KR102374634B1 - 피부 유사 또는 투과 인지질 기술이 적용된 알파리포산 및 항산화제를 포함하는 항노화용 조성물 - Google Patents

피부 유사 또는 투과 인지질 기술이 적용된 알파리포산 및 항산화제를 포함하는 항노화용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 알파리포산 및 항산화제를 포함하는 항노화용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 상기 항노화용 조성물은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함한다. 본 발명에 따른 항노화용 조성물은 자외선에 대한 산화 억제, 세포 손상 방지 및 염증 억제에 있어 현저한 효과를 가지고 있는바, 항노화를 위한 제약, 화장료 및 식품 분야에서 다양하게 활용될 수 있다.

Description

피부 유사 또는 투과 인지질 기술이 적용된 알파리포산 및 항산화제를 포함하는 항노화용 조성물{Anti-aging composition comprising alpha lipoic acid and antioxidant applied with skin-like or permeable phospholipid technology}
본 발명은 알파리포산 및 항산화제를 포함하는 항노화용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 상기 항노화용 조성물은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함한다.
피부 노화는 나이가 들어감에 따라 자연스럽게 생기는 내인성 노화(intrinsic aging)와 외부 환경에 의해서 생기는 외인성 노화(extrinsic aging)로 나눌 수 있다. 내인성 노화의 경우 피부 표피와 진피 간의 결합이 약해지거나 각질형성세포의 분열과 지질 형성 능력을 저하시키는 등의 특징을 가지며 잔주름, 피부 건조증, 경미한 탄력 감소 등을 나타낸다. 외인성 노화는 대부분 광노화(photoaging)를 의미하며 자외선으로 인한 피부 탄력섬유의 손상을 주요 특징으로 한다. 또한 노화에 의한 피부기능 저하는 직, 간접적으로 피부조직 내에 형성된 활성산소종(reactive oxygen species)과 같은 자유 라디칼(free radical)이 피부에 정상적으로 존재하고 있는 항산화 물질의 작용을 감소시켜 유발되는 산화적 스트레스에 의해 영향을 받는다.
이러한 피부노화 억제를 위해 다양한 접근 방법으로 항노화 화장품 연구가 진행되고 있으며, 피부노화의 현상들을 방지하고, 개선시킬 수 있는 활성성분에 대하여 많은 연구가 행해지고 있다.
한국공개특허 제10-2015-0143698호 한국공개특허 제10-2011-0015531호 한국공개특허 제10-2007-0113711호
이에 본 발명자들은 알파리포산 및 항산화제를 포함하는 항노화 포뮬러를 개발하고, 이의 자외선에 대한 산화 억제, 세포 손상 방지 및 염증 억제에 대한 현저한 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서 본 발명의 목적은, 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 항노화용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은, 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 방지용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은, 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 염증성 피부 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 항노화용 화장료 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 방지용 화장료 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 항노화용 식품 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 염증성 피부 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 염증성 피부 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 항노화용 의약외품 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 방지용 의약외품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 항노화용 조성물은 자외선에 대한 산화 억제, 세포 손상 방지 및 염증 억제에 있어 현저한 효과를 가지고 있는바, 항노화를 위한 제약, 화장료 및 식품 분야에서 다양하게 활용될 수 있다.
도 1 및 2는 인간 각질형성 세포주인 HaCaT 세포에서 본 발명에 따른 항노화 포뮬러 및 대조군의 세포독성을 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 자외선이 조사된 인간 각질형성 세포주인 HaCaT 세포에서 본 발명에 따른 항노화 포뮬러의 세포 손상 방지 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 4는 자외선이 조사된 인간 각질형성 세포주인 HaCaT 세포에서 본 발명에 따른 항노화 포뮬러의 세포 손상 방지 효과를 형태학적 분석을 통해 확인한 결과를 나타낸 도이다(A; 자외선 비조사군, B; 자외선 조사군).
도 5는 자외선이 조사된 인간 각질형성 세포주인 HaCaT 세포에서 본 발명에 따른 항노화 포뮬러의 세포 손상 방지 효과를 유세포 분석을 통해 확인한 결과를 나타낸 도이다(A; 자외선 비조사군, B; 자외선 조사군).
도 6은 도 5의 유세포 분석 결과를 토대로 그래프를 작성한 것이다.
도 7은 자외선이 조사된 인간 각질형성 세포주인 HaCaT 세포에서 항노화 포뮬러 및 대조군 6 내지 8이 세포사멸 관련 단백질의 발현에 미치는 영향을 조사한 결과를 나타낸 도이다.
도 8은 자외선이 조사된 인간 각질형성 세포주인 HaCaT 세포에서 항노화 포뮬러 및 대조군의 활성산소종 억제 효과를 형광 분석을 통해 확인한 결과를 나타낸 도이다(A; 자외선 비조사군, B; 자외선 조사군).
