KR102362876B1 - 신규한 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 mdbdo 및 이의 용도 - Google Patents

신규한 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 mdbdo 및 이의 용도 Download PDF

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Abstract

본 발명은 신규한 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO 및 이의 용도에 관한 것으로, 신규한 페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa) MDBDO 균주, 이를 이용한 D-2,3-부탄디올 생산 방법, 상기 균주 또는 이의 배양물을 포함하는 항균용 조성물 및 상기 방법으로부터 생산된 D-2,3-부탄디올을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주는 메소(Meso)-2,3-부탄디올을 생산하지 않으면서 D-2,3-부탄디올을 선택적으로 생산하는 바, D-2,3-부탄디올의 수율 및 생산성 향상에 우수한 효과가 있고 균체 증식 등 배양 특성이 개선되어 비용 절감이 가능하다. 또한, 페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주로부터 생산된 D-2,3-부탄디올은 우수한 항균 효과 및 피부 보습 효과가 있는 바, 화장품을 비롯한 다양한 용도로 제공할 수 있다.

Description

신규한 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO 및 이의 용도{A novel Paenibacillus polymyxa MDBDO strain and uses thereof}
본 발명은 신규한 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO 및 이의 용도에 관한 것으로, 신규한 페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa) MDBDO 균주, 이를 이용한 D-2,3-부탄디올 생산 방법, 상기 균주 또는 이의 배양물을 포함하는 항균용 조성물 및 상기 방법으로부터 생산된 D-2,3-부탄디올을 포함하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
2,3-부탄디올(2,3-Butanediol, 2,3-BDO)은 다양한 산업에 활용되는 화학식 (CH3CHOH)2의 유기 화합물이다. 미생물로부터 생산되는 2,3-부탄디올은 세 종류의 형태(D-, L-, 메소(meso)-)를 가지는 이성질체이며, 이 이성질체들은 형태에 따라 각기 다른 용도로 활용된다. 광학비활성형인 메소-2,3-부탄디올은 주로 바이오화학의 원료물질로 사용되며, 광학활성형인 L-, D-2,3-부탄디올은 생리활성 소재로 이용 가능하다.
미생물의 종류에 따라서 2,3-부탄디올은 전술한 각기 다른 형태의 광학 이성질체 또는 이들의 혼합물 형태로 생산되고 있으며, 이러한 혼합물의 형태는 정제상 어려움이 따른다.
현재 클렙시엘라(Klebsiella) 속 미생물의 2,3-부탄디올 합성 대사를 응용한 산업 균주 연구개발이 전 세계적으로 활발하게 이루어지고 있다. 하지만, 클렙시엘라 속 미생물을 이용한 2,3-부탄디올 생산 기술은 병원성으로 인해 상용화에 제약이 따를 수 있다. 이에, 대안으로 안전한 GRAS((Generally Recognized As Safe)급 미생물인 바실러스(Bacillus) 속의 2,3-부탄디올 생산에 관심이 높아지고 있으나, 국내에서는 아직까지 바실러스 속 미생물의 2,3-부탄디올 생산에 관한 연구가 전무한 상황이다.
이에, 본 발명자들은 페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa) 균주를 이용하여 D-2,3-부탄디올을 제조하는 방법을 개발하고자 예의 노력한 결과, 감마선 조사를 통해 페니바실러스 폴리믹사의 돌연변이 균주를 획득하고, 상기 돌연변이 균주가 D-2,3-부탄디올을 선택적으로 생산하는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은 페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa) MDBDO 균주(수탁번호: KCTC14179BP)를 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 균주를 배지에서 배양하는 단계; 및 상기 배양하는 단계 이후에 상기 배양된 균주 또는 배양물로부터 D-2,3-부탄디올을 회수하는 단계를 포함하는, D-2,3-부탄디올 생산 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는, 항균용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 방법으로 생산된 D-2,3-부탄디올을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 발명의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 발명의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하나의 양태로서 페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa) MDBDO 균주(수탁번호: KCTC14179BP)을 제공한다.
본 발명의 용어, "페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa)"는 바실러스 폴리믹사(Bacillus polymyxa)로도 명명되는, 질소를 고정할 수 있는 그람 양성 박테리아로 토양, 식물 조직 및 해양 퇴적물에서 발견된다.
본 발명은 신규 균주인 페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주를 제공하며, 상기 MDBDO 균주의 수탁번호는 KCTC14179BP이다.
