2). 화합물 번호 1은 MDM2 단백질에 대해 높은 결합 친화성을 유지하였지만, AA-MI-061와 비교하여, SJSA-1 세포에서 세포 성장 억제 활성에서 감소된 효능을 가지고 있었다. 다른 한편으로, 바이사이클로[2.2.2]옥탄-1-카복실산 기를 함유하는 화합물 번호 2는 MDM2 단백질에 대해 높은 결합 친화성, 및 SJSA-1 세포에서 강력한 세포 성장 억제 활성을 유지하였고, 이는 AA-MI-061에 대해 수득된 효능과 유사하였다. 그러나, 화합물 번호 2는 종양 퇴행을 달성하지 못하고 단지 SJSA-1 이종이식 종양을 갖는 마우스에서의 성장을 억제하는, 단지 보통의 항종양 활성을 여전히 나타내었다 (도 2B).

동물에서 화합물 번호 2의 항종양 활성을 개선하기 위한 노력으로, 피롤리딘 질소의 알킬화는 화합물 번호 7 및 번호 8을 포함하는 일련의 화합물을 생산하였다. 화합물 번호 7 및 번호 8은 MDM2에 대한 높은 결합 친화성를 보유하였고 용액에서 안정하였다 (도 1). 예상외로, 화합물 번호 7 및 번호 8은 SJSA-1 이종이식 종양을 갖는 마우스에서 화합물 번호 2보다 훨씬 더 강한 항종양 활성을 나타내었다. 구체적으로, 화합물 번호 7 및 번호 8은 SJSA-1 이종이식 종양을 갖는 마우스에서 완벽한 그리고 지속적인 종양 퇴행을 입증하였다 (도 2B).

따라서 p53 또는 p53-관련된 단백질 및 MDM2 또는 MDM2-관련된 단백질 간의 상호작용을 억제하는 구조식 (I)의 화합물의 화합물이 본원에서 제공된다. p53 또는 p53-관련된 단백질에 대한 MDM2 또는 MDM2-관련된 단백질의 부정적인 효과를 억제함으로써, 본 발명의 화합물은 세포를 세포자멸사 및/또는 세포 주기 정지의 유발제에 대해 감작시킨다. 일 구현예에서, 본 화합물은 세포자멸사 및/또는 세포 주기 정지를 유도한다. 따라서, 세포를 세포자멸사 및/또는 세포 주기 정지의 유도제에 대해 감작시키는 방법 및 세포에서 세포자멸사 및/또는 세포 주기 정지를 유도하는 방법이 또한 본원에 제공된다. 상기 방법은 구조식 (I)을 갖는 1종 이상의 화합물을 단독으로 또는 추가 제제(들), 예를 들면, 세포자멸사 또는 세포 주기 장애물질의 유도제와 조합하여 세포와 접촉시키는 것을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "MDM2-관련된 단백질"은 MDM2와 적어도 25% 서열 상동성을 가지고, p53 또는 p53-관련된 단백질과 상호작용하고 이를 억제하는 단백질을 지칭한다. MDM2-관련된 단백질의 예는, 비제한적으로, MDMX를 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "기능적 p53"은 정상, 높은, 또는 낮은 수준으로 발현된 야생형 p53 및 야생형 p53의 활성의 적어도 약 5%, 예를 들면, 야생형 활성의 적어도 약 10%, 약 20%, 약 30%, 약 40%, 약 50%, 또는 그 이상을 보유하는 p53의 돌연변이체 또는 대립유전자 변이체를 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "p53-관련된 단백질"은 p53과 적어도 25% 서열 상동성을 가지고, 종양 억제 활성을 가지며, MDM2 또는 MDM2-관련된 단백질과의 상호작용에 의해 억제되는 단백질을 지칭한다. p53-관련된 단백질의 예는, 비제한적으로, p63 및 p73을 포함한다.

용어 "질환" 또는 "병태"는 원칙적으로 병리학적 상태 또는 기능으로 간주되고, 특정한 징후, 증상, 및/또는 기능이상의 형태로 나타날 수 있는 장애 및/또는 이상을 가리킨다. 하기에 입증된 바와 같이, 구조식 (I)의 화합물은 p53 및 p53-관련된 단백질 및 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질 간의 상호작용의 강력한 저해제이며, 상기 억제가 이점을 제공하는 질환 및 병태를 치료하는데 사용될 수 있다.

용어 "MDM2 또는 MDM2-관련된 단백질의 저해가 이점을 제공하는 질환 또는 병태"는 p53 또는 p53-관련된 단백질 및 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질 간의 상호작용을 억제하는 것이, 예를 들면, 상기 질환 또는 병태, 또는 MDM2 또는 MDM2-관련된 단백질 저해제에 의해 치료되는 것으로 알려진 질환 또는 병태의 개시, 진행, 발현에 중요하거나 필요한 병태와 관계가 있다. 그와 같은 병태의 예는, 비제한적으로, 암을 포함한다. 당해분야의 숙련가는, 예를 들면, 특정한 화합물의 활성을 평가하는데 편리하게 사용될 수 있는 검정에 의해, 임의의 특정한 세포형에 대해, 화합물이 MDM2 또는 MDM2-관련된 단백질에 의해 매개된 질환 또는 병태를 치료하는지 여부를 쉽게 결정할 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "과증식성 질환"은 동물에서 증식 세포의 국한된 집단이 정상적인 성장의 통상적인 제한에 의해 지배되지 않는 임의의 병태를 지칭한다. 과증식성 장애의 예는 종양, 신생물, 림프종, 백혈병 등을 포함한다. 만약 신생물이 침습 또는 전이를 겪지 않는 한 양성이라고 하며, 만약 신생물이 이들 중 어느 하나를 겪으면 악성이라고 한다. "전이성" 세포는 세포가 인접하는 신체 구조를 침습할 수 있다는 것을 의미한다. 과다형성은 구조 또는 기능에서 유의미한 변경 없이 조직 또는 장기에서 세포 수의 증가를 수반하는 세포 증식의 형태이다. 화생 (Metaplasia)은 완전히 분화된 세포의 한 가지 유형이 분화된 세포의 또 다른 유형을 대체하는 제어된 세포 성장의 형태이다.

활성화된 림프모양 세포의 병리적 성장은 종종 자가면역 장애 또는 만성적 염증성 병태를 야기한다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "자가면역 장애"는 유기체가 유기체 자신의 분자, 세포 또는 조직을 인식하는 항체 또는 면역 세포를 생산하는 임의의 병태를 지칭한다. 자가면역 장애의 비-제한적인 예는 자가면역 용혈성 빈혈, 자가면역 간염, 버거 질환 또는 IgA 신병증, 셀리악 스프루, 만성적 피로 증후군, 크론병, 피부근염, 섬유근육통, 이식편 대 숙주 질환, 그레이브병, 하시모토 갑상선염, 특발성 혈소판감소증 자반병, 편평 태선, 다발성 경화증, 중증 근무력증, 건선, 류마티스성 열, 류마티스성 관절염, 경피증, 쇼그렌 증후군, 전신 홍반성 낭창, 1형 당뇨병, 궤양성 대장염, 백반증 등을 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "노화"는 비-암성 2배체 세포가 분열하는 능력을 상실하는 현상을 지칭하며, 부분적으로 텔로머 기능이상 또는 단축을 특징으로 한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어들 "감작하다" 및 "감작하는"은 제1 치료제 (예를 들면, 본원에서 제공된 화합물)의 투여를 통하여, 동물 또는 동물 내의 세포를 제2 치료제의 생물학적 효과 (예를 들면, 비제한적으로, 세포 분열, 세포 성장, 증식, 침습, 혈관신생, 괴사, 또는 세포자멸사를 포함하는, 세포 기능의 측면의 촉진 또는 지연)에 더 민감하게 만들거나 더 반응하게 만드는 것을 지칭한다. 표적 세포에 대한 제1 제제의 감작 효과는 제1 제제의 투여와 함께 그리고 제1 제제의 투여 없이 제2 제제의 투여시에 관찰된 의도된 생물학적 효과 (예를 들면, 비제한적으로, 세포 성장, 증식, 침습, 혈관신생, 또는 세포자멸사를 포함하는, 세포 기능의 측면의 촉진 또는 지연)의 차이로서 측정될 수 있다. 감작화된 세포의 반응은 제1 제제의 부재시의 반응보다 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 적어도 약 30%, 적어도 약 40%, 적어도 약 50%, 적어도 약 60%, 적어도 약 70%, 적어도 약 80%, 적어도 약 90%, 적어도 약 100%, 적어도 약 150%, 적어도 약 200%, 적어도 약 250%, 적어도 300%, 적어도 약 350%, 적어도 약 400%, 적어도 약 450%, 또는 적어도 약 500%까지 증가될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "세포자멸사의 조절장애"는 세포자멸사를 통해 세포 사멸을 겪는 세포의 능력 (예를 들면, 성향)의 임의의 이상을 지칭한다. 세포자멸사의 조절장애는 다양한 병태와 연관되거나 이에 의해 유도되며, 이의 비-제한적인 예는 자가면역 장애 (예를 들면, 전신 홍반성 낭창, 류마티스성 관절염, 이식편 대 숙주 질환, 중증 근무력증, 또는 쇼그렌 증후군), 만성적 염증성 병태 (예를 들면, 건선, 천식 또는 크론병), 과증식성 장애 (예를 들면, 종양, B 세포 림프종, 또는 T 세포 림프종), 바이러스성 감염 (예를 들면, 헤르페스, 유두종, 또는 HIV), 및 다른 병태, 예컨대 골관절염 및 죽상경화증을 포함한다. 조절장애가 바이러스성 감염에 의해 유도되거나 이와 연관되는 경우, 조절장애가 일어나거나 관찰되는 시점에 바이러스성 간염이 검출되거나 검출되지 않을 수 있다는 점에 주목해야 한다. 즉, 바이러스-유도된 조절장애는 바이러스성 감염의 증상이 사라진 후에도 일어날 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "신생물성 질환"은 양성 (비-암성) 또는 악성 (암성)인 세포의 임의의 비정상 성장을 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "정상 세포"는 비정상 성장 또는 분열을 겪고 있지 않은 세포를 지칭한다. 정상 세포는 비-암성이고 임의의 과증식성 질환 또는 장애의 일부가 아니다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "항-신생물성 제제"는 표적화된 (예를 들면, 악성) 신생물의 증식, 성장, 또는 확산을 지연시키는 임의의 화합물을 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "세포자멸사-조절제"는 세포자멸사를 조절하는데 (예를 들면, 억제하고, 감소시키고, 증가시키고, 촉진하는데) 관여하는 제제를 지칭한다. 세포자멸사-조절제의 예는 비제한적으로, Fas/CD95, TRAMP, TNF RI, DR1, DR2, DR3, DR4, DR5, DR6, FADD, 및 RIP와 같은 사멸 도메인 (death domain)을 포함하는 단백질을 포함한다. 세포자멸사-조절제의 다른 예는, 비제한적으로, TNFα, Fas 리간드, Fas/CD95 및 다른 TNF 패밀리 수용체에 대한 항체, TRAIL (Apo2 리간드 또는 Apo2L/TRAIL로도 공지됨), TRAIL-R1 또는 TRAIL-R2에 대한 항체, Bcl-2, p53, BAX, BAD, Akt, CAD, PI3 키나제, PP1, 및 카스파제 단백질을 포함한다. 조절제는 광범위하게는 TNF 패밀리 수용체 및 TNF 패밀리 리간드의 효능제 및 길항제를 포함한다. 세포자멸사-조절제는 가용성이거나 막 결합될 수 있다 (예를 들면 리간드 또는 수용체). 세포자멸사-조절제는 세포자멸사의 유도제인 것들, 예컨대 TNF 또는 TNF-관련된 리간드, 특히 TRAMP 리간드, Fas/CD95 리간드, TNFR-1 리간드, 또는 TRAIL을 포함한다.

용어 "제2 치료제"는 구조식 (I)의 MDM2 저해제와 상이하고, 관심있는 병태 또는 질환을 치료하는 것으로 알려진 치료제를 지칭한다. 예를 들면, 암이 관심있는 병태 또는 질환일 때, 제2 치료제는 항암제일 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어 "항암제"는 과증식성 질환, 예컨대 암 (예를 들면, 포유동물에서, 그리고 특히 인간에서)의 치료에서 사용된, 임의의 치료제 (예를 들면, 화학치료용 화합물 및/또는 분자 치료용 화합물), 안티센스 요법, 방사선 요법, 또는 수술 개입을 지칭한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어들 "치료하다," "치료하는 것," "치료," 등은 이와 관련된 질환 또는 병태, 및/또는 증상을 제거하거나, 감소시키거나, 개선하는 것을 지칭한다. 배제하는 것이 아님에도 불구하고, 질환 또는 병태를 치료하는 것은 이와 관련된 질환, 병태, 또는 증상이 완전히 제거될 것을 요구하지 않는다. 본원에서 사용된 바와 같이, 용어들 "치료하다," "치료하는 것," "치료," 등은 "예방적 치료"를 포함할 수 있고, 이는 질환 또는 병태를 갖지는 않지만, 질환 또는 병태를 다시 발전시키거나 질환 또는 병태가 재발할 위험성이 있거나 이에 민감한 대상체에서, 질환 또는 병태가 다시 발전할 개연성 또는 이전에 제어된 질환 또는 병태가 재발할 개연성을 감소시키는 것을 지칭한다. 용어 "치료하다" 및 동의어는 본 발명의 화합물의 치료적 유효량을 그와 같은 치료를 필요로 하는 개체에게 투여하는 것을 고려한다.

본 발명의 의미 내에서, "치료"는 또한 재발 예방 또는 단계 예방뿐만 아니라 급성 또는 만성적 징후, 증상 및/또는 기능이상의 치료를 포함한다. 치료는 징후에 의하여 조정될 수 있고, 예를 들면, 증상을 억제하기 위해 조정될 수 있다. 그것은 짧은 기간 동안 달성될 수 있거나, 중간 기간 동안 조정될 수 있거나, 또는 예를 들면 유지 요법의 맥락에서, 장기간 치료일 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이 용어 "치료적 유효량" 또는 "유효한 용량"은, 본 발명의 방법에 의해 투여될 때, 이를 필요한 개체에게 관심있는 병태 또는 질환의 치료를 위한 활성 성분(들)을 효과적으로 전달하는데 충분한 활성 성분(들)의 양을 지칭한다. 암 또는 다른 증식 장애의 경우, 제제의 치료적 유효량은 원치않는 세포 증식을 감소시키고 (즉, 어느 정도 지연시키고, 바람직하게는 정지시키고); 암세포의 수를 감소시키고; 종양 크기를 감소시키고; 암세포가 말초 기관 내로 침윤하는 것을 억제하고 (즉, 어느 정도 지연시키고, 바람직하게는 정지시키고); 종양 전이를 억제하고 (즉, 어느 정도 지연시키고, 바람직하게는 정지시키고); 어느 정도 종양 성장을 억제하고; p53 및 p53-관련된 단백질과의 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질 상호작용을 감소시키고/거나; 암과 연관된 증상 중 하나 이상을 적어도 5%, 적어도 10%, 적어도 15%, 적어도 20%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95%, 또는 100%까지 어느 정도 경감시킬 수 있다. 투여된 화합물 또는 조성물이 현존하는 암세포의 성장을 방지하고/거나 사멸시키는 정도까지, 그것은 세포증식억제성 및/또는 세포독성일 수 있다.