도 9는 자외선이 조사된 인간 각질형성 세포주인 HaCaT 세포에서 항노화 포뮬러 및 대조군 6 내지 8의 활성산소종 억제 효과를 유세포 분석을 통해 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 10은 도 9의 유세포 분석 결과를 토대로 작성한 그래프이다.
도 11은 자외선이 조사된 인간 각질형성 세포주인 HaCaT 세포에서 항노화 포뮬러 및 대조군 6 내지 8의 DPPH 라디칼 소거능을 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 12는 자외선이 조사된 인간 각질형성 세포주인 HaCaT 세포에서 항노화 포뮬러 및 대조군 6 내지 8의 MAPKs 신호전달 경로 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 양태에 따르면, 본 발명은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 항노화용 조성물을 제공한다.
본 발명의 항노화용 조성물은 알파리포산 및 항산화제를 포함하고 피부 유사 또는 투과 인지질 기술이 적용된 조성물일 수 있다.
본 발명의 구체예에서, 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐은 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2의 중량비로 혼합되는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 0.75-1.5 : 0.75-1.5 : 0.75-1.5 : 0.75-1.5 : 0.75-1.5의 중량비이며, 가장 바람직하게는 1 : 1 : 1 : 1 : 1의 중량비로 혼합되는 것이다.
본 발명의 바람직한 구체예에서, 상기 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐의 혼합물은 농도가 1 내지 500 μg/ml인 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 50 내지 400 μg/ml, 더욱 바람직하게는 100 내지 300 μg/ml일 수 있다.
본 발명에 있어서, 항노화는 내적 또는 외적 요인으로 인해 생체 구조와 기능이 쇠퇴하는 현상을 예방, 억제 또는 완화하는 것을 의미한다.
본 발명의 구체예에서, 항노화는 내인성 또는 외인성 노화를 예방, 억제 또는 완화하는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 산화 억제, 세포 손상 방지 및 염증 억제이며, 더욱 바람직하게는 상기 자외선에 의한 산화 억제, 세포 손상 방지 및 염증 억제일 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 따른 항노화용 조성물은 포함된 각 성분(알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 또는 콜라겐), 또는 이들의 조합보다 현저한 자외선에 의한 산화 억제, 세포 손상 방지 및 염증 억제 효과를 확인하였다. 이는 본 발명에 따른 항노화 조성물이 현저한 광노화 억제 효과가 있음을 의미하는바, 항노화를 위한 제약, 화장료 및 식품 분야에서 다양하게 활용될 수 있다.
본 발명의 항노화용 조성물이 화장료 조성물인 경우, 본 발명의 화장료 조성물은 상기 유효성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 사용되는 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 향료 등과 같은 통상적인 보조제 및 담체가 더 포함될 수 있다. 예를 들어, 상기 화장료 조성물에는 글리세린, 부틸렌 글라이콜, 폴리옥시에칠렌 경화피마자유, 토코페릴 아세테이트, 시트릭산, 판테놀, 스쿠알란, 소듐 시트레이트, 알란토인 등의 보조성분이 추가로 더 포함될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 기본적으로 피부에 도포되는 것이므로, 당업계의 화장료 조성물을 참조하여 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있다. 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 마스크팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 등이 포함될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트, 폴리아미드 파우더 등이 포함될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄, 디메틸 에테르 등의 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로 용매, 용해화제, 유탁화제 등이 포함될 수 있고, 구체적으로 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 포함될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로 물, 에탄올, 프로필렌글리콜 등의 액상 희석제; 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르 등의 현탁제; 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가, 트라칸트 등이 포함될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성유, 라놀린유도체, 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 포함될 수 있다.
본 발명의 항노화용 조성물이 식품 조성물인 경우, 본 발명의 식품 조성물은 항노화 등 생체조절 기능을 가지는 식품을 말하는 것으로, 장기적으로 복용하였을 때 인체에 무해해야 한다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 수프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 실시예에서, 본 발명의 식품 조성물은 식품 첨가물일 수 있다. 상기 식품 첨가물은 상기 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에 본 발명의 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐은 원료에 대하여 15중량% 이하, 바람직하게는 10 중량% 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
본 발명의 실시예에서, 본 발명의 식품 조성물은 건강음료 조성물일 수 있다. 상기 건강음료 조성물은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐 외에 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 포함할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토오스, 수크로오스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ml 당 일반적으로 약 0.01 내지 10 g, 바람직하게는 약 0.01 내지 0.1 g 이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명의 항노화용 조성물이 의약외품 조성물인 경우, 이는 생리대, 마스크, 안대, 붕대, 거즈, 탈지면 및 반창고 등에 포함될 수 있다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 자외선에 의한 피부 손상 방지용 조성물을 제공한다.
본 발명의 구체예에서, 상기 자외선에 의한 피부 손상 방지용 조성물은 화장료, 식품 또는 의약외품 조성물일 수 있으며, 중복된 설명은 명세서의 복잡성을 고려하여 생략한다.