상기 페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주는 페니바실러스 폴리믹사 DSM365 균주에 감마선을 조사하여 발생시킨 돌연변이 균주 중에서 분리된 것일 수 있다.
본 발명의 목적상, 본 발명에 따른 페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주는 D-2,3-부탄디올을 생산할 수 있고, D-2,3-부탄디올의 다른 이성질체인 메소(Meso)-2,3-부탄디올은 생산하지 않을 수 있다.
본 발명의 용어, "2,3-부탄디올(2,3-Butanediol, 2,3-BDO)"은 다양한 산업에 활용되는 화학식 (CH3CHOH)2의 유기 화합물이다. 2,3-부탄디올은 현재 주로 미생물로부터 하기 화학식과 같이 세 종류의 형태(D-, L-, 메소-)를 가지는 이성질체로 생성된다. 이성질체들은 형태에 따라 각기 다른 용도로 활용된다. 광학비활성형인 메소-2,3-부탄디올은 주로 바이오화학의 원료물질로 사용되며, 광학활성형인 L-, D-2,3-부탄디올은 생리활성 소재로 이용 가능하다.
[화학식]
Figure 112020056213418-pat00001
본 발명의 구체적인 일 구현예에서, 페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주는 모균주인 감마선 조사 전 페니바실러스 폴리믹사 DSM365 균주에 비해 메소-2,3-부탄디올은 생산하지 않으며, 균체 성장과 D-2,3-부탄디올 생산 증가를 나타냈다(표 1).
본 발명의 일 구현예에서, 페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주는 D-2,3-부탄디올의 선택도가 99% 이상인 것일 수 있고, 구체적으로는 선택도가 100%일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
즉, 본 발명에 따른 페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주는 메소(Meso)-2,3-부탄디올을 생산하지 않고 D-2,3-부탄디올을 99% 이상, 바람직하게는 100%의 비율로 선택적으로 생산함으로써 D-2,3-부탄디올의 생산 및 정제 측면에서 경제적으로 매우 유리하다.
본 발명은 다른 하나의 양태로서 페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주를 배지에서 배양하는 단계; 및 상기 배양하는 단계 이후에 상기 배양된 균주 또는 배양물로부터 D-2,3-부탄디올을 회수하는 단계를 포함하는, D-2,3-부탄디올 생산 방법을 제공한다.
상기 "페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주". "D-2,3-부탄디올"은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어, "배양"은 상기 미생물을 적당히 조절된 환경 조건에서 생육시키는 것을 의미한다. 본 출원의 배양과정은 당업계에 알려진 적당한 배지와 배양조건에 따라 이루어질 수 있다. 이러한 배양 과정은 선택되는 균주에 따라 당업자가 용이하게 조정하여 사용할 수 있다. 구체적으로 상기 배양은 회분식, 연속식 및 유가식일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 용어, "배지"는 상기 미생물을 배양하기 위해 필요로 하는 영양물질을 주성분으로 혼합한 물질을 의미하며, 생존 및 발육에 불가결한 물을 비롯하여 영양물질 및 발육인자 등을 공급한다. 구체적으로, 본 출원의 미생물의 배양에 사용되는 배지 및 기타 배양 조건은 통상의 미생물의 배양에 사용되는 배지라면 특별한 제한 없이 어느 것이나 사용할 수 있으나, 본 출원의 미생물을 적당한 탄소원, 질소원, 인원, 무기화합물, 아미노산 및/또는 비타민 등을 함유한 통상의 배지 내에서 호기성 조건 하에서 온도, pH 등을 조절하면서 배양할 수 있다.
