KR102335029B1

KR102335029B1 - 가자 고체 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화방지용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102335029B1
Application number: KR1020140192194A
Authority: KR
Inventors: 이상한
Original assignee: 경북대학교 산학협력단
Priority date: 2014-12-29
Filing date: 2014-12-29
Publication date: 2021-12-06
Also published as: KR20160080425A

Abstract

본 발명은 가자 고체 발효 추출물 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 및 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물 및 약학적 조성물은 가자를 상황버섯 균사체 배양액으로 고체발효하고, 이를 열수 또는 알코올 추출하는 방법으로 제조하여 피부재생 및 노화 억제 효과를 가지고 있으며, 천연물질 추출물을 주성분으로 함유하고 있어 부작용 및 피부 트러블이 전혀 없다는 장점이 있다.

Description

가자 고체 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화방지용 화장료 조성물{Cosmetic composition comprising the extract from solid fermented Terminalia chebula Retz with Phellinus baumii}

본 발명은 가자 고체 발효 추출물 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 및 약학적 조성물에 관한 것이다.

가자(Terminalia chebula Retz)는 사군자과(Combfreetaceae)에 속하는 가자나무의 성숙한 열매를 건조한 것으로 항염, 항암, 항당뇨 활성 등의 다양한 생리활성이 보고되었다.

또한, 일반적인 발효방법은 주로 유산균처럼 세균을 이용한 액상발효로 발효대상물질이 대개 액체상태이거나 천연물질추출물 10～20% 정도를 80～90%의 물에 희석하여 액상 발효시키는 방법을 이용해 왔다. 이러한 방법을 통한 발효는 발효기질이 새로운 유용물질로 전환되는 생변환(Bio-conversion)효율이 매우 낮고, 특히 식물을 발효물질로 이용할 경우 식물의 세포벽을 구성하는 섬유소를 분해하지 못하므로 발효균이 기질전체를 효과적으로 발효시키기 어려워 발효가능한 물질이 제한적일 수밖에 없다. 따라서 천연물질을 열수 혹은 용매를 이용하여 단순 추출하는 방법이나 액상발효방법을 통해 신규생리활성물질을 탐색하는 종래의 방법은 이미 그 한계상황에 직면해 있는 실정이다.

한국공개특허 제2014-0116665호

이에 본 발명자들은 다양한 생리활성물질을 가지고 있는 가자를 연구하던 중 가자분말을 상황균사체 배양액으로 고체발효하고 이를 열수 또는 알코올로 추출 시 피부재생 및 피부 노화 방지 효과를 증진시킬 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서 본 발명의 목적은 (a) 상황균사체 배양액에 가자분말을 혼합하여 25 ~ 26℃의 온도에서 12 ~ 16일 고체발효하는 단계; 및 (b) 상기 (a)단계에서 얻어진 고체발효물질 대비 9 ~ 11배 중량의 물 또는 알코올을 함께 넣어 20 ~ 28시간 환류 추출하고, 침전물을 제거한 후에 여액을 동결시키는 단계;를 포함하는 가자 고체 발효 추출물 제조방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 본 발명의 방법으로 제조된 가자 고체 발효 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 재생 및 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 본 발명의 방법으로 제조된 가자 고체 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생 및 피부 노화 치료 및 예방용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 (a) 상황균사체 배양액에 가자분말을 혼합하여 25 ~ 26℃의 온도에서 12 ~ 16일 고체발효하는 단계; 및

(b) 상기 (a)단계에서 얻어진 고체발효물질 대비 9 ~ 11배 중량의 물 또는 알코올을 함께 넣어 20 ~ 28시간 환류 추출하고, 침전물을 제거한 후에 여액을 동결시키는 단계;를 포함하는 가자 고체 발효 추출물 제조방법을 제공한다.

또한 본 발명은 상기 방법으로 제조된 가자 고체 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생 및 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 전체 중량 대비 가자 고체 발효 추출물이 0.01 ~ 3 중량%의 비율로 함유될 수 있다.