용어 "용기"는 의약품을 보관하고, 운송하고, 분주하고/거나 취급하는데 적합한 임의의 통 (receptacle) 및 이를 위한 마개 (closure)를 의미한다.

용어 "삽입물"은, 의사, 약사, 및 환자가 제품의 사용에 관하여 현명한 결정을 하는데 필요한 안전성 및 효능 데이터와 더불어, 제품을 투여하는 방법에 관한 설명을 제공하는 의약품과 동봉되는 정보를 의미한다. 포장 삽입물은 일반적으로 의약품을 위한 "라벨"로서 간주된다.

"병행 투여 (Concurrent administration)," "조합으로 투여된," "동시 투여," 및 유사한 어구는 둘 이상의 제제가 치료될 대상체에게 동시에 투여된다는 것을 의미한다. "동시에"는 각각의 제제가 동시에 또는 상이한 시점에 임의의 순서로 순차적으로 투여되는 것을 의미한다. 그러나, 만약 동시에 투여되지 않는 한, 그것은 이들이 원하는 치료 효과를 제공하기 위하여 순서대로 그리고 충분히 근접한 시간 간격으로 개체에게 투여되고 이들이 같이 작용한다는 것을 의미한다. 예를 들면, 구조식 (I)의 MDM2 저해제는 제2 치료제와 동시에 또는 상이한 시점에 임의의 순서로 순차적으로 투여될 수 있다. 본 발명의 MDM2 저해제 및 제2 치료제는, 임의의 적절한 형태로 그리고 임의의 적합한 경로에 의해 별도로 투여될 수 있다. 본 발명의 MDM2 저해제 및 제2 치료제가 동시에 투여되지 않는 경우, 이들이 이를 필요로 하는 대상체에게 임의의 순서로 투여될 수 있는 것으로 이해된다. 예를 들면, 본 발명의 MDM2 저해제는, 이를 필요로 하는 개체에게, 제2 치료제 치료 양식 (예를 들면, 방사선요법)의 투여 전 (예를 들면, 5분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간, 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 8주, 또는 12주 전), 이와 함께, 또는 이후 (예를 들면, 5분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간, 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 8주, 또는 12주 후)에 투여될 수 있다. 다양한 구현예에서, 구조식 (I)의 MDM2 저해제 및 제2 치료제는 투여된 1분 떨어져, 10분 떨어져, 30분 떨어져, 1시간 미만 떨어져, 1시간 떨어져, 1시간 내지 2시간 떨어져, 2시간 내지 3시간 떨어져, 3시간 내지 4시간 떨어져, 4시간 내지 5시간 떨어져, 5시간 내지 6시간 떨어져, 6시간 내지 7시간 떨어져, 7시간 내지 8시간 떨어져, 8시간 내지 9시간 떨어져, 9시간 내지 10시간 떨어져, 10시간 내지 11시간 떨어져, 11시간 내지 12시간 떨어져, 24시간 이내로 떨어져 또는 48시간 이내로 떨어져 투여된다. 일 구현예에서, 조합 요법의 성분들은 1분 내지 24시간 떨어져 투여된다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어들 "박동성 (pulsatile) 투여," "박동성 용량 투여" 또는 "박동성 투여 (dosing)"는 환자에게 구조식 (I)의 화합물을 간헐적 (즉, 비지속적)으로 투여하는 것을 지칭한다. 본 개시내용에서 유용한 박동성 용량 투여 요법은 이를 필요로 하는 환자에게 구조식 (I)의 화합물의 치료적 유효량을 제공하는 임의의 불연속적 투여 요법을 포함한다. 박동성 투여 요법은 연속 투여 요법에서 사용될 것과 동등하거나, 더 낮거나 또는 더 높은 용량의 구조식 (I)의화합물을 사용할 수 있다. 구조식 (I)의 화합물의 박동성 용량 투여의 이점은, 비제한적으로, 개선된 안전성, 감소된 독성, 증가된 노출, 증가된 효능, 및 증가된 환자 순응도를 포함한다. 이들 이점은 구조식 (I)의 화합물이 단일 제제로서 투여되거나 1종 이상의 추하의 항암제와 조합하여 투여될 때 실현될 수 있다. 구조식 (I)의 화합물이 환자에게 투여되기로 예정된 날에, 투여는 단일 또는 분할 용량으로, 예를 들면, 1일에 1회, 1일에 2회, 1일에 3회, 1일에 4회 또는 그 이상으로 일어날 수 있다. 일 구현예에서, 구조식 (I)을 갖는 화합물은 그것이 투여되기로 예정된 날에 1회 (QD) 또는 2회 (BID) 투여된다.

본 발명을 기술하는 맥락에서 (특히 청구범위의 맥락에서) 용어 단수형, 및 유사한 지시대상의 사용은 다르게 명시되지 않는 한 단수 및 복수 모두를 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 본원에서 값의 범위의 설명은 본원에서 다르게 명시되지 않는 한, 상기 범위에 속하는 각각의 별개의 값을 개별적으로 지칭하는 속기법으로서 제공되는 것으로 의도되며, 각각의 별개의 값은 마치 그것이 개별적으로 본원에서 인용되는 것처럼 명세서 내에 통합된다. 본원에 제공된 모든 예, 또는 예시적인 표현 (예를 들면, "예컨대")의 사용은 본 발명을 더 잘 예시하기 위한 것이며 달리 청구되지 않는 한 본 발명의 범위를 제한하고자 하는 것이 아니다. 명세서 내의 어떤 표현도 어떤 청구되지 않은 요소를 본 발명의 실시에 필수적인 것으로 가리키는 것으로서 해석되어서는 안된다.

조사가 소분자 저해제를 이용하여 p53-MDM2 상호작용을 표적화하는 것이 실행가능한 암 치료 전략임을 확립해왔다. MDM2 저해제의 종래의 발견 및 이전 데이터는 MDM2-p53 상호작용의 비-펩타이드, 소분자 저해제가 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질이 역할을 하는 질환 및 병태의 치료를 위한 큰 치료 잠재성을 갖는다는 것을 입증해왔다.

본 발명은 MDM2-p53 상호작용의 강력하고 특이적 저해제의 새로운 부류에 관한 것이다. 본 화합물은 MDM2-p53 상호작용의 강력한 길항제로서 기능한다. 따라서 본 발명의 MDM2 저해제는 그러한 치료를 필요로 하는 대상체에서, 암을 포함하는 다양한 질환 및 병태의 치료에 유용하다. 본 화합물의 치료적 유효량을 그러한 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 원치않는 과증식성 세포를 갖는 대상체를 치료하는 방법이 또한 제공된다. 구조식 (I)의 화합물의 치료적 유효량을 원치않는 증식 세포를 특징으로 하는 병태로 발전할 위험이 있는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 대상체에서 원치않는 증식 세포의 증식, 예컨대 암을 예방하는 방법이 또한 제공된다.

본 발명은 구조식 (I)로 나타낸 MDM2 저해제 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염에 관한 것이다:

식 중,

은

및

로 구성된 군으로부터 선택되고;

B는 C_4-7카보사이클릭 고리이고;

n은 0, 1, 또는 2이고;

R₆은

또는

이고;

R^a는 수소 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-4알킬이고;

R^b는 수소 또는 치환된 또는 비치환된 C_1-4알킬이고;

R^c는 H, C_1- ₃알킬, C_1- ₃알킬렌OR^a, OR^a, 또는 할로이고;

R^e는 -C(=O)OR^a, -C(=O)NR^aR^b, 또는 -C(=O)NHSO₂CH₃이다.

구조식 (I)의 화합물은 MDM2-p53 상호작용을 억제하고 다양한 질환 및 병태의 치료에서 유용하다. 특히, 구조식 (I)의 화합물은, MDM2 및 MDM2-관련된 단백질의 저해가 이점을 제공하는 질환 또는 병태, 예들 들면, 암 및 증식성 질환를 치료하는 방법에서 사용된다. 상기 방법은 치료적 유효량의 구조식 (I)의 화합물을 치료를 필요로 하는 개체에게 투여하는 것을 포함한다. 본 방법은 또한, 구조식 (I)의 화합물에 추가하여 제2 치료제를 개체에게 투여하는 것을 포함한다. 제2 치료제는 치료를 필요로 하는 개체를 괴롭히는 질환 또는 병태를 치료하는데 유용한 것으로 공지된 약물, 예를 들면, 특정한 암을 치료하는데 유용한 것으로 공지된 항암제로부터 선택된다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "알킬"은 직쇄형 및 분지형 포화된 C_1-10 탄화수소 그룹을 의미하고, 이 그룹은 비제한적으로 메틸, 에틸, n-프로필, i-프로필, n-부틸, sec-부틸, t-부틸, n-펜틸, 2-메틸부틸, 3-메틸부틸, 2,2-디메틸프로필, n-헥실, 2-메틸펜틸, 3-메틸펜틸, 4-메틸펜틸, 2,2-디메틸부틸, 2,3-디메틸부틸, 3,3-디메틸부틸, 및 2-에틸부틸을 포함한다. 용어 C_m-n은, 알킬 그룹이 "m" 내지 "n" 탄소 원자를 갖는 것을 의미한다. 용어 "알킬렌"은, 치환체를 갖는 알킬 그룹을 의미한다. 알킬, 예를 들면, 메틸, 또는 알킬렌, 예를 들면, ―CH₂―, 그룹은 예를 들면, 독립적으로 선택된 할로, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 하이드록시, 알콕시, 니트로, 시아노, 알킬아미노, 또는 아미노 그룹 중 하나 이상, 및 전형적으로 1 내지 3 개로 치환될 수 있다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "할로"는 플루오로, 클로로, 브로모, 및 아이오도로서 정의된다.

용어 "하이드록시"는 ―OH로서 정의된다.

용어 "알콕시"는 ―OR 로서 정의되고, 여기서 R은 알킬이다.

용어 "아미노"는 ―NH₂ 로서 정의되고, 용어 "알킬아미노"는 ―NR₂ 로서 정의되고,　여기서 적어도 1종의 R은 알킬 및 두 번째 R은 알킬 또는 수소이다.

용어 "카바모일"은 -C(=O)NR₂로서 정의된다.

용어 "카복시"는 -C(=O)OH 또는 그것의 염로서 정의된다.

용어 "니트로"는 ―NO₂로서 정의된다.

용어 "시아노"는 ―CN로서 정의된다.

용어 "트리플루오로메틸"은 ―CF₃로서 정의된다.

용어 "트리플루오로메톡시"는 ―OCF₃로서 정의된다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 그룹 예컨대

은

에 대한 약어이다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "아릴"은 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 방향족 그룹, 바람직하게는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 방향족 그룹을 의미한다. 아릴 그룹의 예는, 비제한적으로, 페닐, 나프틸, 플루오레닐, 아줄레닐, 안트릴, 펜안트릴, 피레닐, 바이페닐, 및 테르페닐을 포함한다. 아릴은, 또한 바이사이클릭 및 트리사이클릭 탄소 고리를 의미하고, 여기서 하나의 고리는 방향족 및 기타는 포화된, 부분적으로 불포화된, 또는 방향족, 예들 들면, 디하이드로나프틸, 인데닐, 인다닐, 또는 비스테트라하이드로나프틸 (테트랄린일)이다. 다르게 명시되지 않는 한, 아릴 그룹은 비치환되거나 하기의 예로부터 독립적으로 선택된 하나 이상, 및 특히 1 내지 4 개의, 그룹으로 치환될 수 있다: 할로, 알킬, 알케닐, ―OCF₃, ―NO₂, ―CN, ―NC, ―OH, 알콕시, 아미노, 알킬아미노, ―CO₂H, ―CO₂알킬, -OCO알킬, 아릴, 및 헤테로아릴.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클릭"은 헤테로아릴 및 헤테로사이클로알킬 고리계를 의미한다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로아릴"은 1 또는 2 개의 방향족 고리를 함유하고 방향족 고리에서 적어도 하나의 질소, 산소, 또는 황 원자를 함유하는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭 고리계를 의미한다. 헤테로아릴 그룹의 각각의 고리는 1 또는 2 개의 O　원자, 1 또는 2 개의　S 원자, 및/또는 1 내지 4 개의 N　원자를 함유할 수 있고, 단, 각각의 고리 중 헤테로 원자의 총 수는 4 또는 그 미만이고, 각각의 고리는 적어도 1 개의 탄소 원자를 함유한다. 특정 구현예에서, 헤테로아릴 그룹은 5 내지 20, 5 내지 15, 또는 5 내지 10 개의 고리 원자를 갖는다. 모노사이클릭 헤테로아릴 그룹의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 푸라닐, 이미다졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 옥사디아졸릴, 옥사졸릴, 피라지닐, 피라졸릴, 피리다지닐, 피리딜, 피리미디닐, 피롤릴, 티아디아졸릴, 티아졸릴, 티에닐, 테트라졸릴, 트리아지닐, 및 트리아졸릴. 바이사이클릭 헤테로아릴 그룹의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 벤조푸라닐, 벤즈이미다졸릴, 벤조이속사졸릴, 벤조피라닐, 벤조티아디아졸릴, 벤조티아졸릴, 벤조티에닐, 벤조티오페닐, 벤조트리아졸릴, 벤즈옥사졸릴, 푸로피리딜, 이미다조피리디닐, 이미다조티아졸릴, 인돌리지닐, 인돌릴, 인다졸릴, 이소벤조푸라닐, 이소벤조티에닐, 이소인돌릴, 이소퀴놀리닐, 이소티아졸릴, 나프티리디닐, 옥사졸로피리디닐, 프탈라지닐, 프테리디닐, 퓨리닐, 피리도피리딜, 피롤로피리딜, 퀴놀리닐, 퀴녹살리닐, 퀴아졸리디닐, 티아디아졸로피리미딜, 및 티에노피리딜. 다르게 명시되지 않는 한, 헤테로아릴 그룹은 비치환되거나 하기의 예로부터 선택된 하나 이상, 및 특히 1 내지 4 개의, 치환체로부터 치환될 수 있다: 할로, 알킬, 알케닐, ―OCF₃, ―NO₂, ―CN, ―NC, ―OH, 알콕시, 아미노, 알킬아미노, ―CO₂H, ―CO₂알킬, -OCO알킬, 아릴, 및 헤테로아릴.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "사이클로알킬"은 3 내지 8개의 탄소 원자를 함유하는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭, 포화된 또는 부분적으로 불포화된, 고리계를 의미하고, 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸, 및 사이클로옥틸을 포함하고, 이것들은, 예를 들면, 독립적으로 선택된 할로, 트리플루오로메틸, 트리플루오로메톡시, 하이드록시, 알콕시, 니트로, 시아노, 알킬아미노, 또는 아미노 그룹 중 하나 이상, 및 전형적으로 1 내지 3개로 임의로 치환된다.