본 출원에서 상기 탄소원으로는 글루코오스, 프룩토오스, 수크로오스, 말토오스 등과 같은 탄수화물; 만니톨, 소르비톨 등과 같은 당 알코올, 피루브산, 락트산, 시트르산 등과 같은 유기산; 글루탐산, 메티오닌, 리신 등과 같은 아미노산 등이 포함될 수 있다. 또한, 전분 가수분해물, 당밀, 블랙스트랩 당밀, 쌀겨울, 카사버, 사탕수수 찌꺼기 및 옥수수 침지액 같은 천연의 유기 영양원을 사용할 수 있으며, 구체적으로는 글루코오스 및 살균된 전처리 당밀(즉, 환원당으로 전환된 당밀) 등과 같은 탄수화물이 사용될 수 있으며, 그 외의 적정량의 탄소원을 제한 없이 다양하게 이용할 수 있다. 이들 탄소원은 단독으로 사용되거나 2 종 이상이 조합되어 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 질소원으로는 암모니아, 황산암모늄, 염화암모늄, 초산암모늄, 인산암모늄, 탄산안모늄, 질산암모늄 등과 같은 무기질소원; 글루탐산, 메티오닌, 글루타민 등과 같은 아미노산, 펩톤, NZ-아민, 육류 추출물, 효모 추출물, 맥아 추출물, 옥수수 침지액, 카세인 가수분해물, 어류 또는 그의 분해생성물, 탈지 대두 케이크 또는 그의 분해 생성물 등과 같은 유기 질소원이 사용될 수 있다. 이들 질소원은 단독으로 사용되거나 2 종 이상이 조합되어 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 인원으로는 인산 제1칼륨, 인산 제2칼륨, 또는 이에 대응되는 소디움-함유 염 등이 포함될 수 있다. 무기화합물로는 염화나트륨, 염화칼슘, 염화철, 황산마그네슘, 황산철, 황산망간, 탄산칼슘 등이 사용될 수 있으며, 그 외에 아미노산, 비타민 및/또는 적절한 전구체 등이 포함될 수 있다. 이들 구성성분 또는 전구체는 배지에 회분식 또는 연속식으로 첨가될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서, 미생물의 배양 중에 수산화암모늄, 수산화칼륨, 암모니아, 인산, 황산 등과 같은 화합물을 배지에 적절한 방식으로 첨가하여, 배지의 pH를 조정할 수 있다. 또한, 배양 중에는 지방산 폴리글리콜 에스테르와 같은 소포제를 사용하여 기포 생성을 억제할 수 있다. 또한, 배지의 호기 상태를 유지하기 위하여, 배지 내로 산소 또는 산소 함유 기체를 주입하거나 혐기 및 미호기 상태를 유지하기 위해 기체의 주입 없이 혹은 질소, 수소 또는 이산화탄소 가스를 주입할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
배지의 온도는 20 내지 50 ℃, 구체적으로는 30 내지 37 ℃일 수 있으나 이에 제한되지 않는다. 배양 기간은 유용 물질의 원하는 생성량이 수득될 때까지 계속될 수 있으며, 구체적으로는 10 시간 내지 100 시간일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 배양에 의하여 생산된 D-2,3-부탄디올은 배양물 중으로 배출되거나 미처 배출되지 못하고 세포 내에 잔류할 수 있다.
본 발명의 용어, "배양물"은 본 발명의 페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주를 배양한 후 수득한 배지일 수 있다. 배양물의 수득 시기는 미생물 성장곡선 중 지수적 성장기 또는 정체기일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 상기 배양물은 균체 여과 전 또는 여과 후 이용하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 배양하는 단계 이후에 상기 배양된 균주 또는 배양물로부터 D-2,3-부탄디올을 회수하는 단계는 상기 배양 단계에서 생산된 D-2,3-부탄디올을 당해 분야에 공지된 적합한 방법을 이용하여 수집(collect)하는 것일 수 있다. 예를 들어, 증류, 전기투석, 투과증발, 크로마토그라피, 용매추출, 반응추출 및 이들의 조합 등이 사용될 수 있으며, 이에 제한되지 않고 당해 분야에 공지된 적합한 방법을 이용하여 배양물 또는 배양된 균주로부터 D-2,3-부탄디올을 회수할 수 있다. 상기 배양물은 배양액 또는 발효액으로도 명명될 수 있다.
또한, 상기 회수 단계는 정제 공정을 포함할 수 있으며, 당해 분야에 공지된 적합한 방법을 이용하여 수행될 수 있다. 따라서, 상기의 회수되는 D-2,3-부탄디올은 정제된 형태, 혹은 D-2,3-부탄디올을 함유한 미생물 발효액일 수 있다.
본 발명의 상기 배양된 균주 또는 배양물은 동결건조한 분말액상 형태일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명은 다른 하나의 양태로서 페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는 항균용 조성물을 제공한다.
상기 "페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주". "배양물"은 전술한 바와 같다.