또한 본 발명은 상기 방법으로 제조된 가자 고체 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생 및 피부 노화 치료 및 예방용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 피부노화는 주름살, 기미, 주근깨, 자외선에 의한 피부 손상 또는 피부암일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물 및 약학적 조성물은 가자를 상황버섯 균사체 배양액으로 고체발효하고, 이를 열수 또는 알코올 추출하는 방법으로 제조하여 피부재생 및 노화 억제 효과를 가지고 있으며, 천연물질 추출물을 주성분으로 함유하고 있어 부작용 및 피부 트러블이 전혀 없다는 장점이 있다.

도 1은 가자 고체 발효 열수 추출물의 콜라게나아제 저해 활성 정도를 확인한 결과이다.
도 2는 가자 고체 발효 에탄올 추출물의 콜라게나아제 저해 활성 정도를 확인한 결과이다.
도 3은 가자 고체 발효 열수 추출물의 엘라스타아제 저해 활성 정도를 확인한 결과이다.
도 4는 가자 고체 발효 에탄올 추출물의 엘라스타아제 저해 활성 정도를 확인한 결과이다.

최근 많은 여성들뿐만 아니라 남성의 경우에도 미용에 대한 관심이 급증하면서 피부미백, 여드름, 아토피 피부염, 주름 개선 및 피부재생을 위한 다양한 기능성 화장품들이 출시되고 있다. 그러나 시중에 판매되고 있는 대부분의 기능성 화장품의 경우, 합성 화합물을 사용한 제품들이 대부분인데 합성화합물이 첨가된 화장품은 피부에 따라 민감한 피부반응을 유발시킬 수 있어, 다양한 피부 부작용을 초래하는 문제점이 있다.

이에 본 발명자들은 천연물 유래 피부에 유용한 기능성 효과를 갖는 물질을 연구하고 있던 중 가자에 주목하였다.

가자나무는 인도, 미얀마, 말레이시아, 중국 사천성 등에 자생하는 열대성 큰키나무로 과즙에서는 미로발란(myrovalan)이란 노란 색소를 추출하기도 하며 가구용 목재로도 쓰인다. 가자의 약성은 쓰고 조금 시며 떫고 따뜻하다. 그리고, 기를 내리고 오래된 담과 기침을 삭히고 숨이 차는 것, 오래된 설사, 이질, 대하, 탈항에 효험이 있다고 알려져 있으나 피부 재생 및 노화 억제 효과가 있다고 알려져 있지 않다.

본 발명은 (a) 상황균사체 배양액에 가자분말을 혼합하여 25 ~ 26℃의 온도에서 12 ~ 16일 고체발효하는 단계; 및 (b) 상기 (a)단계에서 얻어진 고체발효물질 대비 9 ~ 11배 중량의 물 또는 알코올을 함께 넣어 20 ~ 28시간 환류 추출하고, 침전물을 제거한 후에 여액을 동결시키는 단계;를 포함하는 가자 고체 발효 추출물 제조방법을 제공한다.

본 발명자들은 상기와 같이 제조된 가자 고체 발효 추출물이 화장료로서 적합하며, 실제로 피부 재생 및 피부 노화 억제 효과를 가지고 있는지를 알아보기 위하여 가자 고체 발효 추출물 처리군의 콜라게나아제 활성 및 엘라스타아제 활성을 측정한 결과, 가자 외 상황, 영지, 동충을 섞어 처리한 군에서는 상기 저해 활성이 미미하였으나, 가자 고체 발효 추출물을 단독으로 처리한 군에서는 양성대조군인 EGCG와 비슷하게 월등한 콜라게나아제 저해 활성 및 엘라스타아제 저해 활성이 있음을 확인할 수 있었다.

또한, 가자 고체 발효 추출물에서 크산틴 산화 분석에 의한 노화억제 활성 여부를 확인한 결과, 가자 고체 발효 추출물 농도의존적으로 크산틴 산화효소가 억제되었음을 알 수 있었다.