본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "헤테로사이클로알킬"은 4 내지 12 개의 총 원자를 함유하는 모노사이클릭 또는 바이사이클릭, 포화된 또는 부분적으로 불포화된, 고리계를 의미하고, 상기 원자의 1 내지 5 개는 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택되고, 나머지 원자는 탄소이다. 헤테로사이클로알킬 그룹의 비제한적인 예는 아제티딜, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 디하이드로피롤릴, 모폴리닐, 티오모폴리닐, 디하이드로피리디닐, 옥사사이클로헵틸, 디옥사사이클로헵틸, 티아사이클로헵틸, 디아자사이클로헵틸이고, 이들 각각은 고리의 원자에 대한, 독립적으로 선택된 할로, C_1-6 알킬, C_1-6 알콕시, 시아노, 아미노, 카바모일, 니트로, 카복시, C_2-7 알케닐, C_2-7 알키닐, 등 중하나 이상, 및 전형적으로 1 내지 3 개로 임의로 치환된다.

일부 바람직한 구현예에서,

는

또는

이다.

다른 구현예에서, B는

또는

이다.

다양한 구현예에서, n은 0 또는 1이고, R₁은 H 또는 CH₃이다. 다양한 구현예에서, -(CH₂)_n-R₁은 H, CH₃, 또는 CH₂CH₃이다.

다양한 구현예에서, R₂은 H이다. 다른 구현예에서, R₃은 할로, 및 바람직하게는 클로로이다. 또 다른 구현예에서, R₄은 H이고, R₅은 H이거나, 또는 둘 모두의 R₄ 및 R₅는 H이다

일부 바람직한 구현예에서, R₇은 할로이고, 더 바람직하게는 플루오로이다.

일부 구현예에서, 각각의 R⁸, R⁹, 및 R¹⁰은 H이다

다양한 구현예에서, R^a 및 R^b는, 개별적으로, H, CH₃, 또는 CH₂CH₃이다.

다른 구현예에서, R^c 및 R^d는, 개별적으로, H, 할로, OH, CH₃, CH₂CH₃, 또는 CH₂OH이다. 일부 구현예에서, R^c 및 R^d는 F 및 F_,H 및 H, OH 및 CH₃, CH₃ 및 CH₃, CH₃ 및 OH, H 및 OH, CH₂CH₃ 및 CH₂CH₃, 및 CH₂OH 및 CH₂OH이다.

다른 구현예에서, R^c 및 R^d는 고리 B와 함께 합쳐져서 하기 예의 스피로 모이어티를 형성한다:

및

다른 구현예에서, R^c 및 R^d는 고리 B와 함께 합쳐져서 하기를 형성한다:

또는

일부 구현예에서, R^e는 -C(=O)OH, -C(=O)NH₂, 또는 -C(=O)NHSO₂CH₃이다.

다양한 구현예에서, R⁶은

또는

이다.

추가로, 본 화합물의 염은 또한, 본 발명에서 포함되고 본 발명에서 개시된 방법에서 사용될 수 있다. 본 발명은 구조식 (I)의 화합물의 모든 가능한 입체이성질체 및 기하 이성질체를 추가로 포함한다. 본 발명은 라세미 화합물 및 광학 활성 이성질체 둘 모두를 포함한다. 구조식 (I)의 화합물이 단일 거울상이성질체로서 원할 때, 최종 생성물의 분해에 의해 또는 이성질체적으로 순수한 개시 물질 또는 키랄 보조물 시약의 사용으로부터 입체특이적 합성에 의해 수득될 수 있다: 예들 들면, 참고 Z. Ma 등, Tetrahedron: Asymmetry , 8(6), 페이지 883-888 (1997). 최종 생성물, 중간체, 또는 개시 물질의 분해는 당해기술에서 공지된 임의의 적합한 방법에 의해 달성될 수 있다. 추가로, 구조식 (I)의 화합물의 호변이성질체가 가능한 상황에서, 본 발명은 화합물의 모든 호변이성질체 형태를 포함하는 것으로 의도된다.

본 개시내용의 화합물 중 어떤 것은 입체이성질체, 즉, 광학 이성질체 및 형태적 이성질체 (또는 이형태체)를 포함하는, 원자의 공간적 배열에서만 상이한 이성질체로서 존재할 수 있다. 개시내용은 순수한 개별적인 입체이성질체 제제 및 각각의 풍부한 제제, 및 당해분야의 숙련가에게 잘 알려진 방법에 따라 분리될 수 있는 그와 같은 입체이성질체 뿐만 아니라 개별적인 부분입체이성질체 및 거울상이성질체의 라세미 혼합물 둘 모두로서 모든 입체이성질체를 포함한다.

용어 "실질적으로 없는"은, 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 화합물이 당해분야의 숙련가에 의해 일상적으로 사용된 종래의 검정 방법을 사용하여 확립된 바와 같이 다른 입체이성질체, 예를 들면, 부분입체이성질체 및/또는 거울상이성질체의 약 25% 미만을 포함하는 것을 의미한다. 일 구현예에서, 다른 입체이성질체의 양은 약 24% 미만, 약 23% 미만, 약 22% 미만, 약 21% 미만, 약 20% 미만, 약 19% 미만, 약 18% 미만, 약 17% 미만, 약 16% 미만, 약 15% 미만, 약 14% 미만, 약 13% 미만, 약 12% 미만, 약 11% 미만, 약 10% 미만, 약 9% 미만, 약 8% 미만, 약 7% 미만, 약 6% 미만, 약 5% 미만, 약 4% 미만, 약 3% 미만, 약 2% 미만, 약 1% 미만, 또는 약 0.5% 미만이다.

원하는 입체이성질체의 약 95% 이상, 예들 들면, 약 96% 이상, 약 97% 이상, 약 98% 이상, 또는 약 99% 이상을 함유하는 입체이성질체적으로 풍부한 화합물은 본 명세서에서 일명 "실질적으로 순수한 입체이성질체"이다.

원하는 입체이성질체의 약 99% 이상을 함유하는 입체이성질체적으로 풍부한 화합물은 본 명세서에서 일명 "순수한" 입체이성질체"이다. 임의의 입체이성질체적으로 풍부한 화합물의 순도는 종래의 검정 방법 예컨대, 예들 들면, 정상 HPLC, 역상 HPLC, 키랄 HPLC, 및 ¹H및 ¹³C NMR을 사용하여 결정될 수 있다.

본 발명의 화합물은 염으로서 존재할 수 있다. 본 발명의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 종종, 본 발명의 방법에서 바람직하다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 용어 "약제학적으로 허용가능한 염"은 구조식 (I)의 화합물의 염 또는 쯔비터이온 형태를 의미한다. 식 (I)의 화합물의 염은 화합물의 최종 단리 및 정제 동안에 또는 별도로 화합물을 적합한 양이온, 예컨대, 비제한적으로, 알칼리 및 알칼리토 금속 이온, 예를 들면, Na⁺, K⁺, Ca² ⁺, 및 Mg² ⁺뿐만 아니라 유기 양이온 예컨대, 비제한적으로, 암모늄 및 치환된 암모늄 이온, 예를 들면, NH₄ ⁺, NHMe₃ ⁺, NH₂Me₂ ⁺, NHMe₃ ⁺ 및 NMe₄ ⁺을 갖는 산과 반응시켜서 제조될 수 있다. 1가 및 2가 약제학적으로 허용가능한 양이온의 예는 예를 들면 하기에서 논의된다: Berge 등 J. Pharm. Sci., 66:1-19 (1997).

구조식 (I)의 화합물의 약제학적으로 허용가능한 염은 약제학적으로 허용가능한 산으로 형성된 산 부가 염일 수 있다. 약제학적으로 허용가능한 염을 형성하기 위해 시용될 수 있는 산의 예는 무기 산 예컨대 질산, 붕산, 염산, 브롬화수소산, 황산, 및 인산, 및 유기 산 예컨대 옥살산, 말레산, 석신산, 및 시트르산을 포함한다. 본 발명의 화합물의 염의 비제한적인 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 하이드로아이오다이드, 설페이트, 바이설페이트, 2-하이드록시에탄설포네이트, 포스페이트, 수소 포스페이트, 아세테이트, 아디페이트, 알기네이트, 아스파르테이트, 벤조에이트, 바이설페이트, 부티레이트, 캄포레이트, 캄포르설포네이트, 디글루코네이트, 글리세롤포스페이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 포르메이트, 석시네이트, 푸마레이트, 말레에이트, 아스코르베이트, 이세티오네이트, 살리실레이트, 메탄설포네이트, 메시틸렌설포네이트, 나프틸렌설포네이트, 니코티네이트, 2-나프탈렌설포네이트, 옥살레이트, 파모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 트리클로로아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 포스페이트, 글루타메이트, 바이카보네이트, 파라톨루엔설포네이트, 운데카노에이트, 락테이트, 시트레이트, 타르트레이트, 글루코네이트, 메탄설포네이트, 에탄디설포네이트, 벤젠 설포네이트, 및 p-톨루엔설포네이트 염. 또한, 본 발명의 화합물 내에 존재하는 이용가능한 아미노 그룹은 메틸, 에틸, 프로필, 및 부틸 클로라이드, 브로마이드, 및 아이오다이드; 디메틸, 디에틸, 디부틸, 및 디아밀 설페이트; 데실, 라우릴, 미리스틸, 및 스테릴 클로라이드, 브로마이드, 및 아이오다이드; 및 벤질 및 펜에틸 브로마이드와 함께 사원화될 수 있다. 전술한 것에 비추어, 은 본 명세서에서 나타나는 본 발명의 화합물에 대한 임의의 참조는 구조식 (I)의 화합물 뿐만 아니라 약제학적으로 허용가능한 그것의 염을 포함하는 것으로 의도된다.

본 발명의 구체적인 화합물은 아래에서 제시된 구조를 갖는 화합물을 비제한적으로 포함한다.

본 발명은 다양한 질환 및 병태의 치료를 위해 구조식 (I)의 화합물에 의해 예시된 바와 같은 MDM2 저해제를 제공하고, 여기서 MDM2 및 MDM-2 관련된 단백질의 저해는 유익한 효과를 갖는다. 일 구현예에서, 본 발명은 질환 또는 병태를 앓고 있는 개체를 치료하는 방법에 관한 것이고, 여기서 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질의 저해는 치료적 유효량의 구조식 (I)의 화합물을 치료를 필요로 하는 개체에게 투여하는 것을 포함하는 이점을 제공한다.

본 방법은, p53 및 p53-관련된 단백질 (예를 들면, p63, p73)의 기능(들)을 증가시키는 치료적으로 유효한 양의 약물(들) (예를 들면, 소분자)에 대한 암을 앓고 있는 동물 또는 환자의 노출이 암 세포 또는 지지 세포의 성장을 억제한다는 것을 고려한다. 본 명세서에서 제공된 MDM2 저해제는 p53 또는 p53-관련된 단백질과 MDM2 또는 MDM2-관련된 단백질 (예를 들면, MDMX) 사이의 상호작용을 억제한다. p53 또는 p53-관련된 단백질과 MDM2 또는 MDM2-관련된 단백질 사이의 상호작용의 억제는 암 세포 또는 지지 세포의 성장을 억제하고/거나 암 치료 약물 또는 방사선 요법의 세포사-유도 활성에 대해 더 민감한 집단과 같은 세포를 부여한다. 일 구현예에서, 본 명세서에서 제공된 MDM2 저해제는 p53의 분해를 정상적으로 촉진하는 p53-MDM2 상호작용과의 간섭에 의한 p53의 반감기를 길게한다. 본원에서 제공된 화합물은, 암 세포에서 노화, 세포 성장 저해, 세포자멸사 및/또는 세포 주기 정지를 유도하기 위해 단일요법으로서 투여될 때, 또는 추가 제제(들), 예컨대 다른 세포사-유도 또는 세포 주기 파괴 암 치료 약물 또는 방사선 요법 (병용 요법)과의 일시적 관계로 투여될 때, 암 치료 약물 또는 방사선 요법 단독으로만 치료되는 동물 또는 환자에서 상응하는 부분의 세포와 비교하여 세포자멸사 프로그램을 실행하는데 민감한 더 큰 부분의 암 세포 또는 지지적 세포를 제공하기 위해 다중 암 유형의 치료에 대한 미충족 욕구를 만족시킨다.

일 구현예에서, 치료적 유효량의 1종 이상의 구조식 (I)의 화합물 및 1종 이상의 항암제에 의한 환자의 치료는 화합물 또는 항암 약물/방사선 단독으로 치료된 것들과 비교하여 그와 같은 환자에서 더 큰 항종양 활성 및 임상 이득을 얻는다. 대안적으로 언급된 바와 같이, 본 화합물이 p53 또는 p53-관련된 단백질을 발현시키는 세포의 세포자멸적 역치를 낮게 하기 때문에, 항암 약물/방사선의 활성을 유도하는 세포자멸사에 반응하여 세포자멸사 프로그램을 성공적으로 실행하는 세포의 비는 본 화합물 중 1종 이상과 병용하여 사용될 때 증가될 것이다. 따라서 구조식 (I)의 화합물은 항암 약물/방사선 단독의 종량의 용량과 동일한 종양 반응/임상 이득을 얻기 위해 항암 약물 및/또는 방사선의 더 작고, 따라서 독성이 적고 더 내성있는 용량의 투여를 허용하도록 사용될 수 있다. 승인된 항암 약물 및 방사선 치료의 용량은 공지되어 있기 때문에, 본원에서 제공된 화합물, 조성물, 및 방법은 1종 이상의 승인된 항암 약물 및/또는 방사선 치료와 함께 사용될 수 있다. 또한, 구조식 (I)의 화합물이, 적어도 부분적으로, p53 및 p53-관련된 단백질의 세포자멸유도 및/또는 세포 주기-억제 활성을 자극하여 작용할 수 있기 때문에, 암 세포 및 지지 세포의 치료적으로 유효한 양의 이들 화합물에의 노출은 항암 약물 또는 방사선 요법에 반응하는 세포자멸사 프로그램을 실시하기 위해 세포의 시도와 일치하도록 일시적으로 연결될 수 있다. 따라서, 일 구현예에서, 다른 공지된 항암 약물과 병용한 본 명세서에서 제공된 화합물 또는 약제학적 조성물의 투여는 특히 유효한 치료적 실시를 제공한다.