본 발명의 용어, "항균"은 균에 저항하는 능력을 의미하며, 세균이나 곰팡이, 효도 등과 같은 미생물의 작용으로부터 방어하기 위해 이루어지는 모든 기작을 의미한다. 본 발명의 항균용 조성물은 병원성 세균 또는 진균에 대해 항균 활성을 나타내는 것일 수 있으며, 상기 병원성 세균 또는 진균은 예를 들면, 대장균(Escherichia coli), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 녹농균(Psedomonas aeruginosa), 칸디다 알비칸스(Candida albican) 또는 아스페르길루스 니제르(Aspergillus niger)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 구체적인 일 구현예에서, 본 발명에 따른 방법으로 분리 정제된 D-2,3-부탄디올 0.7%(w/v)를 포함하는 수용액에 대장균, 황색포도상구균, 녹농균, 칸디다 알비칸스 또는 아스페르길루스 니제르의 균주액을 첨가하고 배양한 결과, D-2,3-부탄디올을 단독으로 사용 시 일정 수준의 항균력을 나타내었으며, 방부제로 사용되고 있는 하이드록시아세토페논(hydroxyacetophenone, HAP)과 혼합 시 상승 효과를 나타내는 것을 확인하였다(표 2 및 표 3).
즉, 본 발명의 항균용 조성물은 당업계에 공지된 항균활성을 가진 물질이 추가적으로 포함될 수 있다.
상기 당업계에 공지된 항균활성을 가진 물질은 구체적으로, 동물의 유기체 또는 그 중의 바람직하지 않은 미생물의 생장의 억제를 위해서 사용되는 경우, 통상의 항생물질일 수 있으며, 항균 혹은 항진균 활성 화합물일 수 있다. 상기 물질은 예를 들면, 하이드록시아세토페논, 트리크로산, 크리바조르, 오크톡시글리세롤, 오크트피록스(1-히드록시-4-메틸-6-(2,4, 4-트리메틸펜틸)-2(1 H)-피리돈, 2-아미노 에탄올), 키토산, 파르네솔, 글리세롤 모노 라우레이트, 시트르산, 유산 및 사과산, 및 후민산, 쓸개즙 산, 쓸개즙 추출물, 빌리루빈, 빌리버딘 또는 에틸렌 다이아민테트라 아세트산(ethylene diaminetetraacetic acid, EDTA, 에틸렌 글리콜테트라 아세트산(ethylene glycol tetraacetic acid, EGTA) 또는 이들의 유도체 등 일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
유기물질의 보존을 위한 목적으로 사용되는 경우, 상기 물질은 예를 들면 벤조산, 그 에스터 및 염, 프로피온산 및 그 염, 살리실산 및 그 염, 2,4-헥산산(소르빈산) 및 그 염, 포름알데히드 및 파라포름알데히드, 2-히드록시비페닐 에테르 및 그 염, 2-아연 술피드피리딘-N-옥시드, 무기 술파이트 및 비술파이트, 요오드 산 나트륨, 클로로브타노람, 4-에틸수은-(II)5-아미노-1, 3-비스(2-히드록시) 벤조산, 그 염 및 에스터, 데하이드로아세트산(dehydratcetic acid), 포름산, 1,6-비스(4-아미디노-2-브로모페녹시)-n-헥산 및 그 염, 에틸수은-(II)-티오 살리실산의 나트륨염, 페닐 수은 및 그 염, 10-운데실렌 산 및 그 염, 5-아미노-1,3-비스(2-에틸헥실)-5-메틸-헥사히드로 피리미딘, 5-브로모-5-니트로 1,3-다이옥산, 2-브로모-2-니트로-1,3-프로판다이올, 2,4-디클로로벤질알코올, N-(4-클로로페닐)-N＇-(3,4-디클로로페닐)-요소, 4-클로로-m-크레졸, 2,4,4＇-트리클로로-2＇-히드록시-디페닐에테르, 4-클로로-3,5-디메틸 페놀, 1,1＇-메틸렌-비스(3-(1-히드록시메틸-2,4-디옥시이미다졸리딘-5-일)요소)폴리-(헥사메틸렌지그아니드) 염산, 2-페녹시 