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 염증성 피부 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공한다.
상기 염증성 피부 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물은 약학적 조성물 또는 식품 조성물일 수 있다.
본 발명에 있어서, 예방은 본 발명에 따른 조성물의 투여로 염증성 피부 질환을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 말한다. 또한 치료는 본 발명에 따른 조성물의 투여로 염증성 피부 질환의 증세가 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미하며, 개선은 본 발명의 조성물을 개체에 투여하거나 섭취시켜 염증성 피부 질환의 나쁜 상태를 좋게 하는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 구체예에서, 상기 염증성 피부 질환은 자외선에 의한 것이 바람직하며, 보다 바람직하게는 피부 홍반, 피부작열증, 부종, 피부통증, 소양증, 색소침착증 및 피부암으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상일 수 있으며, 자외선에 의해 발병되는 염증성 피부 질환이라면 제한되지 않는다.
본 발명의 조성물이 약학적 조성물인 경우, 본 발명의 약학적 조성물은 통상의 방법에 따라 다양한 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 예컨대, 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽 등의 경구형 제형으로 제형화할 수 있고, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐과 함께 염증성 피부 질환에 대하여 예방 또는 치료 효과를 갖는 공지의 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
본 발명의 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제를 더 포함할 수 있으며, 이때 약제학적으로 허용 가능한 첨가제로는 전분, 젤라틴화 전분, 미결정셀룰로오스, 유당, 포비돈, 콜로이달실리콘디옥사이드, 인산수소칼슘, 락토스, 만니톨, 엿, 아라비아고무, 전호화전분, 옥수수전분, 분말셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 오파드라이, 전분글리콜산나트륨, 카르나우바납, 합성규산알루미늄, 스테아린산, 스테아린산마그네슘, 스테아린산알루미늄, 스테아린산칼슘, 백당 등이 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0.1 ~ 90 중량부 포함되는 것이 바람직하나 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 실제 임상투여 시에 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제할 수 있으며, 당해 기술 분야에 알려진 적합한 제제를 이용하는 것이 바람직하다.
상기 경구 투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트(Calcium carbonate), 수크로스(Sucrose) 또는 락토오스(Lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 또한, 상기 경구 투여를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.
상기 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜(Propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐은 약학적으로 허용되는 염의 형태로 사용될 수 있으며, 통상의 방법에 의해 제조되는 모든 염, 수화물 및 용매화물이 포함된다.
염으로는 약학적으로 허용 가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가 염은 통상의 방법, 예를 들어 화합물을 과량의 산 수용액에 용해시키고, 이 염을 수혼 화성 유기 용매, 예를 들어 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴을 사용하여 침전시켜서 제조한다. 동 몰량의 화합물 및 물 중의 산 또는 알코올(예, 글리콜 모노메틸에테르)을 가열하고, 이어서 상기 혼합물을 증발시켜 건조시키거나, 또는 석출된 염을 흡인 여과시킬 수 있다. 이때, 유리산으로는 유기산과 무기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 인산, 황산, 질산, 주석산 등을 사용할 수 있고 유기산으로는 메탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 말레인산(maleic acid), 숙신산, 옥살산, 벤조산, 타르타르산, 푸마르산(fumaric acid), 만데르산, 프로피온산(propionic acid), 구연산(citric acid), 젖산(lactic acid), 글리콜산(glycollic acid), 글루콘산(gluconic acid), 갈락투론산, 글루탐산, 글루타르산(glutaric acid), 글루쿠론산(glucuronic acid), 아스파르트산, 아스코르브산, 카본산, 바닐릭산, 히드로아이오딕산 등을 사용할 수 있으며, 이에 제한되지 않는다.
또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용 가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은, 예를 들어 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해시키고, 비용해 화합물 염을 여과한 후 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속염으로서는 특히 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하나 이들에 제한되는 것은 아니다. 또한, 이에 대응하는 은염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 은염(예, 질산은)과 반응시켜 얻을 수 있다.