따라서 이러한 결과를 토대로 본 발명자들은 본 발명의 방법으로 제조된 가자 고체 발효 추출물은 피부재생 및 피부 노화 방지 효과가 우수하므로 기능성 화장료의 제조에 사용할 수 있다는 사실을 알 수 있었다.

그러므로 본 발명은 가자 고체 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생 및 피부 노화 방지용 화장료 조성물을 제공할 수 있다.

본 발명에서 상기 가자 고체 발효 추출물은 전체 화장료 조성물 총 중량 대비 0.01 ~ 3 중량%의 양으로 함유되어 있을 수 있다.

본 발명의 가자 고체 발효 추출물을 화장료 총 중량에 대해 0.01 중량% 미만으로 첨가하는 경우에는 본 발명의 화장료 조성물이 가지는 다양한 생리활성 효과를 나타내지 않으며, 반면 3 중량%를 초과하여 첨가될 경우에는 세포 등에 독성으로 작용하거나 또는 목적하는 효과를 첨가량에 비례하여 얻지 못하기 때문에 경제성을 고려하여 상기 기술된 범위 이내의 함량으로 첨가하는 것이 바람직하며, 또한 첨가량에 따른 화장료 조성물 가격이 상승되므로 경제적이지 못한 문제점이 있다.

본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 제조되는 경우, 본 발명의 조성물은 상술한 가자 고체 발효 추출물 뿐만 아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

또한, 본 발명은 본 발명의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 것을 특징으로 하는 화장방법을 제공한다.

본 발명의 화장 방법은 본 발명의 화장료 조성물을 인간의 피부에 도포하는 모든 화장 방법을 일컫는다. 즉, 화장료 조성물을 피부에 도포하는 당업계에 공지된 모든 방법이 본 발명의 화장 방법에 속한다.

본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 아토피 치료 효과가 우수한 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클린징 제형은 클렌징폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

나아가 본 발명은 가자 고체 발효 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생 및 피부 노화 치료 및 예방용 약학적 조성물을 제공할 수 있다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양의 가자 고체 발효 추출물을 단독으로 포함하거나 하나 이상의 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 즉, 상기 약학적 조성물은 통상의 방법에 따라 연고, 겔, 크림, 패치, 분무제 등의 외용제 등을 비롯하여 다양한 형태로 제형화하여 사용할 수 있으며, 각 제형은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 발명자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.

이하 본 발명을 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

< 실시예 1>

가자 고체 발효 추출물 제조방법

가자 고체 발효 추출물을 제조하기 위하여 시중에 판매하고 있는 가자(訶子)분말을 구입하여 상황균사체 배양액으로 25 ~ 26℃ 조건으로 14일간 고체발효하고, 고체발효 물질 대비 15배 중량의 물 또는 10배 중량의 알코올을 함께 넣어 진탕배양기에서 25℃, 150 rpm 조건으로, 24시간 환류 추출하였으며, 침전물을 제거한 후에 여액을 동결시켜 본 발명의 가자 고체 발효 추출물을 제조하였다.

< 실험예 1>

가자 고체 발효 추출물의 콜라게나아제 저해 활성 효과 평가

본 발명자들은 가자 고체 발효 추출물에 콜라게나아제 저해 활성이 있는지 유무를 확인하기 위하여 하기와 같이 실험을 진행하였다.

본 발명에서 사용한 기질(Substrate)은 sigma사의 FALGPA {N-[3-(2-Furyl)acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala, F-5135}를 트리신 버퍼(50 mM tricine, 10 mM calcium chloride, 400 mM sodium chloride, pH 7.5 adjusted by 1N NaOH)에 녹인 것을 이용하였다. Substrate는 1mM 의 농도로 190 μl 를 1.5ml e-tube에서 가자 고체 발효 추출물과 농도별로 혼합 후 D.W.에 녹인 5 U/ml 농도의 collagenase (sigma, C-5138, Collagenase from Clostridium histolyticum) 10 μl와 반응시켰다. 콜라게나아제에 의한 FALGPA의 FAL + Gly-Pro-Ala의 분해와 이에 의한 345nm 에서의 흡광도 감소량을 1분 간격으로 총 10분간 측정하였다.