에탄올, 헥사메틸렌테트라민, 1-(3-클로로 알릴)-3,5,7-트리아자-1-아조니아-아다만탄-염화물, 1(4-클로로 페녹시)-1(1 H-이미다졸-1-일)-3,3-디메틸-2-부타논, 1,3-비스-(히드록시-메틸)-5,5-디메틸-2,4-이미다졸리딘디온, 벤질알코올, 오크트피록스, 1,2-디브로모2,4-디시아노부탄, 2,2＇-메틸렌-비스(6-브로모-4-클로로-페놀), 브로모-클로로펜, 염화 마그네슘 및 질산 마그네슘과의 5-클로로-2-메틸-3(2 H)-이소티아졸리논 및 2-메틸-3(2 H) 이소티아졸리논의 혼합물, 2-벤질-4-클로로페놀, 2-클로로아세트아미드, 클로로헥시딘, 클로로헥시딘 아세테이트, 클로로헥시딘 글루코네이트, 클로로헥시딘 염산, 1-페녹시-프로판-2-올, N-알킬(C12-C22) 트리메틸-암모늄 브로마이드 및 염화물, 4,4-디메틸-1,3-옥사졸리딘, N-히드록시메틸-N-(1,3-지(히드록시메틸)-2,5-디옥소이미다졸리딘-4-일)-N＇-히드록시-메틸요소, 1,6-비스(4-아미디노 페녹시)-n-헥산 및 그 염, 글루타르알데하이드5-에틸-1-아자3,7-디옥사비사이클로(3.3.0) 옥탄, 3-(4-크롤 페녹시)-1,2-프로판다이올, 히아민(hyamine), 알킬-(C8-C18)-디메틸-벤질-암모늄-염화물, 알킬-(C8-C18)-디메틸-벤질 암모늄 브로마이드, 알킬-(C8-C18)-디메틸-벤질 암모늄 사카리네이트, 벤질헤미호르말, 3-요우드2-프로피닐-부틸카르바메이트 또는 나트륨 히드록시메틸 아미노 아세테이트 등 일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
D-2,3-부탄디올은 이의 항균 효과로 인하여 D-2,3-부탄디올을 유효성분으로 포함하는 본 발명의 항균용 조성물이 첨가된 물질의 보존성을 향상시킬 뿐만 아니라 종래 방부제와 혼합 시 상승된 항균 효과를 가지는 바, 본 발명의 항균용 조성물은 방부제로써 화장료 조성물, 의약외품 조성물, 약학적 조성물, 항균용 조성물 또는 방부제 조성물 등의 다양한 분야에서 널리 사용될 수 있다.
본 발명의 항균용 조성물은 예를 들면, 액상, 크림상, 페이스트상, 고체상 등 어떠한 제형으로도 응용될 수 있다.
본 발명의 항균용 조성물에서, 유효성분인 D-2,3-부탄디올의 함량은 전체 조성물에 대하여 0.001 내지 50 %(w/v), 바람직하게는 0.01 내지 50 %(w/v), 보다 바람직하게는 0.1 내지 30 %(w/v)로 포함될 수 있다.
본 발명은 또 하나의 양태로서 본 발명의 방법으로 생산된 D-2,3-부탄디올을 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.
상기 "D-2,3-부탄디올"은 전술한 바와 같다.
상기 화장료 조성물은 피부 보습력을 향상시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 구체적인 일 구현예에서, 본 발명에 따른 방법으로 분리 정제된 D-2,3-부탄디올 0.2%(w/v)를 포함하는 수용액의 피부 보습력을 확인한 결과, 고분자보습제인 히알루론산(hyaluronate, HA)과 유사한 피부 보습력을 나타내었으며 1,3-BG(1,3-butylene glycol) 및 글리세린(glycerin)보다 우수한 피부 보습력을 나타냄을 확인하였다.
전술한 바와 같이, 본 발명에 따른 방법으로 분리 정제된 D-2,3-부탄디올은 우수한 피부보습력을 나타내는 바, 화장품 등에 있어서 피부 자극성으로 인해 충분한 양의 방부제, 예를 들면 하이드록시아세토페논을 사용하지 못하는 경우에 D-2,3-부탄디올을 병용하여 사용하면 제품에 충분한 방부력을 부여하는 동시에 피부 자극을 감소시키는 효과를 발휘할 것으로 기대된다.