상기 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은, 달리 지시되지 않는 한, 상기 화합물에 존재할 수 있는 산성 또는 염기성 기의 염을 포함한다. 예를 들어, 약학적으로 허용 가능한 염으로는 히드록시기의 나트륨, 칼슘 및 칼륨 염 등이 포함될 수 있고, 아미노기의 기타 약학적으로 허용 가능한 염으로는 히드로브로마이드, 황산염, 수소 황산염, 인산염, 수소 인산염, 이수소 인산염, 아세테이트, 숙시네이트, 시트레이트, 타르트레이트, 락테이트, 만델레이트, 메탄술포네이트(메실레이트) 및 p-톨루엔술포네이트(토실레이트) 염 등이 있으며 당업계에서 알려진 염의 제조방법을 통하여 제조할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 상기 약학적 조성물의 제제화 방법, 투여 방식, 투여 시간 및/또는 투여 경로 등에 의해 다양해질 수 있으며, 상기 약학적 조성물의 투여로 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 투여 대상이 되는 개체의 종류, 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 질병의 증세나 정도, 성별, 식이, 배설, 해당 개체에 동시 또는 이시에 함께 사용되는 약물 기타 조성물의 성분 등을 비롯한 여러 인자 및 의약 분야에서 잘 알려진 유사 인자에 따라 다양해질 수 있으며, 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 목적하는 치료에 효과적인 투여량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여량은 예를 들어, 0.05 내지 5 mg/kg의 농도로 투여되는 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 0.1 내지 0.4 mg/kg, 더욱 바람직하게는 0.2 내지 0.35 mg/kg, 더더욱 바람직하게는 0.25 mg/kg일 수 있으나, 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 약학적 조성물의 투여 경로 및 투여 방식은 각각 독립적일 수 있으며, 그 방식에 있어 특별히 제한되지 아니하며, 목적하는 해당 부위에 상기 약학적 조성물이 도달할 수 있는 한 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1. 항노화 포뮬러 제조
본 실시예에서는 알파리포산(alpha lipoic acid) 및 항산화제를 포함하는 항노화 포뮬러를 제조하였다. 상기 항노화 포뮬러는 알파리포산 1 g, 비타민 C 1 g, 이데베논 1 g, 세라마이드 1 g 및 콜라겐 1 g을 혼합하여 제조하였다.
또한 후술되는 실시예에서 사용된 대조군은 표 1에 나타내었다.
성분 혼합비율(중량비)
대조군 1 알파리포산
대조군 2 비타민C
대조군 3 콜라겐
대조군 4 이데베논
대조군 5 세라마이드
대조군 6 알파리포산, 비타민C, 이데베논 1 : 1 : 1
대조군 7 알파리포산, 비타민C 1 : 1
대조군 8 비타민C, 이데베논, 세라마이드, 콜라겐 1 : 1 : 1 : 1
실시예 2. 인간 각질형성 세포주 배양
2-1. 세포 배양
인간 각질형성 세포주인 HaCaT 세포를 ATCC로부터 분양받아 세포독성 확인 실험에서 사용하였다. 10% FBS(fetal bovine serum) 및 1% 항생제(페니실린(penicillin)/스트렙토마이신(streptomycin))를 첨가한 DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium) 배지를 이용하여 상기 세포주를 CO2 농도 5% 및 온도 37℃인 인큐베이터에서 배양하였다. 배양된 세포는 1주일에 2 내지 3회 계대 배양하였다.
배양된 세포를 배양용기에 부착시켜 준비하였고, 실시예 1에서 제조된 항노화 포뮬러 및 대조군을 각각 처리하여 24시간 동안 배양하였다.
2-2. 자외선 조사
실시예 1에서 제조된 항노화 포뮬러 및 대조군을 각각 처리한 세포에 자외선 B(UVB 280-320nm) 30 mJ/㎠를 조사하였다.
실시예 3. 항노화 포뮬러의 세포독성 확인
상기 실시예 1에서 제조된 항노화 포뮬러의 세포독성을 MTS(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, inner salt) 분석법으로 측정하였다. 구체적으로, 배지에 실시예 1의 항노화 포뮬러를 10, 100, 200, 500 및 1000 μg/ml의 농도로 처리하여 24시간 동안 배양하고 MTS 염료를 처리하였다. 이때 살아있는 세포는 처리한 MTS 염료가 미토콘드리아에 있는 환원효소에 의해 자주색의 포르마잔을 생성하지만 사멸된 세포는 미토콘드리아가 기능을 하지 않기 때문에 포르마잔을 생성하지 못한다. 형성된 포르마잔을 마이크로플레이트 리더(precision microplate reader)로 490/590 nm에서 흡광도를 측정하여 세포독성을 확인하였다. 세포독성을 확인한 결과는 도 1 및 2에 나타내었다.
도 1 및 2에 나타낸 바와 같이, 실시예 1의 항노화 포뮬러 및 대조군은 10 내지 1000 μg/ml의 농도로 처리한 경우에는 세포 생존율에 별다른 영향이 없었으나, 500 μg/ml의 농도로 처리한 경우 세포 생존율이 약 10% 감소, 1000 μg/ml의 농도로 처리한 경우 세포 생존율이 약 20% 정도 감소함을 확인하였다. 이에, 500 μg/ml 이상으로 처리시에는 세포 독성이 있는 것으로 판단하여 이후 실험에서는 200 μg/ml까지로 제한하여 실험하였다.
추가적으로, 자외선 조사 여부 및 항노화 포뮬러 처리(200 μg/ml)에 따른 자외선이 조사된 세포의 세포독성을 확인하였다. 자외선이 조사된 세포에서 세포독성을 확인한 결과는 도 3에 나타내었다.