그 결과, 본 발명의 가자 및 가자 고체발효 추출물 모두 에탄올에서 높은 콜라게나아제 저해 활성을 보임을 알 수 있었다(도 1 및 2 참조).

< 실험예 2>

가자 고체 발효 추출물의 엘라스타아제 저해 활성 효과 평가

본 발명자들은 가자 고체 발효 추출물에 엘라스타아제 저해 활성이 있는지 유무를 확인하기 위하여 하기와 같이 실험을 진행하였다.

먼저, 96 웰 플레이트(well plate)에 본 발명의 가자 고체 발효 추출물을 농도별로 처리 후 0.1 M Tris-HCl buffer(pH 8.0)를 사용하여 녹인 2.5 mU elastase 5 μl와 0.2 mg/ml substrate (N-succinyl-ala-ala-ala-P-Nitroanilide) 150 μl를 반응시켰다. 이후 다중라벨 카운터(multilabel counter; Victor3, Perkin Elmer)를 이용하여 405nm에서 35분간(5분 간격, 7회) 측정하여 효소활성 저해율 계산하였다. Elastase 저해활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 표시하였다.

그 결과, 가자 외 상황, 영지, 동충을 섞어 처리한 군에서는 엘라스타아제 저해 활성이 미미하였으나, 본 발명의 가자 고체 발효 열수 추출물 및 가자 고체 발효 에탄올 추출물에서는 양성대조군인 EGCG와 비슷하게 월등한 엘라스타아제 저해 활성이 있음을 확인할 수 있었다(도 3 및 4 참조).

< 실험예 3>

가자 고체 발효 추출물에서 Sirt 유전자 발현 분석

본 발명자들은 가자 고체 발효 추출물에서 Sirt 유전자의 발현을 확인하기 위하여 하기와 같이 실험을 진행하였다.

먼저, ATCC으로부터 구입한 마우스 3T3-L1 세포를 Dubecco's modified Eagle's medium, DMEM에서 성장시키고, 48 시간 동안 10 % 우태아 혈청(FBS)을 함유하는 DMEM에 1.7 uM 인슐린, 0.5 mM 3-이소부틸메틸잔틴(IBMX) 및 12.7 uM 덱사메타존(DEX)을 첨가한 분화배지에서 배양하였고, 상기 배지는 한방추출물인 본 발명의 가자 고체 발효 추출물와 10 % FBS 및 인슐린(1.7 uM)을 함유하는 DMEM으로 교체하고, 2일 마다 새로운 배지로 변경시켰다. 12일 후 세포를 lysis 시켜 RT-PCR 및 western blot을 실시하였다.

라이시스 버퍼(50 mM Tris-HCl, pH 7.4; 1 mM NaF; 150 mM NaCl; 1 mM EGTA; 1 mM 페닐메탄설포닐 플루오라이드; 1 % NP-40; 및 10 μg/mL 류펩틴) 100 uL를 30 분 동안 얼음에서 세포 펠렛(cell pellet)에 첨가한 후에 4℃에서 30분 동안 10,000 g에서 원심분리하여 총 단백질을 추출하였다. 총 단백질은 BCA단백질 분석법으로 측정하였으며, 5 μg의 단백질은 0.3 M Tris-HCl(pH 6.8), 25 % 2-ME, 12% SDS, 25 mM EDTA, 20 % glycerol 및 0.1 % BPB를 함유하는 5×sample buffer과 혼합시켰고, 상기 혼합물은 5 분 동안 100℃의 온도에서 끓였다. 100 V의 일정 전류에서 10 % SDS-PAGE 적용하였고, 전기영동 후 겔 상의 단백질을 25 mM Tris-HCl(pH 8.9), 192 mM 글리신 및 20 % 메탄올로 구성되는 이동 완충액으로 immobile membrane, PVDF상에 이동시켰다.