본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 크림, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1, 3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
또한, 본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에서, 유효성분인 D-2,3-부탄디올의 함량은 전체 조성물에 대하여 0.001 내지 50 %(w/v), 바람직하게는 0.01 내지 50 %(w/v), 보다 바람직하게는 0.1 내지 30 %(w/v)로 포함될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 상기 D-2,3-부탄디올 이외에 공지의 피부 보습용 성분을 추가로 포함할 수 있다. 추가적인 피부건강에 도움을 주는 원료를 포함하게 되면, 본 발명의 피부 보습용 화장료 조성물의 효과는 더욱 증진될 수 있으며, 피부건강에 도움을 주는 원료의 추가 시에는 복합사용에 따른 피부 안전성, 제형화의 용이성, 유효성분들의 안정성을 고려할 수 있다. 상기 공지의 피부 보습용 성분은 예를 들면, 히알루론산, 1,3-BG, 글리세린, 판테놀, 세라마이드 등 일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 따른 페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa) MDBDO 균주는 메소(Meso)-2,3-부탄디올을 생산하지 않으면서 D-2,3-부탄디올을 선택적으로 생산하는 바, D-2,3-부탄디올의 수율 및 생산성 향상에 우수한 효과가 있고 균체 증식 등 배양 특성이 개선되어 비용 절감이 가능하다. 또한, 페니바실러스 폴리믹사 MDBDO 균주로부터 생산된 D-2,3-부탄디올은 우수한 항균 효과 및 피부 보습 효과가 있는 바, 화장품을 비롯한 다양한 용도로 제공할 수 있다.
도 1은 감마선 조사에 의한 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO의 유가식 배양액과 페니바실러스 폴리믹사 DSM365의 유가식 배양액 및 D-2,3-부탄디올과 메소-2,3-부탄디올의 고성능 액체 크로마토그래피 크로마토그램 분석 결과이다.
도 2는 감마선 조사에 의한 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO의 유가식 발효 배양 결과를 나타낸 것이다.
도 3는 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO유래 D-2,3-부탄디올의 피부 보습력 측정 결과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.
실시예 1. 감마선 조사에 의한 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO의 생산 및 분리
페니바실러스 폴리믹사 DSM365 균주의 감마선 조사 변이 균주를 분리하고자 하였다. 페니바실러스 폴리믹사 DSM365 균주를 50 mL 기본배지(20g/L 글루코스(glucose), 10g/L 효모 추출물(yeast extract), 0.2g/L MgSO4, 3g/L (NH4)2SO4, 3.5 g/L KH2PO4, 2.75g/L K2HPO4, 3mL/L 트레이스 성분 용액(trace element solution): 0.4g/L FeSO4, 5.0 g/L MnCl2·4H2O, 0.1g/L ZnSO4·7H2O, 0.8g/L H3BO3, 0.04g/L CuSO4·5H2O, 0.04 g/L NaMoO4·2H2O, 0.08g/L Co(NO3)2·6H2O, 1.0g/L CaCl2·2H2O, 1.0g/L 비오틴(biotin))를 포함한 250mL 플라스크에서 37 ℃, 8시간 동안 배양 후 균체를 회수하여 PBS 버퍼 10mL에 현탁하고, 감마선을 1~4 Kgy 선량으로 1시간 조사하였다. 감마선 조사에서 사멸률이 99%이상 일 때 현탁한 균체를 적당히 희석하여 고체 기본배지에 도말하였다. 도말한 플레이트에서 성장한 단일 콜로니들 중에서 모균주에 비하여 균체의 크기가 큰 콜로니들을 선별하여 고체 기본배지에 2회 계대하였다. 선별된 변이 균주들을 50mL 기본배지를 포함한 250mL 플라스크 배양을 실시하였다. 6시간마다 배양액 1mL를 13,000 rpm으로 5분간 원심분리한 후 상등액을 0.22um 필터로 여과하여 고성능 액체 크로마토그래피를 이용하여 분석하였다. 고성능 액체 크로마토그래피는 유량 0.6mL/min, 이동상 0.25mM H2SO4, 이온 교환 컬럼(300×78mm, Aminex HPX-87H, Bio-Rad), 시차굴절검출기(RID)를 이용한 조건에서 D-2,3-부탄디올 생산량을 분석하였다.
그 결과, 하기 표 1 에 나타낸 바와 같이 선별된 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO는 모균주에 비해 메소(Meso)-2,3-부탄디올은 생산하지 않으며, 균체 성장과 D-2,3-부탄디올 생산 증가를 나타냈다.