도 3에 나타낸 바와 같이, UVB가 조사된 무처리군은 세포 생존율이 약 50%로 감소한 것을 확인하였다. 반면에, 실시예 1의 항노화 포뮬러 처리군은 무처리군에 비해 세포 생존율이 약 30% 증가한 것을 확인하였다.
실시예 4. 항노화 포뮬러 처리의 자외선에 대한 세포 손상 방지 효과
4-1. 형태학적 분석
실시예 2-1의 세포 및 실시예 2-2의 자외선이 조사된 세포에서 상기 실시예 1에서 제조된 항노화 포뮬러의 세포 손상 방지 효과를 현미경을 통해 확인하였다. 대조군도 동일한 방법으로 분석하였다. 자외선 조사 여부에 따른 세포 형태를 관찰한 결과는 도 4에 나타내었다.
도 4에 나타낸 바와 같이, 자외선이 조사된 세포(도 4B)는 자외선 조사 전(도 4A)에 비해 자외선 B로 인한 세포 사멸 발생 빈도가 높은 것을 확인하였다. 상기 실시예 1의 항노화 포뮬러를 처리한 세포에 자외선 B를 조사하는 경우 대조군 및 무처리군에 비해 세포의 수가 현저히 많으며, 세포의 형태도 유지되는 것을 확인하였다. 상기 결과는 실시예 1의 항노화 포뮬러가 자외선에 대한 세포 손상 방지 효과가 우수하다는 것을 의미한다.
4-2. 유세포 분석을 통한 UVB에 의한 세포사멸(apoptosis) 억제 활성 분석
UVB 조사로 인한 세포사멸(apoptosis) 및 세포사(cell death)와의 직접적인 연관성을 확인하기 위해, UVB 조사된 HaCaT 세포에 FITC-annexin-V staining kit를 이용하여 annexin-V and P.I staining assay를 실시하였다. 본 실시예에서는 항노화 포뮬러와 함께, 상기 실시예 4-1에서 세포의 사멸이 적었던 대조군 6 내지 8의 세포사멸 억제 활성을 분석하였다. 구체적으로, 상기 실시예 2-1의 HaCaT 세포를 10% FBS를 함유한 DMEM 배지로 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 2 × 105 cells/well이 되도록 DMEM 배지로 희석하여 세포 현탁액을 6 웰 배양용기에 각 웰당 2 ml씩 시딩하였다. 세포를 부착시키기 위하여, 시딩된 세포를 24시간 동안 배양하였다. 부착된 세포에 항노화 포뮬러를 처리한 후, 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 회수한 후 PBS로 세척하였다. 세척된 세포를 100 μl의 binding buffer로 재부유시킨 후, 2 μl의 annexin V-FITC를 첨가하여 암실에서 15분 동안 반응시켰다. 그리고 FACS buffer 500 μL 및 P.I 5 μL를 첨가하여 유세포 분석기(flow cytometry(BD Biosciences, CA))를 이용하여 분석하였다. 자외선 조사군의 경우, 항노화 포뮬러 및 대조군을 각각 처리한 세포에 자외선 B(UVB 280-320nm) 30 mJ/㎠를 조사한 후 분석하였다. 대조군도 동일한 방법으로 분석하였다. 대조군 6 내지 8도 항노화 포뮬러와 동일한 방법으로 분석하였다. 유세포 분석 결과는 도 5에 나타내었다. 또한 항노화 포뮬러 및 대조군 6 내지 8의 유세포 분석 결과를 토대로 작성된 그래프는 도 6에 나타내었다.
도 5 및 6에 나타낸 바와 같이, HaCaT 세포에 UVB를 조사한 경우 세포사멸이 약 50%임을 확인하였다. 그러나 항노화 포뮬러를 처리한 세포에 UVB를 조사한 경우 세포사멸이 25%임을 확인하였으며, 이는 대조군들에 비해 현저히 낮은 수치이다. 상기 결과는 항노화 포뮬러가 세포사멸을 억제하는 활성이 높은 것을 의미한다.