일 구현예에서, p53 또는 p53-관련된 단백질과 구조식 (I)의 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질 사이의 상호작용의 저해제는, 가능하게는 정상 세포의 세포 주기 정지를 유도하는 저해제의 능력을 통해 정상 (예를 들면, 비-과증식성) 세포를 어떤 화학치료제 및 방사선의 독성 효과로부터 보호할 수 있다. 예들 들면, 본 명세서에서 제공된 MDM2 저해제는, 돌연변이된, 결실된, 또는 달리 비- 또는 더 적은 기능적 p53 (및/또는 돌연변이된, 결실된, 또는 달리 비- 또는 더 적은 기능적 p53-관련된 단백질)를 포함하는 암 세포에 대해 효과를 갖지 않거나 더 적은 효과를 가지면서 야생형 또는 기능적 p53 (및/또는 야생형 또는 기능적 p53-관련된 단백질)를 포함하는 세포에서 세포 주기 정지를 야기할 수 있다. 이러한 차별적인 보호성 효과는 본 명세서에서 제공된 저해제와 함께 투여될 때 그와 같은 치료의 독성 부작용을 증가시키지 않는 한서 화학치료제 또는 치료의 더 높은 용량 또는 더 긴 치료의 사용을 허용하여 암의 더 유효한 치료를 허용할 수 있다.

또한 추가 제제(들), 예컨대 노화, 세포자멸사, 및/또는 세포 주기 정지의 유발제에 대해 세포를 감작화하기 위해 구조식 (I)의 화합물을 사용하는 방법이 본 명세서에서 제공된다. 구조식 (I)의 화합물은 또한, 화학치료제에 의한 치료 전에 세포 주기 정지의 유도를 통해 정상 세포의 화학보호를 제공하기 위해 사용될 수 있다. 일 구현예에서, 정상 세포가 화학치료제 또는 치료에 대해 내성있도록 하는 방법은 상기 세포를 1종 이상의 구조식 (I)의 화합물과 접촉시키는 것을 포함한다. 또 다른 구현예에서, 화학치료제 또는 치료의 독성 부작용으로부터 과증식성 질환이 있는 동물의 정상 세포를 보호하는 방법은, 동물에게 구조식 (I)의 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 또한 화학치료제의 정상 세포에의 투여에 의해 야기된 장애, 부작용, 또는 병태의 치료, 완화, 또는 예방 방법이 본 명세서에서 제공되고, 상기 방법은 화학요법을 겪는 동물에게 구조식 (I)의 화합물을 투여하는 것을 포함한다. 화학요법에 의해 야기된 그와 같은 장애 및 병태의 예는, 비제한적으로, 점막염, 구내염, 구강건조증, 위장 장애, 및 탈모증을 포함한다.

구조식 (I)의 화합물은 장애, 예컨대 세포자멸적 세포사의 유도에 대해 반응성이 있는 것들, 예를 들면, 과증식성 질환 예컨대 암을 포함하는 세포자멸사의 조절장애를 특징으로 하는 장애의 치료, 완화 또는 예방에 유용하다. 일 구현예에서, 이들 화합물은 암 요법에 대한 내성을 특징으로 하는 암 (예를 들면, 화학내성, 방사선 내성있는, 호르몬 내성있는 등인 암 세포들)을 치료하거나 완화시키기 위해 사용될 수 있다. 또 다른 구현예에서, 본 화합물은 기능적 p53 또는 p53-관련된 단백질의 발현을 특징으로 하는 과증식성 질환을 치료하기 위해 사용될 수 있다. 또 다른 구현예에서, 본 화합물은 세포들에서 세포 주기 정지의 유도에 의해 화학치료제 및 치료의 독성 부작용으로부터 정상 (예를 들면, 비-과증식성) 세포를 보호하기 위해 사용될 수 있다.

일 구현예에서, 구조식 (I)의 화합물은 세포 주기 정지 및/또는 세포자멸사를 유도하고, 또한 세포 주기 정지 및/또는 세포자멸사의 유도를 단독 또는 추가의 세포자멸사 유도 신호와 반응하여 강력하게 한다. 따라서, 본 화합물이 그와 같은 유도 자극에 대해 내성있는 세포를 포함하여 세포를 세포 주기 정지 및/또는 세포자멸사의 유도로 감작화시킨다는 것을 고려한다. p53 또는 p53-관련된 단백질과 MDM2 또는 MDM2-관련된 단백질 사이의 상호작용을 억제하여, 본 화합물은 세포자멸사의 유도에 의해 치료, 완화 또는 예방될 수 있는 임의의 장애에서 세포자멸사를 유도하기 위해 사용될 수 있다. 일 구현예에서, 구조식 (I)의 화합물은 기능적 p53 또는 p53-관련된 단백질을 포함하는 세포에서 세포자멸사를 유도하기 위해 사용될 수 있다.

세포자멸사를 조절하기 위해 1종 이상의 추하의 세포자멸사-조절제, 예를 들면, 항암제과 함께, 구조식 (I)의 화합물. 세포자멸사-조절제의 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: Fas/CD95, TRAMP, TNF RI, DR1, DR2, DR3, DR4, DR5, DR6, FADD, RIP, TNFα, Fas 리간드, TRAIL, TRAIL-R1 또는 TRAIL-R2, Bcl-2에 대한 항체, p53, BAX, BAD, Akt, CAD, PI3 키나제, PP1, 및 카스파제 단백질. 세포자멸사의 개시, 결정 및 분해 단계에 관여된 다른 제제가 또한 포함된다. 세포자멸사-조절제의 예는 제제, 활성, 존재, 또는 대상체에서 세포자멸사를 조절할 수 있는 농도의 변화를 포함한다. 세포자멸사-조절제는 세포자멸사의 유발제, 예컨대 TNF 또는 TNF-관련된 리간드, 특히 TRAMP 리간드, Fas/CD95 리간드, TNFR-1 리간드, 또는 TRAIL인 것들을 포함한다.

본 명세서의 화합물, 조성물, 및 방법은 동물 (예를 들면, 비제한적으로, 인간 및 수의과 동물을 포함하는 포유동물 환자)에서 병든 세포, 조직, 기관, 또는 병태 및/또는 질환 상태를 치료하기 위해 사용된다. 이와 관련하여, 다양한 질환 및 병리는 본 방법 및 조성물을 사용하는 치료 또는 예방에 잘 수용된다. 이들 질환 및 병태의 비제한 예시적인 목록은, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 유방암, 전립선암, 림프종, 피부암, 췌장암, 결장암, 흑색종, 악성 흑색종, 난소암, 뇌암, 원발성 뇌암종, 두경부 암, 신경아교종, 교모세포종, 간암, 방광암, 비-소세포 폐암, 두경부 암종, 유방 암종, 난소 암종, 폐 암종, 소세포 폐 암종, 윌름스 종양, 자궁경부 암종, 고환 암종, 방광 암종, 췌장 암종, 위 암종, 결장 암종, 전립선 암종, 비뇨생식 암종, 갑상선 암종, 식도 암종, 골수종, 다발성 골수종, 부신 암종, 신장 세포 암종, 자궁내막암종, 부신 피질 암종, 악성 췌장 인슐린종, 악성 카르시노이드 암종, 융모막암종, 균상식육종, 악성 고칼슘혈증, 자궁경부 과다형성, 백혈병, 급성 림프구 백혈병, B-CLL를 포함하는 만성적 림프구성 백혈병 (CLL), 급성 골수성 백혈병, 만성적 골수성 백혈병, 만성적 과립구성 백혈병, 급성 과립구성 백혈병, 모발 세포 백혈병, 신경교세포종, 육종 예컨대 지방육종 악성 섬유질 조직구종, 골육종, 유잉 육종, 평활근육종, 및 횡문근육종, 카포시 육종, 진성 적혈구증가증, 본태성 혈소판증가증, 호지킨 질환, 비-호지킨 림프종, 연조직 육종 예컨대 지방종, 및 악성 신경집종, 골육종, 일차 거대글로불린혈증, 및 망막모세포종, 등, T 및 B 세포 매개된 자가면역 질환; 염증성 질환; 감염; 과증식성 질환; AIDS; 퇴행성 병태, 혈관 질환, 등. 일 구현예에서, 치료될 암 세포는 전이성이다. 또 다른 구현예에서, 치료될 암 세포는 다른 항암제에 대해 내성이 있다.

본 명세서의 화합물, 조성물, 및 방법은 기능적 또는 야생형 p53 또는 p53-관련된 단백질을 발현시키는 암을 치료하기 위해 사용된다. 일 구현예에서, 상승된 수준의 MDM2 또는 MDM2-관련된 단백질을 발현시키는 암을 치료하기위해 사용된 화합물, 조성물, 및 방법이 본 명세서에서 제공된다.

본 명세서의 화합물, 조성물, 및 방법은, 예들 들면, 지방육종, 악성 섬유질 조직구종, 골육종, 및 횡문근육종을 포함하는 육종이 있는 환자를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 또 다른 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물, 조성물, 및 방법은예들 들면, 유잉 육종, 평활근육종, 지방종, 및 악성 신경집종을 포함하는 연조직 종양이 있는 환자를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 또 다른 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물, 조성물, 및 방법은 폐, 유방, 간, 또는 결장암이 있는 환자를 치료하기 위해 사용될 수 있다. 또 다른 구현예에서, 본원에서 제공된 화합물, 조성물, 및 방법은 B-세포 만성적 림프구성 백혈병 및 급성 골수 백혈병이 있는 환자를 치료하기 위해 사용될 수 있다.

본 명세서에서 제공된 화합물, 조성물, 및 방법은 또한, 흑색종, 폐암, 육종, 결장암, 전립선암, 융모막암종, 유방암, 망막모세포종, 위 암종, 급성 골수 백혈병, 림프종, 다발성 골수종, 또는 백혈병이 있는 환자를 치료하기 위해 사용될 수 있다.

본 명세서에서 제공된 화합물, 조성물, 및 방법은 추가로, 지방육종 또는 흑색종이 있는 환자를 치료하기 위해 사용될 수 있다.

본 명세서의 화합물, 조성물, 및 방법을 사용하는 치료에 적합한 감염은, 비제한적으로, 바이러스, 박테리아, 진균, 마이코플라스마, 프리온, 등에 의해 야기된 감염을 포함한다.

본 구조식 (I)의 화합물, 또는 구조식 (I)의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물은 과증식성 질환 예컨대 암을 치료하는데 유용하다.

유효량의 구조식 (I)의 화합물을 적어도 1종의 제2 치료제 (비제한적으로, 화학요법적 항신생물제, 세포자멸사-조절제, 항미생물제, 항바이러스제, 항진균제, 및 항-염증제를 포함함) 및/또는 치료적 기술 (예를 들면, 수술 중재 및/또는 방사선요법)과 함께 투여하는 방법이 제공된다. 바람직한 구현예에서, 제2 치료제(들)은 항암제이다.

수많은 제2 적합한 치료적 또는 항암제는 본 방법에서의 사용을 고려한다. 사실상, 본원에서 제공된 방법은 비제한적으로, 수많은 하기 예의 치료제의 투여를 포함할 수 있다: 세포자멸사; 폴리뉴클레오타이드 를 유도하는 제제 (예를 들면, 안티-센스, 리보자임, siRNA); 폴리펩타이드 (예를 들면, 효소 및 항체); 생물학적 모방체 (예를 들면, 고시폴 또는 BH3 모방체); Bcl-2 패밀리 단백질에 결합하고 (예를 들면, 그것을 올리고머화하거나 그것과 복합되는) 제제 예컨대 Bax; 알칼로이드; 알킬화제; 항종양 항생제; 항대사물질; 호르몬; 백금 화합물; 단클론성 또는 다클론성 항체 (예를 들면, 항암 약물, 독소, 데펜신과 접합된 항체), 독소; 방사선핵종; 생물학적 반응 조절제 (예를 들면, 인터페론 (예를 들면, IFN-α) 및 인터류킨 (예를 들면, IL-2)); 입양 면역요법 제제; 조혈 성장 인자; 종양 세포 분화를 유도하는 제제 (예를 들면, 모든-트랜스-레티노산); 유전자 요법 시약 (예를 들면, 안티센스 요법 시약 및 뉴클레오타이드); 종양 백신; 혈관신생 저해제; 프로테오좀 저해제: NF-κB 조절물질; 항-CDK 화합물; HDAC 저해제; 등. 치료제의 수많은 다른 예, 예컨대 개시된 화합물과 공-투여에 적합한 화학요법적 화합물 및 항암 요법은 당해분야의 숙련가에게 공지되어 있다.

항암제는 세포자멸사를 유도 또는 자극하는 제제를 포함한다. 세포자멸사를 유도 또는 자극하는 제제는 예를 들면 삽입작용, 가교결합, 알킬화, 또는 달리 DNA를 손상시키거나 그것을 화학적으로 변형시켜서 DNA와 상호작용하거나 그것을 변형시키는 제제를 포함한다. 세포자멸사를 유도하는 제제는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 방사선 (예를 들면, X-선, 감마선, UV); 종양 괴사 인자 (TNF)-관련된 인자 (예를 들면, TNF 패밀리 수용체 단백질, TNF 패밀리 리간드, TRAIL, TRAIL-R1 또는 TRAIL-R2에 대한 항체); 키나제 저해제 (예를 들면, 표피 성장 인자 수용체 (EGFR) 키나제 저해제. 추가의 항암제는 하기를 포함한다: 혈관 성장 인자 수용체 (VGFR) 키나제 저해제, 섬유아세포 성장 인자 수용체 (FGFR) 키나제 저해제, 혈소판-유도된 성장 인자 수용체 (PDGFR) 키나제 저해제, 및 Bcr-Abl 키나제 저해제 (예컨대 글리벡)); 안티센스 분자; 항체 (예를 들면, 헤르셉틴, 리툭산, 제발린, 및 아바스틴); 항-에스트로겐 (예를 들면, 랄록시펜 및 타목시펜); 항-안드로겐 (예를 들면, 플루타미드, 바이칼루타마이드, 피나스테라이드, 아미노글루테마미드, 케토코나졸, 및 코르티코스테로이드); 사이클로옥시게나제 2 (COX-2) 저해제 (예를 들면, 셀레콕십, 멜록시캄, NS-398, 및 비-스테로이드 항-염증성 약물 (NSAIDs)); 항-염증성 약물 (예를 들면, 부타졸리딘, 데카드론, 델타손, 덱사메타손, 덱사메타손 인텐솔, 덱손(DEXONE), 헥사드롤, 하이드록시클로로퀸, 메티코르텐(METICORTEN), 오라덱손(ORADEXON), 오라손(ORASONE), 옥시펜부타존, 페디아프레드, 페닐부타존, 플라케닐(PLAQUENIL), 프레드니솔론, 프레드니손, 프렐론(PRELONE), 및 탄데아릴(TANDEARIL)); 및 화학치료 약물 (예를 들면, 이리노테칸 (캄프토사르), CPT-11, 플루다라빈 (FLUDARA), 다카바진 (DTIC), 덱사메타손, 미톡산트론, MYLOTARG, VP-16, 시스플라틴, 카보플라틴, 옥살리플라틴, 5-FU, 독소루비신, 젬시타빈, 보르테조밉, 게피티닙, 베바시주맙, 탁소테르 또는 탁솔); 세포성 신호전달 분자; 세라미드 및 사이토카인; 스타우로스포린, 등.