Strains OD600nm Glucose consumption (g/L) Meso-2,3-BDO
(g/L)		 D-2,3-BDO
(g/L)
P. polymyxa DSM365 10.2 17.2 0.32 7.91
P. polymyxaMDBDO 13.4 20.1 0.00 8.84
상기 선별된 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO는 부다페스트조약 하의 수탁기관인 한국생명공학연구원 생물자원센터에 2020년 05월 07일자로 기탁하여 수탁번호 KCTC14179BP를 부여받았다.
실시예 2. 유가식 배양을 통한 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO의 D-2,3-부탄디올 생산
페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO를 이용하여 3L 생산배지(50g/L 글루코스, 30g/L 효모 추출물, 0.2g/L MgSO4, 3g/L (NH4)2SO4, 3.5 g/L KH2PO4, 2.75g/L K2HPO4, 3mL/L 트레이스 성분 용액: 0.4g/L FeSO4, 5.0 g/L MnCl2·4H2O, 0.1g/L ZnSO4·7H2O, 0.8g/L H3BO3, 0.04g/L CuSO4·5H2O, 0.04 g/L NaMoO4·2H2O, 0.08g/L Co(NO3)2·6H2O, 1.0g/L CaCl2·2H2O, 1.0g/L 비오틴)를 포함한 5L 배양기에서 교반속도 300rpm, 공기주입량 2.0vvm, 배양온도 37 ℃, pH 6.0의 조건으로 유가식 배양 중 D-2,3-부탄디올 및 부산물의 생산량을 조사하였다.
그 결과, 도 2와 같이 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO는 배양 72시간째 최종적으로 121.6g/L의 D-2,3-부탄디올을 생산하였으며, D-2,3-부탄디올의 시간당 생산성은 1.689g/L/h를 나타냈다. 이때 부산물의 생산량은 젖산 13.7g/L, 아세트산 0.7g/L, 아세토인 0.1g/L, 에탄올 0.2g/L로 나타났다. 또한 메소-2,3-부탄디올은 생산하지 않는 것으로 나타났다.
실시예 3. 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO유래 D-2,3-부탄디올의 방부력 측정
본 발명에서 제조되어 분리 정제된 D-2,3-부탄디올의 방부력을 측정하기 위해 방부제로 기사용 되고 있는 하이드록시아세토페논(hydroxyacetophenone, HAP), D-2,3-부탄디올, D-2,3-부탄디올과 HAP의 혼합시료(D4, D-2,3-부탄디올 70 : HAP 30%(w/v))의 항균력을 D-2,3-부탄디올 0.7%(w/v)을 포함하는 수용액, HAP 0.3%(w/v)을 포함하는 수용액, D4 1.0%(w/v)을 포함하는 수용액에서 측정하였다.
방부력을 평가하기 위하여 각 시료에 대장균(Escherichia coli), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 녹농균(Psedomonas aeruginosa), 칸디다 알비칸스(Candida albican) 또는 아스페르길루스 니제르(Aspergillus niger)의 균주액을 초기 농도 106 cfu/g 정도 되도록 첨가하였다. 균주액을 첨가한 시료는 24 ~ 48시간 동안 30 ~ 32 ℃의 항온조에서 배양하였으며 1, 7일차에 각각 샘플을 취하여 생균수를 측정하여 표 2 및 표 3에 나타내었다.
그 결과, 표 3의 처리 7일째의 항균력 시험 결과에서 알 수 있듯이 D-2,3-부탄디올을 단독으로 사용 시 일정 수준의 항균력은 나타내었으나 HAP 과 혼합하여 사용 시 HAP의 항균력을 향상시키는 것으로 확인되며, 이는 D-2,3-부탄디올에 의한 HAP의 수가용화도 상승으로 미생물에 대한 항균력을 상승시키는 것으로 설명할 수 있다.
이에, 화장품 등에서 피부 자극성으로 인해 충분한 양의 HAP를 사용하지 못하는 경우에 D-2,3-부탄디올을 병용하여 사용하면 제품에 충분한 방부력을 부여하는 동시에 피부 자극을 감소시키는 효과를 나타낼 것으로 기대된다.