4-3. 웨스턴 블롯팅을 통한 세포사멸 관련 단백질의 발현 분석
UVB 조사에 따른 세포사멸 관련 단백질 발현을 분석하기 위하여, 웨스턴 블롯팅을 통해 UVB 조사에 따른 항노화 포뮬러와 함께, 상기 실시예 4-1에서 세포의 사멸이 적었던 대조군 6 내지 8의 세포사멸 관련 단백질 발현을 분석하였다. 구체적으로, 상기 실시예 2-1의 HaCaT 세포를 10% FBS가 함유된 DMEM 배지로 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 DMEM 배지로 1.5 × 106 cells/well이 되도록 희석하여 세포 현탁액을 제조하였다. 세포를 배양용기에 부착시키기 위하여, 상기 세포 현탁액을 100 mm 배양용기에 10 mL씩 시딩한 후 24시간 동안 배양하여 배양용기에 부착시켰다. 부착된 세포에 항노화 포뮬러를 처리한 후, 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 회수한 후 PBS로 2 내지 3회 세척하였다. 세척된 세포에 용해 완충액을 첨가한 후 30분 동안 반응시켰고, 13,000xg에서 원심분리하여 세포막 성분 등을 제거하였다. 단백질 농도는 bicinchoninic acid protein assay kit(Pierce Biotechnology, USA)를 사용하여 정량하였다. 분리된 단백질 20 내지 50 μg을 로딩한 후 0.02 mA에서 SDS-PAGE(10% running gel, 4.5% stacking gel)를 실시하였다. SDS-PAGE gel에 전개된 단백질을 immun-blot PVDF(polyvinylidene difluoride) 멤브레인에 트랜스퍼하였다. 상기 트랜스퍼는 transfer buffer(20% methanol, 25 mM Tris, 192 mM glycine)를 사용하여 100 V에서 1시간 동안 immun-blot PVDF 멤브레인으로 이동시켰다. 단백질이 이동된 멤브레인은 5% 탈지 우유으로 1시간 동안 블로킹하였다. 1차 항체 P53, c-caspase3, bax, bcl-2(Cell Signaling, USA), b-actin(Sigma, USA)를 1：1,000의 비율로 0.1% TBST(10 mM Tris, 150 mM NaCl, pH 7.5 and 10% Tween 20) 완충용액에 희석하였으며, 블로킹된 멤브레인과 4℃에서 밤새도록 반응시켰다. 반응 후 멤브레인을 0.1% TBST로 3회 세척하였다. 세척된 멤브레인과 2차 항체(Santa Cruz Biotechnology, USA) 희석액(1:5000)을 상온에서 1시간 동안 반응시켰다. 반응 후 2차 항체 0.1% TBST로 3회 세척한 후 ECL detection kit(Thermo Scientific, USA)의 반응액들과 반응시킨 후 imagequantTM LAS 4000(Fujifilm Life Science, Japan)로 단백질 발현을 검출하였다. 자외선 조사군의 경우, 항노화 포뮬러 및 대조군을 각각 처리한 세포에 자외선 B(UVB 280-320nm) 30 mJ/㎠를 조사한 후 분석하였다. 대조군도 동일한 방법으로 분석하였다. 웨스턴 블롯팅을 통해 세포사멸 관련 단백질의 발현을 확인한 결과는 도 7에 나타내었다.
도 7에 나타낸 바와 같이, UVB 처리 후 p53 단백질 발현이 증가하는 것을 확인하였으며(무처리군, 무처리군+UVB), 항노화 포뮬러 처리군은 DNA 손상에 의한 노화와 관련된 p53과 다른 세포사멸 관련 단백질인 c-caspase 3 및 Bax의 발현이 현저히 감소하였고, 미토콘드리아의 포어 형성을 억제하는 Bcl-2의 발현은 증가하는 것을 확인하였다. 상기 결과는 항노화 포뮬러가 세포사멸을 억제하는 활성이 높다는 것을 확인한 실시예 4-2의 유세포 분석 결과와 일치한다.
실시예 5. 항노화 포뮬러의 항산화 효과
5-1. 형광 분석을 통한 항노화 포뮬러의 활성산소종 억제 효과 확인
자외선이 조사된 세포에서 항노화 포뮬러의 활성산소종(reactive oxygen species, ROS) 제거능을 DCF-DA(2'-7'dichlorofluorescin diacetate)를 이용하여 평가하였다. 구체적으로, 상기 실시예 2-1의 세포 및 실시예 2-2의 자외선이 조사된 세포를 PBS로 2회 세척하였다. 세척된 세포를 DCF-DA 25 μM이 첨가된 배지로 교체한 후 37℃에서 30분 동안 배양하였다. 배양된 세포를 PBS로 2회 세척한 후 형광 현미경으로 세포를 관찰하였다. 대조군도 위와 동일한 방법으로 분석하였다. 형광 현미경을 통해 세포를 관찰한 결과는 도 8에 나타내었다.
도 8에 나타낸 바와 같이, 자외선이 조사된 세포(도 8B)는 자외선 조사 전(도 8A)에 비해 활성산소종이 다량 생성된 것을 확인하였다. 상기 실시예 1의 항노화 포뮬러를 처리한 세포에 자외선 B를 조사하는 경우 대조군 및 무처리군에 비해 관찰되는 형광(즉, 활성산소종)이 현저히 적었다. 한편, 대조군 6 내지 8은 대조군 중에서 형광강도가 약한 것을 확인한바, 후술되는 실시예에서도 대조군으로 이용하였다.