상기 막은 5% 탈지유(skim milk)를 이용하여 블로킹 후 1× TBST 완충액으로 각각 10분 씩 4회 세척시켰다. 그 후 Sirt1, UCP1 및 β-액틴에 대한 항체를 포함하는 1차 항체로 면역블롯팅(1:1000, overnight)한 후 1× TBST 완충액으로 각각 10분 씩 4회 세척시켰다. 상기 블롯을 HRP-콘쥬게이트형 2차 항체의 1:5000 희석으로 배양(2시간)한 다음에 1× TBST 완충액으로 각각 10분씩 4회 세정시켰고, 이동된 단백질은 강화된 ECL solution로 exposure-세포재생/노화억제 시험3(UCP유전자 발현 확인) 또는 분화 및 샘플 처리된 3T3-L1 세포를 TRI-reagent를 이용하여 RNA를 분리시켰다. 분리한 RNA를 RT-PCR과정을 통하여 cDNA를 합성하고, 하기 표 1의 프라이머를 제작하여 PCR 및 전기영동을 통해 발현되는 RNA를 정량하였다.

< 실험예 4>

가자 고체 발효 추출물에서 크산틴 산화 분석에 의한 노화억제 활성 분석

본 발명자들은 가자 고체 발효 추출물에서 크산틴 산화 분석에 의한 노화억제 활성 여부를 확인하기 위하여 하기와 같이 실험을 진행하였다.

본 발명에서 사용한 엔자임(Enzyme)은 sigma사의 xanthine oxidase(from bovine milk)를 사용하였고, 기질(substrate)은 sigma사의 하이포크산틴(hypoxanthine)을 사용하였다. 버퍼로는 0.05M 인산 완충액(phosphate buffer; pH 7.5)를 사용하였다. DW에 녹인 0.15 mM substrate를 본 발명의 가자 고체 발효 추출물과 혼합하여 96-웰 플레이트(well plate)에 주입 후 버퍼에 녹인 0.2 U/ml 엔자임을 가하여 분광광도계(spectrophotometer)로 290 nm 에서 흡광도를 측정하였다.

그 결과, 본 발명의 방법으로 제조된 가자 고체 발효 추출물에서는 농도의존적으로 크산틴 산화효소가 억제되었음을 알 수 있었다. 따라서, 본 발명의 가자 고체 발효 추출물은 노화 억제에 효과적이다.

< 실험예 5>

가자 고체 발효 추출물에서 NRU 광독성 시험법을 이용한 피부독성 유무 확인

본 발명자들은 가자 고체 발효 추출물에서 NRU 광독성 시험법을 이용하여 피부 독성 유무를 확인하기 위하여 식약처 가이드라인에 따른 NRU 3T3 in vitro 시험법을 이용하였다. 표준 독성물질로는 클로르프로마진(chlorpromazine)을 이용하였다. 시험방법은 식약처에서 제공하는 ‘광독성 평가에 관한 시험 연구’ 보고서를 기준으로 실시하였다.

상기와 같이 본 발명 가자 고체 발효 추출물의 피부독성을 확인한 결과, 피부독성을 전혀 유발하지 않음을 알 수 있었다.

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims

(a) 상황균사체 배양액에 가자분말을 혼합하여 25 ~ 26℃의 온도에서 12 ~ 16일 고체발효하는 단계; 및
(b) 상기 (a)단계에서 얻어진 고체발효물질 대비 9 ~ 11배 중량의 알코올을 함께 넣어 20 ~ 28시간 환류 추출하고, 침전물을 제거한 후에 여액을 동결시키는 단계;를 포함하는 가자 고체 발효 알코올 추출물 제조방법.
제1항의 방법으로 제조된 가자 고체 발효 알코올 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 재생 및 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
제2항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 전체 중량 대비 가자 고체 발효 알코올 추출물이 0.01 ~ 3 중량%의 비율로 함유되어 있는 것을 특징으로 하는 피부 재생 및 피부 노화 방지용 화장료 조성물.
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