Day 1 Initial 2,3-BDO
(0.7%)		 HAP
(0.3%)		 (D4)
(1.0%)
Escherichia coli 6.9x107 1.5x104 1500 <10
Staphylococcus aureus 4.3x107 2.5x104 3800 <10
Psedomonas aeruginosa 1.1x108 3.1x104 2.1x104 1.1x104
Candida albican 1.8x106 2.5x104 1.5x104 9000
Aspergillus niger 2.5x104 2.1x104 1.2x104 7000
Day 7 Initial 2,3-BDO
(0.7%)		 HAP
(0.3%)		 (D4)
(1.0%)
Escherichia coli 6.9x107 2500 <10 <10
Staphylococcus aureus 4.3x107 9000 <10 <10
Psedomonas aeruginosa 1.1x108 1.1x104 8000 <10
Candida albican 1.8x106 1.9x104 1.0x104 <10
Aspergillus niger 2.5x104 7000 4500 <10
실시예 4. 페니바실러스 폴리믹사 돌연변이 균주 MDBDO유래 D-2,3-부탄디올의 피부 보습력 측정
본 발명에서 제조되어 분리 정제된 D-2,3-부탄디올의 피부 보습력을 측정하기 위해 기존에 피부 보습제로 널리 사용되는 대표적인 원료인 소듐 히알루론산(sodium hyaluronate, HA), 1,3-BG(1,3-butylene glycol) 및 글리세린(glycerin)과 보습력을 비교 측정하였으며 이 때 각 시료에 대해 0.2%(w/v) 수용액을 제조하여 사용하였다.
시료의 상대적인 피부 보습력은 Corneometer CM825(Courage Khazaka, Germany)로 측정되었다. 이 장비는 피부표면의 전기전도도를 측정하는 임피던스 프로브(impedance probe)와 기록계로 구성되어 있으며 전기용량(Capacitance) 값들은 저장된 전기변화량을 나타내고 피부수화로 보통 표현되는 인자인 피부 수분 함량에 비례한다. 즉, 피부 보습의 수준이 높을수록 관찰된 전도도 신호가 더 강하게 된다.
측정기준선은 22세에서 37세 사이의 10명의 여성지원자의 양팔 안쪽 부분의 40 mm 면적을 이용하여 측정, 작성되었으며 시험기간 동안 피험자들은 상대습도 45-55 %, 25 ℃ 로 유지되는 방에서 머물었고 시료 도포 후 30 분간 매 5 분 간격으로 피부 보습도를 측정하였다.
그 결과, 도 3에 나타낸 바와 같이 D-2,3-부탄디올의 시간에 따른 피부 보습력은 고분자보습제인 HA와 거의 유사한 값을 나타내었으며 1,3-BG 및 글리세린보다 높은 값을 나타냄을 알 수 있었다.
즉, 2,3-BDO는 우수한 화장품용 보습제로서 사용될 수 있음을 확인하였다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 다른 당 업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변경된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
한국생명공학연구원 KCTC14179BP 20200507

Claims (7)

  1. 페니바실러스 폴리믹사(Paenibacillus polymyxa) MDBDO 균주(수탁번호: KCTC14179BP).
  2. 제1항에 있어서, 상기 균주는 D-2,3-부탄디올을 생산하는 것인, 균주.
  3. 제1항에 있어서, 상기 균주는 메소(Meso)-2,3-부탄디올을 생산하지 않는 것인, 균주.
  4. 제1항의 균주를 배지에서 배양하는 단계; 및
    상기 배양하는 단계 이후에 상기 배양된 균주 또는 배양물로부터 D-2,3-부탄디올을 회수하는 단계를 포함하는, D-2,3-부탄디올 생산 방법.
  5. 제1항의 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는, 항균용 조성물.
  6. 제1항의 균주 또는 이의 배양물을 유효성분으로 포함하는, 화장료 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부 보습력을 향상시키는 것인, 화장료 조성물.
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KR102599254B1 (ko) * 2023-08-09 2023-11-06 전남대학교산학협력단 페니바실러스 폴리믹사 mdbdo 균주 또는 이의 배양액을포함하는 미생물제제를 포함하는 식물 생장 촉진용 조성물 및 이의 제조 방법

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR101577502B1 (ko) * 2013-12-16 2015-12-14 지에스칼텍스 주식회사 Ｄ（－）２，３－부탄디올의 생성능이 증강된 재조합 미생물 및 이를 이용한 ｄ（－）２，３－부탄디올의 생산 방법

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KR101577502B1 (ko) * 2013-12-16 2015-12-14 지에스칼텍스 주식회사 Ｄ（－）２，３－부탄디올의 생성능이 증강된 재조합 미생물 및 이를 이용한 ｄ（－）２，３－부탄디올의 생산 방법

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