또한 항노화 포뮬러와 함께, 대조군 6 내지 8을 처리한 세포를 PBS로 2회 세척한 후 유세포 분석기(flow cytometry(BD Biosciences, CA))를 이용하여 분석하였다. 유세포 분석 결과는 히스토그램 및 그래프로 표시하였고, 도 9 및 10에 각각 나타내었다.
도 9 및 10에 나타낸 바와 같이, 무처리군에 UVB를 조사한 경우 활성산소종이 무처리군에 비해 약 50% 증가하였다. 이에 비해, 항노화 포뮬러 처리군은 UVB를 조사하였음에도 불구하고 활성산소종이 약 25%였으며, 이는 다른 대조군들에 비해 통계 유의적으로 낮은 수치이다.
5-2. DPPH 라디칼 소거능 확인
DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) 라디칼 소거능 분석을 통해 항노화 포뮬러 및 대조군 6 내지 8의 항산화 활성을 확인하였다. 구체적으로, 항노화 포뮬러 용액을 준비하였다. 준비된 항노화 포뮬러 용액을 0.2mM DPPH 용액(용매 : 메탄올) 100 μl과 혼합하였다. 상기 혼합물을 1분 동안 교반한 후 실온에서 10분 동안 반응시킨 후 517 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 흡광도 측정값은 다음의 계산식으로 계산하였다.
자유 라디칼 소거율(%) = 1-(각 시표의 흡광도/대조군 흡광도) X 100
대조군 6 내지 8도 동일한 방법으로 DPPH 라디칼 소거능을 분석하였다. 항노화 포뮬러 및 대조군 6 내지 8의 DPPH 라디칼 소거능을 계산한 결과는 도 11에 나타내었다.
도 11에 나타낸 바와 같이, 항노화 포뮬러는 대조군 6 내지 8에 비해 DPPH 라디칼 소거능이 통계유의적으로 높은 것을 확인하였다.
실시예 6. 항노화 포뮬러의 MAPKs 신호전달 경로 억제 효과 확인
웨스턴 블롯팅을 통해 항노화 포뮬러가 HaCaT 세포에서 UVB에 의해 유도된 JNK MAPKs의 인산화에 미치는 효과를 분석하였다. 구체적으로, 상기 실시예 2-1의 HaCaT 세포를 10% FBS를 함유한 DMEM 배지로 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 2 × 105 cells/well이 되도록 DMEM 배지로 희석하여 세포 현탁액을 6 웰 배양용기에 각 웰당 2 ml씩 시딩하였다. 세포를 부착시키기 위하여, 시딩된 세포를 24시간 동안 배양하였다. 부착된 세포에 항노화 포뮬러를 처리한 후, 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포에 상기 실시예 2-2의 방법으로 UVB를 조사한 후 24시간 동안 배양하였다. 배양된 세포를 PBS로 2 내지 3회 세척한 후 용해 버퍼를 첨가하여 30분 동안 배양하였다. 배양된 세포를 13,000xg에서 원심분리하여 세포막 성분 등을 제거하였고, 단백질 농도는 bicinchoninic acid protein assay kit(Pierce Biotechnology, USA)를 사용하여 정량하였다. 분리된 단백질 20 내지 50 μg을 로딩한 후 0.02 mA에서 SDS-PAGE(10% running gel, 4.5% stacking gel)를 실시하였다. SDS-PAGE gel에 전개된 단백질을 immun-blot PVDF(polyvinylidene difluoride) 멤브레인에 트랜스퍼하였다. 상기 트랜스퍼는 transfer buffer(20% methanol, 25 mM Tris, 192 mM glycine)를 사용하여 100 V에서 1시간 동안 immun-blot PVDF 멤브레인으로 이동시켰다. 단백질이 이동된 멤브레인은 5% 탈지 우유으로 1시간 동안 블로킹하였다. 1차 항체 JNK, p-JNK(Cell Signaling, USA), b-actin(Sigma, USA) 를 1：1,000의 비율로 0.1% TBST(10 mM Tris, 150 mM NaCl, pH 7.5 and 10% Tween 20) 완충용액에 희석하였으며, 블로킹된 멤브레인과 4℃에서 밤새도록 반응시켰다. 반응 후 멤브레인을 0.1% TBST로 3회 세척하였다. 세척된 멤브레인과 2차 항체(Santa Cruz Biotechnology, USA) 희석액(1:5000)을 상온에서 1시간 동안 반응시켰다. 반응 후 2차 항체 0.1% TBST로 3회 세척한 후 ECL detection kit(Thermo Scientific, USA)의 반응액들과 반응시킨 후 imagequantTM LAS 4000(Fujifilm Life Science, Japan)로 단백질 발현을 검출하였다. 자외선 조사군의 경우, 상기 항노화 포뮬러 및 대조군을 각각 처리한 세포에 자외선 B(UVB 280-320nm) 30 mJ/㎠를 조사한 후 분석하였다. 대조군도 동일한 방법으로 분석하였다. 웨스턴 블롯팅을 통해 MAPKs 신호전달 경로 관련 단백질의 발현을 확인한 결과는 도 12에 나타내었다.