본 명세서의 조성물 및 방법은 하기를 포함한다: 1종 이상의 구조식 (I)의 화합물 및 적어도 1종의 항과증식성 또는 항암제, 예를 들면, 알킬화제, 항대사물질, 및 천연 생성물 (예를 들면, 허브 및 다른 식물 및/또는 동물 유도된 화합물).

본 조성물 및 방법에서 사용하기에 적합한 알킬화제는, 비제한적으로 하기를 포함한다: 1) 질소 머스타드 (예를 들면, 메클로레타민, 사이클로포스파마이드, 이포스파마이드, 멜팔란 (L-사르콜리신); 및 클로르암부실); 2) 에틸렌이민 및 메틸멜라민 (예를 들면, 헥사메틸멜라민 및 티오테파); 3) 알킬 설포네이트 (예를 들면, 부설판); 4) 니트로소우레아 (예를 들면, 카르무스틴 (BCNU); 로무스틴 (CCNU); 세무스틴 (메틸-CCNU); 및 스트렙토조신 (스트렙토조토신)); 및 5) 트리아젠 (예를 들면, 다카바진 (DTIC; 디메틸트리아제노이미드-아졸카복사마이드).

본 조성물 및 방법에 적합한 항대사물질은, 비제한적으로 하기를 포함한다: 1) 엽산 유사체 (예를 들면, 메토트렉세이트 (아메토프테린)); 2) 피리미딘 유사체 (예를 들면, 플루오로우라실 (5-플루오로우라실; 5-FU), 플록수리딘 (플루오로데-옥시우리딘; FudR), 및 사이타라빈 (시토신 아라비노시드)); 및 3) 퓨린 유사체 (예를 들면, 머캅토퓨린 (6-머캅토퓨린; 6-MP), 티오구아닌 (6-티오구아닌; TG), 및 펜토스타틴 (2'-데옥시코포르마이신)).

본 조성물 및 방법에서 사용하기에 적합한 화학치료제는, 비제한적으로 하기를 포함한다: 1) 빈카 알카로이드 (예를 들면, 빈블라스틴 (VLB), 빈크리스틴); 2) 에피포도필로톡신 (예를 들면, 에토포시드 및 테니포시드); 3) 항생제 (예를 들면, 닥티노마이신 (악티노마이신 D), 다우노루비신 (다우노마이신; 루비도마이신), 독소루비신, 블레오마이신, 필리카마이신(미트라마이신), 및 미토마이신 (미토마이신 C)); 4) 효소 (예를 들면, L-아스파라기나제); 5) 생물학적 반응 조절제 (예를 들면, 인터페론-알파); 6) 백금 배위 복합체 (예를 들면, 시스플라틴 (시스-DDP) 및 카보플라틴); 7) 안트라센디온 (예를 들면, 미톡산트론); 8) 치환된 우레아 (예를 들면, 하이드록시우레아); 9) 메틸하이드라진 유도체 (예를 들면, 프로카바진 (N-메틸하이드라진; MIH)); 10) 부신피질 억제제 (예를 들면, 미토탄 (o,p'-DDD) 및 아미노글루테티마이드); 11) 아드레노코르티코스테로이드 (예를 들면, 프레드니손); 12) 프로게스틴 (예를 들면, 하이드록시프로게스테론 카프로에이트, 메드록시프로게스테론 아세테이트, 및 메게스트롤 아세테이트); 13) 에스트로겐 (예를 들면, 디에틸스틸베스트롤 및 에티닐 에스트라디올); 14) 항에스트로겐 (예를 들면, 타목시펜); 15) 안드로겐 (예를 들면, 테스토스테론 프로피오네이트 및 플루옥시메스테론); 16) 안티안드로겐 (예를 들면, 플루타미드): 및 17) 성선자극호르몬-방출 호르몬 유사체 (예를 들면, 류프롤라이드).

암 요법 맥락에서 일상적으로 사용된 임의의 항암제는 본 발명의 조성물 및 방법에서 사용된다. 표 1은 예시적인 항신생물성 제제의 목록을 제공한다. 당해분야의 숙련가는, 모든 U.S. 승인된 화학치료제에 대한 필요한"제품 라벨"이, 예시적인 제제에 대한 승인된 징후, 투여 정보, 독성 데이터, 등을 기재하고 있다는 것은 인식한다.

표 1

항암제는 항암 활성을 갖는 것으로 확인되었던 화합물을 추가로 포함한다. 그 예는, 비제한적으로, 하기를 포함한다: 3-AP, 12-O-테트라데카노일포르볼-13-아세테이트, 17AAG, 852A, ABI-007, ABR-217620, ABT-751, ADI-PEG 20, AE-941, AG-013736, AGRO100, 알라노신, AMG 706, 항체 G250, 항네오플라스톤스, AP23573, 아파지쿠온, APC8015, 아티프리모드, ATN-161, 아스타센텐, 아자시티딘, BB-10901, BCX-1777, 베바시주맙, BG00001, 바이칼루타마이드, BMS 247550, 보르테조밉, 브리오스타틴-1, 부세렐린, 칼시트리올, CCI-779, CDB-2914, 세픽심, 세툭시맙, CG0070, 실렌지타이드, 클로파라빈, 콤브레타스타틴 A4 포스페이트, CP-675,206, CP-724,714, CpG 7909, 쿠르쿠민, 데시타빈, DENSPM, 독세르칼시페롤, E7070, E7389, 엑테인아시딘 743, 에파프록시랄, 에플로니틴, EKB-569, 엔자스타우린, 에를로티닙, 엑시서린드, 펜레티나이드, 플라보피리돌, 플루다라빈, 플루타미드, 포테무스틴, FR901228, G17DT, 갈릭시맙, 게피티닙, 게니스테인, 글루포스파마이드, GTI-2040, 히스트렐린, HKI-272, 호모하링토닌, HSPPC-96, hu14.18-인터류킨-2 융합 단백질, HuMax-CD4, 일로프로스트, 이미퀴모드, 인플릭시맙, 인터류킨-12, IPI-504, 이로풀벤, 익사베필론, 라파티닙, 레날리도마이드, 레스타우르티닙, 류프롤라이드, LMB-9 면역독소, 로나파르닙, 루밀리시맙, 마포스파마이드, MB07133, MDX-010, MLN2704, 단클론성 항체 3F8, 단클론성 항체 J591, 모텍사핀, MS-275, MVA-MUC1-IL2, 닐루타마이드, 니트로캄프토테신, 놀라트렉세드 디하이드로클로라이드, 놀바덱스, NS-9, O6-벤질구아닌, 오블리메르센 나트륨, ONYX-015, 오레고보맙, OSI-774, 파니투무맙, 파라플라틴, PD-0325901, 페메트렉세드, PHY906, 피오글리타존, 피르페니돈, 픽산트론, PS-341, PSC 833, PXD101, 피라졸로아크리딘, R115777, RAD001, 란피르나제, 레베카마이신 유사체, rhu안지오스타틴 단백질, rhuMab 2C4, 로시글리타존, 루비테칸, S-1, S-8184, 사트라플라틴, SB-, 15992, SGN-0010, SGN-40, 소라페닙, SR31747A, ST1571, SU011248, 수베로일아닐라이드 하이드록삼산, 수라민, 탈라보스타트, 탈람파넬, 타리퀴다르, 템시롤리무스, TGFa-PE38 면역독소, 탈리도마이드, 티말파신, 티피파르닙, 티라파자민, TLK286, 트라벡테딘, 트리메트렉세이트 글루쿠로네이트, TroVax, UCN-1, 발프로산, 빈플루닌, VNP40101M, 볼록식시맙, 보리노스태트, VX-680, ZD1839, ZD6474, 질류톤, 및 조수퀴다르 트리하이드로클로라이드.

항암제 및 다른 치료제의 더 상세한 설명에 대해, 당해분야의 숙련가는 하기를 비제한적으로 포함하는 임의의 수의 유익한 매뉴얼을 언급한다: Physician's Desk Reference and to Goodman and Gilman's "Pharmaceutical Basis of Therapeutics" tenth edition, Eds. Hardman 등, 2002.

본원에서 제공된 방법은 1종 이상의 구조식 (I)의 화합물을 방사선 요법과 함께 투여하는 것을 포함한다. 치료적 용량의 방사선을 동물에게 전달하기 위해 사용된 유형, 양, 또는 전달 및 투여 시스템에 의해 제한되지 않는 방법이 본 명세서에서 제공된다. 예들 들면, 포유동물은 광자 방사선요법, 입자 빔 방사선 요법, 다른 유형의 방사선요법, 및 이들의 조합을 수용할 수 있다. 일 구현예에서, 방사선은 선형 가속제를 사용하여 동물에게 전달된다. 또 다른 구현예에서, 방사선은 감마 나이프를 사용하여 전달된다.

방사선 공급원은 포유동물에 대해서 외부 또는 내부에 있을 수 있다. 외부 방사선 요법이 가장 흔하고, 예를 들면, 선형 가속제를 사용하여 피부를 통해 높은-에너지 방사선의 빔을 종양 부위에 조사하는 것을 수반한다. 방사선의 빔은 국재화된 종양 부위로 국재화되지만, 통상의, 건강한 조직의 노출을 피하는 것은 거의 불가능하다. 그러나, 외부 방사선은 포유동물에 의해 보통 용인된다. 내부 방사선 요법은 (예를 들면, 암 세포 결합 리간드에 부착된 입자를 사용하여) 암 세포를 특이적으로 표적으로 하는 전달 시스템의 사용을 포함하여 종양 부위에서 또는 그 근처에서 신체 내부에 방사선-발광 공급원, 예컨대 비드, 와이어, 펠렛, 캡슐, 입자, 등을 이식하는 것을 수반한다. 그와 같은 이식물은 치료 후 제거될 수 있거나, 신체 내에서 불활성인채로 있을 수 있다. 내부 방사선 요법의 유형은, 비제한적으로, 근접요법, 간질 조사, 공동내 조사, 방사선면역요법, 등을 포함한다.

포유동물은 임의로 하기를 수용할 수 있다: 방사선감작제 (예를 들면, 메트로니다졸, 미소니다졸, 동맥내 Budr, 정맥내 아이오도데옥시우리딘 (IudR), 니트로이미다졸, 5-치환된-4-니트로이미다졸, 2H-이소인돌디온, [[(2-브로모에틸)-아미노]메틸]-니트로-1H-이미다졸-1-에탄올, 니트로아닐린 유도체, DNA-친화성 저산소증 선택적 세포독소, 할로겐화된 DNA 리간드, 1,2,4 벤조트리아진 옥사이드, 2-니트로이미다졸 유도체, 불소-함유 나트로아졸 유도체, 벤즈아미드, 니코틴아미드, 아크리딘-삽입제, 5-티오트레트라졸 유도체, 3-니트로-1,2,4-트리아졸, 4,5-디나이트로이미다졸 유도체, 하이드록실화된 텍사피린, 시스플라틴, 미토마이신, 티라파자민, 니트로소우레아, 머캅토퓨린, 메토트렉세이트, 플루오로우라실, 블레오마이신, 빈크리스틴, 카보플라틴, 에피루비신, 독소루비신, 사이클로포스파마이드, 빈데신, 에토포시드, 파클리탁셀, 열 (이상고열), 등), 방사선보호제 (예를 들면, 시스테아민, 아미노알킬 디하이드로젼 포스포로티오에이트, 아미포스틴 (WR 2721), IL-1, IL-6, 등). 방사선감작제는 종양 세포의 사멸을 향상시킨다. 방사선보호제는 건강한 조직을 방사선의 유해한 영향으로부터 보호한다.

허용될 수 없는 부정적인 부작용 없이 방사선의 선량이 포유동물에게 용인되는 한, 임의의 유형의 방사선이 포유동물에게 투여될 수 있다. 방사선요법의 적합한 유형은, 예를 들면, 이온화 (전자기) 방사선요법 (예를 들면, X-선 또는 감마선) 또는 입자 빔 방사선 요법 (예를 들면, 높은 선형 에너지 방사선)을 포함한다. 이온화 방사선은 이온화, 즉, 전자의 획득 또는 손실을 생산하기에 충분한 에너지를 갖는 입자 또는 광자를 포함하는 방사선으로서 정의된다 (예를 들면, 본원에 그 전체가 참고로 통합된 U.S. 제5,770,581호에 기재된 바와 같음). 방사선의 효과는 임상의에 의해 적어도 일부 조절될 수 있다. 일 구현예에서, 방사선의 선량은 최대 표적 세포 노출 및 독성 감소를 위해 분획화된다.

일 구현예에서, 동물에게 투여되는 방사선의 총 선량은 약 .01 Gray (Gy) 내지 약 100 Gy이다. 또 다른 구현예에서, 약 10 Gy 내지 약 65 Gy (예를 들면, 약 15 Gy, 20 Gy, 25 Gy, 30 Gy, 35 Gy, 40 Gy, 45 Gy, 50 Gy, 55 Gy, 또는 60 Gy)가 치료 과정 동안 투여된다. 일부 구현예에서 방사선의 완전한 선량이 1일 동안 투여될 수 있음에도 불구하고, 총 선량이 며칠 동안 이상적으로 분획화되고 투여된다. 바람직하게는, 방사선요법은 적어도 약 3일, 예를 들면, 적어도 5, 7, 10, 14, 17, 21, 25, 28, 32, 35, 38, 42, 46, 52, 또는 56일 (약 1-8주) 동안 투여된다. 따라서, 방사선의 1일 선량은 대략 1-5 Gy (예를 들면, 약 1 Gy, 1.5 Gy, 1.8 Gy, 2 Gy, 2.5 Gy, 2.8 Gy, 3 Gy, 3.2 Gy, 3.5 Gy, 3.8 Gy, 4 Gy, 4.2 Gy, 또는 4.5 Gy), 또는 1-2 Gy (예를 들면, 1.5-2 Gy)를 포함할 것이다. 방사선의 1일 선량은 표적화된 세포의 파괴를 유도하기에 충분해야 한다. 만약 일정 기간 동안 늘어나면, 일 구현예에서, 방사선은 매일 투여되지 않고, 이에 의해 포유동물이 휴식을 취하고 상기 요법의 효과가 실현되게 한다. 예를 들면, 방사선은 바람직하게는 치료의 각 주 동안, 5일 연속 투여되고, 2일에 투여되지 않으며, 이에 의해 주당 2일의 휴식을 허용한다. 그러나, 방사선은 포유동물의 반응성 및 임의의 잠재적인 부작용에 따라, 1일/주, 2일/주, 3일/주, 4일/주, 5일/주, 6일/주, 또는 7일/주 내내 투여될 수 있다. 방사선 요법은 상기 치료 기간에 임의의 시간에 개시될 수 있다. 일 구현예에서, 방사선은 1주 또는 2주 내에 개시되고, 남은 치료 기간의 지속시간 동안 투여된다. 예를 들면, 방사선은, 예를 들면 고형 종양을 치료하기 위해 6주를 포함하는 치료 기간 중 1-6주 또는 2-6주 내에 투여된다. 대안적으로, 방사선은 5주를 포함하는 치료 기간 중 1-5주 또는 2-5주 내에 투여된다. 이들 예시적인 방사선요법 투여 스케줄은 본원에 제공된 방법을 제한하고자 하는 것은 아니다.