도 12에 나타낸 바와 같이, UVB 조사 후 인산화된 JNK(p-JNK) 단백질 발현이 증가하는 것을 확인하였으며(무처리군, 무처리군+UVB), 항노화 포뮬러 처리군은 JNK의 인산화가 대조군들에 비해 현저히 감소한 것을 확인하였다. 상기 결과는 항노화 포뮬러가 JNK 인산화 억제를 통해 MAPKs 신호전달경로에 영향을 미치며, 이를 통해 염증 억제 효과가 있음을 의미한다.
종합적으로 본 발명자들은 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐을 포함하는 항노화 포뮬러를 제조하고, 이의 현저한 자외선에 대한 세포사멸 억제, 활성산소종 제거능 및 JNK 단백질의 인산화를 억제하는 것을 확인하였다. 이는 본 발명에 따른 항노화 포뮬러가 현저한 자외선에 의한 산화 억제, 세포 손상 방지 및 염증 억제효과가 있음을 의미하는바, 항노화를 위한 제약, 화장료 및 식품 분야에서 다양하게 활용될 수 있다.
이하, 제제예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 제제예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 제제예에 의해 제한되는 것으로 해석되지 않는다.
제제예 1. 항노화용 화장료 조성물의 제조
1-1. 유연화장수(스킨로션)의 제조
항노화 포뮬러 0.5%
베타-1,3-글루칸 1.0%
부틸렌글리콜 2.0%
프로필렌글리콜 2.0%
카르복시비닐폴리머 0.1%
피이지-12 노닐페닐에테르 0.2%
폴리솔베이트 80 0.4%
에탄올 10.0%
트리에탄올아민 0.1%
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 to 100%
1-2. 영양화장수(밀크로션)의 제조
항노화 포뮬러 0.5 %
베타-1,3-글루칸 1.0 %
밀납 4.0 %
폴리솔베이트 60 1.5 %
솔비탄세스퀴올레이트 1.5 %
유동파라핀 0.5 %
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0 %
글리세린 3.0 %
부틸렌글리콜 3.0 %
프로필렌글리콜 3.0 %
카르복시비닐 폴리머 0.1 %
트리에탄올아민 0.2 %
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 to 100 %
1-3. 영양크림의 제조
항노화 포뮬러 1.0 %
베타-1,3-글루칸 5.0 %
밀날 10.0 %
폴리솔베이트 60 1.5 %
피이지 60 경화피마자유 2.0 %
솔비탄세스퀴올레이트 0.5 %
유동파라핀 10.0 %
스쿠알란 5.0 %
카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0 %
글리세린 5.0 %
부틸렌글리콜 3.0 %
프로필렌글리콜 3.0 %
트리에탄올아민 0.2 %
방부제, 색소, 향료 적량
정제수 to 100%
이상, 본 발명내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서, 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 실시양태일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의해 정의된다고 할 것이다.

Claims (13)

  1. 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐이 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2의 중량비로 혼합된 혼합물을 포함하는, 항노화용 화장료 조성물로,
    상기 노화는 자외선에 의한 노화인, 항노화용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 자외선은 자외선 B인, 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 혼합물은 농도가 1 내지 500 μg/ml인, 화장료 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 항노화는 산화 억제, 세포 손상 방지 및 염증 억제로 이루어진 군에서 선택된 1 이상인, 화장료 조성물.
  5. 삭제
  6. 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐이 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2의 중량비로 혼합된 혼합물을 포함하는, 항노화용 식품 조성물로,
    상기 노화는 자외선에 의한 노화인, 항노화용 식품 조성물.
  7. 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐이 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2의 중량비로 혼합된 혼합물을 포함하는, 항노화용 의약외품 조성물로,
    상기 노화는 자외선에 의한 노화인, 항노화용 의약외품 조성물.
  8. 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐이 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2의 중량비로 혼합된 혼합물을 포함하는, 자외선에 의한 피부 손상 방지용 화장료 조성물.
  9. 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐이 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2의 중량비로 혼합된 혼합물을 포함하는, 자외선에 의한 피부 손상 방지용 의약외품 조성물.
  10. 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐이 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2의 중량비로 혼합된 혼합물을 포함하는, 자외선에 의한 염증성 피부 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  11. 삭제
  12. 제10항에 있어서,
    상기 자외선에 의한 염증성 피부 질환은 피부 홍반, 피부작열증, 부종, 피부통증, 소양증, 색소침착증 및 피부암으로 이루어진 군에서 선택된 1 이상인, 약학적 조성물.
  13. 알파리포산, 비타민 C, 이데베논, 세라마이드 및 콜라겐이 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2 : 0.5-2의 중량비로 혼합된 혼합물을 포함하는, 자외선에 의한 염증성 피부 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
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