항미생물 치료제가 또한 구조식 (I)의 화합물과 조합된 치료제로서 사용될 수 있다. 미생물 유기체의 기능을 사멸하거나, 억제하거나, 또는 그렇지 않는 한 약화시킬 수 있는 임의의 제제가 사용될 수 있을 뿐만 아니라 그러한 활성을 가지는 것으로 고려되는 임의의 제제가 사용될 수 있다. 항미생물제는, 비제한적으로, 천연 및 합성 항생제, 항체, 억제성 단백질 (예를 들면, 데펜신), 안티센스 핵산, 막 분열성 제제 등을 포함하고, 이는 단독으로 조합하여 사용된다. 실제, 임의의 유형의 항생제가 사용될 수 있고, 이는, 비제한적으로, 항균제, 항바이러스제, 항진균제 등을 포함한다.

본 방법에서, 1종 이상의 구조식 (I)의 화합물은 이를 필요로 하는 포유동물에게 투여된다. 상기 방법의 또 다른 구현예에서, 1종 이상의 화합물 및 1종 이상의 제2 치료제, 즉, 항암제는 하기 조건 중 하나 이상 하에 이를 필요로 하는 포유동물에게 투여된다: 예를 들면, 상이한 주기성으로, 상이한 지속시간으로, 상이한 농도로, 상이한 투여 경로에 의해. 일 구현예에서, 구조식 (I)의 화합물은 치료제 또는 항암제 이전에, 예를 들면, 제2 치료제 또는 항암제의 투여 이전 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, 또는 18시간, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6일, 또는 1, 2, 3, 또는 4주에 투여된다. 또 다른 구현예에서, 구조식 (I)의 화합물은 제2 치료제 또는 항암제 이후에, 예를 들면, 항암제의 투여 후 0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 10, 12, 또는 18시간, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6일, 또는 1, 2, 3, 또는 4주에 투여된다. 또 다른 구현예에서, 구조식 (I)의 화합물 및 제2 치료제 또는 항암제는 동시에, 하지만 상이한 스케줄로 투여되며, 예를 들면, 본 화합물은 매일 투여되는 반면, 제2 치료제 또는 항암제는 1주에 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 또는 4주마다 1회 투여된다. 또 다른 구현예에서, 본 발명의 화합물은 1주 1회 투여되고 제2 치료제 또는 항암제는 매일, 1주 1회, 2주마다 1회, 3주마다 1회, 또는 4주마다 1회 투여된다.

일 구현예에서, 환자에서 암을 치료하거나, 또는 개선하는 방법은 구조식 (I)의 화합물의 치료적 유효량을 환자에게 박동성 투여하는 것을 포함한다.

구조식 (I)의 화합물의 독성 및 치료 효능은, 예를 들면, 동물에서 독성을 야기하지 않는 최고 용량으로서 정의되는, 화합물의 최대 내성 용량 (MTD)을 결정하기 위하여, 세포 배양물 또는 실험 동물에서 표준 약제학적 절차에 의해 결정될 수 있다. 최대 내성 용량 및 치료 효과 (예를 들면, 종양 성장의 억제) 간의 용량 비는 치료 지수이다. 복용량은 이용된 복용 형태, 및 이용된 투여 경로에 따라 이 범위 안에서 달라질 수 있다. 치료적 유효량의 결정은, 특히 본원에 제공된 상세한 개시내용에 비추어, 당해분야의 숙련가의 능력 내에 속한다.

요법에서 사용하는데 필요한 구조식 (I)의 화합물의 치료적 유효량은 치료될 병태의 본성, 활성이 요구되는 시간의 길이, 및 환자의 연령 및 상태에 따라 달라지며, 궁극적으로 주치의에 의해 결정된다. 투여량 및 간격은 원하는 치료 효과를 유지하기에 충분한 MDM2 저해제의 혈장 수준을 제공하기 위해 개별적으로 조정될 수 있다. 원하는 용량은 편리하게 단일 용량으로 투여될 수 있거나, 또는 다중 용량으로서, 예를 들면 1일당 1, 2, 3, 4회 또는 그 이상의 하위용량으로, 적절한 간격으로 투여될 수 있다. 다중 용량이 종종 요구되거나 필요하다. 예를 들면, 본 발명의 MDM2 저해제는 하기의 빈도로 투여될 수 있다: 4일 간격으로 1일당 1회 용량으로서 전달된 4회 용량 (q4d x　4); 3일 간격으로 1일당 1회 용량으로 전달된 4회 용량 (q3d x　4); 5일 간격으로 1일당 전달된 1회 용량 (qd x　5); 3주 동안 1주당 1회 용량 (qwk3); 5회 1일 용량, 2일 휴식, 및 또 다른 5회 1일 용량 (5/2/5); 또는, 상황에 적절한 것으로 결정된 임의의 용량 요법.

본원에서 제공된 약제학적 조성물은 구조식 (I)의 1종 이상의 화합물을 그의 의도된 목적을 달성하는데 유효한 양으로 포함한다. 개별적인 필요는 다를 수 있지만, 각각의 성분의 유효량의 최적 범위의 결정은 본 기술분야의 기술에 속한다. 전형적으로, 화합물은 포유동물, 예를 들면 인간에게, 경구로, 세포자멸사의 유도에 반응하는 장애를 위해 치료되는 포유동물의 체중의 1일당 0.0025 내지 50 mg/kg의 용량, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 동등량으로 투여될 수 있다. 일 구현예에서, 약 0.01 내지 약 25 mg/kg은 장애를 치료하거나 완화시키기 위해 경구로 투여된다. 근육내 주사의 경우, 용량은 일반적으로 경구 용량의 약 2분의 1이다. 예를 들면, 적합한 근육내 용량은 약 0.0025 내지 약 25 mg/kg, 또는 약 0.01 내지 약 5 mg/kg이다.

단위 경구 용량은 약 1 내지 약 2000 mg, 예를 들면, 약 100 내지 약 1000 mg의 본 화합물을 포함할 수 있다. 단위 용량은 각각 약 5 내지 약 500 mg, 편리하게 약 50 내지 250 mg의 화합물 또는 그것의 염을 함유하는, 1종 이상의 정제 또는 캡슐로서 매일 1회 이상 투여될 수 있다.

국소 제형에서, 화합물은 담체 그램 당 약 0.01 내지 100 mg의 농도로 존재할 수 있다. 하나의 구현예에서, 본 화합물은 약 5-100 mg/ml의 농도로 존재한다.

화합물을 열 화학으로서 투여하는 것 외에도, 구조식 (I)의 화합물은 약제학적 제제 또는 조성물의 성분으로서 투여될 수 있다. 약제학적 조성물은 1종 이상의 약제학적으로 허용가능한 담체, 부형제, 및/또는 보조제를 포함한다. 1종 이상의 담체, 부형제, 및 보조제는 구조식 (I)의 화합물을 약제학적으로 사용될 수 있는 제제로 가공하는 것을 용이하게 한다. 조성물, 특히 투여의 한 가지 유형을 위해 사용될 수 있는 경구 또는 국소 투여될 수 있는 조성물, 예컨대 정제, 당의정, 서방 로젠지 및 캡슐, 구강 세정제 및 구강 청결제, 겔, 액체 서스펜션, 모발 린스, 모발 겔, 샴푸, 및 또한 직장으로 투여될 수 있는 제제, 예컨대 좌약뿐만 아니라 정맥내 주입, 주사, 국소로 또는 경구로 투여하기 적합한 용액은, 1종 이상의 담체, 부형제, 및/또는 보조제와 함께, 구조식 (I)의 화합물의 약 0.01 내지 99 퍼센트, 또는 약 0.25 내지 75 퍼센트를 함유한다.

본원에서 제공된 약제학적 조성물은 구조식 (I)의 화합물의 유익한 효과를 경험할 수 있는 임의의 환자에게 투여될 수 있다. 본원에서 제공된 방법 및 조성물이 그렇게 제한되는 것으로 의도되지 않음에도 불구하고, 그러한 환자 중 가장 중요한 것은 포유동물, 예컨대 인간이다. 다른 환자는 수의과 동물 (소, 양, 돼지, 말, 개, 고양이 등)을 포함한다.

구조식 (I)의 화합물 및 이의 약제학적 조성물은 그것의 의도된 목적을 달성하는 임의의 수단에 의해 투여될 수 있다. 구조식 (I)의 화합물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들면 경구, 구강, 흡입, 설하, 직장, 질, 요추 천자를 통한 낭내 또는 척추강내, 경요도, 비강, 피부를 통한, 즉, 경피, 또는 비경구 (정맥내, 근육내, 피하, 관상동맥내, 진피내, 유선내, 복강내, 관절내, 척추강내, 안구뒤, 폐내 주사 및/또는 특정한 부위에서의 수술적 이식) 투여에 의해 투여될 수 있다. 비경구 투여는 바늘 및 주사기를 이용하여 또는 고압 기술을 이용하여 달성될 수 있다. 대안적으로, 또는 동시에, 투여는 경구 경로에 의할 수 있다. 투여된 복용량은 수령체의 연령, 건강, 및 체중, 만약 있는 경우, 동시 치료의 종류, 치료의 빈도, 및 원하는 효과의 특성에 의존할 것이다.

본 발명의 약제학적 조성물 및 제제는 종래의 혼합, 과립화, 당의정-제조, 용해, 또는 동결건조 공정에 의해 제조된다. 경구용 약제학적 조성물은 본 발명의 화합물을 고체 부형제와 조합하고, 선택적으로 상기 수득한 혼합물을 분쇄하고, 만약 원하는 경우 또는 필요한 경우, 적합한 보조제를 첨가한 후, 상기 혼합물을 가공하여 정제 또는 당의정 코어를 수득함으로써 수득될 수 있다.

적합한 부형제는, 예를 들면, 충전제, 예컨대 사카라이드, 예를 들면 락토오스 또는 수크로오스, 만니톨 또는 소르비톨, 셀룰로오스 제제 및/또는 칼슘 포스페이트, 예를 들면 트리칼슘 포스페이트 또는 칼슘 수소 포스페이트 뿐만 아니라 결합제, 예컨대 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분, 감자 전분, 젤라틴, 트라가칸쓰, 메틸 셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스, 나트륨 카복시메틸셀룰로오스, 및/또는 폴리비닐 비닐피롤리돈을 이용하는, 전분 페이스트를 포함한다. 원한다면, 상기-언급된 전분 및 또한 카복시메틸-전분, 가교결합된 폴리비닐 비닐피롤리돈, 한천, 또는 알긴산 또는 그것의 염, 예컨대 나트륨 알기네이트와 같은 붕해제가 부가될 수 있다. 보조제는 적합한 유동-조절제 및 윤활제일 수 있다. 적합한 보조제는, 예를 들면, 실리카, 탈크, 스테아르산 또는 이의 염, 예컨대 마그네슘 스테아레이트 또는 칼슘 스테아레이트, 및/또는 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 당의정 코어는 적합한 코팅물과 함께 제공되며, 이는 원한다면, 위액에 내성이 있다. 이러한 목적을 위해, 농축된 사카라이드 용액이 사용될 수 있고, 이는 임의로 아라비아검, 탈크, 폴리비닐 비닐피롤리돈, 폴리에틸렌 글리콜 및/또는 이산화티타늄, 래커 용액 및 적합한 유기 용매 또는 용매 혼합물을 함유할 수 있다. 위액에 내성이 있는 코팅물을 생산하기 위해, 아세틸셀룰로오스 프탈레이트 또는 하이드록시프로필메틸-셀룰로오스 프탈레이트와 같은 적합한 셀룰로오스 제제의 용액이 사용된다. 염료 또는 안료가, 예를 들면, 확인을 위해 또는 활성 화합물 용량의 조합을 규명하기 위해, 정제 또는 당의정 코팅물에 부가될 수 있다.

경구로 사용될 수 있는 다른 약제학적 제제는 젤라틴으로 만들어진 푸시-핏 (push-fit) 캡슐, 뿐만 아니라 젤라틴 및 글리세롤 또는 소르비톨과 같은 가소제로 만들어진 연질, 밀봉 캡슐을 포함한다. 푸시-핏 캡슐은 과립의 형태의 활성 화합물을 함유할 수 있고, 이는 충전제, 예컨대 락토오스, 결합제, 예컨대 전분, 및/또는 윤활제, 예컨대 탈크 또는 마그네슘 스테아레이트 및, 임의로, 안정제와 혼합될 수 있다. 연질 캡슐에서, 활성 화합물은 적합한 액체, 예컨대 지방 오일, 또는 유동 파라핀에 용해되거나 현탁될 수 있다. 또한, 안정제가 부가될 수 있다.

직장에서 사용될 수 있는 가능한 약제학적 제제는, 예를 들면 좌약을 포함하며, 이는 활성 화합물 중 하나 이상과 좌약 기제와의 조합으로 이루어진다. 적합한 좌약 기제는, 예를 들면, 천연 또는 합성 트리글리세라이드, 또는 파라핀 탄화수소이다. 또한, 활성 화합물과 기제와의 조합으로 이루어진 젤라틴 직장 캡슐을 사용할 수 있다. 가능한 기제 물질은, 예를 들면, 액체 트리글리세라이드, 폴리에틸렌 글리콜, 또는 파라핀 탄화수소를 포함한다.

비경구 투여를 위한 적합한 제형은 수용성 형태의 활성 화합물의 수용액, 예를 들면, 수용성 염 및 알칼리성 용액을 포함한다. 또한, 적절한 유성 주사 서스펜션으로서 활성 화합물의 서스펜션이 투여될 수 있다. 적합한 친유성 용매 또는 비히클은 지방 오일, 예를 들면, 참기름, 또는 합성 지방산 에스테르, 예를 들면, 에틸 올레이트 또는 트리글리세라이드 또는 폴리에틸렌 글리콜-400을 포함한다. 수성 주사 서스펜션은 서스펜션의 점도를 증가시키는 물질을 함유할 수 있고, 이는, 예를 들면, 나트륨 카복시메틸 셀룰로오스, 소르비톨, 및/또는 덱스트란을 포함한다. 임의로, 서스펜션은 또한 안정제를 함유할 수 있다.

국소 조성물은 일 구현예에서 적절한 담체의 선택에 의해, 오일, 크림, 로션, 연고 등으로서 제형화된다. 적합한 담체는 식물성 또는 광유, 백색 바셀린 (백색 연질 파라핀), 분지쇄 지방 또는 오일, 동물성 지방 및 고분자량 알코올 (C₁₂초과)을 포함한다. 상기 담체는 활성 성분이 가용성인 것들일 수 있다. 유화제, 안정제, 습윤제 및 항산화제가 또한 포함될 수 있을 뿐만 아니라 원한다면, 색상 또는 향을 부여하는 제제가 포함될 수 있다. 추가로, 경피 침투 증강제가 이들 국소 제형에서 이용될 수 있다. 그러한 인핸서의 예는 미국 특허 제3,989,816호 및 제4,444,762호에서 발견될 수 있고, 이는 본원에 참고로 통합되어 있다.

연고는 식물성 오일, 예컨대 아몬드 오일 중의 활성 성분의 용액을 가온한 연질 파라핀과 혼합하고 상기 혼합물을 냉각함으로써 제형화될 수 있다. 그와 같은 연고의 전형적인 예는 약 30 중량% 아몬드 오일 및 약 70 중량% 백색 연질 파라핀을 포함하는 것이다. 로션은 적합한 고분자량 알코올, 예컨대 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜에 활성 성분을 용해시킴으로써 편리하게 제조된다.

하기 실시예는 예시적이며, 본원에서 제공된 화합물, 조성물, 및 방법에 제한되는 것이 아니다. 임상 요법에서 일반적으로 접하며 본 기술분야의 숙련가에게 자명한 다양한 조건 및 파라미터의 다른 적합한 변형 및 적응은 본원에서 제공된 방법, 화합물, 및 조성물의 사상 및 범위에 속한다.

별도로 또는 함께 포장된, 구조식 (I)의 화합물 및, 임의로, MDM2 및 MDM2-관련된 단백질의 억제가 이점을 제공하는 질환 및 병태의 치료에서 유용한 제2 치료제, 및 이들 활성제를 이용하기 위한 설명서를 갖는 삽입물을 포함하는 키트가 본원에서 추가로 제공된다.

많은 구현예에서, 구조식 (I)의 화합물은 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질의 억제가 이점을 제공하는 질환 또는 병태의 치료에 유용한 제2 치료제와 함께 투여된다. 제2 치료제는 구조식 (I)의 화합물과 상이하다. 구조식 (I)의 화합물 및 제2 치료제는 원하는 효과를 달성하기 위하여 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다. 또한, 구조식 (I)의 화합물 및 제2 치료제는 단일 조성물 또는 2개의 별개의 조성물로부터 투여될 수 있다.

제2 치료제는 그것의 원하는 치료 효과를 달성하는 양으로 투여된다. 각각의 제2 치료제에 대한 유효한 투여량 범위는 당해기술에 공지되어 있으며, 제2 치료제는 그와 같은 확립된 범위 내에서 이를 필요로 하는 개체에게 투여된다.

구조식 (I)의 화합물 및 제2 치료제는 단일-단위 용량으로서 함께 또는 다중-단위 용량으로서 별도로 투여될 수 있고, 여기서 상기 구조식 (I)의 화합물은 제2 치료제 이전에 투여되거나 그 반대이다. 구조식 (I)의 화합물의 1종 이상의 용량 및/또는 제2 치료제의 1종 이상의 용량이 투여될 수 있다. 따라서, 구조식 (I)의 화합물은 1종 이상의 제2 치료제, 예를 들면, 비제한적으로, 항암제와 함께 사용될 수 있다.

추가의 구현예로서, 본 발명은 본 발명의 방법을 실시하기 위한 그의 사용을 용이하게 하는 방식으로 포장된 1종 이상의 화합물 또는 조성물을 포함하는 키트를 포함한다. 하나의 간단한 구현예에서, 키트는 용기, 예컨대 밀봉된 병 또는 통 내에 포장된, 방법의 실시에 유용한 것으로 본원에 기재된 화합물 또는 조성물 (예를 들면, 구조식 (I)의 화합물 및 선택적인 제2 치료제를 포함하는 조성물)을 포함하고, 라벨은 용기에 부착되거나 또는 키트 내에 포함되며, 이는 본 발명의 방법을 실시하기 위한 화합물 또는 조성물의 사용을 설명한다. 키트는 추가적으로 의도된 투여 경로에 따라 조성물을 투여하는데 적합한 디바이스를 포함할 수 있다.

하기에 논의된 바와 같이, MDM2 저해제는 치료제로서의 그의 개발을 방해하는 특성을 보유하였다. 본 발명의 중요한 특징에 따라, 구조식 (I)의 화합물이 MDM2 및 MDM2-관련된 단백질의 저해제로서 합성되고 평가되었다. 예를 들면, 본 발명의 화합물은 전형적으로 50　nM 미만, 25　nM 미만, 10 nM 미만, 및 5　nM 미만의 MDM2에 대한 결합 친화성 (IC₅₀)를 갖는다.

화합물의 합성

본 발명의 화합물을 하기와 같이 제조했다. 하기 합성식은 구조식 (I)의 화합물을 합성하기 위해 사용된 반응의 대표적인 것이다. 본 발명의 MDM2 저해제를 제조하기 위한 변형 대안적인 반응식은 쉽게, 아래에서 보여진 합성에서 적절한 시약 및 제제의 치환에 의해 당해분야의 숙련가의 능력 내에 있다.

용매 및 시약을 상업적으로 수득했고 추가 정제없이 사용했다. NMR 스펙트럼의 화학 이동(δ)은 통상적인 방식으로 보고된 다중도와 함께 내부 표적에 대한 δ 값 (ppm) 다운필드로서 보고된다.

다르게 언급되지 않는 한 모든 온도는 섭씨 온도이다.

합성 방법, 실시예에서, 그리고 명세서 전체를 통해, 약어는 하기 의미를 갖는다.

최종 화합물은 트리플루오로아세테이트 염 형태이다.

구조식 (I)의 화합물은 하기에서 기재된 바와 같이 비대칭 합성 방법에 의해 또한 제조될 수 있다: U.S. 특허 번호 7,759,383 및 7,737,174 (각각은 참고로 본 명세서에 편입되어 있다), 및 Ding 등, J. Am. Chem . Soc . 127:10130-10131 (2005)). 비대칭 합성의 경우에, 구조식 (I)의 화합물은 당해기술에서 잘 알려진 키랄 분해 방법, 예를 들면, 키랄 칼럼 크로마토그래피에 의해 분리될 수 있다. 키랄 분해에서 사용되는 적합한 키랄은, 예들 들면, Daicel CHIRALCEL^® OD-H, Daicel CHIRAKPAK^® AD-H, 및 Regis Technologies ULMO 키랄 칼럼을 포함한다. 다른 키랄 분해 방법이 또한 가능하다.

HATU (616 mg, 1.62 mmol), DIEA (0.550 mL, 3.24 mmol)를 DCM (15 mL) 중 산 I (500 mg, 1.08 mmol)의 서스펜션에 부가하고 교반했다. 10 분 후, 메틸 4-아미노바이사이클로[2.2.2]옥탄-1-카복실레이트 (396 mg, 2.16 mmol) 및 DMAP (132 mg, 1.08 mmol)를 반응에 부가했다. 밤새 후, 용매를 진공에서 제거하고 조 물질을 칼럼 크로마토그래피로 정제하여 549 mg의 중간체 II를 얻었다.

LiOH.H₂O (110 mg , 2.62 mmol) 및 수산화나트륨 (105 mg, 2.62 mmol)를 THF (3 mL), H₂O (3 mL), 및 MeOH (3 mL)의 혼합물에서 용해된 중간체 II (549 mg, 0.873 mmol)의 용액에 부가했다. 가수분해가, TLC에 결정된 바와 같이 완료된 후, 반응을 TFA (3 mL)으로 켄칭하고 교반했다. 5 분 후, 용액을 진공에서 농축하고 ((건조는 아님), 수득한 오일을 CH₃CN 및 H₂O (1:1)에서 재용해시키고 용액을 분취 HPLC로 정제했다. 정제된 분획을 조합하고, 진공에서 농축하고, H₂O 에서 재-용해시키고, 냉동시키고 동결건조시켜 화합물 번호 2 (TFA 염)을 백색 분말로서 얻었다.¹H-NMR (300MHz, CD₃OD) δ ppm 7.63 (t, J = 6.84 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 6.76 Hz, 1H), 7.35 (t, J = 7.21 Hz, 1H), 7.18-7.04 (m, 2H), 6.77 (dd, J = 1.26 Hz, 1H), 4.68 (d, J = 10.61 Hz, 1H), 2.73-2.48 (m, 1H), 2.16-1.98 (m, 1H), 1.98-1.43 (m, 18H), 1.27-1.02 (m, 2H); ESI-MS m/z 614.92 (M+H)⁺.

화합물 번호 1을, 화합물 번호 2에 대해 기재된 동일한 합성 전략을 사용하여 수득했다. ¹H-NMR (300MHz, CD₃OD) δ ppm 7.61 (t, J = 6.55 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 2.34, 8.20 Hz, 1H), 7.39 (t, J = 6.90 Hz, 1H), 7.15 (t, J = 8.53 Hz, 1H), 7.10 (dd, J = 1.94, 8.22Hz, 1H), 6.78 (d, J = 1.88 Hz, 1H), 4.98 (d, J = 10.87 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 10.92 Hz, 1H), 2.84-2.71 (m, 1H), 2.26 (s, 6H), 2.14 (d, J = 13.90 Hz, 1H), 2.02-1.67 (m, 5H), 1.60-1.38 (m, 1H), 1.31-1.10 (m, 2H); ESI-MS m/z 572.25 (M+H)⁺.

화합물 번호 3을, 화합물 번호 2에 대해 기재된 동일한 합성 전략을 사용하여 수득했다. ¹H-NMR (300MHz, CD₃OD) δ ppm 7.71 (s, 1H), 7.63 (t, J = 6.61 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 2.08, 8.18 Hz, 1H), 7.36 (t, J = 7.54 Hz, 1H), 7.18-7.05 (m, 2H), 6.79 (d, J =1.83 Hz, 1H) 4.96 (d, J = 10.48 Hz, 1H), 4.71 (d, J = 10.51 Hz, 1H), 2.78 (d, J =14.25 Hz, 1H), 2.59-1.91 (m, 6H), 1.91-1.70 (m, 12H), 1.53-1.33 (m, 1H); ESI-MS m/z 650.92 (M+H)⁺.

화합물 번호 4: CDI (49 mg, 0.303 mmol), DIEA (88 μL, 0.505 mmol), 및 DMAP (cat.)을 1,2-디클로로에탄 (10 mL) 중 화합물 번호 2 (62 mg, 0.101 mmol) 의 용액에 부가하고 반응을 40 ℃로 가열했다. 20 분 후, 메탄설폰아미드 (96 mg, 1.01 mmol)를 부가하고 반응을 환류시켰다. 밤새 후, 용매를 진공에서 제거하고 조 물질을 분취 HPLC로 정제하여 화합물 번호 4 (TFA 염)을 백색 고형물로서 얻었다. ¹H-NMR (300MHz, CD₃OD) δ ppm 7.64 (t, J = 7.23 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 1.93, 8.22 Hz, 1H), 7.36 (t, J = 7.23 Hz, 1H), 7.18-7.04 (m, 2H), 6.77 (d, J = 1.66 Hz, 1H), 4.69 (d, J = 10.70 Hz, 1H), 3.19 (s, 3H), 2.75-2.52 (m, 1H), 2.21-1.99 (m, 1H), 1.99-1.44 (m, 17H), 1.41-1.27 (m, 1H), 1.27-1.03 (m, 2H); ESI-MS m/z 691.42 (M+H)⁺.

화합물 번호 5를, 화합물 번호 2에 대해 기재된 동일한 합성 전략을 사용하여 수득했다. ¹H-NMR (300MHz, CD₃OD) δ ppm 7.69-7.60 (m, 2H), 7.48 (, dd, J = 2.09, 8.23 Hz, 1H), 7.40 (t, J = 6.93 Hz, 1H), 7.16 (t, J = 8.05 Hz, 1H), 7.09 (dd, J = 1.91, 8.21 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 1.87 Hz, 1H), 5.07 (d, J = 11.01 Hz, 1H), 4.72 (d, J = 11.08 Hz, 1H), 2.60 (d, J = 12.07 Hz, 1H), 2.30 (dt, J = 4.11, 13.45 Hz, 1H), 2.11-1.93 (m, 2H), 1.92-1.52 (m, 16H), 1.25 (s, 3H); ESI-MS m/z 644.25 (M+H)⁺.

화합물 번호 6을, 화합물 번호 2에 대해 기재된 동일한 합성 전략을 사용하여 수득했다. ¹H-NMR (300MHz, CD₃OD) δ ppm 7.70 (s, 1H), 7.62 (t, J = 7.05 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 2.08, 8.21 Hz, 1H), 7.38 (t, J = 7.41 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 7.93 Hz, 1H), 7.10 (dd, J = 1.76, 8.19 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 1.83 Hz, 1H), 4.99 (d, J = 11.35 Hz, 1H), 4.70 (d, J = 11.00 Hz, 1H), 2.76-2.59 (m, 1H), 2.22-1.91 (m, 3H), 1.89-1.19 (m, 16H), 1.03 (s, 3H); ESI-MS m/z 644.75 (M+H)⁺.

파라포름알데하이드 (15 mg, 0.506 mmol)를 AcOH (1 mL)에서 용해된 화합물 화합물 번호 2 (20 mg, 0.028 mmol)의 용액에 부가했다. 15 분 후 나트륨 트리아세톡시보로하이드라이드 (59 mg, 0.28 mmol)를 부가하고 밤새 반응시킨 후 반응을 포화된 염화암모늄 용액으로 켄칭하고 에틸 아세테이트로 추출했다. 에틸 아세테이트 용매를 진공에서 제거하고 수득한 오일을 아세토니트릴 및 물 (0.1% TFA를 갖는 1:1)의 용액에서 재-용해시키고 분취 HPLC로 정제했다. 순수한 화합물 번호 7 분획을 조합하고, 진공에서 농축하고, (최소량의 아세토니트릴과 함께) 물에서 재-용해시키고, 냉동시키고 동결건조시켜 화합물 번호 7 (TFA 염)을 백색 분말로서 얻었다. ¹H-NMR (300MHz, CD₃OD) δ ppm 7.94 (s, 1H), 7.61-7.52 (m, 2H), 7.40 (t, J = 7.32 Hz, 1H), 7.19-7.08 (m, 2H), 6.78 (d, J = 1.56 Hz, 1H), 4.99 (d, J = 11.86 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 12.06 Hz, 1H), 3.27 (s, 3H), 2.61-2.48 (m, 1H), 2.32-2.14 (m, 2H), 1.88-1.40 (m, 18H), 1.37-1.12 (m, 1H); ESI-MS m/z 628.83 (M+H)⁺.

화합물 번호 8을, 화합물 번호 7에 대해 기재된 동일한 합성 전략을 사용하여 수득했다. ¹H-NMR (300MHz, CD₃OD) δ ppm 7.63 (t, J = 7.04 Hz, 1H), 7.56-7.48 (m, 2H), 7.42 (t, J = 7.39 Hz, 1H), 7.18 (t, J = 7.96 Hz, 1H), 7.10 ( d, J = 8.06 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 5.08-4.96 (m, 1H), 4.57 (d, J = 11.85 Hz, 1H), 4.18-3.99 (m, 1H), 3.87-3.69 (m, 1H), 2.70-2.54 (m, 1H), 2.36-2.13 (m, 2H), 1.94-1.45 (m, 18H), 1.39 (t, J = 6.65 Hz, 3H), 1.32-1.14 (m, 1H); ESI-MS m/z 642.50 (M+H)⁺.

화합물 번호 9를, 화합물 번호 4에 대해 기재된 동일한 합성 전략을 사용하여 수득했다 (수산화암모늄 용액을 메탄설폰아미드 대신에 부가함). ¹H-NMR (300MHz, CD₃OD) δ ppm; ESI-MS m/z 627.58 (M+H)⁺.

MDM2 단백질에 결합하는 본 MDM2 저해제의 능력을 설명하기 위해, 경쟁적 FP 결합 검정을 수행했다. 본 MDM2 저해제를 사용하는 SJSA-1 이종이식 모델에서 안정성 시험, 세포 성장 검정, 약력학적 연구, 및 생체내 효능 연구를 또한 수행했다.

형광-편광 MDM2 결합 검정

본원에 개시된 MDM2 저해제의 결합 친화성을 재조합 인간 His-태그된 MDM2 단백질 (잔기 1-118) 및 형광성으로 태그된 p53-기반 펩타이드를 이용한 형광 편광-기반 (FP-기반) 결합 검정을 이용하여 결정하였다.

형광 프로브의 설계는 PMDM6-F로 불리는 이전에 보고된 고친화성 p53-기반 펩타이드모사 화합물에 기초하였다 (Garcia-Echeverria 등, J. Med. Chem. 43: 3205-3208(2000)). 재조합 MDM2 단백질과의 PMDM6-F의 K_d 값은 포화 곡선으로부터 결정하였다. MDM2 단백질을 Dynex 96-웰, 검정색, 둥근-바닥 플레이트에서 연속적으로 2배 희석하고, PMDM6-F 펩타이드를 1nM 농도로 부가하였다. 상기 검정을 버퍼 (100 mM 인산칼륨, pH 7.5; 100 μg/mL 소 감마 글로불린; 0.02% 나트륨 아자이드, 0.01% 트리톤 X-100)에서 수행하고, 편광값을 ULTRA 판독기(Tecan U.S. Inc., Research Triangle Park, NC)를 이용하여 3시간 배양 후에 측정하였다. S자형 용량-반응 곡선(가변 기울기)에서의 mP 값을 비-선형회귀를 이용하여 적합화시켜 IC₅₀ 값을 수득하였고, 이는 1.40 nM ± 0.25로 결정되었다. 하기 방정식을 이용하여 K_d 값을 계산하였다: K_d 값 = IC₅₀ - L0/2. L0/2는 자유 리간드(PMDM6-F)의 농도이다. PMDM6-F가 1nM의 최종 농도로 사용되었으므로, L0/2는 0.5 nM이었다.

용량-의존적, 경쟁적 결합 실험을 DMSO 중의 시험된 화합물의 연속 희석물을 이용하여 수행하였다. 검정 버퍼 (100 mM 인산칼륨, pH 7.5; 100 μg/mL 소 감마 글로불린; 0.02% 나트륨 아자이드, 0.01% 트리톤 X-100) 중의 시험된 화합물 및 미리 배양된 MDM2 단백질 (10 nM) 및 PMDM6-F 펩타이드 (1 nM)의 5 μL 샘플을 Dynex 96-웰, 검정색, 둥근-바닥 플레이트에서 부가하여 125 μL의 최종 용적을 생산하였다. 각각의 검정을 위해, 대조군은 MDM2 단백질 및 PMDM6-F (0% 억제에 해당함), PMDM6-F 펩타이드 단독 (100% 억제에 해당함)을 포함하였다. 편광값을 3시간 배양 후에 측정하였다. IC₅₀ 값, 즉, 결합된 펩타이드의 50%가 대체된 저해제 농도를 비선형 최소 자승 검정을 이용하여 그래프로부터 결정하였다. 곡선 적합을 GRAPHPAD PRISM 소프트웨어 (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA)를 이용하여 수행하였다. 이 검정의 결과가 표 2에 요약되어 있다.

세포 성장 검정

등질 (Isogenic) HCT-116 결장암 세포주는 Bert Vogelstein 박사 (Johns Hopkins, Baltimore, MD)로부터 받았고, 이를 10% FBS를 함유하는 McCoy's 5A 배지에서 유지시켰다. SJSA-1 세포주는 ATCC (Manassas, VA)로부터 수득하였고 10% FBS를 함유하는 RPMI-1640 배지에서 유지시켰다.

세포를 화합물과 함께 2-3×10³ 세포/웰의 밀도로 96-웰 편평한 바닥 세포 배양 플레이트에 시딩하고 4일간 배양하였다. 증가하는 농도의 시험된 화합물로 처리한 후 세포 성장 억제의 비율을 WST-8 (2-(2-메톡시-4-니트로페닐)-3-(4-니트로페닐)-5-(2,4-디설포페닐)-2H-테트라졸륨 모노나트륨 염 (Dojindo Molecular Technologies Inc., Gaithersburg, Maryland)에 의해 결정하였다. WST-8을 각 웰에 10%의 최종 농도로 부가한 다음, 상기 플레이트를 37에서 2-3시간 동안 배양하였다. 샘플의 흡광도를 TECAN ULTRA 판독기를 이용하여 450 nm에서 측정하였다. 세포 성장을 50%까지 억제한 화합물의 농도 (IC₅₀)를 GraphPad Prism 소프트웨어 (GraphPad Software, La Jolla, CA 92037, USA)를 이용하여 미처리된 세포 및 화합물로 처리된 세포에서의 흡광도를 비교함으로써 계산하였다. 이 검정의 결과가 표 2에 제시되어 있다.

표 2.

SJSA -이종이식 모델을 이용한 생체내 효능 연구

SJSA-1 (골육종) 종양 세포를 트립신 (0.05%)-EDTA (0.53 mM) (GIBCO™, Invitrogen Corp.)로 수확하고, 성장 배지를 부가하고, 상기 세포를 얼음 위에 두었다. 세포 샘플을 트립판 블루 (GIBCO™, Invitrogen Corp.)와 1:1로 혼합하고 혈구계 상에서 계수하여 살아있는/죽은 세포의 수를 결정하였다. 세포를 1X PBS (GIBCO™, Invitrogen Corp.)로 1회 세정하고 PBS에서 재현탁시켰다. 매트리겔 주사를 위해, PBS에서 세정한 후, 세포를 5 mg/ml의 최종 매트리겔 단백질 농도를 위하여 1:1 PBS 및 매트리겔 (BD Biosciences, Invitrogen Corp.)의 빙랭된 혼합물에 재현탁시켰다. SJSA-1 종양을 매트리겔을 이용하여 0.1ml 내에 5 x 10⁶ 세포로 C.B-17 SCID 마우스 내로 접종하였다. 세포를 27 게이지 바늘을 이용하여 각각의 마우스의 옆구리 영역 내로 피하 주사하였다.

마우스에서 성장하는 종양의 크기를 캘리퍼스를 이용하여 2개의 치수로 측정하였다. 종양 부피 (mm³) = (AxB²)/2, 상기 식에서, A 및 B는 각각 종양 길이 및 폭 (mm)이다. 처리 동안, 종양 부피 및 체중을 1주에 3회 측정하였다. 처리를 중지한 후, 종양 부피 및 체중을 1주에 적어도 1회 측정하였다. 마우스를 종양 성장 및 독성의 추가 관찰을 위해 60일간 더 두었다. 화합물 번호 1, 번호 7 및 번호 8의 항종양 활성이 도 2에 나타나 있다. 3주 동안 매주 (qw*3wks), 3주 동안 2일마다, 3주 동안 1주일 중 3일동안 매일 (qd1-3/w*3wks), 및 2주 동안 매일 (qd*14d)을 포함하는, 상이한 용량으로 그리고 상이한 복용 계획에 따른 화합물 번호 8 (경구 위관영양법을 통해 투여됨)의 항종양 활성이 도 3에 나타나 있다.

본원에서 제공된 화합물의 생체내 투여를 위한 적합한 비히클은, 비제한적으로, 10% PEG 400:3% 크레모포어:87% PBS; 98% PEG 200:2% 폴리소르베이트 80; 98% PEG 200:2% TPGS; 및 0.5% 폴리소르베이트 80:0.6% 메틸 셀룰로오스:98.9% 물을 포함한다.

용액에서 화합물의 안정성

화합물의 안정성을 초고 성능 액체 크로마토그래피를 이용하여 1:1 MeOH:H₂O, 1:1 CH₃CN:H₂O, 및 세포 배양 배지에서 결정하였다.

하기 표 3, 4, 및 5는 화합물 화합물 번호 2, 화합물 번호 7, 및 화합물 번호 8에 대한 마이크로솜 안정성, 경구 약동학, 및 세포 성장 억제를 보여주는 추가의 시험 결과를 요약한다.

표 3. 마우스, 랫트 , 개 및 인간 마이크로솜에서 대표적인 화합물의 마이크로솜 안정성

표 4. 스프래그-다우리 랫트에서 경구 약동학 데이터의 요약

표 5. 대표적인 화합물에 의한 세포 성장의 억제. 세포를 4일간 처리하고 그리고 세포 성장을 WST 검정을 이용하여 결정하였다.

본 발명은 구조식 (I)의 화합물 및 구조식 (I)의 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다.

본 발명은 또한 구조식 (I)의 화합물의 치료적 유효량을 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 환자를 치료하는 방법을 포함하며, 여기서 상기 환자는 과증식성 질환을 가지고, 여기서 과증식성 질환, 예컨대 암의 세포는 기능적 p53을 발현하며, 상기 방법은 상기 환자에게 1종 이상의 항암제, 예를 들면, 화학치료제 또는 방사선 요법을 투여하는 것을 추가로 포함한다.

본 발명은 바람직한 구현예와 관련되어 기술된다. 그러나, 본 발명은 상기 개시된 구현예에 제한되지 않는 것으로 인식되어야 한다. 본원에서 본 발명의 구현예의 설명을 고려해볼 때, 당해분야의 숙련가에 의해 다양한 변형이 이뤄질 수 있는 것으로 이해된다. 그와 같은 변형은 하기 청구범위에 포함된다.

Claims

아래의 구조식을 갖는 화합물 또는 그것의 약제학적으로 허용가능한 염:

식 중,

은
로 구성된 군으로부터 선택되고;
B는 C_4-7카보사이클릭 고리이고;
R₁은 H 또는 C_1-4알킬이고;
n은 0, 1, 또는 2이고;
R_2, R_3, R_4, R_5, R_7, R_8, R_9, 및 R₁₀은, H, F, Cl, CH₃, 및 CF₃으로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R₆은
이고;
R^a는 수소 또는 C_1-4알킬이고;
R^b는 수소 또는 C_1-4알킬이고;
R^c 및 R^d는 고리 B의 하나의 탄소 원자에 대한 치환체이고, 여기서
R^c는 H, C_1-3알킬, C_1-3알킬렌OR^a, OR^a, 또는 할로이고;
R^d는 H, C_1-3알킬, C_1-3알킬렌OR^a, OR^a, 또는 할로이고; 그리고
R^e는 -C(=O)OR^a, -C(=O)NR^aR^b, 또는 -C(=O)NHSO₂CH₃이다.
청구항 1에 있어서, B는
또는
인, 화합물.
청구항 1에 있어서, n은 0 또는 1인, 화합물.
청구항 3에 있어서, R₁은 H 또는 CH₃인, 화합물.
청구항 1에 있어서, -(CH₂)_n-R₁은 H, CH₃, 또는 CH₂CH₃인, 화합물.
청구항 1에 있어서, R₂은 H인, 화합물.
청구항 1에 있어서, R₃은 할로인, 화합물.
청구항 7에 있어서, R₃은 클로로인, 화합물.
청구항 1에 있어서, R₄는 H인, 화합물.
청구항 1에 있어서, R₅는 H인, 화합물.
청구항 1에 있어서, R₄ 및 R₅는 H인, 화합물.
청구항 1에 있어서, R₇은 할로인, 화합물.
청구항 12에 있어서, R₇은 플루오로인, 화합물.
청구항 1에 있어서, 각각의 R₈, R₉, 및 R₁₀은 H인, 화합물.
청구항 1에 있어서, R^a 및 R^b는, 개별적으로, H, CH₃, 또는 CH₂CH₃인, 화합물.
청구항 1에 있어서, R^c 및 R^d는, 개별적으로, H, 할로, OH, CH₃, CH₂CH₃, 또는 CH₂OH인, 화합물.
청구항 1에 있어서, R^c 및 R^d는 F 및 F, H 및 H, OH 및 CH₃, OH 및 H, CH₃ 및 CH₃, CH₃ 및 OH, H 및 OH, CH₂CH₃ 및 CH₂CH₃, 또는 CH₂OH 및 CH₂OH인, 화합물.
청구항 1에 있어서, R^c 및 R^d는, 고리 B와 함께 합쳐져서, 하기를 형성하는, 화합물:

또는
청구항 1에 있어서, R^e는 -C(=O)OH, -C(=O)NH₂, 또는 -C(=O)NHSO₂CH₃인, 화합물.
청구항 1에 있어서, R⁶은

또는

인, 화합물.
하기로 구성된 군으로부터 선택된 화합물:

및
(a) 청구항 1의 화합물, 및 (b) 부형제 및/또는 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 암의 치료를 위한 조성물.
청구항 22에 있어서, 암의 치료에서 유용한 화학치료제를 추가로 포함하는, 조성물.
청구항 1에 있어서,

이
이고;
B는
또는
이고;
-(CH₂)_n-R₁은 H, CH₃, 또는 CH₂CH₃이고;
R_2, R_3, R_4, R_5, R_8, R_9, 및 R₁₀은, H, F, Cl, 및 CH₃으로 구성된 군으로부터 독립적으로 선택되고;
R₇은 F이고;
R₆은
인, 화합물.
및
로 구성된 군으로부터 선택된 화합물.
인 화합물.
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